HK1168565B - Decellularization and recellularization of organs and tissues - Google Patents

Claims (15)

1. Ex-vivo-Verfahren zum Dezellularisieren eines Organs eines Säugetiers oder eines vaskularisierten Gewebes eines Säugetiers, umfassend:

   Bereitstellen eines Organs eines Säugetiers mit einer extrazellulären Matrix und einem im Wesentlichen geschlossenen Gefäßbett und von Zellen, die in der extrazellulären Matrix eingebettet sind, oder Bereitstellen eines vaskularisierten Gewebes eines Säugetiers mit einer extrazellulären Matrix und einem Gefäßbaum und von Zellen, in der extrazellulären Matrix eingebettet sind;

   Kanülieren des besagten Organs oder Gewebes an einem oder mehreren Gefäßen und/oder Gängen, wodurch ein kanüliertes Organ oder Gewebe erzeugt wird; und

   Perfundieren der Vaskulatur des besagten kanülierten Organs oder vaskularisierten Gewebes mit einem ersten Zellzerstörungsmedium über besagte eine oder mehrere Kanülierungen.
2. Verfahren nach Anspruch 1, worin grundsätzlich das gesamte Gefäßbett mit dem ersten Zellzerstörungsmedium in Kontakt gebracht wird.
3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, worin besagtes Organ eines Säugetiers ein Herz, eine Niere, eine Leber, Milz, Bauchspeicheldrüse, Blase, ein Skelettmuskel, Dünndarm, Dickdarm, Magen, Knochen, Gehirn oder eine Lunge ist.
4. Verfahren nach Anspruch 1, worin besagte Perfusion multidirektional von jedem kanülierten Gefäß und/oder Gang erfolgt, insbesondere ferner umfassend das Perfundieren des besagten kanülierten Organs mit einem zweiten Zellzerstörungsmedium über besagte eine oder mehrere Kanülierungen, insbesondere, worin besagtes zweites Zellzerstörungsmedium DNase umfasst.
5. Verfahren nach Anspruch 1, worin besagtes Perfundieren für etwa 2 bis 12 Stunden pro Gramm Organgewebe erfolgt.
6. Dezellularisiertes Organ eines Säugetiers oder vaskularisiertes Gewebe eines Säugetiers, umfassend eine dezellularisierte extrazelluläre Matrix des besagten Organs oder Gewebes, worin besagte extrazelluläre Matrix eine Außenfläche umfasst und worin besagte extrazelluläre Matrix, einschließlich des Gefäßbetts oder -baums, im Wesentlichen die Morphologie der besagten extrazellulären Matrix vor der Dezellularisation beibehält, worin besagte Außenfläche im Wesentlichen intakt ist, worin besagtes Organ oder Gewebe mit dem Verfahren nach einem der Ansprüche I bis 5 erhalten werden kann, und worin das Organ eine Milz; eine Bauchspeicheldrüse; eine Lunge; eine Schweine-, Rinder-, Schaf-, Hunde- oder Menschenniere; oder eine Schweine-, Rinder-, Schaf-, Hunde- oder Menschenleber ist.
7. Dezellularisiertes Gewebe nach Anspruch 6, worin besagtes Gewebe kadaverisch ist oder worin besagtes Gewebe Rückenmark, Trachea oder ein Gelenk oder Teil davon ist.
8. Teil eines dezellularisierten Organs eines Säugetiers, umfassend eine dezellularisierte extrazelluläre Matrix des besagten Teils, worin besagte extrazelluläre Matrix eine Außenfläche umfasst und worin besagte extrazelluläre Matrix, einschließlich des Gefäßbaums, im Wesentlichen die Morphologie der besagten extrazellulären Matrix vor der Dezellularisation beibehält, worin besagte Außenfläche im Wesentlichen intakt ist und worin besagter Teil mit dem Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 5 erhalten werden kann.
9. Ex-vivo-Verfahren zum Herstellen eines Organs oder eines vaskularisierten Teils eines Organs oder Gewebes, umfassend Bereitstellen eines Perfusion-dezellularisierten Organs eines Säugetiers, eines Perfusion-dezellularisierten vaskularisierten Teils eines Organs eines Säugetiers oder eines Perfusion-dezellularisierten vaskularisierten Gewebes eines Säugetiers nach einem der Ansprüche 6 bis 8; und

   a) Inkontaktbringen des besagten dezellularisierten Organs, Teils oder Gewebes mit einer Population regenerativer Zellen unter Bedingungen, unter denen besagte regenerative Zellen sich in bzw. auf besagtem dezellularisiertem Organ, Teil oder Gewebe einpflanzen, vermehren und/oder differenzieren, worin die Zellen nichthumane embryonische Zellen sind; oder

   b) Inkontaktbringen des besagten dezellularisierten Organs oder Gewebes mit einer oder mehreren Verbindungen, um Zellen während des Rezellularisationsprozesses zu unterstützen oder zu stimulieren.
10. Verfahren nach Anspruch 9, worin besagte regenerative Zellen in besagtes dezellularisiertes Organ oder Gewebe injiziert oder perfundiert werden.
11. Verfahren nach Anspruch 9a), worin besagtes dezellularisiertes Organ ein Herz, eine Niere, eine Leber, Milz, Bauchspeicheldrüse, Blase, ein Skelettmuskel, Dünndarm, Dickdarm, Magen, Knochen, Gehirn oder eine Lunge ist.
12. Verfahren nach Anspruch 9, worin die Anzahl der besagten regenerativen Zellen, die an besagtem dezellularisiertem Organ oder Gewebe angebracht sind, etwa 1.000 Zellen/mg Gewebe bis etwa 10.000.000 Zellen/mg Gewebe beträgt.
13. Verfahren nach Anspruch 9, worin besagte regenerative Zellen pluripotente Zellen sind oder embryonische Stammzellen außer humanen embryonischen Zellen oder eine Untermenge davon, Nabelschnurzellen oder eine Untermenge davon, Knochenmarkzellen oder eine Untermenge davon, periphere Blutzellen oder eine Untermenge davon, aus Erwachsenen gewonnene Stamm- oder Vorläuferzellen oder eine Untermenge davon, aus Gewebe gewonnene Stamm- oder Vorläuferzellen oder eine Untermenge davon, mesenchymale Stammzellen (MSC) oder eine Untermenge davon, aus Skelettmuskeln gewonnene Stamm- oder Vorläuferzellen oder eine Untermenge davon, multipotente adulte Vorläuferzellen (MAPC) oder eine Untermenge davon, herzeigene Stammzellen (CSC) oder eine Untermenge davon, multipotente adulte aus dem Herz gewonnene Stammzellen oder eine Untermenge davon, herzeigene Fibroblasten, herzeigene Mikrovaskulatur-Endothelzellen oder aortische Endothelzellen sind.
14. Verfahren nach Anspruch 9, worin besagte regenerative Zellen allogen oder xenogen für besagtes dezellularisiertes Organ sind oder worin besagte regenerative Zellen allogen oder xenogen für besagte extrazelluläre Matrix sind oder worin das Organ oder Gewebe einer mechanischen Belastung oder Druck ausgesetzt ist.
15. Verfahren nach Anspruch 9 b), worin besagte eine Verbindung ein Wachstumsfaktor ist oder worin besagte eine Verbindung ein Faktor ist, der die Koagulationskaskade modifiziert, oder worin besagte eine Verbindung ein immunmodulierendes Mittel ist.