HK1009099A1 - 应用去甲司来吉兰的方法和医药组合物 - Google Patents

Description

应用去甲司来吉兰的方法和医药组合物

发明领域

本发明涉及使用司来吉兰(Selegiline)代谢物即去甲司来吉兰及其对映体内去甲司来吉兰的方法和医药组合物。具体地说，本发明提供这些药剂用于司来吉兰反应性疾病和病症的组合物和方法。

发明背景

两种独特的单胺氧化酶是技术上已知的：单胺氧化酶A(MAO-A)和单胺氧化酶B(MAO-B)。给这些酶编码的cDNA显示不同的启动子区域和独特的外显子部分，表明它们是在不同的基因位置上独立编码的。此外，这两种蛋白质的分析已经显示其各自氨基酸顺序的差异。

已发现能选择性抑制MAO-B的第一种化合物是R-(-)-N-甲基-N-(丙-2-炔基)-2-氨基苯基丙烷，也称为L-(-)-狄普尼尔(deprenyl)、R-(-)-狄普尼尔或司来吉兰。司来吉兰有如下结构式：

司来吉兰在MAO-B抑制方面的选择性对于其经口给药的安全性形象是重要的。苯环丙胺(三十多年前引进但随后因其严重的高血压副作用而被淘汰的一种MAO抑制剂)，与司来吉兰相反，是一种非选择性的MAO抑制剂。苯环丙胺的急性毒性起因于MAO-A的抑制，这干扰了酪胺的代谢。酪胺通常是在胃肠道中由MAO-A代谢的，但当MAO-A受抑制时，在食用含酪胺食品如奶酪、啤酒、鲱鱼等之后酪胺吸收就会增加。这导致儿茶酚胺释放而会引起高血压危机，产生“奶酪效应”。Goodman和Gilman把这种效应表征为与MAO-A抑制剂相联系的最严重毒性效应。

司来吉兰的代谢物之一是它的N-去甲类似物。在结构上，这种去甲司来吉兰代谢物是下式仲胺的R-(-)-对映体形式：

在此之前，人们还不知道去甲司来吉兰有药物上有用的，与MAO有关的效应，即对MAO-B的强烈和选择性抑制效应。在确定去甲司来吉兰对于本发明目的的有用性的过程中，更完全地表征了去甲司来吉兰与MAO有关的效应。这种表征已经确定，去甲司来吉兰有极微弱的MAO-B抑制效应，而且与司来吉兰相比，在对MAO-B的选择性方面无任何优势。

例如，本表征确定了司来吉兰在人体血小板中对MAO-B的IC₅₀值为5×10^-9M，而去甲司来吉兰的IC₅₀值为4×10^-7M，表明后者作为MAO-B抑制剂的药效比前者小大约80倍。在测定大鼠皮质富线粒体级分中MAO-B和MAO-A的抑制作用的下列数据中可以看到类似特征：

表1 司来吉兰和去甲司来吉兰对MAO的抑制作用

浓度	抑制百分率
					司来吉兰		去甲司来吉兰
	0.003μM0.010μM0.030μM0.100μM0.300μM1.000μM3.000μM10.000μM30.000μM100.000μM	MAO-B	MAO-A	MAO-B					MAO-A
16.7040.2064.7091.8094.5595.6598.10---					----9.7532.5565.5097.75--	3.407.504.606.7026.1554.7386.2795.1597.05-	----0.00.704.1011.75-56.10

从上表显而易见，司来吉兰作为MAO-B抑制剂的药效相对于MAO-A而言强大约128倍，而去甲司来吉兰作为MAO-B抑制剂的药效相对于MAO-A而言只强97倍。因此，去甲司来吉兰显然有与司来吉兰大致相等的、对MAO-B的选择性(与MAO-A相比)，尽管药效大大降低。

用大鼠脑组织得到了类似结果。司来吉兰显示出对MAO-B的IC₅₀值为0.11×10^-7M，而去甲司来吉兰的IC₅₀值为7.3×10^-7M，表明去甲司来吉兰作为MAO-B抑制剂的药效比司来吉兰小大约70倍。两种化合物在抑制大鼠脑组织中的MAO-A方面都显示出低药效，司来吉兰为0.18×10^-5，去甲司来吉兰为7.0×10^-5。因此，在抑制MAO-A方面，去甲司来吉兰的药效比司来吉兰小大约39倍。

根据其如上所述的药物形象，作为MAO-B抑制剂的去甲司来吉兰，无论在药效上还是在选择性上，与司来吉兰相比均不提供任何优势。相反，上述离体试验数据表明，去甲司来吉兰作为MAO-B抑制剂的用量大约需要司来吉兰数量的70倍。

Heinonen，E.H.等人报告了去甲司来吉兰作为活体MAO-B抑制剂的药效(“去甲司来吉兰，即司来吉兰的一种代谢物，是人体实验对象中MAO-B的一种不可逆抑制剂”，见学术论文集《帕金森病治疗中的司来吉兰》，图尔库大学神经学系统研究报告，芬兰图尔库，No.33(1995)，pp 59-61)。Heinonen认为，活体中去甲司来吉兰的MAO-B抑制效应只有司来吉兰的约1/5，即达到与1.8mg司来吉兰相同的MAO-B效应将需要10mg去甲司来吉兰的剂量。

已知司来吉兰对其有用的各种疾病和病症包括：抑郁症(美国专利4,861,800)；阿尔茨海默病和帕金森病，尤其通过使用经皮剂型，包括软膏剂、霜剂和膏药剂；黄斑变性(美国专利5,242,950)；年龄依赖性退化，包括肾功能和由空间学习能力证实的认识功能(美国专利5,151,449)；垂体依赖性库欣病(美国专利5,192,808)；免疫系统机能障碍(美国专利5,276,057)；和精神分裂症(美国专利5,151,419)。PCT公开的申请WO 92/17169公开了司来吉兰在治疗神经肌肉与神经变性疾病和治疗由于缺氧、低血糖、局部缺血发作或创伤而引起的中枢神经系统损伤方面的用途。

尽管已知司来吉兰能有效地治疗上述病症，但要么不知道其准确数字，要么不知道其机制的性质或作用机制。然而，有证据表明，司来吉兰可能通过减少氧化性神经元损害、增加超氧化歧化酶的数量和/或减少多巴胺分解代谢来提供神经保护或神经元救援。例如，PCT公开的申请WO 92/17169报告说，司来吉兰是通过直接保持动物神经功能、防止其损失和/或给予其帮助而起作用的。

司来吉兰对神经元细胞的生物化学效应已广泛进行了研究。例如，参阅Tatton等人“司来吉兰能中介神经元救援而不是神经元保护”，Movement Disorders 8(Supp 1)：S20-S30(1993)；Tatton等人“垂死神经元的救援”， J.Neurosci.Res.30：662-672(1991)；和Tatton等人“(-)-狄普尼尔防止线粒体去极化和救援营养缺乏性细胞中的细胞死亡”， 11 th Int’l Symp on Parkinson’s Disease，意大利罗马，3月26日-30日，1994年。

已知司来吉兰当通过种类繁多的给药途径和剂型给实验对象给药时是有用的。例如，美国专利4,812,481(Degussa AG)公开了伴行的司来吉兰-金刚烷胺在口服、经口、经肠、经肺、经直肠、经鼻、经阴道、经舌、经静脉内、经动脉内、经心内、经肌内、经腹腔内、经皮内、经皮下配方中的用途。美国专利5,192,550(Alza公司)描述了一种剂型，其中包括一个对司来吉兰不可渗透但对外部流体可渗透的外壁。这种剂型可能适用于司来吉兰的经口、舌下或含剂给药。类似地，美国专利5,387,615公开了各种各样的司来吉兰组合物，包括片剂、丸剂、胶囊剂、粉剂、气雾剂、栓剂、皮肤贴剂、非经肠药剂、和经口液剂，包括油-水悬浮液剂、溶液剂和乳液剂。也公开了含司来吉兰缓释(长效)配方和器具。

除去甲司来吉兰外，司来吉兰还产生一种其它主要直接代谢物，即甲苯丙胺。去甲司来吉兰和甲苯丙胺两者又都进一步代谢成苯异丙胺。已知后两种代谢物，即苯异丙胺和甲苯丙胺，有对多巴胺神经元产生神经毒性效应的潜力，是所不希望的副产物。与司来吉兰不同的是，去甲司来吉兰不产生作为代谢物的甲苯丙胺，只产生苯异丙胺。

因此，尽管是一种有高度药效和选择的MAO-B抑制剂，但司来吉兰的实际用途受制于其对MAO-B的剂量依赖型专一性，和给药后产生的司来吉兰代谢物的药理学。

发明概要

本发明涉及令人惊讶的发现：即去甲司来吉兰(“DMS”或“ R(-)DMS”)及其对映体(内去甲司来吉兰，缩略为“Ent-DMS”或“S(+)DMS”)均可用于给受治疗者提供类似司来吉兰的效应，但与司来吉兰相比，大幅降低了MAO-B抑制活性和明显缺乏对MAO-B的增大选择性。具体地说，本发明涉及令人惊讶的发现：即去甲司来吉兰、内去甲司来吉兰及其异构体混合物提供了一种使司来吉兰反应性疾病或病症获得类似司来吉兰治疗效果的更有利途径。因此，本发明提供了采用去甲司来吉兰和/或内去甲司来吉兰作为有效成分的新型医药组合物，和涉及去甲司来吉兰和内去甲司来吉兰给药的新型治疗方法。

具体地说，本发明提供：

(1)一种改进的方法，用于使患有司来吉兰反应性疾病或病症的受治疗者获得类似司来吉兰治疗效果，该方法包括

以足以产生类似司来吉兰治疗效果的数量对所述受治疗者施用去甲司来吉兰，内去甲司来吉兰或其混合物；和

(2)一种医药组合物，其中，除一种或多种任选的药物上可接受赋形剂或载体外，还含有一定量的去甲司来吉兰、内去甲司来吉兰或其混合物，使得所述组合物定期给药的一个或多个单元剂量能有效地治疗对其给药所述一个或多个单元剂量的受治疗者的一种或多种司来吉兰反应性疾病或病症。

这里使用的“司来吉兰反应性疾病或病症”这一术语，系指包括人类在内的哺乳动物中已知司来吉兰对其有用的各种疾病或病症中任何一种。具体地说，“司来吉兰反应性疾病或病症”系指上述各种疾病和病症，例如阿尔茨海默病、认识机能障碍、神经元救援等。类似地，“类似司来吉兰治疗效果”这一术语，系指在进行司来吉兰反应性疾病或病症治疗的受治疗者中由司来吉兰产生的一种或多种有益于恢复健康的效果。

对本方法有反应的、与神经元变性或创伤有关的司来吉兰反应性疾病或病症包括帕金森病、阿尔茨海默病、抑郁症、青光眼、黄斑变性、局部缺血、糖尿病型神经病、注意力缺乏性失调、脊髓灰质炎后综合症、多发性硬化、阳萎、发作性睡眠病、慢性疲劳综合症、脱发、老年性痴呆、缺氧、认识机能障碍、精神分裂症阴性症状、肌萎缩性外侧硬化、图雷特综合症、迟发性运动障碍，和毒性神经变性。

本发明也包括用R(-)DMS、S(+)DMS或其混合物使免疫系统功能恢复和改善。已有人报告当对动物施用司来吉兰时发生这样的改善或恢复。可治疗的病症或疾病包括年龄依赖型免疫系统功能障碍，AIDS、癌症，和传染性疾病。

因所采用的特定给药途径而异，或者去甲司来吉兰或者内去甲司来吉兰是以游离碱形式或作为生理上可接受无毒酸加成盐给药的。这样的盐包括从有机酸和无机酸例如但不限于盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸、甲磺酸、乙酸、酒石酸、乳酸、琥珀酸、柠檬酸、苹果酸、马来酸、山梨酸、乌头酸、水杨酸、邻苯二甲酸、印波萘酸(embonic酸)、庚酸等衍生的盐。当给药途径采用水溶液剂作为诸如非经肠给药时，盐，尤其盐酸盐的使用是特别理想的；以游离碱形式使用所提供的去甲司来吉兰或内去甲司来吉兰特别适用于经皮给药。因此，这里对DMS或Ent-DMS给药或对其混合物的提法包括游离碱和酸加成盐这两种形式。

可用于本发明目的的去甲司来吉兰和/或内去甲司来吉兰的最佳日剂量是用技术上已知的方法确定的，例如，根据所治疗的疾病或病症的严重性，对其给予治疗的受治疗者的状况，所希望的治疗反应程度和对患者或动物给药的伴行疗法来确定。然而，一般来说，主治医生或兽医将给药以游离仲胺为准计算的至少约0.0015mg/kg的初步剂量，然后因对该治疗的反应而异采用逐渐提高的剂量。典型地说，日剂量将是约0.01mg/kg而且可以扩展到约0.5mg/kg患者体重(这样的剂量也全部是以游离仲胺为基准计算的)。这些指导线进一步要求主治医生或兽医因个体患者或动物的年龄、体重、临床状况和观察到的反应而异仔细酌定实际剂量。

这种日剂量可以按单一或分多次投药方案给药。剂型和投药方案可以允许诸如在一天或多天疗程中从单一剂量单元如经皮贴剂连续释放相当少量有效成分。这对于慢性病症例如帕金森病、阿尔茨海默病和抑郁症的治疗是特别理想的。另外，对于局部缺血或神经损伤等病症，通过更直接的全身性途径如经静脉内或通过吸入给药一个或多个分立剂量，也会是理想的。此外，在青光眼和黄斑变性等其它情况下，可以指明局部给药，例如通过眼内途径。

在经口给药的情况下，本发明包括如下意外发现：对用于各种各样的病症和疾病来说，经口使用去甲司来吉兰和/或内去甲司来吉兰比经口使用司来吉兰更有效。因此，在由于副作用而会禁忌使用司来吉兰本身的情况下，给受治疗者经口服用去甲司来吉兰及其对映体。

含有去甲司来吉兰和/或内去甲司来吉兰的医药组合物可以按照常用技术制备。例如，经肌内、经静脉内和经动脉内途径等非经肠给药途径的去甲司来吉兰制剂可以采用无菌等渗食盐水溶液。对眼内给药也可以采用无菌等渗溶液。

去甲司来吉兰和/或内去甲司来吉兰的经皮单元剂型可以利用以前描述的各种各样技术制备(见诸如美国专利4,861,800；4,868,218；5,128,145；5,190,763与5,242,950；和EP-A 404807，EP-A509761与EP-A 593807)。例如，可以利用一种单片贴剂结构，其中，把去甲司来吉兰直接掺入粘合剂中，并把这种混合物浇铸到一张背衬薄板材上。

此外，还可以把去甲司来吉兰和/或内去甲司来吉兰作为一种酸加成盐掺入一种能使该盐转化成游离碱的多层贴剂中，例如，如EP-A593807中所述。

去甲司来吉兰和/或内去甲司来吉兰也可以通过一种器具给药，该器具采用一种易溶液晶组合物，其中诸如使5～15％去甲司来吉兰与液体和固体聚乙二醇的混合物、一种聚合物及一种非离子型表面活性剂组合，任选地添加丙二醇和一种乳化剂。关于此类经皮制剂的制备的进一步细节，可参照EP-A5509761。

由于“内去甲司来吉兰”这一术语系指去甲司来吉兰的S(+)异构体形式，因而，以上对司来吉兰和内去甲司来吉兰的混合物的提法同时包括旋光异构体的外消旋混合物和非外消旋混合物。

本制剂和方法可治疗的对象包括已知类似司来吉兰治疗效果对其有用的人类对象和非人类对象。因此，以上组合物和方法为哺乳动物，尤其家养哺乳动物提供特别有用的治疗。例如，本方法和组合物可用于治疗犬科和猫科物种中的司来吉兰反应性疾病或病症。

以上组合物和方法的成功使用，需要采用有效量的去甲司来吉兰、内去甲司来吉兰或其混合物。尽管去甲司来吉兰和内去甲司来吉兰作为MAO抑制剂的药效都比司来吉兰小得多，但采用这些药剂或这些药剂的混合物不需要相应增大剂量来获得类似司来吉兰的治疗响应。令人惊讶的是，达到类似司来吉兰治疗效果所需要的剂量处于与司来吉兰已知剂量相同的量级。因此，由于去甲司来吉兰和内去甲司来吉兰在这样的剂量上显示出低得多的MAO-A抑制，因而去甲司来吉兰和内去甲司来吉兰提供了比司来吉兰宽得多的、与MAO-A相关毒性有关的安全性范围。具体地说，MAO-A抑制的有害效应如高血压危机的风险，因其MAO-A抑制药效小40～70倍而减小到最低限度。

如上所述，且尽管其关于MAO-B抑制的可证实不良抑制性质，去甲司来吉兰及其对映体在治疗司来吉兰反应性病症如神经元变性或神经元创伤引起的病症方面还是比司来吉兰显著地更有效的。在这一方面，去甲司来吉兰和/或其对映体同司来吉兰本身一样，当通过一种不依靠上胃肠道或其它胃肠吸收的途径给药时，是特别有用的。较好的途径包括非经肠的、局部的、经皮的、经眼内的、经颊的(含剂)、经舌下的、经鼻内的、吸入、经阴道的和经直肠的途径。

如以上注意到的，本发明包括另一个发现：去甲司来吉兰既可以光活性形式也可以外消旋形式即去甲司来吉兰的对映体的混合物形式采用。去甲司来吉兰，其对映体及其混合物是用如以下实例1中所述的、技术上已知的方法方便地制备的。

附图简要说明

图1：司来吉兰对神经元存活的影响。用胚胎14天大鼠制备中脑培养物。培养物以每板约150万细胞使用，且或者保持于单独生长培养基中(对照培养物)，或者保持于补加了司来吉兰的生长培养基中。在第1、8和15天时，对细胞给予免疫支持以使之有酪氨酸羟基酶(“TH”)存在。实心棒代表在50μM司来吉兰存在下保持的培养物所得到的结果，空心棒代表对照培养物的结果。在所有情况下，结果均表示为第一天对照培养物中存在的TH阳性细胞的百分率。缩略语“DIV”系指“离体试验天数”。图1和以下讨论的各图中棒上方的星号或星指出该结果与对照组相差一个统计上显著的量，即P＜0.05。

图2：中脑细胞中的〔³H〕-多巴胺摄取。如以上对图1所述那样培养的细胞，进行其标志多巴胺的摄取试验，结果表示在图2中实心棒代表在50μM司来吉兰存在下保持的细胞中的摄取，空心棒代表对照培养物中的摄取。

图3：司来吉兰对谷氨酸受体依赖型神经元细胞死亡的影响。大鼠胚胎中脑细胞如以上所述那样培养。使培养物达到稳定后，在为期4天的时间里每天改变培养基，以诱发谷氨酸受体依赖型细胞死亡。因培养物而异，培养基含有0.5、5.0或50μM司来吉兰。在最后一次培养基改变之后，对培养的细胞给予免疫染色以使之有酪氨酸羟基酶存在。图上的棒从左到右分别代表对照组、0.5、5.0和50μM司来吉兰的结果。

图4：司来吉兰对神经元培养物中多巴胺摄取的影响。培养大鼠中脑细胞，像对图3所讨论的那样每天改变培养基。测定细胞对氚标记多巴胺的摄取，结果表示在图中。图上各棒从左到右的顺序与图3相同。

图5：R(-)去甲司来吉兰对谷氨酸受体依赖型神经元细胞死亡的影响。大鼠胚胎中脑培养物像以上所述那样制备，所不同的是用R(-)DMS代替司来吉兰。在第9天，测定培养物中TH阳性细胞的数目。结果表达为对照组的百分率。图上的棒从左到右显示对照组、0.5、5和50μM R(-)DMS的结果。

图6：R(-)去甲司来吉兰对神经元培养物中多巴胺摄取的影响。细胞培养物像以上图5所述那样制备，然后进行氚标记多巴胺摄取量测试。对照组和在0.5μM、5μM与50μM去甲司来吉兰存在下保持的细胞的结果从左到右表示于图中。

图7：在不同单胺氧化酶抑制剂的存在下培养的中脑细胞的多巴胺摄取比较。大鼠胚胎中脑细胞像图3～6所述的那样制备，并在各种单胺氧化酶抑制剂的存在下培养。所考察的抑制剂是司来吉兰；R(-)去甲司来吉兰；优降宁(巴吉林)；和氯吉兰(clorgyline)，浓度均为0.5、5和50μM。此外，细胞是在10μM浓度的谷氨酸受体阻断剂MK-801的存在下培养的。培养物进行氚标记多巴胺摄取量测试。

图8：狄普尼尔和去甲司来吉兰的对映体对神经元多巴胺神经元再摄取的抑制。用新鲜大鼠新纹状体组织制备一种离体神经末端制剂(突触体制剂)。对此考察其在单独缓冲剂中或在补加了不同浓度的司来吉兰、R(-)去甲司来吉兰或S(+)去甲司来吉兰的缓冲剂中摄取氚标记多巴胺的能力。在每一种MAO抑制剂的存在下的摄取量表达为相对于缓冲剂单独存在下的摄取量的抑制百分率，结果表示在图8中。如图中所指出的，用这些曲线确定了每一种试剂的ID₅₀。S(+)DMS的ID₅₀是20μM；司来吉兰，80μM；R(-)DMS，约100μM。

图9：豚鼠海马的活体MAO-B抑制。在为期5天中每天给豚鼠注射不同剂量的司来吉兰、R(-)去甲司来吉兰和S(+)去甲司来吉兰。然后宰杀动物，测定大脑海马部分中的MAO-B活性。结果表达为相对于对照动物中海马MAO-B活性的抑制百分率，并表示在图9中。用这些曲线确定了每种试剂的ID₅₀剂量。司来吉兰的ID₅₀是约0.03mg/kg；DMS的两种对映体都是约0.3mg/kg。

图10：注射了司来吉兰、R(-)DMS或S(+)DMS的大鼠的脾细胞离体干扰素(“IFN”)产生。F344大鼠在为期60天中每天经腹膜内注射食盐水、司来吉兰、R(-)DMS或S(+)DMS。注射的所有大鼠均为老年大鼠，即18～20月龄。在经过未做任何注射的10天“冲出”期之后，将大鼠宰杀，取出其脾脏。测定受刺激的脾细胞(淋巴细胞)的离体干扰素-γ产量，并将其与未注射的老年大鼠以及年轻大鼠(3月龄)的脾细胞(淋巴细胞)的产量比较。图中的棒从左到右分别反映下列动物脾细胞的结果：年轻大鼠；老年大鼠，注射了食盐水的老年大鼠；注射了0.25mg/kg司来吉兰的老年大鼠；注射了1.0mg/kg司来吉兰的老年大鼠；注射了0.025mg/kgR(-)DMS的大鼠；注射了0.25mg/kg R(-)DMS的大鼠；注射了1.0mg/kg  R(-)DMS的大鼠；和注射了1.0mg/kg S(+)DMS的大鼠。水平线指出各IFN水平与用年轻大鼠脾细胞看到的水平有显著差异(P＜0.05)的点。结果表达为每ml中的单位数。

图11：老年大鼠脾细胞离体IFN产生。图11中重复了图10中所示的相同结果，但不包括年轻大鼠脾细胞的结果。“#”指出与用注射了食盐水的老年大鼠的脾脏得到的结果有显著差异(P＜0.05)的结果。“^*”指出与除注射了1.0mg/kg狄普尼尔(deprenyl)的老年大鼠外的各组都有显著差异的结果。

图12：老年大鼠脾细胞离体间白细胞素-2(Interleukin-2)产生。大鼠像以上所述那样注射(见图10)，测定受刺激脾细胞的间白细胞素-2产量。图中棒从左到右的顺序与图10相同。

图13：IgM阳性大鼠脾细胞的百分率。大鼠像以上所述那样(见图10)注射食盐水、司来吉兰、R(-)DMS或S(+)DMS。对这些大鼠的脾脏进行试验，以确定呈IgM阳性的细胞百分率，结果表示在图中。图中的水平线对应于相对于在从年轻大鼠得到的脾脏中看到的百分率而言统计上显著(P＜0.05)的IgM百分率减少。图中的棒从左到右的顺序与图10和12中一样。

图14：呈CD5阳性的大鼠脾细胞百分率。重复图13的实验，但不测定呈IgM阳性的细胞百分率，而是测定呈CD5阳性的百分率。

发明详细说明

去甲司来吉兰和内去甲司来吉兰在治疗司来吉兰反应性疾病或病症方面令人惊讶的效用可部分地归因于它们通过促进修补和恢复来防止多巴胺能神经元损失的强有力作用。因此，以一般观察到微小或无MAO-B抑制的低达0.01mg/kg的剂量，就能观察到神经元损伤和/或死亡的逆转。由于去甲司来吉兰和内去甲司来吉兰能防止神经细胞功能的损失和促进其恢复，因而它们对于种类繁多的神经变性疾病和神经肌肉疾病是有价值的。在这一方面，去甲司来吉兰和内去甲司来吉兰的药效比司来吉兰强得多，如在以下实例中更具经验性地描述的。这些实例仅用于说明性目的，无意限制本发明的范围。

实例

实例1  去甲司来吉兰和内去甲司来吉兰的制备

A、去甲司来吉兰

去甲司来吉兰(以下称为“R(-)DMS”)是用技术上已知的方法制备的。例如，去甲司来吉兰是美国专利No.4,925,878中所述的制备司来吉兰的一种已知化学中间体。去甲司来吉兰可按下述方法制备：在一种惰性有机溶剂如甲苯中，在稍高的温度(70～90℃)下，用等摩尔量的一种活泼炔丙基卤如炔丙基溴Br-CH₂-C≡CH处理R(+)-2-氨基苯基丙烷(左旋苯异丙胺)溶液：

任选地，这个反应可以在一种酸受体如碳酸钾的存在下进行。然后，反应混合物用酸水溶液如5％盐酸萃取，再使萃取物变成碱性。所形成的非水层诸如用苯萃取分离、干燥、减压蒸馏。

此外，这种炔丙基化还可以类似于美国专利No.4,564,706中所述的司来吉兰制备，利用R(+)-2-氨基苯基丙烷与一种弱酸的盐如酒石酸盐，在一种水不混溶溶剂与碱水溶液的双相体系中进行。

B、内去甲司来吉兰

内去甲司来吉兰(以下称为“S(+)DMS”)是从对映体S(-)-2-氨基苯基丙烷(右旋苯异丙胺)，即

按照以上对去甲司来吉兰所述的程序方便地制备的。

C、对映体混合物

去甲司来吉兰各对映体形式的混合物，包括外消旋去甲司来吉兰，是从对映体混合物，包括上述氨基苯基丙烷起始原料的外消旋混合物，方便地制备的。

D、转化成酸加成盐

无论光活性形式还是外消旋形式的N-(丙-2-炔基)-2-氨基苯基丙烷，都可以用常用技术如用一种无机酸处理，转化成一种生理上可接受的无毒酸加成盐。例如，用氯化氢异丙醇溶液制备去甲司来吉兰盐酸盐。无论游离碱还是盐，又都可以用常用技术如重结晶或色谱法进一步纯化。

实例2  用酪氨酸羟基酶衡量的神经元存活

去甲司来吉兰对神经元存活的影响可以与酪氨酸羟基酶即多巴胺生物合成速度限制酶相关联。试验是通过测定在为期7～14天内培养的E-14胚胎中脑细胞中酪氨酸羟基酶阳性细胞的数目进行的。用各种各样的营养因子，包括BDNF、GDNF、EGF和β-FGF，已看到这个系统中的保护。

A、试验方法

用计时的妊娠Sprague-Dawley大鼠，建立来自妊娠第14天的胚胎大鼠大脑的神经元培养物。分离出不带膜覆盖层的中脑，收集在无Ca⁺⁺和Mg⁺⁺的4℃平衡盐溶液中。组织碎片用小内径巴斯德吸管轻轻研磨，使之离解于化学上定义的培养基中。细胞悬浮液以1.5×10⁶细胞/碟的密度在涂布了聚鸟氨酸的35mm Falcon塑料碟(0.1mg/ml，Sigma)上进行平板培养。培养物在10％CO₂/90％空气和100％相对湿度的氛围中保持于37℃，每周补加两次化学上定义的培养基，其组成为MEM/F12(1∶1，Gibco)、葡萄糖(33mM)、HEPES(15mM)、NaHCO₃(44.6mM)、转铁蛋白(100mg/ml)、胰岛素(25mg/ml)、腐胺(60nM)、亚硒酸钠(30nM)、黄体酮(20nM)和谷氨酰胺(2mM)。对照组细胞未受到进一步添加。用于其它细胞的培养基也以一种或多种浓度包括试验物如司来吉兰。

培养物在室温下用0.1M磷酸盐缓冲剂(pH 7.4)中的4％仲甲醛固定30分钟，用0.2％Triton X-100渗透30分钟，在阻断血清存在下于4℃用抗酪氨酸羟基酶的抗体(1∶1000；Eugene Tech)培养48小时。然后，利用一种偶合了过氧化酶的抗生物素蛋白-生物素染色试剂盒(Vectastain ABC试剂盒；Vector Labs)，以3′，3′-二氨基联苯胺为色原，对其进行染色。

通过计数有TH抗体阳性免疫染色的细胞，确定培养物中多巴胺能神经元的数目。用一台Nikon倒置显微镜以200倍放大倍率计数与该碟直径正交的两条横带中的100个域(0.5mm×0.5mm)，占总面积的2.5％。

B、结果

利用以上所述程序，得到下列结果：

表2：司来吉兰和DMS对TH阳性细胞存活的影响

浓度	对照	司来吉兰		去甲司来吉兰
						平均	平均	％对照	平均	％对照
	0.5μM5μM50μM	108.55--	201.70±25.01237.00±12.59292.28±17.41	185.81218.33269.25	246.00±22.76357.95±25.76391.60±34.93						226.62329.76360.76

实例3  用多巴胺摄取量衡量的神经元存活

除测定培养物中TH阳性细胞的数目(见实例2)外，也可以通过直接测定多巴胺摄取量来确定去甲司来吉兰对神经元细胞的保护效应。所培养脑细胞的摄取量对应于轴突生长。

A、试验方法

用以上讨论的方法建立的细胞培养物与〔³H〕多巴胺(0.5mCi/ml；37m Ci/mmol；新英格兰核公司)一起，在抗坏血酸(0.2mg/ml)的存在下，在补加了0.9mM  CaCl₂和0.5mM MgC₂的PBS(pH 7.3)中，在37℃培养15分钟。在漂洗两次和用新鲜缓冲剂培养5分钟之后，通过使该培养物与95％乙醇一起在37℃培养30分钟，使这些细胞内积累的〔³H〕多巴胺释放出来。然后把制剂添加到10ml Ecoscint(National Diagnostics)中，用闪烁谱仪计数。通过用10mM氯苯咪吲哚阻断多巴胺能神经元摄取，得到非专一的摄取值。

B、结果

用以上程序，得到表3中所示的结果。

表3：司来吉兰和DMS对³H-多巴胺摄取的影响

浓度	对照	司来吉兰		去甲司来吉兰
						平均	平均	％对照	平均	％对照
	0.5μM5μM50μM	11982--	14452±21216468±57633018±1317	120.6137.5275.5	24020±80034936±211956826±2656						200.4291.5474.3

C、实例2和3的结论

实例2和3中所述的结果指出，作为一种神经保护剂，去甲司来吉兰优于司来吉兰。这是真实的，尽管事实上去甲司来吉兰作为一种MAO-B抑制剂的药效比司来吉兰弱得多。

实例4  去甲司来吉兰对映体在离体培养的含多巴胺中脑神经元中的神经保护作用

在这些实验中，用大鼠脑组织的中脑含多巴胺神经元培养物的存活来考察司来吉兰和R(-)去甲司来吉兰的神经保护性能。TH阳性神经元的数目正比于多巴胺能神经元的存活，³H-多巴胺摄取量是这些神经元中轴突生长的一个尺度。

A、司来吉兰对多巴胺能神经元存活的影响

从胚胎第14天大鼠制备的中脑培养物用0.5、5和50μM司来吉兰处理15天，从平板培养那一天算起。(关于这些实验中使用的细胞培养及其它方法的更详细讨论，请参阅Mytilineou等人 J.Neurochem，61：1470-1478(1993)。)多巴胺神经元的存活与生长是用酪氨酸羟基酶(TH)免疫细胞化学和〔³H〕多巴胺摄取量来评估的，结果表示在图1和2中。

当司来吉兰以0.5和5μM的浓度试验时，未观察到对神经元存活产生任何影响。在50μM时，司来吉兰在平板培养后8天和15天减少了TH阳性神经元的损失(图1)，在15天时增加了多巴胺摄取量(图2)。在一些独立实验中确定，用0.5、5、50或100μM司来吉兰进行的预处理，在这些实验中使用的试验条件下没有抑制多巴胺的摄取。

这些结果表明，所得到的摄取值反映多巴胺神经元存活和突起赘疣，也表明司来吉兰有神经保护效果。

B、司来吉兰对谷氨酸受体依赖型细胞死亡的影响

也利用一种能引起可以通过谷氨酸受体的抑制予以阻断的神经元细胞死亡的实验范例，考察了司来吉兰的神经保护效果。在这些实验中，细胞进行平板培养，并使之能稳定若干天。然后每天都改变这些细胞的生长培养基，以诱发细胞死亡，这种死亡可以诸如用MK-801阻断谷氨酸受体来加以预防。每天一次改变培养基4天后，培养物进行酪氨酸羟基酶沾染，并进行氚标记多巴胺摄取试验。图3和4中显示的结果进一步支持如下结论：司来吉兰能促进多巴胺能神经元的存活。

C、去甲司来吉兰对多巴胺神经元存活的影响

利用谷氨酸受体依赖的神经元死亡模型，当用去甲司来吉兰代替司来吉兰时提供了一种甚至更强的多巴胺能神经元保护。即使在所试验的最低剂量(0.5μM)，去甲司来吉兰也引起了TH阳性神经元损失的显著减少(图5)和多巴胺摄取量的显著增加(图6)，均相对于对照培养物而言，其中使用了不补加司来吉兰或者去甲司来吉兰的培养基。

D、与其它MAO抑制剂比较

利用谷氨酸受体依赖的神经毒性模式，司来吉兰和去甲司来吉兰的效果与两种其它MAO抑制剂即优降宁和氯吉兰做了比较(图7)。同前面的结果一致，多巴胺摄取量的测定指出了50μM狄普尼尔和5与50μM去甲司来吉兰的神经元保护。优降宁在所使用的浓度显然没有提供任何保护，而氯吉兰在50μM有保护。如所预期的，保护也是通过NMDA受体阻断剂MK-801(10μM)得到的。

E、DMS对映体对³H-多巴胺摄取的影响

表4中总结的数据表明，对于培养物中的中脑含多巴胺神经元来说，R(-)DMS和S(+)DMS都能有效地作为神经保护剂。

表4  DMS对映体对多巴胺摄取的影响

                        ³H-多巴胺摄取量

处理                      (百分率+均值标准误差)

对照                     100±14.14％

R(-)DMS(10nM)           140.82±26.20％

S(+)DMS(10nM)           234±38.36％

这些结果证实，与未处理的对照组细胞相比，用R(-)DMS和S(+)DMS处理后，分别有高出40％和134％的轴突生长和末端轴突存活。因此，S(+)DMS可能是一种比R(-)DMS甚至更强和/或疗效更好的神经保护剂。

实例5  去甲司来吉兰和内去甲司来吉兰作为多巴胺再摄取抑制剂

脑神经递质多巴胺的生物学作用被一种存在于突触前含多巴胺神经末端的限制膜内的高亲合性、钠与能量依赖型输送系统(神经元再摄取)终止于突触上。这种输送机制的抑制会扩展突触上多巴胺的作用，因而加强多巴胺突触传递。

A、试验方法

对去甲司来吉兰(DMS)的R(-)和S(+)对映体进行其抑制多巴胺再摄取系统的能力测试并与司来吉兰比较。这个试验中的抑制活性是药剂在治疗需要提高突触多巴胺活性的疾病方面有价值的指示。目前，这会包括帕金森病、阿尔茨海默病和注意力缺乏机能亢进失调(ADHD)。

使用的试验系统基本上是Fang等人所述的系统( Neuropharmacology33：763-768(1994))。离体神经末端制剂(突触体制剂)是从新鲜大鼠新纹状体脑组织得到的。多巴胺神经末端的输送是通过测定氚标记多巴胺摄取量来估计的。

B、结果

如同在表5所列数据中看到的，司来吉兰、R(-)DMS和S(+)DMS全都抑制了含多巴胺神经末端的多巴胺再摄取。司来吉兰与R(-)DMS是近似等效的。而S(+)DMS无论比司来吉兰还是比R(-)DMS，其药效都强4～5倍。

表5 大鼠新纹状体脑组织的³H-多巴胺摄取

相对药效可以用使多巴胺再摄取量抑制50％所需要的浓度(ID₅₀)来表示。ID₅₀值是用图表法确定的(见图8)，显示在以下表6中。

表6  使多巴胺摄取量抑制50％所需要的浓度

		司来吉兰R(-)DMSS(+)DMS	≈80μm≈100μm≈20um

C、结论

这些结果证实，在适当浓度下，司来吉兰和DMS的每一种对映体都能抑制所释放多巴胺在神经元突触上的传输，并提高这种神经递质在该突触上的相对活性。在这一方面，S(+)DMS的药效比司来吉兰强，后者的药效又比R(-)DMS强。这种效应是药剂有益于治疗帕金森病，阿尔茨海默病和注意力缺乏机能亢进失调(ADHD)的指示。在所试验的药剂中，S(+)DMS在治疗ADHD方面显然是最有效的。

实例6  去甲司来吉兰(DMS)的R(-)和S(+)对映体对人

体血小板MAO-B和豚鼠大脑MAO-B和MAO-A活性的作用

人体血小板MAO排他性地含有该酶的B型异构形式(isoform)。在本研究中，测定了DMS的两种对映体对这种酶的抑制，并与司来吉兰所引起的抑制加以比较。此外，本研究还考察了DMS的两种对映体对豚鼠海马组织中MAO-A与MAO-B的抑制活性。豚鼠脑组织是研究大脑多巴胺代谢、多种MAO形式的酶动力学和能与这些酶相互作用的新型药剂的抑制性能的最好动物模型。此动物种中的多种MAO形式显示出与人体脑组织中发现的多种MAO形式相同的动力学性质。最后，对豚鼠注射药剂，以确定它们可以作为活体大脑MAO抑制剂起作用的程度。

B、试验方法

试验系统利用了人体血小板和/或豚鼠海马匀浆对MAO-A专一基质(¹⁴C-血清素)和MAO-B专一基质(¹⁴C-苯基乙基胺)的离体转化。在S(+)DMS、R(-)DMS或司来吉兰的存在下测定了每种基质的转化速率，并与这些药剂不存在时的同功酶活性加以比较。从这些值计算了抑制百分率。通过比较每种药剂引起50％抑制浓度(IC₅₀值)，评估了药效。

在一些实验中，R(-)DMS、S(+)DMS或司来吉兰在为期5天中每天一次经皮下对活体给药，然后宰杀、制备酶海马匀浆和进行MAO-A与MAO-B活性的离体试验。进行这些实验是要证实DMS对映体能进入脑组织并抑制MAO活性。

C、结果

离体MAO-B抑制活性

MAO-B抑制的结果显示在表7和8中。MAO-B抑制的IC₅₀值和与司来吉兰相比的药效显示在表9中。

表7  人体血小板中的MAO-B抑制

表8  豚鼠海马中的MAO-B 抑制

表9  MAO-B抑制的IC₅₀值

			司来吉兰R(-)DMSS(+)DMS	5nM(1)400nM(80)1400nM(2800)	1nM(1)60nM(60)1200nM(1200)

()＝与司来吉兰相比的药效

如所观察到的，作为MAO-B抑制剂，R(-)DMS的药效比S(+)DMS大20～35倍，两种对映体的药效都比司来吉兰小。

MAO-A抑制活性

从考察豚鼠海马中MAO-A抑制的实验得到的结果总结在表10中，DMS两种对映体和司来吉兰的IC₅₀值显示在表11中。

表 10豚鼠海马中的MAO-A抑制

表11 MAO-A抑制的IC₅₀值

		司来吉兰R(-)DMSS(+)DMS	2.5μM(1)50.0μM(20)100.0μM(40)

()＝与(司来吉兰)相比的药效

作为MAO-A抑制剂，R(-)DMS的药效是S(+)DMS的两倍，两者的药效都比司来吉兰小20～40倍。此外，这些药剂每一种在海马脑组织中作为MAO-A抑制剂的药效都比作为MAO-B抑制剂的药效小2～3个数量级，即100～1000倍。因此，司来吉兰和每种DMS对映体都可归入脑组织中选择性MAO-B抑制剂一类。

活体实验结果

每种DMS对映体在连续5天中每天一次经皮下注射对活体给药，然后测定大脑MAO-B活性的抑制。在这些条件下，作为MAO-B抑制剂，R(-)DMS和S(+)DMS是等效的，但其药效比司来吉兰小10倍。结果显示在图9中，IC₅₀值总结在表12中。

表12 当试验前注射药剂时大脑MAO-B的IC₅₀值

		司来吉兰R(-)DMSS(+)DMS	0.03mg/kg0.30mg/kg0.30mg/kg

这个实验证实，DMS对映体中每一种在非经肠活体给药后都能穿透血-脑屏障和抑制大脑MAO-B。它也证实，离体观察到的每种DMS对映体与司来吉兰之间作为MAO-B抑制剂的药效差异在活体条件下减少了。本实验中给药的剂量不足以抑制MAO-A活性。

D、结论

R(-)DMS和S(+)DMS都证实了作为MAO-A抑制剂和MAO-B抑制剂的活性。每种对映体对MAO-B都是选择性的。在抑制MAO-A和MAO-B两者方面，S(+)DMS的药效一般低于R(-)DMS，而DMS两个对映体的药效都低于司来吉兰。两个对映体都证实了活体给药后的活性，表明这些对映体在非经肠给药后都能进入脑组织。这些药剂抑制MAO-A和MAO-B的能力表明这些药剂有作为帕金森病、阿尔茨海默病或抑郁症的治疗剂的价值。

实例7  去甲司来吉兰的对映体的活体神经保护

通过将这些药剂对摇摆者小鼠-运动神经元疾病，尤其肌萎缩外侧硬化症(ALS)的一种动物模型-给药，考察了DMS对映体防止神经病学恶化的能力。摇摆者小鼠表现出渐进性恶化的前肢虚弱、步态紊乱和前肢肌肉屈曲收缩。

B、试验方法

在一项随机化双盲研究中，在为期30天内每天经腹膜内注射，对摇摆者小鼠给药R(-)DMS、S(+)DMS或对照剂。在这一时间结束时，考察小鼠的握力、跑步时间、休眠运动活性，并对其半定量爪姿态异常和半定量步行异常分级。制备溶液并向动物注射该溶液的研究人员，与分析行为变化的研究人员是不同的。

试验和分级基本上是像Mitsumoto等人[Ann.Neurol.36：142-148(1994)]所述那样进行的。小鼠前爪握力是通过让该动物用双爪抓住一根金属线来确定的。该金属线连接到一台克级量力计上，对小鼠尾巴实施牵引，直至该动物被迫松开金属线。取松开时量力计上的读数作为握力的量度。

跑步时间定义为穿过某规定距离如2.5英尺所需要的最短时间，记录若干次试验的最好时间。

爪姿态异常按照一个以收缩程度为基础的尺度分级，步行异常按照一个从正常步行到不能用爪支撑身体这一范围的尺度分级。

运动活性是通过把动物转移到一个用方形格栅覆盖地板的考察区域中来确定的。活性是用一只小鼠在一设定时间间隔如9分钟内穿过的方格数目来量度的。

C、结果

本研究开始时，各组动物中没有一组在任何变量上有差异，表明这三组在基线上是彼此接近的。体重增加在所有三组中都相同，表明任何动物中均无重大副作用发生。表13总结了在试验动物的平均握力方面观察到的差异：

表13  用R(-)或S(+)DMS处理的

摇摆者小鼠中的平均握力

			对照(安慰剂)R(-)DMSS(+)DMS	1099	9(0-15)20(0-63)14(7-20)

N＝分析的动物数目

所有动物在第一周结束时握力都显著下降。本研究结束时，握力是对照动物最小，范围为0～15g，平均9g。R(-)组的平均握力为20g，数值范围为0～63g。注射了S(+)DMS的第三组，其平均握力为14g，单个数值范围为7～20g。虽然处理动物组中握力的可变性妨碍了这种数据的有意义统计分析，但DMS处理动物中测量的平均握力大于对照组。

也测试了跑步时间、休眠运动活性、半定量爪姿态异常分级和半定量步行异常分级。然而，这些测试无一显示出能表明这三组中任何一组区别于另一组的数据。

实例8R(-)DMS和S(+)DMS的免疫系统恢复作用

在动物和人体中发生的免疫功能与年龄相关的衰退，使较老的个体更易于发生传染病和癌症。美国专利5,276,057和5,387,615认为司来吉兰可用于治疗免疫系统机能障碍。进行本实例实验，是要确定R(-)DMS和S(+)DMS是否也可用于治疗这样的机能障碍。应当认识到，支撑患者正常免疫防御的能力会有益于治疗种类繁多的急性和慢性疾病，包括癌症、AIDS以及细菌性和病毒性感染。

A、试验程序

本实验利用了大鼠模型来考察R(-)DMS和S(+)DMS恢复免疫功能的能力。把大鼠分成下列实验组：

1)年轻大鼠(3月龄，未注射)；

2)老年大鼠(18～20月龄，未注射)；

3)老年大鼠，注射了食盐水；

4)老年大鼠，注射了司来吉兰。剂量为0.25mg/kg体重；

5)老年大鼠，注射了司来吉兰。剂量为1.0mg/kg体重；

6)老年大鼠，注射了R(-)DMS。剂量为0.025mg/kg体重；

7)老年大鼠，注射了R(-)DMS。剂量为0.25mg/kg体重；

8)老年大鼠，注射了R(-)DMS。剂量为1.0mg/kg体重；

9)老年大鼠，注射了S(+)DMS。剂量为1.0mg/kg体重；

在60天内每天一次经腹膜内对大鼠注射。然后，把它们保持另外一段10天的“冲洗”期，在此期间内不给任何注射。这一段时间结束时，将动物宰杀，取出它们的脾脏。然后对脾细胞试验那些能指示免疫系统功能的各种因子。具体地说，用标准试验测定下列：

1)脾细胞离体产生γ-干扰素；

2)离体产生间白细胞素-2；

3)IgM阳性脾细胞的百分率(IgM是B淋巴细胞的制造者)；

4)CD5阳性脾细胞的百分率(CD5是T淋巴细胞的制造者)。

B、结果

注射司来吉兰、R(-)DMS和S(+)DMS对大鼠脾细胞产生干扰素的影响表示在图10和11中。如图10中所示，有一种随年龄发生的细胞干扰素产量锐减(对比年轻动物细胞的产量与老年动物或注射了食盐水的老年动物细胞的产量)。注射司来吉兰、R(-)DMS和S(+)DMS全都导致γ-干扰素水平的部分恢复，剂量为1.0mg/kg体重时增加幅度最大。

图11中重复了与图10中所示相同的数据，所不同的是省略了年轻大鼠细胞的结果。此图更清楚地显示了狄普尼尔、R(-)DMS和S(+)DMS能使老年大鼠脾细胞中γ-干扰素产量恢复的程度。干扰素-γ是一种多功能蛋白质，能抑制病毒复制和调节各种各样的免疫功能。它影响B-细胞所产生的那一类抗体，上调I类和II类MHC复合抗原，和提高巨噬细胞中介的细胞内寄生虫杀灭效率。

图12显示各注射对大鼠脾细胞产生间白细胞素-2的影响。可以看到，R(-)DMS和S(+)DMS两者都能使间白细胞素-2产量恢复到在年轻动物细胞中看到的水平。

各注射对呈IgM阳性的脾细胞百分率的影响表示在图13中。已发现，司来吉兰和R(-)DMS两者都能使IgM阳性细胞部分地恢复到更接近于在年轻大鼠脾中看到的那种水平。因此，显然这些药剂使B淋巴细胞数目恢复。

图14表明，注射0.025mg/kg R(-)DMS或S(+)DMS都可以稍微提高老年大鼠脾中CD5阳性细胞的百分率。然而，无论注射司来吉兰还是注射0.25或1.0mg/kg R(-)DMS显然都没有产生任何影响。

C、结论

总而言之，这些结果支持如下结论：DMS的对映体与司来吉兰对免疫系统功能的影响相仿。此外，关于干扰素、IL-2的产量和关于IgM阳性脾细胞的百分率所得到的结果支持如下结论：DMS对映体能至少部分地恢复年龄依赖型免疫系统功能损失。因此，显而易见，R(-)DMS和S(+)DMS对于因宿主免疫减弱而产生的疾病和病症将具有治疗上有益的效果。这会包括癌症、AIDS和所有类型的传染病。

实例9剂型实例

A、去甲司来吉兰贴剂

成分                        以干重计(mg/cm²)

                                                  

Durotak^_87-2194

粘合型丙烯酸聚合物    90重量份

去甲司来吉兰          10重量份

这两种成分充分混合，浇铸在一张Scotchpak^_9723聚酯薄膜背衬薄板材上，干燥。把该背衬薄板材切割成贴剂，每贴各加一张Scotchpak^_1022氟聚合物隔离衬，将该贴剂气密地封入金属箔封套中。在由神经元变性或神经元创伤所产生的人体病症如帕金森病的治疗中，日敷一贴，以供给每24小时1～5mg去甲司来吉兰。

B、眼用溶液剂

盐酸盐形式的去甲司来吉兰(0.1g)，1.9g硼酸和0.004g硝酸苯基汞溶解于适量无菌水中，使总量为100ml。混合物消毒，密封。它可在眼科上用于治疗由神经元变性或神经元创伤产生的病症，如青光眼视神经病和黄斑变性。

实例3：静脉内溶液剂

在足以提供最终体积为100ml的0.9％等渗食盐水溶液中溶解1g去甲司来吉兰盐酸盐，制备一种1％溶液。此溶液用柠檬酸缓冲到pH 4、密封、灭菌，提供一种适合于静脉内给药的1％溶液剂，可用于治疗由神经元变性或神经元创伤产生的病症。

C、经皮贴剂

向甲基丙烯酸与甲基丙烯酸二甲基氨基乙酯的共聚物的有机溶剂如甲基·乙基酮溶液中添加一种自交联丙烯酸基压敏粘合剂。将此物浇铸到一张可去除的第一金属箔上，蒸发溶剂，这种有涂层的金属箔像EP-A 593807中所述那样放在一个聚酯背衬层上。

向非交联型丙烯酸基压敏粘合剂的适用有机溶剂如乙酸乙酯溶液中添加去甲司来吉兰盐酸盐。可以添加额外的溶剂，还可以采用加热和搅拌以利于分散液形成。将此物涂布到一张可去除的第二金属箔上，蒸发溶剂。从前面制备的聚酯背衬层上取下金属箔之后，将其层压到有涂层的第二可去除金属箔上。把另一份自交联型丙烯酸基压敏粘合剂和甲基丙烯酸与甲基丙烯酸二甲基氨基乙酯的共聚物的有机溶剂如甲基·乙基酮溶液浇铸到第三张可去除金属箔上，蒸发溶剂。去掉第二张和第三张金属箔，把这些残留层压在一起，所形成的层压品切成贴剂，包装。所形成的贴剂将有一个可去除的隔离衬，一个起初无去甲司来吉兰的粘合剂层和一个含有去甲司来吉兰盐酸盐(或其它盐)的基体层。把一个不可渗透的背衬层通过一个类似于与可去除隔离衬接触的粘合剂层的中间粘合剂层粘合到该基体层上。在治疗由神经元变性或神经元创伤产生的人体病症如帕金森病时，日敷一贴，以供给游离碱形式的去甲司来吉兰。

D、经口剂型

从下列成分(mg/单元剂量)制备含有去甲司来吉兰的片剂和胶囊剂：

去甲司来吉兰    1～5

微晶纤维素      86

乳糖            41.6

柠檬酸          0.5～2

柠檬酸钠        0.1～2

硬脂酸镁        0.4

柠檬酸与柠檬酸钠的比例约1∶1。

Claims (21)

1.一种化合物，即S(+)去甲司来吉兰或其药物上可接受的酸加成盐，该化合物可供治疗用途。

2.权利要求1所定义的化合物用于制造一种神经保护或神经元救援用的药剂的用途。

3.权利要求1所定义的化合物用于制造一种免疫系统功能恢复或改善用的药剂的用途。

4.权利要求1所定义的化合物用于制造一种司来吉兰反应性疾病或病症治疗用的药剂的用途。

5.权利要求1所定义的化合物用于制造一种帕金森病、阿尔茨海默病或抑郁症治疗用的药剂的用途。

6.权利要求1所定义的化合物用于制造一种注意力缺乏机能亢进失调治疗用的药剂的用途。

7.权利要求1所定义的化合物用于制造一种局部缺血或缺氧治疗用的药剂的用途。

8.一种药剂，其包含权利要求1的化合物作为活性成分。

9.权利要求8的药剂，其中所述药剂是注射剂型。

10.权利要求8的药剂，其中所述药剂是经皮剂型。

11.权利要求8的药剂，其中所述化合物是盐酸盐。

12.一种药剂，其包含一种化合物，即R-(-)去甲司来吉兰或其药物上可接受的盐作为有效成分，其中所述药剂是经皮剂型。

13.一种化合物，即R-(-)去甲司来吉兰或其药物上可接受的盐用于制造一种神经保护或神经元救援用的药剂的用途。

14.一种化合物，即R-(-)去甲司来吉兰或其药物上可接受的盐用于制造一种免疫系统功能恢复或改善用的药剂的用途。

15.一种化合物，即R-(-)去甲司来吉兰或其药物上可接受的盐用于制造一种司来吉兰反应性疾病或病症治疗用的药剂的用途。

16.一种化合物，即R-(-)去甲司来吉兰或其药物上可接受的盐用于制造一种帕金森病、阿尔茨海默病或注意力缺乏机能亢进失调治疗用的药剂的用途。

17.一种化合物，即R-(-)去甲司来吉兰或其药物上可接受的盐用于制造一种治疗抑郁症用的药剂的用途。

18.一种化合物，即R-(-)去甲司来吉兰或其药物上可接受的盐用于制造一种局部缺血或缺氧治疗用的药剂的用途。

19.一种化合物，即R-(-)去甲司来吉兰或其药物上可接受的盐用于制造一种糖尿病型神经病或肌萎缩性外侧硬化治疗用的药剂的用途。

20.权利要求13-19中任何一项的用途，其中所述化合物是盐酸盐。

21.权利要求13-20中任何一项的用途，其中所述药剂是非口服药剂。