HK1188788A - 作为gpr 119调节剂的4-(5-氰基-吡唑-1-基)哌啶衍生物 - Google Patents

Description

作为GPR 119 调节剂的4-(5-氰基-吡唑-1-基)哌啶衍生物

技术领域

本发明涉及一种新类型的氰基吡唑、包含这些化合物的药物组合物及其用于调节G-蛋白偶联受体GPR119的活性的用途。 

背景技术

糖尿病是其中由于异常的葡萄糖动态平衡导致高水平的血糖的病症。糖尿病的最常见的形式是I型(也称为胰岛素依赖性糖尿病)及II型糖尿病(也称为非胰岛素依赖性糖尿病)。II型糖尿病，占所有糖尿病病例的约90％，是一种严重的渐进性疾病，其导致微血管并发症(包括视网膜病变、神经病变及肾病)，以及大血管并发症(包括加速动脉粥样硬化、冠心病及中风)。 

目前，糖尿病没有任何治愈方法。该疾病的标准疗法限于且集中于控制血糖浓度，以使并发症减至最少或延迟并发症的产生。目前的治疗目标是胰岛素抵抗(二甲双胍，噻唑烷二酮类或胰岛素)或来自β细胞的胰岛素释放(磺酰脲，艾塞那肽(exanatide))。磺酰脲及其他经由β-细胞的去极化发挥作用的化合物促进低血糖，因为其刺激与循环葡萄糖的浓度无关的胰岛素分泌。一种已核准的药物艾塞那肽仅仅在高葡萄糖存在下刺激胰岛素分泌，但由于其缺乏口服生物利用性而必须注射。西格列汀(Sitagliptin)，一种二肽基肽酶IV抑制剂，是增加肠促胰岛素激素的血液水平的新药物，其可增加胰岛素分泌，降低胰高血糖素分泌，且具有其它未充分表征的作用。然而，西格列汀及其它二肽基肽酶IV抑制剂也可影响其他激素及肽的组织水平，并且尚未彻底研究该较广泛的作用的长期结果。 

在II型糖尿病中，肌肉、脂肪及肝细胞无法正常地对胰岛素作出反应。这种病症(胰岛素抵抗)可能是由于细胞胰岛素受体数目的减 少，细胞信号转导途径的破坏或两者。首先，β细胞通过增加胰岛素输出而补偿胰岛素抵抗。然而，最后β细胞无法产生足够的胰岛素来保持正常的葡萄糖水平(血糖正常)，这表明已发展至II型糖尿病。 

在II型糖尿病中，由于胰岛素抵抗以及β细胞功能障碍，而发生空腹高血糖症。β细胞缺陷功能障碍有两个方面：1)增加的基础胰岛素释放(在低、非刺激性葡萄糖浓度下发生)，这在肥胖、胰岛素抗性糖尿病前期以及II型糖尿病中观察到，以及2)响应高血糖症的挑战，无法将胰岛素释放增加至超过已升高的基础水平，这种状况在糖尿病前期中不发生，且可表明从血糖正常胰岛素抗性状态转变成II型糖尿病。用以治疗后一方面的当前疗法包括β-细胞ATP-敏感性钾通道的抑制剂(其用于驱动内源性胰岛素储存的释放)，以及外源性胰岛素的施用。这两种方法均未实现精确的血糖水平正常化，且都带有引发低血糖的风险。 

因此，对于发现以葡萄糖依赖性方式发挥功能的试剂具有极大兴趣。以该方式发挥功能的生理学信号传导途径是众所周知的，包括肠肽GLP-1及GIP。这些激素经由同源G-蛋白偶联受体传递信号，以刺激cAMP在胰腺β-细胞中的生产。增高的cAMP显然不会在禁食或空腹状态期间刺激胰岛素释放。然而，cAMP的许多生物化学靶标，包括ATP-敏感性钾通道、电压-敏感性钾通道及胞吐机制，被调节以显著增强由餐后葡萄糖刺激而导致的胰岛素分泌。因此，新的类似功能的β细胞GPCR(包括GPR119)激动剂调节剂也会刺激内源性胰岛素的释放，且促进II型糖尿病患者的葡萄糖水平的正常化。也已证实，增加的cAMP(例如作为GLP-1刺激的结果)促进β细胞增殖，抑制β细胞死亡且因此改善胰岛质量。这种针对β细胞质量的正面影响对于胰岛素产生不足的II型糖尿病是有利的。 

众所周知，代谢疾病对于其它生理系统具有不利影响，且经常并发多重疾病状态(例如″X综合征″中的I型糖尿病、II型糖尿病、葡萄糖耐受不足、胰岛素抵抗、高血糖症、高脂血症、高甘油三酯血症、高胆固醇血症、血脂障碍、肥胖或心血管疾病)或在糖尿病后继发的继 发性疾病，比如肾病和周围神经病变。因此，糖尿病病症的治疗对于这样的相关疾病状态是有利的。 

发明内容

根据本发明，已发现一种新类型的GPR119调节剂。这些化合物包括： 

4-{5-氰基-4-[(2,4-二氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸异丙酯； 

4-{5-氰基-4-[(2-甲基苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸异丙酯； 

4-{5-氰基-4-[(2,5-二氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯； 

4-{5-氰基-4-[(2,3-二氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯； 

4-{4-[(4-氨基甲酰基-2-氟苯氧基)甲基]-5-氰基-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯； 

4-{4-[(4-氨基甲酰基苯氧基)甲基]-5-氰基-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯； 

4-(5-氰基-4-((4-氰基苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯； 

4-(4-((4-(1H-吡唑-1-基)苯氧基)甲基)-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙基酯； 

4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(1H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯和4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(2H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯； 

4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯； 

4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(2-甲基-2H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯； 

4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(2-(2-羟基乙基)-2H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯； 

4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(1-(2-羟基乙基)-1H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯； 

4-(5-氰基-4-{[2-氟-4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯； 

4-(5-氰基-4-{[4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯； 

4-(4-((4-氨基甲酰基-3-氟苯氧基)甲基)-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯； 

4-(5-氰基-4-{1-[2-氟-4-(甲基磺酰基)苯氧基]乙基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯； 

4-(5-氰基-4-{1-[(2-甲基吡啶-3-基)氧基]乙基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯； 

4-(5-氰基-4-{2-[2-氟-4-(甲基磺酰基)苯基]丙基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯； 

4-(5-氰基-4-{[(2-甲基吡啶-3-基)氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯； 

4-{5-氰基-4-[(2,3,6-三氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯； 

4-{5-氰基-4-[(2,3,6-三氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸异丙基酯； 

4-(5-氰基-4-{[2-氟-4-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯； 

4-(5-氰基-4-{[2-氟-4-(1-甲基-1H-咪唑-5-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯； 

4-[5-氰基-4-({[2-甲基-6-(1H-1,2,4-三唑-1-基)吡啶-3-基]氧基}甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸异丙酯； 

4-[5-氰基-4-({[2-甲基-6-(1H-1,2,4-三唑-1-基)吡啶-3-基] 氨基}甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸异丙酯； 

4-[5-氰基-4-({[2-甲基-6-(甲基磺酰基)吡啶-3-基]氨基}甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸异丙酯； 

4-(5-氰基-4-{[4-(1H-四唑-1-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯； 

1-[1-(5-乙基嘧啶-2-基)哌啶-4-基]-4-{[4-(1H-四唑-1-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-5-甲腈； 

4-{5-氰基-4-[(3-氰基苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸异丙酯； 

4-{5-氰基-4-[(4-氰基-3-甲基苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸异丙酯； 

4-{5-氰基-4-[(4-氰基苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸异丙酯； 

4-[(4-氰基-2-氟苯氧基)甲基]-1-[1-(5-乙基嘧啶-2-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑-5-甲腈； 

4-{5-氰基-4-[(4-氰基-2-氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸叔丁-酯； 

4-{5-氰基-4-[(2-氰基-4-氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸异丙酯； 

4-(5-氰基-4-{[4-(二甲基氨基甲酰基)-2-氟苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯； 

4-(5-氰基-4-{[4-(二甲基氨基甲酰基)-2-氟苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯； 

4-(5-氰基-4-{[2-氟-4-(甲基氨基甲酰基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯； 

4-({5-氰基-1-[1-(5-乙基嘧啶-2-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑-4-基}甲氧基)-3-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺； 

4-{5-氰基-4-[(4-氰基-2-氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯； 

(3S,4S)-4-(5-氰基-4-{[2-氟-4-(甲基氨基甲酰基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯； 

(3R,4S)-4-(5-氰基-4-{[2-氟-4-(甲基氨基甲酰基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯； 

(3S,4S)-4-(5-氰基-4-{[2-氟-4-(甲基氨基甲酰基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯； 

(3R,4R)-4-(5-氰基-4-{[2-氟-4-(甲基氨基甲酰基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯； 

(3S,4S)-4-(5-氰基-4-{[(2-甲基吡啶-3-基)氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯； 

(3S,4R)-4-(5-氰基-4-{[(2-甲基吡啶-3-基)氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯； 

(3S,4R)-4-(5-氰基-4-{[(2-甲基吡啶-3-基)氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯； 

(3S,4R)-4-(5-氰基-4-{[(2-甲基吡啶-3-基)氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯； 

(3R,4S)-4-(5-氰基-4-{[(2-甲基吡啶-3-基)氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯； 

4-(5-氰基-4-{[4-(1H-1,2,3-三唑-1-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯； 

4-(5-氰基-4-{[4-(2H-1,2,3-三唑-2-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯； 

4-(4-((4-(1H-1,2,3-三唑-1-基)苯氧基)甲基)-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯； 

4-(4-((4-(2H-1,2,3-三唑-2-基)苯氧基)甲基)-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯； 

4-[5-氰基-4-({[1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基]氧基}甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯； 

4-[5-氰基-4-({2-氟-4-[(2-羟基乙基)(甲基)氨基甲酰基]苯氧 基}甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯； 

4-[5-氰基-4-({2-氟-4-[(3-羟基吡咯烷-1-基)羰基]苯氧基}甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯； 

4-(4-{[4-(氮杂环丁烷-1-基羰基)-2-氟苯氧基]甲基}-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯； 

4-[5-氰基-4-({[1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基]氧基}甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯； 

4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(1H-1,2,3-三唑-1-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯； 

4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(1H-1,2,3-三唑-1-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯； 

1-(1-(5-乙基嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-4-((2-氟-4-(1H-1,2,3-三唑-1-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲腈； 

4-(4-((4-(1H-1,2,3-三唑-1-基)苯氧基)甲基)-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯； 

4-((4-(1H-1,2,3-三唑-1-基)苯氧基)甲基)-1-(1-(5-乙基嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-5-甲腈； 

4-(4-((4-(2H-1,2,3-三唑-2-基)苯氧基)甲基)-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯； 

4-((4-(2H-1,2,3-三唑-2-基)苯氧基)甲基)-1-(1-(5-乙基嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-5-甲腈； 

4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(2H-1,2,3-三唑-2-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯； 

4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(2H-1,2,3-三唑-2-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯； 

1-(1-(5-乙基嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-4-((2-氟-4-(2H-1,2,3-三唑-2-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲腈； 

4-(4-((5-(1H-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-2-基氧基)甲基)-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯； 

4-(4-((5-(1H-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-2-基氧基)甲基)-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯； 

4-(5-氰基-4-((3-氟-4-(1H-四唑-1-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯； 

4-(5-氰基-4-((3-氟-4-(1H-四唑-1-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯； 

1-(1-(5-乙基嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-4-((3-氟-4-(1H-四唑-1-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲腈； 

4-((5-(1H-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-2-基氧基)甲基)-1-(1-(5-乙基嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-5-甲腈； 

1-(1-(5-乙基嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-4-((2-甲基-6-(1H-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-基氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲腈； 

4-(5-氰基-4-((2-甲基-6-(1H-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-基氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯； 

4-(5-氰基-4-((2-甲基-6-(1H-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-基氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯； 

1-(1-(5-乙基嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-4-((2-氟-4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲腈； 

4-(4-((4-(氮杂环丁烷-1-羰基)-2-氟苯氧基)甲基)-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯； 

4-(4-((4-(氮杂环丁烷-1-羰基)-2-氟苯氧基)甲基)-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯；和 

4-((4-(氮杂环丁烷-1-羰基)-2-氟苯氧基)甲基)-1-(1-(5-乙基嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-5-甲腈； 

或其可药用盐。 

这些化合物调节G-蛋白偶联受体的活性。更特别地，所述化合物调节GPR119。因此，所述化合物可用于治疗其中GPR119活性促成疾病病理或症状的疾病，比如糖尿病。这类病症的实例包括高脂血症、I型糖尿病、II型糖尿病、特发性I型糖尿病(Ib型)、成人的隐匿性 自身免疫性糖尿病(LADA)、早发性2型糖尿病(EOD)、青年发病型非典型糖尿病(YOAD)、青年人的成年发病型糖尿病(MODY)、与营养不良有关的糖尿病、妊娠期糖尿病、冠心病、缺血性发作、血管成形术后的再狭窄、周围血管疾病、间歇性跛行、心肌梗塞(例如坏死及凋亡)、血脂异常、餐后脂血症、葡萄糖耐量降低的病症(IGT)、空腹血糖受损的病症、代谢性酸中毒、酮病、关节炎、肥胖、骨质疏松症、高血压、充血性心力衰竭、左心室肥大症、周围动脉疾病、糖尿病性视网膜病变、黄斑变性、白内障、糖尿病性肾病、肾小球硬化、慢性肾衰竭、糖尿病性神经病变、代谢综合征、X综合征、经前综合征、冠心病、心绞痛、血栓形成、动脉粥样硬化、短暂性脑缺血发作、中风、血管再狭窄、高血糖症、高胰岛素血症、高脂血症、高甘油三酯血症、胰岛素抵抗、葡萄糖代谢不良、葡萄糖耐量降低的病症、空腹血糖受损的病症、肥胖、勃起功能障碍、皮肤及结缔组织病症、足部溃疡及溃疡性结肠炎、内皮功能障碍及血管顺应性受损。所述化合物可用于治疗神经病症，比如阿尔茨海默病、精神分裂症及认知损害。所述化合物也有利于胃肠病，比如炎性肠病、溃疡性结肠炎、克隆病、肠易激综合征等。如上所述，所述化合物也可用于刺激肥胖症患者(尤其是受糖尿病困扰的患者)减轻体重。 

本发明的一个进一步的实施方案涉及包含本发明化合物的药物组合物。这样的制剂一般包含与至少一种可药用赋形剂混合的本发明化合物。这样的制剂也可包含至少一种额外的药剂。这样的药剂的实例包括抗肥胖剂和/或抗糖尿病剂。本发明的另外的方面涉及本发明的化合物在制备用于治疗糖尿病及如本文所述相关病症的药物中的用途。 

应了解，前述发明内容的概述及下文的详细说明都是示例性的和阐释性的，而不限制所要求的本发明的范围。 

发明详述 

通过参考以下本发明的示例性实施方案及其中所包括的实施例的详细说明，可以更容易地理解本发明。 

应当理解，本发明不限于制备所述化合物的特定合成方法，且所述方法当然可进行改变。也应当理解，本发明所用的术语仅仅用于描述特定实施方案，而不意欲构成限制。复数及单数应视为可互换的，而不表示数量： 

a.“卤素”指氯、氟、碘或溴原子； 

b.“C₁-C₄烷基”指含有1至5个碳原子的支链或直链烷基，比如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基等； 

c.“C₁-C₄烷氧基”指含有1至4个碳原子的直链或支链烷氧基，比如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基等； 

d.“C₃-C₆环烷基”指完全氢化且以单个环的形式存在的非芳香族环。这样的碳环环的实例包括环丙基、环丁基、环戊基及环己基； 

e.“C₁-C₄卤代烷基”指被一个或多个卤素原子取代的、含有1至4个碳原子的直链或支链烷基； 

f.“C₁-C₄卤烷氧基”指被一个或多个卤素原子取代的、含有1至4个碳原子的直链或支链烷氧基； 

g.“5至10元的杂芳基”指具有总共5至10个环原子且含有一、二、三或四个独立选自氧、氮及硫的杂原子且具有一、二或三个环(其中此类环可以是稠合的)的碳环芳香族系统。术语“稠合的”指通过与第一个环共享(即，分享)两个相邻原子而存在(即，连接或形成)第二个环。术语“稠合的”等同于术语“缩合的”。术语“杂芳基”包括芳香族基团，比如吡啶、哒嗪、吡嗪、嘧啶、咪唑并[1,2-a]吡啶、咪唑并[1,5-a]吡啶、[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶、[1,2,4]三唑并[4,3-b]哒嗪、[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶和[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶； 

h.“治疗有效量”指可实现以下效果的本发明化合物的量：(i)治疗或预防特定疾病、病症或障碍，(ii)减轻、缓解或消除特定疾病、病症或障碍的一种或多种症状，或(iii)预防或延迟本文所述的特定疾病、病症或障碍的一个或多个症状的发作。 

i.“患者”指温血动物，比如例如豚鼠、小鼠、大鼠、沙鼠、猫、兔、狗、猴、黑猩猩及人类； 

j.“治疗”包括防止性(即，预防性)及缓解性治疗两者，即，缓和、减轻或减慢患者疾病(或病症)的进展或任何与疾病有关的组织损伤； 

k.如本文使用的的术语“被调节”、“调节的”或“调节”，除非另有说明，否则指用本发明化合物活化G-蛋白偶联受体GPR119； 

l.“可药用盐”指该物质或组合物必须与其它组分（制剂中所包含的，和/或用于治疗哺乳动物的）在化学和/或毒理学上相容； 

m.“盐”指可药用盐及适合用于工业过程(比如化合物的制备)的盐。 

n.“可药用盐”指“可药用酸加成盐”或“可药用碱加成盐”，取决于化合物的实际结构。 

o.“可药用酸加成盐”意欲应用于所述碱化合物的任何非毒性有机或无机酸加成盐或其任何中间体。形成适当的盐的示例性无机酸包括盐酸、氢溴酸、硫酸及磷酸，以及酸金属盐，比如正磷酸单氢钠和硫酸氢钾。形成适当的盐的示例性有机酸包括单-、二-及三羧酸。这样的酸的实例为例如乙酸、乙醇酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、马来酸、羟基马来酸、苯甲酸、羟基苯甲酸、苯基乙酸、肉桂酸、水杨酸、2-苯氧基苯甲酸、对-甲苯磺酸及磺酸，比如甲磺酸及2-羟基乙磺酸。这样的盐可以以水合形式或基本上无水的形式存在。通常，这些化合物的酸加成盐可溶于水及各种亲水性有机溶剂中。 

p.“可药用碱加成盐”意欲应用于所述化合物的任何无毒性有机或无机碱加成盐或其任何中间体。形成适当的盐的示例性碱包括碱金属或碱土金属氢氧化物，比如钠、钾、钙、镁或钡氢氧化物；氨及脂肪族、脂环族或芳香族有机胺，比如甲胺、二甲胺、三甲胺和甲基吡啶。 

q.“异构体”指如下文所定义的“立体异构体”及“几何异构 体”。“立体异构体”指具有一个或多个手性中心且每一个中心可以以R或S构型存在的化合物。立体异构体包括所有非对映异构体、对映异构体及差向异构形式，以及其消旋物及混合物。“几何异构体”指可以以顺式、反式、对边、同边、同侧(E)及异侧(Z)形式存在的化合物以及其混合物。 

某些本发明的化合物可以以几何异构体的形式存在。所述化合物可具有一个或多个不对称中心，因此以两种或多种立体异构体的形式存在。本发明包括本发明化合物的所有单独的立体异构体及几何异构体以及其混合物。单独的对映异构体可以通过手性分离或在合成中使用相关对映异构体而获得。如上所述，一些化合物作为异构体存在。可以基于其物理化学差异，通过本领域技术人员已知的方法(比如层析和/或分步结晶)，将这些异构体混合物分离成其单独的异构体。可通过以下步骤分离对映异构体：通过与合适的光学活性化合物(例如手性助剂，诸如手性醇或马绍耳(Mosher's)酰基氯)反应将对映异构体混合物转化为非对映异构体混合物，分离非对映异构体，并且将单个非对映异构体转化(例如水解)为相应的纯对映异构体。也可以通过使用手性HPLC柱分离对映异构体。或者，可以通过使用光学活性起始原料、通过利用光学活性试剂、底物、催化剂或溶剂的不对称合成、或通过不对称转化将一种立体异构体转化为另一种立体异构体来合成特定的立体异构体。 

本发明还涵盖与那些文中列举的相同，但一或多个原子被原子量或质量数与自然中通常发现的原子量或质量数不同的原子置换的本发明同位素标记化合物。可并入本发明化合物的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、碘、及氯的同位素，比如分别为²H、³H、¹¹C、 ¹³C、¹⁴C、¹³N、¹⁵N、¹⁵O、¹⁷O、¹⁸O、³¹P、³²P、³⁵S、¹⁸F、¹²³I、¹²⁵I和³⁶Cl。 

本发明的某些同位素标记化合物(例如以³H及¹⁴C标记的那些)可用于化合物和/或底物组织分布测定中。某些包括氚、¹⁴C、³⁵S和¹²⁵I的同位素标记的配体可用于放射性配体结合测定中。就其容易制备和 可检测性而言，氚化(即³H)及碳-14(即¹⁴C)同位素是特别优选的。此外，用较重同位素(比如氘(即²H))取代可提供某些由更高的代谢稳定性所产生的治疗优点(例如体内半衰期增加或剂量需求降低)，且因此在一些情况下可以是优选的。正电子发射同位素(如¹⁵O、¹³N、¹¹C、及 ¹⁸F)可用于正电子发射断层扫描(PET)研究，以检测受体占用性。一般可通过与下文方案和/或实施例中所公开的类似的以下步骤，通过同位素标记的试剂取代未经同位素标记的试剂来制备本发明同位素标记化的化合物。 

本发明某些化合物可以以超过一种晶型(一般称为“多晶型体”)存在。多晶型物可通过在各种条件下的结晶制得，例如，使用不同溶剂或不同溶剂的混合物进行再结晶；在不同温度下结晶；和/或在结晶期间自非常快至非常慢冷却的各种方式的冷却。也可以通过加热或熔融本发明化合物，然后逐渐或快速冷却而获得多晶型物。可通过固体探针NMR光谱法、IR光谱法、差示扫描量热法、粉末X-射线衍射或这样的其它技术确定多晶型物的存在。 

另外，本发明某些化合物可以以非溶剂化形式以及采用可药用溶剂比如水、乙醇等溶剂化形式存在。一般而言，用于本发明的目的，溶剂化形式被认为与非溶剂化形式等效。所述化合物也可以一种或多种结晶态存在，即呈共晶体、多晶型物，或者它们可以作为无定形固体存在。所有这样的形式都被本发明及其权利要求书所涵盖。 

在本发明组合物的一个实施方案中，组合物进一步包括至少一种选自下述的另外的药剂：抗肥胖剂和抗糖尿病剂。抗肥胖剂的实例包括：地洛他派(dirlotapide)、米垂他派(mitratapide)及英普他派(implitapide)、R56918(CAS号403987)、CAS号913541-47-6、氯卡色林(lorcaserin)、西替司它、PYY_3-36、纳屈酮、油酰-雌酮、奥尼匹肽、普兰林肽、替索芬辛、瘦素、利拉糖肽、溴隐亭、奥利司他、艾塞那肽、AOD-9604(CAS号221231-10-3)和西布曲明。抗糖尿病剂的实例包括二甲双胍、醋磺已脲、氯磺丙脲、特泌胰、格列本脲、格列吡嗪、格列苯脲、格列美脲、格列齐特、格列太特、格列喹酮、格列 索脲、妥拉磺脲、甲苯磺丁脲、淀粉酶抑肽、萃他丁(trestatin)、阿卡波糖、脂解素、卡格列波糖、乙格列酯、米格列醇、伏格列波糖、普拉米星-Q、salbostatin、巴格列酮（balaglitazone）、环格列酮、达格列酮、恩格列酮、isaglitazone、吡格列酮、罗格列酮、曲格列酮、毒蜥外泌肽-3、毒蜥外泌肽-4、曲度奎明(trodusquemine)、白藜芦醇(reservatrol)、西替欧醛(hyrtiosal)提取物、西格列汀(sitagliptin)、维格列汀(vildagliptin)、阿格列汀(alogliptin)和沙格列汀(saxagliptin)。 

在本发明方法的另一个实施方案中，本发明化合物或组合物可以以有效量施用，用于治疗选自以下的病症：高脂血症、I型糖尿病、II型糖尿病、特发性I型糖尿病(Ib型)、成人隐匿性自身免疫性糖尿病(LADA)、早发性2型糖尿病(EOD)、青年发病型非典型糖尿病(YOAD)、青年人的成年发病型糖尿病(MODY)、与营养不良有关的糖尿病、妊娠糖尿病、冠心病、缺血性发作、血管成形术后的再狭窄、周围血管疾病、间歇性跛行、心肌梗塞(例如坏死及凋亡)、血脂异常、餐后脂血症、葡萄糖耐量降低的病症(IGT)、空腹血糖受损的病症、代谢性酸中毒、酮病、关节炎、肥胖、骨质疏松症、高血压、充血性心力衰竭、左心室肥大症、周围动脉疾病、糖尿病性视网膜病变、黄斑变性、白内障、糖尿病性肾病、肾小球硬化、慢性肾衰竭、糖尿病性神经病变、代谢综合征、X综合征、经前综合征、冠心病、心绞痛、血栓形成、动脉粥样硬化、心肌梗死、短暂缺血性发作、中风、血管再狭窄、高血糖症、高胰岛素血症、高脂血症、高甘油三酯血症、胰岛素抵抗、葡萄糖代谢受损、葡萄糖耐量降低的病症、空腹血糖受损的病症、肥胖、勃起功能障碍、皮肤及结缔组织病症、足部溃疡及溃疡性结肠炎、内皮功能障碍及血管顺应性受损、高载脂蛋白B脂蛋白血症、阿尔茨海默病、精神分裂症、认知受损、炎性肠病、溃疡性结肠炎、克隆病及肠易激综合征。 

在一个进一步的实施方案中，所述方法进一步包括施用第二组合物，所述第二组合物包含至少一种选自抗肥胖剂和抗糖尿病剂的另外 药剂，及至少一种可药用赋形剂。该方法可用于同时或连续且以任一种顺序施用组合物。 

在仍然另一个实施方案中，本发明化合物用于制备用于治疗疾病、病症或障碍的药物，其调节G-蛋白偶联受体GPR119活性。此外，所述化合物用于制备治疗糖尿病或与所述糖尿病有关的病态的药物。 

合成 

为了示例的目的，下述反应方案提供合成本发明化合物以及关键中间体的可能路线。关于各个反应步骤的更详细描述，请参见以下实施例部分。本领域技术人员应当理解，可以使用其他合成路线来合成本发明化合物。虽然方案中描述了特定起始原料及试剂且在下文中加以讨论，但仍可以容易地以其他起始原料及试剂进行替换，以提供各种衍生物和/或反应条件。此外，通过如下所述方法制备的许多化合物可以使用本领域技术人员熟知的常规化学根据本公开内容而进行进一步修饰。 

本发明化合物也可以通过包括与化学领域所熟知的方法类似的方法的合成路线加以合成。起始物质通常可从市售来源(比如Aldrich Chemicals(Milwaukee，WI))购得或可使用本领域技术人员已知的方法容易地制得(例如，通过一般描述于Louis F.Fieser和Mary Fieser, Reagents for Organic Synthesis,v.1-19,Wiley,New York(1967-1999ed.，或Beilsteins Handbuch der organischen Chemie,4,Aufl.ed.Springer-Verlag,Berlin,包括附录(也可经由Beilstein联机数据库获得）的方法制备。 

本发明化合物可使用本领域用以制备醚类的类似已知方法制备。读者可关注比如以下文章：1)Hughes,D.L.;Organic Reactions 1992,42Hoboken,NJ,United States;2)Tikad,A.;Routier,S.;Akssira,M.;Leger,J.-M.l;Jarry,C.;Guillaumet,G.Synlett2006,12,1938-42;and3)Loksha,Y.M.;Globisch,D.;Pedersen,E.B.;La Colla,P.;Collu,G.;Loddo,R.J. Het.Chem.2008,45,1161-6，这些文章更详细地描述了这类反应。 

方案1 

方案1可用于制备式N的化合物，其中 

X为或； 

Z为–C(O)-O-R⁶或被C₁-C₄烷基取代的嘧啶、CF₃、卤素、氰基、C₃-C₆环烷基或C₃-C₆环烷基，其中所述环烷基部分的一个碳原子可以任选地被甲基或乙基取代； 

m为1、2或3； 

n为0、1或2； 

R¹为氢、C₁-C₄烷基或C₃-C₆环烷基； 

R^2a为氢、氟或C₁-C₄烷基； 

每个R³独立地选自∶羟基、卤素、氰基、C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、C₁-C₄卤代烷基、C₁-C₄卤烷氧基、-SO₂-R⁷、-P(O)(OR⁸)(OR⁹)、-C(O)-NR⁸R⁹、-N(CH₃)-CO-O-(C₁-C₄)烷基、-NH-CO-O-(C₁-C₄)烷基,-NH-CO-(C₁-C₄)烷基、-N(CH₃)-CO-(C₁-C₄)烷基、-NH-(CH₂)₂-OH和包含包含1、2、3或4个各自独立地选自氧、氮和硫的杂原子的5至6-元杂芳基，其中所述杂芳基上的碳原子任选地被R^4a取代或者所述杂芳基上的氮原子任选地被R^4b取代； 

R^4a为氢、C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、C₁-C₄卤代烷基或卤素，其中所述烷基任选地被羟基或C₁-C₄烷氧基取代； 

R^4b为氢、C₁-C₄烷基、-CH₂-C₁-C₃卤代烷基、-C₂-C₄烷基-OH或-CH₂-C₁-C₄烷氧基； 

R⁵为氢，或当R¹为氢时，则R⁵为氢或C₁-C₄烷基； 

R⁶为C₁-C₄烷基或C₃-C₆环烷基，其中所述环烷基部分的一个碳原子可以任选地被甲基或乙基取代； 

R⁷代表C₁-C₄烷基、C₃-C₆环烷基、NH₂、或-(CH₂)₂-OH； 

R⁸代表氢或C₁-C₄烷基；和 

R⁹代表氢，C₁-C₄烷基、C₃-C₆环烷基、-(CH₂)₂-OH、-(CH₂)₂-O-CH₃、-(CH₂)₃-OH、-(CH₂)₃-O-CH₃、3-氧杂环丁基或3-羟基环丁基； 

或者当R³为-C(O)-NR⁸R⁹时，R⁸和R⁹可以与它们连接的氮原子结合在一起形成氮杂环丁烷、吡咯烷、哌啶或吗啉环。 

在步骤1中，式C化合物可以经由式A化合物与市售化合物B(Sigma-Aldrich)在各种溶剂(包括但不限于乙醇、甲苯及乙腈)中，于22℃至130℃的温度下(取决于所使用的溶剂)进行缩合反应1至72小时而制备。在式A化合物是氢氯化物或三氟乙酸盐的情况下，可以加入一至三当量的碱修饰剂，比如乙酸钠或碳酸氢钠，以中和该盐。该反应可以在极性质子溶剂(比如甲醇及乙醇)中于22℃至85℃温度范围下进行。用于这种转变的一般条件包括使用3当量的在乙醇中的乙酸钠在85℃下加热3小时。 

式A化合物可以经由四步骤方法从取代的或未经取代的4-哌啶酮盐酸盐开始制备(J.Med.Chem.2004,47,2180)。首先，在过量碱存在下，用适当的氯甲酸烷基酯或双(烷基)二碳酸酯处理这些盐，以形成对应的氨基甲酸烷基酯。然后，酮基与叔丁氧羰基酰肼缩合以形成相应的N-(叔丁氧基)羰基(BOC)保护的腙衍生物。接着，使用还原剂(比如氰基硼氢化钠或三乙酰氧基硼氢化钠)将其还原成相应的BOC保护的肼衍生物。最后，N-(叔丁氧基)羰基在酸性条件(比如三氟乙酸或盐酸)下裂解，产生式A的化合物，其一般作为相应的盐(例如二盐酸盐)进行分离和使用。 

在步骤2中，式D化合物可以经由Sandmeyer反应从式C化合物经由形成中间体重氮盐制备(Comp.Org.Synth.,1991,6,203)。这些盐可以通过单独或组合地使用亚硝酸钠和酸水溶液(比如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸及乙酸)，经由式C化合物的重氮化而制备。该反应一般是在水中在0℃至100℃下进行。可选地，可以在0℃至95℃的温度下使用亚硝酸烷基酯比如叔丁基亚硝酸酯与溶剂比如乙腈的无水条件(J.Med.Chem.2006,49,1562)。然后，使这些重氮中间体与铜盐比如溴化铜(II)、溴化亚铜(I)或与三溴甲烷反应，形成式D化合物。用于这种转变的一般条件包括在65℃下、在乙腈中使用叔丁基亚硝酸酯、溴化铜(II)，进行30分钟。 

在步骤3中，式E化合物可以通过在0℃至110℃的温度下，使用还原剂比如氢化锂铝、硼氢化钠、硼氢化锂、硼烷-二甲基硫醚、硼烷-四氢呋喃于极性非质子溶剂比如四氢呋喃、二乙醚、1,4-二噁烷或1,2-二甲氧基乙烷中进行1至24小时，而从式D化合物制备。典型条件包括在70℃下，在四氢呋喃中使用硼烷-二甲基硫醚，进行14小时。 

为了从式E化合物制备式F化合物，必须引入氰基(步骤4)。这可以通过多种条件实现。一种引入氰基的方法可以是使用铜盐比如氰化铜于极性非质子溶剂(比如N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、N,N-二甲基乙酰胺(DMA))中在22℃至200℃的温度下进行1至24小时。将在N,N-二甲基甲酰胺中的氰化铜在165℃下加热5小时是该转化的典型实验设计。 

可选地，在步骤4中，可以使用碱金属氰化物盐，比如氰化钾或氰化钠，连同催化剂比如18-冠-6(US2005020564)和/或溴化四丁基铵(J.Med.Chem.2003,46,1144)在极性非质子溶剂(比如乙腈及二甲亚砜)中，在22℃至100℃的温度下，将氰基加入到至该模板。 

最后，使用金属催化是在步骤4中描述的转变所常见的。催化方法中使用的常见氰化物包括氰化锌、氰化铜、氰化钠及亚铁(II)六氰化钾。金属催化剂可以为铜催化剂，比如碘化铜和/或钯催化剂，比如三(二亚苄基丙酮)二钯(Pd₂(dba)₃)、四-三苯基膦钯(Pd(PPh₃)₄)或二氯(二苯基-膦基二茂铁)-钯(Pd(dppf)Cl₂)。这些催化剂可单独使用，或者与任何前述氰化物以任何组合使用。可以向这些反应中加入配体比如1,1'-双(二苯基膦基)-二茂铁(dppf)或金属添加剂比如锌或铜金属。该反应在极性非质子溶剂比如NMP、DMF、DMA中，在存在或不存在作为添加剂的水的情况下进行。该反应在22℃至150℃的温度下，经由常规或微波加热进行1至48小时，且可以在密封或非密封反应容器中进行。用于步骤4的典型条件包括，在DMA中使用氰化锌、Pd₂(dba)₃、dppf及锌粉，在120℃下于微波炉中加热1小时(J.Med.Chem.2005,48,1132)。 

在步骤5中，式G化合物可以经由Mitsunobu反应从式F化合物 合成。Mitusunobu反应已经在合成文献(例如Chem.Asian.J.2007,2,1340;Eur.J.Org.Chem.2004,2763;S.Chem.Eur.J.2004,10,3130)中进行了综述，且可使用这些综述中所列的许多合成方法。将使用偶氮基二羧酸酯比如偶氮二羧酸二乙酯(DEAD)、偶氮二羧酸二-叔丁酯(TBAD)、偶氮二羧酸二异丙酯(DIAD)和膦试剂比如三苯基膦(PPh₃)、三丁基膦(PBu₃)和聚合物支持的三苯基膦(PS-PPh₃)的Mitsunobu反应方案与式F化合物及通式结构X-OH的化合物组合使用。该反应中使用的溶剂可以包括非质子溶剂，比如甲苯、苯、THF、1,4-二噁烷及乙腈，温度范围为0℃至130℃，取决于所使用的溶剂及偶氮基二羧酸酯。用于该转化的典型条件是在22℃下在1,4-二噁烷中使用DEAD和PS-PPh₃，进行15小时。 

用于制备式G化合物的Mitsunobu反应的可选方法是，在碱比如三乙胺或吡啶存在下，分别使用甲磺酰氯或对-甲苯磺酰氯将式F化合物转化成相应的甲磺酸酯或对-甲苯磺酸酯衍生物。然后，将中间体磺酸酯在碱(比如碳酸钾、氢化钠或叔丁醇钾)存在下与通式X-OH的化合物组合，得到式G化合物。 

式K化合物，其中R¹是C₁-C₄烷基或C₃-C₆环烷基，可以分三步骤从式F化合物制备：1)将伯醇氧化成相应的式H的醛(步骤6，方案1)，2)将式H的醛中间体与式R¹M的有机金属试剂(其中M是锂(Li)或卤化镁(MgCl、MgBr或MgI))反应，以提供式J的仲醇，其中R¹是C₁-C₄烷基或C₃-C₆环烷基(步骤7)，和3)将式J的仲醇与式X-OH的苯酚在Mitsunobu反应条件下进行反应(步骤8)。 

在步骤6(方案1)中，式H化合物可以经由氧化方法形成，包括在22℃至80℃下在单一溶剂或组合溶剂(包括但不限于二氯甲烷、乙腈、己烷或丙酮)中使用1至20当量的活性二氧化锰进行1至72小时。可选地，该氧化反应可以在0.1至1当量2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧基(TEMPO)存在下，在二氯甲烷或氯仿中，于0℃至22℃的温度下，使用1至3当量的三氯异氰尿酸进行0.1至12小时。用于该转化的典型条件是在0.1当量TEMPO存在下，在二氯甲烷中于22℃下使用三氯异氰 尿酸，进行1小时。 

其中Y为NR⁵的本发明化合物的制备也显示在方案1中。式L化合物可以通过与式X-NH-R⁵的氨基化合物，在还原性胺化条件下反应而从式H的中间化合物(方案1)制备(步骤9)(J.Org.Chem.,1996,61,3849;Org.React.2002,59,1)。类似地，式N化合物(其中R¹是C₁-C₄烷基或C₃-C₆环烷基)可以分两步骤从式J中间体(其中R¹是C₁-C₄烷基或C₃-C₆环烷基)制备，该制备是通过：1)氧化成相应的式M的酮(步骤10)，和2)将式M的酮与式X-NH-R⁵的氨基化合物在还原性胺化条件下反应(步骤11)。可选地，式L和式N的化合物(其中R⁵是C₁-C₄烷基)可以通过下列从相应的式L化合物(其中R⁵是H)或相应的式N化合物(其中R⁵是H)制备：在碱存在下，使用式(C₁-C₄)-Cl、(C₁-C₄)-Br或(C₁-C₄)-I的卤化烷基进行烷基化。 

本发明的化合物也可以如方案2和3所示制备，其中X、Z、R¹、R^2a、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸和R⁹与方案1中描述的相同。特别地，式R的化合物可以如方案2所示制备。 

方案2 

在方案2的步骤1中，式O化合物可以通过使用(重氮基甲基)膦酸二甲酯或二甲基-1-重氮基-2-氧代丙基膦酸酯以及碱(比如碳酸钾或叔丁醇钾)在溶剂(包括甲醇、乙醇或四氢呋喃)中，在-78℃至22℃的温度下进行0.1至24小时而从式H的醛(也参见方案1)形成。用于该转化的典型条件包括，使用二甲基-1-重氮基-2-氧代丙基膦酸酯和2当量的碳酸钾在甲醇中在22℃进行0.75小时。 

在步骤2中，式Q化合物可以经由金属催化的Sonagashira偶联方法，使用通式结构X-P的化合物(其中P为卤化物或三氟甲磺酸酯(triflate))，从式O化合物形成。Sonogashira反应已被广泛综述((Chem.Rev.2007,107,874;Angew.Chem.Int.Ed.2007,46,834;Angew.Chem.Int.Ed.2008,47,6954)，且这些综述中列出的许多合成方法可用于合成式Q化合物。通常，该反应中使用的金属催化剂可以为铜催化剂，比如碘化铜和/或钯催化剂，比如 Pd₂(dba)₃、Pd(PPh₃)₄、Pd(dppf)Cl₂或Pd(PPh₃)₂Cl₂。这些催化剂可以单独使用或以任何组合使用。在该反应中一般使用碱添加剂，且可以包括胺碱，比如二乙胺、三乙胺、二异丙基乙胺或吡咯烷，或无机碱，比如碳酸钾或氟化钾。该反应在溶剂比如二氯甲烷、氯仿、乙腈、DMF、甲苯或1,4-二噁烷中，在存在或不存在作为添加剂的水下进行。该反应在0℃至150℃的温度(取决于溶剂)下进行0.1至48小时。用于该转化的典型条件包括在90℃下，在DMF中使用CuI及Pd(PPh₃)₂Cl₂进行2小时。 

最后，在步骤3中，式R化合物可以经由氢化作用，在过渡金属催化剂存在下，从式Q化合物形成。常见的催化剂包括使用5-20％钯碳或5-20％的碳上氢氧化钯。这些反应可以在Parr震荡装置中或在H-Cube氢化流反应器(ThalesNano，U.K.)中，在1至50psi的氢压下，在极性溶剂比如四氢呋喃、乙酸乙酯、甲醇或乙醇中，在22℃至50℃温度下，进行0.1至24小时。用于步骤3的典型条件包括，在设定为“全氢”的H-Cube流装置上以1毫升/分钟流速通过10％钯碳柱筒，使用在乙酸乙酯中的式Q化合物。 

方案3显示用于制备式W的化合物的方法。 

方案3 

在方案3的步骤1中，式F化合物(也参见方案2)可以使用比如三溴化磷或四溴化碳的试剂和三苯基膦进行处理，得到式S化合物。在步骤2中，然后，使式S化合物与三苯基膦在溶剂比如二氯甲烷、氯仿、甲苯、苯、四氢呋喃(THF)或乙腈中反应，得到式T的三苯基鏻盐。然后，将式T的盐在碱(比如正丁基锂、二(三甲基甲硅烷基)酰胺钠、二(三甲基甲硅烷基)酰胺锂、二(三甲基甲硅烷基)酰胺钾或二异丙基酰胺锂)存在下，在溶剂(比如THF、二乙醚或1,4-二噁烷)中与式U羰基化合物组合，得到式V的烯烃化合物，其一般作为E及Z几何异构体的混合物分离(步骤3)。该反应(一般称为Wittig烯化反应)已在文献中得到广泛综述(Chem.Rev.1989,89,863;Modern Carbonyl Olefination2004,1-17;Liebigs Ann.Chem.1997,1283)。 

在步骤4中，式W化合物是在过渡金属催化剂存在下经氢化从式V化合物形成。常见的催化剂包括使用5-20％钯碳或5-20％碳上氢氧 化钯。这些反应可以以与方案2的步骤3所述的类似方式进行。 

可选地，式W化合物可以经由使用式AA的三苯鏻盐的Wittig反应从式H的醛制备(步骤5，方案3)。就步骤3而言，该反应产生式V的烯烃化合物，该化合物一般仍作为E及Z几何异构体的混合物分离，且可通过氢化转化成式W化合物。以与制备式T的盐所用方式类似的方式，经由相应的醇转化成溴化物且随后与三苯基膦反应，而得到式AA的盐。 

以下所示的式BB化合物(其中X、Z、R¹及R^2a为如在方案1中所定义的)可以经由类似于在方案3中所示的反应顺序，从式J的仲醇(参见方案2)或式M的酮(参见方案2)制备。式J化合物转化成相应的溴化物，接着与通式X-CHO的醛进行Wittig烯化，从而提供式CC的烯烃。式CC的烯烃也可以经由式M的酮与通式结构X-CH₂-PPh₃ ⁺Br^-的盐的Wittig反应制得。式CC的链烯随后通过氢化转化成式BB化合物。 

在某些情况下，可以改变方案1、2和3中所示的步骤的顺序。例如，在方案1中，有时可将氰基引入到吡唑环上作为最后步骤，即，将步骤4及5的进行顺序颠倒。而且，在某些情况下，优选地在合成的稍后阶段中，引入或修饰在基团X上的取代基R³，甚至是将其作为最后步骤。例如，当R³是SO₂R⁷时，SO₂R⁷基团可在最后步骤中，通过将带有通式S-R⁷的取代基的相应化合物氧化而形成。 

本发明的化合物可以根据类似于在方案1、2和3所示的顺序，由3,3-二氟-4,4-二羟基1-哌啶甲酸1,1-二甲基乙酯开始制备(WO 2008121687)。以类似于对于方案1中制备式A中间体所述的方式，该物质可转化成式DD的肼衍生物，其随后与方案1中式A的中间体类似 地使用。 

如对本领域技术人员显而易见的，中间体的远位官能性(例如伯胺或仲胺)可能需要保护。这样的保护的需要将取决于远位官能性的性质及制备方法的条件。合适的氨基-保护基团(NH-Pg)包括乙酰基、三氟乙酰基、叔-丁氧羰基(BOC)、苄氧基羰基(CBZ)及9-芴基亚甲基氧基羰基(Fmoc)。类似地，“羟基-保护基团”指封闭或保护羟基官能性的羟基取代基。合适的羟基-保护基团(O-Pg)包括，例如烯丙基、乙酰基、甲硅烷基、苄基、对-甲氧基苄基、三苯甲基等。这样的保护的需要可以由本领域技术人员容易地确定。关于保护基团及其使用的一般描述，可参见T.W.Greene,Protective Groups in Organic Synthesis,John Wiley & Sons,New York,1991。 

如上所述，某些本发明的化合物是酸性的，且其与可药用阳离子形成盐。某些本发明的化合物是碱性的，且其与可药用阴离子形成盐。所有这样的盐都在本发明的范围内，且其可通过常规方法制备，比如根据需要，在水性、非水性或部分水性的介质中混合酸性及碱性实体，通常以化学计量的比例。根据需要，通过过滤、通过用非溶剂沉淀且随后过滤、通过蒸发溶剂，或在水溶液的情况下，通过冷冻干燥回收所述盐。根据本领域已知方法获得结晶形式的化合物，比如通过溶解于合适的溶剂比如乙醇、己烷或水/乙醇混合物中。 

医学用途 

本发明化合物调节G-蛋白偶联受体GPR119的活性。因此，所述化合物可用于预防及治疗其中GPR119活性促成疾病病理或症状的疾病，比如糖尿病。因此，本发明另一方面包括一种治疗个体的代谢疾 病和/或与代谢相关的病症的方法，其包括向需要这种治疗的个体施用治疗有效量的本发明的化合物、所述化合物的盐或含有这样的化合物的药物组合物。所述代谢疾病和与代谢相关的病症选自，但不限于，高脂血症、I型糖尿病、II型糖尿病、特发性I型糖尿病(Ib型)、成人隐匿性自身免疫性糖尿病(LADA)、早发性2型糖尿病(EOD)、青年发病型非典型糖尿病(YOAD)、青年人的成年发病型糖尿病(MODY)、与营养不良有关的糖尿病、妊娠糖尿病、冠心病、缺血性发作、血管成形术后的再狭窄、周围血管疾病、间歇性跛行、心肌梗塞(例如坏死及凋亡)、血脂异常、餐后脂血症、葡萄糖耐量降低的病症(IGT)、空腹血糖异常的病症、代谢性酸中毒、酮病、关节炎、肥胖、骨质疏松症、高血压、充血性心力衰竭、左心室肥大、周围动脉疾病、糖尿病性视网膜病变、黄斑变性、白内障、糖尿病性肾病、肾小球硬化、慢性肾衰竭、糖尿病性神经病变、代谢综合征、X综合征、经前综合征、冠心病、心绞痛、血栓形成、动脉粥样硬化、心肌梗塞，短暂性脑缺血发作、中风、血管再狭窄、高血糖症、高胰岛素血症、高脂血症、高甘油三酯血症、胰岛素抵抗、葡萄糖代谢受损、葡萄糖耐量降低的病症、空腹血糖受损的病症、肥胖、勃起功能障碍、皮肤及结缔组织病症、足部溃疡、内皮功能障碍、高载脂蛋白B脂蛋白血症及血管顺应性受损。此外，该化合物可用于治疗神经障碍，比如阿尔茨海默病、精神分裂症及认知损害。所述化合物也有益于胃肠疾病，比如比如炎性肠病、溃疡性结肠炎、克隆病、肠易激综合征等。如上所述，所述化合物也可用以刺激肥胖症患者尤其是受糖尿病困扰的患者减轻体重。 

根据前文，本发明进一步提供一种用于防止或改善需要其的受试者中任何前述疾病或病症的症状的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的本发明化合物。本发明的进一步方面包括制备用于治疗糖尿病及其相关并存疾病的药物。 

为了显示前述治疗性质，需要施用足以调节G-蛋白偶联受体GPR119的活化的量的化合物。所述量可以根据待治疗的特定疾病/病症、患者疾病/病症的严重性、患者、所施用的特定化合物、给药途径 及其它潜在疾病状态在患者体内的存在等而变化。当全身性施用时，化合物一般在约0.1mg/kg/天至约100mg/kg/天的剂量范围下显示其对前文所示的任一疾病或病症的作用。重复地每日施用可能是期望的，且将根据前文所述条件而变化。 

本发明化合物可以通过各种途径施用。它们可以口服施用。所述化合物也可以胃肠外(即皮下、静脉内、肌内、腹膜内或鞘内)、经直肠或局部施用。 

共同给药 

本发明化合物也可以与其它药剂组合使用，用于治疗本文所述的疾病、病症和/或障碍。因此，还提供了治疗方法，其包括与其他药剂组合施用本发明的化合物。可以与本发明的化合物组合使用的合适的药剂包括抗肥胖剂(包括食欲抑制剂)、抗糖尿病剂、抗高血糖剂、降脂剂及抗高血压剂。 

合适的抗糖尿病剂包括乙酰辅酶A羧化酶-2(ACC-2)抑制剂、二酰基甘油O-酰基转移酶1(DGAT-1)抑制剂、磷酸二酯酶(PDE)-10抑制剂、磺酰脲类(例如醋酸己脲、氯磺丙脲、特泌胰(diabinese)、格列本脲（gliben clamide）、格列吡嗪、格列苯脲（glyburide）、格列美脲、格列齐特、格列戊脲、格列喹酮、格列索脲、妥拉磺脲和甲苯磺丁脲)、氯茴苯酸类、α-淀粉酶抑制剂(例如淀粉酶抑肽、萃他丁(trestatin)和AL-3688)、α-糖苷水解酶抑制剂(例如阿卡波糖)、α-糖苷酶抑制剂(例如脂解素、卡格列波糖、乙格列酯、米格列醇、伏格列波糖、普拉米星-Q和萨保霉素(salbostatin))、PPARγ激动剂(例如巴格列酮（balaglitazone）、环格列酮、达格列酮、恩格列酮、艾沙格列酮、吡格列酮、罗格列酮和曲格列酮)、PPARα/γ激动剂(例如CLX-0940,GW-1536,GW-1929,GW-2433,KRP-297,L-796449,LR-90,MK-0767和SB-219994)、双胍(例如二甲双胍)、胰高血糖素样肽1(GLP-1)激动剂(例如、毒蜥外泌肽-3及毒蜥外泌肽-4)、蛋白质酪氨酸磷酸酶-1B(PTP-1B)抑制剂(例如曲度奎明、西替欧醛提取物(hyrtiosal  extract)及Zhang，S.等人，Drug Discovery Today,12(9/10),373-381(2007)所公开的化合物)、SIRT-1抑制剂(例如白藜芦醇)、二肽基肽酶IV(DPP-IV)抑制剂(例如、西格列汀、维格列汀、阿格列汀和沙格列汀)、胰岛素激放剂、脂肪酸氧化抑制剂、A2拮抗剂、c-jun氨基-末端激酶(JNK)抑制剂、胰岛素、胰岛素模拟物、糖原磷酰酶抑制剂、VPAC2受体激动剂及SGLT2抑制剂(钠依赖性葡萄糖转运子抑制剂，比如达格列净(dapagliflozin)等)。优选的抗糖尿病剂是二甲双胍和DPP-IV抑制剂(例如、西格列汀、维格列汀、阿格列汀和沙格列汀)。 

合适的抗肥胖剂包括11β-羟基类固醇脱氢酶-1(11β-HSD1型)抑制剂、硬脂酰基-CoA去饱和酶-1(SCD-1)抑制剂、MCR-4激动剂、胆囊收缩素-A(CCK-A)激动剂、单胺再吸收抑制剂(比如西布曲明(sibutramine))、拟交感神经剂、β₃肾上腺素激动剂、多巴胺激动剂(比如溴隐亭(bromocriptine))、黑素细胞-刺激激素类似物、5HT2c激动剂、黑色素聚集激素拮抗剂、瘦素(leptin)(OB蛋白质)、瘦素类似物、甘丙肽(galanin)拮抗剂、脂酶抑制剂(比如四氢泥泊司它汀(tetrahydrolipstatin)，即奥利司他)、厌食剂(比如铃蟾肽(bombesin)激动剂)、神经肽-Y拮抗剂(例如NPY Y5拮抗剂)、PYY_3-36包括其类似物)、拟甲状腺素剂、脱氢表雄酮或其类似物、糖皮质素激动剂或拮抗剂、食欲拮抗剂、胰高血糖素样肽-1激动剂、睫状神经营养因子(比如Axokine^TM，可购自Regeneron Pharmaceuticals，Inc.，Tarrytown，NY和Procter&Gamble Company，Cincinnati，OH)、人类刺鼠相关蛋白(AGRP)抑制剂、胃促生长素(ghrelin)拮抗剂、组胺3拮抗剂或反向激动剂、神经调节肽U激动剂、MTP/ApoB抑制剂(例如肠选择性MTP抑制剂、比如地洛他派(dirlotapide))、阿片样物质拮抗剂、食欲拮抗剂等。 

用于本发明的组合方面的优选的抗肥胖剂包括肠选择性MTP抑制剂(例如地洛他派、米垂他派及英普他派、R56918(CAS No.403987)及CAS No.913541-47-6)、CCKa激动剂(例如N-苄基-2-[4-(1H-吲哚 -3-基甲基)-5-氧代-1-苯基-4,5-二氢-2,3,6,10b-四氮杂-苯并[e]甘菊环-6-基]-N-异丙基-乙酰胺(PCT公开号WO2005/116034或美国公开号2005-0267100A1中描述)、5HT2c激动剂(例如氯卡色林)、MCR4激动剂(例如US6,818,658所述的化合物)、脂酶抑制剂(例如、西替司它)、PYY_3-36(如本文使用的“PYY_3-36”包括类似物、比如聚乙二醇修饰的PYY_3-36，例如在美国公布2006/0178501中所述的那些)、阿片样物质拮抗剂(例如纳曲酮)、油酰-雌酮(CAS No.180003-17-2)、奥尼匹肽(TM30338)、普兰林肽替索芬辛(tesofensine)(NS2330)、瘦素、利拉糖肽、溴隐亭、奥利司他、艾塞那肽、AOD-9604(CAS No.221231-10-3)及西布曲明。优选地，本发明化合物及组合疗法与运动及合理饮食组合施用。 

所有上述的美国专利及公开物都并入本文作为参考。 

药物制剂 

本发明还提供药物组合物，其包括治疗有效量的化合物或其其可药用盐，混合至少一种可药用赋形剂。所述组合物包括适于口服、局部或胃肠外使用的形式，且可用于治疗如上所述的糖尿病及相关病症。 

组合物可以配制用于通过本领域已知的任何途径(比如皮下、吸入、口服、局部、胃肠外等)的施用。组合物可以为本领域已知的任何形式，包括但不限于片剂、胶囊、粉剂、颗粒剂、锭剂或液体制剂，比如口服或无菌胃肠外溶液或悬浮液。 

用于口服施用的片剂及胶囊可以为单位剂量呈递形式，且可含有常规赋形剂，比如粘合剂，例如糖浆、阿拉伯胶、明胶、山梨糖醇、黄蓍胶或聚乙烯基吡咯烷酮；填充剂，例如乳糖、糖、玉米淀粉、磷酸钙、山梨糖醇或甘氨酸；压片润滑剂，例如硬脂酸镁、滑石、聚乙二醇或二氧化硅；崩解剂，例如马铃薯淀粉；或可接受的润湿剂，比如十二烷基硫酸钠。可以根据标准药学实践中众所周知的方法包衣所述片剂。 

口服液体制剂可以为例如水性或油性悬浮液、溶液、乳剂、糖浆 或酏剂形式，或可呈干燥产物形式(其在使用前以水或其他合适的载体重构)。这样的液体制剂可以包含常规添加剂，比如助悬剂，例如山梨糖醇、甲基纤维素、葡萄糖浆、明胶、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素、硬脂酸铝凝胶或氢化可食用脂肪、乳化剂，例如卵磷脂、脱水山梨糖醇单油酸酯或阿拉伯胶；非水性载体(其可包括可食用油)，例如杏仁油、油状酯比如甘油、丙二醇或乙醇；防腐剂，例如对-羟基苯甲酸甲酯或丙酯，或山梨酸，和如果需要，常规调味剂或着色剂。 

对于肠胃外给药，流体单位剂量形式是采用化合物及无菌载体(优选水)进行制备。该化合物，取决于所使用的载体及浓度，可以悬浮或溶解于载体或其他合适的溶剂中。在制备溶液时，该化合物可溶于注射用水中，且在填充入合适的小瓶或安瓿及密封前进行过滤灭菌。有利地，试剂比如局部麻醉剂、防腐剂及缓冲剂等可溶解于载体中。为了增进稳定性，组合物可以在填充入小瓶内且于真空下除去水之后进行冷冻。然后，将干燥的冻干粉末密封于小瓶中，并可提供注射用水的附带瓶，以在使用前重构液体。胃肠外悬浮液以基本上相同的方式制备，不同在于将化合物悬浮而非溶解于载体中，且灭菌无法通过过滤实现。化合物可以在悬浮于无菌载体之前通过暴露于环氧乙烷而灭菌。有利地，组合物中包括表面活性剂或润湿剂，以促进该化合物均匀分布。 

组合物可以包含例如约0.1重量％至约99重量％的活性物质，取决于给药方法。当组合物包含剂量单位时，每个单位将包含例如约0.1至900mg的活性成份，更通常地为1mg至250mg。 

本发明化合物可以配制用于以任何适宜的用于人类或兽医的方式施用(与其他抗糖尿病剂类似)。这样的方法是本领域已知的，且已经在前文中进行了概述。关于制备这样的制剂的更详细讨论；读者可参见University of the Sciences in Philadelphia的Remington″s Pharmaceutical Sciences第21版。 

下述实施例用于举例说明本发明的实施方案。然而，应当理解，本发明的实施方案不限于这些实施例的具体细节，因为对于本领域普 通技术人员而言，根据本发明公开内容，其它变化将是可得知的或显而易见的。 

实施例

除非另有规定，否则起始原料通常是从市售来源可获得的，比如Aldrich Chemicals Co.(Milwaukee,WI),Lancaster Synthesis,Inc.(Windham,NH),Acros Organics(Fairlawn,NJ),Maybridge Chemical Company,Ltd.(Cornwall,England),Tyger Scientific (Princeton,NJ),和AstraZeneca Pharmaceuticals(London,England),Mallinckrodt Baker(Phillipsburg NJ);EMD(Gibbstown,NJ)。 

一般的实验步骤 

NMR光谱是在室温下在Varian Unity^TM400(DG400-5探针)或500(DG500-5探针)(两者都购自Varian Inc.，Palo Alto，CA)上分别以400MHz或500MHz进行记录，用于质子分析。化学位移以相对于作为内部参照的残留溶剂的百万分率(δ)表示。波峰形状表示如下：s，单峰；d，双重峰；dd，双重双重峰；t，三重峰；q，四重峰；m，多重峰；bs，宽单峰；2s，两个单峰。 

大气压化学电离质谱(APCI)是在Waters^TM光谱仪(Micromass ZMD，载体气体：氮)(购自Waters Corp.，Milford，MA，USA)上获得，流速为0.3毫升/分钟且采用50∶50水/乙腈洗脱剂系统。电喷雾电离质谱(ES)是在来自Waters^TM的液相色谱质谱仪(Micromass ZQ或ZMD设备(载体气体：氮)(Waters Corp.，Milford，MA，USA))上获得，采用95∶5-0∶100的在乙腈的水的梯度(每种溶剂各含有0.01％甲酸)。这些仪器使用Varian Polaris5C₁₈-A20×2.0mm柱(Varian Inc.，Palo Alto，CA)，以1mL/分钟的流速进行3.75分钟或以2mL/分钟进行1.95分钟。 

柱层析使用硅胶以Flash40Biotage^TM柱(ISC，Inc.，Shelton，CT)或Biotage^TM SNAP柱筒KPsil或Redisep Rf二氧化硅(来自 TeledyneIsco Inc)在氮压下进行。使用具有光电二极管阵列的Waters FractionLynx系统(Waters2996)和质谱仪(Waters/Micromass ZQ)检测方案进行制备型HPLC。分析HPLC研究采用Waters2795Alliance HPLC或Waters ACQUITY UPLC(具有光电二极管阵列)、单四极质谱及蒸发光散射检测方案进行。 

在真空中浓缩指使用旋转蒸发器在减压下蒸发溶剂。 

除非另有说明，否则化学反应在室温(约23℃)下进行。而且，除非另有说明，否则化学反应在氮气氛下进行。 

药理学数据 

用本发明化合物治疗由G-蛋白偶联受体GPR119的激动剂活化调控的疾病的本发明的实践可以通过下文描述的一个或多个功能测定中的活性而得到证实。供应来源列于括号中。 

体外功能测定 

β-内酰胺酶∶

GPR119激动剂的测定采用基于细胞(hGPR119HEK293-CREβ-内酰胺酶)的报导体（reporter construct），其中人类GPR119的激动剂活化经由环状AMP应答元件(CRE)偶联至β-内酰胺酶产生。然后，利用能够进行FRET的β-内酰胺酶底物CCF4-AM(Live Blazer FRET-B/G Loading试剂盒，Invitrogen cat#K1027)测量GPR119活性。特别地，从液氮储存处取出hGPR119-HEK-CRE-β-内酰胺酶细胞(Invitrogen2.5×10⁷/mL)，并且稀释在平板培养基(Dulbecco修饰的Eagle培养基，高葡萄糖(DMEM；Gibco Cat#11995-065)、10％热灭活的胎牛血清(HIFBS；SigmaCat#F4135)、1X MEM非必需氨基酸(Gibco Cat#15630-080)、25mM HEPES pH7.0(Gibco Cat#15630-080)、200nM克拉维酸钾(Sigma Cat#P3494))中稀释。使用平板细胞培养基调整细胞浓度，将50微升该细胞悬浮液(12.5×10⁴个活细胞)添加至黑色、透明底、涂覆有聚-d-赖氨酸的384孔板(Greiner Bio-One cat#781946) 的各个孔中，并且在37℃在含有5％二氧化碳的湿润环境中培养。在4小时之后，移除平板培养基，且用40微升测定培养基替代(测定培养基是不含克拉维酸钾及HIFBS的平板培养基)。然后，以10微升体积添加浓度变化的各个待测化合物(最终DMSO≤0.5％)，且于包含5％二氧化碳的湿润环境中在37℃下将细胞培养16小时。从培养箱中取出板，使其平衡至室温，进行约15分钟。向每孔中加入10微升6×CCF4/AM研究染料溶液(根据Live Blazer FRET-B/G Loading试剂盒的说明书制备，Invitrogen cat#K1027)，并在室温下在黑暗中培养2小时。在EnVision荧光板读取器，激发405nm，发射460nm/535nm上测量荧光。使用4-参数逻辑剂量-响应方程式，用曲线拟合程序分析激动剂-响应曲线，进行EC₅₀测定。 

cAMP：

GPR119激动剂活性也使用基于细胞的测定，采用HTRF(均相时间分辨荧光)cAMP检测试剂盒(cAMP动态2检测试剂盒；Cis Bio cat #62AM4PEC)(其测量细胞中的cAMP水平)进行测定。该方法是细胞产生的天然cAMP与以染料d2标记的cAMP之间的竞争性免疫测定。示踪剂结合通过以Cryptate标记的Mab抗-cAMP显影。特定信号(即能量转移)与标准品或样品中的cAMP浓度成反比。 

特别地，hGPR119HEK-CREβ-内酰胺酶细胞(Invitrogen2.5×10⁷/mL；用于上述β-内酰胺酶测定的相同细胞系)从冷冻保存中取出，且稀释在生长培养基(Dulbecco修饰的Eagle培养基高葡萄糖(DMEM；Gibco Cat#11995-065)，1％活性炭葡聚糖处理的胎牛血清(CD血清；HyClone Cat#SH30068.03)，1x MEM非必需氨基酸(Gibco Cat#15630-080)及25mM HEPES pH7.0(Gibco Cat#15630-080))中。将细胞浓度调节至1.5×10⁵个细胞/mL，将30mL该悬浮液加入到T-175培养瓶中，并且在37℃在湿润环境中于5％二氧化碳下培养。在16小时(过夜)之后，从T-175培养瓶中取出细胞(通过敲击培养瓶侧壁)，以800xg离心，然后再悬浮于测定培养基(1x HBSS+CaCl₂+ MgCl₂(Gibco Cat#14025-092)和25mM HEPES pH7.0(Gibco Cat #15630-080))中。用测定培养基将细胞浓度调节至6.25×10⁵个细胞/mL，将8μl该细胞悬浮液(5000个细胞)加入到白色Greiner384孔、低体积测定板(VWR cat#82051-458)的每个孔中。 

将可变浓度的每种待测化合物在包含3-异丁基-1-甲基叶黄素(IBMX；Sigma cat#I5879)的测定缓冲剂中进行稀释，并且以2微升体积加入到检测板的孔中(IBMX的最终浓度为400μM，DMSO的最终浓度为0.58％)。在室温下培养30分钟后，将5微升标记的d2cAMP及5微升抗-cAMP抗体(两者都以1∶20稀释在细胞裂解缓冲剂中；如制造商的测定方案中所述的)加入到检测板的每个孔。然后将板在室温下培养，并且在60分钟之后，用Envision2104多标记板读取器使用330nm的激发光及615和665nm的发射光读取HTRF信号的变化。原始数据通过内插法根据cAMP标准曲线转化成nM cAMP(如制造商的测定方案中描述的)，使用4-参数对数剂量响应方程式，用曲线拟合程序分析激动剂-响应曲线，进行EC50测定。 

已发现，由于GRP119活化所导致的cAMP响应可以在本发明使用的特定细胞系之外的细胞中产生。 

抑制蛋白(β-Arrestin)∶

GPR119激动剂活性还使用基于细胞的测定，采用DiscoverX PathHunterβ-抑制蛋白细胞测定技术及其U2OS hGPR119β-抑制蛋白细胞系(DiscoverX Cat#93-0356C3)进行测定。在该测定中，通过测量激动剂-诱导的β-抑制蛋白与活化的GPR119的相互作用来测定激动剂活化。将小的42个氨基酸的酶片段，称为ProLink，连接至GPR119的C端。将抑制蛋白融合至较大的酶片段(称为EA(酶受体))。GPR119的活化刺激抑制蛋白的结合，并且迫使两个酶片段互补，导致形成可水解底物且产生化学发光信号的功能性β-半乳糖苷酶。 

特别地，从冷冻保存中取出U2OS hGPR119β-抑制蛋白细胞(DiscoverX1×10⁷/mL)，并且将其稀释在生长培养基(极限必需培养 基(MEM；Gibco Cat#11095-080)，10％热灭活的胎牛血清(HIFBS；SigmaCat#F4135-100)，100mM丙酮酸钠(Sigma Cat#S8636)，500μg/mL G418(Sigma Cat#G8168)和250μg/mL潮霉素B(Invitrogen Cat#10687-010)中。将细胞浓度调节至1.66×10⁵细胞/毫升，将30毫升该悬浮液加入到T-175培养瓶中，并且在37℃在湿润环境中于5％二氧化碳下培养。在48小时之后，用无酶细胞解离缓冲剂(Gibco cat #13151-014)从T-175烧瓶中取出细胞，以800xg离心，随后再悬浮于平板培养基(Opti-MEM I(Invitrogen/BRL Cat#31985-070)及2％活性炭葡聚糖处理的胎牛血清(CD血清；HyClone Cat#SH30068.03)中。用平板培养基调节细胞浓度至2.5×10⁵细胞/毫升，将10微升该细胞悬浮液(2500个细胞)加入到白色Greiner384-孔低体积测定板(VWR cat#82051-458)的每个孔中，将板在37℃在湿润环境中于5％二氧化碳下培养。 

在16小时(过夜)之后，从培养箱中取出测定板，将可变浓度的各个待测化合物(稀释于测定缓冲剂(1x HBSS+CaCl₂+MgCl₂(Gibco Cat#14025-092)、20mM HEPES pH7.0(Gibco Cat#15630-080)和0.1%BSA(Sigma Cat#A9576))以2.5微升体积(DMSO的最终浓度为0.5％)加入到测定板的孔中。在37℃下于湿润环境在5％二氧化碳中培养90分钟之后，将7.5微升Galacton Starβ-半乳糖苷酶底物(PathHunter测定试剂盒(DiscoveRx Cat#93-0001)；如制造商测定方案中描述的测定方案制备)加入到测定板的每孔中。将板在室温下培养，并且在60分钟后，以Envision2104多标记平板读数器于0.1秒/孔下读取发光的变化。使用4-参数对数剂量响应方程式，用曲线拟合程序分析激动剂-响应曲线，进行EC50测定。 

使用BacMam的GPR119的表达和GPR119结合测定 

使用pIRES-puro-hGPR119作为模板和下述引物，经由聚合酶链式反应(PCR)(Pfu Turbo Mater Mix，Stratagene，La Jolla，CA)扩增野生型人类GPR119(公开在PCT专利公开号2010/106457中)： 

hGPR119BamH1,上 

5’-TAAATTGGATCCACCATGGAATCATCTTTCTCATTTGGAG-3’ 

(在5’末端插入BamHI位点) 

hGPR119EcoRI,下 

5’-TAAATTGAATTCTTATCAGCCATCAAACTCTGAGC-3’ 

(在3’末端插入EcoRI位点) 

扩增的产物根据制造商的试验设计进行纯化(Qiaquick Kit，Qiagen，Valencia，CA)，并且用BamH1和EcoRI(New England BioLabs，Ipswich，MA)消化。用BamHI和EcoRI(New England BioLabs，Ipswich，MA)消化载体pFB-VSVG-CMV-poly(公开在PCT专利公开号2010/106457中)。将消化的DNA通过电泳在1％琼脂糖凝胶上进行分离；从凝胶上切下片段，并且加以纯化(Qiaquick Kit，Qiagen，Valencia，CA)。将载体及基因片段连接(Rapid Ligase Kit，Roche，Pleasanton，CA)，并且且转化入OneShot DH5alpha T1R细胞(Invitrogen，Carlsbad，CA)中。培养八个抗氨苄青霉素的菌落(“克隆1-8”)进行小量制备(Qiagen Miniprep Kit，Qiagen，Valencia，CA)，并且进行测序以证实同一性和校正插入方向。 

根据制造商的试验设计，将pFB-VSVG-CMV-poly-hGPR119构建体(克隆#1)转化入OneShot DH10Bac细胞(Invitrogen，Carlsbad，CA)中。再次划线(re-streaked)接种八个阳性(即，白色)菌落，以证实为“阳性”，之后进行培养进行杆粒(bacmid)分离。将重组hGPR119杆粒经由修饰的碱裂解方法，使用来自Qiagen Miniprep Kit(Qiagen，Valencia，CA)的缓冲剂进行分离。简言之，将沉淀的细胞在缓冲剂P1中裂解，用缓冲剂P2中和，且用缓冲剂N3沉淀。将沉淀物通过离心(17,900xg，10分钟)沉淀，并且将上清液与异丙醇混合以使DNA沉淀。DNA经由离心(17,900xg，30分钟)进行沉淀，用70％乙醇洗涤一次，再悬浮于50μL缓冲剂EB(Tris-HCL，pH8.5)中。使用市售可 获得的引物(M13F、M13R，Invitrogen，Carlsbad，CA)进行聚合酶链式反应(PCR)以证实杆粒中hGPR119插入物的存在。 

hGPR119重组杆状病毒的产生

P0病毒储液的产生

根据制造商的试验设计(Cellfectin，Invitrogen，Carlsbad，CA)，用10微升hGPR119杆粒DNA转染在Sf900II培养基(Invitrogen，Carlsbad，CA)中生长的适应的Sf9细胞悬浮液。在培养五天之后，将条件培养基(即“P0”病毒储液)离心，并且经0.22μm过滤器(Steriflip，Millipore，Billerica，MA)过滤。 

冷冻病毒(BIIC)储液的产生

就长期病毒储存和所研究的(即″P1″)病毒储液的产生而言，如下产生冷冻BIIC(感染杆状病毒的昆虫细胞)储液：在Sf900II培养基(Invitrogen，Carlsbad，CA)中培养已适应的Sf9细胞悬浮液，并且用hGPR119P0病毒储液进行感染。在培养24小时之后，温和地离心(约100xg)感染的细胞，再悬浮在冷冻培养基(10％DMSO，1％白蛋白，在Sf900II培养基中)中至最终密度为1×10⁷细胞/mL，并且根据标准冷冻程序以1mL等份试样进行冷冻。 

所研究的(“P1”)病毒储液的产生

用解冻的hGPR119BIIC储液的1∶100稀释物感染在Sf900II培养基(Invitrogen，Carlsbad，CA)中生长的适应的Sf9细胞悬浮液，并且培养几天(在27℃下，同时振摇)。当细胞活力达到70％时，通过离心收集条件培养基，并且通过ELISA(BaculoElisa Kit，Clontech，Mountain View，CA)测定病毒滴度。 

hGPR119在已适应的HEK293FT细胞悬浮液中的过表达

将HEK293FT细胞(Invitrogen，Carlsbad，CA)在振摇瓶中于补 充有50μg/mL新霉素及10mM HEPES的293Freestyle培养基(Invitrogen)中进行培养(37C，8％二氧化碳，振摇)。温和地离心细胞(约500xg，10分钟)，将沉淀再悬浮在补充有18％胎牛血清的Dulbecco′sPBS(减去Mg++/-Ca++)(Sigma Aldrich)与P1病毒的混合物中，使得感染复数(MOI)为10，并且最终细胞密度是1.3×10⁶/mL(总体积2.5升)。将细胞转移至5升Wave Bioreactor Wavebag(Wave Technologies，MA)，并且在27℃下培养4小时(17rocks/min，7度平台角度)；在培养期结束时，加入等体积(2.5升)的补充有30mM丁酸钠(Sigma Aldrich)的293Freestyle培养基(最终浓度＝15mM)，培养细胞20小时(37℃，8％CO2[0.2升/分种]，25震动/分钟，7度平台角度)。经由离心收集细胞(3,000xg，10分钟)，在DPBS(减去Ca++/Mg++)中洗涤一次，再悬浮再悬浮于0.25M蔗糖、25mM HEPES、0.5mM EDTA、pH7.4中并且在-80℃冷冻。 

用于放射性配体结合测定的膜制备

将冷冻的细胞在冰上解冻，并且在4℃以700xg(1400rpm)离心10分钟。将细胞沉淀再悬浮于20mL磷酸缓冲盐水中，并且以1400rpm离心10分钟。然后，将细胞沉淀物再悬浮于均质化缓冲剂(10mM HEPES(Gibco#15630)，pH7.5，1mM EDTA(BioSolutions，#BIO260-15)、1mM EGTA(Sigma，#E-4378)、0.01mg/mL苯甲脒(Sigma#B6506)、0.01mg/mL杆菌肽(Sigma#B0125)、0.005mg/mL亮肽素(Sigma#L8511)、0.005mg/mL抑肽酶(Sigma#A1153))中，并且在冰上培养10分钟。然后，将细胞用紧套玻璃Dounce均质器以15次轻轻敲击进行裂解。将均质物在4℃下以1000xg(2200rpm)离心10分钟。将上清液转移至冰上的新鲜离心管内。将细胞沉淀再悬浮于均质化缓冲剂中，在4℃下以1000xg(2200rpm)再次离心10分钟，之后取出上清液，将沉淀再悬浮于均质化缓冲剂中。该过程重复三次，之后合并上清液，将苯唑那酶(Benzonase，Novagen#71206)和MgCl₂(Fluka#63020)分别加入至最终浓度为1U/mL及6mM，并且在冰上培养一小时。然后， 将溶液在4℃下以25,000xg(15000rpm)离心20分钟，弃去上清液，将沉淀再次悬浮于新鲜的均质化缓冲剂(减去苯唑那酶及MgCl₂)中。在重复25,000xg离心步骤之后，将最终的膜沉淀再悬浮于均质化缓冲剂中，并且在-80℃下冷冻。使用Pierce BCA蛋白质测定试剂盒(Pierce 试剂A#23223和B#23224)测定蛋白质浓度。 

[ ³ H]-化合物A的合成和纯化

将化合物A(4-(1-(4-(甲基磺酰基)苯基)-3a,7a-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基氧基)哌啶-1-甲酸异丙酯，如上所示)(4mg，0.009mmol)溶于0.5毫升的二氯甲烷中，将得到的溶液用(1,5-环辛二烯)(吡啶)(三环己基膦)-铱(I)六氟磷酸酯处理(J.Organometal.Chem.1979,168,183)(5mg,0.006mmol)。将反应容器密封，将溶液在氚气气氛下搅拌17小时。在减压下除去反应溶剂，将得到的残留物溶于乙醇中。通过制备型HPLC使用以下条件进行粗[³H]-化合物A的纯化。 

通过质谱测定纯化的[³H]-化合物A的比活性为70Ci/mmol。 

可选地，使用[³H]-化合物B进行结合测定。 

[ ³ H]-化合物B的合成和纯化

将化合物B(4-(1-(4-(甲基磺酰基)苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，如上所示)(5mg，10.6μmol)溶于1.0mL的二氯甲烷中，并且用Crabtree催化剂(5mg，6.2μmol)处理得到的溶液。将反应容器密封，将溶液在氚气气氛下搅拌17小时。在减压 下除去反应溶剂，将得到的残留物溶于乙醇中。通过如下进行粗[3H]-化合物B的纯化：硅胶快速柱层析，用70％己烷/30％乙酸乙酯进行洗脱，之后硅胶快速柱层析，用60％石油醚/40％乙酸乙酯进行洗脱。通过质谱测定纯化的[³H]-化合物B的比活性为57.8Ci/mmol。 

GPR119放射性配体结合测定 

将测定化合物在100％DMSO中连续稀释(J.T.Baker#922401)。将2微升的各种稀释物加入到96孔板的合适孔中(每个浓度一式三份)。使用最终浓度10μM的未标记的化合物A(或化合物B)测定非特异性结合。 

将[³H]-化合物A(或[³H]-化合物B)稀释在结合缓冲剂(50mM Tris-HCl,pH7.5,(Sigma#T7443),10mM MgCl₂(Fluka63020),1mM EDTA(BioSolutions#BIO260-15),0.15%牛血清白蛋白(Sigma #A7511),0.01mg/mL苯甲脒(Sigma#B6506),0.01mg/mL杆菌肽(Sigma#B0125),0.005mg/mL亮肽素(Sigma#L8511),0.005mg/mL抑酶肽(Sigma#A1153))至浓度为60nM，向96孔板(Nalge Nunc#267245)的所有孔中加入100微升。 

将表达GPR119的膜解冻，并且在结合缓冲剂中稀释至最终浓度为20μg/100μL/孔，将100μL的稀释的膜加入到96孔板的各孔中。 

将板在室温(约25℃)下在振摇下培养60分钟。使用Packard收取器，通过真空过滤至预先浸泡在0.3％聚乙烯胺中的GF/C滤板(Packard#6005174)上而终止测定。然后,使用洗涤缓冲剂(50mMTris-HCl，pH7.5，保持在4℃)洗涤过滤器六次。接着,将滤板在室温风干过夜。将30μl的闪烁计数液(Ready Safe，Beckman Coulter#141349)加入到各孔中，将板密封，使用Wallac TriluxμBeta的基于板的闪烁计数器闪烁计数器测定与每个过滤器相关的放射活性。 

通过进行饱和结合来测定[³H]-化合物A(或[³H]-化合物B)的Kd， 通过非线性回归进行数据分析，拟合至单一位点的双曲线(Graph Pad Prism)。由竞争曲线进行IC50测定，使用专有曲线拟合程序(SIGHTS)和4-参数对数剂量响应方程式分析。使用Cheng-Prusoff方程式根据IC₅₀值计算Ki值。 

对于β-内酰胺酶、β-抑制蛋白、cAMP和结合测定，得到下述结果。: 

*固有活性是最终浓度为10μM的待测化合物的最大活性相对于标准GPR119激动剂，4-[[6-[(2-氟-4-甲基磺酰基苯基)氨基]嘧啶-4-基]氧基]哌啶-1-羧酸异丙酯(WO2005121121)或(S)-1-甲基环丙基4-(1-氟-2-(2-(2,3,6-三氟苯基)乙酰氨基)乙基)哌啶-1-羧酸酯的活性的百分比(参见下图)。 

**曲线外推至100％以计算EC50。 

请注意空白处表示对于那些实施例没有进行该实验。. 

(S)-1-甲基环丙基4-(1-氟-2-(2-(2,3,6-三氟苯基)乙酰氨基)-乙基)哌啶-1-羧酸酯的结构***

***出现在SMASH研讨会“NMR,It's Not Just For Structures:Determination of Physicochemical Properties”于波兰,Oregon，于2010年9月28日，星期二，Kathleen Farley的‘The Gauche effect:Using Conformational Restriction of a Ethyl Amide Series to Improve the Physical Properties of Analogues’。 

体内数据 

所有的体内试验设计都经过Pfizer's Animal Welfare Committee批准。自然的雄性Wistar大鼠(接收时体重200-250g)都是从Harlan Laboratories(Indianapolis,IN)获得，将其成对圈在Sani-chips锯屑床上的悬挂塑料笼中，且随意地喂食Purina5001食物。将大鼠圈养在控制温度和湿度条件下的控制光照循环(光照从6am至6pm)。在研究之前，使大鼠适应设备至少1周。 

化合物的制备 

将实施例50配制成在载体20mM Tris缓冲液(pH7.4)与0.5%甲基纤维素和0.5%HPMCAS-HF中的10%SDD。将剂量(75mg/kg)配制为15mg/mL，以便按5mL/kg施用，将所需量加入到研钵中，并且采用研杵将其与少量载体研磨成光滑的糊状物，加入另外的载体直到该混合物流动，当将其转移到搅拌容器中时，用剩余量的载体洗涤研钵几次，且封口以防止蒸发。在服用当天配制化合物，并且在服用程序之前和期间，采用磁性搅拌棒连续搅拌。 

口服葡萄糖耐量试验(OGTT)方案 

将大鼠分成(n=8/组)四个剂量组：90分钟或30分钟葡萄糖给药前载体(20mM Tris缓冲液，pH7.4，含有0.5%甲基纤维素和0.5%羟丙基甲基纤维素乙酸琥珀酸盐-高级，细粒(HPMCAS-HF))，或90分钟或30分钟葡萄糖给药前75mg/kg实施例50。在第1天，根据体重进行分类，以确保各组具有相等的组平均体重值。在口服葡萄糖耐量试验之前，使大鼠在干净的笼中禁食过夜(～15小时)。在研究的上午(禁食后)记录体重，进行剂量体积计算。在经由口服管饲法给予载体或试验化合物(5mL/kg)之前，经由尾静脉从所有的大鼠采集血样。九十或三十分钟之后，对大鼠抽血，且立即给予口服剂量的葡萄糖(2g/kg)。在葡萄糖负荷后15、30、60和120分钟，对大鼠再抽血。将血样(～250微升/时间点)收集到含有抑肽酶/DPPIVi(0.6TIU/20微升/mL全血)的EDTA管中。在采集之后立即将血液管颠倒几次，并放置在冰上，然后在冷冻离心机中以14,000rpm旋转5分钟。使用Roche c311临床化学分析器分析血浆样品的葡萄糖水平，使用Alpco Ultra-Sensitive Insulin Rat ELISA测定血浆胰岛素浓度，并且使用MSD ELISA试剂盒测定总酰胺GLP-1浓度。 

除非另有说明，结果以平均值+/-SEM(平均标准误差)给出。使用单向方差分析(ANOVA)，采用合适的时间-匹配载体和处理组之间的post-hoc分析，进行数据的统计学评价。使用未调整的t检验，与载体相比具有p<0.05的差异被认为是统计学显著的。 

表1∶在OGTT期间实施例50的作用 

++与时间-匹配的载体相比p＜0.01 

起始原料的制备 

制备例1：4-肼基哌啶-1-羧酸异丙酯二盐酸盐

将4-{2-(叔丁氧羰基)肼基}哌啶-1-羧酸异丙酯(如WO2008137436中所描述的获得)(20.2g，67.02mmol)溶于无水乙醇(250mL)中，在氮气和室温下搅拌该溶液。慢慢地加入浓盐酸水溶液(27.9mL，335mmol)。将该溶液在室温和氮气下搅拌4小时。将反应物浓缩成白色固体，其包含一些起始原料。用在1,4-二噁烷中的4M盐酸溶液(100mL，400mmol)处理该固体，且在室温下搅拌得到的混合物14小时。然后，将反应物在减压下浓缩，得到白色固体，用庚烷(100mL)处理，且再次浓缩，得到呈白色固体的标题化合物(15g，81％)。¹H NMR(400MHz,甲醇l-d₄)δ4.9(m,1H),4.1(m,2H),3.2(m,1H),2.9(m,2H),2.0(m,2H),1.4(m,2H),1.2,(d,6H);LCMS(ES+):202(M+1)。 

制备例2：4-[5-氨基-4-(乙氧基羰基)-1H-吡唑-1-基]-哌啶-1-羧酸异丙酯

将4-肼基哌啶-1-羧酸异丙酯二盐酸盐(7.08g，25.8mmol)、2-氰基-3-乙氧基丙烯酸乙酯(4.81g，28.4mmol)、乙酸钠(6.49g，77.5mmol)和乙醇(80mL)的混合物在85℃下搅拌3小时。将该混合物浓缩至初始体积的约三分之一。加入水(50mL)、饱和碳酸氢钠(50mL)和盐水(50mL)。用乙酸乙酯(2×50mL)萃取得到的混合物。用盐水洗涤合并的有机萃取物，且经硫酸镁干燥。将混合物过滤，在真空下浓缩滤液，得到呈浅黄色固体的粗标题化合物(9.8g)，将其用于下一步而无需纯化。通过经由硅胶层析纯化制备备分析样品，用30％至60％的乙酸乙酯在庚烷中的溶液洗脱。¹H NMR(500MHz,氘代氯仿)，δ1.26(d,6H)1.35(t,3H)1.86-1.95(m,2H)2.04-2.17(m,2H)2.84-2.96(m,2H)3.89-3.98(m,1H)4.28(q,2H)4.25-4.40(m,2H)4.89-4.97(m,1H)5.06(s,2H)7.64(s,1H);LCMS(ES+):325.1(M+1)。 

制备例3：4-[5-溴-4-(乙氧基羰基)-1H-吡唑-1-基]-哌啶-1-羧酸异丙酯

在室温下，将纯净的亚硝酸叔丁酯(4.8mL，39.3mmol)慢慢地加入到4-[5-氨基-4-(乙氧基羰基)-1H-吡唑-1-基]-哌啶-1-羧酸异丙酯(制备例2)(8.5g，26.2mmol)和溴化铜(II)(3.7g，16mmol)在乙腈(100mL)中的搅拌混合物中。在混合物加热至约50℃时，观察到显著的放热效应。在65℃下持续加热30分钟之后，将反应冷却至室温， 然后在真空下浓缩。加入过量的10％氨水溶液，并且用乙酸乙酯萃取混合物。用水及盐水洗涤有机相，且在真空下浓缩。通过硅胶层析纯化残余物，用在庚烷中的30％至70％乙酸乙酯洗脱，得到呈黄色油状物的标题化合物，其为约70％纯(通过NMR和LCMS)。将该物质用于下一步而无需进一步纯化。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ1.23(d,6H)1.34(t,3H)1.84-1.95(m,2H)2.01-2.15(m,2H)2.82-2.98(m,2H)4.25-4.36(m,2H)4.30(q,2H)4.45-4.56(m,1H)4.86-4.96(m,1H)7.95(s,1H);LCMS(ES+):387.9(M+1)。 

制备例4：4-[5-溴-4-(羟甲基)-1H-吡唑-1-基]-哌啶-1-羧酸异丙酯

向4-[5-溴-4-(乙氧基羰基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸异丙酯(3.59g，6.5mmol)在四氢呋喃(32mL)中冷却至0℃的溶液中加入2M硼烷-甲基硫化物复合物在四氢呋喃中的溶液(14.6mL，29.2mmol)。将该反应混合物加热回流21小时，然后在室温下搅拌4小时。将该混合物冷却至0℃，且加入甲醇。将得到的溶液加热至室温，并且搅拌10分钟。将溶液再冷却至0℃，滴加2M氢氧化钠水溶液(10mL)。用乙酸乙酯稀释得到的混合物，并且强力搅拌30分钟。分离层，并且用乙酸乙酯萃取水相两次。将合并的有机层用水及盐水连续洗涤，然后经硫酸镁干燥。过滤该混合物，且在真空下浓缩滤液。经硅胶进行层析，用在庚烷中的55％至70％乙酸乙酯洗脱，得到呈油状物的标题化合物(1.89g，84％)。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ1.23(d,6H),1.87-1.95(br m,3H),2.06(qd,2H),2.89(br t,2H),4.29(br s,2H),4.39(tt,1H),4.50(d,2H),4.90(m,1H),7.58(s,1H);LCMS(ES+)348.0(M+1)。 

制备例5∶4-[5-氰基-4-(羟基甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸异丙酯

将4-[5-溴-4-(羟基甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸异丙酯(1.42g，4.10mmol)、三-(二亚苄基丙酮)二钯(156mg，0.170mmol)、1-1’-双-(二苯基膦基)二茂铁(192mg，0.346mmol)、锌粉(68.8mg，1.06mmol)、氰化锌(497mg，4.23mmol)及N,N-二甲基乙酰胺(20mL)在微波瓶中混合。用氮气冲洗该瓶，密封并且在120℃在微波反应器(Biotage Initiator2.2)中加热1小时。将反应混合物通过Florisil^TM垫，用乙酸乙酯稀释，然后加入水。将水相用乙酸乙酯萃取三次，并且将合并的有机层经硫酸镁干燥。过滤混合物，在真空下蒸发滤液。在硅胶上进行层析，用在庚烷中的55％至70％乙酸乙酯进行洗脱，得到呈绿色油状物的标题化合物，其在静置时固化(1.06g，88％)。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ1.24(d,6H),1.99(br d,2H),2.06-2.17(m,3H),2.93(br t,2H),4.31(br s,2H),4.48(tt,1H),4.71(d,2H),4.92(m,1H),7.60(s,1H);LCMS(ES+):293.1(M+H)。 

制备例6∶2-氟-4-[(2-羟基乙基)硫代]苯酚

向4-溴-2-氟苯酚(0.75mL，6.8mmol)及二异丙基乙胺(3.5mL，20.09mmol)在1,4-二噁烷(35mL)中的溶液中加入9,9-二甲基-4,5-双(二苯基膦基)呫吨(415mg，0.717mmol)、双(二亚苄基丙酮)钯(322mg，0.351mmol)和2-巯基乙醇(0.46mL，6.86mmol)，并在110℃加热该暗褐色反应溶液16小时。使反应物冷却至室温，用水稀释且用乙酸乙酯萃取四次。将有机萃取物合并，经硫酸镁干燥。过滤混合物，在减压 下浓缩滤液，得到褐红色油状物，将其通过在硅胶上的层析纯化，得到呈褐红色固体的标题化合物(985mg，76％)。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ3.00(t,2H,J=5.95Hz)3.69(d,2H,J=3.71Hz)6.89-6.95(m,1H)7.11(ddd,1H,J=8.39,2.15,1.17Hz)7.17(dd,1H,J=10.54,2.15Hz)。 

制备例7：4-[(2-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}乙基)硫代]-2-氟苯酚

向2-氟-4-[(2-羟基乙基)硫代]苯酚(985mg，5.24mmol)和咪唑(371mg，5.30mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的溶液中分批加入叔丁基二甲基甲硅烷基氯(814mg，5.24mmol)，将反应在室温下搅拌4小时。在减压下浓缩反应物，并且用水稀释残余物，之后用乙酸乙酯萃取三次。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，并且经硫酸镁干燥。将混合物过滤，在减压下浓缩滤液，得到橙色的油状物的标题化合物(1.43g，90％)，使用其而无需进一步纯化。LCMS(ES+):301.1(M-1)。 

制备例8∶1-[4-(苄氧基)-3-氟苯基]-1H-四唑

在氮气氛下，向4-(苄氧基)-3-氟苯胺(1.04g，4.8mmol)(WO 2005030140)的悬浮液中加入乙酸(2.3mL，38.3mmol)、原甲酸三乙酯(2.44mL，14.4mmol)和叠氮化钠(0.34g，5.3mmol)，并且将反应混合物在95℃下加热2.5小时。然后，使溶液冷却至室温，加入水，之后用乙酸乙酯萃取三次。将萃取物合并，用盐水洗涤，并且经硫酸镁干 燥。将该混合物过滤并在减压下浓缩，并且通过在硅胶上的层析(在庚烷中的20-40％乙酸乙酯)纯化，得到呈白色固体的标题化合物(1.12g，86％)。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ9.65(s,1H),7.73–7.68(dd,1H,J=11,2.5Hz),7.60–7.57(m,1H)7.47–7.45(m,2H),7.40–7.30(m,5H),5.24(s,2H);LCMS(ES+):271.1(M+1)。 

制备例9：2-氟-4-(1H-四唑-1-基)苯酚

向在Parr振荡烧瓶中的1-[4-(苄氧基)-3-氟苯基]-1H-四唑(1.12g，4.14mmol)中加入乙醇(40mL)，并用氮气吹扫该溶液。加入10％碳钯(0.30g)，将反应物在Parr振荡装置上在40psi的氢气下氢化30分钟。然后，使该混合物穿过微孔过滤器过滤，并在减压下浓缩滤液，得到呈白色固体的标题化合物(0.67g，90％)，使用其而无需任何纯化。¹H NMR(400MHz,氘代甲醇)δ9.62(s,1H),7.65–7.62(dd,1H,J=11,2.5Hz),7.50–7.46(m,1H)7.47–7.45(dd,1H,J=9.0,9.0Hz);LCMS(ES+):181.1(M+1)。 

制备例10：4-(5-氰基-4-((甲基磺酰基氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯

将4-(5-氰基-4-(羟基甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯(制备例5)(75mg，0.24mmol)溶于1mL的无水二氯甲烷中，且加入三乙胺(0.1mL，0.74mmol)。将反应混合物在冰浴中冷却，然后加入甲磺酸酐(62mg，0.34mmol)。从冰浴取出溶液，且搅拌30分钟。通过加入 饱和碳酸氢钠水溶液淬灭反应，分离层。将水层用二氯甲烷再萃取三次。将有机萃取物合并，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且浓缩滤液，得到油状物(75mg，100％产率)。在后续步骤中使用该粗物质而无需进一步纯化。 

制备例11：4-肼基哌啶-1-羧酸叔丁酯盐酸盐

向在高压釜中的4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(50g，0.25mmol)于甲醇(500mL)中的溶液中加入在水(100mL)中的肼单盐酸盐(17.2g，0.25mmol)。将该白色混合物在氩气下搅拌，之后加入在水中的浆液形式的5％铂碳(750mg)。将高压釜密封且用氢气充填至60个大气压，并且搅拌该反应15小时。当完成时，经过滤反应，用甲醇洗涤该垫。进行该制备六次。将合并的滤液在减压下浓缩，通过过滤收集得到的白色沉淀(二-叔丁基-4,4′-肼-1,2-二基二哌啶-1-羧酸酯)副产物，用水洗涤数次。然后，在减压下浓缩水性滤液，得到呈无色固体的期望产物(221g，59％)。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ4.13(br s,2H),3.32(br t,1H),2.77(br t,2H),2.16(m,2H),1.66(m,2H),1.43(s,9H)。 

制备例12：4-[5-氨基-4-(乙氧基羰基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将4-肼基哌啶-1-羧酸叔丁酯盐酸盐(221g，880mmol)、2-氰基-3-乙氧基丙烯酸乙酯(153g，880mmol)、乙酸钠三水合物(477g，352mmol) 和乙醇(2000mL)的混合物在85℃下搅拌8小时。将该混合物在减压下浓缩，残留物溶于乙酸乙酯和水中。分离层，并且用乙酸乙酯萃取水层。然后，将合并的有机萃取物经硫酸镁干燥。过滤混合物，且在减压下浓缩滤液。通过经由短硅胶柱塞过滤而纯化粗物质，并且用在庚烷中的40％乙酸乙酯溶液洗脱，得到呈淡黄色固体的产物(214g，72％)。¹H NMR(500MHz,氘代氯仿)δ7.60(s,1H),5.27(br s,2H),4.23(br q,4H),3.91(m,1H),2.81(br s,2H),2.04(m,2H),1.86(m,2H),1.44(s,9H),1.29(t,3H)。 

制备例13：4-[5-溴-4-(乙氧基羰基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

向溴化铜(II)(1.69g，770mmol)在乙腈(1000mL)中的溶液中慢慢地加入亚硝酸叔丁酯(112mL，960mmol)，将溶液加热至65℃。在30分钟期间，向该物质中滴加4-[5-氨基-4-(乙氧基羰基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(215g，640mmol)在乙腈(650mL)中的溶液。在4小时之后，使反应物冷却至室温，然后倾倒入在冰中的2M盐酸(1500mL)中。将该混合物用乙酸乙酯萃取三次，并且用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤合并的有机萃取物，随后经硫酸镁干燥。过滤混合物，并且在减压下浓缩滤液。通过经由短硅胶柱塞过滤而纯化得到的残余物，最初用在二氯甲烷中的10％庚烷且接着用二氯甲烷进行洗脱，得到呈黄色油状物的标题化合物(137g，53％)，其在静置时固化。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ7.95(s,1H),4.48(m,1H),4.28(br q,4H),2.86(br s,2H),2.06(m,2H),1.90(m,2H),1.44(s,9H),1.34(t,3H)。 

制备例14：4-[5-溴-4-(羟基甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

向4-[5-溴-4-(乙氧基羰基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(137g，0.34mol)在四氢呋喃(1300mL)中冷却至0℃的溶液中慢慢地加入硼烷-甲基硫化物(97mL，1.02mol)。使溶液加热至室温，然后在加热回流15小时。随后，在冰浴中冷却反应，滴添甲醇(40mL)。之后，将溶液在室温搅拌20分钟。加入2M氢氧化钠水溶液(1200mL)，且分离层。用乙酸乙酯萃取水层，将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，且在减压下除去溶剂。通过经由短硅胶柱塞过滤而纯化得到的残留物，用在庚烷中的30％乙酸乙酯溶液洗脱，以显示呈无色固体的标题化合物(61.4g，50％)。来自该纯化的不纯的物质进一步经上述层析方法纯化，得到呈无色固体的第二批标题化合物(22g，18％)。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ7.59(s,1H),4.52(s,2H),4.37(m,1H),4.25(br s,2H),2.86(br s,2H),2.06(m br s,2H),1.89(m,2H),1.45(s,9H)。 

制备例15∶4-[5-氰基-4-(羟基甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将氰化铜(I)(2.97g，33.3mmol)加入到4-[5-溴-4-(羟基甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(10g，27.8mmol)在脱气二甲基甲酰胺(100mL)中的搅拌溶液中。然后，在165℃下将反应加热4小时，且使其冷却至室温。将其在冰浴中进一步冷却，加入乙二胺(5.5mL)在水(20mL)中的溶液，接着，用更多的水(70mL)稀释。然后，用乙酸乙酯萃取该混合物，且分离层。用水及盐水连续洗涤有机层，然后经 硫酸镁干燥。过滤该混合物，并且在减压下浓缩滤液。此过程分8批进行。将最终的粗残余物合并，且通过重复硅胶柱层析纯化，用在庚烷中的40％乙酸乙酯溶液洗脱，得到呈无色固体的标题化合物(11.6g，17％)。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)7.59(s,1H),4.71(s,2H),4.45(m,1H),4.26(br s,2H),2.88(br t,2H),2.08(m,2H),1.98(m,2H),1.48(s,9H);LCMS(ES+):207.1(M-Boc+H)。 

关于4-[5-氰基-4-(羟基甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯的另一种合成方法请参见实施例50。 

制备例16：4-(5-氰基-4-((甲基磺酰基氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

在室温下，向4-(5-氰基-4-(羟基甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(202mg，0.659mmol)在二氯甲烷(6.6mL)中的搅拌溶液中加入三乙胺(0.18mL，1.32mmol)，接着加入甲磺酸酐(189mg，1.1mmol)。将该混合物搅拌4.5小时，之后用二氯甲烷和饱和碳酸氢盐水溶液稀释。分离层，并且用二氯甲烷萃取水层。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤且在真空中浓缩滤液，得到呈油状物的4-(5-氰基-4-((甲基磺酰基氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯，使用其而无需进一步纯化。 

制备例17:2-氟-4-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-四唑-5-基)苯酚和2-氟-4-(2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2H-四唑-5-基)苯酚

A)4-(苄氧基)-3-氟苯甲腈

向3-氟-4-羟基苯甲腈(1.00g，7.30mmol)在20mL乙腈中的搅拌溶液中分批加入碳酸钾(2.02g，14.6mmol)。将得到的混合物搅拌10分钟，之后加入苯甲基溴(1.33mL，10.9mmol)。将混合物在室温下搅拌70小时，之后用乙酸乙酯和水稀释。分离有机相，并且用水、盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并且在真空中浓缩滤液。通过快速层析纯化残余物，用在庚烷中的5至20％梯度乙酸乙酯溶液洗脱，得到呈白色固体的4-(苄氧基)-3-氟苯甲腈(1.33g)。 

B)5-(4-(苄氧基)-3-氟苯基)-1H-四唑及5-(4-(苄氧基)-3-氟苯基)-2H-四唑

将装有4-(苄氧基)-3-氟苯甲腈(250mg，1.10mmol)、叠氮化钠(214mg，3.30mmol)、氯化铵(176mg，3.30mmol)和3mL的N,N-二甲基甲酰胺的小瓶在110℃下加热18小时。将反应混合物冷却至室温，用水和乙酸乙酯稀释，并且用1N盐酸水溶液将pH调节至3。分离有机相，并且用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤且在真空中浓缩滤液，得到呈白色固体的标题化合物(270mg)。在后续步骤中使用该物质而无需纯化。 

C)5-(4-(苄氧基)-3-氟苯基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-四唑和5-(4-(苄氧基)-3-氟苯基)-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2H-四唑

分四批，向5-(4-(苄氧基)-3-氟苯基)-1H-四唑和5-(4-(苄氧基)-3-氟苯基)-2H-四唑(270mg，1mmol)溶于四氢呋喃中的溶液中加入氢化钠(44mg，1.1mmol)，将得到的混合物在室温下搅拌15分钟。然后，加 入(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基硅烷(0.19mL，1.0mmol)，并且在室温下搅拌反应混合物16小时。通过加入水淬灭该反应，加入乙酸乙酯。分离有机相，用乙酸乙酯萃取水相两次。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤且在减压下浓缩滤液。通过快速层析纯化，用乙酸乙酯和庚烷的梯度溶液(5至20％乙酸乙酯)洗脱，得到呈白色固体的期望产物(270mg，产率67％)。 

D)2-氟-4-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-四唑-5-基)苯酚和2-氟-4-(2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2H-四唑-5-基)苯酚

向5-(4-(苄氧基)-3-氟苯基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-四唑和5-(4-(苄氧基)-3-氟苯基)-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2H-四唑(140mg，0.35mmol)溶于2mL乙醇和2mL四氢呋喃的混合物中的溶液中加入钯黑(56mg，0.53mmol)和甲酸(0.14mL，3.5mmol)。将得到的混合物在室温下搅拌4小时，之后经 垫过滤。在减压下浓缩滤液，在后续步骤中使用得到的粗物质而无需进一步纯化。. 

制备例18：5-(4-(苄氧基)-3-氟苯基)-1-(2-(三甲基甲硅烷基氧基)乙基)-1H-四唑和5-(4-(苄氧基)-3-氟苯基)-2-(2-(三甲基甲硅烷基氧基)乙基)-2H-四唑

分两批，向5-(4-(苄氧基)-3-氟苯基)-1H-四唑和5-(4-(苄氧基)-3-氟苯基)-2H-四唑(制备例17，步骤B)(550mg，2mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(8mL)中的溶液中加入氢化钠(163mg，4mmol)，将得到的混合物在室温下搅拌5分钟。然后，加入(2-溴乙氧基)三甲基硅烷(1.3mL，6mmol)，将反应混合物在70℃下搅拌16小时，之后冷却至室温。通过加入水淬灭反应，并加入乙酸乙酯。分离有机相，用乙酸乙酯萃取水相两次。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤且在减压下浓缩。通过快速层析纯化残余物，用乙酸乙酯和庚烷的梯度(5至30％乙酸乙酯)洗脱，得到5-(4-(苄氧基)-3-氟苯基)-1-(2-(三甲基甲硅烷基氧基)乙基)-1H-四唑(100mg，产率12％)和5-(4-(苄氧基)-3-氟苯基)-2-(2-(三甲基甲硅烷基氧基)乙基)-2H-四唑(600mg，产率69％)。 

制备例19∶2-氟-4-(2-(2-(三甲基甲硅烷基氧基)乙基)-2H-四唑-5-基)苯酚

向5-(4-(苄氧基)-3-氟苯基)-2-(2-(三甲基甲硅烷基氧基)乙基)-2H-四唑(制备例18)(230mg，0.54mmol)溶于6mL乙醇与6mL四氢呋喃的混合物中的溶液中加入钯黑(86mg，0.806mmol)和甲酸(0.215mL，5.4mmol)。将得到的混合物在室温下搅拌4小时，之后经 垫过滤。在减压下浓缩滤液，在后续步骤中使用得到的粗物质 (180mg)而无需进一步纯化。 

制备例20：2-氟-4-(1-(2-(三甲基甲硅烷基氧基)乙基)-1H-四唑-5-基)苯酚

向5-(4-(苄氧基)-3-氟苯基)-1-(2-(三甲基甲硅烷基氧基)乙基)-1H-四唑(制备例18)(130mg，0.30mmol)溶于2mL乙醇与2mL四氢呋喃的混合物中的溶液中加入钯黑(48mg，0.45mmol)和甲酸(0.12mL，3mmol)。将得到的混合物在室温下搅拌4小时，之后经 垫过滤。在减压下浓缩滤液，在后续步骤中使用得到的粗物质(94mg)而无需进一步纯化。 

制备例21∶2-氟-4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯酚

A)5-(4-(苄氧基)-3-氟苯基)-1-甲基-1H-四唑及5-(4-(苄氧基)-3-氟苯基)-2-甲基-2H-四唑

在室温下，分两批向5-(4-(苄氧基)-3-氟苯基)-1H-四唑和5-(4-(苄氧基)-3-氟苯基)-2H-四唑(制备例17，步骤B)(1.50g，5.55mmol)在30mL四氢呋喃中的搅拌溶液中加入氢化钠(444mg，11.1mmol)。在5分钟之后后，加入碘甲烷(1.04mL，16.6mmol)，并且将反应在室温和氮气氛下搅拌15小时。将混合物用水稀释，且用乙酸乙酯萃取两次。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤且在真空中浓缩滤液。通过快速层析纯化残余物，用在庚烷中的10-40％乙酸乙酯溶液洗脱，得到呈白色固体的5-(4-(苄氧基)-3-氟苯基)-2-甲基-2H- 四唑的白色固体(1.1g)和5-(4-(苄氧基)-3-氟苯基)-1-甲基-1H-四唑(450mg)。 

5-(4-(苄氧基)-3-氟苯基)-1-甲基-1H-四唑。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ4.15(s,3H)5.23(s,2H)7.15(t,J=8.39Hz,1H)7.31-7.48(m,6H)7.52(dd,J=11.13,2.15Hz,1H).LCMS(M+1)285.1。 

B)2-氟-4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯酚

向5-(4-(苄氧基)-3-氟苯基)-1-甲基-1H-四唑(500mg，1.76mmol)在6毫升的乙醇和6mL的四氢呋喃中的溶液中加入甲酸(0.7mL，17.6mmol)，接着加入钯黑(281mg，2.64mmol)。将反应混合物在室温下搅拌4小时。将反应混合物经过滤，并且在真空中浓缩滤液，得到呈白色固体的2-氟-4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯酚(330mg)，其用于后续反应而无需进一步纯化。 

制备例22：4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯酚

A)4-(苄氧基)-N-甲基苯甲酰胺

在0℃且搅拌下，向装有亚硫酰氯(0.35mL，4.82mmol)的烧瓶中加入市售可得的4-苄氧基苯甲酸(1.00g，4.38mmol)在10mL二氯甲烷和0.01mL的N,N-二甲基甲酰胺中的溶液。移除冰浴，将溶液在室温下搅拌4小时。将混合物在真空浓缩，得到白色固体。将该固体溶于10mL的甲基胺(2M，在四氢呋喃中)，且将得到的溶液在室温下搅拌70小时。将该混合物用乙酸乙酯和水稀释，分离有机层，经硫酸镁干燥，过滤且在真空中浓缩滤液，得到白色固体。从乙酸乙酯和庚烷中重结晶该固体，得到呈白色固体的4-(苄氧基)-N-甲基苯甲酰胺(850mg)。 

B)5-(4-(苄氧基)苯基)-1-甲基-1H-四唑

在顶部具有回流冷凝器的烧瓶中，在氮气氛下，向4-(苄氧基)-N-甲基苯甲酰胺(200mg，0.829mmol)在3mL的乙腈和一滴N,N-二甲基甲酰胺中的搅拌溶液中加入三乙胺(0.12mL)。将该反应混合物搅拌10分钟，之后滴加亚硫酰氯(0.078mL，1.08mmol)。将该黄色反应混合物在室温和氮气氛下搅拌1小时。然后，慢慢地加入三乙胺(0.36mL)，接着加入氯化四丁基铵(37.4mg，0.12mmol)和叠氮化钠(611mg，1.82mmol)。将得到的黄色悬浮液在室温、氮气氛下强力搅拌70小时。将混合物用水及乙酸乙酯稀释。分离有机层，用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤且在真空中浓缩滤液。通过快速层析纯化残余物，用在庚烷中的10至40％梯度乙酸乙酯溶液洗脱，得到呈白色固体的5-(4-(苄氧基)苯基)-1-甲基-1H-四唑(180mg)。 

C)4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯酚

向5-(4-(苄氧基)苯基)-1-甲基-1H-四唑(180mg，0.676mmol)在3mL的乙醇和3mL的四氢呋喃中的搅拌溶液中加入甲酸(0.27mL，6.76mmol)，接着加入钯黑(108mg，1.01mmol)。将该混合物在室温下搅拌4小时。将反应混合物经过滤，并且在真空中浓缩滤液，得到呈白色固体的4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯酚(110mg)，其用于后续反应而无需进一步纯化。 

制备例23：3-氟-4-羟基苯甲酰胺

将市售可获得的3-氟-4-羟基苯甲腈(500mg，3.65mmol)和氢氧化钾(1.02g，18.2mmol)在10mL的80％乙醇中的混合物加热回流16小时。在冷却至室温后，将混合物在真空中浓缩，并且将残余物溶于水中，用乙酸酸化且用乙酸乙酯萃取。将合并的有机萃取物经硫酸镁干燥， 过滤且在真空中浓缩滤液。通过快速层析纯化残余物，用在庚烷中的20至60％梯度乙酸乙酯溶液洗脱，得到呈白色固体德3-氟-4-羟基苯甲酰胺(210mg)。 

可选地，可以如下制备3-氟-4-羟基苯甲酰胺： 

向脲过氧化氢(4.2g，43.8mmol)在12mL水中的搅拌溶液中加入固体氢氧化钠(1.04g，25.5mmol)。将得到的溶液在冰浴中冷却，之后加入3-氟-4-羟基苯甲腈(1.00g，7.29mmol)在5mL乙醇中的溶液。将混合物在室温下强力搅拌2小时，之后用水(100mL)和乙酸乙酯(100mL)稀释。将该混合物搅拌5分钟，之后加入1M盐酸直至pH4。分离水层，并且用乙酸乙酯萃取(3×100mL)。将合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤，且浓缩滤液，产生白色固体。用二乙醚和庚烷(2∶1，90mL)研磨该固体1小时，之后过滤，得到呈白色固体的3-氟-4-羟基苯甲酰胺(1.05g)。¹H NMR(400MHz,氘代二甲亚砜)δ6.93(t,J=8.69Hz,1H)7.19(br.s.,1H)7.53(dd,J=8.39,1.95Hz,1H)7.62(dd,J=12.40,2.05Hz,1H)7.77(br.s.,1H)10.39(s,1H).LCMS(ES)156.0(M+1)。 

制备例24：2-氟-4-羟基苯甲酰胺

向脲过氧化氢(2.1g，21.9mmol)在6mL水中的搅拌溶液中加入固体氢氧化钠(521mg，12.8mmol)。将得到的溶液在冰浴中冷却，之后加入在2mL乙醇中的2-氟-4-羟基苯甲腈(500mg，3.65mmol)。混合物在室温下强力搅拌2小时，之后用水(100mL)和乙酸乙酯(100mL)稀释。将该混合物搅拌5分钟，之后加入1M盐酸直至pH＝4。分离水层，并且用乙酸乙酯萃取(3×50mL)。将合并的有机层经硫酸镁干燥，过滤，且浓缩滤液，得到呈白色固体的2-氟-4-羟基苯甲酰胺。 

制备例25：4-(5-氰基-4-(1-羟基乙基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯

将4-(5-氰基-4-甲酰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯(实施例9，步骤A)(51mg，0.18mmol)溶于2mL的无水四氢呋喃中，在氮气氛下冷却至-78℃。然后，滴加溴化甲基镁(0.070mL，0.21mmol，在二乙醚中3M)。移除冷浴，且将混合物在室温下搅拌1小时。将该混合物用1M硫酸氢钾水溶液稀释，并且用乙酸乙酯萃取三次。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且在真空中浓缩滤液。通过快速层析纯化残余物，用在庚烷中的乙酸乙酯梯度(20至100％乙酸乙酯)洗脱，得到呈白色固体的4-(5-氰基-4-(1-羟基乙基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯(33mg)，其用于后续步骤而无需纯化。 

制备例26：4-硝基苯基碳酸1-甲基环丙酯

A)1-甲基环丙醇

在1L烧瓶中装入甲醇钛(100g)、环己醇(232g)和甲苯(461mL)。烧瓶装有Dean-Stark trap和冷凝器。将该混合物在140℃下加热直至移除甲醇。在180℃下移除甲苯。加入更多甲苯，重复该过程两次。在移除所有甲苯后，将烧瓶在高真空下干燥。将二乙醚(580mL)加入到烧瓶中，制备在二乙醚中的1M溶液。给5L、3-颈烧瓶装备顶部搅拌器、惰性气体入口和恒压加料漏斗。将烧瓶用氮气吹扫，且装入乙酸甲酯(60.1mL，756mmol)、环己氧基钛(1M溶液，在醚中，75.6mL)和 二乙醚(1500mL)。搅拌溶液，同时将反应烧瓶保持在室温水浴中。给加料漏斗装入3M溴化乙基镁溶液(554mL，1.66mole)。在室温下，在3小时期间滴加格氏试剂。混合物变成淡黄色溶液，然后，逐渐形成沉淀物，最后变成暗绿/棕色/黑色混合物。在另外搅拌15分钟之后，在加入格氏试剂之后，小心地将混合物倾倒入10％浓硫酸在1L水中的混合物中。搅拌得到的混合物，直至所有固体溶解。分离水层，用二乙醚萃取(2×500mL)。将合并的有机萃取物依次用水、盐水洗涤，经碳酸钾(500g)干燥30分钟，过滤且将滤液真空中浓缩成油状物。加入碳酸氢钠(200mg)，蒸馏粗物质，收集沸点约100℃的馏份，得到标题化合物(23克)，其含有作为少量杂质的甲基乙基酮和2-丁醇。¹H NMR(500MHz,氘代氯仿)δ0.45(app.t,J=6.59Hz,2H),0.77(app.t,J=5.61Hz,2H),1.46(s,3H)。标题化合物的制备也记载在WO09105717中。 

B)4-硝基苯基碳酸1-甲基环丙酯

将1-甲基环丙醇(10g，137mmol)、氯甲酸4-硝基苯酯(32g，152mmol)和4-二甲基氨基吡啶的一些晶体(150mg，1.2mmol)在二氯甲烷(462mL)中的溶液冷却至0℃。滴加三乙胺(36.5g，361mmol)。在10分钟之后，移除冰浴，且将反应物在室温下搅拌14小时。将反应混合物用饱和碳酸钠水溶液洗涤两次。用二氯甲烷萃取水相。将合并的有机萃取物用水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤且在真空中浓缩滤液。通过快速硅胶层析纯化残余物，用乙酸乙酯在庚烷中的梯度混合物洗脱(最初10分钟期间0至5％乙酸乙酯，然后，等浓度(5％乙酸乙酯对庚烷))，得到20.8g呈澄清油状物的期望碳酸酯。该油状物在静置时固化。 

¹H NMR(500MHz,氘代氯仿)δ0.77(app.t,J=6.59Hz,2H),1.09(app.t,J=7.07Hz,2H),1.67(s,3H),7.40(app.dt,J=9.27,3.17Hz,2H),8.29(app.dt,J=9.27,3.17Hz,2H)。 

可选地，可以如下制备1-甲基环丙醇： 

1-甲基环丙醇

给2000mL4颈烧瓶装备机械搅拌器、惰性气体入口、温度计和两个恒压加料漏斗。用氮气吹扫烧瓶，且装入490mL的二乙醚，接着装入18.2mL(30mmol)四(2-乙基己氧基)钛。一个加料漏斗装有用乙醚将28.6mL(360mmol)乙酸甲酯稀释至120mL而制备的溶液。第二个加料漏斗装有200mL的3M溴化乙基镁的乙醚溶液。将反应烧瓶在冰水浴中冷却，以保持内部温度在10℃或以下。将40毫升的乙酸甲酯溶液加入至烧瓶。然后，以每秒约2滴的速率(不快于2mL/分钟)从加料漏斗滴加格氏试剂。在加入第一份40mL的格氏试剂之后，加入另外20mL份的乙酸甲酯的醚溶液。在加入第二份40mL的格氏试剂之后，加入另一份20mL的乙酸甲酯的二乙醚溶液。在加入第三份40mL的格氏试剂之后，加入另一份20mL的乙酸甲酯的醚溶液。在加入第四份40mL的格氏试剂之后，加入最后一份20mL的乙酸甲酯的醚溶液。 

在完成格氏试剂的加入之后，再搅拌该混合物15分钟。然后，将该混合物倾倒到660g的冰和60mL的浓硫酸的混合物中，且快速搅拌以溶解所有固体。分离相，再次用50毫升的二乙醚萃取水相。将合并的乙醚萃取物用15mL的10%碳酸钠水溶液、15mL的盐水洗涤，且经30克硫酸镁干燥1小时，同时搅拌。然后，过滤乙醚溶液。加入三正丁胺(14.3mL，60mmol)和均三甲苯(10mL)。在大气压下，使用2.5cm×30cm夹套维格罗分馏柱通过蒸馏移除大部分的二乙醚。其余液体转移至较小蒸馏烧瓶，使用两份10mL的己烷促进转移。经由2cm×20cm夹套维格罗分馏柱在大气压下继续蒸馏。收集在98-105℃蒸馏出的液体，得到14g呈无色液体的标题化合物。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ0.42-0.48(m,2H),0.74-0.80(m,2H),1.45(s,3H),1.86(br.s.,1H)。 

制备例27∶2-氟-4-(1-甲基-1H-咪唑-5-基)苯酚

A)5-(3-氟-4-甲氧基苯基)-1-甲基-1H咪唑

将2-氟-4-溴茴香醚(0.216mL，1.63mmol)、三(2-呋喃基)膦(25.9mg，0.108mmol)和碳酸钾(300mg，2.17mmol)置于微波瓶中，且溶于无水N，N-二甲基甲酰胺(4.8mL)中。将混合物用氮气流脱气10分钟，加入1-甲基咪唑(0.087mL，1.1mmol)和乙酸钯(II)(12.4mg，0.054mmol)，且使该混合物再脱气10分钟。将容器置入140℃微波反应器中2小时。用乙酸乙酯稀释该混合物，经过滤，且在减压下浓缩滤液。通过层析纯化粗物质，用在庚烷中的25至100％乙酸乙酯溶液洗脱，然后用在二氯甲烷中的0至10％甲醇梯度洗脱，得到呈黄色油状物的标题化合物(210mg)。¹H NMR(500MHz,氘代氯仿)δ3.57(s,3H),3.85(s,3H),6.95-6.98(m,2H),7.00-7.07(m,2H),7.42(s,1H).相对于文献(Eur.J.Org.chem.,2008,5436and Eur.J.Org.,2006,1379)，在7.42处的质子位移显示期望的咪唑异构体。 

B)2-氟-4-(1-甲基-1H-咪唑-5-基)苯酚

在-30℃，向5-(3-氟-4-甲氧基苯基)-1-甲基-1H咪唑(101.8mg，0.494mmol)在二氯甲烷(2.0mL)中的溶液中加入溴化硼(III)溶液(0.50mL，在庚烷中1.0M溶液)。将该混合物在室温下搅拌20小时。然后，将混合物冷却至-30℃，且向该混合物中加入甲醇(2mL)。将该混合物真空中浓缩，将残余物溶于水中，并且用1M氢氧化钠中和。将溶液浓缩，得到呈黄色固体的标题化合物(90mg)。使用该化合物而无需进一步纯化。 

制备例28∶2-氟-4-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)苯酚

A)2-(3-氟-4-甲氧基苯基)-1-甲基-1H咪唑

将2-氟-4-溴茴香醚(0.256mL，1.93mmol)和碘化铜(I)(375mg， 1.93mmol)置于微波瓶中，并且溶于N,N-二甲基甲酰胺(4.8mL)。将混合物用氮气流脱气10分钟，加入1-甲基咪唑(0.078mL，0.96mmol)和乙酸钯(II)(11mg，0.048mmol)，然后使混合物另外脱气10分钟。将容器置入140℃微波反应器中2小时。用乙酸乙酯(3mL)稀释混合物，倾倒入饱和氯化铵水溶液中，在开放空气中搅拌30分钟，并且用乙酸乙酯萃取两次。将合并的有机相用水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且在真空中浓缩滤液。通过层析纯化粗物质，用乙酸乙酯对庚烷的梯度混合物(25至100％乙酸乙酯/庚烷，然后0至10％甲醇的二氯甲烷溶液)洗脱，得到呈黄色油状物的2-(3-氟-4-甲氧基苯基)-1-甲基-1H咪唑(35.8mg)。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ3.66(s,3H),3.88(s,3H),6.90(s,1H),6.96(m1H),7.10(s,1H),7.24-7.33(m,2H)。与5-(3-氟-4-甲氧基苯基)-1-甲基-1H咪唑(制备27)的质子NMR和文献Eur.J.Org.chem.,2008,5436and Eur.J.Org.,2006,1379)相比，质子NMR显示期望的咪唑异构体。 

B)2-氟-4-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)苯酚

按照类似于制备例27(B)中的方法，从2-(3-氟-4-甲氧基苯基)-1-甲基-1H咪唑制备2-氟-4-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)苯酚，得到呈褐色固体的标题化合物(33.4mg)。使用粗物质而无需进一步纯化。 

制备例29：2-氟-4-(甲基磺酰基)-1-(丙-1-烯-2-基)苯

向1-溴-2-氟-4-(甲基磺酰基)苯(199mg，0.790mmol)和异丙烯基三氟硼酸钾(300mg，2.57mmol)在2-丙醇(10mL)中的溶液中依次加入催化剂二氯1,1'-双-(二苯基膦基)-二茂铁钯(67mg，0.089mmol)和三乙胺(0.17mL，1.20mmol)。将反应在90℃加热15小时，然后在室温搅拌反应48小时。然后，加入水和乙酸乙酯，分离层。用乙酸乙酯萃 取水层。将有机萃取物合并，用盐水洗涤，且经硫酸钠干燥。过滤混合物，并且在减压下浓缩滤液。通过硅胶层析纯化(10至100％乙酸乙酯，在庚烷中)残余物，得到呈白色固体的标题化合物(130mg，80％)。 ¹H NMR(500MHz,氘代氯仿)δ2.17(s,3H),3.08(s,3H),5.29-5.43(m,2H),7.51(t,J=7.56Hz,1H),7.64(dd,J=9.88,1.59Hz,1H),7.70(dd,J=8.05,1.71Hz,1H)。 

制备例30∶4-羟基-2-甲基苄腈

将在二氯甲烷中的三氯化硼(61.2mL,1M)慢慢地加入到二氯甲烷(93mL)中，且冷却至-78℃。向其中加入4-甲氧基-2-甲基苄腈(3.00g，20.4mmol)和碘化四丁铵(7.17g，61.2mmol)在二氯甲烷(20mL)中的溶液。使该反应混合物在-78℃下搅拌5分钟。然后，将反应混合物逐渐温热至室温，且搅拌2小时。慢慢地加入冰浆液以淬灭该反应。使反应搅拌30分钟，且分离层。用二氯甲烷(2x)萃取水层，且将合并的有机萃取物过相分离筒和真空浓缩。通过快速层析纯化粗混合物，用在戊烷中的0%至60%乙酸乙酯洗脱，得到呈黄色固体的目标化合物(1.85g，68%)。1HNMR氘代甲醇，δppm7.40(d,1H),6.80(s,1H),6.70(d,1H),2.40(s,3H);GCMS(CI method)ES+=133[M]AP+=133[M]。 

制备例31A∶3-氟-4-羟基-N-甲基苯甲酰胺

A)4-(苄氧基)-3-氟苯甲酸苄酯 在丙酮中混合3-氟-4-羟基苯甲酸(5.00g，32.06mmol)、苯甲基溴(8.22mL,67.3mmol)和碳酸钾(13.3g，96.24mmol)，且加热回流18小时。将溶液冷却至室温，过滤固体，并且用乙酸乙酯稀释滤液。用饱和的盐水溶液洗涤有机相，经硫酸镁干燥，过滤且在减压下浓缩滤液，得到期望的产物4-(苄氧基)-3-氟苯甲酸苄酯。1H NMR(500MHz,氘代氯仿)δppm5.22(s,2H)5.36(s,2H)7.03(t,J=8.42Hz,1H)7.29-7.52(m,10H)7.76-7.89(m,2H);LCMS(ES+)=381.2(M+45) 

B)4-(苄氧基)-3-氟苯甲酸

将4-(苄氧基)-3-氟苯甲酸苄酯(11.6g，34.2mmol)溶于四氢呋喃(50mL)和甲醇(50mL)中。将氢氧化钠水溶液(70mL，1M)加入到反应混合物中，且搅拌18小时。在冰浴中冷却反应，并且通过小心地加入1M盐酸溶液酸化至pH3。沉淀出白色固体，过滤且干燥过夜，得到呈白色固体的期望产物4-(苄氧基)-3-氟苯甲酸(7.6g，90%)。1H NMR(500MHz,氘代二甲亚砜)δppm3.32(br.s.,1H)5.27(s,2H)7.34-7.39(m,2H)7.42(t,J=7.44Hz,2H)7.45-7.50(m,2H)7.68(dd,J=11.83,2.07Hz,1H)7.75(d,J=8.78Hz,1H) 

C)4-(苄氧基)-3-氟-N-甲基苯甲酰胺

在0℃下，将亚硫酰氯(2.7mL,37mmol)加入到4-(苄氧基)-3-氟苯甲酸在二甲基甲酰胺(0.048mL,0.617mmol)和二氯甲烷(100mL)中的溶液中，并且在室温下搅拌得到的溶液20小时。在减压下浓缩反应物，且在高真空下干燥2小时。将得到的黄色固体溶于四氢呋喃(60mL)中，加入甲胺在四氢呋喃中的2M溶液(35mL)，并且在室温下搅拌反应18小时。在减压下，将反应混合物浓缩至原始体积的一半，白色固体沉淀出。过滤出固体，用水洗涤，且在真空烘箱中干燥过夜，得到呈白色固体的期望产物(6.00g，70%)。1H NMR(500MHz,氘代二甲亚砜)δppm2.76(d,J=4.39Hz,3H)5.24(s,2H)7.30-7.38(m,2H)7.41(t,J=7.32Hz,2H)7.45-7.50(m,2H)7.58-7.75(m,2H)8.37(d,J=4.39Hz,1H) 

D)3-氟-4-羟基-N-甲基苯甲酰胺

将4-(苄氧基)-3-氟-N-甲基苯甲酰胺(1.03g，3.97mmol)悬浮在Parr瓶中的乙醇(20mL)中。在稳定氮气流下，加入在约1.5mL水中的10%钯碳(80mg)。在在室温下，于50psi氢气气氛下振摇反应64小时。将反应混合物小心地过滤穿过垫，用大量的乙酸乙酯洗涤。在减压下浓缩滤液，得到呈亮棕黄色固体的期望产物(628mg，93%)。1H NMR(500MHz,氘代氯仿)δppm3.02(d,J=4.88Hz,3H)7.05(t,J=8.42Hz,1H)7.44(d,J=9.76Hz,1H)7.60(dd,J=11.10,2.07Hz,1H) 

制备例31B∶3-氟-4-羟基-N,N-二甲基苯甲酰胺

在二氯甲烷中混合3-氟-4-羟基苯甲酸(2.00g，12.8mmol)、二甲胺盐酸盐(4.28g，20.5mmol)、1-羟基苯并三唑一水合物(1.96g，12.8mmol)和二异丙基乙胺(4.5mL,26mmol)。加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(3.93g，20.5mmol)，用氮气吹扫反应容器，加盖，且在室温下搅拌过夜。用二氯甲烷和1M磷酸稀释反应物。将形成的沉淀物过滤出，且用稀碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤二氯甲烷层，经硫酸钠干燥，过滤，且在减压下浓缩滤液。通过快速层析纯化残余物，用在庚烷中的65%乙酸乙酯洗脱，得到期望的产物(218mg，9%)。LC/MS(ES+):184.1(M+1) 

制备例32：3-羟基-4,4-二甲氧基哌啶-1-羧酸叔丁酯

将4-氧代-1-哌啶羧酸叔丁酯(2.00g，10mmol)溶于甲醇(20mL)中，且冷却至0℃。加入粉末氢氧化钾(1.26g，22.1mmol)。将碘(2.8g，11mmol)溶于methanol(25mL)中，且经45分钟滴加至反应中。然后，将反应慢慢地温热至室温，且搅拌16小时。浓缩反映物，且加入 甲苯(50mL)。将得到的固体过滤出，且用甲苯洗涤。在减压下浓缩滤液，并且通过快速层析纯化残余物，用在庚烷中的30%至100%乙酸乙酯梯度洗脱，得到3-羟基-4,4-二甲氧基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.89g，72%)。¹H NMR(氘代甲醇，400MHz)δppm4.06-4.00(m,1H),3.99-3.91(m,1H),3.80-3.73(m,1H),3.29(s,3H),3.28(s,3H),3.22-3.10(br m,1H),2.95-2.80(br m,1H),1.91-1.77(m,2H),1.50(s,9H)。 

制备例33∶3-羟基-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯

将3-羟基-4,4-二甲氧基哌啶-1-羧酸叔丁酯(6.70g，26mmol)溶于丙酮(135mL)中，且加入对甲苯磺酸(244mg，1.28mmol)。在室温下，搅拌反应16小时。浓缩混合物，且将得到的残余物溶于叔丁基甲醚中，用饱和的碳酸氢钠水溶液洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤，且在减压下浓缩滤液，得到呈油状物的3-羟基-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(4.67g，69%)。GC/MS(方法1):R,=4.95min;MS(ESIpos):m/z=159[M-tBu]⁺。 

制备例34∶4-肼基-3-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯

将3-羟基-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(5.50g，26mmol)溶于甲醇(120mL)中，并且在加盖的Parr振荡瓶中用氮气流脱气。将肼-盐酸盐(1.44mg，21mmol)溶于水(20mL)中，且加入到反应中。用5mL的水洗涤烧瓶，将其也加入到反应中。将10%的铂碳催化剂(500mg)在水中浆液化，且加入到反应混合物。在室温下，于50psi氢气气氛下振摇混合物16小时。将反应物过滤穿过垫，用甲醇洗涤。在减压下浓缩滤液，然后用庚烷稀释，且在减压下浓缩，得到期望产物4-肼基-3-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯。 

制备例35：4-[5-氨基-4-(乙氧基羰基)-1H-吡唑-1-基]-3-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯

在无水乙醇(170mL)中混合4-肼基-3-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(5.30g，20mmol)和(乙氧基亚甲基)氰基乙酸乙酯(3.42g，19.8mmol)。加入乙酸钠三水合物(10.90g，79.2mmol)，且加热回流反应混合物4小时，将反应冷却至室温，在减压下浓缩，并且将得到的残余物用水和乙酸乙酯稀释。将有机层经硫酸钠干燥，过滤且在减压下浓缩滤液。通过快速层析纯化粗油状物，用在庚烷中的10%至100%乙酸乙酯梯度洗脱，得到4-[5-氨基-4-(乙氧基羰基)-1H-吡唑-1-基]-3-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯。 

制备例36：4-[5-氨基-4-(乙氧基羰基)-1H-吡唑-1-基]-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯

将4-[5-氨基-4-(乙氧基羰基)-1H-吡唑-1-基]-3-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.71g，4.82mmol)溶于二氯甲烷(50mL)中，且冷却至-78℃。滴加二乙氨基三氟化硫(0.710mL,0.58mmol)，然后温热至0摄氏温度25分钟。将反应溶液冷却至-78℃，且小心地加入甲醇(10mL)。在减压下浓缩反应物，且通过快速层析纯化残余物，用在庚烷中的10%至100%乙酸乙酯梯度洗脱，得到4-[5-氨基-4-(乙氧基羰基)-1H-吡唑-1-基]-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯。 

制备例37：4-[5-溴-4-(乙氧基羰基)-1H-吡唑-1-基]-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯

将4-[5-氨基-4-(乙氧基羰基)-1H-吡唑-1-基]-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯(710mg，1.99mmol)溶于乙腈(25mL)中。加入溴化铜(II)(539mg，2.39mmol)，且将反应加热至60℃。滴加叔丁基腈(0.315mL,2.9mmol)，且在65℃下加热该混合物15分钟。将反应冷却至室温，且倾倒入冷的1N盐酸中，用乙酸乙酯(2x)萃取。将合并的有机萃取物用饱和的碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，且经硫酸钠干燥，过滤且在减压下浓缩滤液。通过快速层析纯化粗残余物，用在庚烷中的10%至50%乙酸乙酯梯度洗脱，得到4-[5-溴-4-(乙氧基羰基)-1H-吡唑-1-基]-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯(320mg，38%)。1H NMR(500MHz,氘代氯仿)δppm1.37(t,3H)1.49(s,9H)1.98(d,J=13.42Hz,1H)2.12-2.26(m,1H)2.90(br.s.,2H)4.18(br.s.,1H)4.33(q,J=7.24Hz,2H)4.44-4.70(m,2H)4.85-5.05(m,1H)8.04(s,1H)。 

制备例38∶5-氰基-1-(3-氟哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯

在微波瓶中，将4-[5-溴-4-(乙氧基羰基)-1H-吡唑-1-基]-3氟哌啶-1-羧酸叔丁酯(185mg,0.31mmol)、1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁(18mg，0.032mmol)、锌粉(18mg，0.27mmol)、氰化锌(39.1mg，0.33mmol)和10%钯黑(19.2mg，0.021mmol)在二甲基乙酰胺(3mL)中混合。用氮气使该反应混合物脱气，且在170℃下加热4.5小时。将反应混合物冷却至室温，并且用乙酸乙酯稀释。将反应物过滤穿过 垫，用水稀释滤液和用乙酸乙酯(2x)萃取。将合并的有机萃 取物用水和之后用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且在减压下浓缩滤液。通过快速层析纯化粗残余物，用在庚烷中的10%至100%乙酸乙酯梯度洗脱，得到5-氰基-1-(3-氟哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(80mg，98%)。 

制备例39∶4-[5-氰基-4-(乙氧基羰基)-1H-吡唑-1-基]-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯

将5-氰基-1-(3-氟哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(60mg，0.22mmol)溶于四氢呋喃(3mL)中，加入三乙胺(40uL,0.27mmol)。加入二叔丁基碳酸氢钠(50mg，0.225mmol)，并且在室温下于氮气下搅拌反应3小时。在减压下浓缩反应物，通过快速层析纯化残余物，用在庚烷中的10%至100%乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈油状物的4-[5-氰基-4-(乙氧基羰基)-1H-吡唑-1-基]-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯(52mg,63%)。 

制备例40:1-[1-(叔丁氧基羰基)-3-氟哌啶-4-基]-5-氰基-1H-吡唑-4-羧酸

将4-[5-氰基-4-(乙氧基羰基)-1H-吡唑-1-基]-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯(80mg，0.22mmol)溶于四氢呋喃(2.5mL)、水(1.5mL)和甲醇(0.4mL)中。将溶液冷却至0℃，且加入氢氧化锂一水合物(19mg，0.436mmol)。经2.5小时，使反应慢慢地温热至室温。浓缩反应混合物，将残余物溶于水中，且用乙酸乙酯和甲基叔丁基醚萃取。用水萃取有机层。将合并的水萃取物用1N硫酸氢钠酸化至pH2。用乙酸乙酯(3x)萃取酸性溶液，并且用盐水洗涤萃取物，经硫酸钠干燥，过滤且在减压下浓缩，得到呈白色固体的1-[1-(叔丁氧基羰基)-3-氟哌啶 -4-基]-5-氰基-1H-吡唑-4-羧酸。 

制备例41∶4-[5-氰基-4-(羟基甲基)-1H-吡唑-1-基]-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯

将新的重结晶的(从庚烷中)氰尿酰氯(78mg，0.414mmol)溶于二甲氧基乙烷(2mL)中，并且加入4-甲基-吗啉(0.020mL,0.215mmol)。向该胶质溶液中加入溶于二甲氧基乙烷(2mL)中的1-[1-(叔丁氧基羰基)-3-氟哌啶-4-基]-5-氰基-1H-吡唑-4-羧酸(70mg，0.21mmol)。将反应在60℃下加热3小时。将反应冷却至室温，并且过滤穿过 垫，用二甲氧基乙烷洗涤。将滤液冷却至0℃，并且非常慢地加入硼氢化钠(17mg，0.474mmol)溶于水(0.4mL)中的溶液。一旦加入完成，使反应温热至室温2.5小时。进一步用水稀释反应溶液，并且使用1M硫酸氢钠酸化至pH2.5。用乙酸乙酯(2x)萃取水层，并且将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤且在减压下浓缩滤液。通过快速层析纯化粗残余物，使用在庚烷中的10%至100%乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈油状物的4-[5-氰基-4-(羟基甲基)-1H-吡唑-1-基]-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯(28mg，42%)。 

制备例42∶4-[5-氰基-4-{[(甲基磺酰基)氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯

将4-[5-氰基-4-(羟基甲基)-1H-吡唑-1-基]-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯(28mg，0.086mmol)溶于二氯甲烷(3mL)中。加入三乙胺(0.036mL,0.258mmol)，并且将该混合物冷却至0℃。滴加甲磺酸酸酐(20mg，0.112mmol)，且经2小时慢慢地温热至室温。将二氯甲烷和饱和的碳酸氢钠水溶液加入到反应溶液中，并且分离两相溶液。用二氯甲烷 (2x)萃取水层，将合并的有机萃取物穿过棉花塞。在减压下浓缩滤液，得到呈油状物的4-(5-氰基-4-{[(甲基磺酰基)氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯(33mg，95%)。1H NMR(500MHz,氘代氯仿)δppm1.25-1.30(m,2H)1.50(s,9H)2.01-2.06(m,1H)2.75-2.85(m,2H)3.08(s,3H)4.64-4.74(m,1H)4.79-4.98(m,2H)5.26(s,2H)7.75(s,1H) 

制备例43∶叔丁基-3-氟-4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯的异构体(B和C)

实验细节详细描述在下述方案4中。 

方案4 

步骤A)叔丁基-4-[(三甲基甲硅烷基)氧基]-3,6-二氢吡啶-1-(2H)-羧酸酯

在室温下，经由加料漏斗，向N-叔丁氧基羰基-4-哌啶酮(30.0g，0.15mol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(300mL)中的溶液中连续地加入三甲基甲硅烷基氯(22.9mL,0.18mol)和三乙胺(50.4mL,0.36mol)。将得到的溶液在80℃下加热过夜，然后冷却至室温。用水和庚烷稀释反应混合物。分离层，且用庚烷萃取水层。用水和盐水连续洗涤合并的层，然后经硫酸镁干燥。过滤混合物，并且在减压下浓缩滤液，得到呈黄色油状物的粗产物。通过使其穿过硅胶塞纯化该油状物，用9:1庚烷/乙酸乙酯洗脱，得到呈无色油状物的标题化合物(33.6g，82%)。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ4.78(br s,1H),3.86(br s,2H),3.51(t,2H),2.09(br s,2H),1.45(s,9H),0.18(s,9H)。 

步骤B)叔丁基-3-氟-4-氧代哌啶-1-羧酸酯

在室温下，向叔丁基-4-[(三甲基甲硅烷基)氧基]-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸酯(28.8g，0.11mol)在乙腈(300mL)中加入Selectfluor^TM(41.4g,0.12mol)。将得到的浅黄色悬浮液在室温下搅拌1.5小时。加入饱和的碳酸氢钠水溶液(300mL)和乙酸乙酯(300mL)，分离层。用乙酸乙酯萃取水层两次，将所有的有机层合并且用饱和的碳酸氢钠水溶液和盐水连续洗涤，然后经硫酸镁干燥。过滤该混合物，并且在减压下浓缩滤液，得到呈浅黄色油状物的粗产物。通过重复硅胶柱层析纯化该物质，使用庚烷/乙酸乙酯梯度(2:1至1:1)，得到呈白色固体的标题化合物(15.5g，67%)。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)∶δ4.88(dd,0.5H),4.77(dd,0.5H),4.47(br s,1H),4.17(ddd,1H),3.25(br s,1H),3.23(ddd,1H),2.58(m,1H),2.51(m,1H),1.49(s,9H)。 

可选地，可以如下进行步骤B，分离酮的水合物。在室温下，向叔丁基-4-[(三甲基甲硅烷基)氧基]-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸酯(41.3g，0.15mol)在乙腈(500mL)中的搅拌溶液中加入Selectfluor  ^TM(56.9g,0.16mol)。将得到的浅黄色悬浮液在室温下搅拌4小时10分钟。加入饱和的碳酸氢钠水溶液和乙酸乙酯，分离层。用乙酸乙酯萃取水层两次，将所有的有机层合并且用饱和的碳酸氢钠水溶液和盐水连续洗涤，然后经硫酸镁干燥。过滤该混合物，并且在减压下浓缩滤液，得到呈白色固体的粗叔丁基-3-氟-4-氧代哌啶-1-羧酸酯。将粗叔丁基-3-氟-4-氧代哌啶-1-羧酸酯悬浮在四氢呋喃(120mL)中，并且加入水(120mL)。将得到的溶液在室温下搅拌5.5小时，然后，在减压下浓缩。在高真空下干燥残余物，转移到锥形瓶，且悬浮在二氯甲烷(250mL)中。将得到的悬浮液搅拌5分钟，并且使用烧结玻璃漏斗过滤收集的固体。将得到的滤饼用二氯甲烷(200mL)、二氯甲烷(200mL)和庚烷(100mL)的1:1混合物充分地洗涤。之后，在高真空下干燥固体，得到3-氟-4,4-二羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(26.4g)。1H NMR(500MHz,氘代二甲亚砜)δ1.38(s,9H),1.49-1.52(m,1H),1.63-1.68(m,1H),2.82-3.20(m,2H)3.75(br,1H),3.97(br,1H),4.12(d,J=45,1H),5.92(s,1H),5.97(s,1H)。 

步骤C)(R*)-叔丁基-3-(S)-氟-4-(R)-羟基哌啶-1-羧酸酯的异构体(外消旋的)

向在0摄氏温度下叔丁基-3-氟-4-氧代哌啶-1-羧酸酯(15.5g，71.3mmol)在甲醇(150mL)中的溶液中加入硼氢化钠(3.51g，93.7mmol)。将得到的混合物在0℃下搅拌2小时，然后使其温热至室温。加入饱和的氯化铵水溶液(200mL)，并且用乙酸乙酯萃取该混合物三次。将合并的萃取物用盐水洗涤，且经硫酸镁干燥。过滤该混合物，并且在减压下浓缩滤液，得到粗产物，通过硅胶柱层析纯化，采用庚烷-乙酸乙酯(3:2-1:1)洗脱，得到第一种洗脱产物叔丁基-(3,4-反式)-3-氟-4-羟基哌啶-1-羧酸酯(化合物C，方案4)(3.81g，24%)， 呈浅黄色油状物，其在静置时固化成白色固体。1H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ4.35(ddd,0.5H),4.18(ddd,0.5H),4.15(br s,1H),3.89-3.74(m,2H),2.97(br s,1H),2.93(ddd,1H),2.47(s,1H),2.05-1.92(m,1H),1.58-1.46(m,1H),1.44(s,9H). 

然后，分离呈白色固体的第二种洗脱化合物，叔丁基-(3,4-顺)-3-氟-4-羟基-哌啶-1-羧酸酯(化合物B，方案4)(10.57g，68%)。1H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ4.69-4.65(m,0.5H),4.53-4.49(m,0.5H),3.92-3.86(m,2H),3.69(br s,1H),3.39(br s,1H),3.16(br s,1H),2.13(s,1H),1.88-1.73(m,2H),1.44(s,9H)。 

可选地，可以如下用水合物3-氟-4,4-二羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯开始进行步骤C(步骤2)。 

经30分钟，向在-35℃下3-氟-4,4-二羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(20.0g，85mmol)在四氢呋喃(500mL)的搅拌溶液中滴加 在四氢呋喃（170mL,1M，170mmol）中的溶液。经1.5小时，将反应混合物温热至0℃。用饱和的氯化铵水溶液(150mL)淬灭该反应混合物，并且强力搅拌15分钟。向该0℃的混合物中加入pH7磷酸盐缓冲液(150mL)，接着滴加35%过氧化氢水溶液(150mL)。将得到的混合物搅拌30分钟，并且用乙酸乙酯稀释。分离有机层，且用水、饱和的硫代硫酸钠水溶液和盐水连续洗涤。然后，经无水硫酸镁干燥有机层，过滤且在减压下浓缩滤液，得到粗产物混合物，通过硅胶柱层析[combiflash ISCO330g柱]纯化，使用庚烷-乙酸乙酯(10至60%梯度)洗脱，得到叔丁基-(3,4-顺)-3-氟-4-羟基哌啶-1-羧酸酯(13.9g)。 

步骤D)叔丁基-(3,4-顺)-3-氟-4-羟基-哌啶-1-羧酸酯的对映异构体

经由制备高压液相层析，利用Chiralpak AD-H柱(10×250mm)，分别采用90:10二氧化碳和乙醇的流动相，流速10mL/分钟，将1克外消旋的叔丁基-(3,4-顺)-3-氟-4-羟基-哌啶-1-羧酸酯纯化成其对映异构体。监测分离的波长为210nM。使用分析高压层析，使用Chiralpak AD-H(4.6mm×25cm)柱，等浓度流动相分别为90:10二 氧化碳和乙醇，流速2.5mL/分钟，测定每种对映异构体的分析纯度。监测峰的波长为210nm。获得下述两种异构体∶ 

化合物E，方案4)(3S,4R)-3-氟-4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯，对映异构体1(363mg):R_t=2.67min(100%ee)(在二氯甲烷中的旋光度=+21.2度数)和 

化合物D，方案4)(3R,4S)-3-氟-4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯，对映异构体2(403mg):R_t=2.99min(88%ee). 

通过使用上述对映异构体1制备的5-(6-((3S,4R)-3-氟哌啶-4基氧基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1-甲基-1,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑的(1S)-(+)-樟脑磺酸盐(参见与下述外消旋形式的制备类似的方法)，测定叔丁基-(3,4-顺)-3-氟-4-羟基-哌啶-1-羧酸酯异构体的绝对立体化学。 

5-(6-{[(3,4-顺)-3-氟哌啶-4-基]氧基}-5-甲基嘧啶-4-基)-1-甲基-1,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑(外消旋的)的制备

A.5-(6-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1-甲基-1,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑的制备

在室温下，将1-甲基-1,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑二盐酸盐(2.00g，10.2mmol)和4,6-二氯-5-甲基嘧啶(1.66g，10.2mmol)悬浮在四氢呋喃(51mL)中。向其中加入三乙胺(4.41mL,31.6mmol)，其导致混合物混浊，且导致褐色固体粘着烧瓶壁。在室温下，搅拌该混合物4小时，然后在50℃下再加热19小时。将反应混合物冷却至室温，并且用水(100mL)稀释。用乙酸乙酯(3×100mL)萃取该混合物。将有机提取物合并，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥和过滤。在真空下，将滤液干燥，得到呈浅褐色固体的标题化合物(1.95g，78%)其用于下一步中而无需进一步纯化。 

¹H NMR(500MHz,氘代氯仿)δ2.54(s,3H)3.88(s,3H)4.90(app.d,J=3.66Hz,4H)7.28(s,1H)8.29(s,1H)。 

B.(3,4-顺)-3-氟-4-{[5-甲基-6-(1-甲基-4,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(1H)-基)嘧啶-4-基]氧基}哌啶-1-羧酸叔丁酯(外消旋的)的制备

将(3,4-顺)-3-氟-4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.67g，7.62mmol)和上述制备的5-(6-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1-甲基-1,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑(900mg，3.60mmol)的混合物溶于1,4-二噁烷(20mL)中，并且加热至105℃。在加热10分钟之后，所有的物质都开始溶解，向该混合物中快速加入双(三甲基甲硅烷基)酰胺钠(4.3mL,4.3mmol,在甲苯中1M)，得到浑浊的黄色混合物，然后，在105℃下搅拌2小时。之后，将反应冷却至室温，并通过加入水和饱和的碳酸氢钠水溶液的 等体积混合物淬灭。用乙酸乙酯(3×15mL)萃取该混合物。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，且过滤。在真空下浓缩滤液，得到黄色残余物，通过硅胶柱层析纯化，用在庚烷中的60至100%乙酸乙酯洗脱。分离呈白色固体的标题化合物和起始5-(6-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1-甲基-1,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑的混合物(1.20g)，将其用于后续反应中而没有进一步纯化。 

通过HPLC纯化一批来自在相同条件下进行的单独反应的粗(3,4-顺)-3-氟-4-{[5-甲基-6-(1-甲基-4,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(1H)-基)嘧啶-4-基]氧基}哌啶-1-羧酸叔丁酯。将粗样品(9.5mg)溶于二甲亚砜(1mL)中，并且通过在Waters XBridge C₁₈19×100mm，0.005mm柱上的制备反相HPLC纯化，在8.5分钟内采用80%水/乙腈(0.03%氢氧化铵调节剂)至0%水/乙腈的线性梯度洗脱，接着在1.5分钟期间采用0%水/乙腈洗脱；流速25mL/分钟。如此得到标题化合物(5mg)。分析LCMS∶保留时间2.81分钟Waters XBridge C₁₈4.6×50mm，0.005mm柱；经4.0分钟，90%水/乙腈线性梯度至5%水/乙腈，接着在1分钟期间5%水/乙腈；0.03%氢氧化铵调节剂；流速∶2.0mL/分钟)；LCMS(ES+)433.2(M+1)。 

C.5-(6-{[(3,4-顺)-3-氟哌啶-4-基]氧基}-5-甲基嘧啶-4-基)-1-甲基-1,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑(外消旋的)的制备

将上述制备的粗(3,4-顺)-3-氟-4-{[5-甲基-6-(1-甲基-4,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(1H)-基)嘧啶-4-基]氧基}哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.20g)溶于二氯甲烷(12mL)中，并且向该溶液中加入三氟乙酸(5mL)。将该反应物在室温下搅拌1小时。在真空下除去溶剂，并且将残余物溶于水(50mL)和1N盐酸水溶液(10mL)中。用二氯甲烷(10×30mL)萃取该混合物。然后，通过加入1N氢氧化钠水溶液(20mL)使水层达到pH12，并且用二氯甲烷(40mL)萃取三次。将合并的有机萃取物用 盐水洗涤，经硫酸钠干燥和过滤。在减压下浓缩滤液，得到呈白色固体的5-(6-{[(3,4-顺)-3-氟哌啶-4-基]氧基}-5-甲基嘧啶-4-基)-1-甲基-1,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑(0.72g，经2步骤60%)，使用其而无需另外的纯化。 

¹H NMR(500MHz,氘代氯仿)δ1.84-2.08(m,2H)2.33(s,3H)2.69-2.84(m,1H)2.83-3.01(m,1H)3.16(d,J=13.66Hz,1H)3.27-3.44(m,1H)3.86(s,3H)4.78-4.91(m,1H)4.86(d,J=1.95Hz,2H)4.88(d,J=1.95Hz,2H)5.21-5.32(m,1H)7.26(s,1H)8.18(s,1H);LCMS(ES+)333.4(M+1). 

请注意∶实施例编号从11开始。 

实施例11：4-{5-氰基-4-[(2，4-二氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸异丙酯

将4-(5-氰基-4-((甲基磺酰基氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯(制备例10)(166.5mg，0.449mmol)、2,4-二氟苯酚(0.052mL，0.539mmol)和碳酸铯(293mg，0.898mmol)置于微波瓶中，溶于乙腈(3mL)，并且在微波反应器中在110℃下加热20分钟。将混合物冷却至室温，且在真空下浓缩，用1N氢氧化钠溶液稀释，并且用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，且在真空下浓缩滤液。再Waters Atlantis C₁₈柱4.6×50mm，0.005mm上通过制备反相HPLC纯化粗物质，用在乙腈中水的梯度洗脱(0.05％三氟乙酸调节剂)，得到4-{5-氰基-4-[(2,4-二氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸异丙酯。分析LCMS：保留时间：3.62分钟(Waters Atlantis C₁₈4.6×50mm，0.005mm；4.0分钟期间从95％ 水/乙腈线性变化至5％水/乙腈；0.05％三氟乙酸调节剂；流速2.0mL/分钟)；LCMS(ES+):405.18(M+H)。 

实施例12：4-{5-氰基-4-[(2-甲基苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸异丙酯

向邻-甲酚(21mg，0.19mmol)和4-(5-氰基-4-((甲基磺酰基氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯(制备例10)(60mg，0.16mmol)在乙腈(1.6mL)中的搅拌溶液中加入碳酸铯(106mg，0.32mmol)。将混合物加热回流15小时。在冷却至室温之后，将粗物质在真空中浓缩至干燥，将残余物收集在水中，且用乙酸乙酯萃取三次(每次萃取各20mL)。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且在真空下将滤液浓缩至干燥，得到棕黄色残余物(0.065g，100％)。将粗样品溶于二甲亚砜(1mL)中，并且通过制备反相HPLC于Waters SunfireC₁₈19×100mm，0.005mm柱上纯化，通过在8.5分钟期间80％水/乙腈至0％水/乙腈的线性梯度，接着在0％水/乙腈(0.05％三氟乙酸调节剂)1.5分钟洗脱；流速：25mL/分钟。分析LCMS：保留时间3.82分钟(Waters Atlantis C₁₈4.6×50mm，0.005mm柱；在4.0分钟期间95％水/乙腈线性变化至5％水/乙腈，接着在5％水/乙腈下1分钟；0.05％三氟乙酸调节剂；流速：2.0mL/分钟)；LCMS(ES+)383.2(M+1)。 

实施例13：4-{5-氰基-4-[(2,5-二氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸1-甲基环丙基酯

A)4-(5-氰基-4-((2,5-二氟苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

向2,5-二氟苯酚(54mg，0.39mmol)和4-(5-氰基-4-((甲基磺酰基氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例16)(126mg，0.33mmol)在3mL乙腈中的搅拌溶液中加入碳酸铯(214mg，0.66mmol)。该混合物加热回流15小时。将该混合物冷却至室温，并且用乙酸乙酯和水稀释。分离层，并且用乙酸乙酯萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，且在真空中浓缩滤液，得到4-(5-氰基-4-((2,5-二氟苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，其用于下一步而无需纯化。 

B)4-((2,5-二氟苯氧基)甲基)-1-(哌啶-4-基)-1H-吡唑-5-腈

向4-(5-氰基-4-((2,5-二氟苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(137mg，0.33mmol)在5mL的二氯甲烷中的溶液中加入0.82mL的盐酸(在1,4-二噁烷中4M)。该混合物在室温搅拌2小时，之后在真空中浓缩该混合物，得到4-((2,5-二氟苯氧基)甲基)-1-(哌啶-4-基)-1H-吡唑-5-腈，其用于下一步而无需纯化。 

C)4-{5-氰基-4-[(2,5-二氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯

在室温下，向4-((2,5-二氟苯氧基)甲基)-1-(哌啶-4-基)-1H-吡唑-5-腈(104mg，0.33mmol)在3.3mL的二氯甲烷中的搅拌溶液中加入三乙胺(0.18mL，1.3mmol)，接着加入4-硝基苯基碳酸1-甲基环丙基酯(参见制备例26和WO09105717)(171mg，0.72mmol)。将得到的亮黄色混合物在氮气氛围下搅拌15小时。将反应混合物用二氯甲烷及水稀释。分离层，并且用二氯甲烷萃取水相。将合并的有机相用饱和碳酸 氢钠水溶液、盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤且在真空中浓缩滤液，得到225mg的粗物质。将一部分(45mg)该物质溶于二甲亚砜(0.9mL)中，且通过制备反相HPLC在Waters XBridge C₁₈柱19×100mm，0.005柱上纯化，用在乙腈中的水的梯度洗脱(0.03％氢氧化铵调节剂)。分析LCMS：保留时间3.60分钟(Atlantis C₁₈4.6×50mm，5微米柱；在4分钟期间从95％水/乙腈线性变化至5％水/乙腈；0.05％三氟乙酸调节剂；流速2.0毫升/分钟；LCMS(ES+):417.1(M+H)。 

实施例14：4-{5-氰基-4-[(2,3-二氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸1-甲基环丙基酯

使用市售2,3-二氟苯酚，按照类似于实施例13的方法，制备标题化合物。将粗物质(49mg)溶于二甲亚砜(0.9mL)，且通过制备反相HPLC于Waters XBridge C₁₈柱19×100mm，0.005柱上纯化，用在乙腈中的水的梯度洗脱(0.03％氢氧化铵调节剂)。分析LCMS：保留时间3.62分钟(Atlantis C₁₈4.6×50mm，5微米柱；在4分钟期间从95％水/乙腈线性变化至5％水/乙腈；0.05％三氟乙酸调节剂；流速2.0mL/分钟；LCMS(ES+):417.2(M+H)。 

实施例15：4-{4-[(4-氨基甲酰基-2-氟苯氧基)甲基]-5-氰基-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸1-甲基环丙基酯

A)4-(4-((4-氨基甲酰基-2-氟苯氧基)甲基)-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

向4-(5-氰基-4-(羟基甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例15)(200mg，0.65mmol)、3-氟-4-羟基苯甲酰胺(制备例23)(100mg，0.64mmol)和三苯基膦(188mg，0.72mmol)在3mL的1,4-二噁烷中的搅拌溶液中滴加偶氮基二羧酸二乙酯(0.11mL，0.69mmol)。将得到的混合物在室温下搅拌过夜，之后在真空中浓缩该混合物。通过快速层析纯化残余物，用在庚烷中的30至70％乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈白色固体的4-(4-((4-氨基甲酰基-2-氟苯氧基)甲基)-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(215mg)。 

B)4-((5-氰基-1-(哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)甲氧基)-3-氟苯甲酰胺

在室温下，向4-(4-((4-氨基甲酰基-2-氟苯氧基)甲基)-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(215mg，0.48mmol)在2mL的二氯甲烷中的搅拌溶液中加入1mL的三氟乙酸。在1小时之后，在真空中浓缩溶液。通过快速层析纯化残余物，用1至15％甲醇在含有2％氨水溶液的二氯甲烷中的梯度混合物洗脱，得到呈白色固体的4-((5-氰基-1-(哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)甲氧基)-3-氟苯甲酰胺(150mg)。 

C)4-{4-[(4-氨基甲酰基-2-氟苯氧基)甲基]-5-氰基-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯

在室温下，向4-((5-氰基-1-(哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)甲氧 基)-3-氟苯甲酰胺(40mg，0.12mmol)在1mL的二氯甲烷中的搅拌溶液中加入三乙胺(0.036mL，0.26mmol)，接着加入4-硝基苯基碳酸1-甲基环丙基酯(制备例26和WO09105717)(60mg，0.26mmol)。将得到的亮黄色混合物在氮气氛下在65℃下搅拌2小时。将反应冷却至室温，用水稀释且用二氯甲烷萃取两次。将合并的有机萃取物用饱和碳酸氢钠洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且在真空中浓缩滤液。通过快速层析纯化残余物，用在庚烷中的40至90％梯度乙酸乙酯溶液洗脱，得到呈白色固体的4-{4-[(4-氨基甲酰基-2-氟苯氧基)甲基]-5-氰基-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯(34mg)。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ0.59-0.67(m,2H),0.83-0.92(m,2H),1.54(s,3H),2.02(d,J=4.10Hz,2H),2.04-2.22(m,2H),2.91(br.s.,2H),4.11-4.43(m,2H),4.44-4.55(m,1H),5.15(s,2H),7.03-7.10(m,1H),7.52-7.62(m,2H),7.68(s,1H)1H NMR显示，存在低于10％的据信为相应氨基甲酸异丙酯衍生物的物质(来自污染4-硝基苯基碳酸1-甲基环丙基酯的4-硝基苯基碳酸异丙酯)。LCMS(ES)442.4(M+1)。 

实施例 16 4-{4-[(4-氨基甲酰基苯氧基)甲基]-5-氰基-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯

使用市售可获得的4-羟基苯甲酰胺，按照类似于实施例15的方法制备标题化合物。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ0.57-0.67(m,2H),0.84-0.91(m,2H),1.56(s,3H),1.93-2.05(m,2H),2.05-2.19(m,2H),2.91(t,J=15.62Hz,2H),4.26(br.s., 2H),4.44-4.55(m,1H),5.09(s,2H),6.96-7.04(m,2H),7.66(s,1H),7.75-7.82(m,2H)。¹H NMR显示，存在低于10％的据信为相应氨基甲酸异丙酯衍生物的物质(来自污染4-硝基苯基碳酸1-甲基环丙基酯的4-硝基苯基碳酸异丙酯)。LCMS(ES)424.4(M+1)。 

实施例17：4-(5-氰基-4-((4-氰基苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯

使用市售可获得的4-羟基苯甲腈，按照类似实施例15的方法制备标题化合物。通过快速层析进行粗反应混合物的纯化，用乙酸乙酯在庚烷中的梯度混合物洗脱(0至100％乙酸乙酯)。1H NMR(500MHz,氘代氯仿)δ0.60-0.70(m,2H),0.84-0.94(m,2H),1.23-1.31(m,1H),1.56(s,3H),2.01-2.15(m,4H),2.93(m,2H),4.11-4.37(m,1H),4.49-4.55(m,1H),5.10(s,2H),7.03(d,J=8.78Hz,2H),7.63(d,J=8.78Hz,2H),7.67(s,1H)。 

实施例18：4-(4-((4-(1H-吡唑-1-基)苯氧基)甲基)-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯

按照类似实施例12的方法，使用4-(1H-吡唑-1-基)苯酚(WO2003072547)制备标题化合物。通过快速层析进行粗反应混合物的纯化，用乙酸乙酯在庚烷中的梯度混合物洗脱(0至100％乙酸乙酯)。1H NMR(500MHz,氘代氯仿)δ1.28(d,J=6.34Hz,6H),2.01-2.09(m,2H),2.17(m,2H),2.91–2.99(m,2H),4.37(m,2H),4.50-4.58(m,1H),4.93-4.98(m,1H),5.11(s,2H),6.47(t,J=2.07Hz,1H),7.07(d,J=9.03Hz,2H),7.64(d,J=9.03Hz,2H),7.70(s,1H),7.72(d,J=1.71Hz,1H),7.86(d,J=2.44Hz,1H).LCMS(ES)435.4(M+1)。 

实施例例19：4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(1H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙基酯和4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(2H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙基酯

A)4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯和4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯

向4-(5-氰基-4-(羟基甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯(94mg，0.322mmol)、2-氟-4-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-四唑-5-基)苯酚和2-氟-4-(2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2H-四唑-5-基)苯酚(制备例17)(100mg，0.322mmol)和三苯基膦(110mg，0.42mmol)在5mL的1,4-二噁烷中的搅拌溶液中滴加偶氮基二甲酸二乙酯(0.060mL，0.39mmol)。将得到的混合物在室温下搅拌过夜，之后在真空中浓缩该混合物。通过快速层析纯化残余物，用在庚烷中的10至40％梯度乙酸乙酯溶液洗脱，得到4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙基酯和4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙基酯(140mg，产率74%)。 

4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1羧酸异丙基酯。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ-0.05-0.01(m,9H),0.90-1.00(m,2H),1.18-1.27(m,6H),2.02(br.s.,2H),2.13(m,2H)2.93(br.s.,2H),3.65-3.78(m,2H),4.30(d,J=7.22Hz,2H),4.46-4.58(m,1H),4.86-4.98(m,1H),5.16(s,2H),5.89(s,2H),7.09-7.18(m,1H),7.69(s,1H),7.88-7.96(m,2H).LCMS(ES)585.1(M+1)。 

B)4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(1H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯和4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(2H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯

将4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯和4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯 (220mg,0.38mmol)溶于乙醇(3mL)中，并且滴加2M盐酸水溶液(3mL)。将得到的混合物在50℃下搅拌4小时，之后冷却至室温并过滤。将得到的白色固体用乙酸乙酯和庚烷(1/1体积)洗涤，且在减压下干燥，得到标题化合物(80mg，产率47％)。¹H NMR(400MHz,氘代二甲亚砜)δ1.16(d,J=6.25Hz,6H),1.76-1.90(m,2H),1.98(dd,J=14.45,3.12Hz,2H),2.99(br.s.,2H),4.04(d,J=15.81Hz,2H),4.59-4.71(m,1H),4.70-4.82(m,1H),5.27(s,2H),7.47-7.57(m,1H),7.80-7.83(m,1H),7.83-7.87(m,1H),7.90(s,1H).LCMS(ES)455.0(M+1)。 

实施例20：4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯和

实施例21：4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(2-甲基-2H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯

在室温下，向4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(1H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯和4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(2H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯(70mg,0.15mmol)在四氢呋喃(2mL)中的溶液中分两批加入氢化钠(14mg，0.31mmol)，并且将得到的混合物搅拌5分钟。然后，加入碘代甲烷(0.03mL，0.46mmol)，且在室温再搅拌反应混合物16小时。通过加入水淬灭反应，并且用乙酸乙酯稀释该混合物。分离有机相，用乙酸乙酯萃取水相两次。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经硫酸 镁干燥，过滤且在真空中浓缩滤液。通过快速硅胶层析纯化残余物，用乙酸乙酯在庚烷中的梯度混合物洗脱(30至60％乙酸乙酯)，得到4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯(10mg，产率14%)和4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(2-甲基-2H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯(30mg，产率42%)。 

4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯(实施例20)。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ1.18-1.28(m,6H),1.95-2.06(m,2H),2.13(m,2H),2.85-3.02(m,2H),4.17(s,3H),4.36(d,J=10.15Hz,2H),4.46-4.57(m,1H)4.92(spt,1H),5.19(s,2H),7.17-7.24(m,1H),7.48-7.58(m,2H),7.70(s,1H).LCMS(ES)469.0(M+1)。 

4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(2-甲基-2H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯(实施例21)。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ1.24(d,J=6.25Hz,6H)1.95-2.05(m,2H)2.13(m,2H)2.93(t,J=12.59Hz,2H)4.31(br.s.,2H)4.37(s,3H)4.51(m,1H)4.92(m,1H)5.16(s,2H)7.09-7.16(m,1H)7.69(s,1H)7.83-7.87(m,1H)7.87-7.90(m,1H).LCMS(ES)469.0(M+1)。 

实施例224-(5-氰基-4-((2-氟-4-(2-(2-羟基乙基)-2H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯

A)4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(2-(2-(三甲基甲硅烷氧基)乙基)-2H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯

向4-(5-氰基-4-(羟基甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯(制备例5)(78mg，0.266mmol)、2-氟-4-(2-(2-(三甲基甲硅烷基氧基)乙基)-2H-四唑-5-基)苯酚(制备例19)(90mg，0.27mmol)和三苯基膦(77mg，0.29mmol)在5mL的1,4-二噁烷中的搅拌溶液中滴加偶氮基二甲酸二乙酯(0.046mL，0.28mmol)。将得到的混合物在室温下搅拌15小时，之后将该混合物真空浓缩。通过快速层析纯化残余物，用在庚烷中的5至40％的乙酸乙酯溶液梯度洗脱，得到4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(2-(2-(三甲基甲硅烷氧基)乙基)-2H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯(140mg，产率86%)。 

B)4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(2-(2-羟基乙基)-2H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯

将4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(2-(2-(三甲基甲硅烷氧基)乙基)-2H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯(140mg,0.228mmol)溶于甲醇(2mL)中，滴加4M盐酸(1mL)在1,4-二噁烷中的溶液。将得到的混合物在室温下搅拌2小时，之后在减压下浓缩。将残余物(160mg)分成数份，通过反相HPLC纯化50mg粗物质，得到标题化合物(30mg，26％)(柱：Waters XBridge C₁₈19×100，5微米；流动相A：在水中的0.03％氢氧化铵(v/v)；流动相B：在乙腈中的0.03％氢氧化铵(v/v)；梯度：在8.5分钟期间85％水/15％乙腈线性至0％水/100％乙腈，在0％水/100％乙腈下保持至10.0分钟。流速：25mL/min。检测：215nm.LCMS(ES+):499.5(M+1)。 

实施例23：4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(1-(2-羟基乙基)-1H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯

A)4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(1-(2-(三甲基甲硅烷氧基)乙基)-1H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯

向4-(5-氰基-4-(羟基甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯(43mg，0.15mmol)、2-氟-4-(1-(2-(三甲基甲硅烷基氧基)乙基)-1H-四唑-5-基)苯酚(制备例20)(50mg，0.15mmol)和三苯基膦(43mg，0.16mmol)在3mL的1,4-二噁烷中的搅拌溶液中滴加偶氮基二羧酸二乙酯(0.025mL，0.16mmol)。将得到的混合物在室温下搅拌过夜，之后在真空中浓缩该混合物。通过快速层析纯化残余物，用在庚烷中的30至70％的乙酸乙酯梯度洗脱，得到4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(1-(2-(三甲基甲硅烷氧基)乙基)-1H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯(50mg，产率55%)。 

B)4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(1-(2-羟基乙基)-1H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯

将4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(1-(2-(三甲基甲硅烷氧基)乙基)-1H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯(50mg,0.082mmol)溶于甲醇(2mL)中，滴加4M盐酸(1mL)在1,4-二噁烷中的溶液。将得到的混合物在室温下搅拌2小时，之后于减压下浓缩。通过反相HPLC纯化残余物(60mg)，得到标题化合物(20mg，产率49％)(柱：Waters XBridge C₁₈19×100，5微米；流动相A：在水中的0.03％氢氧化铵(v/v)；流动相B：在乙腈中的0.03％氢氧化铵(v/v)；梯度：在8.5分钟期间从80％水/20％乙腈线性至0％水/100％乙腈，在0％水/100％乙腈下保持至10.0分钟。流速：25mL/min。检测：215nm。 

LCMS(ES+):499.4(M+1)。 

实施例24：4-(5-氰基-4-{[2-氟-4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯

使用2-氟-4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯酚(制备例21)，按照类似实施例15的方法制备标题化合物。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ0.58-0.67(m,2H),0.83-0.92(m,2H),1.57(s,3H),1.94-2.05(m,2H),2.05-2.21(m,2H),2.92(t,J=12.98Hz,2H),4.17(s,3H),4.32(br.s.,2H),4.43-4.56(m,1H),5.19(s,2H),7.17-7.24(m,1H),7.48-7.58(m,2H),7.70(s,1H)。1H NMR显示，存在低于10％的据信为相应氨基甲酸异丙酯衍生物的物质(来自污染4-硝基苯基碳酸1-甲基环丙基酯的4-硝基苯基碳酸异丙酯)。LCMS(ES)481.6(M+1)。 

实施例25：4-(5-氰基-4-{[4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯

使用4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯酚(制备例22)，按照类似实施例15的方法制备标题化合物。 

¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ0.60-0.67(m,2H),0.83-0.91 (m,2H),1.58(s,3H),1.96-2.06(m,2H),2.06-2.21(m,2H),2.84-3.00(m,2H),4.16(s,3H),4.33(br.s.,2H),4.45-4.57(m,1H),5.12(s,2H),7.10-7.15(m,2H),7.68(s,1H),7.69-7.74(m,2H)。1H NMR显示，存在低于10％的据信为相应氨基甲酸异丙酯衍生物的物质(来自污染4-硝基苯基碳酸1-甲基环丙基酯的4-硝基苯基碳酸异丙酯)。LCMS(ES)463.5(M+1)。 

实施例26：4-(4-((4-氨基甲酰基-3-氟苯氧基)甲基)-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯

使用2-氟-4-羟基苯甲酰胺(制备例24)，按照类似于实施例13的方法制备标题化合物。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ0.57-0.65(m,2H),0.82-0.89(m,2H),1.53(s,3H),1.92-2.04(m,2H),2.10(qd,J=12.14,4.20Hz,2H),2.90(br.s.,2H),4.32(br.s.,2H),4.49(tt,J=11.25,4.37Hz,1H),5.02-5.09(m,2H),6.00(br.s.,1H),6.51-6.64(m,1H),6.69(dd,J=13.66,2.54Hz,1H),6.84(dd,J=8.78,2.54Hz,1H),7.64(s,1H),8.07(t,J=9.08Hz,1H)。1H NMR显示，存在低于10％的据信为相应氨基甲酸异丙酯衍生物的物质(来自污染4-硝基苯基碳酸1-甲基环丙基酯的4-硝基苯基碳酸异丙酯)。LCMS(ES)442.4(M+1)。 

实施例27：4-(5-氰基-4-{1-[2-氟-4-(甲基磺酰基)苯氧基]乙基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯

使用2-氟-4-(甲基磺酰基)苯酚和4-(5-氰基-4-(1-羟基乙基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯(制备例25)，按照类似实施例15的方法制备标题化合物。通过反相HPLC纯化样品(柱：Waters XBridgeC₁₈19×100，5微米；流动相A：在水中的0.03％氢氧化铵(v/v)；流动相B：在乙腈中的0.03％氢氧化铵(v/v)；梯度：在8.5分钟期间从80％水/20％乙腈线性至0％水/100％乙腈，在0％水/100％乙腈下保持至10.0分钟。流速：25mL/分钟。LCMS(ES+):479.2M+1)。 

实施例28：4-(5-氰基-4-{1-[(2-甲基吡啶-3-基)氧基]乙基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯

使用2-甲基吡啶-3醇和4-(5-氰基-4-(1-羟基乙基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯(制备例25)，按照类似实施例15的方法制备标题化合物。通过反相HPLC纯化样品(柱：Waters XBridgeC₁₈19×100，5微米；流动相A：在水中的0.03％氢氧化铵(v/v)；流动相B：在乙腈中的0.03％氢氧化铵(v/v)；梯度：在8.5分钟期间从85％水/15％乙腈线性至0％水/100％乙腈，在0％水/100％乙腈下保持至10.0分钟。流速：25mL/分钟。LCMS(ES+):398.2M+1)。 

实施例 29 4-(5-氰基-4-{2-[2-氟-4-(甲基磺酰基)苯基]丙基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯

A)4-(5-氰基-4-乙烯基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯

在-78℃下，向溴化(甲基)三苯基鏻(323mg，0.88mmol)在四氢呋喃(5mL)中的搅拌混合物中滴加正丁基锂(0.360mL，0.89mmol，2.5M，在己烷中)。将得到的黄色混合物在-78℃下搅拌30分钟，然后，加入4-(5-氰基-4-甲酰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯(实施例9，步骤A)(171mg，0.59mmol)在四氢呋喃(2.5mL)中的溶液。移除冷浴，将反应混合物在室温下搅拌3.75小时。用饱和氯化铵水溶液淬灭反应，用乙酸乙酯萃取混合物两次。将合并的萃取物依次用水及盐水洗涤，然后经硫酸钠干燥。过滤混合物，并且将滤液在真空中浓缩。通过硅胶层析纯化残余物，用乙酸乙酯在庚烷中的梯度混合物(10至100％)洗脱，得到呈澄清油状物的标题化合物(116mg，68％)。¹H NMR(500MHz,氘代氯仿)δ0.88(d,J=6.10Hz,6H),1.55-1.67(m,2H),1.68-1.84(m,2H),2.43-2.73(m,2H),3.95(br.s.,2H),4.04-4.21(m,1H)4.44-4.67(m,1H),5.02(d,J=11.22Hz,1H),5.43(d,J=17.81Hz,1H),6.20(dd,J=17.81,11.22Hz,1H),7.27(s,1H)。 

B)(E,Z)-4-(5-氰基-4-(2-(2-氟-4-(甲基磺酰基)苯基)丙-1-烯基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯

向4-(5-氰基-4-乙烯基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯(116mg，0.4mmol)和2-氟-4-(甲基磺酰基)-1-(丙-1-烯-2-基)苯(制备例29)(43mg，0.20mmol)在无水二氯甲烷(2mL)中的溶液中加入第二代Hoveyda-Grubbs催化剂(从Aldrich市售可获得)(12.5mg，0.020mmol)。将绿色溶液在40℃下加热72小时，定期加入二氯甲烷。 该物质在减压下浓缩，通过硅胶层析纯化(10至100％乙酸乙酯，在庚烷中)残余物，得到呈不纯油状物的产物(8mg，8％)。该物质照原样使用。LCMS(APCI):473.2(M–1)。 

C)4-(5-氰基-4-{2-[2-氟-4-(甲基磺酰基)苯基]丙基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯

在“全氢”设定下，使用10％钯碳柱筒以1mL/分钟的流速将(E,Z)-4-(5-氰基-4-(2-(2-氟-4-(甲基磺酰基)-苯基)丙-1-烯基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯(8mg，0.02mmol)在乙酸乙酯(3mL)中的溶液在H-Cube^TM上氢化。在真空中浓缩该物质，通过反相HPLC纯化残余物(4mg)(柱：Waters XBridge C₁₈19×100，5微米；流动相A：在水中的0.03％氢氧化铵(v/v)；流动相B：在乙腈中的0.03％氢氧化铵(v/v)；梯度：在8.5分钟期间从80％水/20％乙腈线性至0％水/100％乙腈，在0％水/100％乙腈下保持至10.0分钟。流速：25mL/分钟)，得到标题化合物(1.9mg，23％)：LCMS(ES+):477.2(M+1)。 

实施例30：4-(5-氰基-4-{[(2-甲基吡啶-3-基)氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯

使用2-甲基吡啶-3-醇，按照类似实施例13的方法制备标题化合物。通过快速层析纯化粗物质，用乙酸乙酯在庚烷中的梯度混合物洗脱(60至100％乙酸乙酯)，得到77mg呈白色固体的标题化合物。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δ0.60-0.66(m,2H),0.83-0.90(m,2H),1.55(s,3H),1.96-2.05(m,2H),2.05-2.20(m,2H),2.49(s,3H),2.84-2.98(m,2H),4.11-4.42(m,2H),4.46-4.55(m,1H),5.04(s,2H),7.06-7.16(m,2H),7.65(s,1H),8.12(dd, J=4.49,1.56Hz,1H)。 

实施例 31 4-{5-氰基-4-[(2,3,6-三氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯

A)4-(5-氰基-4-((2,3,6-三氟苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

将4-(5-氰基-4-((甲基磺酰基氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例16)(87.8mg，0.228mmol)、2,3,6-三氟苯酚(51.7mg，0.342mmol)和碳酸铯(149mg，0.456mmol)置于微波瓶中，且溶于乙腈(3mL)中。将瓶在微波反应器中在110℃下加热20分钟。在减压下浓缩该混合物，将残余物溶于1N氢氧化钠溶液(5mL)，并且用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，且在减压下浓缩滤液。粗制物通过层析纯化，用在庚烷中的0至30％乙酸乙酯梯度洗脱，得到36.2mg呈澄清油状物的4-(5-氰基-4-((2,3,6-三氟苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯。 

B) 4-{5-氰基-4-[(2,3,6-三氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯

使用市售可获得的2,3,6-三氟苯酚，按照类似实施例13(B和C)的方法制备4-{5-氰基-4-[(2,3,6-三氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯。将粗物质(17.1mg)通过制备反相HPLC于Sepax2-乙基吡啶柱250×21.2mm，0.005上纯化，用在庚烷中的乙醇梯度洗脱。分析LCMS：保留时间11.769分钟(Phenomenex Luna(2)C₁₈ 150×3.0mm，5微米柱；在12.5分钟期间从95％水/甲醇线性变化至100％甲醇；0.1％甲酸调节剂；流速0.75mL/分钟；LCMS(ES+):456.9(M+Na).¹H NMR(500MHz,氘代氯仿)δ0.64-0.66(m,2H),0.88–0.91(m,2H),1.57(s,3H),2.00(d,J=10.49Hz,2H),2.07-2.18(m,2H),2.91–2.95(m,2H),4.18(br.s.,1H),4.36(br.s.,1H),4.50(tt,J=11.34,4.15Hz,1H),5.19(s,2H),6.83-6.90(m,2H),7.67(s,1H)。 

实施例32：4-{5-氰基-4-[(2,3,6-三氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸异丙酯

使用市售可获得的2,3,6-三氟苯酚，按照类似实施例11的方法制备标题化合物。通过柱层析纯化粗物质，用在庚烷中的0至25％乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈澄清油状物的4-{5-氰基-4-[(2,3,6-三氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸异丙酯。¹H NMR(500MHz,氘代氯仿)δ1.26(d,J=6.10Hz,6H),2.01(d,J=11.22Hz,2H)2.13(qd,J=12.28,4.64Hz,2H),2.88-3.01(m,2H),4.32(br.s.,2H)4.51(tt,J=11.34,4.15Hz,1H),4.90-4.98(m,1H),5.18(s,2H),6.82-6.92(m,2H),7.67(s,1H);LCMS(ES+):423.4(M+H)。 

实施例33：4-(5-氰基-4-{[2-氟-4-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯

照类似实施例11的方法，从2-氟-4-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)苯酚(制备例28)和4-(5-氰基-4-((甲基磺酰基氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯(制备例10)制备标题化合物。通过制备反相HPLC于Sepax Silica250×21.2mm，0.005mm上纯化粗物质，用在庚烷中的乙醇梯度洗脱。分析LCMS：保留时间8.598分钟(PhenomenexLuna(2)C₁₈150×3.0mm，5微米柱；在12.5分钟期间从95％水/甲醇线性变化至100％甲醇；0.1％甲酸调节剂；流速0.75mL/分钟；LCMS(ES+):467.0(M+H).¹H NMR(500MHz,氘代氯仿)δ1.27(d,J=6.10Hz,6H),1.97-2.09(m,2H),2.16(m,2H),2.93-2.98(m,2H),3.76(s,3H)4.25–4.43(m,2H),4.50–4.57(m,1H),4.91-4.99(m,1H),5.17(s,2H),6.97(s,1H),7.11(s,1H),7.12-7.15(m,1H),7.42(dd,J=11.71,1.95Hz,1H),7.38-7.44(m,1H),7.72(s,1H)。 

实施例34：4-(5-氰基-4-{[2-氟-4-(1-甲基-1H-咪唑-5-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯

照类似实施例11的方法，从2-氟-4-(1-甲基-1H-咪唑-5-基)苯酚(制备例27)和4-(5-氰基-4-((甲基磺酰基氧基)甲基)-1H-吡唑-1- 基)哌啶-1-羧酸异丙酯(制备例10)制备标题化合物。通过制备反相HPLC于Sepax Silica250×21.2mm，0.005mm上纯化粗物质，用在庚烷中的乙醇梯度洗脱。分析LCMS：保留时间8.797分钟(Phenomenex Luna(2)C₁₈150×3.0mm，5微米柱；在12.5分钟期间从95％水/甲醇线性变化至100％甲醇；0.1％甲酸调节剂；流速0.75mL/分钟；LCMS(ES+):467.0(M+H).¹H NMR(500MHz,氘代氯仿)δ1.27(d,J=6.34Hz,6H),2.03(d,J=11.22Hz,2H),2.11-2.20(m,2H),2.95(br.s.,2H),3.66(s,3H),4.34(br.s.,2H),4.50-4.57(m,1H),4.94(dt,J=12.44,6.22Hz,1H),5.15(s,2H),7.07(s,1H),7.10-7.17(m,3H),7.51(s,1H),7.71(s,1H)。 

实施例35∶4-[5-氰基-4-({[2-甲基-6-(1H-1,2,4-三唑-1-基)吡啶-3-基]氧基}甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸异丙酯

使用2-甲基-6-(1H-1,2,4-三唑-1-基)吡啶-3-醇，按照类似实施例12的方法制备标题化合物。通过反相HPLC纯化样品(柱：Waters XBridge C₁₈19×100，5微米；流动相A：在水中的0.03％氢氧化铵(v/v)；流动相B：在乙腈中的0.03％氢氧化铵(v/v)；梯度：在8.0分钟期间从80％水/20％乙腈线性至0％水/100％乙腈，在0％水/100％乙腈下保持至9.5分钟。流速：25mL/分钟。LCMS(MS ES+:451.1)。 

实施例36：4-[5-氰基-4-({[2-甲基-6-(1H-1,2,4-三唑-1-基)吡啶-3-基]氨基}甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸异丙酯

向4-(5-氰基-4-((甲基磺酰基氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯(制备例10)(44mg，0.12mmol)在0.75mL的四氢呋喃中的搅拌溶液中加入N,N-二异丙基乙胺(0.042mL，0.24mmol)，接着加入2-甲基-6-(1H-1,2,4-三唑-1-基)吡啶-3-胺(21mg，0.12mmol)。将反应混合物在60℃下加热16小时，之后冷却至室温，且用水及盐水稀释。然后，用15mL乙酸乙酯萃取该混合物三次。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且在真空中浓缩滤液，得到52mg黄色泡沫。通过反相HPLC纯化样品(柱：Waters Sunfire C₁₈19×100，5微米；流动相A：在水中的0.05％三氟乙酸(v/v)；流动相B：在乙腈中的0.05％三氟乙酸(v/v))；梯度：在8.5分钟期间从90％水/10％乙腈线性至0％水/100％乙腈，在0％水/100％乙腈下保持至10.0分钟。流速：25mL/分钟。LCMS(MS ES+:450.1)。 

实施例37：4-[5-氰基-4-({[2-甲基-6-(甲基磺酰基)吡啶-3-基]氨基}甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸异丙酯

使用2-甲基-6-(甲基磺酰基)吡啶-3-胺，按照类似实施例36的方法制备标题化合物。通过反相HPLC纯化样品(柱：Waters XBridge C₁₈19×100，5微米；流动相A：在水中的0.03％氢氧化铵(v/v)；流动相B：在乙腈中的0.03％氢氧化铵(v/v)；梯度：在8.5分钟期间从85％水/15％乙腈线性至0％水/100％乙腈，在0％水/100％乙腈下保持至10.0分钟。流速：25mL/分钟。LCMS(ES+):461.0(M+1)。 

实施例38：4-(5-氰基-4-{[4-(1H-四唑-1-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯

使用市售可获得的4-四唑-1-基苯酚，按照类似实施例15的方法制备标题化合物。通过快速层析纯化粗物质，用在庚烷中0%至75%乙酸乙酯梯度洗脱。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δppm0.60-0.66(m,2H)0.84-0.90(m,2H)1.19(t,J=7.03Hz,1H)1.55(s,3H)2.03(br.s.,2H)2.06-2.19(m,2H)2.92(br.s.,2H)3.46(q,J=7.09Hz,1H)4.46-4.56(m,1H)5.11(s,2H)7.11-7.16(m,2H)7.60-7.65(m,2H)7.68(s,1H)8.90(s,1H)。 

实施例39：1-[1-(5-乙基嘧啶-2-基)哌啶-4-基]-4-{[4-(1H-四唑-1-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-5-腈

A)4-(5-氰基-4-{[4-(1H-四唑-1-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

向三苯基膦(283mg，1.08mmol)在四氢呋喃(2mL)中的搅拌的冷(0℃)溶液中滴加二乙基偶氮二羧酸酯(0.17mL,1.1mmol)。将冷的反应混合物搅拌20分钟，之后加入4-四唑-1-基-苯酚(165.5mg,1.021mmol)在四氢呋喃中的溶液。在35分钟之后，加入4-(5-氰基-4-(羟基甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例15)(300mg,0.979mmol)在四氢呋喃中的溶液，并且将反应慢慢地温热至室温过夜。在减压下浓缩反应物，并通过快速层析纯化残余物，使用在庚烷中的0%至80%乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈白色蓬松固体的标题化 合物(304mg，68%)。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δppm1.46(s,9H)2.03(s,2H)2.06-2.20(m,2H)2.90(br.s.,2H)4.28(br.s.,2H)4.46-4.56(m,1H)5.12(s,2H)7.10-7.18(m,2H)7.59-7.66(m,2H)8.90(s,1H);LCMS(ES)451.1(M+1) 

B)1-哌啶-4-基-4-{[4-(1H-四唑-1-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-5-腈

将4-(5-氰基-4-{[4-(1H-四唑-1-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(298mg,0.663mmol)溶于二氯甲烷(1.6mL)中。加入三氟乙酸(0.15mL)，并且在室温下，在氮气下搅拌该反应1.5小时。浓缩反应物，并且在下述步骤中使用而无需进一步纯化。LCMS(ES+)351.1(M+1) 

C)1-甲基环丙基4-(5-氰基-4-{[4-(1H-四唑-1-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸酯

将1-哌啶-4-基-4-{[4-(1H-四唑-1-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-5-腈(30mg,0.086mmol)和二异丙基乙胺(0.12ml,0.688mmol)溶于在密封管中的乙腈(2mL)中。加入2-氯-5-乙基嘧啶(0.020mL,0.2mmol)，在120℃下加热反应18小时，且在室温下36小时。在减压下浓缩反应混合物，并且通过快速层析纯化粗物质，用在庚烷中0%至70%乙酸乙酯梯度洗脱，得到褐色固体。将该固体与最少量的乙醚研磨，得到呈浅褐色固体的标题化合物(3mg，8%)。LCMS(ES+)457.1(M+1)1H NMR(400MHz,氘代氯仿)δppm1.16-1.22(m,3H)2.10(br.s.,2H)2.13-2.25(m,2H)2.43-2.50(m,2H)3.00-3.10(m,2H)3.43-3.50(m,1H)4.88-4.96(m,2H)5.12(s,2H)7.10-7.16(m,2H)7.60-7.64(m,2H)7.66(s,1H)8.12-8.24(m,2H)8.90(s,1H)。 

实施例40：4-{5-氰基-4-[(3-氰基苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸异丙酯

使用市售可获得的3-氰基苯酚，按照类似实施例12的方法制备标题化合物。通过快速层析纯化粗物质，用在庚烷中的0%至40%乙酸乙酯梯度洗脱，得到16.4mg(62%)呈澄清无色残余物的标题化合物。1H NMR(400MHz,氘代氯仿)δppm1.28(d,J=6.25Hz,6H)1.99-2.09(m,2H)2.10-2.24(m,2H)2.88-3.06(m,2H)4.35(br.s.,2H)4.48-4.60(m,1H)4.90-5.01(m,1H)5.08(s,2H)7.19-7.25(m,2H)7.32(d,J=7.82Hz,1H)7.39-7.47(m,1H)7.68(s,1H) 

实施例41：4-{5-氰基-4-[(4-氰基-3-甲基苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸异丙酯

使用4-羟基-2-甲基苄腈，按照类似实施例12的方法制备标题化合物。通过快速层析纯化粗物质，用在庚烷中从0%至40%乙酸乙酯梯度洗脱，得到18.8mg(69%)呈澄清残余物的标题化合物。1H NMR(400MHz,氘代氯仿)δppm1.27(d,J=6.25Hz,6H)1.96-2.08(m,2H)2.09-2.23(m,2H)2.54(s,3H)2.96(t,J=12.51Hz,2H)4.35(br.s.,2H)4.54(tt,J=11.29,4.15Hz,1H)4.95(spt,J=6.25Hz,1H)5.09(s,2H)6.85(dd,J=8.60,2.35Hz,1H)6.90(s,1H)7.57(d,J=8.60Hz,1H)7.67(s,1H) 

实施例42：4-{5-氰基-4-[(4-氰基苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸异丙酯

使用市售可获得4-氰基苯酚，按照类似实施例12的方法制备标题化合物。通过快速层析纯化粗物质，用在庚烷中的0%至40%乙酸乙酯梯度洗脱，得到14.7mg(56%)呈粘性白色固体的标题化合物。1H NMR(400MHz,氘代氯仿)δppm1.27(d,J=6.25Hz,6H)1.95-2.08(m,2H)2.16(m,2H)2.85-3.08(m,2H)4.35(br.s.,2H)4.54(tt,J=11.29,4.15Hz,1H)4.95(dt,J=12.51,6.25Hz,1H)5.11(s,2H)7.04(d,J=8.99Hz,2H)7.64(d,J=8.99Hz,2H)7.68(s,1H) 

实施例43：4-[(4-氰基-2-氟苯氧基)甲基]-1-[1-(5-乙基嘧啶-2-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑-5-腈

使用市售可获得的4-氰基-2-氟苯酚，按照类似实施例39的方法制备标题化合物。通过快速层析纯化粗物质，用在二氯甲烷中0%至1.5%的甲醇梯度洗脱。将得到的固体经由从10%甲醇/乙酸乙酯中重结晶进一步纯化，得到3.67g(60%)呈几乎白色固体的纯净产物。¹H NMR(500MHz,氘代氯仿)δppm1.22(t,J=7.56Hz,3H)2.07-2.15(m,2H)2.15-2.28(m,2H)2.50(q,J=7.56Hz,2H)3.03-3.13(m,2H)4.66(tt,J=11.44,4.18Hz,1H)4.95(d,J=13.66Hz,2H)5.19(s,2H)7.13(t,J=8.17Hz,1H)7.42(dd,J=10.37, 1.83Hz,1H)7.47(d,J=8.29Hz,1H)7.70(s,1H)8.21(s,2H) 

实施例44：4-{5-氰基-4-[(4-氰基-2-氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸叔丁酯

使用市售可获得4-氰基-2-氟苯酚，按照类似实施例15的方法制备标题化合物。通过快速层析纯化粗物质，用在庚烷中的10%至40%乙酸乙酯梯度洗脱，得到标题化合物(21g，100%)。1H NMR(氘代氯仿)δppm7.71(s,1H),7.44-7.48(m,1H),7.40-7.43(m,1H),7.09-7.15(m,1H),5.18(s,2H),4.48-4.56(m,1H),4.22-4.38(m,2H),2.84-3.01(m,2H),2.09-2.19(m,2H),1.99-2.06(m,2H),1.49(s,9H) 

实施例45：4-{5-氰基-4-[(2-氰基-4-氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸异丙酯

使用市售可获得的2-氰基-4-氟苯酚，按照类似实施例15的方法制备标题化合物。通过HPLC纯化(Column Waters Atlantis dC18 4.6x50mm,5微米；调节剂∶0.05%三氟乙酸；梯度∶经4.0min从95%水/5%乙腈线性至5%水/95%乙腈，保持5%水/95%乙腈5.0分钟；流速∶2.0mL/min)，得到35.8mg(73%)的标题化合物。LCMS(ES+):412.0(M+1) 

实施例46：4-(5-氰基-4-{[4-(二甲基氨基甲酰基)-2-氟苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯

使用3-氟-4-羟基-N,N-二甲基苯甲酰胺(制备例31B)，按照类似实施例15的方法制备标题化合物。通过HPLC(Column Waters Atlantis dC184.6x50mm,5微米；调节剂∶0.05%三氟乙酸；梯度∶经4.0min从95%水/5%乙腈线性至5%水/95%乙腈，保持5%水/95%乙腈5.0分钟；流速∶2.0mL/min)纯化，得到6.8mg(12%)的标题化合物。LC/MS(ES+):458.0(M+1) 

实施例47∶4-(5-氰基-4-{[4-(二甲基氨基甲酰基)-2-氟苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯

使用3-氟-4-羟基-N,N-二甲基苯甲酰胺(制备例31B)，按照类似实施例15的方法制备标题化合物。通过HPLC(Column Waters Atlantis dC184.6x50mm,5微米；调节剂∶0.05%三氟乙酸；梯度∶经4.0min从95%水/5%乙腈线性至5%水/95%乙腈，保持5%水/95%乙腈5.0分钟；流速∶2.0mL/min)纯化，得到28.7mg(51%)的标题化合物。LC/MS(ES+):470.1(M+1) 

实施例48：4-(5-氰基-4-{[2-氟-4-(甲基氨基甲酰基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯

使用3-氟-4-羟基-N-甲基苯甲酰胺(制备例31A)，按照类似实施例15的方法制备标题产物。通过HPLC(Column Waters Atlantis dC184.6x50mm,5微米；调节剂∶0.05%三氟乙酸；梯度∶经4.0min从95%水/5%乙腈线性至5%水/95%乙腈，保持5%水/95%乙腈5.0分钟；流速∶2.0mL/min)纯化，得到35.6mg(65%)的标题产物。LC/MS(ES+):456.0(M+1) 

实施例49∶4-({5-氰基-1-[1-(5-乙基嘧啶-2-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑-4-基}甲氧基)-3-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺

使用3-氟-4-羟基-N,N-二甲基苯甲酰胺(制备例31B)，按照类似实施例39的方法制备标题产物。通过HPLC(Column Waters Atlantis dC184.6x50mm,5微米；调节剂∶0.05%三氟乙酸；梯度∶经4.0min从95%水/5%乙腈线性至5%水/95%乙腈，保持5%水/95%乙腈5.0分钟；流速∶2.0mL/min)纯化，得到26.7mg的标题产物。LC/MS(ES+):478.0(M+1) 

实施例50：4-{5-氰基-4-[(4-氰基-2-氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯

合成方法列在下述方案5中。 

方案5 

A)4-[5-氰基-4-(乙氧基羰基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将5-氰基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(Jubilant Chemsys Ltd.D-12,Sector-59,201301,Noida,U.P.India)(50g,300mmol)、将4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(67g，333mmol)和三苯基膦(111g，420mmol)溶于2-甲基四氢呋喃(200mL)中，且冷却至0℃。滴加40%偶氮二羧酸二乙酯在甲苯中的溶液(76.5mL,420mmol)。一旦完成加入，经1小时使反应温热至室温，然后使其在室温下搅拌18小时。当强力搅拌时，小心地加入庚烷(1400mL)，并且在1小时之后形成悬浮液。过滤出固体，用庚烷(400mL)和乙酸乙酯(200mL)的混合物洗涤滤液。然后，浓缩滤液，并且通过快速层析纯化残余物，用在庚烷中的25%乙酸乙酯洗脱，然后从乙酸乙酯-庚烷中重结晶，得到期望产物(35.2g，33%)。1H NMR(氘代氯仿)delta ppm7.97(s,1H),4.49-4.59(m,1H),4.36(q,J=7.1Hz,2H),4.22-4.30(m,2H),2.80-2.99(m,2H),2.06-2.19(m,2H),1.93-2.02(m,2H),1.46(s,9H),1.37(t,J=7.1Hz,3H) 

B):4-[5-氰基-4-(羟基甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将4-[5-氰基-4-(乙氧基羰基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(45.5g,131mmol)溶于四氢呋喃(350mL)中，并且冷却至-78℃。经75分钟滴加氢化二异丁基铝在甲苯中的1.5M溶液(50g，350mmol)，同时保持内部温度在-65℃至-60℃之间。一旦完成加入，将反应混合物温热至-10℃90分钟。当保持温度为-10℃，小心地滴加氢氧化钾的4M水溶液(350mL,10.7eq)。一旦完成加入，使反应混合物慢慢地达到室温，同时强力搅拌，然后在室温下搅拌20小时。加入甲基叔丁基醚(200mL)和庚烷(400mL)，并且分离有机相。将有机相用1M硫 酸氢钾水溶液、盐水洗涤，且经硫酸镁和30g的硅胶的混合物干燥。过滤出固体，且在减压下浓缩滤液。当浓缩时开始形成沉淀。在60℃下，将得到的湿残余物与500mL在庚烷中的10%甲基叔丁基醚研磨1小时，并且在搅拌下将悬浮液慢慢地冷却至室温。过滤出得到的固体，且在设定40℃的真空烘箱中干燥，得到4-[5-氰基-4-(羟基甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(31.2g,78%)。1H NMR(氘代氯仿)δppm7.59(s,1H),4.70(d,J=5.5Hz,2H),4.41-4.51(m,1H),4.17-4.32(m,2H),2.81-2.96(m,2H),2.01-2.16(m,3H),1.94-2.00(m,2H),1.45(s,9H) 

C)4-{5-氰基-4-[(4-氰基-2-氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸叔丁酯

向4L瓶子中装入4-[5-氰基-4-(羟基甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(336g,1.10mol)、三苯基膦(359.58g,1.37mol),4-氰基-2-氟苯酚(157.89g,1.15mol)和2-甲基四氢呋喃(2.02L,20.10mol)。将该混合物搅拌成溶液，并且保持在室温和氮气下。向另一个4L瓶子中装入二氮烯二羧酸二乙酯在甲苯中的溶液(564.33mL,620.76g,1.43mol)和2-甲基四氢呋喃(2.12L,21.11mol)。搅拌该混合物以确保完全溶解，保持在室温和氮气下。使用单个蠕动泵(两个进料管线)以将两个气流泵入T形管(不锈钢)，接着加入100mL的线圈体积(1/8，“之后1/4”ID PTE管)，混合流速为20mL/min。在流动8小时之后，进料瓶变空，使用2×25mL的甲基四氢呋喃洗涤瓶子，并泵出管线。在下述反应中使用该产物流。 

D)4-[(4-氰基-2-氟苯氧基)甲基]-1-哌啶-4-基-1H-吡唑-5-腈甲苯磺酸盐

将在步骤C中收集的4-{5-氰基-4-[(4-氰基-2-氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸叔丁酯物流分到两个5L的单颈烧瓶中。将对甲苯磺酸一水合物(344.22g，1.81mol)分别加入到混合物中，并且使用保持在75℃下的旋转蒸发器浴加热烧瓶8小时。将反应冷却至室温，且使其成粒过夜。过滤混合物，并且在真空下抽干3小时，得到呈甲苯磺酸盐的目标产物(480g，经两个步骤88%)。 

E)4-{5-氰基-4-[(4-氰基-2-氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯

将4-[(4-氰基-2-氟苯氧基)甲基]-1-哌啶-4-基-1H-吡唑-5-腈(478g,960.71mmol)的甲苯磺酸盐溶于在4L瓶中的2-甲基四氢呋喃(2.39L,23.83mol)和水(478.00mL)中。加入三乙胺(200.86mL,1.44mol)和4-硝基苯基碳酸1-甲基环丙酯(制备例26)(229.83g，960.71mmol)，且搅拌48小时。用1N氢氧化钠水溶液(1L)洗涤反应混合物。搅拌该混合物，并且分离层。将有机层用1N氢氧化钠水溶液(1L)洗涤几次，经硫酸镁干燥，过滤且在减压下浓缩滤液，得到辆黄色固体。在室温下，将这些固体在乙酸乙酯中浆液化过夜。过滤出固体，并将得到的浅黄色固体在乙酸乙酯(3体积)中再浆液化，过滤，且在真空下抽干，得到呈黄白色固体的目标化合物(313g，两批，77%)。¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)δppm0.60-0.66(m,2H)0.84-0.90(m,2 H)1.55(s,3H)1.96-2.04(m,2H)2.11(qd,J=12.10,4.68Hz,2H)2.92(br.s.,2H)4.07-4.41(m,2H)4.50(tt,J=11.27,4.15Hz,1H)5.16(s,2H)7.09(t,J=8.20Hz,1H)7.36-7.46(m,2H)7.68(s,1H)。 

熔点=144.6℃ 

Combustion Analysis for(Quantitative Technologies Inc.(QTI)291Route22East 

Salem Ind.Park–Bldg5 

Whitehouse NJ08888-0470 

C22H22FN5O3 

C(理论值=62.40%) 

62.28% 

62.29% 

H(理论值=5.24%) 

5.17% 

5.13% 

N(理论值=16.54%) 

16.42% 

16.50% 

实施例51：(3S,4S)-4-(5-氰基-4-{[2-氟-4-(甲基氨基甲酰基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯

A)(3S,4S)-4-[5-氰基-4-(乙氧基羰基)-1H-吡唑-1-基]-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯

按照与4-[5-氰基-4-(乙氧基羰基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例50，步骤A)的制备所描述的类似方法，由5-氰基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯和(3S,4R)-3-氟-4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例43B)制备(3S,4S)-4-[5-氰基-4-(乙氧基羰基)-1H-吡唑-1-基]-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯。通过快速层析纯化粗物质，用在庚烷中的0%至30%乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈稠的澄清油状物的期望产物(149.4mg，32%)。 

B)(3S,4S)-4-[5-氰基-4-(羟基甲基)-1H-吡唑-1-基]-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯

按照与4-[5-氰基-4-(羟基甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例50，步骤B)的制备所描述的类似方法，由(3S,4S)-4-[5-氰基-4-(乙氧基羰基)-1H-吡唑-1-基]-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯制备(3S,4S)-4-[5-氰基-4-(羟基甲基)-1H-吡唑-1-基]-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯。通过快速层析纯化粗物质，用在庚烷中的5%至50%乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈稠的澄清油状物的期望产物(74mg，56%)，其在静置时固化。 

C)(3S,4S)-4-(5-氰基-4-{[2-氟-4-(甲基氨基甲酰基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯

使用3-氟-4-羟基-N-甲基苯甲酰胺(制备例31A)，按照类似实施例50的方法制备标题化合物。通过HPLC(柱∶Waters Xbridge C124.6x50mm,5微米；调节剂∶0.05%氢氧化铵；梯度∶经4.0min从95%水/5%乙腈线性至5%水/95%乙腈，保持5%水/95%乙腈5.0分钟；流速∶2.0mL/min)纯化，得到期望产物。LC/MS(ES+):476.4(M+1) 

实施例52：(3R,4S)-4-(5-氰基-4-{[2-氟-4-(甲基氨基甲酰基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯

使用3-氟-4-羟基-N-甲基苯甲酰胺(制备例31A)，按照类似实施例51的方法制备标题化合物。通过HPLC(柱∶Waters Xbridge C124.6x50mm,5微米；调节剂∶0.05%氢氧化铵；梯度∶经4.0min从95%水/5%乙腈线性至5%水/95%乙腈，保持5%水/95%乙腈5.0分钟；流速∶2.0mL/min)纯化粗物质，得到期望产物。LC/MS(ES+):476.4(M+1) 

实施例53：(3S,4S)-4-(5-氰基-4-{[2-氟-4-(甲基氨基甲酰基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯

使用3-氟-4-羟基-N-甲基苯甲酰胺(制备例31A)，按照类似实施例50和51的方法制备标题化合物。经由HPLC(柱∶Princeton2-乙基吡啶250×21.2mm,5微米；梯度∶95%庚烷/5%乙醇1.5分钟，经10分钟线性至0%庚烷/100%乙醇，保持0%庚烷/100%乙醇至5.0min1分钟，且线性至95%庚烷/5%乙醇；流速∶28mL/min)纯化粗物质，得到期望产物。LC/MS(ES+):473.9(M+1) 

实施例54：(3R,4R)-4-(5-氰基-4-{[2-氟-4-(甲基氨基甲酰基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯

使用3-氟-4-羟基-N-甲基苯甲酰胺(制备例31A)，按照类似实施例50和51的方法制备标题化合物。经由HPLC(柱∶Princeton2-乙基吡啶250×21.2mm,5微米；梯度∶95%庚烷/5%乙醇1.5分钟，经10分钟线性至0%庚烷/100%乙醇，保持0%庚烷/100%乙醇至5.0min1分钟，且线性至95%庚烷/5%乙醇；流速∶28mL/min)纯化粗物质，得到期望产物。 

LC/MS(ES+):473.9(M+1) 

实施例55：(3S,4S)-4-(5-氰基-4-{[(2-甲基吡啶-3-基)氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯

将4-(5-氰基-4-{[(甲基磺酰基)氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例42)(33mg,0.082mmol)溶于乙腈(3mL)中，加入碳酸铯(53mg,0.164mmol)和3-羟基-2-甲基吡啶(9mg，0.082mmol)。将该反应混合物加热至80℃1.5小时。将反应冷却至室温，且在减压下浓缩。用水稀释粗残余物，并且用乙酸乙酯(3x)萃取。将合并的有机萃取物用0.5N氢氧化钠水溶液、水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且在减压下浓缩滤液。通过快速层析纯化粗残余物，用在庚烷中的30%至100%乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈琥珀色油状物的外消旋产物(30mg，70%)。1H NMR(500MHz,氘代氯仿)δppm1.50(s,9 H)2.11(m,1H)2.25-2.39(m,1H)2.53(s,3H)2.93(br.s.,2H)4.30(br.s.,1H)4.43-4.71(m,2H)4.72-4.91(m,1H)5.09(s,2H)7.09-7.20(m,2H)7.75(s,1H)8.16(d,J=3.90Hz,1H) 

实施例56：(3S,4R)-4-(5-氰基-4-{[(2-甲基吡啶-3-基)氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯

使用市售可获得3-羟基-2-甲基吡啶，按照类似实施例55的方法制备标题化合物。通过快速层析纯化粗物质，用在庚烷中的30%至100%乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈琥珀色油状物的期望产物。1H NMR(500MHz,氘代氯仿)δppm1.50(s,9H),2.01-2.08(m,1H)2.52(s,3H)2.74-2.88(m,1H)2.94-3.14(m,1H)3.14-3.34(m,1H)4.27-4.57(m,2H)4.61-4.75(m,1H)4.80-5.01(m,1H)5.09(s,2H)7.10-7.18(m,2H)7.73(s,1H)8.15(d,J=3.66Hz,1H) 

实施例57：(3S,4R)-4-(5-氰基-4-{[(2-甲基吡啶-3-基)氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯

使用市售可获得3-羟基-2-甲基吡啶，按照类似实施例55的方法制备标题化合物。通过快速层析纯化粗物质，用在庚烷中的40%至100%乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈白色固体的期望外消旋产物。1H NMR(400MHz,氘代氯仿)δppm0.66(br.s.,2H)0.91(br.s.,2H)1.57(s,3H)2.05(d,J=12.10Hz,1H)2.52(s,3H)2.82(br.d,J=9.00 Hz,1H)3.05(br.d,J=9.00Hz,1H)3.15-3.40(m,1H)4.20-4.60(m,2H)4.60-4.77(m,1H)4.77-5.03(m,1H)5.09(s,2H)7.06-7.21(m,2H)7.73(s,1H)8.16(d,J=4.29Hz,1H) 

实施例58：(3S,4R)-4-(5-氰基-4-{[(2-甲基吡啶-3-基)氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯

使用市售可获得3-羟基-2-甲基吡啶，按照类似实施例55的方法制备标题化合物。通过快速层析纯化粗物质，用在庚烷中的40%至100%乙酸乙酯梯度洗脱，得到外消旋产物，通过以下述条件的手性HPLC进一步纯化∶柱：chiralcel OJ-H4.6mm x25cm；流动相∶85/15二氧化碳/甲醇，调节剂∶0.2%异丙胺；流速∶2.5ml/分钟，得到标题化合物。LC/MS(ES+):414.1(M+1) 

实施例59：(3R,4S)-4-(5-氰基-4-{[(2-甲基吡啶-3-基)氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯

使用市售可获得3-羟基-2-甲基吡啶，按照类似实施例55的方法制备标题化合物。通过快速层析纯化粗物质，用在庚烷中从40%至100%乙酸乙酯梯度洗脱，得到外消旋产物，通过以下述条件从手性HPLC进一步纯化∶柱∶chiralcel OJ-H4.6mm x25cm；流动相∶85/15二氧 化碳/甲醇，调节剂∶0.2%异丙胺；流速∶2.5ml/分钟，得到标题化合物。LC/MS(ES+):414.1(M+1) 

实施例60：4-(5-氰基-4-{[4-(1H-1,2,3-三唑-1-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

使用4-(1H-1,2,3-三唑-1-基)苯酚(用途专利申请号：PCT/US2009/038315，公开号WO2009/129036A1)，按照类似实施例15的方法制备标题化合物。通过HPLC(柱∶Phenomenex Gemini C₁₈250x21.2mm,8微米；流动相∶从在水(氨pH10)中的50%乙腈(氨，pH10)至在水(氨pH10)中的55%乙腈(氨，pH10)；流速∶25mL/分钟；波长∶220nm)，得到标题化合物。LC/MS(ES+):450.1(M+1) 

实施例61：4-(5-氰基-4-{[4-(2H-1,2,3-三唑-2-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

使用4-(2H-1,2,3-三唑-2-基)苯酚(美国专利申请号：PCT/US2009/038315，公开号WO2009/129036A1)，按照类似实施例 15的方法制备标题化合物。通过HPLC(柱∶Phenomenex Gemini C₁₈250x21.2mm,8微米；流动相∶在水(氨pH10)中的63%乙腈(氨，pH10)；流速∶25mL/分钟；波长∶220nm)，得到标题化合物。LC/MS(ES+):450.1(M+1) 

实施例62∶4-(4-((4-(1H-1,2,3-三唑-1-基)苯氧基)甲基)-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯

按照类似实施例60的方法制备标题化合物。将粗物质通过反相HPLC纯化∶柱：Kromasil Eternity-5-C₁₈150x30mm×5微米，流动相∶从在水(0.225%甲酸)中的俄38%乙腈(0.225%甲酸)到在水(0.225%甲酸)中的58%乙腈(0.225%甲酸)， 

流速∶30mL/min 

波长：220nm 

1H NMR(400MHz,氘代氯仿)∶δppm7.92(s,1H),7.84(s,1H),7.68(d,3H),7.11(t,2H),5.11(s,2H),4.53(m,1H),4.26(m,2H),2.93(s,2H),2.12(t,2H),2.03(d,2H)1.56(s,3H),0.88(t,2H),0.64(t,2H) 

实施例63：4-(4-((4-(2H-1,2,3-三唑-2-基)苯氧基)甲基)-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯

按照类似实施例61的方法，由实施例61开始制备标题化合物。将粗残余物通过制备HPLC纯化，得到50mg(39%)呈白色固体的标题化合物∶柱：Boston Symmetrix ODS-H150x30mm×5微米，流动相∶从在水(0.225%甲酸)中的50%乙腈(0.225%甲酸)到在水(0.225%甲酸)中的70%乙腈(0.225%甲酸)， 

流速∶30mL/min 

波长：220nm 

¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)∶δppm8.01(d,2H),7.78(s,2H),7.69(s,1H),7.07(d,2H),5.10(s,2H),4.51(m,1H),4.33(m,2H),2.93(s,2H),2.11(t,2H),2.03(d,2H)1.56(s,3H),0.80(s,2H),0.65(d,2H). 

实施例64：4-[5-氰基-4-({[1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基]氧基}甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

按照类似实施例13的方法制备标题化合物。通过硅胶层析，使用石油醚和乙酸乙酯的1:4混合物纯化粗化合物。 

¹H NMR(400MHz，氘代氯仿)∶δppm7.54(s,1H),4.53(s,2H),4.48(m,1H),4.28(br,2H),3.69(m,1H),3.31(m,4H),2.90(m,2H),2.79(s,3H),2.11(m,2H),1.88-2.00(m,6H),1.47(s,9H). 

实施例65：4-[5-氰基-4-({2-氟-4-[(2-羟基乙基)(甲基)氨基甲酰基]苯氧基}甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

按照类似实施例46的方法制备标题化合物。通过反相HPLC纯化粗物质：柱:Phenomenex Gemini C₁₈250x21.2mm×8微米，流动相∶ 从在水(氨pH10)中40%乙腈(氨pH10)至在水(氨pH10)中60%乙腈(氨pH10) 

流速∶25mL/min 

波长∶220nm 

¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)∶δppm7.69(s,1H),7.28(d,1H),7.24(s,1H),7.05(d,1H),5.18(s,2H),4.50(q,1H),4.29(d,2H)，3.90(s,2H),3.71(s,2H),3.10(s,3H),2.91(s,2H),2.14(q,2H),1.99(s,2H),1.48(s,9H). 

实施例66：4-[5-氰基-4-({2-氟-4-[(3-羟基吡咯烷-1-基)羰基]苯氧基}甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

按照类似实施例46的方法制备标题化合物。通过反相HPLC纯化粗物质：柱:Phenomenex Gemini C₁₈250x21.2mm×8微米，流动相∶从在水(氨pH10)中40%乙腈(氨pH10)至在水(氨pH10)中60%乙腈(氨pH10) 

流速：25mL/min 

波长∶220nm 

¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)∶δppm7.69(s,1H),7.32(d,2H),7.05(t,1H),5.14(s,2H),4.52(q,2H),4.29(s,2H)，3.78(d,2H),3.64(d,1H),3.45(d,1H),2.90(s,2H),2.14 (q,2H),2.00(d,4H),1.47(s,9H)。 

实施例67：4-(4-{[4-(氮杂环丁烷-1-基羰基)-2-氟苯氧基]甲基}-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

按照类似实施例46的方法制备标题化合物。通过反相HPLC纯化粗物质：柱:Phenomenex Gemini C₁₈250x21.2mm×8微米，流动相∶从在水(氨pH10)中40%乙腈(氨pH10)至在水(氨pH10)中60%乙腈(氨pH10) 

流速∶25mL/min 

波长∶220nm 

¹H NMR(400MHz,氘代氯仿)∶δppm7.69(s,1H),7.43(d,1H),7.41(s,1H),7.04(t,1H),5.14(s,2H),4.50(q,1H),4.31(d,6H)，2.90(d,2H),2.38(q,2H),2.15(q,2H),2.08(d,2H),1.47(s,9H). 

实施例68：4-[5-氰基-4-({[1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基]氧基}甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯

按照类似实施例64的方法制备标题化合物。将粗物质通过反相HPLC纯化∶柱：Phenomenex Synergi C₁₈150x30mm×4微米，流动相∶从在水(0.225%甲酸)中的43%乙腈(0.225%甲酸)到在水(0.225%甲酸)中的53%乙腈(0.225%甲酸)， 

流速∶30mL/min 

1H NMR(400MHz,氘代氯仿)∶δppm7.54(s,1H),4.53(s,2H),4.48(m,1H),4.35(d,2H),3.69(m,1H),3.31(m,4H),2.91(m,2H),2.78(s,3H),2.12(m,2H),1.87-1.98(m,6H),1.56(s,3H),0.88(t,2H),0.66(t,2H). 

在整个申请中，提及了多个出版物。将这些出版物的公开内容以其整体在此并入本申请作为参考，用于所有目的。 

对本领域技术人员显而易见的是，在没有背离本发明的范围或精神下，可以对本发明进行各种修饰和改变。根据本文所公开的说明书和本发明的实施，本发明的其它实施方案对于本领域技术人员来说是显然的。说明书和实施例仅仅被视为是示例性的，本发明的实际范围和精神由下述权利要求书给出。 

Claims (12)

1.化合物，选自：

4-{5-氰基-4-[(2,4-二氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸异丙酯；

4-{5-氰基-4-[(2-甲基苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸异丙酯；

4-{5-氰基-4-[(2,5-二氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

4-{5-氰基-4-[(2,3-二氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

4-{4-[(4-氨基甲酰基-2-氟苯氧基)甲基]-5-氰基-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸酯1-甲基环丙酯；

4-{4-[(4-氨基甲酰基苯氧基)甲基]-5-氰基-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

4-(5-氰基-4-((4-氰基苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

4-(4-((4-(1H-吡唑-1-基)苯氧基)甲基)-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙基酯；

4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(1H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙基酯和4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(2H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯；

4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯；

4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(2-甲基-2H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯；

4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(2-(2-羟基乙基)-2H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯；

4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(1-(2-羟基乙基)-1H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯；

4-(5-氰基-4-{[2-氟-4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

4-(5-氰基-4-{[4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

4-(4-((4-氨基甲酰基-3-氟苯氧基)甲基)-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

4-(5-氰基-4-{1-[2-氟-4-(甲基磺酰基)苯氧基]乙基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙基酯；

4-(5-氰基-4-{1-[(2-甲基吡啶-3-基)氧基]乙基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯；

4-(5-氰基-4-{2-[2-氟-4-(甲基磺酰基)苯基]丙基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯；

4-(5-氰基-4-{[(2-甲基吡啶-3-基)氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

4-{5-氰基-4-[(2,3,6-三氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

4-{5-氰基-4-[(2,3,6-三氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸异丙酯；

4-(5-氰基-4-{[2-氟-4-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯；

4-(5-氰基-4-{[2-氟-4-(1-甲基-1H-咪唑-5-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯；

4-[5-氰基-4-({[2-甲基-6-(1H-1,2,4-三唑-1-基)吡啶-3-基]氧基}甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸异丙酯；

4-[5-氰基-4-({[2-甲基-6-(1H-1,2,4-三唑-1-基)吡啶-3-基]氨基}甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸异丙酯；

4-[5-氰基-4-({[2-甲基-6-(甲基磺酰基)吡啶-3-基]氨基}甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸异丙酯；

4-(5-氰基-4-{[4-(1H-四唑-1-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

1-[1-(5-乙基嘧啶-2-基)哌啶-4-基]-4-{[4-(1H-四唑-1-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-5-甲腈；

4-{5-氰基-4-[(3-氰基苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸异丙酯；

4-{5-氰基-4-[(4-氰基-3-甲基苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸异丙酯；

4-{5-氰基-4-[(4-氰基苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸异丙酯；

4-[(4-氰基-2-氟苯氧基)甲基]-1-[1-(5-乙基嘧啶-2-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑-5-甲腈；

4-{5-氰基-4-[(4-氰基-2-氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸叔丁酯；

4-{5-氰基-4-[(2-氰基-4-氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸异丙酯；

4-(5-氰基-4-{[4-(二甲基氨基甲酰基)-2-氟苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯；

4-(5-氰基-4-{[4-(二甲基氨基甲酰基)-2-氟苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

4-(5-氰基-4-{[2-氟-4-(甲基氨基甲酰基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

4-({5-氰基-1-[1-(5-乙基嘧啶-2-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑-4-基}甲氧基)-3-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺；

4-{5-氰基-4-[(4-氰基-2-氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

(3S,4S)-4-(5-氰基-4-{[2-氟-4-(甲基氨基甲酰基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯；

(3R,4S)-4-(5-氰基-4-{[2-氟-4-(甲基氨基甲酰基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁基酯；

(3S,4S)-4-(5-氰基-4-{[2-氟-4-(甲基氨基甲酰基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

(3R,4R)-4-(5-氰基-4-{[2-氟-4-(甲基氨基甲酰基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

(3S,4S)-4-(5-氰基-4-{[(2-甲基吡啶-3-基)氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯；

(3S,4R)-4-(5-氰基-4-{[(2-甲基吡啶-3-基)氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯；

(3S,4R)-4-(5-氰基-4-{[(2-甲基吡啶-3-基)氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

(3S,4R)-4-(5-氰基-4-{[(2-甲基吡啶-3-基)氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

(3R,4S)-4-(5-氰基-4-{[(2-甲基吡啶-3-基)氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

4-(5-氰基-4-{[4-(1H-1,2,3-三唑-1-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯；

4-(5-氰基-4-{[4-(2H-1,2,3-三唑-2-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯；

4-(4-((4-(1H-1,2,3-三唑-1-基)苯氧基)甲基)-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

4-(4-((4-(2H-1,2,3-三唑-2-基)苯氧基)甲基)-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

4-[5-氰基-4-({[1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基]氧基}甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯；

4-[5-氰基-4-({2-氟-4-[(2-羟基乙基)(甲基)氨基甲酰基]苯氧基}甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯；

4-[5-氰基-4-({2-氟-4-[(3-羟基吡咯烷-1-基)羰基]苯氧基}甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯；

4-(4-{[4-(氮杂环丁烷-1-基羰基)-2-氟苯氧基]甲基}-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯；

4-[5-氰基-4-({[1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基]氧基}甲基)-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(1H-1,2,3-三唑-1-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(1H-1,2,3-三唑-1-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯；

1-(1-(5-乙基嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-4-((2-氟-4-(1H-1,2,3-三唑-1-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲腈；

4-(4-((4-(1H-1,2,3-三唑-1-基)苯氧基)甲基)-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯；

4-((4-(1H-1,2,3-三唑-1-基)苯氧基)甲基)-1-(1-(5-乙基嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-5-甲腈；

4-(4-((4-(2H-1,2,3-三唑-2-基)苯氧基)甲基)-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯；

4-((4-(2H-1,2,3-三唑-2-基)苯氧基)甲基)-1-(1-(5-乙基嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-5-甲腈；

4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(2H-1,2,3-三唑-2-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

4-(5-氰基-4-((2-氟-4-(2H-1,2,3-三唑-2-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯；

1-(1-(5-乙基嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-4-((2-氟-4-(2H-1,2,3-三唑-2-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲腈；

4-(4-((5-(1H-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-2-基氧基)甲基)-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

4-(4-((5-(1H-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-2-基氧基)甲基)-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯；

4-(5-氰基-4-((3-氟-4-(1H-四唑-1-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

4-(5-氰基-4-((3-氟-4-(1H-四唑-1-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯；

1-(1-(5-乙基嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-4-((3-氟-4-(1H-四唑-1-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲腈；

4-((5-(1H-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-2-基氧基)甲基)-1-(1-(5-乙基嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-5-甲腈；

1-(1-(5-乙基嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-4-((2-甲基-6-(1H-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-基氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲腈；

4-(5-氰基-4-((2-甲基-6-(1H-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-基氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯；

4-(5-氰基-4-((2-甲基-6-(1H-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-基氧基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

1-(1-(5-乙基嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-4-((2-氟-4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲腈；

4-(4-((4-(氮杂环丁烷-1-羰基)-2-氟苯氧基)甲基)-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

4-(4-((4-(氮杂环丁烷-1-羰基)-2-氟苯氧基)甲基)-5-氰基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸异丙酯；和

4-((4-(氮杂环丁烷-1-羰基)-2-氟苯氧基)甲基)-1-(1-(5-乙基嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-5-甲腈；

或其可药用盐。

2.化合物，选自：

4-(5-氰基-4-{[2-氟-4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

4-(5-氰基-4-{[4-(1H-四唑-1-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

1-[1-(5-乙基嘧啶-2-基)哌啶-4-基]-4-{[4-(1H-四唑-1-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-5-甲腈；

4-[(4-氰基-2-氟苯氧基)甲基]-1-[1-(5-乙基嘧啶-2-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑-5-甲腈；和

4-{5-氰基-4-[(4-氰基-2-氟苯氧基)甲基]-1H-吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸1-甲基环丙酯；

或其可药用盐。

3.药物组合物，其包含以治疗有效量存在的、根据权利要求1-2中任一项的化合物，与至少一种可药用赋形剂相混合。

4.权利要求3的组合物，其进一步包含至少一种选自抗肥胖剂和抗糖尿病剂的另外的药剂。

5.权利要求4的组合物，其中所述抗肥胖剂选自：地洛他派、米垂他派、英普他派、R56918(CAS号403987)、CAS号913541-47-6、氯卡色林、西替司它、PYY_3-36、纳屈酮、油酰-雌酮、奥尼匹肽、普兰林肽、替索芬辛、瘦素、利拉糖肽、溴隐亭、奥利司他、艾塞那肽、AOD-9604(CAS号221231-10-3)和西布曲明。

6.权利要求4的组合物，其中所述抗糖尿病剂选自二甲双胍、醋磺已脲、氯磺丙脲、特泌胰、格列本脲、格列吡嗪、格列苯脲、格列美脲、格列齐特、格列太特、格列喹酮、格列索脲、妥拉磺脲、甲苯磺丁脲、淀粉酶抑肽、萃他丁、阿卡波糖、脂解素、卡格列波糖、乙格列酯、米格列醇、伏格列波糖、普拉米星-Q、salbostatin、巴格列酮、环格列酮、达格列酮、恩格列酮、isaglitazone、吡格列酮、罗格列酮、曲格列酮、毒蜥外泌肽-3、毒蜥外泌肽-4、曲度奎明、白藜芦醇、西替欧醛提取物、西格列汀、维格列汀、阿格列汀和沙格列汀。

7.一种用于治疗糖尿病的方法，其包括向需要该治疗的患者给药有效量的根据权利要求1或2的化合物。

8.一种用于治疗代谢性或与代谢相关的疾病、病症或障碍的方法，其包括向患者施用治疗有效量的权利要求1或2的化合物的步骤。

9.一种用于治疗选自下述的病症的方法：高脂血症、I型糖尿病、II型糖尿病、特发性I型糖尿病(Ib型)、成人隐匿性自身免疫性糖尿病、早发性2型糖尿病、青年发病型非典型糖尿病、青年人的成年发病型糖尿病、与营养不良有关的糖尿病、妊娠糖尿病、冠心病、缺血性发作、血管成形术后的再狭窄、周围血管疾病、间歇性跛行、心肌梗死(例如坏死及凋亡)、血脂异常、餐后脂血症、葡萄糖耐量降低的病症、空腹血糖受损的病症、代谢性酸中毒、酮病、关节炎、肥胖、骨质疏松症、高血压、充血性心力衰竭、左心室肥大症、周围动脉疾病、糖尿病性视网膜病变、黄斑变性、白内障、糖尿病性肾病、肾小球硬化、慢性肾衰竭、糖尿病性神经病变、代谢综合征、X综合征、经前综合征、冠心病、心绞痛、血栓形成、动脉粥样硬化、心肌梗死、短暂缺血性发作、中风、血管再狭窄、高血糖症、高胰岛素血症、高脂血症、高甘油三酯血症、胰岛素抵抗、葡萄糖代谢受损、葡萄糖耐量降低的病症、空腹血糖受损的病症、肥胖、勃起功能障碍、皮肤及结缔组织病症、足部溃疡及溃疡性结肠炎、内皮功能障碍及血管顺应性受损、高载脂蛋白B脂蛋白血症、阿尔茨海默病、精神分裂症、认知受损、炎性肠病、溃疡性结肠炎、克隆病及肠易激综合征，所述方法包括施用有效量的权利要求1或2的化合物。

10.一种用于治疗代谢性或与代谢相关的疾病、病症或障碍的方法，其包括向需要这样的治疗的患者施用两种单独的药物组合物的步骤，所述两种药物组合物包括：

(i)根据权利要求3的第一组合物；和

(ii)第二组合物，其包含至少一种选自抗肥胖剂和抗糖尿病剂的另外的药剂、及至少一种可药用赋形剂。

11.权利要求10的方法，其中同时施用所述第一组合物和所述第二组合物。

12.权利要求10的方法，其中以任何顺序施用所述第一组合物和所述第二组合物。