HU201742B - Process for producing heterocyclic disulfides and pharmaceutical preparations containing same - Google Patents
Process for producing heterocyclic disulfides and pharmaceutical preparations containing same Download PDFInfo
- Publication number
- HU201742B HU201742B HU861011A HU101186A HU201742B HU 201742 B HU201742 B HU 201742B HU 861011 A HU861011 A HU 861011A HU 101186 A HU101186 A HU 101186A HU 201742 B HU201742 B HU 201742B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- ppm
- het
- disulfide
- bis
- methanol
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D213/78—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
- C07D213/79—Acids; Esters
- C07D213/80—Acids; Esters in position 3
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D235/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings
- C07D235/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D235/04—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles
- C07D235/24—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached in position 2
- C07D235/28—Sulfur atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
- C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
- C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
- C07D239/46—Two or more oxygen, sulphur or nitrogen atoms
- C07D239/56—One oxygen atom and one sulfur atom
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D249/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
- C07D249/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
- C07D249/08—1,2,4-Triazoles; Hydrogenated 1,2,4-triazoles
- C07D249/10—1,2,4-Triazoles; Hydrogenated 1,2,4-triazoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D249/12—Oxygen or sulfur atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D253/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D251/00
- C07D253/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D251/00 not condensed with other rings
- C07D253/06—1,2,4-Triazines
- C07D253/065—1,2,4-Triazines having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D253/07—1,2,4-Triazines having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms, or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
- C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
- C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D277/32—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D277/36—Sulfur atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
- C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
- C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D277/32—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D277/38—Nitrogen atoms
- C07D277/44—Acylated amino or imino radicals
- C07D277/46—Acylated amino or imino radicals by carboxylic acids, or sulfur or nitrogen analogues thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
- C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
- C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D277/32—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D277/56—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D285/00—Heterocyclic compounds containing rings having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D275/00 - C07D283/00
- C07D285/01—Five-membered rings
- C07D285/02—Thiadiazoles; Hydrogenated thiadiazoles
- C07D285/04—Thiadiazoles; Hydrogenated thiadiazoles not condensed with other rings
- C07D285/12—1,3,4-Thiadiazoles; Hydrogenated 1,3,4-thiadiazoles
- C07D285/125—1,3,4-Thiadiazoles; Hydrogenated 1,3,4-thiadiazoles with oxygen, sulfur or nitrogen atoms, directly attached to ring carbon atoms, the nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Thiazole And Isothizaole Compounds (AREA)
- Pyridine Compounds (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Description
általános képletű diszulfidok előállítására - a képletben a 2 Hét jelentése azonos, és
Hét jelentése 1,2,4-triazolil-, piridinil-, benzimidazolil-, tiazolil-, pirimidinil-, 1,3,4-tiadiazolil- vagy dihidro-l,2,4-triazinilcsoport, amelynek az alábbiakban felsoroltak közül azonosan egy, két vagy három szubsztituenst hordoznak, azzal a feltétellel, hogyha a gyűrűn lévő szubsztituensből több van, azok mindig eltérőek, de piridil-6-csoport esetén 2-,3- vagy 4monokarboxi-helyettesítés is kizárt
1-4 szénatomos alkilcsoport, amely adott esetben karbonilcsoporttal, karboxilcsoporttal vagy 1-4 szénatomos alkoxikarbonilcsoporttal szubsztituált,
1- 5 szénatomos acilaminocsoport, ahol az acilcsoport egy alifás mono- vagy dikarbonsav acilcsoportját jelenti, hidroxil-,
0x0-, karboxilfenil-,
2- 4 szénatomos halogénalkenil-, karboxi-(C 1 -C4-alkil)-tiocsoport.
A vegyületeket analóg eljárásokkal állítják elő. Az immunrendszert serkentő hatásuk van.
A leírás terjedelme: 8 oldal ábra nélkül
HU 201742 Β
A találmány tárgya eljárás új heterociklusos diszulfidok és az azokat tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására.
Ismert, hogy a röviden humorális immunitásnak és sejtimmunitásnmak nevezett védőmechanizmusok, amelyekkel az élő szervezet rendelkezik, kölcsönhatást fejtenek ki a patogén elváltozásokat előidéző és pontenciálisan káros idegen testek, főleg mikroorganizusok vagy neoplasztikus sejtek semlegesítésében és eliminálásában.
Immunológiai vizsgálatok kiderítették, hogy az immunológiai aktivitás külső és belső tényezők által provokált csökkenése és a fertőző tumorbetegségek növekvő elterjedése között összefüggés áll fenn. Emelett az immunrendszer funkcióinak az elváltozás következtében egyéb betegségek keletkeznek, így például az autoimmun betegségek és az immunkomplexek által kiváltott betegségek. Ezért régóta keresnek immunserkentő anyagokat, azaz olyan anyagokat, amelyek képesek a velük kezelt egyed immunológiai aktivitását megváltoztatni, előnyösen fokozni, és amelyek jó hatékonyságuk és jó fiziológiai elviselhetőségük folytán a test védekező erejének megsegítésében széleskörűen alkalmazhatók. Az immunitás serkentése szempontjából például a BCG-t, C. Parvum-ot, továbbá M. tuberculosis és a brucellák kivonatait vizsgálták.
Ezeknek az anyagoknak azonban az alkalmazásra kerülő koncentrációkban világosan észlelhető mellékhatásai vannak, így például különböző méretű helyi granulomák. Az anyagok pontos természete nem ismeretes, ez a jól reprodukálható klinikai eredményekkel járó, rendszerszemléletű vizsgálatukat nehezíti. Ezért kívánatosak az olyan új immunserkentők, amelyek kistoxicitású, kémiailag definiált anyagok, mint például a besztatin, a kismolekulasúlyú immunserkentő, amelyet jelenleg intenzíven vizsgálnak és tudományos referencia anyagként használnak.
Meglepő módon azt találtuk, hogy az új
Het-S-S-Het (I) általános képletű heterociklusos diszulfidok erős immunserkentő és az immunitást helyreállító hatással rendelkeznek; e hatás például a juheritrociták által kiváltott DTH-reakcióban, a mononukleáris fagociták aktiválásában és kifejezetten erős CSF-aktivitásában nyilvánul meg. Az említett immunserkentő hatások például a fertőzésekkel szembeni ellenálló erő fokozásában is megfigyelhetők. Ezen túlmenően az (I) általános képletű vegyületek meglepő módon citosztatikus hatással is rendelkeznek, például az egér Bló-melanoma esetében.
Az általános képletben a 2 Hét jelentése azonos, és
Hét jelentése 1,2,4-triazolil-, piridinil-, benzimidazolil-, tiazolil-, pirimidinil-, 1,3,4-tiadiazolil- vagy dihidro-1,2,4- triazinilcsoport, amelyek az alábbiakban felsoroltak közül azonosan, egy, két vagy három szubsztituenst hordoznak, azzal a feltétellel, hogyha a gyűrűn lévő szubsztituensből több van, azok mindig eltérőek, de piridil-6-csoport esetén a 2-, 3- vagy 4monokarboxi-helyettesítés is kizárt:
1-4 szénatomos alkilcsoport, amely adott esetben karbamoilcsoportal, karboxilcsoporttal vagy 1-4 szénatomos alkoxikarbonilcsoporttal szubsztituált,
1-5 szénatomos acilaminocsoport, ahol az acilcso2 port egy alifás mono- vagy dikarbonsav acilcsoportját jelenti, hidroxil-, oxo-, karboxil- fenil-, 2-4 szénatomos halogénalkenil-, karboxi-(Ci-C4-alki)-tiocsoport.
Amennyiben az új vegyületek savas funkciókat hordoznak, fiziológiailag elviselhető sóik alakjában is jelen lehetnek. Az ilyen sók példáiként az alábbiakat soroljuk fel: alkálifém- alkáliföldfémsók, így a nátrium-, kálium-, kalcium-, magnézumsók, vagy például ammóniumsók és szubsztituált ammóniumsók, például az NH+4-ionnal, etanol-ammóniummal, dietanol-ammóniummal, továbbá tetraalkil-ammóniummal alkotott sók, vagy bázikus aminosavakkal, például lizinnel vagy arginnel képzett sók.
Az új vegyületeket a találmány szerint úgy állítjuk elő, hogy valamely általános képletű vegyületet ahol Hét jelentése a fenti - oxidálószerrel kezelünk.
Oxidálószerként például az elemi oxigént és a hidrogén- peroxidot nevezzük meg, adott esetben vassók, például Mohr-féle só, vagy bázisok, például nátriumhidroxid, kálium-hidroxid, nátrium-hidrogén-karbonát vagy kálium-hidrogén-karbonát adagolása mellett, továbbá alkalmazhatók szenes persavak, például perecetsavak, perbenzoesav vagy m-klór-perbenzoesav, vagy elemi jód vagy bróm, adott esetben bázis, például nátrium-hidroxid vagy kálium-hidroxid, vas(III)klorid vagy káliumhexacianoferrát(III) adagolása mellett.
Előnyben részesítjük az alábbi oxidálószereket: oxigén, hidrogén- peroxid, szerves persavak, így például perecetsav, perbenzoesav és m-klór-perbenzoesav valamint elemi jód. Az oxidálást előnyösen vízben vagy szerves oldószerben végezzük (például metanol, etanol, izopropanol, etil-acetát és halogénezett szénhidrogének, például diklór-metán és kloroform). A felsorolt oldószerek elegyeit is alkalmazhatjuk. Oxigén, hidrogén-peroxid és persavak alkalmazása esetén kerülni kell azokat az oldószereket, amelyek - mint ismeretes - robbanásveszélyes peroxidokat képeznek (például éter, tetrahidrofurán, dioxán, aceton, metiletil-keton, izopropanol stb.).
Teljes általánosságban lehetséges, hogy az új diszulfidokban a Hét molekularészben szereplő szubsztituenseket az irodalomból ismert eljárásokkal egyéb, szintén Hét fent megadott szubsztituensei közé tartozó szubsztituenssé alakítjuk. így például egy alkoxikarbonil-csoportot elszappanosítással szabad karboxilcsoporttá alakíthatunk.
A hatóanyagot egy vagy több, előnyösen egy további olyan gyógyhatású hatóanyaggal kombinálhatjuk, amely például baktériumok, gombák vagy vírusok okozta fertőzéseket és tomorbetegségeket kedvezően befolyásol. A hatóanyagokat a találmány értelmében parenterálisan vagy orálisan alkalmazhatjuk. Parenterális alkalmazás céljára a hatóanyagot gyógyászatilag elviselhető vektorban feloldjuk vagy szuszpendáljuk, előnyösen növényi olajban, például földimogyoróolajban vagy szézamolajban.
Előnyösek a hatóanyag alkoholos, például etanolos, propándiolos vagy glicerines oldatai, vagy a felsoroltak elegyével készített oldatai is. Vizes oldat készítése céljából a hatóanyagot előnyösen vízben oldódó, fiziológiailag elviselhető só alakjában alkalmazzuk. A készítmények a szokásosan használt segédés hordozóanyagokat tartalmazhatják. Ilyenek például a töltőanyagok, emulgeátorok, csúsztató és pufferoló anyagok, ízesítő anyagok stb.
HU 201742 Β
Az alábbiakban példákat adunk a vegyületek immunserkentő aktivitásaira, valamint az egér immunválasztására gyakorolt hatásukra különböző szabványosított in vitro módszerek szerint végzett kísérletek alapján. Az alkalmazott módszerek - mint ismeretes - különösen alkalmasak immunserkentők, illetve hatásuk minőségének kivizsgálására.
/. kísérlet
Juheritrocitákkal szembeni késleltetett típusú sejtimmunológiai reakcióra kifejtett hatás (delayed type hypersensitivity, DTH)
5-5 nőnemű, 18-20 g testsúlyú NMRI-egerekből álló csoportot egyedeinek intravénásán 106 *, illetve 109 db juheritrocitát applikáltunk. Az immunológiában a juheritrocitákat szabvány vizsgálati anyagnak (antigénnek) tekintik sejtbeli és humorális immunreakciók kiváltása szempontjából. Ez a teszt főleg az imunrendszer T-sejtektől függő komponenesének (T helper cells) működőképességéről ad felvilágosítást. A 8. kiviteli példa szerint előállított anyagot, azaz a bisz-(5-karboximetil-4-metil-tiazol-2-il)-diszulfidot a -3., -2., -1. és 0. napon fiziológiás konyhasóoldata alakjában 20, 30, illetve .40 mg/kg dózisban intraperitoneálisan alkalmaztuk. Öt nap múlva mindegyik állatnak 2xl08 db juheritrocitát befecskendeztünk a talpba, és 24 óra elteltével megmértük a láb duzzadását. A láb duzzadását egy késleltetett típusú bőrreakció váltja ki delayed type hypersensitivity, DTH), és szakember tudja, hogy ez a duzzadás a sejtbeli immunválasz mértékének tekinthető (Collins, E M. és Mackaness, G. B„ J. Immunoi. 101, 830-845, 1986). Az 1. táblázatban összefoglalt eredmények azt mutatják, hogy 106 juheritrocitával 106 db juheroxitával végzett immunizálás után a találmány szerint előállított vegyület a sejtbeli immunválaszt fokozza. A fenti kísérletben a serkentés optimuma 30 mg/kg dózis esetén figyelhető meg.
1. táblázat
Egerek juheritrocitákkal végzett immunizálása - a sejtbeli immunválaszra (DTH-reakcióra) kifejtett hatás
| Napi két kezelés a -3., -2., -1. és 0. napon Dózis i.p. | %-os duzzadás 106 eritrociták esetében |
| PSB* | 24,3+1,3 |
| vizsgált anyag 20 mg/kg | 28,3±6,7 |
| vizsgált anyag 40 mg/kg | 36,5±6,5 |
| vizsgált anyag 60 mg/kg | 31,4±8,7 |
*PSB-foszfáttal pufferolt konyhasó-oldat (NaCl: 8000 mg/1, KC1: 200 mg/1, Na2HPÖ4.2H2O: 200 mg/1).
2. kísérlet
A nem-specifikus immunitás serkentésére gyakorolt hatás - az egy magú (mononukleáris) fagociták aktiválása
A 8. példa szerint előállított vegyületnek a peritoneál- makrofágok serkentésére kifejtett hatását vizsgáltuk meg 6-8 hetes NMRI-egereken. Nőnemű egereknek parenterálisan, illetve orálisan 25 , 50, 100 illetve 200 mg/kg dózisban adtuk be a vizsgálandó anyagot, míg a kontroll csoportot pufferolt konyhasóoldattal kezeltük. A kezelés után 3 nappal az állatokat leöltük, és peritoneál-marofágjaikat megvizsgáltuk aktiválás szempontjából. A makrogfágok aktiválásának mértékeként egyrészt a lizoszomális enzimek (β-galaktozidáz, β-glukuronidáz, N-acetil-D-glükoizaminidáz) kiválasztását határoztuk meg, másrészt hasonló makrofág-kultúrákban a kolloid arány (198 Au) felvétele által kiváltott pinocitózist vizsgáltuk meg. A makrofágok oxidatív anyagcseréjének intezitása aktiválási állapotuk további mérőszámaként tekinthető. Ezen aktivitás meghatározása biolumátok segítségével a kemoluminiszcencia megmérése alapján történik. E célból egyrészt 30 mm átmérőjű Petricsészékben 3xl06 db makrofágot 1 ml TC-199 közeggel, másrészt félgömbaljú polietilén csövecskékben (a kemoluminisztencia meghatározása céljából) 1C< makrofágot 100 μΐ közeggel 5% CO2 mellett 37 °C- on inkubáltunk. Egy órás inkubálás után a kultúrákat mostuk az úszó sejtek eltávolítása céljából. A kemoluminiszcenciát (csöves kultúrában) közvetlenül határoztuk meg, míg a Petri-csészéket 37 °C további 24 órán át inkubáltuk, és ezután mértük meg az enzim- és pinocitózis-aktivitást. Az alábbi eredményeket kaptuk:
2. táblázat
Az egér peritoneál-makrofágjainak oxidatív anyagcseréjére kifejtett hatás (kemoliminiszcencia: RL-egységek/15 perc)
Egyszeri dózis i.p. p.o.
PBS 2,97±0,28xl05 3,65^,81x105 <25 mg/kg 7,87±0,28xl05 6,41±0,42xl05 vizs- 50 mg/kg 9,72±0,82xl05 8,99±O,39xlO5 gált 100 mg/kg 12,85±2,37x1ο5 11,8510,92x1ο5 anyag 200 mg/kg 24,40±3,39x1ο5 15,60±l,98xl05
RL-egység - relatív fény-egység
Az NMRI-egereken a 8. példa szerinti vegyülettel végzett kezelés mind parenterális, mind orális beadás esetén serkenti a makrofágok aktivitását, azaz stimulálja az immunitást. Az oxidatív anyagcsere fokozása oxigéngyökök keletkezésében és így az ezzel járó mérhető fényben nyilvánul meg. A 25 mg/kg-ot meghaladó dózisok esetében a makrofág-aktivitás dózistól függő emelkedés figyelhető meg parenterális és orális alkalmazáskor egyaránt.
A 3. táblázat azt mutatja, hogy a kontroll egerek makrofágjai lizoszomális enzimek (β-glukuronidázt, β-galaktozidázt, N-acetil^-D-glükozamidinázt) csak csekély mennyiségben választanak ki a kultúra felülúszó részébe. Az orálisan vagy parenterálisan 72 órán át a hatóanyaggal kezelt egerek egymagú fagocitái a fent említett savas hidrolázenzimeket (β-Glu, β-Gal, N-Ac-Glu) észrevehetően nagyobb mennyiségben választják ki egy olyan dózis-hatás-görbe szerint, amely midegyik mért enzim esetében felülmúlja a kontrollt. Megállapítható, hogy a vizsgált anyag serkenti a makrofágok aktivitását és az enzimek szabaddá tételét elősegíti.
Az egymagú fagociták pinocitózis-aktivitásának mennyiségi meghatározását Davies és munkatársai módszere szerint végeztük (Davies, P, Allison, A. C. és Haswell, A. D.: Biochem. Biophys. Rés. Com. 52, 627, 1973). Ehhez 2 nm részecskeméretű, 4-12
HU 201742 Β
3. táblázat
Az egér peritoneál-makrofágjai által kiválasztott lizoszomális hidroláz-enzimek mennyiségére gyakorolt hatás ''·<> .**— i ___ h /-ii Tτ/ 1 fc> z-» _ i τt/_TI Π a L. z'11.. ΞΞΤΤΤΖΓΤ'
| kezelés | lx í. p. illetve p.o. | -B-Glu mU/ml | B-Gal mU/ml | β-Ac-Glu mU/ml | |
| PBS | 755/ 484 | 1306/ 1702 | 1238/1168 | ||
| 25 mg/kg | 1001/ 897 | 2584/ 4917 | 2786/1947 | ||
| vizsgált. | 50 mg/kg | 1370/1133 | 11058/ 9179 | 3315/2862 | |
| anyag | 100 mg/kg | 1791/1593 | 17596/13195 | 4305/3676 | |
| 200 m^kg | 2136/1886 | 22351/17357 | 6548/5621 |
mCi/mg Au fajlagos aktivitású rádiókatív kolloid aranyat alkalmaztunk. A 4. táblázatban közölt eredmények a 8. példa szerint előállított vegyületnek az endocitózis teljesítményre kifejtett hatását szemléltetik. A találmány szerint előállított vegyülettel kezelt állatok peritoneál-makrofágjai a kolloid arany (198 Au) pinocitózisát szignifikásan és dózistól függően fokozzák a kezeletlen állatok makrofágjaihoz viszonyítva.
4. táblázat
Egérmakrofágok pinocitózis-teljesítményére kifejtett hatás 20
5. táblázat
C. albicans-fertőzés utáni átlagos túlélési idő (őxlO5 CFU)
| Kezelés 15 2x60 mg/kg naponta i. p. | átlagos túlélési idő (nap) | megbízhatósági hatás | |
| 95% | 99% | ||
| PSB | 9,7 | 8,4-10,6 | 7,8-10,9 |
| Vizsgálati anyag | : 16,1 | 14,8-17,4 | 14,4-17,8 |
Kezelés 1 x_intraperitoneálisan orálisan
PSB 0,201xl03 cpm 0,150xl03 cpm ^25 mg/kg 0,415xl03 cpm 0,365xl03 cpm
Vizsgált 50 mg/kg 0,558xl03 cpm 0,448xl03 cpm anyag ' 100 mg 0,7l8xl03 cpm 0,66lxl03 cpm (200 mg/kg 0,862xl03 cpm 0,739xl03 cpm
3. kísérlet
Balb/c-egerek Candida albicans-szel történő fertőzéssel szembeni ellenállóságának fokozása
a) Megelőző kezelés
Balb/c-egereket 4 napon át naponta kétszer 60 mg/kg dózisú hatóanyaggal kezeltük intraperitoneálisan (8. példa szerinti vegyület). Az utolsó dózis beadása 35 után 24 órával az állatokat Candida albicans-szal (5xlO5 CFU/egér) megfertőztük. A hatóanyag helyett fiziológiás konyhasó-oldattal kezelt kontrollt szintén megfertőztük. A pusztulási arányból az átlagos túlélési időt számítottuk. A kontroll csoport 50%-a 9,7 nappal a fertőzés után pusztult el, míg a hatóanyaggal kezelt csoport átlagos túlélési ideje 16,1 nap volt. Az alkalmazott kezelési mód és dózis mellett (megelőző adagolás) a vizsgált anyag a Balb/c egér Candida albicans elleni rezisztenciáját szignifikánsan fokozza.
b) terápiás kezelés
Idült Candida albicans-fertőzés kezelése céljából nőnemű Balb/c- egereket (15/csoport) intravénásán 25 Candida albicans-szal (2,5xl05 cfu/egér) megfertőztük (0. nap). A megfertőzés után az állatokat 8 egymást követő napon (3-10. nap) a 8. példa szerint kapott vegyülettel kezeltük intraperitoneálisan, 60,0 mg/kg dózisokkal. A kontroll állatokat fiziológiás konyhasó30 oldattal kezeltük. A 8., 14. és 21. napon vizeletmintákat vettünk, és a kórokozók számát (csíraszámot) meghatároztuk. A 30. napon az állatokat leöltük, és a csíraszámot, valamint a vesében található nekrózisok számát vizsgáltuk meg.
A 6, táblázat azt mutatja, hogy a vizsgált hatóanyag terápiás dózisban az idült albicansfertőzés minden paraméterét (a vizeletben és a vesében található kórokozók számát és a veseszövet elhalását) csökkentette, azaz a betegséget befolyásolja. Majdnem 40 valamennyi kontroll állat esetében kórokozókat találtunk a vizeletben, míg a kezelt állatoknál a csírák száma szignifikásan csökkent. A csíráknak a vesébe történő megtelepedését a hatóanyag 63%-ról 27%-ra, a nekrózisok gyakoriságát 87%-ról 10%-ra csökkenti.
6. táblázat
Idült Candida albicans-fertőzés terápiás kezelése
| Kezelés 60 mg/kg i.p. | 8. nap | Pozitív lelet 14. nap | 21. nap | Csírák a vesében 30. nap | Nekrózis a vesében 30. nap |
| PBS | 4/15 (27%) | 8/15 (53%) | 10/15 (67%) | 19/30 (63%9 | 26/30 (87%) |
| Hatóanyag | 1/15 (7%) | 1/15 (7%) | 4/15 (27%) | 8/30 (27%) | 3/30 (10%) |
4. kísérlet
A találmány szerint előállított vegyületeknek a DTH-reakcióra gyakorolt serkentése
Az 1. kísérlet keretében leírt módon NMRI-egereket különböző új, a találmány szerint előállított vegyületekkel kezeltük. Az immunserkentés meghatározása céljából a DTH-reakciót viszgáltuk. A 7.
táblázat különböző anyagok relatív hatását szemlélteti, 60 a 8. példa szerinti vegyülethez viszonyítva, amelynekhatása itt 100%- nak felel meg. A táblázatból kitűnik, hogy az alkalmazott vegyületekkel kezelt állatok esetén a DTH-reakció általában erősebb, mint a (8. példa szerinti vegyülettel kezelt) kontroll ese65 tében.
HU 201742 Β
7. táblázat
| x. példa szerinti mg/kg vegyület | Dózis Alkalmazás módja | DTH- -reakció (SRBC) | 5 | |
| 2 | 20 | lxi. p. 0. nap | 88% | |
| 5 | 200 | lxi. p. 0. nap | 61% | 10 |
| 6 | 100 | lxi. p. 0. nap | 100% | |
| 8 | 100 | lxi. p. 0. nap | 100% | |
| 10 | 10 | lxi. p. 0. nap | 112% | |
| 12 | 100 | lxi. p. 0. nap | 96% | |
| 13 | 200 | lxi. p. 0. nap | 147% | 15 |
| 14 | 100 | lxi. p. 0. nap | 118% |
9. táblázat
| x. példa szerinti vegyület | Dózis (mg/kg) i. p. naponta | A túlélési idő* relatív növe- lx kedése (kontroll=l00%) |
| 1 | 1 | 144 |
| 1 | 2 | 123 |
| 5 | 10 | 142 |
| 6 | 10 | 145 |
| 8 | 1 | 130 |
| 10 | 10 | 135 |
| 12 | 10 | 205 |
| 14 | 10 | 107 |
5. kísérlet
A találmány szerint alkalmazható vegyületek 20 makrofágokra kifejtett serkentő hatása
A 2. kísérlet leírásában ismertetett módon NMRIegereket a találmány szerint alkalmazható különböző vegyületekkel kezeltük. Az immunserkentés meghatározásaként a makrofágok funkcióját (kemoluminisz- 25 cenc és enzimaktivitás) vizsgáltuk meg.
A 8. táblázat különböző anyagok hatását szemlélteti a 8. példa szerint előállított vegy ülethez viszonyítva, amelynek aktiváló hatása (a kontroll és a kezelt közötti különbség) itt 100%-nak felel meg. A táblázat 30 azt mutatja, hogy a vizsgált vegyületek a makrofágokat kemoluminiszcencia és lizoszomális enzimek szempontjából erősen serkentik.
8. táblázat 35
x. példa szerinti vegyület makrofág-akti vitás
| (100 mg/kg i. p. egyszeri dózis, a 0. napon) | kemoluminiszcencia, % | exocitózis % | 40 |
| 1 | 30% | 48% | 45 |
| 2 | 72% | 53% | |
| 5 | 37% | 45% | |
| 6 | 26% | 33% | |
| 8 | 100% | 100% | |
| 10 | 66% | 21% | 50 |
| 12 | 39% | 54% | |
| 13 | 81% | 77% | |
| 14 | 97% | 93% |
6. kísérlet
A Candida albicans elleni védőerő serkentése a hatóanyagok megelőző célú adagolásával
A 3a) kísérletben leírtak szerint Balb/c-egereket kezeltünk a találmány szerint alkalmazható vegyüle- 60 tekkel. A 9. táblázat azt mutatja, hogy a kezelt állatok átlagos túlélési ideje a kezeletlen kontrollcsoporthoz viszonyítva szigfikánsan nő.
* A kontrollcsoport átlagos túlélési ideje=»100%
7. kísérlet
A BJó-melanoma áttétel-képződésére gyakorolt hatás
Nőnemű C57B1/6 egereken (csoportonként 10 állat) 2x1ο5 élő B16-melanoma-sejttel primer tumort váltottunk ki. A tumort, ha átmérője elérte a 0,65 cm-t, műtét útján eltávolítottuk. A tumor eltávolítása után a B16-melanoma áttételeket képez a tüdőben, és az állatok elhullanak. Az állatokat a tumor redukálása után a műtét előtti 3., 5., 7., 9., 11. és 13. napon, illetve a megfelelő műtét utáni napokon 50,
100 illetve 200 mg/kg dózisú 8. példa szerinti vegyülettel kezeltük intraperitoneálisan. A primer tumor eltávolítása utáni elpusztulást arányból számítjuk az átlagos túlélési időt.
A kontrollcsoport 50%-a 26. napig pusztul el, míg 1 a kezelt csoport túlélési ideje szignifikásan hosszabb volt (50, 100, illetve 200 mg/kg esetében 43, 40, illetve 35 nap).
fej#**
10. táblázat
Terápiás tumorkezelés B16-melanóma esetén
| Kezelés 6x, i. p. (mg/kg) 3., 5., 7., 9., 11., 13. nap | átlagos túlélési idő (nap) |
| PBS | 26 |
| Hatóanyag 50 | 43 |
| 100 | 40 |
| 200 | 35 |
8. kísérlet
A csontvelő-telepek képződésére gyakorolt hatás
6-8 hetes B2D2F1 egereken a 8. példa szeritni vegyület hatását vizsgáltuk a csontvelő-telepek serkentésére. Nőnemű egereknek a vizsgált anyagot 2,5 mg/kg, illetve 5 mg/kg dózisban adtuk be intraperitoneálisan. Egy nappal később az állatokat leöltük, a csontvelősejteket izoláltuk és általánosan ismert és általánosan ismert módszerek (Metcalf, Immunology 27, 427, 1971; Stanley és munkatársai, J. Exp. Med. 143, 631, 1976) segítségével tenyésztettük. A csontvelő-telepek kifejlődése érdekében „CSF”- forrásként (Colony stimulating factor) a szokásos módon 15 %-os L-sejt-felülúszót használtunk. Vetés után 8 nappal megszámoltuk a telepeket. A 10. táblázatból kivehető
HU 201742 Β módon a vizsgált anyag 2,5 és 5 mg/kg dózisú egyszeri adagolása a csontvelő-telepek képződését észrevehetően serkenti, Colony stimulating factor adagolása esetén és enélkül egyaránt.
11. táblázat
A csontvelő képződésére gyakorolt hatás (in vivő)
| Kezelés, A csontvelő-telepek száma a 8. napon | ||
| dózis lxi. p. | CSF adagolásával CSF nélkül | |
| PBS | 41±6 | 0 |
| Vizsgálati 2,5 | 94±11 | 24±2 |
| anyag 5,0 | 163±8 | 44±5 |
Az alábbi példák a találmányt részletesebben ismertetik, az oltalmi kör minden korlátozása nélkül.
1. Példa
Bisz(3-hidroxi-1-fenil-1,2,4-triazol-5-il)-diszulfid
2,9 g (15 mmól) 3-hidroxi-l-fenil-5-merkapto1,2,4-triazol 100 ml metanollal készített elegyéhez szobahőmérsékleten 3,2 ml (33 mmól) hidrogén-peroxidot csepegtetünk 35%-os metanolos oldat alakjában. Az oldat megsárgul, és 20 perc elteltével az új vegyület lassan kiválik. 4 órával később a csapdékot leszívatjuk, metanollal mossuk, majd szárítjuk.
Hozam: 2,1 - az elméleti hozam 72%-a.
Op.: 323 ’C (bomlás)
NMR (dő-DMSO) δ = 11,58 ppm, SZ, 2H, -OH
7,38 ppm, m, 10H, arom. H.
2. Példa
Bisz(5-karboxi-benzimidazol-2-il)-diszulfid
2-merkapto-benzimidazol-5-karbonsavból állítjuk elő a cím szerinti vegyületet az 1. példában leírtak szerint.
Hozam: 70%
Op.: 235-238 ’C x
NMR (dő-DMSO) δ - 9,4 ppm, d, NH
7,4- 8,4 ppm, m, arom. H Z
3. Példa bisz-(3-karboxi-pirid-2-il)-diszulfid
2-merkapto-piridin-3-karbonsavból állítjuk elő az
1. példában leírtak szerint.
Hozam: 56%
Op.: 206 ’C
NMR (dő-DMSO) δ= 8,5 ppm, q, 2H, 8,22 ppm, w, 2H, 7,53 ppm, q, 2H.
4. Példa bisz(5-aminokarbonilmetil-4-metil-l,3-tiazol-2-il)-diszulfid
Az 1. példában leírtak szerint állítjuk elő a cím szerinti vegyületet 5-(amino-karbonil-metil)-2-merkapto-4-metil-1,3-tiazolból.
Hozam: 92,1%
Op.: 200-203 ’C
NMR (dő-DMSO) δ - 7,33, széles d, 4H, -NH2
3,62 sz, 4H, -CH2-2,26 sz, 6H, -CH3
5. Példa bisz[4-(2-klór-allil)-6-hidroxi-5-oxo-4,5-di-hidro-1,2,4-triazin-3-il] -diszulfid
2,2 g 4-(2-klór-allil)-6-hidroxi-3-merkapto-5-oxo4,5-dihidro-l,2,4-triazin 25 ml metanollal készített oldatához szobahőmérsékleten 0,86 ml 35%-os hidrogén-peroxid-oldatot csepegtetünk. Az oldatot 1 órán át keverjük, mire a termék kristályosodik. A kristályokat leszívatjuk, metanollal mossuk, majd levegőn szárítjuk.
Hozam: 1,2 g,
Op.: 204-205 ’C (bomlás)
NMR (dő-DMSO) δ= 12,7 ppm (széles sz, -OH), 5,5 ppm (dd, -CH2) /
4,8 ppm (sz, -CH2N)
6. Példa bisz(6-hidroxi-2-metil-5-oxo-2,5-dihidro-l ,2,4triazin-3-il)-diszulfid
1,59 g 6-hidroxi-3-merkapto-2-metil-5-oxo-2,5-dihidro-l,2,4-triazin 30 ml metanollal készített oldatához szobahőmérsékleten 0,43 ml 35%-os hidrogénperoxid-oldatot csepegtetünk, és az elegyet 30 percen át keverjük. Szenes derítés után az oldatot rotációs bepárlóban betöményítjük, és a maradékot jeges vízzel eldörzsöljük. A csapadékot szűrjük, jeges vízzel mossuk, levegőn szárítjuk, majd metanolban szuszpendáljuk, szűrjük, kevés metanollal mossuk és vákuumban szárítjuk.
Hozam: 0,8 g.
Op.: 220 ’C (bomlás)
NMR (dő-DMSO) δ - 3,87 ppm (sz, -CH3)
7. Példa bisz(6-hidroxi-4-metil-5-oxo-4,5-dihidro-l ,2,4-t -riazin-3-il)-diszulfid
3,1 g 6-hidroxi-3-merkapto-4-metil-5-oxo-4,5-dihidro-l,2,4-triazin 400 ml metanol és 38 ml víz elegyével készített oldatához szobahőmérsékleten 2,5 ml 35%-os hidrogén-peroxid-oldatot csepegtetünk. 30 perces keverés után az elegyet 100 ml-re betöményítjük, a csapadékot leszívatjuk és szárítjuk.
Hozam: 1,5 g.
Op.: 237 ’C
NMR (CF3CO2D): δ = 3,67 ppm, sz, 2H, -OH 3,8 ppm, sz, 6H, -CH3
8. Példa bisz(5-karboximetil-4-metil-tiazol-2-il)-diszulfid
23,62 g 5-karboximetil-4-metil-2-merkapto-tiazol 250 ml metanollal készített oldatát szűrjük, majd vizes hűtés mellett 12,5 ml 35%-os hidrogén-peroxid-oldatot csepegtetünk hozzá. Az oldatot vízfürdőn 30 percen át, szobahőmérsékleten 2 órán át keverjük, a terméket szűrjük, metanollal mossuk. 22,8 g cím szerinti terméket nyerünk.
Op.: 162 ’C
NMR (CF2CO2D): δ - 2,6 ppm (sz, 6H, -CH3)
4,2 ppm (sz, 4H, -CH2)9. Példa bisz(5-karboximetil-l ,3-tiazol-2-il)-diszulfid
0,88 g 2-merkapto-l,3-tiazol-5-il-ecetsav körülbelül 10 ml metanollal készített oldatához szobahőmérsékleten 0,5 ml 33%-os hidrogén-peroxid-oldatot adunk. 30 perc múlva a kristályos szuszpenziót hűtjük, szűrjük, és a kiszűrt anyagot szárítjuk.
HU 201742 Β
Hozam: 0,6 g
Op.: 150 °C (bomlás)
Vékonyrétegkromatográfiás összehasonlítás (Merck Kieselgél lemezen) teljes konverziót mutat (Rf-0,3; etilacetát, etanol, víz és hangyasav 65:25:10:1 arányú elegye).
10. Példa bisz(4-karboximetil-metil-l,3-tiazol-2-il)-diszulfid
1,75 g 4-karboximetil-2-merkapto-tiazolt a 8. példa szerint reagáltatunk.0,95 g cím szerinti terméket kapunk.
Op.: 163-165 ’C
NMR (dó-DMSO): δ = 3,7 ppm, sz, 4H, -CH27,6 ppm, sz, 2H, -CH, 9,4 ppm, sz, 2H, -CO2H
11. Példa bisz(2-karboximetiltio-l,3,4-tiadíazol-5-il)-dÍszulfid
1,4 g (2-merkapto-l,3,4-tiadiazol-5-il)-merkaptoecetsav 10 ml metanollal készített oldatához jeges hűtés mellett 0,65 ml 35%-os hidrogén-peroxid-oldatot csepegtetünk. Az elegyet szobahőmérsékleten 1 órán át keverjük, majd szűrjük. A kristályokat kevés metanollal mossuk és vákuumban szárítjuk.
Hozam: 1,3 g
Op.: 179 ’C (bomlás)
NMR (dő-DMSO) 5-13 ppm, széles, -COO4,2 ppm, sz, -CH2
72. Példa bisz(5-karboxi-l ,3-tiazol-2-il)-diszulfid g 2-merkapto-tiazol-5-karbonsavat 100 ml metanolban enyhe melegítés közben feloldunk. Az oldathoz jeges hűtés mellett lassan 10,7 ml 35%-os hidrogén-peroxid-oldatot adunk, majd az elegyet szobahőmérsékleten 45 percen át keverjük. A csapadékot leszívatjuk, metanollal mossuk és vákuumban szárítjuk.
Hozam: 21,5 g
Op.: 280 ’C (bomlás)
NMR (dó-DMSO): δ - 8,48 ppm, sz, tiazol-H.
13. Példa bisz(5-karboxi-4-metil-tiazol-2-il)-diszulfid
1,75 g (10 mmól) 4-metil-2-merkapto-tiazol-5-karbonsav 50 ml metanollal készített szuszpenziójához jeges hűtés mellett 0,86 ml 35%-os hidrogén-peroxid-oldatot adunk. Az oldat 0 ’C hőmérsékleten 30 percen át, majd szobahőmérsékleten 1 órán át keverjük. A kivált kristályokat leszívatjuk, kevés metanollal mossuk, vákuumban szárítjuk.
Hozam: 1,52 g
Op.: 240-241 ’C (bomlás)
NMR (dé-DMS): δ - 2,6 ppm, sz, -CH3
14. Példa bisz(4-karboximetil-5-metil-tiazol-2-il)-diszulfid
7. lépés
4-bróm-propionil-ecetsav-metilészter g propionil-ecetsav-metilészter 60 g diklór-metánnal készített oldatához 8,7 ml bróm 30 ml diklór-metánnal készített oldatát csepegtetjük. Az elegyet szobahőmérsékleten 75 percen át keverjük, további 0,66 ml bróm 5 ml diklór-metánnal készített oldatát adjuk hozzá, és megint 75 percen át keverjük. Az oldatot háromszor 50-50 ml vízzel, utána 20 ml telített nátrium-hidrogén- karbonát-oldattal, majd újból kétszer 50-50 ml vízzel mossuk, nátrium-szulfáttal szárítjuk és bepároljuk. 38,6 g olajszerű terméket kapunk.
2. lépés (2-merkapto-5-metil-tiazol-4-il)-ecetsav-metil- észter
Az 1. lépés szerint kapott termék 30,1 g-ját 80 ml etanolban oldjuk, és az oldatot 24 g frissen készített ammónium-ditiokarbaminát 200 ml etanol és 200 ml víz elegyével készített oldatához adjuk szobahőmérsékleten. Az elegyet 2,5 órán át keverjük, utána 7,5 ml trifluor-ecetsavat adagolunk hozzá. Egyórás keverés után a reakcióelegyet szárazra pároljuk, és a maradékhoz kloroform és víz 1:1 arányú keverékéből 200 ml-t adunk. A szerves fázist kétszer vízzel mossuk, nátrium-szulfáttal szárítjuk, majd bepároljuk. A szilárd maradékot éterrel feliszapoljuk, majd szűrjük.
Hozam: 8,9 g
Op.: 149 ’C (bomlás)
NMR (dó-DMSO): δ - 11 ppm, széles, -SH 3,7 ppm, sz, -OCH3 3,5 ppm, sz, -CH2- 2,1 ppm, sz, -CH3.
3. lépés (2-merkapto-5-metil-tiazol-4-il)-ecetsav
A 2. lépés szerint kapott tennék 1,98 g-ját enyhe melegítés közben 20 ml metanolban feloldjuk, és az oldatot szobahőmérsékleten 40 percen át keverjük, majd 50 ml vízzel hígítjuk és tömény sósav-oldattal pH 1-re savanyítjuk. Az oldatot jeges hűtés közben még 1 órán át keverjük, utána a teméket leszívatjuk és jeges kloridmentesre mossuk, végül vákuumban foszforpentoxid felett szárítjuk.
Hozam: 1,67 g
NMR (dó- DMSO) δ - 13,9 ppm, széles, -COOH
3,5 ppm, sz, -CH2- 2,08 ppm, sz, -CH3
4. lépés bisz(4-karboximetil-5-metil-tiazol-2-il)-diszulfid
A 3. lépés szerint kapott anyag 430 mg-ját 20 ml metanolban szuszpendáljuk, melegítés közben feloldjuk és az oldathoz szobahőmérsékleten 0,25 ml 35%-os hidrogén-peroxidot csepegtetünk. Az elegyet 1 órán át keverjük, mintegy 5 ml-re bepároljuk, a terméket leszűrjük. Kevés jéghideg metanollal mossuk.
Hozam: 280 mg
NMR (dé-DMSO) δ - 3,65 ppm, sz, -CH22,37 ppm, sz, -CH3
75. Példa bisz(5-karboximetil-l,3-tiazol-2-il)-diszulfid
0,8 g 2-merkapto-5-karboximetil-l,3-tiazol 10 ml metanollal készített oldatához keverés közben 0,5 ml 33%-os hidrogén- peroxid-oldatot csepegtetünk. Az elegyet éjszakán át keverjük, majd a kristályokat leszívatjuk.
Hozam: 0,6 g
Op.: 150 ’C (bomlás)
A tennék vékonyrétegkromatográfiailag egységes (Rf-0,3, Kieselgél; etil-acetát, etanol, víz és hangyasav 60:25:15:1 arányú elegye).
HU 201742 Β
IR (KBr-pasztilla) δ - 1710 cm1 (-COOCH). 'H-NMR (dő-DMSO): (ppm)=3,8 (sz, -CH2-tiazol,
2H) 7,6 (sz, tiazol-4H, 1H)
16. Példa bisz[5-(metoxi-karbonil-metil)-l ,3-tiazol-2-il]-diszulfid
0,5 g 2-merkapto-5-(metoxi-karbonil-metil)-l,3-tiazol 5 ml metanollal készített oldatához keverés közben 0,3 ml 33%-os hidrogén-peroxid-oldatot csepegtetünk. Az elegyet egy éjszakán át keverjük, a kristályosán kivált terméket szűrjük.
Hozam: 0,3 g.
Op.: 72 ’C
A tennék vékonyrétegkromatográfiailag egységes (Kieselgél, etil-acetát, Rf-0,8)
IR (KBr-pasztilla): δ - 135 cm'1 (-COOCH3)
Ή-NMR (dő-DMSO): (ppm): 3,6 (sz, -CH2-tiazol, 2H) 3,7 (sz, -COOCH3, 3H) 7,0 (sz, tiazol-4H, 1H).
17. Példa bisz(4-karboxi-1,3-tiazol-5-il)-diszulfid 5 g bisz(4-metoxikarbonil-l,3-tiazol-5-il)-diszulfid
100 ml metanollal készített szuszpenziójához 1,5 g nátrium-hidroxid 20 ml vízzel készített oldatát adjuk, és az elegyet visszafolyató hűtő alkalmazásával 1 órán át melegítjük. Az oldat lehűlése után a metanol rotációs bepárlóban eltávolítjuk, és a vizes fázist kevés etil-acetáttal egyszer extraháljuk. A pH-értéket 2n sósav-oldattal savasra állítjuk. A terméket szűrjük, szűrítjük, majd etil-acetátból átkritályosítjuk. 2 g cím szerinti terméket kapunk.
Op.: 154 ’C
IR (KBr-pasztilla): 1680 cm'1 (-COOH) 'H-NMR (dő-DMSO): d(ppm): 8,6 (sz, tiazol-2H). A 18-22. példák szerinti vegyületeket az 1. példában elmondottak szerint állítjuk elő.
18. Példa bisz(5-acetilamino-l ,3-tiazol-2-il)-diszulfid 'H-NMR (dő-DMSO): δ - 2,16 ppm (sz, 6H,
-CH3) 7,56 ppm (sz, 2H, tiazol-H), 11,6 ppm (széles sz, 2H, -NH-).
19. Példa bisz(5-acetilamino-l ,3,4-tiadiazol-2-il)-diszulfid Ή-NMR (dő-DMSO): δ = 2,20 ppm (sz, 6H,
-CH3) 12,84 ppm (széles sz, 2H, -NH-).
20. Példa bisz[5-(4-karboxi-butiril-amina)-1,3-tiazol-2-il]•diszulfid 'H-NMR (dő-DMSO): δ - 1,6-2,6 ppm (m, 12H, hat -CH2-csoport) 7,50 ppm (sz, 2H, tiazol-H), 12,63 ppm (széles sz, 2H, -NH-), 13,05 ppm (széles sz, 2H, -COOH).
27. Példa bisz[5-(3-karboxi-propionil-amino)-l ,3-tiazol-2-il] -diszulfid 'H-NMR (dő-DMSO): δ - 2,4-2,7 ppm (m, 8H,
CH2-) 7,50 ppm (sz, 2H, tiazol-H), 12,66 ppm (széles sz, 2H, -NH-), 13,15 ppm (széles sz, 2H, -COOH)
22. Példa bisz[5-(2-karboxi-etil)-4-metil-l ,3-tiazol-2-il]diszulfid 'H-NMR (dő-DMSO): δ - 2,27 ppm (sz, 6H, -CH3) 2,55 ppm (d, 4H, tiazol-CH2-) 2,96 ppm (t, 4H, -CH2-CO2-)
23. Példa bisz[(5-karboximetil-6-hidroxi-4-metil)-pirimidin2-il)-diszulfid g 5-karboximetil-6-hidroxi-2-merkapto-4-metil15 pirimidin 200 ml 1 mólos nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal készített oldatához jeges hűtés mellett 10 ml 35%-os hidrogén-peroxidot csepegtetünk. Az elegyet szobahőmérsékleten 4 órán át keverjük, majd jeges hűtés mellett 1 n sósav-oldattal pH 2-re sava20 nyitjuk. A csapadékot leszítvatjuk és szárítjuk. 1,5 g cím szerinti terméket kapunk.
Op.: 331 ’C (bomlás)
IR: 1630, 1700 cmNMR: δ = 2,5 ppm (sz, 6H, -CH3) 3,26 ppm 25 (sz, 4H, -CH2).
Claims (1)
- SZABADALMI IGÉNYPONTOK1. EljárásHet-S-S-Het30 általános képletű diszulfidok előállítására - a képletben a 2 Hét jelentése azonos, és Hét jelentése 1,2,4-triazolil-, piridinil-, benzimidazolil-, tiazinil-, pirimidinil-, 1,3,4-tiadiazolil- vagy dihidro-1,2,4- triazolilcsoport, amelyek az alábbi35 akban felsoroltak közül azonosan egy, két vagy három szubsztituenst hordoznak, azzal a feltétellel, hogyha a gyűrűn lévő szubsztituensből több van, azok mindig eltérőek, és piridil-6-csoport esetén a 2-, 3- vagy 4- monokarboxi-helyettesítés is40 kizárt:1-4 szénatomos alkilcsoport, amely adott esetben karbamoilcsoporttal, karboxilcsoporttal vagy 1-4 szénatomos alkoxikarbonilcsoporttal szubsztituált, 1-5 szénatomos acilaminocsoport, ahol az acilcso45 port egy alifás mono- vagy dikarbonsav acilcsoportját jelenti, hidroxil-, 0x0-, karboxil-, fenil-, 2-4 szénatomos halogénalkenil-, karboxi-(Ci-C4-alkil)-tiocsoport azzal jellemezre, hogy egy50 Het-SH általános képletű vegyületet - a képletben Hét jelentése a fenti - oxidálószerrel kezelünk, majd kívánt esetben egy alkoxikarbonilcsoportot karboxilcsoporttá hidrolizálunk.55 2. Eljárás főleg immunserkentő gyógyszerkészítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy egy, az1. igénypont szerint előállított Het-S-S-Het általános képletű vegyületet - a képletben Hét jelentése az 1. igénypontban megadott - a gyógyszergyár60 tásban szokásos hordozó és egyéb segédanyagokkal összekeverve gyógyszerkészítménnyé alakítunk.Kiadja az Országos Találmányi Hivatal, Budapest A kiadásért felel: Dr. Szvoboda Gabriella osztályvezető AGUILAR & TÁRSA Kft - GYŐR Felelős vezető: Javier Aguilar ügyvezető ig.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19853508666 DE3508666A1 (de) | 1985-03-12 | 1985-03-12 | Heterocyclische disulfide und ihre anwendung als immunmodulatoren |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU201742B true HU201742B (en) | 1990-12-28 |
Family
ID=6264871
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU861011A HU201742B (en) | 1985-03-12 | 1986-03-10 | Process for producing heterocyclic disulfides and pharmaceutical preparations containing same |
Country Status (19)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0194571B1 (hu) |
| JP (1) | JPH0751572B2 (hu) |
| KR (1) | KR940001773B1 (hu) |
| AR (1) | AR245113A1 (hu) |
| AT (1) | ATE58293T1 (hu) |
| AU (1) | AU594943B2 (hu) |
| DE (2) | DE3508666A1 (hu) |
| DK (1) | DK165181C (hu) |
| ES (3) | ES8801506A1 (hu) |
| FI (1) | FI860980A7 (hu) |
| GR (1) | GR860649B (hu) |
| HU (1) | HU201742B (hu) |
| IE (1) | IE58729B1 (hu) |
| IL (1) | IL78091A (hu) |
| NO (1) | NO168357C (hu) |
| NZ (1) | NZ215424A (hu) |
| PH (1) | PH22275A (hu) |
| PT (1) | PT82166B (hu) |
| ZA (1) | ZA861780B (hu) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3915094A1 (de) | 1989-05-09 | 1991-01-10 | Hoechst Ag | Verfahren zur herstellung von 2-mercapto-4-methyl-1,3-thiazol-5-yl-essigsaeure und deren ester |
| TW252112B (hu) * | 1993-08-19 | 1995-07-21 | Pfizer | |
| DE10055219A1 (de) * | 2000-11-08 | 2002-05-29 | Bayer Ag | Verfahren zur Herstellung von Dithiazolyldisulfiden |
| US8163776B2 (en) | 2001-01-10 | 2012-04-24 | Grassetti Family Trust | Method of immunomodulation using thione-forming disulfides |
| DE102005004472A1 (de) * | 2005-01-31 | 2006-08-10 | Rhein Chemie Rheinau Gmbh | Verfahren zur Herstellung von Bis-DMTD |
Family Cites Families (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR5680M (hu) * | 1966-08-19 | 1968-01-08 | ||
| IL36587A (en) * | 1970-05-05 | 1977-10-31 | Grassetti D | Compositions containing pyridine derivatives and their use in a method of modifying cellular surface reactions |
| US4378364A (en) * | 1970-05-05 | 1983-03-29 | Grassetti Davide R | Postoperative treatment of carcinoma patients |
| GB1365943A (en) * | 1970-09-16 | 1974-09-04 | Gaf Corp | Metalworking additive and composition and process for making the same |
| GB1327467A (en) * | 1970-10-12 | 1973-08-22 | Merck & Co Inc | Pharmaceutical compositions for inhibiting indoleamine- n-methyl transferase |
| FR2403798A1 (fr) * | 1977-09-22 | 1979-04-20 | Rorer Inc William H | Compositions synergiques a base de disulfure de bis(2-pyridyl-1-oxyde et leur utilisation pour leur activite anti-inflammatoire |
| US4152439A (en) * | 1978-01-12 | 1979-05-01 | Davide R. Grassetti | Stimulant and antidepressant agents |
| DE2944225A1 (de) * | 1979-11-02 | 1981-05-07 | Akzo Gmbh, 5600 Wuppertal | Verfahren zur herstellung von dithiazoldisulfiden |
| US4451471A (en) * | 1981-03-18 | 1984-05-29 | Ciba-Geigy Corporation | Certain 2,4,5-tri-substituted thiazoles, pharmaceutical compositions containing same and methods of using same |
| DE3118128A1 (de) * | 1981-05-07 | 1982-12-02 | Bayer Ag, 5090 Leverkusen | Verwendung von disulfiden als lipoxygenasehemmer und diese enthaltende arzneimittel |
| DE3263149D1 (en) * | 1981-10-21 | 1985-05-23 | Beecham Group Plc | Topical antimicrobial compositions |
| HU193951B (en) * | 1985-03-11 | 1987-12-28 | Richter Gedeon Vegyeszet | Process for producing new sulfur-containing 5-substituted benzimidazol derivatives and pharmaceutical compositions containing them |
-
1985
- 1985-03-12 DE DE19853508666 patent/DE3508666A1/de not_active Withdrawn
-
1986
- 1986-03-05 EP EP86102901A patent/EP0194571B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1986-03-05 AT AT86102901T patent/ATE58293T1/de not_active IP Right Cessation
- 1986-03-05 DE DE8686102901T patent/DE3675561D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1986-03-07 AR AR86303344A patent/AR245113A1/es active
- 1986-03-10 IL IL78091A patent/IL78091A/xx not_active IP Right Cessation
- 1986-03-10 GR GR860649A patent/GR860649B/el unknown
- 1986-03-10 HU HU861011A patent/HU201742B/hu not_active IP Right Cessation
- 1986-03-10 FI FI860980A patent/FI860980A7/fi not_active Application Discontinuation
- 1986-03-10 PH PH33495A patent/PH22275A/en unknown
- 1986-03-10 NZ NZ215424A patent/NZ215424A/xx unknown
- 1986-03-10 ES ES552840A patent/ES8801506A1/es not_active Expired
- 1986-03-10 DK DK108786A patent/DK165181C/da active
- 1986-03-11 IE IE63086A patent/IE58729B1/en not_active IP Right Cessation
- 1986-03-11 AU AU54605/86A patent/AU594943B2/en not_active Ceased
- 1986-03-11 JP JP61051594A patent/JPH0751572B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1986-03-11 NO NO860908A patent/NO168357C/no unknown
- 1986-03-11 PT PT82166A patent/PT82166B/pt not_active IP Right Cessation
- 1986-03-11 ZA ZA861780A patent/ZA861780B/xx unknown
- 1986-03-12 KR KR1019860001768A patent/KR940001773B1/ko not_active Expired - Fee Related
-
1987
- 1987-07-07 ES ES557614A patent/ES8801624A1/es not_active Expired
- 1987-07-07 ES ES557615A patent/ES8801625A1/es not_active Expired
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5041653A (en) | Substituted benzamide radiosensitizers | |
| US5032617A (en) | Substituted benzamide radiosensitizers | |
| JP4531865B2 (ja) | 分子シャペロン産生を増強するのに有用なヒドロキシルアミン誘導体およびそれの調製 | |
| CA2132578C (en) | Method of tumor treatment | |
| WO1982001873A1 (en) | 1-sulfo-2-oxoazetidine derivatives and process for their preparation | |
| JP4828823B2 (ja) | 治療用分子および方法−１ | |
| KR101691536B1 (ko) | 신규 fak 저해제를 유효성분으로 포함하는 방사선 민감성 증진용 조성물 | |
| US20090306201A1 (en) | Selective inhibitors for transferases | |
| HU197735B (en) | Process for producing ascorbinic acid derivatives and pharmaceutical compositions containing them | |
| PL146070B1 (en) | Method of obtaining 2-/n-substituted guanidin/4-/1,2,4-triazol-5-il/-thiazoles | |
| CA2728769A1 (en) | Nitrogen heterocycle derivatives as proteasome modulators | |
| JP2023509360A (ja) | 発毛を促進する化合物の合成 | |
| HU201742B (en) | Process for producing heterocyclic disulfides and pharmaceutical preparations containing same | |
| EP0194572B1 (de) | Heterocyclische Sulfide, Verfahren zu ihrer Herstellung und pharmazeutische Mittel, die diese Verbindungen enthalten | |
| PL182806B1 (pl) | Nowe krystaliczne sole addycyjne cefemu z kwasami sposób ich wytwarzania oraz zawierające je środki lecznicze | |
| US20110257176A1 (en) | Nitrogen heterocycle derivatives as proteasome modulators | |
| WO1988002366A1 (en) | 1,2,4-benzotriazine oxides as radiosensitizers and selective cytotoxic agents | |
| US3767674A (en) | Cyclohexeno thioxanthones | |
| FI61891B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av ett nytt salt av piperazinyluracil med furosemid vilket aer anvaendbart saosom ett laekemedel | |
| JP2511709B2 (ja) | キサントシリンｘモノメチルエ―テル誘導体及びそれを含有する抗腫瘍剤 | |
| JPS63264580A (ja) | ３−（２−ハロアルキル）−１，４−オキサチインおよび２−（２−ハロアルキル）−１，４−ジチイン | |
| CA1339217C (en) | 1,2,4-benzotriazine oxides as radiosensitizers and selective cytotoxic agents | |
| JP4781624B2 (ja) | Ｒａｎｔｅｓ誘導剤 | |
| KR20040022224A (ko) | 특이 구조를 가진 일 군의 새로운 항암 화합물 | |
| CA1292990C (en) | Heterocyclic disulfides and their use as immunomodulators |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HPC4 | Succession in title of patentee |
Owner name: BEHRINGWERKE AG., DE |
|
| HMM4 | Cancellation of final prot. due to non-payment of fee |