HK1118863B - Phage particle diagnostic reagents - Google Patents

Claims (23)

1. Procédé in vitro de détection de la présence d'un fragment portant un antigène sur une cellule, ledit procédé comprenant les étapes consistant à :

   a) prévoir un bactériophage, pour lequel ledit bactériophage :

   i) comprend une molécule marqueuse détectable ; et

   ii) présente sur sa surface extérieure un anticorps connu pour se lier spécifiquement avec ledit fragment portant un antigène,

   - pour lequel le bactériophage est obtenu par un procédé comprenant les étapes consistant à insérer dans une cellule bactérienne une séquence d'acide nucléique codant l'anticorps à présenter sur la surface du bactériophage et à transfecter la même cellule bactérienne avec un phage d'assistance, pour lequel ladite séquence d'acide nucléique codant l'anticorps est dépourvue d'une séquence d'enrobage du bactériophage ;

   b) mettre en contact une cellule avec ledit bactériophage ;

   c) dénaturer le bactériophage spécifiquement lié à ladite cellule pour libérer ladite molécule marqueuse ; et

   d) détecter ladite molécule marqueuse, pour lequel cette détection de ladite molécule marqueuse détecte la présence dudit fragment portant un antigène sur ladite cellule.
2. Procédé selon la revendication 1, pour lequel ladite molécule marqueuse est sélectionnée parmi le groupe constitué par un acide nucléique marqueur, une molécule fluorescente, un polypeptide, un lipide, un hydrate de carbone, un ligand, un récepteur, une enzyme, un substrat et une molécule inorganique.
3. Procédé selon la revendication 2, consistant en outre à amplifier ledit acide nucléique marqueur avant l'étape (d).
4. Procédé selon la revendication 1, ledit procédé consistant en outre à laver ladite cellule entre les étapes (b) et (c).
5. Procédé selon la revendication 1, pour lequel ladite cellule est un globule rouge sanguin et ledit fragment portant un antigène est un antigène de globule rouge.
6. Procédé selon la revendication 5, pour lequel ledit antigène de globule rouge est sélectionné parmi le groupe constitué par A, B, Rh(D), Rh(C), Rh(c), Rh(E), Rh(e), K, k, Js^a, Js^b, Kp^a, Le^a, Le^b, Lu^a, Lu^b, Fy^a, Fy^b, M, N, S, s, Do^a, Do^b, Jk^a et Jk^b.
7. Procédé selon la revendication 1, pour lequel ladite cellule est un globule blanc et pour lequel ledit fragment portant un antigène est sélectionné parmi le groupe constitué par un antigène lymphocyte, un antigène monocyte et un antigène granulocyte.
8. Procédé selon la revendication 1, pour lequel ladite cellule est une plaquette et, en outre, pour lequel ledit fragment portant un antigène est un antigène de plaquette.
9. Procédé selon la revendication 8, pour lequel ledit antigène de plaquette est sélectionné parmi le groupe constitué par HPA-1a, HPA-1b, HPA-2a, HPA-2b, HPA-3a, HPA-3b, HPA-4a, HPA-4b, HPA-5a, HPA-5b, HPA-6b, HPA-7b, HPA-8b, HPA-9b, HPA-10b, Gov^a et Gov^b.
10. Procédé selon la revendication 1, pour lequel ledit acide nucléique comprend une séquence complémentaire à une sonde de balise moléculaire.
11. Procédé selon la revendication 10, pour lequel ladite sonde de balise moléculaire comprend un fluorophore.
12. Procédé selon la revendication 3, pour lequel ledit acide nucléique est amplifié en utilisant une réaction en chaine par polymérase (PCR).
13. Procédé selon la revendication 3, pour lequel ledit acide nucléique est amplifié par une transcription utilisant une immuno-détection amplifiée par ARN T7 (IDAT).
14. Procédé selon la revendication 2, pour lequel ladite molécule marqueuse est un acide nucléique marqueur.
15. Procédé selon la revendication 14, pour lequel ledit acide nucléique marqueur est détecté en analysant la température de fusion de l'acide nucléique marqueur.
16. Nécessaire de détection de la présence d'un fragment portant un antigène sur une cellule, ledit nécessaire comprenant un bactériophage, dans lequel ledit bactériophage :

    i) comprend une molécule marqueuse détectable ; et

    ii) présente sur sa surface extérieure un anticorps connu pour se lier spécifiquement avec ledit fragment portant un antigène,

    - dans lequel le bactériophage est obtenu par un procédé comprenant les étapes consistant à insérer dans une cellule bactérienne une séquence d'acide nucléique codant l'anticorps à présenter sur la surface du bactériophage et à transfecter la même cellule bactérienne avec un phage d'assistance, pour lequel ladite séquence d'acide nucléique codant l'anticorps est dépourvue d'une séquence d'enrobage du bactériophage ;

    - ledit nécessaire comprenant en outre un applicateur et une documentation d'instructions pour son utilisation.
17. Procédé in vitro de détection de la présence d'un fragment portant un antigène sur une cellule, ledit procédé comprenant les étapes consistant à :

    a) prévoir un bactériophage, pour lequel ledit bactériophage :

    i) comprend au moins deux molécules marqueuses, pour lequel lesdites molécules marqueuses sont chacune distinctement détectable ; et

    ii) présente sur sa surface extérieure un anticorps connu pour se lier spécifiquement avec ledit fragment portant un antigène,

    - pour lequel le bactériophage est obtenu par un procédé comprenant les étapes consistant à insérer dans une cellule bactérienne une séquence d'acide nucléique codant l'anticorps à présenter sur la surface du bactériophage et à transfecter la même cellule bactérienne avec un phage d'assistance, pour lequel ladite séquence d'acide nucléique codant l'anticorps est dépourvue d'une séquence d'enrobage du bactériophage ;

    b) mettre en contact une cellule avec ledit bactériophage ;

    c) dénaturer le bactériophage spécifiquement lié à ladite cellule pour libérer lesdites molécules marqueuses ; et

    d) détecter au moins une desdites molécules marqueuses, pour lequel cette détection desdites molécules marqueuses détecte la présence dudit fragment portant un antigène sur ladite cellule.
18. Procédé in vitro de détection de la présence d'au moins deux fragments différents portant un antigène sur une cellule, ledit procédé comprenant les étapes consistant à :

    a) prévoir un premier bactériophage, pour lequel ledit premier bactériophage :

    i) comprend une première molécule marqueuse détectable ; et

    ii) présente sur sa surface extérieure un anticorps connu pour se lier spécifiquement avec un premier fragment portant un antigène,

    - pour lequel ledit premier bactériophage est obtenu par un procédé comprenant les étapes consistant à insérer dans une cellule bactérienne une première séquence d'acide nucléique codant l'anticorps à présenter sur la surface du premier bactériophage et à transfecter la même cellule bactérienne avec un phage d'assistance, pour lequel ladite première séquence d'acide nucléique codant l'anticorps est dépourvue d'une séquence d'enrobage du bactériophage ;

    b) prévoir un second bactériophage, pour lequel ledit second bactériophage :

    i) comprend une seconde molécule marqueuse détectable ; et

    ii) présente sur sa surface extérieure un anticorps connu pour se lier spécifiquement avec un second fragment portant un antigène,

    - pour lequel ledit second bactériophage est obtenu par un procédé comprenant les étapes consistant à insérer dans une cellule bactérienne une seconde séquence d'acide nucléique codant l'anticorps à présenter sur la surface du second bactériophage et à transfecter la même cellule bactérienne avec un phage d'assistance, pour lequel ladite seconde séquence d'acide nucléique codant l'anticorps est dépourvue d'une séquence d'enrobage du bactériophage ;

    c) mettre en contact ladite cellule avec ledit premier bactériophage ;

    d) mettre en contact ladite cellule avec ledit second bactériophage ;

    e) détecter la liaison dudit premier bactériophage avec ledit premier fragment portant un antigène en détectant la présence de ladite première molécule marqueuse, pour lequel cette détection de ladite première molécule marqueuse détecte la présence dudit premier fragment portant un antigène sur ladite cellule ; et

    f) détecter la liaison dudit second bactériophage avec ledit second fragment portant un antigène en détectant la présence de ladite seconde molécule marqueuse, pour lequel cette détection de ladite seconde molécule marqueuse détecte la présence dudit second fragment portant un antigène sur ladite cellule.
19. Procédé selon la revendication 18, pour lequel ladite première molécule marqueuse est un premier acide nucléique marqueur et, en outre, pour lequel ladite seconde molécule marqueuse est un second acide nucléique marqueur.
20. Procédé selon la revendication 19, pour lequel lesdits premier et second acides nucléiques marqueurs sont détectés en analysant les températures de fusion desdits premier et second acides nucléiques marqueurs.
21. Procédé de détection de la présence d'un anticorps anti globule rouge dans un sérum humain, ledit procédé comprenant les étapes consistant à :

    a) mettre en contact un globule rouge humain exprimant au moins un antigène de globule rouge humain sur la surface de ladite cellule avec ledit sérum ;

    b) laver ladite cellule pour retirer tout anticorps lié non-spécifiquement avec ladite cellule ;

    c) prévoir un bactériophage, pour lequel ledit bactériophage :

    i) comprend une molécule marqueuse détectable ; et

    ii) présente sur sa surface extérieure un réactif anti-globuline humain,

    - pour lequel ledit réactif est obtenu par un procédé comprenant les étapes consistant à insérer dans une cellule bactérienne une séquence d'acide nucléique codant le réactif à présenter sur la surface du bactériophage et à transfecter la même cellule bactérienne avec un phage d'assistance, pour lequel ladite séquence d'acide nucléique codant le réactif est dépourvue d'une séquence d'enrobage du bactériophage ;

    d) mettre en contact ladite cellule avec ledit bactériophage ;

    e) laver ladite cellule pour retirer tout anticorps lié non-spécifiquement avec ladite cellule ;

    f) dénaturer le bactériophage spécifiquement lié à ladite cellule pour libérer ladite molécule marqueuse ; et

    g) détecter ladite molécule marqueuse, pour lequel cette détection de ladite molécule marqueuse détecte la présence dudit anticorps anti globule rouge dans ledit sérum.
22. Procédé in vitro de détection de la présence d'un anticorps anti globule rouge chez un humain, ledit procédé comprenant les étapes consistant à :

    a) laver un globule rouge obtenu chez ledit humain pour retirer tout anticorps lié non-spécifiquement avec ladite cellule ;

    b) prévoir un bactériophage, pour lequel ledit bactériophage :

    i) comprend une molécule marqueuse détectable ; et

    ii) présente sur sa surface extérieure un réactif anti-globuline humain,

    - pour lequel ledit réactif est obtenu par un procédé comprenant les étapes consistant à insérer dans une cellule bactérienne une séquence d'acide nucléique codant le réactif à présenter sur la surface du bactériophage et à transfecter la même cellule bactérienne avec un phage d'assistance, pour lequel ladite séquence d'acide nucléique codant le réactif est dépourvue d'une séquence d'enrobage du bactériophage ;

    c) mettre en contact ladite cellule avec ledit bactériophage ;

    d) dénaturer le bactériophage spécifiquement lié à ladite cellule pour libérer ladite molécule marqueuse ; et

    g) détecter ladite molécule marqueuse, pour lequel cette détection de ladite molécule marqueuse détecte la présence dudit anticorps anti globule rouge chez ledit humain.
23. Procédé de détection de la présence d'un fragment portant un antigène dans une composition, ledit procédé comprenant les étapes consistant à :

    a) prévoir un bactériophage, pour lequel ledit bactériophage :

    i) comprend une molécule marqueuse détectable ; et

    ii) présente sur sa surface extérieure un anticorps connu pour se lier spécifiquement avec ledit fragment portant un antigène,

    - pour lequel le bactériophage est obtenu par un procédé comprenant les étapes consistant à insérer dans une cellule bactérienne une séquence d'acide nucléique codant l'anticorps à présenter sur la surface du bactériophage et à transfecter la même cellule bactérienne avec un phage d'assistance, pour lequel ladite séquence d'acide nucléique codant l'anticorps est dépourvue d'une séquence d'enrobage du bactériophage ;

    b) mettre en contact ladite composition avec ledit bactériophage ; et

    c) détecter ladite molécule marqueuse, pour lequel cette détection de ladite molécule marqueuse détecte la présence dudit fragment portant un antigène sur ladite cellule.