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HK1229345B - Proteins comprising amino-terminal proximal shiga toxin a subunit effector regions and cell-targeting immunoglobulin-type binding regions capable of specifically binding her2/neu/erbb2 - Google Patents

Proteins comprising amino-terminal proximal shiga toxin a subunit effector regions and cell-targeting immunoglobulin-type binding regions capable of specifically binding her2/neu/erbb2 Download PDF

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Publication number
HK1229345B
HK1229345B HK17102811.4A HK17102811A HK1229345B HK 1229345 B HK1229345 B HK 1229345B HK 17102811 A HK17102811 A HK 17102811A HK 1229345 B HK1229345 B HK 1229345B
Authority
HK
Hong Kong
Prior art keywords
protein
cell
seq
shiga toxin
cells
Prior art date
Application number
HK17102811.4A
Other languages
English (en)
French (fr)
Chinese (zh)
Other versions
HK1229345A1 (en
Inventor
Eric POMA
Erin WILLERT
Original Assignee
Molecular Templates, Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Molecular Templates, Inc. filed Critical Molecular Templates, Inc.
Publication of HK1229345A1 publication Critical patent/HK1229345A1/en
Publication of HK1229345B publication Critical patent/HK1229345B/en

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Claims (24)

  1. Cytotoxisches Protein, umfassend:
    a) eine immunglobulinartige Binderegion, umfassend ein oder mehr Polypeptid(e) und fähig zur spezifischen Bindung von mindestens einem extrazellulären Zielbiomolekül, wobei die genannte immunglobulinartige Binderegion von einem Antikörper abgeleitet ist, wobei das genannte extrazelluläre Zielbiomolekül HER2/neu/ErbB2 ist; und
    b) eine Shigatoxin-Effektorregion, umfassend ein Polypeptid, das zur Bewirkung der Cytotoxizität von Shigatoxin, Untereinheit A fähig ist, und Folgendes umfasst:
    eine Aminosäuresequenz, die mindestens zu 90 % mit der in einer von SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2 oder SEQ ID NO: 3 gezeigten Aminosäuresequenz identisch ist; oder
    eine Aminosäuresequenz, ausgewählt aus:
    (i) Aminosäuren 75 bis 251 von SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2 oder SEQ ID NO: 3;
    (ii) Aminosäuren 1 bis 241 von SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2 oder SEQ ID NO: 3;
    (iii) Aminosäuren 1 bis 251 von SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2 oder SEQ ID NO: 3; und
    (iv) Aminosäuren 1 bis 261 von SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2 oder SEQ ID NO: 3;
    wobei das Protein zur Verursachung des Todes einer Zelle fähig ist, die physikalisch mit dem genannten HER2/neu/ErbB2 gekoppelt ist; und
    wobei die Binderegion und die Shigatoxin-Effektorregion in dem Protein derart orientiert sind, dass sich die Binderegion an einer Position befindet, die sich mehr proximal zum Carboxyterminus der Shigatoxin-Effektorregion als zum Aminoterminus der Shigatoxin-Effektorregion befindet.
  2. Cytotoxisches Protein nach Anspruch 1, wobei das Protein eine cytotoxische Wirkung aufweist, die mindestens um das 3-fache größer auf eine erste Zellpopulation ist, deren Mitglieder physikalisch mit dem genannten HER2/neu/ErbB2 gekoppelt sind, im Vergleich zu einer zweiten Zellpopulation, deren Mitglieder nicht physikalisch mit dem genannten HER2/neu/ErbB2 gekoppelt sind.
  3. Cytotoxisches Protein nach Anspruch 2, wobei die genannte erste Zellpopulation mit dem genannten HER2/neu/ErbB2 mittels kovalenter und/oder nicht-kovalenter intermolekularer Interaktionen physikalisch gekoppelt ist, die das genannte HER2/neu/ErbB2, oder einen Anteil davon, an die Außenseite einer Zelle koppeln; oder wobei das genannte HER2/neu/ErbB2 ein von der ersten Zellpopulation exprimiertes integrales Membranprotein oder peripheres Membranprotein ist.
  4. Cytotoxisches Protein nach einem der Ansprüche 1 bis 3, wobei die Shigatoxin-Effektorregion Folgendes umfasst:
    (i) Aminosäuren 75 bis 251 von SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2 oder SEQ ID NO: 3;
    (ii) Aminosäuren 1 bis 241 von SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2 oder SEQ ID NO: 3;
    (iii) Aminosäuren 1 bis 251 von SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2 oder SEQ ID NO: 3; oder
    (iv) Aminosäuren 1 bis 261 von SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2 oder SEQ ID NO: 3.
  5. Cytotoxisches Protein nach einem der Ansprüche 1 bis 3, wobei die Shigatoxin-Effektorregion eine Mutation relativ zu einer nätürlich vorkommenden Untereinheit A von einem Mitglied der Shigatoxin-Familie umfasst, welche die enzymatische Aktivität der Shigatoxin-Effektorregion verändert, die Mutation aus mindestens einer Deletion, Insertion oder Substitution eines Aminosäurerests ausgewählt ist; wobei die natürlich vorkommende Untereinheit A eines Mitglieds der Shigatoxin-Familie die Aminosäuresequenz von einer von den SEQ ID NOs: 1 bis 3 umfasst oder aus der Aminosäuresequenz von einer von den SEQ ID NOs: 1 bis 3 besteht.
  6. Cytotoxisches Protein nach Anspruch 5, wobei die Mutation die Cytotoxizität der Shigatoxin-Effektorregion reduziert.
  7. Cytotoxisches Protein nach einem der Ansprüche 1 bis 6, wobei die immunglobulinartige Binderegion ein variables Einzelkettenfragment (scFv) umfasst.
  8. Cytotoxisches Protein nach Anspruch 7, wobei die immunglobulinartige Binderegion die Aminosäuren 269 bis 512 von SEQ ID NO: 8 umfasst.
  9. Cytotoxisches Protein nach einem der Ansprüche 1 bis 6, wobei die immunglobulinartige Binderegion ein Einzeldomänen-Antikörper-Fragment (sdAb-Fragment) umfasst.
  10. Cytotoxisches Protein nach Anspruch 9, wobei das Einzeldomänen-Antikörperfragment ein VHH-Fragment ist.
  11. Cytotoxisches Protein nach einem der Ansprüche 1 bis 10 in der Form eines Homomultimers oder Heteromultimers.
  12. Cytotoxisches Protein nach einem der Ansprüche 1 bis 11, in der Form eines pharmazeutisch verträglichen Salzes oder Solvats.
  13. Pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend ein cytotoxisches Protein nach einem der Ansprüche 1 bis 12 und mindestens einen pharmazeutisch verträglichen Hilfsstoff oder Träger.
  14. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 13, wobei der pharmazeutisch verträgliche Träger ein physiologisch verträgliches Lösungs- oder Dispersionsmedium umfasst; und/oder wobei der pharmazeutisch verträgliche Träger Wasser, Alkohol, ein Polyol und geeignete Gemische davon; ein Pflanzenöl; oder einen injizierbaren organischen Ester umfasst.
  15. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 13 oder 14, weiter umfassend ein Adjuvans; ein Umhüllungsmittel; ein antimikrobielles, antibakterielles oder antifungales Mittel; ein isotonisches Mittel; einen Polyalkohol; ein Absorptionsverzögerungsmittel; einen Stabilisator; einen Puffer; ein Tensid; und/oder ein pharmazeutisch verträgliches Antioxidans.
  16. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 15, wobei:
    das Adjuvans ein Konservierungsmittel, Netzmittel, Emulgiermittel oder Dispergiermittel ist;
    das Umhüllungsmittel Lecithin ist;
    das antibakterielle oder antifungale Mittel ein Paraben, Chlorbutanol, Phenol oder eine Sorbinsäure ist;
    das isotonische Mittel ein Zucker oder Natriumchlorid ist;
    der Polyalkohol Mannitol oder Sorbitol ist; und/oder
    das pharmazeutisch verträgliche Antioxidans ein wasserlösliches Antioxidans, ein öllösliches Antioxidans oder ein Metallchelatbildner ist.
  17. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 16, wobei:
    das wasserlösliche Antioxidans Ascorbinsäure, Cysteinhydrochlorid, Natriumbisulfat, Natriummetabisulfit oder Natriumsulfit ist;
    das öllösliche Antioxidans Ascorbylpalmitat, Butylhydroxyanisol, Butylhydroxytoluol, Lecithin, Propylgallat oder alpha-Tocopherol ist; und/oder
    der Metallchelatbildner Citronensäure, Ethylendiamintetraessigsäure, Sorbitol, Weinsäure oder Phosphorsäure ist.
  18. Polynukleotid, kodierend für ein cytotoxisches Protein nach einem der Ansprüche 1 bis 12 oder ein Komplement davon.
  19. Expressionsvektor, umfassend ein Polynukleotid nach Anspruch 18.
  20. Wirtszelle, umfassend ein Polynukleotid nach Anspruch 18 oder einen Expressionsvektor nach Anspruch 19.
  21. In-vitro-Verfahren zum Abtöten einer HER2/neu/ErbB2-exprimierenden Zelle, wobei das Verfahren den Schritt des Inkontaktbringens der Zelle mit einem cytotoxischen Protein nach einem der Ansprüche 1 bis 12 oder einer pharmazeutischen Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 13 bis 17 umfasst.
  22. Cytotoxisches Protein nach einem der Ansprüche 1 bis 12 oder eine pharmazeutische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 13 bis 17, zur Verwendung bei der Behandlung oder Prävention einer Erkrankung, einer Störung oder einem Zustand bei einem Patienten mit Bedarf daran, wobei die Erkrankung, die Störung oder der Zustand durch Zellen gekennzeichnet ist, die HER2/neu/ErbB2 exprimieren.
  23. Cytotoxisches Protein nach einem der Ansprüche 1 bis 12 oder eine pharmazeutische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 13 bis 17, zur Verwendung nach Anspruch 22, wobei die Erkrankung, die Störung oder der Zustand Krebs oder ein Tumor ist, der durch Zellen gekennzeichnet ist, die HER2/neu/ErbB2 exprimieren.
  24. Cytotoxisches Protein nach einem der Ansprüche 1 bis 12 oder eine pharmazeutische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 13 bis 17, zur Verwendung nach Anspruch 23, wobei der Krebs aus der Gruppe ausgewählt ist, bestehend aus: Brustkrebs, Magen-Darm-Krebs, Keimzellenkrebs, Drüsenkrebs, Kopf-Hals-Krebs, Nieren-Harnwegskrebs, Leberkrebs, Lungen-Pleurakrebs, Prostatakrebs, einem Sarkom, Hautkrebs und Gebärmutterkrebs.
HK17102811.4A 2014-03-11 2015-03-10 Proteins comprising amino-terminal proximal shiga toxin a subunit effector regions and cell-targeting immunoglobulin-type binding regions capable of specifically binding her2/neu/erbb2 HK1229345B (en)

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Application Number Priority Date Filing Date Title
US61/951,121 2014-03-11

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HK1229345A1 HK1229345A1 (en) 2017-11-17
HK1229345B true HK1229345B (en) 2021-02-05

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