HK40016400A - 脂质组合 - Google Patents

Description

脂质组合

领域

本公开内容总体上涉及海洋脂质的组合。特别地，本公开内容涉及从新西兰青口贝(Perna canaliculus)和磷虾获得的脂质的组合、包含所述组合的组合物和制剂以及所述组合和组合物在治疗中的用途。本公开内容还涉及用于制造磷虾油的工艺以及磷虾油在组合和组合物中的用途。

背景

在本说明书中对任何先前的出版物(或来源于其的信息)或对任何已知的物质的引用不是并且不应当被视为确认或承认或以任何形式暗示该先前的出版物(或来源于其的信息)或已知的物质形成本说明书涉及的所致力于的领域中的公知常识的部分。

炎症是对损伤和感染的必需的生理适应性应答，没有这样的应答，人类和动物不能生存。它的功能是消除损伤的最初原因、除去令人不适的因素(offending factors)并且启动组织结构和功能的修复。炎症的早期急性期典型地以发热、疼痛、发红和肿胀为特征。急性炎症的通常结果是损伤的恢复和修复，然而，不均衡的急性炎症应答和长期慢性炎症应答在诸如脓毒症的状况下可能是有害的。

重要地，在影响所有组织和器官的许多疾病的病理学中现在已经牵涉到慢性炎症，所述疾病包括骨关节炎、类风湿性关节炎、心血管疾病、脑血管疾病、呼吸道疾病、自身免疫病和肌少症(sarcopenia)；事实上，在衰老本身的过程中已经牵涉到慢性炎症。

作为对炎症过程的应答，已经开发了一系列药物，最有效的是能够抑制过度炎症的糖皮质激素类固醇药物。然而，归因于其显著的副作用，类固醇药物治疗在广泛的临床用途中受到限制，并且通常限于仅短期使用。开发了被称为非甾体抗炎药物(NSAID类)的第二类炎症药物，诸如布洛芬等—参见表1。认识到的是，阿司匹林具有抗炎活性，并且其是此第二类抗炎药物的一部分。这些药物比类固醇药物更安全，并且可以用于较慢性的炎症状况，诸如骨关节炎。

表1：通常使用的非甾体抗炎药物(NSAID类)的清单

前列腺素在炎症应答中起着关键作用，随着前列腺素的存在在发炎组织中的显著增加，通过升高温度和扩张血管导致疼痛和发热，这引起释放前列腺素的位置的发红和肿胀。NSAID类是环加氧酶-1(COX-1)和环加氧酶-2(COX-2)两者的竞争性位点抑制剂，并且从而减少前列腺素的合成。通过减少前列腺素的产生，NSAID类有助于缓解发热的不适并且减少炎症和相关的疼痛。NSAID类通常被用于治疗以疼痛和炎症为特征的急性状况和慢性状况，诸如骨关节炎、类风湿性关节炎、头痛和偏头痛以及发热。然而，围绕安全性，NSAID类还存在相当多的问题，并可呈现出胃肠道、肾脏和心血管毒性。例如，阿司匹林可以在使用的几天内引起胃出血，并且在2015年7月，FDA重申了先前关于常见的NSAID止痛药的心脏危害的警告，排除阿司匹林。这些止痛药包括布洛芬(Advil、Motrin)和萘普生(Aleve)以及仅处方的NSAID类。

因此，存在对于另外的可选择的抗炎治疗的需求。

概述

现在已经发现，贻贝脂质和磷虾油的某些组合可以有利地提供针对炎症过程中所牵涉到的一种或更多种促炎介质的产生或释放的相加的或协同的抑制作用。在一些实施方案中，本公开内容的组合因此可以为以炎症为特征的或具有炎症组分的紊乱提供新的治疗处理。在一些实施方案中，本公开内容的组合可以为疼痛，诸如与炎症相关的疼痛，提供新的治疗处理。

因此，在一个方面中，提供了包含贻贝脂质和磷虾油的组合。贻贝脂质和磷虾油的组合可以适于受试者的单独施用或同时施用。在一些实施方案中，该组合是包含贻贝脂质和磷虾油的组合物。

在另一方面中，提供了由贻贝脂质和磷虾油组成或基本上由贻贝脂质和磷虾油组成的组合。贻贝脂质和磷虾油的组合可以适于受试者的单独施用或同时施用。在一些实施方案中，该组合是由贻贝脂质和磷虾油组成或基本上由贻贝脂质和磷虾油组成的组合物。

在另一方面中，提供了包含贻贝脂质和磷虾油的组合，用于在治疗中使用。在一些实施方案中，提供了包含贻贝脂质和磷虾油的组合，用于在治疗受试者的炎症中使用。还提供了包含贻贝脂质和磷虾油的组合，用于在治疗受试者的疼痛中使用。贻贝脂质和磷虾油的组合可以适于受试者的单独施用或同时施用。在一些实施方案中，该组合是包含贻贝脂质和磷虾油的组合物。

在另一方面中，本公开内容提供了治疗有需要的受试者中的炎症的方法，包括向所述受试者施用包含贻贝脂质和磷虾油的组合。本公开内容还提供了治疗有需要的受试者中的疼痛的方法，包括向所述受试者施用包含贻贝脂质和磷虾油的组合。贻贝脂质和磷虾油的组合可以适于受试者的单独施用或同时施用。在一些实施方案中，该组合是包含贻贝脂质和磷虾油的组合物。

在另一方面中，本公开内容提供了贻贝脂质和磷虾油在制造用于治疗炎症的组合药物中的用途。本公开内容还提供了贻贝脂质和磷虾油在制造用于治疗疼痛的组合药物中的用途。该药物可以适于单独施用或同时施用。在一些实施方案中，该组合是包含贻贝脂质和磷虾油的组合物。

在另一方面中，本公开内容提供了用于治疗炎症的组合剂，所述组合包含贻贝脂质和磷虾油。本公开内容还提供了用于治疗疼痛的组合剂，所述组合包含贻贝脂质和磷虾油。贻贝脂质和磷虾油可以适于受试者的单独施用或同时施用。在一些实施方案中，组合剂是包含贻贝脂质和磷虾油的组合物。

在一些实施方案中，贻贝脂质呈干燥的贻贝粉末的形式。在其他实施方案中，贻贝脂质呈从贻贝获得的脂质提取物(“贻贝脂质提取物”)的形式。在还另外的实施方案中，贻贝脂质可以呈干燥的贻贝粉末和贻贝脂质提取物的组合或组合物的形式。

在一些实施方案中，磷虾油具有在约40-99％w/w的范围内的磷脂含量，并且在另外的实施方案中，具有在约50-99％w/w的范围内例如约60-80％w/w的范围内的磷脂含量。

在一些实施方案中，本公开内容的组合在治疗受试者的一种或更多种紊乱中可以是有用的，其中所述紊乱具有炎症组分，并且由此一种或更多种促炎分子的抑制在治疗上是有益的。在一些实施方案中，组合可以适用于治疗一种或更多种慢性紊乱。

在一些实施方案中，例如用于在治疗慢性炎症中使用，组合可以消除、避免或以其他方式减轻与通常可获得的NSAID类相关的一种或更多种副作用的程度、严重性或持续时间。

在另一方面中，提供了用于制备具有约50％或更大例如约60％或更大的磷脂含量的磷虾油的工艺，所述工艺包括以下步骤：

(a)使磷虾生物质进料材料与CO₂和乙醇的混合物接触，以提取磷虾油；以及

(b)使所述磷虾油与CO₂接触，以提取至少一定比例的非极性脂质组分，使得所述油具有至少50％w/w的磷脂含量。

在一些实施方案中，从此工艺获得的磷虾油具有约60％w/w或更大的磷脂含量，例如具有至少约65％w/w或70％w/w或75％w/w或80％w/w或85％w/w或90％w/w的磷脂含量。

本公开内容还涉及用于富集磷虾油的磷脂含量的工艺。

因此，在另一方面中，提供了用于将具有小于50％w/w的磷脂含量的磷虾油的磷脂含量增加到约50％w/w或更大的工艺，所述工艺包括使具有小于50％w/w的磷脂含量的磷虾油与CO₂接触以选择性地除去非极性脂质组分的步骤。

在一些实施方案中，初级磷虾油具有小于约50％w/w、例如小于约40％w/w或小于约30％w/w或20％w/w的磷脂含量。在一些实施方案中，如此获得的富集油具有至少约55％w/w、或至少约60％w/w、或至少约65％w/w、或至少约70％w/w、或至少约75％w/w、或至少约80％w/w、或至少约85％w/w、或至少约90％w/w的磷脂含量。

另一个实施方案提供通过本公开内容的工艺获得的具有约50％w/w或更大(例如≥60％w/w)的磷脂含量的磷虾油。

还另外的实施方案提供用于在本文所描述的组合和组合物中使用的具有约50％w/w或60％w/w或更大的磷脂含量的磷虾油。

附图

图1A图解描绘了用于贻贝脂质提取物和磷虾油的各种浓度的组合、单独的贻贝脂质提取物和磷虾油中的每一种、橄榄油和N-(3-(氨甲基)苄基)乙脒(1400W)的在脂多糖(LPS)和干扰素γ(IFγ)刺激的RAW264.7细胞中的NO抑制作用。

图1B图解描绘了用于贻贝脂质提取物和磷虾油的各种浓度的组合、单独的贻贝脂质提取物和磷虾油中的每一种、橄榄油以及N-(3-(氨甲基)苄基)乙脒(1400W)的在脂多糖(LPS)和干扰素γ(IFγ)刺激的RAW264.7细胞中的NO释放(％)。

图2A图解描绘了用于贻贝脂质提取物和磷虾油的各种浓度的组合、单独的贻贝脂质提取物和磷虾油中的每一种、橄榄油以及地塞米松的在脂多糖(LPS)和干扰素γ(IFγ)刺激的RAW264.7细胞中的TNFα抑制作用。

图2B图解描绘了用于贻贝脂质提取物和磷虾油的各种浓度的组合、单独的贻贝脂质提取物和磷虾油中的每一种以及橄榄油的在脂多糖(LPS)和干扰素γ(IFγ)刺激的RAW264.7细胞中的TNFα释放(％)。

图3A图解描绘了用于贻贝脂质提取物和磷虾油的各种浓度的组合、单独的贻贝脂质提取物和磷虾油中的每一种、橄榄油和地塞米松的在脂多糖(LPS)和干扰素γ(IFγ)刺激的RAW264.7细胞中的IL-6抑制作用。

图3B图解描绘了用于贻贝脂质提取物和磷虾油的各种浓度的组合、单独的贻贝脂质提取物和磷虾油中的每一种、以及橄榄油的在脂多糖(LPS)和干扰素γ(IFγ)刺激的RAW264.7细胞中的IL-6释放(％)。

图4A图解描绘了用于贻贝脂质提取物和磷虾油的各种浓度的组合、单独的贻贝脂质提取物和磷虾油中的每一种、橄榄油以及双氯芬酸的在脂多糖(LPS)和干扰素γ(IFγ)刺激的RAW264.7细胞中的PGE2抑制作用。

图4B图解描绘了用于贻贝脂质提取物和磷虾油的各种浓度的组合、单独的贻贝脂质提取物和磷虾油中的每一种、以及橄榄油的在脂多糖(LPS)和干扰素γ(IFγ)刺激的RAW264.7细胞中的PGE2释放(％)。

图5A图解描绘了用于贻贝脂质提取物和磷虾油的各种浓度的组合(LY90-LY50)的在脂多糖(LPS)和干扰素γ(IFγ)刺激的RAW264.7细胞中的NO释放(％)。

图5B图解描绘了用于贻贝脂质提取物和磷虾油的各种浓度的组合(LY50-LY10)的在脂多糖(LPS)和干扰素γ(IFγ)刺激的RAW264.7细胞中的NO释放(％)。

图6A图解描绘了用于贻贝脂质提取物和磷虾油的各种浓度的组合(LY75-LY60)的在脂多糖(LPS)和干扰素γ(IFγ)刺激的RAW264.7细胞中的NO释放(％)。

图6B图解描绘了用于贻贝脂质提取物和磷虾油的各种浓度的组合(LY60-LY45)的在脂多糖(LPS)和干扰素γ(IFγ)刺激的RAW264.7细胞中的NO释放(％)。

图7图解描绘了通过贻贝脂质提取物和磷虾油的各种浓度的组合(LY90-LY10)的协同的NO抑制的等效应图(isobologram)。

图8A图解描绘了用于贻贝脂质提取物和磷虾油的各种浓度的组合(LY90-LY60)的在脂多糖(LPS)和干扰素γ(IFγ)刺激的RAW264.7细胞中的TNFα释放(％)。

图8B图解描绘了用于贻贝脂质提取物和磷虾油的各种浓度的组合(LY60-LY30)的在脂多糖(LPS)和干扰素γ(IFγ)刺激的RAW264.7细胞中的TNFα释放(％)。

图8C图解描绘了用于贻贝脂质提取物和磷虾油的各种浓度的组合(LY40-LY10)的在脂多糖(LPS)和干扰素γ(IFγ)刺激的RAW264.7细胞中的TNFα释放(％)。

图9A图解描绘了用于贻贝脂质提取物和磷虾油的各种浓度的组合(LY70-LY55)的在脂多糖(LPS)和干扰素γ(IFγ)刺激的RAW264.7细胞中的TNFα释放(％)。

图9B图解描绘了用于贻贝脂质提取物和磷虾油的各种浓度的组合(LY50-LY35)的在脂多糖(LPS)和干扰素γ(IFγ)刺激的RAW264.7细胞中的TNFα释放(％)。

图10图解描绘了通过贻贝脂质提取物和磷虾油的各种浓度的组合(LY90-LY10)的协同的TNFα抑制的等效应图。

图11A图解描绘了用于贻贝脂质提取物和磷虾油的各种浓度的组合(LY90-LY50)的在脂多糖(LPS)和干扰素γ(IFγ)刺激的RAW264.7细胞中的IL-6释放(％)。

图11B图解描绘了用于贻贝脂质提取物和磷虾油的各种浓度的组合(LY50-LY10)的在脂多糖(LPS)和干扰素γ(IFγ)刺激的RAW264.7细胞中的IL-6释放(％)。

图12A图解描绘了用于贻贝脂质提取物和磷虾油的各种浓度的组合(LY70-LY50)的在脂多糖(LPS)和干扰素γ(IFγ)刺激的RAW264.7细胞中的IL-6释放(％)。

图12B图解描绘了用于贻贝脂质提取物和磷虾油的各种浓度的组合(LY50-LY30)的在脂多糖(LPS)和干扰素γ(IFγ)刺激的RAW264.7细胞中的IL-6释放(％)。

图13图解描绘了通过贻贝脂质提取物和磷虾油的各种浓度的组合(LY90-LY10)的协同的IL-6抑制的等效应图。

描述

在整个本说明书和所附权利要求中，除非上下文另有要求，否则词语“包含(comprise)”和变型诸如“包含(comprises)”和“包含(comprising)”将被理解为暗示包括所陈述的整数或步骤或者整数的组，但不排除任何其他整数或步骤或者整数或步骤的组。

在整个本说明书和所附权利要求中，除非上下文另有要求，否则措辞“基本上由...组成(consisting essentially of)”和变型诸如“基本上由...组成(consistsessentially of)”将被理解为指示，所叙述的要素是本发明的必要的即必需的要素。该措辞允许存在不实质性地影响本发明的特征的其他未叙述的要素，但排除会影响所限定的本发明的基本和新颖的特征的另外的未指定的要素。

除非上下文另外明确地指示，否则单数形式“一(a)”、“一(an)”和“该(the)”包括复数方面。

术语“发明”包括如本文描述的所有公开内容、方面、实施方案和实施例。

如本文所使用的，“约”是指可以变化多达所陈述的量、值或参数的10％、5％或2％-1％的量、值或参数，并且至少包括本领域内接受的公差。当关于所陈述的整数值使用时，“约”可以包括所陈述的值的任一侧的一个整数的变化，例如“50％”可以包括49％和51％。当在所叙述的值的范围之前时，它意图应用于该范围的上限和下限两者。

除非上下文另有指示，否则下文描述的特征可以独立地应用于任何方面或实施方案。

如本文所使用的，“贻贝脂质”是指从新西兰绿唇(NZGL)(或绿壳)贻贝(新西兰青口贝)中提取或获得的脂质组分。贻贝脂质可以包含多不饱和长链脂肪酸(PUFA)诸如ALA、ETA、EPA和DHA，甾醇，甾醇酯，甘油三酯，非极性脂质类胡萝卜素和(NZGL)贻贝肉的其他组分中的一种或更多种。贻贝脂质可以呈干燥的贻贝粉末的形式，或者呈从贻贝肉中提取的脂质部分(“贻贝脂质提取物”)的形式。还设想，“贻贝脂质”包括贻贝粉末和贻贝脂质提取物的混合物，例如贻贝脂质可以通过添加贻贝粉末来补充，或反之亦然。在一些实施方案中，贻贝脂质是分离的脂质部分。

贻贝脂质粉末可以通过任何合适的干燥手段(例如冷冻干燥、快速干燥或真空干燥)和粉碎手段从新鲜的(生的)、冷冻的或热处理的NZGL贻贝肉制备。除了脂肪酸(包括ALA、ETA、EPA和DHA)之外，通过干燥贻贝肉获得的贻贝粉末还将含有其他潜在有益的组分，包括矿物质、氨基酸、肽、蛋白质和糖胺聚糖(例如软骨素-4-硫酸盐和软骨素-6-硫酸盐)。用于制备贻贝粉末的工艺是本领域已知的。

贻贝脂质提取物可以通过任何合适的方法例如溶剂提取(例如丙酮或乙醇-参见例如WO2005073354A1，其内容通过引入并入)、酶处理(参见例如WO2006128244，其内容通过引入并入)或超临界流体提取从新鲜的(生的)、冷冻的、热处理的或干燥的(例如冷冻干燥的、快速干燥的或真空转鼓干燥的)NZGL贻贝肉(例如粉末状的、喷雾干燥的或粉碎形式的贻贝肉)中获得。在一些实施方案中，贻贝脂质提取物有利地通过用超临界CO₂从干燥的(例如冷冻干燥的)贻贝肉(任选地被稳定化以防止氧化)中提取而获得。用于获得贻贝脂质提取物的示例性方法被描述在WO 97/09992A1中，其内容通过引用并入。其他方法在本领域中将是已知的。

在优选的实施方案中，工艺在使得有益组分诸如脂肪酸大体上不被破坏并且被极大地保留的条件例如冷加工下进行。

根据WO 97/09992A1中描述的工艺获得的一种示例性贻贝脂质提取物还被称为(Pharmalink International Limited，香港)。含有添加的维生素E(0.15％w/w，作为抗氧化的防腐剂添加)，并且包括游离脂肪酸、甘油三酯、甾醇酯、非极性脂质和类胡萝卜素的组合(Sinclair，A.J.等人，2000年)，并且是长链ω-3多不饱和脂肪酸、二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)以及其他长链脂肪酸诸如5,9,12,15-十八碳四烯酸、5,9,12,16-十九碳四烯酸、7,11,14,17-二十碳四烯酸和5,9,12,15,18-二十一碳五烯酸的来源。(与橄榄油一起配制成封装的口服剂型)以和Omega(用于人类消费)以及(用于狗和猫)的名义销售。

在一些实施方案中，在本公开内容的组合中使用的贻贝脂质提取物与维生素E一起配制(例如以约0.2％w/w、或0.15％w/w、或0.1％w/w、或0.05％w/w、或约0.03％w/w或约0.01％w/w的量添加)。在一些实施方案中，贻贝脂质以的形式被使用，即含有0.15％w/w维生素E的贻贝脂质提取物。在一些实施方案中，任选地含有维生素E的贻贝脂质进一步用载体油诸如橄榄油配制。虽然在一些实施方案中，贻贝脂质是贻贝脂质提取物，并且含有添加的维生素E，但维生素E的添加是任选的，并且因此，在一些实施方案中，贻贝脂质提取物被纯地使用，即不包含任何其他另外成分诸如维生素E。

呈各种形式的贻贝脂质也可以从商业供应商购买。

磷虾油可以从任何合适的磷虾物种制备，包括南极磷虾(Euphausia superba)(南极磷虾(Antarctic krill))、太平洋磷虾(Euphausia pacifica)(太平洋磷虾(Pacifickrill))、北磷虾(Maganycitiphanes norvegica)(北磷虾(Northern krill))、晶磷虾(Euphausia crystallorophias)(冰磷虾(ice krill))、冷磷虾(Euphausia frigida)、长额磷虾(Euphausia longirostris)、三刺磷虾(Euphausia triacantha)和瓦氏磷虾(Euphausia vallentini)。在一些优选的实施方案中，磷虾油从南极磷虾中获得。

海洋脂质含有呈游离形式和甘油三酯形式的脂肪酸，特别是ω-3脂肪酸，诸如EPA和DHA。类似地，磷虾油也富含ω-3脂肪酸，然而，磷虾油含有大量磷脂，其中脂肪酸经由甘油部分附接到磷酸酯头部基团。正是脂肪酸的这种磷脂结合形式比甘油三酯形式更有效地被摄入到细胞膜中，并且从而更易于生物可利用。在磷虾油中发现的典型的磷脂可以包括：磷脂酰胆碱、烷基酰基磷脂酰胆碱、磷脂酰肌醇、磷脂酰丝氨酸、溶血磷脂酰胆碱、溶血烷基酰基磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、烷基酰基磷脂酰乙醇胺、心磷脂+N-酰基磷脂酰乙醇胺、溶血磷脂酰乙醇胺和溶血烷基酰基磷脂酰乙醇胺。磷虾油还含有可观的量的虾青素，一种抗氧化剂，这也是其红色颜色的原因。

在一些实施方案中，磷虾油含有至少约1％w/w、5％w/w、10％w/w或至少约20％w/w磷脂。在另外的实施方案中，油含有至少约25％w/w、或至少约30％w/w、或至少约35％w/w、或至少约40％w/w、或至少约45％w/w、或至少约50％w/w、或至少约55％w/w、或至少约60％w/w、或至少约65％w/w、或至少约70％w/w、或至少约75％w/w、或至少约80％w/w、或至少约85％w/w磷脂，或至少约90％w/w磷脂、或至少约95％w/w磷脂、或至少约97％w/w磷脂、或至少约98％w/w磷脂、或至少约99％w/w磷脂。在一些实施方案中，磷虾油具有在约40-99％w/w的范围内的磷脂含量。在一些另外的实施方案中，磷虾油具有在约60-99％w/w的范围内、例如在约65-90％w/w的范围内的磷脂含量。如本文所提到的，“富集的”磷虾油是指具有至少约60％w/w的磷脂含量的磷虾油。磷脂含量可以通过本领域中任何合适的手段来确定，例如³¹P NMR分析。

用于制备磷虾油(包括富含磷脂的磷虾油)的方法是本领域已知的。典型地，新鲜的、冷冻的和/或热处理的磷虾(例如南极磷虾或太平洋磷虾)生物质可以使用溶剂(例如醇，诸如乙醇；酮，诸如丙酮；或二甲氧基乙烷)和/或超临界流体(例如CO₂)来提取。用于制备磷虾油的一些非限制性示例性工艺被描述在美国专利第9,028,877号、美国专利第9,375,453号、美国专利第6,800,299号、美国专利第8,828,447号、美国专利第9,150,815号、美国专利第8,383,845号、WO2007/123424、WO2011/050474、WO2015/104401和WO2015/121378中，这些专利的内容通过引用并入本文。另外的方法也在本文被描述。磷虾油还可以从商业供应商购买。

在一些有利的实施方案中，磷虾油具有约5％w/w或更小、或约4％w/w、或3％w/w、或2％w/w或1％w/w、或0.5％w/w或更小的水含量。在一些实施方案中，磷虾油具有约5％w/w或更小、或约4％w/w、或3％w/w、或2％w/w、或1％w/w、或0.5％w/w或更小的残余提取溶剂含量。在另外的实施方案中，磷虾油具有约5％w/w或更小、或约4％w/w、或3％w/w、或2％w/w、或1％w/w、或0.5％w/w或更小的水含量，以及约5％w/w或更小、或约4％w/w、或3％w/w、或2％w/w、或1％w/w、或0.5％w/w或更小的残余提取溶剂含量。水和溶剂可以通过任何合适的手段除去，诸如非常短的持续时间的温和的加热(例如30分钟、或1小时、或2小时、或3小时，在约或小于约60℃、或50℃、或40℃的温度，并且优选地使得成分的完整性大体上不被损害)、氮气流或冻干(冷冻干燥)。

该组合针对一种或更多种炎症介质诸如一氧化氮(NO)、细胞因子诸如白细胞介素(例如IL-6)、前列腺素(例如PG-E₂)和TNFα的抑制活性在治疗受试者的一种或更多种紊乱或症状中可以是有用的，由此这样的分子中的一种或更多种的抑制在治疗上是有益的。特别地，本公开内容的组合在治疗过度的急性炎症或慢性炎症和/或与之相关的症状例如疼痛、发热、发红和肿胀中的一种或更多种中可以是有用的。在一些实施方案中，该组合在治疗其中病理学包括炎症组分的紊乱的炎症和/或与这样的紊乱相关的疼痛中可以是有用的。包括炎症方面的紊乱的一些非限制性示例包括动脉粥样硬化、变态反应、哮喘、自身免疫疾病(例如乳糜泻病、银屑病、类风湿性关节炎、银屑病性关节炎)、纤维肌痛、痛风、偏头痛、骨关节炎、溃疡性结肠炎、癌症、包括阿尔茨海默病的认知受损(impaired cognition)、2型糖尿病、迟发性肌肉酸痛(DOMS)、克罗恩病和强直性脊柱炎。在一些实施方案中，本公开内容的组合可以在治疗关节疼痛或改善与骨关节炎或类风湿性关节炎相关的关节活动性中是有用的。在一些实施方案中，本公开内容的组合在治疗其中PGE₂的抑制可以是有益的紊乱例如类风湿性关节炎、偏头痛和疼痛(疼痛可以是伤害性(躯体的或内脏的)疼痛和/或神经性疼痛)中可以是有用的。

应当理解，本文所描述的组合可以适于单独施用或同时施用。在适于同时施用的情况下，该组合可以作为包含贻贝脂质提取物和磷虾油两者的紧密组合物(intimatecomposition)或混合物来提供和/或施用，或者作为每种组合组分的离散剂型来提供和/或施用。在贻贝脂质提取物和磷虾油各自被单独地提供和/或施用的情况下，它们可以同时地施用、一个接一个地施用或者各自在不同的时间施用。

在另外的实施方案中，贻贝脂质和磷虾油可以任选地与一种或更多种药学上可接受的载体和/或添加剂组合一起被配制，或单独地被配制。合适的载体的一些示例是食用油例如橄榄油、蓖麻油、亚麻籽油、葡萄籽油、鱼油(例如金枪鱼油)、菜籽油、植物油、向日葵油、奇亚油(chia oil)、大豆油、芝麻油、海藻油、及其混合物。一种或更多种任选的添加剂，例如抗氧化剂、维生素(例如脂溶性维生素(A、D、E和K)或水溶性维生素(B1、B2、B3、B5、B6、B7、B9、B12、C)、膳食矿物质、氨基酸、气味和味道掩蔽剂、乳化剂、药学上可接受的醇(例如乙醇、甘油、丙二醇和聚乙二醇)或其他粘度改性剂、表面活性剂(例如聚山梨醇酯)、悬浮剂、乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、葡萄糖、润滑剂、粘合剂、淀粉、吸收促进剂和防腐剂等也可以被包括。载体或添加剂可以完成一种或更多种功能。贻贝脂质和/或磷虾油可以任选地进一步用以下补充或与以下组合：贻贝和磷虾油的一种或更多种另外纯化或部分纯化的组分，诸如虾青素及其酯，呈游离酸、酸酯、甘油三酯或磷脂的形式的脂肪酸(例如EPA、DHA)，甾醇，甾醇酯，氨基酸，肽和蛋白质以及糖胺聚糖(例如硫酸软骨素)。其它抗炎食物诸如全研磨形式或其提取物，例如姜黄(姜黄素)、生姜、大蒜、丁子香等也可以被任选地并入。

配制的组合可以根据本领域已知的方法制备。这样的方法包括促使贻贝脂质提取物和/或磷虾油与载体紧密关联的步骤，任选地与一种或更多种添加剂成分一起。将理解的是，任何载体或添加剂将是药学上可接受的。

因此，在一些实施方案中，贻贝脂质和磷虾油单独地或与载体油诸如橄榄油一起地配制。在一些实施方案中，载体油构成组合或组合物的从约10％w/w至约90％w/w，例如约20％w/w至约80％w/w。在另外的实施方案中，载体油构成组合或组合物的约25％w/w、或约30％w/w、或约35％w/w、或约40％w/w、或约45％w/w、或约50％w/w、或约55％w/w、或约60％w/w、或约65％w/w、或约70％w/w、或约75％w/w。在一些实施方案中，载体油与贻贝脂质和磷虾油的组合量的重量比是约3:1、或约2.5:1、或约2:1、或约1.5:1、或约1:1、或约1:1.5、或约1:2、或约1:2.5、或约1:3。

虽然本文设想了任何的施用形式，诸如口服、肠胃外、局部、透皮或皮下施用，但有利地，在一些实施方案中，本公开内容的组合可以以口服剂型被提供和/或施用。在一些实施方案中，组合可以以本体形式(bulk form)存在，例如作为液体、糖浆、糊剂、半固体蜡、分散体、悬浮液、乳液(例如油包水或水包油)、粉碎状粉末或微封装粉末，单个剂量可以从这些形式被测量。测量和/或施用可以通过任何手段进行，诸如匙或勺、注射器、滴管或量杯。测量的剂量可以直接地施用至受试者或者通过食物或饮料混合、倾倒在食物或饮料上或撒在食物或饮料上。

在其他实施方案中，组合有利地以单位口服剂型即固定剂型存在。合适的单位口服剂量的一些示例包括单独地包装的安瓿、管、填充注射器、小袋、咀嚼剂(chews)和胶囊(包括硬凝胶胶囊和软凝胶胶囊)。

合适的单位口服剂型的一个示例是呈硬壳或软壳的形式的胶囊。壳可以包含明胶、普鲁兰多糖、羟丙甲纤维素、PVA共聚物、角叉莱胶或诸如淀粉或纤维素的其它糖类组分、或其混合物中的一种或更多种，并且还可以包含着色剂、乳浊剂、增塑剂(例如山梨醇、木糖、麦芽糖醇和丙三醇)等。用于封装海洋油和脂质诸如贻贝油脂和磷虾油的方法是本领域已知的。参见例如WO2015/121378，其内容通过引用并入本文。在一些实施方案中，在磷虾油被单独地封装的情况下，磷虾油可以在不存在任选的另外的剂例如粘度改性剂的情况下被封装，也就是说，胶囊填充物基本上由磷虾油组成。

在一些有利的实施方案中，本公开内容的贻贝脂质和磷虾油的组合以软凝胶胶囊形式存在，例如包含贻贝脂质和磷虾油两者的软凝胶胶囊，或者单独的软凝胶胶囊，其中贻贝脂质和磷虾油被单独地封装，任选地与合适的载体和/或添加剂一起。合适的软凝胶胶囊可以从明胶(或可选择地，糖源诸如普鲁兰多糖和羟丙甲纤维素)、任选地与一种或更多种增塑剂诸如山梨醇和丙三醇(甘油)以及添加剂诸如着色剂和乳浊剂一起制备。在一个示例中，软凝胶胶囊壳可以包含明胶，以及山梨醇和丙三醇中的一种或两种。

微封装是一种方法，通过该方法，微小的小滴或颗粒被涂层壁包围或被嵌入基质中以形成粉末，其中涂层或基质形成避免或减少化学反应诸如氧化的倾向的功能屏障。此外，它可以提供潜在的味道或气味掩蔽作用。因此，在一些实施方案中，贻贝脂质和/或磷虾油可以单独地或一起地被微封装，以形成粉末。通常使用的微封装方法包括乳化、喷雾干燥、冷冻干燥、同轴电喷雾、挤出、凝聚、超临界流体技术和原位聚合。涂层材料包括天然聚合物和合成聚合物、碳水化合物(例如淀粉、葡萄糖)、蛋白质(例如酪蛋白、明胶)及其混合物。(参见例如，Bakry，A.M.等人，Comprehensive Reviews in Food Science and FoodSafety，15，143，2016，以及其中引用的参考文献，WO2014/170464和WO2014/169315，其内容通过引用被包含在本文中)。贻贝脂质和/或磷虾油可以与如上文所描述的一种或更多种载体或添加剂一起微封装。微封装的贻贝脂质和/或磷虾油粉末可以被进一步封装，例如封装在硬壳胶囊单位剂型中。粉末状微封装的脂质或油可以任选地与一种或更多种载体或添加剂组合。

在一些实施方案中，本公开内容的组合可以与食物或饮料一起服用，例如通过将贻贝脂质提取物和磷虾油的组合撒到、搅拌到、混合到食物或饮料中、或者食物或饮料上，或者通过将贻贝脂质提取物和磷虾油的组合应用或并入到食物或饮料中或者食物或饮料上的其他手段。因此，该组合可以以用于并入饮料或食品中或上的形式被提供。在一些实施方案中，该组合也可以在食品和饮料的制备中被配制，以提供功能食物。

在一些实施方案中，贻贝脂质和磷虾油单独地或与载体油诸如橄榄油和任选地与抗氧化剂(例如维生素E)一起配制。

待被本公开内容的组合治疗的受试者包括哺乳动物受试者，例如人类、灵长类动物、猫科动物、犬科动物、牛科动物、马科动物(equines)、猪科动物(porcines)、兔科动物(leporines)、绵羊类动物(ovines)以及山羊类动物(caprines)，并且包括家畜动物(例如牛、马、绵羊、猪和山羊)、伴侣动物(例如狗、猫、兔、豚鼠)和圈养野生动物。还设想了实验室动物诸如兔、小鼠、大鼠、豚鼠和仓鼠，因为它们可以提供便利的测试系统。

上文描述的剂型中的任一种可以酌情应用于人类或兽医用途。

治疗有效量意图包括当根据期望的给药方案施用时对于至少部分地达到期望的治疗效果而言为联合有效的组合的量，期望的治疗效果包括以下中的一种或更多种：减轻、消除或减少正在被治疗的特定的紊乱或状况的炎症的持续时间、严重程度和/或频率，和/或炎症的一种或更多种症状(例如，热、疼痛、肿胀、发红)；防止或延迟正在被治疗的特定的紊乱或状况的发生；抑制正在被治疗的特定的紊乱或状况的进展；或者(部分地或完全地)停止或逆转正在被治疗的特定的紊乱或状况的发生或进展。

合适的剂量和给药方案可以由主治医师或兽医师确定，并且可以取决于正在被治疗的特定的状况/症状、状况的严重程度以及受试者的一般年龄、健康和重量。贻贝脂质和/或磷虾油的合适的每日剂量可以独立地在从约10mg至约10g的范围内，例如约10mg、20mg、30mg、40mg、50mg、100mg、150mg、200mg、250mg、300mg、350mg、400mg、450mg、500mg、550mg、600mg、650mg、700mg、750mg、800mg、850mg、900mg、950mg、1g、1.1g、1.2g、1.3g、1.4g、1.5g、1.6g、1.7g、1.8g、1.9g、2.0g、2.1g、2.2g、2.3g、2.4g、2.5g、2.6g、2.7g、2.8g、2.9g、3.0g、3.2g、3.5g、3.7g、4.0g、4.5g、5.0g、5.5g、6.0g、6.5g、7.0g、7.5g、8.0g、8.5g、9.0g或约9.5g。在一些另外的实施方案中，该组合的每日剂量可以在从约20mg至约15g的范围内，例如约20mg、30mg、40mg、50mg、100mg、150mg、200mg、250mg、300mg、350mg、400mg、450mg、500mg、550mg、600mg、650mg、700mg、750mg、800mg、850mg、900mg、950mg、1g、1.1g、1.2g、1.3g、1.4g、1.5g、1.6g、1.7g、1.8g、1.9g、2.0g、2.1g、2.2g、2.3g、2.4g、2.5g、2.6g、2.7g、2.8g、2.9g、3.0g、3.2g、3.5g、3.7g、4.0g、4.5g、5.0g、5.5g、6.0g、6.5g、7.0g、7.5g、8.0g、8.5g、9.0g、9.5g、10.0g、10.5g、11.0g、11.5g、12.0g、12.5g、13.0g、13.5g、14.0g或14.5g。

在一些实施方案中，单个单位剂量(例如软凝胶胶囊)可以包含约10mg、20mg、25mg、30mg、40mg、50mg、60mg、70mg、75mg、80mg、90mg、100mg、110mg、120mg、125mg、130mg、140mg、150mg、160mg、165mg、170mg、175mg、180mg、190mg、200mg、210mg、220mg、225mg、230mg、240mg、250mg、260mg、265mg、270mg、275mg、280mg、290mg、300mg、310mg、320mg、325mg、330mg、340mg、350mg、360mg、365mg、370mg、375mg、380mg、390mg、400mg、410mg、420mg、425mg、430mg、440mg、450mg、460mg、465mg、470mg、475mg、480mg、490mg或约500mg的组合，任选地与载体油(例如橄榄油)一起配制。在其一些另外的实施方案中，该组合还包含维生素E。在其一些另外的实施方案中，该组合以在总的贻贝脂质和磷虾油的总量的约10％w/w至约90％w/w的范围内的量包含贻贝脂质(例如作为PCSO-524)，并且以在总的贻贝脂质和磷虾油的约90％w/w至约10％w/w的范围内的量包含磷虾油，即，从约10:90至90:10的贻贝脂质与磷虾油的重量比，例如，贻贝脂质与磷虾油以约15:85、或约20:80、或约25:75、或约30:70、或约35:65、或约40:60、或约45:55、或约50:50、或约55:45、或约60:40、或约65:35、或约70:30、或约75:25、或约80:20、或约85:15的重量比。

剂量可以便利地每日施用一次，或每日剂量可以被划分并且每日施用多次(例如两次、三次或四次)。在一些实施方案中，本公开内容的组合可以每周施用一次、每周施用两次、每周施用三次或每周施用更多次，例如隔天施用。在一些实施方案中，治疗可以是连续的或长期的，例如，经过至少6-12个月或至少2-3年的时期，或持续进行。

本公开内容的组合，例如以任一种每日剂量，可以以在总的贻贝脂质和磷虾油的总量的约1％w/w至约99％w/w的范围内的量包含贻贝脂质，并且以在总的贻贝脂质和磷虾油的约99％w/w至约1％w/w的范围内的量包含磷虾油，即，从约1:99至99:1的贻贝脂质与磷虾油的重量比。在一些实施方案中，该组合以在总的贻贝脂质和磷虾油的总量的约5％w/w至约95％w/w的范围内的量包含贻贝脂质，并且以在总的贻贝脂质和磷虾油的约95％w/w至约5％w/w的范围内的量包含磷虾油，即，从约5:95至95:5的贻贝脂质与磷虾油的重量比。在一些实施方案中，该组合以在总的贻贝脂质和磷虾油的总量的约10％w/w至约90％w/w的范围内的量包含贻贝脂质，并且以在总的贻贝脂质和磷虾油的约90％w/w至约10％w/w的范围内的量包含磷虾油，即，从约10:90至90:10的贻贝脂质与磷虾油的重量比。在还另外的实施方案中，该组合包含以约15:85、或约20:80、或约25:75、或约30:70、或约35:65、或约40:60、或约45:55、或约50:50、或约55:45、或约60:40、或约65:35、或约70:30、或约75:25、或约80:20、或约85:15的重量比的贻贝脂质与磷虾油。

虽然本公开内容的组合可以作为用于任何一种或更多种紊乱的唯一抗炎治疗被施用，但它们也可以与一种或更多种NSAID类的施用方案联合施用，NSAID类诸如塞来昔布、双氯芬酸、二氟尼柳、依托度酸、非诺洛芬、氟比洛芬、布洛芬、吲哚美辛、酮洛芬、telorolac、甲芬那酸(mefenamic)、美洛昔康、萘丁美酮、萘普生、奥沙普秦、吡罗昔康、舒林酸和托美汀。在一些实施方案中，本公开内容的组合可以消除或减少与NSAID类相关的潜在副作用，例如，通过消除或大体上消除对于另外的NSAID类治疗的需求，或者通过减少实现有益的治疗效果所需的NSAID类的剂量和/或给药频率。

如上文所讨论的，在一个或更多个实施方案中，在本文公开的组合中使用的磷虾油可以有利地具有至少约50％w/w或更高、优选地至少约60％w/w或更高的磷脂含量。用于从磷虾粉(krill meal)中提取高磷脂(例如大于约50％w/w或60％w/w)的磷虾油的许多现有技术工艺使用CO₂和CO₂/乙醇的组合。然而，公认的是，磷虾油的磷脂含量越高，磷虾油就越有粘性，其中具有约60％或更大的含量的磷虾油典型地在环境温度作为粘性糊剂存在。这存在制造挑战，特别是在工业规模或商业规模的油生产中，因为需要较高的温度以从粘性材料中蒸发提取工艺中使用的溶剂，其中对油的热相关的损害更有可能发生。此外，然后需要增加的压力以将油从提取罐转移到包装罐。

一种示例性的现有技术工艺在WO2007123424中被描述。该文献描述了两步工艺，借此进料材料首先用纯CO₂提取，以仅提取出中性脂质(即非极性甘油三酯)，留下借助于除去非极性甘油三酯富集磷脂的材料。此富集磷脂的材料然后用CO₂+≥10％乙醇共溶剂来提取，以从磷虾进料生物质中一起提取极性磷脂和剩余的非极性甘油三酯。此方法在商业规模上低效率地使用工厂生产能力(plant capacity)，因为在该工艺的两个阶段期间，高压提取器中的大部分体积被填充有进料生物质中的不可提取的蛋白质、碳水化合物和灰分组分。这在根本上也是效率较低的分批操作(与更有效的连续操作相比)，这可能不利地影响工艺成本。有效地，直接在工业规模的本体非均质固体原材料上，在第一步中实现用于将最终的极性磷脂含量递送到成品油中的富集。精确的最终的油富集要求准确事先了解固体进料的极性脂质含量和非极性脂质含量，以及各自将在随后如何很好地提取。在实践中，商业规模的不确定性可能转化为昂贵的过度富集，这然后需要最终共混回到所要求的规格(specification)。这再次不利地影响工艺的经济性。

US 9,735,453、US 9,078,905、US 9,028,877、US 9,320,765和US9,072,752描述了用CO₂或CO₂加上约5％乙醇提取磷虾以提取中性脂质(非极性甘油三酯)，随后用CO₂/～20％乙醇从本体非均质固体材料中提取具有高的量的磷脂、虾青素酯和/或ω-3脂肪酸的磷虾油。这些工艺共有上文描述的缺点。

本公开内容现在描述一种工艺，在一些实施方案中，该工艺可以减少、最小化或消除上文讨论的当根据现有技术方法制备包含高的或富集的磷脂的磷虾油时的缺点中的一种或更多种，特别是在工业规模或商业规模时(例如，当制造至少约50kg、100kg、200kg、300kg或500kg以及更大的量级的油的批次时)。因此，本公开内容还提供用于制备具有至少约50％w/w或更高、优选地到至少约60％w/w或更高的水平的磷脂含量的磷虾油的工艺；以及用于将较低磷脂含量(小于约50％w/w)的油富集到至少约50％w/w或更高、优选地到至少约60％w/w或更高的水平的工艺。

在一些实施方案中，本公开内容提供了用于制备具有至少约50％w/w的磷脂含量的磷虾油的2-步工艺，其中第一步包括从磷虾生物质中提取具有小于约50％w/w的磷脂含量的第一磷虾油，以及然后从第一磷虾油中除去至少一定比例的非极性脂质组分(例如甘油三酯)，以获得与第一磷虾油相比富含磷脂(即具有较高的磷脂含量)的第二磷虾油。

与上文讨论的现有技术工艺相反，该工艺的一些实施方案从磷虾生物质进料材料中非选择性地提取油开始。从固体进料粉中提取极性脂质(例如磷脂)和非极性脂质(例如甘油三酯)两者可以使用CO₂和乙醇的混合物(例如共沸乙醇-包含约95％乙醇的水-乙醇混合物)来实现。

在一些优选的实施方案中，可以使用在CO₂中至少约15％w/w或约20％w/w乙醇的质量比率，例如在约17-22％w/w的范围内。在另外的实施方案中，可以使用在CO₂中至少约25％w/w乙醇的质量比率，诸如在CO₂中至少约26％w/w乙醇、或至少约27％w/w乙醇、或至少约28％w/w乙醇、或至少约29％w/w乙醇、或至少约30％w/w乙醇被使用。

在一些实施方案中，包括在本段落中讨论的任何一个其他实施方案，提取温度处于或低于约60℃，诸如处于或低于约55℃、或者处于或低于约50℃、或者处于或低于约45℃、或者处于或低于40℃、或者处于或低于35℃、或者处于或低于30℃，以有利地降低或最小化产品降解的风险。提取压力可以被设定为确保用于选定的温度和CO₂与乙醇的比率的超临界条件、亚临界条件和/或近临界的条件。在一些实施方案中，压力在约200-350巴的范围内，例如约250-300巴的范围内，尽管较高的压力例如400巴和更大在技术上是有效的，并且也可以被使用。在一些实施方案中，压力值或压力范围产生充分的溶剂密度，以确保非极性脂质的提取不成为该工艺的速率限制。在一些实施方案中，提取压力条件可以在整个提取工艺中被调节，以在超临界条件、亚临界条件或近临界的条件之间移动。在一些实施方案中，使用亚临界条件和/或近临界的条件，用于其的条件将依据CO₂与乙醇的二元混合比(mix ratio)(或者在还包含水的共沸乙醇的情况下的三元混合比)而变化。提取时间可以由本领域技术人员确定，并且可以尤其取决于提取条件和期望的经济优化。在一些实施方案中，提取时间通常在约1-15小时的范围内，例如约2-10小时，例如约2-5小时、或约3-6小时、或约4-5小时。这进而可以尤其取决于生物质进料材料的量和粒度。较大的颗粒将允许使用较高的溶剂流量，同时仍然保持静态的生物质和均匀溶剂接触。然而，较大的颗粒还呈现对溶剂到达颗粒的中心的增加的扩散要求，其中更多的溶剂被需要。因此，在一些实施方案中，进料材料的粒度是约1-5mm，例如约2-3mm。

在一些另外的实施方案中，提取压力是约300巴，并且提取温度是约60℃。

油的分离可以在较低的温度(例如约25-35℃)和压力(例如约25-60巴)进行。

所得到的提取的油包含极性脂质(例如磷脂)和非极性脂质(例如甘油三酯)两者，并且可以具有小于约50％w/w、或小于约45％w/w、或小于约40％w/w、或小于约35％w/w、或小于约30％w/w、或小于约25％w/w、或小于约20％w/w、或小于约10％w/w的磷脂含量。

在一些有利的实施方案中，存在于油中的水和乙醇然后可以使用任何合适的方法来除去，例如在真空下蒸发(任选地用温和加热，例如约65℃或更小)、氮气流或冻干。在一些实施方案中，任选地用温和加热，使油经受在真空下的蒸发。进一步地，这之后是在较高的温度(例如约70℃、约75℃或约80℃)的短的停留时间(例如1-3秒)，以从低粘度的极性脂质和非极性脂质混合物中除去水和乙醇共溶剂，高比例的非极性脂质提供低粘度。在一些优选的实施方案中，在真空下温和加热的整个过程中，温度有利地不超过约60℃，以便避免或最小化所提取的油的组分的降解。在另外的实施方案中，在真空下温和加热的整个过程中，温度有利地不超过约55℃、或约50℃、或约45℃、或约40℃、或约35℃、或约30℃、或约25℃。

在一些实施方案中，在蒸发之后的残余的挥发物含量(水和乙醇)是约或小于约3％w/w，因为这可以最小化残余的乙醇和水不利地影响随后的富集步骤中的脂质的分离的可能性。在另外的实施方案中，残余的挥发物含量是约或小于约2.5％w/w，或者约或小于约2.0％w/w，或者约或小于约1.5％w/w，或者约或小于约1.0％w/w，或者小于约0.5％w/w，或者小于约0.3％w/w，或者小于约0.1％w/w。

在此阶段，在蒸发之后，由于非极性脂质组分的存在，油仍然是流体且可以被容易地分析例如磷脂含量和/或ω-3脂肪酸含量。这是重要的，因为需要精确的分析以便计算期望的富集度，并且因此计算在随后的步骤中实现的最终的油的磷脂含量。特别地，在最终的高磷脂含量是期望的情况下，过度富集(即进一步除去非极性脂质)，即使是小幅度的，也可能导致归因于过度的粘性的加工问题。蒸发的油可以被彻底地混合以确保均质性，任选地在转移到中间产品罐之后。任选地，油可以被温和地加热(例如，在小于或约60℃或约55℃，或约50℃或约45℃，或约40℃，或约35℃，或约30℃，或约25℃的温度)，以帮助保持流动的且均质的材料，用于分析。在一些实施方案中，与上文讨论的现有技术工艺中使用的第一步本体固体生物质相比，通过第一步骤CO₂/EtOH提取所获得的未富集的油的较低的粘性性质可以有利地允许更精确的组成分析，因为可以更容易地实现本体均质性。在一些实施方案中，这可以有利地避免、最小化或以其他方式减少磷脂在随后的非极性脂质的选择性提取中的过度富集，过度富集可能以其他方式产生不合意地粘性的或不可移动的固体产品。

工艺的第二步骤涉及从第一步骤中获得的油中优选地或选择性地提取非极性脂质(甘油三酯)。如果通过第一提取步骤获得的未富集的油已经被转移到中间罐，则未富集的油被返回到提取设施。使油进一步经受CO₂提取，在一些优选的实施方案中在超临界条件例如在约300巴或大于约300巴和在约60℃处，以便选择性地提取非极性脂质(甘油三酯)。在一些实施方案中，提取可以始于较低的压力，并且然后递增地增加到期望的水平(例如，约300巴)。非极性脂质(甘油三酯)可以被逐步地提取，从而富集剩余的残液，直到实现所需的组成目标，例如至少约50％w/w、或至少约55％w/w磷脂、或至少约60％w/w磷脂、或至少约65％w/w磷脂、或至少约70％w/w磷脂、或至少约75％w/w磷脂、或至少约80％w/w磷脂、或至少约85％w/w磷脂、或至少约90％w/w磷脂、或至少约95％w/w磷脂、或至少约97％w/w磷脂、或至少约98％w/w磷脂、或至少约99％w/w磷脂的磷脂含量。

在一些实施方案中，在所需量的非极性脂质已经被提取以实现期望水平的磷脂富集后，使提取容器部分地减压允许剩余压力有助于按需要排出现在富集的(和更有粘性的)残液。通过从仍然部分地加压的提取器中排放，可以在较大的程度上耐受富集的高粘度油的排放。以此方式，极其有粘性的材料可以被转移用于向前共混和配制。

在一个或更多个实施方案中，工艺可以允许半连续加工，其中单独的提取容器在连续旋转时被更换，但一次更换一个，而其他提取容器继续操作。以此方式，可以避免为了更换多个提取器批次而停止。

在其他实施方案中，本文所描述的第二步骤可以用于富集具有小于约50％w/w的磷脂含量的任何磷虾油的磷脂含量，以便获得具有至少约50％w/w的磷脂含量的磷虾油。

在一些实施方案中，起始磷虾油具有约45％w/w或更小、或者约40％w/w或更小、或者约35％w/w或更小、或者约30％w/w或更小、或者约25％w/w或更小、或者约20％w/w或更小、或者约10％w/w或更小的磷脂含量。在一些实施方案中，最终富集的油可以具有至少约55％w/w磷脂、或至少约60％w/w磷脂、或至少约65％w/w磷脂、或至少约70％w/w磷脂、或至少约75％w/w磷脂、或至少约80％w/w磷脂、或至少约85％w/w磷脂、或至少约90％w/w磷脂、或至少约95％w/w磷脂、或至少约97％w/w磷脂、或至少约98％w/w磷脂、或至少约99％w/w磷脂的磷脂含量。

在一些实施方案中，富集的磷虾油具有约5％w/w或更小、或约4％w/w、或3％w/w、或2％w/w、或1％w/w、或0.5％w/w或更小的最终水含量。在一些实施方案中，磷虾油具有约5％w/w或更小、或约4％w/w、或3％w/w、或2％w/w、或1％w/w、或0.5w/w或更小的残余提取溶剂含量。在另外的实施方案中，磷虾油具有约5％w/w或更小、或约4％w/w、或3％w/w、或2％w/w、或1％w/w、或0.5w/w或更小的水含量以及约5％w/w或更小、或约4％w/w、或3％w/w、或2％w/w、或1％w/w、或0.5w/w或更小的残余提取溶剂含量。在还另外的实施方案中，富集的磷虾油具有5％w/w或更小、或约4％w/w、或3％w/w、或2％w/w、或1.5％w/w、或1％w/w、或0.5w/w、或0.3％w/w、或0.1％w/w、或更小的残余溶剂(水和乙醇)含量。

在还其他实施方案中，最终富集的磷虾油具有至少约60％w/w磷脂的磷脂含量，以及约3％w/w或更小的残余溶剂含量。

如本文所描述的涉及磷虾油的其他实施方案还可以酌情适用于通过本公开内容的工艺生产的磷虾油。

以下实施例被提供以用于说明本公开内容的一些实施方案的目的，并且不意图限制上文描述的一般性。

实施例

实施例1-62％w/w磷脂磷虾油的制备

1.从磷虾粉中提取磷虾油

在60℃的温度和300巴的压力用CO₂/乙醇提取磷虾粉(乙醇与磷虾粉的进料比为约3.0-3.5：1w/w)，其中乙醇质量分数在约17-22％w/w的范围内。乙醇/CO₂阶段提取的持续时间在10小时和15小时之间。提取的油/CO₂/EtOH混合物在45巴的压力和25℃分离。

将通过此方法获得的几批油共混，以提供含有极性组分和非极性组分两者且具有约42％的磷脂含量的磷虾油(参见下表1-1)。

表1-1：磷虾油样品中PL的³¹P NMR分析

2.从由步骤1获得的磷虾油中选择性提取甘油三酯。

将5.9kg进料磷虾油(具有上文表1-1中陈述的组成)直接地装载到单个10.7L提取容器(155mm的直径)中。进料材料在60℃的温度和300巴的压力用CO₂提取。

主要包含甘油三酯的提取物被回收并且相比于装载到提取容器中的进料磷虾油是显著更小粘性的。

在提取的材料的总质量达到可以被提取的材料的理论量的97％后，开始提取容器的减压工艺。该设施经过15分钟的时间段以恒定的斜坡速率从300巴减压至100巴，其中CO₂循环继续，尽管以提取流量的50％。在此时间期间，在提取器的出口处的测量的温度从60℃操作温度降低至50℃。然后，提取器在泵不运行的情况下经过另外的15分钟的时间段从100巴进一步减压至75巴。此后，清空分离容器的内容物。

在提取容器仍然处于加工温度和75巴压力的同时，从远低于残液表面水平的提取器容器的底部清空容器中的富集的磷虾油内容物，从而避免随着残液油被排放的高压CO₂的损失。富集的油的回收花费约一小时，并且在此期间，容器的压力从75巴减少到54巴，因为提取容器中剩余的CO₂膨胀以占据先前被残液油所占用的空间。

在富集的油的排出已经结束后，观察到的是，一些富集的磷虾油在提取容器中保留在容器的分布器和底部表面上，这被估计为小于富集的油的总质量的2％。在商业规模上，任何这样的剩余油被回收到用于该提取器的随后的磷虾油批次中。

在虾青素分析和磷脂分析之前，富集的油在烘箱中在55℃加热持续1小时。这允许样品是充分流动的，用于搅拌以实现用于分析的均质样品。

表1-2总结了进料、提取的油和富集的油的质量以及磷脂(PL)含量和虾青素(Asta)含量。非常少的磷脂(<1g/100g提取物)和虾青素(<2mg/100g提取物)被共同提取。总体来说，从富集工艺获得的提取物的质量是富集到62％磷脂所需的理论提取物的98％。

表1-2：磷脂(PL)含量和虾青素(Asta)含量的总结

表1-3和表1-4总结了富集的油的组成含量。

表1-3：磷虾油样品中PL的³¹P NMR分析

磷脂(PL)		总PL的wt％	g/100g样品
				磷脂酰胆碱	PC	72.9	45.2
烷基酰基磷脂酰胆碱	AAPC	10.0	6.2
				磷脂酰肌醇	PI	1.3	0.8
磷脂酰丝氨酸	PS	0.7	0.4
				溶血磷脂酰胆碱	LPC	7.6	4.7
溶血烷基酰基磷脂酰胆碱	LAAPC	0.6	0.4
				磷脂酰乙醇胺	PE	1.1	0.7
烷基酰基磷脂酰乙醇胺	AAPE	1.3	0.8
				心磷脂+N-酰基磷脂酰乙醇胺	CL/NAPE	3.8	2.4
溶血磷脂酰乙醇胺	LPE	0.5	0.3
				溶血烷基酰基磷脂酰乙醇胺	LAAPE	0.2	0.1
总PL含量			62.0

表1-4：脂肪酸的GC分析

实施例2-

贻贝脂质提取物根据WO97/09992制备，并且以(PharmalinkInternational Limited，香港)的形式被使用。磷虾油通过实施例1的工艺制备，具有如上文表1-3和表1-4中陈述的组成含量。

样品制备

新鲜样品被每日制备。样品在取样之前通过倒转来混合。样品在1.5mL离心管中称重，并且用乙醇制成100mg/mL以制备储备液(stock)。通过以正确的比率称出油并且然后用乙醇补足至浓度来制备储备液混合物。制备储备液在乙醇中的系列稀释液(serialdilution)。然后将系列稀释液稀释在细胞培养基中(1/100)，之后添加到具有最终1/10稀释液的细胞(一式三份)。这产生用于所有剂量和对照的0.1％的乙醇浓度。磷虾油含有约62％w/w磷脂。贻贝脂质提取物以的形式被使用。

在呈现结果时使用的缩写在下文表2-1中被陈述：

表2-1：缩写

测定：

在脂多糖(LPS)和干扰素γ(IFNγ)刺激的鼠科动物巨噬细胞RAW264.7细胞中确定抗炎活性，RAW264.7细胞在标准细胞培养基中培养且在存在或不存在不同的测试化合物/提取物和阳性对照的情况下用LPS和IFNγ孵育。包括NO、PGE₂和LTB₄、细胞因子TNFα和IL-6的炎症介质的产生通过所建立的方法使用商业试剂盒进行测量。使用相关的内部对照，每个样品用至少3种浓度进行测试(使用3个平行测定(replicate)，最大浓度是100μg/ml)(n＝9)(表2-2)。每个样品的细胞毒性还通过MTT测定来确定。对于所测试的任何浓度没有检测到细胞毒性。

表2-2中总结了每次测定的测定参数。简言之，为了进行抗炎测定，对所培养的RAW264.7细胞进行计数，并且在96孔板中进行平板接种(0.8×10⁵细胞/孔)，并且孵育持续指定的平板接种时间。然后将培养基吸出并且用新鲜培养基代替，随后添加测试化合物。在添加刺激物(stimulant)之前，将化合物孵育持续1h。然后将板孵育持续4-18h之间，并且针对感兴趣的介质分析上清液，剩余的细胞活力通过MTT确定。

阳性对照基于它们在类似测定中的广泛用途来选择，包括N-(3-(氨甲基)苄基)乙脒(1400W)，诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的缓慢、紧密结合抑制剂(Garvey,E.P.等人,JBiol Chem,1997,21:272(8):4959-63)；和地塞米松，一种常用的细胞因子抑制剂。双氯芬酸是常见的非甾体抗炎剂且已知为产生PGE2的环加氧酶(COX)的抑制剂。

表2-2：测定参数

结果

1.一氧化氮测定

NO是自由基代谢物，其已经被示出为具有许多生理功能，既作为信号传导分子，又作为炎症中的毒性剂(Coleman,2001)。NO来源于L-精氨酸通过三种类型的一氧化氮合酶(NOS)的氧化；三种类型的一氧化氮合酶为最初在鼠科动物巨噬细胞中描述的构成形式，神经元NOS和内皮NOS以及诱导型形式iNOS(Nathan&Xie,1994；Stuehr&Marletta,1985)。诱导型形式在表达后被连续地激活，并且因此通过由炎症分子如LPS和IFNγ刺激的NF-κB在转录水平被调节。NO通过iNOS的生产经历几小时的滞后时间，之后以高得多(nM)的持续水平产生NO(Nathan&Xie,1994)。在炎症中很可能牵涉到NOS的诱导型形式，并且由于所产生的NO的较高水平，更容易在体外进行评估。

NO是不寻常的信号传导分子。因为不存在用于NO的特定的细胞表面受体，所以NO不加区别地进入细胞，其中效果取决于细胞类型和NO浓度，因此产生范围广泛的生理应答。NO引起增大的血管通透性、血管舒张和自由基生成，这引起组织损伤并且消除病原体(Guzik,Korbut,&Adamek-Guzik,2003)。这些生理变化与伴随增大的血流量的炎症有关，允许更多的免疫细胞进入受影响的组织，从而破坏病原体。

NO抑制测定的结果在图1A和图1B以及表2-3中所描绘。

表2-3：NO抑制的IC₅₀

LY

磷虾

90％LY

75％LY

橄榄油

1400W

～107

～286

44.8

40.9

无活性

1.6

2.肿瘤坏死因子-α

TNFα是急性期炎症应答中主要涉及的细胞信号传导蛋白(细胞因子)。巨噬细胞是TNFα的主要来源，尽管TNFα可以通过许多其他细胞类型诸如CD4+淋巴细胞、自然杀伤(NK)细胞、中性粒细胞、肥大细胞、嗜酸性粒细胞和神经元来释放。TNFα通过MAPK和NF-κB的激活来产生。它起到增加其自身的产量和其它炎症细胞因子诸如白细胞介素-1β(IL-1β)的产量的作用。TNFα诱导发热、凋亡性细胞死亡、恶病质、炎症，并且抑制肿瘤发生和病毒复制。许多疾病状态牵涉到TNFα，包括脓毒症、创伤性损伤、缺血、哮喘、烧伤、肠易激综合征、阿尔茨海默病、癌症、重度抑郁症、关节炎和多发性硬化(Cairns,Panacek,Harken,&Banerjee,2000；Dowlati等人,2010；Swardfager等人,2010)。

TNFα抑制测定的结果在图2A和图2B以及表2-4中描绘。

表2-4：TNFα抑制的IC₅₀

LY

磷虾

90％LY

75％LY

橄榄油

Dexa

～238.7

～103.3

89

57

DNF*

3.328e-005

*没有拟合剂量应答曲线的数学模型

3.白细胞介素-6

类似于TNFα，IL-6被认为是促炎细胞因子。IL-6由刺激免疫应答的T细胞和巨噬细胞分泌。IL-6引起骨髓中中性粒细胞的增加的产量。它支持B细胞的生长，并且拮抗T细胞向调节性T细胞的分化。它能够跨越血脑屏障，并且启动下丘脑中PGE₂的合成，从而改变身体的温度设定点(Banks,Kastin,&Gutierrez,1994)。

IL-6抑制测定的结果在图3A和图3B和表2-5中被描绘。

表2-5：IL-6抑制的IC₅₀

	LY	磷虾	90％LY	75％LY	橄榄油	Dexa
								22.4	13.4	11.5	10.4	～106.8	1.19

4.前列腺素E₂

前列腺素E2(PGE₂)是通过酶环加氧酶(COX)的作用从花生四烯酸(AA)产生的脂质介质中的一种，并且与诱发发热、疼痛感觉和炎症相关。阿司匹林和非甾体抗炎药(NSAID类)抑制前列腺素(包括PGE₂)的生物合成，产生解热、镇痛和抗炎作用(Kawahara，K.等人，2015和Kawabata A.，2011)。

结果在图4A和图4B以及表2-6中被描绘。

表2-6：PG-E₂抑制的IC₅₀

LY

磷虾

90％LY

75％Ly

50％LY

双氯芬酸

橄榄油

非活性

非活性

～112

～118

55.3

0.12

DNF*

*没有拟合剂量应答曲线的数学模型结果的总结

在此测定系统中，贻贝脂质提取物和磷虾油在所测试的浓度被证实为单独地抑制NO、TNFα和IL-6，但不抑制PGE2。

在抑制NO、TNFα和IL-6方面，贻贝脂质提取物和磷虾油的组合比单独的贻贝脂质提取物或磷虾油更有效。在PGE₂测定中，单独的贻贝脂质提取物或磷虾油均不展现出抑制活性，但在组合中展现出抑制。

实施例3：协同作用

贻贝脂质提取物根据WO97/09992制备，并且以的形式被使用。磷虾油通过实施例1的工艺制备，具有如在上文表1-3和表1-4中陈述的组成含量。

样品、制剂和组合

在实验取样之前，将和高磷脂的磷虾油的储备样品通过倒转混合。样品在15mL离心管中称重，并且用乙醇制成100mg/mL以制备储备液。混合物通过以正确的比率混合稀释的油来制备。系列稀释液在乙醇中制备。然后将系列稀释液稀释在细胞培养基中(1/100)，之后添加到具有最终1/10稀释液的细胞(一式三份)。这产生用于所有剂量和对照的0.1％的乙醇浓度。这些剂量被每日新鲜地制备。表3-1示出对于每种样品的所使用的缩写。

表3-1：样品名称缩写

测定

在脂多糖(LPS)和干扰素γ(IFNγ)刺激的鼠科动物巨噬细胞RAW264.7细胞中确定抗炎活性，RAW264.7细胞在标准细胞培养基(DMEM、胎牛血清5％)中培养且在存在或不存在不同测试化合物/提取物和对照的情况下孵育。包括NO、细胞因子TNFα和IL-6的炎症介质的产生通过所建立的方法用商业ELISA试剂盒(供应商在表3-2中列出)进行测量。使用相关的内部对照，每个样品用至少6种浓度进行测试(使用3个平行测定，最大浓度是100μg/ml)(n＝9)(在表3-2中示出)。所测试的每个样品的细胞毒性通过MTT测定来确定。对于所测试的任何浓度均没有检测到细胞毒性。

用于每次测定的测定参数总结在表3-2中。简言之，对于NO测定、TNFα测定和IL-6测定，对所培养的RAW264.7细胞进行计数，并且在96孔板中进行平板接种(0.8×10⁵细胞/孔)，并且孵育持续48h。然后将培养基吸出并且用新鲜培养基代替，随后添加测试化合物。在添加刺激物之前，将化合物孵育持续1h。然后将板孵育持续18h，并且针对感兴趣的介质分析上清液，剩余的细胞活力通过MTT确定。

阳性对照是基于它们在类似测定中的广泛用途来选择，包括N-(3-(氨甲基)苄基)乙脒(1400W)，诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的缓慢、紧密结合抑制剂(Garvey等人,1997)；和地塞米松，一种常用的细胞因子抑制剂。

表3-2：抗炎测定和阳性对照

协同作用计算

协同作用被表达为组合指数(Combination Index)。协同作用组合指数(CI)和等效应图IC50权重使用Compsyn软件计算。在Graphpad Prism中产生的剂量应答曲线被转变成表示该曲线的10个点。然后，这10个点被输入到Compsyn程序中，Compsyn程序产生拟合数据点的曲线。此方法是优选的，以紧密地重复协同作用程序中完整的剂量应答曲线。然后将Compsyn拟合曲线用于协同作用计算。在所测试的范围内的协同作用的模式可以用等效应图来观察，该等效应图绘制了在IC50每种组分对活性的相对贡献。存在在被共混的两种药物之间绘制的直线(Biavatti,2009)。该线下方的值指示协同作用，在该线上的值被认为是累加的，并且在该线上方的值是拮抗的。

结果

1.一氧化氮测定

组合被测定以确定组合是否对炎症信号传导分子NO展现出协同抑制。组合首先以10％增量进行测试。观察到的最具活性的组合是LY60。然后测试围绕LY60的另外的5％增量。

所测试的组合LY90-LY10的剂量应答曲线在图5A、图5B、图6A和图6B中被描绘。表3-3和表3-4中呈现用于NO抑制的IC50值和组合指数。小于1的组合指数指示协同作用。用于10％增量的等效应图在图7中被描绘。

表3-3：组合LY90-LY10的NO抑制的IC₅₀值

表3-4：组合LY75至LY45的NO抑制的IC₅₀(CI)和组合指数

2.TNFα测定

组合被测定以确定组合是否对炎症细胞因子TNFα展现出协同抑制。组合首先以10％增量进行测试。观察到的最具活性的组合是LY50。然后测试围绕LY50的另外的5％增量。

所测试的组合LY90-LY10的剂量应答曲线在图8A、图8B、图8C、图9A和图9B中被描绘。表3-5和表3-6中呈现用于TNFα抑制的IC50值和组合指数。小于1的组合指数指示协同作用。用于10％增量的等效应图在图10中被描绘。

表3-5：用于TNFα抑制的IC₅₀值

*-无可能的估计值

表3-6：用于LY70-LY35的IC₅₀和CI(n＝9)

3.IL-6测定

组合被测定以确定组合是否对炎症细胞因子IL-6展现出协同抑制。组合首先以10％增量进行测试。观察到的最具活性的组合是LY60。然后测试围绕LY60的另外的5％增量。

所测试的组合LY90-LY10的剂量应答曲线在图11A、图11B、图12A和图12B中被描绘。表3-7和表3-8中呈现用于IL-6抑制的IC50值和组合指数。小于1的组合指数指示协同作用。用于10％增量的等效应图在图13中被描绘。

表3-7：用于IL-6抑制的IC₅₀(n＝3)

表3-8：用于IL-6抑制的IC₅₀和组合指数

结果的总结

在抑制NO、TNFα和IL-6方面，以组合使用的贻贝脂质提取物和磷虾油在此测定系统中被证实为满足用于协同作用的数学标准。

实施例4：患者研究

向罹患多种疼痛/炎症状况的患者施用呈胶囊形式的以75:25的PCSO-542与磷虾油的比率的贻贝脂质提取物(呈PCSO-542的形式)和磷虾油(61％PL)的组合。所述胶囊的组成在表4-1中呈现。

表4-1：150mg油共混胶囊的组成

*包含0.15％w/w维生素E

(即约0.056mg/胶囊)

在一次剂量、两次剂量或三次剂量内，剂量通常在每天从2-8粒胶囊的范围内。在开始用该组合进行治疗之前，患者通常已经服用包括扑热息痛或布洛芬的一种或更多种NSAID类，以管理疼痛。结果在表4-2中被描绘。

表4-2：患者结果的总结

参考文献

Biavatti，M.W.(2009).Synergy：an old wisdom，a new paradigm forpharmacotherapy.Brazilian Journal of Pharmaceutical Sciences，45(3)，371-378.

Cairns，C.B.，Panacek，E.A.，Harken，A.H.，&Banerjee，A.(2000).Bench tobedside：Tumor necrosis factor-alpha：From inflammation toresuscitation.Academic Emergency Medicine，7(8)，930-941.

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Dowlati，Y.，Herrmann，N.，Swardfager，W.，Liu，H.，Sham，L.，Reim，E.K.，&Lanctot，K.L.(2010).A Meta-Analysis of Cytokines in MajorDepression.Biological Psychiatry，67(5)，446-457.doi：10.1016/j.biopsych.2009.09.033

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Swardfager，W.，Lanctot，K.，Rothenburg，L.，Wong，A.，Cappell，J.，&Herrmann，N.(2010).A Meta-Analysis of Cytokines in Alzheimer′s Disease.BiologicalPsychiatry，68(10)，930-941.

Claims (58)

1.一种组合，所述组合包含贻贝脂质和磷虾油，其中所述组合适于单独施用或按顺序施用。

2.根据权利要求1所述的组合，所述组合呈包含贻贝脂质和磷虾油的组合物的形式。

3.根据权利要求1或2所述的组合，其中所述磷虾油具有至少约40％w/w的磷脂含量。

4.根据权利要求3所述的组合，其中所述磷虾油具有至少约60％w/w的磷脂含量。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的组合，其中所述磷虾油具有约5％w/w或更小的水含量。

6.根据权利要求5所述的组合，其中所述磷虾油具有约3％w/w或更小的水含量。

7.根据权利要求5所述的组合，其中所述磷虾油具有约1％w/w或更小的水含量。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的组合，其中所述磷虾油具有约5％w/w或更小的提取溶剂含量。

9.根据权利要求8所述的组合，其中所述磷虾油具有约3％w/w或更小的提取溶剂含量。

10.根据权利要求8所述的组合，其中所述磷虾油具有约1％w/w或更小的提取溶剂含量。

11.如权利要求1-10中任一项所述的组合，其中所述贻贝脂质呈贻贝粉末的形式。

12.根据权利要求1-10中任一项所述的组合，其中所述贻贝脂质呈贻贝脂质提取物的形式，任选地含有维生素E。

13.根据权利要求1-12中任一项所述的组合，其中贻贝脂质与磷虾油的重量比在1:99至99:1的范围内。

14.根据权利要求13所述的组合，其中贻贝脂质与磷虾油的所述重量比是约5:95，或约10:90，或约15:85，或约20:80，或约25:75，或约30:70，或约35:65，或约40:60，或约45:55，或约50:50，或约55:45，或约60:40，或约65:35，或约70:30，或约75:25，或约80:20，或约85:15，或约90:10，或约95:5。

15.根据权利要求1-14中任一项所述的组合，所述组合呈口服单位剂型。

16.根据权利要求15所述的组合，其中所述口服单位剂型是软凝胶胶囊。

17.根据权利要求15或16所述的组合，其中所述口服单位剂型包含从约10mg至约10g的贻贝脂质。

18.根据权利要求17所述的组合，其中所述口服单位剂型包含约10mg、20mg、30mg、40mg、50mg、100mg、150mg、200mg、250mg、300mg、350mg、400mg、450mg、500mg、550mg、600mg、650mg、700mg、750mg、800mg、850mg、900mg、950mg、1g、1.1g、1.2g、1.3g、1.4g、1.5g、1.6g、1.7g、1.8g、1.9g、2.0g、2.1g、2.2g、2.3g、2.4g、2.5g、2.6g、2.7g、2.8g、2.9g、3.0g、3.2g、3.5g、3.7g、4.0g、4.5g、5.0g、5.5g、6.0g、6.5g、7.0g、7.5g、8.0g、8.5g、9.0g或约9.5g的贻贝脂质。

19.根据权利要求15-18中任一项所述的组合，其中所述口服单位剂型包含从约10mg至约10g的磷虾油。

20.根据权利要求19所述的组合，其中所述口服单位剂型包含约10mg、20mg、30mg、40mg、50mg、100mg、150mg、200mg、250mg、300mg、350mg、400mg、450mg、500mg、550mg、600mg、650mg、700mg、750mg、800mg、850mg、900mg、950mg、1g、1.1g、1.2g、1.3g、1.4g、1.5g、1.6g、1.7g、1.8g、1.9g、2.0g、2.1g、2.2g、2.3g、2.4g、2.5g、2.6g、2.7g、2.8g、2.9g、3.0g、3.2g、3.5g、3.7g、4.0g、4.5g、5.0g、5.5g、6.0g、6.5g、7.0g、7.5g、8.0g、8.5g、9.0g或约9.5g的磷虾油。

21.根据权利要求15-20中任一项所述的组合，其中所述口服单位剂型包含约10-500mg的所述组合。

22.根据权利要求21所述的组合，其中所述口服单位剂型包含约50-300mg的所述组合。

23.根据权利要求1-22中任一项所述的组合，还包含一种或更多种药学上可接受的载体和/或添加剂。

24.根据权利要求1-22中任一项所述的组合，所述组合由贻贝脂质和磷虾油组成或基本上由贻贝脂质和磷虾油组成。

25.一种组合物，所述组合物包含贻贝脂质和磷虾油。

26.根据权利要求25所述的组合物，其中所述磷虾油具有至少约50％w/w的磷脂含量。

27.根据权利要求25或26所述的组合物，其中所述贻贝脂质呈贻贝脂质提取物的形式，任选地含有维生素E。

28.根据权利要求25-27中任一项所述的组合物，其中贻贝脂质与磷虾油的重量比是约5:95，或约10:90，或约15:85，或约20:80，或约25:75，或约30:70，或约35:65，或约40:60，或约45:55，或约50:50，或约55:45，或约60:40，或约65:35，或约70:30，或约75:25，或约80:20，或约85:15，或约90:10，或约95:5。

29.根据权利要求25-28中任一项所述的组合物，还包含载体油。

30.根据权利要求29所述的组合物，其中所述载体油构成总组合物的从约10％w/w至约90％w/w。

31.根据权利要求29所述的组合物，其中载体油与贻贝脂质和磷虾油的组合量的重量比是从约3:1至约1:3。

32.根据权利要求25-31中任一项所述的组合物，所述组合物呈单位剂型。

33.根据权利要求32所述的组合物，所述组合物被封装在软凝胶胶囊中。

34.根据权利要求32或33所述的组合物，所述组合物包含约10-500mg的组合的贻贝脂质和磷虾油。

35.根据权利要求34所述的组合物，所述组合物包含约50-300mg的组合的贻贝脂质和磷虾油。

36.根据权利要求1-24中任一项所述的组合或根据权利要求25-35中任一项所述的组合物，用于在治疗受试者的炎症中使用。

37.一种治疗有需要的受试者的炎症的方法，所述方法包括向所述受试者施用根据权利要求1-24中任一项所述的组合或根据权利要求25-35中任一项所述的组合物。

38.贻贝脂质和磷虾油在制造用于治疗炎症的组合药物中的用途。

39.根据权利要求38所述的用途，其中所述药物适于单独施用或同时施用。

40.根据权利要求39所述的用途，其中所述药物呈贻贝脂质和磷虾油的组合物的形式。

41.一种用于治疗炎症的组合剂，所述组合剂包含贻贝脂质和磷虾油。

42.根据权利要求41所述的剂，适于单独施用或同时施用。

43.根据权利要求1-24中任一项所述的组合或根据权利要求25-35中任一项所述的组合物，用于在治疗受试者的疼痛中使用。

44.一种治疗有需要的受试者的疼痛的方法，所述方法包括向所述受试者施用根据权利要求1-24中任一项所述的组合或根据权利要求25-35中任一项所述的组合物。

45.贻贝脂质和磷虾油在制造用于治疗疼痛的组合药物中的用途。

46.根据权利要求45所述的用途，其中所述药物适于单独施用或同时施用。

47.根据权利要求46所述的用途，其中所述药物呈贻贝脂质和磷虾油的组合物的形式。

48.一种用于治疗炎症的组合剂，所述组合剂包含贻贝脂质和磷虾油。

49.根据权利要求48所述的剂，适于单独施用或同时施用。

50.一种用于制备具有约50％或更大的磷脂含量的磷虾油的工艺，包括以下步骤：

(a)使磷虾生物质进料材料与CO₂和乙醇的混合物接触，以提取磷虾油；以及

(b)使所述磷虾油与CO₂接触，以提取至少一定比例的非极性脂质组分，使得所述油具有至少50％w/w的磷脂含量。

51.根据权利要求50所述的工艺，其中使所述磷虾生物质进料材料与CO₂中约15％w/w至约30％w/w乙醇的混合物接触。

52.根据权利要求50或51所述的工艺，其中步骤(a)在约60°或更小的温度进行。

53.根据权利要求50-52中任一项所述的工艺，其中步骤(a)在约300巴或大于约300巴的压力进行。

54.根据权利要求50-53中任一项所述的工艺，其中步骤(b)在约60°或更小的温度进行。

55.根据权利要求50-54中任一项所述的工艺，其中步骤(a)在约300巴或大于约300巴的压力进行。

56.根据权利要求50-55中任一项所述的工艺，其中从步骤(b)获得的所述油具有在约60％w/w至约90％w/w的范围内的磷脂含量。

57.根据权利要求50-56中任一项所述的工艺，其中从步骤(a)中获得的提取油中除去乙醇。

58.根据权利要求57所述的工艺，其中所述乙醇在约60℃或更小的温度在真空下被除去。