EA033826B1 - Производные фториндола в качестве положительных аллостерических модуляторов мускаринового рецептора m1 - Google Patents
Производные фториндола в качестве положительных аллостерических модуляторов мускаринового рецептора m1 Download PDFInfo
- Publication number
- EA033826B1 EA033826B1 EA201890684A EA201890684A EA033826B1 EA 033826 B1 EA033826 B1 EA 033826B1 EA 201890684 A EA201890684 A EA 201890684A EA 201890684 A EA201890684 A EA 201890684A EA 033826 B1 EA033826 B1 EA 033826B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- hydroxycyclohexyl
- indole
- ylmethyl
- carboxamide
- fluoro
- Prior art date
Links
- 102000007207 Muscarinic M1 Receptor Human genes 0.000 title claims abstract description 15
- 108010008406 Muscarinic M1 Receptor Proteins 0.000 title claims abstract description 15
- 230000003281 allosteric effect Effects 0.000 title abstract description 6
- QISSVLCQDNIJCS-UHFFFAOYSA-N 2-fluoro-1h-indole Chemical class C1=CC=C2NC(F)=CC2=C1 QISSVLCQDNIJCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 title 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 159
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 29
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 37
- -1 2-chloropyridin-4-ylmethyl Chemical group 0.000 claims description 34
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 19
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 14
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims description 13
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 claims description 12
- 230000000155 isotopic effect Effects 0.000 claims description 11
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 8
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 7
- 229930000680 A04AD01 - Scopolamine Natural products 0.000 claims description 6
- 208000028698 Cognitive impairment Diseases 0.000 claims description 6
- STECJAGHUSJQJN-GAUPFVANSA-N Hyoscine Natural products C1([C@H](CO)C(=O)OC2C[C@@H]3N([C@H](C2)[C@@H]2[C@H]3O2)C)=CC=CC=C1 STECJAGHUSJQJN-GAUPFVANSA-N 0.000 claims description 6
- STECJAGHUSJQJN-UHFFFAOYSA-N N-Methyl-scopolamin Natural products C1C(C2C3O2)N(C)C3CC1OC(=O)C(CO)C1=CC=CC=C1 STECJAGHUSJQJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 208000010877 cognitive disease Diseases 0.000 claims description 6
- 201000000980 schizophrenia Diseases 0.000 claims description 6
- STECJAGHUSJQJN-FWXGHANASA-N scopolamine Chemical compound C1([C@@H](CO)C(=O)O[C@H]2C[C@@H]3N([C@H](C2)[C@@H]2[C@H]3O2)C)=CC=CC=C1 STECJAGHUSJQJN-FWXGHANASA-N 0.000 claims description 6
- 229960002646 scopolamine Drugs 0.000 claims description 6
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 claims description 5
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 5
- 230000036407 pain Effects 0.000 claims description 5
- 208000019116 sleep disease Diseases 0.000 claims description 5
- 208000022925 sleep disturbance Diseases 0.000 claims description 5
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 210000005153 frontal cortex Anatomy 0.000 claims description 4
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 claims description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 4
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000011514 reflex Effects 0.000 claims description 3
- COUMPUDLVBOBKP-IRXDYDNUSA-N 4,7-difluoro-N-[(1S,2S)-2-hydroxycyclohexyl]-1-[(1-methylpyrazol-4-yl)methyl]indole-3-carboxamide Chemical compound CN1C=C(CN2C=C(C(=O)N[C@H]3CCCC[C@@H]3O)C3=C(F)C=CC(F)=C23)C=N1 COUMPUDLVBOBKP-IRXDYDNUSA-N 0.000 claims description 2
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000004087 circulation Effects 0.000 claims description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 claims description 2
- 229940072480 scopolamine 0.3 mg Drugs 0.000 claims 5
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 claims 5
- 150000003857 carboxamides Chemical class 0.000 claims 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 claims 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims 1
- 238000007492 two-way ANOVA Methods 0.000 claims 1
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 25
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 72
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 37
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 35
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 32
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 32
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 27
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 16
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 16
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 16
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 14
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 14
- LSGKMZLPZFPAIN-UHFFFAOYSA-N 1h-indole-3-carboxamide Chemical compound C1=CC=C2C(C(=O)N)=CNC2=C1 LSGKMZLPZFPAIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 12
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 11
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 10
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 10
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 9
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 9
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 9
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 9
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 8
- OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N acetylcholine Chemical compound CC(=O)OCC[N+](C)(C)C OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 229960004373 acetylcholine Drugs 0.000 description 7
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 7
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 7
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 7
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 7
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229920002565 Polyethylene Glycol 400 Polymers 0.000 description 6
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 6
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 6
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 6
- 230000003727 cerebral blood flow Effects 0.000 description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 6
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 6
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 6
- NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M potassium iodide Chemical compound [K+].[I-] NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 6
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 6
- WSLDOOZREJYCGB-UHFFFAOYSA-N 1,2-Dichloroethane Chemical compound ClCCCl WSLDOOZREJYCGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- KQONVQCRVKCVHS-UHFFFAOYSA-N 1,2-difluoroindole-3-carboxamide Chemical compound FC=1N(C2=CC=CC=C2C=1C(=O)N)F KQONVQCRVKCVHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 5
- 239000007821 HATU Substances 0.000 description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102000014415 Muscarinic acetylcholine receptor Human genes 0.000 description 5
- 108050003473 Muscarinic acetylcholine receptor Proteins 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 5
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 5
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 5
- MAKXRDHUMVJFIS-UHFFFAOYSA-N 2,2,2-trifluoro-1-(4-fluoro-1h-indol-3-yl)ethanone Chemical compound FC1=CC=CC2=C1C(C(=O)C(F)(F)F)=CN2 MAKXRDHUMVJFIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WMPDAIZRQDCGFH-UHFFFAOYSA-N 3-methoxybenzaldehyde Chemical compound COC1=CC=CC(C=O)=C1 WMPDAIZRQDCGFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 4
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 4
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 4
- 239000002585 base Substances 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 230000003920 cognitive function Effects 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N diethylamine Chemical compound CCNCC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 4
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N thionyl chloride Chemical compound ClS(Cl)=O FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QAEDZJGFFMLHHQ-UHFFFAOYSA-N trifluoroacetic anhydride Chemical compound FC(F)(F)C(=O)OC(=O)C(F)(F)F QAEDZJGFFMLHHQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- MOBRMRJUKNQBMY-UHFFFAOYSA-N 1-(chloromethyl)-2-fluorobenzene Chemical compound FC1=CC=CC=C1CCl MOBRMRJUKNQBMY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- JNWWUDOYVBWQJP-UHFFFAOYSA-N 4-(bromomethyl)-2-chloropyridine Chemical compound ClC1=CC(CBr)=CC=N1 JNWWUDOYVBWQJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DDGPQOYGZVAPAN-UHFFFAOYSA-N 4-(chloromethyl)-1-methylpyrazole;hydrochloride Chemical compound Cl.CN1C=C(CCl)C=N1 DDGPQOYGZVAPAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- BQRFHEZGEHNEMR-UHFFFAOYSA-N 4-fluoro-1-[(1-methylpyrazol-4-yl)methyl]indole-3-carboxylic acid Chemical compound CN1C=C(CN2C=C(C(O)=O)C3=C(F)C=CC=C23)C=N1 BQRFHEZGEHNEMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000003688 G-Protein-Coupled Receptors Human genes 0.000 description 3
- 108090000045 G-Protein-Coupled Receptors Proteins 0.000 description 3
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 3
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 3
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 3
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 3
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 3
- 238000004296 chiral HPLC Methods 0.000 description 3
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 3
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 3
- INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N iodomethane Chemical compound IC INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 230000003228 microsomal effect Effects 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 3
- 229910000104 sodium hydride Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000012312 sodium hydride Substances 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- LKKCSUHCVGCGFA-GEMLJDPKSA-N (1s,2s)-2-aminocyclohexan-1-ol;hydrochloride Chemical compound Cl.N[C@H]1CCCC[C@@H]1O LKKCSUHCVGCGFA-GEMLJDPKSA-N 0.000 description 2
- LRNHJBKOBOVSME-UHFFFAOYSA-N (2,3-difluoropyridin-4-yl)methanol Chemical compound OCC1=CC=NC(F)=C1F LRNHJBKOBOVSME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UFVITZSNNOQYBF-UHFFFAOYSA-N (2,5-difluoropyridin-4-yl)methanol Chemical compound OCC1=CC(F)=NC=C1F UFVITZSNNOQYBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UDDVPFLXGOBESH-UHFFFAOYSA-N (2-chloropyridin-4-yl)methanol Chemical compound OCC1=CC=NC(Cl)=C1 UDDVPFLXGOBESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DEGCNYCNQMSEKG-UHFFFAOYSA-N (3-fluoropyridin-4-yl)methanol Chemical compound OCC1=CC=NC=C1F DEGCNYCNQMSEKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DYLIWHYUXAJDOJ-OWOJBTEDSA-N (e)-4-(6-aminopurin-9-yl)but-2-en-1-ol Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2C\C=C\CO DYLIWHYUXAJDOJ-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Substances CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DDQPHBWSKUOXDI-UHFFFAOYSA-N 2,2,2-trifluoro-1-[4-fluoro-1-[(1-methylpyrazol-4-yl)methyl]indol-3-yl]ethanone Chemical compound CN1C=C(CN2C=C(C(=O)C(F)(F)F)C3=C(F)C=CC=C23)C=N1 DDQPHBWSKUOXDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000004777 2-fluoroethyl group Chemical group [H]C([H])(F)C([H])([H])* 0.000 description 2
- IIGNZLVHOZEOPV-UHFFFAOYSA-N 3-Methoxybenzyl alcohol Chemical compound COC1=CC=CC(CO)=C1 IIGNZLVHOZEOPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IAVREABSGIHHMO-UHFFFAOYSA-N 3-hydroxybenzaldehyde Chemical compound OC1=CC=CC(C=O)=C1 IAVREABSGIHHMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RHJUHVZYYIKMIK-UHFFFAOYSA-N 4-(bromomethyl)-2,5-difluoropyridine Chemical compound BrCC1=CC(=NC=C1F)F RHJUHVZYYIKMIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QVTCEZINLKFYJJ-UHFFFAOYSA-N 4-(bromomethyl)-2-fluoropyridine Chemical compound FC1=CC(CBr)=CC=N1 QVTCEZINLKFYJJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RMVYIGBZCTUZNB-UHFFFAOYSA-N 4-(chloromethyl)-3-fluoropyridine Chemical compound FC1=CN=CC=C1CCl RMVYIGBZCTUZNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RDCCTSJRSSJAFO-UHFFFAOYSA-N 4-fluoro-1h-indole-3-carboxylic acid Chemical compound C1=CC(F)=C2C(C(=O)O)=CNC2=C1 RDCCTSJRSSJAFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 102000017927 CHRM1 Human genes 0.000 description 2
- 101150073075 Chrm1 gene Proteins 0.000 description 2
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 2
- 229920000663 Hydroxyethyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PCLIMKBDDGJMGD-UHFFFAOYSA-N N-bromosuccinimide Chemical compound BrN1C(=O)CCC1=O PCLIMKBDDGJMGD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 2
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N acrylic acid group Chemical group C(C=C)(=O)O NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 2
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 238000011914 asymmetric synthesis Methods 0.000 description 2
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 2
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 2
- WGQKYBSKWIADBV-UHFFFAOYSA-N benzylamine Chemical compound NCC1=CC=CC=C1 WGQKYBSKWIADBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 230000001055 chewing effect Effects 0.000 description 2
- IJOOHPMOJXWVHK-UHFFFAOYSA-N chlorotrimethylsilane Chemical compound C[Si](C)(C)Cl IJOOHPMOJXWVHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 230000037410 cognitive enhancement Effects 0.000 description 2
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 2
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 2
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 2
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 2
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000007876 drug discovery Methods 0.000 description 2
- GXKQVOXCQOQZED-UHFFFAOYSA-N ethyl 1-methylpyrazole-4-carboxylate Chemical compound CCOC(=O)C=1C=NN(C)C=1 GXKQVOXCQOQZED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 description 2
- 230000005176 gastrointestinal motility Effects 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 150000002475 indoles Chemical class 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 description 2
- 210000004731 jugular vein Anatomy 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012280 lithium aluminium hydride Substances 0.000 description 2
- 210000001853 liver microsome Anatomy 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- KKOUHTMLFUAAGG-UHFFFAOYSA-N methyl 2-chloropyridine-4-carboxylate Chemical compound COC(=O)C1=CC=NC(Cl)=C1 KKOUHTMLFUAAGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 2
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 2
- 239000003973 paint Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- RMBAVIFYHOYIFM-UHFFFAOYSA-M sodium methanethiolate Chemical compound [Na+].[S-]C RMBAVIFYHOYIFM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- ZQRYPCAUVKVMLZ-HTQZYQBOSA-N tert-butyl (3r,4r)-4-amino-3-fluoropiperidine-1-carboxylate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N1CC[C@@H](N)[C@H](F)C1 ZQRYPCAUVKVMLZ-HTQZYQBOSA-N 0.000 description 2
- ZQRYPCAUVKVMLZ-YUMQZZPRSA-N tert-butyl (3s,4s)-4-amino-3-fluoropiperidine-1-carboxylate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N1CC[C@H](N)[C@@H](F)C1 ZQRYPCAUVKVMLZ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- JZNWQLLPLOQGOI-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 3-fluoro-4-oxopiperidine-1-carboxylate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N1CCC(=O)C(F)C1 JZNWQLLPLOQGOI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZQRYPCAUVKVMLZ-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 4-amino-3-fluoropiperidine-1-carboxylate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N1CCC(N)C(F)C1 ZQRYPCAUVKVMLZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FHMYTVUBQZSSNY-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 4-trimethylsilyloxy-3,6-dihydro-2h-pyridine-1-carboxylate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N1CCC(O[Si](C)(C)C)=CC1 FHMYTVUBQZSSNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000012549 training Methods 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QSXREDPBMQKKAY-UHFFFAOYSA-N (1-methylpyrazol-4-yl)methanol Chemical compound CN1C=C(CO)C=N1 QSXREDPBMQKKAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QBYIENPQHBMVBV-HFEGYEGKSA-N (2R)-2-hydroxy-2-phenylacetic acid Chemical compound O[C@@H](C(O)=O)c1ccccc1.O[C@@H](C(O)=O)c1ccccc1 QBYIENPQHBMVBV-HFEGYEGKSA-N 0.000 description 1
- RTHCYVBBDHJXIQ-MRXNPFEDSA-N (R)-fluoxetine Chemical compound O([C@H](CCNC)C=1C=CC=CC=1)C1=CC=C(C(F)(F)F)C=C1 RTHCYVBBDHJXIQ-MRXNPFEDSA-N 0.000 description 1
- MIOPJNTWMNEORI-GMSGAONNSA-N (S)-camphorsulfonic acid Chemical compound C1C[C@@]2(CS(O)(=O)=O)C(=O)C[C@@H]1C2(C)C MIOPJNTWMNEORI-GMSGAONNSA-N 0.000 description 1
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ATJAPDDRINWXLD-IRXDYDNUSA-N 1-[(2,5-difluoropyridin-4-yl)methyl]-4,7-difluoro-N-[(1S,2S)-2-hydroxycyclohexyl]indole-3-carboxamide Chemical compound O[C@H]1CCCC[C@@H]1NC(=O)c1cn(Cc2cc(F)ncc2F)c2c(F)ccc(F)c12 ATJAPDDRINWXLD-IRXDYDNUSA-N 0.000 description 1
- QXAGIHQGQMBZOU-IRXDYDNUSA-N 1-[(2-chloropyridin-4-yl)methyl]-4,7-difluoro-N-[(1S,2S)-2-hydroxycyclohexyl]indole-3-carboxamide Chemical compound O[C@H]1CCCC[C@@H]1NC(=O)C1=CN(CC2=CC(Cl)=NC=C2)C2=C(F)C=CC(F)=C12 QXAGIHQGQMBZOU-IRXDYDNUSA-N 0.000 description 1
- RJTJRVASUFIDQM-UHFFFAOYSA-N 1-[(4-cyano-4-pyridin-2-ylpiperidin-1-yl)methyl]-4-oxoquinolizine-3-carboxylic acid Chemical compound C=12C=CC=CN2C(=O)C(C(=O)O)=CC=1CN(CC1)CCC1(C#N)C1=CC=CC=N1 RJTJRVASUFIDQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FFGHMEKFPCGYEG-UHFFFAOYSA-N 2,3-difluoropyridine-4-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=NC(F)=C1F FFGHMEKFPCGYEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QXCOHSRHFCHCHN-UHFFFAOYSA-N 2-chloropyridine-4-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=NC(Cl)=C1 QXCOHSRHFCHCHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZBFAXMKJADVOGH-UHFFFAOYSA-N 2-fluoro-4-methylpyridine Chemical compound CC1=CC=NC(F)=C1 ZBFAXMKJADVOGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NSTREUWFTAOOKS-UHFFFAOYSA-N 2-fluorobenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1F NSTREUWFTAOOKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004105 2-pyridyl group Chemical group N1=C([*])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- POLXLLIQWDBJMD-UHFFFAOYSA-N 3-fluoropyridine-4-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=NC=C1F POLXLLIQWDBJMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AFASTNAFCDOVOI-IRXDYDNUSA-N 4,7-difluoro-1-[(2-fluoropyridin-4-yl)methyl]-N-[(1S,2S)-2-hydroxycyclohexyl]indole-3-carboxamide Chemical compound O[C@H]1CCCC[C@@H]1NC(=O)C1=CN(CC2=CC(F)=NC=C2)C2=C(F)C=CC(F)=C12 AFASTNAFCDOVOI-IRXDYDNUSA-N 0.000 description 1
- ULUURGRPKBOSTR-ROUUACIJSA-N 4,7-difluoro-1-[(3-fluoropyridin-4-yl)methyl]-N-[(1S,2S)-2-hydroxycyclohexyl]indole-3-carboxamide Chemical compound O[C@H]1CCCC[C@@H]1NC(=O)C1=CN(CC2=CC=NC=C2F)C2=C(F)C=CC(F)=C12 ULUURGRPKBOSTR-ROUUACIJSA-N 0.000 description 1
- CPHTUGZEDBZQGG-RXVVDRJESA-N 4,7-difluoro-N-[(1S,2S)-2-hydroxycyclohexyl]-1-[(1-methylindazol-3-yl)methyl]indole-3-carboxamide Chemical compound CN1N=C(CN2C=C(C(=O)N[C@H]3CCCC[C@@H]3O)C3=C(F)C=CC(F)=C23)C2=C1C=CC=C2 CPHTUGZEDBZQGG-RXVVDRJESA-N 0.000 description 1
- YSAAIAXTTOSCFA-ROUUACIJSA-N 4,7-difluoro-N-[(1S,2S)-2-hydroxycyclohexyl]-1-[(2-methylsulfanylpyridin-4-yl)methyl]indole-3-carboxamide Chemical compound CSC1=NC=CC(CN2C=C(C(=O)N[C@H]3CCCC[C@@H]3O)C3=C(F)C=CC(F)=C23)=C1 YSAAIAXTTOSCFA-ROUUACIJSA-N 0.000 description 1
- ZWKIJOPJWWZLDI-UHFFFAOYSA-N 4-fluoro-1h-indole Chemical compound FC1=CC=CC2=C1C=CN2 ZWKIJOPJWWZLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000002659 Amyloid Precursor Protein Secretases Human genes 0.000 description 1
- 108010043324 Amyloid Precursor Protein Secretases Proteins 0.000 description 1
- 102000009091 Amyloidogenic Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010048112 Amyloidogenic Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 239000004342 Benzoyl peroxide Substances 0.000 description 1
- OMPJBNCRMGITSC-UHFFFAOYSA-N Benzoylperoxide Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(=O)OOC(=O)C1=CC=CC=C1 OMPJBNCRMGITSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N Busulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000489438 Cinchona pubescens Species 0.000 description 1
- IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N Cyclic adenosine monophosphate Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=CN=C2N)=C2N=C1 IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N Deuterium Chemical compound [2H] YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N Ethyl urethane Chemical compound CCOC(N)=O JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004354 Hydroxyethyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000012448 Lithium borohydride Substances 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 239000012359 Methanesulfonyl chloride Substances 0.000 description 1
- 229940121743 Muscarinic receptor agonist Drugs 0.000 description 1
- 101100136062 Mycobacterium tuberculosis (strain ATCC 25618 / H37Rv) PE10 gene Proteins 0.000 description 1
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PHSPJQZRQAJPPF-UHFFFAOYSA-N N-alpha-Methylhistamine Chemical compound CNCCC1=CN=CN1 PHSPJQZRQAJPPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007832 Na2SO4 Substances 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012124 Opti-MEM Substances 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000233805 Phoenix Species 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-N R-2-phenyl-2-hydroxyacetic acid Natural products OC(=O)C(O)C1=CC=CC=C1 IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 1
- 108091027981 Response element Proteins 0.000 description 1
- 240000005578 Rivina humilis Species 0.000 description 1
- KJTLSVCANCCWHF-UHFFFAOYSA-N Ruthenium Chemical compound [Ru] KJTLSVCANCCWHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010039424 Salivary hypersecretion Diseases 0.000 description 1
- 241000144290 Sigmodon hispidus Species 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004809 Teflon Substances 0.000 description 1
- 229920006362 Teflon® Polymers 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N Tritium Chemical compound [3H] YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- IVOMOUWHDPKRLL-UHFFFAOYSA-N UNPD107823 Natural products O1C2COP(O)(=O)OC2C(O)C1N1C(N=CN=C2N)=C2N=C1 IVOMOUWHDPKRLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 230000008856 allosteric binding Effects 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001414 amino alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 210000004727 amygdala Anatomy 0.000 description 1
- 230000003942 amyloidogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 229940054051 antipsychotic indole derivative Drugs 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003542 behavioural effect Effects 0.000 description 1
- SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N benzenesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940092714 benzenesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid group Chemical group C(C1=CC=CC=C1)(=O)O WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019400 benzoyl peroxide Nutrition 0.000 description 1
- 125000000440 benzylamino group Chemical group [H]N(*)C([H])([H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000008499 blood brain barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 210000001218 blood-brain barrier Anatomy 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 1
- 125000001246 bromo group Chemical group Br* 0.000 description 1
- RRKTZKIUPZVBMF-UHFFFAOYSA-N brucine Natural products C1=2C=C(OC)C(OC)=CC=2N(C(C2)=O)C3C(C4C5)C2OCC=C4CN2C5C31CC2 RRKTZKIUPZVBMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RRKTZKIUPZVBMF-IBTVXLQLSA-N brucine Chemical compound O([C@@H]1[C@H]([C@H]2C3)[C@@H]4N(C(C1)=O)C=1C=C(C(=CC=11)OC)OC)CC=C2CN2[C@@H]3[C@]41CC2 RRKTZKIUPZVBMF-IBTVXLQLSA-N 0.000 description 1
- 230000005587 bubbling Effects 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- FJDQFPXHSGXQBY-UHFFFAOYSA-L caesium carbonate Chemical compound [Cs+].[Cs+].[O-]C([O-])=O FJDQFPXHSGXQBY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000024 caesium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011089 carbon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 229950005499 carbon tetrachloride Drugs 0.000 description 1
- 238000012754 cardiac puncture Methods 0.000 description 1
- 208000015114 central nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 description 1
- 230000001149 cognitive effect Effects 0.000 description 1
- 230000003931 cognitive performance Effects 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 229940095074 cyclic amp Drugs 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- 229910052805 deuterium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000011979 disease modifying therapy Methods 0.000 description 1
- 230000007783 downstream signaling Effects 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 230000036267 drug metabolism Effects 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- KACZQOKEFKFNDB-UHFFFAOYSA-N ethyl 1h-pyrazole-4-carboxylate Chemical compound CCOC(=O)C=1C=NNC=1 KACZQOKEFKFNDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003191 femoral vein Anatomy 0.000 description 1
- 229960002464 fluoxetine Drugs 0.000 description 1
- 238000001640 fractional crystallisation Methods 0.000 description 1
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 229960004198 guanidine Drugs 0.000 description 1
- PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N guanidinium chloride Chemical compound [Cl-].NC(N)=[NH2+] PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- JYVHOGDBFNJNMR-UHFFFAOYSA-N hexane;hydrate Chemical compound O.CCCCCC JYVHOGDBFNJNMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001320 hippocampus Anatomy 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 235000019447 hydroxyethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 230000006951 hyperphosphorylation Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 229910052738 indium Inorganic materials 0.000 description 1
- APFVFJFRJDLVQX-UHFFFAOYSA-N indium atom Chemical compound [In] APFVFJFRJDLVQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 125000002346 iodo group Chemical group I* 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000007787 long-term memory Effects 0.000 description 1
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 1
- 229960002510 mandelic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000015654 memory Effects 0.000 description 1
- QARBMVPHQWIHKH-UHFFFAOYSA-N methanesulfonyl chloride Chemical compound CS(Cl)(=O)=O QARBMVPHQWIHKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 210000001589 microsome Anatomy 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 239000000472 muscarinic agonist Substances 0.000 description 1
- PSZYNBSKGUBXEH-UHFFFAOYSA-N naphthalene-1-sulfonic acid Chemical compound C1=CC=C2C(S(=O)(=O)O)=CC=CC2=C1 PSZYNBSKGUBXEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001734 parasympathetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 210000001428 peripheral nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 150000003003 phosphines Chemical class 0.000 description 1
- 229940068918 polyethylene glycol 400 Drugs 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- LPNYRYFBWFDTMA-UHFFFAOYSA-N potassium tert-butoxide Chemical compound [K+].CC(C)(C)[O-] LPNYRYFBWFDTMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000012746 preparative thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N propylene Natural products CC=C QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004805 propylene group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([*:1])C([H])([H])[*:2] 0.000 description 1
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000011946 reduction process Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 229910052703 rhodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010948 rhodium Substances 0.000 description 1
- MHOVAHRLVXNVSD-UHFFFAOYSA-N rhodium atom Chemical compound [Rh] MHOVAHRLVXNVSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052707 ruthenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000026451 salivation Diseases 0.000 description 1
- 239000012363 selectfluor Substances 0.000 description 1
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000003625 skull Anatomy 0.000 description 1
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 1
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000012321 sodium triacetoxyborohydride Substances 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 230000000707 stereoselective effect Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000000547 structure data Methods 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- ZQRYPCAUVKVMLZ-JGVFFNPUSA-N tert-butyl (3s,4r)-4-amino-3-fluoropiperidine-1-carboxylate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N1CC[C@@H](N)[C@@H](F)C1 ZQRYPCAUVKVMLZ-JGVFFNPUSA-N 0.000 description 1
- JXBLMDWEOQDVAC-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 4-(benzylamino)-3-fluoropiperidine-1-carboxylate Chemical compound FC1CN(C(=O)OC(C)(C)C)CCC1NCC1=CC=CC=C1 JXBLMDWEOQDVAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ROUYFJUVMYHXFJ-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 4-oxopiperidine-1-carboxylate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N1CCC(=O)CC1 ROUYFJUVMYHXFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N tetrachloromethane Chemical compound ClC(Cl)(Cl)Cl VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N tetramethylsilane Chemical compound C[Si](C)(C)C CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 description 1
- 230000002110 toxicologic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000027 toxicology Toxicity 0.000 description 1
- 229910052722 tritium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
- A61K31/415—1,2-Diazoles
- A61K31/4155—1,2-Diazoles non condensed and containing further heterocyclic rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
- C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
- C07D403/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
- A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
- A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
- C07D401/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
- C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
- C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
- C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
- C07D417/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
- C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Indole Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к соединению формулы (I) или его стереоизомерам и фармацевтически приемлемым солям в качестве положительных аллостерических модуляторов мускаринового рецептора M1. Это изобретение также относится к способам получения таких соединений и к фармацевтическим композициям, включающим такие соединения. Соединения согласно этому изобретению могут быть использованы в лечении различных нарушений, связанных с мускариновым рецептором M1 (формула I)
Description
Область изобретения
Изобретение относится к соединениям формулы (I), или их изотопным формам, стереоизомерам или фармацевтически приемлемым солям, в качестве положительных аллостерических модуляторов мускаринового рецептора M1 (M1 PAMs). В изобретении также описан способ получения таких соединений, фармацевтические композиции, включающие такие соединения, и их применение.
Уровень техники
Мускариновые рецепторы ацетилхолина (mAChRs), которые принадлежат к классу А семейства связанных с G-белком рецепторов (GPCRs), широко экспрессируются по всему организму. Пять подтипов, названных М1-М5, отвечающих на эндогенный нейромедиатор ацетилхолин (ACh), были идентифицированы на сегодняшний день. Они играют главную роль в регуляции активности многих важных функций центральной и периферической нервной системы, включая когнитивную функцию. M1, M3 и М5 связываются с Gq, тогда как М2 и М4 связываются через Gi/o с даунстрим-сигнальными путями и ассоциированными эффекторными системами (Critical Reviews in Neurobiology, 1996, 10, 69-99; Pharmacology & Therapeutics, 2008, 117, 232-243). M2 и М3 высоко экспрессируются на периферии, и известно, что они участвуют в моторике желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) и парасимпатических реакциях, таких как слюнотечение (Life Sciences, 1993, 52, 441-448). Мускариновый рецептор M1 преобладающе экспрессируется в таких отделах головного мозга как кора, гиппокамп и миндалевидное тело, участвующие в когнитивной деятельности, и поэтому ожидается, что селективная активация рецептора M1 повысит когнитивную производительность (Annals of Neurology, 2003, 54, 144-146).
Ксаномелин, агонист мускаринового рецептора ацетилхолина с приемлемой селективностью в отношении подтипов M1 и М4, показал значительное влияние на когнитивную функцию в клиническом тестировании болезни Альцгеймера (AD) (Alzheimer Disease and Associated Disorders, 1998, 12(4), 304312), несмотря на то что побочные эффекты со стороны желудочно-кишечного тракта привели к высокому проценту отсеявшихся в клинических испытаниях. Существует высокая степень консервативности между подтипами мускаринового рецептора в их ортостерических участках связывания ацетилхолинового лиганда, мешающая идентифицировать селективный агонист M1.
Для того чтобы обойти эту проблему селективности и безопасности, дополнительный вариант состоит в разработке M1 PAMs, которые действуют в менее конервативном аллостерическом связывающем участке. Merck сообщил о разработке M1 РАМ, PQCA (1-{[4-циано-4-(пиридин-2-ил)пиперидин-1ил]метил}-4-оксо-4Н-хинолизин-3-карбоновой кислоты). Это соединение очень селективно в отношении M1 по сравнению с другими подтипами мускаринового рецептора, и было обнаружено, что оно является эффективным в нескольких преклинических моделях когнитивной функции (Psychopharmacology, 2013, 225(1), 21-30) без побочных эффектов со стороны желудочно-кишечного тракта в дозах, равных или меньших, чем пятикратная минимальная эффективная доза, необходимая для улучшения когнитивной функции. В преклинических исследованиях было продемонстрировано, что активация M1 увеличивает концентрацию нейромедиатора ацетилхолина в мозге. Кроме того, активация M1 имеет потенциал в качестве модифицирующей заболевание терапии для лечения AD как за счет смещения процессинга АРР к неамилоидогенному пути α-секретазы, так и путем уменьшения гиперфосфорилирования tau. Положительные аллостерические модуляторы на рецепторе M1 продемонстрировали увеличение генерации sAPPa in vitro (The Journal of Neuro science, 2009, 29, 14271-14286). Поэтому M1 PAMs обеспечивают подход как для симптоматического, так и для модифицирующего заболевание лечения когнитивных расстройств в случае AD и шизофрении.
В публикациях заявок на патент РСТ WO 2015049574 A1, WO 2015044072 A1, WO 2015028483, WO 2007067489 и WO 2011149801 раскрыты некоторые M1 РАМ соединения. В заявке на патент РСТ WO 2001058869 и патенте США US 4616009 раскрыты некоторые соединения индола, пригодные для использования в лекарственных средствах. Хотя несколько M1 PAMs были раскрыты в литературе, на настоящий момент на рынке нее существует никакого лекарственного средства, действующего как M1 РАМ.
Для лекарственных с намеченным действием на центральную нервную систему (ЦНС) соединение должно преодолеть гематоэнцефалический барьер, или, другими словами, соединения должны обладать свойствами проникновения в мозг. Распространена гипотеза о том, что несвязанное, или свободное, лекарственное средство доступно для взаимодействия с фармакологическими и токсикологическими мишенями в мозге. Эта гипотеза упоминается как гипотеза свободного лекарственного средства в фармакокинетике (Current Opinion in Drug Discovery & Development, 2005, 8, 505-512; Expert Opinion on Drug Discovery, 2007, 2, 51-64; Pharmaceutical Research, 2008, 25, 1737-1750; Current Drug Metabolism, 2008, 9, 4659; Journal of Pharmaceutical Sciences, 2010, 99, 1107-1122).
Несмотря на то что в предшествующем уровне техники раскрыты M1 РАМ соединения, которые могут быть использованы в лечении заболеваний, связанных с ЦНС, существует проблема плохого проникновения в мозг и доступности свободной фракции. Поэтому существует невосполненная потребность в открытии и разработке новых M1 PAMs с хорошим проникновением в мозг и соответствующей свободной фракцией. Такие соединения могут иметь эффективность в намного более низких дозах, таким образом, увеличивая коэффициент безопасности по отношению к эффективности дозы. M1 РАМ соединения согласно настоящему изобретению решают проблему проникновения в мозг, а также доступности
- 1 033826 свободной фракции в мозге, и таким образом, являются очень эффективными при лечении нарушения, связанного с ЦНС.
Сущность изобретения
В первом аспекте изобретение относится к соединению формулы (I), являющемуся РАМ мускаринового рецептора M1
в которой
R1 обозначает
но
R2 обозначает
причем * обозначает точку присоединения;
R3 является фтором или водородом;
R4 является галогеном, -S-CH3 или водородом;
R5 является -СН3, -CH2CH2F или водородом; и а=1 или 2;
или к его изотопной форме, стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к способам получения соединения формулы (I) или его стереоизомера и фармацевтически приемлемой соли.
В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество по меньшей мере одного соединения формулы (I) или его стереоизомера и фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемые эксципиенты или носители.
В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I) или его стереоизомеру и фармацевтически приемлемой соли для применения в качестве M1 РАМ.
В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I) или его стереоизомеру и фармацевтически приемлемой соли для применения в лечении различных нарушений, выбранных из AD, шизофрении, когнитивных нарушений, боли или нарушений сна.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения нарушений, связанных с мускариновым рецептором M1, включающему введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) или его стереоизомера и фармацевтически приемлемой соли.
В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I) или стереоизомеров и фармацевтически приемлемых солей для получения лекарственного средства для лечения нарушений, связанных с мускариновым рецептором M1.
В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I) для применения в положительной аллостерической модуляции мускаринового рецептора M1.
Краткое описание чертежей
Фиг. 1 - эффект тестируемого соединения в контекстной задаче выработки условного рефлекса на
- 2 033826 страх;
фиг. 2 - эффект тестируемого соединения на модуляцию мозгового кровообращения во фронтальной коре.
Подробное описание изобретения
Если не указано иное, следующие термины, используемые в описании и формуле изобретения, имеют значения, приведенные ниже.
Термин галоген означает фтор, хлор, бром или йод.
Фраза терапевтически эффективное количество определяется как количество соединения согласно настоящему изобретению, которое (i) лечит определенное заболевание, состояние или нарушение, (ii) устраняет один или несколько симптомов определенного заболевания, состояния или нарушения, (iii) задерживает появление одного или более симптомов определенного заболевания, состояния или нарушения, описанного здесь.
Термин изотопная форма в рамках изобретения отсылает к соединению формулы (I), в котором один или более атомов соединения формулы (I) заменены их соответствующими изотопами. Например, изотопы водорода включают 2Н (дейтерий) и 3Н (тритий).
Термин стереоизомеры в рамках изобретения относится к изомерам соединения формулы (I), отличающимся по расположению их атомов в пространстве. Соединения, раскрытые здесь, могут существовать как единственные стереоизомеры, рацематы и/или смеси энантиомеров и/или диастереомеров. Все такие единственные стереоизомеры, рацематы и их смеси находятся быть в рамках настоящего изобрете ния.
Термин фармацевтически приемлемая соль в рамках изобретения относится к солям активного соединения, т.е. соединения формулы I, и ее получают реакцией с подходящей кислотой или производным кислоты в зависимости от конкретных заместителей, находящихся на соединениях, описанных здесь.
В заявке на патент WO 2015044072 A1 раскрыты производные индола в качестве соединений M1 РАМ. На основе доступных данные in vitro, раскрытых в этом патенте, три из самых мощных соединений (пример номер 30, 76 и 77) были синтезированы в наших лабораториях и протестированы в отношении их фармакокинетических свойств и свойств проникновения в мозг у крыс Wistar. Было обнаружено, что все три соединения имели слабое проникновение в мозг. Это делает эти соединения менее идеальными для лечения расстройств центральной нервной системы. Соединения M1 РАМ согласно настоящему изобретению имеют проникновение в мозг и/или свободную фракцию, доступную в мозге, которые делают их полезными соединениями для дальнейшей разработки для лечения расстройств центральной нервной системы.
Варианты осуществления.
Настоящее изобретение охватывает все соединения, описанные соединением формулы (I), без ограничения, однако предпочтительные аспекты и элементы изобретения обсуждаются здесь в форме сле дующих вариантов осуществления.
В одном варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы (I), в которой R1 обозначает
НО ;
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы (I), в которой R2 обозначает
в которых * обозначает точку присоединения; R4, R5 и а имеют значения, определенные в первом аспекте; или к его изотопной форме, стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли.
В другом варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы (I), в которой
R2 обозначает
в которых * обозначает точку присоединения; R4, R5 и а имеют значения, определенные в первом
- 3 033826 аспекте; или к его изотопной форме, стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли.
В другом варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы (I), в которой
R2 обозначает
в котором * обозначает точку присоединения; R4 и а имеют значения, определенные в первом аспекте; или к его изотопной форме, стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли.
В другом варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы (I), в которой
R2 обозначает
в котором * обозначает точку присоединения; R5 имеет значения, определенные в первом аспекте; или к его изотопной форме, стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли.
В другом варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы (I), в которой R3 является фтором; или к его изотопной форме, стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли.
В другом варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы (I), в которой R1 обозначает
R2 обозначает
в которых * обозначает точку присоединения; R4 и а имеют значения, определенные в первом аспекте; или к его изотопной форме, стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы (I), в которой
R1 обозначает
R2 обозначает
в которых * обозначает точку присоединения; R5 имеет значения, определенные в первом аспекте; или к его изотопной форме, стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли.
В еще одном варианте осуществления репрезентативные соединения согласно настоящему изобре тению включают, но не ограничени ими, следующие соединения
- 4 033826
N-[ (IS, 2S)-2-гидроксициклогексил]-1-(1-метил-1Н-пиразол-4илметил)-4-фтор-ΙΗ-индол-З-карбоксамид;
N-[ (IS, 2S) -2-гидроксициклогексил]-1-(2-хлорпиридин-4илметил)-4-фтор-ΙΗ-индол-З-карбоксамид;
N-[ (1R, 2R)-2-гидроксициклогексил]-1-(1-метил-1Н-пиразол-4илметил)-4-фтор-ΙΗ-индол-З-карбоксамид;
N-[ (IS,2S)-2-гидроксициклогексил]-1-(1-метил-1Н-индазол-3илметил)-4,7-дифтор-1Н-индол-3-карбоксамид;
N-[ (IS, 2S)-2-гидроксициклогексил]-1-(1-метил-1Н-пиразол-4илметил)-4,7-дифтор-1Н-индол-3-карбоксамид;
N- [ (IS,2S)-2-гидроксициклогексил]-1-(2-хлорпиридин-4илметил)-4,7-дифтор-1Н-индол-3-карбоксамид;
N-[ (IS,2S)-2-гидроксициклогексил]-1-(2-фторпиридин-4илметил)-4-фтор-ΙΗ-индол-З-карбоксамид;
N-[ (IS, 2S)-2-гидроксициклогексил]-1-(2-фторпиридин-4илметил)-4,7-дифтор-1Н-индол-3-карбоксамид;
N-[ (IS,2S)-2-гидроксициклогексил]-1-(З-фторпиридин-4илметил)-4-фтор-ΙΗ-индол-З-карбоксамид;
N-[ (IS,2S)-2-гидроксициклогексил]-1-(5-фторпиридин-4илметил)-4,7-дифтор-1Н-индол-3-карбоксамид;
N-[ (IS,2S)-2-гидроксициклогексил]-1-(2,5-дифторпиридин-4илметил)-4-фтор-ΙΗ-индол-З-карбоксамид;
N-[(IS,2S)-2-гидроксициклогексил]-1-(2,5-дифторпиридин-4илметил)-4,7-дифтор-1Н-индол-3-карбоксамид;
N-[(IS,2S)-2-гидроксициклогексил]-1-(2,З-дифторпиридин-4илметил)-4-фтор-ΙΗ-индол-З-карбоксамид;
N-[ (IS,2S)-2-гидроксициклогексил]-1-(1-пиридин-4-илметил)4-фтор-ΙΗ-индол-З-карбоксамид;
N-[ (IS,2S)-2-гидроксициклогексил]-1-(1Н-пиразол-4-илметил)4-фтор-ΙΗ-индол-З-карбоксамид;
N-[ (IS,2S)-2-гидроксициклогексил]-1-(2-бромтиазол-5илметил)-4-фтор-ΙΗ-индол-З-карбоксамид;
N-[ (IS,2S)-2-гидроксициклогексил]-1-(1-этил-5-метил-1Нпиразол-4-илметил)-4-фтор-ΙΗ-индол-З-карбоксамид;
N-[ (IS,2S)-2-гидроксициклогексил]-1-(бензотиазол-6илметил)-4-фтор-ΙΗ-индол-З-карбоксамид;
N-[(IS,2S)-2-гидроксициклогексил]-1-(1-(2-фторэтил)-1Нпиразол-4-илметил)-4-фтор-ΙΗ-индол-З-карбоксамид;
N-[ (IS, 2S)-2-гидроксициклогексил]-1-(2-метилсульфанилпиридин-4-илметил)-4,7-дифтор-1Н-индол-3-карбоксамид;
N-[(IS,2S)-2-гидроксициклогексил]-1-(2-метилсульфанилпиридин-4-илметил)-4-фтор-ΙΗ-индол-З-карбоксамид;
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу получения соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли. Способ получения соединения формулы (I) приведен на общих схемах 1 и 2, на которых всех группы имеют значения, определенные выше.
Общая схема 1 изображает способы получения соединения формулы (I), в которой R1, R2 и R3 имеют значения, определенные выше.
Общая схема-I
- 5 033826
Стадия 1. Получение соединения формулы В.
Соединение формулы А вводят в реакцию с ангидридом трифторуксусной кислоты в растворителе, выбранном из DMF, при комнатной температуре в течение 2-4 ч для получения соединения формулы В.
Стадия 2. Получение соединения формулы С.
Соединение формулы В, полученное на стадии 1, вводят в реакцию с кАЩ-галогеном или R2CH2O-SO2-CH3 в присутствии карбоната калия, гидрида натрия, карбоната цезия или трет-бутоксида калия в растворителе, выбранном из DMF, THF или ацетонитрила, в течение ночи при комнатной температуре для получения соединения формулы С.
Стадия 3. Получение соединения формулы D.
Соединение формулы С, полученное на стадии 2, вводят в реакцию с водным раствором гидроксида натрия или гидроксида калия при 50-70°C в течение 16-18 ч для получения соединения формулы D.
Стадия 4. Получение соединения формулы (I).
Соединением формулы D, полученное на стадии 3, вводят в реакцию сочетания с амином R1NH2.HC1 в присутствии реагента для реакций сочетания, HATU, DCC или EDC и основания, DIPEA в растворителе, выбранном из DMF, THF, дихлорметана или 1,4-диоксана, при комнатной температуре в течение ночи для получения соединения формулы (I).
Стадия 5. Получение соединения формулы Е.
Соединение формулы В, полученное на стадии 1, вводят в реакцию с водным раствором гидроксида натрия при 50-70°C в течение 16-18 ч для получения соединения формулы Е.
Стадия 6. Получение соединения формулы F.
Соединение формулы Е, полученное на стадии 5, вводят в реакцию сочетания с амином R1-NH2.HC1 в присутствии реагента для реакций сочетания, HATU, DCC, или EDC и основания, DIPEA в растворителе, выбранном из DMF, THF, при комнатной температуре в течение ночи для получения соединения формулы F.
Стадия 7. Получение соединения формулы (I).
Соединение формулы F, полученное на стадии 6, вводят в реакцию с кАЩ-галогеном или R2CH2O-SO2-CH3 в присутствии карбоната калия и йодида калия в растворителе, выбранном из DMF, в течение ночи при комнатной температуре для получения соединения формулы (I).
Стадия 8. Получение соединения формулы (I) (в которой R2 обозначает
R4 обозначает -S-CH3).
- 6 033826
Соединение формулы (I), полученное на стадиях 4 и 7 (в котором, R2 обозначает
R4 обозначает F), вводят в реакцию с тиометилатом натрия в растворителе, выбранном из DMF или THF, в диапазоне температур 55-65°C в течение 2-5 ч для получения соединения формулы (I) (в которой R2 обозначает
R4 обозначает -S-CH3).
Получение фармацевтически приемлемой соли соединения формулы (I).
Соединение формулы (I) может в случае необходимости быть преобразовано в его фармацевтически приемлемую соль реакцией с подходящей кислотой или производным кислоты.
Подходящие фармацевтически приемлемые соли будут очевидны для специалиста в данной области техники. Соли могут быть образованы с неорганическими кислотами, например соляной, бромистоводородной, серной, азотной и фосфорной кислотой, или с органическими кислотами, например щавелевой, янтарной, малеиновой, уксусной, фумаровой, лимонной, яблочной, виннокаменной, бензойной, птолуиловой, п-толуолсульфоновой, бензолсульфоновой кислотой, метансульфоновой или нафталинсульфоновой кислотой.
Схема 2 описывает способ получения соединения формулы (Ia) и (Ib), в которой R2 и R3 имеют зна чения, определенные выше.
Схема 2
Стадия 1. Получение соединения формулы G.
Соединение формулы D (приведенное на схеме 1) вводят в реакцию с трет-бутил-4-амино-3фторпиперидин-1-карбоксилатом путем осуществления процедуры, как описано на стадии 4 схемы 1, для получения соединения формулы G.
Стадия 2. Получение соединения формулы (Ia).
Соединение формулы G (полученное на предыдущей стадии) вводят в реакцию с эфирной HCl в растворителях, выбранных из DCM и т.п., в диапазоне температур 25-30°C в течение 2-4 ч для получения соединения формулы (Ia).
Стадия 3. Получение соединения формулы (Ib).
Соединение формулы (Ia) (полученное на предыдущей стадии) подвергали регулированию рН до 78 с использованием бикарбоната натрия в воде в диапазоне температур 5-10°C для получения соединения формулы (Ib).
В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции соедине- 7 033826 ния формулы (I). Для использования соединения формулы (I) или его стереоизомеров и фармацевтически приемлемых солей в терапии, их обычно составляют в фармацевтическую композицию в соответствии со стандартной фармацевтической практикой.
Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению могут быть составлены стандартным образом с использованием одного или более фармацевтически приемлемых эксципиентов. Фармацевтически приемлемый эксципиент является носителем или разбавителем. Таким образом, активные соединения по изобретению могут быть составлены для перорального введения. Такие фармацевтические композиции и способы их получения известны в данной области техники.
Доза активных соединений может варьировать в зависимости от таких факторов как возраст и масса тела пациента, природа и серьезность заболевания, подвергаемого лечению, и других таких факторов. Поэтому любая ссылка относительно фармакологически эффективного количества соединений общей формулы (I), их стереоизомеров и фармацевтически приемлемых солей относится к вышеупомянутым факторам.
В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения нарушений, связанных с мускариновыми рецепторами M1.
В другом варианте осуществления нарушения, связанные с мускариновыми рецепторами M1, выбраны из группы, состоящей из AD, шизофрении, когнитивных нарушений, боли или нарушений сна.
Коммерческие реактивы использовались без дополнительной очистки. RT определяют как диапазон температур окружающей среды, как правило от 25 до 35°C. Все масс-спектры были получены с использованием условий ESI, если не указано иное. Спектры 1Н-ЯМР регистрировали при 400 МГц на инструменте Bruker. Дейтеризованный хлороформ, метанол или диметил сульфоксид использовались в качестве растворителя. Тетраметилсилан (TMS) использовался в качестве внутреннего стандарта. Значения химического сдвига выражают в частях на миллион (δ). Следующие сокращения используются для мультиплетности сигналов ЯМР: с - синглет, с ушир. - уширенный синглет, д - дублет, т - триплет, к - квартет, квинт. - квинтет, г - гептет, дд - дублет дублетов, дт - дублет триплетов, тт - триплет триплетов, м - мультиплет. Хроматография относится к колоночной хроматографии, осуществляемой с использованием силикагеля 100-200 меш и проводимой в условиях давления азота (флэш-хроматография).
Стереоизомеры, как правило, обычно получают как рацематы, которые могут быть разделены на оптически активные изомеры известным по сути образом. В случае соединений формулы (I), имеющих асимметрический атом углерода, настоящее изобретение относится к D-формам, L-формам и D,Lсмесям, и в случае соединения формулы (I), содержащего множество асимметрических атомов углерода, к диастереомерным формам, и изобретение распространяется на каждую из этих стереоизомерных форм и на их смеси, включая рацематы. Такие соединения общей формулы (I), имеющие асимметрический углерод и как правило полученные как рацематы, могут быть отделены один от другого обычными способами, или любой данный изомер может быть получен стереоспецифическим или асимметричным синтезом. Однако также возможно изначально использовать оптически активное соединение, соответственно, в качестве конечного соединения тогда получают оптически активное энантиомерное или диастереомерное соединение.
Стереоизомеры соединений общей формулы (I) могут быть получены одним или более путями, представленными ниже:
i) один или более реактивов может использоваться в их оптически активной форме;
ii) оптически чистый катализатор или хиральные лиганды вместе с металлическим катализатором могут использоваться в процессе восстановления. Металлический катализатор может быть родием, рутением, индием и т.п. Хиральные лиганды могут предпочтительно быть хиральными фосфинами (Principles of Asymmetric synthesis, J.E. Baldwin Ed., Tetrahedron series, 14, 311-316);
iii) смесь стереоизомеров может быть разделена стандартными способами, такими как формирование диастереомерной соли с хиральными кислотами или хиральными аминами, или хиральными аминоспиртами, хиральными аминокислотами. Полученная смесь диастереомеров может затем быть разделена такими способами как фракционная кристаллизация, хроматография и т.п., с последующей дополнительной стадией выделения оптически активного продукта путем гидролиза производного;
iv) смесь стереоизомеров может быть разделена стандартными способами, такими как разделение с использованием микроорганизмов, разделение диастереомерных солей, образованных с хиральными кислотами или хиральными основаниями.
Хиральные кислоты, которые могут использоваться, могут быть винной кислотой, миндальной кислотой, молочной кислотой, камфорсульфоновой кислотой, аминокислотами и т.п. Хиральные основания, которые могут использоваться, могут быть алкалоидами хинного дерева, бруцином или основной аминокислотой, такой как лизин, аргинин и т.п. В случае соединений общей формулы (I), содержащих геометрическую изомерию, настоящее изобретение относится ко всем этим геометрическим изомерам.
Способы хиральной ВЭЖХ.
Способ А.
Колонка: CHIRALPAK AD-H (250x4,6) мм 5 мкм; растворитель А=50,0% МеОН, В=49,9% ACN,
- 8 033826
С=0,1% DEA; изократический поток=1,5 мл/мин. Т=25°С.
Способ В.
Колонка: CHIRALPAK AD-H (250x4,6) мм 5 мкм; растворитель А=99,9% МеОН, В=0,1% DEA; изократический поток=0,8 мл/мин. T=25°C.
Используются следующие сокращения:
ACN: ацетонитрил
СС14: Тетрахлорметан
CDCI3: Дейтеризованный хлороформ
DCM: дихлорметан
DCC: N,N'-дициклогексилкарбодиимид
DEA: диэтиламин
DIPEA: N,N-диизопропилэтиламин
DMF: N,N-диметилформамид
DMSO: диметил сульфоксид
EDC: Этилендихлорид
HATU: 2-(7-аза-1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3тетраметилуроний гексафторфосфат
НС1: Соляная кислота
К2СО3: Карбонат калия
МеОН: метанол
NaBH4: Боргидрид натрия
NaOH: Гидроксид натрия
Na2SO4: Сульфат натрия
RT: Комнатная температура (25-30 °C)
THF: тетрагидрофуран
Примеры
Соединения согласно изобретению получали согласно следующим экспериментальным процедурам с использованием подходящих материалов и условий. Следующие примеры приведены только в качестве иллюстрации, но не ограничения объема изобретения.
Получение 1. 4-Хлорметил-1-метил-1Н-пиразол гидрохлорид (I-1)
N N HCI \
Стадия 1. К раствору этилового эфира 1Н-пиразол-4-карбоновой кислоты (35,0 г, 0,25 моль) в THF (100 мл) добавляли суспензию гидрида натрия (17,38 г, 0,43 моль) в растворе в THF (100 мл) под N2 при 25°С и перемешивали в течение одного часа. Метил йодид (24 мл, 0,38 родинки) добавляли при комнатной температуре и реакционную смесь нагревали до 60-65°С в течение 6 ч. Реакционную смесь вливали в воду со льдом (200 мл) и экстрагировали этилацетатом (100 млх3). Объединенную органическую фазу промывали водой (50 мл), солевым раствором (50 мл), высушивали над Na2SO4 и концентрировали под вакуумом для получения этил-1-метил-1Н-пиразол-4-карбоксилата.
Выход: 32,36 г (83%); Ή-ЯМР (CDCi3, 400 МГц) δ ppm: 1,30-1,33 (с, 3H), 3,91 (с, 3H), 4,25-4,30 (к, 2Н), 7,83 (с, 1Н), 7,88 (с, 1Н); Масса (m/z): 155,0 (М+Н)+.
Стадия 2. Алюмогидрид лития (320 мл, 0,32 моль, 1М в THF) добавляли к охлажденному раствору этил-1-метил-1Н-пиразол-4-карбоксилата (32,34 г, 0,21 моль) в THF (300 мл) при перемешивании в атмосфере N2. Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали далее в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждали до 0°С, разбавляли этилацетатом и обрабатывали водой (25 мл). Смесь фильтровали через слой целита и концентрировали под вакуумом для получения сырого соединения, которое затем очищали флэш-хроматографией (этилацетат:метанол (98:2)) с получением (1-метил-1Нпиразол-4-ил)метанола.
Выход: 14,66 г (62%); Ή-ЯМР (CDCi3, 400 МГц) δ ppm: 1,98 (с ушир., 1Н), 3,88 (с, 3H), 4,56 (с, 2Н), 7,36 (с, 1Н), 7,45 (с, 1Н); масса (m/z): 113,1 (М+Н)+.
Стадия 3. К охлажденному раствору (1-метил-1Н-пиразол-4-ил)метанола (8,61 г, 0,076 моль) в DCM (100 мл) в атмосфере N2 добавляли по каплям тионилхлорид (8,7 мл, 0,12 моль). Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали под вакуумом при 23-25°C для получения целевого соединения.
- 9 033826
Выход: 12,77 г (99%); 1Н-ЯМР (DMSO-d6, 400 МГц) δ ppm: 3,85 (с, 3H), 4,67 (с, 2Н), 4,76-4,79 (t,
1Н), 4,88 (с ушир., 1Н), 7,47 (с, 1Н), 7,78 (с, 1Н).
Получение 2. 4-Бромметил-2-фторпиридин (1-2)
К раствору 2-фтор-4-метилпиридина (75,0 г, 0,675 моль) в CCl4 (200 мл) в атмосфере N2 при 25°C добавляли N-бромсукцинимид (160 г, 0,90 моль) и пероксид бензоила (24,52 г, 0,101 моль). Реакционную массу постепенно нагревали до 85°C и перемешивали в течение 5 ч при этой температуре. Реакционную массу после охлаждения до комнатной температуры отфильтровывали под вакуумом и промывали CCl4 (50 мл). Фильтрат концентрировали под вакуумом для получения сырого остатка, который очищали флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат:н-гексан (02:98) с получением целевого со единения.
Выход: 35,2 г (27%); Ή-ЯМР (CDCl3, 400 МГц) δ ppm: 4,71 (с, 2Н), 7,27 (с, 1Н), 7,42-7,43 (д, J=4,9 Гц, 1Н), 8,24-8,25 (д, J=5,1 Гц, 1Н); масса (m/z): 190,0 (М+Н)+, 192,1 (М+Н)+.
Получение 3. 4-Бромметил-2,5-дифторпиридин (1-3)
Стадия 1. К охлажденному до 0°C раствору 2,5-дифторизоникотиновой кислоты (0,5 г, 0,003 моль) в THF (5 мл) под N2 добавляли по каплям литий-алюминийгидрид (1M в THF, 3,7 мл, 0,0037 моль). Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали далее в течение 1,5 ч. Реакционную смесь охлаждали до 0°C, разбавляли этилацетатом и обрабатывали водой (0,5 мл). Смесь фильтровали через слой целита и концентрировали под вакуумом для получения (2,5-дифторпиридин-4-ил) метанола.
Выход: 0,45 г (98%); Ή-ЯМР (CDCl3, 400 МГц) δ ppm: 4,60 (с, 2Н), 4,96 (с ушир., 1Н), 7,05 (с, 1Н), 7,78 (с, 1Н); Масса (m/z): 145,9 (М+Н)+.
Стадия 2. К охлажденному до 0°C раствору (2,5-дифторпиридин-4-ил)метанола (0,45 г, 0,003 моль) в DCM (10 мл) под N2 добавляли по каплям трибромид фосфора (0,44 мл, 0,0037 моль). Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1,5 ч. Реакционную смесь разбавляли DCM (75 мл), обрабатывали насыщенным водным бикарбонатом натрия (20 мл) и разделяли. Органический слой промывали водой (20 мл), солевым раствором (20 мл) и высушивали над Na2SO4. Органическую фазу концентрировали под вакуумом для получения целевого соединения.
Выход: 0,23 г (37%); Ή-ЯМР (DMSO-d6, 400 МГц) δ ppm: 4,68 (с, 2Н), 7,20 (с, 1Н), 8,16 (с, 1Н); Масса (m/z): 208,1 (М+Н)+, 210,1 (М+Н)+.
Получение 4. 4-Бромметил-2-хлорпиридин (1-4)
Стадия 1. К раствору 2-хлоризоникотиновой кислоты (2,0 г, 0,012 моль) в DMF (5 мл) под N2 при 25°C добавляли гидрид натрия (0,73 г, 0,015 моль) и перемешивали в течение 0,5 ч. Метилйодид (1,5 мл, 0,025 моль) добавляли при комнатной температуре и реакционную смесь нагревали до 50°C в течение 2 часов. Реакционную смесь растворяли в воде со льдом (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (50 млх3). Органический слой промывали солевым раствором (50 мл) и высушивали над Na2SO4. Органическую фазу концентрировали под вакуумом для получения метил 2-хлоризоникотината.
Выход: 2,1 г (100%); масса (m/z): 172,0 (М+Н)+, 174,0 (М+Н)+.
Стадия 2. К охлажденному раствору метил 2-хлоризоникотината (1,7 г, 0,009 моль) в THF (30 мл) под N2 частями добавляли боргидрид лития (0,43 г, 0,019 моль). Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали далее в течение 3 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении; остаток растворяли в ледяной воде (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (50 млх3). Органический слой промывали солевым раствором (50 мл) и высушивали над Na2SO4. Органическую фазу концентрировали под вакуумом для получения сырого соединения, которое затем очищали флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат:н-гексан (40:60) с получением (2хлорпиридин-4-ил)метанола.
Выход: 1,0 г (71%); Ή-ЯМР (CDCl3, 400 МГц) δ ppm: 2,29 (с ушир., 1Н), 4,75 (с, 2Н), 7,20-7,21 (д, J=4,9 Гц, 1Н), 7,31 (с, 1Н), 8,32-8,33 (д, J=5,0 Гц, 1Н); масса (m/z): 144,0 (М+Н)+, 145,9 (М+Н)+.
Стадия 3. (2-Хлорпиридин-4-ил)-метанол превращали в целевое соединение с использованием про- 10 033826 цедуры, подобной описанной на стадии 2 получения 3.
Выход: 0,49 г (85%); Ή-ЯМР (CDCl3, 400 МГц) δ ppm: 4,35 (с, 2Н), 7,36 (с, 1Н), 8,37-8,38 (д, J=4,9
Гц, 1Н); Масса (m/z): 205,9 (М+Н)+, 208,0 (М+Н)+.
Получение 5. 4-Хлорметил-3-фторпиридин (1-5) .01
Стадия 1. 3-Фторизоникотиновую кислоту превращали в (3-фторпиридин-4-ил)метанол с использованием процедуры, подобный описанной на стадии 1 получения 3.
Выход: 0,19 г (7 0%); масса (m/z): 12 8,1 (М+Н)+.
Стадия 2. К охлажденному раствору (3-фторпиридин-4-ил)метанола (0,19 г, 0,001 моль) в DCM (5 мл) под N2 добавляли по каплям тионилхлорид (0,21 мл, 0,003 моль). Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли DCM (50 мл) и обрабатывали насыщенным водным растовром бикарбоната натрия (10 мл). Органический слой промывали водой (20 мл), солевым раствором (20 мл) и высушивали над Na2SO4 и концентрировали под вакуумом для получения целевого соединения.
Выход: 0,12 г (56%); масса (m/z): 146,0 (М+Н)+, 148,0 (М+Н)+. Получение 6. 1-Хлорметил-2-фторбензол (1-6) .01
Целевое соединение, 1-хлорметил-2-фторбензол, синтезировали из 2-фторбензойной кислоты с осуществлением процедуры, как описано в получении 5.
Выход: 0,455 г (100%); масса (m/z): 145 (М+Н)+, 147,0 (М+Н)+.
Получение 7. 2,3-Дифторпиридин-4-илметиловый эфир метансульфоновой кислоты (1-7)
Стадия 1. (2,3-Дифторпиридин-4-ил)метанол синтезировали из 2,3-дифторизоникотиновой кислоты путем осуществления процедуры, как описано в получении 3. Выход: 0,16 г (2 9%); Масса (m/z): 146,0 (М+Н)+.
Стадия 2. (2,3-Дифторпиридин-4-ил)метанол превращали в целевое соединение путем реакции с метансульфонил хлоридом и продукт использовали как таковой без какой-либо очистки.
Выход: 0,37 г (68%).
Получение 8. 1-Хлорметил-3-ен (1-8)
CI ст
Стадия 1. К раствору 3-гидроксибензальдегида (3,0 г, 0,025 моль) в DMF (15 мл) при комнатной температуре добавляли K2CO3 (10,18 г, 0,073 моль) и метилйодид (6,93 г, 0,049 моль) и перемешивали в течение 12 ч в атмосфере азота. Реакционную смесь вливали в воду (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (50 млх3). Органический слой высушивали над Na2SO4 и концентрировали под вакуумом для получения 3-метоксибензальдегида.
Выход: 3,11 г (93%); 1И-ЯМР (CDCl3, 400 МГц) δ ppm: 3,87 (с, 2H), 7,17-7,20 (м, 1Н), 7,40-7,41 (м, 1Н), 7,43-7,46 (м, 2Н), 9,98 (с, 1Н).
Стадия 2. К раствору 3-метоксибензальдегида (3,11 г, 0,022 моль) в THF (10 мл) и метаноле (20 мл) добавляли частями NaBH4 (1,43 г, 0,042 моль) при 0-10°C в атмосфере азота. После добавления реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Реакционную смесь концентрировали под вакуумом и вливали в воду (50 мл). Водный слой экстрагировали этилацетатом (50 млх 3). Органический слой высушивали над Na2SO4 и концентрировали под вакуумом для получения (3метоксифенил)метанола.
Выход: 2,95 г (93%); Л-ЯМР (CDCl3, 400 МГц) δ ppm: 3,85 (с, 3H), 4,69-4,71 (м, 2Н), 6,85-6,88 (м, 1Н), 6,96-6,97 (м, 2Н), 7,28-7, 32 (м, 1Н).
Стадия 3. Целевое соединение синтезировали из (3-метоксифенил)метанола процедурой, описанной
- 11 033826 в получении 5.
Выход: 3,03 г (78%); ‘И-ЯМР (CDCI3, 400 МГц) δ ppm: 3,82 (с, 3H), 4,57 (с, 2Н), 6,85-6,88 (м, 1Н), 6,94-6,98 (м, 2Н), 7,26-7,30 (м, 1Н).
Получение 9. трет-Бутил 4-амино-3-фторпиперидин-1-карбоксилат
F
Стадия 1. трет-Бутил-4-триметилсиланилокси-3,6-дигидро-2Н-пиридин-1-карбоксилат
Хлортриметилсилан (16,3 г, 0,15 моль) добавляли по каплям к смеси трет-бутил-4-оксопиперидин1-карбоксилата (25,0 г, 0,12 моль), триэтиламина (42,6 мл, 0,31 моль) в 35 мл DMF при 25°C за 20 мин под N2. Реакционную массу нагревали до 90-92°C и поддерживали в течение 20 ч. Реакционной массе давали охладиться до 25°C. N-гексан (120 мл) добавляли к реакционной массе и нейтрализовали насыщенным раствором бикарбоната натрия (60 мл). Органический слой отделяли, промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия, водой и солевым раствором. Органический слой высушивали над Na2SO4 и концентрировали под вакуумом при 45°C для получения целевого соединения. Выход: 33,3 г (66%).
Стадия 2. трет-Бутил-3-фтор-4-оксопиперидин-1-карбоксилат
трет-Бутил-4-триметилсиланилокси-3,6-дигидро-2Н-пиридин-1-карбоксилат (33,3,12 моль) добавляли по каплям к Selectfluor® (30,6 г, 0,086 моль) в 250 мл ацетонитрила при комнатной температуре за 15 минут. Реакция была экзотермической и температуру реакционной массы повышали до 60°C и получали прозрачный раствор. После добавления реакционную массу перемешивали при комнатной температуре в течение 10 ч под N2. Реакционную массу разбавляли 200 мл этилацетата и промывали солевым раствором (100 млх2). Органический слой высушивали над Na2SO4 и концентрировали на роторном испарителе при 45°C под вакуумом для получения остатка, который очищали флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат:гексан (40:60) с получением целевого соединения.
Выход: 15,2 г (55%).
Стадия 3. трет-Бутил-4-(бензиламино)-3 -фторпиперидин-1 -карбоксилат
F
К прозрачному раствору трет-бутил-3-фтор-4-оксопиперидин-1-карбоксилата (3,0 г, 0,0138 моль, полученного на стадии 2) в EDC (50 мл), добавляли бензил амин (1,77 г, 0,016 моль) и перемешивали в течение 2 ч. Натрий триацетоксиборгидрид (5,86 г, 0,276 моль) добавляли при 10°C. После добавления реакционную массу перемешивали в течение 12 ч под N2 при комнатной температуре. Реакционную массу вливали в воду, подщелачивали щелочным раствором и экстрагировали этилацетатом (50 млх3). Органический слой высушивали над Na2SO4 и концентрировали под вакуумом для получения сырого остатка, который очищали флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат:гексан (20:80) с получением трет-бутил-4-(бензиламино)-3-фторпиперидин-1-карбоксилата в форме отдельных цис- и трансдиастереомеров.
Транс-диастереомер (3 a)
Выход: 0,370 г (8,8%).
Ή-ЯМР (CDCls, 400 МГц) δ ppm: 1,45 (с, 9Н), 1,60-1,70 (м, 2Н), 1,96-1,99 (м, 1Н), 2,79-2,91 (м, 3H), 3,78-3,81 (м, 1Н), 3,88-3,91 (м, 2Н), 4,22-4,27 (м, 1Н), 4,36-4,39 (м, 1Н), 7,24-7,35 (м, 5Н); масса (m/z):
- 12 033826
309,2 (М+Н)+.
Цис-диастереомер (3b):
F
Выход: 2,02 г (47%);
1И-ЯМР (DMSO-d6, 400 МГц) δ ppm: 1,38 (с, 9Н), 1,44-1,68 (м, 2Н), 2,05 (м, 1Н), 2,57-2,66 (м, 2Н), 2,93-3,02 (м, 1Н), 3,76-3,77 (м, 2Н), 3,90 (м, 1Н), 4,12 (м, 1Н), 4,71-4,83 (м, 1Н), 7,19-7,35 (м, 5Н); Масса (m/z): 309,2 (М+Н)+.
Транс-диастереомер (3a), полученный на стадии 3, подвергали хиральному разделению с помощью Способа А хиральной ВЭЖХ с получением двух энантиомеров. Транс-энантиомер-I элюировал со временем удерживания 6,86 минут и Транс-энантиомер-II элюировал со временем удерживания 11,96 мин.
Так же цис-диастереомер (3 b), полученный на стадии 3, подвергали хиральному разделению с помощью Способа В хиральной ВЭЖХ с получением двух энантиомеров. Цис-энантиомер-I элюировал со временем удерживания 5,76 мин и цис-энантиомер-II элюировал со временем удерживания 6,98 мин.
Стадия 4. цис-трет-Бутил-4-амино-3-фторпиперидин-1-карбоксилат (цис-изомер-I) (Б9а)
К раствору цис-энантиомера-I (как получено на стадии 3, 2,0 г, 0,06 моль, полученный на предыдущей стадии) в метаноле (50 мл), 10%-ный Pd/C (1,0 г, 0,5 об.) добавляли в одной части и перемешивали в течение 2 ч при барботировании газообразного Н2. Реакционную смесь фильтровали через целит и фильтрат концентрировали под вакуумом для получения цис-трет-бутил-4-амино-3-фторпиперидин-1карбоксилата (цис-изомер-1).
Выход: 1,2 г (85%); 1И-ЯМР (DMSO-d6, 400 МГц) δ ppm: 1,38 (с, 9Н), 1,50-1,54 (м, 2Н), 1,69-1,70 (м, 2Н); 2,76-2,80 (м, 2Н), 3,00 (м, 1Н), 3,85 (м, 1Н), 4,07 (м, 1Н), 4,45-4,63 (м, 1Н); масса (m/z): 219,1 (М+Н)+.
Стадия 5. цис-трет-Бутил-4-амино-3-фторпиперидин-1-карбоксилат (цис-изомер-II) (I-9b) цис-Энантиомер-II (полученный на стадии 3) дебензилировали согласно процедуре, описанной на стадии 4, для получения цис-трет-бутил-4-амино-3-фторпиперидин-1-карбоксилата (цис-изомер II).
Выход: 1,1 г (83,5%); 1И-ЯМР (DMSO-de, 400 МГц) δ ppm: 1,38 (с, 9Н), 1,42-1,54 (м, 2Н), 1,82 (м, 2Н), 2,71-2,81 (м, 2Н), 2,99 (м, 1Н), 3,85 (м, 1Н), 4,08 (м, 1Н), 4,46-4,58 (м, 1Н); масса (m/z): 219,1 (М+Н)+.
Стадия 6. транс-трет-Бутил-4-амино-3-фторпиперидин-1-карбоксилат (транс-изомер I) (Б9с). транс-Энантиомер-I (полученный на стадии 3) дебензилировали согласно процедуре, описанной на стадии 4, для получения транс-трет-бутил-4-амино-3-фторпиперидин-1-карбоксилата (транс-изомер-I).
Выход: 0,33 г (96%); 1И-ЯМР (CDCI3, 400 МГц) δ ppm: 1,45 (с, 9Н), 1,55-1,57 (м, 2Н), 1,86-1,89 (м, 2Н), 2,70-2,78 (м, 2Н), 2,89-2,91 (м, 1Н), 4,01-4,05 (м, 1Н), 4,13-4,14 (м, 1Н), 4,20-4,28 (м, 1Н); масса (m/z):
219,1 (М+Н)+.
Стадия 7. транс-трет-Бутил-4-амино-3-фторпиперидин-1-карбоксилат (транс-изомер II) (I-9d). транс-Энантиомер-II (полученный на стадии 3) дебензилировали согласно процедуре, описанной на стадии 4, для получения транс-трет-бутил-4-амино-3-фторпиперидин-1-карбоксилата (транс-изомер-II).
Выход: 0,31 г (95%); 1И-ЯМР (CDCl3, 400 МГц) δ ppm: 1,45 (с, 9Н), 1,52-1,57 (м, 2Н), 1,86-1,89 (м, 2Н), 2,75-2,80 (м, 2Н), 2,86-2,94 (м, 1Н), 3,98-4,04 (м, 1Н), 4,11-4,16 (м, 1Н), 4,20-4,28 (м, 1Н); масса (m/z):
219,1 (М+Н)+.
Получение 10. 2,2,2-Трифтор-1-(4-фтор-1Н-индол-3-ил)-этанон (I-10)
Н
К раствору 4-фториндола (28,75 г, 0,213 моль (полученного согласно Org. Synth. 1985, 63, 214) в DMF (200 мл), ангидрид трифторуксусной кислоты (73,50 г, 0,349 моль) медленно добавляли по каплям при 0°C в атмосфере азота. После завершения добавления реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали до 0-10°C и медленно вливали в ледяную воду (500 мл). Реакционную массу перемешивали в течение 30 мин. Таким образом, полученное твердое вещество отфильтровывали, промывали водой (500 мл), затем н-гексаном (500 мл). Полученные твердые вещества высушивали под вакуумом с получением целевого соединения.
Выход: 37,25 г (75%); 1И-ЯМР (DMSO-d6, 400 МГц) δ ppm: 7,03-7,07 (м, 1Н), 7,30-7,35 (м, 1Н), 7,397,41 (м, 1Н), 8,51 (с, 1Н), 12,91 (с, 1Н); Масса (m/z): 230 (М-Н)+.
Получение примеров соединения формулы (I).
Пример 1. N-[(1 S.2S)-2-l' идроксициклогексил]-1-(1 -метил-1 Н-пиразол-4-илметил)-4-фтор-1Ниндол-3-карбоксамид
- 13 033826
К охлажденному раствору 2,2,2-трифтор-1-(4-фтор-1Н-индол-3-ил)этанона (1-10, 13,30 г, 0,057 моль) в DMF (100 мл) под N2 добавляли K2CO3 (47,06 г, 0,34 моль), 4-хлорметил-1-метил-1Н-пиразол гидрохлорид (13,07 г, 0,078 моль) и содержимое перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь вливали в ледяную воду (1000 мл) и экстрагировали этилацетатом (250 млх3). Объединенные органические слои промывали водой (200 млх3), солевым раствором (100 мл) и высушивали над Na2SO4. Органическую фазу концентрировали под вакуумом для получения сырого соединения, которое затем очищали флэш-хроматографией (этилацетат:н-гексан (80:20)) с получением 1-[1-(1-метил1 Н-пиразол-4-илметил)-4-фтор-1 Н-индол-3 -ил] -2,2,2-трифторэтанона.
Выход: 17,23 г (92%); 1И-ЯМР (CDCl3, 400 МГц) δ ppm: 3,88 (с, 3H), 5,26 (с, 2Н), 7,01-7,05 (м, 1Н), 7,21-7,26 (м, 1Н), 7,30-7,34 (м, 2Н), 7,48 (с, 1Н), 7,91 (с, 1Н); масса (m/z): 326,2 (М+Н)+.
Стадия 2. 1-(1-Метил-1Н-пиразол-4-илметил)-4-фтор-1Н-индол-3-карбоновая кислота
Смесь 1-[1-(1-метил-1Н-пиразол-4-илметил)-4-фтор-1Н-индол-3-ил]-2,2,2-трифторэтанона (21,39 г, 0,066 моль) и 4н. водного раствора NaOH (27,07 г, 0,67 моль) нагревали до 98-100°C в течение 5 ч. Реакционную массу охлаждали до 5-10°C и разбавляли 100 мл ледяной воды. Водный слой подкисляли уксусной кислотой до рН ~ 5 при 5-10°C. Твердые вещества, полученные таким образом, отфильтровывали. Эти твердые вещества экстрагировали из смеси этилацетат:метанол (80:20), высушивали над Na2SO4 и концентрировали под вакуумом с получением 1-(1-метил-1Н-пиразол-4-илметил)-4-фтор-1Н-индол-3карбоновой кислоты.
Выход: 16,71 г (93%); Ή-ЯМР (DMSO-d6, 400 МГц) δ ppm: 3,75 (с, 1Н), 5,29 (с, 2Н), 6,87-6,92 (м, 1Н), 7,17-7,22 (м, 1Н), 7,40-7,50 (м, 2Н), 7,73 (с, 1Н), 8,11 (с, 1Н); масса (m/z): 274,3 (М+Н)+.
Стадия 3. N-[(1 S.2S)-2-T идроксициклогексил]-1 -(1 -метил-1Н-пиразол-4-илметил)-4-фтор-1Н-индол3-карбоксамид.
Раствор 1-(1-метил-1Н-пиразол-4-илметил)-4-фтор-1Н-индол-3-карбоновой кислоты (16,70 г, 0,061 моль) в DMF (120 мл) и HATU (29,21 г, 0,077 моль) перемешивали в течение 15 мин с последующим добавлением (1S,2S) 2-аминоциклогексанол гидрохлорида (11,28 г, 0,074 моль) и DIPEA (49 мл, 0,28 моль) за 15 мин при комнатной температуре. Во время добавления DIPEA реакционная масса становится экзотермической. После завершения добавления реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную массу медленно вливали в воду (800 мл) и перемешивали в течение 1 ч. Полученное твердое вещество отфильтровывали, промывали водой (1000 мл). Эти твердые вещества экстрагировали из смеси этилацетат:метанол (80:20), высушивали над Na2SO4 и концентрировали под вакуумом с получением твердых веществ. Эти твердые вещества растворяли в этилацетате (700 мл), перемешивали при 60°C и фильтровали для удаления любых нерастворенных частиц. Фильтрат концентри ровали под вакуумом для получения целевого продукта.
Выход: 17,64 г (78%); Ή-ЯМР (DMSO-d6, 400 МГц) δ ppm: 1,17-1,24 (м, 4Н), 1,59-1,65 (м, 2Н), 1,861,88 (м, 1Н), 1,96-1,98 (м, 1Н), 3,59-3,61 (м, 1Н), 3,76 (с, 3H), 4,70-4,71 (д, J=4,7 Гц, 1Н), 5,28 (с, 2Н), 6,906,95 (м, 1Н), 7,18-7,22 (м, 1Н), 7,40-7,45 (м, 2Н), 7,50-7,52 (д, J=8,27 Гц, 1Н), 7,71 (с, 1Н), 8,00 (с, 1Н); масса (m/z): 371,2 (М+Н)+=+34,8°.
- 14 033826
Пример 2. Н-[(18,28)-2-Гидроксициклогексил]-1-(2-хлорпиридин-4-илметил)-4-фтор-1Н-индол-3карбоксамид
Стадия 1. 4-Фтор-1Н-индол-3-карбоновая кислота
ОН
К 2,2,2-трифтор-1-(4-фтор-1Н-индол-3-ил)-этаноне (1-10, 18,49 г, 0,080 моль), 4н. водный раствор NaOH (200 мл, 0,80 моль) добавляли при комнатной температуре и нагревали до 100°C в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли ледяной водой (200 мл). Водный слой промывали этилацетатом (100 млх2) и подокисляли разбавленной HCl до рН ~ 4. Полученное твердое вещество отфильтровывали, промывали водой и н-гексаном, каждого по 100 мл, отдельно. Твердые вещества высушивали под вакуумом.
Выход: 5,43 г (38%); Ή-ЯМР (DMSO-de, 400 МГц) δ ppm: 6,84-6,89 (м, 1Н), 7,12-7,17 (м, 1Н), 7,267,28 (м, 1Н), 8,02 (с, 1Н), 11,87 (с, 1Н), 12,05 (м, 1Н); Масса (m/z): 180,2 (М+Н)+.
Стадия 2. №[(^^)-2-Гидроксициклогексил]-4-фтор-1Н-индол-3-карбоксамид
К раствору 4-фтор-1Н-индол-3-карбоновой кислоты, полученной на предыдущей стадии (0,39 г, 0,002 моль), в DMF (15 мл) под N2 при 25°C добавляли HATU (0,99 г, 0,0026 моль), (1S,2S)-2аминоциклогексанол гидрохлорид (0,39 г, 0,0026 моль), DIPEA (1,5 мл, 0,0026 моль) с промежутком 5 мин после каждого добавления. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь вливали в воду (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (25 млх3). Органический слой промывали солевым раствором (20 мл), высушивали над Na2SO4 и концентрировали под вакуумом для получения сырого остатка, который затем очищали флэш-хроматографией (метанол:хлороформ (03:97)) с получением целевого соединения.
Выход: 0,43 г (73%); Ή-ЯМР (DMSO-d6, 400 МГц) δ ppm: 1,17-1,25 (м, 4Н), 1,60-1,66 (м, 2Н), 1,871,97 (м, 2Н), 3,37-3,39 (м, 1Н), 3,59-3,64 (м, 1Н), 4,73-4,74 (д, J=4,9 Гц, 1Н), 6,87-6,92 (м, 1Н), 7,12-7,17 (м, 1Н), 7,28-7,30 (д, J=8,1 Гц, 1Н), 7,41-7,45 (t, 1Н), 7,91-7,92 (д, J=2,4 Гц, 1Н), 11,88 (с, 1Н); масса (m/z):
277,1 (M+H)+.
Стадия 3. N-[(1 S,2S)-2-F идроксициклогексил]-1 -(2-хлорпиридин-4-илметил)-4-фтор-1Н-индол-3карбоксамид.
К раствору ^[(^^)-2-гидроксициклогексил]-4-фтор-1Н-индол-3-карбоксамида (0,24 г, 0,0008 моль) в DMF (5 мл) под N2 при 25°C добавляли карбонат калия (0,37 г, 0,0026 моль), йодид калия (0,014 г, 0,00008 моль), 4-бромметил-2-хлорпиридин (1-4, 0,25 г, 0,0012). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь вливали в воду со льдом (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (50 млх3). Органический слой промывали солевым раствором (50 мл) и высушивали над Na2SO4. Органическую фазу концентрировали под вакуумом для получения сырого остатка, который затем очищали флэш-хроматографией с использованием смеси метанол:хлороформ (02:98) с получением целевого соединения. Выход: 1,0 г (76%); 1Н-ЯМР (CDCl3, 400 МГц) δ ppm: 1,27-1,44 (м, 4Н), 1,79 (м, 2Н), 2,11 (м, 2Н), 3,49 (м, 1Н), 3,87 (м, 1Н), 4,29 (с, 1Н), 5,34 (с, 2Н), 6,88 (с, 1Н), 6,99-7,02 (м, 3H), 7,21 (м, 2Н), 8,02 (с, 1Н), 8,33-8,34 (д, J=3,8 Гц, 1Н); масса (m/z): 402,2 (М+Н)+.
Примеры 3-19.
Соединения примеров 3-19 были получены путем осуществления экспериментальных процедур, как описано в примерах 1 и 2, с некоторыми некритическими изменениями
- 15 033826
| Пример No. | Химическое название и структура | Данные охарактеризовывания | |
| 3 | ^-ЯМР (DMSO-d6;, 400 | ||
| 1 1 W | MUw) | δ ppm: 1,16-1,29 | |
| А—Ли Ku | (м, | 4Н)? 1,59-1,65 | |
| Г Ii if н ОН | |||
| (μ, | 2Н) , 1,86-1,98 | ||
| (μ, | 2Н), 3,29-3,34 | ||
| (μ, | 1Н) , 3,56-3,60 | ||
| (μ, | 1Н), 3,75 (с, | ||
| \ | |||
| 3Η) , | 4,70-4,71 (д, | ||
| N-[(IR,2R)-2- | 1Η) , | 5,28 (с, 2Н) , | |
| гидроксициклогексил]-1-(1-метил- | 6, 90- | 6,95 (м, 1Н) , | |
| 1Н-пиразол-4-илметил)-4-фтор-1Н- | 7,17- | 7,22 (м, 1Н), | |
| индол-3-карбоксамид | 7,40- | 7,44 (т, 1Н), | |
| 7,45 | (с, 1Н) , 7,50- | ||
| 7,52 | (д, J=8,3 Гц, | ||
| 1Η) , | 7,71 (с, 1Н), | ||
| 8,00 | (с, 1Н) ; Масса | ||
| (m/z) | : 371,3 (М+Н)+. | ||
| 4 | ^-ЯМР (DMSO-d6, 4 00 | ||
| Р θ \ х У Μ | МГц) | δ ppm: 1,16- | |
| Ζ~Ν - | 1,23 | (м, 4Н) , 1,59- | |
| 1 Ιι ιί н он | |||
| ми | 1, 65 | (м, 2Н) , 1,86- | |
| 1,98 | (м, 2Н) , 3,29- | ||
| 3,34 | |||
| N-jO 1 N- [ (IS,2S)-2- | 3, 60 (с, (д, | (м, 1Н), 3,56- (м, 1Н), 4,01 ЗН) , 4,70-4,71 1Н) ; 5,81 (с, | |
| гидроксициклогексил]-1-(1-метил- | 2Н) , | 6, 89-6, 95 (м, | |
| 1Н-имидазол-3-илметил)-4,7- | 1Н) , | 7,09-7,13 (м, | |
| дифтор-1Н-индол-3-карбоксамид | 1Н) , | 7,16-7,21 (м, | |
| 1Н) , | 7,35-7,39 (т, | ||
| 1Н), | 7,43-7,47 (т, | ||
| 1Н), | 7,53-7,55 (д, | ||
| J=8,2 | Гц, 1Н), 7,59- | ||
| 7, 61 | (д, J=8,5 Гц, | ||
| 1Н) , | 7, 65-7, 67 (д, | ||
| J=8 , 1 | Гц, 1Н) , 8,13 | ||
| (с, | 1Н); Масса | ||
| (m/z) | : 42,1,3 (М+Н) |
- 16 033826
| 5 | F 0 \ ) | ^-ЯМР (DMSO-d6, 400 МГц) δ ppm: 1,19- | ||
| 1,24 | (м, | 4Η) , 1,59- | ||
| ш | 1, 62 | (μ, | 2Η), 1,85- | |
| N | 1,88 | (μ, | 1Η) , 1,95- | |
| F L | 1,97 | (μ, (μ, | 1Η) , 3,27- | |
| Il 11 4 XN | 3,29 | 1Η) , 3,57- | ||
| N 1 | 3,59 | (μ | 1Η), 3,76 | |
| N-[(IS,2S)-2- | (с, | 3Η) | , 4,65-4,66 | |
| гидроксициклогексил]-1-(1-метил- | (д, | 1=4, | 75 Гц, 1Η) , | |
| 1Н-пиразол-4-илметил)-4,7- | 5, 35 | (с, | 2Η) , 6,86- | |
| дифтор-ΙΗ-индол-З-карбоксамид | 6, 88 | (μ, | 1Η), 7,01- | |
| 7,03 | (μ | 1Η), 7,40 | ||
| (с, | 1Η) | , 7,48-7,53 | ||
| (м, | 1Η) | , 7,66 (с, | ||
| 1Н) , | θ, | 10 (с, 1Η); | ||
| Масса | (m/z): 389,3 | |||
| (М+Н) | + | |||
| 6 | IMP (DMSO-d6, | |||
| 1 1 | 400 МГц) | δ ppm: 1,23 | ||
| (м, | 4Η) | , 1,61-1,62 | ||
| \ I if Н ОН | ||||
| (м, | 2Η) | , 1,87-1,97 | ||
| (м, | 2Η) | , 3,40 (μ, | ||
| F Qx4-ZCI | ||||
| Η 1 | 1Н) , | 3, | 50 (μ, 1Η) , | |
| Zn | 4, 66- | 4,67 (д, 1Η), | ||
| N-[(IS,2S)-2- | 5, 63 | (с, | 2Η) , 6,88- | |
| гидроксициклогексил]-1-(2- | 6, 93 | (μ, | 1Η) , 6,97- | |
| хлорпиридин-4-илметил)-4,7- | 7,04 | (μ | 2Η), 7,22 | |
| (с, | 1Η) | , 7,66-7,69 | ||
| дифтор-1Н-индол-3-карбоксамид | ||||
| (т, | 1Η) | , 8,10 (с, | ||
| 1Н) , | θ, | 35-8,36 (д, | ||
| J=5, 0 | Гц | , 1Η); Масса | ||
| (m/z) | : 420,3 (Μ+Η)+. |
- 17 033826
| 7 | ^-ЯМР (DMSO-d6, | ||
| f о | 4 00 МГц) δ ppm: 1,17- | ||
| ГЛ--if H он | 1,29 | (м, 4H) , 1,59- | |
| LA J | 1, 65 | (T, 2H) , 1,86- | |
| 1,98 | (дд, 2H) , 3,36 | ||
| Tl Ί | (м, | 1H) , 3,60-3,61 | |
| ϋ^Ν | (μ, | 1H), 4,69-4,70 | |
| Ν- [ (15,2S)-2- | (д, | 1H) , 5,61 (c, | |
| гидроксициклогексил]-1-(2- | 2Η) , | 6, 92-6, 97 ( t , | |
| фторпиридин-4-ил-метил)-4-фтор- | 2Н) , | 7,05-7,06 (д, | |
| 1Н-индол-3-карбоксамид | J=4,7 | Гц, 1H), 7,15- | |
| 7,20 | (m, 1H) , 7,31- | ||
| 7,33 | (д, J=8,2 Гц, | ||
| 1H) , | 7,51-7,55 ( t , | ||
| 1H) , | 8,11 (с, 1H), | ||
| 8,16- | 8,17 (д, J=5,1 | ||
| Гц, | 1H); Масса | ||
| (m/z) | : 386, 3 (M+H) + . | ||
| 8 | F 0 L/ | Щ-ЯМР (DMSO-d6, 4 00 | |
| МГц) | δ ppm: 3,22- | ||
| Js. Ζ-Ν ϊ Г Π---if н он | 1,29 | (m, 4H) , 1,60- | |
| L II l| | 1, 66 | (m, 2H), 1,88- | |
| F | 1,98 | (m, 2H) , 3,33- | |
| Ύί | 3,38 | (m, 1H), 3,61- | |
| 3, 63 | (m, 1H) , 4,66- | ||
| N- [ (15,2S)-2- | 4, 68 | (д, 1H) , 5,67 | |
| гидроксициклогексил]-1-(2- | (с, 2H) , 6,86 | ||
| фторпиридин-4-илметил)-4,7- | - 6 | ,93 (μ, 2H) , | |
| дифтор-1Н-индол-3-карбоксамид | 6, 96- | 7,02 (μ, 2H), | |
| 7, 65- | 7,68 (t, 1H) , | ||
| 8,11 | (c, 1H), 8,18- | ||
| 8,20 | (д, 1=5,11 Гц, | ||
| 1H) ; | Масса (m/z): | ||
| 404,2 | (M+H) +. |
- 18 033826
| 9 | i О | ОЯМР (DMSO-d6, 4 00 | |||
| МГц) | δ ppm: 1,18- | ||||
| ОН | 1,25 | (м, 4Н) . 1,60- | |||
| r h il Η | |||||
| ид > | 1, 66 | (м, 2Н), 1,87- | |||
| 1,89 | (м, 1Н), 1,97- | ||||
| So | 1,99 | (м, 1Н), 3,36- | |||
| JSS | 3,37 | (м, 1Н), 3,60- | |||
| F | 3, 62 | (м, 1Н) , 4,69- | |||
| N- [ (IS,2S)-2- | 4,71 | (д, J=4,95 Гц, | |||
| гидроксициклогексил]-1-(3 | - | 1Н) , | 5,67 (с, 2Н) , | ||
| фторпиридин-4-илметил)-4- | фтор- | 6,86- | 6,89 (м, 1Н) , | ||
| 1H-индол-З-карбоксамид | 6, 94- | 6,99 (м, 1Н) , | |||
| 7,17- | 7,23 (м, 1Н), | ||||
| 7,35- | 7,37 (д, J=8,2 | ||||
| Гц, | 1Н). 7,51-7,54 | ||||
| (м, | 1Н) , 8,06 (с, | ||||
| 1Н) , | 8,33-8,34 (д, | ||||
| J=4,7 | Гц, 1Н), 8,59 | ||||
| (с, | 1Н); Масса | ||||
| (m/z) | : 386, 2 (М+Н)+. | ||||
| 10 | ОЯМР (DMSO-d6, 4 00 | ||||
| f °% λ | МГц) | δ ppm: 1,24- | |||
| r<A—Λ~ м | Ьн | 1,29 | (м, 4Н) , 1,60- | ||
| Γ Ιι ι | 1, 66 | (м, 2Н), 1,87- | |||
| 1,90 | (м, 1Н), 1,95- | ||||
| F Η Ί | 1,97 | {m, 1Н), 3,34- | |||
| 3,35 | (м, 1Н) , 3,58- | ||||
| 3, 62 | (м, 1Н), 4,66- | ||||
| 4, 68 | (д, J=4,95 Гц, | ||||
| N- [ (IS,2S)-2- | 1Н) , | 5,72-5,76 (с, | |||
| гидроксициклогексил]-1-(3 | - | 2Н) , | 6, 76-6, 79 (м, | ||
| фторпиридин-4-илметил)-4, | 7- | 1Н) , | 6, 88-6, 93 (м, | ||
| дифтор-1H-индол-З-карбоксамид | 1Н) , | 6, 97-7,03 (м, | |||
| 1Н), | 7, 67-7, 64 (м, | ||||
| 1Н), | 8,08 (с, 1Н) , | ||||
| 8,33- | 8,35 (д, J=4,8 | ||||
| Гц, | 1Н) , 8,60 (с, | ||||
| 1Н) ; | Масса (m/z): |
- 19 033826
| 404,2 (М+Н)+. | ||||
| 11 | Щ-ЯМР (CDC13 | 400 | ||
| F 0 \ ) | МГц) δ ppm: | 1,33- | ||
| ΛΝ Ku | 1,48 (м, | 4Η) , | 1,79 | |
| E ii if H 0H | ||||
| (μ, 2Η), | 2,10· | -2,11 | ||
| (м, 2Η), | 3,47· | -3,51 | ||
| k/VF | (μ, 1Η), | 3, 88 | (м, | |
| I I | 1Η) , 4,25 | (с ушир., | ||
| 1Η), 5,42 | (с, | 2H) , | ||
| N- [ (1S,2S)-2- | 6, 27-6,28 | (м, | 1Н) , | |
| 6,98-7,09 | (м, | 2H) , | ||
| гидроксициклогексил]-1-(2,5- | ||||
| дифторпиридин-4-илметил)-4-фтор- | 7,21-7,23 | (м, | 2Н) , | |
| 8,03 (с, | 1Н) , | 8,11 | ||
| ΙΗ-индол-З-карбоксамид | (с, 1Η) | ; I | Яасса | |
| (m/z): 404 | ,2 (М+Н)+. | |||
| 12 | 1Н-ЯМЕ | > (DMSO-d6, | ||
| F О \ ) | 400 МГц) δ | ppm: | 1,23 | |
| (м, 4Η), | 1, 63 | (м, | ||
| Г И if н он | ||||
| 2Η) , 1,87- | -1,96 | (μ, | ||
| т 7 с | 2Η) , 3,51 | (м, | 1Η) , | |
| н Т | 3,60 (м, | 1Н) , | 4, 66 | |
| fXn | (м, 1Η), | 5, 73 | (с, | |
| 2Η) , 6,61 | (с, | 1Η), | ||
| N-[(IS,2S)-2- | 6,91-7,02 | (м, | ||
| 2H) , | ||||
| гидроксициклогексил]-1-(2,5- | ||||
| 7,66 (μ, | 1Н) , | 8,04 | ||
| дифторпиридин-4-илметил)-4,7- | ||||
| (с, 1Η), | 8,31 | (с, | ||
| дифтор-1Н-индол-3-карбоксамид | ||||
| 1Η); Масса (m/z): | ||||
| 422,3 (М+н: | ) +. |
- 20 033826
| 13 | F О \ ) i \\ | 1Н-ЯМР (DMSO-d6, 4 00 МГц) δ ppm: 1,2 3- | ||
| / N | 1,24 | (m, | 4H) , 1,60- | |
| Ou H OH | 1, 65 | (m, | 2H), 1,86- | |
| 1,89 | (m, | 1H) , 1,96- | ||
| 1,98 | (m, | 1H) , 3,43- | ||
| fOn | 3,46 | (m, | 1H) , 3,57- | |
| r T F | 3, 60 | (m, | 1H), 4,69- | |
| N- [ (IS,2S)-2- | 4,71 | (Д, | J=4,5 Гц, | |
| гидроксициклогексил]-1-(2,3- | 1Н) , | 5, 74 | (с, 2H), | |
| дифторпиридин-4-илметил) -4-фтор- | 6,76- | 6,77 | (m, 1H) , | |
| ΙΗ-индол-З-карбоксамид | 6, 95- | 7,00 | (m, 1H), | |
| 7,18- | 7,23 | (m, 1H) , | ||
| 7,36- | 7,38 | (Д, J=8,l | ||
| Гц, | 1H) , | 7,52-7,56 | ||
| (м, | 1H) , | 7,93-7,94 | ||
| (д, | J=4,4 | Гц. 1H), | ||
| 8,06 | (c, | 1H) ; Масса | ||
| (m/z) | : 404 | , 2 (M+H)+. | ||
| 14 | 1Н-ЯМР (DMSO-d6, | |||
| Ϊ 1 «О | 400 МГц) δ | ppm: 1,23- | ||
| Цч. U-N | 1,25 | (m, | 4H) , 1,60- | |
| Г 11 ιί н он | ||||
| 1, 66 | (m, | 2H) , 1,87- | ||
| 2,00 | (m, | 2H), 3,40 | ||
| 11 1 | (м, | 1H) , | 3,60-3,61 | |
| (μ, | 1H) , | 4,71-4,72 | ||
| N- [ (IS,2S)-2- | (д, | 1H) , | 5,57 (c, | |
| гидроксициклогексил]-1-(1- | 2Η) , | 6, 9C | -6,95 (m, | |
| пиридин-4-илметил)-4-фтор-1Н- | 1Η) , | 7,11 | -7,16 (m, | |
| индол-3-карбоксамид | 1Η) , | 7, IE | -7,20 (д, | |
| J=7, S | Гц, | 1H), 7,27- | ||
| 7,30 | (м, | 1H), 7,33- | ||
| 7,35 | (d, | J=8,2 Гц, | ||
| 1H) , | 7,46-7,49 (τ, | |||
| 1H) , | 7,71 | -7,77 (τ, |
- 21 033826
| 1Н) , 8,50- Гц, (m/z) | 8,09 (с, 1Н) , | |||
| 8,52 (д, 1Н) ; : 368,3 | . J=4,l Масса (М+Н) +. | |||
| 15 | ^-ЯМР (DMSO-d6, | |||
| F 0 \ > i \\ ' | 4 00 МГц) δ ppir | i: 1,16- | ||
| ότΎ h Ьн | 1,24 | (м, 4Н) , | , 1,59- | |
| MV | 1, 65 | (м, 2Н) , | , 1,85- | |
| 1,97 | (м, 2Н) , | , 3,29- | ||
| V)N | 3,34 | (м, 1Н) | , 3,58 | |
| (м, | 1Н), 4, | 70-4,71 | ||
| N-|(IS,2S)-2- | (д, | 1Н), 5, | 31 (с, | |
| гидроксициклогексил]-1-(1H- | 2Н) , | 6, 90-6, | 95 (м, | |
| пиразол-4-илметил)-4- фтор-1Н- | 1Н) , | 7,17-7, | 20 (м, | |
| индол-3-карбоксамид | 1Н) , | 7,40-7, | 44 (т, | |
| 1Н) , | 7,51-7, | 54 (м, | ||
| 2Н) , | 7,81 (с, 1Н) , | |||
| 7,99 | (с, 1Н) | , 12,79 | ||
| (с ушир., 1Н) | ; Масса | |||
| (m/z) | : 357,3 | (М+Н) +. | ||
| 16 | ^-ЯМР | (CDC13, | ||
| ί ί О | 4 00 МГц) δ ppir | i: 1,25- | ||
| FY/н Ьн | 1,36 | (м, 4Н) | , 1,75- | |
| 1,78 | (м, 2Н) | , 2,04- | ||
| N | 2,13 | (м, 2Н) | , 3,44- | |
| N | 3,49 | (м, 1Н) | , 3,84- | |
| н | 3,86 | (м, 1Н) | , 4,30- | |
| Вг | 4,31 | (с ушир | • , 1Н), | |
| N-[ ( IS,2S)-2- | 5, 43 | (с, 2Н) | , 6,96- | |
| гидроксициклогексил]-1- (2- | 7,01 | (м, 1Н) | , 7,15- | |
| бромтиазол-5-илметил)-4- фтор- | 7,23 | (м, ЗН) | , 7,49- | |
| lH-индол-З-карбоксамид | 7,52 | (м, 1Н) | , 7,98 | |
| (с, | 1Н) ; | Масса | ||
| (m/z) | : 452, | 2,454,2 | ||
| (М+Н) | + |
- 22 033826
| 17 | F 0 \ ) | ^-ЯМР (DMSO-d6, 4 00 МГц) δ ppm: 1,17- | |||
| 1,24 | (м, | 4Н) | 1,48- | ||
| \ 1 ι[ H OH | |||||
| kA J | 1,51 | (т, | ЗН) | 1,59- | |
| N | 1, 65 1,88 | (м, (м, | 2Н) | 1,86- 1,96- | |
| li il | 1Н) | ||||
| A'n | 1,98 | (м, | 1Н) | , 2,78 | |
| (с, | ЗН) , | з, | 59-3,61 | ||
| (м, | 1Н) , | з, | 69-3,73 | ||
| N-[(IS,2S)-2- | 2Н) , | 4, | 70-4,71 | ||
| (м, | |||||
| гидроксициклогексил]-1-(1-этил- | |||||
| 5-метил-1Н-пиразол-4-илметил)-4- | (д, | J=4,7 | TL | б 1Н) , | |
| 5,28 | (с, | 2Н) | 6,90- | ||
| фтор-1Н-индол-3-карбоксамид | |||||
| 6, 95 | (м, | 1Н) | 7,18- | ||
| 7,22 | (м, | 1Н) | 7,40- | ||
| 7,45 | (м, | 2Н) | 7,50- | ||
| 7,52 | (д, | J=8 | г 27 Гц, | ||
| 1Н) , | 7,71 | (с | 1Н) , | ||
| 8,00 | (с, | 1Н) | Масса | ||
| (m/z) | : 39S | ), 3 | (М+Н) +. | ||
| 18 | ^-ЯМР (DMSO-d6, | ||||
| F О \ > 1 А Α·Ά | 400 МГц) δ | ppir | : 1,16- | ||
| 1,33 | (м, | 4Н) | 1,60- | ||
| Ου | 1, 66 | (м, | 2Н) | 1,87- | |
| 1,99 | (м, | 2Н) | 3,29- | ||
| 3,34 | (м, | 1Н) | 3,58- | ||
| L ILz/ | 3, 62 | (м, | 1Н) | 4,70- | |
| 4,71 | (д, | 1Н) | , 5, 65 | ||
| N-[(IS,2S)-2- | (с, | 2Н) , | б, | 90-6,96 | |
| гидроксициклогексил]-1- | 1Н) , | 7, | 14-7,19 | ||
| (м, | |||||
| (бензотиазол-6-илметил)-4-фтор- | 1Н) , | 7, | 42-7,51 | ||
| (м, | |||||
| 1Н-индол-3-карбоксамид | |||||
| (м, | ЗН) , | θ, | 04-8,09 | ||
| (м, | 2Н) , | 8, | 16 (с, | ||
| 1Н) , | 9, 37 | (с, 1Н); | |||
| Масса | (m/z): | 424,20 | |||
| (М+Н) | + |
- 23 033826
гидроксициклогексил]-1-(1-(2фторэтил)-11Н-пиразол-4илметил)-4-фтор-1Н-индол-3карбоксамид
Щ-ЯМР (DMSO-d6,
| 400 МГц) δ | ppm: | 1,25- | |
| 1,39 | (м, | 4Н) , | 1,75- |
| 1,77 | (м, | 2Н) , | 2, 06- |
| 2,13 | (м, | 2Н) , | 3,43- |
| 3,48 | (м, | 2Н) , | 3, 83- |
| 3,85 | (м, | 1Н) , | 4,31- |
| 4,33 | (т, | 1Н) , | 4,38- |
| 4,40 | (т, | 1Н) , | 4, 65- |
| 4, 68 | (т, | 1Н) , | 4,77- |
| 4,79 | (т, | 1Н) , | 5,20 |
| (с, | 2Н) , | 6, 92 | -6, 98 |
| (м, | 1Н) , | 7,17 | -7,24 |
| (м, | зн) , | 7,39 | ' (с, |
| 1Н) , | 7,48 | : (с, | 1Н) , |
| 7,96 | (с, | 1Н) ; | Масса |
| (m/z) | : 401 | 3,2 (М+Н)+. |
Пример 20. №[(^^)-2-Гидроксициклогексил]-1-(2-метилсульфанилпиридин-4-илметил)-4,7дифтор-1Н-индол-3-карбоксамид
К суспензии И-[(18,28)-2-гидроксициклогексил]-1-(2-фторпиридин-4-илметил)-4,7-дифтор-1Ниндол-3-карбоксамида (пример 8, 0,050 г, 0,00012 моль) в THF (10 мл) добавляли натрий тиометилат (0,020 г, 0,00029 моль) и нагревали до 60°C в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и вливали в воду. Водный слой экстрагировали этилацетатом (25 млх3).
Органический слой высушивали над Na2SO4 и концентрировали под вакуумом для получения сырого остатка, который затем очищали препаративной TLC, используя этилацетат, с получением целевого соединения.
Выход: 9,0 мг (16,5%); Ή-ЯМР (DMSO-de, 400 МГц) δ ppm: 1,24 (м, 5Н), 1,60-1,66 (м, 2Н), 1,87-1,90 (м, 1Н), 1,94-1,97 (м, 1Н), 2,46 (с, 3H), 3,34-3,35 (м, 1Н), 3,60 (м, 1Н), 5,55 (с, 2Н), 6,71-6,73 (д, J=4 Гц, 1Н), 6,86-6,92 (м, 1Н), 6,97-7,02 (м, 2Н), 7,65-7,68 (м, 1Н), 8,09 (с, 1Н), 8,35-8,36 (д, J=5,1 Гц, 1Н); масса (m/z): 432,2 (М+Н)+.
Пример 21. N-[( 1S,2S)-2Tидроксициклогексил]-1 -(2-метилсульфанилпиридин-4-илметил)-4-фтор1Н-индол-3-карбоксамид
Целевое соединение получали экспериментальной процедурой, как описано в примере 20 с использованием примера 7 с некоторыми некритическими изменениями.
Н-ЯМР (DMSO-dfe 400 МГц) δ ppm: 1,18-1,23 (м, 4Н), 1,33-1,35 (м, 1Н), 1,60-1,66 (м, 2Н), 1,87-1,89 (м, 1Н), 1,97-1,99 (м, 1Н), 3,33-3,38 (м, 3H), 3,40-3,48 (м, 1Н), 4,70-4,71 (д, 1Н), 5,50 (с, 2Н), 6,79-6,81 (м, 1Н), 6,92-6,97 (м, 1Н), 7,11 (с, 1Н), 7,15-7,21 (м, 1Н), 7,31-7,33 (м, 1Н), 7,51-7,55 (м, 1Н), 8,10 (с, 1Н), 8,348,35 (м, 1Н); масса (m/z): 413,51 (М+Н)+.
Биологические данные.
Пример 72. Определение значений ЕС50 аллостерического потенциала в отношении Мускаринового рецептора M1.
- 24 033826
Стабильную клеточную линию СНО, экспрессирующую рекомбинантный мускариновый рецептор M1 человека и репортерную систему pCRE-Luc, использовали для клеточного теста. Этот тест предлагает нерадиоактивный подход для определения связывания соединения с GPCRs. В этом специфическом тесте измеряется уровень внутриклеточного циклического АМФ, который модулируется активацией или ингибированием рецептора. Рекомбинантные клетки содержат репортерный ген люциферазы под контролем элемента ответа цАМФ.
Вышеупомянутые клетки выращивали в 96-луночном планшете с белыми стенками и прозрачным дном в среде Hams F12, содержащей 10%-ную эмбриональную бычью сыворотку (FBS). До добавления соединений или стандартного агониста клетки выдерживали в бессывороточной среде в течение ночи. Увеличивающиеся концентрации тестируемых соединений добавляли к клеткам вместе с ЕС20 ацетилхолина в среде OptiMEM. Инкубацию продолжали при 37°C в инкубаторе CO2 в течение 4 ч. Среду удаляли и клетки промывали буферизованным солевым фосфатным раствором. Клетки лизировали и активность люциферазы измеряли в Люминометре. Единицы люминесценции выстраивали против концентраций соединений с помощью программного обеспечения Graphpad. Значения ЕС50 соединений были определены как концентрация, требуемая для стимуляции активности люциферазы на 50% в присутствии ЕС20 ацетилхолина и результаты приведены в табл. 1.
Таблица 1
| Прим. | hMl РАМ ЕС50 (нМ) | Прим. | hMl РАМ ЕС50 (нМ) |
| 1 | 1264 | 25 | 1441 |
| 2 | 681,1 | 26 | 1105 |
| 3 | 1637 | 27 | 1689 |
| 4 | 1492 | 28 | 1568 |
| 3 | 370,5 | 29 | 2920 |
| 6 | 122,5 | 30 | 1081 |
| 7 | 1360 | 31 | 1608 |
| 8 | 192 | 32 | 1586 |
| 9 | 1417 | 33 | 1374 |
| 10 | 940 | 34 | 1387 |
| 11 | 1534 | 35 | 1482 |
| 12 | 432,5 | 36 | 1349 |
| 13 | 1378 | 37 | 1985 |
| 18 | 160,2 | 38 | 1448 |
| 19 | 744 | 39 | 1485 |
| 22 | 1495 | 44 | 1306 |
| 23 | 1074 | 45 | 1163 |
1390
Пример 73. Тест связывания белка.
Несвязанные фракции новых химических соединений в плазме, гомогенате мозга и микросомах печени определяли с помощью высокопроизводительного диализа (НТ диализ). Кратко, мембраны диализа пропитывали деионизированной водой в течение 20 мин и затем деионизированной водой с 30%-ным этанолом в течение 15 мин и наконец фосфатным буфером перед использованием. Мембраны промывали фосфатным буфером перед сборкой. Мембраны выкладывали слоями между тефлоновыми пластинками блока диализа. Сток-растворы тестируемых соединений получали в концентрации 10 мМ в DMSO, разбавляли до 1 мМ в ацетонитриле и далее разбавляли до 100 мкМ в смеси воды и ацетонитрила (1:1 об./об.). Человеческую плазму (пул 3) получали из человеческой крови (3 донора) путем центрифунгирования при 4000 об/мин в течение 10 мин при 4°C. Кровь крысы и собаки получали в день исследования и центрифугировали для получения плазмы. Мозги крысы изолировали, очищали и гомогенизировали с 2 объемами буфера (3х разбавление). Микросомы печени получали в 0,5 мг/мл в фосфатном буфере (100 мМ, рН 7,4). В камеры для диализа загружали 150 мкл 100 мМ фосфатного буфера (рН 7,4) в 3 экземплярах. Матричные камеры загружали 150 мкл гомогената плазмы или мозга или микросомальной суспензии, дополненных тестируемыми соединениями в конечной концентрации 1 мкМ. 50 мкл образца удаляли из обеих камер в 0 ч. Планшет запечатывали и инкубировали при 37°C в течение 6 ч при 100 об/мин. Через 6 ч 50 мкл образца удаляли из обеих камер. Равные объемы буфера или человеческой плазмы/микросомальной суспензии добавляли к плазме/микросомальным и буферным образцам соответственно, для создания идентичных матриксов образцов для анализа. Образцы осаждали, используя 150 мкл ацетонитрила, содержащего флуоксетин в качестве внутреннего стандарта. Все образцы центрифугиро- 25 033826 вали при 10000 об/мин в течение 10 мин при 4°C. Супернатанты анализировали LC-MS/MS и результаты приведены в табл. 2.
Таблица 2
| Пример | Виды | Fll (Среднее ± SEM, П=3) | ||
| Плазма | Мозг | Микросомы | ||
| 1 | Крыса | 0.267 ± 0.03 | 0.166 ±0.01 | 0.836 ± 0.04 |
| Собака | 0.217 ±0.21 | NA | 0.982 ±0.01 | |
| Человек | 0.197 ±0.01 | NA | 1.046 ±0.07 | |
| 2 | Крыса | 0.068 ±0.002 | 0.015 ±0.001 | 0.679 ±0.081 |
| Собака | 0.087 + 0.008 | NA | 0.576 ± 0.079 | |
| Человек | 0.040 + 0.002 | NA | 0.459 ± 0.046 | |
| 5 | Крыса | 0.210 ±0.01 | 0.128 ±0.01 | 0.779 ± 0.01 |
| Собака | 0.163 ±0.02 | NA | 0.746 ± 0.004 | |
| Человек | 0.077 ± 0.01 | NA | 0.899 ±0.03 | |
| 6 | Крыса | 0.050 ± 0.008 | 0.014 ± 0.001 | 0.560 ± 0.048 |
| Собака | 0.043 ± 0.002 | NA | 0.713 ±0.041 | |
| Человек | 0.030 ±0.003 | NA | 0.546 ±0.018 | |
| 7 | Крыса | 0.20 ± 0.02 | 0.06 ± 0.004 | 0.80 ± 0.04 |
| Собака | 0.20 ± 0.01 | NA | 0.60 ± 0.03 | |
| Человек | 0.10 ±0.004 | NA | 0.70 ±0.03 | |
| 8 | Крыса | 0.089 ± 0.01 | 0.0348 ± 0.0001 | 0.606 ± 0.008 |
| Собака | 0.064 ±0.01 | NA | 0.679 ±0.066 | |
| Человек | 0.079 ±0.006 | NA | 0.626 ±0.037 | |
| 22 | Крыса | 0.315 ±0.03 | 0.067 ± 0.002 | 0.902 ±0.006 |
| Собака | 0.310 ±0.01 | NA | 0.866 ± 0.034 | |
| Человек | 0.309 ±0.008 | NA | 0.788 ±0.031 |
Пример 74. Фармакокинетическое исследование на грызунах.
Самцы крыс Wistar (260+50 г) использовались в качестве подопытных животных. Животных размещали индивидуально в клетке из полипропилена. За два дня до исследования самцов крыс Wistar анестезировали изофлюраном для хирургического размещения катетера в яремной вене. Крыс рандомизированно разделяли для перорального (3 мг/кг) и внутривенного (в/в) (1 мг/кг) введения (п=3/группа) и держали без пищи в течение ночи перед пероральным (п/о) введением. Однако крысам, предназначенным для внутривенного введения, доступ к пище и воде предоставляли ad libitum.
В предопределенный момент времени кровь собирали через яремную вену и дополняли эквивалентным объемом нормального солевого раствора. Собранную кровь помещали в маркированную пробирку Эппендорфа, содержащую 10 мкл гепарина в качестве антикоагелянта. Типично образцы крови собирали в следующие моменты времени: 0,08, 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 6, 8 и 24 ч после введения. Кровь центрифугировали при 4000 об/мин в течение 10 мин. Плазму отделяли и сохраняли в замороженном виде при -80°C до анализа. Концентрации тестируемых соединений определяли количественно в плазме способом качественной LC-MS/MS с использованием подходящего метода экстракции. Тестируемые соединения определяли количественно в диапазоне калибровки приблизительно 1-1000 нг/мл в плазме. Образцы исследования анализировали с помощью калибровочных образцов в партии и образцах контроля качества в составе партии.
Фармакокинетические параметры Cmax, AUCt, T1/2, клиренс и биодоступность (%F) вычисляли с помощью стандартной некомпартментной модели с использованием пакетов программ Phoenix WinNonlin 6.0.2 или 6.0.3 и результаты сведены в табл. 3.
- 26 033826
Таблица 3
| Пример | RO А | Носитель | Стах (нг/мл) | AUCo-t (нг.ч/мл) | Т1/2 (Ч) | Клиренс (мл/мин/кг) | % F |
| 1 | 0.25 % Tween 80 + 99.75 % НЕС раствор | 1187 + 81 | 5163 ±464 | 2.9±0.2 | - | 76 ± 7 | |
| в/в | 5 % Pharmaso Ive + 45 % Пропилен гликоль + 50% PEG 400 | - | 2250 ±190 | 3.0±0.3 | 7.3 ±0.4 | ||
| 2 | п/о | 0.25 % Tween 80 + 99.75 % НЕС раствор | 632 + 167 | 2161+599 | 1.9+0.2 | - | 63 ± 17 |
| в/в | 5 % Pharmaso Ive + 45 % Пропилен гликоль + 50% PEG 400 | - | 1146 + 245 | 1.9+0.4 | 16.1 ±2.8 | ||
| 5 | п/о | 0.25 % Tween 80 + 99.75 % НЕС раствор | 2681+66 4 | 7867±2857 | 3.3±0.3 | - | 90 ± 33 |
| в/в | 5 % Pharmaso Ive + 45 % Пропилен гликоль | - | 2921+1432 | 4.0+1.7 | 7.1 ±4.3 |
- 27 033826
| + 50% PEG 400 | |||||||
| 7 | n/o | 0.25 % Tween 80 + 99.75 % НЕС раствор | 783 ± 254 | 2261 +471 | 1.4+0.2 | - | 67 ± 14 |
| в/в | 5% Pharmaso Ive + 45 % Пропилен гликоль + 50% PEG 400 | - | 1119 ±119 | 2.0+0.4 | 14.2 ± 2.0 | ||
| 8 | п/о | 0.25 % Tween 80 + 99.75 % НЕС раствор | 578 + 170 | 2497 ± 842 | 2.3±1.8 | - | 45 ± 15 |
| в/в | 5 % Pharmaso Ive + 45 % Пропилен гликоль + 50% PEG 400 | - | 1834 ±562 | 1.8±0.3 | 9±3 | ||
| 12 | п/о | 0.25 % Tween 80 + 99.75 | 337 ± 141 | 1140+114 | 3.0+3.0 | - | 62 ± 6 |
- 28 033826
| % НЕС раствор | |||||||
| в/в | 5% Pharmaso Ive + 45 % Пропилен гл и ноль + 50% PEG 400 | - | 609 ± 62 | 1.6±0.5 | 26.7 ± 3.4 | ||
| 22 | п/о | Вода для анализа | 207 ± 76 | 1647 ± 147 | 4.8±2.8 | - | 60 ± 5 |
| в/в | Вода для инъекций | - | 908 ± 198 | 7.6±1.7 | 17.1 ±3.3 |
ROA - путь введения.
Пример 75. Исследование проникновения в мозг на грызунах.
Самцы крыс Wistar (260+40 г) использовались в качестве подопытных животных. Трое животных были размещены в каждой клетке. Животным давали воду и пищу ad libitum в течение эксперимента и держали в условиях 12-часового цикла свет/темнота.
Проникновение в мозг определяли у крыс дискретным образом. За один день до дня введения самцов крыс Wistar акклиматизировали и рандомизированно распределяли по группам согласно их массе тела. В каждый момент времени (0,5, 1 и 2 ч) использовались n=3 животных.
Тестируемые соединения были соответствующим образом предварительно составлены и введены перорально в дозе (эквивалент свободного основания) 3 мг/кг. Образцы крови удаляли кардиальной пункцией, используя анестезию изофлюраном. Животных умерщвляли для сбора ткани мозга. Плазму отделяли и образцы мозга гомогенизировали и сохраняли в замороженном виде при -20°C до анализа. Концентрации тестируемых соединений в плазме и мозге определяли с помощью способа LC-MS/MS.
Тестируемые соединения определяли количественно в плазме и гомогенате мозга способом качественной LC-MS/MS с использованием подходящего метода экстракции. Тестируемые соединения были определены количественно в диапазоне калибровки 1-500 нг/мл в плазме и гомогенате мозга. Образцы исследования анализировали с помощью калибровочных образцов в партии и образцах контроля качества в составе партии. Вычисляли степень отношения мозг-плазма (Cb/Ср) и результаты представлены в табл. 4.
Таблица 4
| Прим. | Проникновение в мозг крысы при однократном введении (СЬ/Ср) в количестве 3 мг/кг, п/о |
| 1 | 0,30 ± 0, 05 |
| 2 | 0,95 ± 0,17 |
| 5 | 0,50 + 0, 04 |
| 6 | 2,09 ± 0,46 |
| 7 | 0, 61 ± 0,01 |
| 8 | 1,1 ± 0,1 |
| 10 | 2,40 ± 0, 30 |
| 11 | 1,59 ± 0, 35 |
| 12 | 1, 64 ± 0,12 |
Пример 76. Модель задачи распознавания объектов.
Свойства улучшения когнитивной функции соединений согласно этому изобретению оценивали при помощи этой модели.
Самцы крыс Wistar (8-10 недель) использовались в качестве подопытных животных. Четырех животных размещали в каждой клетке. Животных держали в условиях 20%-ной пищевой депривации со
- 29 033826 дня, предшествующего эксперименту. Воду давали ad libitum в течение эксперимента. Животных держали в условиях 12-часового цикла свет/темнота при комнатных температуре и влажности. Эксперимент проводили на открытой области, отмеченной акриловой краской. Крыс приучали к индивидуальным аренам (открытая область) в течение 1 ч в отсутствие каких-либо объектов в день 1.
Одна группа из 12 крыс получала носитель, и другая группа животных получала соединение формулы (I) перед фазами ознакомления (T1) и выбора (Т2). Во время фазы ознакомления, (T1), крыс размещали индивидуально на арене на 3 мин, в течение которых два идентичных объекта (a1 и а2) помещали в 10 см от стены. Через 24 ч после T1 проводили испытание на анализ долговременной памяти.
Тех же крыс помещали на ту же арену, как в испытании Т1. Во время фазы выбора (Т2) крысам давали исследовать арену в течение 3 мин в присутствии копии знакомого объекта (а3) и одного нового объекта (b). Во время испытания Т1 и Т2 исследования каждого объекта (определяемое как фырканье, облизывание, жевание или движения усов при перемещении носа к объекту на расстоянии меньше чем 1 см) регистрировали с помощью секундомера.
Т1 является общим временем, потраченным на исследование знакомых объектов (a1+a2).
Т2 является общим временем, потраченным на исследование знакомого объекта и нового объекта (аз+Ь).
Дискриминационный индекс=время, проведенное с новым объектом/(время, проведенное с новым и знакомым объектом).
Анализ распознавания объектов проводили, как описано в Behavioural Brain Research, 1988, 31, 4759 и результаты приведены в табл. 5.
Таблица 5
| Прим. | Доза мг/кг, п/о | Среднее время исследования ± S.E.M (сек) | Вывод |
| Знакомый | Новый объект |
| объект | ||||
| 1 | 0,3 | 11,31 ± 1,07 | 28,92 ± 3,54 | Активный |
| 2 | 1 | 9,06 ± 1,75 | 15,09 ± 2,19 | Активный |
| 5 | 0, 3 | 11,00 ± 0,81 | 19,64 ± 1,74 | Активный |
| 6 | 3 | 15,75 ± 1,71 | 23, 67 ± 2, 62 | Активный |
| 7 | 1 | 9,16 ± 0,83 | 19,56 ± 1,96 | Активный |
| 8 | 0,3 | 7,59 ± 1,02 | 14,36 ± 1,56 | Активный |
Пример 77. Модель задачи распознавания объектов - провокация скополамином.
Свойства улучшения познания соединений согласно этому изобретению оценивали при помощи этой модели.
Самцы крыс Wistar (8-10 недель) использовались в качестве подопытных животных. Четырех животных размещали в каждой клетке. Животных держали в условиях 20%-ной пищевой депривации со дня, предшествующего эксперименту. Воду давали ad libitum в течение эксперимента. Животных держали в условиях 12-часового цикла свет/темнота при комнатных температуре и влажности. Эксперимент проводили на открытой области, отмеченной акриловой краской. Крыс приучали к индивидуальным аренам (открытая область) в течение 1 ч в отсутствие каких-либо объектов в день 1.
Крысы получали носитель или носитель и скополамин, или соединение формулы (I) и скополамин, перед ознакомлением (T1). Во время фазы ознакомления, (T1), крыс размещали индивидуально на арене на 3 мин, в течение которых два идентичных объекта (a1 и а2) помещали в 10 см от стены. Через 3 мин после T1, проводили испытание на тест на запоминание выполнялось. Тех же крыс помещали на ту же арену, как в испытании T1. Во время фазы выбора (Т2) крысам давали исследовать арену в течение 3 мин в присутствии копии знакомого объекта (a3) и одного нового объекта (b). Во время испытания T1 и Т2, исследования каждого объекта (определяемое как фырканье, облизывание, жевание или движения усов при перемещении носа к объекту на расстоянии меньше чем 1 см) регистрировали с помощью секундомера.
Т1 является общим временем, потраченным на исследование знакомых объектов (a1+a2).
Т2 является общим временем, потраченным на исследование знакомого объекта и нового объекта (яз+Ь).
Дискриминационный индекс=время, проведенное с новым объектом/(время, проведенное с новым и знакомым объектом).
- 30 033826
Таблица 6
| Прим. | Доза мг/кг, п/о | Среднее время исследования ± S.E.M (сек) | Вывод | ||
| Знакомый объект | Новый | объект | |||
| 1 | 0,3 | 7,54 ± 1,93 | 13, 07 | ± 1,79 | Активный |
| 2 | 0,3 | 14,29 ± 1,92 | 20, 93 | ± 2,89 | Активный |
| 5 | 1 | 13,61 ± 1,79 | 25, 72 | ± 3, 67 | Активный |
Пример 78. Контекстная задача выработки условного рефлекса страха.
Эксперимент проводили в течение двух дней. В день 1 крыс помещали в камеру для наблюдения оперантного поведения и давали акклиматизироваться в течение 2 мин. Крысы получали неизбежный удар в лапу (безусловный стимул (US): удар током 0,5-0,7 мА в течение 3 с). После интервала 1 мин удары повторяли для поставки в общей сложности трех US. Крысами после обучения вводили носитель или тестируемое соединение. Скополамин (0,3 мг/кг, подкожно) вводили спустя 120 мин после обучения.
В день 2 крыс помещали в камеру для наблюдения оперантного поведения и время полного замораживания оценивали в течение 5 мин. Результаты приведены на фиг. 1.
Пример 79. Оценка уровней sAPPa коры в мозге крысы.
Экспериментальная процедура.
Самцов крыс Wistar (250+45 г) рандомизированно разделяли на группы, получавшие разные виды лечения (n=5 на группу). Контрольной группе крыс вводили внутрибрюшинную (в/б) инъекцию носителя (99,75% 0,25%-ной гидроксиэтилцеллюлозы ННХ+0,25% tween 80 для примеров 8 и 22; 5% Pharmasolve+45% пропиленгликоля+50% полиэтиленгликоля 400 для примера 1). Крысам в контрольных группах назначали одну дозу тестируемого соединения, которую вводили единственной внутрибрюшинной инъекцией тестируемого соединения (объем дозы 2 мл/кг). Крыс умерщвляли сворачиванием шеи через 60 мин после лечения. Мозги быстро изолировали и кору анализировали при -20°C. Кору немедленно сохраняли на сухом льду и взвешивали, после чего сохраняли при -80°C до определения количества sAPPa с использованием твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA).
Получение пробы.
1. Таблетки коктейля ингибитора протеазы (полный мини-, Make-Roche; 1 таблетка для 8 мл) добавляли к солевому раствору буфера Трис (TBS) до использования буфера для обработки ткани.
2. Ткани коры оттаивали и гомогенизировали в пяти объемах TBS и раствор центрифугировали при 15000 об/мин при 4°C в течение 90 мин.
3. Супернатант отбрасывали и гомогенизировали в пяти объемах TBS. Образцы центрифугировали при 15000 об/мин при 4°C в течение 30 мин.
4. Супернатант отбрасывали и осадок обрабатывали ультразвуком в десяти объемах 50 мМ буфера Трис (рН: 7,6), содержащего 6М Гуанидин-HCl. Обработку ультразвуком повторяли четыре раза с продолжительностью по пять секунд каждый раз.
5. Полученную смесь инкубировали при комнатной температуре в течение 30 мин и центрифугировали при 15000 об/мин при 4°C в течение 30 мин. Супернатант разбавляли 100х буфером EIA до добавления в предварительно покрытые планшеты ELISA.
Измерение sAPPa с помощью набора ELISA.
Для исследования влияния острого лечения тестируемым соединением на уровни sAPPa экспрессию этого белка измеряли в образцах, полученных из гомогенатов мозга подвергнутых и не подвергнутых лечению крыс путем использования теста ELISA. Вся процедура была осуществлена, как описано в руководстве набора ELISA (Mouse/Rat sAPPa (highly sensitive) assay kit, Catalog Number: JP27419, Immuno-Biological Laboratories Co. Ltd, Гамбург, Германия).
Статистический анализ.
Статистические анализы проводили с помощью Graph Pad Prism (версия 4). Результаты представлены как средние ± SEM уровни sAPPa, выраженные как процент от контрольных значений, полученных на крысах, обработанных носителем. Статистическую значимость после лечения оценивали с помощью однонаправленного ANOVA с последующим анализом Даннетта и уровень значимости был установлен ниже значения р, меньшего чем 0,05, и результаты представлены в табл. 7.
- 31 033826
Таблица 7. Эффект тестируемых соединений на уровни sAPPa коры у самцов крыс Wistar
| Прим. | Уровни sAPPot (% носителя^ | ) | Вывод | |
| 1.0 мг/кг, в/б | 3f 0 мг/кг, в/б | 10,0 мг/кг, в/б | ||
| 1 | 155 ± б** | 153 ± 7** | 142 ± б** | Активный |
| 8 | 120 ± 17 | 137 + 14 | 173 ± 10** | Активный |
Значения представляют собой средние+SEM (н=5/группа). ** р <0,01 vs. носитель (пост-тест Даннетта).
Пример 80. Модуляция мозгового кровотока во фронтальной коре.
Эффект тестируемого соединения на модуляцию мозгового кровотока оценивали с использованием крыс.
Крыс акклиматизировали к лабораторной среде в течение по меньшей мере 7 дней. Крыс (300-350 г) размещали в группах по четыре в контролируемой среде (темп.=21 ± 3°C; влажность=30-70%) и держали в условиях 12-часового цикла свет/темнота с включением света в 7:00. Пищу и воду обеспечивали ad libitum.
Крыс анестезировали 12%-ным уретаном (внутрибрюшинно). Температуру тела животных поддерживали при 37°C с помощью электрогрелки и ректального температурного зонда. Маленький разрез осуществляли в одной из вентральных сторон задней конечности и бедренную вену канюлировали катетером PE10 для введения лекарственного средства. Затем животное помещали в стереотаксическую структуру и срединный разрез осуществляли для экспонирования черепа. Просверливали трепанационное отверстие нал фронтальной корой (стереотаксические координаты 1 мм перед и 4 мм вбок от брегмы). Кислород поставляли через носовой обтекатель стереотаксического аппарата, связанного с контролируемым поставщиком газа с потоком 200 мл/мин. Лазерный Допплеровский зонд (AD Instruments Inc.) помещали над отверстием для контроля мозгового кровотока. Лазерный Допплеровский зонд был подсоединен к компьютеризированной системе сбора и накопления данных (PowerLab 16/30, AD Instruments Inc.). Носитель или тестируемое соединение вводили внутривенно после того, как мозговой кровоток был стабилен в течение 30 мин. Данные мозгового кровотока собирали в течение дальнейших 90 мин. Полученные данные вычисляли как увеличение процента относительно базового уровня тока крови в покое. Данные для тестируемого соединения сравнивали с контрольной группой с помощью однонаправленного ANOVA с пост-тестом Bonferroni.
Ссылка.
Psychopharmacology (Berl). 2013, 225, 21-30.
Результат.
Пример 1 значительно увеличивал мозговой кровоток, как показано на фиг. 2.
Claims (8)
- ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Соединение фториндола формулы (I) в которойR1 обозначаетR2 обозначает- 32 033826сн3 причем * обозначает точку присоединения; R3 является фтором или водородом;R4 является галогеном, -S-CH3 или водородом;R5 является -СН3, -CH2CH2F или водородом;а=1 или 2;или его изотопная форма, стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль.
- 2. Соединение по п.1, в котором R1 обозначаетR2 обозначает
- 3. Соединение по п.1, в котором R1 обозначаетR2 обозначает
- 4. Соединение по любому из пп.1-3, выбранное из группы, состоящей из следующих соединений: N-[(1 S,2S)-2-гидроксициклогексил]-1 -(1 -метил-1 Н-пиразол-4-илметил)-4-фтор-1 Н-индол-3 карбоксамид;№[(^^)-2-гидроксициклогексил]-1-(2-хлорпиридин-4-илметил)-4-фтор-1Н-индол-3-карбоксамид; N-[(1 R,2R)-2-гидроксициклогексил] -1-(1 -метил-1 Н-пиразол-4-илметил)-4-фтор-1 Н-индол-3 карбоксамид;N-[(1 S,2S)-2-гидроксициклогексил]-1 -(1 -метил-1 Н-индазол-3 -илметил)-4,7-дифтор-1 Н-индол-3 карбоксамид;N-[(1 S,2S)-2-гидроксициклогексил]-1 -(1 -метил-1 Н-пиразол-4-илметил)-4,7-дифтор-1 Н-индол-3 карбоксамид;№[(^^)-2-гидроксициклогексил]-1-(2-хлорпиридин-4-илметил)-4,7-дифтор-1Н-индол-3- 33 033826 карбоксамид;К-[(18,28)-2-гидроксициклогексил]-1-(2-фторпиридин-4-илметил)-4-фтор-1Н-индол-3-карбоксамид;К-[(18,28)-2-гидроксициклогексил]-1-(2-фторпиридин-4-илметил)-4,7-дифтор-1Н-индол-3карбоксамид;К-[(18,28)-2-гидроксициклогексил]-1-(3-фторпиридин-4-илметил)-4-фтор-1Н-индол-3-карбоксамид; К-[(18,28)-2-гидроксициклогексил]-1-(3-фторпиридин-4-илметил)-4,7-дифтор-1Н-индол-3карбоксамид;К-[(18,28)-2-гидроксициклогексил]-1-(2,5-дифторпиридин-4-илметил)-4-фтор-1Н-индол-3карбоксамид;К-[(18,28)-2-гидроксициклогексил]-1-(2,5-дифторпиридин-4-илметил)-4,7-дифтор-1Н-индол-3карбоксамид;К-[(18,28)-2-гидроксициклогексил]-1-(2,3-дифторпиридин-4-илметил)-4-фтор-1Н-индол-3карбоксамид;N-[( 18,28)-2-гидроксициклогексил]-1-(1 -пиридин-4-илметил)-4-фтор-1Н-индол-3-карбоксамид;N-[( 18,28)-2-гидроксициклогексил]-1-(1 Н-пиразол-4-илметил)-4-фтор-1 Н-индол-3-карбоксамид; М[(18,28)-2-гидроксициклогексил]-1-(2-бромтиазол-5-илметил)-4-фтор-1Н-индол-3-карбоксамид;N-[( 18,28)-2-гидроксициклогексил]-1-(1 -этил-5-метил-1 Н-пиразол-4-илметил)-4-фтор-1 Н-индол-3карбоксамид;М[(18,28)-2-гидроксициклогексил]-1-(бензотиазол-6-илметил)-4-фтор-1Н-индол-3-карбоксамид;N-[( 18,28)-2-гидроксициклогексил]-1-(1 -(2-фторэтил)-1 Н-пиразол-4-илметил)-4-фтор-1 Н-индол-3карбоксамид;М[(18,28)-2-гидроксициклогексил]-1-(2-метилсульфанилпиридин-4-илметил)-4,7-дифтор-1Ниндол-3-карбоксамид иN-[( 18,28)-2-гидроксициклогексил]-1 -(2-метилсульфанилпиридин-4-илметил)-4-фтор-1 Н-индол-3карбоксамид;или его фармацевтически приемлемая соль.
- 5. Фармацевтическая композиция для клинических состояний, опосредованных мускариновым рецептором M1, включающая терапевтически эффективное количество соединения по любому из пп.1-4 и фармацевтически приемлемые эксципиенты или носители, где клинические состояния выбраны из болезни Альцгеймера, шизофрении, когнитивных нарушений, боли или нарушений сна.
- 6. Применение соединения по любому из пп.1-4 для получения лекарственного средства для лечения нарушения, выбранного из болезни Альцгеймера, шизофрении, когнитивных нарушений, боли или нарушений сна.
- 7. Применение соединения по любому из пп.1-4 для лечения нарушения, связанного с мускариновым рецептором M1.
- 8. Применение по п.7, в котором нарушение, связанное с мускариновым рецептором M1, выбрано из группы, состоящей из болезни Альцгеймера, шизофрении, когнитивных нарушений, боли или нарушений сна.Эффект тестируемого соединения в контекстной задаче выработки условного рефлекса на страхЕЗ Носитель 1 мл/кг, подкожно + Носитель 1 мл/кг, подкожноНоситель 2 мл/кг, перорально+Скополамин 0,3 мг/кг, подкожно ЕЯ Пример 8 0,3 мг/кг, перорально+Скополамин 0,3 мг/кг, подкожно ЕЗ Пример 81 мг/кг, перорально + Скополамин 0,3 мг/кг, подкожно ЕЗ Пример 8 3 мг/кг, перорально + Скополамин 0,3 мг/кг, подкожно И Пример 810 мг/кг, перорально + Скополамин 0,3 мг/кг, подкожно ЕН Пример 8 20 мг/кг, перорально + Скополамин 0,3 мг/кг, подкожно*р<о.о5, **p<o.oi, ***p<o.ooi относ. СкополаминаФиг. 1- 34 033826Эффект тестируемого соединения на модуляцию мозгового кровообращения во фронтальной кореНоситель (0,33 мл/кг, внутривенно) -♦-Пример 1 (1 мг/кг, внутривенно)О 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100Время (мин. после инфузии) *р<о.О5 относ, носителя, Двусторонний ANOVA с последующими пост-тестами Bonferroni, п=6-8Фиг. 2
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IN4809CH2015 | 2015-09-10 | ||
| PCT/IB2016/054290 WO2017042643A1 (en) | 2015-09-10 | 2016-07-19 | Fluoroindole derivatives as muscarinic m1 receptor positive allosteric modulators |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA201890684A1 EA201890684A1 (ru) | 2018-10-31 |
| EA033826B1 true EA033826B1 (ru) | 2019-11-29 |
Family
ID=56618200
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| EA201890684A EA033826B1 (ru) | 2015-09-10 | 2016-07-19 | Производные фториндола в качестве положительных аллостерических модуляторов мускаринового рецептора m1 |
Country Status (28)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US10294217B2 (ru) |
| EP (1) | EP3347349B1 (ru) |
| JP (1) | JP6553811B2 (ru) |
| KR (1) | KR102068237B1 (ru) |
| CN (1) | CN108026073B (ru) |
| AU (1) | AU2016320645B2 (ru) |
| BR (1) | BR112018004719B1 (ru) |
| CA (1) | CA2997956C (ru) |
| CY (1) | CY1122321T1 (ru) |
| DK (1) | DK3347349T3 (ru) |
| EA (1) | EA033826B1 (ru) |
| ES (1) | ES2750868T3 (ru) |
| HR (1) | HRP20191869T1 (ru) |
| HU (1) | HUE047056T2 (ru) |
| IL (1) | IL257869A (ru) |
| LT (1) | LT3347349T (ru) |
| MA (1) | MA42769B1 (ru) |
| MD (1) | MD3347349T2 (ru) |
| ME (1) | ME03571B (ru) |
| MX (1) | MX379454B (ru) |
| NZ (1) | NZ740587A (ru) |
| PL (1) | PL3347349T3 (ru) |
| PT (1) | PT3347349T (ru) |
| RS (1) | RS59473B1 (ru) |
| SI (1) | SI3347349T1 (ru) |
| SM (1) | SMT201900608T1 (ru) |
| WO (1) | WO2017042643A1 (ru) |
| ZA (1) | ZA201801463B (ru) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR102438588B1 (ko) | 2017-10-18 | 2022-08-31 | 수벤 라이프 사이언시스 리미티드 | 무스카린 m1 수용체 양성 알로스테릭 조절제로서 헤테로아릴 화합물 |
| MX2020004339A (es) | 2017-10-27 | 2020-08-03 | Suven Life Sciences Ltd | Moduladores alostericos positivos del receptor m1 muscarinico. |
| JP2023512821A (ja) | 2020-02-04 | 2023-03-29 | マインドセット ファーマ インコーポレイテッド | 中枢神経系障害の治療のためのセロトニン作動性幻覚薬としての３－ピロリジンインドール誘導体 |
| WO2023114224A1 (en) | 2021-12-13 | 2023-06-22 | Sage Therapeutics, Inc. | Combination of muscarinic receptor positive modulators and nmda positive allosteric modulators |
| CN115385849B (zh) * | 2022-09-14 | 2024-01-26 | 南通瑞合达医药科技有限公司 | 一种N-Boc-3-氟-4-哌啶酮提纯的方法 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2011084368A1 (en) * | 2009-12-17 | 2011-07-14 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Quinoline amide m1 receptor positive allosteric modulators |
| WO2015044072A1 (en) * | 2013-09-27 | 2015-04-02 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Indol and indazol derivatives |
| US20150094328A1 (en) * | 2013-10-01 | 2015-04-02 | Eisai R&D Management Co., Ltd. | 4-Azaindole Derivatives |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60123485A (ja) | 1983-12-08 | 1985-07-02 | Yoshitomi Pharmaceut Ind Ltd | インド−ル−３−カルボキサミド誘導体 |
| CA2399791A1 (en) | 2000-02-11 | 2001-08-16 | Bristol-Myers Squibb Company | Cannabinoid receptor modulators, their processes of preparation, and use of cannabinoid receptor modulators in treating respiratory and non-respiratory diseases |
| ATE475650T1 (de) | 2005-12-05 | 2010-08-15 | Merck Sharp & Dohme | Positive allosterische chinolon-m1- rezeptormodulatoren |
| RU2507204C2 (ru) * | 2009-08-31 | 2014-02-20 | Мерк Шарп И Доум Корп. | Положительные аллостерические модуляторы м1-рецепторов на основе пираниларилметилбензохиназолинона |
| EP2575454B1 (en) | 2010-05-28 | 2018-08-29 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Naphthalene carboxamide m1 receptor positive allosteric modulators |
| TW201512197A (zh) | 2013-08-30 | 2015-04-01 | Hoffmann La Roche | 吡咯并吡啶或吡唑并吡啶衍生物 |
| US9708278B2 (en) | 2013-11-27 | 2017-07-18 | Vanderbilt University | Substituted 4-benzyl-3,4-dihydro-2H-benzo[B][1,4]oxazine-2-carboxamide analogs as positive allosteric modulators of muscarinic acetycholine receptor M1 |
-
2016
- 2016-07-19 PT PT167502590T patent/PT3347349T/pt unknown
- 2016-07-19 DK DK16750259T patent/DK3347349T3/da active
- 2016-07-19 BR BR112018004719-8A patent/BR112018004719B1/pt active IP Right Grant
- 2016-07-19 AU AU2016320645A patent/AU2016320645B2/en active Active
- 2016-07-19 ES ES16750259T patent/ES2750868T3/es active Active
- 2016-07-19 ME MEP-2019-288A patent/ME03571B/me unknown
- 2016-07-19 HR HRP20191869TT patent/HRP20191869T1/hr unknown
- 2016-07-19 SM SM20190608T patent/SMT201900608T1/it unknown
- 2016-07-19 NZ NZ740587A patent/NZ740587A/en unknown
- 2016-07-19 SI SI201630447T patent/SI3347349T1/sl unknown
- 2016-07-19 PL PL16750259T patent/PL3347349T3/pl unknown
- 2016-07-19 HU HUE16750259A patent/HUE047056T2/hu unknown
- 2016-07-19 LT LT16750259T patent/LT3347349T/lt unknown
- 2016-07-19 RS RS20191328A patent/RS59473B1/sr unknown
- 2016-07-19 MX MX2018002821A patent/MX379454B/es unknown
- 2016-07-19 CN CN201680052764.2A patent/CN108026073B/zh active Active
- 2016-07-19 JP JP2018512868A patent/JP6553811B2/ja active Active
- 2016-07-19 MD MDE20180689 patent/MD3347349T2/ro unknown
- 2016-07-19 EA EA201890684A patent/EA033826B1/ru unknown
- 2016-07-19 WO PCT/IB2016/054290 patent/WO2017042643A1/en not_active Ceased
- 2016-07-19 EP EP16750259.0A patent/EP3347349B1/en active Active
- 2016-07-19 KR KR1020187009938A patent/KR102068237B1/ko active Active
- 2016-07-19 US US15/758,313 patent/US10294217B2/en active Active
- 2016-07-19 MA MA42769A patent/MA42769B1/fr unknown
- 2016-07-19 CA CA2997956A patent/CA2997956C/en active Active
-
2018
- 2018-03-02 ZA ZA2018/01463A patent/ZA201801463B/en unknown
- 2018-03-05 IL IL257869A patent/IL257869A/en active IP Right Grant
-
2019
- 2019-10-16 CY CY20191101086T patent/CY1122321T1/el unknown
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2011084368A1 (en) * | 2009-12-17 | 2011-07-14 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Quinoline amide m1 receptor positive allosteric modulators |
| WO2015044072A1 (en) * | 2013-09-27 | 2015-04-02 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Indol and indazol derivatives |
| US20150094328A1 (en) * | 2013-10-01 | 2015-04-02 | Eisai R&D Management Co., Ltd. | 4-Azaindole Derivatives |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA2963321C (en) | Novel methyl-piperidine compounds useful for inhibiting microsomal prostaglandin e2 synthase-1 | |
| JP2025098178A (ja) | ピロリジン化合物 | |
| DK2519514T3 (en) | Neuronal nicotinic alpha4beta2-acetylcholine receptor ligands | |
| EA033826B1 (ru) | Производные фториндола в качестве положительных аллостерических модуляторов мускаринового рецептора m1 | |
| JP2024517678A (ja) | ソルチリン活性の修飾物質 | |
| EP3303331B1 (en) | Muscarinic m1 receptor positive allosteric modulators | |
| EA030034B1 (ru) | Азетидинилоксифенилпирролидиновые соединения | |
| KR20220162159A (ko) | Sstr4 작용제로서의 n-헤테로아릴알킬-2-(헤테로사이클릴 및 헤테로사이클릴메틸)아세트아미드 유도체 | |
| EA017007B1 (ru) | Соединения 5-(гетероциклил)алкил-n-(арилсульфонил)индола и их применение в качестве лигандов 5-ht | |
| EA022043B1 (ru) | Сульфоновые соединения в качестве лигандов 5-htрецептора | |
| US20170240535A1 (en) | Hdac1/2 inhibitors for the treatment of neurodegenerative and/or cognitive disorders | |
| AU2009248231A1 (en) | Novel N-(2-amino-phenyl)-acrylamides | |
| EA016594B1 (ru) | Производные 1-(аминоалкоксиарилсульфонил)индола в качестве 5-нтлигандов | |
| EA031089B1 (ru) | Кристаллический (2s)-3-[(3s,4s)-3-[(1r)-1-гидроксиэтил]-4-(4-метокси-3-{[1-(5-метилпиридин-2-ил)азетидин-3-ил]окси}фенил)-3-метилпирролидин-1-ил]-3-оксопропан-1,2-диол | |
| HK1247914B (zh) | 作为毒蕈硷性m1受体正向别构调节剂的氟吲哚衍生物 | |
| JP2025540298A (ja) | Ｈｄａｃ阻害剤およびその使用 | |
| JP2020186182A (ja) | 標的蛋白質分解誘導化合物 | |
| EA045074B1 (ru) | Соединения пирролидина | |
| EP2093218A1 (en) | Arylalkyl substituted imidazolidinones |