HK1137011B - 抑制mtp的四氢-萘-1-羧酸衍生物 - Google Patents

Description

抑制MTP的四氢-萘-1-羧酸衍生物

本发明涉及新的四氢-萘-1-羧酸衍生物，其具有抑制apoB分泌/MTP的活性和伴随的降脂活性。本发明进一步涉及制备这种化合物的方法，包含所述化合物的药物组合物，以及所述化合物作为治疗动脉粥样硬化、胰腺炎、肥胖症、高甘油三酯血症、高胆固醇血症、高脂血症、糖尿病和II型糖尿病的药物的用途。

肥胖症是众多严重健康问题(如成人发病的糖尿病和心脏病)的起因。此外，减轻体重逐渐成为比例不断增加的人群中的强迫观念。

现在，高胆固醇血症、特别是伴随升高的低密度脂蛋白(下文称为LDL)和极低密度脂蛋白(下文称为VLDL)血浆浓度的高胆固醇血症与过早动脉粥样硬化和/或心血管疾病之间的因果关系是公认的。然而，目前可用于治疗高脂血症的药物数量是有限的。

主要用于处理高脂血症的药物包括：胆汁酸螯合剂树脂，例如考来烯胺(cholestyramine)和考来替泊(colestipol)；纤维酸衍生物，例如苯扎贝特、氯贝丁酯、非诺贝特、环丙贝特和吉非贝齐；烟酸；和胆固醇合成抑制剂，例如HMG辅酶A还原酶抑制剂。依然存在对具有提高的效率和/或经不同于上述药物的其他机制起作用的新的降脂剂的需求。

血浆脂蛋白是由脂质(胆固醇、甘油三酯、磷脂)和载脂蛋白生成的高分子量水溶性复合物。五类主要的脂蛋白的脂质比例和载脂蛋白类型不同，都来源于肝和/或肠，已根据它们的密度(超速离心法测量)而被定义。它们包括LDL、VLDL、中密度脂蛋白(下文称为IDL)、高密度脂蛋白(下文称为HDL)和乳糜微粒。已鉴定了十种主要的人血浆载脂蛋白。由肝分泌并含有载脂蛋白B(下文称为Apo-B)的VLDL经降解生成LDL，LDL运输总血清胆固醇的60至70％。Apo-B也是LDL的主要蛋白组分。由于过度合成或减少的代谢而增加的血清中LDL-胆固醇与动脉粥样硬化有因果关系。相反，含有载脂蛋白A1的高密度脂蛋白(下文称为HDL)具有保护作用，并与冠心病风险负相关。因此，HDL/LDL比率是评价个体血浆脂分布致动脉粥样化潜力的方便的方法。

载脂蛋白(apo)B的两个同种型apo B-48和apo B-100是人脂蛋白代谢中的重要蛋白。根据十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶，Apo B-48的大小是apo B-100的约48％，由人肠合成。Apo B-48是乳糜微粒组装所必需的，因此在饮食脂肪的肠吸收中具有必须的作用。Apo B-100在人肝中生成，是合成和分泌VLDL所必需的。LDL含有人血浆中胆固醇的约2/3，是VLDL的代谢产物。Apo B-100几乎是LDL的唯一蛋白组分。血浆中升高浓度的apo B-100和LDL胆固醇是发生动脉粥样硬化冠心病的公认的风险因子。

许多遗传和获得性疾病可以导致高脂血症。它们可被分为原发性和继发性高脂血状态。继发性高脂血症的最普遍原因是糖尿病、酗酒、药物、甲状腺机能减退、慢性肾衰竭、肾病综合征、胆汁郁积和贪食。原发性高脂血症也已被分类为普通高胆固醇血症、家族性混合性高脂血症、家族性高胆固醇血症、剩余高脂血症(remnant hyperlipidaemia)、乳糜微粒血症综合征和家族性高甘油三酯血症。

已知微粒体甘油三酯转移蛋白(下文称为MTP)催化甘油三酯、胆固醇酯和磷脂(例如磷脂酰胆碱)的运输。这说明MTP是合成含有ApoB的脂蛋白(例如乳糜微粒和LDL前体VLDL)所必需的。因此得出，MTP抑制剂将抑制VLDL和LDL的合成，从而降低人的VLDL、LDL、胆固醇和甘油三酯的水平。相信，能够抑制MTP的化合物可用于治疗病症并降低餐后血清甘油三酯的血浆水平，所述病症例如肥胖症、高脂血症、高胆固醇血症、高甘油三酯血症、II类糖尿病、动脉粥样硬化。

本发明基于如下意想不到的发现：一组四氢-萘-1-羧酸衍生物具有抑制apoB分泌/MTP的活性。式(I)的这些化合物可以全身起作用和/或起选择性MTP抑制剂的作用，即，能够在哺乳动物肠壁(gut wall)水平选择性阻断MTP。

本发明涉及一类新的式(I)化合物、其药学上可接受的酸加成盐、其N-氧化物及其立体化学异构形式

其中

A是-CH₂-或-(C＝O)-；

x代表

n是整数2或3；

R⁵是氢或C_1-4烷基；

R⁶是氢或C_1-4烷基；

R¹是NR⁷R⁸或OR⁹；

其中R⁷和R⁸各自独立选自

氢，

C_1-8烷基，

经1、2或3个取代基取代的C_1-8烷基，每个取代基相互独立选自卤代、氰基、C_3-8环烷基、C_1-4烷基羰基、C_1-4烷氧基羰基、多卤代C_1-4烷基、羟基羰基、-OR¹⁰、-NR¹⁰R¹¹、-CONR¹²R¹³、芳基、多环芳基或杂芳基；

C_3-8环烷基；

C_3-8环烯基；

C_3-8烯基；

C_3-8炔基；

芳基；

多环芳基；

杂芳基；

或者，与载有R⁷和R⁸的氮原子结合的R⁷和R⁸可以形成氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、氮杂环庚烷基或氮杂环辛烷基(azocanyl)环，其中这些环的每一个可以任选经一个或两个取代基取代，每个取代基独立选自C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、羟基、羟基羰基或C_1-4烷氧基羰基；

其中R¹⁰是氢、C_1-4烷基、C_1-4烷基羰基、C_1-4烷氧基羰基、芳基、多环芳基或杂芳基；

R¹¹是氢或C_1-4烷基；

R¹²是氢、C_1-4烷基或苯基；

R¹³是氢、C_1-4烷基或苯基；

R⁹是C_1-8烷基，

经1、2或3个取代基取代的C_1-8烷基，每个取代基相互独立选自卤代、氰基、C_3-8环烷基、C_1-4烷基羰基、C_1-4烷氧基羰基、多卤代C_1-4烷基、羟基羰基、-OR¹⁰、-NR¹⁰R¹¹、-CONR¹²R¹³、芳基、多环芳基或杂芳基；

C_3-8环烷基；

C_3-8环烯基；

C_3-8烯基；

C_3-8炔基；

芳基；

多环芳基；

杂芳基；

其中

芳基是苯基；经1至5个取代基取代的苯基，每个取代基独立选自C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、卤代、羟基、三氟甲基、氰基、C_1-4烷氧基羰基、C_1-4烷氧基羰基C_1-4烷基、甲基磺酰氨基、甲基磺酰基、NR¹⁰R¹¹、C_1-4烷基NR¹⁰R¹¹、CONR¹²R¹³或C_1-4烷基CONR¹²R¹³；

多环芳基是萘基、茚满基、芴基或1，2，3，4-四氢萘基，并且所述多环芳基任选被一个或两个取代基取代，每个取代基独立选自C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、苯基、卤代、氰基、C_1-4烷基羰基、C_1-4烷氧基羰基、C_1-4烷氧基羰基C_1-4烷基、NR¹⁰R¹¹、C_1-4烷基NR¹⁰R¹¹、CONR¹²R¹³、C_1-4烷基CONR¹²R¹³或C_1-4烷氧基羰基氨基，且

杂芳基是吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、三嗪基、三唑基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、异噻唑基、噁唑基、吡咯基、呋喃基、噻吩基；喹啉基；异喹啉基；1，2，3，4-四氢-异喹啉基；苯并噻唑基；苯并[1，3]间二氧杂环戊烯基；2，3-二氢-苯并[1，4]二氧杂环己烯基；吲哚基；2，3-二氢-1H-吲哚基；1H-苯并咪唑基；并且所述杂芳基任选经一个或两个取代基取代，每个取代基独立选自C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、苯基、卤代、氰基、C_1-4烷基羰基、C_1-4烷氧基羰基、C_1-4烷氧基羰基C_1-4烷基、NR¹⁰R¹¹、C_1-4烷基NR¹⁰R¹¹、CONR¹²R¹³或C_1-4烷基CONR¹²R¹³；

R^2a、R^2b和R^2c相互独立选自氢、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、卤代、羟基、氰基、硝基、多卤代C_1-4烷基、多卤代C_1-4烷氧基或C_1-4烷氧基羰基；

R^3a、R^3b和R^3c相互独立选自氢、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、卤代、羟基、氰基、硝基、多卤代C_1-4烷基、多卤代C_1-4烷氧基或C_1-4烷氧基羰基；

R⁴是苯基；经1、2、3或5个取代基取代的苯基，每个取代基独立选自C_1-4烷基、卤代、羟基、C_1-4烷氧基、氰基、硝基、多卤代C_1-4烷基、多卤代C_1-4烷氧基、C_1-4烷基羰基、氨磺酰基、杂环基或任选经1、2或3个取代基取代的苯基，每个取代基独立选自C_1-4烷基、卤代、C_1-4烷氧基或三氟甲基；

或选自吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、三嗪基、呋喃基和噻吩基的杂芳基，其中这些杂芳基的每一个可以任选经一个或两个取代基取代，每个取代基独立选自C_1-4烷基、卤代、羟基、C_1-4烷氧基、氧代基、氰基、多卤代C_1-4烷基、C_1-4烷基羰基、C_1-4烷氧基羰基或杂环基；

其中

杂环基选自氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、氮杂环庚烷基和氮杂环辛烷基，其可以任选经一个或两个取代基取代，每个取代基独立选自C_1-4烷基或卤代。

如前述定义中所使用的：

-卤代包括氟、氯、溴和碘

-C_1-4烷基定义为具有1至4个碳原子的直链和支链饱和烃基，例如甲基、乙基、丙基、丁基、1-甲基乙基、2-甲基丙基等

-C_1-6烷基意为包括C_1-4烷基及其具有5或6个碳原子的更高同系物，例如2-甲基丁基、戊基、己基等；

-C_1-8烷基意为包括C_1-6烷基及其具有7至8个碳原子的更高同系物，例如庚基、乙基己基、辛基等；

-多卤代C_1-4烷基定义为多卤素取代的C_1-4烷基、特别是经1至4个卤素原子取代的C_1-4烷基(如上文定义)，例如氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、三氟乙基等；

-C_3-8环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基；

-C_3-8环烯基包括环丙烯基、环丁烯基、环戊烯基、环己烯基、环庚烯基和环辛烯基；

-C_3-8烯基定义了含有一个双键并具有3至8个碳原子的直链和支链烃基，例如2-丙烯基、3-丁烯基、2-丁烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、3-甲基-2-丁烯基、3-己烯基、2-己烯基、2-戊烯基、2-辛烯基等；

C_3-8炔基定义了含有一个三键并具有3至8个碳原子的直链和支链烃基，例如2-丙炔基、3-丁炔基、2-丁炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、3-甲基-2-丁炔基、3-己炔基、2-己炔基、2-戊炔基、2-辛炔基等。

上文提到的药学可接受的酸加成盐意为包括可由式(I)化合物生成的治疗上有效的非毒性酸加成盐形式。这些药学可接受的酸加成盐可用适合的酸处理碱形式而方便地获得。适合的酸包括例如：无机酸，例如氢卤酸(例如盐酸或氢溴酸)、硫酸、硝酸、磷酸及类似酸；或者有机酸，例如乙酸、丙酸、羟乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸(即，乙二酸)、丙二酸、琥珀酸(即，丁二酸)、马来酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、环拉酸、水杨酸、对氨基水杨酸、扑酸及类似酸。

反过来，所述盐形式可用适合碱处理而被转化成游离碱形式。

式(I)化合物可以未溶剂化和溶剂化两种形式存在。术语“溶剂化物”在这里用来描述含有本发明化合物和一个或多个药学可接受溶剂分子(例如乙醇)的分子络合物。当所述溶剂是水时则使用术语“水合物”。

式(I)化合物的N-氧化物形式意为包括其中一个或几个氮原子被氧化成所谓N-氧化物(特别是其中一个或多个叔氮(例如哌嗪基或哌啶基的叔氮)被N-氧化的那些N-氧化物)的式(I)化合物。本领域技术人员无需任何创造性技能就能够轻易获得这样的N-氧化物，并且这样的N-氧化物是式(I)化合物的显而易见的替代物，因为这些化合物是摄取后在人体内通过氧化而生成的代谢物。公知的是，氧化一般是药物代谢中涉及的第一步骤(Textbook of Organic Medicinal andPharmaceutical Chemistry(有机药物和制药化学教科书)，1977，第70-75页)。还公知的是，化合物的代谢物形式还可以替代所述化合物本身而给人施用，具有几乎相同的效果。

按照本领域已知的将三价氮转化为其N-氧化物形式的方法，可以将式(I)化合物转化为相应的N-氧化物形式。所述N-氧化反应一般可以通过使式(I)化合物与适合的有机或无机过氧化物反应而进行。适合的无机过氧化物包括例如过氧化氢、碱金属或碱土金属过氧化物，例如过氧化钠、过氧化钾；适合的有机过氧化物可以包括过氧酸，例如过氧化苯甲酸(benzenecarboperoxoic acid)或卤素取代的过氧化苯甲酸(例如3-氯代过氧化苯甲酸)、过氧链烷酸(例如过氧乙酸)、烷基氢过氧化物(例如叔丁基氢过氧化物)。适合的溶剂有例如水、低级链烷醇(例如乙醇等)、烃(例如甲苯)、酮(例如2-丁酮)、卤代烃(例如二氯甲烷)和这些溶剂的混合物。

上文使用的术语“立体化学异构形式”定义为式(I)化合物可具有的所有可能的异构形式。除非另外提出或说明，化合物的化学名指示所有可能的立体化学异构形式的混合物，所述混合物含有基本分子结构的所有非对映体和对映体。更特别地，立构中心(stereogenic center)可以具有R或S构型；二价环状(部分地)饱和基团上的取代基可以具有顺式或反式构型。含有双键的化合物可以在所述双键处具有E或Z立体化学。显而易见地，式(I)化合物的立体化学异构形式将包括在本发明范围内。

使用公知方法例如X射线衍射，本领域技术人员可容易地确定式(I)化合物和用于其制备的中间体的绝对立体化学构型。

式(I)化合物具有至少两个不对称碳原子，如下所示，其中不对称碳原子以*表示。

由于至少两个不对称碳原子的存在，一般而言，术语“式(I)化合物”包括四种立体异构体的混合物。大部分本发明化合物以反式构型或顺式构型制备：

顺式

反式

上述“顺式”或“反式”化合物的每一个都由两种对映体的外消旋混合物组成，并且加粗键或切割键(hashed bonds)已用于指示这种相对立体化学构型。

在“顺式”或“反式”化合物被分离成各自两种单一对映体时，加粗键和切割键被楔形键替代以指示该化合物是单一对映体。如果单一对映体中特定手性碳原子的绝对立体化学是未知的，那么其立体化学构型被指定为指示相对立体化学的R^*或S^*。

进一步地，一些式(I)化合物和一些用于其制备的中间体可以表现出多晶现象。要理解，本发明涵盖具有可用于治疗上文所述病状的性质的任何多晶形式。

一些式(I)化合物也可以其互变异构形式存在。尽管未明确表示在上式中，但这样的形式将包括在本发明范围内。例如，当芳族杂环经羟基取代时，酮式可以是主要存在的互变异构体。

在本申请的框架中，表达“本发明化合物”还指包括通式(I)化合物及其前药或者其同位素标记化合物。

所谓式(I)化合物的“前药”也在本发明范围内。前药是药学活性化合物的某些衍生物，所述衍生物本身可能具有很少或没有药理学活性，但在施用到人体内或人体上时可例如通过水解裂解被转化成具有预期药物活性的式(I)化合物。这样的衍生物被称为“前药”。

在本申请的框架中，本发明化合物固然将包括其化学元素的所有同位素组合。在本申请的框架中，化学元素，特别是涉及式(I)化合物而提出时，包括该元素的所有同位素和同位素混合物，无论是天然存在还是合成制备的，也不论是天然丰度还是同位素富集形式。特别地，当提及氢时，应理解为指¹H、²H、³H及其混合物；当提及碳时，应理解为指¹¹C、¹²C、¹³C、¹⁴C及其混合物；当提及氮时，应理解为指¹³N、¹⁴N、¹⁵N及其混合物；当提及氧时，应理解为指¹⁴O、¹⁵O、¹⁶O、¹⁷O、¹⁸O及其混合物；当提及氟时，应理解为指¹⁸F、¹⁹F及其混合物。

因此，本发明化合物固然包括具有一种或多种元素的一种或多种同位素的化合物及其混合物，包括放射性化合物，也称为放射标记化合物，其中一种或多种非放射性原子被其放射性同位素之一所替代。术语″放射标记化合物″指含有至少一种放射性原子的任何式(I)化合物、其药学上可接受的酸或碱加成盐、其N-氧化物形式或其季铵盐。例如，化合物可以被正电子或γ发射放射性同位素标记。对于放射配体结合技术(膜受体分析)，³H-原子或¹²⁵I-原子是被选择替代的原子。对于成像，最普遍使用的正电子发射(PET)放射性同位素是¹¹C、¹⁸F、¹⁵O和¹³N，其全部是加速剂生成的(accelerator produced)，并分别具有20、100、2和10分钟的半衰期。因为这些放射性同位素的半衰期如此短，只可能在现场具有加速剂以供生成它们的机构使用它们，因此限制了它们的应用。这些放射性同位素中最广泛使用的是¹⁸F、^99mTc、²⁰¹Tl和¹²³I。这些放射性同位素的处理、生成、分离和掺入分子，是本领域技术人员已知的。

特别地，放射性原子选自氢、碳、氮、硫、氧和卤素。优选地，放射性原子选自氢、碳和卤素。

特别地，放射性同位素选自³H、¹¹C、¹⁸F、¹²²I、¹²³I、¹²⁵I、¹³¹I、⁷⁵Br、⁷⁶Br、⁷⁷Br和⁸²Br。优选地，放射性同位素选自³H、¹¹C和¹⁸F。

在一个实施方案中，本发明涉及式(I)的那些化合物，其中A代表-(C＝O)-；R¹是OR⁹，其中R⁹是C_1-6烷基或C_3-8烯基；R^2a、R^3a、R^2b、R^3b、R^2c和R^3c是氢；R⁴代表苯基、经C_1-4烷氧基取代的苯基、经卤素取代的苯基、经羟基取代的吡啶基或经C_1-4烷氧基取代的吡啶基；并且X代表基团(a-1)，其中R⁵是氢，且R⁶是氢或C_1-4烷基。

引人关注的式(I)化合物是其中适用下述限制的一种或多种的那些式(I)化合物：

a)X代表基团(a-1)，其中n是2；或

b)X代表基团(a-1)，其中n是3；或

c)X代表基团(a-2)；或

d)X代表基团(a-4)；或

e)X代表基团(a-5)；或

f)R^2a＝R^3a，R^2b＝R^3b，且R^2c＝R^3c；特别地，R^2a＝R^3a＝H，R^2b＝R^3b＝H，且R^2c＝R^3c＝H，或

g)A是-(C＝O)-；或

h)A是-CH₂-；或

i)R¹是NR⁷R⁸，其中R⁷和R⁸各自独立选自氢；C_1-8烷基；经一个或两个取代基取代的C_1-8烷基，所述取代基各自相互独立选自羟基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷氧基羰基、羟基羰基、NR¹⁰R¹¹、CONR¹²R¹³、芳基或杂芳基；或芳基；或

j)R¹是NR⁷R⁸，其中R⁷和R⁸与载有R⁷和R⁸的氮原子组合形成吡咯烷基或哌啶基环，其中这些环的每一个可以任选经一个或两个取代基取代，所述取代基各自独立选自C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、羟基、羟基羰基或C_1-4烷氧基羰基；或

k)R¹是OR⁹，其中R⁹是C_1-8烷基或C_3-8烯基；或

l)R⁴是苯基；经1、2或3个取代基取代的苯基，每个取代基独立选自C_1-4烷基、卤代、羟基、C_1-4烷氧基或多卤代C_1-4烷氧基；或杂芳基，选自吡啶基或哒嗪基，每个任选经羟基或C_1-4烷氧基取代。

一般，式(I)化合物可在至少一种反应惰性溶剂中并任选在至少一种适合的偶联试剂和/或适合的碱存在下用式(III)的羧酸中间体N-烷基化式(II)中间体而制备，所述过程进一步任选包括将式(I)化合物转化成其加成盐，和/或制备其立体化学异构形式。

可通过添加有效量的反应促进剂来方便地活化式(III)的羧酸。所述反应促进剂的非限制性实例包括羰基二咪唑、二酰亚胺(例如N，N’-二环己基-碳二亚胺或1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺)及其官能衍生物。该反应可以进一步在有效量以下化合物存在下进行，所述化合物例如羟基苯并三唑(HOBT)、六氟磷酸苯并三唑基氧基三(二甲基氨基)-鏻、六氟磷酸四吡咯烷鏻、六氟磷酸溴代三吡咯烷鏻或其官能衍生物。

式(I-a)化合物定义为其中基团A代表-(C＝O)-的式(I)化合物，可通过使式(V)中间体与式(IV)中间体在至少一种反应惰性溶剂中并任选在至少一种适合的偶联试剂和/或适合的碱存在下反应而制备，所述方法进一步任选包括将式(I)化合物转化为其加成盐，和/或制备其立体化学异构形式。

可通过添加有效量的反应促进剂来方便地活化式(IV)的羧酸。所述反应促进剂的非限制性实例包括羰基二咪唑、二酰亚胺(例如N，N’-二环己基-碳二亚胺或1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺)及其官能衍生物。在使用手性纯的式(IV)反应物时，式(IV)中间体与所述中间体(V)的快速且对映体化自由反应可以进一步在有效量以下化合物存在下进行，所述化合物例如羟基苯并三唑(HOBT)、六氟磷酸苯并三唑基氧基三(二甲基氨基)-鏻、六氟磷酸四吡咯烷鏻、六氟磷酸溴代三吡咯烷鏻或其官能衍生物，例如D.Hudson，J.Org.Chem.(1988)，53：617所公开的。

式(I-b)化合物定义为其中基团A代表-CH₂-的式(I)化合物，可以用式(IV-b)中间体N-烷基化式(V)中间体而制备，其中W是适合的离去基团，例如卤代，例如氯代、溴代、碘代，或者在一些情况下W还可以是磺酰氧基，例如甲磺酰氧基、苯磺酰氧基、三氟甲烷-磺酰氧基及类似的反应性离去基团。该反应可以在反应惰性溶剂中和任选在适合碱存在下进行，所述溶剂例如乙腈、2-戊醇、异丁醇、二甲基乙酰胺或DMF，所述碱例如碳酸钠、碳酸钾或三乙胺。搅拌可以提高反应速率。反应可以方便地在室温至反应混合物的回流温度之间的温度下进行。

式(II)中间体可如下制备：使式(IV)中间体或式(IV-b)中间体与式(VI)中间体(其中PG是保护基团，例如叔丁基氧基羰基或苄基)反应，式(IV)羧酸中间体在至少一种反应惰性溶剂中，并任选在至少一种适合的偶联试剂和/或适合碱存在下反应；随后去除保护基团PG。

式(V)中间体可如下制备：使式(VII)中间体(其中PG是保护基团，例如叔丁基氧基羰基或苄基)与式(III)羧酸中间体在至少一种反应惰性溶剂中和任选在至少一种适合的偶联试剂和/或适合碱存在下反应；随后去除保护基团PG。

式(XIII)中间体定义为其中R¹代表OR⁹、R^2a＝R^3a、R^2b＝R^3b且R^2c＝R^3c的式(IV)中间体，可如下所述制备。

式(XV)中间体可如下所述制备。式(XV)中间体是其中R¹代表NR⁷R⁸的式(IV)中间体。

式(IV-b)中间体可如下所述制备。式(IV-b-1)中间体定义为其中R¹代表NR⁷R⁸的式(IV-b)中间体，式(IV-b-2)中间体定义为其中R¹代表OR⁹的式(IV-b)中间体。

可以通过本领域已知的N酰化方法，使用H-NR⁷R⁸作为试剂，将式(XVII)中间体(其中取代基R^2a、R^2b、R^2c、R^3a、R^3b、R^3c、R⁴、R⁵、A¹、A²和X如式(I)化合物所定义)转化成式(I-c)化合物(定义为其中R¹代表NR⁷R⁸的式(I)化合物)。

上文所述方法中制备的式(I)化合物可以对映体的外消旋混合物形式合成，所述对映体可以按照本领域已知的拆分方法相互分离。以外消旋形式获得的那些式(I)化合物可通过与适合手性酸反应而被转化成相应的非对映体盐形式。所述非对映体盐形式随后例如通过选择性结晶或分级结晶而分离，通过碱从其中释放对映体。分离式(I)化合物对映体形式的可选方式包括使用手性固定相的液相色谱法。所述纯立体化学异构形式还可以衍生自适合起始材料的相应的纯立体化学异构形式，条件是反应立体特异性地发生。优选地，如果需要特定立体异构体，则所述化合物将通过立体特异性制备方法合成。这些方法有利地采用对映体纯的起始原料。

式(I)化合物、其N-氧化物形式、药学可接受盐和立体异构形式具有良好的apoB分泌和MTP抑制活性以及伴随的降脂活性。因此，本发明式(I)化合物可尤其在治疗罹患高脂血症、肥胖症、动脉粥样硬化或II型糖尿病的患者的方法中用作药物。因此，本发明化合物可以用于生产用于治疗过量极低密度脂蛋白(VLDL)或低密度脂蛋白(LDL)引起的病症以及特别是所述VLDL和LDL相关胆固醇引起的病症的药物。特别地，本发明化合物可以用于生产用于治疗高脂血症、肥胖症、动脉粥样硬化或II型糖尿病的药物。

式(I)化合物的主要作用机理显示涉及肝细胞和肠上皮细胞中MTP(微粒体甘油三酯转移蛋白)活性的抑制，分别导致VLDL和乳糜微粒生成减少。这对高脂血症而言是新颖和创造性方法，并且预期通过减少VLDL的肝生成和乳糜微粒的肠生成而降低LDL-胆固醇和甘油三酯。

许多遗传性和获得性疾病可以导致高脂血症。它们可以分类为原发性和继发性高脂血状态。继发性高脂血症的最普遍原因是糖尿病、酗酒、药物、甲状腺机能减退、慢性肾衰竭、肾病综合征、胆汁郁积和贪食。原发性高脂血症有普通高胆固醇血症、家族性混合性高脂血症、家族性高胆固醇血症、剩余高脂血症、乳糜微粒血症综合征、家族性高甘油三酯血症。本发明化合物还可用于预防或治疗罹患肥胖症或动脉粥样硬化、特别是冠状动脉粥样硬化的患者，以及更一般性地、与动脉粥样硬化相关的病症，例如缺血性心脏病、外周血管疾病、脑血管疾病。本发明化合物可以导致动脉粥样硬化消退并抑制动脉粥样硬化的临床后果，特别是发病率和死亡率。

鉴于式(I)化合物的效用，因此本发明还提供治疗罹患过量极低密度脂蛋白(VLDL)或低密度脂蛋白(LDL)导致的病症，特别是所述VLDL和LDL相关胆固醇引起的病症的，包括人在内的温血动物(本文总称为患者)的方法。因此，提供了缓解罹患诸如高脂血症、肥胖症、动脉粥样硬化或II型糖尿病等病状的患者的治疗方法。

肠合成的Apo B-48对于乳糜微粒组装是必需的，并因此在饮食脂肪的肠吸收中起必要作用。本发明提供了在肠壁水平上起选择性MTP抑制剂作用的化合物。

此外，本发明提供了包含至少一种药学可接受载体和治疗有效量的式(I)化合物的药物组合物。

为了制备本发明药物组合物，有效量的碱或酸加成盐形式的特定化合物作为活性成分与至少一种药学可接受载体紧密混合而组合，所述载体可以采用多种形式，取决于需要施用的制剂形式。这些药物组合物希望是适合优选用于口服施用、直肠施用、经皮施用或胃肠外注射的单一剂量形式。

例如在制备口服剂量形式组合物时，在口服液体制剂(例如混悬液、糖浆、酏剂和溶液)情况下可以使用任何通常的液体药物载体，例如使用水、二醇、油、醇等；或者在散剂、丸剂、胶囊和片剂情况下可使用固体药物载体，例如使用淀粉、糖、高岭土、润滑剂、粘合剂、崩解剂等。因为它们容易施用，片剂和胶囊代表了最有利的口服剂量单位形式，这种情况下采用固体药物载体是显而易见的。对于胃肠外注射组合物，药物载体主要包括无菌水，尽管可以加入其他成分以改善活性成分的溶解性。注射溶液可以例如使用包括盐水溶液、葡萄糖溶液或两者混合物的药物载体制备。注射混悬液可以使用适合的液体载体、悬浮剂等制备。在适合经皮施用的组合物中，药物载体可以任选包括渗透增强剂和/或适合的润湿剂，任选与小比例的、不对皮肤产生明显有害作用的适合添加剂组合。可以选择所述添加剂以促进活性成分施用至皮肤和/或有助于制备需要的组合物。这些局部组合物可以各种方式施用，例如作为透皮贴片、膏药(spot-on)或软膏。式(I)化合物的加成盐由于其相对于相应的碱形式增加的水溶性而明显更适合制备水性组合物。

特别有利的是以易于施用和剂量一致的剂量单位形式配制本发明的药物组合物。本文使用的″剂量单位形式″指适合作为单位剂量的物理上离散的单位，每个单位含有经计算产生预期治疗效果的预定量的活性成分以及所需的药物载体。这种剂量单位形式的例子有片剂(包括刻痕或包衣的片剂)、胶囊、丸剂、粉末包、薄片、注射溶液或混悬液、茶匙量(teaspoonfuls)、餐匙量(tablespoonfuls)等，及其分开的多剂量形式(multiples)。

对于口服施用，本发明的药物组合物可以采取固体剂量形式的形式，例如用药学可接受赋形剂和载体通过常规方式制备的片剂(可吞食和可咀嚼形式)、胶囊或凝胶囊，所述赋形剂和载体例如粘合剂(例如，预胶化玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、羟基丙基甲基纤维素等)、填充剂(例如，乳糖、微晶纤维素、磷酸钙等)、润滑剂(例如，硬脂酸镁、滑石、二氧化硅等)、崩解剂(例如，马铃薯淀粉、淀粉乙醇酸钠等)、润湿剂(例如，十二烷基硫酸钠)等。这样的片剂可以通过本领域公知方法包衣。

口服施用的液体制剂可以采用例如溶液、糖浆、混悬液的形式，或者它们可以配制成干产品，在使用前与水和/或另一种适合液体载体混合。这样的液体制剂可以通过常规方式制备，任选使用其他药学可接受添加剂，例如悬浮剂(例如，山梨糖醇浆、甲基纤维素、羟基丙基甲基纤维素或氢化食用脂)、乳化剂(例如卵磷脂或阿拉伯树胶)、非水性载体(例如杏仁油、油酯或乙醇)、增甜剂、香料、掩蔽剂和防腐剂(例如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯或山梨酸)。

用于本发明药物组合物的药学可接受增甜剂优选包括至少一种强力(intense)增甜剂和任选至少一种大量(bulk)增甜剂，所述强力增甜剂例如阿斯巴甜、乙酰舒泛钾、环拉酸钠、甜肽胺、二氢查耳酮增甜剂、莫尼林、卡哈苡苷三氯半乳蔗糖(4，1′，6′-三氯-4，1′，6′-三脱氧半乳蔗糖)或优选糖精、糖精钠或糖精钙，所述大量增甜剂例如山梨糖醇、甘露醇、果糖、蔗糖、麦芽糖、异麦芽糖、葡萄糖、氢化葡萄糖浆、木糖醇、焦糖或蜂蜜。强力增甜剂方便以低浓度使用。例如，在糖精钠情况下，所述浓度可以为最终制剂的约0.04％至0.1％(重量/体积)。大量增甜剂可有效地以更大浓度使用，范围从约10％至约35％、优选约10％至15％(重量/体积)。

可掩蔽低剂量制剂中苦味成分的药学可接受香料优选为水果香料，例如樱桃、覆盆子、黑醋栗或草莓香料。两种香料的组合可以产生非常好的结果。在高剂量制剂中，可能需要更强的药学可接受香料，例如焦糖巧克力(Caramel Chocolate)、凉薄荷(Mint Cool)、Fantasy等。每种香料可以约0.05％至1％(重量/体积)的浓度存在于最终组合物中。有利地使用所述强香料的组合。优选地使用在配制情况中不经历任何味道和/或颜色改变或损失的香料。

式(I)化合物可配制用于通过注射胃肠外施用，方便地通过静脉内、肌肉内或皮下注射，例如通过弹丸(bolus)注射或连续静脉内输注。注射制剂可以单位剂量形式提供，例如在包含添加的防腐剂的安瓿或多剂量容器内提供。它们可以采取诸如在油性或水性媒介物中的混悬液、溶液或乳液的形式，并且可以含有配制剂，例如等渗剂、悬浮剂、稳定剂和/或分散剂。可选地，活性成分可以粉末形式存在，以在使用前与适合媒介物(例如无菌无热原水)混合。

式(I)化合物还可以直肠组合物形式配制，例如含有常规栓剂基质(例如可可脂和/或其他甘油酯)的栓剂或保留灌肠剂。

式(I)化合物可以与其他药物结合使用，具体说，本发明药物组合物可以进一步包含至少一种其他降脂剂，从而导致所谓的联合降脂疗法。所述其他降脂剂可以是例如惯常用于处理高脂血症的已知药物，例如之前在发明背景中提到的胆汁酸螯合剂树脂、纤维酸衍生物或烟酸。适合的其他降脂剂还可以包括其他胆固醇生物合成抑制剂和胆固醇吸收抑制剂，特别是HMG-CoA还原酶抑制剂和HMG-CoA合酶抑制剂、HMG-CoA还原酶基因表达抑制剂、CETP抑制剂、ACAT抑制剂、角鲨烯合成酶抑制剂、CB-1拮抗剂、胆固醇吸收抑制剂(例如依泽替米贝)等。

任何HMG-CoA还原酶抑制剂可以用作本发明组合疗法方面中的第二化合物。除非另外说明，本文使用的术语″HMG-CoA还原酶抑制剂″指抑制由酶HMG-CoA还原酶催化的羟基甲基戊二酰-辅酶A生物转化为甲瓦龙酸的化合物。这样的″HMG-CoA还原酶抑制剂″有例如洛伐他汀、辛伐他汀、氟伐他汀、普伐他汀、利伐他汀和阿托伐他汀。

任何HMG-CoA合酶抑制剂可以用作本发明联合疗法方面的第二化合物。除非另外说明，本文使用的术语″HMG-CoA合酶抑制剂″指抑制由酶HMG-CoA合酶催化的从乙酰-辅酶A和乙酰乙酰-辅酶A生物合成羟基甲基戊二酰-辅酶A的化合物。

任何HMG-CoA还原酶基因表达抑制剂可以用作本发明联合疗法方面的第二化合物。这些物质可以是阻断DNA转录的HMG-CoA还原酶转录抑制剂或者防止编码HMG-CoA还原酶的mRNA翻译成蛋白质的翻译抑制剂。这样的抑制剂可以直接影响转录或翻译，或者可以在胆固醇生物合成级联中被一种或多种酶生物转化成具有上述性质的化合物，或者可以导致具有上述活性的代谢物的累积。

任何CETP抑制剂可以用作本发明联合疗法方面的第二化合物。除非另外说明，本文使用的术语″CETP抑制剂″指抑制胆固醇酯转移蛋白(CETP)介导的各种胆固醇酯和甘油三酯从HDL转运至LDL和VLDL的化合物。

任何ACAT抑制剂可以用作本发明联合疗法方面的第二化合物。除非另外说明，本文使用的术语″ACAT抑制剂″指抑制通过酶酰基CoA：胆固醇酰基转移酶的饮食胆固醇的细胞内酯化的化合物。

任何角鲨烯合成酶抑制剂可以用作本发明联合疗法方面的第二化合物。除非另外说明，本文使用的术语″角鲨烯合成酶抑制剂″指抑制由酶角鲨烯合成酶催化的两分子焦磷酸法呢酯缩合生成角鲨烯的化合物。

高脂血症治疗领域的技术人员根据下文提供的试验结果将容易地确定式(I)化合物的治疗有效量。一般而言，预期治疗有效剂量是约0.001mg/kg至约50mg/kg体重、更优选约0.01mg/kg至约5mg/kg待治疗患者的体重。以两个或多个亚剂量形式在一整天中以适合间隔施用治疗有效剂量是适合的。所述亚剂量可以配制为单位剂量形式，例如每单位剂量形式各自含有约0.1mg至约350mg、更特别地约1至约200mg的活性成分。

本领域技术人员公知，施用的确切剂量和频率取决于使用的具体式(I)化合物、被治疗的具体病状、待治疗病状的严重度、具体患者的年龄、体重和总体身体状态以及患者可能采用的其他药物治疗(包括上述其他降脂剂)。而且，所述有效每日量可以根据被治疗患者的响应和/或根据开出本发明化合物处方的医师的评价而被降低或增加。因此，上述有效的每日量范围只是指导。

实验部分

在下文描述的方法中使用了下述缩写：″ACN″代表乙腈；″DCM″代表二氯甲烷；″DMF″指N，N-二甲基-甲酰胺；″THF″代表四氢呋喃；而″DIPE″代表二异丙醚。

N-环己基碳二亚胺N-甲基聚苯乙烯HL树脂(1.90mmol/g)是Novabiochem 01-64-021树脂；聚合物负载的碳酸盐基(polymer-supported carbonate base)[聚苯乙烯基甲基]-三甲基碳酸氢铵树脂(5.8mmol/g)是Novabiochem 01-64-041树脂；聚苯乙烯-碳二亚胺树脂(1.90mmol/g)是Novabiochem 01-64-024树脂；聚苯乙烯-N-甲基吗啉HL(3.80mmol/g)树脂是Novabiochem 01-64-0211树脂；聚苯乙烯-碳酸氢盐(5.8mmol/g)树脂是Novabiochem-01-064-0419树脂。

Novabiochem树脂可获自Calbiochem-Novabiochem AG，Weidenmattweg 4，CH-4448Switzerland。

A.中间体的合成

实施例A.1

苯甲酸(0.00012mol，1.2当量)溶解于DMF(0.5ml)并与N-环己基碳二亚胺N-甲基聚苯乙烯HL树脂(1.90mmol/g)(0.10526g，0.0002mol，2当量)混合。添加1-羟基苯并三唑(HOBT)(0.02027g，0.00015mol，1.5当量)/DMF(0.5ml)。混合物搅拌15分钟，随后添加N-(叔丁氧基羰基)-1，2-乙烷-二胺(0.0001mol)/DCM(3ml)。反应完成后，添加聚合物负载的碳酸盐基[聚苯乙烯基甲基]三甲基碳酸氢铵树脂(5.8mmol/g)(0.076g，0.00045mol，4.5当量)，混合物搅拌3小时。最后，过滤去除树脂，用DCM/DMF(3/1 v/v，1.0ml)的混合物洗涤三次，随后减压下蒸发溶剂，由此产生中间体(1)(定量产出；无需进一步纯化而用于下一反应步骤)。

中间体(1)(0.0001mol)溶解于6N HCl在异丙醇(2ml)中的混合物，在65℃下搅拌并加热5小时。反应混合物在减压下浓缩，由此产生作为其盐酸加成盐的中间体(2)。

以类似方式，制备盐酸盐形式的中间体(3)至(8)。为此效果，在反应步骤a)中，苯甲酸被2-甲氧基苯甲酸或4′-(三氟甲基)-2-联苯基羧酸替代；并且N-(叔丁氧基羰基)-1，2-乙烷二胺被N-(叔丁氧基羰基)-1，3-丙二胺、N-甲基-N-(叔丁氧基羰基)-1，2-乙烷二胺或N-甲基-N-(叔丁氧基羰基)-1，3-丙二胺替代。

实施例A.2

2-羟基-2-苯基-丙酸甲酯(0.1mol)被添加至硫酸(300ml)的水(250ml)溶液中，反应混合物在100℃下搅拌20小时。沉淀被滤除并溶解于DCM(600ml)。有机层被分离、干燥、过滤并蒸发溶剂直至体积为100ml。沉淀被滤除并干燥，产生9g中间体(14)。

实施例A.3

中间体(14)(1.327mol)在无水乙醇(2360ml)中的混合物被搅拌，添加浓缩的硫酸(4ml)。反应混合物在氮气下回流22小时，然后使反应混合物冷却过夜至室温。产生的沉淀被滤除，用无水乙醇洗涤并干燥，产生120g中间体(15)(mp.186-187℃)。

乙醇层被合并和蒸发，得到的残留物溶解于DCM(1450ml)，用NaHCO₃水溶液洗涤(两次，500ml)，干燥并蒸发溶剂。残留物在50-55℃温度下于DIPE(680ml)中搅拌，残留DCM被蒸馏掉，留下浓缩物在室温静置超过2小时。得到的固体被滤除，用DIPE(120ml)和戊烷洗涤，然后在40℃干燥，产生另外103.2g中间体(15)(mp.187-188℃)。

之前的DIPE/戊烷层被蒸发，残留物溶解于无水ACN(200ml)，然后再次蒸发溶剂，产生166.3g of中间体(16)(mp.75℃)。

实施例A.4

中间体(15)(0.03mol)在氯仿(50ml)中搅拌。添加亚硫酰氯(0.06mol)，反应混合物被搅拌并回流4小时直至排气停止。通过蒸发溶剂而浓缩反应混合物。添加氯仿(200ml)，再次蒸发溶剂，产生的残留物被缓慢添加至无水乙醇(100ml)，其在±5℃的冰水浴上冷却。移除冰浴，使反应混合物升温至室温。反应混合物在室温搅拌4小时。蒸发溶剂，产生中间体(17)(mp：78-80℃)。

从中间体(16)开始类似地制备中间体(18)。

实施例A.5

中间体(17)(0.0567mol)和对甲苯磺酸(1g)的混合物在甲酸(500ml)和浓盐酸(125ml)的混合物中搅拌并回流3小时。通过蒸发溶剂而浓缩反应混合物，残留物溶解于DCM，用NaHCO₃水溶液洗涤并干燥。溶剂被蒸发，残留物通过二氧化硅柱色谱法纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/己烷1/9)，产生中间体(19)(mp.115-118℃)。

从中间体(18)开始类似地制备中间体(20)(mp.133-135℃)。

实施例A.6

2-甲氧基-苯甲酸(0.028mol)溶解于DCM(150ml)。亚硫酰氯(8.2ml)被逐滴添加至该混合物，混合物被回流2小时30分钟。反应混合物被冷却，蒸发溶剂。然后加DCM(150ml)，再次蒸发溶剂。粗化合物溶解于DCM(150ml)。首先添加1-(苯基甲基)-3-吡咯烷胺(0.028mol)，然后添加饱和NaHCO₃水溶液(75ml)。混合物反应2小时。然后分层。分离的有机层经干燥(MgSO₄)、过滤并蒸发溶剂。残留物用二异丙醚处理，粗化合物通过柱色谱法纯化(洗脱剂：100％CH₂Cl₂至3％CH₃OH/CH₂Cl₂)。收集产物级分，蒸发溶剂，产生7.14g中间体(21)。

中间体(21)(0.023mol)在CH₃OH(150ml)中的混合物用作为催化剂的碳载钯10％(1g)氢化。在氢(1当量)摄取后，滤掉催化剂并蒸发滤液。残留物通过反相高效液相色谱法纯化(ShandonC18BDS(碱去活二氧化硅)8μm，250g，I.D.5cm)。应用两种或三种流动相的梯度(相A：0.25％NH₄HCO₃水溶液；相B：CH₃OH(任选)；相C：CH₃CN)。收集产物级分并蒸发溶剂，产生2.56g中间体(22)。

实施例A.7

2-甲氧基-3-吡啶羧酸(0.028mol)溶解于DCM(150ml)。亚硫酰氯(8.2ml；0.112mol))滴加至该混合物，混合物被回流2小时30分钟。蒸发溶剂。然后添加DCM(150ml)，再次蒸发溶剂。粗化合物溶解于DCM(150ml)。首先添加1-(苯基甲基)-3-吡咯烷胺(0.028mol)，然后添加饱和NaHCO₃水溶液(75ml)。混合物反应2小时。然后分层。分离的有机层经干燥(MgSO₄)、过滤并蒸发溶剂。残留物通过柱色谱法纯化(洗脱剂：100％CH₂Cl₂至3％CH₃OH/CH₂Cl₂1/100)。收集产物级分，蒸发溶剂，产生7.97g中间体(23)。

中间体(23)(0.026mol)在CH₃OH(150ml)中的混合物用作为催化剂的碳载钯10％(1g)氢化。在氢(1当量)摄取后，滤掉催化剂并蒸发滤液。残留物通过反相高效液相色谱法纯化(ShandonC18BDS(碱去活二氧化硅(Base Deactivated Silica))8μm，250g，I.D.5cm)。应用两种或三种流动相的梯度(相A：0.25％NH₄HCO₃水溶液；相B：CH₃OH(任选)；相C：CH₃CN)。收集产物级分并蒸发溶剂，产生3.01g中间体(24)。

实施例A.8

反式-1-苯基-1，2，3，4-四氢-萘-1，4-二羧酸4-乙基酯(0.15mol)的NaHCO₃(0.15M，200ml水)溶液被搅拌，添加Aliquat^TM(0.15mol)(三-C_8-10-烷基甲基季铵氯化物的混合物)，和3-溴-1-丙烯(0.75mol)/DCM(200ml)，然后在20℃搅拌反应混合物4天，分离有机层。用DCM(300ml)提取水层，干燥(MgSO₄)合并的有机层。蒸发溶剂，残留物在己烷(500ml)中搅拌，然后冷却至0℃。得到的沉淀被滤除，用己烷洗涤并在60℃干燥过夜，产生46g中间体(25)。

浓盐酸(28％)(100ml)和4-甲基-苯磺酸(0.7g)被添加至中间体(25)(0.13mol)的甲酸(400ml)溶液，然后搅拌并回流反应混合物6小时。蒸发溶剂，残留物在DCM(300ml)和饱和NaHCO₃水溶液(200ml)中分配。DCM-层被分离、干燥(MgSO₄)并蒸发溶剂。残留物经乙醚研磨产生固体(I)，浓缩母液层，然后从乙酸乙酯/己烷混合物结晶产生固体(II)。合并固体(I)和(II)，通过快速柱色谱法(洗脱剂：DCM/CH₃OH 95/5)纯化。收集产物级分，蒸发溶剂，残留物经己烷研磨。该残留物然后用乙醚研磨并滤除以产生固体，产生7g中间体(26)(mp.138-139℃)。

实施例A.9

2-甲氧基-3-吡啶羧酸(0.028mol)溶于DCM(150ml)。逐滴添加亚硫酰氯(8ml；0.112mol)至该混合物，该混合物被回流2小时30分钟。蒸发溶剂。然后添加DCM(150ml)，再次蒸发溶剂。粗化合物溶解于DCM(150ml)。首先添加N-甲基-N-(苯基甲基)-1，3-丙二胺(0.028mol)，然后添加饱和NaHCO₃水溶液(75ml)。混合物反应2小时。然后分层。分离的有机层经干燥(MgSO₄)、过滤并蒸发溶剂。残留物通过柱色谱法纯化(洗脱剂：100％CH₂Cl₂至CH₃OH/CH₂Cl₂1/100)。收集产物级分，蒸发溶剂，产生8.71g中间体(27)。

中间体(27)(0.028mol)在CH₃OH(150ml)中的混合物用作为催化剂的碳载钯10％(2g)氢化。在氢(1当量)摄取后，滤掉催化剂并蒸发滤液。通过添加HCl(6N)的2-丙醇溶液使残留物从2-丙醇结晶。残留物通过反相高效液相色谱法纯化(ShandonC18 BDS(碱去活二氧化硅)8μm，250g，I.D.5cm)。应用两种或三种流动相的梯度(相A：0.25％NH₄HCO₃水溶液；相B：CH₃OH(任选)；相C：CH₃CN)。收集产物级分并蒸发溶剂，产生2.65g中间体(28)。

实施例A.10

2-甲氧基-3-吡啶羧酸(0.00485mol)溶解于DCM(50ml)。向该混合物逐滴添加亚硫酰氯(1.4ml)，混合物被回流2小时30分钟。蒸发溶剂。然后添加DCM(50ml)，再次蒸发溶剂。粗化合物溶解于DCM(50ml)。首先添加4-(苯基甲基)-2-吗啉甲胺(0.00485mol)，然后添加饱和NaHCO₃水溶液(25ml)。混合物反应2小时。然后分层。分离的有机层经干燥(MgSO₄)、过滤并蒸发溶剂。残留物通过柱色谱法纯化(洗脱剂：100％CH₂Cl₂至CH₃OH/CH₂Cl₂1/100)。收集产物级分，蒸发溶剂，产生1.6g中间体(29)。

中间体(29)(0.0049mol)在CH₃OH(50ml)中的混合物用作为催化剂的碳载钯(0.4g)氢化。在氢(1当量)摄取后，滤掉催化剂并蒸发滤液。通过添加HCl(6N)的2-丙醇溶液使残留物从2-丙醇结晶。产物经滤除并干燥，产生作为盐酸盐而分离的0.8g中间体(30)。

实施例A.11

2-甲氧基-3-吡啶羧酸(0.0269mol)溶解于DCM(150ml)。向该混合物逐滴添加亚硫酰氯(8ml)，混合物被回流2小时30分钟。蒸发溶剂。然后添加DCM(150ml)，再次蒸发溶剂。粗化合物溶解于DCM(150ml)。首先添加4-氨基六氢-1H-氮杂-1-羧酸乙酯(0.0269mol)，然后添加饱和NaHCO₃水溶液(75ml)。混合物反应2小时。然后分层。分离的有机层经干燥(MgSO₄)、过滤并蒸发溶剂。残留物通过柱色谱法纯化(洗脱剂：100％CH₂Cl₂至CH₃OH/CH₂Cl₂1/100)。收集产物级分，蒸发溶剂，产生8.63中间体(31)。

中间体(31)(0.026mol)溶解于CH₃OH(60ml)。添加氢氧化钾(7g)，反应混合物回流5小时。向反应混合物添加DCM，有机层用水洗涤两次。分离的有机层经干燥(MgSO₄)、过滤并蒸发溶剂。残留物通过反相高效液相色谱法纯化(ShandonC18 BDS(碱去活二氧化硅)8μm，250g，I.D.5cm)。应用两种或三种流动相的梯度(相A：0.25％NH₄HCO₃水溶液；相B：CH₃OH(任选)；相C：CH₃CN)。收集产物级分并蒸发溶剂，产生2.01g中间体(32)。

实施例A.12

2-甲氧基-苯甲酸(0.0269mol)溶解于DCM(150ml)。向该混合物逐滴添加亚硫酰氯(8ml)，混合物被回流2小时30分钟。蒸发溶剂。然后添加DCM(150ml)，再次蒸发溶剂。粗化合物溶解于DCM(150ml)。首先添加4-氨基六氢-1H-氮杂-1-羧酸乙酯(0.0269mol)，然后添加饱和NaHCO₃水溶液(75ml)。混合物反应2小时。然后分层。分离的有机层经干燥(MgSO₄)、过滤并蒸发溶剂。残留物通过柱色谱法纯化(洗脱剂：100％CH₂Cl₂至CH₃OH/CH₂Cl₂1/100)。收集产物级分，蒸发溶剂，产生8.5g中间体(33)。

中间体(33)(0.0262mol)溶解于CH₃OH(120ml)，添加水(1ml)。添加氢氧化钠(7g)，反应混合物回流72小时。蒸发溶剂并添加水和DCM。有机层用水洗涤。分离的有机层经干燥(MgSO₄)、过滤并蒸发溶剂。残留物通过反相高效液相色谱法纯化(ShandonC18BDS(碱去活二氧化硅)8μm，250g，I.D.5cm)。应用两种或三种流动相的梯度(相A：0.25％NH₄HCO₃水溶液；相B：CH₃OH(任选)；相C：CH₃CN)。收集产物级分并蒸发溶剂，产生4.02g中间体(34)。

B.最终化合物的制备

实施例B.1

中间体(2)(0.0001mol)、聚苯乙烯-碳二亚胺(1.90mmol/g)树脂(0.0002mol，0.105g)、聚苯乙烯-N-甲基吗啉HL(3.80mmol/g)树脂(0.0005mol，0.132g)、中间体(19)(0.00015mol)的DCM(1ml)溶液和1-羟基苯并三唑(HOBT)(0.0015mol，0.020g)/THF(1ml)的混合物在室温摇动过夜。聚苯乙烯-碳酸氢盐(polystyrene-bicarbonate)(5.8mmol/g)树脂(0.0005mol，0.086g)作为清除剂被添加以去除过量HOBT。反应混合物摇动2小时，过滤，蒸发滤液，产生化合物(1)。

实施例B.2

DMF(3滴)被添加至中间体(19)(0.025mol)的DCM(100ml)溶液，然后添加亚硫酰氯(0.1mol)。反应混合物被搅拌、回流1小时，然后蒸发溶剂。添加DCM，蒸发溶剂。得到的残留物溶解于DCM(100ml)，然后添加中间体(7)(0.025mol)，随后添加NaHCO₃水溶液(50ml)。反应混合物在室温搅拌4小时，分层。有机层经干燥，蒸发溶剂。残留物通过高效液相色谱法(Chiralpak AD)(洗脱剂：己烷/乙醇80/20)分离成其对映体。收集两种产物级分，蒸发溶剂。残留物各自经DIPE研磨，然后收集需要的产物，产生4.84g化合物(25)和4.72g化合物(26)。

实施例B.3

中间体(19)(0.025mol)的DCM(100ml)溶液与亚硫酰氯(0.1mol)搅拌并回流1小时，然后蒸发溶剂。添加新鲜DCM，蒸发除去过量亚硫酰氯。残留物溶解于DCM(50ml)，将得到的溶液添加至中间体(9)(0.025mol)在DCM(50ml)中的混合物。添加NaHCO₃水溶液(50ml)，反应混合物在室温搅拌2小时。分离层，有机层用稀释盐酸洗涤，干燥，蒸发溶剂。得到的残留物通过HPLC纯化(Chiral phase AD)(洗脱剂：己烷/乙醇60/40)而分离成其对映体，产生5.02g化合物(27)和5.05g化合物(28)。

实施例B.4

中间体(26)(1g；0.0030mol)溶解于DCM(15ml)。向该溶液逐滴添加亚硫酰氯(0.54ml；0.0075mol)，然后添加几滴DMF。反应回流1小时。蒸发溶剂。向残留物添加DCM(15ml)，再次蒸发溶剂。粗混合物溶解于DCM(15ml)，首先添加中间体(9)(0.003mol)，然后添加NaHCO₃饱和水溶液(15ml)。反应混合物在室温搅拌2小时。分层。分离的有机层经干燥(MgSO₄)，过滤，蒸发溶剂，产生1.6g化合物(34)。

实施例B.5

化合物(38)(0.00297mol)溶解于THF(20ml)。反应物通氮气鼓泡，然后添加四(三苯基膦)钯(0.070g)。混合物用冰浴冷却至0℃，然后添加硼氢化钠(0.00297mol)。冷却持续4小时，混合物在室温反应过夜。然后，反应物用HCl(1N)猝灭，用DCM萃取。分离的有机层经干燥(MgSO₄)，过滤，蒸发溶剂。产物通过柱色谱法(洗脱剂：(CH₂Cl₂/CH₃OH)从99/1至90/10)纯化。收集产物级分，真空蒸发溶剂。残留物再溶解于CH₂Cl₂/CH₃OH，用活性炭处理。混合物经decalite过滤，蒸发溶剂。残留物通过反相高效液相色谱法纯化(ShandonC18 BDS(碱去活二氧化硅)8μm，250g，I.D.5cm)。应用两种或三种流动相的梯度(相A：0.25％NH₄HCO₃水溶液；相B：CH₃OH(任选)；相C：CH₃CN)。收集纯级分并蒸发溶剂。残留物再溶解于DCM，该溶液添加至二异丙醚。滤掉沉淀并干燥固体，产生0.016g化合物(29)。

实施例B.6.

a)化合物(34)(0.0030mol)溶解于THF(20ml)。反应物通氮气鼓泡，然后添加四(三苯基膦)钯(0.00006mol)。混合物用冰浴冷却至0℃，然后添加硼氢化钠(0.003mol)。冷却持续4小时，混合物在室温反应过夜。然后，反应物用HCl(1N)猝灭，用DCM萃取。分离的有机层经干燥(MgSO₄)，过滤，蒸发溶剂。产物通过柱色谱法(洗脱剂：(DCM/MeOH)从99/1至90/10)纯化。收集产物级分，真空蒸发溶剂。残留物再溶解于CH₂Cl₂/CH₃OH，用活性炭处理。混合物经decalite过滤，蒸发溶剂。残留物通过反相高效液相色谱法纯化(ShandonC18 BDS(碱去活二氧化硅)8μm，250g，I.D.5cm)。应用两种或三种流动相的梯度(相A：0.25％NH₄HCO₃水溶液；相B：CH₃OH(任选)；相C：CH₃CN)。收集产物级分并蒸发溶剂。残留物溶解于DCM，该溶液添加至二异丙醚。滤掉沉淀并干燥白色固体，产生反式-4-{[3-(2-甲氧基-苯甲酰氨基)-丙基]-甲基-氨基甲酰基}-1-苯基-1，2，3，4-四氢-萘-1-羧酸(中间体(35))。

b)中间体(35)(0.000199mol，0.100g)溶于无水DCM(2ml)。然后向该混合物添加1-羟基-1H-苯并三唑(1.2当量，0.032g)、N′-(乙基碳亚胺基)-N，N-二甲基-1，3-丙二胺(N′-(ethylcarbonimidoyl)-N，N-dimethyl-1，3-propanediamine)一盐酸化物(1.2当量，0.046g)和3-氨基丙酸甲酯盐酸盐(3当量，0.083g)和N-乙基-N-(1-甲基-乙基)-2-丙胺(10当量，0.329ml)。反应混合物在室温下搅拌过夜。添加额外的3-氨基-丙酸甲酯盐酸盐(3当量，0.083g)，混合物用饱和NaHCO₃水溶液洗涤3次。分离的有机层经干燥(MgSO₄)，过滤，蒸发溶剂。残留物然后通过柱色谱法纯化(100％CH₂Cl₂至2％CH₃OH/CH₂Cl₂)。收集想要的级分，蒸发溶剂，产生化合物(31)。

实施例B.7

中间体(19(0.00376mol，1.22g)溶于无水DCM(20ml)。然后向混合物添加HOBt(0.00451mol，0.733g)、1-乙基-3-(3′-二甲基-氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDCI)(0.00451mol，1.04g)和中间体(24)(0.00451mol)和DIPEA(0.0376mol，7.4ml)。反应混合物在室温下搅拌过夜。添加额外的中间体(24)(0.00451mol)，混合物用饱和NaHCO3水溶液洗涤3次。分离的有机层经干燥，过滤，蒸发溶剂。残留物然后通过快速柱色谱法纯化(100％CH2Cl2至CH3OH/CH2Cl2 1/20)。收集想要的产物级分，蒸发溶剂，产生化合物(45)。

表F-1列出了根据上述实施例之一制备的化合物。一些化合物的立体化学构型已经指示为R^*或S^*，表明在绝对立体化学未知情况下的相对立体化学，尽管化合物本身已经作为单一立体异构体被分离并因此是对映体纯的。对于一些化合物，包括了熔点(m.p.)。

表F-1

化合物鉴定

一般程序A

使用Alliance HT 2790(Waters)系统进行HPLC测量，所述系统包括具有排气器的四元泵、自动进样器、柱温箱(除非另外指明，设在40℃)、二极管阵列检测器(DAD)和下面各自方法中指定的柱。来自柱的流体被分至MS光谱仪。MS检测器配有电喷射离子化源。使用0.1秒的停留时间在1秒钟内扫描100至1000，获得质谱。毛细管针头电压为3kV，源温度保持在140℃。使用氮气作为喷雾器气体。使用Waters-Micromass MassLynx-Openlynx数据系统进行数据采集。

一般程序B

使用Acquity UPLC(Waters)系统进行LC测量，所述系统包括二元泵、样品组织器、柱加热器(设为55℃)，二极管阵列检测器(DAD)和下面各自方法中指定的柱。来自柱的流体被分至MS光谱仪。MS检测器配有电喷射离子化源。使用0.02秒的停留时间在0.18秒钟内扫描100至1000，获得质谱。毛细管针头电压为3.5kV，源温度保持在140℃。使用氮气作为喷雾器气体。使用Waters-Micromass MassLynx-Openlynx数据系统进行数据采集。

方法1除了一般程序A外：在Xterra MS C18柱(3.5μm，4.6x100mm)上进行反相HPLC，流速为1.6ml/min。使用三种流动相(流动相A：95％25mM醋酸铵+5％乙腈；流动相B：乙腈；流动相C：甲醇)运行梯度条件：6.5分钟内100％A至1％A、49％B和50％C，1分钟内至1％A和99％B并保持这些条件1分钟，以100％A再平衡1.5分钟。使用10μl注射体积。锥体(cone)电压对于正离子化模式是10V，对于负离子化模式为20V。

方法2

除了一般程序B外：在桥连乙基硅氧烷/二氧化硅混合物(BEH)C18柱(1.7μm，2.1x50mm；Waters Acquity)上进行反相UPLC(超高效液相色谱法)，流速0.8ml/min。使用两种流动相(流动相A：0.1％甲酸于H₂O中/甲醇95/5；流动相B：甲醇)运行梯度条件：1.3分钟内从95％A和5％B至5％A和95％B，并保持0.2分钟。使用0.5μl的注射体积。锥体电压对正离子化模式为10V，对负离子化模式为20V。

方法3

除了一般程序A外：在Chromolith(4.6x25mm)上进行反相HPLC，流速为3ml/min。使用三种流动相(流动相A：95％25mM醋酸铵+5％乙腈；流动相B：乙腈；流动相C：甲醇)运行梯度条件：0.9分钟内从96％A、2％B和2％C至49％B和49％C，0.3分钟内至100％B并保持0.2分钟。使用2μl注射体积。锥体电压对于正离子化模式是10V，对于负离子化模式为20V。

表：分析数据

当化合物是在LCMS方法中产生不同峰的异构体混合物时，仅主要组分的保留时间在LCMS表中提供(Rt：以分钟计的保留时间)。

Co.No.			Proc.	Co.No.			Proc.	Co.No.			Proc.
												1	5.93	471	1	15	6.72	615	1	29	1.34	541	2
2	6.06	501	1	16	6.13	485	1	30	1.36	542	2
												3	6.65	615	1	17	6.23	515	1	31	1.20	586	2
4	6.06	485	1	18	6.76	629	1	32	1.18	587	2
												5	6.19	515	1	19	6.15	485	1	33	1.19	613	2
6	6.72	629	1	20	6.16	515	1	36	1.08	527	3
												7	6.05	485	1	21	6.79	629	1	37	5.61	556	1
8	6.16	515	1	22	6.22	499	1	38	6.20	539	1
												9	6.76	629	1	23	6.32	529	1	39	6.14	540	1
10	6.19	499	1	24	6.82	643	1	40	6.40	568	1
												11	6.32	529	1	25	5.68	515	1	41	6.42	567	1
12	6.79	643	1	26	5.68	515	1	42	1.43	569	2
												13	6.06	471	1	27	5.81	529	1	43	1.03	601	2
14	6.16	501	1	28	5.82	529	1	44	1.20	612	2

旋光度：

使用旋光仪测量旋光度。[α]_D ²⁰表示在20℃的温度下使用钠D线波长(589nm)的光测量的旋光度。在实际值后，提到了用以测量旋光度的溶液浓度和溶剂。

C.药理实施例

C.1.ApoB分泌的定量

HepG2细胞在24-孔板中在含有10％胎牛血清的MEM Rega 3中培养。在70％汇合时，更换培养基并添加测试化合物或载体(DMSO，0.4％终浓度)。培养24小时后，将培养基转移至Eppendorf管，通过离心清洁。针对任一种apoB的绵羊抗体被添加至上清液，混合物在8℃保持24小时。然后，添加兔抗绵羊抗体，使免疫复合体在8℃沉淀24小时。免疫沉淀物以1320g离心25分钟而成粒状沉淀(pelleted)，用含有40mM Mops、40mM NaH₂PO₄、100mM NaF、0.2mM DTT、5mM EDTA、5mM EGTA、1％Triton-X-100、0.5％去氧胆酸钠(DOC)、0.1％SDS、0.2μM亮肽素和0.2μM PMSF的缓冲液洗涤两次。沉淀中的放射活性通过液体闪烁计数定量。IC₅₀值通常被转化为pIC50值(＝-log IC₅₀值)以便于使用，并总结于表C-1。

表C-1：pIC50值

Co.No.	pIC50	Co.No.	pIC50	Co.No.	pIC50
						4	6.499	16	6.102	25	7.761
5	6.716	17	6.382	26	6.252
						6	7.37	18	6.51	28	7.018
7	＜6	19	6.642	29	6.985
						8	＜6	20	＜6	30	7.115
9	6.893	21	6.62	31	＜6
						10	6.127	22	6.179	32	＜6
11	6.177	23	6.224	33	＜6
						12	7.634	24	7.635	42	6.544

C.2.MTP分析

MTP活性使用J.R.Wetterau和D.B.Zilversmit在Chemistry andPhysics of Lipids，38，205-222(1985)中描述的类似分析进行测量。为制备供体和受体小泡(vesicle)，将适合的脂质/氯仿放入玻璃试管并在N₂流下干燥。将含有15mM Tris-HCl pH 7.5、1mM EDTA、40mM NaCl、0.02％NaN₃的缓冲液(分析缓冲液)添加至干燥脂质。混合物简单涡旋，然后使脂质在冰上水化20分钟。然后通过在室温下浴声处理(Branson 2200)最多15分钟来制备小泡。丁基化羟基甲苯以0.1％的浓度包括在所有小泡制剂中。脂质转移分析混合物含有供体小泡(40nmol磷脂酰胆碱、7.5mol％心磷脂和0.25mol％甘油三[1-¹⁴C]-油酸酯)、受体小泡(240nmol磷脂酰胆碱)和5mg BSA，总体积675μl，于1.5ml微量离心管中。测试化合物溶解于DMSO(0.13％终浓度)添加。在37℃下5分钟预孵育后，通过添加100μl透析缓冲液中的MTP而起始反应。通过添加在15mM Tris-HCl pH 7.5、1mM EDTA、0.02％NaN₃(1∶1，体积/体积)中预平衡的400μl DEAE-52纤维素而终止反应。混合物搅拌4分钟并在Eppendorf离心管中以最大速度离心2分钟(4℃)以沉淀DEAE-52结合的供体小泡。含有受体脂质体的上清液部分被计数，使用[¹⁴C]计数来计算从供体小泡转移至受体小泡的甘油三酯百分比。

表C-2：pIC50值

Co.No.	pIC50	Co.No.	pIC50	Co.No.	pIC50
						1	5.902	13	5.269	25	8.186
2	6.391	14	5.604	26	6.761
						3	6.681	15	5.56	27	6.112
4	7.654	16	＜7	28	8.144
						5	8.028	17	7.428	29	7.398
6	8.018	18	7.209	30	7.633
						7	7.068	19	6.883	31	7.186
8	7.568	20	7.151	32	6.78
						9	7.718	21	7.317	33	7.097
10	8	22	7.785	42	7.639
						11	8.245	23	7.935	43	＜6
12	8.198	24	8.214	44	7.277

Claims (11)

1.式(I)化合物、其药学可接受的酸加成盐及其立体化学异构形式：

其中

A是-(C＝O)-；

X代表

n是整数2或3；

R⁵是氢；

R⁶是氢或C_1-4烷基；

R¹是NR⁷R⁸或OR⁹；

其中R⁷和R⁸各自独立选自氢，

经1、2或3个取代基取代的C_1-8烷基，每个取代基相互独立选自C_1-4烷氧基羰基；

R⁹是C_1-8烷基，

C_3-8烯基；

R^2a、R^2b和R^2c是氢；

R^3a、R^3b和R^3c是氢；

R⁴是苯基；经1、2、3或5个取代基取代的苯基，每个取代基独立选自C_1-4烷氧基或任选经1、2或3个取代基取代的苯基，每个取代基独立选自卤代或三氟甲基；

或任选经一个或两个取代基取代的吡啶基，每个取代基独立选自羟基或C_1-4烷氧基。

2.权利要求1所述的化合物，其中R¹是NR⁷R⁸。

3.权利要求1所述的化合物，其中R¹是OR⁹。

4.权利要求1所述的化合物，其中A代表-(C＝O)-；R¹是OR⁹，其中R⁹是C_1-6烷基或C_3-8烯基；R^2a、R^3a、R^2b、R^3b、R^2c和R^3c是氢；R⁴代表苯基、经C_1-4烷氧基取代的苯基、经卤素取代的苯基、经羟基取代的吡啶基或经C_1-4烷氧基取代的吡啶基；并且X代表基团(a-1)，其中R⁵是氢，且R⁶是氢或C_1-4烷基。

5.一种药物组合物，其包含药学可接受载体和治疗活性量的、权利要求1至4任一项所述的化合物。

6.一种制备权利要求5所述药物组合物的方法，其中治疗活性量的权利要求1至4任一项所述的化合物与药学可接受载体紧密混合。

7.权利要求1至4任一项所述的化合物在制备药物中的用途。

8.一种式(II)化合物，其中A、X、R¹、R^2a、R^2b、R^2c、R^3a、R^3b、R^3c和R⁵如权利要求1中所限定的

9.一种式(XVII)化合物，其中取代基R^2a、R^2b、R^2c、R^3a、R^3b、R^3c、R⁴、R⁵、A和X如权利要求1中所限定的

10.一种制备式(I)化合物的方法，其中

a)式(II)中间体与式(III)中间体在反应惰性溶剂中和任选在适合偶联试剂和/或适合碱存在下反应

b)或者，式(I)化合物相互转化；或者如果需要；式(I)化合物被转化成药学可接受酸加成盐，或者反过来，式(I)化合物的酸加成盐用碱转化成游离碱形式；和如果需要，制备其立体化学异构形式，

其中R¹、R^2a、R^2b、R^2c、R^3a、R^3b、R^3c、R⁴、R⁵、A和X如权利要求1中所限定的。

11.一种制备定义为其中基团A代表-(C＝O)-的式(I)化合物的式(I-a)化合物的方法，

a)其中式(V)中间体与式(IV)中间体在反应惰性溶剂中和任选在适合偶联试剂和/或适合碱存在下反应

b)或者，式(I-a)化合物相互转化；或者如果需要；式(I-a)化合物被转化成药学可接受酸加成盐，或者反过来，式(I-a)化合物的酸加成盐用碱转化成游离碱形式；和如果需要，制备其立体化学异构形式，

其中，R¹、R^2a、R^2b、R^2c、R^3a、R^3b、R^3c、R⁴、R⁵和X如权利要求1中所限定的。