HK1182015B - 活性药物化合物用於治疗中枢神经系统病症的用途 - Google Patents

Description

活性药物化合物用于治疗中枢神经系统病症的用途

本发明涉及选择性的GABAAα5负性变构调节剂的药物用途，该调节剂用于治疗、预防与皮质及海马中过度GABA能抑制有关的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展。更具体而言，本发明涉及选择性的GABAAα5负性变构调节剂的药物用途，该调节剂用于治疗、预防由导致皮质及海马中过度GABA能抑制的神经发育缺陷引起的CNS病症和/或延缓其进展，或用于卒中后恢复，其中所述CNS病症选自唐氏综合征认知缺陷、孤独症认知缺陷、I型神经纤维瘤病认知缺陷。

具体而言，本发明涉及选择性的GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防CNS病症和/或延缓其进展的用途，其中所述选择性的GABAAα5负性变构调节剂选自式(I)化合物和/或式(II)化合物或其药学上可接受的盐

其中R¹、R²、R³、R⁴、R⁵和R⁶如本文中所定义。

由染色体21的三体化引起的唐氏综合征(DS)是智能障碍的最常见遗传原因，在全世界范围内每650至1000个活产儿中约有一个活产儿患有此病[BittlesAH等人，EurJPublicHealth(2007)17(2)：221-225]。尽管DS认知缺陷的病因仍不确定，但产前及围产期前脑及小脑的细胞及解剖学异常表明，在患有DS的受试者中早期脑发育有所改变。已在DS小鼠模型中描述类似的中枢神经系统(CNS)异常。具体而言，Ts65Dn小鼠(最广泛使用的DS模型)具有异常的前脑及小脑发育、突触形成及神经生理学缺陷以及行为缺陷。

最近的研究已表明，产后Ts65Dn脑的主要功能缺陷可为兴奋与抑制之间的不平衡，例如皮质及海马中的兴奋性突触数量降低且抑制性突触标记物相对增加。进一步研究表明，抑制性突触驱动力增加可为Ts65Dn前脑中的一般生理学表型。

目前尚无可用于治疗DS患者的认知缺陷的治疗选择方案。现已发现，GABAA受体功能的抑制是治疗DS认知损害的有吸引力的机制。

调控氯离子通道(chloridechannel)的GABAA受体是哺乳动物中枢神经系统中的主要的抑制性神经递质受体，且已广泛用作神经调节药物的靶标。临床使用的许多化合物(例如抗焦虑药、镇静药、安眠药或抗癫痫药)经由变构苯并二氮杂(BZD)结合位点来增加GABAA受体激活。已将这类化合物称为“BZD位点受体激动剂”。产生相反效应(即，降低受体激活)的BZD结合位点配体被称为“BZD位点受体逆激动剂”。“BZD位点受体拮抗剂”是结合受体而不调节其功能、但阻断激动剂及逆激动剂二者的活性的配体[HaefelyWE，EurArchPsychiatryNeurolSci(1989)238：294-301]。迄今为止，仅在动物行为实验中及在极少数探索性人类研究中对BZD受体逆激动剂进行了测试。结果显示有益活性，然而，进入临床的化合物的进一步开发由于致焦虑效应而受到阻止，该致焦虑效应可能由这些药剂所显示的对特定BZD受体亚型缺乏选择性而导致。

GABAA受体的非选择性拮抗剂(也称为通道阻断剂)(例如印防已毒素或PTZ)最可能通过其对含有GABAAα1、α2和α3亚基的受体的作用而增加惊厥风险，且因此不能安全地用于DS患者。因此，先决条件是，适宜的GABAA受体抑制剂对于主要地参与记忆形成的受体亚型具有选择性。

GABAA受体是大部分由2个α、2个p和1个γ亚基组成的五聚体。每一个亚基可具有数种基因产物，从而产生大量受体变体。已通过产生缺乏α1、α2、α3或α5亚基的正常地西泮(diazepam)敏感性(α4和α6对地西泮不敏感)的转基因小鼠来阐明不同α亚基亚型的重要性。结果表明，α1是造成BZD受体配体激动剂的镇静效应的原因，且α2及或许α3是造成BZD受体配体激动剂的抗焦虑效应的原因[K等人，Science(2000)290(5489)：131-134；H，CellTissueRes(2006)326(2)：505-516]。α5亚 基的改良药理学的结果较不明显，但该亚基的表达减少或无表达可与海马依赖性任务中的认知促进有关，且重要的是，对焦虑或促惊厥范式没有影响。这与海马中α5亚基的优先定位相一致。

因此，假设，对含有α5亚基的GABAA受体具有反向激动选择性的BZD位点配体应增强认知功能而无致焦虑及促惊厥副作用。

BZD位点配体的选择性可通过对GABAA受体亚型的不同亲和力(“结合选择性”)来实现。或者，在类似亚型亲和力的情形下，可尝试不同程度的受体调节(“功能选择性”)，即，对GABAAα5受体亚型反向激动且对其它亚型无活性。化合物也可具有结合选择性及功能选择性二者的组合，但是迄今为止此很少见。最近已合成多种经描述作为逆激动剂对含有α5亚基的GABAA受体具有活性的化合物[WO2006/045429、WO2006/045430、WO2007/042421、WO2009/071476]。现已发现，这些化合物中的某些对含有α5亚基的GABAA受体具有有益的药理学性质以及出色的结合及功能选择性。结果证实以下假设：具有这样的药理学性质的化合物可改善认知功能而无CNS介导的副作用，包括焦虑和/或惊厥[BallardTM等认，Psychopharmacology，(2009)202：207-223]。

本发明中所用的药学活性化合物是改善认知的对含有α5亚基的GABAA受体具有结合选择性及功能选择性二者的组合的分子。重要的是，本发明中所用的药学活性化合物在毒理学研究中所测试的暴露下无致焦虑或促惊厥效应。

在本发明中已发现，选择性的GABAAα5负性变构调节剂对数种动物模型具有促认知效应，但不会致焦虑或促惊厥。给Ts65Dn及对照(整倍体)小鼠长期施用本发明所用的活性药物化合物，并实施一系列行为测试，包括评估感觉运动能力、焦虑及认知。本发明所用的活性药物化合物会改善Ts65Dn小鼠(但对照小鼠并不如此)在Morris水迷宫(Morriswatermaze)中的表现，且并不影响Ts65Dn或对照小鼠的感觉运动能力、一般活动、运动协调或焦虑。从经治疗的Ts65Dn及对照小鼠获得的血液样品中的活性药物化合物的血浆浓度与活体内结合模拟研究中的25-75％的GABAAα5受体占有水平相关。重要的是，这些实验证实了脑GABAAα5受体的选择性占有，且强化以下观点：双重结合及功能选择性会赋予理想的认知 增强效应性质，且没有与对其它GABAA受体亚型的活性有关的不希望有的副作用。

令人感兴趣的是，已显示，长期施用本发明所用的活性药物化合物：

1.不改变Ts65Dn或对照小鼠的所测试感觉运动能力中的任一种；

2.不影响在转杆测试(Rotarodtest)中的运动协调；

3.不改变在饲养笼中在周期的明或暗阶段期间的自发运动活动；

4.在旷场测试(OpenFieldtest)中不改变Ts65Dn及对照小鼠的焦虑或运动活动；

5.在孔板测试(HoleBoardtest)中降低赋形剂治疗的Ts65Dn小鼠中发现的活动过度；

6.在Morris水迷宫中改善学习(acquisition)及暗示(cued)期期间Ts65Dn小鼠的表现。

进一步发现，本发明所用的活性药物化合物：

a)在所述化合物不增强对照小鼠的学习的条件下逆转Nfl+/-突变小鼠的空间学习缺陷；

b)在掩蔽Nfl+/-小鼠的行为缺陷的条件下不影响其表现；

c)不影响Nfl+/-及对照小鼠的转杆测试中的运动学习；

d)可用作与NFl有关的认知缺陷的潜在治疗。

除非另外定义，否则本文所用的所有技术及科学术语都具有与领域的普通技术人员通常所理解含义相同的含义。尽管与本文所述的那些类似或等效的方法及材料可用于本发明的实践或测试，但下文阐述适宜的方法及材料。

除非另外指出，否则本申请中所用的命名是基于IUPAC系统命名法。

除非另外指出，否则本文结构中的碳、氧、硫或氮原子上出现的任何空缺化合价都表示存在氢。

本文所述的定义不管所讨论术语单独或组合出现均适用。本发明涵盖，本文所述的定义可经增补以形成化学上相关的组合，例如“杂环烷基-芳基”、“卤代烷基-杂芳基”、“芳基-烷基-杂环烷基”或“烷氧基-烷基”。组合的最后一个成员是按颠倒顺序被该组合的其它成员取代的基团。

当指示取代基的数目时，术语“一个或多个”是指从一个取代基至最高 可能取代数目的范围，即被取代基替代一个氢至最多替代所有氢。

术语“任选的”或“任选地”表示，随后阐述的事件或情况可能但未必发生，且该描述包括该事件或情况发生的情形以及该事件或情况不发生的情形。

术语“取代基”表示替代母体分子上的氢原子的原子或原子团。

术语“取代的”是指，所指定的基团带有一个或多个取代基。在任意基团可以携带多个取代基并且提供多种可能取代基的情况下，所述取代基独立地选择并且不需要是相同的。术语“未取代的”是指，所指定的基团不带有取代基。术语“任选地取代的”是指，所指定的基团是未取代的或者被一个或多个取代基取代，该取代基独立地选自可能取代基的组。当指示取代基的数目时，术语“一个或多个”是指从一个取代基至最高可能取代数目，即被取代基替代一个氢至最多替代所有氢。

术语“本发明中所用的化合物”及“本发明所用的化合物”表示式(I)或(II)化合物及其立体异构体、互变异构体、溶剂化物和盐(例如，药学上可接受的盐)。

术语“药学上可接受的盐”表示不是在生物学上或其它方面不希望的盐。药学上可接受的盐包括酸加成盐及碱加成盐。

术语“药学上可接受的酸加成盐”表示使用以下酸形成的那些药学上可接受的盐：无机酸，例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、碳酸、磷酸；及有机酸，其选自脂族、脂环族、芳族、芳脂族、杂环、羧酸和磺酸类的有机酸，如甲酸、乙酸、丙酸、乙醇酸、葡糖酸、乳酸、丙酮酸、草酸、苹果酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、天冬氨酸、抗坏血酸、谷氨酸、邻氨基苯甲酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、双羟萘酸(embonicacid)、苯乙酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等。

术语“药学上可接受的碱加成盐”表示使用有机或无机碱形成的那些药学上可接受的盐。可接受的无机碱的实例包括钠、钾、铵、钙、镁、铁、锌、铜、锰和铝盐。衍生自药学上可接受的有机无毒碱的盐包括：伯胺、仲胺和叔胺、被取代胺(包括天然存在的被取代胺)、环胺以及碱性离子交换树脂的盐，诸如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、2-二乙基氨基乙醇、氨丁三醇、二环己胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖 啡因、普鲁卡因(procaine)、海巴明(hydrabamine)、胆碱、甜菜碱、乙二胺、葡糖胺、甲基还原葡糖胺、可可碱、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶和多胺树脂的盐。

术语“卤代”、“卤素”和“卤化物”在本文中可互换地使用，且表示氟、氯、溴或碘。尤其地，卤素表示F、C1或Br，最特别是指F。

术语“烷基”表示具有1个至12个碳原子、尤其1个至7个碳原子、更尤其1个至4个碳原子的单价直链或支链饱和烃基，例如，甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基。尤其地，烷基表示甲基或异丙基，最特别是指甲基。

术语“烷氧基”表示式-O-R’的基团，其中R’是烷基。烷氧基部分的实例包括甲氧基、乙氧基、异丙氧基和叔丁氧基。

术语“卤代烷基”表示，烷基的至少一个氢原子已经被相同或不同的卤素原子、尤其氟原子替代的烷基。卤代烷基的实例包括单氟-、二氟-或三氟-甲基、-乙基或-丙基，例如3，3，3-三氟丙基、2-氟乙基、2，2，2-三氟乙基、氟甲基或三氟甲基。术语“全卤代烷基”表示，烷基的所有氢原子都已经被相同或不同的卤素原子替代的烷基。尤其地，卤代烷基表示单氟甲基和二氟甲基。

术语“羟烷基”表示，烷基的至少一个氢原子已经被羟基替代的烷基。羟烷基的实例包括：羟基甲基、2-羟乙基、2-羟基丙基、3-羟基丙基、1-(羟基甲基)-2-甲基丙基、2-羟基丁基、3-羟基丁基、4-羟基丁基、2，3-二羟基丙基、2-羟基-1-羟基甲基乙基、2，3-二羟基丁基、3，4-二羟基丁基或2-(羟基甲基)-3-羟基丙基。

术语“杂环烷基”是指，4至9个环原子的一价饱和或部分不饱和单环或双环系统，其包含1、2或3个选自N、O和S的环杂原子，剩余环原子是碳。双环是指由具有两个共同环原子的两个环组成，即分隔所述两个环的桥是单键或一个或两个环原子的链。单环饱和杂环烷基的实例是：氮杂环丁基、吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢-噻吩基、吡唑烷基、咪唑烷基、噁唑烷基、异噁唑烷基、噻唑烷基、哌啶基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、1，1-二氧代-硫代吗啉-4-基、氮杂环庚基、二氮杂环庚基、高哌嗪基或氧氮杂环庚基。二环饱和杂环烷基的实例是： 8-氮杂-二环[3.2.1]辛基、奎宁环基、8-氧杂-3-氮杂-二环[3.2.1]辛基、9-氮杂-二环[3.3.1]壬基、3-氧杂-9-氮杂-二环[3.3.1]壬基或3-硫杂-9-氮杂-二环[3.3.1]壬基。部分不饱和杂环烷基的实例是二氢呋喃基、咪唑啉基、二氢-噁唑基、四氢-吡啶基或二氢吡喃基。杂环烷基可任选地如本文所述被取代。尤其地，杂环烷基表示吗啉基、硫代吗啉基、二氧代硫代吗啉基、2-氧杂-6-氮杂-螺[3.3]庚-6-基、吡咯烷基和氧代吡咯烷基。最特别地，杂环烷基表示吗啉基、硫代吗啉基或二氧代硫代吗啉基。

术语“杂环烷基烷基”表示，烷基的至少一个氢原子被杂环烷基替代的烷基。杂环烷基烷基的实例包括吡咯烷基-甲基和吡咯烷基-甲基。

术语“芳基”表示，包含6个至10个碳环原子的单价芳香族碳环单环或二环环系统。芳基部分的实例包括苯基及萘基。芳基可任选地如本文所述被取代。特定芳基是苯基和单氟-苯基。

术语“杂芳基”表示，具有5个至12个环原子的单价芳香族杂环单环或二环环系统，其包含1个、2个、3个或4个选自N、O和S的杂原子，其余环原子均为碳。杂芳基部分的实例包括：吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、三唑基、噁二唑基、噻二唑基、四唑基、吡啶基、吡嗪基、吡唑基、哒嗪基、嘧啶基、三嗪基、氮杂环庚三烯基、二氮杂环庚三烯基、异噁唑基、苯并呋喃基、异噻唑基、苯并噻吩基、吲哚基、异吲哚基、异苯并呋喃基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、苯并噁二唑基、苯并噻二唑基、苯并三唑基、嘌呤基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、咔唑基或吖啶基。杂芳基可任选地如本文所述被取代。尤其地，杂芳基表示吡啶基、单氟吡啶基和5，6-二氢-8H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡嗪-7-基，最尤其是指吡啶基和单氟吡啶基。

术语“氧代”表示，二价氧原子＝O。

术语“活性药物成分”(或“API”)表示药物组合物中具有特定生物活性的化合物。

术语“药学上可接受的”表示材料的属性，该材料可用于制备通常安全的、无毒的且并非生物学上或其它方面不希望的药物组合物，且可被接受用于兽医以及人类药物用途。

术语“药学上可接受的赋形剂”表示不具有治疗活性且无毒性的任意成分，例如用于配制药物产品的崩解剂、粘合剂、填充剂、溶剂、缓冲剂、张力剂、稳定剂、抗氧化剂、表面活性剂或润滑剂。

术语“药物组合物”(或“组合物”)表示，包含治疗有效量的活性药物成分以及药学上可接受的赋形剂的混合物或溶液，其要施用给有此需要的哺乳动物，例如人类。

术语“调节剂”表示，与靶受体相互作用的分子。相互作用包括例如激动、拮抗或反向激动活性。

术语“抑制剂”表示这样的化合物，其与特定配体竞争结合至特定受体、减弱或阻止特定配体结合至特定受体，或者其减弱或阻止特定蛋白功能的抑制。

术语“激动剂”表示这样的化合物，其对受体结合位点具有亲和力且增强受体介导的反应的活性，如例如Goodman和Gilman的“ThePharmacologicalBasisofTherapeutics，第7版”，第35页，MacmillanPubl.Company，Canada，1985中所定义。“完全激动剂”实现完全反应，而“部分激动剂”即使占有全部受体群体也实现小于完全激活的效应。“逆激动剂”通过结合至相同激动剂结合位点而产生与激动剂相反的效应，或通过结合不同变构结合位点而减弱激动剂的效应。

术语“拮抗剂”表示，减弱或阻止其它化合物或受体位点的作用的化合物，如例如Goodman和Gilman的“ThePharmacologicalBasisofTherapeutics，第7版”，第35页MacmillanPubl.Company，Canada，1985中所定义。具体而言，拮抗剂表示，削弱激动剂的效应的化合物。“竞争性拮抗剂”结合至与激动剂相同的位点，但不激活该位点，由此阻断激动剂的作用。“非竞争性拮抗剂”结合至受体上的变构(非激动剂)位点以阻止受体激活。“可逆拮抗剂”非共价结合至受体，因此可被“洗掉(Washedout)”。“不可逆拮抗剂”共价结合至受体，且不会通过竞争配体或洗涤而被替换。

术语“变构调节剂”表示这样的化合物，其结合至受体的不同于激动剂结合位点的位点(“变构位点”)。其诱导受体的构象变化，这又会改变受体对内源配体或激动剂的亲和力。“正性变构调节剂”使亲和力增加，而“负性变构调节剂”(NAM)使亲和力降低，且因此间接降低受体的活性。在本发 明中，负性变构调节剂具体地结合至苯并二氮杂结合位点，且对含有α5亚基的GABAA受体具有反向激动选择性。

术语“抑制常数”(Ki)表示，特定抑制剂对受体的绝对结合亲和力。其利用竞争结合测定来测量，且等于该特定抑制剂在无竞争配体(例如放射性配体)存在的情况下占有50％的受体时的浓度。可将Ki值对数转化成pKi值(-logKi)，其中数值提高表示效能依指数级升高。

术语“次于最大有效浓度(submaximaleffectiveconcentration)”(EC10)表示，获得特定效应的最大值的10％时所需该特定化合物的浓度。

术语“结合选择性”表示，特定化合物对两种或更多种不同受体亚型的结合亲和力之间的比值。若特定化合物的结合选择性是10或更大，更尤其地若其结合选择性是20或更大，最特别地若其结合选择性是50或更大，则称该特定化合物“具有结合选择性”。

术语“功能选择性”表示，特定化合物对不同受体亚型的不同调节程度，例如作为针对一种特定受体亚型的逆激动剂，而作为另一受体亚型的拮抗剂。在本发明中，若化合物作为GABAAα5β3γ2受体亚型的逆激动剂而使GABA的效应降低超过30％，却对其它GABAA受体亚型的影响小于15％，尤其小于10％，则称该化合物尤其具有功能选择性。

术语“病症”、“缺陷”、“失能”、“障碍”、“疾病”或“疾病状况”可互换地用以表示任意疾病、病症、症状、障碍或适应证。

术语“神经发育缺陷”表示神经发育障碍，其中脑或中枢神经系统的生长及发育已经受损(ReynoldsCR等认，Handbookofneurodevelopmentalandgeneticdisordersinchildren(1999)GuilfordPress，NY)。

术语“GABA能抑制”表示，GABA介导的对脊椎动物中的成熟神经元具有抑制性的神经传递(BernardC等人，Epilepsia(2000)41(S6)：S90-S95)。

术语“过度GABA能抑制”表示GABA介导的神经传递增加，其导致兴奋性/抑制性(E/I)电路平衡遭受破坏而倾向于抑制(xleschevnikovA.M.等人，J.Neurosci.(2004)24：8153-8160)。

术语“认知缺陷”或“认知损害”描述作为认知表现的障碍的任意特征。该术语表示总体智能表现的缺陷，例如精神发育迟滞，其表示认知能力的特定缺陷(学习障碍、诵读困难)，或者其表示药物诱导的记忆损害。认知 缺陷可为先天性的，或由诸如脑损伤、神经障碍或精神疾患等环境因素引起。术语“唐氏综合征认知缺陷”或“唐氏综合征认知损害”表示，表现出染色体21的三体化的受试者的认知缺陷，具体地为导致所述受试者的智力功能的轻微至极度损害的学习、记忆及语言异常。

术语“智能障碍”(ID)或“精神发育迟滞”表示，由理解新资讯或复杂信息、学习新技能的能力显著降低且独立应付的能力降低表现的早期发作认知损害，其在成年期之前开始且对发育有持久影响。

术语“促认知的”描述减轻或逆转诸如意识错乱、定向障碍、谵妄或认知缺陷等病症或改善认知的任意特征。

术语“1型神经纤维瘤病”(NF1)表示，由染色体17上的基因突变引起的病症，所述基因编码与细胞内信号传导有关的称为神经纤维瘤蛋白的蛋白质(CuiY等人，Cell(2008)1735：549-60)。

术语“孤独症”表示，特征在于社会互动及交流受到损害及行为有限且重复的神经发育病症(AmericanPsychiatricAssociationInc.，DiagnosticandStatisticalManualofMentalDisorders(DSM-IV-TR)(2000)第4版)。

术语“卒中”是由血液至脑的供应失调而引起的快速发展的脑功能丧失。这可由堵塞(血栓形成、动脉栓塞)造成的缺血(缺少血流量)或出血而引起(SimsNR等人，BiochimicaetBiophysicaActa(2009)1802(1)：80-91)。

术语“卒中后恢复”表示，在卒中后恢复受损脑功能的能力(DimyanM.A.等人，NatRevNeurol.(2011)7(2)：76-85)。

术语疾病状况的“治疗(treating或treatment)”包括(1)预防疾病状况，即使疾病状况的临床症状不在受试者中发展，所述受试者可暴露于该疾病状况或易患该疾病状况，但尚未经历或呈现该疾病状况的症状，(2)抑制疾病状况，即，阻滞疾病状况或其临床症状的发展，或(3)减轻疾病状况，即，使疾病状况或其临床症状暂时或永久消退。

术语“治疗有效量”表示，当施用给受试者时实现以下效果的本发明化合物的量：(i)治疗或预防特定疾病、病症或障碍，(ii)削弱、改善或消除特定疾病、病症或障碍的一种或多种症状，或(iii)预防或延缓本文所述特定疾病、病症或障碍的一种或多种症状的发作。治疗有效量将随以下因素而变化：化合物、所治疗的疾病状况、所治疗疾病的严重程度、受 试者的年龄及相对健康状况、施用途径及形式、主治医师或兽医从业人员的判断及其它因素。

术语“受试者”或“患者”表示，动物，更尤其为脊椎动物。在某些实施方案中，脊椎动物是哺乳动物。哺乳动物包括人类；非人类灵长类动物，例如黑猩猩及其它猿及猴类；农场动物，例如牛、马、绵羊、山羊及猪；家养动物，例如兔、狗及猫；实验室动物，包括啮齿类动物，例如大鼠、小鼠及豚鼠。在某些实施方案中，哺乳动物是人类。术语受试者不表示特定年龄或性别。

具体实施方式

详言之，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，所述中枢神经系统(CNS)病症是由导致皮质及海马中过度GABA能抑制的神经发育缺陷引起。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，所述中枢神经系统(CNS)病症是由导致皮质及海马中过度GABA能抑制的神经发育缺陷引起，其中所述CNS病症选自唐氏综合征认知缺陷、孤独症认知缺陷、I型神经纤维瘤病认知缺陷或卒中后认知缺陷。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，所述中枢神经系统(CNS)病症是由导致皮质及海马中过度GABA能抑制的神经发育缺陷引起，其中所述CNS病症选自唐氏综合征认知缺陷。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，所述中枢神经系统(CNS)病症是由导致皮质及海马中过度GABA能抑制的神经发育缺陷引起，其中所述CNS病症选自孤独症认知缺陷。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，所述中枢神经系统(CNS)病症是由导致皮质及海马中过度GABA能抑制的神经发育缺陷引起，其中所述CNS病症选自I型神经纤维瘤病认知缺陷。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，所述中枢神经系统(CNS)病症是由导致皮质及海马中过度GABA能抑制的神经发育缺陷引起，其中所述CNS病症选自卒中后认知缺陷。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，所述中枢神经系统(CNS)病症是由导致皮质及海马中过度GABA能抑制的神经发育缺陷引起，其中所述CNS病症选自智能障碍。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是BZD结合位点的配体，且作为含有α5亚基的GABAA受体的逆激动剂。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是GABAA受体的BZD结合位点的配体，且作为GABAAα5β3γ2受体亚型的逆激动剂。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂对含有α5亚基的GABAA受体具有结合选择性。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂对含有α5亚基的GABAA受体具有功能选择性。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂与人GABAAα5β3γ2受体亚型结合的结合选择性是对人GABAAα1β2/3γ2、α2β3γ2和α3β3γ2受体亚型的结合亲合力的10倍以上。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂对含有α5亚基的GABAA受体具有结合选择性。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂如下表现出功能选择性：作为人GABAAα5β3γ2受体亚型的逆激动剂，使GABA的效应降低30％以 上，且另外对人GABAAα1β2/3γ2、α2β3γ2和α3β3γ2受体亚型的GABA效应的影响小于15％。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂选自式(I)化合物或式(II)化合物或其药学上可接受的盐，

其中

R¹是氢、卤素、烷基、卤代烷基或氰基；

R²是氢、卤素、烷基、卤代烷基或氰基；

R³是氢、烷基或杂环烷基烷基，其中杂环烷基烷基任选地被一个或多个下述取代基取代：羟基、氧代、烷基、烷氧基、卤代烷基、羟烷基、卤素或氰基；

R⁴是芳基或杂芳基，所述芳基或杂芳基各自任选地被1、2或3个卤素取代；

R⁵是氢、烷基、卤代烷基或羟烷基；

R⁶是-C(O)-NR⁷R⁸

R⁷是氢；

R⁸是烷基；

或者R⁷和R⁸与它们连接的氮一起形成杂环烷基或杂芳基，所述杂环烷基或杂芳基各自任选地被一个或多个下述取代基取代：羟基、氧代、烷基、烷氧基、卤代烷基、羟烷基、卤素或氰基。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂选自式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其中

R¹是氢、卤素、烷基、卤代烷基或氰基；

R²是氢、卤素、烷基、卤代烷基或氰基；

R³是氢、烷基或杂环烷基烷基，其中杂环烷基烷基任选地被一个或多个下述取代基取代：羟基、氧代、烷基、烷氧基、卤代烷基、羟烷基、卤素或氰基。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂选自式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其中

R¹是氢、卤素、卤代烷基或氰基；

R²是卤素或卤代烷基；

R³是氢、烷基或被1个氧代取代的杂环烷基烷基。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂选自：

3-氟-10-氟甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

3-溴-10-二氟甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

3-氰基-10-二氟甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

10-二氟甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

3-氯-10-氟甲基-6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

10-氯-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

3，10-二氯-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

10-氯-3-氰基-6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

10-氯-3-二氟甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

3-溴-10-氯-6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

10-溴-3-氟-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

3-溴-10-甲基-6-(2-氧代-吡咯烷-1-基甲基)-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是3-溴-10-二氟甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂不是3-溴-10-二氟甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂选自式(II)化合物或其药学上可接受的盐，其中

R⁴是芳基或杂芳基，所述芳基或杂芳基各自任选地被1、2或3个卤素取代；

R⁵是氢、烷基、卤代烷基或羟烷基；

R⁶是-C(O)-NR⁷R⁸；

R⁷是氢；

R⁸是烷基；

或者R⁷和R⁸与它们连接的氮一起形成杂环烷基或杂芳基，所述杂环烷基或杂芳基各自任选地被一个或多个下述取代基取代：羟基、氧代、烷基、烷氧基、卤代烷基、羟烷基、卤素或氰基。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂选自式(II)化合物或其药学上可接受的盐，其中

R⁴是芳基或杂芳基，所述芳基或杂芳基各自任选地被1个卤素取代；

R⁵是烷基；

R⁶是C(O)-NR⁷R⁸；

R⁷是氢，且R⁸是烷基；

或者R⁷和R⁸与它们连接的氮一起，形成任选地被1个或2个氧代取 代的杂环烷基，或形成杂芳基。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂选自：

N-异丙基-6-(5-甲基-3-苯基-异噁唑-4-基甲氧基)-烟酰胺；

(5，6-二氢-8H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡嗪-7-基)-[6-(5-甲基-3-苯基-异噁唑-4-基甲氧基)-吡啶-3-基]-甲酮；

[6-(5-甲基-3-苯基-异噁唑-4-基甲氧基)-吡啶-3-基]-(2-氧杂-6-氮杂-螺[3.3]庚-6-基)-甲酮；

(1，1-二氧代-1，6-硫代吗啉-4-基)-{6-[3-(4-氟-苯基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-甲酮；

{6-[3-(4-氯-苯基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-吗啉-4-基-甲酮；

[6-(5-甲基-3-吡啶-2-基-异噁唑-4-基甲氧基)-吡啶-3-基]-吗啉-4-基-甲酮；

6-[3-(5-氟-吡啶-2-基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-异丙基-烟酰胺；

(1，1-二氧代-1，6-硫代吗啉-4-基)-{6-[3-(5-氟-吡啶-2-基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-甲酮；

{6-[3-(5-氯-吡啶-2-基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-硫代吗啉-4-基-甲酮；或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是N-异丙基-6-(5-甲基-3-苯基-异噁唑-4-基甲氧基)-烟酰胺；或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是(5，6-二氢-8H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡嗪-7-基)-[6-(5-甲基-3-苯基-异噁唑-4-基甲氧基)-吡啶-3-基]-甲酮；或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是[6-(5-甲基-3-苯基-异噁唑-4-基甲氧基)-吡啶-3-基]-(2-氧杂-6-氮杂-螺[3.3]庚-6-基)-甲酮；或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是(1，1-二氧代-1，6-硫代吗啉-4-基)-{6-[3-(4-氟-苯基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-甲酮；或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是{6-[3-(4-氯-苯基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-吗啉-4-基-甲酮；或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是[6-(5-甲基-3-吡啶-2-基-异噁唑-4-基甲氧基)-吡啶-3-基]-吗啉-4-基-甲酮；或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是6-[3-(5-氟-吡啶-2-基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-异丙基-烟酰胺；或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是(1，1-二氧代-1，6-硫代吗啉-4-基)-{6-[3-(5-氟-吡啶-2-基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-甲酮；或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是{6-[3-(5-氯-吡啶-2-基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-硫代吗啉-4-基-甲酮；或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂单独地使用，或者与第二种活性药物化合物联合地顺序或同时使用。

在一个具体实施方案中，本发明涉及一种用于在需要这种治疗的受试者中治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的方法，所述中枢神经系统(CNS)病症是由导致皮质及海马中过度GABA能抑制的神经发育缺陷引起，所述方法包括：给所述受试者施用治疗有效量的药学上可接受形式的本文所述的GABAAα5负性变构调节剂。

在一个具体实施方案中，本发明涉及一种用于在需要这种治疗的受试 者中治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的方法，其中所述CNS病症选自唐氏综合征认知缺陷，所述方法包括：给所述受试者施用治疗有效量的药学上可接受形式的本文所述的GABAAα5负性变构调节剂。

在一个具体实施方案中，本发明涉及一种用于在需要这种治疗的受试者中治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的方法，其中所述CNS病症选自孤独症认知缺陷，所述方法包括：给所述受试者施用治疗有效量的药学上可接受形式的本文所述的GABAAα5负性变构调节剂。

在一个具体实施方案中，本发明涉及一种用于在需要这种治疗的受试者中治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的方法，其中所述CNS病症选自I型神经纤维瘤病认知缺陷，所述方法包括：给所述受试者施用治疗有效量的药学上可接受形式的本文所述的GABAAα5负性变构调节剂。

在一个具体实施方案中，本发明涉及一种用于在需要这种治疗的受试者中治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的方法，其中所述CNS病症选自卒中后认知缺陷，所述方法包括：给所述受试者施用治疗有效量的药学上可接受形式的本文所述的GABAAα5负性变构调节剂。

在一个具体实施方案中，本发明涉及一种用于在需要这种治疗的受试者中治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的方法，其中所述CNS病症选自智能障碍(disability)，所述方法包括：给所述受试者施用治疗有效量的药学上可接受形式的本文所述的GABAAα5负性变构调节剂。

在一个具体实施方案中，本发明涉及一种药物组合物，其包含药学上可接受形式的本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，所述药物组合物用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，所述中枢神经系统(CNS)病症是由导致皮质及海马中过度GABA能抑制的神经发育缺陷引起。

在一个具体实施方案中，本发明涉及一种药物组合物，其包含药学上可接受形式的本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，所述药物组合物用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述CNS 病症选自唐氏综合征认知缺陷。

在一个具体实施方案中，本发明涉及一种药物组合物，其包含药学上可接受形式的本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，所述药物组合物用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述CNS病症选自孤独症认知缺陷。

在一个具体实施方案中，本发明涉及一种药物组合物，其包含药学上可接受形式的本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，所述药物组合物用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述CNS病症选自I型神经纤维瘤病认知缺陷。

在一个具体实施方案中，本发明涉及一种药物组合物，其包含药学上可接受形式的本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，所述药物组合物用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述CNS病症选自卒中后认知缺陷。

在一个具体实施方案中，本发明涉及一种药物组合物，其包含药学上可接受形式的本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，所述药物组合物用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述CNS病症选自智能障碍。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂用于制备药物的用途，所述药物用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，所述中枢神经系统(CNS)病症是由导致皮质及海马中过度GABA能抑制的神经发育缺陷引起。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂用于制备药物的用途，所述药物用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述CNS病症选自唐氏综合征认知缺陷。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂用于制备药物的用途，所述药物用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述CNS病症选自孤独症认知缺陷。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂用于制备药物的用途，所述药物用于治疗、预防中枢神经系统 (CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述CNS病症选自I型神经纤维瘤病认知缺陷。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂用于制备药物的用途，所述药物用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述CNS病症选自卒中后认知缺陷。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂用于制备药物的用途，所述药物用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述CNS病症选自智能障碍。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，所述中枢神经系统(CNS)病症是由导致皮质及海马中过度GABA能抑制的神经发育缺陷引起。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述CNS病症选自唐氏综合征认知缺陷。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述CNS病症选自孤独症认知缺陷。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述CNS病症选自I型神经纤维瘤病认知缺陷。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述CNS病症选自卒中后认知缺陷。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述CNS病症选自智能障碍。在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，所述中枢神经系统(CNS)病症是由导致皮质及海马中过度GABA能抑制的神经发育缺陷引起，其中所述CNS病症选自唐氏 综合征认知缺陷，且其中所述GABAAα5负性变构调节剂是3-溴-10-二氟甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，所述中枢神经系统(CNS)病症是由导致皮质及海马中过度GABA能抑制的神经发育缺陷引起，其中所述CNS病症选自唐氏综合征认知缺陷，且其中所述GABAAα5负性变构调节剂是(1，1-二氧代-1，6-硫代吗啉-4-基)-{6-[3-(4-氟-苯基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-甲酮；或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及一种GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，所述中枢神经系统(CNS)病症是由导致皮质及海马中过度GABA能抑制的神经发育缺陷引起，其中所述CNS病症选自唐氏综合征认知缺陷，且其中所述GABAAα5负性变构调节剂是3-溴-10-二氟甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及一种GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，所述中枢神经系统(CNS)病症是由导致皮质及海马中过度GABA能抑制的神经发育缺陷引起，其中所述CNS病症选自唐氏综合征认知缺陷，且其中所述GABAAα5负性变构调节剂是(1，1-二氧代-1，6-硫代吗啉-4-基)-{6-[3-(4-氟-苯基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-甲酮；或其药学上可接受的盐。

在另一个实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，所述中枢神经系统(CNS)病症与皮质及海马中过度GABA能抑制有关，所述GABAAα5负性变构调节剂选自式(I)化合物或式(II)化合物或其药学上可接受的盐

其中

R¹是氢、卤素、烷基、卤代烷基或氰基；

R²是氢、卤素、烷基、卤代烷基或氰基；

R³是氢、烷基或杂环烷基烷基，其中杂环烷基烷基任选地被一个或多个下述取代基取代：羟基、氧代、烷基、烷氧基、卤代烷基、羟烷基、卤素或氰基；

R⁴是芳基或杂芳基，所述芳基或杂芳基各自任选地被1、2或3个卤素取代；

R⁵是氢、烷基、卤代烷基或羟烷基；

R⁶是-C(O)-NR⁷R⁸

R⁷是氢；

R⁸是烷基；

或者R⁷和R⁸与它们连接的氮一起形成杂环烷基或杂芳基，所述杂环烷基或杂芳基各自任选地被一个或多个下述取代基取代：羟基、氧代、烷基、烷氧基、卤代烷基、羟烷基、卤素或氰基。

在一个具体实施方案中，本发明涉及如上所述的GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，所述中枢神经系统(CNS)病症与皮质及海马中过度GABA能抑制有关，其中所述皮质及海马中过度GABA能抑制是由神经发育缺陷引起。

在一个具体实施方案中，本发明涉及如上所述的GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，所述中枢神经系统(CNS)病症是由导致皮质及海马中过度GABA能抑制的神经发育缺陷引起。

在一个具体实施方案中，本发明涉及如上所述的GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，所述中枢神经系统(CNS)病症与皮质及海马中过度GABA能抑制有关，尤其是由神经发育缺陷引起，其中所述CNS病症选自唐氏综合征认知缺陷、孤独症认知缺陷或I型神经纤维瘤病认知缺陷。

在一个具体实施方案中，本发明涉及如上所述的GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，所述中枢神经系统(CNS)病症与皮质及海马中过度GABA能抑制有关，尤其是由神经发育缺陷引起，其中所述CNS病症是唐氏综合征认知缺陷。

在一个具体实施方案中，本发明涉及如上所述的GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，所述中枢神经系统(CNS)病症与皮质及海马中过度GABA能抑制有关，尤其是由神经发育缺陷引起，其中所述CNS病症是孤独症认知缺陷。

在一个具体实施方案中，本发明涉及如上所述的GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，所述中枢神经系统(CNS)病症与皮质及海马中过度GABA能抑制有关，尤其是由神经发育缺陷引起，其中所述CNS病症是I型神经纤维瘤病认知缺陷。

在一个具体实施方案中，本发明涉及如上所述的GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，所述中枢神经系统(CNS)病症与皮质及海马中过度GABA能抑制有关，其中所述CNS病症的特征在于卒中后失能。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂与人GABAAα5β3γ2受体亚型结合的结合选择性是对人GABAAα1β2/3γ2、α2β3γ2和α3β3γ2受体亚型的结合亲合力的10倍以上。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂如下表现出功能选择性：作为 人GABAAα5β3γ2受体亚型的逆激动剂，使GABA的效应降低30％以上，且另外对人GABAAα1β2/3γ2、α2β3γ2和α3β3γ2受体亚型的GABA效应的影响小于15％。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂选自式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其中R¹、R²和R³如本文中所定义。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂选自式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其中R¹是氢、卤素、卤代烷基或氰基；R²是卤素或卤代烷基；R³是氢、烷基或被1个氧代取代的杂环烷基烷基。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂选自：

3-氟-10-氟甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

3-溴-10-二氟甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

3-氰基-10-二氟甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

10-二氟甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

3-氯-10-氟甲基-6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

10-氯-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

3，10-二氯-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

10-氯-3-氰基-6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

10-氯-3-二氟甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

3-溴-10-氯-6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

10-溴-3-氟-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

3-溴-10-甲基-6-(2-氧代-吡咯烷-1-基甲基)-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂选自式(II)化合物或其药学上可接受的盐，其中R⁴、R⁵和R⁶如本文中所定义。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂选自式(II)化合物或其药学上可接受的盐，其中R⁴是芳基或杂芳基，所述芳基或杂芳基各自任选地被1个卤素取代；R⁵是烷基；R⁶是C(O)-NR⁷R⁸；R⁷是氢，且R⁸是烷基；或R⁷和R⁸与它们连接的氮一起，形成任选地被1个或2个氧代取代的杂环烷基，或形成杂芳基。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂选自：

N-异丙基-6-(5-甲基-3-苯基-异噁唑-4-基甲氧基)-烟酰胺；

(5，6-二氢-8H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡嗪-7-基)-[6-(5-甲基-3-苯基-异噁唑-4-基甲氧基)-吡啶-3-基]-甲酮；

[6-(5-甲基-3-苯基-异噁唑-4-基甲氧基)-吡啶-3-基]-(2-氧杂-6-氮杂-螺[3.3]庚-6-基)-甲酮；

(1，1-二氧代-1，6-硫代吗啉-4-基)-{6-[3-(4-氟-苯基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-甲酮；

{6-[3-(4-氯-苯基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-吗啉-4-基-甲酮；

[6-(5-甲基-3-吡啶-2-基-异噁唑-4-基甲氧基)-吡啶-3-基]-吗啉-4-基-甲酮：

6-[3-(5-氟-吡啶-2-基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-异丙基-烟酰胺；

(1，1-二氧代-1，6-硫代吗啉-4-基)-{6-[3-(5-氟-吡啶-2-基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-甲酮；

{6-[3-(5-氯-吡啶-2-基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-硫代吗啉-4-基-甲酮；

或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是N-异丙基-6-(5-甲基-3-苯基-异噁唑-4-基甲氧基)-烟酰胺；或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是(5，6-二氢-8H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡嗪-7-基)-[6-(5-甲基-3-苯基-异噁唑-4-基甲氧基)-吡啶-3-基]-甲酮；或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是[6-(5-甲基-3-苯基-异噁唑-4-基甲氧基)-吡啶-3-基]-(2-氧杂-6-氮杂-螺[3.3]庚-6-基)-甲酮；或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是(1，1-二氧代-1，6-硫代吗啉-4-基)-{6-[3-(4-氟-苯基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-甲酮；或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是{6-[3-(4-氯-苯基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-吗啉-4-基-甲酮；或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂用 于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是[6-(5-甲基-3-吡啶-2-基-异噁唑-4-基甲氧基)-吡啶-3-基]-吗啉-4-基-甲酮；或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是6-[3-(5-氟-吡啶-2-基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-异丙基-烟酰胺；或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是(1，1-二氧代-1，6-硫代吗啉-4-基)-{6-[3-(5-氟-吡啶-2-基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-甲酮；或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是{6-[3-(5-氯-吡啶-2-基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-硫代吗啉-4-基-甲酮；或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂单独地使用，或者与第二种活性药物化合物联合地顺序或同时使用。

在一个具体实施方案中，本发明涉及一种在需要这种治疗的受试者中用于治疗、预防唐氏综合征认知缺陷、孤独症认知缺陷、I型神经纤维瘤病认知缺陷和/或延缓其进展、或者用于卒中后恢复的方法，所述方法包括：给所述受试者施用治疗有效量的药学上可接受形式的本文所述的GABAAα5负性变构调节剂。

在一个具体实施方案中，本发明涉及一种药物组合物，其包含药学上可接受形式的本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，所述药物组合物用于治疗、预防唐氏综合征认知缺陷、孤独症认知缺陷、I型神经纤维瘤病认知缺陷和/或延缓其进展、或者用于卒中后恢复。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防唐氏综合征认知缺陷、孤独症认知缺陷、I型神经纤维瘤病认知缺陷和/或延缓其进展、或者用于卒中后恢复。

在一个具体实施方案中，本发明涉及用于制备药物的本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，所述药物用于治疗、预防唐氏综合征认知缺陷、孤独症认知缺陷、I型神经纤维瘤病认知缺陷和/或延缓其进展、或者用于卒中后恢复。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂用于制备药物的用途，所述药物用于治疗、预防唐氏综合征认知缺陷、孤独症认知缺陷、I型神经纤维瘤病认知缺陷和/或延缓其进展、或者用于卒中后恢复。

在另一个实施方案中，本发明涉及一种GABAAα5负性变构调节剂，其选自式(I)化合物或式(II)化合物或其药学上可接受的盐，

其中

R¹是氢、卤素、烷基、卤代烷基或氰基；

R²是氢、卤素、烷基、卤代烷基或氰基；

R³是氢、烷基或杂环烷基烷基，其中杂环烷基烷基任选地被一个或多个下述取代基取代：羟基、氧代、烷基、烷氧基、卤代烷基、羟烷基、卤素或氰基；

R⁴是芳基或杂芳基，所述芳基或杂芳基各自任选地被1、2或3个卤素取代；

R⁵是氢、烷基、卤代烷基或羟烷基；

R⁶是-C(O)-NR⁷R⁸

R⁷是氢；

R⁸是烷基；

或者R⁷和R⁸与它们连接的氮一起形成杂环烷基或杂芳基，所述杂环烷基或杂芳基各自任选地被一个或多个下述取代基取代：羟基、氧代、烷基、烷氧基、卤代烷基、羟烷基、卤素或氰基；

所述GABAAα5负性变构调节剂用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，所述中枢神经系统(CNS)病症与皮质及海马中过度GABA能抑制有关。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，所述中枢神经系统(CNS)病症与由神经发育缺陷引起的皮质及海马中过度GABA能抑制有关。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，所述中枢神经系统(CNS)病症是由导致皮质及海马中过度GABA能抑制的神经发育缺陷引起。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，所述中枢神经系统(CNS)病症与皮质及海马中过度GABA能抑制有关，尤其是由神经发育缺陷引起，其中所述CNS病症选自唐氏综合征认知缺陷、孤独症认知缺陷或I型神经纤维瘤病认知缺陷。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，所述中枢神经系统(CNS)病症与皮质及海马中过度GABA能抑制有关，尤其是由神经发育缺陷引起，其中所述CNS病症是唐氏综合征认知缺陷。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，所述中枢神经系统(CNS)病症与皮质及海马中过度GABA能抑制有关，尤其是由神经发育缺陷引起，其中所述CNS病症是孤独症认知缺陷。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变 构调节剂，其用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，所述中枢神经系统(CNS)病症与皮质及海马中过度GABA能抑制有关，尤其是由神经发育缺陷引起，其中所述CNS病症是I型神经纤维瘤病认知缺陷。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，所述中枢神经系统(CNS)病症与皮质及海马中过度GABA能抑制有关，其中所述CNS病症的特征在于卒中后失能。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述GABAAα5负性变构调节剂与人GABAAα5β3γ2受体亚型结合的结合选择性是对人GABAAα1β2/3γ2、α2β3γ2和α3β3γ2受体亚型的结合亲合力的10倍以上。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述GABAAα5负性变构调节剂如下表现出功能选择性：作为人GABAAα5β3γ2受体亚型的逆激动剂，使GABA的效应降低30％以上，且另外对人GABAAα1β2/3γ2、α2β3γ2和α3β3γ2受体亚型的GABA效应的影响小于15％。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述GABAAα5负性变构调节剂选自式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其中R¹、R²和R³如本文中所定义。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述GABAAα5负性变构调节剂选自式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其中R¹是氢、卤素、卤代烷基或氰基；R²是卤素或卤代烷基；R³是氢、烷基或被1个氧代取代的杂环烷基烷基。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或 延缓其进展，其中所述GABAAα5负性变构调节剂选自：

3-氟-10-氟甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

3-溴-10-二氟甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

3-氰基-10-二氟甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

10-二氟甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

3-氯-10-氟甲基-6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

10-氯-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

3，10-二氯-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

10-氯-3-氰基-6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

10-氯-3-二氟甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

3-溴-10-氯-6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

10-溴-3-氟-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂

3-溴-10-甲基-6-(2-氧代-吡咯烷-1-基甲基)-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是3-溴-10-二氟甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述GABAAα5负性变构调节剂不是3-溴-10-二氟甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂或其药学上可接 觉的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述GABAAα5负性变构调节剂选自式(II)化合物或其药学上可接受的盐，其中R⁴、R⁵和R⁶如本文中所定义。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述GABAAα5负性变构调节剂选自式(II)化合物或其药学上可接受的盐，其中R⁴是芳基或杂芳基，所述芳基或杂芳基各自任选地被1个卤素取代；R⁵是烷基；R⁶是C(O)-NR⁷R⁸；R⁷是氢，且R⁸是烷基；或R⁷和R⁸与它们连接的氮一起，形成任选地被1个或2个氧代取代的杂环烷基，或形成杂芳基。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述GABAAα5负性变构调节剂选自：

N-异丙基-6-(5-甲基-3-苯基-异噁唑-4-基甲氧基)-烟酰胺；

(5，6-二氢-8H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡嗪-7-基)-[6-(5-甲基-3-苯基-异噁唑-4-基甲氧基)-吡啶-3-基]-甲酮；

[6-(5-甲基-3-苯基-异噁唑-4-基甲氧基)-吡啶-3-基]-(2-氧杂-6-氮杂-螺[3.3]庚-6-基)-甲酮；

(1，1-二氧代-1，6-硫代吗啉-4-基)-{6-[3-(4-氟-苯基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-甲酮；

{6-[3-(4-氯-苯基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-吗啉-4-基-甲酮；

[6-(5-甲基-3-吡啶-2-基-异噁唑-4-基甲氧基)-吡啶-3-基]-吗啉-4-基-甲酮；

6-[3-(5-氟-吡啶-2-基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-异丙基-烟酰胺；

(1，1-二氧代-1，6-硫代吗啉-4-基)-{6-[3-(5-氟-吡啶-2-基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-甲酮；

{6-[3-(5-氯-吡啶-2-基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-硫代吗 啉-4-基-甲酮；或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是N-异丙基-6-(5一甲基-3-苯基-异噁唑-4-基甲氧基)-烟酰胺；或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是(5，6-二氢-8H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡嗪-7-基)-[6-(5-甲基-3-苯基-异噁唑-4-基甲氧基)-吡啶-3-基]-甲酮；或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是[6-(5-甲基-3-苯基-异噁唑-4-基甲氧基)-吡啶-3-基]-(2-氧杂-6-氮杂-螺[3.3]庚-6-基)-甲酮；或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是(1，1-二氧代-1，6-硫代吗啉-4-基)-{6-[3-(4-氟-苯基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-甲酮或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是{6-[3-(4-氯-苯基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-吗啉-4-基-甲酮；或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是[6-(5-甲基-3-吡啶-2-基-异噁唑-4-基甲氧基)-吡啶-3-基]-吗啉-4-基-甲酮；或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是6-[3-(5-氟-吡啶-2-基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-异丙基-烟酰胺；或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是(1，1-二氧代-1，6-硫代吗啉-4-基)-{6-[3-(5-氟-吡啶-2-基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-甲酮；或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述GABAAα5负性变构调节剂是{6-[3-(5-氯-吡啶-2-基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-硫代吗啉-4-基-甲酮；或其药学上可接受的盐。

在一个具体实施方案中，本发明涉及本文所述的GABAAα5负性变构调节剂，其用于治疗、预防如本文所述的中枢神经系统(CNS)病症和/或延缓其进展，其中所述GABAAα5负性变构调节剂单独地使用，或者与第二种活性药物化合物联合地顺序或同时使用。

实施例

材料和方法

a动物

表1显示本研究中所用雄性动物的数目。十只对照及十只Ts65Dn6月龄小鼠在治疗开始时接受8581；16只对照及15只Ts65Dn5-6月龄小鼠在治疗开始时接受R1，另外两组对照(n＝13)及Ts65Dn(n＝13)小鼠接受赋形剂。

b.活性药物化合物

在本发明所用的活性药物化合物如先前在WO2006/045429、WO2006/045430、WO2007/042421和WO2009/071476中所述来制备：

化合物8580

3-氟-10-氟甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂如在WO2006/045430第17页实施例3中所述来制备。

化合物8581

3-溴-10-二氟甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂如在WO2006/045430第21页实施例7中所述来制备。

化合物8582

3-氰基-10-二氟甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂如在WO2006/045430第23页实施例13中所述来制备。

化合物8583

10-二氟甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂如在WO2006/045430第26页实施例16中所述来制备。

化合物8584

3-氯-10-氟甲基-6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂如在WO2006/045430第28页实施例20中所述来制备。

化合物8585

10-氯-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂如在WO2006/045429第15页实施例1中所述来制备。

化合物8586

3，10-二氯-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂如在WO2006/045429第23页实施例20中所述来制备。

化合物8587

10-氯-3-氰基-6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂如在WO2006/045429第37页实施例47中所述来制备。

化合物8588

10-氯-3-二氟甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂如在WO2006/045429第29页实施例32中所述来制备。

化合物8589

3-溴-10-氯-6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂如在WO2006/045429第33页实施例38中所述来制备。

化合物8590

10-溴-3-氟-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂如在WO2006/045429第37页实施例47中所述来制备。

化合物8591

3-溴-10-甲基-6-(2-氧代-吡咯烷-1-基甲基)-9H-咪唑并[1，5-a][1，2，4]三唑并[1，5-d][1，4]苯并二氮杂如在WO2007/042421第67页实施例101中所述来制备。

化合物O1

N-异丙基-6-(5-甲基-3-苯基-异噁唑-4-基甲氧基)-烟酰胺如在WO2009/071476第50页实施例26中所述来制备。

化合物P1

(5，6-二氢-8H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡嗪-7-基)-[6-(5-甲基-3-苯基-异噁唑-4-基甲氧基)-吡啶-3-基]-甲酮如在WO2009/071476第62页实施例75中所述来制备。

化合物Q1

[6-(5-甲基-3-苯基-异噁唑-4-基甲氧基)-吡啶-3-基]-(2-氧杂-6-氮杂-螺[3.3]庚-6-基)-甲酮如在WO2009/071476第64页实施例81中所述来制备。

化合物R1

(1，1-二氧代-1，6-硫代吗啉-4-基)-{6-[3-(4-氟-苯基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-甲酮如在WO2009/071476第75页实施例112中所述来制备。

化合物S1

{6-[3-(4-氯-苯基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-吗啉-4-基-甲酮如在WO2009/071476第78页实施例123中所述来制备。

化合物T1

[6-(5-甲基-3-吡啶-2-基-异噁唑-4-基甲氧基)-吡啶-3-基]-吗啉-4-基-甲酮如在WO2009/071476第123页实施例274中所述来制备。

化合物U1

6-[3-(5-氟-吡啶-2-基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-异丙基-烟酰胺如在WO2009/071476第127页实施例289中所述来制备。

化合物V1

(1，1-二氧代-1λ6-硫代吗啉-4-基)-{6-[3-(5-氟-吡啶-2-基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-甲酮如在WO2009/071476第127页实施例293中所述来制备。

化合物W1

{6-[3-(5-氯-吡啶-2-基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-硫代吗啉-4-基-甲酮如在WO2009/071476第132页实施例310中所述来制备。

已经通过与[³H]氟马西尼(flumazenil)(85Ci/mmol；Roche)竞争结合至表达大鼠(稳定转染)或人类(瞬时转染)α1β2/3γ2，α2β3γ2、α3β3γ2和α5β3γ2组成受体的HEK293细胞，测量上文活性药物化合物对GABAA受体亚型的结合亲和力。从表2a可以看出，本发明所用的活性药物化合物对α5β3γ2受体亚型展示高亲和力及相对于α1β2/3γ2、α2β3γ2和α3β3γ2受体亚型的良好选择性。

从表2b可以看出，本发明所用的活性药物化合物也展示实质功能选择性。针对在爪蟾(Xenopus)卵母细胞中表达的克隆受体测定亚型选择性效应。使人类重组GABAA受体在光滑爪蟾(Xenopuslaevis)卵母细胞中表达。在双微电极电压钳条件下，通过在共施加试验化合物之前及期间施加EC10的GABA，引起电流反应。将有试验化合物存在下的反应幅度表示为在药物添加之前幅度的百分比。

c.药物组合物

就小鼠研究而言，将本发明的活性药物化合物配制在巧克力-牛奶(Puleva，巴塞罗那，西班牙)中。以20mg/kg的剂量口服施用本发明的活性药物化合物或赋形剂6周。在为期30天的行为评估期间，它们的施用予以延期。

就人用而言，可制备包含如上文所述的活性药物化合物及治疗上惰性的载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物或药物，以及利用本发明化合物来制备所述组合物及药物的方法。

组合物可以以符合良好医学实践的方式配制、计量和给药。关于这一点考虑的因素包括治疗的具体病症、治疗的具体哺乳动物、个体患者的临床状况、病症的病因、药物递送的部位、给药方法、给药的时间安排、以及从业医师已知的其它因素。

本发明所用的活性药物化合物可以通过任何合适方式给药，包括口服、局部(包括含服和舌下)、直肠、阴道、透皮、胃肠外、皮下、腹膜内、肺内、皮内、鞘内和硬膜外和鼻内，以及如果需要用于局部治疗，病灶内给药。胃肠外输注包括肌内、静脉内、动脉内、腹膜内或皮下给药。

本发明所用的活性药物化合物可以以任何方便给药形式给药，所述给药形式例如片剂、粉剂、胶囊剂、溶液剂、分散体、混悬剂、糖浆剂、喷雾剂、栓剂、凝胶剂、乳剂、贴剂等。这样的组合物可以包含药物制剂中常规的组分，例如稀释剂、载体、pH调节剂、防腐剂、增溶剂、稳定剂、润湿剂、乳化剂、增甜剂、着色剂、矫味剂、用于改变渗透压的盐、缓冲剂、掩蔽剂、抗氧化剂、以及另外的活性剂。它们也可以还包含其它有治疗价值的物质。

通过混合本发明所用的活性药物化合物和载体或赋形剂，制备典型的药物组合物。合适的载体和赋形剂对于本领域技术人员是熟知的，并且详细描述于例如AnselH.C.等，Ansel'sPharmaceuticalDosageFormsandDrugDeliverySystems(药物剂型和药物递送系统)(2004)Lippincott，Williams&Wilkins，Philadelphia；GennaroA.R.等，Remington：TheScienceandPracticeofPharmacy(制药学的科学与实践)(2000)Lippincott，Williams&Wilkins，Philadelphia；和RoweR.C，HandbookofPharmaceuticalExcipients(药物赋形剂手册)(2005)PharmaceuticalPress，Chicago中。所述药物组合物还可以包括一种或多种缓冲剂、稳定剂、表面活性剂、润湿剂、润滑剂、乳化剂、悬浮剂、防腐剂、抗氧化剂、遮光剂、助流剂、加工助剂、着色剂、增甜剂、芳香剂、矫味剂、稀释剂和其它已知的添加剂，以提供所述药物(即本发明的化合物或其药物组合物)的极好外观或者有助于制备该药物产品(即药物)。

本发明所用的活性药物化合物的给药剂量可以在宽范围内变化，并且当然将适合于每种特定情形的个别要求。通常，在口服给药的情况下，每人约0.1-1500mg、更具体地1-1000mg、最具体地5-500mg的本发明所用的活性药物化合物的日剂量应是适当的，尽管上述上限在必要时也可以被超出。

合适口服剂型的一个实例是这样的片剂，该片剂包含与约90-30mg 无水乳糖、约5-40mg交联羧甲基纤维素钠、约5-30mg聚乙烯吡咯烷酮(PVP)K30和约1-10mg硬脂酸镁复合的约100mg至500mg本发明所用的活性药物化合物。这些粉末状成分首先混合在一起，然后与PVP的溶液混合。所得组合物可以被干燥，制粒，与硬脂酸镁混合并使用常规设备压制成片剂形式。

气溶胶组合物的一个实例可以如下制备：将例如10-100mg本发明所用的活性药物化合物溶解在合适的缓冲溶液例如磷酸盐缓冲液中，如果需要，加入张力剂(tonicifier)例如盐如氯化钠。可以例如使用0.2gm滤器，过滤所述溶液，以除去杂质和污染物。

d.统计学分析

使用双因子(“基因型”x“治疗”)ANOVA来分析数据。使用双因子ANOVA与重复测量(“期”x“基因型”x“治疗”)来分析Morris水迷宫数据。此后若比较两个群组则通过Student氏t-检验，或若比较两个以上群组则通过Bonferroni检验，从而比较每一实验群组的平均值。使用用于Windows第17.0版的SPSS(SPSSAG，苏黎士，瑞士)，进行所有分析。

表格简单说明

表1.本发明中用于实施例1至6的实验动物群组。

表2a.本发明所用的活性药物化合物的结合亲和力及结合选择性。

表2b.活性药物化合物对爪蟾卵母细胞中所表达的GABAA受体亚型的调节。对人类GABAAα5受体的影响：对GABA的次于最大(EC10)反应的变化％，其通过氟马西尼结合分析在30xKi值下测定。对人类GABAAα1、α2和α3受体的影响：对GABA的次于最大(EC10)反应的变化％，其通过氟马西尼结合分析在3μM或在30xKi值下(若Ki小于0.1μM)测定。

表3.8581、R1及赋形剂治疗的Ts65Dn及对照小鼠的感觉运动测试系列(平均评分±S.E.M.)。

表4.R1、8581及赋形剂治疗的Ts65Dn及对照小鼠的孔板试验结果(平均评分±S.E.M.)。**：p＜0.01Ts65Dn相对于对照

表5.在腹膜内注射后0.5、3、7和24小时，Nfl+/-和对照小鼠血清 中的8581浓度(ng/ml)。

附图说明

图1.8581、R1及赋形剂治疗的Ts65Dn及对照小鼠在不同恒定速度下自转杆跌落的延缓时间的平均值±S.E.M.。

图2.8581、R1及赋形剂治疗的Ts65Dn及对照小鼠在加速周期期间自转杆跌落的延缓时间的平均值±S.E.M.。

图3.在赋形剂、R1或8581治疗条件下，在24小时的完整暗-明周期中，Ts65Dn及对照小鼠在其饲养笼中作出的自发活动的平均值±S.E.M.。

图4.在赋形剂、R1或8581治疗条件下，在周期的光及暗阶段期间，Ts65Dn及对照小鼠作出的平均活动的平均值±S.E.M.。

图5.R1、8581及赋形剂治疗的Ts65Dn及对照小鼠在旷场的中心及外围作出的横跨次数的平均值±S.E.M.。*：p＜0.05；**：p＜0.01，显著ANOVA后的Bonferroni检验。

图6.R1、8581及赋形剂治疗的Ts65Dn及对照小鼠在旷场中作出的以后腿站立次数的平均值±S.E.M.。

图7.在八个学习期期间在MWM中到达平台的延缓时间的平均值±S.E.M.。

图8.赋形剂(A)、8581(B)及R1治疗的Ts65Dn及对照小鼠以及赋形剂及8581治疗的Ts65Dn(C)及对照(D)小鼠在八个学习期期间到达平台的延缓时间的平均值±S.E.M.。*：p＜0.05；**：p＜0.01；***：p＜0.001，显著ANOVA后的T-检验。

图9.赋形剂及8581治疗的Ts65Dn(A)及对照(B)小鼠以及赋形剂及R1治疗的Ts65Dn(C)及对照(D)小鼠在八个学习期期间到达平台的延缓时间的平均值±S.E.M.。*：p＜0.05；**：p＜0.01；***：p＜0.001，显著ANOVA后的t-检验。

图10.在暗示期期间到达平台的延缓时间的平均值±S.E.M.。*：p＜0.05，Ts65Dn相对于对照；#：p＜0.05；##：p＜0.01，8581和R1相对于赋形剂。

图11.在长期治疗后8581逆转Ts65Dn小鼠的海马切片中的长时程增 强缺陷。数据呈现为从赋形剂、8581治疗的Ts65Dn(TS)及对照(CO)小鼠的海马切片记录的所引起EPSP的平均值±S.E.M.。在20min的稳定基线阶段后，向海马切片施加强直刺激以诱导LTP。将场ESPS斜率标准化，并呈现为平均值±SEM(n＝5-7/群组)。*p＜0.05，相对于赋形剂(V)。

图12.在长期治疗后R1逆转Ts65Dn小鼠的海马切片中的长时程增强缺陷。数据呈现为从赋形剂、R1治疗的TS和CO小鼠的海马切片记录的所引起EPSP的平均值±S.E.M.。在20min的稳定基线阶段后，向海马切片施加强直刺激以诱导LTP。将场ESPS斜率标准化，并呈现为平均值±SEM(n＝5-7/群组)。*p＜0.05，相对于赋形剂(V)。

图13.8581挽救TS及CO小鼠海马中的神经元增殖。数据表示为赋形剂及8581治疗的TS及CO小鼠中Ki67+细胞密度的平均值±S.E.M.。ANOVA“基因型”：F(1，20)＝7.39，p＝0.024；“治疗”：F(1，20)＝6.30，p＝0.033；“基因型x治疗”：F(1，20)＝1.81，p＝0.21.**：p＜0.01TS相对于CO；#：p＜0.05，##：p＜0.01赋形剂相对于8581治疗的小鼠；显著ANOVA后的Bonferroni检验。

图14.8581挽救TS小鼠海马中的颗粒细胞密度。数据表示为赋形剂及8581治疗的TS及CO小鼠的颗粒细胞层中DAPI+细胞密度的平均值±S.E.M.(A)。ANOVA“基因型”：F(1，20)＝0.51，p＝0.49；“治疗”：F(1，20)＝7.09，p＝0.026；“基因型x治疗”：F(1，20)＝4.00，p＝0.076。*：p＜0.05TS相对于CO；##：p＜0.01赋形剂相对于8581治疗的小鼠；显著ANOVA后的Bonferroni检验。(B)赋形剂及8581治疗的TS及CO小鼠的DAPI免疫染色的代表性图像。

图15.8581使TS小鼠海马中GAD+突触结所占面积百分比正常化。数据表示为赋形剂及8581治疗的TS及CO小鼠海马中GAD+突触结所占面积百分比的平均值±S.E.M.(A)。ANOVA“基因型”：F(1，20)＝0.085，p＝0.77；“治疗”：F(1，20)＝1.14，p＝0.30；“基因型x治疗”：F(1，20)＝7.15，p＝0.017。*：p＜0.05TS相对于CO；#：p＜0.05赋形剂相对于8581治疗的小鼠；显著ANOVA后的Bonferroni检验。(B)赋形剂及RO4938581治疗的TS及CO小鼠的GAD免疫染色的代表性图像。

图16.8581(1mg/kg)挽救Nfl+/-小鼠的空间学习缺陷。在探查试验期 间在每一象限中所花费时间的平均百分比(QL：目标象限左侧；QT：目标象限；QR：目标象限右侧；QO：目标象限对面)。

图17.8581(1mg/kg)挽救Nfl+/-小鼠的空间学习缺陷。在探查试验期间对目标平台的平均接近程度。

图18.在掩蔽Nfl+/-小鼠的行为缺陷的条件下，8581(1mg/kg)不影响其表现。在探查试验期间在每一象限中所花费时间的平均百分比(QL：目标象限左侧；QT：目标象限；QR：目标象限右侧；QO：目标象限对面)。

图19.在掩蔽Nfl+/-小鼠的行为缺陷的条件下，8581(1mg/kg)不影响其表现。在探查试验期间对目标平台的平均接近程度。

图20.情境性条件反射：经8581治疗的对照小鼠的剂量反应曲线(0.3、1.0和3.0mg/kg)(P＜0.05)。

图21.两天连续施用8581(1mg/kg)时对照小鼠的情境性条件反射。

图22.经赋形剂或8581(1mg/kg)治疗的对照小鼠在转杆上的表现。

图23.经赋形剂或8581(1mg/kg)治疗的Nfl+/-小鼠在转杆上的表现。

缩写

ANOVA＝方差分析

BZD＝苯并二氮杂

CNS＝中枢神经系统

CO＝对照

DS＝唐氏综合征

F＝F-检验值

GABA＝γ-氨基丁酸

i.p.＝腹膜内

LTP＝长时程增强

MANOVA＝多变量方差分析

MWM＝Morris水迷宫

p＝概率

p.o.＝口服

S.E.M.＝平均值标准误差

TS＝Ts65Dn

veh＝赋形剂

实施例1.感觉运动测试

遵循RuedaN等人.[NeurosciLett(2008)433(1)：22-27]所述的程序，实施一系列感觉运动测试。在视觉放置反射测试中，对小脑及前庭功能进行评价。在3次连续试验中，使小鼠以尾巴朝向平坦表面的方式自15cm高度轻轻降落。以0-4量表给前爪伸展反应评分[4：当置位于最高高度时动物伸展前爪；3：在触须接触表面之前前爪伸展；2：在触须接触表面之后前爪伸展；1：在鼻子接触表面之后前爪伸展；0：未伸展]。

测量对突然的听觉刺激的惊恐反应，以评价听觉灵敏度。使小鼠面向一个不熟悉的笼子的壁放置，并通过使两个不锈钢镊子(7cm长)碰撞在一起来产生听觉刺激。基于反应幅度来指定评分(0-3分)：跳跃大于1cm(3分)；跳跃小于1cm(2分)；耳朵缩回(普赖尔反射，1分)；或无反应(0分)。

通过注意对用棉签接触触须的反射反应来分析触须放置反射。在三次连续试验中，将用身体同侧的爪子接触受刺激触须的动物指定评分为1，且若无反应，则为0。

通过量化在拉拽尾巴以将其与铝棒网盖(alidofaluminumbars)(2mm)分开时的抵抗来评估抓力(0：无抵抗，抓力完全丧失；1：轻微；2：中等；3：有力；4：抵抗非常有力，抓力正常)。

为评价平衡能力，在升高的(高40cm)水平(长50cm)杆上实施四次20秒平衡试验。试验1及2是在平坦木杆(宽9mm)上实施；试验3及4是在圆柱铝杆(直径为1cm)上实施。在每一试验中，将动物置于升高的杆上的有标记的中心区(10cm)中。若动物在20秒内跌落，则给予0评分；若其在中心区内停留超过20秒，则评分为1；若其离开中心区，则评分为2；且若其到达棒的一端，则评分为3。

测量抓握反射(三次5秒试验)，作为动物通过前爪抓住升高的水平金属丝(直径为2mm)而保持悬挂的能力。当动物在所有三次试验中均用前爪保持悬挂，则获得最大可能评分3(每个试验1分)。同时通过评估动物 抬起后肢以触及金属丝的次数来给牵引能力(tractioncapacity)评分(0：无；1：一肢；2：两肢)。

表3显示8581、R1及赋形剂治疗的Ts65Dn及对照小鼠在不同感觉运动测试中的评分。8581或R1治疗未改变Ts65Dn或对照小鼠的所测试感觉运动能力(视觉、听觉、力量、平衡能力、抓握反射、牵引能力或在衣架悬挂测试(coathangingtest)中的运动协调)中的任一种。

实施例2.运动协调：转杆

使用转杆器件(UgoBasile；Comerio，意大利)来评价运动协调，该器件由长37cm且直径为3cm的塑料杆组成，其以不同速度旋转。在一期中，实施4次试验，每一试验最长持续时间为60秒。在前三次测试中，杆分别以5、25和50rpm的恒定速度旋转。最后一次试验由加速周期组成，其中杆旋转得逐渐加快，且动物不得不适应逐渐提高的测试要求。记录每一动物在转杆上停留的时间长度。

如图1及2中所示，在8581或R1治疗后，任一个基因型小鼠在转杆上运动协调未改变。Ts65Dn及对照小鼠在不同恒定速度下(ANOVA“基因型”：vel2：F(1，76)＝0.63，p＝0.42；vel3：F(1，76)＝1.54，p＝0.21)或在加速周期期间(F(1，76)＝1.87，p＝0.17))自转杆跌落的延缓时间(1atency)无差异。

此外，未发现8581或R1及赋形剂治疗的Ts65Dn或对照小鼠在不同恒定速度下(ANOVA“治疗”vel2：F(1，76)＝0.08，p＝0.92)；vel3：F(1，76)＝1.42，p＝0.24)或在加速周期期间(F(1，76)＝1.40，p＝0.25)的跌落延缓时间存在差异。

MANOVA揭示，在任一转杆测试条件下(vel2：F(1，76)＝0.31，p＝0.72；vel3：F(1，76)＝0.48，p＝0.61；加速.F(1，76)＝0.43，p＝0.64)，因素“基因型”与“治疗”无明显相互影响。

实施例3.自发活动：活动测定(Actimetry)

在本测试中，对24小时完整明-暗周期期间动物自发运动活动的昼夜节律变化进行评价。本装置是检测由小鼠移动引起的磁场变化的器件(Acti-systemII，Panlab，巴塞罗那)。其记录连续24小时周期(12小时明及 12小时暗)期间动物的移动。

图3及4显示，Ts65Dn及对照小鼠(ANOVA“基因型”暗：F(1，76)＝2.79，p＝0.10；明：F(1，76)＝2.24，p＝0.14)在赋形剂、R1或8581治疗条件下(ANOVA“治疗”暗：F(1，76)＝2.20，p＝0.12，明：F(1，76)＝0.27，p＝0.76；ANOVA“基因型x治疗”：暗：F(1，76)＝0.79，p＝0.45；明：F(1，76)＝0.39，p＝0.67)在其饲养笼中在周期的暗或明阶段期间作出的自发活动的量无差异。

实施例4.旷场

使用正方形形状的旷场(55cmx55cm，环绕有25cm高的栅栏，且分成25个相等的正方形)，来评估探索性行为及焦虑。将动物置于场地中心，且在一次5分钟试验中对竖向(以后腿站立)活动及水平横跨(在各正方形之间，细分成中心相对于外围横跨)的次数进行评分。

在本旷场测试中，未发现两种基因型小鼠在迷宫中心作出的活动(ANOVA“基因型”：F(1，76)＝2.77，p＝0.10；图5)或以后腿站立的次数(F(1，76)＝0.01，p＝0.90；图6)存在显著差异。然而，当与对照小鼠进行比较时，在相同治疗下，赋形剂治疗的Ts65Dn小鼠活动过度，如通过外围活动(ANOVA“基因型”：F(1，76)＝15.86，p＜0.001；图5)及总活动(F(1，76)＝17.39，p＜0.001；图6)增加所显示。

MANOVA揭示，R1或8581治疗未显著影响任一基因型小鼠的水平(ANOVA“治疗”：外围：F(1，76)＝1.08，p＝0.34；总横跨次数：F(1，76)＝1.27，p＝0.28)或竖向(以后腿站立F(1，76)＝1.75，p＝0.18)活动。长期施用该两种化合物未影响迷宫中心的活动(ANOVA“治疗”：中心：F(1，76)＝2.42，p＝0.096)的事实表明，这些化合物未在任一基因型小鼠中引起致焦虑效应。

未发现在水平活动方面(中心：F(1，44)＝0.64，p＝0.71；外围：F(1，76)＝1.06，p＝0.35；总计：F(1，76)＝1.00，p＝0.37)在“基因型”与“治疗”之间存在显著相互影响，但ANOVA揭示该两种因素对以后腿站立的次数有显著影响(F(1，76)＝3.36，p＝0.04)。

实施例5.探索性活动：孔板

孔板是具有四个孔的木盒子(32x32x30cm)。底面被分成九个10cm的正方形。在一次5分钟试验中，测量探索次数、探索每一孔所花费的时间及在装置中的总活动。也根据ABA交替次数来计算重复指数(探索先前探索过的孔)。

表4显示R1、8581及赋形剂治疗的Ts65Dn及对照小鼠在孔板测试中的评分。在所有治疗条件下，Ts65Dn小鼠比对照小鼠作出较多次数的横跨。8581及R1治疗使Ts65Dn小鼠显示的此活动过度降低。Ts65Dn小鼠也显示在所有治疗条件下作出的探索次数增加。在此迷宫中在不同治疗条件下Ts65Dn及对照小鼠的竖向活动间未发现差异。两种基因型小鼠与治疗之间探索孔所花费的时间未发现显著差异。Ts65Dn小鼠显示注意力改变，这是因为其重复较多次探索最近探索的孔(ABA指数)。在8581治疗后(但在R1治疗后并不如此)，Ts65Dn小鼠的ABA指数得以正常化。

实施例6.空间学习：Morris水迷宫

利用Morris水迷宫来评价空间学习。本装置是直径为110cm的圆形槽，其装满水(22-24℃)，且通过添加奶粉而变得不透明。在该槽内部，平台隐藏在水平面以下1cm处。

在治疗阶段结束时，每天一期连续12期对动物进行测试：8个学习期(平台浸没于水中)，随后4个暗示期(平台可见)。所有试验均用位于水平面以上2m处的照相机进行录影。在每一试验中，针对每一动物使用SMART计算机化跟踪系统(PanlabS.A.，巴塞罗那，西班牙)来分析小鼠路径，测量逃脱延缓时间、行进距离及游泳速度。

训练期

在学习期(S1-S8)中，平台隐藏在水平面以下1cm处。自每天一期的一个学习期至下一个学习期，将平台置于不同位置(东方、西南方、中心及西北方)；每一位置在每一个每天一期连续四期使用一次。8个学习期及4个暗示期(每天一期)分别包括间隔30-45min四对试验。每一对试验中，使小鼠随机自四个位置(北方、南方、东方、西方)中的一个位置出发，两个试验的出发位置保持不变。当小鼠找到平台或已过去60秒时，结束第一对试验；20秒时间段后开始第二试验，此期间让动物停留 在平台上。位于迷宫外的数个固定暗示在池中始终可见。

暗示期

在暗示期期间，平台可见：水平面位于平台以下1cm处，且其位置用标记标出。在每一期期间，遵循与学习期相同的实验程序进行八次试验。

如图7中所示，所有群组的小鼠在整个学习期中均知道平台位置，因为它们到达平台的延缓时间缩短(ANOVA‘期’：F(7，65)＝26.8，p＜0.001)。

Ts65Dn小鼠在MWM中显示明显学习缺陷(ANOVA“基因型”：F(1，65)＝39.26，p＜0.001；图8A)，但Ts65Dn与对照学习曲线间的差异在8581(ANOVA“基因型”：F(1，18)＝4.69，p＜0.05；图8B)及R1治疗(ANOVA“基因型”：F(1，26)＝13.57，p＜0.01)后减小。

如图9A中所示，8581治疗显著改善Ts65Dn小鼠的表现(ANOVA“治疗”：F(1，24)＝32.43，p＜0.001)。长期R1治疗也改善Ts65Dn小鼠的认知(F(1，24)＝9.2，p＜0.01；图9C)。8581(图9B)或R1(图9D)未显著影响对照小鼠的表现。

在暗示期期间(图10)，赋形剂治疗的Ts65Dn小鼠显示相对于对照小鼠的到达平台的延缓时间延长(ANOVA“基因型”：F(1，46)＝5.35，p＝0.024)。R1和8581治疗使Ts65Dn小鼠到达平台的延缓时间缩短(ANOVA“治疗”：F(1，46)＝6.52，p＝0.003)，但对照小鼠并未如此(ANOVA“基因型x治疗”：F(1，46)＝3.44，p＝0.038))。

实施例7.长时程增强(LTP)

在唐氏综合征的Ts65Dn小鼠模型中评价长期施用8581及R1对LTP的影响。将8581、R1(20mg/kg，口服)或赋形剂施用六周。在最后一次施用后1小时，将小鼠斩首，并快速取出脑。将海马解剖，并用组织切片机切成400-μm的切片。使切片在交界式浴槽(interfacechamber)中在室温用人工脑脊髓液(ACSF)恢复至少1小时，所述人工脑脊髓液(ACSF)含有(以mM计)：120NaCl、3.5KCl、2.5CaCl₂、1.3MgSO₄、1.25NaH₂PO₄、26NaHCO₃和10D-葡萄糖，且被95％O₂和5％CO₂饱和。从具有含有2MNaCl的玻璃微量吸移管(1-4MΩ)的CAl放线层，记录场 兴奋性突触后电位(fEPSP)，且其通过用距离记录电极＞500μm的绝缘双极铂/铱电极刺激沙飞侧支而引起。调节刺激强度，以引起等于相对最大幅度的50％的fEPSP而无重迭群峰。在记录稳定基线(脉冲持续时间为100μs，0.033Hz)后，通过TBS(在100Hz下5个脉冲为1串，共10串，且间隔时间为200ms)来诱导长时程增强(LTP)。在僵直性痉挛(tetanus)期间，刺激脉冲的持续时间加倍。在20min的基线记录后，在每一单个海马切片中诱导LTP，并记录80min。放大来自记录电极的信号，并带通过滤(1Hz-1kHz)，并使用Spike2程序(Spike2，CambridgeElectronicDesign，Cambridge，UK)存储于计算机中。对于分析，将fEPSP斜率表示为占所记录基线值的百分比。将得自数个切片的结果表示为平均值±SEM。通过重复测量(RM)MANOVA(“时间”x“治疗”x“基因型”)来实施统计学分析。所有分析均使用用于Windows的第18.0版的SPSS来实施。

如图11及12中所示，赋形剂治疗的Ts65Dn小鼠的海马切片呈现LTP缺陷。相比而言，在8581或R1治疗的动物的海马切片中诱导的LTP与在对照小鼠的海马切片中诱导的LTP没有不同(分别为图11及12)。这表明，用8581或R1长期治疗Ts65Dn小鼠可挽救LTP缺陷，这可能是通过降低在这些动物中所观察到的过度GABA介导的抑制来实现的。

实施例8.挽救的神经生成

海马形态的改变(例如颗粒细胞密度及海马神经生成的降低)也与Ts65Dn小鼠显示的学习缺陷有关。已知空间学习依赖于海马的功能完整性，海马是CNS中在资讯编码及检索方面起重要作用的结构。通过用抗-Ki67(经历G1晚期以及G2及M期的细胞标记物)标记增殖细胞，我们已经研究了齿状回(DG)中的新生细胞群。我们证实，在这些小鼠中海马神经生成降低，且显示，长期施用8581使TS小鼠中增殖细胞的密度完全恢复(p＝0.033；图13)。而且，在长期施用8581后TS小鼠中已经历成熟的细胞的神经元存活也正常化，如通过在TS小鼠中发现的DAPI+细胞增加所显示(p＝0.026；图14)。

因此，此化合物促进细胞增殖及已经历成熟的神经元存活。由于新生神经元及成熟神经元二者均似乎与海马依赖性学习及记忆有关，因此 增殖及成熟神经元密度的恢复可能与TS小鼠中8581的认知增强效应有关。

另外，我们发现与对照动物相比在TS小鼠的海马中GABA能突触的数量增加。重要的是，长期用8581进行治疗会挽救该改变，因为在用该选择性的GABAAα5NAM长期治疗后呈GAD阳性的突触结的数量显著减少(p＝0.017；图15)。该治疗在CO小鼠中产生不显著的使这些突触的数量增加的趋势。

实施例9.Nfl+/-小鼠在Morris水迷宫中的空间学习

在处理后1周，每天在腹膜内注射8581或赋形剂后30分钟，进行连续两次试验来训练小鼠，持续8-9天。在每一试验中，给小鼠60秒来寻找平台。在每一试验后，将小鼠放在平台上待15秒。在探查试验当天(第3天、第5天、第7天及第9天)，在训练后实施60秒的探查试验。对于探查试验1(第3天)，没有一个测试群组知道在目标象限中明确地搜寻；探查试验3及4(第7天及第9天)显示，与CO/赋形剂相比，Nfl/赋形剂群组显著受损(双因子ANOVA，象限x基因型相互影响，F(3，51)＝5.662，P＜0.01)。重要的是，对于所有探查试验，8581治疗的Nfl+/-小鼠显示与对照动物相当的表现，此表明8581挽救Nfl+/-小鼠的空间学习缺陷。空间学习的两种不同量度(象限中的搜寻％(图16)及对目标平台的平均接近程度(图17))同样显示，本发明中所用的活性药物化合物挽救Nfl+/-小鼠的空间学习缺陷(CO/赋形剂(n＝10)，Nfl/赋形剂(n＝9)，CO/8581(n＝10)，和Nfl/8581(n＝11))。

在突变组的空间学习与对照组无差别(由于探查试验的次数较少而使得减弱较少)的条件下，测试本发明中所用的活性药物化合物对Nfl+/-小鼠的表现的影响。探查试验期间在每一象限中所花费时间的平均百分比显示在图18中。对目标象限的平均接近程度显示在图19中。结果显示，用赋形剂治疗的Nfl+/-小鼠与以类似方式治疗的对照小鼠无差别。目标象限的搜寻％与对目标象限的接近程度间的比较未显示在群组间存在任何差异。对于探查试验1及2(第5天及第7天)，所有群组均在目标象限中选择性地搜寻(p＜0.01)，且群组间不存在差异。

实施例10.恐惧条件反射

利用情境性恐惧条件反射方案，使用每天一次试验实施一天(图20)或连续两天(图21)来训练对照小鼠(B16；129F1)。在训练当天，在腹膜内注射8581或赋形剂后30分钟，将小鼠放置于训练室中。在放置后40秒递送脚部电击(1秒，0.4mA)。在训练后24h，通过使用自动化程序来记录条件反应(小鼠的僵立时间百分比)。将每一训练日的前30秒期间及最后一次训练试验后24小时的平均僵立程度制图。

图20中所示的剂量反应曲线(0.3、1.0及3.0mg/kg)表明，对照小鼠的情境性恐惧条件反射有剂量依赖性增强。3mg/kg8581显著增强训练后24小时的僵立(p＜0.05)。从图21可以看出，1mg/kg8581也引起连续两天训练小鼠后情境性条件反射的显著增强。经药物治疗的小鼠与对照/赋形剂群组相比僵立显著增强(F1，18)＝5.254，p＝0.034)。

实施例11.转杆

使用赋形剂或8581来治疗对照小鼠(B16；129F1)和Nfl+/-小鼠(对于4个群组中的每一个，n＝10)。在腹膜内注射8581(1mg/kg)或赋形剂后30分钟，利用转杆方案使用加速速度(4-40rpm，最长持续时间为300秒)对小鼠进行测试，实施四次试验，且试验间的时间间隔为30min。图22显现对照小鼠在转杆上的表现，图23解释了Nf1+/-小鼠在转杆上的表现。8581未影响Nf1+/-突变小鼠或对照小鼠的表现。

Claims (10)

1.GABAAα5负性变构调节剂用于制备治疗、预防CNS病症和/或延缓CNS病症的进展的药物中的用途，所述CNS病症与皮质及海马中过度GABA能抑制有关，

其中所述CNS病症选自唐氏综合征认知缺陷、孤独症认知缺陷或I型神经纤维瘤病认知缺陷，

其中所述GABAAα5负性变构调节剂是(1，1-二氧代-1，6-硫代吗啉-4-基)-{6-[3-(4-氟-苯基)-5-甲基-异噁唑-4-基甲氧基]-吡啶-3-基}-甲酮或其药学上可接受的盐。

2.根据权利要求1所述的用途，其中所述皮质及海马中过度GABA能抑制是由神经发育缺陷引起。

3.根据权利要求1所述的用途，其中所述CNS病症是由导致皮质及海马中过度GABA能抑制的神经发育缺陷引起。

4.根据权利要求1-3中的任一项所述的用途，其中所述CNS病症是唐氏综合征认知缺陷。

5.根据权利要求1-3中的任一项所述的用途，其中所述CNS病症是孤独症认知缺陷。

6.根据权利要求1-3中的任一项所述的用途，其中所述CNS病症是I型神经纤维瘤病认知缺陷。

7.根据权利要求1-6中的任一项所述的用途，其中与对人GABAAα1β2/3γ2、α2β3γ2和α3β3γ2受体亚型的结合亲合力相比，所述GABAAα5负性变构调节剂与人GABAAα5β3γ2受体亚型结合的结合选择性是10倍以上。

8.根据权利要求1-7中的任一项所述的用途，其中所述GABAAα5负性变构调节剂如下表现出功能选择性：作为人GABAAα5β3γ2受体亚型的逆激动剂，使GABA的效应降低30％以上，且另外对人GABAAα1β2/3γ2、α2β3γ2和α3β3γ2受体亚型的GABA效应的影响小于15％。

9.根据权利要求1-8中的任一项所述的用途，其中所述GABAAα5 负性变构调节剂单独地使用，或者与第二种活性药物化合物联合地顺序或同时使用。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的GABAAα5负性变构调节剂用于制备药物的用途，所述药物用于治疗、预防唐氏综合征认知缺陷、孤独症认知缺陷、I型神经纤维瘤病认知缺陷和/或延缓唐氏综合征认知缺陷、孤独症认知缺陷、I型神经纤维瘤病认知缺陷的进展、或者用于卒中后恢复。