HK1205743B - 3-取代的雌甾-1，3，5(10)，16-四烯衍生物、其制备方法、包含其的药物制剂及其用於制备药物的用途 - Google Patents

Description

3-取代的雌甾-1,3,5(10),16-四烯衍生物、其制备方法、包含 其的药物制剂及其用于制备药物的用途

本发明涉及AKR1C3抑制剂及其制备方法，涉及其用于治疗和/或预防疾病的用途并且还涉及其用于制备治疗和/或预防疾病、尤其是出血性病症和子宫内膜异位症的药物的用途。

AKR1C3是多功能酶并尤其催化4-雄甾烯-3,17-二酮(弱雄激素)到睾酮(强雄激素)的还原以及雌酮(弱雌激素)到17β-雌二醇(强雌激素)的还原。此外，抑制了前列腺素(PG)H2到PGF2α的还原以及PGD2到9α,11β-PGF2的还原(T.M.Penning等人,2006,'Aldo-keto reductase(AKR)1C3:Role in prostate disease and the development ofspecific inhibitors',Molecular and Cellular Endocrinology 248(1-2),182-191)。

雌二醇(E2)的局部形成在乳腺癌病症和子宫内膜异位症的发生和发展中发挥主要作用。通过治疗性给药芳香酶抑制剂(用于抑制由雄激素形成雌激素)和硫酸酯酶抑制剂(用于阻断由硫酸雌酮形成雌酮)来实现雌激素的组织浓度的降低，尤其是雌二醇的组织浓度的降低。然而，两种治疗方法都具有劣势，即彻底降低了全身雌激素浓度(A.Oster等人,J.Med.Chem.2010,53,8176–8186)。最近，实验证明子宫内膜异位症病灶能局部合成雌二醇(B.Delvoux等人,J Clin Endocrinol Metab.2009,94,876-883)。对于卵巢子宫内膜异位症亚型，已描述了AKR1C3mRNA的过表达(T.Smuc等人,Mol Cell Endocrinol.2009Mar 25；301(1-2):59-64)。

亟需确定酶醛-酮还原酶1C3(AKR1C3)(同物异名：5型17β-羟基甾体脱氢酶或前列腺素F合成酶)的新抑制剂，因为抑制剂有治疗激素依赖性病症(例如子宫内膜异位症)以及治疗非激素依赖性病症的潜能(M.C.Byrns,Y.Jin,T.M.Penning,Journal of SteroidBiochemistry and Molecular Biology(2010)；A.L.Lovering et.al.,Cancer Res 64(5),1802-1810)。除了子宫内膜异位症，这还包括前列腺癌(K.M.Fung等人,Endocr RelatCancer 13(1),169-180)、前列腺增生(R.O.Roberts等人,Prostate 66(4),392-404)、子宫内膜癌(T.L.Rizner等人,Mol Cell Endocrinol 2006248(1-2),126-135)、多囊卵巢综合征(K.Qin等人,J Endocrinol Metab 2006,91(1),270-276)、肺癌(Q.Lan等人,Carcinogenesis 2004,25(11),2177-2181)、非霍奇金淋巴瘤(Q.Lan等人,Hum Genet2007,121(2),161-168)、脱发(L.Colombe等人,Exp Dermatol 2007,16(9),762-769)、肥胖(P.A.Svensson等人,Cell Mol Biol Lett 2008,13(4),599-613)、膀胱癌(J.D.Figueroa,Carcinogenesis 2008,29(10),1955-1962)、慢性髓样细胞白血病(J.Birthwistle,MutatRes 2009,662(1-2),67-74)、肾细胞癌(J.T.Azzarello,Int J Clin Exp Pathol 2009,3(2),147-155)、乳腺癌(M.C.Byrns,J Steroid Biochem Mol Biol 2010,118(3),177-187)、过早性成熟(C.He,Hum Genet 2010,128(5)、515-527)以及慢性阻塞性肺病(S.Pierrou,Am J Respir Crit Care 2007,175(6),577-586)。

已知AKR1C3的一些抑制剂(参阅:Joanna M Day,Helena J Tutill,Atul Purohitand Michael J Reed,Endocrine-Related Cancer(2008)15,665–692；另参阅专利US20100190826和WO2007/100066)。已经描述的甾体物质例如为EM-1404，其基于在17位具有螺内酯单元的雌甾三烯骨架(F.Labrie等人,美国专利第6,541,463号,2003)。

在P.Bydal,Van Luu-The,F.Labrie,D.Poirier,European Journal ofMedicinal Chemistry 2009,44,632-644中记载了具有内酯单元的其他甾体AKR1C3抑制剂。在D.Deluca,G.Moller,A.Rosinus,W.Elger,A.Hillisch,J.Adamski,Mol.Cell.Endocrinol.2006,248,218–224中已经描述了氟化雌甾三烯衍生物。

本发明的化合物是基于在17-位被芳族杂环取代的雌甾-1,3,5(10),16-四烯骨架的物质。S.E.Barrie等人的US 5604213描述了仅仅作为17α-羟化酶/C17-20裂解酶(Cyp17A1)抑制剂的17-(3-吡啶基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-醇，即一种在碳原子3处被游离羟基取代的相关物质。

此外，US 5604213没有描述任何在3-位被烷氧基或烷基取代的17-(3-吡啶基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯衍生物。本发明所要求保护的本发明化合物的3-位处的取代基还包括一个或多个官能团，例如羧基或羟基，这产生与US 5604213所述物质的进一步结构差异。令人惊讶地，现已发现本文所要求保护的本发明化合物是AKR1C3的有效抑制剂。

US 2005/0203075描述了在3-位被氨基羰基(-CONH₂)基团取代的具有抗增殖和抗血管形成活性的雌甾-1,3,5(10),16-四烯衍生物，但未提及具体的分子靶标。然而，这些衍生物在雌甾-1,3,5(10),16-四烯骨架的17-位没有被杂环取代。

被描述为Cyp17A1抑制剂的17-吡啶基雄甾烷衍生物和17-嘧啶基雄甾烷衍生物的综述见于V.M.Moreira等人,Current Medicinal Chemistry,2008Vol.15,No.9。

本发明的化合物是式(I)的化合物及其盐、溶剂合物以及所述盐的溶剂合物，以及由式(I)包括并在下文作为实施方案提及的化合物及其盐、溶剂合物以及所述盐的溶剂合物。

本发明提供式(I)的化合物及其盐、溶剂合物以及所述盐的溶剂合物

其中

A表示任选地被氟、氯、腈、羟基、羧基、三氟甲基、五氟乙基、甲氧基、乙氧基、三氟甲氧基、-OCH₂CF₃、-SO₂CH₃、-SO₂CH₂CH₃、-(C＝O)CH₃、C₁-C₄-烷基、-CH₂OH、-C(CH₃)₂OH、-CONH₂、-(C＝O)NHCH₃、-(C＝O)NHCH₂CH₃、-(C＝O)N(CH₃)₂、-SO₂NH₂、-SO₂NHCH₃、-SO₂N(CH₃)₂单取代或二取代的吡啶-3-基、嘧啶-5-基、嘧啶-4-基、吡嗪-2-基、哒嗪-4-基、哒嗪-3-基，

R¹表示-O-CR^aR^b-Y，其中

R^a和R^b相互独立地表示氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、苯基、4-氟苯基、3-氟苯基、2-氟苯基、CH₃-O-CH₂-、-CH₂CF₃，或者

R^a和R^b一起表示-(CH₂)_n-，其中n＝2、3、4或5，或者

R^a和R^b一起表示-CH₂-O-CH₂-、-CH₂-NH-CH₂-、-CH₂-N(CH₃)-CH₂-、-CH₂CH₂-O-CH₂CH₂-、-CH₂CH₂-NH-CH₂CH₂-、-CH₂CH₂-N(CH₃)-CH₂CH₂-，

-O-CR^cR^d-CR^eR^f-Y，其中

R^c、R^d、R^e、R^f表示氢，或者

R^e、R^f表示氢，并且R^c、R^d相互独立地表示甲基、乙基，或者一起表示-(CH₂)_n-，其中n＝2、3、4、5，或者一起表示-CH₂-O-CH₂-或-CH₂CH₂-O-CH₂CH₂-，或者

R^c、R^d表示氢，并且R^e、R^f相互独立地表示甲基、乙基、CF₃CH₂-，或者一起表示其中n＝2、3、4、5的-(CH₂)n-、-CH₂CH₂-O-CH₂CH₂-、-CH₂CH₂-NH-CH₂CH₂-、-CH₂CH₂-N(CH₃)-CH₂CH₂-、-CH₂-O-CH₂-、-CH₂-NH-CH₂-、-CH₂-N(CH₃)-CH₂-，或者

R^d、R^e、R^f表示氢并且R^c表示甲基、乙基、三氟甲基，或者

R^c、R^d、R^f表示氢并且R^e表示甲基、乙基、三氟甲基、羟基、甲氧基、三氟甲氧基，或者

R^d、R^f表示氢并且R^c、R^e相互独立地表示甲基、乙基、三氟甲基，

-O-CH₂CH₂CH₂-Y，

-O-CH₂C(CH₃)₂CH₂-Y，

-O-CH₂CH₂C(CH₃)₂-Y，

-O-CH₂CH₂CH(CH₃)-Y，

-O-CH₂-CH(OH)-CH₂-Y，

-OCH₂CH₂CH₂CH-Y，

-CH₂-Y，

-CR^gR^h-CRⁱR^j-Y，其中

R^g、R^h、Rⁱ、R^j表示氢，或者

R^g、R^h、Rⁱ表示氢并且R^j表示甲基、乙基、三氟甲基，或者

Rⁱ、R^j表示氢，并且R^g、R^h表示甲基或一起表示-CH₂-、-CH₂CH₂-、-CH₂CH₂CH₂-，或者

R^g表示甲基并且R^h、Rⁱ、R^j表示氢，

-CH₂CH₂CH₂-Y，

-CH₂CH₂C(CH₃)₂-Y或

-CH₂CH₂CH₂CH₂-Y，并且

Y表示-CO₂H、-OH、-(C＝O)NH₂、-(C＝O)NHC_1-4-烷基、-S(＝O)CH₃。

优选这样的式(I)的化合物及其盐、溶剂合物以及所述盐的溶剂合物，其中

A表示任选地被氟、氯、腈、羟基、羧基、三氟甲基、甲氧基、乙氧基、三氟甲氧基、-SO₂CH₃、-(C＝O)CH₃、C₁-C₄-烷基单取代的吡啶-3-基、嘧啶-5-基、嘧啶-4-基、吡嗪-2-基、哒嗪-4-基、哒嗪-3-基，

R¹表示-O-CR^aR^b-Y，其中

R^a和R^b相互独立地表示氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、苯基、CH₃-O-CH₂-、CF₃CH₂-，

-O-CR^cR^d-CR^eR^f-Y，其中

R^c、R^d、R^e、R^f表示氢，或者

R^c、R^d表示氢并且R^e、R^f相互独立地表示甲基、乙基、CF₃CH₂-，

或者

R^d、R^e、R^f表示氢并且R^c表示甲基、乙基，或者

R^c、R^d、R^f表示氢并且R^e表示甲基、乙基，

-O-CH₂CH₂CH₂-Y，

-O-CH₂C(CH₃)₂CH₂-Y，

-O-CH₂CH₂C(CH₃)₂-Y，

-O-CH₂CH₂CH(CH₃)-Y，

-O-CH₂-CH(OH)-CH₂-Y，或者

-CR^gR^h-CRⁱR^j-Y，其中

R^g、R^h、Rⁱ、R^j表示氢，或者

R^g、R^h、Rⁱ表示氢并且R^j表示甲基、乙基，或者

Rⁱ、R^j表示氢并且R^g、R^h表示甲基，或者

R^g表示甲基并且R^h、Rⁱ、R^j表示氢，并且

Y表示-CO₂H、-OH、-(C＝O)NH₂、-(C＝O)NHC_1-4-烷基。

特别优选这样的式(I)的化合物及其盐、溶剂合物以及所述盐的溶剂合物，其中

A表示任选地被氟、羧基、三氟甲基、甲基单取代的吡啶-3-基、嘧啶-5-基、哒嗪-4-基，

R¹表示-O-CR^aR^b-Y，其中

R^a和R^b表示氢，或者R^a表示氢并且R^b表示甲基、乙基、苯基或CH₃-O-CH₂-，

-O-CR^cR^d-CR^eR^f-Y，其中

R^c、R^d表示氢并且R^e、R^f表示甲基，

-O-CH₂CH₂CH₂-Y，

-O-CH₂C(CH₃)₂CH₂-Y，

-O-CH₂-CH(OH)-CH₂-Y，或者

-CH₂-CH₂-Y，并且

Y表示-CO₂H、-OH、-(C＝O)NH₂、-(C＝O)NHC_1-4-烷基。

非常特别优选这样的式(I)的化合物及其盐、溶剂合物以及所述盐的溶剂合物，其中

A表示5-氟吡啶-3-基、5-(三氟甲基)吡啶-3-基、5-羧基吡啶-3-基、6-甲基吡啶-3-基、嘧啶-5-基、6-甲基哒嗪-4-基，并且

R¹表示-O-CR^aR^b-CO₂H，

-O-CR^aR^b-(C＝O)NH₂，

-O-CR^aR^b-(C＝O)NHCH₂CH₃，其中

R^a和R^b表示氢，或者

R^a表示氢并且R^b表示甲基、乙基、苯基、CH₃OCH₂-，

-O-CR^cR^d-CR^eR^f-CO₂H，其中

R^c、R^d表示氢并且R^e、R^f表示甲基，

-O-CH₂CH₂CH₂-OH，

-O-CH₂CH₂CH₂-CO₂H，

-O-CH₂C(CH₃)₂CH₂-OH，或者

-O-CH₂-CH(OH)-CH₂-OH。

本发明还提供以下化合物及其盐、溶剂合物以及所述盐的溶剂合物：

3-[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]丙酸

({17-[5-(三氟甲基)吡啶-3-基]雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基}氧基)乙酸

{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}乙酸

{[17-(6-甲基吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}乙酸

{[17-(嘧啶-5-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}乙酸

5-[3-(羧基甲氧基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-17-基]烟酸

{[17-(6-甲基哒嗪-4-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}乙酸

3-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}-2,2-二甲基丙酸

4-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}丁酸

2-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}丙酸

2-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}丁酸

2-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}-3-甲氧基丙酸

2-{[17-(3-吡啶基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}丙酸

2-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}丙酰胺

3-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}丙-1-醇

3-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}-2,2-二甲基丙-1-醇

3-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}丙-1,2-二醇

{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}(苯基)乙酸

N-乙基-2-({17-[5-(三氟甲基)吡啶-3-基]雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基}氧基)乙酰胺。

已发现，本发明提供的雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-羰基氨基衍生物起AKR1C3抑制剂的作用。所要求保护的化合物显示体外对AKR1C3的强抑制(IC₅₀值<200nM)，而且在大多数情况下，甚至IC₅₀值<50nM。

根据它们的结构，本发明的化合物(参见例如实施例10、11、12、13、14、17和18)可以某些立体异构形式(非对映异构体)存在。因此，本发明包括非对映异构体及其相应混合物。从此类非对映异构体混合物，可以以已知方式分离立体异构体均一的组分。

如果本发明的化合物可以互变异构体形式存在，则本发明包括所有互变异构体形式。

在本发明的情形中，优选的盐是本发明化合物的生理学可接受的盐。然而，本发明还包括如下的盐，所述盐本身不适于药学应用，但其可用于例如分离或纯化本发明的化合物。

本发明化合物的生理学可接受的盐包括无机酸、羧酸和磺酸的酸加成盐，例如以下酸的盐：盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、乙酸、甲酸、三氟乙酸、丙酸、乳酸、酒石酸、苹果酸、柠檬酸、富马酸、马来酸和苯甲酸。

本发明化合物的生理学可接受的盐还包括常用碱的盐，例如且优选碱金属盐(例如钠盐和钾盐)、碱土金属盐(例如钙盐和镁盐)以及得自氨或具有1至16个碳原子的有机胺的铵盐，所述有机胺例如且优选为乙胺、二乙胺、三乙胺、乙基二异丙胺、单乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二环己胺、二甲基氨基乙醇、普鲁卡因、二苄胺、N-甲基吗啉、精氨酸、赖氨酸、乙二胺和N-甲基哌啶。

在本发明的情形中，溶剂合物是本发明化合物的以下形式，即，其处于固态或液态且通过与溶剂分子配位形成络合物。水合物是特定形式的溶剂合物，其中所述配位是与水配位。在本发明的情形中，优选的溶剂合物是水合物。

此外，本发明还包括本发明化合物的前药。术语“前药”包括如下化合物，所述化合物自身可以是生物活性的或惰性的，但它们在它们于身体中所度过的时间期间(例如，代谢地或水解地)转化成本发明的化合物。

在本发明的情形中，除非不同地指出，否则取代基具有以下含义：

C ₁ -C ₄ -烷基表示具有1至4个碳原子的直链或支链烷基，例如且优选地为甲基、乙基、丙基、丁基、异丙基、叔丁基、异丁基。

此外，本发明提供了用于制备本发明式(I)的化合物的方法。可以通过以下合成路线来例示本发明的化合物(I)的制备：

可以如合成实施例1的示例性方式所述，由雌酮起始制备本发明的一些化合物(合成路线1)：

雌酮向中间体1的转化由文献(Tetrahedron Letters,2003,44,3071–3074或Journal of Medicinal Chemistry,1986,29,692–698)已知，或者可以通过使雌酮与1,1,2,2,3,3,4,4,4-九氟丁烷-1-磺酰氯在THF中在碳酸钾的存在下反应来完成。

使用Heck反应，通过与丙烯酸乙酯反应制备中间体2(J.Org.Chem.,1972,37(14),2320–2322)。优选地，使用丙烯酸乙酯、三乙胺、三-2-甲苯基膦和乙酸钯(II)在乙腈中进行所述反应。

通过在炭载钯的存在下氢化合成中间体3。

在碱如吡啶、2,6-二甲基吡啶或2,6-二叔丁基吡啶的存在下或在叔胺如三乙胺或二异丙基乙胺的存在下，使用三氟甲磺酸酐或N,N-双(三氟甲磺酰基)苯胺进行向中间体4的转化，或使用碱金属六甲基硅氮烷或二异丙基氨基锂(LDA)进行向中间体4的转化(J.Med.Chem.,1995,38,2463–2471；J.Org.Chem.,1985,50,1990–1992；J.Am.Chem.Soc.,2009,131,9014–9019；Archiv der Pharmazie(Weinheim,Germany),2001,334,12,373-374)。优选的是在二氯甲烷中在2,6-二叔丁基吡啶的存在下与三氟甲磺酸酐反应。

通过本领域技术人员已知的Suzuki反应来制备中间体5。为此，使中间体4与5-氟吡啶-3-硼酸(boronic acid)反应，或与相应的硼酸酯如硼酸频哪醇酯、MIDA硼酸酯反应(D.M.Knapp等人,J.Am.Chem.Soc.2009,131,6961)，或与三氟硼酸盐反应(G.A.Molander等人,J.Org.Chem.2009,74,973)。大量的含钯催化剂适合用作催化剂，例如四(三苯基膦)钯(0)、双(三苯基膦)二氯化钯(II)或[1,3-双(2,6-二异丙基苯基)咪唑-2-亚基](3-氯吡啶基)二氯化钯(II)(CAS 905459-27-0)。或者，可以使用含钯源如乙酸钯(II)、氯化钯(II)或Pd(dba)₂与含磷配体如三苯基膦、SPhos(D.M.Knapp等人,J.Am.Chem.Soc.2009,131,6961)或RuPhos(G.A.Molander,J.Org.Chem.2009,74,973)的组合。优选在双(三苯基膦)氯化钯(II)存在下与5-氟吡啶-3-硼酸反应。

通过本领域技术人员已知的羧酸酯水解，由中间体5开始，进行实施例1的制备。优选在THF和乙醇中与氢氧化钠水溶液反应。

本发明化合物的另一子集可以以合成实施例2-7的示例性方式所示的制备(合成路线2)。

由雌酮开始，通过在诸如氢化钠、叔丁醇钾、碳酸铯或碳酸钾的碱的存在下，在DMSO、1-甲基吡咯烷-2-酮、DMF或四氢呋喃中与溴乙酸苄酯或氯乙酸苄酯反应，使中间体6反应。优选在碳酸钾的存在下在四氢呋喃中与溴乙酸苄酯反应。与中间体4的制备类似地合成中间体7。然后，由中间体开始，使用与中间体5的制备相同的反应条件，通过Suzuki反应制备实施例化合物2-7。优选使用适合的含氮的芳族硼酸或硼酸频哪醇酯。如制备实施例19的示例性方式所示的，由实施例2、3、4、5、6和7开始，可以制备其他实施例化合物。为此，在本领域技术人员已知的酰胺合成反应过程中，使实施例化合物2(其中A为5-(三氟甲基)吡啶-3-基)与乙胺反应。优选使用在2-甲基四氢呋喃中的1,1’-羰基二咪唑与咪唑盐酸盐，如Organic Process Research&Development 2009,13,106–113所述。

本发明化合物的另一子集可以以合成实施例8-18的示例性方式所示的制备(合成路线3)。

与中间体5的制备类似地，通过与适合的含氮的芳族硼酸或硼酸频哪醇酯的Suzuki反应，制备了3-甲氧基雌甾-1,3,5(10),16-四烯-17-基三氟甲磺酸酯(S.Cacchi,E.Morera,Synthesis,1986,4,320–322)。优选使用5-氟吡啶-3-硼酸(用于制备中间体8)或吡啶-3-硼酸(用于制备中间体10)。通过在2,6-二甲基吡啶的存在下在二氯甲烷中与三溴化硼反应制备中间体9和11。通过在诸如氢化钠、叔丁醇钾、碳酸铯或碳酸钾的存在下与适当取代的烷基卤反应，进行实施例化合物的制备。如果使用烷基氯，则可以任选地添加碘化钠或碘化钾。优选在碘化钾或碘化钠的存在下与作为碱的碳酸钾反应。如果实施例化合物中的R1基团包含羧基，则由中间体9和11开始，使用羧酸甲酯或羧酸乙酯基团取代的烷基卤，并且在第二步骤中通过添加氢氧化钠水溶液水解所述酯。

以不可预见的方式，本发明的化合物呈现有用的药理学活性谱和有利的药代动力学性质。因此，它们适于用作用于治疗和/或预防人类和动物的疾病的药物。出于本发明的目的，术语“治疗”包括预防。本发明化合物的药学功效可以由其作为AKR1C3抑制剂的作用来解释。因此，本发明的化合物特别适于治疗和/或预防子宫内膜异位症、子宫平滑肌瘤、子宫出血性病症、痛经、前列腺癌、前列腺增生、痤疮、皮脂溢、脱发、过早性成熟、多囊卵巢综合征、乳腺癌、肺癌、子宫内膜癌、肾细胞癌、膀胱癌、非霍奇金淋巴瘤、慢性阻塞性肺病(COPD)、肥胖或炎性疼痛。

此外，本发明提供本发明的化合物用于制备治疗和/或预防病症、特别是上述病症的药物的用途。

此外，本发明提供用于治疗和/或预防病症、特别是上述病症的方法，其使用有效量的本发明的化合物。

此外，本发明提供本发明化合物用于治疗和/或预防病症、特别是上述病症的用途。

此外，本发明提供在用于治疗和/或预防上述病症的方法中使用的本发明的化合物。

此外，本发明提供包含至少一种本发明的化合物以及至少一种或多种其他活性化合物、特别用于治疗和/或预防上述病症的其他活性化合物的药物。可以以例示且优选的方式提及以下适于组合的活性化合物：选择性雌激素受体调节剂(SERM)、雌激素受体(ER)拮抗剂、芳香酶抑制剂、17βHSD1抑制剂、甾体硫酸酯酶(STS)抑制剂、GnRH激动剂和拮抗剂、kisspeptin受体(KISSR)拮抗剂、选择性雄激素受体调节剂(SARM)、雄激素、5α-还原酶抑制剂、选择性孕酮受体调节剂(SPRM)、促孕激素、抗促孕激素(antigestagens)、口服避孕药、丝裂原活化蛋白(MAP)激酶的抑制剂和MAP激酶激酶(Mkk3/6、Mek1/2、Erk1/2)的抑制剂、蛋白激酶B(PKBα/β/γ；Akt1/2/3)的抑制剂、磷酸肌醇3-激酶(PI3K)的抑制剂、细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK1/2)的抑制剂、缺氧诱导的信号转导途径的抑制剂(HIF1α抑制剂、脯氨酰羟化酶的活化剂)、组蛋白脱乙酰基酶(HDAC)抑制剂、前列腺素F受体(FP)(PTGFR)拮抗剂和非甾体抗炎药(NSAID)。

本发明的化合物可以与例如用于治疗癌症的已知的抗过度增殖物质、细胞抑制物质或细胞毒性物质组合。此外，本发明的化合物还可以与放疗和/或外科手术组合使用。

可以举例方式提及以下作为适于组合的活性化合物：

131I-chTNT、阿巴瑞克、阿比特龙、阿柔比星、阿地白介素、阿仑珠单抗、阿利维A酸、六甲蜜胺、氨鲁米特、氨柔比星、安吖啶、阿那曲唑、arglabin、三氧化二砷、天冬酰胺酶、阿扎胞苷、巴利昔单抗、BAY 80-6946、BAY 1000394、BAY 86-9766(RDEA 119、贝洛替康、苯达莫司汀、贝伐珠单抗、贝沙罗汀、比卡鲁胺、比生群、博来霉素、硼替佐米、布舍瑞林、白消安、卡巴他赛、亚叶酸钙、左亚叶酸钙、卡培他滨、卡铂、卡莫氟、卡莫司汀、卡妥索单抗、塞来昔布、西莫白介素、西妥昔单抗、苯丁酸氮芥、氯地孕酮、氮芥、顺铂、克拉立滨、氯屈膦酸、氯法拉滨、crisantaspase、环磷酰胺、环丙特龙、阿糖胞苷、达卡巴嗪、放线菌素D、达促红素α、达沙替尼、柔红霉素、地西他滨、地加瑞克、地尼白介素2、地舒单抗、地洛瑞林、二溴螺氯铵、多西他赛、去氧氟尿苷、多柔比星、多柔比星+雌酮、依库珠单抗、依屈洛单抗、依利醋铵、艾曲泊帕、内皮他丁、依诺他滨、表柔比星、环硫雄醇、促红素α、倍他依泊汀、艾铂、艾立布林、厄洛替尼、雌二醇、雌莫司汀、依托泊甙、依维莫司、依西美坦、法罗唑、非格司亭、氟达拉滨、氟尿嘧啶、氟他胺、福美坦、福莫司汀、氟维司群、硝酸镓、加尼瑞克、吉非替尼、吉西他滨、吉妥珠单抗、glutoxim、戈舍瑞林、二盐酸组胺、组氨瑞林、羟基脲、I-125种子(I-125seeds)、伊班膦酸、替伊莫单抗、伊达比星、异环磷酰胺、伊马替尼、咪喹莫德、英丙舒凡、干扰素α、干扰素β、干扰素γ、伊匹木单抗、伊立替康、伊沙匹隆、兰瑞肽、拉帕替尼、来那度胺、来格司亭、香菇多糖、来曲唑、亮丙瑞林、左旋咪唑、利舒脲、洛铂、洛莫司汀、氯尼达明、马索罗酚、甲羟孕酮、甲地孕酮、美法仑、美雄烷、巯嘌呤、甲氨蝶呤、甲氧沙林、甲氨基酮戊酸盐、甲睾酮、米法莫肽、米替福新、米立铂、二溴甘露醇、米托胍腙、二溴卫矛醇、丝裂霉素、米托坦、米托蒽醌、奈达铂、奈拉滨、尼洛替尼、尼鲁米特、尼妥珠单抗、尼莫司汀、尼曲吖啶、奥法木单抗、奥美拉唑、奥普瑞白介素、奥沙利铂、p53基因治疗、紫杉醇、帕利夫明、钯-103种子(palladium-103seed)、帕米磷酸、帕木单抗、帕唑帕尼、培门冬酶、PEG-倍他依泊汀(甲氧基PEG-倍他依泊汀)、培非司亭、培干扰素α-2b、培美曲塞、喷他佐辛、喷司他丁、培洛霉素、培磷酰胺、毕西巴尼、吡柔比星、普乐沙福、普卡霉素、聚氨葡糖、聚磷酸雌二醇、多糖-k、卟吩姆钠、普拉曲沙、泼尼莫司汀、丙卡巴肼、喹高莱、氯化镭-223、雷洛昔芬、雷替曲塞、雷莫司汀、雷佐生、refametinib、瑞戈非尼、利塞膦酸、利妥昔单抗、罗米地新、罗米司亭、沙格司亭、sipuleucel-T、西佐喃、索布佐生、甘氨双唑钠、索拉非尼、链佐星、舒尼替尼、他拉泊芬、他米巴罗汀、他莫昔芬、他索纳明、替西白介素、替加氟、替加氟+吉美拉西+奥替拉西、替莫泊芬、替莫唑胺、坦罗莫司、替尼泊甙、睾酮、替曲膦、沙立度胺、塞替派、胸腺法新、硫鸟嘌呤、托珠单抗、托泊替康、托瑞米芬、托西莫单抗、曲贝替定、曲妥珠单抗、曲奥舒凡、维甲酸、曲洛司坦、曲普瑞林、曲磷胺、色氨酸、乌苯美司、戊柔比星、凡他尼布、伐普肽、vemurafenib、长春碱、长春新碱、长春地辛、长春氟宁、长春瑞滨、伏林司他、伏罗唑、钇-90玻璃微球、净司他丁、净司他丁酯、唑来膦酸、佐柔比星。

优选地，本发明涉及包含至少一种本发明的化合物和以下活性化合物中的一种或多种的药物，其特别地用于治疗和/或预防雄激素受体依赖性增殖性疾病：

LHRH(促黄体素释放素)激动剂，

LHRH(促黄体素释放素)拮抗剂，

C(17,20)-裂解酶抑制剂，

I型5-α-还原酶抑制剂，

II型5-α-还原酶抑制剂，

I/II型混合型5-α-还原酶抑制剂，

用于治疗骨转移的发射α-放射的放射性药剂

细胞抑制剂，

VEGF(血管内皮生长因子)激酶抑制剂，

抗促孕激素(antigestagens)，

抗雌激素，

EGF抗体，

雌激素，或

其他雄激素拮抗剂，

聚(ADP-核糖)聚合酶I抑制剂，或

与细胞表面蛋白偶联的双特异性T-细胞衔接器(BiTE)，例如前列腺特异性膜抗原(PSMA)。

本发明还涉及包含至少一种通式I的化合物(或其与有机或无机酸的生理可接受的加成盐)的药物制剂以及这些化合物用于制备药物、特别是用于上述适应症的药物的用途。

所述化合物在口服给药之后和胃肠外给药之后可以用于上述适应症。

本发明的化合物可具有全身和/或局部作用。对此，它们可以以适当的方式给药，例如口服给药、胃肠外给药、肺部给药、鼻部给药、舌下给药、含服给药、直肠给药、皮肤给药、经皮给药、结膜给药、耳部给药，或作为植入物或支架给药。

对于这些施用途径，可以以合适的剂型给药本发明的化合物。

适于口服给药的是包含结晶和/或非结晶(amorphisized)和/或溶解形式的本发明化合物的剂型，所述剂型根据现有技术发挥作用且迅速释放和/或调节释放本发明化合物，例如片剂(未包衣或包衣的片剂，例如肠溶包衣或用溶出延迟的包衣或不溶性包衣的包衣，所述包衣控制本发明化合物的释放)、在口腔中迅速崩解的片剂或膜/糯米纸囊剂(wafer)、膜/冻干产物、胶囊(例如硬明胶胶囊或软明胶胶囊)、糖衣片剂、颗粒剂、小丸、散剂、乳剂、混悬剂、气雾剂或溶液。

可以进行胃肠外给药，避免了吸收步骤(例如静脉内给药、动脉内给药、心脏内给药、椎管内给药或腰内给药)或包括了吸收(例如肌内给药、皮下给药、皮内给药、经皮给药或腹膜内给药)。适于胃肠外给药的剂型尤其是溶液、混悬剂、乳剂、冻干产物或无菌粉末形式的注射制剂和输注制剂。

适于其他给药途径的剂型例如是用于吸入的药剂形式(尤其是粉末吸入器、喷雾器)、滴鼻剂、溶液和喷雾剂；用于舌部给药、舌下给药或含服给药的片剂，膜/糯米纸囊剂或胶囊、栓剂、耳部或眼部制剂、阴道胶囊、水性混悬剂(洗液、振烫合剂(shaking mixture))、亲脂性混悬剂、软膏、乳膏、经皮治疗系统(例如贴剂)、乳制剂(milk)、糊剂、泡沫剂、扑粉、植入物、子宫内系统、阴道环或支架。

本发明的化合物可被转化成所述的剂型。这可以以本领域已知的方式，通过与惰性、无毒的、药学合适的辅剂混合来进行。这些辅剂尤其包括载剂(例如微晶纤维素、乳糖、甘露醇)、溶剂(例如液体聚乙二醇)、乳化剂和分散剂或湿润剂(例如十二烷基硫酸钠、聚氧脱水山梨糖醇油酸酯(polyoxysorbitan oleate))、粘合剂(例如聚乙烯吡咯烷酮)、合成和天然聚合物(例如白蛋白)、稳定剂(例如抗氧化剂，诸如抗坏血酸)、着色剂(例如无机颜料，诸如氧化铁)以及味道和/或气味矫正剂。

本发明还涉及包含至少一种本发明化合物并通常连同一种或多种惰性、无毒的药学合适的辅剂的医药产品，及其用于上述目的的用途。

在口服给药的情况下，每日的量是约0.01-100mg/kg体重。待给药的通式I的化合物的量在宽泛的范围内变化并可覆盖每一有效量。根据待治疗的病症和给药方法，给药的化合物的量可以是0.01-100mg/kg体重/天。

然而，任选地，可能需要偏离所述的量，这主要取决于体重、给药途径、对活性物质的个体反应、制剂类型以及进行给药的时点或间隔。因此，在一些情况下，使用小于上述最小量可能是足够的，而在其他情况下，必须超过所述的上限。在相对大量的给药的情况下，可以建议将其分成一整天内的多个单独剂量。

除非另有规定，以下试验和实施例中的百分比是重量百分比；份是重量份。在每一情况下，溶剂比例、稀释比和与液体/液体溶液的浓度相关的信息指的是体积。

缩写(化学)列表

缩写和首字母缩略词

DMF	N,N-二甲基甲酰胺
		DMSO	二甲基亚砜
h	小时
		HPLC	高压高效液相色谱

LC-MS	液相色谱-质谱联用
		ES-MS	电喷射质谱
min	分钟
		MS	质谱
NMR	核磁共振波谱
		RT	室温
TFA	三氟乙酸
		THF	四氢呋喃

本发明化合物的纯化

在一些情况下，可以通过制备型HPLC，例如使用来自Waters的自动纯化器设备(通过UV检测和电喷射离子化来检测化合物)与市售预包装的HPLC柱(例如XBridge柱(来自Waters)，C18,5μm,30×100mm)的组合，来纯化本发明的化合物。所用的溶剂体系是乙腈/添加有甲酸的水。可以使用本领域技术人员已知的其他添加剂，例如氨、乙酸铵或三氟乙酸。还可以使用例如甲醇替代乙腈。

在一些情况下，使用以下方法进行制备型HPLC分离：

使用冻干或真空离心以去除HPLC溶剂混合物。如果所得的化合物以TFA盐或甲酸盐形式存在，则可以通过本领域已知的标准实验室程序它们转化成相应的游离碱。

在一些情况下，本发明的化合物可以通过硅胶色谱纯化。为此目的，例如，使用预包装的硅胶柱(例如，来自Separtis,Flash silica gel)与Flashmaster II色谱仪(Argonaut/Biotage)和色谱溶剂或溶剂混合物(如己烷、乙酸乙酯和二氯甲烷及甲醇)的组合。

本发明化合物的结构分析

在一些情况下，通过LC-MS分析本发明的化合物：

在一些情况下，使用以下分析方法：

仪器：Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001；柱：Acquity UPLC BEH C181.750×2.1mm；流动相A：水+0.1体积％甲酸，流动相B：乙腈；梯度：0-1.6min 1-99％B,1.6-2.0min99％B；流速0.8ml/min；温度：60℃；进样：2μl；DAD扫描：210-400nm

以下符号用于本发明化合物的NMR数据：

s	单峰
		d	双重峰
t	三重峰
		q	四重峰
quin	五重峰
		m	多重峰
br	宽峰
		mc	中心多重峰

本发明化合物的合成

中间体1

17-氧代雌甾-1,3,5(10)-三烯-3-基-1,1,2,2,3,3,4,4,4-九氟丁烷-1-磺酸酯

首先将30.0g(111mmol)雌酮和46.0g(222mmol)碳酸钾装入300ml THF中。加入40.2g(133mmol)1,1,2,2,3,3,4,4,4-九氟丁烷-1-磺酰氟，并将混合物在回流下搅拌7h以及在RT下搅拌18h。然后加入另外0.2当量1,1,2,2,3,3,4,4,4-九氟丁烷-1-磺酰氟，并将混合物在回流下加热4h。过滤固体，浓缩滤液至其初始体积的一半，倒在饱和氯化钠溶液上并搅拌35min。然后分离各相，用乙酸乙酯萃取水相两次，用水和饱和氯化钠溶液洗涤合并的有机相并经硫酸钠干燥。除去溶剂并用己烷研磨残余物。这产生63.6g固体。C₂₂H₂₁F₉O₄S。¹H-NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ[ppm]＝0.80(s,3H),1.27-1.64(m,6H),1.66-1.80(m,1H),1.85-2.12(m,3H),2.18-2.43(m,3H),2.81-2.94(m,2H),7.11-7.21(m,2H),7.43(d,1H)。

中间体2

(E)-3-(17-氧代雌甾-1,3,5(10)-三烯-3-基)丙烯酸乙酯

在微波中于150℃/100瓦下加热500mg(0.91mmol)17-氧代雌甾-1,3,5(10)-三烯-3-基-1,1,2,2,3,3,4,4,4-九氟丁烷-1-磺酸酯、181mg丙烯酸乙酯、144微升三乙胺、47mg(0.15mmol)三-2-甲苯基膦和14mg(0.06mmol)乙酸钯(II)在8ml乙腈中的混合物。将两个类似的反应批次(在每一种情况下由1g 17-氧代雌甾-1,3,5(10)-三烯-3-基-1,1,2,2,3,3,4,4,4-九氟丁烷-1-磺酸酯开始)的混合物合并。经硅藻土(Celite)过滤合并的混合物，倒在氯化铵水溶液上并搅拌30min。将混合物用二氯甲烷萃取三次，用饱和氯化钠溶液洗涤，经硫酸钠干燥，并浓缩。通过硅胶柱色谱(己烷/乙酸乙酯)纯化，得到287mg固体。C₂₃H₂₈O₃。¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ[ppm]＝0.80(s,3H),1.21(t,3H),1.28-1.45(m,3H),1.45-1.60(m,3H),1.69-1.80(m,1H),1.87-2.10(m,3H),2.18-2.29(m,1H),2.32-2.45(m,2H),2.79-2.88(m,2H),4.14(q,2H),6.51(d,1H),7.29(d,1H),7.39(s,1H),7.41–7.45(m,1H),7.54(d,1H)。

中间体3

3-(17-氧代雌甾-1,3,5(10)-三烯-3-基)丙酸乙酯

将100mg Pd/碳(10％)添加到含282mg(0.80mmol)(E)-3-(17-氧代雌甾-1,3,5(10)-三烯-3-基)丙烯酸乙酯的10ml乙酸乙酯中。在RT下引入氢气，持续1h。过滤催化剂并用总计10ml乙酸乙酯洗涤残余物。减压除去溶剂，得到278mg(理论值的98％)产物。C₂₃H₃₀O₃。

¹H-NMR(300MHz,氯仿-d):δ[ppm]＝0.90(s,3H),1.25(t,3H),1.35-1.73(m),1.91-2.21(m,4H),2.23–2.34(m,1H),2.35-2.56(m,2H),2.60(t,2H),2.84-2.97(m,4H),4.14(q,2H),6.95(s,1H),7.00(d,1H),7.22(d,1H)。

中间体4

3-(17-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基)丙酸乙酯

将0.25ml(1.16mmol)2,6-二叔丁基吡啶滴加到274mg(0.77mmol)3-(17-氧代雌甾-1,3,5(10)-三烯-3-基)丙酸乙酯在10ml二氯甲烷中的溶液中。然后滴加0.16ml(0.93mmol)三氟甲磺酸酐，并将混合物在RT下搅拌24h。将混合物小心地倒入70ml饱和碳酸氢钠溶液中，分离各相，用二氯甲烷萃取水相两次，用饱和碳酸氢钠溶液洗涤合并的有机相，用1M盐酸水溶液、氯化钠溶液洗涤两次，经硫酸钠干燥，并浓缩。这产生522mg棕色油。C₂₄H₂₉F₃O₅S。¹H-NMR(400MHz,氯仿-d,所选择的信号):δ[ppm]＝1.00(s,3H).1.25(t,3H),1.80(td,1H),1.85-1.98(m,2H),2.04-2.17(m,1H),2.25-2.47(m,3H),2.55-2.67(m),2.79-2.96(m),4.14(q,2H),5.58-5.67(m,1H),6.95(s,1H),7.00(d,1H),7.19(d,1H)。

中间体5

3-(17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基)丙酸乙酯

首先将522mg(1.07mmol)3-[17-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]丙酸乙酯装到5ml甲苯和3ml乙醇中。然后添加212mg(1.4当量)5-氟吡啶-3-硼酸、91mg LiCl、1.3ml 2M碳酸氢钠水溶液和38mg双(三苯基膦)氯化钯(II)，并将混合物在微波中在120℃/300W下加热90min。过滤混合物，分离各相，并用乙酸乙酯(每次20ml)萃取水层两次。用饱和碳酸氢钠溶液和饱和氯化钠溶液洗涤合并的有机相，经硫酸钠干燥，并浓缩。通过硅胶柱色谱(己烷/乙酸乙酯)纯化，得到108mg浅黄色油。C₂₈H₃₂FNO₂。¹H-NMR(300MHz,氯仿-d):δ[ppm]＝1.04(s,3H),1.25(t),1.2-1.90(m),1.91-2.04(m,1H),2.08-2.26(m,2H),2.26-2.51(m,3H),2.61(t,2H),2.82–2.97(m),4.14(q,2H),6.07–6.12(m,1H),6.91-7.05(m,2H),7.22(d,1H),7.40(dt,1H),8.34(d,1H),8.45–8.51(m,1H)。

中间体6

[(17-氧代雌甾-1,3,5(10)-三烯-3-基)氧基]乙酸苄酯

在回流下过夜加热5.00g(18mmol)雌酮、3.5ml溴乙酸苄酯(22mmol)、7.67g(55mmol)碳酸钾和70ml THF的混合物。加入另外0.2当量溴乙酸苄酯，并将混合物在回流下搅拌另外3h。向反应混合物添加水。使各相分离，并用乙酸乙酯萃取水相两次。用水、饱和氯化钠溶液洗涤合并的有机相，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过硅胶柱色谱(己烷/乙酸乙酯)纯化，得到7.91g无色油。C₂₇H₃₀O₄。¹H-NMR(300MHz,氯仿-d):δ[ppm]＝0.91(s,3H),1.35-1.73(m),1.90-2.59(m),2.78-2.96(m,2H),4.64(s,2H),5.24(s,2H),6.60–6.67(m,1H),6.70(dd,1H),7.19(d,1H),7.35(s,5H)。

中间体7

[(17-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基)氧基]乙酸苄酯

与中间体4的制备类似地使7.9g(18.9mmol)[(17-氧代雌甾-1,3,5(10)-三烯-3-基)氧基]乙酸苄酯反应，得到10.1g为粗产物的标题化合物。C₂₈H₂₉F₃O₆S。¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ[ppm]＝0.92(s,3H),1.29-1.61(m),1.65-1.86(m,3H),2.02-2.15(m,1H),2.17-2.40(m,3H),2.66-2.78(m,2H),4.76(s,2H),5.15(s,2H),5.72(d,1H),6.57(d,1H),6.65(dd,1H),7.10(d,1H),7.27-7.41(m,5H).

中间体8

17-(5-氟吡啶-3-基)-3-甲氧基雌甾-1,3,5(10),16-四烯

将1.23g(0.05当量)双(三苯基膦)氯化钯(II)添加到14.6g(35.1mmol)3-甲氧基雌甾-1,3,5(10),16-四烯-17-基三氟甲磺酸酯(S.Cacchi,E.Morera,Synthesis,1986,4,320–322)、6.92g(1.4当量)5-氟吡啶-3-硼酸、2.97g(2.0当量)氯化锂、47ml 2M碳酸氢钠水溶液、80ml乙醇和100ml甲苯的混合物中，并将混合物在回流下加热4.5h。经硅藻土过滤混合物，分离各相并用乙酸乙酯萃取水相。用饱和碳酸氢钠水溶液和饱和氯化钠溶液洗涤合并的有机相，经硫酸钠干燥，并浓缩。通过硅胶柱色谱(己烷/乙酸乙酯)纯化残余物。这样得到10.4g(理论值的81％)固体。C₂₄H₂₆FNO。¹H-NMR(300MHz,氯仿-d):δ[ppm]＝1.05(s,3H),1.40-1.75(m),1.82(td,1H),1.90-2.03(m,1H),2.03-2.27(m),2.27-2.57(m),2.84-3.03(m,2H),3.79(s,3H),5.99-6.18(m,1H),6.66(d,1H),6.73(dd,1H),7.21(d,1H),7.40(dt,1H),8.34(d,1H),8.48(s,1H)。

中间体9

17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-醇

在0℃-3℃的温度下，将用50ml二氯甲烷稀释的11.6ml 2,6-二甲基吡啶滴加到100ml 1M三溴化硼的二氯甲烷溶液。然后在0℃-3℃的温度下滴加溶解在50ml二氯甲烷中的10.4g 17-(5-氟吡啶-3-基)-3-甲氧基雌甾-1,3,5(10),16-四烯，在冰浴中使混合物温热至RT过夜。将反应混合物添加到400ml冰/水中并搅拌40min。分离各相，用二氯甲烷(每次50ml)萃取水相三次，用饱和氯化钠溶液洗涤合并的有机相，经硫酸钠干燥并浓缩。将粗产物在40℃在己烷中研磨，抽滤并用己烷洗涤。这样得到13.9g棕色固体(粗产物)。C₂₃H₂₄FNO。MS(ESIpos)实测质量数:349.00。

1H-NMR(300MHz,DMSO-d6):δ[ppm]＝0.98(s,3H),1.27-1.61(m,4H),1.69(td,1H),1.78–1.90(m,1H),2.03-2.35(m,5H),2.65-2.84(m,2H),6.23–6.28(m,1H),6.40-6.52(m,2H),7.01(d,1H),7.63-7.70(m,1H),8.42(d,1H),8.46–8.50(m,1H),8.98(s,1H)。

中间体10

3-甲氧基-17-(3-吡啶基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯

在80℃下，类似于实施例8，使3.00g(7.20mmol)3-甲氧基雌甾-1,3,5(10),16-四烯-17-基三氟甲磺酸酯类似地与1.24g(1.40当量)吡啶-3-硼酸过夜反应。通过硅胶柱色谱(己烷/乙酸乙酯)纯化后，这样得到1.2g作为粗产物的标题化合物。进一步通过HPLC纯化120mg粗产物。这样得到60mg标题化合物。C₂₄H₂₇NO。MS(ESIpos)实测质量数:345.21。¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ[ppm]＝0.98(s,3H),1.32-1.61(m,4H),1.71(td,1H),1.83-1.91(m,1H),2.04-2.14(m,2H),2.17-2.38(m,3H),2.75-2.89(m,2H),3.66(s,3H),6.11(dd,1H),6.60(d,1H),6.65(dd,1H),7.13(d,1H),7.29-7.34(m,1H),7.76(dt,1H),8.42(dd,1H),8.59(d,1H)。

中间体11

17-(3-吡啶基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-醇

与制备中间体9类似地，使1.1g 3-甲氧基-17-(3-吡啶基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯与三溴化硼(1M的二氯甲烷溶液)和2,6-二甲基吡啶反应。为了后处理，将混合物倒入冰-水中并搅拌。加入二氯甲烷。抽滤残余的固体，用水和二氯甲烷洗涤，并通过添加甲苯、然后在旋转蒸发器上除去甲苯进行干燥(三次)。用乙醚研磨并减压干燥，得到511mg标题化合物。C₂₃H₂₅NO。MS(ESIpos)实测质量数:332.00。¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ[ppm]＝1.01(s,3H),1.31-1.61(m,4H),1.72(td,1H),1.85(dt,1H),2.09-2.23(m,3H),2.27-2.41(m,2H),2.66-2.83(m,2H),6.40–6.45(m,2H),6.49(dd,1H),7.02(d,1H),7.84(dd,1H),8.37–8.42(m,1H),8.67(d,1H),8.82(s,1H)。

实施例化合物的制备

实施例1

3-[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]丙酸

将100mg(0.23mmol)3-[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]丙酸乙酯、3ml THF、0.5ml乙醇和0.58ml 2M氢氧化钠水溶液在RT下过夜搅拌，然后用水洗涤，并用10％浓度的柠檬酸水溶液调整至pH 3。用乙酸乙酯萃取水相三次。在硫酸钠上干燥合并的有机相，并浓缩。通过制备型HPLC(乙腈/水/甲酸)纯化残余物。这样产生44mg白色固体。C₂₆H₂₈FNO₂。MS(ESIpos)实测质量数:405.21。¹H-NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ[ppm]＝0.99(s,3H),1.24-1.62(m,4H),1.62-1.78(m,1H),1.78-1.96(m,1H),2.01-2.40(m,5H),2.70(t,2H),2.75-2.93(m,2H),6.26(s.,1H),6.85-6.96(m,2H),7.13(d,1H),7.68(d,1H),8.43(d,1H),8.48(s,1H).,12.1(s)。

实施例2

({17-[5-(三氟甲基)吡啶-3-基]雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基}氧基)乙酸

首先将200mg(1.07mmol){[17-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}乙酸苄酯装到1.5ml甲苯和1ml乙醇中。然后添加97mg(1.4当量)5-(三氟甲基)吡啶-3-硼酸、31mg LiCl、0.49ml 2M碳酸氢钠水溶液和12mg 1,3-二(2,6-二异丙基苯基)咪唑-2-亚基(3-氯吡啶基)二氯化钯(II)(CAS 905459-27-0)，并将混合物在微波中在120℃/300W下加热90min。将混合物过滤，添加0.90ml 2M氢氧化钠水溶液，将混合物在微波中在120℃/300W下加热30min。使用10％浓度的柠檬酸水溶液将反应混合物调节至pH 3，并用乙酸乙酯萃取水相三次。用饱和氯化钠溶液洗涤合并的有机相，经硫酸钠干燥，并浓缩。通过制备型HPLC(乙腈/水/甲酸)纯化，得到43mg固体。C₂₆H₂₆F₃NO₃。MS(ESIpos)实测质量数:457.19。1H-NMR(300MHz,DMSO-d6):δ[ppm]＝1.00(s,3H),1.27–2.41(m),2.70–2.88(m,2H),4.56(s,2H),6.35(s.,1H),6.46-6.73(m,2H),7.13(d,1H),8.03(s.,1H),8.83(s,1H),8.90(s,1H),12.9(s)。

实施例3

{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}乙酸

与制备实施例2类似地，使200mg(0.36mmol){[17-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}乙酸苄酯与72mg(0.51mmol)5-氟吡啶-3-硼酸反应。这样得到31mg(理论值的21％)固体。C₂₅H₂₆FNO₃。MS(ESIpos)实测质量数:407.19。1H-NMR(300MHz,DMSO-d6):δ[ppm]＝0.98(s,3H),1.26-1.63(m,4H),1.64–1.78(m,1H),1.79–1.93(m,1H),2.00-2.39(m,5H),2.73-2.89(m,2H),4.56(s,2H),6.26(s.,1H),6.53-6.66(m,2H),7.13(d,1H),7.68(dd,1H),8.42(d,1H),8.48(s,1H),12.9(s)。

实施例4

{[17-(6-甲基吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}乙酸

将9.6mg双(三苯基膦)氯化钯(II)添加到150mg[(17-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基)氧基]乙酸苄酯、52mg(1.4当量)2-甲基-5-硼酸、23mg(2.0当量)氯化锂在1.5ml甲苯、1ml乙醇和0.37ml 2M碳酸氢钠水溶液中的混合物中，并且将混合物在100℃搅拌过夜。添加0.7ml 2M氢氧化钠水溶液，并将混合物在100℃搅拌过夜。用水稀释反应混合物，用柠檬酸溶液调整至pH＝4并用乙酸乙酯萃取三次。浓缩合并的有机相并通过制备型HPLC纯化。这样得到24mg标题化合物。C₂₆H₂₉NO₃。MS(ESIpos)实测质量数:403.21。¹H-NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ[ppm]＝0.96(s,3H),1.29-1.62(m,4H),1.69(td,1H),1.80–1.92(m,1H),1.99-2.39(m,6H),2.41(s,3H),2.71-2.89(m,2H),4.56(s,2H),6.00–6.07(m,1H),6.56(d,1H),6.59-6.66(m,1H),7.10-7.22(m,2H),7.61-7.68(m,1H),8.44(d,1H),12.9(br.s,1H)。

实施例5

{[17-(嘧啶-5-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}乙酸

与实施例4类似地，使150mg[(17-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基)氧基]乙酸苄酯与47mg嘧啶-5-硼酸反应。通过制备型HPLC纯化，得到42mg标题化合物。C₂₄H₂₆N₂O₃。MS(ESIpos)实测质量数:390.19。¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ[ppm]＝0.98(s,3H),1.33-1.62(m,4H),1.72(td,1H),1.83-1.91(m,1H),2.08-2.16(m,2H),2.18-2.38(m,3H),2.62-2.65(m,1H),2.73-2.87(m,2H),4.55(s,2H),6.27-6.31(m,1H),6.57(d,1H),6.63(dd,1H),7.13(d,1H),8.82(s,2H),9.04(s,1H)。

实施例6

5-[3-(羧基甲氧基)雌甾-1，3，5(10)，16-四烯-17-基]烟酸

与实施例4类似地，使150mg[(17-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基)氧基]乙酸苄酯与100mg 5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)烟酸甲酯反应。通过制备型HPLC纯化并用乙醚研磨所得固体，得到39mg标题化合物。C₂₆H₂₇NO₅。MS(ESIpos)实测质量数:433.19。¹H-NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ[ppm]＝0.99(s,3H),1.30-1.63(m,5H),1.63-1.79(m,1H),1.82-1.93(m,1H),2.04-2.40(m,6H),2.73-2.85(m,2H),4.56(s,2H),6.23–6.27(m,1H),6.57(d,1H),6.63(dd,1H),7.13(d,1H),8.16(t,1H),8.81(d,1H),8.91(d,1H),13.2(br.s)。

实施例7

{[17-(6-甲基哒嗪-4-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}乙酸

与实施例4类似地，使181mg(0.33mmol)[(17-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基)氧基]乙酸苄酯与101mg(0.46mmol)3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)哒嗪反应。通过制备型HPLC纯化，得到粗产物，将其用乙醚以及用乙酸乙酯研磨。这样得到14mg(理论值的9％)标题化合物。C₂₅H₂₈N₂O₃。MS(ESIpos)实测质量数:404.21。¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ[ppm]＝1.01(s,3H),1.32-1.61(m,4H),1.69(td,1H),1.82-1.90(m,1H),2.08-2.38(m,5H),2.58(s,3H),2.71-2.88(m,2H),4.51(s,2H),6.54-6.58(m,2H),6.62(dd,1H),7.13(d,1H),7.48(d,1H),9.10(d,1H)。

实施例8

3-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}-2,2-二甲基丙酸

将120mg(0.31mmol)17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-醇、61mg(0.37mmol,1.2当量)3-氯-2,2-二甲基丙酸甲酯、212mg(1.53mmol,5.0当量)碳酸钾和5mg碘化钾在4.6ml DMSO中的混合物在80℃搅拌18h。添加.77ml 2M氢氧化钠水溶液，并将混合物在RT下搅拌过夜。用水稀释混合物，用10％浓度的柠檬酸水溶液调整至pH 3-4并用乙酸乙酯萃取三次，浓缩萃取液并通过制备型HPLC纯化残余物。这样产生7mg固体。C₂₈H₃₂FNO₃。MS(ESIpos)实测质量数:449.24。¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ[ppm]＝0.98(s,3H),1.16(s,6H),1.31-1.61(m,4H),1.65–1.76(m,1H),1.81-1.92(m,1H),2.05–2.38(m,5H),2.75–2.84(m,2H),3.85(s,2H),6.24-6.28(m,1H),6.59(d,1H),6.64(dd,1H),7.12(d,1H),7.67(dt,1H),8.43(d,1H),8.49(t,1H),12.3(s)。

实施例9

4-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}丁酸

将100mg(0.29mmol)17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-醇、78mg(0.43mmol,1.2当量)4-溴丁酸甲酯、198mg(1.53mmol,5当量)碳酸钾和4mg碘化钠的混合物在80℃搅拌18h。然后添加另外78mg 4-溴丁酸甲酯，并将混合物在120℃搅拌过夜。添加0.72ml 2M氢氧化钠水溶液，并将混合物在40℃搅拌3h。用水稀释混合物，用10％浓度的柠檬酸水溶液调整至pH 4并用乙酸乙酯萃取三次，浓缩萃取液并通过制备型HPLC纯化残余物。这样产生43mg固体。C₂₇H₃₀FNO₃。MS(ESIpos)实测质量数:435.22。¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ[ppm]＝0.99(s,3H),1.31-1.61(m,4H),1.71(td,1H),1.82-1.92(m,3H),2.06-2.37(m,7H),2.77-2.84(m,2H),3.89(t,2H),6.25(dd,1H),6.57–6.81(m,1H),6.62-6.68(m,1H),7.12(d,1H),7.64-7.70(m,1H),8.43(d,1H),8.48(t,1H),12.1(br.s,1H)。

实施例10

(RS)-2-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}丙酸

与实施例8类似地，使100mg 17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-醇与117mg(3.0当量)2-氯丙酸乙酯在80℃反应过夜。添加2M氢氧化钠水溶液，然后将混合物在40℃搅拌2.5h。这样在制备型HPLC后得到44mg标题化合物。C₂₆H₂₈FNO₃。MS(ESIpos)实测质量数:421.21。¹H-NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ[ppm]＝0.98(s,3H),1.29-1.62(m,8H),1.70(td,1H),1.79–1.92(m,1H),2.02-2.38(m,6H),2.67–2.86(m,2H),4.70(q,1H),6.26(br.s.,1H),6.49-6.63(m,2H),7.12(d,1H),7.67(dt,1H),8.43(d,1H),8.47–8.50(m,1H),12.9(br.s,1H)。

实施例11

(RS)-2-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}丁酸

与实施例8类似地，使100mg 17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-醇与117mg(3.0当量)2-氯丁酸甲酯在80℃反应7h以及在室温下反应72h。添加2M氢氧化钠水溶液，然后将混合物在40℃搅拌5.5h。这样在制备型HPLC后得到48mg标题化合物。C₂₇H₃₀FNO₃。MS(ESIpos)实测质量数:435.22。¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ[ppm]＝0.95(t,3H),0.99(s,3H),1.31-1.61(m,4H),1.63-1.92(m,4H),2.09-2.37(m,5H),2.69-2.89(m,2H),4.48-4.55(m,1H),6.22-6.28(m,1H),6.52–6.56(m,1H),6.57–6.63(m,1H),7.12(d,1H),7.64-7.69(m,1H),8.42(d,1H),8.48(t,1H),12.87(br.s.,1H)。

实施例12

(RS)-2-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}-3-甲氧基丙酸

与实施例8类似地，使100mg 17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-醇与169mg(3.0当量)2-溴-3-甲氧基丙酸甲酯在80℃反应4h。添加2M氢氧化钠水溶液，然后将混合物在40℃搅拌5.5h。这样在制备型HPLC后得到57mg标题化合物。C₂₇H₃₀FNO₄。MS(ESIpos)实测质量数:451.22。¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ[ppm]＝0.99(s,3H),1.32-1.61(m,4H),1.71(td,1H),1.81-1.92(m,1H),2.05-2.37(m,5H),2.71-2.87(m,2H),3.28(s,3H),3.66-3.78(m,2H),4.79–4.84(m,1H),6.24-6.27(m,1H),6.54-6.59(m,1H),6.62(dt,1H),7.12(d,1H),7.67(dt,1H),8.42(d,1H),8.48(t,1H),13.01(br.s.,1H)。

实施例13

(RS)-2-{[17-(3-吡啶基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}丙酸

与实施例8类似地，使100mg 17-(3-吡啶基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-醇与123mg(3.0当量)2-氯丙酸乙酯在80℃反应过夜。添加2M氢氧化钠水溶液，然后将混合物在40℃搅拌4h。这样在制备型HPLC后得到19mg标题化合物。C₂₆H₂₉NO₃。MS(ESIpos)实测质量数:403.21。¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ[ppm]＝0.98(s,3H),1.31-1.61(m,7H,在1.43ppm包含双峰),1.71(td,1H),1.81-1.92(m,1H),2.02-2.15(m,2H),2.15-2.38(m,3H),2.69-2.89(m,2H),4.70(qd,1H),6.11(dd,1H),6.51-6.55(m,1H),6.59(dt,1H),7.12(d,1H),7.29-7.34(m,1H),7.76(dt,1H),8.41(dd,1H),8.58(d,1H),12.9(br.s.,1H)。

实施例14

(RS)-2-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}丙酰胺

将100mg 17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-醇、92mg(3.0当量)2-氯丙酰胺、198mg(5当量)碳酸钾和4mg碘化钠在3ml DMSO中的混合物在80℃搅拌18h，然后在100℃搅拌4h以及在120℃搅拌18h。用水稀释混合物并用乙酸乙酯萃取三次，经硫酸钠干燥合并的有机相并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物，得到18mg标题化合物。

纯化方法制备型HPLC：

C₂₆H₂₉FN₂O₂。MS(ESIpos)实测质量数:420.22。¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ[ppm]＝0.99(s,3H),1.31-1.61(m,7H,在1.37ppm处包含双峰),1.71(td,1H),1.87(dt,1H),2.06-2.38(m,5H),2.70-2.89(m,2H),4.51(q,1H),6.24-6.27(m,1H),6.58(t,1H),6.64(dt,1H),7.10–7.18(m,2H),7.36(d,1H),7.63-7.71(m,1H),8.43(d,1H),8.46-8.51(m,1H)。

实施例15

3-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}丙-1-醇

将100mg 17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-醇、119mg(3.0当量)3-溴丙-1-醇、198mg(5当量)碳酸钾和4mg碘化钠在3ml DMSO中的混合物在80℃搅拌18h，然后在100℃搅拌4h。用水稀释混合物并用乙酸乙酯萃取三次，经硫酸钠干燥合并的有机相并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物，得到42mg标题化合物。C₂₆H₃₀FNO₂。MS(ESIpos)实测质量数:407.23。¹H-NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ[ppm]＝0.98(s,3H),1.29-1.62(m,4H),1.64-1.91(m,4H),2.03-2.39(m,5H),2.71-2.90(m,2H),3.44-3.55(m,2H),3.93(t,2H),4.48(t,1H),6.23–6.28(m,1H),6.59(d,1H),6.64(dd,1H),7.11(d,1H),7.67(dt,1H),8.43(d,1H),8.46–8.51(m,1H)。

实施例16

3-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}-2,2-二甲基丙-1-醇

将100mg 17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-醇、143mg(3.0当量)3-溴-2,2-二甲基丙-1-醇、198mg(5当量)碳酸钾和4mg碘化钠在3ml DMSO中的混合物在80℃搅拌18h，然后在100℃搅拌4h、在120℃搅拌18h以及在150℃搅拌5h。用水稀释混合物并用乙酸乙酯萃取三次，经硫酸钠干燥合并的有机相并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物，得到42mg标题化合物。C₂₈H₃₄FNO₂。MS(ESIpos)实测质量数:435.26。¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ[ppm]＝0.87(s,6H),0.99(s,3H),1.31-1.61(m,4H),1.71(td,1H),1.83-1.91(m,1H),2.06-2.37(m,5H),2.73-2.87(m,2H),3.23(d,2H),3.60(s,2H),4.52(t,1H),6.26(dd,1H),6.59(d,1H),6.64(dd,1H),7.11(d,1H),7.64-7.70(m,1H),8.43(d,1H),8.48(t,1H)。

实施例17

(RS)-3-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}丙-1,2-二醇

将150mg 17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-醇、143mg(3.0当量)3-溴-2,2-二甲基丙-1-醇、296mg(5当量)碳酸钾和7mg碘化钾在3ml DMSO中的混合物在120℃搅拌18h。用水稀释混合物并用乙酸乙酯萃取三次，经硫酸钠干燥合并的有机相并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物，得到26mg标题化合物。C₂₆H₃₀FNO₃。MS(ESIpos)实测质量数:435.26。¹H-NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ[ppm]＝0.99(s,3H),1.30-1.62(m,4H),1.71(td,1H),1.81–1.93(d,1H),2.02-2.39(m,5H),2.74-2.86(m,2H),3.39(t,2H),3.67-3.80(m,2H),3.90(dd,1H),4.57(t,1H),4.83(d,1H),6.26(br.s.,1H),6.55-6.71(m,2H),7.12(d,1H),7.67(dt,1H),8.40-8.52(m,2H)。

实施例18

(RS)-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}(苯基)乙酸

将100mg 17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-醇、170mg氯(苯基)乙酸乙酯(3当量)、197mg(5当量)碳酸钾和4mg碘化钠在3ml DMSO中的混合物在80℃搅拌3天。然后添加0.7ml 2M氢氧化钠水溶液，并将混合物在40℃搅拌5.5h。用水稀释反应混合物，用柠檬酸溶液酸化至pH＝4并用乙酸乙酯萃取三次。干燥合并的有机相并浓缩。通过制备型HPLC纯化，得到19mg标题化合物。

纯化方法制备型HPLC：

C₃₁H₃₀FNO₃。MS(ESIpos)实测质量数:483.22。1H-NMR(300MHz,DMSO-d6):δ[ppm]＝0.98(s,3H),1.30-1.63(m,4H),1.70(td,1H),1.81–1.91(m,1H),2.04-2.38(m,5H),2.74–2.84(m,2H),5.71(s,1H),6.23–6.27(m,1H),6.63-6.73(m,2H),7.14(d,1H),7.32-7.42(m,3H),7.48-7.54(m,2H),7.64-7.70(m,1H),8.42(d,1H),8.48(s,1H),13.1(br.s.,1H)。

实施例19

N-乙基-2-({17-[5-(三氟甲基)吡啶-3-基]雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基}氧基)乙酰胺

将66mg(3当量)1,1’-羰基二咪唑和7mg咪唑盐酸盐添加到含62mg(0.14mmol)({17-[5-(三氟甲基)吡啶-3-基]雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基}氧基)乙酸的3ml 2-甲基四氢呋喃中，并将混合物在室温下搅拌过夜。添加0.5ml DMF，并将混合物在50℃加热6h。添加0.34ml 2M乙胺的THF溶液和57微升三乙胺，并将混合物在室温下搅拌3天。用水稀释反应混合物并用乙酸乙酯萃取三次，浓缩合并的有机相并通过制备型HPLC纯化残余物。这样得到41mg标题化合物。C₂₈H₃₁F₃N₂O₂。MS(ESIpos)实测质量数:484.23.¹H-NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ[ppm]＝0.93-1.07(m,6H),1.33-1.66(m,4H),1.73(td,1H),1.83-1.92(m,1H),2.05-2.41(m,5H),2.76-2.86(m,2H),3.06-3.16(m,2H),4.34(s,2H),6.32–6.38(m,1H),6.62-6.72(m,2H),7.15(d,1H),7.97-8.06(m,2H),8.81–8.85(m,1H),8.88-8.92(m,1H)。

本发明化合物体外药理学检验

实施例20(AKR1C3抑制活性)

在下面段落所述的AKR1C3测定中测量本发明的物质的AKR1C3抑制活性。

基本上，通过定量来自Coumberone的Coumberol来测量酶活性(Halim,M.,Yee,D.J.和Sames,D.,J.AM.CHEM.SOC.130,14123–14128(2008)，以及Yee,D.J.,Balsanek,V.,Bauman,D.R.,Penning,T.M.和Sames,D.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 103,13304–13309(2006))。在该试验中，可以测定由AKR1C3进行NADPH-(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸盐)-依赖性还原非荧光Coumberone而导致的高荧光Coumberol的增加。

所用的酶是重组人AKR1C3(醛-酮还原酶家族1成员C3)(GenBank登记号NM_003739)。其在大肠杆菌(E.coli)中表达为GST(谷胱甘肽S转移酶)融合蛋白，并由谷胱甘肽琼脂糖亲合色谱纯化。通过用凝血酶消化并随后进行尺寸排阻色谱来除去GST(Dufort,I.,Rheault,P.,Huang,XF.,Soucy,P.,and Luu-The,V.,Endocrinology 140,568-574(1999))。

对于该测定，将受试物质于DMSO中的50nl 100倍浓缩溶液用移液器转移到黑色小体积384孔微量滴定板(Greiner Bio-One,Frickenhausen,Germany)中，添加AKR1C3于测定缓冲液[50mM磷酸钾缓冲液pH 7、1mM DTT、0.0022％(w/v)Pluronic F-127、0.01％BSA(w/v)和蛋白酶抑制剂混合物(来自Roche的完整的不含EDTA蛋白酶抑制剂混合物)]中的溶液(2.0μl)，并且将混合物孵育15min以使在酶反应之前所述物质与酶预结合。然后，通过添加NADPH(16.7μM→在5μl测定体积中的最终浓度为10μM)和Coumberone(0.5μM→在5μl测定体积中的最终浓度为0.3μM)于测定缓冲液中的溶液(3μl)来启动酶反应，并且将所得混合物在22℃孵育90min的反应时间。使AKR1C3的浓度适于酶制剂的相应活性，并进行调节以使测定在线性范围内进行。典型的浓度处于1nM的区域。通过添加由抑制剂EM-1404[F.Labrie等人,美国专利6,541,463,2003](2μM→在5μl测定体积中的最终浓度为1μM)组成的5μl终止液来终止反应。然后，使用合适的测量仪器(来自BMG Labtechnologies的Pherastar)，在520nm(在380nm激发)测量Coumberole的荧光。荧光强度用作所形成的Coumberole的量的量度，因此用作AKR1C3的酶活性的量度。将数据归一化(没有抑制剂的酶反应＝0％抑制；有所有其他测定组分但没有酶＝100％抑制)。通常，受试物质在相同微量滴定板上以20μM至96.8pM范围内的11种不同浓度(20μM、5.9μM、1.7μM、0.5μM、0.15μM、44nM、12.9nM、3.8nM、1.1nM、0.3nM和96.8pM，在测定前，基于100倍浓缩溶液的水平用100％DMSO通过连续1:3稀释来制备稀释系列)来试验，每一浓度测试两次，并且使用4-参数拟合来计算IC₅₀值。

如所述的那样，检验了所要求保护的药理学物质对AKR1C3酶的抑制活性(参见表1)。所要求保护的化合物表现出体外对AKR1C3的强抑制(IC₅₀值<200nM)，并且在大部分情况下甚至IC₅₀值<50nM。

表1：本发明化合物对AKR1C3的抑制(对于一些化合物，示出两次试验测定的值)

实施例21(在基于细胞的系统中试验AKR1C3抑制)

在基于细胞的系统中，使用coumberol作为AKR1C3的底物，测量了本发明所述物质对AKR1C3的抑制(Halim,M.,Yee,D.J.和Sames,D.,J.AM.CHEM.SOC.130,14123–14128(2008)，以及Yee,D.J.,Balsanek,V.,Bauman,D.R.,Penning,T.M.和Sames,D.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 103,13304–13309(2006))(参见实施例20)。

所使用的细胞系统是HEK293细胞(ATCC,USA)(细胞培养基：DMEM,1.5g葡萄糖,10％FCS,PSG)。将细胞在AKR1C3表达质粒(pCMV6-AC-AKR1C3,GenBank登记号NM_003739.4)中转染过夜(X-tremeGENE HP,Roche)。第二天上午，将细胞以40000细胞/孔的细胞密度接种在黑色96孔细胞培养板上(Greiner Bio-One,Frickenhausen,Germany)。7h后，将细胞与试验物质(以100x浓度溶解在DMSO中，终浓度为10^-11M-10^-5M)和coumberol(溶解在细胞培养基中，终浓度5x10^-6M)一起孵育过夜。下一个上午，使用适合的测量仪器(Mithras,fromBerthold)，在535nm(在355nm激发)测定coumberol的荧光。将荧光强度用作形成的coumberol的量的量度，并因此用作AKR1C3酶活性的量度。将数据标准化(没有抑制剂的转染细胞，仅DMSO＝0％抑制；转染细胞，10μM抑制剂EM-1404[F.Labrie等人.美国专利6541463,2003]＝100％抑制)，并使用4-参数拟合计算IC₅₀值。

在上述基于细胞的测定中，测定了所要求保护的药理学物质对AKR1C3酶的抑制活性(参见表2)。所述化合物显示体外对细胞AKR1C3的强抑制(IC₅₀值<300nM)，而且在大多数情况下，甚至IC₅₀值<100nM。

表2：本发明化合物对AKR1C3的抑制(对于一些化合物，示出独立的实验测定的值)

实施例化合物	细胞AKR1C3抑制IC50[nmol/l])
		1	40
1	52
		1	157
2	48
		2	68
3	49
		3	56
3	31
		8	170
8	220

实施例22(AKR1C3结合)

通过等温滴定量热法测定实施例化合物1和AKR1C3酶的结合。使用解离常数(K_D值)可以表示特定化合物的亲和力的程度。如实施例20所述制备人AKR1C3酶。对于ITC实验，通过凝胶渗透将人AKR1C3蛋白转移到由137mM NaCl、2.7mM KCl、10mM Na₂HPO₄、2mM KH₂PO₄和1mM三(2-羧基乙基)膦盐酸盐组成的PBS缓冲液中。将化合物以10mM的浓度溶解在100％DMSO中，然后用PBS缓冲液稀释。使用ITC200滴定量热计(GE Healthcare,Northampton,MA,USA)，在25℃的温度下进行等温滴定量热实验(ITC实验)。通过量热信号积分测定由注射蛋白引起的焓改变。数据用Origin 7.0(GE Healthcare,Northampton,MA,USA)分析。使用所讨论的最后一次滴定注射测定稀释热值，并在曲线拟合前减去。注射针中的蛋白浓度为80-120μM，待测化合物的浓度为5-20μM。

对于实施例化合物1，测得了230纳摩尔浓度的K_D值和-1500kcal/mol放热结合焓。

Claims (17)

1.式(I)的化合物及其盐，

其中

A表示任选地被氟、氯、腈、羟基、羧基、三氟甲基、五氟乙基、-(C＝O)CH₃、C₁-C₄-烷基、-CH₂OH、-CONH₂单取代或二取代的吡啶-3-基、嘧啶-5-基、嘧啶-4-基、吡嗪-2-基、哒嗪-4-基、哒嗪-3-基，

R¹表示-O-CR^aR^b-Y，其中

R^a和R^b相互独立地表示氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、苯基、CH₃-O-CH₂-，

-O-CR^cR^d-CR^eR^f-Y，其中

R^c、R^d、R^e、R^f表示氢，或者

R^e、R^f表示氢，并且R^c、R^d相互独立地表示甲基、乙基，或者

R^c、R^d表示氢，并且R^e、R^f相互独立地表示甲基、乙基，或者

R^d、R^e、R^f表示氢并且R^c表示甲基、乙基、三氟甲基，或者

R^c、R^d、R^f表示氢并且R^e表示甲基、乙基，R^d、R^f表示氢并且

R^c、R^e相互独立地表示甲基、乙基，

-O-CH₂CH₂CH₂-Y，

-O-CH₂C(CH₃)₂CH₂-Y，

-O-CH₂CH₂C(CH₃)₂-Y，

-O-CH₂CH₂CH(CH₃)-Y，

-O-CH₂-CH(OH)-CH₂-Y，

-CR^gR^h-CRⁱR^j-Y，其中

R^g、R^h、Rⁱ、R^j表示氢，

-CH₂CH₂CH₂-Y，

并且

Y表示-CO₂H、-OH、-(C＝O)NH₂、-(C＝O)NHC_1-4-烷基。

2.式(I)的化合物及其盐，

其中

A表示任选地被氟、氯、腈、羟基、羧基、三氟甲基、-(C＝O)CH₃、C₁-C₄-烷基单取代的吡啶-3-基、嘧啶-5-基、嘧啶-4-基、吡嗪-2-基、哒嗪-4-基、哒嗪-3-基，

R¹表示-O-CR^aR^b-Y，其中

R^a和R^b相互独立地表示氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、苯基、CH₃-O-CH₂-，

-O-CR^cR^d-CR^eR^f-Y，其中

R^c、R^d、R^e、R^f表示氢，或者

R^c、R^d表示氢并且R^e、R^f相互独立地表示甲基、乙基，或者

R^d、R^e、R^f表示氢并且R^c表示甲基、乙基，或者

R^c、R^d、R^f表示氢并且R^e表示甲基、乙基，

-O-CH₂CH₂CH₂-Y，

-O-CH₂C(CH₃)₂CH₂-Y，

-O-CH₂CH₂C(CH₃)₂-Y，

-O-CH₂CH₂CH(CH₃)-Y，

-O-CH₂-CH(OH)-CH₂-Y，或者

-CR^gR^h-CRⁱR^j-Y，其中

R^g、R^h、Rⁱ、R^j表示氢，

Y表示-CO₂H、-OH、-(C＝O)NH₂、-(C＝O)NHC_1-4-烷基。

3.式(I)的化合物及其盐，

其中

A表示任选地被氟、羧基、三氟甲基、甲基单取代的吡啶-3-基、嘧啶-5-基、哒嗪-4-基，

R¹表示-O-CR^aR^b-Y，其中

R^a和R^b表示氢，或者R^a表示氢并且R^b表示甲基、乙基、苯基或CH₃-O-CH₂-，

-O-CR^cR^d-CR^eR^f-Y，其中

R^c、R^d表示氢并且R^e、R^f表示甲基，

-O-CH₂CH₂CH₂-Y，

-O-CH₂C(CH₃)₂CH₂-Y，

-O-CH₂-CH(OH)-CH₂-Y，或者

-CH₂-CH₂-Y，并且

Y表示-CO₂H、-OH、-(C＝O)NH₂、-(C＝O)NHC_1-4-烷基。

4.式(I)的化合物及其盐，

其中

A表示5-氟吡啶-3-基、5-(三氟甲基)吡啶-3-基、5-羧基吡啶-3-基、6-甲基吡啶-3-基、嘧啶-5-基、6-甲基哒嗪-4-基，并且

R¹表示-O-CR^aR^b-CO₂H，

-O-CR^aR^b-(C＝O)NH₂，

-O-CR^aR^b-(C＝O)NHCH₂CH₃，其中

R^a和R^b表示氢，或者

R^a表示氢并且R^b表示甲基、乙基、苯基、CH₃OCH₂-，-O-CR^cR^d-CR^eR^f-CO₂H，其中

R^c、R^d表示氢并且R^e、R^f表示甲基，

-O-CH₂CH₂CH₂-OH，

-O-CH₂CH₂CH₂-CO₂H，

-O-CH₂C(CH₃)₂CH₂-OH，或者

-O-CH₂-CH(OH)-CH₂-OH。

5.式(I)的化合物及其盐，

所述化合物为

3-[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]丙酸

({17-[5-(三氟甲基)吡啶-3-基]雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基}氧基)乙酸

{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}乙酸

{[17-(6-甲基吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}乙酸

{[17-(嘧啶-5-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}乙酸

5-[3-(羧基甲氧基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-17-基]烟酸

{[17-(6-甲基哒嗪-4-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}乙酸

3-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}-2,2-二甲基丙酸

4-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}丁酸

2-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}丙酸

2-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}丁酸

2-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}-3-甲氧基丙酸

2-{[17-(3-吡啶基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}丙酸

2-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}丙酰胺

3-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}丙-1-醇

3-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}-2,2-二甲基丙-1-醇

3-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}丙-1,2-二醇

{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]氧基}(苯基)乙酸

N-乙基-2-({17-[5-(三氟甲基)吡啶-3-基]雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基}氧基)乙酰胺。

6.如权利要求1-5中任一项所述的式(I)的化合物在制备用于治疗和/或预防与AKR1C3酶相关的疾病的药物中的用途。

7.如权利要求1-5中任一项所述的式(I)的化合物在制备用于治疗和/或预防疾病子宫内膜异位症、子宫平滑肌瘤、子宫出血性病症、痛经、前列腺癌、前列腺增生、痤疮、皮脂溢、脱发、过早性成熟、多囊卵巢综合征、乳腺癌、肺癌、子宫内膜癌、肾细胞癌、膀胱癌、非霍奇金淋巴瘤、慢性阻塞性肺病(COPD)、肥胖或炎性疼痛的药物中的用途。

8.药物，其包含如权利要求1-5中任一项所述的式(I)的化合物和一种或多种其他活性化合物的组合。

9.药物，其包含如权利要求1-5中任一项所述的式(I)的化合物和惰性无毒的药学上适合的辅剂的组合。

10.如权利要求1-5中任一项所述的式(I)的化合物和一种或多种其他活性化合物的组合，或者如权利要求1-5中任一项所述的式(I)的化合物和惰性无毒的药学上适合的辅剂的组合在制备用于治疗和/或预防子宫内膜异位症、子宫平滑肌瘤、子宫出血性病症、痛经、前列腺癌、前列腺增生、痤疮、皮脂溢、脱发、过早性成熟、多囊卵巢综合征、乳腺癌、肺癌、子宫内膜癌、肾细胞癌、膀胱癌、非霍奇金淋巴瘤、慢性阻塞性肺病(COPD)、肥胖或炎性疼痛的药物中的用途。

11.抗增殖有效量的如权利要求1-5中任一项所述的至少一种式(I)化合物或如权利要求8-9中任一项所述的药物在制备用于治疗人类和动物的子宫内膜异位症的药物中的用途。

12.抗炎有效量的如权利要求1-5中任一项所述的至少一种式(I)化合物或如权利要求8-9中任一项所述的药物在制备用于治疗人类和动物的子宫内膜异位症的药物中的用途。

13.镇痛有效量的如权利要求1-5中任一项所述的至少一种式(I)化合物或如权利要求8-9中任一项所述的药物在制备用于治疗人类和动物的子宫内膜异位症的药物中的用途。

14.制备式(I)化合物的方法，

其中

A表示5-氟吡啶-3-基；

R¹表示-CH₂CH₂COOH；

在该方法中，中间体4

经Suzuki反应得到中间体5，

中间体5经羧酸酯水解进一步发生反应得到式(I)的化合物，在式(I)中，A表示5-氟吡啶-3-基并且R¹表示-CH₂CH₂COOH。

15.制备式(I)化合物的方法，

其中

A具有如权利要求1至4中任一项所定义的意义；并且

R¹表示-OCH₂COOH；

在该方法中，

中间体7

经Suzuki反应得到式(I)的化合物，在式(I)中A具有如权利要求1至4中任一项所定义的意义并且R¹表示-OCH₂COOH。

16.制备其中A表示5-(三氟甲基)吡啶-3-基并且R¹表示-OCH₂(C＝O)NHCH₂CH₃的式(I)化合物的方法，

在该方法中，其中A表示5-(三氟甲基)吡啶-3-基并且R¹表示-OCH₂COOH的式(I)化合物与乙胺反应导致得到其中A表示5-(三氟甲基)吡啶-3-基并且R¹表示-OCH₂(C＝O)NHCH₂CH₃的式(I)化合物。

17.制备式(I)化合物的方法，

在式(I)中

A具有如权利要求1至4中任一项所定义的意义，并且

R¹表示-O-CR^aR^b–Y，其中

R^a和R^b相互独立地表示氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、苯基、CH₃-O-CH₂-，

-O-CR^cR^d-CR^eR^f-Y，其中

R^c、R^d、R^e、R^f表示氢，或者

R^e、R^f表示氢，并且R^c、R^d相互独立地表示甲基、乙基，或者

R^c、R^d表示氢，并且R^e、R^f相互独立地表示甲基、乙基，或者

R^d、R^e、R^f表示氢并且R^c表示甲基、乙基，或者

R^c、R^d、R^f表示氢并且R^e表示甲基、乙基，R^d、R^f表示氢并且R^c、R^e相互独立地表示甲基、乙基，

-O-CH₂CH₂CH₂-Y，

-O-CH₂C(CH₃)₂CH₂-Y，

-O-CH₂CH₂C(CH₃)₂-Y，

-O-CH₂CH₂CH(CH₃)-Y，

-O-CH₂-CH(OH)-CH₂-Y，

Y表示-CO₂H、-OH、-(C＝O)NH₂、-(C＝O)NHC_1-4-烷基，

在该方法中，其中A具有如权利要求1至4中任一项所定义的意义的中间体9

反应得到其中A具有如权利要求1至4中任一项所定义的意义并且

R¹如下所定义的式(I)化合物，其中

R¹表示-O-CR^aR^b–Y，其中

R^a和R^b相互独立地表示氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、苯基、CH₃-O-CH₂-，

-O-CR^cR^d-CR^eR^f-Y，其中

R^c、R^d、R^e、R^f表示氢，或者

R^e、R^f表示氢，并且R^c、R^d相互独立地表示甲基、乙基，或者

R^c、R^d表示氢，并且R^e、R^f相互独立地表示甲基、乙基，或者

R^d、R^e、R^f表示氢并且R^c表示甲基、乙基，或者

R^c、R^d、R^f表示氢并且R^e表示甲基、乙基，R^d、R^f表示氢并且R^c、R^e相互独立地表示甲基、乙基，

-O-CH₂CH₂CH₂-Y，

-O-CH₂C(CH₃)₂CH₂-Y，

-O-CH₂CH₂C(CH₃)₂-Y，

-O-CH₂CH₂CH(CH₃)-Y，

-O-CH₂-CH(OH)-CH₂-Y，

Y表示-CO₂H、-OH、-(C＝O)NH₂、-(C＝O)NHC_1-4-烷基。