HK1068371B

HK1068371B - Means and methods for the production of adenovirus vectors

Info

Publication number: HK1068371B
Application number: HK05100596.3A
Authority: HK
Inventors: Ronald Vogels; Abraham Bout
Original assignee: Crucell Holland B.V.
Priority date: 2002-04-25
Filing date: 2003-04-24
Publication date: 2010-02-05

Claims

Rekombinanter Adenovirus-Vektor, welcher strukturelle und nicht-strukturelle Elemente von einem Adenovirus eines ersten Serotyps umfasst, wobei der Vektor des Weiteren eine Sequenz umfasst, welche ein funktionelles E4-orf6-Protein codiert, wobei die Sequenz ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus:
a) einer E4-orf6-codierenden Sequenz von einem Adenovirus eines zweiten Serotyps, der unterschiedlich zu dem ersten Serotyp ist; und

b) einer E4-orf6-codierenden Sequenz, welche eine Fusion zwischen einem Teil einer E4-orf6-codierenden Sequenz eines zweiten Serotyps, der unterschiedlich zu dem ersten Serotyp ist, und einem Teil einer E4-orf6-codierenden Sequenz eines dritten Serotyps ist,
wobei der dritte Serotyp identisch mit oder unterschiedlich zu dem ersten Serotyp sein kann.
Rekombinanter Adenovirus-Vektor nach Anspruch 1, wobei der erste und zweite Serotyp aus verschiedenen Adenovirus-Untergruppen sind.
Rekombinanter Adenovirus-Vektor nach Anspruch 1, wobei der erste Serotyp aus einer Untergruppe ist, die eine andere als Untergruppe C ist, und wobei die E4-orf6-codierende Sequenz aus einem Adenovirus-Serotyp der Untergruppe C ist.
Rekombinanter Adenovirus-Vektor nach Anspruch 1, wobei der erste Serotyp aus Untergruppe B ist und der zweite Serotyp aus Untergruppe C ist.
Rekombinanter Adenovirus-Vektor nach Anspruch 1, wobei die E4-orf6-codierende Sequenz aus Adenovirus-Serotyp 5 ist.
Rekombinanter Adenovirus-Vektor nach einem der Ansprüche 1 bis 5, wobei der erste Serotyp ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Adenovirus-Serotypen 11, 14, 16, 21, 34, 35 und 50.
Rekombinanter Adenovirus-Vektor nach einem der Ansprüche 1 bis 6, des Weiteren eine Sequenz umfassend, welche ein nicht-adenovirales Protein, Polypeptid oder Peptid codiert.
Rekombinanter Adenovirus-Vektor nach Anspruch 7, wobei das nichtadenovirale Protein, Polypeptid oder Peptid ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus: einem Zelltod-induzierenden Polypeptid, einer antigenen Determinante eines pathogenen Organismus, einem tumorspezifischen Antigen, einem viralen Protein, einem Hormon und einem Cytokin.
Verfahren zur Herstellung eines rekombinanten Adenovirus-Vektors, welcher strukturelle und nicht-strukturelle Elemente von einem Adenovirus eines ersten Serotyps umfasst, wobei das Verfahren die Schritte umfasst:
a) Bereitstellen einer komplementierenden Zelle, welche eine E1B-55K-codierende Sequenz in einer exprimierbaren Form aus einem Adenovirus eines zweiten Serotyps beherbergt, mit den nötigen Elementen von einem Adenovirus, um die Assemblierung des rekombinanten Adenovirus-Vektors durch die komplementierende Zelle zu erlauben, wobei die Elemente mindestens einige strukturelle und nicht-strukturelle Elemente aus einem Adenovirus des ersten Serotyps, der unterschiedlich zu dem zweiten Serotyp ist, umfassen, und eine Sequenz, welche ein funktionelles E4-orf6-Protein codiert, welches kompatibel mit dem exprimierbaren E1B-55K-Protein in der komplementierenden Zelle ist;

b) Züchten der komplementierenden Zelle in einem Medium unter Bedingungen, die es ermöglichen, die Herstellung und Assemblierung des Adenovirus-Vektors stattfinden zu lassen; und

c) Ernten des so hergestellten rekombinanten Adenovirus-Vektors aus dem Medium und/oder der komplementierenden Zelle,
wobei die Sequenz, welche das kompatible E4-orf6-Protein codiert, in dem so hergestellten rekombinanten Adenovirus-Vektor vorliegt.
Verfahren nach Anspruch 9, wobei die E4-orf6-codierende Sequenz ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus:
a) einer E4-orf6-codierenden Sequenz aus einem Adenovirus des zweiten Serotyps;

b) einer E4-orf6-codierenden Sequenz aus einem Adenovirus eines dritten Serotyps, der unterschiedlich zu dem ersten und zweiten Serotyp ist; und

c) einer E4-orf6-codierenden Sequenz, welche die Fusion zwischen einem Teil einer E4-orf6-codierenden Sequenz aus einem dritten Serotyp und einem Teil einer E4-orf6-codierenden Sequenz aus einem Adenovirus des zweiten Serotyps umfasst, wobei der dritte Serotyp identisch mit oder unterschiedlich zu dem ersten Serotyp sein kann.
Verfahren nach einem der Ansprüche 9 oder 10, wobei der erste und zweite Serotyp aus unterschiedlichen Untergruppen sind.
Verfahren nach einem der Ansprüche 9 bis 11, wobei der zweite Serotyp ein Adenovirus-Serotyp von Untergruppe C ist.
Verfahren nach Anspruch 12, wobei der zweite Serotyp ein Adenovirus-Serotyp 5 ist.
Verfahren nach einem der Ansprüche 9 bis 13, wobei der erste Serotyp ein Adenovirus-Serotyp der Untergruppe B ist.
Verfahren nach Anspruch 14, wobei der erste Serotyp aus der Gruppe ausgewählt ist, welche aus Adenovirus-Serotypen 11, 14, 16, 21, 34, 35 und 50 besteht.
Verfahren nach einem der Ansprüche 9 bis 15, wobei die E1B-55K-codierende Sequenz in das Genom der komplementierenden Zelle integriert ist.
Verfahren nach einem der Ansprüche 9 bis 16, wobei die komplementierende Zelle abgeleitet ist von einer primären, diploiden menschlichen Zelle oder einer Vorläuferzelle davon.
Verfahren nach einem der Ansprüche 9 bis 17, wobei die komplementierende Zelle von einer primären menschlichen Retinoblasten-Zelle, einer primären menschlichen embryonalen Nierenzelle, einer primären menschlichen neuronalen Zelle oder einer primären menschlichen Amniocyte abgeleitet ist.
Verfahren nach einem der Ansprüche 9 bis 18, wobei die komplementierende Zelle eine in ihr Genom integrierte Nucleinsäure umfasst, welche mindestens ein Adenovirus E1A-Protein codiert.
Verfahren nach Anspruch 19, wobei die Nucleinsäure, welche mindestens ein Adenovirus E1A-Protein codiert, aus einem Adenovirus-Serotyp von einer Untergruppe ist, die eine andere als Untergruppe B ist.
Verfahren nach Anspruch 19, wobei die Nucleinsäure, welche mindestens ein Adenovirus E1A-Protein codiert, aus einem Adenovirus-Serotyp der Untergruppe C ist.
Verfahren nach Anspruch 20, wobei die Nucleinsäure, welche mindestens ein Adenovirus E1A-Protein codiert, aus einem Adenovirus-Serotyp 5 ist.
Verfahren nach einem der Ansprüche 9 bis 22, wobei die E4-orf6-codierende Sequenz und die E1B-55K-codierende Sequenz aus unterschiedlichen Adenovirus-Serotypen sind und wobei die unterschiedlichen Adenovirus-Serotypen Mitglieder derselben Adenovirus-Untergruppe sind.
Verfahren nach einem der Ansprüche 9 bis 22, wobei die E4-orf6-codierende Sequenz und die E1B-55K-codierende Sequenz aus unterschiedlichen Adenovirus-Serotypen sind und wobei die beiden unterschiedlichen Adenovirus-Serotypen Mitglieder der Untergruppe C sind.
Verfahren nach einem der Ansprüche 9 bis 22, wobei die E4-orf6-codierende Sequenz und die E1B-55K-codierende Sequenz aus demselben Adenovirus-Serotyp sind.
Verfahren nach Anspruch 25, wobei die E4-orf6-codierende Sequenz und die E1B-55K-codierende Sequenz aus dem Adenovirus-Serotyp 5 sind.
Verfahren nach Anspruch 9, wobei die komplementierende Zelle eine PER.C6-Zelle oder ein Abkömmling davon ist.
Arzneimittel, umfassend einen rekombinanten adenoviralen Vektor nach einem der Ansprüche 1 bis 8 oder erhältlich durch ein Verfahren nach einem der Ansprüche 9 bis 27.
Kollektion (Kit of parts), umfassend:
a) eine komplementierende Zelle zur Herstellung eines rekombinanten Adenovirus-Vektors, welcher strukturelle und nicht-strukturelle Elemente eines Adenovirus eines ersten Serotyps umfasst, wobei die Zelle eine E1B-55K-codierende Sequenz aus einem Adenovirus eines zweiten Serotyps in exprimierbarer Form beherbergt, und

b) einen oder mehrere replizierbare Nucleinsäurevektoren, welche alle nötigen adenoviralen Elemente umfassen, um die Assemblierung des rekombinanten Adenovirus-Vektors durch die komplementierende Zelle zu ermöglichen, wobei die Elemente mindestens einige strukturelle und nicht-strukturelle Elemente aus einem Adenovirus des ersten Serotyps umfassen, der unterschiedlich zu dem zweiten Serotyp ist, und eine Sequenz, welche ein funktionelles E4-orf6-Protein codiert, welches kompatibel mit dem exprimierbaren E1B-55K-Protein in der komplementierenden Zelle ist.
Kollektion nach Anspruch 29, wobei die E4-orf6-codierende Sequenz ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus:
a) einer E4-orf6-codierenden Sequenz aus einem Adenovirus des zweiten Serotyps;

b) einer E4-orf6-codierenden Sequenz aus einem Adenovirus eines dritten Serotyps, der unterschiedlich zu dem ersten und zweiten Serotyp ist; und

c) einer E4-orf6-codierenden Sequenz, welche eine Fusion zwischen einem Teil einer E4-orf6-codierenden Sequenz aus einem dritten Serotyp und einem Teil einer E4-orf6-codierenden Sequenz aus einem Adenovirus des zweiten Serotyps ist, wobei der dritte Serotyp identisch mit oder unterschiedlich zu dem ersten Serotyp sein kann.