HK1118863B - Phage particle diagnostic reagents - Google Patents

Claims (23)

1. Ein in vitro Verfahren zum Nachweisen des Vorliegens einer Antigen-tragenden Gruppe auf einer Zelle, wobei das Verfahren die folgenden Schritte umfasst:

   a) Bereitstellen eines Bakteriophagen, wobei besagter Bakteriophage

   i) ein nachweisbares Markierungs-Molekül umfasst; und

   ii) auf seiner äußeren Oberfläche einen Antikörper präsentiert, von dem bekannt ist, dass er spezifisch an besagte Antigen-tragende Gruppe bindet,

   wobei der Bakteriophage erhalten wird durch ein Verfahren umfassend die Schritte des Einbringens einer Nukleinsäuresequenz, die den Antikörper kodiert, der auf der Oberfläche des Bakteriophagen präsentiert werden soll, in eine Bakterienzelle und Transfizieren der gleichen Bakterienzelle mit einem Helfer-Phagen, wobei besagte den Antikörper kodierende Nukleinsäuresequenz keine Bakteriophagen-Verpackungssequenz aufweist;

   b) Inkontaktbringen einer Zelle mit besagtem Bakteriophagen;

   c) Denaturieren des Bakteriophagen, der spezifisch mit besagter Zelle gebunden ist, um besagtes Markierungs-Molekül freizusetzen, und

   d) Nachweisen von besagtem Markierungs-Molekül, wobei das Nachweisen von besagtem Markierungs-Molekül das Vorliegen der Antigen-tragenden Gruppe auf besagter Zelle nachweist.
2. Das Verfahren von Anspruch 1, wobei besagtes Markierungsmolekül ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus einer Markierungs-Nukleinsäure, einem fluoreszierenden Molekül, einem Polypeptid, einem Lipid, einem Kohlenhydrat, einem Liganden, einem Rezeptor, einem Enzym, einem Substrat und einem anorganischen Molekül.
3. Das Verfahren von Anspruch 2, desweiteren umfassend das Amplifizieren von besagter Markierungs-Nukleinsäure vor dem Schritt (d).
4. Das Verfahren von Anspruch 1, wobei besagtes Verfahren desweiteren das Waschen von besagter Zelle zwischen dem Schritt (b) und dem Schritt (c) umfasst.
5. Das Verfahren von Anspruch 1, wobei besagte Zelle eine rote Blutkörperchen-Zelle ist und besagtes Antigen-tragende Molekül ein rotes Blutkörperchenzell-Antigen ist.
6. Das Verfahren von Anspruch 5, wobei besagtes rotes Blutkörperchenzell-Antigen ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus A, B, Rh(D), Rh(C), Rh(c), Rh(E), Rh(e), K, k, Js^a, Js^b, Kp^a, Le^a, Le^b, Lu^a, Lu^b, Fy^a, Fy^b, M, N, S, s, Do^a, Do^b, Jk^a, und Jk^b.
7. Das Verfahren von Anspruch 1, wobei besagte Zelle eine weiße Blutkörperchen-Zelle ist und besagte Antigen-tragende Gruppe ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus einem Lymphozyten-Antigen, einem Monozyten-Antigen und einem Granulozyten-Antigen.
8. Das Verfahren von Anspruch 1, wobei besagte Zelle ein Blutplättchen ist und wobei desweiteren besagte Antigen-tragende Gruppe ein Blutplättchen-Antigen ist.
9. Das Verfahren von Anspruch 8, wobei besagtes Blutplättchen-Antigen ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus HPA-1a, HPA-1b, HPA-2a, HPA-2b, HPA-3a, HPA-3b, HPA-4a, HPA-4b, HPA-5a, HPA-5b, HPA-6b, HPA-7b, HPA-8b, HPA-9b, HPA-10b, Gov^a, und Gov^b.
10. Das Verfahren von Anspruch 1, wobei besagte Nukleinsäure eine Sequenz umfasst, die komplementär zu einer molekularen Leuchtsignal-Sonde ist.
11. Das Verfahren von Anspruch 10, wobei besagte molekulare Leuchtsignal-Sonde einen Fluorophor umfasst.
12. Das Verfahren von Anspruch 3, wobei besagte Nukleinsäure unter Verwendung der Polymerase-Kettenreaktion (PCR) amplifiziert wird.
13. Das Verfahren von Anspruch 3, wobei besagte Nukleinsäure durch Transkription amplifiziert wird unter Verwendung von Immunonachweis, amplifiziert mit T7 RNA (IDAT).
14. Das Verfahren von Anspruch 2, wobei besagtes Markierungsmolekül eine Markierungs-Nukleinsäure ist.
15. Das Verfahren von Anspruch 14, wobei besagte Markierungs-Nukleinsäure nachgewiesen wird durch Untersuchen der Schmelztemperatur der Markierungs-Nukleinsäure.
16. Ein Kit zum Nachweisen des Vorliegens einer Antigen-tragenden Gruppe auf einer Zelle, wobei besagter Kit einen Bakteriophagen umfasst, wobei besagter Bakteriophage:

    a) ein nachweisbares Markierungs-Molekül umfasst und;

    b) auf seiner äußeren Oberfläche einen Antikörper präsentiert, von dem bekannt ist, dass er spezifisch mit besagter Antigen-tragenden Gruppe bindet, wobei der Bakteriophage erhalten wird durch ein Verfahren umfassend die Schritte des Einbringens einer Nukleinsäuresequenz, die den Antikörper kodiert, der auf der Oberfläche des Bakteriophagen präsentiert werden soll, in eine Bakterienzelle und Transfizieren der gleichen Bakterienzelle mit einem Helfer-Phagen, wobei besagte den Antikörper kodierende Nukleinsäuresequenz keine Bakteriophagen-Verpackungs-Sequenz aufweist;

    wobei besagter Kit desweiteren einen Applikator und eine Gebrauchsanweisung zur Verwendung davon umfasst.
17. Ein in vitro Verfahren zum Nachweisen des Vorliegens einer Antigen-tragenden Gruppe auf einer Zelle, wobei besagtes Verfahren folgende Schritte umfasst:

    a) Bereitstellen eines Bakteriophagen, wobei besagter Bakteriophage:

    i) zumindest zwei Markierungs-Moleküle umfasst, wobei besagte Markierungsmoleküle jeweils unterschiedlich voneinander nachweisbar sind; und

    ii) auf seiner äußeren Oberfläche einen Antikörper präsentiert, von dem bekannt ist, dass er spezifisch mit besagter Antigen-tragender Gruppe bindet, wobei der Bakteriophage erhalten wird durch ein Verfahren umfassend die Schritte des Einbringens einer Nukleinsäuresequenz, die den Antikörper kodiert, der auf der Oberfläche des Bakteriophagen präsentiert werden soll, in eine Bakterienzelle und Transfizieren der gleichen Bakterienzelle mit einem Helfer-Phagen, wobei besagte den Antikörper kodierende Nukleinsäuresequenz keine Bakteriophagen-Verpackungs-Sequenz aufweist;

    b) Inkontaktbringen einer Zelle mit besagtem Bakteriophagen;

    c) Denaturieren des Bakteriophagen, der spezifisch mit besagter Zelle gebunden ist, um besagte Markierungs-Moleküle freizusetzen; und

    d) Nachweisen von zumindest einem von besagten Markierungs-Molekülen, wobei das Nachweisen von besagten Markierungsmolekülen das Vorliegen der Antigentragenden Gruppe auf besagter Zelle nachweist.
18. Ein in vitro Verfahren zum Nachweisen des Vorliegens von zumindest zwei unterschiedlichen Antigen-tragenden Gruppen auf einer Zelle, wobei besagtes Verfahren folgende Schritte umfasst:

    a) Bereitstellen eines ersten Bakteriophagen, wobei besagter erster Bakteriophage:

    i) ein nachweisbares erstes Markierungs-Molekül umfasst; und

    ii) auf seiner äußeren Oberfläche einen Antikörper präsentiert, von dem bekannt ist, dass er spezifisch an eine erste Antigen-tragende Gruppe bindet, wobei besagter erster Bakteriophage erhalten wird durch ein Verfahren umfassend die Schritte des Einbringens einer ersten Nukleinsäuresequenz, welche den auf der Oberfläche des ersten Bakteriophagen zu präsentierenden Antikörper kodiert, in eine Bakterienzelle und Transfizieren der gleichen Bakterienzelle mit einem Helferphagen, wobei besagte den Antikörper kodierende erste Nukleinsäuresequenz keine Bakteriophagen-Verpackungs-Sequenz aufweist;

    b) Bereitstellen eines zweiten Bakteriophagen, wobei der zweite Bakteriophage:

    i) ein nachweisbares erstes Markermolekül umfasst; und

    ii) auf seiner äußeren Oberfläche einen Antikörper präsentiert, von dem bekannt ist, dass er spezifisch mit einer zweiten Antigen-tragenden Gruppe bindet, wobei besagter zweiter Bakteriophage erhalten wird durch ein Verfahren umfassend die Schritte des Einbringens einer zweiten Nukleinsäuresequenz, die den Antiköper, der auf der Oberfläche des zweiten Bakteriophagen präsentiert werden soll, kodiert, in eine Bakterienzelle und Transzifieren der gleichen Bakterienzelle mit einem Helfer-Phagen, wobei besagte zweite Nukleinsäuresequenz, die den Antikörper kodiert, keine Bakteriophagen-Verpackungs-Sequenz aufweist;

    c) Inkontaktbringen besagter Zelle mit besagtem ersten Bakteriophagen;

    d) Inkontaktbringen von besagter Zelle mit besagtem zweiten Bakteriophagen;

    e) Nachweisen des Bindens von besagtem ersten Bakteriophagen mit besagter erster Antigen-tragender Gruppe durch Nachweisen des Vorliegens von besagtem ersten Markierungs-Molekül, wobei das Nachweisen von besagtem ersten Markierungs-Molekül das Vorliegen der ersten Antigen-tragenden Gruppe auf besagter Zelle nachweist;

    f) Nachweisen des Bindens des zweiten Bakteriophagen mit besagter zweiter Antigen-tragender Gruppe durch Nachweisen des Vorliegens von besagtem zweiten Markierungs-Molekül, wobei das Nachweis von besagtem zweiten Markierungs-Molekül das Vorliegen von besagter zweiter Antigen-tragender Gruppe auf besagter Zelle nachweist.
19. Das Verfahren von Anspruch 18, wobei das besagte erste Markierungs-Molekül eine erste Markierungs-Nukleinsäure ist und desweiteren wobei besagtes zweites Markierungs-Molekül eine zweite Markierungs-Nukleinsäure ist.
20. Das Verfahren von Anspruch 19, wobei besagte erste und zweite Markierungs-Nukleinsäure nachgewiesen werden durch Untersuchen der Schmelztemperaturen von besagten ersten und zweiten Markierungs-Nukleinsäuren.
21. Ein Verfahren zum Nachweisen des Vorliegens eines Antikörpers gegen rote Blutkörperchen-Zellen in humanem Serum, wobei besagtes Verfahren folgende Schritte umfasst:

    a) Inkontaktbringen einer menschlichen roten Blutkörperchen-Zelle, welche zumindest ein menschliches rotes Blutkörperchen-Zellantigen auf der Oberfläche von besagter Zelle exprimiert, mit besagtem Serum;

    b) Waschen von besagter Zelle, um jeglichen Antikörper, der nicht spezifisch mit besagter Zelle bindet, zu entfernen;

    c) Bereitstellen eines Bakteriophagen, wobei besagter Bakteriophage:

    i) ein nachweisbares Markierungs-Molekül umfasst; und

    ii) auf seiner äußeren Oberfläche ein Anti-Humanglobulin-Reagenz präsentiert, wobei besagtes Reagenz erhalten wird durch ein Verfahren umfassend die Schritte des Einbringens einer Nukleinsäure-Sequenz, welche das Reagenz, das auf der Oberfläche des Bakteriophagen präsentiert werden soll, kodiert, in eine Bakterienzelle, und Transfizieren der gleichen Bakterienzelle mit einem HelferPhagen, wobei besagte das Reagenz kodierende Nukleinsäuresequenz keine Bakteriophagen-Verpackungs-Sequenz aufweist;

    d) Inkontaktbringen von besagter Zelle mit besagtem Bakteriophagen;

    e) Waschen von besagter Zelle, um irgendeinen Bakteriophagen, der nicht spezifisch mit besagter Zelle bindet, zu entfernen;

    f) Denaturieren eines Bakteriophagen, der spezifisch mit besagter Zelle gebunden ist, um besagtes Markierungs-Molekül freizusetzen; und

    g) Nachweisen von besagtem Markierungs-Molekül, wobei das Nachweisen von besagtem Markierungs-Molekül das Vorliegen von einem Antikörper gegen rote Blutkörperchen-Zellen in besagtem Serum nachweist.
22. Ein in vitro Verfahren zum Nachweisen des Vorliegens eines Antikörpers gegen eine rote Blutkörperchen-Zelle in einem Menschen, wobei besagtes Verfahren folgende Schritte umfasst:

    a) Waschen einer roten Blutkörperchen-Zelle erhalten aus besagten Menschen, um jeglichen Antikörper zu entfernen, der nicht spezifisch mit besagter Zelle gebunden hat;

    b) Bereitstellen eines Bakteriophagen, wobei besagter Bakteriophage:

    i) ein nachweisbares Markierungs-Molekül umfasst; und

    ii) auf seiner äußeren Oberfläche ein Anti-Humanglobulin-Reagenz präsentiert, wobei besagtes Reagenz erhalten wird durch ein Verfahren umfassend die Schritte des Einbringens einer Nukleinsäuresequenz, welche das Reagenz, das auf der Oberfläche des Bakteriophagen präsentiert werden soll, kodiert in eine Bakterienzelle und Transfizieren der gleichen Bakterienzelle mit einem Helferphagen, wobei besagte das Reagenz-kodierende Nukleinsäuresequenz keine Bakteriophagen-Verpackungs-Sequenz aufweist;

    c) Inkontaktbringen von besagter Zelle mit besagten Bakteriophagen;

    d) Denaturieren des Bakteriophagen, der spezifisch mit besagter Zelle gebunden ist, um besagtes Markierungs-Molekül freizusetzen; und

    e) Nachweisen von besagten Markierungs-Molekülen, wobei das Nachweisen von besagtem Markierungs-Molekül das Vorliegen eines Antikörpers gegen rote Blutkörperchen-Zellen in besagtem Serum nachweist.
23. Das Verfahren zum Nachweisen des Vorliegens einer Antigen-tragenden Gruppe in einer Zusammensetzung, wobei das Verfahren folgende Schritte umfasst:

    a) Bereitstellen eines Bakteriophagen, wobei besagter Bakteriophage:

    i) ein nachweisbares erstes Markierungs-Molekül umfasst; und

    ii) auf seiner äußeren Oberfläche einen Antikörper präsentiert, von dem man weiß, dass er spezifisch mit besagter Antigen-tragender Gruppe bindet, wobei der Bakteriophage erhalten wird durch ein Verfahren umfassend die Schritte des Einbringens einer Nukleinsäuresequenz, welche den Antikörper kodiert, der auf der Oberfläche des Bakteriophagen präsentiert werden soll, in eine Bakterienzelle und Transfizieren der gleichen Bakterienzelle mit einem Helfer-Phagen, wobei besagte den Antikörper kodierende Nukleinsäuresequenz keine Bakteriophagen-Verpackungs-Sequenz aufweist;

    b) Inkontaktbringen von besagter Zusammensetzung mit besagtem Bakteriophagen; und

    c) Nachweisen von besagtem Markierungsmolekül, wobei das Nachweisen von besagtem Markierungsmolekül das Vorliegen von besagter Antigen-tragender Gruppe auf besagter Zelle nachweist.