HK1244019B - Fusion proteins - Google Patents

Claims (23)

1. Fusionsprotein, umfassend:

   a) einen Insulinrezeptoragonisten mit der allgemeinen Formel Z₁-Z₂-Z₃, wobei:

   i) Z₁ ein Insulin-B-Kettenanalogon ist, umfassend die Aminosäuresequenz: X₁X₂X₃QHLCGSHLVEALX₄LVCGERGFX₅YX₆X₇X₈X₉, wobei X₁ F, Q oder A ist; X₂ V oder G ist; X₃ N, K, D, G, Q, A oder E ist; X₄ E, Y, Q oder H ist; X₅ H oder F ist; X₆ G, T, S, H oder V ist oder fehlt; X₇ G, E, P, K, D, S oder H ist oder fehlt; X₈ G, E, K, P, Q, D oder H ist oder fehlt; X₉ G, T, S, E, K oder A ist oder fehlt, vorausgesetzt, dass das Insulin-B-Kettenanalogon mindestens eine Modifikation von der Aminosäuresequenz der B-Kette eines Moleküls von humanem Insulin an X₄, X₅, X₆, X₇, X₈ oder X₉ beinhaltet (SEQ ID Nr. 1);

   ii) Z₂ ein erster Peptid-Linker ist, der 5 bis 10 Aminosäuren umfasst, wobei mindestens 5 der Aminosäuren G-Reste sind; und

   iii) Z₃ ein Insulin-A-Kettenanalogon ist, umfassend die Aminosäuresequenz: GIVEQCCTSX₁CSLX₂QLENYCX₃X₄, wobei X₁ T oder I ist; X₂ D, Y, Q oder E ist; X₃ G, N, S oder A ist und X₄ eine beliebige natürlich vorkommende Aminosäure ist oder fehlt, vorausgesetzt, dass, wenn X₃ N ist, X₄ eine Aminosäure sein muss, bei der es sich nicht um G oder N handelt (SEQ ID Nr. 2);

   b) einen zweiten Peptid-Linker mit zwischen 10 und 25 Aminosäuren, wobei mindestens 50 % der Aminosäuren G-Reste sind; und

   c) eine humane IgG-Fc-Region; wobei der C-terminale Rest des Insulinrezeptoragonisten direkt an den N-terminalen Rest des zweiten Peptid-Linkers fusioniert ist und der C-terminale Rest des zweiten Peptid-Linkers direkt an den N-terminalen Rest der humanen IgG-Fc-Region fusioniert ist.
2. Fusionsprotein nach Anspruch 1, wobei:

   das Insulin-B-Kettenanalogon mindestens eine Modifikation von der Aminosäuresequenz der humanen Insulin-B-Kette an X₄ oder X₅ von SEQ ID Nr. 1 beinhaltet und

   das Insulin-A-Kettenanalogon mindestens eine Modifikation von der Aminosäuresequenz der humanen Insulin-A-Kette an X₁ oder X₂ von SEQ ID Nr. 2 beinhaltet.
3. Fusionsprotein nach einem der Ansprüche 1 oder 2, wobei:

   das Insulin-B-Kettenanalogon die Sequenz von SEQ ID Nr. 1 umfasst, wobei: X₁ F ist; X₂ V ist; X₃ N oder D ist; X₄ E ist; X₅ H ist; und

   das Insulin-A-Kettenanalogon die Sequenz von SEQ ID Nr. 2 umfasst, wobei: X₁ I oder T ist; X₂ D ist; X₃ G ist und X₄ fehlt.
4. Fusionsprotein nach einem der Ansprüche 1-3, wobei das Insulin-B-Kettenanalogon die Sequenz von SEQ ID Nr. 1 umfasst, wobei X₆-X₉ jeweils G sind.
5. Fusionsprotein nach einem der Ansprüche 1-4, wobei der erste Peptid-Linker die folgende Aminosäuresequenz umfasst: X₁GX₂GGGG, wobei X₁ G ist oder fehlt und X₂ G oder S ist oder fehlt (SEQ ID Nr. 3).
6. Fusionsprotein nach Anspruch 5, wobei X₁ und X₂ von SEQ ID Nr. 3 G bzw. S sind.
7. Fusionsprotein nach einem der Ansprüche 1-6, wobei der Insulinrezeptoragonist die folgende Aminosäuresequenz aufweist:
8. Fusionsprotein nach einem der Ansprüche 1-7, wobei der zweite Peptid-Linker ein Peptid mit der Sequenz [GGGGX] _n umfasst, wobei X Q, E oder S ist und wobei _n 2-5 ist.
9. Fusionsprotein nach einem der Ansprüche 1-8, wobei der zweite Peptid-Linker die folgende Aminosäuresequenz umfasst: GGGGX₁GGGGX₂GGGGX₃GGGGX₄X₅X₆, X₁ ist Q oder E, X₂ ist Q oder E, X₃ ist Q oder E, X₄ ist G, E oder Q oder fehlt, X₅ ist G oder fehlt und X₆ ist G oder fehlt (SEQ ID Nr. 6).
10. Fusionsprotein nach einem der Ansprüche 1-9, wobei der zweite Peptid-Linker die folgende Aminosäuresequenz aufweist: GGGGQGGGGQGGGGQGGGGG (SEQ ID Nr. 7).
11. Fusionsprotein nach einem der Ansprüche 1-10, wobei die humane IgG-Fc-Region eine Fc-Region von einem IgG1, IgG2 oder IgG4 ist.
12. Fusionsprotein nach einem der Ansprüche 1-11, wobei die humane IgG-Fc-Region eine Aminosäuresequenz umfasst, die aus der Gruppe bestehend aus SEQ ID Nr. 8, SEQ ID Nr. 9 und SEQ ID Nr. 10 ausgewählt ist.
13. Fusionsprotein mit der Aminosäuresequenz von SEQ ID Nr. 12.
14. Homodimer von zwei Fusionsproteinen nach einem der Ansprüche 1-13.
15. Pharmazeutische Zusammensetzung, die entweder ein Fusionsprotein nach einem der Ansprüche 1-13 oder ein Homodimer nach Anspruch 14 und mindestens einen Hilfsstoff umfasst.
16. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 15, die weiterhin Citrat, Citronensäure, Polysorbat 80 und Mannit umfasst.
17. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 15 oder 16, wobei der pH-Wert von etwa 6,0 bis etwa 6,75 reicht.
18. Pharmazeutische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 15 bis 17, die weiterhin Dulaglutid umfasst.
19. Fusionsprotein nach einem der Ansprüche 1-13 zur Verwendung in einer Therapie.
20. Fusionsprotein nach einem der Ansprüche 1-13 zur Verwendung bei der Behandlung von Diabetes mellitus.
21. Fusionsprotein nach einem der Ansprüche 1-13 zur Verwendung in einer simultanen, separaten oder sequentiellen Kombination mit Dulaglutid bei der Behandlung von Diabetes mellitus.
22. Homodimer nach Anspruch 14 zur Verwendung in einer simultanen, separaten oder sequentiellen Kombination mit Dulaglutid bei der Behandlung von Diabetes mellitus.
23. Polynukleotid, das das Fusionsprotein nach einem der Ansprüche 1-13 kodiert.