FI106027B - Menetelmä (S)(+)-2-etoksi-4-[N-[1-(2-piperidinofenyyli)-3-metyyli-1-butyyli] aminokarbonyylimetyyli]-betsoehapon tai sen suolan valmistamiseksi sekä (S)-1-(2-piperidinofenyyli)-3-metyyli-1-butyyliamiinin N-asetyyli-L-glutamiinisuola sen valmistus - Google Patents

Description

-10602)

Menetelmä (S)(+)-2-etoksi-4-[N-[1 -(2-piperidinofenyyli)-3-metyyli-1 -butyyli]-aminokarbonyylimetyylij-bentsoehapon tai sen suolan valmistamiseksi sekä (S)-1-(2-piperidinofenyyli)-3 -metyyli-1-butyyliamiinin N-asetyyli-L-glutamiini-suola ja sen valmistus - Förfarande för framställning av (S)(+)-2-etoxi-4-[N-5 [1-(2-piperidinofenyl)-3-metyl-1-butyl]aminokarbonylmetyl]-bensoesyra eller dess sait, samt N-acetyl-L-glutaminsaltar(s) (S)-1-(2-piperidinofenyl)-3-metyl- 1-butylamin och dess framställning

Julkaisussa EP-B-0,147,850 kuvataan mm. 2-etoksi-4-[N-[1-(2-piperidino-10 fenyyli)-3-metyyli-1 -butyyli]aminokarbonyylimetyyli]-bentsoehapon rasemaatti (koodi-no.: AG-EE 388 ZW), jolla on kaava ch3 ch, \ /

CH

15 Γ2 _ Q(„ 20 ja julkaisussa EP-B-0,207,331 kuvataan tämän yhdisteen kaksi muuta polymor-fista muotoa. Tällä yhdisteellä ja sen fysiologisesti hyväksyttävillä suoloilla on : arvokkaita farmakologisia ominaisuuksia, ts. vaikutusta välituoteaineenvaih- duntaan, erityisesti kuitenkin verensokeria alentavaa vaikutusta.

25 Tämän yhdisteen molempien enantiomeerien, ts. (S)(+)-2-etoksi-4-[N-[1-(2-piperidinofenyyli)-3-metyyli-1-butyyli]aminokarbonyylimetyyli]bentsoehapon (koodi-no.: AG-EE 623 ZW) ja (R)(-)-2-etoksi-4-[N-[1 -(2-piperidinofenyyli)-3-metyyli-1-butyyli]aminokarbonyylimetyyli]bentsoehapon (koodi-no.: AG-EE 624 30 ZW) verensokeria alentava vaikutus testattiin naaraspuolisilla rotilla.

Yllättävällä tavalla keksittiin, että (S)-enantiomeeri (AG-EE 623 ZW) on vaikuttava enantiomeeri, ja että sen vaikutus kestää rotalla yli 6 tuntia.

106027 2 Näiden rotalla saatujen tulosten perusteella esiintyy ihmisellä AG-EE 623 ZW:n yksinomaisen käytön tarjoaminen, jonka kautta annosta voidaan pienentää 50 %:lla AG-EE 388 ZW-annokseen verrattuna. Tämä ja suhteellisen pitkä vaikutuksen kesto voitiin todistaa ihmisellä. Tämän lisäksi keksittiin ihmistutkimuk-5 sissa kuitenkin, että AG-EE 623 ZW:llä on yllättäviä farmakokineettisiä ominaisuuksia, jotka eivät AG-EE 388 ZW-tietojen johdosta olleet ennalta aavistettavissa. AG-EE 623 ZW:llä on täten yllättäviä terapeuttisia etuja rasemaattiin AG-EE 388 ZW verrattuna.

10 Yllättävät tulokset ihmisellä ovat: (a) AG-EE 623 ZW-peilit putoavat nopeammin nollaan kuin AG-EE 388 ZW-peilit, jopa samalla absoluuttisella annoksella, mitä ei ollut odotettavissa vaikutuksen suhteellisen pitkän keston johdosta.

15 (b) Suhteessa saavutettuun verensokerin alenemiseen AG-EE 623 ZW:llä esiintyy oleellisesti alhaisemmat plasmapeilit, kuin AG-EE 388 ZW-annoksen puolituksella olisi ollut odotettavissa.

(c) Verensokeria alentava vaikutus alkaa AG-EE 623 ZW-annon jälkeen nopeammin kuin AG-EE 388 ZW-annon jälkeen.

20

Molempien enantiomeerien välinen selvä ero on, että vaikuttava enantiomeeri, AG-EE 623 ZW, poistuu yllättävällä tavalla suhteellisesti pidemmästä vaikutuk-: sen kestosta huolimatta oleellisesti nopeammin kuin tehoton enantiomeeri, AG-EE 624 ZW, kuten kuvioissa 1 ja 2 osoitetaan. Kuviossa 1 esitetään tällöin 25 AG-EE 623 ZW:n ja AG-EE 624 ZW:n plasmakonsentraatio kun on annettu laskimonsisäisesti 1,0 mg AG-EE 388 ZW:tä, ja kuviossa 2 esitetään AG-EE 623 ZW:n ja AG-EE 624 ZW:n plasmakonsentraatio sen jälkeen kun on annet-*, tu oraalisesti (liuos) 1,0 mg AG-EE 388 ZW:tä kulloinkin 12 vapaaehtoiselle miespuoliselle koehenkilölle. Rasemaatin annon jälkeen tehoton enantiomeeri, 30 AG-EE 624 ZW, ei siis ollut ainoastaan tarpeettomana painolastina yhtä korkeina plasmakonsentraatioina kuin vaikuttava enantiomeeri, AG-EE 623 ZW, vaan odottamattomasti korkeampina maksimi-ja kestopeileinä. Tämä ilmenee esimerkiksi annettaessa tabletin, jossa on 2 mg AG-EE 388 ZW:tä tai tabletin, 3 1CCC27 jossa on 1 mg AG-EE 623 ZW:tä 12 tai 6 koehenkilöllä niin, että maksimikon-sentraatiot olivat 84 ± 25 tai 28 ± 18 ng/ml, samoin kuin konsentraatiot olivat 4 tunnin kuluttua 19 ± 8 tai 0,7 ± 1,0 ng/ml, 5 tunnin kuluttua 13 ± 6 tai 0,3 ± 0,7 ng/ml, ja 6 tunnin kuluttua 10 ± 6 tai 0,3 ± 0,7 ng/ml.

5 Tämä AG-EE 623 ZW:n yllättävästi nopeampi verensokerin alenemisen alkaminen AG-EE 388 ZW:hen verrattuna on diabeetikolle erityisen edullista, koska nopeasta alkamisesta on seurauksena sairauden optimaalinen kontrolli.

10 AG-EE 388 ZW:n antoon verrattuna AG-EE 623 ZW:n annon yllättävä etu on siis, että vältetään organismin tarpeettoman korkeat ja pitkäkestoiset ainerasi-tukset, niillä on suuri merkitys pitkäaikaishoidossa kuten diabetes mellituksen hoidossa.

15 Ihmistutkimuksista ilmenee, että uudella (S)-enantiomeerillä, ts. (S)(+)-2- etoksi-4-[N-[1-(2-piperidinofenyyli)-3-metyyli-1-butyyli]aminokarbonyylimetyyli]-bentsoehapolla on verensokeria alentavan vaikutuksen kantajana yllättävästi ja suhteellisen pitkän vaikutuksenkestonsa johdosta ennustettavissa olemattoman nopean verestä poistumisen seurauksena AG-EE 388 ZW:hen verrattuna 20 ylivoimaiset ominaisuudet, jotka ylittävät suuresti enantiomeerin "normaalin" edun sen rasemaattiin, ts. annoksen puolituksen etuun verrattuna.

: Keksinnön kohteena on siis uusi (S)(+)-2-etoksi-4-[N-[1-(2-piperidinofenyyli)-3- metyyli-1 -butyylijaminokarbonyylimetyylijbentsoehappo tai (S)(+)-2-etoksi-4-25 [N-[1 -(2-piperidinofenyyli)-3-metyyli-1 -butyyli]aminokarbonyylimetyyli]bentsoe- happo, joka on optisesti oleellisen puhdasta, jolla on esimerkiksi optinen puhtaus vähintään ee = 95 %, edullisesti 98-100 %, sen fysiologisesti hyväksyttä-vät suolat epäorgaanisten tai orgaanisten happojen tai emästen kanssa, tätä yhdistettä tai sen fysiologisesti hyväksyttäviä suoloja sisältävät lääkkeet ja 30 menetelmä niiden valmistamiseksi.

Uusi yhdiste saadaan keksinnön mukaisesti seuraavilla menetelmillä: 106027 4 a) Kaavan I mukainen (S)-amiini

CH, CHS

^CH

ch2

5 I^H

c-nh2 oe0 * 10 saatetaan reagoimaan yleisen kaavan II mukaisen karboksyylihapon kanssa -“"O" - oc2h5 jossa 15 Won karboksiryhmä tai suojaryhmällä suojattu karboksiryhmä, tai sen mahdollisesti reaktioseoksessa valmistettujen reaktiokykyisten johdannaisten kanssa, ja poistamalla vaadittaessa seuraavaksi suojaryhmän.

20 Yleisen kaavan II mukaisen yhdisteen reaktiokykyisinä johdannaisina tulevat kyseeseen esimerkiksi sen esterit kuten metyyli-, etyyli- tai bentsyyliesteri, sen tioesterit kuten metyyltio- tai etyylitioesteri, sen halogenidit kuten happokloridi, : sen anhydridit tai imidatsolidit.

25 Reaktio suoritetaan tarkoituksenmukaisesti liuottimessa kuten metyleenikloridi, kloroformi, hiilitetrakloridi, eetteri, tetrahydrofuraani, dioksaani, bentseeni, tolueeni, asetonitriili tai dimetyyliformamidi, mahdollisesti happoa aktivoivan * aineen tai vettä poistavan aineen läsnä ollessa, esimerkiksi kloorimuurahais-happoetyyliesterin, kloorimuurahaishappoisobutyyliesterin, tionyylikloridin, 30 fosforitrikloridin, fosforipentoksidin, Ν,Ν'-disykloheksyylikarbodi-imidin, N,N'-disykloheksyylikarbodi-imidi/N-hydroksisukkinimidin, N.N'-karbonyylidi-imidat-solin tai Ν,Ν'-tionyylidi-imidatsolin tai trif enyy I if osf i i ni/h i i I itetrakl or id i n, tai aminoryhmää aktivoivan aineen, esimerkiksi fosforitrikloridin läsnä ollessa, ja 106027 5 mahdollisesti epäorgaanisen emäksen kuten natriumkarbonaatin tai tertiääri-sen orgaanisen emäksen kuten trietyyliamiinin tai pyridiinin läsnä ollessa, jotka voivat toimia samanaikaisesti liuottimina, lämpötiloissa välillä -25 ja 250°C, edullisesti kuitenkin lämpötiloissa välillä -10°C ja käytetyn liuottimen kiehumis-5 piste. Reaktio voidaan suorittaa myös ilman liuotinta, lisäksi voidaan reaktion aikana muodostunut vesi erottaa atseotrooppisella tislauksella, esimerkiksi kuumentamalla tolueenin kanssa vedenerottajalla, tai lisäämällä kuivausainetta kuten magnesiumsulfaattia tai molekyyliseuloja.

10 Vaadittaessa suoritetaan suojaryhmän seuraava lohkaisu edullisesti hydrolyyt-tisesti, tarkoituksenmukaisesti joko hapon kuten suolahapon, rikkihapon, fosfo-rihapon, trifluorietikkahapon tai trikloorietikkahapon läsnä ollessa tai emäksen kuten natriumhydroksidin tai kalsiumhydroksidin läsnä ollessa sopivassa liuot-timessa kuten vesi, metanoli, metanoli/vesi, etanoli, etanoli/vesi, vesi/isopro-15 panoli tai vesi/dioksaani lämpötiloissa välillä -10 ja 120°C, esimerkiksi lämpötiloissa välillä huoneenlämpötila ja reaktioseoksen kiehumispiste.

Suojaryhmänä käytetty tert-butyyliryhmä voidaan lohkaista myös termisesti mahdollisesti inertissä liuottimessa kuten metyleenikloridi, kloroformi, bentsee-20 ni, tolueeni, tetrahydrofuraani, dioksaani tai jääetikka ja edullisesti vahvojen happojen kuten trifluorietikkahapon, bromivedyn, p-tolueenisulfonihapon, rikkihapon, fosforihapon tai polyfosforihapon läsnä ollessa.

«

Lisäksi voidaan suojaryhmänä käytetty bentsyyliryhmä lohkaista myös hydro-25 genolyyttisesti hydrauskatalysaattorin kuten Pd/C:n läsnä ollessa sopivassa liuottimessa kuten metanoli, etanoli, etanoli/vesi, jääetikka, etyyliasetaatti, dioksaani tai dimetyyliformamidi.

b) Lohkaistaan yleisen kaavan III mukainen (S)-yhdiste 106027 6 ch3 ch3 < /

?H

CH> H

^^^CH-NH.CO-CH2-/^\-a (!!!)

Qq jossa A on hydrolyysillä, termolyysi tai hydrogenolyysillä karboksiryhmäksi muutetta-10 vissa oleva karboksyylihappojohdannainen.

Hydrolysoituvina ryhminä tulevat kyseeseen esimerkiksi karboksiryhmän funktionaaliset johdannaiset kuten sen substituoimattomat tai substituoidut amidit, esterit, tioesterit, ortoesterit, iminoeetterit, amidiinit tai anhydridit, nitriiliryhmä, 15 tetratsolyyliryhmä, mahdollisesti substituoitu 1,3-oksatsol-2-yyli- tai 1,3-oksat-solin-2-yyliryhmä ja termolyyttisesti lohkaistavina ryhminä esimerkiksi esterit tertiääristen alkoholien kanssa, esimerkiksi tert-butyyliesteri, ja 20 hydrogenolyyttisesti lohkaistavina ryhminä esimerkiksi aralkyyliryhmät, esimerkiksi bentsyyliryhmä.

Hydrolyysi suoritetaan tarkoituksenmukaisesti joko hapon kuten suolahapon, 25 rikkihapon, fosforihapon, trifluorietikkahapon tai trikloorietikkahapon läsnä ollessa tai emäksen kuten natriumhydroksidin tai kalsiumhydroksidin läsnä ollessa sopivassa liuottimessa kuten vesi, vesi/metanoli, etanoli, vesi/etanoli, vesi/isopropanoli tai vesi/dioksaani lämpötiloissa välillä -10 ja 120°C, esimerkiksi lämpötiloissa välillä huoneenlämpötila ja reaktioseoksen kiehumispiste.

Jos A yleisen kaavan III mukaisessa yhdisteessä on nitriili- tai aminokarbonyy-liryhmä, niin nämä ryhmät voidaan muuttaa karboksiryhmäksi 100-%:isella fosforihapolla lämpötiloissa välillä 100 ja 180°C, edullisesti lämpötiloissa välillä 30 106027 7 120 ja 160°C, tai myös nitriitillä, esimerkiksi natriumnitriitillä, hapon kuten rikkihapon läsnä ollessa, jolloin näitä käytetään tarkoituksenmukaisesti samanaikaisesti liuottimena, lämpötiloissa välillä 0 ja 50°C.

5 Jos A yleisen kaavan III mukaisessa yhdisteessä on esimerkiksi tert-butyyli-oksikarbonyyliryhmä, niin tert-butyyliryhmä voidaan lohkaista myös termisesti mahdollisesti inertissä liuottimessa kuten metyleenikloridi, kloroformi, bentsee-ni, tolueeni, tetrahydrofuraani, dioksaani tai jääetikka ja edullisesti vahvan hapon kuten trifluorietikkahapon, bromivedyn, p-tolueenisulfonihapon, rikki-10 hapon, fosforihapon tai polyfosforihapon läsnä ollessa lämpötiloissa välillä Oja 100°C, edullisesti lämpötiloissa välillä 20°C ja käytetyn liuottimen kiehumispiste.

Jos A yleisen kaavan III mukaisessa yhdisteessä on esimerkiksi bentsyylioksi-15 karbonyyliryhmä, niin bentsyyliryhmä voidaan myös lohkaista hydrogenolyytti-sesti hydrauskatalysaattorin kuten Pd/C:n läsnä ollessa sopivassa liuottimessa kuten metanoli, etanoli, metanoli/vesi, etanoli/vesi, jääetikka, etyyliasetaatti, dioksaani tai dimetyyliformamidi edullisesti lämpötiloissa välillä Oja 50°C, esimerkiksi huoneenlämpötilassa ja vetypaineessa 1 - 5 bar (100 - 500 kPa).

20 c) Yleisen kaavan IV mukainen (S)-yhdiste CH3 ch3 \ /

CH

25 ^**2 ^ C^NH-CO-CH2—V \—Vf (IV) a0 30 jossa W on karboksiryhmä tai alkoksikarbonyyliryhmä, jossa on yhteensä 2-5 hiili-atomia, jolloin alkoksiryhmän alkyyliosa voi olla substituoitu fenyyliryhmällä, 106027 8 saatetaan reagoimaan yleisen kaavan x mukaisen yhdisteen kanssa

Z - CH2 - CH3 V

jossa 5 Z on nukleofiilisesti vaihdettavissa oleva ryhmä kuten halogeeniatomi, sulfo-nyylioksiryhmä tai myös yhdessä viereisen vetyatomin kanssa diatsoryhmä ja suoritetaan vaadittaessa seuraavaksi hydrolyysi tai hydrogenolyysi.

Reaktio suoritetaan tarkoituksenmukaisesti vastaavalla halogenidilla, sulfoni-10 happoesterillä tai rikkihappodiesterillä, esimerkiksi etyylibromidilla, etyylijodi-dilla, dietyylisulfaatilla, p-tolueenisulfonihappoetyyliesterillä tai metaanisulfoni-happoetyyliesterillä, tai diatsoetaanilla, mahdollisesti emäksen kuten natrium-hydridin, kaliumkarbonaatin, natriumhydroksidin, kalium-tert-butylaatin tai trietyyliamiinin läsnä ollessa edullisesti sopivassa liuottimessa kuten asetoni, 15 dietyylieetteri, tetrahydrofuraani, dioksaani, pyridiini tai dimetyyliformamidi lämpötiloissa välillä Oja 100°C, edullisesti lämpötiloissa välillä 20 ja 50°C.

Jos W yleisen kaavan IV mukaisessa yhdisteessä on karboksiryhmä, niin tämä voidaan muuttaa vastaavaksi esteriyhdisteeksi.

20

Vaadittaessa suoritetaan seuraava hydrolyysi joko hapon kuten suolahapon, rikkihapon, fosforihapon, trifluorietikkahapon tai trikloorietikkahapon läsnä * ollessa tai emäksen kuten natriumhydroksidin tai kalsiumhydroksidin läsnä ollessa sopivassa liuottimessa kuten vesi, metanoli, metanoli/vesi, etanoli, eta-25 noli/vesi, vesi/isopropanoli tai vesi/dioksaani lämpötiloissa välillä -10 ja 120°C, esimerkiksi lämpötiloissa välillä huoneenlämpötila ja reaktioseoksen kiehumispiste, tai seuraava hydrogenolyysi suoritetaan hydrauskatalysaattorin kuten Pd/C läsnä 30 ollessa sopivassa liuottimessa kuten metanoli, etanoli, etanoli/vesi, jääetikka, etyyliasetaatti, dioksaani tai dimetyyliformamidi vetypaineessa 1-10 bar (0,1 -1 MPa).

1CCC27 9 d) Pelkistetään enantioselektiivisesti yleisen kaavan VI mukainen yhdiste αγ - CO - ch2 $ \-w \=/ (VI) ,-- OC^ o jossa W on karboksiryhmä tai alkoksikarbonyyliryhmä, jossa on yhteensä 2-5 hiili-atomia, jolloin alkoksiryhmän alkyyliosa voi olla substituoitu fenyyliryhmällä, ja Y on ryhmä, jolla on kaava 10 ^CH3 Cu CH,\ ^CH3 CH 3\ u 3XCH^

H\ /\CH ^-°H\ / I

C ch3 ch3-^ NC ch

Il II I

-C-NH-, -C-NH- tai - C = NH - 15 ja vaadittaessa hydrolysoidaan seuraavaksi.

Pelkistys suoritetaan edullisesti vedyllä sopivan kiraalisen hydrauskatalysaat-torin läsnä ollessa sopivassa liuottimessa kuten metanoli, etanoli, isopropanoli, etyyliasetaatti, dioksaani, tetrahydrofuraani, metanoli/tetrahydrofuraani, meta-20 noli/metyleenikloridi, etanoli/metyleenikloridi tai isopropanoli/metyleenikloridi lämpötiloissa välillä Oja 100°C, edullisesti kuitenkin lämpötiloissa'välillä 20 ja 50°C, ja vetypaineessa välillä 1 ja 1 000 bar (0,1 -100 MPa), edullisesti välillä 5 ja 100 bar (0,5 ja 10 MPa), ja tarkoituksenmukaisesti lisäten 0,1-5 %, edullisesti 0,3 - 1 % titaani(IV)tetraisopropylaattia, ja edullisesti ilman hapen pois 25 sulkien. Edullisesti pelkistys suoritetaan yleisen kaavan VI mukaisen yhdisteen (Z)-muodolla.

Kiraalisina hydrauskatalysaattoreina tulevat kyseeseen vastaavat metalliligan-dikompleksit kuten Ru(OCO-CH3)2[(S)-BINAP], Ru2CI4[(S)-BINAP]2 x N(C2H5)3, 30 Rh[(S)-BINAP-NBD]CI04 tai Rh[(-)-NORPHOS-COD]BF4.

Katalyyttisessä hydrauksessa voi samanaikaisesti pelkistyä mukana bentsyyli-oksikarbonyyliryhmä ja muuttua karboksiryhmäksi.

106027 10

Vaadittaessa seuraava hydrolyysi suoritetaan joko hapon kuten suolahapon, rikkihapon, fosforihapon, trifluorietikkahapon tai trikloorietikkahapon läsnäollessa tai emäksen kuten natriumhydroksidin tai kalsiumhydroksidin läsnäollessa sopivassa liuottimessa kuten vesi, metanoli, metanoli/vesi, etanoli, etano-5 li/vesi, vesi/isopropanoli tai vesi/dioksaani lämpötiloissa välillä -10 ja 120°C, esimerkiksi lämpötiloissa välillä huoneenlämpötila ja reaktioseoksen kiehumispiste.

e) Hapetetaan yleisen kaavan VII mukainen (S)-yhdiste 10 CH, CH, \ /

CH

CH2 l^H /r\ ac - NH - CO - CH,—v VW" O*11) \=< /-v OCjHj

O

jossa W" on hapettamalla karboksiryhmäksi muutettavissa oleva ryhmä.

20 Tällaisena hapetettavissa olevana ryhmänä tulee kyseeseen esimerkiksi for-myyliryhmä ja sen asetaalit, hydroksimetyyliryhmä ja sen eetterit, substituoima- * ton tai substituoitu asyyliryhmä kuten asetyyli-, klooriasetyyli-, propionyyli-, malonihappo-(1)-yyliryhmä tai maloniesteri-(1)-yyliryhmä.

25

Reaktio suoritetaan hapetusreagenssilla sopivassa liuottimessa kuten vesi, jääetikka, metyleenikloridi, dioksaani tai glykolidimetyylieetteri lämpötiloissa ' välillä Oja 100°C, tarkoituksenmukaisesti kuitenkin lämpötiloissa välillä 20°C

ja 50°C. Reaktio suoritetaan kuitenkin edullisesti hopeaoksidi/natriumhydrok-30 sidilla, mangaanidioksidi/asetonilla tai mangaanidioksidi/metyleenikloridilla, vetyperoksidi/natriumhydroksidilla, bromilla tai kloorilla natrium- tai kaliumhyd-roksidissa, kromitrioksidi/pyridiinissä tai pyridiniumkloorikromaatilla.

106027 11 f) Erotetaan seosta, joka koostuu mielivaltaisesta määrästä yleisen kaavan Vili mukaista (S)-enantiomeeriä ch, ch3 \ /

CH

5 I

ch2 C^NH - CO - CH2—V W (W)

fY

mielivaltaisesta määrästä yleisen kaavan IX mukaista (R)-enantiomeeriä CH, CH, \ /

CH

CH, 15 L'H /r~\ C - NH - CO - CH2—(' W (,x> 0Co ^ 20 joissa W on karboksiryhmä tai alkoksikarbonyyliryhmä, jossa on yhteensä 2-5 hiili-atomia, jolloin alkoksiryhmän alkyyliosa voi olla substituoitu fenyyliryhmällä, edullisesti 50/50-seosta, niiden diastereomeeristen additiotuotteiden, kompleksien tai suolojen kautta ja vaadittaessa seuraavalla hydrolyysillä tai hydroge-25 nolyysillä.

Erotus suoritetaan edullisesti pylväs-tai HPLC:llä muodostamalla diastereo-meeriset additiotuotteet tai kompleksit kiraalisella faasilla.

30 Vaadittaessa seuraava hydrolyysi suoritetaan joko hapon kuten suolahapon, rikkihapon, fosforihapon, trifluorietikkahapon tai trikloorietikkahapon läsnä ollessa tai emäksen kuten natriumhydroksidin tai kalsiumhydroksidin läsnä ollessa sopivassa liuottimessa kuten vesi, metanoli, metanoli/vesi, etanoli, 106027 12 etanoli/vesi, vesi/isopropanoli tai vesi/dioksaani lämpötiloissa välillä -10 ja 120°C, esimerkiksi lämpötiloissa välillä huoneenlämpötila ja reaktioseoksen kiehumispiste, tai seuraava hydrogenolyysi suoritetaan hydrauskatalysaattorin kuten Pd/C:n läsnä ollessa sopivassa liuottimessa kuten metanoli, etanoli, 5 etanoli/vesi, jääetikka, etyyliasetaatti, dioksaani tai dimetyyliformamidi vetypai-neessa 1 -10 bar (0,1 -1 MPa).

Näin keksinnön mukaisesti saatu (S)-enantiomeeri, jonka optinen puhtaus on tarkoituksenmukaisesti vähintään 90 %, voidaan muuttaa jaekiteytyksellä 10 (S)-enantiomeeriksi, jonka optinen puhtaus on vähintään 95 %, edullisesti 98-100%.

Sama pätee keksinnön mukaisille kaavojen III, IV ja VII mukaisille (S)-yhdis-teille, erityisesti niiden estereille.

15 Näin keksinnön mukaisesti saatu (S)-enantiomeeri voidaan muuttaa suoloik-seen, erityisesti farmaseuttiseen käyttöön fysiologisesti hyväksyttäviksi suo-loikseen epäorgaanisten tai orgaanisten happojen tai myös emästen kanssa. Happoina tulevat tällöin kyseeseen esimerkiksi suolahappo, bromivetyhappo, 20 rikkihappo, fosforihappo, maitohappo, sitruunahappo, viinihappo, meripihka-happo, maleiinihappo tai fumaarihappo, ja emäksinä natriumhydroksidi, kal-siumhydroksidi, kalsiumhydroksidi, sykloheksyyliamiini, etanoliamiini, dietano-Namiini, trietanoliamiini, etyleenidiamiini tai lysiini.

25 Lähtöaineina käytetyt kaavojen I - IX mukaiset yhdisteet ovat osaksi kirjallisuuden tuntemia tai saadaan sinänsä tunnetuilla menetelmillä.

* Kaavan I mukainen (S)-amiini voidaan saada vastaavasta amiinista 30 rasemaatin lohkaisulla, esimerkiksi diastereomeeristen suolojen fraktiokiteytyk-sellä sopivilla optisesti aktiivisilla hapoilla, edullisesti N-asetyyli-L-glutamiini-hapolla, ja vaadittaessa uudelleenkiteyttämisellä samoin kuin seuraavalla suolojen hajottamisella, 106027 13 pylväs- tai HPLC-kromatografialla kiraalisilla faaseilla, mahdollisesti asyylijoh-dannaisen muodossa, tai muodostamalla diastereomeerisiä yhdisteitä, joiden erotus ja seuraava 5 lohkaisu voidaan saada.

Lisäksi kaavan I mukainen (S)-amiini voidaan saada korkealla enantiomeeri-puhtaudella .

10 enantioselektiivisellä pelkistyksellä vedyn avulla sopivan kiraalisen hydrauska-talysaattorin läsnä ollessa lähtien vastaavasta N-asyyliketimiinistä tai enami-dista, tarkoituksenmukaisesti lisäten 0,1 - 5 % titaanitetraisopropylaattia, ja mahdollisesti seuraavalla asyyliryhmän kuten formyyli- tai asetyyliryhmän lohkaisulla, 15 vastaavan typpiatomiin kiraalisesti substituoidun ketimiinin tai hydratsiinin diastereoselektiivisellä pelkistyksellä vedyn avulla sopivan hydrauskatalysaat-torin läsnä ollessa, tarkoituksenmukaisesti lisäten 0,1 - 5 % titaanitetraisopropylaattia, ja mahdollisesti kiraalisen apuryhmän, esimerkiksi (S)-l-fenetyyliryh-20 män seuraavalla lohkaisulla katalyyttisellä hydrogenolyysillä, tai sopivan metalliorgaanisen yhdisteen, edullisesti Grignard- tai litiumyhdisteen diastereoselektiivisellä additiolla vastaavaan, typpiatomiin kiraalisesti substitu-oituun aldimiiniin, mahdollisesti lisäten 0,1 - 10 % titaanitetraisopropylaattia, 25 seuraavalla hydrolyysillä ja mahdollisesti saadun diastereomeerin erotuksella ja kiraalisen apuryhmän, esimerkiksi (R)-1-fenetyyliryhmän seuraavalla lohkaisulla katalyyttisellä hydrogenolyysillä, « ja vaadittaessa suolanmuodostuksella sopivien optisesti aktiivisten happojen 30 kanssa, edullisesti N-asetyyli-L-glutamiinihapon, ja vaadittaessa yksin- tai moninkertaisella uudelleenkiteytyksellä samoin kuin suolan seuraavalla hajotuksella.

106027 14 Lähtöaineina käytetyt yleisten kaavojen III, IV ja VII mukaiset yhdisteet saadaan kaavan I mukaisen (S)-amiinin reaktiolla sopivan karboksyylihapon tai sen reaktiivisten johdannaisten kanssa ja käytetyn suojaryhmän mahdollisella seuraavalla lohkaisulla.

5 Lähtöaineina käytetty yleisen kaavan VI mukainen yhdiste saadaan asyloimal-la vastaavan iminoyhdisteen tai sen metalliorgaanisen kompleksin vastaavalla karboksyylihapolla tai sen reaktiivisilla johdannaisilla, lohkaisten mahdollisesti seuraavaksi esteriryhmän.

10

Uusi (S)-enantiomeeri on käytännöllisesti katsoen myrkytön; esimerkiksi annettaessa kulloinkin 5 koiraspuoliselle ja 5 naaraspuoliselle rotalle kerralla 1000 mg/kg p.o. (suspensio 1-%:isessa metyyliselluloosassa) ei yksikään eläin kuollut 14 päivän tarkkailuajanjakson aikana.

15

Keksinnön mukaisesti valmistettu (S)-enantiomeeri (AG-EE 623 ZW) ja sen fysiologisesti hyväksyttävät suolat soveltuvat farmakologisten ja farmakoki-neettisten ominaisuuksiensa vuoksi diabetes mellituksen hoitoon. Tätä varten AG-EE 623 ZW tai sen fysiologisesti hyväksyttävät suolat, mahdollisesti yhdis-20 telmänä muiden vaikuttavien aineiden kanssa, voidaan työstää tavallisiin ga-leenisiin valmistemuotoihin kuten tabletit, rakeet, kapselit, jauheet, lääkepuik-kilot, suspensiot tai injektionliuokset. Yksittäisannos aikuisella on tällöin " 0,1 - 20 mg, edullisesti 0,25 - 5 mg, erityisesti kuitenkin 0,25, 0,5, 1,0, 1,5, 2,0, 2,5, 3,0 tai 5,0 mg, kerran, kahdesti tai kolmesti päivässä.

25

Keksinnön edelleen eräänä kohteena on kaavan I mukainen uusi (S)-amiini, joka on arvokas välituote uuden (S)-enantiomeerin valmistuksessa, samoin kuin sen additiosuolat epäorgaanisten tai orgaanisten happojen kanssa.

30 Seuraavat esimerkit kuvaavat keksintöä lähemmin:

Esimerkki A

106027 15 (SV1-(2-piDeridino-fenvvliV3-metvvli-1-butwliamiini 5 Sekoitettuun liuokseen, jossa on 122 g (0,495 mol) raseemista 1 -(2-piperi-dinofenyyli)-3-metyyli-1-butyyliamiinia 1000 ml:ssa asetonia, lisätään 93,7 g (0,495 mol) N-asetyyli-L-glutamiinihappoa. Kuumennetaan höyryhauteella palautusjäähdyttimellä ja lisätään erissä metanolia (yhteensä noin 80 ml), kunnes saadaan kirkas liuos. Kun on jäähdytetty ja annettu seistä huoneen-10 lämpötilassa yön yli, saadut kiteet suodatetaan imupullolla, nämä pestään kahdesti kulloinkin 200 ml:lla kylmää asetonia -15°C:ssa, ja nämä kuivataan. Saatu tuote [98,9 g; sulamispiste: 163 - 166°C; [a]|° = + 0,286° (c = 1 meta-nolissa)] kiteytetään 1000 ml:sta asetonia lisäten 200 ml metanolia, jolloin (S)-1 -(2-piperidino-fenyyli)-3-metyyli-1 -butyyliamiini saadaan N-asetyyli-L-15 glutamiinihappoadditiosuolana.

Saanto: 65,1 g (60,4 % teoreettisesta),

Sulamispiste: 168 -171 °C Laskettu: C 63,42 H 8,56 N 9,65 Saatu: 63,64 8,86 9,60 20 [cc]d° = + 0,357° (c = 1 metanolissa)

Vapaa amiini saadaan öljynä vapauttamalla esimerkiksi natriumhydroksidi- tai ammoniakkiliuoksella, uuttamalla esimerkiksi tolueenilla, eetterillä, etyyliase taatilla tai metyleenikloridilla samoin kuin kuivaamalla, suodattamalla ja kon-25 sentroimalla uutteen tyhjössä.

Amiinin fSI-konfiauraatio osoitettiin seuraavalla tavalla: amiinin reaktio (S')-1-fenetyyli-isosyanaatin kanssa eetterissä vastaavaksi ureajohdannaiseksi [sulamispiste: 183 - 184°C; [αβ0 = + 2,25° (c = 1 metanolissa)], kiteiden kasvatus 30 etanoli/vedestä (8/1) ja seuraava röntgenrakenneanalyysi, joka antaa tulokseksi (S,S')-konfiguraation ureajohdannaiselle ja täten (S)-konfiguraation käytetylle amiinille.

106027 16

Enantiomeeripuhtaus määritettiin seuraavalla tavalla: 1. Amiininäytteen asetylointi 1,3 ekvivalentilla asetanhydridiä jääetikassa 20°C:ssa yön yli.

2. N-asetyylijohdannaisen tutkiminen (sulamispiste: 128 - 132°C) HPLC:n 5 avulla yhtiön Baker kiraalifaasi-HPLC-kolonnilla, jossa (S)-N-(3,5-dinitrobent-soyyli)-2-fenyyliglysiini on liitetty kovalenttisesti aminopropyylisilikageeliin (hiukkaskoko: 5 pm, pallomainen, 60 A hiukoskoko; kolonnin pituus: 250 mm 4,6-mm sisähalkaisijalla; eluentti: n-heksaani/isopropanoli (100/5); eluointi-nopeus: 2 ml/min; lämpötila: 20°C; UV-detektio 254 nm:llä.

10 Saatiin: huippu 1(R): huippu 2(S) = 0,75 %: 99,25 %, ee (enantiomeric excess) = 98,5 % (S).

(S)-amiini voidaan muuttaa eetteripitoisella kloorivetyliuoksella dihydrokloridi-hydraatikseen.

15 Sulamispiste: 135 - 145°C (hajoaa)

Laskettu (x H20): C 56,99 H 8,97 N 8,31 Cl 21,02 Saatu: 56,85 8,93 8,38 21,25 [a]o° = 26,1 ° (c = 1 metanolissa)

20 Esimerkki B

N-asetvvli-N-i1-(2-piperidino-fenvvli)-3-metvvli-1 -buten-1-vvlil-amiini • c

Liuokseen, jossa on 20 g (81,8 mmol) juuri valmistettua isobutyyli-(2-piperi-25 dino-fenyyli)-ketimiiniä 200 ml:ssa asetonitriiliä, lisätään huoneenlämpötilassa 4,7 ml (81,8 mmol) jääetikkaa, 25,7 g (98,2 mmol) trifenyylifosfiinia, 34,2 ml (245 mmol) trietyyliamiinia ja 7,9 ml (81,8 mmol) hiiiitetrakloridia ja sekoitetaan 18 tuntia huoneenlämpötilassa. Seuraavaksi haihdutetaan tyhjössä ja jaetaan etyyliasetaatin ja veden välillä. Orgaaninen uute kuivataan ja suodatetaan, ja 30 se haihdutetaan tyhjössä. Haihdutusjäännös puhdistetaan pylväskromatogra-fialla silikageelillä (tolueeni/etyyliasetaatti = 10/1), jolloin ensin eluoituu (E)-muoto ja sitten (Z)-muoto.

106027 17 (EVmuoto:

Saanto: 6,1 g (26 % teoreettisesta),

Sulamispiste: 135 - 137°C (etyyliasetaatti/petrolieetteri)

Laskettu: C 75,48 H 9,15 N 9,78 5 Saatu: 75,47 9,35 9,70 (Z)-muoto:

Saanto: 3,1 g (13 % teoreettisesta),

Sulamispiste: 140 - 143°C (etyyliasetaatti) 10 Laskettu: C 75,48 H 9,15 N 9,78

Saatu: 75,56 9,30 9,79

Esimerkki C

15 N-asetvvli-N-i1 -(2-Diperidino-fenwlh-3-metvvli-1 -buten-1 -vvlil-amiini

Sekoitettuun liuokseen, jossa on 44 g (0,18 mol) juurivalmistettua isobutyyli-(2-piperidino-fenyyli)-ketimiiniä 440 ml:ssa tolueenia, lisätään tipoittain sisälämpötilassa 0°C 17 ml (0,18 mol) asetanhydridiä. Sekoitetaan 3 tunnin ajan 20 0°C:ssa ja 15 tuntia huoneenlämpötilassa, haihdutetaan sitten tyhjössä, liuotetaan haihdutusjäännös etyyliasetaattiin ja ravistellaan useita kertoja nathumve-tykarbonaatin vesiliuoksen kanssa. Orgaaninen faasi kuivataan, se suodate-- taan ja haihdutetaan tyhjössä. Haihdutusjäännös puhdistetaan pylväskromato- grafialla silikageelillä (tolueeni/etyyliasetaatti = 5/1), jolloin ensin eluoituu (E)-25 muoto ja sitten (Z)-muoto.

(El-muoto: .· Saanto: 3,0 g (5,8 % teoreettisesta), 30 (ZVmuoto:

Saanto: 17,8 g (34,5 % teoreettisesta),

Sulamispiste: 139 -141 °C (etyyliasetaatti) 106027 18

Laskettu: C 75,48 H 9,15 N 9,78 Saatu: 75,68 8,99 9,86

Esimerkki D 5 N-asetvvli-N-i(SM-(2-piperidino-fenvvli)-3-metvyli-1-butvvin-amiini 0,57 g (1,99 mmol) (Z)-N-asetyyli-N-[1-(2-piperidino-fenyyli)-3-metyyli-1-buten-1-yyli]-amiinia, jonka sulamispiste on 139 -141 °C, liuotetaan 10 ml:aan kaasun-10 poistokäsiteltyyn liuotinseokseen (metanoli/metyleenikloridi = 5/1) argonilma-kehässä ja lisätään liuokseen, jossa on 16,8 mg (1 mol-%) NOYORI-katalysaat-toria Ru(0-asetyyli)2[(S)-BINAP] (valmistettu [Ru(COD)CI2]n:stä (S)-BINAP:n [= (S)-2,2'-bis(difenyylifosfino)-1,1 '-naftyyli], trietyyliamiinin ja natriumasetaatin kanssa), ja 3,4 mg (0,5 mol-%) titaanitetraisopropylaattia 10 ml:ssa kaasunpois-15 tokäsiteltyä liuotinseosta (metanoli/metyleenikloridi = 5/1). Reaktioseos siirretään autoklaaviin, joka on tyhjennetty tyhjössä 10'2 mbar (1 Pa). Huuhdotaan useita kertoja vedyllä paineessa 400 kPa ja hydrataan seuraavaksi 30°C:ssa ja 10 MPa:ssa vedyn vastaanoton loppumiseen (170 tuntia). Seuraavaksi ruskeanpunainen liuos haihdutetaan tyhjössä, haihdutusjäännöstä keitetään 30 ml:n 20 kanssa n-heksaania palautusjäähdyttimellä ja suodatetaan kuumana liukenemattomasta aineesta. Suodos haihdutettiin, jolloin tapahtui kiteytyminen.

Saanto: 0,31 g (54 % teoreettisesta),

Sulamispiste: 127 -131 °C

Enantiomeeripuhtaus. ee = 82 % (S) [HPLC-menetelmä: katso esimerkkiä A], 25 Liukenemattomasta materiaalista, joka saatiin keitettäessä 30 ml:lla n-heksaania, voidaan saada n-heksaanin kanssa edelleen keittämällä, suodattamalla ja kiteyttämällä heksaaniliuoksesta 14 % raseemista N-asetyyliamiinia, jonka sulamispiste on 154 -156°C.

Esimerkki E

19 106027 (SV1-(2-piperidino-fenwlfl-3-metwli-1-butwliamiini 5 1 g (3,47 mmol) N-asetyyli-N-[(S)-1-(2-piperidino-fenyyli)-3-metyyli-1-butyyli]- amiinia (sulamispiste: 128 - 133°C; ee = 99,4 %] kuumennetaan 10 ml:ssa konsentroitua suolahappoa 5,5 tuntia palautusjäähdyttimellä, jäähdytetään ja kaadetaan konsentroidun ammoniakin ja jään seokseen. Uutetaan kahdesti etyyliasetaatilla, pestään orgaaninen faasi vedellä, kuivataan ja suodatetaan ja 10 haihdutetaan tyhjössä.

Saanto: 0,84 g (98,8 % teoreettisesta) öljymäistä amiinia.

Asetyloidaan takaisin 0,42 ml:lla (1,3 ekvivalenttia) asetanhydridiä 8,4 ml:ssa jääetikkaa yön yli huoneenlämpötilassa, haihdutetaan tyhjössä, jaetaan haih-15 dutusjäännös etyyliasetaatin ja natriumbikarbonaatin kylläisen vesiliuoksen välillä ja kuivataan, suodatetaan ja haihdutetaan orgaaninen uute tyhjössä, jolloin saadaan 0,83 g (84,7 % teoreettisesta) N-asetyyli-N-[(S)-1-(2-piperidino-fenyyli)-3-metyyli-1-butyyli]-amiinia (sulamispiste: 130 - 132°C; ee = 99,4 %).

20 Esimerkki F

2-etoksi-4-rN-( 1 -(2-piperidino-fenwli)-3-metvvli-1 -buten-1 -vvli Vaminokarbo-nvvlimetvvlil-bentsoehappoetvvliesteri 25 Valmistettu isobutyyli-(2-piperidino-fenyyli)-ketimiinistä ja 3-etoksi-4-etoksikar-bonyylifenyylietikkahaposta yhdenmukaisesti esimerkin B kanssa. Puhdistetaan pylväskromatografialla silikageelillä (tolueeni/ asetoni = 10/1), jolloin eluoituu ensin (E)-muoto ja sitten (Z)-muoto.

30 (E1-muoto:

Saanto: 4 % teoreettisesta,

Sulamispiste: 101 - 103°C

106027 20

Laskettu: C 72,77 H 8,00 N 5,85

Saatu: 72,74 7,78 5,86 (ZVmuoto: 5 Saanto: 28,1 % teoreettisesta,

Sulamispiste: 124 - 127°C (petrolieetteri/tolueeni = 5/1)

Laskettu: C 72,77 H 8,00 N 5,85

Saatu: . 72,90 7,86 5,83

10 Esimerkki G

N-f(S'1-1-fenetvvlfl-N-i(SH-(2-piperidino-fenvvli)-3-metvvli-1-butvvin-amiini 17 g (49 mmol) N-[(S')-1-fenetyyli]-isobutyyli-(2-piperidino-fenyyli)-ketimiiniä, 15 kiehumispiste 150 - 155°C/0,3 torr (40 Pa) [valmistettu isobutyyli-(2-piperidino- fenyyli)-ketonista ja (S')-1-fenetyyli-amiinista (yhtiö Fluka, ee = 99,6 %) toluee-nissa + trietyyliamiinissa lisäämällä tipoittain liuosta, jossa on titaanitetraklori-dia tolueenissa] liuotetaan 170 ml:aan vedetöntä etanolia. Lisätään 1,7 g ti-taanitetraisopropylaattia ja 8 g Raney-nikkeliä ja hydrataan 50°C:ssa ja vety-20 paineessa 200 bar (20 MPa). Lisätään 20 tunnin kuluttua vielä 8 g Raney- nikkeliä ja hydrataan samoissa olosuhteissa vielä 52 tuntia. Suodatetaan seliit-tikerroksella G3-sintterillä katalysaattorista ja suodos haihdutetaan tyhjössä. Saanto: 13,1 g (76,6 % teoreettisesta),

Kiehumispiste: 152°C/0,2 torr (27 Pa) 25 Laskettu: C 82,23 H 9,78 N 7,99

Saatu: 82,00 10,03 7,74 [cc]d° = 55,3° (c = 1,1 metanolissa)

Diastereomeeripuhtaus määritetään HPLC:llä Lichrosorb RP18-HPLC-kolonnil-30 la yhtiöstä E. Merck (Saksa); kolonnin pituus: 250 mm sisähalkaisijalla 4 mm; hiukkaskoko; 7 pm. Eluentti: metanoli/dioksaani/0,1-% natriumasetaatin vesiliuos, säädetty etikkahapolla pH-arvoon = 4,05 (135/60/5); Lämpötila: 23°C; UV-detektio 254 nm:llä.

106027 21

Saatu: huippu 1 (S,S'): huippu 2(R,S') = 98,4 %: 1,4 %, de (diastereomeric excess) = 97,0 % (S,S').

Esimerkki H 5 f S VI -(2-piperidino-fenwl0-3-metwli-1-butwliamiini 12,5 g (36 mmol) N-[(S’)-1-fenetyyli]-N-[(S)-1-(2-piperidino-fenyyli)-3-metyyli-1-butyyli]-amiinia, jossa on de = 97,0 % (S,S'), liuotetaan 125 ml:aan vettä ja 10 3,6 ml:aan konsentroitua suolahappoa. Lisätään 1,3 g Pd/C:tä (10-%) ja hydra- taan 50°C:ssa ja vetypaineessa 5 bar (500 kPa). Vedyn vastaanoton jälkeen (10 tuntia) katalysaattori suodatetaan pois seliittikerroksella. Suodos säädetään konsentroidulla ammoniakilla jäätä lisäten alkaliseen pH-arvoon ja uutetaan etyyliasetaatilla. Orgaaninen uute kuivataan ja suodatetaan ja haihdute-15 taan tyhjössä.

Saanto : 6 ,4 g (72,1 % teoreettisesta).

Kiehumispiste: 115 - 117°C/0,4 torr (53 Pa)

Enantiomeeripuhtaus: ee = 93,5 % (S) [HPLC-menetelmä (edeltävän asetyloin-nin jälkeen): katso esimerkkiä A], 20

Esimerkki I

: N-[fR^-1-fenetvvin-N-i(S1-1-(2-piperidino-fenvvlh-3-metvvli-1 -butvvlil-amiini 25 Hauteessa 60°C:ssa sekoitettuun liuokseen, jossa on 27,4 mmol (4 ekvivalenttia) isobutyylimagnesiumbromidia 22 ml:ssa vedetöntä tetrahydrofuraania, lisätään tipoittain liuos, jossa on 2 g (6,84 mmol) N-[(R')-1-fenetyyli]-(2-piperi-dino-bentsaldimiinia) [valmistettu ekvimolaarisista määristä 2-piperidino-bents-aldehydiä ja (R')-1 -fenetyyliamiinia antamalla seistä huoneenlämpötilassa yön 30 yli ja kuivaamalla seuraavaksi natriumsulfaatilla eetteriliuoksessa] 20 ml:ssa vedetöntä tetrahydrofuraania. 18 tunnin kuluttua hauteen lämpötila kohotetaan 80°C:seen ja lisätään vielä 2 ekvivalenttia isobutyylimagnesiumbromidia 11 ml:ssa tetrahydrofuraania. Kulloinkin 12 tunnin 80°C:ssa sekoituksen jäi- 106027 22 keen lisätään vielä kerran kulloinkin 2 ekvivalenttia isobutyylimagnesiumbromi-diliuosta. Noin 90 tunnin kuluttua 80°C:ssa jäähdytetään, sekoitetaan ylimäärä konsentroitua suolahappoa ja haihdutetaan vesisuihkun tyhjöllä kuiviin. Haih-dutusjäännös liuotetaan veteen ja säädetään konsentroidulla ammoniakilla 5 alkaliseen pH-arvoon. Uutetaan eetterillä, kuivataan orgaaninen uute natrium-sulfaatilla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä. Haihdutusjäännös puhdistetaan pylväskromatografialla silikageelillä (tolueeni/asetoni = 95/5).

Saanto: 0,20 g (8,3 % teoreettisesta),

Sulamispiste: < 20°C

10 Diastereomeeripuhtaus määritetään kuten esimerkissä G HPLC:n avulla.

Saatu: huippu 1(R,R'): huippu 2(S,R') = 4,4 % : 95,6 %, de (diastereomeric excess) = 91,2 % (S,R’).

Yhdenmukaisella seoksella, jossa on 2,0 g Schiffin emästä ja yhteensä 6 ekvi-15 valenttia isobutyylimagnesiumbromidia tolueeni/tetrahydrofuraanissa (4/1) ja lisäämällä 5 % titaani(IV)tetraisopropylaattia ja kuumentamalla 60 tuntia 100°C:ssa lasipommissa saatiin 5-% saanto, jolla oli de = 97,6 % (S,R')·

Esimerkki K

20 IS1-1 -i2-pipehdino-fenvvli)-3-metvvli-1 -butvvliamiini

Liuosta, jossa on 0,15 g (0,428 mmol) N-[(R’)-1-fenetyyli]-N-[(S)-1-(2-piperi-dino-fenyyli)-3-metyyli-1 -butyylij-amiinia (de = 91,2 %), 0,47 ml (0,47 mmol) 25 1 N suolahappoa ja 1,5 ml vettä, hydrataan kun läsnä on 20 mg Pd/C:tä (10-%) 5 tuntia 50°C:ssa ja vetypaineessa 3,4 bar (340 kPa). Suodatetaan piimaalla, säädetään konsentroidulla ammoniakilla alkaliseen pH-arvoon ja uutetaan < *. etyyliasetaatilla. Uute kuivataan, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä.

Saanto: 0,066 g (62,8 % teoreettisesta),

30 Sulamispiste: < 20°C

Enantiomeeripuhtaus: ee = 87,6 % (S) [HPLC-menetelmä (edeltävän asetyloin-nin jälkeen): katso esimerkkiä A].

Esimerkki 1 23 106027 /S)-2-etoksi-4-fN-( 1 -/2-piperidino-fenwli)-3-metvvli-1 -butvvlil-aminokarbonvvli-metwlil-bentsoehappoetwliesteri 5

Liuokseen, jossa on 0,47 g (1,91 mmol) (S)-3-metyyli-1-(2-piperidino-fenyyli)- 1-butyyliamiinia (ee = 98,5 %) 5 ml:ssa vedetöntä asetonitriiliä, lisätään peräjälkeen 0,48 g (1,91 mmol) 3-etoksi-4-etoksikarbonyylifenyylietikkahappoa, 0,60 g (2,29 mmol) trifenyylifosfiinia, 0,80 ml (5,73 mmol) trietyyliamiinia ja 10 0,18 ml (1,91 mmol) hiilitetrakloridia ja sekoitetaan 20 tuntia huoneenlämpöti lassa. Seuraavaksi haihdutetaan tyhjössä ja jaetaan etyyliasetaatin ja veden välillä. Orgaaninen uute kuivataan ja suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä. Haihdutusjäännös puhdistetaan pylväskromatografialla silikageelillä (tolueeni/-etyyliasetaatti = 10/1).

15 Saanto: 0,71 g (77,3 % teoreettisesta),

Sulamispiste: 110 - 112°C

Laskettu: C 72,47 H 8,39 N 5,83

Saatu: 72,29 8,42 5,80 20 Enantiomeeripuhtaus määritetään HPLC:llä kiraalifaasi-HPLC-kolonnilla yhtiöstä Baker, johon on liitetty kovalenttisesti (S)-N-3,5-dinitrobentsoyylileusiinia aminopropyyli/silikageelille (hiukkaskoko: 5 pm, pallomaisia, 60 A huokoskoko; :' kolonnin pituus: 250 mm sisähaikaisijalla 4,6 mm; eluentti: n-heksaani/tetra- hydrofuraani/metyleenikloridi/etanoli (90/10/1/1); eluoimisnopeus: 2 ml/min; 25 Lämpötila: 20°C; UV-detektio 242 nm:llä).

Saatu: huippu 1(R): huippu 2(S) = 0,75 %: 99,25 %, ee = 98,5 % (S).

106027

Esimerkki 2 24 (S)-2-etoksi-4-[N-(1-(2-piperidino-fenyyli)-3-metyyli-1-butyyli)-aminokarbonyyli- metyyli]-bentsoehappoetyyliesteri 5

Liuokseen, jossa on 2,71 g (11 mmol) vedetöntä (S)-3-metyyli-1-(2-piperidino-fenyyli)-1-butyyliamiinia (ee = 98,5 %) 30 ml:ssa absoluuttista tolueenia, lisätään huoneenlämpötilassa 2,77 g (11 mmol) 3-etoksi-4-etoksikarbonyylifenyy-lietikkahappoa ja sekoitetaan, kunnes saadaan liuos. Sitten lisätään 2,38 g 10 (11,55 mmol) Ν,Ν'-disykloheksyylikarbodi-imidiä ja sekoitetaan huoneenläm pötilassa. 24 tunnin kuluttua lisätään edelleen 0,54 g (2,14 mmol) 3-etoksi-4-etoksikarbonyylifenyylietikkahappoa ja 0,48 g (2,33 mmol) Ν,Ν'-disyklohek-syylikarbodi-imidiä ja sekoitetaan yön yli. Seuraavaksi jäähdytetään sisälämpötilaan +5°C ja suodatetaan pois imupullolla muodostunut sakka, joka pes-15 tään 5 ml:lla tolueenia. Yhdistetyt tolueenisuodokset konsentroidaan tyhjössä tilavuuteen noin 10 ml. Näin saatu liuos kuumennetaan höyryhauteella ja siihen sekoitetaan erissä petroiieetteriä (yhteensä 55 ml) pysyvään sameuteen. Jäähdytetään jäässä, jolloin tapahtuu kiteytyminen. Suodatetaan imupullolla ja kuivataan 75°C:ssa/4 torr (0,53 kPa). Saatu tuote (4,57 g; sulamispiste 20 111 -112°C; ee = 98,9 %) suspendoidaan 50 ml:aan petroiieetteriä. Kuumen netaan höyryhauteella ja lisätään erissä niin paljon tolueenia (yhteensä 8 ml), kunnes saadaan liuos. Sitten jäähdytetään jäässä ja suodatetaan imupullolla ” kiteinen tuote, joka kuivataan 75°C:ssa/4 torr (0,53 kPa).

Saanto: 3,93 g (74,3 % teoreettisesta),

25 Sulamispiste: 117 -118°C

Laskettu: C 72,47 H 8,39 N 5,83

Saatu: 72,44 8,43 5,93 « [a]o° = +9,4° (c = 1,01 metanolissa)

Enantiomeeripuhtaus: ee = 99,9 % [HPLC-menetelmä: katso esimerkkiä 1] 30 25 106027

Esimerkki 3 (S)-2-etoksi-4-fN-(1-(2-piperidino-fenvvliV3-metvvii-1-butvvliVaminokarbonvvli- metvvlil-bentsoehappo 5

Seosta, jossa on 3,79 g (7,88 mmol) (S)-2-etoksi-4-[N-(1-(2-piperidino-fenyyli)- 3-metyyli-1 -butyyli)-aminokarbonyylimetyyli]-bentsoehappoetyyliesteriä (ee = 99,9 %) 37 ml:ssa etanolia, sekoitetaan 60°C:ssa hauteessa ja lisätään 10 ml (10 mmol) 1 N natriumhydroksidia. 4 tunnin 60°C:ssa sekoittamisen jälkeen 10 lisätään lämpimässä 10 ml (10 mmol) 1 N suolahappoa ja annetaan jäähtyä huoneenlämpötilaan. Siemenkiteen siirrostuksen ja yön yli seisomisen jälkeen jäähdytetään vielä 1 tunti jäässä sekoittaen. Kiteinen tuote suodatetaan pois imupullolla ja pestään kahdesti kulloinkin 5 ml:lla vettä. Seuraavaksi kuivataan 75°C:ssa, kunnes seuraavaksi kuivataan 100°C:ssa/4 torr (0,53 kPa) tyhjökaa-15 pissa fosforipentoksidilla.

Saanto: 3,13 g (87,7 % teoreettisesta),

Sulamispiste: 130 -131 °C (korkealla sulava muoto)

Laskettu: C 71,64 H 8,02 N 6,19

Saatu: 71,48 7,87 6,39 20 [ajo0 = +7,45° (c = 1,06 metanolissa)

Enantiomeeriouhtaus määritetään HPLC:llä kiraalifaasi-HPLC-kolonnilla yh-tiöstä ChromTech (Ruotsi) AGP(a1-happo glykoproteiini)faasilla; sisähalkaisi-ja: 4,0 mm; pituus: 100 mm; hiukkashalkaisija: 5 pm. Lämpötila: 20°C; eluentti: 25 0,1 % KH2P04-vesiliuos (=A) + 20 % asetonitriiliä (=B), gradientin kohoaminen 4 min sisällä 40 %;iin (B):tä; eluointinopeus: 1 ml/min; UV-detektio 240 nm:llä. Viipymäaika (S)-enantiomeeri: 2,7 min; Viipymäaika (R)-enantiomeeri: 4,1 min. :· Saatu: (S):(R) = 99,85 %:0,15 %, ee = 99,7 % (S).

30 Uudelleenkiteytettäessä näyte etanoli/vedestä (2/1) sulamispiste ei muutu. Kuumennettaessa näytettä petrolieetteri/tolueenissa (5/3), suodattamalla liukenemattoman osuuden (sulamispiste: 130-131 °C) ja jäähdyttämällä suodok-

• I

106027 26 sen nopeasti saadaan otsikkoyhdisteen alhaisessa lämpötilassa sulava muoto, jonka sulamispiste on 99-101 °C.

Laskettu: C 71,64 H 8,02 N 6,19

Saatu: 71,66 7,97 6,44 5

Alhaisessa lämpötilassa sulava muoto ja korkeassa lämpötilassa sulava muoto eroavat toisistaan IR-KBr-spektriensä suhteen, mutteivät kuitenkaan IR-liuos-spektriensä (metyleenikloridi) suhteen.

10 Jos alhaisessa lämpötilassa sulavan muodon näyte lämmitetään sulamispisteensä yläpuolelle, niin havaitaan toinen sulamispiste 127 - 130°C:ssa.

Jos alhaisessa lämpötilassa sulavan muodon näytettä uudelleenkiteytetään etanoli/vedestä (2/1), niin saadaan korkeassa lämpötilassa sulavaa muotoa.

15

Korkeassa lämpötilassa sulavaa muotoa ja alhaisessa lämpötilassa sulavaa muotoa tutkittiin "Differential Scanning Calorimetry (DSC)"-menetelmällä [laite Mettler, TA-300-järjestelmä; mittaussolu: DSC 20; Fa. Mettler, CH-8306 Greifensee, Sveitsi], jolloin saatiin seuraava tulos: 20 • ( ♦ « * « 106027 27

Yhdiste Kuumennusnopeus Kuumennusnopeus esimerkki_10 °K/min_3 °K/min_

Korkeassa yhtenäinen sulamishuippu yhtenäinen sulamishuippu lämpötilassa sulamispisteessä 133°C; sulamispisteessä 132°C; 5 sulava muoto sulamisentalpia: 100 J/α sulamisentalpia: 99.1 J/a

Alhaisessa 1. huippu 57°C:ssa 1. huippu 54°C:ssa lämpötilassa (hyvin heikko) (hyvin heikko; endoterminen) 10 sulava muoto 2. huippu 78°C:ssa 2. endoterminen huippu (heikko) 104°C:ssa, sulamispiste 102°C, sulamisentalpia: 52 J/g 3. endoterminen huippu 3. eksoterminen peruslinjan 15 107°C; eteneminen kiteyttämällä sulamisentalpia: 55 J/g 104°C:ssa sulatettua ainetta 4. endoterminen 4. endoterminen huippu

huippu 132°C:ssa 131°C:ssa, sulamispiste: 130°C

20 sulamisentalpia: 25 J/g sulamisentalpia: 52 J/g • : ' Esimerkki 4 25 (S)-2-etoksi-4-[N-(1-(2-piperidino-fenyyli)-3-metyyli-1-butyyli)-aminokarbonyyli-metyylij-bentsoehappo-etyyliesteri 0,79 g (1,65 mmol) (Z)-2-etoksi-4-[N-(1 -(2-piperidino-fenyyli)-3-metyyli-1 -buten-1 -yyli)-aminokarbonyylimetyyli]-bentsoehappo-etyyliesteria, jonka sula-30 mispiste on 124 - 127°C, liuotetaan 10 ml:aan kaasunpoistokäsiteltyä liuotin-seosta (metanoli/metyleenikloridi = 5/1) argonilmakehässä ja lisätään liuokseen, jossa on 17 mg NOYORI-katalysaattoria Ru(0-asetyyli)2[(S)-BINAP] : · ; (valmistettu [Ru(COD)CI2]n:stä (S)-BINAP:n [= (S)-2,2'-bis(difenyylifosfino)-1,1'- 106027 28 binaftyyli], trietyyliamiinin ja natriumasetaatin kanssa) ja 3 mg titaanitetraiso-propylaattia 10 ml:ssa kaasunpoistokäsiteltyä liuotinseosta (metanoli/metylee-nikloridi = 5/1). Reaktioseos siirretään tyhjössä 10'2 mbaarissa (1 Pa) kaasun-poistokäsiteltyyn autoklaaviin. Huuhdotaan viidesti vedyllä paineessa 5 bar 5 (500 kPa) ja hydrataan seuraavaksi 30°C:ssa ja 100 baarissa (10 MPa) vedyn vastaanoton päättymiseen (154 tuntia). Ruskeanpunainen liuos konsentroidaan tyhjössä, haihdutusjäännös liuotetaan 80 mhaan eetteriä, suodatetaan liukenemattomat ruskeat höytäleet aktiivihiilellä, ja näin saatu kirkas vaaleankeltainen suodos konsentroidaan tyhjössä. Haihdutusjäännöstä (0,60 g) keite-10 tään 60 ml:ssa n-heksaania palautusjäähdyttimellä ja suodatetaan liukenemattomasta aineesta kuumana. Suodos saa seistä yön yli huoneenlämpötilassa. Siitä suodatetaan tällöin erottuneet kiteet.

Saanto: 0,45 g (56,7 % teoreettisesta),

Sulamispiste: 131 - 133°C (120°C:sta sintrautumisen jälkeen) 15 Enantiomeeripuhtaus: ee = 39 % (S) [HPLC-menetelmä: katso esimerkkiä 1].

Esimerkki 5 (S)-2-etoksi-4-rN-(1-(2-piperidino-fenvvli)-3-metvvli-1 -butvvli)-aminokarbonvvli-20 metvvin-bentsoehappo-etvvliesteri

Liuokseen, jossa on 0,68 g (1,15 mmol) (S)-2-hydroksi-4-[N-(1-(2-piperidino-: fenyyli)-3-metyyli-1-butyyli)aminokarbonyylimetyyli]-bentsoehappo-etyyliesteriä [sulamispiste: 125 - 126°C; 25 [a]§° = +12,87° (c = 1,01 metanolissa)] 5 ml:ssa vedetöntä dimetyyliformami- dia, lisätään 0,05 g (1,15 mmol) natriumhydridiä (55-% öljyssä) ja sekoitetaan 0,5 tuntia huoneenlämpötilassa.

« • - .

Sitten lisätään tipoittain liuos, jossa on 0,12 ml (1,15 mmol) etyylijodidia 30 2,5 mhssa vedetöntä dimetyyliformamidia, ja sekoitetaan 5 tuntia huoneenläm pötilassa. Haihdutetaan tyhjössä, jaetaan laimean natriumhydroksidin ja kloroformin välillä, orgaaninen uute kuivataan, suodatetaan ja konsentroidaan tyh- « 106027 29 jössä. Haihdutusjäännös puhdistetaan pylväskromatografialla silikageelillä (tolueeni/etyyliasetaatti = 10/1).

Saanto: 0,48 g (67 % teoreettisesta),

Sulamispiste: 110-112°C 5 Laskettu: C 72,47 H 8,39 N 5,83

Saatu: 72,61 8,54 5,97

Enantiomeeripuhtaus: ee = 98,5 % (S) [HPLC-menetelmä: katso esimerkkiä 1], Esimerkki 6 10 (S)-2-etoksi-4-[N-n-f2-DiDeridino-fenvvliV3-metwli-1-butvvliVaminokarbonvvli-metwl Π-bentsoehappo-etwl iesteri

Valmistettu (S)-2-hydroksi-4-[N-(1 -(2-piperidino-fenyyli)-3-metyyli-1 -butyyli)-15 aminokarbonyylimetyyli]-bentsoehaposta esimerkin 5 mukaisesti käyttämällä 2 ekvivalenttia natriumhydridiä ja 2 ekvivalenttia etyylijodidia.

Saanto: 42 % teoreettisesta,

Sulamispiste: 110 -112°C Laskettu: C 72,47 H 8,39 N 5,83 20 Saatu: 72,61 8,54 5,99

Enantiomeeripuhtaus: ee = 98,3 % (S) [HPLC-menetelmä: katso esimerkkiä 1], • :

Esimerkki 7 25 (SV+1-2-etoksi-4-rN-M-(2-piperidino-fenvvli1-3-metvvli-1-butwlh-aminokarbo-nvvlimetvvli]-bentsoehappo-etwliesteri ia (R1M-2-etoksi-4-fN-( 1 -i2-piperidino-fenvvlh-3-metvvli-1 -butvvlil-aminokarbo-nvylimetwlil-bentsoehappo-etwliesteri 30 920 mg (±)-2-etoksi-4-[N-(1 -(2-piperidino-fenyyli)-3-metyyli-1 -butyyli)-amino- karbonyylimetyylij-bentsoehappo-etyyliesteriä erotetaan 10-mg yksittäisinä annoksina preparatiivisella kiraalifaasi-HPLC-kolonnilla yhtiöstä Baker, johon : * on kiinnitetty kovalenttisesti (S)-N-3,5-dinitrobentsoyylileusiinia aminopropyy- 106027 30 li/silikageelille (hiukkaskoko: 40 μιτι; kolonnin pituus: 250 mm sisähalkaisijalla 20 mm; eluentti: n-heksaani/tetrahydrofuraani/etanoli/metyleenikloridi (180/20/3/2); eluointinopeus: 21,25 ml/min; Lämpötila: 27°C; UV-detektio 285 nm:llä), jolloin ensin eluoituu (R)(-)-enantiomeeri (huippu 1) ja sitten 5 (S)(+)-enantiomeeri (huippu 2).

Vastaavasti leikatuista ja kerätyistä fraktioista saadaan tyhjössä haihduttamisen jälkeen:

Fraktio "huippu 1" (R): 423 mg (raaka),

Fraktio "huippu 2" (S): 325 mg (raaka).

10

Epäpuhtauksien (mm. tetrahydrofuraanin sisältämän 2,6-di-tert-butyyIi-4-metyyli-fenolistabilisaattorin) erottamiseksi molemmat fraktiot puhdistetaan kulloinkin pylväskromatografisesti silikageelillä (tolueeni/asetoni = 10/1).

15 (RK-l-enantiomeeri:

Saanto: 234,5 mg (51 % teoreettisesta),

Sulamispiste: 122 - 124°C (petrolieetteri + asetoni)

Laskettu: C 72,47 H 8,39 N 5,83 Saatu: 72,40 8,18 5,71 20 [α]ρ° = 8,3° (c = 1 metanolissa) fSVenantiomeeri: •.

; Saanto: 131,2 mg (28,5 % teoreettisesta),

Sulamispiste: 122 - 124°C (petrolieetteri/asetoni = 8/1) 25 Laskettu: C 72,47 H 8,39 N 5,83

Saatu: 72,28 8,44 5,70 [oc]d° = + 8,3° (c = 1 metanolissa) • - s

Enantiomeerien erottamiseksi on sopiva myös Chiralcel OD-kolonni yhtiöstä 30 Daicel. Kolonnilla, jonka pituus on 250 mm ja sisähalkaisija 4,6 mm (eluentti: absoluuttinen etanoli/(n-heksaani + 0,2 % dietyyliamiini) = 5/95; Lämpötila: 40°C; UV-detektio 245 nm:ssä) (R)-enantiomeeri eluoituu 6,8 min kuluttua ja j · (S)-enantiomeeri 8,5 min kuluttua.

31 106027

Esimerkki 8 (R1M-2-etoksi-4-fN-n-f2-DiDeridino-fenwli)-3-metwli-1 -butwlfl-aminokarbo-nvvlimetwlil-bentsoehappo x 0.4 Η·Ό 5

Valmistettu 150 mg:sta (0,312 mmol) (R)(-)-2-etoksi-4-[N-(1-(2-piperidino-fenyyli)-3-metyyli-1-butyyli)-aminokarbonyylimetyyli]-bentsoehappo-etyylieste-ristä [sulamispiste: 122 - 124°C; [a]|° = 8,3° (c = 1 metanolissa)] saippuoimalla 1 N natriumhydroksidilla etanolissa esimerkin 3 mukaisesti.

10 Saanto: 95,8 mg (66,7 % teoreettisesta),

Sulamispiste: 103 - 105°C (tolueeni/petrolieetteri)

Laskettu (x 0,4 H20): C 70,51 H 8,01 N 6,09

Saatu: 70,88 7,79 5,81

Moolihuippu M+: Laskettu: 452 15 Saatu: 452 [α]£° = 6,5° (c = 1 metanolissa)

Enantiomeeripuhtaus: ee = 99,7 % (R) [HPLC-menetelmä: katso esimerkkiä 3]. 20 Esimerkki 9 (SV+V2-etoksi-4-fN-( 1 -(2-piperidino-fenwli1-3-metvvli-1 -butvvli Vaminokarbo- • r * ‘ nvvlimetvvin-bentsoehappo x 0.4 H.0 25 Valmistettu 89 mg:sta (0,198 mmol) (S)(+)-2-etoksi-4-[N-(1-(2-piperidino- fenyy I i )-3-metyy I i-2-butyyli)-aminokarbonyy limetyy I i]-bentsoehappo-etyy I ieste-riä [sulamispiste: 122-124 °C; [αβ0 +8,3° (c = 1 metanolissa)] saippuoimalla 1 N natriumhydroksidilla etanolissa esimerkin 3 mukaisesti.

Saanto: 44,5 mg (48,8 % teoreettisesta), 30 Sulamispiste: 102 - 103°C (tolueeni/petrolieetteri)

Laskettu: (x 0,4 H20) C 70,51 H 8,01 Saatu: 70,80 8,06 [oc]d° = + 6,7° (c = 1 metanolissa) 106027 32

Enantiomeeripuhtaus: ee = 99,6 % (S) [HPLC-menetelmä: katso esimerkkiä 3]. Esimerkki 10 5 (S)-2-etoksi-4-rN-( 1 -(2-piperidino-fenvvin-3-metvvli-1 -butvvin-aminokarbonvvli- metwlil-bentsoehappo

Hydrataan 0,26 g (0,47 mmol) (S)-2-etoksi-4-[N-(1-(2-piperidino-fenyyli)-3-metyyli-1-butyyli)-aminokarbonyylimetyyli]-bentsoehappo-bentsyyliesteriä 10 (sulamispiste: 91 - 92°C; [α]£° = +9,5°; c = 1,05 metanolissa) 10 ml:ssa etanolia 0,12 g:lla Pd/C:ttä (10-%) 50°C:ssa ja vetypaineessa 5 bar (500 kPa). 5 tunnin kuluttua katalysaattori suodatetaan silikageelillä ja haihdutetaan tyhjössä. Haihdutusjäännös kiteytetään etanoli/vedestä (2/1).

Saanto: 0, 15 g (70 % teoreettisesta),

15 Sulamispiste: 130 -131 °C

Laskettu: C 71,64 H 8,02 N 6,19

Saatu: 71,76 8,12 6,05

Enantiomeeripuhtaus: ee = 99,6 % [HPLC-menetelmä: katso esimerkkiä 3], 20 Esimerkki 11 (SI^-etoksM-rN-f 1 -(2-piperidino-fenvvli)-3-metvvli-1 -butvvIO-aminokarbonvvIi- • ( : metvvl ij-bentsoehappo 25 Kuumennetaan 102 mg (0,20 mmol) (S)-2-etoksi-4-[N-(1-(2-piperidino-fenyyli)-3-metyyli-1-butyyli)-aminokarbonyylimetyyli]-bentsoehappo-tert-butyyliesteriä (sulamispiste: 122 - 123°C; [αβ0 = +8,7°; c = 1 metanolissa) 5 ml:ssa bent-seeniä yhdessä muutamien kiteiden kanssa p-tolueenisulfonihappohydraattia puoli päivää palautusjäähdyttimellä. Tällöin on ohutlevykromatogrammin mu-30 kaan RF-arvon ja massaspektrin mukaan muodostunut haluttu tuote. Sulamispiste: 129 -131 °C Moolihuippu M+: Laskettu: 452 • Saatu: 452 33

Esimerkki 12 106027 fS1-2-etoksi-4-fN-(1-(2-piperidino-fenvvli1-3-metvvli-1-butwliVaminokarbonvvli- metwlil-bentsoehappo 5

Sekoitetaan 200 mg (0,395 mmol) (S)-2-etoksi-4-[N-(1-(2-piperidino-fenyyli)-3-metyyli-1-butyyli)-aminokarbonyylimetyyli]-bentsoehappo-tert-butyyliesteriä (sulamispiste: 122 - 123°C; [a]o° = +8,7°; c = 1 metanolissa) 2 ml:ssa mety-leenikloridia yhdessä 0,45 g:n kanssa (3,95 mmol) trifluorietikkahappoa yön yli 10 huoneenlämpötilassa. Haihdutetaan tyhjössä ja jaetaan haihdutusjäännös natriumvetykarbonaatin vesiliuoksen ja etyyliasetaatin välillä. Orgaaninen uute kuivataan, suodatetaan ja konsentroidaan tyhjössä. Haihdutusjäännös kiteytetään etanoli/vedestä (2/1).

Saanto: 115 mg (64,7 % teoreettisesta),

15 Sulamispiste: 126 - 128°C

Laskettu: C 71,64 H 8,02 N 6,19

Saatu: 71,39 7,91 6,06 [°0d° = +6,97° (c = 0,975 metanolissa)

Enantiomeeripuhtaus: ee = 99,8 % [HPLC-menetelmä: katso esimerkkiä 3].

20

Esimerkki 13 • - : Tabletit, joissa on 0.25 ma AG-EE 623 ZW:tä 25 Tabletti sisältää: 0,250 mg vaikuttavaa ainetta 0,125 mg N-metyyliglukamiinia 0,038 mg polyvinyylipyrrolidonia 30 0,075 mg polyoksietyleenipolyoksipropyleenipolymeeriä 0,150 mg mikrokiteistä selluloosaa I « 106027 34

Valmistus:

Vaikuttava aine ja apuaineet liuotetaan veteen 90°C:ssa tai mikrokiteinen selluloosasuspendoidaan, ja dispersio haihdutetaan tyhjössä. Kuivattu massa 5 seulotaan 1-mm silmukkakoolla.

Vaikuttavan aineen granulaattiin sekoitetaan tablettia kohden seuraavat ainesosat: 10 24,862 mg natriumkarboksimetyylitärkkelystä 24.000 mg mikrokiteistä selluloosaa 0.500 ma magnesiumstearaattia 50.000 mg 15 Tästä seoksesta puristetaan pyöreitä, kaksitasoisia tabletteja, joiden paino on 50 mg ja halkaisija 5 mm.

Esimerkki 14 20 Tabletit, joissa on 0.5 ma AG-EE 623 ZW:tä Tabletti sisältää: • < * 0,500 mg vaikuttavaa ainetta 0,250 mg N-metyyliglukamiinia 25 0,075 mg polyvinyylipyrrolidonia 0,150 mg polyoksietyleenipolyoksipropyleenipolymeeriä 0,300 mg mikrokiteistä selluloosaa

Valmistus:

Vaikuttava aine ja apuaineet liuotetaan veteen 90°C:ssa tai mikrokiteinen selluloosasuspendoidaan, ja dispersio haihdutetaan tyhjössä. Kuivattu massa seulotaan 1-mm silmukkakoolla.

30 106027 35

Vaikuttavan aineen granulaattiin sekoitetaan tablettia kohden seuraavat ainesosat: 24,225 mg natriumkarboksimetyylitärkkelystä 5 24,000 mg mikrokiteistä selluloosaa 0,500 mg magnesiumstearaattia 50,000 mg Tästä seoksesta puristetaan pyöreitä, kaksitasoisia tabletteja, joiden paino on 10 50 mg ja halkaisija 5 mm.

Esimerkki 15

Tabletit, joissa on 1.0 ma AG-EE 623 ZW:tä 15

Tabletti sisältää: 1,00 mg vaikuttavaa ainetta 0,50 mg N-metyyliglukamiinia 0,15 mg polyvinyylipyrrolidonia 20 0,03 mg polyoksietyleenipolyoksipropyleenipolymeeriä 0,60 mg mikrokiteistä selluloosaa «< : Valmistus: 25 Vaikuttava aine ja apuaineet liuotetaan veteen 90°C:ssa tai mikrokiteinen selluloosasuspendoidaan, ja dispersio haihdutetaan tyhjössä. Kuivattu massa seulotaan 1-mm silmukkakoolla.

• ·

Vaikuttavan aineen granulaattiin sekoitetaan tablettia kohden seuraavat ai-30 nesosat: » « 106027 36 23,22 mg natriumkarboksimetyylitärkkelystä 24.00 mg mikrokiteistä selluloosaa 0.50 mg magnesiumstearaattia 50.00 mg 5 Tästä seoksesta puristetaan pyöreitä, kaksitasoisia tabletteja, joiden paino on 50 mg ja halkaisija 5 mm.

Esimerkki 16 10

Tabletit, joissa on 1.5 ma AG-EE 623 ZW:tä

Tabletti sisältää: 1,500 mg vaikuttava aine 15 0,750 mg N-metyyliglukamiinia 0,225 mg polyvinyylipyrrolidonia 0,045 mg polyoksietyleenipolyoksipropyleenipolymeeriä 0,900 mg mikrokiteistä selluloosaa 20 Valmistus:

Vaikuttava aine ja apuaineet liuotetaan veteen 90°C:ssa tai mikrokiteinen

• I

: selluloosasuspendoidaan, ja dispersio haihdutetaan tyhjössä. Kuivattu massa seulotaan 1-mm silmukkakoolla.

25

Vaikuttavan aineen granulaattiin sekoitetaan tablettia kohden seuraavat ainesosat: « « 23,080 mg natriumkarboksimetyylitärkkelystä 30 23,000 mg mikrokiteistä selluloosaa 0,500 ma magnesiumstearaattia 50,000 mg I $ 106027 37 Tästä seoksesta puristetaan pyöreitä, kaksitasoisia tabletteja, joiden paino on 50 mg ja halkaisija 5 mm.

Esimerkki 17 5

Tabletit, joissa on 2.0 ma AG-EE 623 ZW:tä

Tabletti sisältää: 2.00 mg vaikuttavaa ainetta 10 1,00 mg L-lysiiniä 1.00 mg polyvinyylipyrrolidonia 1.00 mg polyoksietyleenipolyoksipropyleenipolymeeriä 4.00 mg mikrokiteistä selluloosaa 15 Valmistus:

Ainesosat liuotetaan veteen, jonka lämpötila on 90°C tai mikrokiteinen selluloosa suspendoidaan, ja dispersio käsitellään suihkukuivaimessa. Seuraavaksi lisätään tablettia kohden seuraavat ainesosat: 20 20,35 mg mikrokiteistä selluloosaa 20.00 mg natriumkarboksimetyylitärkkelystä •.

* 0.65 ma magnesiumstearaattia 50.00 mg 25 Tästä seoksesta puristetaan pyöreitä, kaksoiskuperia tabletteja, joiden paino on 50 mg ja halkaisija 5 mm ja päällystetään hydroksipropyylimetyylisellu-loosalla maun peittävästi.

• I

38 106027

Esimerkki 18

Tabletit, joissa on 2,5 mg AG-EE 623 ZW:tä 5 Tabletti sisältää: 2,50 mg vaikuttavaa ainetta 1.25 mg L-lysiiniä 1.25 mg polyvinyylipyrrolidonia 1.25 mg polyoksietyleenipolyoksipropyleenipolymeeriä 10 4,10 mg mikrokiteistä selluloosaa

Valmistus:

Ainesosat liuotetaan veteen, jonka lämpötila on 90°C tai mikrokiteinen sellu-15 loosa suspendoidaan, ja dispersio käsitellään suihkukuivaimessa. Seuraavaksi lisätään tablettia kohden seuraavat ainesosat: 19.50 mg mikrokiteistä selluloosaa 19.50 mg natriumkarboksimetyylitärkkelystä 20 0,65 ma magnesiumstearaattia 50,00 mg Tästä seoksesta puristetaan pyöreitä, kaksoiskuperia tabletteja, joiden paino on 50 mg ja halkaisija 5 mm ja päällystetään hydroksipropyylimetyyliselluloo-25 salia maun peittävästi.

• ·

Esimerkki 19 39 106027

Tabletit, joissa on 3,0 ma AG-EE 623 ZW:tä 5 Tabletti sisältää: 3.0 mg vaikuttavaa ainetta 1.5 mg L-lysiiniä 1.5 mg polyvinyylipyrrolidonia 1.5 mg polyoksietyleenipolyoksipropyleenipolymeeriä 10

Valmistus:

Ainesosat liuotetaan veteen, jonka lämpötila on 90°C, ja liuos käsitellään suih-kukuivaimella. Seuraavaksi lisätään tablettia kohden seuraavat ainesosat: 15 21,5 mg mikrokiteistä selluloosaa 21.0 mg natriumkarboksimetyylitärkkelystä 50.0 mg 20 Tästä seoksesta puristetaan pyöreitä, kaksoiskuperia tabletteja, joiden paino on 50 mg ja halkaisija 5 mm ja päällystetään hydroksipropyylimetyyliselluloo-salla maun peittävästi.

• «

Esimerkki 20 25

Tabletit, joissa on 5 mg AG-EE 623 ZW:tä

Tabletti sisältää: 5.0 mg vaikuttavaa ainetta 30 2,5 mg L-lysiiniä 2.5 mg polyvinyylipyrrolidonia 2.5 mg polyoksietyleenipolyoksipropyleenipolymeeriä • · • «. t.

106027 40

Valmistus:

Ainesosat liuotetaan veteen, jonka lämpötila on 90°C, ja liuos jatkokäsitellään suihkukuivaimella. Seuraavaksi lisätään tablettia kohden seuraavat ainesosat: 5 19.0 mg mikrokiteistä selluloosaa 18,5 mg natriumkarboksimetyylitärkkelystä 50.0 mg 10 Tästä seoksesta puristetaan pyöreitä, kaksoiskuperia tabletteja, joiden paino on 50 mg ja halkaisija 5 mm ja päällystetään hydroksipropyylimetyyliselluloo-salla maun peittävästi.

*t « ·

Claims (15)

106027 41

1. Menetelmä fysiologisesti vaikuttavan (S)(+)-2-etoksi-4-[N-[1-(2-piperidino-fenyyli)-3-metyyli-1-butyyli]aminokarbonyylimetyyli]-bentsoehapon ja sen suo-5 lojen epäorgaanisten tai orgaanisten happojen tai emästen kanssa, jolla on kaava CH,V CH3 3\ / 3 CH CHg μ j 10 ^\J^NH-CO-CH2 —y— COOH (A) ^ OC2«5 15 valmistamiseksi, tunnettu siitä, että a) kaavan (I) mukainen (S)-amiini CH3X /Ch3 CH 20 j?H* H «') 0¾ 25 saatetaan reagoimaan yleisen kaavan (II) mukaisen karboksyylihapon kanssa ·.. HOOC-CHj—^ W (II) 30 0C2Hs jossa W on karboksiryhmä tai suojaryhmällä suojattu karboksiryhmä, • · 106027 42 tai sen mahdollisesti reaktioseoksessa valmistettujen reaktiokykyisten johdannaisten kanssa ja vaadittaessa seuraavaksi lohkaistaan käytetty suojaryhmä pois, tai 5 b) lohkaistaan yleisen kaavan (III) mukainen (S)-yhdiste CH3\ /CH3 en aJ^NH-CO-CH, —P* A *IU* 0C2HS jossa A on hydrolyysillä, termolyysillä tai hydrogenolyysillä karboksiryhmäksi muutet-15 tavissa oleva karboksyylihappojohdannainen, tai c) yleisen kaavan (V) mukainen (S)-yhdiste ChL· CH3 3\ / 3 CH 20 ^H2 H - NH - CO - CH2—P \-W <IV> :: 25 jossa W’ on karboksiryhmä tai alkoksikarbonyyliryhmä, jossa on yhteensä 2-5 hiiliatomia, jolloin alkoksiryhmän alkyyliosa voi olla substituoitu fenyyliryhmällä, • saatetaan reagoimaan yleisen kaavan (V) mukaisen yhdisteen kanssa 30 Z - CH2 - CH3 , (V) ♦ ♦ 106027 43 jossa Z on nukleofiilisesti vaihdettavissa oleva ryhmä tai myös yhdessä viereisen vetyatomin kanssa diatsoryhmä, ja vaadittaessa näin saatu yhdiste hydrolysoidaan tai hydrogenoidaan seuraavaksi, tai 5 d) pelkistetään enantioselektiivisesti yleisen kaavan (VI) mukainen yhdiste a, Y - CO - CH2 -M \-w (VI) «vt jossa W on karboksiryhmä tai alkoksikarbonyyliryhmä, jossa on yhteensä 2-5 hiiliatomia, jolloin alkoksiryhmän alkyyliosa voi olla substituoitu fenyyliryhmällä, ja 15. on ryhmä, jolla on kaava CH,s. ^CH, ^-CH3 CH3\ ^CH H. /CH ^CH H I | CHj | toi CH,

20 -C-NH-, -C-NH- -C = N- ja vaadittaessa näin saatu yhdiste hydrolysoidaan seuraavaksi tai e) hapetetaan yleisen kaavan (VII) mukainen (S)-yhdiste ΟΗ3χ ^ΟΗ3 CH CH2 1 t aJ^NH-CO-CH2 —^ Vr <VM) O _οεΛ jossa .. W” on hapettamalla karboksiryhmäksi muutettavissa oleva ryhmä, tai 44 106027 f) erotetaan seos, joka koostuu mielivaltaisesti määrästä yleisen kaavan (Vili) mukaista (S)-enantiomeeriä ^pH, CH s I ?> ^ -CO-CH2 —V y—W (Vili) *JL,Q °<=Λ 10 ja mielivaltaisesta määrästä yleisen kaavan (IX) mukaista (R)-enantiomeeriä CH3X ^pH3 CH CH2H —. ^r\J^NH-CO-CH2—U y-w (|χ)

15 LIVa Λ=< joissa W’ on karboksiryhmä tai alkoksikarbonyyliryhmä, jossa on yhteensä 2-5 hii-20 liatomia, jolloin alkoksiryhmän alkyyliosa voi olla substituoitu fenyyliryhmällä ja vaadittaessa seuraavalla hydrolyysillä tai hydrogenolyysilla, ja « *' näin saatu yhdiste muutetaan vaadittaessa uudelleenkiteyttämällä yhdisteeksi, jolla on korkeampi enantiomeeripuhtaus, jolloin etanoli/vedestä (2/1) kiteyttä-25 mällä saadaan korkeammassa lämpötilassa sulava muoto, jonka sulamispiste on 130 - 131°C, ja petrolieetteri/tolueenista (5/3) kiteyttämällä saadaan alhaisessa lämpötilassa sulava muoto, jonka sulamispiste on 99 - 101°C, ja « «... näin saatu yhdiste muutetaan suoloikseen, erityisesti fysiologisesti hyväksyttä-30 viksi suoloikseen epäorgaanisten tai orgaanisten happojen tai emästen kanssa. • · 106027 45

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan yhdiste, joka on optisesti oleellisesti puhdasta.

3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että sen optinen 5 puhtaus on vähintään ee = 95 %.

4. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että sen optinen puhtaus on vähintään ee = 98 %. 10 5. (S)-1-(2-piperidino-fenyyli)-3-metyyli-1-butyyliamiinin N-asetyyli-L-gluta- miinisuola, jonka yleiskaava (I) on CH3\ /CH3 CH

15 P1"12 H ^vJ^nh2 {l) OCq 20

6. Menetelmä valmistaa (S)-1-(2-piperidino-fenyyli)-3-metyyli-1-butyyliamiinin N-asetyyli-L-glutamiinisuolaa, tunnettu siitä, että liuotetaan raseemista 1 -(2-piperidino-fenyyli)-3-metyyli-1 -butyyliamiinia ja N-asetyyli-L-glutamiinihappoa ja (S)-1 -(2-piperidino-fenyyli)-3-metyyli-1 -butyyliamiinin saostunut suola erote-25 taan N-asetyyli-L-glutamiinihapolla ja tarpeen mukaan kiteytetään. / · 9 • v .. · • _ 4. 106027 46