ES2948561A1 - Compuestos para etiquetado fluorescente - Google Patents
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Abstract
Compuestos para etiquetado fluorescente. La presente invención se refiere a unos compuestos de estructura BODIPY con buenas propiedades para el etiquetado fluorescente específico de C-nucleófilos, así como su procedimiento de obtención que permite de manera eficiente y económica la preparación de una gran diversidad de compuestos de forma directa, rápida, y con buenos rendimientos de reacción. La aplicación de estos compuestos incluye, aunque no exclusivamente, su uso como marcadores biológicos para la tinción selectiva de células y microrganismos vivos, como sondas fluorescentes en biosensores en bioimagen de organismos vivos o los captadores de energía en células solares, o como emisores en láseres de colorante o como emisores en sistemas OLED.
Description
DESCRIPCIÓN
Compuestos para etiquetado fluorescente
La presente invención se refiere a unos compuestos de estructura BODIPY con buenas propiedades para el etiquetado fluorescente específico de C-nucleófilos, así como su procedimiento de obtención que permite de manera eficiente y económica la preparación de una gran diversidad de compuestos de forma directa, rápida, y con buenos rendimientos de reacción. La aplicación de estos compuestos incluye, aunque no exclusivamente, su uso como marcadores biológicos para la tinción selectiva de células y microrganismos vivos, como sondas fluorescentes en biosensores en bioimagen de organismos vivos o los captadores de energía en células solares, o como emisores en láseres de colorante o como emisores en sistemas OLED.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN
El desarrollo de métodos de funcionalización generales, selectivos, eficientes y altamente versátiles es actualmente uno de los principales retos en la química de los 4-bora-3a,4a-diaza-s-indacenos (BODIPYs). Aunque se han descrito metodologías que permiten llevar a cabo este tipo de transformaciones en todas las posiciones del BODIPY, la gran mayoría implican el uso de rutas en varias etapas (sustituciones en el pirrol o en el dipirrometano precursor) adaptadas individualmente a cada colorante objetivo final buscado (Clarke, R. G.; Hall, M. J. Adv. Heterocycl. Chem. 2019, 128, 181-261), con las desventajas que ello conlleva en cuanto al mayor esfuerzo sintético requerido, pérdida global de rendimiento químico y aumento de los costes económicos. Por estos motivos, hay un gran interés en el desarrollo de métodos directos de funcionalización de BODIPYs pre-formados, conocidos en general como métodos postsintéticos, que permitan introducir la nueva funcionalidad en una única y última etapa de reacción, idealmente.
En general, las estrategias de posfuncionalización de los BODIPYs (Boens, N.; Verbelen, B.; Ortiz, M. J.; Jiao, L.; Dehaen, W. Coord. Chem. Rev. 2019, 399, 213024) requieren la introducción previa de un átomo o grupo reactivo (halógeno, formilo, metilo, tioéter, o incluso hidrógeno) que facilite la funcionalización final deseada. Estos grupos reactivos pueden estar directamente unidos al esqueleto del cromóforo (al
átomo de boro o a los átomos de carbono del núcleo de boradiazaindaceno) o bien sobre posiciones periféricas, alejadas uno o más enlaces del núcleo cromofórico. Entre las prefuncionalizaciones más versátiles descritas para los BODIPYs se encuentran (ver: Boens, N.; Verbelen, B.; Ortiz, M. J.; Jiao, L.; Dehaen, W. Coord. Chem. Rev.
2019, 399, 213024): 1) la propia presencia de los átomos de flúor en el boro que permite su sustitución por C-, O- y N-sustituyentes; 2) la introducción de halógenos en el esqueleto de boradiazaindaceno, que permite llevar acabo reacciones de sustitución nucleófila aromática y/o de acoplamiento cruzado catalizadas por metales de transición; 3) la introducción de un grupo tioalquilo o un halógeno en la posición (C8) (meso), que posibilita su sustitución directa con heteronucleófilos (alcoholes, aminas, tioles) o reacciones de acoplamiento cruzado (acoplamiento de Liebeskind-Srogl); 4) los grupos metilo directamente unidos al esqueleto cromofórico, que presentan un cierto carácter ácido debido a la deslocalización electrónica del carbanión correspondiente, lo que permite su activación con bases suaves en reacciones de condensación de tipo Knoevenagel o el ataque electrófilo con reactivos de halogenación y posterior sustitución nucleófila; 5) la ausencia de sustituyentes en las posiciones C3 y C5 que posibilite la sustitución nucleófila vicaria de hidrógeno (VNS), su análoga oxidativa (ONSH) y la funcionalización C-H catalizada por metales de transición o radicalaria, que permiten a su vez la introducción directa de C- y heterosustituyentes en estas posiciones. Todos estos métodos presentan limitaciones en cuanto a la variedad de sustituyentes que se pueden introducir bajo las mismas condiciones de reacción (generalmente, sustituyentes carbonados y heteroatómicos requieren condiciones de reacción distintas), el tipo de funcionalización “reactiva” necesaria que deben presentar los nuevos sustituyentes para poder participar en la reacción, que afecta a su precio, disponibilidad y diversidad estructural, la compatibilidad química entre los grupos funcionales preexistentes en el BODIPY y en el nuevo sustituyente bajo las condiciones de reacción y, por supuesto, el rendimiento químico de la reacción de posfuncionalización.
Por tanto, se hace necesario el diseño de nuevos compuestos con estructura BODIPY con buenas propiedades para el etiquetado fluorescente específico y obtenidos de manera eficiente y económica, que permitan la preparación de una gran diversidad de compuestos de forma directa, rápida, con buenos rendimientos de reacción.
DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN
En la presente invención se ha desarrollado un nuevo método de posfuncionalización de BODIPYs general, eficiente y económico, empleando condiciones catalíticas y suaves de reacción, y que no requieren de la prefuncionalización del sustituyente a incorporar, lo que permite introducir una gran diversidad de sustituyeles de forma directa, rápida, con buenos rendimientos y bajo condiciones de reacción similares.
En un primer aspecto, la invención se refiere a un compuesto de fórmula general (I) o cualquiera de sus sales o isómeros (a partir de ahora “compuesto de la invención”):
donde:
Z se selecciona de entre un átomo de nitrógeno (N) o un grupo C(R?);
R6 se selecciona de entre hidrógeno, alquilo C1-C18 sustituido o no sustituido, alquenilo C2-C18 sustituido o no sustituido, alquinilo C2-C18 sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo sustituido o no sustituido, halógeno, -OR’, -NR’R”, -CN, -COR’, -COOR’, -CONR’R”, -S¡R’R”R’” , -S¡R’R”(OR’” ), -Si(OR’)3, -PR’R”, -P(=O)R’R”, -P(=O)(OR’)(OR”), -P(=O)(OR’)(NR” R” ’), -P(=O)(NR’R”)(NR” ’R” ”), -SR’, -SOR’, -SO2R’, -SO2OR’, -S02NR’R”, -S(=NR’)R”, -SeR’, -Se(=O)R’, -TeR’, -Te(=O)R’;
R2 a R5 se seleccionan cada uno independientemente de entre hidrógeno, alquilo C1-C18 sustituido o no sustituido, alquenilo C2-C18 sustituido o no sustituido, alquinilo C2-C18 sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo sustituido o no sustituido, halógeno, -OR’, -NR’R”, -N3, -NR’(C=O)R”, -NR’C(=O)OR”, -NR’C(=O)NR”R” ’, -NR’(C=S)NR”R’” , -NR’S 02R”, -COR’, -COOR’, -CONR’R”, -SiR’R”R’” , -SiR’R”(OR’” ), -Si(OR’)3, -PR’R”, -P(=O)R’R”, -P(=O)(OR’)(OR”), -P(=O)(OR’)(NR” R’” ), -P(=O)(NR’R”)(NR” ’R” ”), -SR’, -SOR’, -S02R’, -SO2OR’,
-S02NR’R”, -S(=NR’)R”, -SeR’, -Se(=O )R’, -TeR’, -Te(=O )R’;
R’, R”, R’” y R”” se seleccionan cada uno independientemente de entre hidrógeno, alquilo C i-C 1s, alquenilo C2-C18, alquinilo C2-C18, arilo o heteroarilo;
R7 se selecciona de entre hidrógeno, alquilo C1-C18 sustituido o no sustituido, alquenilo C2-C18 sustituido o no sustituido, alquinilo C2-C18 sustituido o no sustituido, -CN, -CH2OR’, -CH20(C=O )R’, arilo sustituido o no sustituido, o heteroarilo sustituido o no sustituido; y
R1 se selecciona de entre hidrógeno, alquilo C1-C18 sustituido o no sustituido, alquenilo C2-C18 sustituido o no sustituido, alquinilo C2-C18 sustituido o no sustituido, -CN, cicloalquilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo sustituido, o no sustituido o un grupo de fórmula (la):
donde R2, R3, R4 y R6 están definidos anteriormente y R5 se selecciona de entre hidrógeno, alquilo C1-C18 sustituido o no sustituido, alquenilo C2-C18 sustituido o no sustituido, alquinilo C2-C18 sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo sustituido o no sustituido, halógeno, -OR’, -NR’R”, -N3, -NR’(C=O )R”, -NR’C(=O )0 R”, -NR’C(=O )NR”R” ’, -NR’(C=S)NR”R” ’, -NR’S02R”, -COR’, -COOR’, -CONR’R”, -SiR’R”R” ’, -S¡R’R”(OR’” ), -Si(OR’)3, -PR’R”, -P(=O )R’R”, -P(=O )(0 R’)(0 R”), -P(=O )(0 R’)(NR” R” ’), -P(=O )(NR’R”)(NR” ’R” ” ), -SR’, -SOR’, -SO2R’, -SO2OR’, -S02NR’R”, -S(=NR’)R”, -SeR’, -Se(=O )R’, -TeR’, -Te(=O )R’ o un grupo de fórmula (la);
donde cada R2 a R6 de los grupos (la) englobados en el compuesto (I) y del compuesto (I) se seleccionan de manera independiente.
En una realización preferida del compuesto de la invención Z es un grupo C(R?), más preferiblemente R7 es un grupo alquilo C1-C6 o un grupo fenilo, opcionalmente sustituido por al menos un grupo alquilo C1-C6, preferiblemente R7 es un grupo metilo o un grupo fenilo. Cuando R7 es un grupo fenilo preferiblemente está sustituido por al menos un grupo metilo.
En otra realización preferida del compuesto de la invención, R6 es un grupo alquilo C1-C6, preferiblemente es un metilo.
En otra realización preferida del compuesto de la invención, R2 a R5 se seleccionan cada uno independientemente de un grupo alquilo C1-C6. Más preferiblemente, R2 y Rs son un grupo etilo y/o R3 y R4 son un grupo metilo.
En otra realización preferida del compuesto de la invención, el compuesto es de fórmula general (II): 
donde R1 se ha descrito anteriormente.
En una realización más preferida, R1 se selecciona de entre un grupo -CH2-CH3, -CH2-CH=CH2, -CH(CO-CH3)2, -CN, un grupo fenilo sustituido por al menos un grupo -OH o su tautómero correspondiente donde el grupo es un cilohexadieno sustituido por un grupo =O , azulilo sustituido por al menos un grupo alquilo (C1-C4), un grupo pirrol opcionalmente sustituido por al menos un grupo de fórmula (la), un indol, y un grupo de fórmula (la).
En otra realización preferida de los compuestos de la invención R1 se selecciona de
los grupos -CH2-CH3, -CH 2-CH=CH2, -CH(CO-CH3)2, -CN, 
En otra realización preferida de los compuestos de la invención, Ri es un grupo pirrol sustituido por al menos un grupo de fórmula (la):
donde Z, R2 a R4 y R6 están descritos anteriormente y R5 está descrito anteriormente y preferiblemente R5 se selecciona de entre hidrógeno, alquilo C1-C6 o es un grupo de fórmula (la), donde a su vez Z y R2 a R6 se han descrito anteriormente y se seleccionan independientemente de los mismos radicales del grupo (la) y del compuesto (I).
En una realización preferida, los compuestos se seleccionan de entre:
Los compuestos de la invención son sondas que se pueden utilizar en el mareaje biológico, en tinción selectiva de células y microorganismos vivos, como biosensores
en bioimagen de organismos vivos, en aplicaciones tecnológicas como captadores de energía en células solares o como emisores en láseres de colorante o en sistemas OLED o similares. La metodología desarrollada permite etiquetar de forma simple y en un solo paso de reacción de moléculas biológicas tales como aminoácidos (tirosina), resveratrol y guayazuleno; sondas con grupo acetilacetona para complejación de iones metálicos; o sondas redox funcionalizadas con grupo hidroquinona o quinona, entre otras. La simplicidad, generalidad y eficiencia del método de preparación permite extenderlo a muchas otras aplicaciones fotónicas y biofotónicas.
Por tanto, otro aspecto de la invención se refiere al uso del compuesto de fórmula general (I) de la presente invención, como marcador o sonda fluorescente. Más preferiblemente como marcador biológico para la tinción selectiva de células y microrganismos vivos.
En una realización preferida, los compuestos de la invención son sondas fluorescentes en biosensores para la obtención de bioimagen de organismos vivos o células.
En una realización preferida, los compuestos de la invención se utilizan como captadores de energía en células solares, como emisores en láseres de colorante o como emisores en sistemas OLED.
La obtención de los compuestos de la invención es general, eficiente y económica, donde se emplean condiciones catalíticas y suaves de reacción y no requiriere la prefuncionalización del sustituyente a incorporar en Ri, permitiendo así introducir una gran diversidad de sustituyentes de forma directa, rápida, con buenos rendimientos y bajo condiciones de reacción similares.
Un aspecto adicional de la presente invención se refiere a la transformación química de un compuesto de fórmula general (III) en el compuesto final de esta invención también de fórmula general (I) por reacción con una molécula de fórmula general RiH donde el grupo carboxialquilo ha sido sustituido por la agrupación Ri, siendo H un átomo de hidrógeno o un par de electrones no compartidos.
Por tanto, otro aspecto de la invención se refiere a un procedimiento de obtención de los compuestos de fórmula general (I) que comprende: hacer reaccionar un compuesto
CN-BODIPY, compuesto de fórmula (III), con un grupo acetoxialquilo (OAc) en posición C3 y/o C5 con un compuesto Ri-H en presencia de un catalizador ácido (preferiblemente de Bronsted o de Lewis).
donde R1 a R6 y Z están definidos anteriormente.
En una realización preferida, los CN-BODIPYs de partida se obtienen mediante la reacción de los correspondientes F-BODIPYs con cianuro de trimetilsililo (TMSCN) en presencia de SnCL a temperatura ambiente empleando diclorometano como disolvente. La reacción transcurre rápidamente (aprox. 30 min) y en la mayoría de los casos los CN-BODIPYs se obtienen con rendimientos cuantitativos tras extracción acuosa de la reacción y eliminación del disolvente a presión reducida, sin necesidad de purificación cromatográfica.
El término “alquilo” se refiere, en la presente invención, a cadenas hidrocarbonadas saturadas, lineales o ramificadas, que tienen de 1 a 18 átomos de carbono, por ejemplo, metilo, etilo, n-propilo, /-propilo, n-butilo, terc-butilo, sec-butilo, n-pentilo, n-hexilo, etc. Preferiblemente el grupo alquilo tiene entre 1 y 6 átomos de carbono. Los grupos alquilo pueden estar opcionalmente sustituidos por uno o más sustituyeles tales como alquinilo, alquenilo, halo, hidroxilo, alcoxilo, carboxilo, ciano, carbonilo, acilo, alcoxicarbonilo, amino, nitro o mercapto.
El término “alquenilo” se refiere, en la presente invención, a cadenas hidrocarbonadas insaturadas, lineales o ramificadas, que tienen de 2 a 18 átomos de carbono, preferiblemente de 2 a 6, y que contienen uno o más enlaces carbono-carbono dobles y que opcionalmente puede contener algún enlace triple, por ejemplo, vinilo, 1 -propenilo, alilo, isoprenilo, 2-butenilo, 1,3-butadienilo, etc. Los radicales alquenilos pueden estar opcionalmente sustituidos por uno o más sustituyentes tales como alquilo, alquinilo, halo, hidroxilo, alcoxilo, carboxilo, ciano, carbonilo, acilo, alcoxicarbonilo, amino, nitro o mercapto.
El término “alquinilo” se refiere a radicales de cadenas hidrocarbonadas, lineales o ramificadas, de 2 a 18 átomos de carbono, preferiblemente de 2 a 6, y que contienen al menos uno o más enlaces carbono-carbono triples y que opcionalmente puede contener algún enlace doble, por ejemplo, etilino, propinilo, butinilo, etc. Los radicales alquinilos pueden estar opcionalmente sustituidos por uno o más sustituyeles tales como alquilo, alquenilo, halo, hidroxilo, alcoxilo, carboxilo, ciano, carbonilo, acilo, alcoxicarbonilo, amino, nitro o mercapto.
El término “arilo” , se refiere, en la presente invención, a anillos aromáticos, sencillos o múltiples que pueden estar condensados, y que tienen entre 5 a 18 átomos de carbono en la parte del anillo, tales como, pero sin limitarse a, fenilo, naftilo, difenilo, indenilo, fenantrilo, azulilo, fluorenilo o antracilo. Preferiblemente el grupo arilo tiene de 5 a 10 átomos de carbono y más preferiblemente el grupo arilo es un fenilo o azulilo. Los radicales arilos pueden estar opcionalmente sustituidos en cualquiera de sus posiciones por uno o más sustituyeles y se seleccionan independientemente entre tales como alquilo, alquenilo, alquinilo, O-alquilo, O, halógeno, hidroxilo, amino o acilo. En una realización preferida el arilo es un fenilo o azulilo, opcionalmente sustituidos por al menos un grupo O, hidroxilo, O-alquilo o halógeno.
El término “heteroarilo” se refiere a un arilo, como se ha definido anteriormente, que contiene al menos un átomo distinto de carbono, tales como S, N, ÓO, formando parte del anillo aromático. Ejemplos de grupos heteroarilo incluyen, pero no se limitan a pirrol o indol. El heteroarilo está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes y se seleccionan independientemente entre tales como alquilo, alquenilo, alquinilo, O alquilo, O, halógeno, hidroxilo, amino, acilo o un grupo de fórmula (la). En una realización preferida el heteroarilo es un grupo pirrol, opcionalmente sustituido por al menos un grupo de fórmula (la).
Por “halógeno” se entiende en la presente invención a un átomo de bromo, cloro, yodo o flúor.
El término “isómero” incluye enantiómeros dependiendo de su asimetría o diastereoisómeros, así como tautómeros cuando los dos isómeros que se diferencian solo en la posición de un grupo funcional.
A lo largo de la descripción y las reivindicaciones la palabra "comprende" y sus variantes no pretenden excluir otras características técnicas, aditivos, componentes o pasos. Para los expertos en la materia, otros objetos, ventajas y características de la invención se desprenderán en parte de la descripción y en parte de la práctica de la invención. Los siguientes ejemplos y figuras se proporcionan a modo de ilustración, y no se pretende que sean limitativos de la presente invención.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS
Fig. 1. Espectros normalizados de absorción y emisión de fluorescencia de los derivados de C-nucleófilos 5 (con sustituyente alilo) y 11 (con guayazuleno de sustituyente) en diferentes disolventes: AcOEt (puntos negros), MeOH (gris) y PBS (negro).
Fig. 2. Fenómeno de desactivación de la fluorescencia del compuesto 11 por transferencia electrónica fotoinducida (PET), modelizado mediante cálculos de la teoría del funcional de la densidad (DFT, B3LYP/6-311+G*).
Fig. 3. Tinción subcelular específica. A) Tinción de células HeLa con 4 (preparado a partir de dietilzinc) a una concentración 100 nivi. Barra blanca de escala: 10 μm.
EJEMPLOS
A continuación, se ilustrará la invención mediante unos ensayos realizados por los inventores, que pone de manifiesto la efectividad del producto de la invención.
Ejemplo 1. Síntesis del compuesto de partida 3
Compuesto 2
A una disolución del F-BODIPY comercial 1 (300 mg, 0,94 mmol) en CH2Cl2 (3 mL), se
añadió cianotrimetilsilano (TMSCN) (0,84 mL, 6,6 mmol) y cloruro de estaño (SnCL) (0,056 mL, 0,47 mmol) a temperatura ambiente. Tras agitar la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 30 min, se añadió agua (10 mL) y CH2Cl2 (20 mL), se separó la fase orgánica y se extrajo la fase acuosa con CH2Cl2 (3 * 20 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una disolución acuosa de NaHC03 (0.1 M ) y una disolución saturada de NaCl (20 mL), se secaron sobre sulfato sódico (Na2SO4) anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida, para obtener 2 (313 mg, 100%) como un sólido cristalino rojo-anaranjado de elevada pureza.
Compuesto 3
A una disolución agitada de acetato de plomo (Pb(OAc)4) (1,25 g, 2,81 mmol) en diclorometano (CH2Cl2) (5 mL), se añadió gota a gota una disolución del CN-BODIPY 2 (390 mg, 1,17 mmol) en una mezcla de ácido acético/anhídrido acético (ACOH/AC2O) (20:1 v/v, 20 mL) a 0 ° C bajo atmósfera de argón. Tras agitar la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 2,5 h, se añadió agua fría (4 °C, 50 mL) y CH2Cl2 (20 mL), se separó la fase orgánica y se extrajo la fase acuosa con CH2Cl2 (3 * 50 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una disolución de bicarbonato sódico (NaHCO3) (0,1 M ) y una disolución saturada de cloruro sódico (NaCl) (20 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El crudo resultante se purificó por cromatografía en columna flash (gradiente lineal: hexano/acetato de etilo (AcOEt), 100:0 → 60:40), para obtener 3 (330 mg, 72%) como un sólido naranja.
1H NMR (CDCl3, 400 MHz): 5 = 5,43 (2H, s, H1’), 2,70 (6H, s, CH35 y CH38), 2,52 (2H, q, J = 7,4 Hz, CH3CH22I. 2,48 (2H, q, J = 7,4 Hz, CH3CH26I. 2,41 (3H, s, CH31), 2,40 (3H, s, CH37), 2,16 (3H, s, H4’), 1,10 (3H, t, J = 7,4 Hz, CH3CH22I. 1,09 (3H, t, J = 7,4 Hz, CH3CH26).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): 5 = 170,9 (C3’), 157,8 (C5), 143,7 (C3), 142,9 (C8), 140,8 (C7), 136,3 (C1), 136,2 (C6), 135,0 (C2), 132,3 (C7a), 130,6 (C8a), 127,1 (q, JCB = 74 Hz, 2 x CN), 56,5 (C1’), 21,00 (C4’), 17,8 (CH3CH26), 17,4 (CH3CH22/CH38), 17,4 (CH38/CH3CH22), 15,5 (CH3CH22), 15,1 (CH3CH26), 14,7 (CH37), 14,6 (CH31), 14,1 (CH35).
HRMS (API-ES+) m/z calculado para C22H27BN4Na02 [M+Na]+ 413,2123; encontrado 413,2138, Calculado para C22H31BN5O2 [M+NH4]+ 408,2569; encontrado 408,2587.
Ejemplo 2. Síntesis de los compuestos de la invención
El siguiente esquema recoge la síntesis de BODIPYs incorporando C-nucleófilos a partir del compuesto de partida CN-BODIPY 3, empleando trifluorometanosulfonato de escandio Sc(OTf)3 (5-24) y trifluorometanosulfonato de trimetilsililo (TMSOTf) (4) como catalizador, [a] cat: 0,025 equiv (5-9, 12-19, 23 y 24); 0,05 equiv (5, 6, 20 y 22); 0,08 equiv (21); 1,5 equiv (4). [b] Tipo de nucleófilo: timetilsililo (TMS)Ri (5 y 7); dietilzinc (Et2Zn) (4); R1H (6, 8-24). [c] Equiv de R1H: 1 equiv (10, 23 y 24); 1,2 equiv (9); 1,4 equiv (11, 19); 1.5 equiv (4-8, 12-18); exceso de 3 (1,5 equiv (20), 4,4 equiv (21) y 4,8 equiv (22)). [d] CH2Cl2 (4-9 y 11-24); acetonitrilo (MeCN) (10). [e] 10 requirió un aumento de temperatura, [f] Rendimiento expresado como mezcla de regioisómeros.
[g] Se forman por oxidación espontánea de la hidroquinona correspondiente [h] Los productos se obtienen en la misma reacción (14 y 15; 17 y 18; 23 y 24). [i] Relación de isómeros aislados 17:18 (1,4 :1).
Las hidroquinonas (benceno-1,4-dioles) fueron nucleófilos especialmente reactivos en estas condiciones, generando también el producto de C-alquilación (13-17), en vez del fenil éter producto de O-alquilación, con muy buenos rendimientos y de forma muy rápida. Algunas de las hidroquinonas así alquiladas eran inestables al aire/luz,
oxidándose fácilmente a la correspondiente quinona, que en ocasiones fue el único producto aislado finalmente de la reacción (13). La reacción espontánea de oxidación era tanto más rápida cuanto mayor es su grado de alquilación, es decir, cuanto más rico electrónicamente es el anillo de la hidroquinona producto, como era de esperar.
Compuesto 4
A una disolución agitada de 3 (16 mg, 0,041 mmol) en CH2Cl2 anhidro (1 mL), se añadió dietilzinc (15% w/w en hexano, 140,6 μL, 0,129 mmol) y TMSOTf (11,1 μL, 0,062 mmol) a temperatura ambiente bajo atmósfera de argón (cámara de guantes). Tras agitar la mezcla de reacción a temperatura ambiente, en atmósfera de argón durante 90 min, se añadió agua (10 mL) y CH2Cl2 (20 mL), se separó la fase orgánica y se extrajo la fase acuosa con CH2Cl2 (3 * 20 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una disolución saturada de NaCl (20 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El crudo resultante se purificó por cromatografía en columna flash (gradiente lineal: hexano/acetato de etilo (AcOEt), 95:5 → 60:40), para obtener 4 (7,3 mg, 49%) como un sólido rojoanaranjado.
1H NMR (CDCl3, 400 MHz): 5 = 3,00-2,90 (2H, m, H1’), 2,66 (3H, s, CH35), 2,65 (3H, s, CH38), 2,45 (2H, q, J= 7 ,5 Hz, CH3CH¿6), 2,46 (2H, q, J= 7 ,5 Hz, CH3CH¿2), 2,38 (6H, s, CH31 y CH37), 1,86-1,72 (2H, m, H2’), 1,16 (3H, t, J = 7,3 Hz, H3’), 1,11 (3H, t, J = 7,5 Hz, CH3CH22), 1,07 (3H, t, J= 7 ,5 Hz, CH3CH26).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): 5 = 156,3 (C3), 152,5 (C5), 141,0 (C8), 138,7 (C1/C7), 137,8 (CHC1), 134,1 (C6), 133,8 (C2), 130,4 (C7a/C8a), 130,2 (C8a/C7a), 127,8 (q, JCB = 74,8 Hz, 2 x CN), 29,8 (C1’), 22,3 (C2’), 17,4 (CH3CH22/CH3CH26/CH38). 17,4 (CH3CH26/CH38/CH3CH22). 15,2 (CH3CH22/CH3CH26/CH37/CH3I/C 3’), 14,9 (CH3CH26/CH37/CH31/C3’/CH3CH22), 14,9 (CH37/CH3I/C 37CH3CH22/CH2CH26), 14,8 (CH31/C3’/CH3CH22/CH3CH26/CH37), 13,6 (CH35).
HRMS (API-ES+) m/z calculado para C22H30BN4 [M+H]+ 361,2562; encontrado 361,2573, Calculado para C22H29BN4Na [M+Na]+ 383,2382; encontrado 383.2391.
Compuesto 5
A una disolución agitada de 3 (15 mg, 0,038 mmol) en CH2Cl2 anhidro (2 mL) se añadió aliltrimetilsilano (9,2 pL, 0,058 mmol) y Sc(OTf)3 en CH2Cl2 anhidro (96 pL de una disolución 0,01 M , 0,025 equiv) a temperatura ambiente. Tras agitar la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 2 h, se añadió agua (10 mL) y CH2Cl2 (20 mL), se separó la fase orgánica y se extrajo la fase acuosa con CH2Cl2 (3 * 20 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una disolución saturada de NaCI (20 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El crudo resultante se purificó por cromatografía en columna flash (gradiente lineal: hexano/AcOEt, 100:0 → 80:20), para obtener 5 (12 mg, 84%) como un sólido rojo-anaranjado.1
1H NMR (CDCl3, 400 MHz): 5 = 6,07-5,91 (1H, m, H3’), 5,22 (1H, dd, J= 1,2, 17,2 Hz, H4’frans), 5,09 (1H, d, J = 10,2 Hz, H4’c/s), 3,09 (2H, m, H1’), 2,66 (6H, s, CH35 y CH38), 2,52 (2H, m, H2’), 2,46 (4H, q, J = 7,5 Hz, CH3CH72 y CH3CH26), 2,39 (6H, s, CH31 y CH37), 1,12 (3H, t, J= 7 ,5 Hz, CH¿CH22), 1,07 (3H, t, J=7 ,5 Hz, CH3CH26).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): 5 = 154,9 (C5), 153,0 (C3), 141,2 (C8), 138,5 (C7a), 138,2 (C8a), 137,2 (C3’), 134,3 (C7), 133,7 (C1), 130,5 (C6), 130,2 (C2), 127,7 (q, JCB = 74 Hz, 2 x CN), 115,9 (C4’), 32,5 (C2’), 27,1 (C1’), 17,4 (CH3CH22/CH3CH26/CH38), 17,4 (CH38/CH3CH72/CH3CH76). 15,2 (CH3CH72/CH3CH76). 14,9 (CH3CH76/CH3CH22), 14,9 (CH37), 14,8 (CH31), 13,7 (CH35).
HRMS (API-ES+) m/z calculado para C23H30BN4 [M+H]+ 373,2562; encontrado 373,2556, Calculado para C23H33BN5 [M+NH4]+ 390,2828; encontrado 390,2826, Calculado para C23H29BN4Na [M+Na]+ 395,2382; encontrado 395,2367.
Compuesto 6
A una disolución agitada de 3 (10 mg, 0,026 mmol) en CH2Cl2 anhidro (2 mL), se añadió acetilacetona (4 mg, 0,038 mmol) y Sc(OTf)3 en CH2Cl2 anhidro (64 μL de una disolución 0,01 M , 0,025 equiv) a temperatura ambiente. Tras agitar la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 24 h, se añadió agua (10 mL) y CH2Cl2 (20 mL), se separó la fase orgánica y se extrajo la fase acuosa con CH2Cl2 (3 * 20 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una disolución saturada de NaCl (20 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El crudo resultante se purificó por cromatografía en columna flash (gradiente lineal: hexano/AcOEt, 100:0 → 80:20), para obtener 6 (10 mg, 90%) como un sólido rojo anaranjado, mezcla casi equimolecular de los dos tautómeros en CDCl3 a 25 0C (1H RMN).1
1H NMR (CDCl3, 400 MHz): 5 = 4,82 (1H, t, J = 7,2 Hz, H2b), 4,20 (2H, s, H1’b), 3,56 (2H, d, J = 7,2 Hz, H1b), 2,70 (3H, s, CH35’/CH38’), 2,70 (3H, s, CH38’/CH35’), 2,68 (6H, s, CH35 y CH38), 2,47 (4H, m, CH3CH76 y CH3CH76”). 2,41 (3H, s, CH3I/CH3I ’), 2,40 (3H, s, CH31’/CH31), 2,38 (2H, m, CH3CH72). 2,37 (3H, s, CH37/CH37’), 2,36 (3H, s, CH37’/CH37), 2,33 (2H, m, CH3CH72’). 2,25 (6H, s, CH34b y CH36b), 2,19 (6H, s, 6H, s, CH34’b y CH36’b), 1,08 (3H, t, J = 7,5 Hz, CH3CH26’), 1,06 (3H, t, J = 7,5 Hz, CH3CH26), 1,01 (3H, t, J = 7,5 Hz, CH3CH22’), 0,91 (3H, t, J= 7 ,5 Hz, CH¿CH22).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): 5 = 202,9 (C3b y C5b), 192,1 (C3’b y C5’b), 155,0 (C5), 154,6 (C5’), 150,2 (C3’), 149,9 (C3), 141,9 (C8), 141,6 (C8’), 139,5 (C1’), 139,2 (C7), 139.1 (C7’), 138,0 (C1), 135,4 (C6), 135,2 (C6’), 134,9 (C2), 133,3 (C2’), 131,3 (C8a), 131.1 (C7a), 131,0 (C7’a), 130,2 (C8’a), 128,3 (q, JCB = 73,9 Hz, 2 x CN), 126,8 (q, JCB = 73,9 Hz, 2 x CN’), 106,3 (C2’b), 65,1 (C2b), 30,7 (C4b y C6b), 28,6 (C1’b), 24,7 (C1b), 24,2 (C4’b y C6’b), 17,8 (CH38), 17,7 (CH38’), 17,7 (CH3CH¿2 ’), 17,4 (CH3CH76
y CH3CH76”). 17,2 (CH3CH72I. 15,1 (CH37), 15,0 (CH3CH?21. 14,9 (CH31 y CH31’), 14,8 (CH3CH22’), 14,7 (CH3CH26 v CH3CH26’), 14,5 (CH37’), 13,9 (CH35), 13,7 (CH35’). HRMS (API-ES+) m/z calculado para C25H35BN5O2 [M+NH4]+ 448,2883; encontrado 448,2868, Calculado para C2sH3iBN4Na02 [M+Na]+ 453,2437; encontrado 453,2418, Calculado para C25H32BN4O2 [M+H]+ 431,2617; encontrado 431,2621.
Compuesto 7
A una disolución agitada de 3 (20 mg, 0,051 mmol) en CH2Cl2 anhidro (2 mL), se añadió TMSCN (9,6 μL, 0,077 mmol) y Sc(OTf)3 en CH2Cl2 anhidro (128 μL de una disolución 0,01 M , 0,025 equiv) a temperatura ambiente. Tras agitar la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 3 h, se añadió agua (10 mL) y CH2Cl2 (20 mL), se separó la fase orgánica y se extrajo la fase acuosa con CH2Cl2 (3 * 20 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una disolución saturada de NaCl (20 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El crudo resultante se purificó por cromatografía en columna flash (gradiente lineal: hexano/AcOEt, 100:0 → 80:20), para obtener 7 (17 mg, 92%) como un sólido rojo-anaranjado.1
1H NMR (CDCl3, 400 MHz): 5 = 4,14 (2H, s, H1’), 2,71 (3H, s, CH35), 2,69 (3H, s, CH38), 2,60 (2H, q, J= 7 ,6 Hz, CH3CH¿2), 2,48 (2H, q, J= 7 ,6 Hz, CH3CH¿6), 2,42 (3H, s, CH37), 2,41 (3H, s, CH31), 1,19 (3H, t, J= 7,6 Hz, CH3CH22), 1,09 (3H, t, J = 7,6 Hz, CH3CH26).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): 5 = 157,8 (C5), 142,9 (C3), 141,2 (C8), 137,3 (C7a), 136,9 (C8a), 136,3 (C7), 133,5 (C1), 132,0 (C6), 129,9 (C2), 126,3 (q, Jcb = 74 Hz, 2 x BCN), 114,5 (CN1’), 17,6 (CH38), 17,3 (CH3CH72/CH3CH76). 17,3 (CH3CH76/CH3CH72). 16,3 (C1’), 15,0 (CH3CH72/CH3CH76). 14,5 (CH3CH76/CH3CH22), 14,4 (CH31/CH37), 14,4 (CH37/CH31), 13,9 (CH35).
HRMS (API-ES+) m/z calculado para C21H28BN6 [M+NH4]+ 375,2467; encontrado 375,2479.
Compuesto 8
A una disolución agitada de 3 (15 mg, 0,038 mmol) en CH2Cl2 anhidro (2 mL), se añadió fenol (5,4 mg, 0,058 mmol) y Sc(OTf)3 en CH2Cl2 anhidro (96 μL de una disolución 0,01 M , 0,025 equiv) a temperatura ambiente. Tras agitar la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 3 h, se añadió agua (10 mL) y CH2Cl2 (20 mL), se separó la fase orgánica y se extrajo la fase acuosa con CH2Cl2 (3 * 20 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una disolución saturada de NaCl (20 mL), se secaron sobre Na2S04 anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El crudo resultante se purificó por cromatografía en columna flash (gradiente lineal: hexano/AcOEt, 100:0 → 75:25), para obtener 8 (11 mg, 80%) como un sólido rojo-anaranjado.
1H NMR (CDCl3, 400 MHz): 5 = 7,09 (1H, br t, J= 7,5 Hz, H5’), 6,97 (1H, d, J= 7,5 Hz, H7’), 6,82 (1H, t, J= 7 ,5 Hz, H6’), 6,78 (1H, d, J=7 ,5 Hz, H4’), 5,20 (1H, s, OH3’), 4,46 (2H, s, H1’), 2,69 (3H, s, CH38), 2,65 (3H, s, CH35), 2,46 (2H, q, J= 7,6 Hz, CH3CH76).
2,40 (3H, s, CH37), 2,38 (3H, s, CH31), 2,20 (2H, q, J = 7,6 Hz, CH3CH72). 1,07 (3H, t, J = 7,6 Hz, CH3CH76). 0,73 (3H, t, J=7 ,6 Hz, CH3CH22).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): 5 = 153,6 (C3’), 153,3 (C3 y C5), 141,3 (C8), 138,7 (C7a), 138.3 (C8a), 134,7 (C7), 134,4 (C1), 130,7 (C6), 130,5 (C7’), 130,3 (C2), 128,5 (C5’), 127.3 (q, JCB = 74 Hz, 2 x CN), 123,8 (C2’), 121,0 (C6’), 115,7 (C4’), 28,0 (C1’), 17,5 (CH38), 17,4 8 (CH3CH72/CH3CH76). 17,3 (CH3CH76/CH3CH72). 14,9 (CH3I/CH37/CH3CH26), 14,9 (CH37/CH3CH26/CH3I), 14,8 (CH3CH26/CH3I/CH37), 14,1 (CH3CH22), 13,7 (CH35).
HRMS (API-ES+) m/z calculado para C26H33BN5O [M+NH4]+ 442,2777; encontrado 442,2768, Calculado para C26H29BN4NaO [M+Na]+ 447,2331; encontrado 447,2322.
Compuesto 9
A una disolución agitada de 3 (15 mg, 0,038 mmol) en CH2Cl2 anhidro (1 mL), se añadió éster metílico de N-benciloxicarbonil-L-tirosina (15,5 mg, 0,046 mmol) y Sc(OTf)3 en CH2Cl2 anhidro (96 μL de una disolución 0,01 M , 0,025 equiv) a temperatura ambiente. Tras agitar la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 5 h, se añadió agua (10 mL) y CH2Cl2 (20 mL), se separó la fase orgánica y se extrajo la fase acuosa con CH2Cl2 (3 * 20 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una disolución saturada de NaCl (20 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El crudo resultante se purificó por cromatografía en columna flash (gradiente lineal: CH2Cl2/MeOH, 100:0 → 90:10), para obtener 9 (19 mg, 75%) como un sólido rojo-anaranjado.
1H NMR (CDCl3, 400 MHz): 5 = (OH3’ no observado) 7,34-7,24 (5H, m, H6” , H7” , H8” , H9” y H10” ), 6,82 (1H, br d, H5’), 6,68 (1H, br d, H4’), 6,67 (1H, br s, H7’), 5,38 (1H, d, J = 9,2 Hz, H1”), 5,05 (1H, d, J = 12,4 Hz, H4”), 4,97 (1H, d, J = 12,4 Hz, H4” ), 4,53 4,46 (1H, m, H9’), 4,40 (2H, m, H1’), 3,62 (3H, s, OCH310’), 2,95 (2H, d, J = 4,8 Hz, H8’), 2,67 (3H, s, CH38), 2,63 (3H, s, CH35), 2,45 (2H, q, J = 7,5 Hz, CH3CH22/CH3CH26), 2,39 (3H, s, CH31/CH37), 2,35 (3H, s, CH37/CH31), 2,18 (2H, q, J = 7,5 Hz, CH3CH76/CH3CH72). 1,06 (3H, t, J = 7,5 Hz, CH3CH72/CH3CH76). 0,74 (3H, t, J = 7,5 Hz, CH3CH76/CH3CH72).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): 5 = (2 x CN no observado) 172,3 (C10’), 156,1 (C2”), 153,4 (C3/C5), 152,9 (C5/C3), 152,8 (C3’), 141,3 (C8), 138,6 (C1/C7), 138,5 (C7/C1), 136,7 (C5”), 134,7 (C2/C6), 134,5 (C6/C2), 131,1 (C7’), 130,7 (C7a/C8a), 130,4 (C8a/C7a), 128,8 (C5’), 128,5 (C6’/C6”/C7”/C8”/C9”/C10”), 128,0 (C6”/C7”/C8”/C9”/C10”/C6’), 127,8 (C7”/C8”/C9”/C10”/C6’/C6” ), 123,9 (C2’), 115,9 (C4’), 66,7 (C4”), 55,1 (C9’), 52,3 (OCH3IO’), 37,1 (C8’), 27,6 (C1’), 17,5 (CH38), 17,4 (CH3CH72/CH3CH76I. 17,3 (CH3CH76/CH3CH72I. 14,9 (CH3I/CH37/ CH3CH76/CH3CH22), 14,9 (CH37/CH3CH26/CH3CH22/CH3D. 14,8
(CH3CH26/CH3CH22/CH3I/CH37), 14,2 (CH3CH26/CH3CH22), 13,7 (CH35).
HRMS (API-ES+) m/z calculado para Css→BNsNaOs [M+Na]+ 682,3178; encontrado 682,3175, Calculado para C38H43BN5O5 [M+H]+ 660,3350; encontrado 660,3358.
Compuesto 10
A una disolución agitada de 3 (15 mg, 0,038 mmol) en MeCN anhidro (1 mL), se añadió resveratrol (8,8 mg, 0,038 mmol) y Sc(OTf)3 en MeCN anhidro (96 μL de una disolución 0,01 M , 0,025 equiv) a temperatura ambiente. Tras agitar la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 2 h, se adicionó más Sc(OTf)3 en MeCN anhidro (96 μL de una disolución 0.01 M , 0.025 equiv), y se calentó a 50 °C durante 3 h. Transcurrido ese tiempo se mantuvo la reacción a temperatura ambiente durante 12 h adicionales. Finalmente se añadió agua (10 mL) y CH2Cl2 (20 mL), se separó la fase orgánica y se extrajo la fase acuosa con CH2Cl2 (3 * 20 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una disolución saturada de NaCl (20 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El crudo resultante se purificó por cromatografía en columna flash (gradiente lineal: CHCL/MeOH, 100:0 → 94:6), para obtener una mezcla de regioisómeros (12,5 mg, 58%). El regioisómero mayoritario 10 se aisló puro por cristalización en una mezcla hexano/AcOEt como un sólido rojo-anaranjado.
1H NMR (mezcla CD3CN/CD3COCD3, 6:1, 500 MHz): 5 = 8,04 (1H, s, OH3’), 7,76 (1H, s, OH13’), 7,67 (1H, s, OH5’), 7,20 (2H, d, J = 8,6 Hz, H11’ y H15’), 6,99 (1H, d, J = 16,0 Hz, H8’), 6,76 (1H, d, J= 16,0 Hz, H9’), 6,63 (1H, d, J = 2,4 Hz, H6’), 6,61 (2H, d, J = 8,6 Hz, H12’ y H14’), 6,38 (1H, d, J = 2,4 Hz, H4’), 4,57 (2H, br s, H1’), 2,67 (3H, s, CH35), 2,62 (3H, s, CH38), 2,54 (2H, m, CH3CH22) 2,44 (3H, s, CH37), 2,23 (3H, s,
CH31), 1,96 (2H, m, CH3CH26)1,09 (3H, m, CH3CH26), 0,64 (3H, t, J = 7,5 Hz, CH3CH?21.
13C NMR (mezcla CD3CN/CD3COCD3, 6:1, 125 MHz): 5 = 158,1 (C13’), 158,0 (C5’), 157,3 (C3’), 155,2 (C3), 152,8 (C5), 143,4 (C8), 141,4 (C1), 141,2 (C7’), 139,9 (C7), 135,5 (C2), 135,3 (C6), 131,6 (C9’), 131,3 (C7a y C8a), 130,4 (C10’), 129,2 (C11’ y C15’), 124,8 (C8’), 116,3 (C12’ y C14’), 113,6 (C2’), 105,3 (C6’), 102,6 (C4’), 26,8 (C1’), 18,2 (CH38), 17,9 (CH3CH26), 17,7 (CH3CH221. 15,3 (CH¿CH26), 15,0 (CH37), 14,7 (CH31), 14,3 (CH¿CH22), 13,9 (CH35).
HRMS (API-ES+) m/z calculado para C34H3sBN4Na03 [M+Na]+ 581,2700; encontrado 581,2701.
Compuesto 11
A una disolución agitada de 3 (16 mg, 0,041 mmol) en CH2Cl2 anhidro (1 mL), se añadió guayazuleno (8,9 mg, 0,057 mmol) y Sc(OTf)3 en CH2Cl2 anhidro (103 μL de una disolución 0,01 M , 0,025 equiv). Tras agitar la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 1 día, se volvió a añadir más Sc(OTf)3 en CH2Cl2 anhidro (103 μL de una disolución 0,01 M , 0,025 equiv) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se mantuvo a temperatura ambiente durante 3 días adicionales. Transcurrido ese tiempo se añadió agua (10 mL) y CH2Cl2 (20 mL), se separó la fase orgánica y se extrajo la fase acuosa con CH2Cl2 (3 * 20 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una disolución saturada de NaCl (20 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El crudo resultante se purificó por cromatografía en columna flash (gradiente lineal: hexano/AcOEt, 100:0 → 70:30), para obtener 11 (16,2 mg, 75%) como un sólido morado.
1H NMR (CDCl3, 400 MHz): 5 = 8,03 (1H, d, J = 2,0 Hz, H5’), 7,26 (1H, dd, J = 10,7, 2,0 Hz, H7’), 7,11 (1H, s, H3’), 6,87 (1H, d, J = 10,7 Hz, H8’), 5,14 (2H, s, H1’), 3,11 (3H, s, CH39’), 3,06-2,94 (1H, m, C2H6CH6’), 2,72 (3H, s, CH38), 2,64 (3H, s, CH35), 2,51 (3H, s, CH34’), 2,46 (2H, q, J = 7,6 Hz, CH3CH26), 2,41 (6H, s, CH31 y CH37), 2,09 (2H, q, J = 7,6 Hz, CH3CH¿2), 1,34 (6H, d, J = 6,9 Hz, C?HfiCH6’1. 1,07 (3H, t, J = 7,6 Hz, CH3CH26), 0,76 (3H, t, J= 7 ,6 Hz, CH¿CH22).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): 5 = (2 x CN no observado) 155,3 (C3), 152,9 (C5), 145,2 (C9’), 141,1 (C8), 139,2 (C3’), 139,1 (C6’), 138,8 (C1), 138,0 (C4’), 137,9 (C7), 134,9 (C7’), 134,7 (C2), 134,2 (C6), 133,7 (C5’), 133,3 (C9’a), 130,6 (C7a/C8a), 130,4 (C8a/C7a), 126,7 (C8’), 124,0 (C4’a), 121,3 (C2’), 37,8 (C2H6CH6’), 30,7 (C1’), 27,8 (CH39’), 24,7 (C?HfiCH6’1. 17,5 (CH38), 17,4 (CHaCH→), 17,3 (CHaCH→), 14,9 (CH31 y CH37), 14,8 (CH3CH26), 14,5 (CHaCH221. 13,7 (CH35), 13,0 (CH34’).
HRMS (API-ES+) m/z calculado para C3sH42BN4 [M+H]+ 529,3503; encontrado 529,3506.
Compuesto 12
A una disolución agitada de 3 (15 mg, 0,038 mmol) en CH2Cl2 anhidro (2 mL), se añadió indol (6,7 mg, 0,058 mmol) y Sc(OTf)3 en CH2Cl2 anhidro (96 μL de una disolución 0,01 M , 0,025 equiv) a temperatura ambiente. Tras agitar la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 1,5 h, se añadió agua (10 mL) y CH2Cl2 (20 mL), se separó la fase orgánica y se extrajo la fase acuosa con CH2Cl2 (3 * 20 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una disolución saturada de NaCl (20 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El crudo resultante se purificó por cromatografía en columna flash (gradiente lineal: hexano/AcOEt, 100:0 → 70:30), para obtener 12 (15 mg, 88%) como un sólido rojo.
1H NMR (CDCl3, 400 MHz): 5 = 8,08 (1H, s, H4’), 7,66 (1H, d, J = 7,3 Hz, H9’), 7,32 (1H, d, J = 7,3 Hz, H6’), 7,18 (1H, t, J = 7,3 Hz, H7’), ), 7,14 (1H, t, J = 7,3 Hz, H8’), 6,97 (1H, s, H3’), 4,55 (2H, s, H1’), 2,70 (3H, s, CH35), 2,65 (3H, s, CH38), 2,47 (2H, q, J = 7,5 Hz, CH3CH76I. 2,41 (3H, s, CH37), 2,36 (3H, s, CH31), 2,20 (2H, q, J = 7,5 Hz, CH3CH22), 1,08 (3H, t, J =7,5 Hz, CH3CH26), 0,70 (3H, t, J=7 ,5 Hz, 3H, CH3CH22).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): 5 = 154,4 (C5), 152,8 (C3), 141,2 (C8), 138,6 (C8a), 138,0 (C7a), 134,6 (C7), 134,3 (C1), 130,5 (C6), 130,2 (C2), 127,6 (q, Jcb = 74 Hz, 2 x CN), 127,5 (C10’), 123,3 (C3’), 122,1 (C7’), 119,7 (C8’), 118,7 (C9’), 111,3 (C6’), 111,1 (C2’), 24,1 (C1’), 17,5 (CH35), 17,4 (CH3CH26), 17,3 (CH3CH22), 14,9 (CH3CH26), 14,8 (CH37), 14,8 (CH31), 14,3 (CH3CH72I. 13,7 (CH38).
HRMS (API-ES+) m/z calculado para C28H34BN6 [M+NH4]+ 465,2938; encontrado 465,2953, Calculado para C28H3oBNsNa [M+Na]+ 470,2491; encontrado 470,2494.
Compuesto 13
A una disolución agitada de 3 (14,8 mg, 0,038 mmol) en CH2Cl2 anhidro (1 mL), se añadió 2,3,5-trimetilhidroquinona (8,7 mg, 0,057 mmol) y Sc(OTf)3 en CH2Cl2 anhidro (94 μL de una disolución 0,01 M , 0,025 equiv) a temperatura ambiente. Tras agitar la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 1 h, se añadió agua (10 mL) y CH2Cl2 (20 mL), se separó la fase orgánica y se extrajo la fase acuosa con CH2Cl2 (3 x 20 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una disolución saturada de NaCl (20 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El crudo resultante se purificó por cromatografía en columna flash (gradiente lineal: hexano/AcOEt, 97:3 → 70:30), para obtener 13 (17,1 mg, 93%) como un sólido rojo-anaranjado.
1H NMR (CD3COCD3, 400 MHz): 5 = 4,37 (2H, s, H1’), 2,80 (3H, s, CH38), 2,67 (3H, s, CH35), 2,56 (2H, q, J = 7,6 Hz, CH3CH76I. 2,48 (3H, s, CH37), 2,43 (3H, s, CH31), 2,28 (2H, q, J = 7,6 Hz, CH3CH72I. 2,04 (6H, s, CH34’ y CH35’), 1,98 (3H, s, CH37’), 1,10
(3H, t, J = 7,6 Hz, CH3CH26), 0,87 (3H, t, J = 7,6 Hz, CHaCH?2).
13C NMR (CD3COCD3, 100 MHz): 5 = 187,5 (C6’), 186,9 (C3’), 153,9 (C5), 151,4 (C3), 143,9 (C8), 143,4 (C2’/C7’), 141,5 (C47C5’), 141,4 (C5’/C4’), 140,4 (C7), 140,2 (C7’/C2’), 140,1 (C1), 135,5 (C6), 134,1 (C2), 131,5 (C7a), 131,0 (C8a), 127,4 (q, JCB = 73,7 Hz, 2 x CN) 27,0 (C1’), 18,1 (CH3CH22), 18,0 (CH38), 17,6 (CH3CH26), 15,0 (CH3CH26), 14,8 (CH37), 14,6 (CH31), 14,5 (CH¿CH22), 13,6 (CH35), 13,1 (CH37’), 12,6 (CH34’/CH35’), 12,4 (CH35’/CH34’).
HRMS (API-ES+) m/z calculado para C29H37BN5O2 [M+NH4]+ 498,3040; encontrado 498,3064, Calculado para C29H33BN4Na02 [M+Na]+ 503,2594; encontrado 503,2615.
Compuesto 14y15
A una disolución agitada de 3 (30 mg, 0,077 mmol) en CH2Cl2 anhidro (2 mL) se añadió 2 ,6-dimetilhidroquinona (15,9 mg, 0,12 mmol) y Sc(OTf)3 en CH2Cl2 anhidro (192 μL de una disolución 0,01 M, 0,025 equiv) bajo atmósfera de argón, en ausencia de luz y a temperatura ambiente. Tras agitar la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 30 min, se añadió agua (10 mL) y CH2Cl2 (20 mL), se separó la fase orgánica y se extrajo la fase acuosa con CH2Cl2 (3 * 20 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una disolución saturada de NaCl (20 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El crudo resultante se purificó por cromatografía en columna flash (gradiente lineal: hexano/AcOEt, 100:0 → 65:35), para obtener 14 (29,2 mg, 81%) y 15 (4,5 mg, 13%) como sólidos rojos.
1H NMR (CD3COCD3, 400 MHz): 5 = (CH3CH22 no observado), 7,97 (1H, s, OH3’), 6,66 (1H, s, OH6’), 6,63 (1H, s, H4’), 4,34 (2H, br s, H1’), 2,79 (3H, s, CH38), 2,71 (3H, s, CH35), 2,57 (2H, q, J = 7,6 Hz, CH3CH26I. 2,48 (3H, s, CH37), 2,38 (3H, s, CH31), 2,20 (3H, s, CH35’), 2,10 (3H, s, CH37’), 1,10 (3H, t, J = 7,6 Hz, CH3CH26I. 0,62 (3H, t,
J = 7,6 Hz, CH¿CH22).
13C NMR (CD3COCD3, 100 MHz): 5 = (2 x CN no observado), 154,9 (C5), 152,4 (C3), 149,4 (C3’), 147,3 (C6’), 143,1 (C8), 141,1 (C1), 139,2 (C7), 135,1 (C2/C6), 134,9 (C6/C2), 131,0 (C7a y C8a), 126,5 (C7’), 125,1 (C5’), 120,8 (C2’), 115,2 (C4’), 28,2 (C1’), 17,9 (CH38), 17,7 (CH3CH22/CH3CH26), 17,3 (CH3CH26/CH3CH22), 16,9 (CH35’), 15,1 (CH3CH26), 14,7 (CH37), 14,5 (CH31/CH3CH22), 14,2 (CH3CH22/CH31 ), 13,53 (CH35 y CH37’).
HRMS (API-ES+) m/z calculado para C28H33BN4Na02 [M+Na]+ 491,2594; encontrado 491,2620, Calculado para C28H37BNs02 [M+NH4]+ 486,3040; encontrado 486,3056.
1H NMR (CDCl3, 500 MHz): 5 = 6,63 (1H, q, J = 1,5 Hz, H4’), 4,33 (2H, s, H1’), 2,68 (3H, s, CH35/CH38), 2,68 (3H, s, CH38/CH35), 2,47 (2H, q, J = 7,6 Hz, CH3CH¿6), 2,40 (3H, s, CH37), 2,35 (3H, s, CH31), 2,19 (2H, q, J = 7,6 Hz, CHsCH→), 2,07 (3H, d, J = 1.5 Hz, CH35’), 2,03 (3H, s, CH37’),1,07 (3H, t, J = 7,6 Hz, CH3CH26), 0,86 (3H, t, J = 7.6 Hz, CH¿CH22).
13C NMR (CDCl3, 125 MHz): 5 = 187,9 (C6’), 186,3 (C3’), 154,1 (C5), 150,4 (C3), 145,8 (C5’), 143,6 (C7’), 141,5 (C8), 139,9 (C2’), 138,8 (C7), 138,4 (C1), 134,9 (C6), 133,3 (C4’), 133,2 (C2), 131,0 (C7a), 130,2 (C8a), 127,1 (q, JCB = 74,3 Hz, 2 x CN), 26,4 (C1’), 17,8 (CH38), 17,7 (CH3CH¿2), 17,4 (CH3CH?61. 16,1 (CH35’), 14,9 (CH3CH26/CH37), 14,9 (CH37/CH3CH26), 14,7 (CH31), 14,3 (CH3CH?21. 13,8 (CH35), 13,3(CH37’).
HRMS (API-ES+) m/z calculado para C28H35BNs02 [M+NH4]+ 484,2883; encontrado 484,2881, Calculado para C28H3iBN4Na02 [M+Na]+ 489,2437; encontrado 489,2428.
Compuesto 16
A una disolución agitada de 3 (13 mg, 0,033 mmol) en CH2Cl2 anhidro (1 mL), se añadió 2,3-dimetoxi-5-metil-hidroquinona a (9,2 mg, 0,050 mmol) y Sc(OTf)3 en CH2Cl2 anhidro (94 μL de una disolución 0,01 M , 0,025 equiv) a temperatura ambiente y en usencia de luz. Tras agitar la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 1 h, se añadió agua (10 mL) y CH2Cl2 (20 mL), se separó la fase orgánica y se extrajo la fase acuosa con CH2Cl2 (3 * 20 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una disolución saturada de NaCl (20 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El crudo resultante se purificó por cromatografía en columna flash (gradiente lineal: hexano/AcOEt, 95:5 → 80:20), para obtener 16 (14,2 mg, 83%) como un sólido rojo-anaranjado.
1H NMR (CDCl3, 400 MHz): 5 = 5,43 (1H, s, OH3’), 5,37 (1H, s, OH6’), 4,51 (2H, br s, H1’), 3,92 (3H, s, OCH35’), 3,88 (3H, s, OCH34’), 2,71 (3H, s, CH35), 2,67 (3H, s, CH38), 2,47 (2H, q, J= 7,6 Hz, CH3CH76). 2,39 (3H, s, CH37), 2,30 (3H, s, CH31), 2,13 (3H, s, CH37’), 1,96 (2H, br q, CH3CH2). 1,08 (3H, t, J = 7,6 Hz, CH3CH26), 0,59 (3H, t, J = 7,6 Hz, CH3CH22).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): 5 = 153,6 (C3), 152,6 (C5), 141,1 (C3’), 140,8 (C8), 140,4 (C6’), 139,2 (C1), 138,3 (C5’), 137,7 (C7), 137,0 (C4’), 134,2 (C2 y C6), 130,5 (C7a/C8a), 130,3 (C8a/C7a), 127,2 (q, JCB = 74,6 Hz, 2 x CN), 119,5 (C7’), 117,4 (C2’), 61,1 (OCH34’/OCH35’), 61,0 (OCH35’/OCH34’), 27,4 (C1’), 17,6 (CH38), 17,4 (CH3CH76I. 17,1 (CH3CH22), 14,9 (CH3CH26), 14,8 (CH37), 14,6 (CH31), 13,8 (CH3CH22), 13,7 (CH35), 12,2 (CH37’).
HRMS (API-ES+) m/z calculado para C29H39BN5O4 [M+NH4]+ 532,3095; encontrado 532,3078, Calculado para C29H3sBN4Na04 [M+Na]+ 537,2649; encontrado 537,2630.
Compuestos 17y18
A una disolución agitada de 3 (50 mg, 0,128 mmol) en CH2Cl2 anhidro (1 mL), se añadió 2-clorohidroquinona (24,7 mg, 0,192 mmol) y Sc(OTf)3 en CH2Cl2 anhidro (320 μL de una disolución 0,01 M, 0,025 equiv) a temperatura ambiente durante 5 h. Transcurrido ese tiempo se añadió agua (10 mL) y CH2Cl2 (20 mL), se separó la fase orgánica y se extrajo la fase acuosa con CH2Cl2 (3 * 20 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una disolución saturada de NaCl (20 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El crudo resultante se purificó por cromatografía en columna flash (gradiente lineal: hexano/AcOEt, 85:15 → 60:40), para obtener una mezcla de los tres regioisómeros posibles, de la cual se puedo aislar y caracterizar: 17 (13,2 mg, 27%) y 18 (11,6 mg, 19%) como sólidos rojos-anaranjados.
1H NMR (CD3COCD3, 400 MHz): 5 = 8,50 (1H, s, OH7’), 8,02 (1H, s, OH4’), 6,88 (1H, d, J = 8,7 Hz, H5’), 6,81 (1H, d, J = 8,7 Hz, H6’), 4,69 (2H, s, H1’), 2,78 (3H, s, CH38), 2,71 (3H, s, CH35), 2,57 (2H, q, J = 7,6 Hz, CH3CH26I. 2,48 (3H, s, CH37), 2,38 (3H, s, CH31), 2,06 (2H, br q, CH3CH22), 1,10 (3H, t, J= 7 ,6 Hz, CH3CH26), 0,65 (3H, t, J= 7,6 Hz, CH3CH22).
13C NMR (CD3COCD3, 100 MHz): 5 = 153,5 (C3), 152,8 (C5), 150,4 (C7’), 147,5 (C4’), 143,4 (C8), 140,9 (C1), 139,5 (C7), 135,1 (C6), 134,7 (C2), 131,2 (C7a/C8a), 131,1 (C8a/C7a), 127,40 (q, JCB = 74,0 Hz, 2 x CN), 123,4 (C2’/C3’), 123,2 (C37C2’), 116,5 (C5’), 115,1 (C6’), 29,2 (C1’), 18,1 (CH38), 17,8 (CH3CH¿6), 17,6 (CH3CH22), 15,2 (CH3CH26), 14,9 (CH37), 14,6 (CH31), 14,3 (CH¿CH22), 13,7 (CH35).
HRMS (API-ES+) m/z calculado para C26H32BCIN5O2 [M+NH4]+ 492,2337; encontrado 492,2303, Calculado para C26H2sBCIN4Na02 [M+Na]+ 497,1891; encontrado 497,1889, Calculado para C26H29BCIN4O2 [M+H]+ 475,2071; encontrado 475,2070.
1H NMR (CD3COCD3, 400 MHz): 5 = 8,52 (1H, s, OH3’), 7,92 (1H, s, OH6’), 6,92 (1H, s, H7’), 6,52 (1H, s, H4’), 4,38 (2H, s, H1’), 2,83 (3H, s, CH38), 2,65 (3H, s, CH35), 2,56 (2H, q, J = 7,5 Hz, CH3CH¿2/CH3CH26), 2,49 (3H, s, CH31/CH37), 2,47 (3H, s, CH37/CH3I), 2,30 (2H, q, J = 7,5 Hz, CH3CH¿6/CH3CH¿2), 1,10 (3H, t, J = 7,5 Hz, CH3CH22/CH3CH26), 0,82 (3H, t, J = 7,5 Hz, CH3CH26/CH3CH22).
13C NMR (CD3COCD3, 100 MHz): 5 = 153,6 (C3 y C5), 148,9 (C3’), 146,8 (C6’), 143,8 (C8), 140,2 (C1 y C7), 135,3 (C2/C6), 135,0 (C6/C2), 131,4 (C7a/C8a), 130,9 (C8a/C7a), 127,6 (q, JCB = 74,6 Hz, 2 x CN), 124,8 (C2’), 119,0 (C5’), 118,7 (C4’), 116,5 (C7’), 26,4 (C1’), 17,8 (CH38), 17,7 (CH 3CH¿2/CH 3CH¿6), 17,6 (CH3CH26/CH3CH22), 15,1 (CH3CH22/CH3CH26), 14,8 (CH31/CH37), 14,8 (CH37/CH31), 14,4 (CH3CH76/CH3CH22). 13,7 (CH35).
HRMS (API-ES+) m/z calculado para C26H32BCIN5O2 [M+NH4]+ 492,2337; encontrado 492,2349, Calculado para C26H28BCIN4Na02 [M+Na]+ 497,1891; encontrado 497,1906.
Compuesto 19
A una disolución agitada de 3 (10 mg, 0,026 mmol) en CH2Cl2 anhidro (2 mL), se añadió pirrol (2,6 mg, 0,038 mmol) y Sc(OTf)3 en CH2Cl2 anhidro (96 pL de una disolución 0,01 M , 0,025 equiv) a temperatura ambiente. Tras agitar la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 2 h, se añadió agua (10 mL) y CH2Cl2 (20 mL), se separó la fase orgánica y se extrajo la fase acuosa con CH2Cl2 (3 * 20 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una disolución saturada de NaCI (20 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión
reducida. El crudo resultante se purificó por cromatografía en columna flash (gradiente lineal: hexano/AcOEt, 100:0 → 75:25), para obtener compuesto 19 (7 mg, 69%) como un sólido rojo.
1H NMR (CDCl3, 400 MHz): 5 = 8,78 (1H, br s, H3’), 6,69 (1H, s, 1H, H4’), 6,13 (2H, m, H5’ y H6’), 4,45 (2H, s, H1’), 2,68 (3H, s, CH35), 2,66 (3H, s, CH38), 2,48 (2H, q, J = 7,5 Hz, CH3CH76I. 2,42 (2H, q, J = 7,5 Hz, CH3CH¿2), 2,41 (3H, s, CH37), 2,36 (3H, s, CH31), 1,09 (3H, t, J= 7 ,5 Hz, CH3CH26), 0,73 (3H, t, J=7 ,5 Hz, CH3CH22).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): 5 = 153,3 (C5), 151,4 (C3), 141,7 (C8), 138,9 (C7a), 138.7 (C8a), 135,0 (C7), 134,6 (C1), 130,6 (C6), 130,0 (C2), 127,6 (q, JCB = 73,9 Hz, 2 x CN), 125,8 (C2’), 118,2 (C4’), 108,6 (C5’), 108,3 (C6’), 26,7 (C1’), 17,5 (CH35), 17,4 (CH3CH76I. 17,3 (CH3CH22), 14,9 (CH3C7 y CH3CH26), 14,6 (CH31), 14,1 (CH3CH22), 13.7 (CH38).
HRMS (API-ES+) m/z calculado para C24H29BN5 [M+H]+ 398,2515; encontrado 398,2526, Calculado para C24H28BNsNa [M+Na]+ 420,2334; encontrado 420,2353.
Compuesto 20
A una disolución agitada de 3 (13,9 mg, 0,038 mmol) en CH2Cl2 anhidro (2 mL), se añadió pirrol (1,6 mg, 0,024 mmol) y Sc(OTf)3 (0,57 mg, 0,0012 mmol) a temperatura ambiente. Tras agitar la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 2,5 h, se añadió agua (10 mL), se separó la fase orgánica y se extrajo la fase acuosa con CH2Cl2 (3 x 20 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una disolución saturada de NaCl (20 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El crudo resultante se purificó por cromatografía en columna flash (gradiente lineal: hexano/AcOEt, 100:0 → 80:20), para obtener 20 (10 mg, 59%) junto con el derivado monosustituido 19 (1,5 mg, 15%) y el trisustituido 21 (4 mg, 15%), como sólidos rojos.
1H NMR (CDCl3, 400 MHz): 5 = 8,76 (1H, s, NH), 5,98 (2H, d, J = 2,6 Hz, H3’), 4,36 (4H, s, H1’), 2,66 (6H, s, CH38), 2,63 (6H, s, CH35), 2,45 (4H, q, J = 7,6 Hz, CH3CH22/CH3CH26), 2,38 (6H, s, CH31/CH37), 2,33 (6H, s, CH37/CH31), 2,31 (4H, q, J = 7,6 Hz, CH3CH76/CH3CH72I. 1,07 (6H, t, J = 7,6 Hz, CH3CH72/CH3CH76I. 0,76 (6H, t, J =7,5 Hz, CH3CH76/CH3CH72I.
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): 5 = 152,7 (C3/C5), 152,0 (C5/C3), 141,5 (C8), 139,1 (C1/C7), 138,2 (C7/C1), 135,1 (C2/C6), 134,2 (C6/C2), 130,5 (C7a/C8a), 130,1 (C8a/C7a), 128,2 (q, JCB = 74,0 Hz, 4 x CN), 125,4 (C2’), 108,7 (C3’), 27,0 (C1’), 17,5 (CH38), 17,4 (CH3CH22/CH3CH26), 17,3 (CH3CH76/CH3CH72I. 14,9 (CH3CH22/CH3CH26), 14,8 (CH31/CH37), 14,7 (CH37/CH31), 14,1 (CH→CH26/CH3CH22), 13,6 (CH35).
HRMS (API-ES+) m/z calculado para C44H52B2N9 [M+H]+ 728,4541; encontrado 728,4551, Calculado para C44H5iB2NgNa [M+Na]+ 750,4360; encontrado 750,4377.
Compuesto21
A una disolución agitada de 3 (20 mg, 0,051 mmol) en CH2Cl2 anhidro (3 mL), se añadió pirrol (1,0 mg, 0,015 mmol) y Sc(OTf)3 (0,57 mg, 0.0012 mmol) a temperatura ambiente. Tras agitar la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 3 h, se añadió agua (10 mL) y CH2Cl2 (20 mL), se separó la fase orgánica y se extrajo la fase acuosa con CH2Cl2 (3 x 20 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una disolución saturada de NaCI (20 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y
se eliminó el disolvente a presión reducida. El crudo resultante se purificó por cromatografía en columna flash (gradiente lineal: hexano/AcOEt, 100:0 → 30:70), para obtener compuesto 21 (11,5 mg, 72%), junto con el derivado disustituido 20 (1,0 mg, 9%) y el tetrasustituido 22 (3,5 mg, 17%) como sólidos rojos.
1H NMR (CDCl3, 500 MHz): 5 = 8,46 (1H, s, NH), 5,88 (1H, s, H14), 4,41 (2H, s, H9/H9’/H9”), 4,29 (2H, s, H9’/H9”/H9), 4,22 (2H, s, H9”/H9/H9’), 2,66 (3H, s, CH35/CH38/CH357CH387CH357CH38” ), 2,66 (3H, s, CH38/CH35’/CH38’/CH35”/CH38” / CH35), 2,65 (3H, s, CH35’/CH38’/CH35”/CH38”/CH35/CH38), 2,63 (3H, s, CH38’/CH35”/CH38”/CH35/CH38/CH35’), 2,62 (3H, s, CH35”/CH38”/CH35/CH38/ CH35’/ CH38’), 2,59 (3H, s, CH38”/CH35/CH38/ CH35’/CH38’/CH35” ), 2,48-2,40 (8H, m, CH3CH76/CH3CH72/CH3CH767CH3CH727CH3CH767CH3CH72” '). 2,38 (6H, s, CH31/CH37/CH317CH377CH317CH37” ), 2,36 (3H, s, CH37/CH31’/CH37’/CH31”/CH37”/CH31), 2,36 (3H, s, CH317CH377CH317CH377CH31/CH37), 2,35 (3H, s, CH37’/CH31”/CH37”/CH31/CH37/CH31’), 2,29 (3H, s, CH31”/CH37”/CH31/CH37/CH31’/CH37’), 2,26 (4H, q, J = 7,5 Hz, CH3CH?2/CH3CH76’/CH3CH72’/CH3CH76”/CH3CH72”/CH3CH?61. 1,09-1,01 (9H, m, CH3CH22/CH3CH26/CH3CH72’/CH3CH26”/CH3CH22”/CH3CH76”1. 0,93 (3H, t, J = 7,5 Hz, CH3CH26/CH3CH227CH3CH267CH3CH227CH3CH267CH3CH22), 0,84 (3H, t, J = 7,5 Hz, CH3CH22’/CH3CH76”/CH3CH72”/CH3CH76” /CH3CH22/CH3CH26), 0,77 (3H, t, J = 7,5 Hz, CH3CH767CH3CH727CH3CH767CH3CH72/CH3CH26/CH3CH22’).
13C NMR(CDCl3, 125 MHz): 5= 155,2, 152,5, 151,7, 151,1, 141,8, 141,4, 141,0, 139,6, 139,3, 139,1, 138,0, 137,9, 137,3, 135,5, 135,4, 134,0, 133,7, 130,6, 130,4, 130,2, 129,00-126,71(m, 6 x CN), 124,7, 122,4, 115,6, 110,2, 29,8, 27,11, 25,7, 25,6, 17,6, 17,5, 17,5, 17,4, 17,2, 17,0, 15,0, 14,9, 14,8, 14,8, 14,7, 14,6, 14,5, 14,4, 13,6.
HRMS (API-ES+) m/z calculado para C64H74B3Ni3Na [M+Na]+ 1080,6389; encontrado 1080,6427.
Compuesto 22
A una disolución agitada de 3 (56 mg, 0,143 mmol) en CH2Cl2 anhidro (10 mL), se añadió pirrol (2,0 mg, 0,030 mmol) y Sc(OTf)3 (0,72 mg, 0,0015 mmol) a temperatura ambiente. Tras agitar la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 1,5 h, se añadió agua (10 mL) y CH2Cl2 (20 mL), se separó la fase orgánica y se extrajo la fase acuosa con CH2Cl2 (3 * 20 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una disolución saturada de NaCl (20 mL), se secaron sobre Na3S04 anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El crudo resultante se purificó por cromatografía en columna flash (gradiente lineal: hexano/AcOEt, 100:0 → 30:70), para obtener compuesto 22 (33 mg, 80%) como un sólido rojo.
1H NMR(CDCl3, 500 MHz): 5 = 7,87 (1H, s, NH), 4,36 (d, J= 18,0 Hz, 2H), 4,19 (d, J = 17,9 Hz, 2H), 4,12 (d, J = 17,7 Hz, 2H), 4,01 (d, J = 17,3 Hz, 2H), 2,65 (12H, s), 2,58 (6H, s), 2,56 (6H, s), 2,53 (6H, s), 2,45-2,38 (14H, m), 2,33 (8H, s), 2,32 (6H, s), 2,29 (6H, s), 1,06-1,00 (18H, m), 0,95 (6H, t, J=7 ,5 Hz).
13C NMR(CDCl3, 100 MHz): 5= 153,3, 151,9, 151,1, 151,1, 142,2, 141,5, 140,7, 140,3, 137,7, 137,4, 136,0, 135,8, 133,8, 133,5, 131,0, 130,7, 130,4, 130,4, 128,7-126,1 (m, 8 x CN), 122,7, 115,1, 25,8, 25,7, 17,6, 17,5, 17,4, 17,3, 17,2, 15,0, 15,0, 14,9, 14,9, 14,8, 14,7, 14,7, 14,5, 13,5.
HRMS (API-ES+) m/z calculado para C84H101B4N18 [M+NH4]+ 1405,8865; encontrado 1405,8914.
Compuesto 23 y 24
A una disolución del F-BODIPY 25 (Nepomnyashchii, A. B.; Broering, M.; Ahrens, J.; Bard, A. J. J. Am. Chem. Soc. 2011, 133, 8633 - 8645) (204 mg, 0,563 mmol) en CH2Cl2 (2 mL), se añadió TMSCN (479 μL, 3,76 mmol) y SnCL (32 μL, 0,268 mmol) a temperatura ambiente. Tras agitar la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 30 min, se añadió agua (30 mL) y CH2Cl2 (20 mL), se separó la fase orgánica y se extrajo la fase acuosa con CH2Cl2 (3 * 50 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una disolución acuosa de NaHCO3 (0.1 m) y una disolución saturada de NaCl (20 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El crudo resultante se purificó por cromatografía en columna flash (gradiente lineal: hexano/AcOEt, 100:0 → 80:20), para obtener 26 (199 mg, 96%) como un sólido rojo-anaranjado.
1H NMR (CDCl3, 400 MHz): 5 = 6,97 (2H, s, H3’ y H5’), 6,14 (2H, s, H2 y H6), 2,73 (6H, s, CH33 y CH35), 2,34 (3H, s, CH34’), 2,07 (6H, s, CH32’ y CH36’), 1,42 (6H, s, CH31 y CH37).
13C NMR (CDCl3, 100 MHz): 5 = 155,8 (C3 y C5), 143,8 (C7/C1/C7a/C8a), 143,0 8 (C8), 139,4 (C4’), 134,8 (C2’ y C6’), 130,3 (C1’), 129,4 (C3’ y C5’), 129,03 (C7a/C8a/C7/C1), 126,4 (q, JCB = 74 Hz, 2 x CN), 122,4 (C2 y C6), 21,3 (CH34’), 19,6 (CH32’ y CH36’), 15,6 (CH33 y CH35), 13,8 (CH31 y CH37).
HRMS (API-ES+) m/z calculado para C24H26BN4 [M+H]+ 381,2249; encontrado 381,2250, Calculado para C24H2sBN4Na [M+Na]+ 403,2069; encontrado 403,2060.
A una disolución agitada de 3 (11 mg, 0,028 mmol) en CH2Cl2 anhidro (1 mL), se añadió 26 (10,7 mg, 0,028 mmol) y Sc(OTf)3 en CH2Cl2 anhidro (64 μL de una disolución 0,01 M , 0,025 equiv) a temperatura ambiente. Tras agitar la mezcla de
reacción a temperatura ambiente durante 5,5 h, se añadió agua (10 mL) y CH2Cl2 (20 mL), se separó la fase orgánica y se extrajo la fase acuosa con CH2Cl2 (3 * 20 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una disolución saturada de NaCl (20 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El crudo resultante se purificó por cromatografía en columna flash (gradiente lineal: hexano/AcOEt, 100:0 → 70:30), para obtener 23 (9,3 mg, 47%) y 24 (4,5 mg, 15%) como sólidos rojos-anaranjados. También se recuperó el compuesto 22 (4,0 mg, 37%).
1H NMR (CDCl3, 500 MHz): 5 = 6,97 (2H, s, H3” y H5” ), 6,14 (1H, s, H6’), 4,23 (br d, H9), 2,72 (3H, s, CH35’), 2,68 (3H, s, CH35/CH38), 2,68 (3H, s, CH38/CH35), 2,66 (3H, s, CH33’), 2,47 (2H, q, J = 7,6 Hz, CH3CH761. 2,41 (3H, s, CH37), 2,33 (3H, s, CH34” ), 2,32 (3H, s, CH31), 2,06 (8H, m, CH3CH72. CH32” y CH36” ), 1,42 (6H, s, CH31’ y CH37’), 1,08 (3H, t, J= 7 ,6 Hz, CH3CH26), 0,69 (3H, t, J=7 ,6 Hz, CH3CH26).
13C NMR (CDCl3, 125 MHz): 5 = 156,0 (C5’), 155,1 (C3’), 154,5 (C5), 150,0 (C3), 144,0 (C7’/C7a’), 142,9 (C8’), 141,6 (C8), 141,0 (C1’/C8a’), 139,4 (C4”), 139,1 (C7), 138,9 (C1), 135,0 (C6), 134,4(C2” y C6” ), 133,6 (C2), 131,0 (C7a), 130,4 (C1” ), 130,0 (C8a), 129.6 (C3” y C5”), 129,3 (C7a’/C7’), 128,4 (C8a’/C1’), 127,5 (C2’), 126,9 (q, JCB = 74,0 Hz, 4 x CN), 122,5 (C6’), 24,7 (C9), 21,3 (CH38” ), 19,7 (CH32”/CH36” ), 19,5 (CH36”/CH32” ), 17,7 (CH38), 17,4 (CH3CH72/CH3CH761. 17,4 (CH3CH76/CH3CH721.
15.6 (CH35’), 15,0 (CH37), 14,8 (CH3CH76). 14,6 (CH31), 14,4 (CH33’), 14,2 (CH3CH72).
13,9 (CH37’), 13,8 (CH35), 11,8 (CH31’).
HRMS (API-ES+) m/z calculado para C44H52B2N9 [M+NH4]+ 728,4541; encontrado 728,4512, Calculado para C44H48B2N3Na [M+Na]+ 733,4095; encontrado 733,4052.
1H NMR (CDCl3, 500 MHz): 5 = 6,97 (2H, s, H3” y H5”), 4,23 (4H, br d, H9 y H9’” ), 2,68 (9H, s), 2,68 (3H, s), 2,66 (6H, s), 2,47 (4H, q, J = 7,6 Hz), 2,41 (6H, s), 2,32 (9H, s, CH32” , CH36” ), 2,15-2,01 (10H, m), 1,41 (6H, s, CH31’ y CH37’), 1,08 (6H, t, J = 7,6 Hz), 0,69 (6H, t, J= 7 ,5 Hz).
13C NMR(CDCl3, 125 MHz): 5= 155,4, 154,4, 150,0, 142,8, 141,6, 141,1, 139,5, 139,1, 135,1, 133,7, 131,1, 130,6, 130,0, 129,6, 128,7, 127,7, 29,9, 24,7, 21,4, 19,5, 17,7, 17,4, 14,9, 14,8, 14,6, 14,5, 14,2, 13,8, 11,9.
HRMS (API-ES+) m/z calculado para C64H75B3N13 [M+NH4]+ 1058,6569; encontrado 1058,6567, Calculado para C64H7iB3Ni2Na [M+Na]+ 1063,6123; encontrado 1063,6106.
Ejemplo 3. Estudio fotofísico de los compuestos representativos
Con vistas a sus posibles aplicaciones en biología, se realizó un estudio preliminar de las propiedades fotofísicas de algunos de los compuestos más representativos preparados en este capítulo. Los nuevos BODIPYs se estudiaron en tres disolventes distintos para determinar la influencia de la polaridad del medio: AcOEt, como disolvente orgánico polar aprótico de carácter lipófilo; MeOH, como disolvente orgánico polar prótico; y tampón fosfato salino (PBS), como medio acuoso que será también el utilizado en los experimentos de microscopía de fluorescencia que se describen a continuación.
Todas las medidas se llevaron a cabo en las mismas condiciones, empleando una longitud de onda de excitación de 490 nm y el BODIPY comercial 1 en metanol (0 = 0.91) como referencia para la estimación de los rendimientos cuánticos.
Las propiedades fotofísicas de los derivados de C-nucleófilos son muy dependientes
de la naturaleza del sistema carbonado introducido, como era de esperar (Tabla 1). Los compuestos con sistemas alquílicos acíclicos (4-7) tienen propiedades muy similares a las del compuesto 2 no sustituido, precursor de toda la serie. Sin embargo, en el caso de los derivados con sistemas cíclicos insaturados se observan dos tendencias generales. Mientras que los derivados con anillo de fenol (8, 9) son muy similares a los anteriores, mostrando como diferencia más significativa solo un pequeño desplazamiento batocrómico de la banda de absorción, los derivados de guayazuleno (11) (Fig. 1), indol (12) y pirrol (19) tienen baja o nula fluorescencia en los tres disolventes estudiados. Esto puede deberse a un proceso de transferencia electrónica fotoinducida (PET) entre el nuevo anillo introducido, rico en electrones, y el BODIPY, que desactiva la fluorescencia. La contribución de este proceso PET se ha podido modelizar teóricamente mediante cálculos DFT en el caso del derivado con anillo de guayazuleno (11), que actúa como donador (PET reductivo) y se encuentra a una distancia del cromóforo que permite la interacción entre ambas unidades. Así, los cálculos realizados muestran que la transición electrónica de menor energía ocurre desde su HOMO-1 a su LUMO, ambos ubicados principalmente en el núcleo de BODIPY (Fig. 2). Los cálculos indican también que la participación de una transferencia electrónica (PET reductivo) desde el HOMO (ubicado principalmente en el sistema de guayazuleno) hasta el HOMO-1, semi-vacante tras la excitación, es termodinámicamente factible. Este proceso impide que el electrón excitado pueda volver a su propio estado fundamental, provocando así un decaimiento no radiativo que es el responsable de la dramática desactivación de la fluorescencia observada para estos compuestos en todos los solventes estudiados (Tabla 1). Un efecto similar sobre la fluorescencia se ha descrito en otros derivados BODIPY con sustituyentes azuleno o indol.
La siguiente tabla 1 recoge las propiedades fotofísicas de los BODIPYs derivados de C-nucleófilos en distintos disolventes (Ab es la longitud de onda del máximo de absorción; £ es el coeficiente de absorción molar; A es la longitud de onda del máximo de emisión de fluorescencia; 0 es el rendimiento cuántico de fluorescencia; t es el tiempo de vida del estado excitado).
[a] No es soluble PBS, [b] Presenta un hombro a 557,0 nm,
Ejemplo 5. Estudios de microscopía
Se ha llevado a cabo un cribado preliminar de la mayoría de los nuevos BODIPYs sintetizados en este capítulo como sondas fluorescentes en microscopía celular de fluorescencia de células vivas, empleando dos líneas celulares distintas de cáncer: HeLa y SCC38 (derivada de carcinoma humano de células escamosas de laringe). Los
compuestos se han incubado con las células vivas a tres concentraciones distintas (50 nM, 100 nM y 500 nM) durante 30 minutos, antes de lavar con tampón fosfato salino (PBS) para eliminar el exceso de colorante. Las concentraciones más idóneas para la visualización fueron las de 50 nM y 100 nM. En líneas generales, este cribado ha mostrado que la mayoría de los compuestos pueden atravesar la membrana celular y presentan tinción subcelular específica y nula citotoxicidad.
Se observó que el compuesto 4 (preparado a partir de dietilzinc) tiñe de forma selectiva vesículas esféricas sin mostrar tinción difusa en el interior celular (Fig. 3).
Claims (15)
1. Compuesto de fórmula general (I)
donde:
Z se selecciona de entre un átomo de nitrógeno (N) o un grupo C(R?);
R6 se selecciona de entre hidrógeno, alquilo C1-C18 sustituido o no sustituido, alquenilo C2-C18 sustituido o no sustituido, alquinilo C2-C18 sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo sustituido o no sustituido, halógeno, -OR’, -NR’R”, -CN, -COR’, -COOR’, -CONR’R”, -SiR’R”R’” , -S¡R’R”(OR” ’), -Si(OR’)3, -PR’R”, -P(=O)R’R”, -P(=O)(OR’)(OR”), -P(=O)(OR’)(NR” R” ’), -P(=O)(NR’R”)(NR” ’R” ” ), -SR’, -SOR’, -S02R’, -SO2OR’, -S02NR’R”, -S(=NR’)R”, -SeR’, -Se(=O)R’, -TeR’, -Te(=OR’);
R2 a R5 se seleccionan cada uno independientemente de entre hidrógeno, alquilo C1-C18 sustituido o no sustituido, alquenilo C2-C18 sustituido o no sustituido, alquinilo C2-C18 sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo sustituido o no sustituido, halógeno, -OR’, -NR’R”, -N3, -NR’(C=O)R”, -NR’C(=O)OR”, -NR’C(=O)NR”R” ’, -NR’(C=S)NR”R’” , -NR’S 02R”, -COR’, -COOR’, -CONR’R”, -S¡R’R”R’” , -SiR’R”(OR’”), -Si(OR’)3, -PR’R”, -P(=O)R’R”, -P(=O)(OR’)(OR”), -P(=O)(OR’)(NR” R’” ), -P(=O)(NR’R”)(NR” ’R” ”), -SR’, -SOR’, -SO2R’, -SO2OR’, -S02NR’R”, -S(=NR’)R”, -SeR’, -Se(=O)R’, -TeR’, -Te(=OR’); R’, R” , R’” y R” ” se seleccionan cada uno independientemente de entre hidrógeno, alquilo Ci-C1s, alquenilo C2-C18, alquinilo C2-C18, arilo o heteroarilo; R7 se selecciona de entre hidrógeno, alquilo C1-C18 sustituido o no sustituido, alquenilo C2-C18 sustituido o no sustituido, alquinilo C2-C18 sustituido o no sustituido, CH2OR’, -CH20(C=O)R’, -CN, arilo sustituido o no sustituido, o heteroarilo sustituido o no sustituido; y
Ri se selecciona de entre hidrógeno, alquilo C1-C18 sustituido o no sustituido, alquenilo C2-C18 sustituido o no sustituido, alquinilo C2-C18 sustituido o no sustituido, -CN, cicloalquilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo sustituido o no sustituido, o un compuesto de fórmula (la):
donde R2, R3, R4 y R6 están definidos anteriormente y R5 se selecciona de entre hidrógeno, alquilo C1-C18 sustituido o no sustituido, alquenilo C2-C18 sustituido o no sustituido, alquinilo C2-C18 sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo sustituido o no sustituido, halógeno, -OR’, -NR’R”, -N3, -NR’(C=O)R”, -NR’C(=O)OR”, -NR’C(=O)NR”R” ’, -NR’(C=S)NR”R” ’, -NR’S 02R”, -CN, -COR’, -COOR’, -CONR’R”, -SiR’R”R’” , -SiR’R”(OR’” ), -Si(OR’)3, -PR’R”, -P(=O)R’R”, -P(=O)(OR’)(OR”), -P(=O)(OR’)(NR” R” ’), -P(=O)(NR’R”)(NR” ’R” ”), -SR’, -SOR’, -SO2R’, -SO2OR’, -S02NR’R”, -S(=NR’)R”, -SeR’, -Se(=O)R’, -TeR’, -Te(=O)R’ o un grupo de fórmula (la);
o cualquiera de sus sales o isómeros.
2. Compuesto según la reivindicación 1, donde Z es un grupo C(R7).
3. Compuesto según la reivindicación 2, donde R7 es un grupo alquilo C1-C6 o un grupo fenilo sustituido por al menos un grupo alquilo C1-C6, preferiblemente el alquilo es un metilo.
4. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, donde R6 es un grupo alquilo C1-C6, preferiblemente es un metilo.
5. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, donde R2 a R5 se seleccionan cada uno independientemente de un grupo alquilo C1-C6.
6. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, donde R2 y Rs son un grupo etilo y/o R3 y R4 son un grupo metilo.
7. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, donde el compuesto es de fórmula general (II):
donde R1 está descrito en la reivindicación 1.
8. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, donde R1 se selecciona de entre un grupo -CH2-CH3, -CH2-CH=CH2, -CH(CO-CH3)2, -CN, un grupo fenilo sustituido por al menos un grupo -OH o un grupo ciclohexadieno sustituido por al menos un grupo =O , azulilo sustituido por al menos un grupo alquilo (C1-C4), pirrol, un indol, y un grupo de fórmula (la).
9. Compuesto según la reivindiación 8, donde R1 se selecciona de los grupos -CH2-
10. Compuesto según la reivindicación 8, donde R1 es un grupo pirrol sustituido por al menos un grupo de fórmula (la):
donde Z, R2 a R4, Rey R7 están descritos en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 y R5 está descrito en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 o es un grupo de fórmula (la).
11. Compuestos según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 , donde los compuestos son:
12. Uso del compuesto de fórmula general (I) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11 como marcador o sonda fluorescente.
13. Uso según la reivindicación 12, como marcador biológico para la tinción selectiva de células y microrganismos vivos.
14. Uso del compuesto de fórmula general (I) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11 como sondas fluorescentes en biosensores en bioimagen de organismos vivos.
15. Uso del compuesto de fórmula general (I) según cualquiera de las reivindicaciones 1 y 11, como captadores de energía en células solares, como emisores en láseres de colorante o como emisores en sistemas OLED.
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| ES202130797A Withdrawn ES2948561A1 (es) | 2021-08-16 | 2021-08-16 | Compuestos para etiquetado fluorescente |
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|---|---|---|---|---|
| WO2025006156A2 (en) * | 2023-06-27 | 2025-01-02 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Alkylated bodipy compound and methods of using the alkylated bodipy compound |
Citations (2)
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|---|---|---|---|---|
| EP3550206A1 (en) * | 2016-11-30 | 2019-10-09 | Toray Industries, Inc. | Pyrromethene-boron complex, color conversion composition, color conversion film, light source unit, display, and illumination device |
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-
2022
- 2022-08-01 WO PCT/ES2022/070516 patent/WO2023021228A1/es not_active Ceased
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP3550206A1 (en) * | 2016-11-30 | 2019-10-09 | Toray Industries, Inc. | Pyrromethene-boron complex, color conversion composition, color conversion film, light source unit, display, and illumination device |
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Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| DURÁN-SAMPEDRO, G. ET AL. . First Highly Efficient and Photostable E and C Derivatives of 4,4-Difluoro-4-bora-3a,4a-diaza-s-indacene (BODIPY) as Dye Lasers in the Liquid Phase, Thin Films, and Solid-State Rods. Chemistry - A European Journal , 22.01.2014, Vol. 20, Páginas 2646-2653 0947-6539; 1521-3765 (en línea) , (DOI: 10.1002/chem.201303579) Ver página 2646, resumen; página 2647, esquema 1; página 1417, conclusión. * |
| NGUYEN, A.L. ET AL. . Synthesis and properties of B-cyano-BODIPYs. Journal of Porphyrins and Phthalocyanines , 2016, Vol. 20, Páginas 1409-1419 1088-4246; 1099-1409 (en línea), (DOI: 10.1142/S108842461650125X) Ver página 1409, resumen; página 1410, esquema 1; página 1417, conclusión. * |
| URIEL, C. ET AL. . BODIPYs as Chemically Stable Fluorescent Tags for Synthetic Glycosylation Strategies towards Fluorescently Labeled Saccharides . Chemistry - A European Journal , 30.01.2020, Vol. 26, Páginas 5388-5399 0947-6539; 1521-3765 (en línea), (DOI: 10.1002/chem.201905780) Ver página 5388, resumen; página 5389, figura 1. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
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| WO2023021228A1 (es) | 2023-02-23 |
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