HK1081191B

HK1081191B - 3-(4-氧代-4h-苯并吡喃-2-基)-(1h)-喹啉-4-酮衍生物、其制备方法和含有它们的药物组合物

Info

Publication number: HK1081191B
Application number: HK06101208.0A
Authority: HK
Inventors: Jean-Daniel Brion; Lucien Israel; Alain Le Ridant; Catherine Harpey; Cherif Rabhi; El Bachir Kaloun
Original assignee: Les Laboratoires Servier
Priority date: 2002-06-19
Filing date: 2003-06-18
Publication date: 2007-09-07

Description

3-(4-氧代-4H-苯并吡喃-2-基)-(1H)- 喹啉-4-酮衍生物、其制备方法和含有它们的药物组合物

本发明涉及新的3-(4-氧代-4H-苯并吡喃-2-基)-(1H)-喹啉-4-酮化合物、它们的制备方法、含有它们的药物组合物以及它们作为抗癌药的用途。

抗癌治疗需要不断开发新的抗肿瘤药，旨在获得具有更强活性同时具有更好的耐受性的药物。

除本发明的化合物是新化合物以外，它们具有非常有价值的抗肿瘤特性。

一方面，它们具有促细胞凋亡作用，该作用与p53、pRb和Bc1-2的表达无关，以及具有显著的抗血管生成作用，另一方面，它们与许多抑制细胞的治疗药具有协同作用，而没有任何另外的血毒性或通常具有的任何不耐性病征。

由于上述特性，本发明的化合物对于化学治疗是高度有效且良好耐受的辅药，同时，当化学治疗由于种种原因如不耐受性、完成疗程、由于手术原因而中止等而中止时，本分明的药物能够维持和延长这些化学治疗的作用。

由于本发明化合物的特性，它们可以有利地与目前使用的所有细胞毒性治疗和放射疗法(未增加其毒性)以及针对攻击性癌(乳癌和前列腺癌)的各种激素疗法联合。

更具体而言，本发明涉及式(I)化合物：

其中：

●R₁、R₂、R₃、R₄、R₆、R₈、R₉和R₁₀可以相同或不同，各自表示选自如下的基团：氢、羟基、直链或支链(C₁-C₆)烷氧基、直链或支链(C₁-C₆)烷基、其中烷氧基是直链或支链(C₁-C₆)烷氧基的芳基烷氧基、其中烷氧基各自为直链或支链(C₁-C₆)烷氧基的烷氧基羰基烷氧基，和OR′，其中R′代表离子化或可离子化的基团，例如磷酸基-PO(OH)₂、硫酸基-SO₃H、其中烷基是直链或支链(C₁-C₆)烷基的羧基烷基羰基、其中烷基各自是直链或支链(C₁-C₆)烷基的二烷基氨基烷基羰基或者其中烷基是直链或支链(C₁-C₆)烷基的羧基烷基氨基羰基，

●R₅表示选自直链或支链(C₁-C₆)烷基、芳基和杂芳基的基团，

●R₇表示选自氢、羟基、直链或支链(C₁-C₆)烷氧基、直链或支链(C₁-C₆)烷基和(C₃-C₇)环烷基的基团，或者R₇表示含氮或含氧的杂环，若存在时的其旋光异构体、其与药学上可接受的酸的加成盐和其水合物和溶剂合物。

在药学上可接受的酸之中，可没有任何限制地提及盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、乙酸、三氟乙酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、富马酸、酒石酸、马来酸、柠檬酸、抗坏血酸、草酸、甲磺酸、苯磺酸、樟脑酸。

芳基应理解为苯基、联苯基、萘基或四氢萘基，这些基团各自任选被一个或多个相同或不同的选自如下的原子或基团取代：卤原子和直链或支链(C₁-C₆)烷基、羟基、直链或支链(C₁-C₆)烷氧基、直链或支链(C₁-C₆)多卤代烷基、氨基(任选被一或两个直链或支链(C₁-C₆)烷基取代)、硝基和(C₁-C₂)亚烷基二氧基。

杂芳基应理解为5-至12-元基团，其或是芳族单环或是其中至少有一个环是芳香特性的双环，并且杂芳基包含一个、两个或三个选自氧、氮和硫的杂原子，应该理解：杂芳基可任选被一个或多个相同或不同的选自如下的原子或基团取代：卤原子和直链或支链(C₁-C₆)烷基、羟基、直链或支链(C₁-C₆)烷氧基、直链或支链(C₁-C₆)多卤代烷基和氨基(任选被一或两个直链或支链(C₁-C₆)烷基取代)。在杂芳基之中，可没有任何限制地提及噻吩基、吡啶基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、唑基、异唑基、噻唑基、异噻唑基、喹啉基、异喹啉基和嘧啶基。

含氮杂环应理解为饱和或不饱和5-至7-元含氮单环基团，其任选被一个或多个选自如下的基团取代：羟基、直链或支链(C₁-C₆)烷氧基、直链或支链(C₁-C₆)烷基、其中烷基部分是直链或支链的芳基-(C₁-C₆)烷基，和其中烷基部分是直链或支链的且其中氨基任选被一个或两个直链或支链(C₁-C₆)烷基取代的氨基-(C₁-C₆)烷基。

优选的含氮杂环是任选取代的哌啶基和四氢吡啶基。

含氧杂环应理解为饱和或不饱和的含氧原子的5-至7-元单环基团，其任选被一个或多个选自如下的基团取代：羟基、直链或支链(C₁-C₆)烷氧基、直链或支链(C₁-C₆)烷基、其中烷基部分是直链或支链的芳基-(C₁-C₆)烷基，和其中烷基部分是直链或支链的且其中氨基任选被一个或两个直链或支链(C₁-C₆)烷基取代的氨基-(C₁-C₆)烷基。

本发明的一个有利方面涉及其中R₅表示芳基的式(I)化合物。

本发明的另一个有利方面涉及其中R₇表示氢原子的式(I)化合物。

本发明的另一个有利方面涉及其中R₇表示任选取代的含氮杂环的式(I)化合物。

优选的式(I)化合物中，R₅表示苯基且R₇表示氢原子或取代的1，2，3，6-四氢-4-吡啶基。

本发明优选的化合物中，可以更加特别提及的是：

-3-(5-羟基-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基)-1-苯基-1H-喹啉-4-酮，

-3-[5，7-二甲氧基-8-(1-甲基-1，2，5，6-四氢吡啶-4-基)-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基]-1-苯基-1H-1，4-二氢喹啉-4-酮，

-3-(5，7-二羟基-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基)-1-苯基-1H-1，4-二氢喹啉-4-酮，

-和3-[5，7-二羟基-8-(1-甲基-1，2，5，6-四氢吡啶-4-基)-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基]-1-苯基-1H-1，4-二氢喹啉-4-酮。

本发明还涉及制备式(I)化合物的方法，该方法的特征在于：

使式(II)化合物：

其中R₁、R₂、R₃、R₄和R₅如式(I)所定义，

与乙氧基亚甲基丙二酸二乙酯反应，生成式(III)化合物：

其中R₁、R₂、R₃、R₄和R₅如上所定义，并且Et代表乙基，

将式(III)化合物在酸条件下环化，生成式(IV)化合物：

其中R₁、R₂、R₃、R₄和R₅和Et如上所定义，

将式(IV)化合物水解，生成式(V)化合物：

其中R₁、R₂、R₃、R₄和R₅如上所定义，

使式(V)化合物与亚硫酰氯作用而转化为酰氯，然后使其与式(VI)化合物反应：

其中R₇、R₈、R₉和R₁₀如式(I)所定义，

生成式(VII)化合物：

其中R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇、R₈、R₉和R₁₀如上所定义，

使式(VII)化合物与碱作用，生成式(VIII)化合物：

其中R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇、R₈、R₉和R₁₀如上所定义，且表明所得化合物根据涉及的分子呈酮-烯醇混合物的形式，

然后使式(VIII)化合物经历酸性条件，生成式(I)化合物，如果必要，根据常规纯化技术将其纯化，如果必要，根据常规分离技术将其分离为其旋光异构体，并且如果需要将其转化为与药学上可接受的酸的加成盐。

其中一个或多个取代基R₁-R₄和R₆-R₁₀代表羟基的式(I)化合物也可以通过裂解其中对应取代基代表直链或支链(C₁-C₆)烷氧基的式(I)化合物而制得。

其中一个或多个取代基R₁-R₄和R₆-R₁₀代表烷氧基羰基烷氧基、芳基烷氧基或OR′基的式(I)化合物也可以由其中对应取代基代表羟基的式(I)化合物开始制得。

除了它们是新化合物这一事实之外，本发明的化合物具有非常有价值的抗肿瘤特性，这使它们可用于治疗癌症。

在本发明化合物可治疗的癌症类型中，可没有任何限制地提及腺癌、癌、肉瘤、神经胶质瘤和白血病。

它们也可以与另一种抗癌药如紫杉醇、他莫昔芬及其衍生物、顺铂及其类似物、伊立替康及其代谢物、各种烷化剂联和用于治疗，其中主要的实例是环磷酰胺、依托泊甙、长春花属生物碱、阿霉素和其它蒽环类和亚硝基脲类。

本发明还涉及含有作为活性成分的至少一种式(I)化合物以及一种或多种合适的惰性无毒赋形剂的药物组合物。在本发明的药物组合物中，可特别提及的是适于口服、肠胃外(静脉内、肌肉内或皮下)或经鼻施用的那些、片剂或糖衣丸、舌下片剂、胶囊剂、锭剂、栓剂、乳膏、软膏、皮肤凝胶剂、注射制剂、可饮用混悬剂等。

有用剂量可适应于疾病的性质和严重程度、施用途径、患者的年龄和体重和任何相关的治疗，且为每24小时一次或分多次施用0.5mg-2g。

以下实施例举例说明本发明但没有任何限制。

使用的起始原料是已知产物或根据已知方法制备。

根据常用光谱测定技术(红外光谱、NMR、质谱分析法)测定实施例中描述的化合物的结构。

实施例1：3-(7-甲氧基-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基)-1-苯基-1H-1，4-二氢喹啉-4-酮

步骤A：N，N-二苯基氨基亚甲基丙二酸二乙酯

将10mmol乙氧基亚甲基丙二酸二乙酯加至10mmol二苯胺中，然后将该混合物在140-150℃加热5小时。回到环境温度后，用100ml二乙醚洗涤形成的固体并用己烷重结晶，得到褐色固体形式的预期产物。

熔点：146-148℃。

MS(EI，m/z)：339.9(M^+.)。

步骤B：4-氧代-1-苯基-1H-1，4-二氢喹啉-3-甲酸乙酯

向10mmol前一步骤得到的化合物中加入13.3g多磷酸。然后将该混合物(其逐渐变为液体)在150-160℃加热45分钟，然后冷却至90℃。水解后，将混合物用10％NaOH溶液中和，分离后得到预期产物。

IR(NaCl板，cm^-1)：1733(υC＝O)，1610(υC＝C)，1645(υC＝O)，690(υC-H(ar))。

MS(EI，m/z)：293.3(M^+.)。

步骤C：4-氧代-1-苯基-1H-1，4-二氢喹啉-3-甲酸

向溶于甲醇中的10mmol前一步骤得到的化合物中加入38mL 2MNaOH溶液。然后将该反应混合物在甲醇回流下加热10小时，然后真空下除去溶剂。将水加入所得残留物，然后用4M HCl溶液中和该混合物。用水洗涤所得灰色固体，然后干燥，得到预期产物。

熔点：210-213℃。

IR(KBr，cm^-1)：3320(υOH(酸))，1733(υC＝O)，1610(υC＝C)，1645(υC＝O)，690(υC-H(ar))。

MS(EI，m/z)：265.3(M^+.)。

步骤D：4-氧代-1-苯基-1H-1，4-二氢喹啉-3-甲酸(2-乙酰基-5-甲氧基)苯基酯

将10mmol前一步骤得到的化合物加入到溶于二氯乙烷中的20mmol亚硫酰氯中。将该反应混合物在溶剂回流下加热2小时，然后真空浓缩，真空下用二氯乙烷夹带蒸馏除去过量的亚硫酰氯，重复数次。

将由此得到的酰氯(白色固体)以小份加至6.7mmol溶于吡啶的市售2-羟基-4-甲氧基苯乙酮中。在惰性气氛、环境温度下搅拌12小时后，将该反应混合物通过硅胶柱色谱法(洗脱液：CH₂Cl₂/MeOH：95/5)提纯，得到黄色粉末状预期产物。

熔点：137-139℃。

IR(KBr，cm^-1)：2865(OCH₃的υCH)，1740(υC＝O)，1655(υC＝O)，1590-1575(υC＝C)。

MS(电喷雾，m/z)：413.4(M^+.)。

步骤E：3-[3-(2-羟基-4-甲氧基苯基-1，3-二氧代丙-1-基)-1H-1-苯基-1，4二氢喹啉-4-酮

在惰性气氛、环境温度下，将12mmol叔丁醇钾慢慢加入到溶于二甲基甲酰胺和四氢呋喃的混合物(35/75)中的10mmol前一步骤得到的化合物。将该反应混合物搅拌2小时并倒入含有1.3mL 10％盐酸的55mL 0℃水溶液中。滤出得到的沉淀，用大量的水洗涤然后干燥。将所得固体通过硅胶柱色谱法(洗脱液：CH₂Cl₂)提纯，得到酮-烯醇混合物形式的预期产物。

熔点：228-230℃。

步骤F：3-(7-甲氧基-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基)-1-苯基-1H-1，4-二氢喹啉-4-酮

向溶入25mL冰醋酸的10mmol前一步骤得到的化合物中慢慢加入25ml含有20％硫酸的乙酸溶液。生成黄色沉淀。于环境温度下2小时30分钟后，将该混合物倒入冰水中(4℃)。滤出不溶物并用大量水洗涤，得到白色粉末状预期产物。

熔点：297℃。

IR(cm^-1)：2825(υOCH₃)，1750(υC＝O)，1675(υC＝O)，1570-1590(υC＝C)。

MS(电喷雾，m/z)：396.1(M^+.)。

元素微量分析：

％C ％H ％N

计算值： 72.63 4.63 3.39

实测值： 72.46 4.57 3.27

实施例2：3-(7-羟基-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基)-1-苯基-1H-喹啉-4-酮

在惰性气氛、避光条件下，边搅拌边将10mmol实施例1的化合物加入到溶于214mL氢碘酸(57％水溶液)中的500mmol苯酚中。然后将该多相反应混合物在160℃下加热15小时。最初的黄色溶液转化为橙色。回到环境温度后，将该溶液倒在冰上，并用水、然后用二乙醚洗涤所得沉淀，以除去残留苯酚，重结晶之后，得到黄色粉末状预期产物。

熔点：295-300℃(丙酮)。

IR(cm^-1)：3280(υOH)，1770(υC＝O)，1655(υC＝O)，1570-1590(υC＝C)。

MS(电喷雾，m/z)：381.1(M^+.)。

元素微量分析：

％C ％H ％N

计算值： 72.17 4.29 3.51

实测值： 72.37 4.37 3.55

实施例3：3-(6-甲氧基-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基)-1-苯基-1H-1，4-二氢喹啉-4-酮

根据实施例1描述的方法，但在步骤D中用2-羟基-5-甲氧基苯乙酮代替2-羟基-4-甲氧基苯乙酮，得到预期产物。

熔点：265℃。

IR(cm^-1)：2830(υOCH₃)，1740(υC＝O)，1655(υC＝O)，1570-1590(υC＝C)。

MS(电喷雾，m/z)：396.1(M^+.)。

元素微量分析：

％C ％H ％N

计算值： 72.63 4.63 3.39

实测值： 72.74 4.46 3.36

实施例4：3-(5-甲氧基-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基)-1-苯基-1H-1，4-二氢喹啉-4-酮

根据实施例1描述的方法，但在步骤D中用2-羟基-6-甲氧基苯乙酮代替2-羟基-4-甲氧基苯乙酮，得到预期产物。

熔点：271℃。

IR(cm^-1)：2830(υOCH₃)，1744(υC＝O)，1655(υC＝O)，1570-1590(υC＝C)。

MS(电喷雾，m/z)：3961(M^+.)。

元素微量分析：

％C ％H ％N

计算值： 72.63 4.63 3.39

实测值： 72.46 4.57 3.27

实施例5：3-(5，7-二甲氧基-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基)-1-苯基-1H-1，4-二氢喹啉-4-酮

步骤A：2，4-二甲氧基-6-羟基苯乙酮：

将14.5mmol K₂CO₃一次性加入到10mmol溶于丙酮中的根皮乙酰苯一水合物中。然后在惰性气氛下于30分钟内加入20mmol硫酸二甲酯，并将反应混合物在丙酮回流下加热12小时。回到环境温度后，将混合物倒入水中，得到白色悬液，然后将其过滤。洗涤所得白色粉末，然后用甲醇重结晶，得到预期产物。

熔点：80-81℃(甲醇)。

步骤B：3-(5，7-二甲氧基-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基)-1-苯基-1H-1，4-二氢喹啉-4-酮：

根据实施例1描述的方法，但在步骤D中用以上步骤A获得的化合物代替2-羟基-4-甲氧基苯乙酮，得到预期产物。

熔点：282℃。

IR(cm^-1)：2825(υOCH₃)，1744(υC＝O)，1655(υC＝O)，1570-1590(υC＝C)。

MS(电喷雾，m/z)：425.45(M^+.)。

元素微量分析：

％C ％H ％N

计算值 70.42 4.77 3.16

实测值： 70.33 4.76 3.26

实施例6：3-(5-羟基-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基)-1-苯基-1H-喹啉-4-酮

根据实施例2描述的方法，由实施例4的化合物开始，得到预期产物。

熔点：＞300℃(丙酮)。

IR(cm^-1)：3200(υOH)，1770(υC＝O)，1635(υC＝O)，1570-1590(υC＝C)。

MS(电喷雾，m/z)：381.1(M^+.)。

元素微量分析：

％C ％H ％N

计算值： 72.17 4.29 3.51

实测值： 72.33 4.40 3.65

实施例7：3-(5-羟基-7-甲氧基-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基)-1-苯基-1H-喹啉-4-酮

在惰性气氛、避光条件下，将11mmol BBr₃(1M二氯甲烷溶液)在15分钟内加入到10mmol实施例5的化合物的二氯甲烷悬液中，结果生成黄色沉淀。将该反应混合物在环境温度下剧烈搅拌6小时，然后冷却至0℃。然后加入乙醇并在真空下浓缩溶液。然后将所得残留物倒入醇水溶液(50％)中，并将混合物剧烈搅拌10分钟。滤出所得沉淀，用水洗涤、然后用二乙醚洗涤，重结晶后，得到米黄色粉末状预期产物。

熔点：295-296℃(丙酮)。

IR(cm^-1)：3224(υOH)，1780(υC＝O)，1655(υC＝O)，1570-1590(υC＝C)。

MS(电喷雾，m/z)：411.41(M^+.)。

元素微量分析：

％C ％H ％N

计算值： 72.99 4.16 3.40

实测值： 72.70 4.10 3.45

实施例8：3-(4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基)-1-苯基-1H-喹啉-4-酮

根据实施例1描述的方法，但在步骤D中用苯乙酮代替2-羟基-4-甲氧基苯乙酮，得到预期产物。

熔点：327-328℃(丙酮)。

MS(电喷雾，m/z)：365.4(M^+.)。

元素微量分析：

％C ％H ％N

计算值： 78.89 4.14 3.83

实测值： 78.60 4.10 3.60

实施例9：3-[5，7-二甲氧基-8-(1-甲基-1，2，5，6-四氢吡啶-4-基)-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基]-1-苯基-1H-1，4-二氢喹啉-4-酮

步骤A：4-(2，4-二甲氧基-6-羟基-5-甲基羰基苯基)-1-甲基-1，2，5，6-四氢吡啶

向溶于冰醋酸中的10mmol实施例5中步骤A得到的化合物中加入11.5mmol 1-甲基哌啶-4-酮，缓慢加入以便不超出25℃。当加入完成后，鼓入氯化氢气流1小时40分钟，然后将该反应混合物在95至100℃温度下加热5小时。通过真空蒸馏除去乙酸，然后用水处理残余油并用乙醚萃取。通过加入40％ NaOH溶液使水相变成碱性。滤出所得沉淀，用大量水洗涤并用石油醚重结晶，得到预期产物。

熔点：143-144℃。

IR(KBr，cm^-1)：3400-3200(υOH)，2843(υOCH₃)，1680(υC＝O)，1655(υC＝C)。

MS(EI，m/z)：291(M^+.)。

步骤B：3-[5，7-二甲氧基-8-(1-甲基-1，2，5，6-四氢吡啶基)-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基]-1-苯基-1H-1，4-二氢喹啉-4-酮

根据实施例1描述的方法，但在步骤D中用以上步骤A所得化合物代替2-羟基-4-甲基苯乙酮，得到预期化合物。

熔点：248-250℃(丙酮)。

IR(cm^-1)：2835(υOCH₃)，1755(υC＝O)，1675(υC＝O)，1570-1590(υC＝C)。

MS(电喷雾，m/z)：520.6(M^+.)。

元素微量分析：

％C ％H ％N

计算值： 73.28 5.10 5.22

实测值： 73.83 5.42 5.38

实施例10：3-(5，7-二羟基-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基)-1-苯基-1H-1，4-二氢喹啉-4-酮

根据实施例实施例2描述的方法，由实施例5的化合物开始得到预期产物。

熔点：365-368℃(丙酮)。

IR(cm^-1)：3224(υOH)，1780(υC＝O)，1655(υC＝O)，1570-1590(υC＝C)。

MS(电喷雾，m/z)：397.4(M^+..)。

元素微量分析：

％C ％H ％N

计算值： 72.54 3.80 3.52

实测值： 72.20 4.01 3.33

实施例11：[2-(4-氧代-1-苯基-1，4-二氢喹啉-3-基)-4H-1-苯并吡喃-7-基氧基]乙酸乙酯

向悬浮于丙酮中的10mmol实施例2的化合物中缓慢加入20mmol碳酸钾，然后加入20mmol溴乙酸乙酯。将该混合物在溶剂回流下加热2小时30分钟，然后在回到环境温度下后，倒入水中。滤出所得不溶物并用大量水洗涤，得到白色固体状的预期产物。

熔点：330℃(丙酮)。

IR(cm^-1)：1744(υC＝O)，1680(υC＝O)，1655(υC＝O)，1570-1590(υC＝C)。

MS(电喷雾，m/z)：467.48(M^+.)。

元素微量分析

％C ％H ％N

计算值： 71.94 4.53 3.00

实测值： 71.70 4.77 3.40

实施例12：3-[5，7-二甲氧基-8-(1-甲基-1，2，5，6-四氢吡啶-4-基)-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基]-1-甲基-1H-1，4-二氢喹啉-4-酮

步骤A：N-苯基氨基亚甲基丙二酸二乙酯

根据实施例1步骤A中描述的方法，但用苯胺代替二苯胺，得到预期产物。

熔点：46-48℃(己烷)。

MS(EI，m/z)：263(M^+.)。

步骤B：N-甲基-N-苯基氨基亚甲基丙二酸二乙酯

在惰性气氛下，向溶于四氢呋喃中的10mmol前一步骤得到的化合物中缓慢(以小份)加入12mmol 95％NaH，然后滴加30mmol碘代甲烷。然后将该反应混合物在环境温度和惰性气氛下搅拌12小时。加入1ml甲醇以中和过量的氢化钠。然后在真空中浓缩溶液，然后将水加入所得残余油。用二氯甲烷萃取后，将合并的有机相干燥、过滤并减压浓缩，得到无色油形式的预期产物。

MS(EI，m/z)：276(M^+.)。

步骤C：3-[5，7-二甲氧基-8-(1-甲基-1，2，5，6-四氢吡啶-4-基)-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基]-1-甲基-1H-1，4-二氢喹啉-4-酮

根据实施例1步骤B至F描述的方法，但在步骤B中用以上步骤B所得化合物代替实施例1步骤A所得化合物，并且在步骤D中用实施例9步骤A所得化合物代替2-羟基-4甲氧基苯乙酮，得到预期产物。

熔点：289-291℃(丙酮)。

MS(电喷雾，m/z)：458.5(M^+.)。

元素微量分析：

％C ％H ％N

计算值： 70.73 5.72 6.11

实测值： 70.25 5.48 5.78

实施例13：3-[5，7-二甲氧基-8-[1-(4-氟苄基)-1，2，5，6-四氢吡啶-4-基]-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基]-1-苯基-1H-1，4-二氢喹啉-4-酮

步骤A：1-(4-氟苄基)哌啶-4-酮：

向溶入二氯甲烷中的10mmol哌啶-4-酮盐酸盐一水合物和20mmol三乙胺中慢慢加入10mmol 4-氟苄基氯；然后将该反应混合物在溶剂回流下加热48小时，同时剧烈搅拌。回到环境温度后，加入水，然后分离各相，将有机相干燥，过滤并在真空下浓缩，得到橙色油状的预期产物。

MS(EI，m/z)：207.2(M^+.)。

步骤B：4-(3-乙酰基-4，6-二甲氧基-2-羟基苯基)-1-(4-氟苄基)-1，2，5，6-四氢吡啶

向溶于冰醋酸中的10mmol实施例5步骤A得到的化合物中加入11mmol以上步骤A得到的化合物，缓慢加入以免温度超过25℃。当加入完成后，向溶液鼓入氯化氢气流2小时，然后将该反应混合物在95-100℃下加热5小时。通过真空蒸馏除去乙酸，然后向得到的残余油中加入水。用二乙醚萃取后，用40％ NaOH溶液使水相变成碱性。滤出得到的沉淀、用大量水洗涤并用醚/乙酸乙酯(90/10)的混和物重结晶，得到米黄色固体形式的预期产物。

熔点：147-150℃。

IR(cm^-1)：3400-3200(υOH)，2871(OCH₃的υCH)，1633(υC＝O)，1655(υC＝C)，1350-1100(υC-F)。

MS(EI，m/z)：385.4(M^+.)。

步骤C：3-[5，7-二甲氧基-8-[1-(4-氟苄基)-1，2，5，6-四氢吡啶-4-基]-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基]-1-苯基-1H-1，4-二氢喹啉-4-酮

根据实施例1描述的方法，但在步骤D中用以上步骤B得到的化合物代替2-羟基-4-甲氧基苯乙酮，得到预期产物。

熔点：218-219℃(丙酮)。

IR(cm^-1)：2835(υOCH₃)，1755(υC＝O)，1655(υC＝O)，1570-1590(υC＝C)。

MS(电喷雾，m/z)：614.66(M^+.)。

实施例14：3-[5，7-二羟基-8-(1-甲基-1，2，5，6-四氢吡啶-4-基)-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基]-1-苯基-1H-1，4-二氢喹啉-4-酮

将10mmol实施例9的化合物分散于氯化吡啶中；然后将该混合物在密封管中于180℃加热12小时。冷却至100℃后，将反应混合物倒入水中并使用10％碳酸氢钠溶液调节pH为7-8(pH起始值为1)。过滤分离不溶物并用水洗涤，得到预期产物。

熔点：＞250℃。

IR(cm^-1)：3330(υOH)，1785(υC＝O)，1665(υC＝O)，1570-1590(υC＝C)。

MS(电喷雾，m/z)：492.5(M^+.)。

元素微量分析：

％C ％H ％N

计算值： 72.94 5.12 5.87

实测值： 73.16 4.91 5.69

实施例15：3-[5，7-二甲氧基-8-(1-苄基-1，2，5，6-四氢吡啶-4-基)-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基]-1-苯基-1H-1，4-二氢喹啉-4-酮

根据实施例13步骤B至C描述的方法，但是在步骤B中用1-苄基哌啶-4-酮代替实施例13步骤A得到的化合物，得到预期产物。

熔点：248-249℃(丙酮)。

IR(cm^-1)：2830(OCH₃的υCH)，1765(υC＝O)，1655(υC＝O)，1570-1590(υC＝C)。

MS(电喷雾，m/z)：596.9(M^+.)。

元素微量分析：

％C ％H ％N

计算值： 76.49 5.41 4.69

实测值： 76.06 5.03 4.93

实施例16：3-[5，7-二羟基-8-(1-苄基-1，2，5，6-四氢吡啶-4-基)-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基]-1-苯基-1H-1，4-二氢喹啉-4-酮

根据实施例14描述的方法，从实施例15的化合物开始制得预期产物。

熔点：230-231℃(丙酮)。

IR(cm^-1)：3340(υCH)，1752(υC＝O)，1655(υC＝O)，1570-1590(υC＝C)。

MS(电喷雾，m/z)：568.6(M^+.)。

元素微量分析：

％C ％H ％N

计算值： 76.04 4.96 4.93

实测值： 76.39 5.41 5.22

实施例17：3-[5，7-二羟基-8-[1-(4-氟苄基)-1，2，5，6-四氢吡啶-4-基]-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基]-1-苯基-1H-1，4-二氢喹啉-4-酮

根据实施例14描述的方法，从实施例13的化合物开始制得预期产物。

熔点：197-198℃(丙酮)。

IR(cm^-1)：3245(υCH)，1775(υC＝O)，1655(υC＝O)，1570-1590(υC＝C)。

MS(电喷雾，m/z)：586.6(M^+.)。

元素微量分析：

％C ％H ％N

计算值： 73.71 4.64 4.78

实测值： 73.20 4.28 4.34

实施例18：3-[5，7-二甲氧基-8-[1-(4-甲氧基苄基)-1，2，5，6-四氢吡啶-4-基]-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基]-1-苯基-1H-1，4-二氢喹啉-4-酮

根据实施例13描述的方法，但在步骤A用4-甲氧基苄基氯代替4-氟苄基氯，制得预期产物。

熔点：232-235℃(丙酮)。

IR(cm^-1)：2845(υOCH₃)，1750(υC＝O)，1655(υC＝O)，1570-1590(υC＝C)。

MS(电喷雾，m/z)：626.7(M^+.)。

实施例19：3-[5，7-二甲氧基-8-(1，2，5，6-四氢吡啶-4-基)-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基]-1-苯基-1H-1，4-二氢喹啉-4-酮

在惰性气氛下，向10mmol实施例18化合物的冰醋酸悬液中加入0.9mg Pd/C(10％重量)。将该反应混合物在70℃加热并在大气压压下于氢气氛中搅拌5小时。然后将该反应混合物用硅藻土过滤，然后用甲醇洗涤。真空蒸馏除去溶剂。向所得的残余物加入pH调节为8-9的水。用CH₂Cl₂/MeOH(90/10)混合物萃取，得到白色固体形式的预期产物。

熔点：251-253℃(二乙醚/丙酮)。

IR(cm^-1)：3387(υN-H)，2880(υOCH₃)，1780(υC＝O)，1655(υC＝O)，1570-1590(υC＝C)。

MS(电喷雾，m/z)：506.5(M^+.)。

元素微量分析：

％C ％H ％N

计算值： 73.50 5.17 5.53

实测值： 73.12 5.58 4.98

实施例20：3-[5，7-二甲氧基-8-(1-异丙基-1，2，5，6-四氢吡啶基)-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基]-1-苯基-1H-1，4-二氢喹啉-4-酮

根据实施例13的步骤B到C描述的方法，但是在步骤B中用N-异丙基哌啶-4-酮代替实施例13步骤A得到的化合物，制得预期产物。

熔点：248-249℃(丙酮)。

IR(cm^-1)：2850(υOCH₃)，1755(υC＝O)，1650(υC＝O)，1570-1590(υC＝C)。

MS(电喷雾，m/z)：548.6(M^+.)。

元素微量分析：

％C ％H ％N

计算值： 74.43 5.88 5.11

实测值： 73.78 5.23 5.78

实施例21：3-[7-(4-溴苄氧基)-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基]-1-苯基-1H-喹啉-4-酮

根据实施例11描述的方法，从实施例2的化合物开始、但用4-溴苄氧基氯代替溴乙酸乙酯，制得预期产物。

IR(cm^-1)：1744(υC＝O)，1655(υC＝O)，1570-1590(υC＝C)。

MS(电喷雾，m/z)：549.4(M^+.)。

元素微量分析：

％C ％H ％N

计算值： 67.65 3.66 2.54

实测值： 66.95 4.21 2.44

实施例22：3-[5，7-二甲氧基-8-[1-(2-二甲基氨基乙基)-1，2，5，6-四氢吡啶-4-基]-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基]-1-苯基-1H-1，4-二氢喹啉-4-酮

根据实施例13描述的方法，但是在步骤A中用2-氯-N，N-二甲基乙基胺代替4-氟苄基氯，得到预期产物。

实施例23：3-[5，7-二羟基-8-[1-(2-二甲基氨基乙基)-1，2，5，6-四氢吡啶-4-基]-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基]-1-苯基-1H-1，4-二氢喹啉-4-酮

根据实施例2描述的方法，从实施例22的化合物开始，制得预期产物。

本发明化合物的药理学研究

实施例24：本发明化合物的体外细胞毒性研究

培养来自不同来源和部位(肺、乳房、前列腺、结肠、血液、膀胱、皮肤、卵巢、脑)的癌的十一种细胞系，以与参比物质相比研究各种化合物。

将细胞与不同浓度的本发明化合物培养96小时。

体外细胞毒活性通过Carmichael在Cancer Res.-1987；47(4)：936-942中所述的MTT[3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基溴化四唑]试验法测定。

活性以术语IC₅₀表示，也就是说抑制50％肿瘤细胞增殖的浓度。

在该模型中，本发明化合物对于一种或多种肿瘤细胞系具有内在细胞毒活性。

例如，实施例9的化合物对于所测试的11种细胞系中的8种具有细胞毒活性(取决于所使用的细胞系，IC₅₀值为2至10μM)。

实施例14的化合物对于所测试的11种细胞系中的5种的IC₅₀值为0.05至0.25μM。

实施例25：本发明化合物与已知抗癌药的体外协同效应

使用对三种抗癌药敏感的三种细胞系：与紫杉醇治疗有关的乳腺癌细胞，与顺铂(CDDP)治疗有关的肺癌细胞，以及与CPT-11(伊立替康)的代谢物SN38治疗有关的结肠癌细胞。

将肿瘤细胞与5种不同浓度的每种本发明化合物和5种浓度的各种抗癌药一起培养96小时。

通过实施例24描述的MTT试验法测定体外细胞毒活性。

根据刊登于Trends Pharmaceutical Sci.-1983；4：450中的Chou和Talabay的方法进行数据分析。

本发明化合物显示出与所测试的不同抗癌药的协同效应，也就是说它们增强了同时施用的抗癌剂的细胞毒活性。

例如，实施例14和16的化合物显示出与紫杉醇和顺铂的协同效应。

实施例26：本发明化合物的细胞凋亡作用

细胞凋亡是一种自然机制，其允许人体除去其自身的异常细胞如癌细胞。

本发明化合物的促细胞凋亡作用研究在前列腺癌系(LN CaP)中进行。将细胞在IC₅₀浓度下培养8-96小时。

然后根据Sgonc在Trends Genetics-1994；10：41描述的方法进行TUNEL试验。

本发明的化合物能够导致细胞凋亡，产生最大强度的时间因化合物而异。

本发明的化合物不同与以前所述的物质，其具有更早导致细胞凋亡的能力。例如，实施例6化合物早期(8小时)导致非常高度的细胞凋亡。

实施例27：药物组合物

每片含有10mg活性组分的1000片片剂的制备处方

实施例9的化合物………………………………………………………… 10g

羟丙基纤维素………………………………………………………………2g

小麦淀粉……………………………………………………………………10g

乳糖…………………………………………………………………………100g

硬脂酸镁……………………………………………………………………3g

滑石…………………………………………………………………………3g

Claims

1、式(I)化合物、若存在时的其旋光异构体、其与药学上可接受的酸的加成盐或其水合物或溶剂合物，

其中：

●R₁、R₂、R₃、R₄、R₆、R₈、R₉和R₁₀可以相同或不同，各自表示选自如下的基团：氢、羟基、直链或支链(C₁-C₆)烷氧基、直链或支链(C₁-C₆)烷基、其中烷氧基是直链或支链(C₁-C₆)烷氧基的芳基烷氧基、其中烷氧基各自为直链或支链(C₁-C₆)烷氧基的烷氧基羰基烷氧基，和OR′，其中R′代表选自如下的基团：-PO(OH)₂、-SO₃H、其中烷基是直链或支链(C₁-C₆)烷基的羧基烷基羰基、其中烷基各自是直链或支链(C₁-C₆)烷基的二烷基氨基烷基羰基和其中烷基是直链或支链(C₁-C₆)烷基的羧基烷基氨基羰基，

●R₇表示选自氢、羟基、直链或支链(C₁-C₆)烷氧基、直链或支链(C₁-C₆)烷基和(C₃-C₇)环烷基的基团，或者R₇表示含氮或含氧的杂环，

芳基表示苯基、联苯基、萘基或四氢萘基，这些基团各自任选被一个或多个相同或不同的选自如下的原子或基团取代：卤原子和直链或支链(C₁-C₆)烷基、羟基、直链或支链(C₁-C₆)烷氧基、直链或支链(C₁-C₆)多卤代烷基、任选被一或两个直链或支链(C₁-C₆)烷基取代的氨基、硝基和(C₁-C₂)亚烷基二氧基，

杂芳基表示5-至12-元基团，其或是芳族单环或是其中至少有一个环是芳香特性的双环，并且杂芳基包含一个、两个或三个选自氧、氮和硫的杂原子，而且：杂芳基可任选被一个或多个相同或不同的选自如下的原子或基团取代：卤原子和直链或支链(C₁-C₆)烷基、羟基、直链或支链(C₁-C₆)烷氧基、直链或支链(C₁-C₆)多卤代烷基和任选被一或两个直链或支链(C₁-C₆)烷基取代的氨基，

含氮杂环表示饱和或不饱和的含氮原子的5-至7-元单环基团，其任选被一个或多个选自如下的基团取代：羟基、直链或支链(C₁-C₆)烷氧基、直链或支链(C₁-C₆)烷基、其中烷基部分是直链或支链的芳基-(C₁-C₆)烷基，和其中烷基部分是直链或支链的且其中氨基任选被一个或两个直链或支链(C₁-C₆)烷基取代的氨基-(C₁-C₆)烷基，

含氧杂环表示饱和或不饱和的含氧原子的5-至7-元单环基团，其任选被一个或多个选自如下的基团取代：羟基、直链或支链(C₁-C₆)烷氧基、直链或支链(C₁-C₆)烷基、其中烷基部分是直链或支链的芳基-(C₁-C₆)烷基，和其中烷基部分是直链或支链的且其中氨基任选被一个或两个直链或支链(C₁-C₆)烷基取代的氨基-(C₁-C₆)烷基。

2、根据权利要求1的式(I)化合物，其中R₁、R₂、R₃、R₄、R₆、R₈、R₉和R₁₀可以相同或不同，各自表示选自如下的基团：氢、羟基、直链或支链(C₁-C₆)烷氧基、直链或支链(C₁-C₆)烷基、其中烷氧基是直链或支链(C₁-C₆)烷氧基的芳基烷氧基和其中烷氧基各自为直链或支链(C₁-C₆)烷氧基的烷氧基羰基烷氧基。

3、根据权利要求1-2中任一项的式(I)化合物，其中R₅表示芳基。

4、根据权利要求1-2中任一项的式(I)化合物，其中R₇表示氢原子。

5、根据权利要求1-2中任一项的式(I)化合物，其中R₇表示任选取代的含氮杂环。

6、根据权利要求1-2中任一项的式(I)化合物，其中R₅表示苯基且R₇表示氢原子或取代的1，2，3，6-四氢-4-吡啶基。

7、根据权利要求1的式(I)化合物，其为3-(5-羟基-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基)-1-苯基-1H-喹啉-4-酮。

8、根据权利要求1的式(I)化合物，其为3-[5，7-二甲氧基-8-(1-甲基-1，2，5，6-四氢吡啶-4-基)-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基]-1-苯基-1H-1，4-二氢喹啉-4-酮。

9、根据权利要求1的式(I)化合物，其是3-(5，7-二羟基-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基)-1-苯基-1H-1，4-二氢喹啉-4-酮。

10、根据权利要求1的式(I)化合物，其是3-[5，7-二羟基-8-(1-甲基-1，2，5，6-四氢吡啶-4-基)-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-2-基]-1-苯基-1H-1，4-二氢喹啉-4-酮。

11、制备根据权利要求1的其中R₆是氢的式(I)化合物的方法，其特征在于：

使式(II)化合物：

其中R₁、R₂、R₃、R₄和R₅如权利要求1所定义，

与乙氧基亚甲基丙二酸二乙酯反应，生成式(III)化合物：

其中R₁、R₂、R₃、R₄和R₅如权利要求1所定义，并且Et代表乙基，

将式(III)化合物在酸条件下环化，生成式(IV)化合物：

将式(IV)化合物水解，生成式(IV)化合物：

其中R₁、R₂、R₃、R₄和R₅如权利要求1所定义，

其中R₇、R₈、R₉和R₁₀如权利要求1所定义，

生成式(VII)化合物：

其中R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₇、R₈、R₉和R₁₀如权利要求1所定义，

使式(VII)化合物与碱作用，生成式(VIII)化合物：

其中R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₇、R₈、R₉和R₁₀如权利要求1所定义，且表明所得化合物根据涉及的分子呈酮-烯醇混合物的形式，

12、含有作为活性成分的根据权利要求1-10任一项的化合物以及一种或多种惰性无毒和药学上可接受的载体的药物组合物。

13、根据权利要求1-10任一项的式I化合物或权利要求12的药物组合物在制备抗癌药物中的用途。