HK1263278B

HK1263278B - 组胺-3受体反向激动剂、乙醯胆硷酯酶抑制剂和nmda受体拮抗剂的三重组合产品

Info

Publication number: HK1263278B
Application number: HK19122527.5A
Authority: HK
Inventors: Ramakrishna Nirogi; Anil Karbhari Shinde; Abdul Rasheed Mohammed; Pradeep Jayarajan; Gopinadh Bhyrapuneni; Venkateswarlu Jasti
Original assignee: Suven Life Sciences Limited
Priority date: 2016-08-18
Filing date: 2017-08-14
Publication date: 2021-05-14

Description

组胺-3受体反向激动剂、乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂的三重组合产品

技术领域

本发明涉及与乙酰胆碱酯酶抑制剂(AChEI)和N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂组合或作为其辅助的组胺-3受体(H₃R)反向激动剂或其可药用盐。本发明还涉及该组合和含有所述组合的药物组合物在治疗认知障碍中的用途。

背景技术

阿尔茨海默病(AD)是全世界痴呆症的最常见原因。过去的和未来几十年预测的AD病例数量呈指数上升，预计同样地对发达经济体和发展中经济体的社会和医疗保健系统造成巨大压力。AD还给患者的家庭和社会带来了巨大的情感和经济负担。

目前批准用于AD的认知增强药物清单并不长，并且历史上一直关注乙酰胆碱酯酶抑制剂(多奈哌齐(donepezil)、利凡斯的明(rivastigmine)和加兰他敏(galantamine))。这些药物通过靶向乙酰胆碱酯酶(AChE)酶以抑制乙酰胆碱(ACh)水解成乙酸和胆碱来起作用。提高突触中的ACh水平可以刺激胆碱能受体并促进记忆功能。尽管乙酰胆碱酯酶抑制剂(AChEI)可以暂时延缓AD中认知功能下降的进展，但其作用是中等的。ACh存在于中枢和外周神经系统两者中，AChEI产生多种不良副作用，例如胃肠道紊乱、心动过缓和过度唾液分泌，这些副作用与对外周毒蕈碱胆碱能受体的作用有关(Expert Opinion on DrugSafety,3,2004,425–440)。AChE抑制剂类药物的限制是其耐受性差，其功效不能持续，并且随着疾病的进展其需要恒定的剂量滴度(Cochrane Database Systematic Reviews,2006,CD005593)，这导致显著的患者不顺从。这些副作用的发生率和严重程度随着剂量的提高而提高，并且通常在治疗开始时或剂量提高后更明显。因此，对用于治疗认知障碍的替代疗法存在着未满足的需求。

H₃R是G蛋白偶联受体(GPCR)，主要在皮质、海马和纹状体的前部表达。H₃R作为自受体(autoreceptor)和异受体(heteroreceptor)两者起作用。其调节在认知、情绪和感觉门控中起重要作用的多种神经递质的合成和释放。初步文献报道表明，H₃R拮抗剂可具有治疗多种CNS疾病的有希望的效用，所述疾病包括AD、精神分裂症、注意力缺陷多动障碍(attention-deficit hyperactivity disorder，ADHD)、癫痫、发作性睡病、神经性疼痛和代谢障碍。已经证明，多种研究化合物对这种受体的拮抗作用可以改善动物模型中的学习和记忆。

由于阻断H₃R会调节组胺能和胆碱能活性，可预期H₃R反向激动剂补充和/或增强AChEI的认知功能。这可以继而有助于降低副作用，同时具有更好的患者依从性，因此可以长期施用。

谷氨酸能系统也参与学习和记忆，并且是治疗阿尔茨海默病的靶标。美金刚(另一种批准用于阿尔茨海默病的治疗)通过抑制过度刺激条件下的NMDA受体而作用于谷氨酸能系统。其可以起到保护谷氨酸神经元免受过量谷氨酸刺激，同时提高信噪比的作用。已知谷氨酸神经元在与学习和记忆相关的脑区域中的胆碱能神经元上具有突触连接。

由于痴呆的原因和发展取决于不同的机制，因此使用以不同机制工作的药物组合来治疗AD可能是有利的。目前批准用于AD的治疗包括乙酰胆碱酯酶抑制剂多奈哌齐和NMDA受体拮抗剂美金刚的组合。然而，仍然需要新的药物/组合来治疗患有AD的患者。

本发明化合物是H₃R反向激动剂，其对紧密相关的受体亚型具有高亲和力和非常高的选择性，并改善动物的学习和记忆。本文提到的H₃R反向激动剂化合物描述于US9079888B2中，其通过引用并入本文。这些化合物的制备在上述专利中给出。

由于AD的治疗在本质上是慢性的，因此对于更好和更安全的治疗选择存在极度渴望的未满足的医学需求。AD患者急切寻求的治疗策略是通过辅助现有治疗来实现改善，其为患者带来额外的缓解，降低护理人员的负担，使得患者能够享受更好的生活质量而无需机构护理和/或住院治疗。

本发明提供了H₃R反向激动剂化合物或其可药用盐，其与AChEI和NMDA受体拮抗剂组合治疗以增强患者的认知功能。本发明基于以下不寻常的发现：具有H₃R反向激动剂活性的化合物、作为AChEI的化合物(例如多奈哌齐)和作为NMDA受体拮抗剂的化合物(例如美金刚)的组合在其药理活性中显示出协同作用。当水平过高时，美金刚通过阻断脑中的谷氨酸能神经传递起作用。组胺调节从皮质纹状体神经末梢释放谷氨酸。因此，从未预期H₃R反向激动剂+多奈哌齐+美金刚的组合会产生协同的促认知作用。然而出人意料的是，H₃R反向激动剂+AChEI+NMDA受体拮抗剂的组合(三重组合)在动物模型中显示出协同作用，并且还提高了乙酰胆碱水平，乙酰胆碱是在认知改善中起重要作用的神经递质。基于这些结果，可以推断H₃R反向激动剂+AChEI+NMDA受体拮抗剂的这种组合施用和/或共同治疗可以产生有益效果，以提高人中的治疗功效。此外，本发明的H₃R反向激动剂化合物或其可药用盐增强了AChEI和NMDA受体拮抗剂在治疗认知障碍中的作用。

发明内容

本发明的目的是提供改进的组合治疗，用于治疗认知障碍，例如阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease)、精神分裂症、帕金森病(Parkinson’s disease)、路易体痴呆(lewy body dementia)、血管性痴呆(vascular dementia)、额颞痴呆(frontotemporaldementia)、唐氏综合征(Down syndrome)或图雷特综合征(Tourette’s syndrome)。

第一方面，本发明涉及组胺-3受体反向激动剂、乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂的组合。

在另一方面，本发明涉及组胺-3反向激动剂、乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂的组合；其中组胺-3受体反向激动剂选自：

N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺；

N-[4-(1-环丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺；和

N-[4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺；

或其可药用盐。

在另一方面，本发明涉及组胺-3受体反向激动剂、乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂的组合；其中组胺-3受体反向激动剂是N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐。

在另一方面，本发明涉及组胺-3受体反向激动剂、乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂的组合；其中组胺-3受体反向激动剂是N-[4-(1-环丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐。

在另一方面，本发明涉及组胺-3受体反向激动剂、乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂的组合；其中组胺-3受体反向激动剂是N-[4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐。

在另一方面，本发明涉及组胺-3受体反向激动剂、乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂的组合；其中乙酰胆碱酯酶抑制剂选自多奈哌齐、加兰他敏和利凡斯的明或其可药用盐。

在另一方面，本发明涉及组胺-3受体反向激动剂、乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂的组合；其中NMDA受体拮抗剂是美金刚或其可药用盐。

在另一方面，本发明涉及N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺、多奈哌齐和美金刚或其可药用盐的组合。

在另一方面，本发明涉及N-[4-(1-环丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺、多奈哌齐和美金刚或其可药用盐的组合。

在另一方面，本发明涉及N-[4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺、多奈哌齐和美金刚或其可药用盐的组合。

在另一方面，本发明涉及所述组合，其用于治疗认知障碍。

在另一方面，本发明涉及所述组合，其用于治疗认知障碍，例如阿尔茨海默病、精神分裂症、帕金森病、路易体痴呆、血管性痴呆、额颞痴呆、唐氏综合征或图雷特综合征。

在另一方面，本发明涉及治疗认知障碍(例如阿尔茨海默病、精神分裂症、帕金森病、路易体痴呆、血管性痴呆、额颞痴呆、唐氏综合征或图雷特综合征)的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的所述组合。

在另一方面，本发明涉及组胺-3受体反向激动剂，其用于用乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂进行治疗的患者的认知障碍(例如阿尔茨海默病、精神分裂症、帕金森病、路易体痴呆、血管性痴呆、额颞痴呆、唐氏综合征或图雷特综合征)的辅助治疗。

在另一方面，本发明涉及化合物N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐，其用于用多奈哌齐和美金刚进行治疗的患者的认知障碍(例如阿尔茨海默病、精神分裂症、帕金森病、路易体痴呆、血管性痴呆、额颞痴呆、唐氏综合征或图雷特综合征)的辅助治疗。

在另一方面，本发明涉及化合物N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐，其用于与乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂组合或辅助乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂来治疗认知障碍，例如阿尔茨海默病、精神分裂症、帕金森病、路易体痴呆、血管性痴呆、额颞痴呆、唐氏综合征或图雷特综合征。

在另一方面，本发明涉及用于治疗认知障碍的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的与多奈哌齐或其可药用盐和美金刚或其可药用盐组合或作为其辅助的N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐。

在另一方面，本发明涉及组胺-3受体反向激动剂、乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂的组合用于治疗认知障碍(例如阿尔茨海默病、精神分裂症、帕金森病、路易体痴呆、血管性痴呆、额颞痴呆、唐氏综合征或图雷特综合征)的用途。

在另一方面，本发明涉及N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺、多奈哌齐和美金刚或其可药用盐用于治疗认知障碍(例如阿尔茨海默病、精神分裂症、帕金森病、路易体痴呆、血管性痴呆、额颞痴呆、唐氏综合征或图雷特综合征)的用途。

在另一方面，本发明涉及药物组合物，其包含组胺-3受体反向激动剂、乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂和可药用赋形剂或其组合。

在另一方面，本发明涉及药物组合物，其包含N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺、多奈哌齐和美金刚或其可药用盐和可药用赋形剂或其组合。

在另一方面，本发明涉及包含组胺-3受体反向激动剂、乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂或其可药用盐、以及可药用赋形剂或其组合的药物组合物，其用于治疗认知障碍，例如阿尔茨海默病、精神分裂症、帕金森病、路易体痴呆、血管性痴呆、额颞痴呆、唐氏综合征或图雷特综合征。

附图简述

图1a描绘了使用物体识别任务模型，化合物1与多奈哌齐和美金刚的共同治疗对认知增强性质的作用的结果。

图1b描绘了使用物体识别任务模型，化合物3与多奈哌齐和美金刚的共同治疗对认知增强性质的作用的结果。

图2描绘了化合物1与多奈哌齐和美金刚的组合对雄性Wistar大鼠的内侧前额叶皮质中细胞外乙酰胆碱水平的作用。

图3描绘了化合物2与多奈哌齐和美金刚的组合对雄性Wistar大鼠的内侧前额叶皮质中细胞外乙酰胆碱水平的作用。

图4描绘了化合物3与多奈哌齐和美金刚的组合对雄性Wistar大鼠的内侧前额叶皮质中细胞外乙酰胆碱水平的作用。

图5描绘了化合物1与多奈哌齐和美金刚的组合对麻醉的雄性Wistar大鼠背侧海马中诱发的θ水平的作用。

发明详述

除非另有说明，否则说明书和权利要求中使用的下列术语具有以下含义：

本文所用的术语“组胺-3受体反向激动剂”是指与组成型活性组胺-3受体结合，稳定它们并因此降低活性(负内在活性)的配体或药物。其阻断或抑制激动剂对H₃受体的功能/结合，并发挥与受体激动剂的相反的药理作用。

组胺-3受体反向激动剂的实例包括：

N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺；

N-[4-(1-环丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺；和

N-[4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺；

或其可药用盐。

上述化合物的可药用盐的实例包括但不限于N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺二盐酸盐；N-[4-(1-环丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺酒石酸盐；和N-[4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺酒石酸盐。

本文所用的术语“乙酰胆碱酯酶抑制剂”是抑制乙酰胆碱酯酶分解乙酰胆碱从而提高神经递质乙酰胆碱的水平和作用持续时间两者的化学品或药物。乙酰胆碱酯酶抑制剂的实例是多奈哌齐、利凡斯的明和加兰他敏。优选地，乙酰胆碱酯酶抑制剂是多奈哌齐和利凡斯的明。更优选地，乙酰胆碱酯酶抑制剂是多奈哌齐。

多奈哌齐是批准用于治疗阿尔茨海默病的轻度、中度和重度痴呆的药物。多奈哌齐是乙酰胆碱酯酶的可逆抑制剂，以商品名作为盐酸盐出售。

利凡斯的明是批准用于治疗阿尔茨海默病的轻度、中度和重度痴呆的药物。利凡斯的明是可逆的胆碱酯酶抑制剂，以商品名和Exelon作为酒石酸盐出售。

加兰他敏是批准用于治疗阿尔茨海默病的轻度、中度和重度痴呆的药物。加兰他敏是可逆的竞争性乙酰胆碱酯酶抑制剂，以商品名作为氢溴酸盐出售。

本文所用的术语“NMDA受体拮抗剂”是指通过抑制NMDA受体而作用于谷氨酸能系统的一类化合物。NMDA受体拮抗剂的实例是美金刚。美金刚是批准用于治疗阿尔茨海默病的中度至重度痴呆的药物。美金刚是NMDA受体拮抗剂，以商品名和Namenda作为盐酸盐出售。

美金刚和多奈哌齐的组合被批准用于治疗阿尔茨海默病的中度至重度痴呆，并以商品名Namzaric^TM作为美金刚盐酸盐和多奈哌齐盐酸盐出售。

短语“治疗有效量”定义为本发明化合物的以下量：(i)治疗特定疾病、病症或障碍，(ii)消除特定疾病、病症或障碍的一种或更多种症状，以及(iii)延迟本文所述的特定疾病、病症或障碍的一种或更多种症状的发作。

本文所用的术语“可药用盐”是指活性化合物的盐，并且通过与合适的有机酸或无机酸或酸衍生物反应制备，这取决于本文所述化合物上发现的特定取代基。

如本文所用的术语“患者”是指动物。优选地，术语“患者”是指哺乳动物。术语哺乳动物包括例如小鼠、大鼠、狗、兔、猪、猴、马和人的动物。更优选地，患者是人。

本文所用的术语“阿尔茨海默病”是指引起记忆、思维和行为问题的痴呆症。阿尔茨海默病可以是轻度至中度至重度阿尔茨海默病。

本文使用的化合物1是N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺二盐酸盐，其具有以下化学结构：

本文使用的化合物2是N-[4-(1-环丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺酒石酸盐，其具有以下化学结构：

本文使用的化合物3是N-[4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺酒石酸盐，其具有以下化学结构：

本文所用的术语“治疗”是指对哺乳动物疾病的任何治疗，包括：(a)减缓或阻止临床症状的发展；和/或(b)引起临床症状的消退。

本文所用的术语“使用的化合物(compound for use)”包括以下任何一种或更多种：(1)化合物的用途，(2)化合物的使用方法，(3)在治疗中的用途，(4)用于制备用于治疗的药物组合物/药物的用途，或(5)治疗/治疗/预防/减少/抑制的方法，包括向有此需要的对象施用有效量的活性化合物。

本文所用的术语“认知障碍”是指一组主要影响学习、记忆、感知和问题解决的精神健康障碍，包括健忘症、痴呆和谵妄。认知障碍可能由疾病、病症、障碍或毒性引起。认知障碍的实例包括但不限于阿尔茨海默病、精神分裂症、帕金森病、路易体痴呆(lewy bodydementia，LBD)、血管性痴呆、额颞痴呆(frontotemporal dementia，FTD)、唐氏综合征或图雷特综合征。优选地，认知障碍是阿尔茨海默病。

本文所用的术语“辅助”或“辅助治疗”是指对已经接受对于认知障碍的至少一种其他治疗的患者的额外治疗。向患者施用用作辅助治疗的药物以使初始治疗更好地起作用。

实施方案

本发明涵盖本文所述的所有组合而没有限制，然而，本文以以下实施方案的形式讨论了本发明的一些优选方面和要素。

在一个实施方案中，本发明涉及组胺-3受体反向激动剂、乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂的组合；其中组胺-3受体反向激动剂是N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺二盐酸盐。

在另一个实施方案中，本发明涉及组胺-3受体反向激动剂、乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂的组合；其中组胺-3受体反向激动剂是N-[4-(1-环丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺酒石酸盐。

在另一个实施方案中，本发明涉及组胺-3受体反向激动剂、乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂的组合；其中组胺-3受体反向激动剂是N-[4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺酒石酸盐。

在另一个实施方案中，本发明涉及N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺、利凡斯的明和美金刚或其可药用盐的组合。

在另一个实施方案中，本发明涉及N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺、加兰他敏和美金刚或其可药用盐的组合。

在另一个实施方案中，本发明涉及N-[4-(1-环丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺、利凡斯的明和美金刚或其可药用盐的组合。

在另一个实施方案中，本发明涉及N-[4-(1-环丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺、加兰他敏和美金刚或其可药用盐的组合。

在另一个实施方案中，本发明涉及N-[4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺、利凡斯的明和美金刚或其可药用盐的组合。

在另一个实施方案中，本发明涉及N-[4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺、加兰他敏和美金刚或其可药用盐的组合。

在另一个实施方案中，本发明涉及N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺二盐酸盐、多奈哌齐盐酸盐和美金刚盐酸盐的组合。

在另一个实施方案中，本发明涉及N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺二盐酸盐、利凡斯的明酒石酸盐和美金刚盐酸盐的组合。

在另一个实施方案中，本发明涉及N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺二盐酸盐、加兰他敏氢溴酸盐和美金刚盐酸盐的组合。

在另一个实施方案中，本发明涉及N-[4-(1-环丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺酒石酸盐、多奈哌齐盐酸盐和美金刚盐酸盐的组合。

在另一个实施方案中，本发明涉及N-[4-(1-环丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺酒石酸盐、利凡斯的明酒石酸盐和美金刚盐酸盐的组合。

在另一个实施方案中，本发明涉及N-[4-(1-环丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺酒石酸盐、加兰他敏氢溴酸盐和美金刚盐酸盐的组合。

在另一个实施方案中，本发明涉及N-[4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺酒石酸盐、多奈哌齐盐酸盐和美金刚盐酸盐的组合。

在另一个实施方案中，本发明涉及N-[4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺酒石酸盐、利凡斯的明酒石酸盐和美金刚盐酸盐的组合。

在另一个实施方案中，本发明涉及N-[4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺酒石酸盐、加兰他敏氢溴酸盐和美金刚盐酸盐的组合。

在另一个实施方案中，本发明提供了组胺-3受体反向激动剂、乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂的组合，其比组胺-3受体反向激动剂和乙酰胆碱酯酶抑制剂、乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂、或组胺-3受体反向激动剂和NMDA受体拮抗剂的组合更有效。

在另一个实施方案中，本发明提供了组胺-3受体反向激动剂、乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂的组合，其比单独组胺-3受体反向激动剂、单独乙酰胆碱酯酶抑制剂和单独NMDA受体拮抗剂更有效。

在另一个实施方案中，本发明提供了N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺二盐酸盐、多奈哌齐盐酸盐和美金刚盐酸盐的组合，其比N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺二盐酸盐和多奈哌齐盐酸盐、多奈哌齐盐酸盐和美金刚盐酸盐、或N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺二盐酸盐和美金刚盐酸盐更有效。

在另一个实施方案中，本发明提供了N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺二盐酸盐、多奈哌齐盐酸盐和美金刚盐酸盐的组合，其比单独N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺二盐酸盐、单独多奈哌齐盐酸盐和单独美金刚盐酸盐更有效。

在另一个实施方案中，组胺-3受体反向激动剂的可药用盐包括但不限于二盐酸盐、草酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐等。优选地，可药用盐是二盐酸盐和酒石酸盐。更优选地，可药用盐是二盐酸盐。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗阿尔茨海默病的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的所述组合。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗阿尔茨海默病的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐、乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗阿尔茨海默病的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的N-[4-(1-环丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐、乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗阿尔茨海默病的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的N-[4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐、乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗阿尔茨海默病的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的与乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂组合的N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗阿尔茨海默病的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的与乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂组合的N-[4-(1-环丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗阿尔茨海默病的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的与乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂组合的N-[4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗阿尔茨海默病的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的与乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂组合的N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺二盐酸盐。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗阿尔茨海默病的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的与乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂组合的N-[4-(1-环丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺酒石酸盐。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗阿尔茨海默病的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的与乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂组合的N-[4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺酒石酸盐。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗阿尔茨海默病的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的与多奈哌齐或其可药用盐和美金刚或其可药用盐组合的N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺二盐酸盐。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗阿尔茨海默病的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的与多奈哌齐盐酸盐和美金刚盐酸盐组合的N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺二盐酸盐。

在另一个实施方案中，本发明涉及N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺二盐酸盐、乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂的组合，其用于治疗阿尔茨海默病。

在另一方面，本发明涉及N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐，其用于用乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂进行治疗的患者中阿尔茨海默病的辅助治疗。

在另一方面，本发明涉及N-[4-(1-环丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐，其用于用乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂进行治疗的患者中阿尔茨海默病的辅助治疗。

在另一方面，本发明涉及N-[4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐，其用于用乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂进行治疗的患者中阿尔茨海默病的辅助治疗。

在另一个实施方案中，本发明涉及N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺二盐酸盐，其用于用多奈哌齐和美金刚或其可药用盐进行治疗的患者中阿尔茨海默病的辅助治疗。

在另一个实施方案中，本发明涉及N-[4-(1-环丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺酒石酸盐，其用于用多奈哌齐和美金刚或其可药用盐进行治疗的患者中阿尔茨海默病的辅助治疗。

在另一个实施方案中，本发明涉及N-[4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺酒石酸盐，其用于用多奈哌齐和美金刚或其可药用盐进行治疗的患者中阿尔茨海默病的辅助治疗。

在另一个实施方案中，本发明涉及组胺-3受体反向激动剂、乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂的组合在制备用于治疗阿尔茨海默病的药物中的用途。

在另一个实施方案中，本发明涉及组胺-3受体反向激动剂在制备药物中的用途，所述药物与乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂组合用于治疗阿尔茨海默病。

在另一个实施方案中，本发明涉及组胺-3受体反向激动剂在制备药物中的用途，所述药物作为乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂的辅助用于治疗阿尔茨海默病。

在另一个实施方案中，本发明涉及N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐在制备药物中的用途，所述药物与多奈哌齐或其可药用盐和美金刚或其可药用盐组合用于治疗阿尔茨海默病。

在另一个实施方案中，本发明涉及N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺二盐酸盐在制备药物中的用途，所述药物与多奈哌齐或其可药用盐和美金刚或其可药用盐组合用于治疗阿尔茨海默病。

在另一个实施方案中，本发明涉及N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺二盐酸盐在制备药物中的用途，所述药物与多奈哌齐盐酸盐和美金刚盐酸盐组合用于治疗阿尔茨海默病。

在另一个实施方案中，本发明涉及组胺-3受体反向激动剂，其与Namzaric^TM组合用于治疗阿尔茨海默病。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗阿尔茨海默病的方法，包括向有此需要的患者施用治疗有效量的与Namzaric^TM组合的组胺-3受体反向激动剂。

在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗阿尔茨海默病的组合，其中阿尔茨海默病是轻度阿尔茨海默病。

在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗阿尔茨海默病的组合，其中阿尔茨海默病是中度阿尔茨海默病。

在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗阿尔茨海默病的组合，其中阿尔茨海默病是重度阿尔茨海默病。

在另一个实施方案中，本发明涉及组合，其中活性成分可以同时或分开施用于患者。

在另一个方面，本发明组合的活性成分通常通过根据标准药学实践将活性成分配制成药物组合物来施用。

在另一个方面，本发明组合的活性成分可以通过经口、鼻、局部、皮肤或肠胃外途径施用。

在另一个方面，本发明组合的活性成分可以通过相同或不同的施用途径施用。例如，本发明的组胺-3受体反向激动剂可以经口施用，乙酰胆碱酯酶抑制剂可以透皮施用，并且NMDA受体拮抗剂可以局部施用。

可以使用一种或更多种可药用赋形剂以常规方式配制本发明的药物组合物。可药用赋形剂是稀释剂、崩解剂、黏合剂、润滑剂、助流剂、聚合物、包衣剂、溶剂、共溶剂、防腐剂、润湿剂、增稠剂、消泡剂、甜味剂、调味剂、抗氧化剂、着色剂、增溶剂、增塑剂、分散剂等。赋形剂选自微晶纤维素、甘露醇、乳糖、预胶化淀粉、羟基乙酸淀粉钠、玉米淀粉或其衍生物、聚维酮、交联聚维酮、硬脂酸钙、单硬脂酸甘油酯、棕榈酸硬脂酸甘油酯、滑石、胶体二氧化硅、硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、硬脂酰富马酸钠、硬脂酸锌、硬脂酸或氢化植物油、阿拉伯树胶、氧化镁、葡萄糖、脂肪、蜡、天然或硬化油、水、生理氯化钠溶液或醇(例如乙醇、丙醇或甘油)、糖溶液(例如葡萄糖溶液或甘露醇溶液)等或多种赋形剂的混合物。

在另一个方面，本发明的活性化合物可以配制成丸剂、片剂、包衣片剂、胶囊剂、散剂、颗粒剂、微丸剂(pellet)、贴剂、植入物、膜、液体、半固体、凝胶、气溶胶、乳剂、酏剂等。这样的药物组合物及其制备方法是本领域熟知的。

在另一方面，本发明的药物组合物含有按重量计1至90％、5至75％和10至60％的本发明化合物或其可药用盐。药物组合物中活性化合物或其可药用盐的量可以为约0.1mg至约100mg或约0.1mg至约60mg或约0.1mg至约30mg或落入0.1mg至100mg的较宽范围内的任何范围。

在另一个方面，本发明组合的药物组合物可以是常规制剂，例如立即释放制剂，修改的释放制剂如持续释放制剂、延迟释放制剂和延长释放制剂，或新的递送系统，例如经口崩解制剂和透皮贴剂。

活性化合物的剂量可以根据因素如患者的年龄和体重、性质、施用途径和待治疗疾病的严重程度等因素而变化。因此，关于化合物1、2和3的药理学有效量的任何参考是指上述因素。

在另一方面，组胺-3受体反向激动剂可与乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂共同施用，日剂量为0.1mg至100mg；例如0.1、0.5、0.75、1、1.5、3、5、6、10、20、25、30、50、75和100mg，优选日剂量为0.1、3、5、6、10、20、25、30或50mg，最优选日剂量为0.5、3、5、10或20mg。

在另一个方面，乙酰胆碱酯酶抑制剂可以与组胺-3受体反向激动剂和NMDA受体拮抗剂共同施用，日剂量为1mg至30mg；例如1、1.5、2、3、4、4.5、5、6、8、9.5、10、12、13、13.3、15、16、23、24、25或30mg，优选日剂量为1、1.5、2、3、4、4.5、5、6、8、9.5、10、12、13、13.3、16、23、24或25mg，最优选日剂量为1.5、3、4、4.5、5、6、8、9.5、10、12、13.3、16、23或24。

在另一方面，NMDA受体拮抗剂美金刚可与组胺-3受体反向激动剂和乙酰胆碱酯酶抑制剂共同施用，日剂量为1mg至40mg；例如5、7、10、14、20、28或40mg，优选日剂量为5、7、10、14、20或28mg，最优选日剂量为5、10、14、20或28mg。

在另一个方面，乙酰胆碱酯酶抑制剂多奈哌齐可与组胺-3受体反向激动剂和NMDA受体拮抗剂共同施用，日剂量为2mg至30mg；例如2、5、10、15、23、25或30mg,，优选日剂量为2、5、10、23或25mg，最优选日剂量为5、10或23mg。

在另一方面，乙酰胆碱酯酶抑制剂利凡斯的明可与组胺-3受体反向激动剂和NMDA受体拮抗剂共同施用，日剂量为0.5mg至15mg；例如1、1.5、3、4.5、5、6、9.5、10或13.3mg，优选日剂量为1、1.5、3、4.5、5、6、9.5或13.3mg，最优选日剂量为1.5、3、4.5、6、9.5和13.3mg。

在另一方面，乙酰胆碱酯酶抑制剂加兰他敏可与组胺-3受体反向激动剂和NMDA受体拮抗剂共同施用，日剂量为1mg至30mg；例如1、2、4、6、8、12、16、24和30mg，优选日剂量为2、4、6、8、12、16和24mg，最优选日剂量为4、8、12、16和24mg。

在另一个方面，治疗包括每天向患者施用0.1mg至100mg的N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐。

在另一个方面，治疗包括每天向患者施用0.1mg至60mg的N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐。

在另一个方面，治疗包括每天向患者施用0.1mg至30mg的N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐。

在另一方面，治疗包括每天向患者施用1mg至25mg的多奈哌齐或其可药用盐。

在另一方面，治疗包括每天向患者施用5mg至25mg的多奈哌齐或其可药用盐。

在另一方面，治疗包括每天向患者施用5、10或23mg的多奈哌齐或其可药用盐。

在另一方面，治疗包括每天向患者施用1mg至40mg的美金刚或其可药用盐。

在另一方面，治疗包括每天向患者施用5mg至30mg的美金刚或其可药用盐。

在另一方面，治疗包括每天向患者施用5、10、14、20或28mg的美金刚或其可药用盐。

在另一方面，治疗包括每天一至三次、每周一至三次或每月一至三次向患者施用活性化合物。优选地，治疗包括每天一次、每天两次或每天三次向患者施用化合物。更优选地，治疗包括每天一次向患者施用化合物。

实施例

以下给出的实施例仅以示例的方式提供，因此不应解释为限制本发明的范围。

缩写：

ANOVA ：方差分析

AP ：前后向(Anterior Posterior)

aCSF ：人工脑脊液

CaCl₂.2H₂O ：氯化钙二水合物

DV ：背腹侧(Dorsal Ventral)

DTT ：二硫苏糖醇

EC₅₀ ：半数最大有效浓度

EDTA ：乙二胺四乙酸

EEG ：脑电图

GDP ：鸟苷二磷酸

GPCR ： G蛋白偶联受体

HCl ：盐酸

h ：小时

HEPES ： 4-(2-羟乙基)哌嗪-1-乙磺酸

i.p. ：腹膜内

i.v. ：静脉内

KCl ：氯化钾

K_b ：结合常数

K_i ：抑制常数

LC-MS/MS ：液相色谱-质谱/质谱

mg ：毫克

MgCl₂ ：氯化镁

min ：分钟

ML ：内外侧(Medial Lateral)

mM ：毫摩

nmol/L ：纳摩尔每升

NaCl ：氯化钠

NaH₂PO₄.2H₂O ：磷酸二氢钠二水合物

Na₂HPO₄.7H₂O ：磷酸一氢钠七水合物

NPO ：脑桥吻核(Nucleus Pontis Oralis)

nM ：纳摩

p.o. ：经口

s.c. ：皮下

S.E.M. ：平均值的标准误差

μM ：微摩

θ ： Theta

实施例1：确定人和大鼠组胺-3受体的K_i值

根据以下程序评估受试化合物以确定人和大鼠组胺-3受体的K_i值。

材料和方法：

受体来源：大鼠脑额叶皮质或在CHO细胞中表达的重组人cDNA

放射性配体：[3H]R-α-甲基组胺

最终配体浓度：[3.0nM]

非特异性决定簇：R-α-甲基组胺(100μM)

参考化合物：R-α-甲基组胺

阳性对照：R-α-甲基组胺

孵育条件：

将提高浓度的受试化合物或标准品与膜受体和放射性配体在5mM MgCl₂和50mMTRIS-HCl(pH 7.4)中在室温下孵育60分钟。通过在玻璃纤维过滤器上快速真空过滤终止反应。确定在过滤器上捕获的放射性，并与对照值比较，以确定受试化合物与克隆的人或大鼠受体结合位点的任何相互作用。

结果：

ND-未进行

参考：

Br J Pharmacol.,2008,154(6):1166–1181.

实施例2：确定组胺-3受体的IC₅₀值

根据以下程序评估受试化合物以确定IC₅₀值。

材料和方法：

受体来源：人重组(CHO-K1细胞)

放射性配体：[35S]-GTPγS

最终配体浓度：[0.3nM]

参考化合物：噻普酰胺(Thioperamide)

阳性对照：噻普酰胺

孵育条件：

在30℃下将提高浓度的受试化合物和/或载剂与膜(0.09mg/mL)和10μM GDP在改良的HEPES pH 7.4缓冲液(20mM HEPES，pH 7.4,100mM NaCl，10mM MgCl₂,1mM EDTA)中预孵育20分钟，然后添加SPA珠并再孵育60分钟。通过0.3nM[³⁵S]GTPγS引发反应以进行另外30分钟的孵育期。相对于3μM R(-)-α-甲基组胺响应，受试化合物诱导的[³⁵S]GTPγS结合提高50％或更多(≥50％)表明可能具有组胺-3受体激动剂活性。受试化合物诱导对0.03μM R(-)-α-甲基组胺诱导之[³⁵S]GTPγS结合响应之提高的50％或更多(≥50％)的抑制表明受体拮抗剂活性。进行这些研究，并使用如上所述的标准放射性配体结合技术在台湾的Eurofins Panlabs Taiwan Ltd分析数据。

结果：

化合物1在人重组组胺-3受体的GTPγS测定中显示出反向激动剂样特性，IC₅₀值为20nM。

参考：

J.Neurochem.,1998,71(2):808-816.

实施例3：物体识别任务模型

使用该模型评估本发明化合物的认知增强特性。

使用雄性Wistar大鼠(8-10周龄)作为实验动物。每笼饲养四只动物。从实验前一天开始，动物保持20％的食物剥夺。在整个实验过程中提供随意饮水。在温度和湿度受控的室内将动物维持在12小时光/暗循环。实验在由丙烯酸制成的开放区域中进行。在第1天，在没有任何物体的情况下，使大鼠适应独立场地(开放区域)。

在熟悉(T₁)和选择(T₂)试验之前，大鼠在适应的当天接受载剂、多奈哌齐和美金刚，或受试化合物、多奈哌齐和美金刚。在熟悉阶段(T₁)期间，将大鼠单独放置在场地中3分钟，其中两个相同物体(a₁和a₂)位于离壁10cm处。在T₁之后24小时，评估长期记忆测试试验。将相同大鼠置于与其在T₁试验中相同的场地中。在选择阶段(T₂)期间，允许大鼠在熟悉的物体的复制品(a₃)和一个新物体(b)的存在下探索场地3分钟。在T₁和T₂试验期间，使用秒表记录每个物体的探索(定义为嗅探、舔、咀嚼或在鼻子以小于1cm的距离指向物体的同时移动鼻毛)

T₁是探索熟悉物体所花费的总时间(a₁+a₂)。

T₂是探索熟悉物体和新物体所花费的总时间(a₃+b)。

辨别指数是在选择试验(T₂)中探索新物体所花费的时间除以探索新物体和熟悉物体所花费的时间的总和。

如Behavioural Brain Research,1988,31,47-59中所述进行物体识别测试。

结果：

载剂处理的动物花费几乎相等的时间来探索新物体和熟悉物体。用受试化合物、多奈哌齐和美金刚的组合处理的组花费了明显更多的时间来探索新物体。与载剂处理相比，在用多奈哌齐和美金刚处理的组中未观察到辨别指数的显著提高。然而，用受试化合物、多奈哌齐和美金刚共同处理的组显示出记忆终点(辨别指数)的显著改善。该促认知作用表明受试化合物对多奈哌齐和美金刚的促认知作用具有增强作用。该研究的结果在图1a和1b中提供。

实施例4：评估雄性Wistar大鼠的内侧前额叶皮质中乙酰胆碱的调节

通过该模型评估三重组合的神经递质调节作用。

在异氟烷麻醉下，在雄性Wistar大鼠(240至300g体重)的内侧前额叶皮质(mPFC；AP:+3.2mm,ML:-0.5mm,DV:-3.0mm)中立体定位植入微透析导管。根据大鼠脑图谱(Paxinos和Watson，2004)得到坐标，参考点取自前囟并且垂直于颅骨。允许大鼠在圆底有机玻璃(Plexiglas)碗中单独恢复4天，自由使用饲料和水。

在手术恢复4天后，将雄性Wistar大鼠连接到平衡杠杆臂上的双石英衬里的双通道液体旋转装置(Instech，UK)上，这允许动物的不受限制的运动。在研究开始前16小时，通过导管将预平衡的微透析探针(2mm透析膜)插入mPFC中。在研究当天，使用人工脑脊液(aCSF；NaCl 147mM,KCl 2.7mM,MgCl₂ 1mM,CaCl₂.2H₂O 1.2mM,pH 7.4)以1.5μL/分钟的流速灌注探针，并维持2小时的稳定期。在用受试化合物(3或10mg/kg，p.o.)或载剂处理之前，以20分钟的间隔收集五份基础样品。在施用受试化合物之后30分钟施用多奈哌齐(1mg/kg,s.c.)和美金刚(1mg/kg,s.c.)。在受试化合物处理之后再收集透析液样品4小时。在分析之前将透析液储存在-50℃以下。

乙酰胆碱的定量：

使用基于LC-MS/MS的方法定量透析液中的乙酰胆碱浓度。

统计分析：

将乙酰胆碱的所有微透析数据绘制为相对于平均透析液基础浓度的百分比变化，100％定义为五个给药前值的平均值。使用双向方差分析(时间和处理)然后Bonferroni后检验将乙酰胆碱水平的百分比变化与多奈哌齐和美金刚组合进行比较。计算乙酰胆碱水平的百分比变化的曲线下面积(AUC)值，并使用非配对“t”检验再次相对于多奈哌齐和美金刚处理比较平均AUC值之间的统计学显著性。在p值小于0.05时认为是统计学显著的。不正确的探针放置被视为排除动物数据的标准。

参考：

1.Paxinos G.and Watson C.(2004)Rat brain in stereotaxiccoordinates.Academic Press,New York.

结果：化合物1

用多奈哌齐和美金刚处理使乙酰胆碱水平提高至最大值为基础水平的1726±297％。与多奈哌齐和美金刚组合相比，化合物1、多奈哌齐和美金刚组合后乙酰胆碱的提高显著更高。在三重组合之后，观察到乙酰胆碱的平均最大提高为给药前水平的2968±585(图2(a))。

与多奈哌齐和美金刚组合相比，在化合物1、多奈哌齐和美金刚处理后计算的平均曲线下面积值(AUC)显著更高(图2(b))。

化合物2

用多奈哌齐和美金刚处理使乙酰胆碱水平提高至最大值为基础水平的1365±249％。与多奈哌齐和美金刚组合相比，化合物2、多奈哌齐和美金刚组合后乙酰胆碱的提高显著更高。在三重组合之后，观察到乙酰胆碱的平均最大提高为给药前水平的2696±504％(图3(a))。

与多奈哌齐和美金刚组合相比，在化合物2、多奈哌齐和美金刚处理后计算的平均曲线下面积值(AUC)显著更高(图3(b))。

化合物3

用多奈哌齐和美金刚处理使乙酰胆碱水平提高至最大值为基础水平的1375±461％。与多奈哌齐和美金刚组合相比，化合物3、多奈哌齐和美金刚组合后乙酰胆碱的提高显著更高。在三重组合之后，观察到乙酰胆碱的平均最大提高为给药前水平的2674±271(图4(a))。

与多奈哌齐和美金刚组合相比，在化合物3、多奈哌齐和美金刚处理后计算的曲线下平均面积值(AUC)显著更高(图4(b))。

实施例5：评估麻醉的雄性Wistar大鼠背侧海马中的θ调节

使用该模型评估三重组合对作为药效学终点的脑活动的影响。

通过腹膜内施用氨基甲酸乙酯(1.2至1.5g/kg)麻醉雄性Wistar大鼠(240至320g)，用于在左股静脉中植入导管。将动物置于立体定位框架中，用于将电极(不锈钢丝，Plastics One)植入背侧海马(AP:–3.8mm；ML:+2.2mm；DV:–2.5mm；Paxinos和Watson,2004)。将双极刺激电极(无捻不锈钢丝，其尖端间隔0.75-1.0mm，Plastics One)植入Nucleus Pontis Oralis(NPO；AP:–7.8mm；ML:1.8mm；DV:–6.0mm；Paxinos和Watson,2004)。另外，将一个电极植入小脑中作为参考。通过使用Grass S88刺激器和PSIU6刺激隔离装置(Grass Medical Instruments,Quincy,MA)以0.01序列/秒的速率递送至NPO的6秒电刺激序列(20-160μA,0.3-ms脉冲持续时间,250Hz)诱发海马θ节律。使用Ponemah(版本5.2)软件以1000Hz的速率记录EEG，并存储用于使用NeuroScore(版本3.0)进行离线分析。通过使用在控制条件下将θ节律引导至最大幅度的50％所需的电流来实现基线幅度水平。在1小时的稳定期后，进行基线记录30分钟，然后用载剂或化合物1(1mg/kg,i.v.)处理。在化合物1处理之后30分钟施用多奈哌齐(0.3mg/kg,i.v.)和美金刚(0.3mg/kg,i.v.)并继续记录另外1小时。

统计分析：

计算在30分钟基线期间的刺激期中的θ节律频率的功率，并计算处理之后这些测量值的％变化。使用双向方差分析(时间和处理)然后Bonferroni后检验，将化合物1、多奈哌齐和美金刚的三重组合之后的相对θ功率的百分比变化与多奈哌齐和美金刚进行比较。在p值小于0.05时认为是统计学显著的。

参考：

结果：

用多奈哌齐和美金刚胺组合处理产生海马θ功率的适度提高。化合物1与多奈哌齐和美金刚组合产生θ功率水平的显著提高，并且峰值水平达到给药前水平的167±11％。观察到三重组合中的效果显著高于多奈哌齐和美金刚的组合(图5(a))。

与多奈哌齐和美金刚组合相比，化合物1、多奈哌齐和美金刚处理之后计算的平曲线下面积值(AUC)显著更高(图5(b))。

Claims

1.包含组胺-3受体反向激动剂、乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂的用于治疗患者的认知障碍组合产品；其中所述组胺-3受体反向激动剂选自：N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺；

N-[4-(1-环丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺；或

N-[4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺；

或其可药用盐；

乙酰胆碱酯酶抑制剂是多奈哌齐或其可药用盐，并且所述NMDA受体拮抗剂是美金刚或其可药用盐。

2.如权利要求1所述的组合产品，其中所述组胺-3受体反向激动剂是N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐。

3.如权利要求1所述的组合产品，其中所述可药用盐选自，

N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺二盐酸盐；

N-[4-(1-环丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺酒石酸盐；或

N-[4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺酒石酸盐。

4.如权利要求1、2或3中任一项所述的组合产品，其中所述组胺-3受体反向激动剂是N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺二盐酸盐。

5.如权利要求1所述的组合产品，其中所述乙酰胆碱酯酶抑制剂是多奈哌齐盐酸盐。

6.如权利要求1所述的组合产品，其中所述NMDA受体拮抗剂是美金刚盐酸盐。

7.包含N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺二盐酸盐、多奈哌齐盐酸盐和美金刚盐酸盐的组合产品。

8.如权利要求1至7中任一项所述的组合产品，其用于治疗患者的认知障碍。

9.如权利要求8所述的组合产品，其中所述认知障碍选自阿尔茨海默病、精神分裂症、帕金森病、路易体痴呆、血管性痴呆、额颞痴呆、唐氏综合征或图雷特综合征。

10.如权利要求1至7中任一项所述的组合产品在制备用于在有此需要的患者中治疗认知障碍的药物中的用途。

11.如权利要求10所述的组合产品的用途，其中所述认知障碍选自阿尔茨海默病、精神分裂症、帕金森病、路易体痴呆、血管性痴呆、额颞痴呆、唐氏综合征或图雷特综合征。

12.包含N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐、乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂的组合产品，其用于治疗患者的阿尔茨海默病；其中所述乙酰胆碱酯酶抑制剂是多奈哌齐或其可药用盐，并且所述NMDA受体拮抗剂是美金刚或其可药用盐。

13.如权利要求12所述的组合产品，(a)其中所述N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐、乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂组合施用以用于治疗患者，或者

(b)其中所述N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐作为用乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂进行稳定治疗的患者的辅助治疗来施用；其中所述乙酰胆碱酯酶抑制剂是多奈哌齐或其可药用盐，并且所述NMDA受体拮抗剂是美金刚或其可药用盐。

14.如权利要求12所述的组合产品在制备用于治疗患者的阿尔茨海默病的药物中的用途，

(a)其中每天向所述患者施用0.1mg至100mg的N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐，或者

(b)其中每天向所述患者施用0.1mg至60mg的N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐，或者

(c)其中每天向所述患者施用0.1mg至30mg的N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐，并且

(d)其中每天向所述患者施用1mg至30mg的多奈哌齐或其可药用盐，并且

(e)其中每天向所述患者施用1mg至40mg的美金刚或其可药用盐。

15.药物组合物，其包含如权利要求1至7中任一项所述的组合产品，以及可药用赋形剂。

16.如权利要求15所述的药物组合物，其用于治疗选自阿尔茨海默病、精神分裂症、帕金森病、路易体痴呆、血管性痴呆或额颞痴呆的认知障碍。

17.如权利要求15所述的药物组合物，(a)其中所述N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐的存在量为0.1mg至100mg，或者

(b)其中所述N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐的存在量为0.1mg至60mg，或者

(c)其中所述N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐的存在量为0.1mg至30mg，并且

(d)其中所述多奈哌齐或其可药用盐的存在量为2mg至30mg，并且

(e)其中所述美金刚或其可药用盐的存在量为1mg至40mg。

18.如权利要求12或权利要求13所述的组合产品在制备用于治疗患者的阿尔茨海默病的药物中的用途，其中将N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐经口或肠胃外途径施用于所述患者。

19.如权利要求18所述的用途，其中将N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐经局部途径施施用于所述患者。

20.如权利要求18所述的用途，其中将N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐经鼻或皮肤途径施用于所述患者。

21.如权利要求12或权利要求13所述的组合产品在制备用于治疗患者的阿尔茨海默病的药物中的用途，其中将N-[4-(1-环丁基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-(吗啉-4-基)乙酰胺或其可药用盐以每天一至三次、每周一至三次或每月一至三次施用于所述患者。