[go: up one dir, main page]

HU202104B - Process for producing immunstimulating pharmaceutical compositions containing 1-carboxy-3,4-methylenedioxi-8-methoxy-phenantrene - Google Patents

Process for producing immunstimulating pharmaceutical compositions containing 1-carboxy-3,4-methylenedioxi-8-methoxy-phenantrene Download PDF

Info

Publication number
HU202104B
HU202104B HU895304A HU530489A HU202104B HU 202104 B HU202104 B HU 202104B HU 895304 A HU895304 A HU 895304A HU 530489 A HU530489 A HU 530489A HU 202104 B HU202104 B HU 202104B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
mouse
macrophages
carboxy
dose
red blood
Prior art date
Application number
HU895304A
Other languages
German (de)
English (en)
Inventor
Klaus Goerler
Guenter Krumbiegel
M Hanack
L Subramanian
Original Assignee
Madaus Ag Dr
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Madaus Ag Dr filed Critical Madaus Ag Dr
Publication of HU202104B publication Critical patent/HU202104B/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D317/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D317/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3
    • C07D317/44—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D317/70—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems condensed with ring systems containing two or more relevant rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D317/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D317/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3
    • C07D317/44—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D317/46—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems condensed with one six-membered ring
    • C07D317/48—Methylenedioxybenzenes or hydrogenated methylenedioxybenzenes, unsubstituted on the hetero ring
    • C07D317/62—Methylenedioxybenzenes or hydrogenated methylenedioxybenzenes, unsubstituted on the hetero ring with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to atoms of the carbocyclic ring
    • C07D317/68—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Description

A találmány tárgya eljárás l-karboxi-3,4-metiléndioxi-8-metoxi-fenantrént tartalmazó immunstimuláló hatású gyógyszerkészítmények előállítására.
Az 1 -karboxi-3,4-metiléndioxi-8-metoxi-f enantrén a J. Nat. Products 46, 507 (1983) közleményből ismert. Ej)ben leírják, hogy házinyúlnál 90 mgkg dózisban ahortív és egérnél 60 mg/kg dózisban implantációt gátló hatású. A közleményben leírtakból azonban immunstimuláló hatást nem lehetett feltételezni.
Az arisztolochiasav (3,4-metiléndioxi-8-metoxi-10-nitro-l-fenantrénkarbonsav) és 8-helyzetben szubsztítuálatlan származéka ismertek (J. Org. Chem. 30 3792-3800 (1965); Dtsch. Apoth. Ztg. 1978 /1962/). Fagocitózisserkentő és vírusellenes hatásuk alapján fertőzéses megbetegedések megelőzésére és kezelésére javasoltak. A gyógyhatást általános fertőzéseknél növelik, és eredményesen alkalmazhatók gennyesedések és kelések kezelésére. Nagyobb dózistartományokban végzett farmakológiai kísérleteknél azonban patkányok előgyomrán rövidesen sejtes elfajulás jöt t létre, am i az alkalmazást kérdésessé teszi.
Az l-karboxi-3,4-metiléndioxi-8-metoxi-fenantrén, amelynek az arisztolochiasavtól eltérő, abortív és implantációt gátló hatása ismert, még igen nagy dózisokban - a gyógyászatban szokásos 10 mg/kg dózisban sem makroszkóposán, sem szövettanilag nem mutatott hámszövet-hiperpláziát, és mutagén hatás sem volt észlelhető.
Az l-karboxi-3,4-metiléndioxi-8-metoxi-fenantrént úgy állítják elő, hogy 6-bróm-piperonilbromidot trifenil-foszfinnal vízmentes közegben [(6-bróm -piperonil)-trifen il -foszf ón i um j-bromid dá reagáltatnak. Majd ezt 2-metoxi-benzaldehiddel erős bázis jelenlétében 2-bróm-4,5-metiléndioxi2’-metoxi-stilbénné kapcsolják. A stilben-bromidszármazékot ultraibolya fénnyel besugározva 1bróm-3,4-metiléndioxi-8-metoxi-fenantrénné alakítják. Ebből az 1-karboxi-származékot alalkálidioxiddal kapják.
A találmány szerinti gyógyszerkészítmények a hatóanyagból a gyógyszertechnológiában szokásosan alkalmazott eljárásokkal állíthatók elő.
A találmány szerint előállított immunstimuláló hatású gyógyszerkészítmények a fertőzés elleni védekezés fokozására szolgálnak. így például jelentősen aktiválják a leukociták fagocitását. A találmány szerint előállított gyógyszerkészítmények például a Mycobacteriumok vagy Pneumococcusok által okozott általános fertőzések kezelésénél, továbbá lokális fertőzések kezelésére használhatók. A találmány szerint előállított immunstimuláló hatású gyógyszerkészítmények akkor is használhatók, ha a fagocitózis gyengülése áll fenn, ami péládul kortikoszteroidok vagy citosztatikumok alkalmazása után lép fel. A találmány szerint előállított gyógyszerkészítmények alkalmazásával a gyengült fagocitózis ismét normálizálható.
A találmány szerint előállított gyógyszerkészítmények ezenkívül vírusellenes hatást is mutatnak.
A találmány szerint előállított gyógyszerkészítményeket többek között makrofág-aktiváló hatásra is megvizsgáltuk. Paraméterként monocitáknak és makrofágoknak az egerek hasüregében való stimulálását vettük.
A monociták f okozott kemotaktikus bevándorlását a hasüregbe és a monoxiták differenciálódását fagocitózisra fokozott képességű mikrofágokká, célszerűen a kísérleti vegyület intraperitoneális alkalmazásával mutatjuk be.
A stimulálás olyan folyamat, amely bizonyos időt vesz igénybe. A fagocitózis aktivitásának a vizsgálatát ezért mint szokásos farmakológiai modellt egereknek a találmány szerinti vegyületekkel végzett háromnapos előkezelése után végezzük. Egyes kísérleti csoportoknál az intraperitoneális sejtpopulációt közvetlenül a vegyület beadása után eltávolítottak, annak kimutatására, hogy megfigyelt stimulálás csak bizonyos inkubációs idő után lép fel.
Kísérleti anyagok
A vizsgálandó anyagot 0,5 mg/ml töménységben vízben feloldottuk, és ezt az oldatot szükség szerint hígítottuk.
NH ^Cl-trisz-puffer
NH4CI 8,3 g/liter
Trisz[trisz(hidroxi-metil)-amino-metán] 4,110 g/200 ml (pH=7,65) keverék 1 rész trisz + 9 rész NH4CI, 2 n sósavval
7,2 pH-értékre beállítva
PBS/BSA
40,0 g NaCl
1,0 g KC1 vízzel 51 ml-re feltöltve,
7,2gNa2HPO4.2H2O pH-7,4 l,0gKH2PO4 + 0,2 g BSA (marha szérumálbumin, Sigma, No. A-9647) 100 ml PBS-re (foszfáttal pufferolt sóoldat).
DMEM
Dulbecco által módosított Eeagle tápoldat, Lglutaminnal, fenolvörös nélkül (Gibco, katszám 041-1885) + 5% FCS (magzati borjúszérum), illetve + 5% FCS+0,2% heparin
FCS fetális (magzati) borjúszérum (Gibco, kát. szám: 011-6290)
May-Grünwald-oldat módosított (Merck, At. 1424)
Ürüvér
Nr.5,30.08.84., MPL Freiburg
Antiszérum
Anti-ürü-eritrocita szérum nyulakból, Nr.308. IKA 468/6-11 nap; 18.07.78, MPIFreiburg
Kísérleti állatok
A kísérleteket 18 hetes nőstény FI hibrid egerekkel (Balb/cxC57B16) végeztük. Az állatokat a kísér-2HU 202104Β letek megkezdése előtt 5 napon át szoktattuk a laboratóriumi körülményekhez. Az állatok a patkányok és egerek részére szokásos szemcsés standard eledelt (Altromin Nr. 1324) kapták és csapvizet tetszés szerint. Az állatokat tioglikolát standarddal három makrofág-stimulálhatóságra megvizsgáltuk, ennél a vizsgálatnál jó pozitív reakciókat mutattak.
Adagolás és alkalmazás
A vegyületet vizes oldatban (0,5 mg/ml) a következő dózisokban alkalmaztuk:
intraperitoneálisan: 20 gg/kg
500 pg/kg mg/kg
A különböző dózisok alkalmazásához a törzsoldat hígítása a következő volt:
^g/kg 1 μg/ml
500 p.g/kg 25 μg/ml mg/kg 250 μ§/πι1 és ezekből mindenkor 0,4 ml-t használtunk.
Alkalmazási séma csoport-5 egér
Előkezelés: a) három beadás három egymást követő napon, a negyedik napon a makrofágok kitermelése,
b) egy beadás közvetlenül a makrofágok kitermelése előtt.
A makrofág-sejtszuszpenzió előállítása és a fagocitózis
A kísérlet elve:
Immunológiásan aktiváló anyagok beadása után a kísérleti állatokban a makrofágok stimulálódnak és a monociták makrofágokká differenciálódnak. A kidífferenciálódott, stimulált makrofágok izolálás után is képesek a megfelelő antitestekkel opszonifikált antigénstruktúrákat, ebben az esetben az ürüeritrocitákat in vitro fagocitálni. A fagocitált eritrociták (vörösvérsejtek) mikroszkóposán felismerhetők.
A kísérlet elvégzése:
Megfelelő előkezelés után az egereket nyakcsigolyájuk eltűrésével megöljük. A hashártyát feltárjuk, és 5% magzati borjúszérumot és 0,2% heparint tartalmazó 4 ml DMEM tápoldatot intraperitoneálisan beadunk. Körülbelül 30 mp masszázs után fecskendővel 3 ml sejtszuszpenziót leszívunk, és 0 ’Cos hűtőfürdőben levő polipropiléncsövecs- kébe eresztjük. Mindegyik csoportból 1 egeret arra használunk, hogy az izzadmányban a sejtkoncentrációt megállapítsuk, körülbelül 4 x 105 sejt/ml koncentrációt állítunk be.
Adherens makrofágok izolálása:
A makrofágokat és monocitákat az izolált sejtpopulációból úgy választjuk ki, hogy a sejtpopulációt fedőlemezeken inkubáljuk, ilyenkor a makrofágok és a monociták a lemezhez tapadnak, a többi sejt nem. 24 tartállyal ellátott szövettenyésztő lemezek4 re (polisztirol, Costar) kerek fedőlemezkéket helyezünk és ezekre 5% magzati borjúszérumot tartalmazó 0,25 ml DMEM tápoldatot rétegzünk A sejtek egyenletes elosztása céljából a lemezeket rázógépre tesszük és rázás közben (5 perc, körülbelül 200 fordVperc) mindegyik adaghoz 0,25 ml sejtszuszpenziót pipettázunk. Ezután a szövettenyésztő lemezeket 1 órán át 37 C hőmérsékletű, 8% CO2-ot tartalmazó tenyésztőszekrényben inkubáljuk Az inkubálás után a nem tapadó sejteket leszivatjuk és a többit 5% magzati borjúszérumot tartalmazó 0,25 ml DMEM tápoldattal kétszer mossuk
Az ürü-vörösvérsejtek opszonifikálása:
Az 1 ml ürüvért kétszer 4 ml PBS/BSA oldattal mossuk (centrifugálás 10 perc, 500 xg). A mosott vért 1:50 arányban PBS/BSA oldattal 1:200 arányban hígítjuk A hígított ürüvért és a hígított antiszérumot 1:1 arányban keverjük és 1,5 órán át kíméletesen rázva (körülbelül 80 ford/perc) inkubáljuk
Fagocitózis:
A szövettenyésztő lemezek mindegyik tartályába, amely az adherens makrofágokat a fedőlemezkéken tartalmazza, 0,5 ml opszonifikált vörösvérsejt-szuszpenziót pipettázunk A lemezeket 20 percig 37 ’C-on, 8% CO2 jelenlétében inkubáljuk Ezután a feleslegben levő vörösvérsejteket leszivatjuk és a fedőlemezkéket 0,5% magzati borjúszérumot tartalmazó DMEM tápoldattal kétszer mossuk.
A nem fagocitált vörösvérsejtek oldásához ezeket minden esetben 1 ml NlUCl-trisz-pufferral kezeljük (úgy találtuk, hogy 3,75 perc behatási idő megfelel). A puffer leszívatása után a fedőlemezkéket PBS/BSA oldattal kétszer mossuk
A fagocitózis kimutatása (festési technikák):
A fagocitózis után a makrofágokat Pappenheum szerint kombinált May-Grünwald-Giemsa eljárással megfestjük. A festést a szövettenyésztő tálak tartályaiban végezzük perc Konc. May-Grünwald-oldat, leszívatva, perc kétszer desztillált H2O, minimum 85%-os foszforsavval 7,0 pH-értékre beállítva, leszívatva, perc Giemsa oldat 1:40 hígításban és használat előtt megszűrve, leszívatva, desztillált vízzel palackból leöblítve.
A sejtmagok a festés után vörös-ibolya színűek, a citoplazma vüágoskék. A fagocitált vörösvérsejtek halvány rózsaszínűek. A mikroszkóp-preparátumokat levegőn szárítjuk, majd „Eukitt” ragasztóval tárgylemezekre ragasztjuk (három preparátum/egér).
Mikroszkópos kiértékelés
Egy egér három mikroszkóp-preparátumából kettőt számoltunk meg. Olajimmerziós, 1000-szeres nagyítású Zeiss mikroszkópot használtunk A harmadik preparátumot csak akkor használtuk fel, ha két preparátumból az eredmény nem volt egyértelmű. Preparátumokként 300 sejtet számláltunk, és ezeket a fagocitózis-aktivitástól függően a vörösvérsejt/makrofág növekvő számával osztályokba soroltuk.
-3HU 202104Β
Osztály
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
Vörösvérsejt/makrofág
9
11-20* +A számításokhoz feltételeztük, hogy 11 vörösvérsejt/makrofág esetében a 12. osztályban a megoszlás súlypontja 12vörösvérsejt/makrofág. A12. osztálybeli makrofágok viszonylag ritkán fordulnak elő.
2) a fagocitált vörösvérsejtek eloszlása (amakrof ágok száma egy osztályban x a vörősvérse jt/makrofág szám) az osztályokra %-ban, a fagocitált vörösvérsejtek összes számára, mint 100%-ra. Ennek során azoknak a makrofágoknak a számát, amelyek vörösvérsejteket nem fagocitáltak, nem vesszük tekintetbe.
Paraméter:
A makrofág-stimuláláshoz paraméternek a fagocitózis-aktivitás növekedését tekintettük, a fagocitált vörösvérsejtek pro makrofág (- osztály) számával kifejezve. A stimulálás megmutatkozik azon makrofágok számának a csökkenésében, amelyek vörösvérsejteket nem vagy csak kevés vörösvérsejtet fagocitáltak és azon makrofágok számánakanövekedésében, amelyek több vörösvérsejtet fagocitáltak.
Adatfeldolgozás és grafikus ábrázolás
A mikroszkóp-preparátumok számlálását speciálisan beprogramozott WNAG LVP 2200 számítógépen végeztük, ami a számlált osztályok külön-külön való regisztrálását lehetővé tette. Az egyes adatok közepelését az „MA 1” programmal, a grafikus ábrázolásokat az „NPL” programmal végeztük.
A stimuláló hatást minden egyes kísérleti anyagra és dózisra kétféle módon mutattuk ki:
1) a makrofágok eloszlása az osztályokra (vörösvérsejt/makrofág) %-ban, a 300 sejtre mint 100%ra. Ennek során azoknak a makrofágoknak a száma is a grafikus ábrázolásba kerül, amelyek vörösvérsejtet nem fagocitáltak;
Eredmények:
Makrofág (MPH) stimulálás l-karboxi-3,4-metilén-dioxí-8-metoxi-fenantrénnel(i.p.)
Dózis: 3x10 |xg/kg i.p.
MPH stimulálás 3 nap után (x ± a középértékek 25 standard hibája)
l.ábra
a) 300 sejt eloszlása az 1-12. osztályokra, %
2. ábra
b) A fagocitált vörösvérsejtek (eritrociták) eloszlása az 1-12. osztályokra, %.
Táblázat
Dózis: 3 x 20 μg/kg i.p.
Makrofág stimulálás 3 nap után a) 300 sejt eloszlása az 1-12. osztályokra, %.
n Oszt. Egér 1 Egér 2 Egér 3 Egér 4 x-quer SD SE MD
1 1,00 75,67 71,33 66.50 72.17 71.417 3.777 1.889 71.750
2 2.00 12,67 17.00 20.00 15.50 16.292 3.056 1.528 16.250
3 3.00 6.83 6.17 8.67 7.67 7.333 1.080 0.540 7.250
4 4.00 2.17 3.33 3.50 2.50 2.875 0.644 0.322 2.917
5 5.00 0.67 1.67 1.17 1.17 1.167 0.408 0.204 1.167
6 6.00 1.33 0.17 0.17 0.17 0.458 0.583 0.292 0.167
7 7.00 0.17 0.33 0.00 0.50 0.250 0.215 0.108 0.250
8 8.00 0.00 0.00 0.00 0.17 0.042 0.083 0.042 0.000
9 9.00 0.17 0.00 0.00 0.00 0.042 0.083 0.042 0.000
10 10.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.000 0.000 0.000 0.000
11 11.00 0.33 0.00 0.00 0.17 0.125 0.160 0.080 0.083
12 12.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.000 0.000 0.000 0.000
b) A fagocitált vörösvérsejtek eloszlása az 1 -12. osztályokra, %
n Oszt. Egér 1 Egér 2 Egér 3 Egér 4 x-quer SD SE MD
1 1,00 0.0 0.0 0.0 0.0 0.00 0.00 0.00 0.00
2 2.00 26.5 34.8 37.5 31.2 32.50 4.77 2.38 33.01
3 3.00 28.6 25.3 32.5 30.9 29.30 3.14 1.57 29.72
4 4.00 13.6 20.5 19.7 15.1 17.21 3.39 1.69 17.39
-4HU 202104Β
b) A fagocitált vörősvérsejtek eloszlása az 1-12. osztályokra, %
n Oszt. Egér 1 Egér 2 Egér 3 Egér 4 x-quer SD SE MD
5 5.00 5.6 13,7 8.8 9.4 9.34 3.32 1.66 9.07
6 6.00 13.9 1.7 1.6 1.7 4.72 6.14 3.07 1.69
7 7.00 2.1 4.1 0.0 6.0 3.06 2.60 1.30 3.09
8 8.00 0.0 0.0 0.0 2.3 0.59 1.17 0.59 0.00
9 9.00 2.8 0.0 0.0 0.0 0.70 1.39 0.70 0.00
10 10.00 0.0 0.0 0.0 0.0 0.00 0.00 0.00 0.00
11 11.00 7.0 0.0 0.0 3.4 2.58 3.33 1.66 1.68
12 12.00 0.0 0.0 0.0 0.0 0.00 0.00 0.00 0.00
Dózis: 3 x 500 pg/kg i.p.
Makrofág (MPH) stimulálás 3 nap után (x ± a középértékek standard hibája).
3. ábra
a) 300 sejt eloszlása az 1 -12. osztályokra, %.
4. ábra
b) A fagocitált vörősvérsejtek (eritrociták) eloszlása az 1 -12. osztályokra, %.
Táblázat
Dózis: 3 x 500 μg/kg i.p.
Makrofág stimulálás 3 nap után a) 300 sejt eloszlása az 1-12. osztályokra, %
n Oszt. Egér 1 Egér 2 Egér 3 Egér 4 Egér 5 x-quer SD SE MD
1 1.00 63.00 52.83 53,83 47.33 51.33 53.667 5.775 2.583 52.833
2 2.00 13.00 19.67 20.50 17.83 15.67 17.333 3.053 1.365 17.833
3 3.00 8.00 11.83 13.33 16.00 12.17 12.267 2.893 1.294 12.167
4 4.00 5.00 6.00 5.83 7.83 8.67 6.667 1.523 0.681 6.000
5 5.00 4.33 3.83 3.00 5.00 5.50 4.333 0.979 0.438 4.333
6 6.00 2.83 2.83 1.33 2.50 2.67 2.433 0.630 0.282 2.667
7 7.00 1.17 1.33 0.83 1.17 2.17 1.333 0.500 0.224 1.167
8 8.00 0.83 0.50 0.50 0.83 0.50 0.633 0.183 0.082 0.500
9 9.00 1.17 0.67 0.17 1.00 0.67 0.733 0.384 0.172 0.667
10 10.00 0.00 0.17 0.33 0.00 0.00 0.100 0.149 0.067 0.000
11 11.00 0.67 0.33 0.17 0.50 0.50 0.433 0.190 0.085 0.500
12 12.00 0.00 0.00 0.17 0.00 0.17 0.067 0.091 0.041 0.000
b) A fagocitált vörősvérsejtek eloszlása az 1 -12. osztályokra, %
n Oszt. Egér 1 Egér 2 Egér 3 Egér 4 Egér 5 x-quer SD SE MD
1 1.00 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.00 0.00 0.00 0.00
2 2.00 12.5 17.5 20.3 13.5 11.9 15.13 3.60 1.61 13.54
3 3.00 15.3 21.0 26.4 24.3 18.5 21.11 4.41 1.97 21.04
4 4.00 14.4 16.0 17.3 17.8 19.8 17.06 2.02 0.90 17.30
5 5.00 16.6 13.6 11.9 15.2 16.7 14.80 2.07 0.93 15.19
6 6.00 13.6 12.6 6.6 9.5 10.1 10.48 2.75 1.23 10.14
7 7.00 6.7 7.1 4.9 5.3 9.9 6.79 1.95 0.87 6.71
8 8.00 5.6 3.1 3.5 4.4 2.7 3.85 1.17 0.52 3.46
9 9.00 8.9 4.7 1.3 6.1 4.1 5.03 2.79 1.25 4.74
10 10.00 0.0 1.3 3.0 0.0 0.0 0.86 1.31 0.59 0.00
11 11.00 6.4 3.0 1.6 3.8 3.8 3.72 1.73 0.77 3.80
12 12.00 0.0 0.0 3.3 0.0 2.5 1.17 1.62 0.72 0.00
Dózis: 3x5 mg/kg i.p.
Makrofág (MPH) stimulálás 3 nap után (x ± a középértékek standard hibája)
-5HU 202104Β
5. ábra
a) 300 sejt eloszlása az 1-12. osztályokra, %
6. ábra
b) a fagocitált vörösvérsejtek (eritrociták) eloszlása az 1-12. osztályokra, %.
Táblázat
Dózis:3x5mg/kgi.p.
Makrofág stimulálás 3 nap után a) 300 sejt eloszlása az 1-12. osztályokra, %.
n Oszt Egér Egér Egér Egér Egér x-quer SD SE MD
2 3 4 5
1 1.00 69.33 50.33 52.17 49.50 56.17 55.500 8.149 3.644 52.167
2 2.00 9.83 16.17 18.00 23.33 22.17 17.900 5.381 2.406 18.000
3 3.00 8.00 12.17 11.50 14.67 11.17 11.500 2.389 1.068 11.500
4 4.00 4.83 7.17 5.83 6.50 5.33 5.933 0.925 0.414 5.833
5 5.00 2.83 6.00 5.17 2.67 3.00 3.933 1.539 0.688 3.000
6 6.00 2.00 2.33 4.17 1.83 1.67 2.400 1.018 0.455 2.000
7 7.00 0.67 2.67 1.33 0.50 0.17 1.067 0.990 0.443 0.667
8 8.00 0.67 1.00 0.00 0.33 0.00 0.400 0.435 0.194 0.333
9 9.00 0.67 1.17 0.83 0.17 0.17 0.600 0.435 0.194 0.667
10 10.00 0.33 0.17 0.50 0.17 0.17 0.267 0.149 0.067 0.167
11 11.00 0.17 0.67 0.17 0.17 0.00 0.233 0.253 0.133 0.167
12 12.00 0.67 0.17 0.33 0.17 0.00 0.267 0.253 0.113 0.167
b) A fagocitált vörösvérsejtek eloszlása az 1 -12. osztályokra, %
n Oszt Egér 1 Egér 2 Egér 3 Egér 4 Egér 5 x-quer SD SE MD
1 1.00 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.00 0.00 0.00 0.00
2 2.00 10.5 11.4 14.1 22.2 26.2 16.88 6.94 3.10 14.12
3 3.00 17.1 17.2 18.0 27.9 26.4 21.32 5.35 2.39 18.04
4 4.00 15.5 15.2 13.7 18.5 18.9 16.37 2.25 1.01 15.48
5 5.00 12.1 17.0 16.2 10.1 14.2 13.92 2.83 1.27 14.17
6 6.00 10.7 8.2 16.3 8.7 9.8 10.76 3.26 1.46 9.84
7 7.00 4.3 11.3 6.3 2.9 1.2 5.18 3.90 1.75 4.27
8 8.00 5.0 4.9 0.0 2.2 0.0 2.43 2.49 1.11 2.22
9 9.00 5.7 6.6 5.2 1.3 1.6 4.07 2.47 1.11 5.23
10 10.00 3.2 1.1 3.5 1.4 1.8 2.20 1.10 0.49 1.77
11 11.00 1.8 4.7 1.3 1.6 0.0 1.88 1.73 0.77 1.58
12 12.00 14.2 2.4 5.2 3.2 0.0 5.00 5.49 2.46 3.17
A stimuláló hatás függése a dózistól
Fiziológiás nátrium-klorid-oldat i.p., illetve p.o. beadása után a kontrollcsoportok azt mutatják, hogy az i.p. beadás maga előidéz már egy gyenge makrofág-aktiválást. A makrofágok nagy része két 50 vörösvérsejtet fagocitált.
Akettőnél több vörösvérsejtet fagocitáló makrofágok számának növekedése tehát a vegyület hatásával magyarázható. A vörösvérsejtek %-os menynyiségét a 4. osztálytól (makrofágok három és ennél 55 több vörösvérsejttel) ezért arányba állítottuk a dózissal.
A 7. ábra a 4. osztálytól és e felett a vörösvérsejtek %-os mennyiségének és a dózisnak az összefüggését szemlélteti, 20 mg/kg 500 m/kg és 5 mg/kg i.p. 60 dózis beadása után. A kontroll 45% ± 6% (x ± középértékek standard hibája). Az ábrán a középértékek standard hibájának (±) tartományát a középérték körül a szaggatott vonal szemlélteti.
Táblázat
A makrofágok stimulálásának és a dózisnak az összefüggése i.p. beadás után x - dózis (pg/kg), y = a fagocitált vörösvérsejtek %-os mennyisége, SEM = a középértékek standard hibája.
Nr. X -értékek y -értéke SE -értékek N
1. 20.0000 38.2000 2.7800 4
2. 500.0000 63.7600 3.3200 5
3. 5000.0000 61.8000 5.4200 5
Kiértékelés
A vegyület a makrofágok aktiválását 20 μ-g/kg 500 μ-g/kg dózissal 38%-64%-ra növeli. A dózis további növelése 5 mg/kg-ra a stimulálás csekély csökkenését eredményezi. A makrofágok aktiválása a
-6HU 202104Β választott dózistartományban nem lineáris.
A kísérleti csoport, amelyet közvetlenül a makrofágok termelése előtt egyszer intraperitoneálisan kezeltünk, azt mutatta, hogy a megfigyelt hatások csak bizonyos inkubációs idő után jelentkeznek. Ez 5 a felfedezés azt mutatja, hogy a vegyület in vivő a fagocitózis-növekedést előidéző mechanizmusokat a makrofágokban indukálta. Ez a következő hatásokra utal:
1. a membrán bekebelezési arányának stimulálá- 10 sára
2. az Fc-receptorsűrűség fokozására, és/vagy
3. a C3b-receptorok mobilitásának a fokozására.

Claims (1)

  1. Eljárás hatóanyagként l-karboxi-3,4-metüéndioxi-8-metoxi-fenantrént vagy gyógyászatilag elfogadható sóját tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy az ismert módon előállított hatóanyagot a szokásos gyógyszerészeti segédanyagokkal együtt immunstimuláló hatású gyógyszerkészítménnyé feldolgozzuk.
HU895304A 1985-08-28 1986-08-27 Process for producing immunstimulating pharmaceutical compositions containing 1-carboxy-3,4-methylenedioxi-8-methoxy-phenantrene HU202104B (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19853530718 DE3530718A1 (de) 1985-08-28 1985-08-28 Methylendioxyphenanthren- und -stilbenderivate, verfahren zur herstellung derselben und arzneimittel, die diese enthalten

Publications (1)

Publication Number Publication Date
HU202104B true HU202104B (en) 1991-02-28

Family

ID=6279566

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU895304A HU202104B (en) 1985-08-28 1986-08-27 Process for producing immunstimulating pharmaceutical compositions containing 1-carboxy-3,4-methylenedioxi-8-methoxy-phenantrene
HU863711A HU199446B (en) 1985-08-28 1986-08-27 Process for producing methylenedioxyphenanthrene and stilbene derivatives and pharmaceutical compositions comprising same
HU895304A HU895304D0 (en) 1985-08-28 1986-08-27 Process for manufacturing of immune stimulant pharmaceutical compositions containing 1-carboxy-3,4-methylenedioxy-8-methoxy-phenantrene

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU863711A HU199446B (en) 1985-08-28 1986-08-27 Process for producing methylenedioxyphenanthrene and stilbene derivatives and pharmaceutical compositions comprising same
HU895304A HU895304D0 (en) 1985-08-28 1986-08-27 Process for manufacturing of immune stimulant pharmaceutical compositions containing 1-carboxy-3,4-methylenedioxy-8-methoxy-phenantrene

Country Status (27)

Country Link
US (2) US4835178A (hu)
JP (1) JPS62167776A (hu)
KR (1) KR880000179B1 (hu)
AR (1) AR242568A1 (hu)
AT (1) AT398568B (hu)
BE (1) BE905340A (hu)
CH (1) CH673457A5 (hu)
DD (1) DD266800A5 (hu)
DE (1) DE3530718A1 (hu)
DK (1) DK168705B1 (hu)
ES (1) ES2001893A6 (hu)
FI (1) FI92396C (hu)
FR (1) FR2586681B1 (hu)
GB (1) GB2179347B (hu)
HU (3) HU202104B (hu)
IE (1) IE59239B1 (hu)
IT (1) IT1197467B (hu)
LU (1) LU86556A1 (hu)
MX (2) MX172917B (hu)
NL (1) NL8602127A (hu)
NO (1) NO863434L (hu)
PL (2) PL148757B1 (hu)
PT (1) PT83258B (hu)
SE (1) SE465153B (hu)
SU (1) SU1731053A3 (hu)
YU (2) YU44061B (hu)
ZA (1) ZA866487B (hu)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE432983T1 (de) * 1989-12-15 1992-03-19 Pharma Mar, S.A., Madrid Neue verbindungen des diterpentyps.
EP0498095B1 (en) * 1991-02-05 1995-01-04 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Sulfonic stilbene derivatives in the treatment of viral diseases
JP3309104B2 (ja) * 1992-02-20 2002-07-29 メレルダウファーマス−ティカルズ インコーポレイテッド ウイルス病治療用のスルホン酸誘導体類
US5334615A (en) * 1992-12-17 1994-08-02 Walles Wilhelm E Oil with bactericidal and virucidal properties
US5739166A (en) * 1994-11-29 1998-04-14 G.D. Searle & Co. Substituted terphenyl compounds for the treatment of inflammation
CN112778264B (zh) * 2021-01-21 2023-09-15 江西农业大学 马兜铃次酸衍生物及其在制备抗炎药物中的应用

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4122092A (en) * 1977-08-25 1978-10-24 University Of Rochester Total synthesis of (±)-picropodophyllone and (±)-4'-demethylpicropodophyllone
JPS57106677A (en) * 1980-12-22 1982-07-02 Kureha Chem Ind Co Ltd N-(3,4-methylenedioxybenzylidene) aminomethylcyclohexane-carboxylic acid, and salt of said carboxylic acid

Also Published As

Publication number Publication date
HUT44775A (en) 1988-04-28
US4835178A (en) 1989-05-30
NO863434D0 (no) 1986-08-27
PL154026B1 (en) 1991-06-28
KR870002119A (ko) 1987-03-30
IE59239B1 (en) 1994-01-26
GB8619644D0 (en) 1986-09-24
SE465153B (sv) 1991-08-05
CH673457A5 (hu) 1990-03-15
YU43998B (en) 1990-02-28
NO863434L (no) 1987-03-02
HU895304D0 (en) 1990-03-28
SE8603589D0 (sv) 1986-08-26
ATA215186A (de) 1994-05-15
MX172917B (es) 1994-01-21
US5024743A (en) 1991-06-18
PL148757B1 (en) 1989-11-30
NL8602127A (nl) 1987-03-16
SU1731053A3 (ru) 1992-04-30
DE3530718A1 (de) 1987-03-12
ES2001893A6 (es) 1988-07-01
YU44061B (en) 1990-02-28
PL268178A1 (en) 1988-10-13
IT8621526A0 (it) 1986-08-26
FI863282A0 (fi) 1986-08-13
FR2586681A1 (fr) 1987-03-06
FI92396B (fi) 1994-07-29
DK168705B1 (da) 1994-05-24
PT83258A (de) 1986-09-01
DD266800A5 (de) 1989-04-12
HU199446B (en) 1990-02-28
JPS62167776A (ja) 1987-07-24
IE862288L (en) 1987-02-28
LU86556A1 (fr) 1986-12-02
YU147586A (en) 1988-02-29
PL261196A1 (en) 1988-02-04
BE905340A (fr) 1987-02-27
MX3550A (es) 1993-10-01
FI863282L (fi) 1987-03-01
DE3530718C2 (hu) 1992-07-09
PT83258B (pt) 1988-07-01
GB2179347B (en) 1989-08-09
SE8603589L (sv) 1987-03-01
KR880000179B1 (ko) 1988-03-12
AR242568A1 (es) 1993-04-30
DK407586D0 (da) 1986-08-27
FR2586681B1 (fr) 1991-02-22
ZA866487B (en) 1987-04-29
GB2179347A (en) 1987-03-04
AT398568B (de) 1994-12-27
IT1197467B (it) 1988-11-30
DK407586A (da) 1987-03-01
MX9300436A (es) 1994-07-29
JPH0349908B2 (hu) 1991-07-31
FI92396C (fi) 1994-11-10
YU114987A (en) 1988-02-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Ehrlich et al. Effects of antimicrotubular agents on the secretion of collagen: a biochemical and morphological study
Kisilevsky et al. Arresting amyloidosis in vivo using small-molecule anionic sulphonates or sulphates: implications for Alzheimer's disease
US8227496B2 (en) Use of 4-[(4-thiazolyl)phenoxy]alkoxy-benzamidine derivatives for treatment of osteoporosis
KR20210010958A (ko) Pde4 억제제 및 pi3 델타 또는 이중 pi3 델타-감마 키나아제 억제제를 함유하는 약제학적 조성물
DE69935720T2 (de) Diamino-propanol-verbindungen zur behandlung von ischaemien
JPH07119227B2 (ja) 生体物質処置方法、処置用化合物
JPH07506094A (ja) プロテインキナーゼｃ阻害剤
HU201672B (en) Process for producing pharmaceutical compositions comprising podophyllotoxin
US10350184B2 (en) Derivatives used in the treatment of muscle atrophy
HU202104B (en) Process for producing immunstimulating pharmaceutical compositions containing 1-carboxy-3,4-methylenedioxi-8-methoxy-phenantrene
Kisilevsky Anti-amyloid drugs: potential in the treatment of diseases associated with aging
JPH0291020A (ja) Ｐａｆ―アセッサー拮抗剤による疾患の治療
KR20000035446A (ko) 세포접착분자 발현억제제
US4843092A (en) Immunosuppressive agent
JPH05502434A (ja) 医薬組成物およびその用途
US5962480A (en) Drug for ameliorating brain diseases
JPH05503506A (ja) 芳香族ポリマーを含む薬学的組成物及びそれを用いる治療法
US11484484B2 (en) Composition for alleviating skin barrier dysfunction
WO1995013082A1 (en) Immunotherapy composition and method
US20040102365A1 (en) Pharmaceutical composition for prevention and remedy of osteoporosis
US20100160394A1 (en) Use of 4-[(4- thiazolyl)phenoxy]alkoxy-benzamidine derivatives for the prophylaxis and treatment of osteoporosis
KR100309888B1 (ko) 골다공증 예방 및 치료제 조성물
JPH02256610A (ja) ポリアロマティック化合物を含有する医薬用組成物
JP5555922B2 (ja) 脱毛を治療する、又は、脱毛の発症を遅らせるための組成物
EP0073490A1 (en) Dihydrothiazole-purines

Legal Events

Date Code Title Description
HMM4 Cancellation of final prot. due to non-payment of fee