[go: up one dir, main page]

GR1009175B - Combination of nannochloropsis gaditana-and-propolis extracts acting as drastic components in skin-care cosmetic formulas - Google Patents

Combination of nannochloropsis gaditana-and-propolis extracts acting as drastic components in skin-care cosmetic formulas

Info

Publication number
GR1009175B
GR1009175B GR20160100314A GR20160100314A GR1009175B GR 1009175 B GR1009175 B GR 1009175B GR 20160100314 A GR20160100314 A GR 20160100314A GR 20160100314 A GR20160100314 A GR 20160100314A GR 1009175 B GR1009175 B GR 1009175B
Authority
GR
Greece
Prior art keywords
extract
combination
skin
nannochloropsis gaditana
rate
Prior art date
Application number
GR20160100314A
Other languages
Greek (el)
Inventor
Παναγιωτα Δραγανη
Σοφια Λετσιου
Κωνσταντινος Γαρδικης
Νικολαος Νικολαου Κουτσιανας
Original Assignee
Apivita Καλλυντικα Διαιτητικα Φαρμακα Ανωνυμη Εμπορικη Και Βιοτεχνικη Εταιρεια
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Apivita Καλλυντικα Διαιτητικα Φαρμακα Ανωνυμη Εμπορικη Και Βιοτεχνικη Εταιρεια filed Critical Apivita Καλλυντικα Διαιτητικα Φαρμακα Ανωνυμη Εμπορικη Και Βιοτεχνικη Εταιρεια
Priority to GR20160100314A priority Critical patent/GR1009175B/en
Priority to PCT/GR2016/000063 priority patent/WO2017216588A1/en
Publication of GR1009175B publication Critical patent/GR1009175B/en

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/92Oils, fats or waxes; Derivatives thereof, e.g. hydrogenation products thereof
    • A61K8/927Oils, fats or waxes; Derivatives thereof, e.g. hydrogenation products thereof of insects, e.g. shellac
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9706Algae
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/98Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin
    • A61K8/987Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin of species other than mammals or birds
    • A61K8/988Honey; Royal jelly, Propolis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08Anti-ageing preparations

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Insects & Arthropods (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Cosmetics (AREA)

Abstract

Novelty: a combination of nannochloropsis gaditana-and-propolis extracts acting as drastic components in cosmetic formulas used for skin care and, more precisely, for antiageing care is disclosed. Composition: the resulted extract is a combination of two subsidiary components: 1) propolis extract in water, glycerol and b- hydroxypropyl cyclodextrin (0.1 to 20% w/w); 2) annochloropsis gaditana extract in water and 1,3 of propanodiol. The invented combinational extract is added to the whole mixture following its incorporation to a pre-mixture of citric acid the pH of which has been regulated with its conjugate base to pH7 ensuring the stability of the resulted formula for the long-lasting preservation of the extract; it follows the pH control which is accordingly regulated by addition of pH-regulating solutions which are either a NaOH solution (20%w/w) or a C6H8O7 solution (20% w/w).

Description

ΣΥΝΔΥΑΣΜΟΣ ΕΚΧΥΛΙΣΜΑΤΟΣ ΜΙΚΡΟΦΥΚΟΥΣ NANNOCHLOROPSIS NANNOCHLOROPSIS MICROALGAE EXTRACT COMBINATION

 GADITANA ΚΑΙ ΕΚΧΥΛΙΣΜΑΤΟΣ ΠΡΟΠΟΛΗΣ ΩΣ ΔΡΑΣΤΙΚΟΥ ΣΥΣΤΑΤΙΚΟΥ GADITANA AND PROPOLIS EXTRACT AS ACTIVE INGREDIENT

ΣΕ ΚΑΛΛΥΝΤΙΚΟΤΕΧΝΙΚΕΣ ΦΟΡΜΟΥΛΕΣ ΓΙΑ ΔΕΡΜΑΤΙΚΗ ΧΡΗΣΗ IN COSMETIC FORMULAS FOR SKIN USE

ΠΕΡΙΓΡΑΦΗ DESCRIPTION

Τεχνικό πεδίο Technical field

Η παρούσα επινόηση αναφέρεται στη χρήση ενός συνδυασμού εκχυλίσματος του μικροφύκους Nannochloropsis Gaditana & εκχυλίσματος πρόπλης ως δραστικού συστατικού σε καλλυντικοτεχνικές φόρμουλες και στη μέθοδο ενσωμάτωσής του σε αυτές. Ο ως άνω συνδυασμός προορίζεται για τοπική δερματική χορήγηση ως συστατικό είτε καλλυντικού είτε φαρμακοκαλλυντικού προϊόντος και συγκεκριμένα με χρήση αντιγηραντική σε δύο επίπεδα. The present invention relates to the use of a combination of Nannochloropsis Gaditana microalgae extract & prople extract as an active ingredient in cosmetic formulas and the method of incorporating it into them. The above combination is intended for local dermal administration as a component of either a cosmetic or a pharmaco-cosmetic product, specifically using anti-aging on two levels.

Τεχνολογικό υπόβαθρο Technological background

Μέχρι σήμερα δεν έχει αναφερθεί παγκοσμίως κανένα ανάλογο προϊόν. Ειδικότερα, η επιδερμίδα αποτελεί έναν καθρέφτη που αντανακλά ό,τι συμβαίνει στο ανθρώπινο σώμα. Η διαδικασία της γήρανσης είναι ένα πολύπλοκο φαινόμενο το 20% του οποίου οφείλεται σε γενετικούς παράγοντες ενώ το 80% στην επίδραση εξωτερικών συνθηκών. Συγκεκριμένα, η επιτάχυνση και το βάθος της γήρανσης εξαρτάται κυρίως από το περιβάλλον, ήτοι την υπεριώδη ακτινοβολία (φωτογήρανση), το οξειδωτικό στρες (περιβαλλοντική ρύπανση) αλλά και τις συνήθειες της καθημερινότητας (κάπνισμα, κακή διατροφή) και το στρες σε μικρότερο βαθμό. Καθημερινά είμαστε εκτεθειμένοι σε οξειδωτικούς στρεσογόνους παράγοντες μέσα από τη διατροφή μας, το περιβάλλον στο οποίο ζούμε, από τα προϊόντα του μεταβολισμού και γενικότερα τον σύγχρονο τρόπο ζωής. Σήμερα γίνεται αποδεκτό ότι η έκθεση σε επιβαρυμένες εξωτερικές συνθήκες όπως υπεριώδης ακτινοβολία ή περιβαλλοντική ρύπανση μπορεί να ευθύνεται για το 80% των ορατών σημαδιών της γήρανσης του δέρματος, συμπεριλαμβανομένων της ξηρότητας και της δημιουργίας ρυτίδων, και διαταραχές της μελάγχρωσης, ενώ η φωτογήρανση σχετίζεται με κίνδυνο εμφάνισης καρκίνου (Amaro-Ortiz, 2014). To date, no similar product has been reported worldwide. In particular, the skin is a mirror that reflects everything that happens in the human body. The aging process is a complex phenomenon of which 20% is due to genetic factors while 80% to the effect of external conditions. Specifically, the acceleration and depth of aging depends mainly on the environment, i.e. ultraviolet radiation (photoaging), oxidative stress (environmental pollution) but also everyday habits (smoking, poor diet) and stress to a lesser extent. Every day we are exposed to oxidative stress factors through our diet, the environment in which we live, from the products of metabolism and in general the modern lifestyle. It is now accepted that exposure to harsh external conditions such as UV radiation or environmental pollution may be responsible for 80% of the visible signs of skin aging, including dryness and wrinkling, and pigmentation disorders, while photoaging is associated with risk occurrence of cancer (Amaro-Ortiz, 2014).

Η κύρια μέθοδος προστασίας από τη φωτογήρανση είναι η επάλειψη των εκτεθειμένων σημείων του δέρματος με καλλυντικοτεχνικά σκευάσματα που περιέχουν ουσίες που ονομάζονται αντηλιακά φίλτρα (Κατάλογος φίλτρων υπεριώδους ακτινοβολίας που επιτρέπονται στα καλλυντικά προϊόντα, Παράρτημα VI, ΚΑΝΟΝΙΣΜΟΣ (ΕΚ) αριθ. 1223/2009 ΤΟΥ ΕΥΡΩΠΑΪΚΟΥ ΚΟΙΝΟΒΟΥΛΙΟΥ ΚΑΙ ΤΟΥ ΣΥΜΒΟΥΛΙΟΥ και ΚΑΝΟΝΙΣΜΟΣ (ΕΕ) 2016/621 για την τροποποίηση του παραρτήματος VI του κανονισμού (ΕΚ) αριθ. 1223/2009 του Ευρωπαϊκού Κοινοβουλίου και του Συμβουλίου για τα καλλυντικά προϊόντα). Παρά την εκτεταμένη όμως χρήση των παραγόντων αυτών, οι οποίοι αποδεδειγμένα καθυστερούν την εμφάνιση σχετιζόμενου με ηλιακή ακτινοβολία μελανώματος, έχει δειχθεί πως οι εν λόγω παράγοντες ενώ μπορούν να καθυστερήσουν την καταστροφή του DNA δεν μπορούν να προσφέρουν ολοκληρωτική προστασία ενάντια στη UVA και UVB ακτινοβολία (Amaya Viros, 2014). The main method of protection against photoaging is to apply cosmetic products containing substances called sunscreens to the exposed areas of the skin (List of UV filters permitted in cosmetic products, Annex VI, REGULATION (EC) No. 1223/2009 OF THE EUROPEAN OF THE PARLIAMENT AND OF THE COUNCIL and REGULATION (EU) 2016/621 amending Annex VI to Regulation (EC) No 1223/2009 of the European Parliament and of the Council on cosmetic products). However, despite the extensive use of these agents, which have been proven to delay the appearance of melanoma related to solar radiation, it has been shown that while these agents can delay DNA damage, they cannot provide complete protection against UVA and UVB radiation (Amaya Viros, 2014).

Προκειμένου να εξαλειφθεί το ανωτέρω μειονέκτημα των αντηλιακών φίλτρων, έχουν αναπτυχθεί διάφορες στρατηγικές που μπορούν να δράσουν συνεργιστικά με τα αντιηλιακά φίλτρα και μέσω διαφόρων μηχανισμών να προσφέρουν αυξημένη φωτοπροστασία στα καλλυντικοτεχνικά σκευάσματα, τα οποία ανήκουν ως επί το πλείστον στην κατηγορία των γαλακτωμάτων. In order to eliminate the above disadvantage of sunscreens, various strategies have been developed that can act synergistically with sunscreens and through various mechanisms offer increased photoprotection to cosmetic formulations, which mostly belong to the category of emulsions.

Επιπλέον, η φωτοπροστασία μπορεί να προέλθει με την προσθήκη δραστικών ουσιών οι οποίες συμβάλλουν στη διατήρηση και ενίσχυση της λειτουργίας δομικών μονάδων του δέρματος αποτρέποντας την εμφάνιση κλινικών σημαδιών γήρανσης. In addition, photoprotection can come from the addition of active substances that contribute to maintaining and strengthening the function of the skin's structural units, preventing the appearance of clinical signs of aging.

Επιπλέον οι στρατηγικές αυτές μπορούν να εφαρμοστούν και σε καλλυντικοτεχνικά σκευάσματα που είθισται να χρησιμοποιούνται για την καθημερινή προστασία και περιποίηση τις περιόδους χαμηλής ηλιοφάνειας καθώς το 80% της ηλιακής ακτινοβολίας μπορεί να διαπεράσει τα σύννεφα. In addition, these strategies can also be applied to cosmetic formulations that are usually used for daily protection and care during periods of low sunshine as 80% of solar radiation can penetrate clouds.

 Επιπλέον, προστασία από το οξειδωτικό στρες γίνεται μόνο με την ενσωμάτωση δραστικών συστατικών που ενισχύουν την αντιοξειδωτική άμυνα της επιδερμίδας. Τα αντιηλιακά φίλτρα τροποποιούν τη διείσδυση της υπεριώδους ακτινοβολίας στην επιδερμίδα και χωρίζονται στα χημικά και στα φυσικά φίλτρα. Τα χημικά αντηλιακά φίλτρα είναι μόρια οργανικής σύνθεσης που απορροφούν την υπεριώδη ακτινοβολία, ενώ τα φυσικά αντηλιακά φίλτρα είναι ανόργανα οξείδια (διοξείδιο του τιτανίου, οξείδια του ψευδαργύρου) και δρουν αντανακλώντας την υπεριώδη ακτινοβολία. Τα αντηλιακά γαλακτώματα μπορούν να περιέχουν είτε μόνο φυσικά είτε μόνο χημικά φίλτρα, ή συνδυασμό χημικών και φυσικών φίλτρων. Ο συνδυασμός χημικών και φυσικών φίλτρων παρουσιάζει κάποια πλεονεκτήματα διότι: 1) Η χρήση συνδυασμού έχει ως αποτέλεσμα ενσωμάτωση χαμηλότερου ποσοστού φίλτρων μειώνοντας έτσι την αυξημένη επικινδυνότητα πρόκλησης ερεθιστικότητας που προέρχεται από τα χημικά φίλτρα, 2) Δημιουργούνται ελκυστικές υφές, που είναι δύσκολο να επιτευχθούν με τη χρήση μόνο φυσικών φίλτρων και 3) Υφίσταται συνεργιστική δράση (Πίνακας, Marcel Dekker, 1997) που απαιτεί συνολικά τη χρήση μικρότερης συγκέντρωσης αντηλιακών φίλτρων In addition, protection against oxidative stress is only achieved by incorporating active ingredients that strengthen the skin's antioxidant defenses. Sunscreen filters modify the penetration of ultraviolet radiation into the skin and are divided into chemical and natural filters. Chemical sunscreens are molecules of organic composition that absorb UV radiation, while natural sunscreens are inorganic oxides (titanium dioxide, zinc oxides) and act by reflecting UV radiation. Sunscreen emulsions can contain either only natural or only chemical filters, or a combination of chemical and natural filters. The combination of chemical and physical filters presents some advantages because: 1) Using a combination results in the incorporation of a lower percentage of filters thus reducing the increased risk of irritation coming from chemical filters, 2) Attractive textures are created, which are difficult to achieve with using only natural filters and 3) There is a synergistic effect (Table, Marcel Dekker, 1997) that requires a lower concentration of sunscreens to be used overall

I I

Παρά ταύτα, στις περιπτώσεις που χρησιμοποιούνται συνδυασμοί χημικών και φυσικών φίλτρων πρέπει να λαμβάνονται υπόψιν δύο παράμετροι για την απόλυτη φυσικοχημική σταθερότητα και αποτελεσματικότητα των αντιηλιακών προϊόντων: Nevertheless, in cases where combinations of chemical and physical filters are used, two parameters must be taken into account for the absolute physicochemical stability and effectiveness of sunscreen products:

Α) η σχεδόν επιβεβλημένη χρήση ανιονικών γαλακτωματοποιητών λόγω της ικανότητας τους να διαλύουν τα χημικά φίλτρα και να ενσωματώνονται σε συστήματα με υψηλό ποσοστό ηλεκτρολυτών. Οι γαλακτω μ άτοποι ητές αυτοί παρουσιάζουν pH μεγαλύτερο του 7. A) the almost mandatory use of anionic emulsifiers due to their ability to dissolve chemical filters and be incorporated into systems with a high percentage of electrolytes. These emulsifiers have a pH greater than 7.

Β) η ανάγκη διατήρησης του pH περίπου στο 7, ώστε να μην υπάρχει περίπτωση διάλυσης των φυσικών φίλτρων και σχηματισμός υδατοδιαλυτων αλκαλικών συμπλοκών των οξειδίων κάτι που θα μπορούσε να προκαλέσει συγκέντρωση ιόντων στην υδατική φάση του γαλακτώματος έχοντας ως αποτέλεσμα α) τη μεταβολή της κατανομής τους εντός του γαλακτώματος και τη μη διατήρηση της αποτελεσματικότητας του προϊόντος και β) τη μεταβολή της επιφανειακής τάσης στην διεπιφάνεια των δύο φάσεων του γαλακτώματος και αποσταθεροποίηση του. B) the need to maintain the pH around 7, so that there is no chance of dissolution of the natural filters and formation of water-soluble alkaline complexes of the oxides which could cause a concentration of ions in the aqueous phase of the emulsion resulting in a) a change in their distribution within the emulsion and not maintaining the effectiveness of the product and b) changing the surface tension at the interface of the two phases of the emulsion and destabilizing it.

Οι ανωτέρω παράμετροι που περιγράφηκαν έχουν ως αποτέλεσμα η προσθήκη εντός της φόρμουλας επιπλέον συστατικών να παρουσιάζει δυσκολίες, αφού πρέπει να γίνεται με τρόπο που να διασφαλίζει την διατήρηση του pH στα επιτρεπτά επίπεδα. Είναι μάλιστα χαρακτηριστικό το ότι στην πλειοψηφία τους τα εκχυλίσματα φυσικών συστατικών παρουσιάζουν χαμηλό pH (4, 5-5, 5) κυρίως για λόγους μικροβιακής σταθερότητας τους. Επομένως η εισαγωγή τους σε φόρμουλες της παραπάνω κατηγορίας πρέπει να γίνεται με τρόπο που να διασφαλίζει τη διατήρηση του pH του γαλακτώματος περίπου στο 7. The above described parameters result in the addition of additional ingredients within the formula presenting difficulties, since it must be done in a way that ensures the maintenance of the pH at the permissible levels. It is indeed characteristic that the majority of the extracts of natural ingredients have a low pH (4.5-5.5) mainly for reasons of their microbial stability. Therefore, their introduction into formulas of the above category must be done in a way that ensures the maintenance of the pH of the emulsion at about 7.

Με την παρούσα επινόηση καταφέραμε να δημιουργήσουμε έναν συνδυασμό εκχυλίσματος μικροφύκους Nannochloropsis gaditana & εκχυλίσματος πρόπολης και να εισάγουμε το μείγμα αυτό σε φόρμουλες που περιέχουν συνδυασμούς αντηλιακών φίλτρων, με τρόπο που να επιτυγχάνεται η διατήρηση του pH στα επιθυμητά επίπεδα και κατ<'>επέκταση η διατήρηση της σταθερότητας του γαλακτώματος καθ όλη τη διάρκεια ζωής της. With the present invention we managed to create a combination of Nannochloropsis gaditana microalgae extract & propolis extract and introduce this mixture into formulas containing combinations of sun filters, in a way to achieve the maintenance of the pH at the desired levels and by extension the preservation of the stability of the emulsion throughout its lifetime.

 Ειδικότερα, το επινοηθέν εκχύλισμα αποτελείται από το συνδυασμό δύο επί μέρους συστατικών: In particular, the invented extract consists of the combination of two separate components:

 1 . Εκχυλίσματος πρόπολης σε νερό, γλυκερόλη και βυδροξυπρόπυλοκυκλοδεξτρίνη 1. Propolis extract in water, glycerol and hydroxypropyl cyclodextrin

2.   Εκχυλίσματος του μικροφύκους Nannochloropsis gaditana σε νερό και 1 ,3 προπανοδιόλη. 2. Extract of the microalgae Nannochloropsis gaditana in water and 1,3 propanediol.

Η πρόπολη είναι μια ρητινώδης ουσία η οποία παράγεται από τις μέλισσες. Ανάλογα με τη χλωρίδα της γεωγραφικής περιοχής των μελισσιών και την περίοδο συλλογής της η σύστασή της ποικίλλει. Περιέχει κατά μέσο όρο 50% ρητίνες, 30 % κηρούς, 10% αρωματικά συστατικά, 5% γύρη και 5% διάφορα άλλα συστατικά. Τα βιοδραστικά συστατικά της πρόπολης είναι οι πολυφαινόλες, τα τερπένια, τα στεροειδή, καθώς και σάκχαρα και αμινοξέα. Οι κύριες πολυφαινόλες της είναι φλαβονοειδή και φαινολικά οξέα. Εξαιτίας του υψηλού αντιοξειδωτικού περιεχομένου της, η πρόπολη δημιουργεί προστασία έναντι της πρόωρης γήρανσης αναστέλλοντας τις βλαβερές ελεύθερες ρίζες που δημιουργούνται από την UV ακτινοβολία (Fonseca, 2011 , Dudonne, 2011 , Gregoris, 2011). Η δράση αυτή βρίσκει εφαρμογή τόσο στην παρασκευή καλλυντικών όσο και στην παραδοσιακή ιατρική. Συγκεκριμένα είναι γνωστά Διπλώματα Ευρεσιτεχνίας που αναφέρονται στον ευεργετικό ρόλο της πρόπολης στο δέρμα στοχεύοντας κυρίως στις αντιμικροβιακές και αντιφλεγμονώδεις ιδιότητές της (patent US201 5/0374759, patent US201 6/0128932, patent US201 5/0290253). Στην παρούσα επινόηση για την παρασκευή της πρόπολης χρησιμοποιείται η μέθοδος που περιγράφεται στο υπ<'>αριθμόν 1000752 Δίπλωμα Ευρεσιτεχνίας, καθώς με τη συγκεκριμένη μέθοδο διασφαλίζεται η μέγιστη συγκέντρωση πολυφαινολών στο εκχύλισμα και η σταθερότητα τους στο χρόνο. Propolis is a resinous substance produced by bees. Depending on the flora of the geographical area of the bees and the collection period, its composition varies. It contains an average of 50% resins, 30% waxes, 10% aromatics, 5% pollen and 5% various other ingredients. The bioactive components of propolis are polyphenols, terpenes, steroids, as well as sugars and amino acids. Its main polyphenols are flavonoids and phenolic acids. Due to its high antioxidant content, propolis creates protection against premature aging by inhibiting harmful free radicals created by UV radiation (Fonseca, 2011, Dudonne, 2011, Gregoris, 2011). This action finds application both in the preparation of cosmetics and in traditional medicine. Specifically, there are known Patents that refer to the beneficial role of propolis in the skin, mainly targeting its antimicrobial and anti-inflammatory properties (patent US201 5/0374759, patent US201 6/0128932, patent US201 5/0290253). In the present invention, the method described in Patent No. 1000752 is used for the preparation of propolis, as this method ensures the maximum concentration of polyphenols in the extract and their stability over time.

Επίσης η συγκεκριμένη μέθοδος επιτρέπει τη χρήση οποιοσδήποτε πρόπολης ως πρώτης ύλης. Also, this specific method allows the use of any propolis as a raw material.

Το δεύτερο συστατικό του επινοηθέντος εκχυλίσματος είναι εκχύλισμα του μικροφύκους Nannochloropsis gaditana. The second component of the invented extract is an extract of the microalgae Nannochloropsis gaditana.

Το τελευταίο διάστημα υπάρχει ένα τεράστιο ενδιαφέρον για φυσικά προϊόντα που προέρχονται από την θαλάσσια βιοποικιλότητα. Τα άλγη και κυρίως τα μικροφύκη είναι η κύρια πηγή βιοδραστικών ενώσεων οι οποίες μπορούν να χρησιμοποιηθούν ως λειτουργικά συστατικά (Raposo, 2013) όπως καροτενοειδή, φυκοβιλίνες, λιπαρά οξέα, πολυσακχαρίτες, πεπτίδια, βιταμίνες και στερόλες (Raposo, 2013). Ωστόσο, από τα περίπου 30.000 μικροφυκών είδος που πιστεύεται ότι υπάρχουν μόνο λίγες χιλιάδες στελέχη φυλάσσονται σε συλλογές σε όλο τον κόσμο, μόνο μερικές εκατοντάδες έχουν μελετηθεί για το χημικό τους περιεχόμενο και μόλις πέντε έχουν καλλιεργηθεί σε βιομηχανικές ποσότητες (Gouveia, 2006, Macedo, 2009). Μελέτες πάνω στα θαλάσσια μικροφύκη αναδεικνύουν την χρήση τους ως συστατικά στα καλλυντικά (Fujitani, 2001 , Blackburn, 2012). Συγκεκριμένα φαίνεται ότι παρουσιάζουν αντιαλλεργικές, αντιφλεγμονώδεις ιδιότητες. Επίσης τα μικροφύκη αναστέλλουν την δράση του ενζύμου της υαλουρονιδάσης, το οποίο διασπά τις ίνες κολλαγόνου στο δέρμα, καταστρέφει το φυσικό υαλουρονικό οξύ που παράγεται στο σώμα, συνεπώς το απενεργοποιεί από την σύνδεση των μορίων κολλαγόνου κι ελαστίνης (Fujitani, 2001). Αυτό αποτρέπει το σχηματισμό νέου κολλαγόνου και ελαστίνης, και προκαλεί πρόωρη γήρανση και χαλάρωση. Όσον αφορά το γένος Nannochloropsis spp, στο οποίο συμπεριλαμβάνεται το μικροφύκος Nannochloropsis gaditana, έχει χρησιμοποιηθεί για καλλυντική χρήση μόνο το Nannochloropsis oculata, το οποίο παρουσιάζει συσφικτικές ιδιότητες (Blackburn, 2012). Lately there has been a huge interest in natural products derived from marine biodiversity. Algae and especially microalgae are the main source of bioactive compounds that can be used as functional ingredients (Raposo, 2013) such as carotenoids, phycobilins, fatty acids, polysaccharides, peptides, vitamins and sterols (Raposo, 2013). However, of the approximately 30,000 microalgae species believed to exist, only a few thousand strains are kept in collections worldwide, only a few hundred have been studied for their chemical content and only five have been cultivated in industrial quantities (Gouveia, 2006; Macedo, 2009). ). Studies on marine microalgae highlight their use as ingredients in cosmetics (Fujitani, 2001, Blackburn, 2012). In particular, they seem to have anti-allergic, anti-inflammatory properties. Microalgae also inhibit the action of the hyaluronidase enzyme, which breaks down the collagen fibers in the skin, destroys the natural hyaluronic acid produced in the body, therefore disabling it from connecting collagen and elastin molecules (Fujitani, 2001). This prevents the formation of new collagen and elastin, and causes premature aging and sagging. Regarding the genus Nannochloropsis spp, which includes the microalgae Nannochloropsis gaditana, only Nannochloropsis oculata, which exhibits astringent properties, has been used for cosmetic use (Blackburn, 2012).

Αντίθετα το μικροφύκος Nannochloropsis gaditana, το οποίο χρησιμοποιείται από την επινόησή μας σε συνδυασμό με το εκχύλισμα πρόπολης, δεν έχει χρησιμοποιηθεί έως σήμερα ως καλλυντικό συστατικό. Το μικροφύκος Nannochloropsis gaditana είναι θαλάσσιο μικροφύκος, και περιγράφηκε για πρώτη φορά από τον D. J. Hibberd (Hibberd, 1981). Συγκεκριμένα πρόκειται για ένα μικρό μονοκύτταρο(<5μm διάμετρος) μιξοτροφικό, μη μαστιγοφόρο μικροφύκος το οποίο ανήκει στην κατηγορία των ευστιγματοφύκων. In contrast, the microalgae Nannochloropsis gaditana, which is used by our invention in combination with propolis extract, has not been used as a cosmetic ingredient to date. The microalga Nannochloropsis gaditana is a marine microalga, and was first described by D. J. Hibberd (Hibberd, 1981). Specifically, it is a small unicellular (<5μm diameter) mixotrophic, non-flagellate microalgae which belongs to the category of eustigmatophytes.

Η παρούσα επινόηση, επικεντρώνεται στη μέθοδο ενσωμάτωσης του συνδυασμού εκχυλίσματος μικροφύκους Nannochloropsis gaditana & εκχυλίσματος πρόπολης σε καλλυντικοτεχνικά σκευάσματα και τη χρήση του ως δραστικού συστατικού που οποίο εμφανίζει σημαντική αντιγηραντική δράση σε δυο επίπεδα . The present invention focuses on the method of incorporating the combination of Nannochloropsis gaditana microalgae extract & propolis extract into cosmetic preparations and its use as an active ingredient that exhibits significant anti-aging action on two levels.

Είναι η πρώτη φορά που χρησιμοποιείται ο συνδυασμός εκχυλίσματος μικροφύκους Nannochloropsis gaditana & εκχυλίσματος πρόπολης για καλλυντική χρήση. Παρόλο αυτά έχει αναφερθεί η χρήση εκχυλίσματος πρόπολης και εκχυλίσματος του μικροφύκους σπιρουλίνα σε καλλυντικά ως ξεχωριστά συστατικά σε σαπούνι για καλλυντική χρήση. Επιπλέον, αναφέρεται η χρήση εκχυλίσματος πρόπολης και εκχυλίσματος φυκιών ως συστατικά καλλυντικών makeup. It is the first time that the combination of Nannochloropsis gaditana microalgae extract & propolis extract is used for cosmetic use. However, the use of propolis extract and spirulina microalga extract in cosmetics has been reported as separate ingredients in soap for cosmetic use. In addition, the use of propolis extract and seaweed extract as cosmetic makeup ingredients is reported.

Αποκάλυψη της επινόησης Disclosure of Invention

Προκειμένου η επινόησή μας να καταστεί κατανοητή στους ειδικούς της παρούσας τεχνικής, προβαίνουμε στη συνέχεια στην περιγραφή της σύνθεσης ενός ενδεικτικού γαλακτώματος με αντιηλιακά φίλτρα στην οποία γίνεται χρήση του συνδυασμού εκχυλίσματος του μικροφύκους Nannochloropsis gaditana & εκχυλίσματος πρόπολης, ως δραστικού συστατικού. In order for our invention to be understood by the experts in the present technique, we proceed next to describe the composition of an indicative emulsion with sunscreen filters in which the combination of Nannochloropsis gaditana microalgae extract & propolis extract is used as an active ingredient.

Η σύνθεση της φόρμουλας περιλαμβάνει το συνδυασμό εκχυλίσματος μικροφύκους Nannochloropsis gaditana σε νερό και 1 ,3 προπανοδιόλη & εκχυλίσματος πρόπολης σε νερό, γλυκερόλη και βυδροξυπρόπυλοκυκλοδεξτρίνη ως δραστικό συστατικό σε περιεκτικότητα από 0.1 έως 20% w/w. The composition of the formula includes the combination of Nannochloropsis gaditana microalgae extract in water and 1,3 propanediol & propolis extract in water, glycerol and hydroxypropyl cyclodextrin as an active ingredient in a content of 0.1 to 20% w/w.

 Επιπλέον η συγκεκριμένη σύνθεση περιέχει συνδυασμό των παρακάτω αντηλιακών φίλτρων: In addition, the specific composition contains a combination of the following sun filters:

‘Cosmetic Ingredient database-CosIng: http://ec.europa.eu/growth/sectors/cosmetics/cosing/index en.htm 'Cosmetic Ingredient database-CosIng: http://ec.europa.eu/growth/sectors/cosmetics/cosing/index en.htm

Τη σύνθεση της φόρμουλας συμπληρώνουν: The composition of the formula is completed by:

      1. Ανιονικός γαλακτωματοποιητής ή συνδυασμός αυτών όπως: 1. Anionic emulsifier or combination thereof such as:

      2. Μη ιονικοί συν-γαλακτωματοποιητές όπως λιπαρές αλκοόλες (και συγκεκριμένα μία ή μίγμα εκ των cetearyl alcohol, cetyl alcohol, behenyl Alcohol, Arachidyl alcohol), ή/και εστέρες σακχαρόζης (και συγκεκριμένα ένας ή μίγμα εκ των Sucrose Polystearate, Sucrose Distearate & Sucrose Stearate), ή/και αιθέρες γλυκοζίτη (και συγκεκριμένα ένας ή μίγμα των Cetearyl Glucoside, Coco-Glucoside, Arachidyl Glucoside, C-12-20 Alkyl Glucoside, C 14-22 Alkyl Glucoside) σε περιεκτικότητα 0.1-5% w/w. 2. Nonionic co-emulsifiers such as fatty alcohols (and in particular one or a mixture of cetearyl alcohol, cetyl alcohol, behenyl Alcohol, Arachidyl alcohol), and/or sucrose esters (and in particular one or a mixture of Sucrose Polystearate, Sucrose Distearate & Sucrose Stearate), and/or glucoside ethers (specifically one or a mixture of Cetearyl Glucoside, Coco-Glucoside, Arachidyl Glucoside, C-12-20 Alkyl Glucoside, C 14-22 Alkyl Glucoside) in a content of 0.1-5% w/w .

      3. Η σύνθεση της φόρμουλας εμπλουτίζεται με μαλακτικούς παράγοντες όπως κυρίως φυσικά έλαια όπως το λάδι από τον καρπό του Argania Spinosa ή/και του Olea europea, ή/και φυσικά γλυκερίδια όπως αυτά από τον καρπό του Cocos nucifera και εστέρες από τις ομάδες αυτών που προέρχονται από κορεσμένα και/ή ακόρεστα, διακλαδισμένα και/ή μη διακλαδισμένα αλκανοκαρβοξυλικά οξέα που έχουν μήκος ανθρακικής αλυσίδας από 3 ως 30 άτομα άνθρακα και κορεσμένες και /ή ακόρεστες, διακλαδισμένες και /ή μη διακλαδισμένες αλκοόλες που έχουν μήκος ανθρακικής αλυσίδας από 3 ως και 30 άτομα άνθρακα και αυτών που προέρχονται από αρωματικά οξέα και κορεσμένες και /ή ακόρεστες, διακλαδισμένες και /ή μη διακλαδισμένες αλκοόλες που έχουν μήκος ανθρακικής αλυσίδας από 3 ως και 30 άτομα όπως τα heptyl undec-10-enoate, 1 ,2,3- Propanetrio Triheptanoate, Octyl Cocoate, Coco-Capprylate/Caprate σε περιεκτικότητα 1-20% w/w. 3. The composition of the formula is enriched with softening agents such as mainly natural oils such as the oil from the fruit of Argania Spinosa and/or Olea europea, and/or natural glycerides such as those from the fruit of Cocos nucifera and esters from the groups of derived from saturated and/or unsaturated, branched and/or unbranched alkanocarboxylic acids having a carbon chain length of 3 to 30 carbon atoms and saturated and/or unsaturated, branched and/or unbranched alcohols having a carbon chain length of 3 to and 30 carbon atoms and those derived from aromatic acids and saturated and/or unsaturated, branched and/or unbranched alcohols having a carbon chain length of 3 to 30 atoms such as heptyl undec-10-enoate, 1,2,3- Propanetrio Triheptanoate, Octyl Cocoate, Coco-Capprylate/Caprate in a content of 1-20% w/w.

      4. Η σύνθεση της φόρμουλας επιπλέον περιέχει ουσίες από την ομάδα των αλκοολών με δράση έναντι των μικροοργανισμών όπως 2-φαινοξυαιθανόλη, 1 ,2-προπανοδιόλη, 3- (2-αιθυλεξυλοξυ) και οκτανο-1 ,2-διόλη σε περιεκτικότητα 0.1-2% w/w. 4. The composition of the formula additionally contains substances from the group of alcohols with activity against microorganisms such as 2-phenoxyethanol, 1,2-propanediol, 3-(2-ethylhexyloxy) and octane-1,2-diol in a content of 0.1-2 %w/w.

      5. Στη σύνθεση της φόρμουλας ως σταθεροποιητές της δομής του, χρησιμοποιούνται παράγοντες σταθεροποίησης από την ομάδα των κομμών ή των υδρόφιλων κολλοειδών όπως κόμμι ξανθάνης και κητυλική υδροξυαιθυλοκυτταρινη σε περιεκτικότητα 0.01-2% w/w. 5. In the composition of the formula, as stabilizers of its structure, stabilizing agents from the group of gels or hydrophilic colloids such as xanthan gum and cetyl hydroxyethyl cellulose are used in a content of 0.01-2% w/w.

      6. Τέλος η σύνθεση της φόρμουλας συμπληρώνεται με υγροσκοπικούς και παράγοντες φροντίδας του δέρματος όπως άλατα υαλουρονικού οξέος, η πανθενόλη, οξική τοκοφερόλη και εκχυλίσματα φυτών όπως κρίταμου (Crithmum maritimum), ελιάς( Olea europea), ελίχρυσου (Helichrysum italicum) σε περιεκτικότητα 0.001-3%. 6. Finally, the composition of the formula is supplemented with hygroscopic and skin care agents such as hyaluronic acid salts, panthenol, tocopherol acetate and plant extracts such as crithum (Crithmum maritimum), olive (Olea europea), helichrysum (Helichrysum italicum) in a content of 0.001- 3%.

      7. Η υπόλοιπη σύνθεση του γαλακτώματος συμπληρώνεται από νερό. 7. The rest of the composition of the emulsion is completed by water.

Η παρασκευή της σύνθεσης της φόρμουλας που περιέχει τον επινοηθέντα συνδυασμό εκχυλίσματος μικροφύκους Nannochloropsis gaditana & εκχυλίσματος πρόπολης, ως δραστικού συστατικού της, γίνεται με τα ακόλουθα βήματα The preparation of the composition of the formula containing the invented combination of Nannochloropsis gaditana microalgae extract & propolis extract, as its active ingredient, is done with the following steps

Στο πρώτο στάδιο αναμειγνύονται όλα τα υδρόφιλα και μη θερμο-ευαίσθητα συστατικά της σύνθεσης σε ειδικό δοχείο το οποίο θερμαίνεται στους 80 °C. Εν συνεχεία σε δεύτερο στάδιο, αναμειγνύονται όλα τα λιπόφιλα συστατικά της σύνθεσης σε δεύτερο δοχείο και θερμαίνονται στους 80-85 °C μέχρι πλήρους ομογενοποίησης του μίγματος. Στο τρίτο στάδιο μεταφέρεται το μίγμα των λιπόφιλων συστατικών στο δοχείο με τα υδρόφιλα συστατικά και παράλληλα με κατάλληλο εξοπλισμό ομογενοποίησης εφαρμόζεται ανάμιξη υψηλής διάτμησης για μείωση της επιφανειακής τάσης μεταξύ των δυο ανομοιογενών συστημάτων και τη δημιουργία σταθερής διασποράς μικκυλίων της μιας εντός της άλλης. Η διαδικασία της ομογενοποίησης γίνεται με ταχύτητα διάτμησης 3000 στροφών/λεπτό και διαρκεί 10-30 λεπτά σε σταθερή θερμοκρασία 80 °C και με τακτική μικροσκοπική παρατήρηση του μίγματος. Ακολουθεί ψύξη του ομογενοποιημένου μίγματος με χρήση μόνο περιφερειακής ανάδευσης. In the first stage, all the hydrophilic and non-thermo-sensitive components of the composition are mixed in a special container which is heated to 80 °C. Then in a second stage, all the lipophilic components of the composition are mixed in a second container and heated to 80-85 °C until the mixture is completely homogenized. In the third stage, the mixture of the lipophilic components is transferred to the container with the hydrophilic components and, in parallel with appropriate homogenization equipment, high shear mixing is applied to reduce the surface tension between the two heterogeneous systems and to create a stable dispersion of micelles of one within the other. The homogenization process is carried out at a shear speed of 3000 rpm and lasts 10-30 minutes at a constant temperature of 80 °C and with regular microscopic observation of the mixture. This is followed by cooling of the homogenized mixture using only peripheral stirring.

Εν συνεχεία σε θερμοκρασία περιβάλλοντος προστίθενται με ήπια περιφερειακή ανάδευση τα θερμοευαίσθητα υδρόφιλα συστατικά, εκτός του επινοηθέντος συνδυασμού. Then, at ambient temperature, the heat-sensitive hydrophilic components, apart from the invented combination, are added with gentle peripheral stirring.

Ο επινοηθείς συνδυασμός προστίθεται στο μίγμα που αναφέρεται παραπάνω, αφού πρώτα έχει ενσωματωθεί σε πρόμιγμα ρυθμιστικού διαλύματος κιτρικού οξέως που έχει ρυθμιστεί σε pΗ=7 με τη συζυγή του βάση. Η προσθήκη του επινοηθέντος συνδυασμού μέσω ρυθμιστικού διαλύματος έχει ως αποτέλεσμα την εξασφαλισμένη σταθερότητα της φόρμουλας καθ όλη τη διάρκεια ζωής της. The invented combination is added to the mixture mentioned above, after it has first been incorporated into a premix of citric acid buffer adjusted to pH=7 with its conjugate base. The addition of the invented combination through a buffer results in the guaranteed stability of the formula throughout its lifetime.

Στη συνέχεια γίνεται έλεγχος του pH που προκύπτει και ρυθμίζεται ανάλογα με την προσθήκη ρυθμιστών που είναι είτε Διάλυμα 20% w/w καυστικού νατρίου (NaOH) ή διάλυμα 20%w/w κιτρικού οξέως (C6H8O7) για τελική ρύθμιση pΗ=7. The resulting pH is then checked and adjusted accordingly by adding buffers that are either a 20% w/w sodium caustic solution (NaOH) or a 20%w/w citric acid solution (C6H8O7) for a final pH=7 adjustment.

Το ιξώδες του προϊόντος που προκύπτει θα πρέπει να κυμαίνεται μεταξύ 30000 και 80000 cps (BROOKFIELD RV, spindle/speed: SA25/3rpm). The viscosity of the resulting product should be between 30000 and 80000 cps (BROOKFIELD RV, spindle/speed: SA25/3rpm).

Πειραματική τεκμηρίωση χρήσης του συνδυασμού εκχυλίσματος του μικροφύκους Nannochloropsis gaditana & εκχυλίσματος πρόπολης. Προκειμένου να τεκμηριωθεί η χρήση του συνδυασμού εκχυλίσματος του μικροφύκους Nannochloropsis gaditana & εκχυλίσματος πρόπολης ως αντιγηραντικό συστατικό σε καλλυντική φόρμουλα προβήκαμε σε in vitro μελέτη των επιμέρους συστατικών του (πρόπολη, Nannochloropsis gaditana) προσομοιώνοντας διαφορετικές συνθήκες γήρανσης με στόχο την βέλτιστη προσέγγιση του φαινομένου της γήρανσης του δέρματος. Στη μελέτη αυτή χρησιμοποιήθηκαν ανθρώπινοι δερματικοί ινοβλάστες. Experimental evidence of use of the combination of Nannochloropsis gaditana microalgae extract & propolis extract. In order to document the use of the combination of Nannochloropsis gaditana microalgae extract & propolis extract as an antiaging ingredient in a cosmetic formula, we conducted an in vitro study of its individual components (propolis, Nannochloropsis gaditana) simulating different aging conditions with the aim of optimally approximating its aging effect skin. Human dermal fibroblasts were used in this study.

Αρχικά μελετήθηκε η βιοδραστικότητα του εκχυλίσματος Nannochloropsis gaditana υπό συνθήκες οξειδωτικού στρές. Είναι γνωστό ότι, το οξειδωτικό στρες αποτελεί μια πολύ σημαντική μορφή επίθεσης στο δέρμα και θεωρείται από τους σημαντικότερους παράγοντες που προκαλεί γήρανση. Στο οξειδωτικό στρες ενεργοποιείται ο σχηματισμός ελευθέρων ριζών. Οι ελεύθερες ρίζες είναι υψηλής δραστικότητας μόρια, που δημιουργούνται ως υποπροϊόντα του κανονικού μεταβολισμού (ενδογενή) και του περιβαλλοντικού στρες (εξωγενή), και είναι υπεύθυνες για κυτταρικές βλάβες κυρίως με στόχο τα κύτταρα όπως τα δερματικά κύτταρα. Στην πειραματική διαδικασία χρησιμοποιήθηκε το υπεροξείδιο του υδρογόνου (Η2Ο2) ως παράγοντας σχηματισμού ελευθέρων ριζών. Συγκεκριμένα η πειραματική διαδικασία περιλαμβάνει τα παρακάτω στάδια: 48ωρη επώαση του εκχυλίσματος Nannochloropsis gaditana συγκέντρωσης 1% στους ινοβλάστες, αφαίρεση θρεπτικού υλικού και πλύσιμο με ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικών/άλατος (PBS) για την αποφυγή ενδομοριακών αντιδράσεων μεταξύ του εγχύματος και Η2Ο2,προσθήκη διαλύματος υπεροξειδίου του υδρογόνου (0.1,0.5,1mM) για τρεις ώρες, προσθήκη θρεπτικού υλικού και μέτρηση βιωσιμότητας των κυττάρων με βάση το ATP (Crouch, 1993). First, the bioactivity of Nannochloropsis gaditana extract under oxidative stress conditions was studied. It is known that oxidative stress is a very important form of attack on the skin and is considered one of the most important factors that causes aging. Oxidative stress activates the formation of free radicals. Free radicals are highly reactive molecules, created as by-products of normal metabolism (endogenous) and environmental stress (exogenous), and are responsible for cellular damage mainly targeting cells such as skin cells. In the experimental procedure, hydrogen peroxide (H2O2) was used as a free radical forming agent. Specifically, the experimental procedure includes the following stages: 48-hour incubation of the Nannochloropsis gaditana extract at a concentration of 1% in the fibroblasts, removal of nutrient material and washing with phosphate/salt buffer solution (PBS) to avoid intramolecular reactions between the infusate and H2O2, addition of a peroxide solution of hydrogen (0.1,0.5,1mM) for three hours, addition of nutrient material and measurement of cell viability based on ATP (Crouch, 1993).

Από την συγκεκριμένη πειραματική διαδικασία παρατηρήθηκε ότι το εκχύλισμα Nannochloropsis gaditana (1%), προστατεύει τα κύτταρα έναντι του οξειδωτικού στρες εφόσον παρατηρήθηκε αύξηση της ζωτικότητας των κυττάρων 70% (αύξηση ΑΤΡ) με εκχύλισμα Nannochloropsis gaditana (1%) υπό συνθήκες οξειδωτικού στρες (προσθήκη Η2O2) σε σχέση με τα κύτταρα χωρίς εκχύλισμα Nannochloropsis gaditana. From the specific experimental procedure it was observed that Nannochloropsis gaditana extract (1%) protects the cells against oxidative stress since a 70% increase in cell vitality (increased ATP) was observed with Nannochloropsis gaditana extract (1%) under oxidative stress conditions (addition H2O2) relative to cells without Nannochloropsis gaditana extract.

Περαιτέρω διερεύνηση του σημαντικού αυτού αποτελέσματος μας οδήγησε σε μελέτη των μεταβολών που προκαλεί η επίδραση του εκχυλίσματος Nannochloropsis gaditana στην γονιδιακή έκφραση δερματικών ινοβλαστών υπο συνθήκες οξειδωτικού στρες. Για το σκοπό αυτό χρησιμοποιήθηκε τεχνική της αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης σε πραγματικό χρόνο RT-PCR (Giulietti A et al.). Απο τη γονιδιακή μελέτη προέκυψε ότι οι ινοβλάστες με εκχύλισμα Nannochloropsis gaditana συγκέντρωσης 1% παρουσίασαν υπερέκφραση (p<0.05) του γονιδίου της φιμπριλίνης (FBN) σε σχέση με τους ινοβλάστες χωρίς εκχύλισμα υπο συνθήκες οξειδωτικού στρες. Η φιμπριλίνη είναι μία γλυκοπρωτεΐνη η οποία είναι απαραίτητη για τον σχηματισμό των ινών ελαστίνης καθώς αποτελεί το ικρίωμα για την σωστή τοποθέτηση της ελαστίνης με στόχο την διατήρηση της ελαστικότητας του δέρματος (Langton, 2010). Επιπλέον, παρατηρήθηκε υπερέκφραση του γονιδίου της foxo-3 το οποίο κωδικοποιεί την πρωτεΐνη foxo-3 η οποία θεωρείται ανήκει στις πρωτεΐνες μακροζωίας και αντιγήρανσης (Kyoung, 2005). Further investigation of this important result led us to study the changes caused by the effect of Nannochloropsis gaditana extract on the gene expression of skin fibroblasts under conditions of oxidative stress. For this purpose, real-time polymerase chain reaction RT-PCR technique was used (Giulietti A et al.). From the gene study, it emerged that fibroblasts with Nannochloropsis gaditana extract at a concentration of 1% showed overexpression (p<0.05) of the fibrillin gene (FBN) compared to fibroblasts without extract under conditions of oxidative stress. Fibrillin is a glycoprotein that is essential for the formation of elastin fibers as it is the scaffold for the correct placement of elastin with the aim of maintaining skin elasticity (Langton, 2010). In addition, overexpression of the foxo-3 gene was observed, which encodes the foxo-3 protein, which is considered to belong to the longevity and antiaging proteins (Kyoung, 2005).

Εν συνεχεία διενεργήθηκε διερεύνηση της βιοδραστικότητας του εκχυλίσματος πρόπολης υπο συνθήκες φωτοξειδωτικού στρες (πρόωρη γήρανση). Subsequently, an investigation of the bioactivity of the propolis extract under conditions of photooxidative stress (premature aging) was carried out.

Η υπεριώδης ακτινοβολία είναι σημαντική πηγή οξειδωτικού στρες για το δέρμα. Εκτός από την παραγωγή ελεύθερων ριζών, η υπεριώδης ακτινοβολία επιδρά αρνητικά στα αμυντικά ένζυμα που διαθέτει το δέρμα ενάντια στην οξείδωση, αφήνοντάς το ακόμη πιο ευάλωτο απέναντι στη μόνιμη κυτταρική βλάβη (επιτάχυνση της γήρανσης του δέρματος). Όταν το δέρμα εκτίθεται παρατεταμένα στην υπεριώδη ακτινοβολία χωρίς την προστασία με αντιηλιακά φίλτρα, η προστασία του εξαρτάται αποκλειστικά από τα ενδογενή αντιοξειδωτικά αμυντικά συστήματα. UV radiation is a major source of oxidative stress for the skin. In addition to producing free radicals, UV radiation negatively affects the skin's defense enzymes against oxidation, leaving it even more vulnerable to permanent cellular damage (accelerating skin aging). When the skin is exposed to UV radiation for a long time without the protection of sun filters, its protection depends solely on the endogenous antioxidant defense systems.

Στην πειραματική διαδικασία που διενεργήθηκε, υπολογίστηκε η ποσότητα του κολλαγόνου και της ελαστίνης που παράγεται υπό συνθήκες φωτο-οξειδωτικού στρες (UVA+UVB 48mJ/cm<2>) από τους ινοβλάστες με ή χωρίς εκχύλισμα πρόπολης. Η λάμπα UV χρησιμοποιήθηκε ως παράγοντας σχηματισμού ελευθέρων ριζών. Συγκεκριμένα η επώαση του εκχυλίσματος πρόπολης στα κύτταρα διήρκησε 4 ημέρες υπό συνθήκες φωτο-οξειδωτικού στρες (UVA+UVB 48mJ/cm<2>). Τη πέμπτη μέρα μετρήθηκε η παραγωγή κολλαγόνου με τη μέθοδο Sirius Red (Vogel, 2-015), η παραγωγή ελαστίνης με την μέθοδο TPPS (Winkelaman, 1962) και έγινε εκτίμηση της ζωτικότητας των κυττάρων με τη μέθοδο ΜΤΤ (Mosmann,1983). Αρχικά παρατηρήθηκε ότι το εκχύλισμα πρόπολης (1%), προστατεύει τα κύτταρα έναντι του φωτο-οξειδωτικού στρες εφόσον παρατηρήθηκε αύξηση της ζωτικότητας των κυττάρων 40% με εκχύλισμα πρόπολης (1%) υπο συνθήκες φωτοοξειδωτικού στρες σε σχέση με τα κύτταρα χωρίς εκχύλισμα πρόπολης. Από την μελέτη αυτή προέκυψε ότι το εκχύλισμα πρόπολης προστατεύει τα κύτταρα από το φωτο-οξειδωτικό στρες διατηρώντας την ικανότητα των κυττάρων να παράγουν κολλαγόνο και ελαστίνη, τις θεμελιώδες πρωτεΐνες του εξωκυττάριου χώρου υπεύθυνες για την ελαστικότητα και την σφριγηλότητα του δέρματος. In the experimental procedure carried out, the amount of collagen and elastin produced under conditions of photo-oxidative stress (UVA+UVB 48mJ/cm<2>) by the fibroblasts with or without propolis extract was calculated. UV lamp was used as free radical forming agent. Specifically, the incubation of the propolis extract in the cells lasted 4 days under conditions of photo-oxidative stress (UVA+UVB 48mJ/cm<2>). On the fifth day, collagen production was measured with the Sirius Red method (Vogel, 2-015), elastin production with the TPPS method (Winkelaman, 1962) and cell viability was assessed with the MTT method (Mosmann, 1983). Propolis extract (1%) was initially observed to protect cells against photo-oxidative stress as a 40% increase in cell viability was observed with propolis extract (1%) under conditions of photo-oxidative stress compared to cells without propolis extract. This study found that propolis extract protects cells from photo-oxidative stress by maintaining the ability of cells to produce collagen and elastin, the fundamental proteins of the extracellular space responsible for the elasticity and firmness of the skin.

Με βάση όλες τις ανωτέρω πειραματικές εφαρμογές, επιβεβαιώθηκαν τα ακόλουθα: Based on all the above experimental applications, the following were confirmed:

Ο συνδυασμός εκχυλίσματος του μικροφύκους Nannochloropsis gaditana & εκχυλίσματος πρόπολης έχει προστατευτικό ρόλο στην γήρανση των κυττάρων του ανθρώπινου δέρματος. Αυτό επιβεβαιώνεται 1) μέσω του προστατευτικού ρόλου του εκχυλίσματος πρόπολης έναντι του φωτο-οξειδωτικού στρες με τη χρήση του οποίου ενισχύθηκε η ικανότητα των δερματικών κυττάρων να παράγουν κολλαγόνο και ελαστίνη και 2) μέσω του προστατευτικού ρόλου του εκχυλίσματος Nannochloropsis gaditana έναντι του οξειδωτικού στρες με την χρήση του οποίου αυξήθηκε η έκφραση της φιμπριλινης των δερματικών κυττάρων ενισχύοντας την ελαστικότητας του δέρματος εφόσον η πρωτεΐνη αυτή προσφέρει το ικρίωμα για τη σωστή διαμόρφωση στο χώρο της ελαστίνης. Η κατεύθυνση αυτή επιβεβαιώνεται με την αυξημένη έκφραση του γονιδίου foxo με την χρήση του εκχυλίσματος Nannochloropsis gaditana ενισχύοντας την αντιγηραντική του χρήση. The combination of Nannochloropsis gaditana microalgae extract & propolis extract has a protective role in the aging of human skin cells. This is confirmed 1) through the protective role of propolis extract against photo-oxidative stress using which the ability of skin cells to produce collagen and elastin was enhanced and 2) through the protective role of Nannochloropsis gaditana extract against oxidative stress by use of which increased the expression of skin cell fibrillin enhancing skin elasticity since this protein provides the scaffolding for the correct configuration in the area of elastin. This direction is confirmed by the increased expression of the foxo gene with the use of Nannochloropsis gaditana extract, enhancing its antiaging use.

ΑΝΑΦΟΡΕΣ REFERENCES

Sunscreens: Development, Evaluation and Regulatory Aspects, Marcel Dekker Inc, New York, 1997, ISBN: 0-8247-9306-4 Sunscreens: Development, Evaluation and Regulatory Aspects, Marcel Dekker Inc, New York, 1997, ISBN: 0-8247-9306-4

Ultraviolet radiation, aging and the skin: prevention of damage by topical cAMP manipulation. Alexandra Amaro-Ortiz, Betty Yan, and John A. D'Orazio. Molecules. 2014; 19(5): 6202-6219. Ultraviolet radiation, aging and the skin: prevention of damage by topical cAMP manipulation. Alexandra Amaro-Ortiz, Betty Yan, and John A. D'Orazio. Molecules. 2014? 19(5): 6202-6219.

Propolis as potential cosmeceutical sunscreen agent for its combined photoprotective and antioxidant properties. Gregoris E, Fabris S, Bertelle M, Grassato L, Stevanato R. Int J Pharm. 2011 Feb 28;405(l-2):97-101. Propolis as potential cosmeceutical sunscreen agent for its combined photoprotective and antioxidant properties. Gregoris E, Fabris S, Bertelle M, Grassato L, Stevanato R. Int J Pharm. 2011 Feb 28;405(l-2):97-101.

Evaluation of the Potential of Brazilian Propolis against UV-Induced Oxidative Stress. Fonseca YM, Marquele-Oliveira F, Vicentini FT, Furtado NA, Sousa JP, Lucisano-Valim YM, Fonseca MJ. Evid Based Complement Alternat Med. 2011;2011. Evaluation of the Potential of Brazilian Propolis against UV-Induced Oxidative Stress. Fonseca YM, Marquele-Oliveira F, Vicentini FT, Furtado NA, Sousa JP, Lucisano-Valim YM, Fonseca MJ. Evid Based Complement Alternat Med. 2011; 2011.

Phenolic composition and antioxidant properties of poplar bud (Populus nigra) extract: individual antioxidant contribution of phenolics and transcriptional effect on skin aging. Dudonne S, Poupard P, Coutiere P, Woillez M, Richard T, Merillon JM, Vitrac X. J Agric Food Chem. 2011 May ll;59(9):4527-36. Phenolic composition and antioxidant properties of poplar bud (Populus nigra) extract: individual antioxidant contribution of phenolics and transcriptional effect on skin aging. Dudonne S, Poupard P, Coutiere P, Woillez M, Richard T, Merillon JM, Vitrac X. J Agric Food Chem. 2011 May ll;59(9):4527-36.

 Raposo, M.F., de Morais, R.M., Bernardo de Morais A.M. Bioactivity and applications of sulphated polysaccharides from marine microalgae. Mar Drugs, 2013 11, 233-352 Raposo, M.F., de Morais, R.M., Bernardo de Morais A.M. Bioactivity and applications of sulfated polysaccharides from marine microalgae. Mar Drugs, 2013 11, 233-352

Gouveia L., Raymundo A., Batista A.P., Sousa I., Empis J. Chlorella vulgaris and Flaematococcus pluvialis biomass as colouring and antioxidant in food emulsions. Eur Food Res Tech 2006, 222, 362-367 Gouveia L., Raymundo A., Batista A.P., Sousa I., Empis J. Chlorella vulgaris and Flaematococcus pluvialis biomass as coloring and antioxidant in food emulsions. Eur Food Res Tech 2006, 222, 362-367

Macedo, M.F., Miller, A.Z., Dionisio, A., Saiz-Jimenez, C. Biodiversity of cyanobacteria and green algae on monuments in the Mediterranean Basin: an overview. Microbiology 2009, 155, 3476-3490. Macedo, M.F., Miller, A.Z., Dionisio, A., Saiz-Jimenez, C. Biodiversity of cyanobacteria and green algae on monuments in the Mediterranean Basin: an overview. Microbiology 2009, 155, 3476-3490.

Fujitani, N.; Sakari, S.; Yamagushi, Y.; Takenaka, FI. Inhibitory effects of microalgae on activation of hyaluronidase. J Appl Phycol 2001, 13, 489-492 Fujitani, N.; Sakari, S.; Yamagushi, Y.; Takenaka, FI. Inhibitory effects of microalgae on activation of hyaluronidase. J Appl Phycol 2001, 13, 489-492

Langton AK, Sherratt MJ, Griffiths CE, Watson RE. A new wrinkle on old skin: the role of elastic fibres in skin ageing. Int J Cosmet Sci. 2010 Oct;32(5):330-9. Langton AK, Sherratt MJ, Griffiths CE, Watson RE. A new wrinkle on old skin: the role of elastic fibers in skin aging. Int J Cosmet Sci. 2010 Oct;32(5):330-9.

Kyoung Kim FI, Kyoung Kim Y, Song IH, Baek SH, Lee SR, Hye Kim J, Kim JR. Down-regulation of a forkhead transcription factor, FOX03a, accelerates cellular senescence in human dermal fibroblasts. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2005 Jan;60(l):4-9. Kyoung Kim FI, Kyoung Kim Y, Song IH, Baek SH, Lee SR, Hye Kim J, Kim JR. Down-regulation of a forkhead transcription factor, FOX03a, accelerates cellular senescence in human dermal fibroblasts. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2005 Jan;60(l):4-9.

Crouch SP, Kozlowski R, Slater KJ, Fletcher J. The use of ATP bioluminescence as a measure of cell proliferation and cytotoxicity. J Immunol Methods. 1993 Mar 15;160(l):81-8. Crouch SP, Kozlowski R, Slater KJ, Fletcher J. The use of ATP bioluminescence as a measure of cell proliferation and cytotoxicity. J Immunol Methods. 1993 Mar 15;160(l):81-8.

Mosmann T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays. J Immunol Methods. 1983 Dec 16;65(l-2):55-63. Mosmann T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays. J Immunol Methods. 1983 Dec 16;65(l-2):55-63.

Winkelman J. The distribution of tetraphenylporphinesulfonate in the tumor-bearing rat. Cancer Res. 1962 Jun;22:589-96. Winkelman J. The distribution of tetraphenylporphinesulfonate in the tumor-bearing rat. Cancer Res. 1962 Jun;22:589-96.

Vogel B, Siebert H, Flofmann U, Frantz S.Determination of collagen content within picrosirius red stained paraffin-embedded tissue sections using fluorescence microscopy. MethodsX. 2015 Feb 21;2:124-34. Vogel B, Siebert H, Flofmann U, Frantz S. Determination of collagen content within picrosirius red stained paraffin-embedded tissue sections using fluorescence microscopy. MethodsX. 2015 Feb 21;2:124-34.

Claims (8)

ΑΞΙΩΣΕΙΣ             1. Συνδυασμός εκχυλίσματος μικροφύκους nannochloropsis gaditana και εκχυλίσματος πρόπολης ως δραστικού συστατικού σε καλλυντικοτεχνικές φόρμουλες για δερματική και συγκεκριμένα αντιγηραντική χρήση, όπου οι φόρμουλες περιλαμβάνουν τα αντιηλιακά φίλτρα 2-Ethylhexyl 2-Cyano-3,3-Diphenylacrylate σε ποσοστό από 0% έως 10% ανά w/w, 2-Ethylhexyl 2-Hydroxybenzoate σε ποσοστό από 0% έως 5% ανά w/w, 4-tert-Butyl-4'-methoxydibenzoylmethane σε ποσοστό από 0% έως 5% ανά w/w, ,2'- (6- (4-Methoxyphenyl)1, 3, 5 - triazine - 2, 4-diyl) bis (5- ( (2-ethylhexyl) oxy )phenol ) Bemotrizinol σε ποσοστό από 0% έως 10% ανά w/w, 2-Ethylhexyl 4-Methoxycinnamate σε ποσοστό από 0% έως 10% ανά w/w, Benzoic acid, 2-[4-(diethylamino)-2-hydroxybenzoyl]-, hexylester σε ποσοστό από 0% έως 10% ανά w/w, 2,4,6-Τ rianilino-(p-carbo-2'-ethylhexyl-1 '-oxy)-1 ,3,5-triazine σε ποσοστό από 0% έως 5% ανά w/w, Zinc oxide σε ποσοστό από 0% έως 25% ανά w/w και Titanium oxide σε ποσοστό από 0% έως 25% ανά w/w, ανιονικούς γαλακτωματοποιητές ή συνδυασμούς αυτών, μη ιονικούς συνγαλακτωματοποιητές, μαλακτικούς παράγοντες, ουσίες από την ομάδα των αλκοολών, παράγοντες σταθεροποίησης από την ομάδα των κομμών ή των υδρόφιλων κολλοειδών, υγροσκοπικούς παράγοντες φροντίδας του δέρματος και νερό, που χαρακτηρίζεται από το ότι δραστικό στοιχείο της φόρμουλας αποτελεί ο συνδυασμός εκχυλίσματος μικροφύκους Nannochloropsis gaditana σε νερό και 1 ,3 προπανοδιόλη & εκχυλίσματος πρόπολης σε νερό, γλυκερόλη και β -υδροξυπρόπυλοκυκλοδεξτρίνη σε περιεκτικότητα από 0.1 έως 20% ανά w/w.1. Combination of nannochloropsis gaditana microalgae extract and propolis extract as an active ingredient in cosmetic formulas for skin and specifically antiaging use, where the formulas include the sunscreen filters 2-Ethylhexyl 2-Cyano-3,3-Diphenylacrylate in a percentage of 0% to 10% by w/w, 2-Ethylhexyl 2-Hydroxybenzoate at a rate of 0% to 5% by w/w, 4-tert-Butyl-4'-methoxydibenzoylmethane at a rate of 0% to 5% by w/w, ,2' - (6-(4-Methoxyphenyl)1, 3, 5 - triazine - 2, 4-diyl) bis (5-( (2-ethylhexyl) oxy )phenol ) Bemotrizinol at a rate of 0% to 10% by w/w , 2-Ethylhexyl 4-Methoxycinnamate at a rate of 0% to 10% by w/w, Benzoic acid, 2-[4-(diethylamino)-2-hydroxybenzoyl]-, hexylester at a rate of 0% to 10% by w/ w, 2,4,6-T rianilino-(p-carbo-2'-ethylhexyl-1 '-oxy)-1,3,5-triazine in a percentage of 0% to 5% by w/w, Zinc oxide in percentage from 0% to 25% by w/w and Titanium oxide in percentage from 0% to 25% by w/w, anionic emulsion agents or combinations thereof, non-ionic co-emulsifiers, softening agents, substances from the group of alcohols, stabilizing agents from the group of gels or hydrophilic colloids, hygroscopic skin care agents and water, characterized in that the active element of the formula is combination of Nannochloropsis gaditana microalgae extract in water and 1,3 propanediol & propolis extract in water, glycerol and β-hydroxypropylcyclodextrin in a content of 0.1 to 20% per w/w.            2. Συνδυασμός εκχυλίσματος μικροφύκους nannochloropsis gaditana και εκχυλίσματος πρόπολης ως δραστικού συστατικού σε καλλυντικοτεχνικές φόρμουλες για δερματική χρήση σύμφωνα με την αξίωση 1 που χαρακτηρίζεται από το ότι, οι ανιονικοί γαλακτοποιητές ή ο συνδυασμός αυτών που περιλαμβάνονται στη φόρμουλα είναι Sodium hydrogen N-(1-oxooctadecyl)-L-glutamate σε ποσοστό από 0.1% έως 2% ανά w/w, ή/και 2,3-Propanetricarboxylic acid, 2-hydroxy-, ester with 1 ,2,3-propanetriol monooctadecanoate σε ποσοστό από 0,1% έως 4% ανά w/w, ή / και Butanedioic acid, sulfo-, C-C1 6-18-alkyl esters, disodium salt σε ποσοστό από 0,1% έως 2% ανά w/w, ή / και Sulfuric acid, mixed cetyl and stearyl esters, sodium salts σε ποσοστό από 0,1% έως 4% ανά w/w και 1-hexadecanol, phosphate, potassium salt σε ποσοστό από 0,1% έως 4% ανά w/w.2. Combination of nannochloropsis gaditana microalgae extract and propolis extract as active ingredient in cosmetic formulas for skin use according to claim 1 characterized in that the anionic emulsifiers or the combination thereof included in the formula are Sodium hydrogen N-(1-oxooctadecyl )-L-glutamate at a rate of 0.1% to 2% per w/w, and/or 2,3-Propanetricarboxylic acid, 2-hydroxy-, ester with 1,2,3-propanetriol monooctadecanoate at a rate of 0.1% up to 4% per w/w, and/or Butanedioic acid, sulfo-, C-C1 6-18-alkyl esters, disodium salt at a rate of 0.1% to 2% per w/w, and/or Sulfuric acid, mixed cetyl and stearyl esters, sodium salts at a rate from 0.1% to 4% per w/w and 1-hexadecanol, phosphate, potassium salt at a rate from 0.1% to 4% per w/w.            3. Συνδυασμός εκχυλίσματος μικροφύκους nannochloropsis gaditana και εκχυλίσματος πρόπολης ως δραστικού συστατικού σε καλλυντικοτεχνικές φόρμουλες για δερματική χρήση σύμφωνα με την αξίωση 1 που χαρακτηρίζεται αηό το ότι, οι μη ιονικοί συν-γαλακτωματοποιητές που περιλαμβάνει η φόρμουλα είναι λιπαρές αλκοόλες και συγκεκριμένα μία ή μίγμα εκ των cetearyl alcohol, cetyl alcohol, behenyl Alcohol, Arachidyl alcohol, ή/και εστέρες σακχαρόζης (και συγκεκριμένα ένας ή μίγμα εκ των Sucrose Polystearate, Sucrose Distearate & Sucrose Stearate), ή/και αιθέρες γλυκοζίτη (και συγκεκριμένα ένας ή μίγμα των Cetearyl Glucoside, Coco-Glucoside, Arachidyl Glucoside, C-12-20 Alkyl Glucoside, C 14-22 Alkyl Glucoside) σε περιεκτικότητα 0.1-5% w/w.3. Combination of nannochloropsis gaditana microalgae extract and propolis extract as an active ingredient in cosmetic formulas for skin use according to claim 1 characterized in that the non-ionic co-emulsifiers included in the formula are fatty alcohols and specifically one or a mixture of cetearyl alcohol, cetyl alcohol, behenyl Alcohol, Arachidyl alcohol, and/or sucrose esters (and specifically one or a mixture of Sucrose Polystearate, Sucrose Distearate & Sucrose Stearate), and/or glucoside ethers (and specifically one or a mixture of Cetearyl Glucoside, Coco-Glucoside, Arachidyl Glucoside, C-12-20 Alkyl Glucoside, C 14-22 Alkyl Glucoside) in a content of 0.1-5% w/w.            4. Συνδυασμός εκχυλίσματος μικροφύκους nannochloropsis gaditana και εκχυλίσματος πρόπολης ως δραστικού συστατικού σε καλλυντικοτεχνικές φόρμουλες για δερματική χρήση σύμφωνα με την αξίωση 1 που χαρακτηρίζεται από το ότι, οι μαλακτικοί παράγοντες με τους οποίους εμπλουτίζεται η φόρμουλα είναι κυρίως φυσικά έλαια, ή/και φυσικά γλυκερίδια και εστέρες από τις ομάδες αυτών που προέρχονται από κορεσμένα και/ή ακόρεστα, διακλαδισμένα και/ή μη διακλαδισμένα αλκανοκαρβοξυλικά οξέα που έχουν μήκος ανθρακικής αλυσίδας από 3 ως 30 άτομα άνθρακα και κορεσμένες και /ή ακόρεστες, διακλαδισμένες και /ή μη διακλαδισμένες αλκοόλες που έχουν μήκος ανθρακικής αλυσίδας από 3 ως και 30 άτομα άνθρακα και αυτών που προέρχονται από αρωματικά οξέα και κορεσμένες και /ή ακόρεστες, διακλαδισμένες και /ή μη διακλαδισμένες αλκοόλες που έχουν μήκος ανθρακικής αλυσίδας από 3 ως και 30 άτομα όπως τα heptyl undec-10-enoate, 1 ,2,3- Propanetrio Triheptanoate, Octyl Cocoate, Coco-Capprylate/Caprate σε περιεκτικότητα 1-20% w/w.4. Combination of nannochloropsis gaditana microalgae extract and propolis extract as active ingredient in cosmetic formulas for skin use according to claim 1 characterized in that the emollients with which the formula is enriched are mainly natural oils, and/or natural glycerides and esters from the groups thereof derived from saturated and/or unsaturated, branched and/or unbranched alkanocarboxylic acids having a carbon chain length of from 3 to 30 carbon atoms and saturated and/or unsaturated, branched and/or unbranched alcohols having a length of carbon chain from 3 to 30 carbon atoms and those derived from aromatic acids and saturated and/or unsaturated, branched and/or unbranched alcohols having a carbon chain length from 3 to 30 atoms such as heptyl undec-10-enoate, 1,2,3-Propanetrio Triheptanoate, Octyl Cocoate, Coco-Capprylate/Caprate in a content of 1-20 %w/w.            5. Συνδυασμός εκχυλίσματος μικροφύκους nannochloropsis gaditana και εκχυλίσματος πρόπολης ως δραστικού συστατικού σε καλλυντικοτεχνικές φόρμουλες για δερματική χρήση σύμφωνα με την αξίωση 1 που χαρακτηρίζεται από το ότι, το ποσοστό των ουσιών από την ομάδα των αλκοολών που χρησιμοποιούνται για τη δράση κατά των μικροοργανισμών κυμαίνεται από 0, 1% έως 2% ανά w/w.5. Combination of nannochloropsis gaditana microalgae extract and propolis extract as active ingredient in cosmetic formulas for skin use according to claim 1 characterized in that the percentage of substances from the group of alcohols used for the action against microorganisms ranges from 0 , 1% to 2% by w/w.            6. Συνδυασμός εκχυλίσματος μικροφύκους nannochloropsis gaditana και εκχυλίσματος πρόπολης ως δραστικού συστατικού σε καλλυντικοτεχνικές φόρμουλες για δερματική χρήση σύμφωνα με την αξίωση 1 που χαρακτηρίζεται από το ότι, η περιεκτικότητα των παραγόντων σταθεροποίησης της δομής της φόρμουλας κυμαίνεται από 0.01% έως 2% ανά w/w.6. Combination of nannochloropsis gaditana microalgae extract and propolis extract as active ingredient in cosmetic formulas for skin use according to claim 1 characterized in that the content of the structure stabilizing agents of the formula ranges from 0.01% to 2% per w/w .            7. Συνδυασμός εκχυλίσματος μικροφύκους nannochloropsis gaditana και εκχυλίσματος πρόπολης ως δραστικού συστατικού σε καλλυντικοτεχνικές φόρμουλες για δερματική χρήση σύμφωνα με την αξίωση 1 που χαρακτηρίζεται από το ότι η περιεκτικότητα των υγροσκοπικών παραγόντων και των παραγόντων φροντίδας του δέρματος κυμαίνεται από 0.001% έως 3% ανά w/w.7. Combination of nannochloropsis gaditana microalgae extract and propolis extract as active ingredient in cosmetic formulas for skin use according to claim 1 characterized in that the content of hygroscopic agents and skin care agents ranges from 0.001% to 3% by w/ w.            8. Μία μέθοδος ενσωμάτωσης του συνδυασμού εκχυλίσματος μικροφύκους nannochloropsis gaditana και εκχυλίσματος πρόπολης ως δραστικού συστατικού σε καλλυντικοτεχνικές φόρμουλες για δερματική χρήση σύμφωνα με τις αξιώσεις 1 έως 7, που χαρακτηρίζεται από το ότι ο συνδυασμός του εκχυλίσματος προστίθεται στο μίγμα αφού πρώτα έχει ενσωματωθεί σε πρόμιγμα ρυθμιστικού διαλύματος κιτρικού οξέως που έχει ρυθμιστεί σε pΗ=7 με τη συζυγή του βάση, προκειμένου να εξασφαλίζεται η σταθερότητα του τελικού προϊόντος ενώ στη συνέχεια γίνεται έλεγχος του pH που προκύπτει και ρυθμίζεται ανάλογα με την προσθήκη ρυθμιστών που είναι είτε Διάλυμα 20% w/w καυστικού νατρίου (NaOH) ή διάλυμα 20%w/w κιτρικού οξέως (C6H8O7) για τελική ρύθμιση pΗ=7.8. A method of incorporating the combination of nannochloropsis gaditana microalgae extract and propolis extract as an active ingredient in cosmetic formulas for skin use according to claims 1 to 7, characterized in that the combination of the extract is added to the mixture after it has first been incorporated into a buffer premix of citric acid solution that has been adjusted to pH=7 with its conjugate base, in order to ensure the stability of the final product while the resulting pH is then checked and adjusted accordingly by the addition of buffers that are either 20% w/w caustic solution sodium (NaOH) or 20%w/w citric acid (C6H8O7) solution for final pH=7 adjustment.
GR20160100314A 2016-06-13 2016-06-13 Combination of nannochloropsis gaditana-and-propolis extracts acting as drastic components in skin-care cosmetic formulas GR1009175B (en)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GR20160100314A GR1009175B (en) 2016-06-13 2016-06-13 Combination of nannochloropsis gaditana-and-propolis extracts acting as drastic components in skin-care cosmetic formulas
PCT/GR2016/000063 WO2017216588A1 (en) 2016-06-13 2016-11-21 A combination of a nannochloropsis gaditana extract and a propolis extract as active component in cosmetic formulations for dermal use

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GR20160100314A GR1009175B (en) 2016-06-13 2016-06-13 Combination of nannochloropsis gaditana-and-propolis extracts acting as drastic components in skin-care cosmetic formulas

Publications (1)

Publication Number Publication Date
GR1009175B true GR1009175B (en) 2017-12-18

Family

ID=57680417

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
GR20160100314A GR1009175B (en) 2016-06-13 2016-06-13 Combination of nannochloropsis gaditana-and-propolis extracts acting as drastic components in skin-care cosmetic formulas

Country Status (2)

Country Link
GR (1) GR1009175B (en)
WO (1) WO2017216588A1 (en)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2006232766A (en) * 2005-02-28 2006-09-07 Pentapharm Ltd Skin cosmetic
GR1007520B (en) * 2010-12-02 2012-02-02 Apivita - Καλλυντικα - Διαιτητικα - Φαρμακα Ανωνυμη Εμπορικη Και Βιοτεχνικη Εταιρεια, Extraction and formation of inclusion complexes of propolis active components with hydroxypropyl-β-cyclodextrin.
WO2016026723A2 (en) * 2014-08-19 2016-02-25 Cutech Srl Extracts of nannochloropsis sp. and their applications

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE4336169A1 (en) * 1993-10-22 1995-07-13 Puetter Medice Chem Pharm Sunscreen contg. propolis extract
US20040258765A1 (en) 2003-06-23 2004-12-23 Gee Gilbert C. Method for treatment of sores and lesions of the skin
DK2908831T3 (en) 2012-10-18 2018-03-12 Montero Gida Sanayi Ve Ticaret As HERBAL FORMULATIONS
US9968548B2 (en) 2014-11-07 2018-05-15 Vets Plus, Inc. Dental hard chew supplements containing antimicrobial actives

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2006232766A (en) * 2005-02-28 2006-09-07 Pentapharm Ltd Skin cosmetic
GR1007520B (en) * 2010-12-02 2012-02-02 Apivita - Καλλυντικα - Διαιτητικα - Φαρμακα Ανωνυμη Εμπορικη Και Βιοτεχνικη Εταιρεια, Extraction and formation of inclusion complexes of propolis active components with hydroxypropyl-β-cyclodextrin.
WO2016026723A2 (en) * 2014-08-19 2016-02-25 Cutech Srl Extracts of nannochloropsis sp. and their applications

Also Published As

Publication number Publication date
WO2017216588A1 (en) 2017-12-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6307444B2 (en) Anti-aging external composition for skin and method for producing the same
JP2021194341A (en) A method for suppressing the expression of neutrophil adhesion promoting factors, a method for preventing or improving wrinkles and / or sagging of the skin, an agent for preventing or improving wrinkles and / or sagging of the skin, and a composition kit for external use on the skin.
JPWO2004016236A1 (en) Cosmetics
JP2011516585A (en) Skin care composition and method of use thereof
JP2020532560A (en) Cosmetic composition containing extract of Dendrobium candidam flower
WO2009157575A1 (en) Skin preparation for external use, whitening agent, anti-aging agent, and antioxidant
JP6731425B2 (en) Obtaining extracts from brown alga gametophytes and their use as cosmetic anti-aging active ingredients
KR20180115674A (en) Synergistic extracts of Palmaria palmata and jasmine, compositions comprising them and uses thereof
US20150025036A1 (en) Use of an active principle derived from eucheuma cottonii and rich in linear galactans for controlling skin cell aging
CN106999400B (en) Composition comprising Sirt6 activator and DNA repair enzyme
ES2624909T3 (en) Composition for skin care
JP5836666B2 (en) MITF-M production promoter, hair cosmetic composition and skin cosmetic composition containing the MITF-M production promoter
KR102390656B1 (en) A cosmetic composition comprising chlorella extract for skin-whitening
KR102672765B1 (en) Cosmetic composition for UV protection with excellent skin moisturizing effect and feeling of use
FR3075055A1 (en) 4-ACTIVE COMPLEX TO ENHANCE SKIN FLASH
KR102485135B1 (en) A multi-fuctional cosmetic composition comprising astaxanthin complex
KR101550309B1 (en) Antiaging cosmetic composition containing fermented green tomato extract
KR102487267B1 (en) A cosmetic composition for anti-inflammatory comprising astaxanthin complex
GR1009175B (en) Combination of nannochloropsis gaditana-and-propolis extracts acting as drastic components in skin-care cosmetic formulas
JP6375087B2 (en) Cosmetics
KR102503192B1 (en) A cosmetic composition having hydrogel formulation comprising sliybum marianum seed extract
JP4167247B2 (en) Skin preparation
KR101805395B1 (en) Cosmetic composition for skin moisturizing
KR102813262B1 (en) Composition for improving skin health that promotes reverse aging and manufacturing method thereof
KR102746298B1 (en) A cosmetic composition comprising rucinol and natural extracts for skin-whitening

Legal Events

Date Code Title Description
PG Patent granted

Effective date: 20180309