ES1235378U - Sliding device for study of nematodes (Machine-translation by Google Translate, not legally binding) - Google Patents
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Abstract
Description
DESCRIPCIÓNDESCRIPTION
Dispositivo portaobjetos para estudio de nematodos.Slide device for study of nematodes.
OBJETO DE LA INVENCIÓNOBJECT OF THE INVENTION
La presente invención se encuadra en el campo técnico de las pletinas de microscopios para montaje de muestras, y se refiere en particular a un dispositivo portaobjetos para estudio de nematodos, acoplable a los elementos portaobjetos de dispositivos de visualización de laboratorio tipo microscopio o similar.The present invention falls within the technical field of microscope plates for sample assembly, and relates in particular to a slide device for nematode study, attachable to the slide elements of microscope-like laboratory display devices or the like.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓNBACKGROUND OF THE INVENTION
Caenorhabditis elegans es un nematodo de tierra de la familia Rhabditidae que mide aproximadamente 1 mm de longitud y vive en ambientes templados, y que es ampliamente aceptado y empleado como modelo animal para estudios en diversos campos como la genética o la farmacología. Posee simetría bilateral, con cuatro cordones epidérmicos y una cavidad que contiene una serie de fluidos que le dan un aspecto transparente a contraluz. Caenorhabditis elegans is a land nematode of the Rhabditidae family that measures approximately 1 mm in length and lives in temperate environments, and is widely accepted and used as an animal model for studies in various fields such as genetics or pharmacology. It has bilateral symmetry, with four epidermal cords and a cavity that contains a series of fluids that give it a transparent backlit appearance.
Los miembros de esta especie poseen muchos de los órganos y sistemas de cualquier otro animal. Es un organismo hermafrodita, cuya anatomía está conformada por estoma, faringe, intestinos, gónadas y una cutícula de colágeno. Los machos tienen una sola gónada, vasos eferentes y una cola especializada para la cópula. Los hermafroditas poseen dos ovarios, oviductos, una cavidad para almacenar el esperma y un útero.Members of this species possess many of the organs and systems of any other animal. It is a hermaphrodite organism, whose anatomy is made up of stoma, pharynx, intestines, gonads and a collagen cuticle. Males have a single gonad, efferent vessels and a specialized tail for intercourse. Hermaphrodites have two ovaries, oviducts, a cavity to store sperm and a uterus.
Una de las ventajas de este organismo respecto a otros es su pequeño tamaño, lo que favorece poder alojarlos y mantenerlos. Sin embargo, este reducido tamaño y su alta movilidad dificultan en gran medida su manipulación individual a la hora de realizar las habituales operaciones de estudio, tales como visualización, tinción o disección.One of the advantages of this organism compared to others is its small size, which favors being able to house and maintain them. However, this small size and high mobility greatly hinder individual manipulation when performing the usual study operations, such as visualization, staining or dissection.
Se conoce en el actual estado de la técnica una variedad de dispositivos para facilitar el estudio de nematodos, en especial sistemas microfluídicos para la investigación con el organismo modelo C. elegans, como por ejemplo la patente US20120129726A1 que detalla un sistema de imagen subcelular en placas multipocillo, o las patentes US10052631B2 y US8961877B2, que describen sistemas de cribado de alto rendimiento. Estos dispositivos son complejos y difícilmente aplicables a los sistemas de imagen y análisis disponibles actualmente. A variety of devices are known in the current state of the art to facilitate the study of nematodes, especially microfluidic systems for research with the C. elegans model organism , such as for example US20120129726A1 detailing a subcellular imaging system in plates multiwell, or US10052631B2 and US8961877B2, which describe high performance screening systems. These devices are complex and hardly applicable to the currently available imaging and analysis systems.
Por otro lado, el documento JP2015230377A hace referencia a un dispositivo portaobjetos fabricado en cristal o resina ópticamente transparente para la observación al microscopio de especímenes biológicos como, por ejemplo, microorganismos u organismos del plancton. El portaobjetos presenta una pluralidad de microcavidades de un tamaño entre 0,01 y 0,5 mm y con una profundidad entre 0,001 y 0,2 mm, en las que pueden alojarse los especímenes a observar sin que éstos resulten dañados. Las microcavidades pueden ser selladas aplicando un cubreobjetos convencional de cristal para formar cámaras en las que queda confinado el espécimen. La morfología de dichas cavidades, sin embargo, no impide la movilidad del espécimen, así como permiten el alojamiento de más de un ejemplar, dificultando así la observación.On the other hand, JP2015230377A refers to a slide device made of optically transparent glass or resin for microscopic observation of biological specimens such as microorganisms or organisms of plankton. The slide has a plurality of microcavities of a size between 0.01 and 0.5 mm and with a depth between 0.001 and 0.2 mm, in which the specimens to be observed can be housed without them being damaged. The microcavities can be sealed by applying a conventional glass coverslip to form chambers in which the specimen is confined. The morphology of these cavities, however, does not impede the mobility of the specimen, as well as allow the accommodation of more than one specimen, thus making observation difficult.
Existe por tanto la necesidad de disponer de dispositivos portaobjetos que permitan aislar e inmovilizar nematodos de manera individual para facilitar su observación y manipulación de una manera sencilla y económica, que además permita su acoplamiento a la gran mayoría de los dispositivos de visualización de laboratorio actualmente existentes.There is therefore a need to have slide devices that allow isolating and immobilizing nematodes individually to facilitate their observation and manipulation in a simple and economical way, which also allows their coupling to the vast majority of currently existing laboratory visualization devices .
DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓNDESCRIPTION OF THE INVENTION
El objeto de la invención consiste en un dispositivo portaobjetos para estudio de nematodos, especialmente configurado y dimensionado para Caenorhabditis elegans, que permite un alojamiento e inmovilización individual de ejemplares de nematodos para la realización de las técnicas de manipulación y estudio habituales.The object of the invention consists of a slide device for the study of nematodes, specially configured and sized for Caenorhabditis elegans, which allows individual accommodation and immobilization of specimens of nematodes to perform the usual manipulation and study techniques.
Para ello, el dispositivo comprende una placa de soporte, y una lámina cubreobjetos, vinculable a la placa. La placa comprende, en una de sus caras, una pluralidad de microhendiduras, estando cada una de ellas configurada y dimensionada para alojamiento en su interior de un único individuo de la especie nematodo, por lo cual presenta una geometría esencialmente alargada. Las microhendiduras son recubribles superiormente, una vez introducido el nematodo en su interior, mediante la lámina, generando así una cámara cerrada.For this, the device comprises a support plate, and a coverslip sheet, linkable to the plate. The plate comprises, on one of its faces, a plurality of micro grooves, each of them being configured and sized for housing inside a single individual of the nematode species, whereby it presents an essentially elongated geometry. The micro grooves are superiorly coated, once the nematode has been introduced inside, by means of the sheet, thus generating a closed chamber.
Ambos elementos del dispositivo están realizados con materiales ópticamente transparentes, para permitir la observación de los nematodos, así como para evitar la dispersión de la luz y la autofluorescencia de los soportes.Both elements of the device are made with optically transparent materials, to allow the observation of the nematodes, as well as to avoid the scattering of light and the autofluorescence of the supports.
Las microhendiduras presentan unas dimensiones comprendidas en el rango de 0.5 mm y los 2.0 mm para el largo, entre los 0.02 mm y los 0.2 mm para el ancho, y entre los 0.02 mm y los 0.2 mm de profundidad.The micro grooves have dimensions in the range of 0.5 mm and 2.0 mm for the length, between 0.02 mm and 0.2 mm for the width, and between 0.02 mm and 0.2 mm deep
El efecto técnico que deriva de la morfología alargada de las microhendiduras consiste en facilitar la manipulación, visualización y disección del nematodo, al quedar éste físicamente atrapado y con una capacidad de movimiento limitada o impedida. Por tanto, el problema técnico que resuelve el dispositivo, mediante la incorporación de las microhendiduras, es el proporcionar un dispositivo portaobjetos sencillo en el que los nematodos puedan quedar atrapados de uno en uno e inmovilizados para su observación y/o manipulación, simplemente alojándolos en las microhendiduras practicadas en el portaobjetos.The technical effect that derives from the elongated morphology of the microcracks consists in facilitating the manipulation, visualization and dissection of the nematode, since it is physically trapped and with a limited or impeded movement capacity. Therefore, the technical problem that the device solves, by incorporating the micro-grooves, is to provide a simple slide device in which the nematodes can be trapped one by one and immobilized for observation and / or manipulation, simply by accommodating them in the microcracks practiced on the slide.
El dispositivo es acoplable a los alojamientos para portaobjetos existentes en los sistemas de visualización habitualmente empleados en la actualidad (microscopios, macroscopios, lupas, sistemas de rayos X, TACs, o ecógrafos). Dichos alojamientos pueden estar dotados de elementos de sujeción o carecer de dichos elementos.The device is attachable to existing slide housings in the visualization systems commonly used today (microscopes, macroscopes, magnifiers, X-ray systems, CTs, or ultrasound scanners). Said housings may be provided with fasteners or lack said elements.
El dispositivo portaobjetos para estudio de nematodos así descrito aporta una serie de ventajas sobre los dispositivos existentes. En primer lugar, constituye un dispositivo sencillo que puede ser aplicado a los sistemas de imagen y análisis disponibles actualmente en el mercado.The slide device for studying nematodes thus described provides a number of advantages over existing devices. First, it constitutes a simple device that can be applied to the image and analysis systems currently available in the market.
Por otra parte, facilita el proceso de manipulación, visualización y disección del nematodo, ya que éste queda físicamente atrapado y su movimiento resulta limitado. Además, la inmovilización conseguida mediante el empleo adicional de un cubreobjetos facilita la observación sin necesidad de adormecer total o parcialmente al espécimen.On the other hand, it facilitates the process of manipulation, visualization and dissection of the nematode, since it is physically trapped and its movement is limited. In addition, the immobilization achieved by the additional use of a coverslip facilitates observation without the need to completely or partially numb the specimen.
DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOSDESCRIPTION OF THE DRAWINGS
Para complementar la descripción que se está realizando y con objeto de ayudar a una mejor comprensión de las características de la invención, de acuerdo con un ejemplo preferente de realización práctica de la misma, se acompaña como parte integrante de dicha descripción, un juego de dibujos en donde con carácter ilustrativo y no limitativo, se ha representado lo siguiente:To complement the description that is being made and in order to help a better understanding of the characteristics of the invention, according to a preferred example of practical implementation thereof, a set of drawings is attached as an integral part of said description. where, for illustrative and non-limiting purposes, the following has been represented:
Figura 1.- Muestra una vista en perspectiva superior del dispositivo portaobjetos para estudio de nematodos, en la que se observan sus principales elementos constituyentes.Figure 1.- It shows a top perspective view of the slide device for the study of nematodes, in which its main constituent elements are observed.
Figura 2.- Muestra una vista del dispositivo de la figura 1, con la incorporación de la lámina cobertora.Figure 2.- Shows a view of the device of Figure 1, with the incorporation of the sheet cover.
Figura 3.- Muestra un detalle de un corte longitudinal del dispositivo, en la que se aprecia una vista lateral de unos alojamientos del dispositivo, teniendo cada uno de ellos en su interior un ejemplar de nematodo.Figure 3.- Shows a detail of a longitudinal section of the device, in which a side view of some housings of the device can be seen, each of them having a specimen of nematode inside.
Figura 4.- Muestra un detalle de un corte transversal del dispositivo, en la que se aprecia una vista frontal de unos alojamientos del dispositivo.Figure 4.- Shows a detail of a cross-section of the device, in which a front view of some housings of the device can be seen.
REALIZACIÓN PREFERENTE DE LA INVENCIÓNPREFERRED EMBODIMENT OF THE INVENTION
Seguidamente se proporciona, con ayuda de las figuras anteriormente referidas, una explicación detallada de un ejemplo de realización preferente del objeto de la presente invención.Next, a detailed explanation of a preferred embodiment of the object of the present invention is provided with the aid of the aforementioned figures.
El dispositivo portaobjetos para estudio de nematodos que se describe, mostrado en las figuras 1 y 2 y destinado a ser acoplado a los alojamientos para portaobjetos existentes en sistemas de visualización comerciales, está conformado por una placa (1) de soporte, realizada en un material con propiedades ópticas de transparencia y de resistencia al rayado y la abrasión, y una lámina (2) cubreobjetos, vinculable a la placa (1) y también con propiedades ópticas de transparencia.The slide device for the study of nematodes described, shown in Figures 1 and 2 and intended to be coupled to the slides housings existing in commercial display systems, is formed by a support plate (1), made of a material with optical properties of transparency and resistance to scratching and abrasion, and a sheet (2) coverslip, linkable to the plate (1) and also with optical transparency properties.
La placa (1), que en esta realización preferente tiene una geometría rectangular, presenta una cara anterior (3) y una cara posterior (4), opuesta a la cara anterior (3).The plate (1), which in this preferred embodiment has a rectangular geometry, has an anterior face (3) and a posterior face (4), opposite the anterior face (3).
La placa (1) comprende, en su cara anterior (3), una pluralidad de microhendiduras (5), estando cada una de ellas configurada y dimensionada para alojamiento e inmovilización en su interior de un único individuo de la especie nematodo. Dado que es necesario que este individuo tenga impedida, o al menos reducida, su movilidad, para facilitar su manipulación y estudio, cada una de las microhendiduras (5) tiene una geometría esencialmente alargada, como puede observarse en las figuras adjuntas.The plate (1) comprises, on its front face (3), a plurality of micro grooves (5), each being configured and sized for housing and immobilization within a single individual of the nematode species. Given that it is necessary for this individual to be prevented, or at least reduced, by his mobility, in order to facilitate his manipulation and study, each of the microcracks (5) has an essentially elongated geometry, as can be seen in the attached figures.
En una realización preferente del dispositivo, en la cual el nematodo a estudiar pertenece a la especie Caenorhabditis elegans, cada microhendidura (5) presenta unas dimensiones de 1.5 mm de largo, 0.05 mm de ancho, y 0.05 mm de profundidad. In a preferred embodiment of the device, in which the nematode to be studied belongs to the species Caenorhabditis elegans, each micro-cleft (5) has dimensions of 1.5 mm long, 0.05 mm wide, and 0.05 mm deep.
Por su parte, la lámina (2) cubreobjetos es confrontable y vinculable a la cara anterior (3) de la placa (1), como se muestra en la figura 2, para cierre superior de las microhendiduras (5), creando así unas cámaras cerradas que evitan que los nematodos puedan escapar y evitan la necesidad de técnicas adicionales de inmovilización, tales como la sedación.On the other hand, the coverslip sheet (2) is confrontable and linkable to the front face (3) of the plate (1), as shown in Figure 2, for upper closure of the micro-grooves (5), thus creating cameras closed that prevent nematodes from escaping and avoid the need for additional immobilization techniques, such as sedation.
Como se ha indicado anteriormente, dicha lámina (2) está realizada en un material con propiedades ópticas de trasparencia, para no interferir en la visualización de los ejemplares alojados en el interior de las microhendiduras (5) a las que recubren. As indicated above, said sheet (2) is made of a material with optical transparency properties, so as not to interfere with the display of the specimens housed inside the microcracks (5) to which they cover.
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