HK1142341B - Anti-hepcidin antibodies and uses thereof - Google Patents

Claims (20)

1. Isolierter Antikörper, der humanes Hepcidin-25 mit einem K_D-Wert von 800 pM oder weniger gemäß Bestimmung mittels Oberflächenplasmonenresonanz (SPR) bei 25 °C bindet und der sechs CDRs umfasst, die aus der Gruppe ausgewählt sind, die aus:

   (i) LCDR1, LCDR2, LCDR3, HCDR1, HCDR2 und HCDR3, die die in den SEQ ID Nrn.: 52, 60, 62, 65, 71 bzw. 75 dargestellten Aminosäuresequenzen aufweisen;

   (ii) LCDR1, LCDR2, LCDR3, HCDR1, HCDR2 und HCDR3, die die in den SEQ ID Nrn.: 42, 76, 62, 79, 87 bzw. 46 dargestellten Aminosäuresequenzen aufweisen;

   (iii) LCDR1, LCDR2, LCDR3, HCDR1, HCDR2 und HCDR3, die die in den SEQ ID Nrn.: 41, 53, 31, 63, 84 bzw. 46 dargestellten Aminosäuresequenzen aufweisen;

   (iv) LCDR1, LCDR2, LCDR3, HCDR1, HCDR2 und HCDR3, die die in den SEQ ID Nrn.: 43, 30, 31, 32, 44 bzw. 46 dargestellten Aminosäuresequenzen aufweisen;

   (v) LCDR1, LCDR2, LCDR3, HCDR1, HCDR2 und HCDR3, die die in den SEQ ID Nrn.: 43, 53, 61, 63, 85 bzw. 46 dargestellten Aminosäuresequenzen aufweisen; und

   (vi) LCDR1, LCDR2, LCDR3, HCDR1, HCDR2 und HCDR3, die die in den SEQ ID Nrn.: 43, 57, 61, 63, 84 bzw. 46 dargestellten Aminosäuresequenzen aufweisen, besteht.
2. Antikörper nach Anspruch 1, wobei der Antikörper einen K_D-Wert für humanes Hepcidin-25 zwischen 400 pM bis 30 pM gemäß Bestimmung mittels SPR bei 25 °C aufweist.
3. Antikörper nach Anspruch 1 oder Anspruch 2, wobei der Antikörper einen K_D-Wert für humanes Hepcidin-25 zwischen 200 pM bis 30 pM gemäß Bestimmung mittels SPR bei 25 °C aufweist.
4. Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 3, wobei der Antikörper einen IC₅₀-Wert zwischen 100 nM und 50 nM in einem in vitro-Assay der Bioaktivität von Hepcidin-25 aufweist, wobei der Assay eine Hepcidin-induzierte Internalisierung und/oder einen Hepcidin-induzierten Abbau von Ferroportin misst.
5. Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 4, wobei der Antikörper einen IC₅₀-Wert zwischen 100 nM und 25 nM in einem in vivo-Assay der Bioaktivität von Hepcidin-25 aufweist, wobei der Assay eine durch IL-6 induzierte Abnahme der Eisenspiegel im Serum misst.
6. Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 5, wobei der Antikörper ein gentechnisch hergestellter humaner Antikörper ist.
7. Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 6, wobei das Framework der variablen Region der leichten Kette aus 02, 018 oder L12 ausgewählt ist.
8. Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 7, wobei das Framework der variablen Region der schweren Kette aus VH1-69, VH1-18 oder VH1-46 ausgewählt ist.
9. Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 8, der eine variable Region einer schweren Kette (HCVR) und eine variable Region einer leichten Kette (LCVR) umfasst, worin (i) die HCVR und die LCVR die in den SEQ ID Nrn.: 148 bzw. 126 dargestellten Aminosäuresequenzen aufweisen; (ii) die HCVR und die LCVR die in den SEQ ID Nrn.: 128 bzw. 127 dargestellten Aminosäuresequenzen aufweisen; (iii) die HCVR und die LCVR die in den SEQ ID Nrn.: 150 bzw. 124 dargestellten Aminosäuresequenzen aufweisen; oder (iv) die HCVR und die LCVR die in den SEQ ID Nrn.: 151 bzw. 125 dargestellten Aminosäuresequenzen aufweisen.
10. Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 9, der eine schwere Kette und eine leichte Kette umfasst, die (i) die in den SEQ ID Nrn.: 6 bzw. 14 dargestellten Aminosäuresequenzen aufweisen; (ii) die in den SEQ ID Nrn.: 7 bzw. 15 dargestellten Aminosäuresequenzen aufweisen; (iii) die in den SEQ ID Nrn.: 9 bzw. 17 dargestellten Aminosäuresequenzen aufweisen; oder (iv) die in den SEQ ID Nrn.: 8 bzw. 16 dargestellten Aminosäuresequenzen aufweisen.
11. Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 10, der zwei Polypeptide der schweren Kette und zwei Polypeptide der leichten Kette umfasst, und wobei jedes der Polypeptide der schweren Kette die in SEQ ID Nr.: 8 dargestellte Aminosäuresequenz aufweist und jeder der Polypeptide der leichten Kette die in SEQ ID Nr.: 16 dargestellte Aminosäuresequenz aufweist.
12. Polynucleotid, das eine Nucleotidsequenz mit Codierung für einen Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 11 umfasst.
13. Polynucleotid nach Anspruch 12, das eine Nucleotidsequenz mit Codierung für ein Polypeptid der leichten Kette mit der in den SEQ ID Nrn.: 14, 15, 16 oder 17 dargestellten Aminosäuresequenz umfasst.
14. Polynucleotid nach Anspruch 12, das eine in den SEQ ID Nrn.: 12 oder 13 dargestellte Nucleotidsequenz umfasst.
15. Pharmazeutische Zusammensetzung, die den Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 11 und einen pharmazeutisch akzeptablen Träger, ein pharmazeutisch akzeptables Verdünnungsmittel oder einen pharmazeutisch akzeptablen Hilfsstoff umfasst.
16. Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 11 zur Verwendung in einer Therapie.
17. Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 11 zur Verwendung bei der Behandlung und/oder Prävention von Anämie.
18. Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 11 zur Verwendung bei einer Erhöhung der Eisenspiegel im Serum, der Retikulozytenzahl, der Zahl der roten Blutkörperchen, des Hämogloblins oder des Hämatokritwerts bei einem Individuum.
19. Immunassay, umfassend a) Erhalten einer Probe, die hinsichtlich reifem humanem Hepcidin untersucht werden soll; b) Inkontaktbringen der Probe mit einem Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 11 unter für ein Binden des Antikörpers geeigneten Bedingungen und Ermöglichen, dass jegliches vorhandene reife humane Hepcidin einen Komplex mit dem Antikörper bildet; und c) Nachweisen des Vorhandenseins oder Nichtvorhandenseins des Komplexes und/oder Bestimmen der Menge des Komplexes in der Probe mittels eines Immunnachweisverfahrens.
20. Immunassay nach Anspruch 18, wobei das Immunnachweisverfahren ein enzymgekoppelter Immunsorptionsassay (Enzyme Linked Immunosorbent Assay, ELISA), ein Radioimmunassay (RIA), ein Immunhistochemie (ICH)-Assay, ein Immunfluoreszenz (IF)-Assay, ein Agglutinationsassay, ein Western-Blot-Assay, ein Dot-Blot-Assay, ein Slot-Blot-Assay oder ein Oberflächenplasmonenresonanz-Nachweisverfahren ist.