EA020566B1

EA020566B1 - Спироциклические производные амидов

Info

Publication number: EA020566B1
Application number: EA201290077A
Authority: EA
Inventors: Лилиан Алькараз; Эндрю Бэйли; Николас Киндон
Original assignee: Астразенека Аб; Пулмаджин Терапеутикс (Синерджи) Лимитед
Priority date: 2009-07-31
Filing date: 2010-07-29
Publication date: 2014-12-30
Also published as: IL217557A; MY163117A; ZA201201473B; GT201200028A; IL217557A0; EP2459572B1; CO6491034A2; MX2012001232A; JP2013500958A; BR112012008043A2; SA110310628B1; US20110053909A1; UY32814A; KR20120056838A; HN2012000217A; CA2768527A1; EA201290077A1; TWI443103B; US20130018037A1; NI201200018A

Abstract

Изобретение относится к спироциклическим производным амидов, представляющим собойилии их фармацевтически приемлемым солям. Соединения по изобретению обладают активностью в качестве фармацевтических средств, в частности в качестве средств с двойным действием агонистов адренергических β-рецепторов и антихолинергических агентов.

Description

Настоящее изобретение относится к спироциклическим производным амидов.

Первая линия терапии для ряда легочных расстройств, включая хроническую обструктивную болезнь легких (СОРЭ) и астму, осуществляется посредством применения бронходилататоров. Антагонисты мускариновых рецепторов (антихолинергические средства) представляют собой бронходилататоры, которые проявляют свою эффективность посредством снижения вагусного холинергического тонуса, основного обратимого компонента сужения дыхательных путей при СОРЭ. Агонисты β-адренорецепторов также являются бронходилататорами благодаря своей способности функционально антагонизировать бронхоконстрикторные ответы на ряд медиаторов, включая ацетилхолин.

Помимо улучшения функции легких, эти агенты оказывают благоприятное воздействие при диспноэ (одышке), на качество жизни, толерантность к физической нагрузке и уменьшают обострения. В ряде клинических исследований продемонстрировано, что совместное введение антихолинергического средства и агониста (₂-рецептора более эффективно, чем одного из этих двух индивидуальных компонентов (уаи Ыоогб, РА., Аитапп, Р-Ь., 1аиккепк, Е., 8тее1к, РР, УегЬаеб, 1., О1кке, В., Мие11ег, А. & СотеИккец Р.РО., 2005. Сотрапкоп оГ Поборют оисе бабу. Гогто1его1 1\\асе бабу аиб Ьо1П сотЬтеб оисе бабу т рабейк \νί11ι СОРЭ, Еиг. Рекрп. 1., уо1. 26, р. 214-222). Одиночная молекула, обладающая активностями в отношении как мускариновых, так и (₂-рецепторов (МАВА), может обеспечить дополнительную пользу пациентам с диагнозом СОРЭ в плане эффективности и профиля побочных эффектов, чем любой из двух взятых по отдельности агентов. Кроме того, молекула, обладающая двойной активностью, также может обеспечить пользу в плане удобства применения и соблюдения больным режима и схемы лечения по сравнению с совместным применением схем лечения взятыми по отдельности агентами. Одиночный агент также может быть полезен с позиции изготовления композиции по сравнению с двумя отдельными соединениями, также предоставляя возможность, в сочетании с другим терапевтическим средством, для терапии тройного действия.

Теперь согласно первому аспекту изобретения авторами изобретения предложено соединение, представляющее собой

или его фармацевтически приемлемую соль.

Подходящим образом соединение по первому аспекту изобретения представляет собой

- 1 020566

Согласно второму аспекту изобретения авторами изобретения предложено соединение, представляющее собой

или его фармацевтически приемлемую соль.

Подходящим образом соединение по второму аспекту изобретения представляет собой

Понятно, что некоторые соединения по настоящему изобретению могут существовать в сольватированных, например гидратированных, а также несольватированных формах. Следует понимать, что в настоящем изобретении раскрыты все такие сольватированные формы. Таутомеры и их смеси также входят в объем настоящего изобретения.

Соединения по изобретению обладают активностью в качестве фармацевтических средств, в частности в качестве средств с двойным действием агонистов адренергических β-рецепторов и антихолинергических агентов, включая антагонисты мускариновых рецепторов (М1, М2 и М3), в частности М3антагонистов. Заболевания и состояния, которые могут быть подвергнуты лечению соединениями по изобретению и их фармацевтически приемлемыми солями, включают:

1) дыхательные пути: обструктивные заболевания дыхательных путей, включая астму, в том числе бронхиальную, аллергическую, наследственную, приобретенную, индуцированную физической нагрузкой, индуцированную лекарственным средством (включая индуцированную приемом аспирина и ΝδΆΙΌ (нестероидные противовоспалительные средства)) и индуцированную пылью астму, как перемежающуюся, так и персистирующую и всех степеней тяжести, и другие случаи гиперчувствительности дыхательных путей; хроническую обструктивную болезнь легких (ΟΘΡΌ); бронхит, в том числе инфекционный и эозинофильный бронхит; эмфизему; бронхоэктаз; муковисцидоз; саркоидоз; экзогенный аллергический альвеолит (Тагтег'з 1ии§) и родственные заболевания; гиперчувствительный пневмонит; фиброз легких, в том числе криптогенный фиброзирующий альвеолит, идиопатические интерстициальные пневмонии, фиброз, являющийся осложнением противоопухолевой терапии и хронической инфекции, включая туберкулез и аспергиллез и другие грибковые инфекции; осложнения легочной трансплантации; васкулитоподобные (ναδουΐίΐίο) и тромботические расстройства легочной сосудистой сети и легочную гипертензию; противокашлевую активность, в том числе в лечении хронического кашля, ассоциированного с воспалительными и секреторными состояниями дыхательных путей, и ятрогенного кашля; острый и хронических ринит, в том числе медикаментозный ринит и вазомоторный ринит; круглогодичный и сезонный аллергический ринит, в том числе нервный ринит (гЫтйз иегуоза) (сенную лихорадку); назальный полипоз; острую вирусную инфекцию, в том числе насморк и инфекцию вследствие респираторного синцитиального вируса, вируса гриппа, коронавируса (включая δΛΚδ (атипичная пневмония)) и аденовируса; или эозинофильный эзофагит;

2) кости и суставы: поражения кожи ревматического или подагрического происхождения (аПНпцДез). ассоциированные с остеоартритом/остеоартрозом или включающие остеоартрит/остеоартроз, как первичный, так и вторичный по отношению, например к врожденной дисплазии тазобедренного сустава; цервикальный и поясничный спондилит и боль в нижней области спины и шее; остеопороз; ревматоидный артрит и болезнь Стилла; серонегативные спондилоартропатии, в том числе анкилозирующий спондилит, псориатический артрит, реактивный артрит и недифференцируемую спондилоартропатию; септический артрит и другие ассоциированные с инфекцией артропатии и заболевания кости, такие как

- 2 020566 туберкулез, в том числе болезнь Потта и синдром Понсе; острый и хронический индуцируемый отложением кристаллов синовит, в том числе подагрический артрит, заболевание вследствие отложения пирофосфата кальция и воспаление сухожилий, синовиальной сумки и синовиальной жидкости, ассоциированное с апатитом кальция; болезнь Бехчета; первичный и вторичный синдром Шегрена; системный склероз и ограниченную склеродермию; системную красную волчанку, заболевание соединительной ткани смешанного типа и недифференцируемое заболевание соединительной ткани; воспалительные миопатии, в том числе дерматомиозит и полимиозит; ревматическую полимиалгию; юношеский артрит, в том числе идиопатические воспалительные поражения кожи ревматического происхождения для суставов любой локализации и ассоциированные синдромы, ревматическую атаку и ее системные осложнения; васкулитиды (уаксиНббек), в том числе гигантоклеточный артериит, синдром Такаясу, синдром Чарга-Штраусс, полиартериит узлов, микроскопический полиартериит и васкулитиды, ассоциированные с вирусной инфекцией, реакциями гиперчувствительности, криоглобулинами и парапротеинами; боль в нижней части спины; семейную средиземноморскую лихорадку, синдром Макла-Уэльса, семейную ирландскую лихорадку, болезнь Кикучи; индуцированные приемом лекарств артралгии, воспаления кожи при тендините ДеибоиШбек) и миопатии;

3) боль и ремоделирование соединительной ткани при скелетно-мышечных расстройствах вследствие травмы (например, повреждения при занятиях спортом) или болезни: поражения кожи ревматического или подагрического происхождения (например, ревматоидный артрит, остеоартрит, подагрическую или кристаллическую артропатию), другое суставное заболевание (такое как дегенерация межпозвонкового диска или дегенерация височно-нижнечелюстного сустава), нарушение ремоделирования кости (такое как остеопороз, болезнь Педжета или остеонекроз), полихондрит (роКсНоибгНЦк), склеродермию, расстройство соединительной ткани смешанного типа, спондилоартропатии или периодонтальное заболевание (такое как периодонтит);

4) кожа: псориаз, атопический дерматит, контактный дерматит или другие экзематозные дерматозы и реакции гиперчувствительности замедленного типа; фито- и фотодерматит; себоррейный дерматит, герпетиформный дерматит, красный плоский лишай, склеротический и атрофический лишай, гангренозную пиодермию, кожный саркоид, дискоидную красную волчанку, пузырчатку, пемфигоид, врожденный буллезный эпидермолиз, крапивницу, ангионевротические отеки, васкулитиды, токсические эритемы, кожные эозинофилии, гнездную алопецию, мужское (та1е-райети) облысение, синдром Свита, болезнь Вебера-Крисчена, мультиформную эритему; целлюлит, как инфекционный, так и неинфекционный; панникулит; кожные лимфомы, немеланомный рак кожи и другие диспластические поражения; индуцированные приемом лекарств расстройства, в том числе стойкую лекарственную эритему;

5) глаза: блефарит; конъюнктивит, в том числе круглогодичный и весенний аллергический конъюнктивит; ирит; передний и задний увеит; хориоидит; аутоиммунные, дегенеративные или воспалительные расстройства, воздействующие на сетчатку; офтальмит, в том числе симпатический офтальмит; саркоидоз; инфекции, в том числе вирусные, грибковые и бактериальные;

6) желудочно-кишечный тракт: глоссит, гингивит, периодонтит; эзофагит, в том числе рефлюксэзофагит; эозинофильный гастроэнтерит, мастоцитоз, болезнь Крона, колит, в том числе неспецифический язвенный колит, проктит, зуд заднего прохода; спастические боли в животе (соеБас б15еаке), синдром раздраженного кишечника и пищевые аллергии, которые проявляются вдали от кишечника (например, мигрень, ринит и экзема);

7) абдоминальная область: гепатит, в том числе аутоиммунный, алкогольный и вирусный; фиброз и цирроз печени; холецистит; панкреатит как острый, так и хронический;

8) мочеполовая система: нефрит, в том числе интерстициальный и гломерулонефрит; нефротический синдром; цистит, в том числе острый и хронический (интерстициальный) цистит и язву Ханнера; острый и хронический уретрит, простатит, эпидидимит, оофорит и сальпингит; вульвовагинит; болезнь Пейрони; эректильную дисфункцию (как мужскую, так и женскую);

9) отторжение трансплантата: острое и хроническое, например после трансплантации почки, сердца, печени, легкого, костного мозга, кожи или сетчатки либо после переливания крови; или хроническое заболевание трансплантат против хозяина;

10) ЦНС (центральная нервная система): болезнь Альцгеймера и другие приводящие к слабоумию расстройства, в том числе СГО (болезнь Крейтцфельдта-Якоба) и пуСГО (новый вариант СЮ); амилоидоз; множественный склероз и другие демиелинизирующие синдромы; церебральный атеросклероз и васкулит; височный артериит; тяжелую псевдопаралитическую миастению; острую и хроническую боль (острую, перемежающуюся или устойчивую либо центрального, либо периферического происхождения), в том числе висцеральную боль, головную боль, мигрень, невралгию тройничного нерва, атипичную лицевую боль, суставную и костную боль, боль, являющуюся результатом рака и опухолевой инвазии, невропатические болевые синдромы, в том числе диабетические, постгерпетические и ВИЧассоциированные невропатии; нейросаркоидоз; осложнения в центральной и периферической нервной системе вследствие злокачественных, инфекционных или аутоиммунных процессов;

11) другие аутоиммунные и аллергические расстройства, в том числе тиреоидит Хашимото, болезнь Грейвса, болезнь Аддисона, сахарный диабет, идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру, эози- 3 020566 нофильный фасцит, гипер-1дЕ-синдром, антифосфолипидный синдром;

12) другие расстройства с участием воспалительного или иммунологического компонента, в том числе синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД), лепру, синдром Сезари и паранеопластические синдромы;

13) сердечно-сосудистая система: атеросклероз, воздействующий на коронарное и периферическое кровообращение; перикардит; миокардит, воспалительные и аутоиммунные кардиомиопатии, в том числе миокардиальный саркоид; ишемические реперфузионные поражения; эндокардит, вальвулит и аортит, в том числе инфекционный (например, сифилитический); васкулитиды; заболевания проксимальных и периферических вен, в том числе флебит и тромбоз, включая тромбоз глубоких вен и осложнения варикозных вен;

14) онкология: лечение обычных видов рака, в том числе опухолей предстательной железы, молочной железы, легкого, яичников, поджелудочной железы, кишечника и толстой кишки, желудка, кожи и головного мозга и злокачественных новообразований, воздействующих на костный мозг (включая лейкозы) и лимфопролиферативные системы, например лимфомы Ходжкина и неходжкинской лимфомы; включая предупреждение и лечение метастатического заболевания и опухолевых рецидивов и паранеопластических синдромов; и

15) желудочно-кишечный тракт: спастические боли в животе, проктит, эозинофильный гастроэнтерит, мастоцитоз, болезнь Крона, язвенный колит, микроскопический колит, перемежающийся колит, расстройство раздраженный кишечник (1т1аЫе Ьо\ус1 Ывогйег), синдром раздраженного кишечника, невоспалительную диарею, пищевые аллергии, которые проявляются вдали от кишечника, например, мигрень, ринит и экзема.

Таким образом, в настоящем изобретении раскрыты соединения или их фармацевтически приемлемые соли, как они определены ранее, для применения в терапии.

Кроме того, в настоящем изобретении раскрыто применение соединений или их фармацевтически приемлемых солей, как они определены ранее, в изготовлении лекарственного средства для применения в терапии.

В контексте настоящего описания термин терапия также включает профилактику, если не представлены конкретные указания на обратное. Термины терапевтический и терапевтически следует истолковывать соответственно.

Ожидается, что профилактика будет особенно релевантна в отношении лечения субъектов, которые пострадали от предшествующего приступа рассматриваемого заболевания или состояния, либо которые иным образом считаются имеющими повышенный риск рассматриваемого заболевания или состояния. Как правило, субъекты с риском развития конкретного заболевания или состояния включают субъектов, имеющих наследственную историю данного заболевания или состояния, или субъектов, которые были идентифицированы путем генетического тестирования или скрининга как особенно чувствительные к развитию этого заболевания или состояния.

Кроме того, в настоящем изобретении раскрыт способ лечения или снижения риска возникновения воспалительного заболевания или состояния (в том числе обратимого обструктивного заболевания или состояния дыхательных путей), включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения или его фармацевтически приемлемой соли, как они определены ранее.

В частности, соединения по данному изобретению могут быть использованы в лечении респираторного дистресс-синдрома взрослых (АКИ8), легочной эмфиземы, бронхита, бронхоэктаза, хронической обструктивной болезни легких (СОРИ), астмы или ринита.

Для вышеупомянутых терапевтических применений вводимая дозировка будет, несомненно, изменяться в зависимости от используемого соединения, способа введения, желаемого лечения и показанного расстройства. Например, суточная дозировка соединения по изобретению, если его вводят ингаляцией, может находиться в диапазоне от 0,05 до 100 мкг/кг массы тела. Альтернативно, если соединение вводят перорально, тогда суточная дозировка соединения по изобретению может находиться в диапазоне от 0,01 до 100 мг/кг массы тела.

Соединения по изобретению и их фармацевтически приемлемые соли могут быть использованы как таковые, но в общем случае будут введены в форме фармацевтической композиции, в которой соединение/соль (активный ингредиент) по изобретению находится вместе с фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем или носителем. Традиционные методики выбора и изготовления подходящих фармацевтических композиций описаны, например, в РЬагтасеИсаЛ - ТЬе 8с1еисе о£ Иоваде Рогт Ие51ди5, М.Е. АиНои, СЬигсЬШ ЫушдвШие, 1988.

В зависимости от способа введения фармацевтическая композиция предпочтительно будет содержать от 0,05 до 99 мас.% (массовых процентов), более предпочтительно от 0,05 до 80 мас.%, еще более предпочтительно от 0,10 до 70 мас.% и даже еще более предпочтительно от 0,10 до 50 мас.% активного ингредиента, где все массовые проценты даны в расчете на общую массу композиции.

Кроме того, в настоящем изобретении также раскрыта фармацевтическая композиция, содержащая соединение по изобретению или его фармацевтически приемлемую соль, как они определены ранее, вме- 4 020566 сте с фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем или носителем.

Кроме того, в настоящем изобретении раскрыт способ изготовления фармацевтической композиции, включающий смешивание соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли, как они определены ранее, с фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем или носителем.

Фармацевтические композиции можно вводить местно (например, на кожу или в легкое и/или дыхательные пути) в форме, например кремов, растворов, суспензий, гидрофторалкановых (НРА) аэрозолей и сухих порошковых композиций, например композиций в ингаляторном устройстве, известном как ТигЬиЬа1ег®; или системно, например, путем перорального введения в форме таблеток, капсул, сиропов, порошков или гранул; или путем парентерального введения в форме растворов или суспензий; или путем подкожного введения; или путем ректального введения в форме суппозиториев; или трансдермально.

Сухие порошковые композиции или находящиеся под давлением НРА-аэрозоли соединений по изобретению можно вводить пероральной или назальной ингаляцией. Для ингаляции желательно, чтобы соединение было тонкоизмельченным. Тонкоизмельченное соединение предпочтительно имеет массмедианный диаметр (ша88 шеФаи Фаше!ег) меньше 10 мкм и может быть суспендировано в пропеллентной смеси с помощью диспергирующего вещества, такого как жирная С₈-С₂₀-кислота или ее соль (например, олеиновая кислота), соль желчных кислот, фосфолипид, алкилсахарид, перфторированное или полиэтоксилированное поверхностно-активное вещество либо другое фармацевтически приемлемое диспергирующее вещество.

Соединения по изобретению также можно вводить посредством сухого порошкового ингалятора. Такой ингалятор может представлять собой ингалятор разового или многократного дозирования и может представлять собой приводимый в действие дыханием сухой порошковый ингалятор.

Одна из возможностей заключается в смешивании тонкоизмельченного соединения по изобретению с веществом-носителем, например, моно-, ди- или полисахаридом, сахарным спиртом или другим полиолом. Подходящими носителями являются сахара, например лактоза, глюкоза, раффиноза, мелезитоза, лактит, мальтит, трегалоза, сахароза, маннит; и крахмал. Альтернативно, тонкоизмельченное соединение может иметь покрытие из другого вещества. Кроме того, порошковую смесь можно распределять в твердые желатиновые капсулы, каждая из которых содержит желаемую дозу активного соединения.

Другая возможность заключается в превращении тонкоизмельченного порошка в сферы, которые разрушаются при процедуре вдыхания. Таким сферонизированным порошком можно заполнить резервуар для лекарственного средства ингалятора многократного дозирования, например, известного как ТигЬиНа1ег®. в котором дозатор отмеряет желаемую дозу, которая затем вдыхается пациентом. С использованием этой системы активный ингредиент, с веществом-носителем или без него, доставляется пациенту.

Для перорального введения соединение по изобретению можно смешивать с адъювантом или носителем, например лактозой, сахарозой, сорбитом, маннитом; крахмалом, например картофельным крахмалом, кукурузным крахмалом или амилопектином; производным целлюлозы; связующим веществом, например желатином или поливинилпирролидоном; и/или смазывающим веществом, например стеаратом магния, стеаратом кальция, полиэтиленгликолем, воском, парафином и т.п., и затем прессовать в таблетки. Если необходимы таблетки с покрытием, на ядра, приготовленные, как описано выше, можно нанести покрытие с помощью концентрированного сахарного раствора, который может содержать, например, аравийскую камедь, желатин, тальк и диоксид титана. Альтернативно, на таблетку можно нанести покрытие из подходящего полимера, растворенного в высоколетучем органическом растворителе.

Чтобы изготовить мягкие желатиновые капсулы, соединение по изобретению можно смешивать, например, с растительным маслом или полиэтиленгликолем. Твердые желатиновые капсулы могут содержать гранулы соединения при использовании обоих вышеупомянутых эксципиентов для таблеток. Жидкие или полутвердые композиции соединения по изобретению также могут быть внесены в твердые желатиновые капсулы.

Жидкие композиции для перорального применения могут быть в форме сиропов или суспензий, например растворов, содержащих соединение по изобретению, поддерживающий баланс сахар и смесь этанола, воды, глицерина и пропиленгликоля. Возможно, что такие жидкие композиции могут содержать окрашивающие агенты, корригенты, сахарин и/или карбоксиметилцеллюлозу в качестве загустителя или другие эксципиенты, известные специалистам в данной области.

В частности, соединения по настоящему изобретению и их соли могут быть применены в лечении воспалительных заболеваний, таких как (но этим не ограничиваясь) ревматоидный артрит, остеоартрит, астма, аллергический ринит, хроническая обструктивная болезнь легких (СОРЭ), псориаз и воспалительное заболевание кишечника, и эти соединения по изобретению можно комбинировать со следующими агентами: нестероидными противовоспалительными агентами (далее ΝδΑΙΌ), включая неселективные ингибиторы циклооксигеназы СОХ-1/СОХ-2, применяемые местно или системно (такие как пироксикам, диклофенак, пропионовые кислоты, как, например, напроксен, флурбипрофен, фенопрофен, кетопрофен и ибупрофен, фенаматы, как, например, мефенамовая кислота, индометацин, сулиндак, азапропазон, пиразолоны, как, например фенилбутазон, салицилаты, как, например аспирин); селективными ингибито- 5 020566 рами СОХ-2 (такими как мелоксикам, целекоксиб, рофекоксиб, валдекоксиб, люмарококсиб, парекоксиб и эторикоксиб); циклооксигеназа-ингибирующими донорами оксида азота (СЮОЭ); глюкокортикостероидами (вводимыми любыми местным, пероральным, внутримышечным, внутривенным или внутрисуставным путями); метотрексатом, лефлуномидом; гидроксихлорохином, ά-пеницилламином, ауранофином или другими парентеральными либо пероральными препаратами золота; аналгетиками; диацереином; средствами внутрисуставной терапии, такими как производные гиалуроновой кислоты; и пищевыми добавками, такими как глюкозамин.

Соединения по изобретению также можно вводить вместе с другими соединениями, применяемыми для лечения вышеупомянутых состояний.

Следовательно, далее в настоящем изобретении раскрыта комбинированная терапия, где соединение по изобретению или его фармацевтически приемлемую соль, либо фармацевтическую композицию, либо композицию, содержащую соединение по изобретению, вводят одновременно, или последовательно, или в виде комбинированного препарата с другим терапевтическим агентом или агентами для лечения одного или более чем одного из перечисленных выше состояний.

Более того, в настоящем изобретении раскрыта комбинация соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли с цитокином или агонистом либо антагонистом функции цитокинов (включая агенты, которые действуют на цитокиновые пути передачи сигнала, такие как модуляторы системы 8ОС8 (супрессоров цитокиновой передачи сигнала)), включая альфа-, бета- и гамма-интерфероны; инсулиноподобный фактор роста I типа (ЮР-1); интерлейкины (1Ь), включая 1Б1-17, и антагонисты или ингибиторы интерлейкинов, такие как анакинра; ингибиторы фактора некроза опухоли альфа (ΤΝΡ-α), такие как анти-ΤNР-моноклональные антитела (например, инфликсимаб, адалимумаб и СЭР-870), и антагонисты ΤΝΡ-рецептора, включая иммуноглобулиновые молекулы (такие как этанерсепт) и низкомолекулярные агенты, такие как пентоксифиллин.

Помимо этого в настоящем изобретении раскрыта комбинация соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли с моноклональным антителом, направленным на В-лимфоциты (таким как СЭ20 (ритуксимаб), МКА-а1Ь16К) или Т-лимфоциты (СТЬА4(цитотоксический Т-лимфоцитарный антиген 4)-1д, НиМах1Ь-15).

Более того, в настоящем изобретении раскрыта комбинация соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли с модулятором функции хемокиновых рецепторов, таким как антагонист СК1, СК2, СК2А, СК2В, СК3, СК4, СК5, СК6, СК7, СК8, СК9, СК10 и СК11 (для семейства С-С); СХСК1, СХСК2, СХСК3, СХСК4 и СХСК5 (для семейства С-Х-С) и СХ₃СК1 для семейства С-Х₃-С.

Кроме того, в настоящем изобретении раскрыта комбинация соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли с ингибитором матриксных металлопротеаз (ММР), т.е. стромелизинов, коллагеназ и желатиназ, а также аггреканазы; особенно, коллагеназы-1 (ММР-1), коллагеназы-2 (ММР-8), коллагеназы-3 (ММР-13), стромелизина-1 (ММР-3), стромелизина-2 (ММР-10) и стромелизина-3 (ММР-11) и ММР-9 и ММР-12, включая такие агенты, как доксициклин.

Более того, в настоящем изобретении раскрыта комбинация соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли и ингибитора биосинтеза лейкотриенов, ингибитора 5-липоксигеназы (5-ЬО) или антагониста белка, активирующего 5-липоксигеназу, (РЬАР), таких как зилейтон; АВТ-761; фенлейтон; тепоксалин; АЬЬой-79175; АЬЬой-85761; Ю(5-замещенный)тиофен-2-алкилсульфонамид; 2,6-ди-трет-бутилфенол-гидразоны; метокситетрагидропираны, такие как 2еиеса ΖΌ-2138; соединение 8В-210661; пиридинил-замещенное соединение 2-цианонафталина, такое как Ь-739010; соединение 2-цианохинолина, такое как Ь-746530; или соединение индола либо хинолина, такое как МК-591, МК-886 и ВАУх1005.

Кроме того, в настоящем изобретении раскрыта комбинация соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли и антагониста рецептора лейкотриенов (ЬТ) В4, БТС4, БТЭ4 и БТЕ4, выбранного из группы, состоящей из фенотиазин-3-онов, таких как Ь-651392; амидиновых соединений, таких как СО8-25019с; бензоксаламинов, таких как онтазоласт; бензолкарбоксимидамидов, таких как ВПЬ 284/260; и таких соединений, как зафирлукаст, аблукаст, монтелукаст, пранлукаст, верлукаст (МК-679), КО-12525, Ко-245913, иралукаст (СОР 45715А) и ВАУх7195.

Более того, в настоящем изобретении раскрыта комбинация соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли и ингибитора фосфодиэстеразы (РЭЕ), такого как метилксантанин, включая теофиллин и аминофиллин; селективного ингибитора изоферментов РЭЕ, включая ингибитор РЭЕ4, ингибитор изоформы РЭЕ4Э или ингибитор РЭЕ5.

Кроме того, в настоящем изобретении раскрыта комбинация соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли и антагониста гистаминовых рецепторов 1 типа, такого как цетиризин, лоратадин, дезлоратадин, фексофенадин, акривастин, терфенадин, астемизол, азеластин, левокабастин, хлорфенирамин, прометазин, циклизин или мизоластин, применяемые перорально, местно или парентерально.

- 6 020566

Более того, в настоящем изобретении раскрыта комбинация соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли и ингибитора протонного насоса (такого как омепразол) или гастропротекторного антагониста гистаминового рецептора 2 типа.

Кроме того, в настоящем изобретении раскрыта комбинация соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли и антагониста гистаминового рецептора 4 типа.

Более того, в настоящем изобретении раскрыта комбинация соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли и сосудосуживающего симпатомиметического агента, являющегося агонистом альфа-1/альфа-2 адренергических рецепторов, такого как пропилгекседрин, фенилэфрин, фенилпропаноламин, эфедрин, псевдоэфедрин, нафазолина гидрохлорид, оксиметазолина гидрохлорид, тетрагидрозолина гидрохлорид, ксилометазолина гидрохлорид, трамазолина гидрохлорид или этилнорэпинефрина гидрохлорид.

Кроме того, в настоящем изобретении раскрыта комбинация соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли и хромона, такого как хромогликат натрия или недокромил-натрий.

Более того, в настоящем изобретении раскрыта комбинация соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли с глюкокортикоидом, таким как флунизолид, триамцинолона ацетонид, беклометазона дипропионат, будесонид, флутиказона пропионат, циклезонид или мометазона фуроат.

Кроме того, в настоящем изобретении раскрыта комбинация соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли с агентом, который модулирует ядерный рецептор гормонов, такой как РРЛК (рецепторы, активируемые пролифератором пероксисом).

Более того, в настоящем изобретении раскрыта комбинация соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли вместе с иммуноглобулином (1д) или 1§-препаратом либо антагонистом или антителом, модулирующим функцию 1д, таким как анти-1дЕ (например, омализумаб).

Кроме того, в настоящем изобретении раскрыта комбинация соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли и другого применяемого системно или местно противовоспалительного агента, такого как талидомид или его производное, ретиноид, дитранол или кальципотриол.

Более того, в настоящем изобретении раскрыта комбинация соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли и комбинаций аминосалицилатов и сульфапиридина, таких как сульфасалазин, месалазин, балсалазид и олсалазин; и иммуномодулирующих агентов, таких как тиопурины и кортикостероиды, такие как будесонид.

Кроме того, в настоящем изобретении раскрыта комбинация соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли вместе с антибактериальным агентом, таким как производное пенициллина, тетрациклин, макролид, бета-лактам, фторхинолон, метронидазол, ингалируемый аминогликозид; противовирусным агентом, включая ацикловир, фамцикловир, валацикловир, ганцикловир, цидофовир, амантадин, римантадин, рибавирин, занамивир и осельтамавир; ингибитором протеаз, таким как индинавир, нелфинавир, ритонавир и саквинавир; нуклеозидным ингибитором обратной транскриптазы, таким как диданозин, ламивудин, ставудин, зальцитабин или зидовудин; или ненуклеозидным ингибитором обратной транскриптазы, таким как невирапин или эфавиренз.

Более того, в настоящем изобретении раскрыта комбинация соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли и сердечно-сосудистого средства, такого как блокатор кальциевых каналов, блокатор бета-адренорецепторов, ингибитор ангиотензин-превращающего фермента (АСЕ), антагонист рецепторов ангиотензина-2; снижающего уровень липидов агента, такого как статин или фибрат; модулятора морфологии клеток крови, такого как пентоксифиллин; тромболитического средства или антикоагулянта, такого как ингибитор агрегации тромбоцитов.

Кроме того, в настоящем изобретении раскрыта комбинация соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли и агента, действующего на ЦНС, такого как антидепрессант (например, сертралин), антипаркинсоническое лекарственное средство (например, депренил, Ь-дофа, ропинирол, прамипексол, ингибитор МАОВ (моноаминоксидаза В), такой как селегин и расагилин, ингибитор сотР (катехол-о-метилтрансфераза), такой как тасмар, ингибитор А-2, ингибитор обратного захвата дофамина, антагонист NМ^Α (Ν-метил-Э-аспартат), агонист никотина, агонист дофамина или ингибитор нейрональной синтазы оксида азота) или лекарственное средство против болезни Альцгеймера, такое как донепезил, ривастигмин, такрин, ингибитор СОХ-2, пропентофиллин или метрифонат.

Более того, в настоящем изобретении раскрыта комбинация соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли и агента для лечения острой или хронической боли, такого как аналгетик центрального или периферического действия (например, опиоид или его производное), карбамазепин, фенитоин, вальпроат натрия, амитриптилин или другие антидепрессанты, парацетамол или нестероидное противовоспалительное средство.

Кроме того, в настоящем изобретении раскрыта комбинация соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли вместе с применяемым парентерально или местно (включая ингаляцию) местным анестезирующим агентом, таким как лигнокаин или его производное.

Соединение по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемая соль также могут быть применены в комбинации со средством против остеопороза, включая гормональное средство, такое

- 7 020566 как ралоксифен, или бифосфонат, такой как алендронат.

Более того, в настоящем изобретении раскрыта комбинация соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли вместе с (1) ингибитором триптазы; (2) антагонистом фактора активации тромбоцитов (РАР); (3) ингибитором интерлейкин-превращающего фермента (1СЕ); (4) ингибитором 1МРЭН (инозинмонофосфат-дегидрогеназы); (5) ингибиторами молекул адгезии, включая антагонист УЪА-4 (очень позднего антигена 4); (6) катепсином; (7) ингибитором киназ, таким как ингибитор тирозинкиназы (такой как В1к (тирозинкиназа Брутона), Ик (1Ь-2-индуцируемая тирозинкиназа Т-клеток), 1ак3 (янус-киназа 3) или МАР, например, гефитиниб или иматиниба мезилат), серин/треониновой киназы (например, ингибитор МАР-киназы (митоген-активируемой протеинкиназы), такой как р38, ΡΝΚ (с-Ши-Ы-концевая киназа), протеинкиназа А, В или С либо ΙΚΚ (1кВ-киназа)) или киназы, вовлеченной в регуляцию клеточного цикла, (такой как циклинзависимая киназа); (8) ингибитором глюкозо-6-фосфат-дегидрогеназы; (9) антагонистом кинин-В₁- или В₂-рецептора; (10) противоподагрическим средством, например колхицином; (11) ингибитором ксантиноксидазы, например аллопуринолом; (12) средством, способствующим выведению мочевой кислоты, например пробенецидом, сульфинпиразоном и бензбромароном; (13) средством, усиливающим секрецию гормона роста; (14) трансформирующим фактором роста (ТОРР); (15) тромбоцитарным фактором роста (РЭСР); (16) фактором роста фибробластов, например основным фактором роста фибробластов (ЬРОР); (17) гранулоцитарномакрофагальным колониестимулирующим фактором (ОМ-С8Р); (18) капсаициновым кремом; (19) антагонистом тахикининового ΝΚ1- или ЫК3-рецептора, таким как ЫКР-608С, 8В-233412 (талнетант) или Ό-4418; (20) ингибитором эластазы, таким как ИТ-77 или ΖΌ-0892; (21) ингибитором ТЫР-альфапревращающего фермента (ТАСЕ); (22) ингибитором индуцибельной синтазы оксида азота (|ЫО8); (23) молекулой-гомологом хемоатграктантного рецептора, экспрессируемой на ТН2-клетках (Т-хелперных клетках 2 типа) (такой как антагонист СРТН2); (24) ингибитором Р38; (25) агентом, модулирующим функцию То11-подобных рецепторов (ТЬР); (26) агентом, модулирующим активность пуринергических рецепторов, таких как Р2Х7; (27) ингибитором активации фактора транскрипции, такого как ЫРкВ (ядерный фактор-кВ), АР1 (активаторный белок 1) или 8ТАТ (передатчики сигнала и активаторы транскрипции); или (28) агонистом глюкокортикоидного рецептора (ОР-рецептора).

Кроме того, в настоящем изобретении раскрыта комбинация (например, для лечения СОРЭ, астмы или аллергического ринита) соединения по изобретению и одного или более чем одного агента, выбранного из списка, содержащего нестероидный агонист глюкокортикоидного рецептора (ОР-рецептора); ингибитор РЭЕ4, в том числе ингибитор изоформы РЭЕ4;

модулятор функции хемокиновых рецепторов (такой как антагонист рецептора СР1); стероид (такой как будесонид) и ингибитор функции киназы р38.

Соединение по изобретению или его фармацевтически приемлемую соль также можно использовать в комбинации с существующим терапевтическим агентом для лечения рака, например, подходящие агенты включают:

(1) антипролиферативное/антинеопластическое лекарственное средство или его комбинацию, которые используются в медицинской онкологии, такие как алкилирующий агент (например, цисплатин, карбоплатин, циклофосфамид, азотистый иприт, мелфалан, хлорамбуцил, бусульфан или нитрозомочевина); антиметаболит (например, антифолат, такой как фторпиримидин, подобный 5-фторурацилу или тегафуру, ралтитрексед, метотрексат, цитозинарабинозид, гидроксимочевина, гемцитабин или паклитаксел); противоопухолевый антибиотик (например, антрациклин, такой как адриамицин, блеомицин, доксорубицин, дауномицин, эпирубицин, идарубицин, митомицин-С, дактиномицин или митрамицин); антимитотический агент (например, винка-алкалоид, такой как винкристин, винбластин, виндезин или винорелбин, или таксоид, такой как таксол или таксотер); или ингибитор топоизомеразы (например, эпиподофиллотоксин, такой как этопозид, тенипозид, амсакрин, топотекан или камптотецин);

(2) цитостатический агент, такой как антиэстроген (например, тамоксифен, торемифен, ралоксифен, дролоксифен или иодоксифен), негативный регулятор эстрогеновых рецепторов (например, фулвестрант), антиандроген (например, бикалутамид, флутамид, нилутамид или ципротерона ацетат), антагонист ЬНРН (рилизинг-фактора лютеинизирующего гормона) или агонист ЬНРН (например, гозерелин, лейпрорелин или бусерелин), прогестоген (например, мегестрола ацетат), ингибитор ароматазы (например, анастрозол, летрозол, воразол или эксеместан) или ингибитор 5а-редуктазы, такой как финастерид;

(3) агент, ингибирующий инвазию раковых клеток (например, ингибитор металлопротеиназы, подобный маримастату, или ингибитор функции рецептора урокиназного активатора плазминогена);

(4) ингибитор функции факторов роста, например антитело к факторам роста (например, антиегЬЬ2-антитело трастузумаб или анти-егЬЬ1-антитело цетуксимаб [С225]), ингибитор фарнезилтрансферазы, ингибитор тирозинкиназ или ингибитор серин/треонинкиназ, ингибитор семейства эпидермального фактора роста (например, ингибитор тирозинкиназ семейства ЕОРР (рецептор эпидермального фактора роста), такой как Ы-(3-хлор-4-фторфенил)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолин-4-амин (гефи- 8 020566 тиниб, ΑΖΌ 1839), Ы-(3-этинилфенил)-6,7-бис-(2-метоксиэтокси)хиназолин-4-амин (эрлотиниб, ϋ§Ι-774) или 6-акриламидо-Ы-(3-хлор-4-фторфенил)-7-(3-морфолинопропокси)хиназолин-4-амин (С1 1033), ингибитор семейства факторов роста тромбоцитов или ингибитор семейства факторов роста гепатоцитов;

(5) антиангиогенное средство, такое как средство, ингибирующее эффекты сосудистого эндотелиального фактора роста (например, антитело против фактора роста эндотелиальных клеток сосудов бевацизумаб, соединение, раскрытое в νϋ 97/22596, νϋ 97/30035, νϋ 97/32856 или νϋ 98/13354), или соединение, действующее по другому механизму (например, линомид, ингибитор функции интегринов ανβ3 или ангиостатин);

(6) агент, вызывающий повреждение сосудов, такой как комбретастатин А4 или соединение, раскрытое в νϋ 99/02166, νϋ 00/40529, νϋ 00/41669, νϋ 01/92224, νϋ 02/04434 или νϋ 02/08213;

(7) агент, используемый в антисмысловой терапии, например такой, который направлен на одну из мишеней, приведенных выше, как, например Ι§Ι§ 2503, в анти-гак антисмысловой терапии;

(8) агент, используемый в генотерапевтическом подходе, например, подходах по замене аберрантных генов, таких как аберрантный р53 или аберрантный ВКСА1 (ген 1 рака молочной железы) либо ВКСА2, подходах ΟΌΕΡΤ (ген-направленная ферментативная пролекарственная терапия), например с применением цитозиндезаминазы, тимидинкиназы или бактериального фермента нитроредуктазы, и подходах по повышению толерантности пациента к химиотерапии или лучевой терапии, таких как генная терапия множественной лекарственной устойчивости; или (9) агент, используемый в иммунотерапевтическом подходе, например подходах ех νίνο и ίη νίνο по повышению иммуногенности опухолевых клеток пациента, как, например, трансфекция цитокинами, такими как интерлейкин-2, интерлейкин-4 или гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор, подходах по снижению Т-клеточной анергии, подходах с использованием трансфицированных иммунных клеток, таких как цитокин-трансфицированные дендритные клетки, подходах с использованием цитокин-трансфицированных опухолевых клеточных линий и подходах с использованием антиидиотипических антител.

Вышеупомянутые соединения по изобретению могут быть преобразованы в их фармацевтически приемлемую соль, например соль присоединения кислоты, такую как гидрохлорид (например, дигидрохлорид), гидробромид (например, дигидробромид), трифторацетат (например, дитрифторацетат), сульфат, фосфат, ацетат, фумарат, малеат, тартрат, лактат, цитрат, пируват, сукцинат, оксалат, метансульфонат или п-толуолсульфонат.

Теперь данное изобретение будет проиллюстрировано посредством ссылки на следующие далее примеры, в которых использовали следующие общие методы, но этим не ограничивается.

Общие методы.

Если не указано иное, то исходные вещества имелись в продаже. Все растворители и имеющиеся в продаже реагенты были химически чистыми и были использованы по получении. Все операции проводили при температуре окружающей среды, т.е. в диапазоне 17-28°С, и, где целесообразно, в атмосфере инертного газа, такого как азот. Нагревание микроволнами относится к нагреванию до постоянной температуры с использованием микроволнового излучения с переменной мощностью в микроволновом реакторе СЕМ ОНсоуег®. Реакции гидрирования проводили, используя систему ВисЫ Ре1егю® или систему ТЬаккЫапо Н-СиЬе®, как подробно описано. Концентрирование всех растворов осуществляли путем упаривания при пониженном давлении (в вакууме), например используя роторный испаритель ВисЫ Ро1ауарог®.

Тонкослойную хроматографию (ТЬС) проводили, используя алюминиевые или стеклянные пластины с покрытием диоксида кремния (размер частиц меньше 63 мкм; пористость 60А; площадь поверхности около 500 м²/г) с флуоресцентным (УФ254) индикатором. После элюирования проводили визуализацию пластин либо посредством облучения при УФ254, либо посредством проявления с использованием подходящего индикатора, такого как йод (предварительно адсорбированного на диоксиде кремния), водный раствор перманганата калия или водный раствор нитрата церия(1У)-аммония. Примеры препаратов индикаторов можно найти в Е.хрептеп1а1 Ог^нис Сйеш151гу: Ргерагайуе апй Мюгокса1е, 2'¹ Εά. (Ήαηνοοά. Ь., Μοοάу, С. αηά Регсу, I.), V^1еуВ1аскνе11, 1998.

Аналитическую НРЬС проводили, используя либо колонку ν;·ι^Γ5 ХВ^де™ С8 (3,5 мкм) с элюированием градиентом ацетонитрила в 0,1%-ном водном растворе трифторуксусной кислоты, или в 0,1%-ном водном растворе муравьиной кислоты, или в 0,1%-ном водном растворе ацетата аммония, или в 0,1%-ном водном растворе аммиака; либо колонку ν;·ι^Γ5 ХВ^де™ С18 (3,5 мкм) с градиентом ацетонитрила в 0,1%-ном водном растворе аммиака; либо колонку \ν;·ιΚΓ5 §утте1гу™ С18 (3,5 мкм) с градиентом ацетонитрила в 0,1%-ном водном растворе трифторуксусной кислоты; либо колонку \ν;·ι^Γ5 §цпйге™ С8 (3,5 мкм) с градиентом ацетонитрила в 0,1%-ном водном растворе трифторуксусной кислоты; либо колонку Рйепотепех Оет1т™ С18 (3 мкм) с градиентом ацетонитрила в 0,1%-ном водном растворе трифторуксусной кислоты. УФ-спектры элюируемых пиков измеряли, используя диодную матрицу на системе Адйап! 1100® или эквивалентной системе.

- 9 020566

Жидкостную хроматографию среднего давления (МРЬС) на диоксиде кремния (размер частиц меньше 63 мкм; пористость 60А; площадь поверхности около 500 м²/г) проводили, используя предварительно заполненные колонки Вю1аде РЬЛ§Н™ или им эквивалентные, например колонки диоксида кремния ТНопъоп 8ΙΝΟΕΕ §1ЕР™, Вю1аде ЕокНе™, Те1ейупе Есо Кей18ер™ или §Шсус1е иИгаРиге, при рекомендованных скоростях потока растворителя и загрузках образца. Чистоту фракций определяли либо посредством ТЬС, либо аналитической НРЬС.

Препаративную НРЬС проводили, используя градиент ацетонитрила или метанола в 0,1 или 0,2%ном водном растворе ТЕЛ, водном растворе муравьиной кислоты или водном растворе аммиака, используя колонку РЬепотепех Оет1ш™ ΝΧ С18 (30x100 мм, 5 мкм), колонку \Уа1ег5 §цпйге™ Ргер С8 (30x100 мм, 10 мкм), колонку \Уа1ег5 §цпйге™ Ргер С18 (30x100 мм, 5 мкм) или колонку \Уа1ег5 ХВпйде™ С8 (30x100 мм, 5 мкм) в качестве стационарной фазы при скорости потока 30-35 мл/мин, как подробно описано. Фракции собирали после детекции посредством УФ-спектроскопии при такой длине волны, как 220 или 254 нм. Чистоту фракций определяли либо посредством ТЬС, либо аналитической НРЬС.

¹Н ЯМР-спектры регистрировали на приборе Вгикег Ауапсе 600 (600 МГц), Вгикег ΌΚΧ 500 (500 МГц) или Уапап Иш1у1поуа 500, 400 или 300 МГц. В качестве стандартов использовали либо центральные пики хлороформа-й (СИС13; 5Н 7,27 млн^-1), диметилсульфоксида-йб (й6-ЭМ§О; 5_Н 2,50 млн^-1) или метанола-й4 (СИ3ОП; 5Н 3,31 млн^-1), либо внутренний стандарт тетраметилсилана (ТМ§; 5Н 0,00 млн¹). Масс-спектры регистрировали на АдйеЩ ΜδΌ (масс-спектральный детектор) (+уе и -уе для АРС1 (химической ионизации при атмосферном давлении) и/или электрораспыления (например, в мультимодальном режиме)), вслед за аналитической НРЬС.

Все другие способы осуществляли, используя стандартные лабораторные методы, например, как подробно описано в Ехрептеп1а1 Огдашс СЬет181гу: Ргерагайуе апй Мюго8са1е, 2'¹ Ей. (Напуоой, Ь., Моойу, С. апй Регсу, I.), ^йеуВ1аскче11, 1998.

Сокращения или термины, использованные в примерах, имеют следующие значения:

г - граммы, ч - час(ы), мин - минута(ы), мл - миллилитры,

А1ВЫ - азо-бис-изобутиронитрил,

СТО - 1,1'-карбонилдиимидазол,

ИСМ - дихлорметан,

ИМЕ - Ν,Ν'-диметилформамид,

ИМ§О - диметилсульфоксид,

НАТИ - гексафторфосфат О-(7-азабензотриазол-1-ил)-Ы,Ы,Ы'Ы'-тетраметилурония,

НС1 - хлористый водород/соляная кислота,

НРЬС - высокоэффективная жидкостная хроматография, основание Хюнига - Ν,Ν-диизопропилэтиламин,

1РА - изопропанол,

МеОН - метанол,

МТВЕ - метил-трет-бутиловый эфир,

ИВЗ - Ν-бромсукцинимид,

NСδ - Ν-хлорсукцинимид,

ИМР - 1-метилпирролидин-2-он, к.т. - комнатная температура,

Т3Р - ангидрид 2-пропанфосфоновой кислоты,

ТВАЕ - фторид тетрабутиламмония,

ТЕА - трифторуксусная кислота,

ТНЕ - тетрагидрофуран,

То5Ю-65 - связанная с макропористым полимером ионообменная смола, поставляемая Вю1аде АВ,

Тритон-В - гидроксид бензилтриметиламмония.

- 10 020566

Получение синтетических промежуточных соединений

А) Получение сегментов ароматического линкера.

Ароматическое промежуточное соединение 5. 3-(2-(трет-Бутилдиметилсилилокси)этил)-2-фторбензальдегид

а) трет-Бутил(2-фторфенетокси)диметилсилан

г

Раствор 2-(2-фторфенил)этанола (5,5 г) и имидазола (8,0 г) в ΌΜΡ (50 мл) охлаждали в ледяной воде, обрабатывали трет-бутилдиметилхлорсиланом (6,52 г), затем извлекали из охлаждающей бани и перемешивали при комнатной температуре в течение 3,5 ч. Раствор выливали в воду и три раза экстрагировали диэтиловым эфиром. Объединенные органические экстракты три раза промывали водой, один раз рассолом, затем сушили над безводным сульфатом магния и концентрировали при пониженном давлении, что позволило получить указанное в подзаголовке соединение в виде бесцветного масла.

Выход: 9,9 г.

'II ЯМР (400 МГц, С1)С1_;): δ 7,25-7,14 (т, 2Н), 7,07-6,97 (т, 2Н), 3,81 (1, 1=7,0 Гц, 2Н), 2,87 (1, 1=6,9 Гц, 2Н), 0,86 (к, 9Н), -0,03 (к, 6Н).

Ь) 3-(2-(трет-Бутилдиметилсилилокси)этил)-2-фторбензальдегид.

Раствор 2,2,6,6-тетраметилпиперидина (11,0 г) в безводном ТНР (200 мл) охлаждали до -78°С и обрабатывали бутиллитием (37,5 мл), непрерывно добавляя его в течение 5 мин с помощью шприца. Раствор перемешивали при -78°С в течение 15 мин и затем обрабатывали раствором трет-бутил(2фторфенетокси)диметилсилана [ароматическое промежуточное соединение 5, стадия а] (9,9 г) в ТНР (25 мл), добавляя его по каплям в течение 15 мин. Затем раствор перемешивали при -78°С в течение 2 ч, далее обрабатывали раствором ΌΜΡ (9 мл) в ТНР (25 мл), добавляя его по каплям в течение 10 мин. Раствор перемешивали при -78°С в течение 1 ч, затем охлаждающую баню убирали и раствор оставляли нагреваться до комнатной температуры в течение ночи. Реакционную смесь выливали в водный НС1 (0,5 М) и три раза экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы три раза промывали водой, один раз рассолом, затем сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении, что позволило получить указанное в заголовке соединение.

Выход: 10,1 г.

'II ЯМР (400 МГц, СОС1₃): δ 10,41 (к, 1Н), 7,79-7,74 (т, 1Н), 7,55 (1ф 1=7,4; 1,6 Гц, 1Н), 7,22 (1, 1=7,6 Гц, 1Н), 3,88 (1, 1=6,5 Гц, 2Н), 2,96 (1, 1=6,6 Гц, 2Н), 0,88 (к, 9Н), 0,00 (к, 6Н).

Ароматическое промежуточное соединение 7.

2-Хлор-5-(2-гидроксиэтил)бензальдегид

а) 2-Хлор-5-(цианометил)бензойная кислота

о

Раствор 5-(бромметил)-2-хлорбензойной кислоты |\МО 2001/044170] (1,75 г) в ΌΜΡ (20 мл) обрабатывали раствором цианистого калия (0,91 г) в воде (7 мл) и полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 3 суток. Смесь разбавляли водой и дважды экстрагировали этилацетатом. Органические фазы отбрасывали, тогда как водную фазу осторожно подкисляли концентрированной соляной кислотой (5 мл), пропуская всю высвобождающуюся НСЫ через раствор хлорной извести с помощью потока азота. После перемешивания в течение 20 мин водную фазу дважды дополнительно экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы три раза промывали водой, один раз рассолом, затем сушили над безводным сульфатом магния и концентрировали в вакууме, что позволило получить неочищенное указанное в подзаголовке соединение в виде коричневого твердого вещества.

Выход: 1,25 г.

т/ζ 195 М+ (ΕΙ).

- 11 020566

Ь) 5-(Карбоксиметил)-2-хлорбензойная кислота

Гидроксид калия (0,969 г) в воде (10 мл) добавляли к раствору 2-хлор-5-(цианометил)бензойной кислоты [ароматическое промежуточное соединение 7, стадия а] (1,25 г) в этаноле (10 мл) и полученную смесь нагревали при температуре дефлегмации в течение 2,25 ч, затем оставляли охлаждаться. Смесь концентрировали в вакууме для удаления этанола и затем разбавляли водой и дважды промывали этилацетатом. Органические фазы отбрасывали, тогда как водную фазу подкисляли до рН 1 концентрированной соляной кислотой и дважды экстрагировали этилацетатом. Объединенные экстракты сушили над безводным сульфатом магния и концентрировали в вакууме, что позволило получить указанное в подзаголовке соединение в виде коричневой смолы.

Выход: 1,38 г.

'II ЯМР (400 МГц, ά₆-ΌΜδΘ): δ 12,93 (Ьг 5, 2Н), 7,69 (й, 1=2,1 Гц, 1Н), 7,48 (й, 1=8,3 Гц, 1Н), 7,42 (йй, 1=8,3; 2,2 Гц, 1Н), 3,66 (5, 2Н).

с) 2-(4-Хлор-3 -(гидроксиметил)фенил)этанол

Раствор боран-диметилсульфидного комплекса (2 Μ в ТНР; 6,50 мл) порциями в течение 5 мин добавляли к раствору 5-(карбоксиметил)-2-хлорбензойной кислоты [ароматическое промежуточное соединение 7, стадия Ь] (1,37 г) в безводном ТНР (20 мл) при комнатной температуре. Полученный выделяющий пузырьки газа раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч, затем нагревали до температуры дефлегмации в течение 1 ч. Охлажденную смесь гасили, добавляя порциями метанол (5 мл) в течение 5 мин. Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и затем очищали флэш-хроматографией на диоксиде кремния, элюируя 5%-ным метанолом в дихлорметане, что позволило получить указанное в подзаголовке соединение в виде бесцветного масла.

Выход: 0,933 г.

'Н ЯМР (400 МГц, СОС1₃): δ 7,36 (й, 1=2,1 Гц, 1Н), 7,30 (й, 1=7,9 Гц, 1Н), 7,11 (йй, 1=8,1; 2,2 Гц, 1Н), 4,77 (5, 2Н), 3,87 (1, 1=6,5 Гц, 2Н), 2,86 (1, 1=6,5 Гц, 2Н).

Не наблюдали двух обмениваемых протонов. й) 2-Хлор-5-(2-гидроксиэтил)бензальдегид.

Диоксид марганца(1У) (1,00 г) добавляли к раствору 2-(4-хлор-3-(гидроксиметил)фенил)этанола [ароматическое промежуточное соединение 7, стадия с] (0,200 г) в ΌΡΜ (5 мл) и полученную суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь затем фильтровали через целит, хорошо промывая остаток ЭСМ. Фильтрат и промывки концентрировали в вакууме, что позволило получить указанное в подзаголовке соединение в виде бесцветного масла.

Выход: 0,197 г.

'Н ЯМР (400 МГц, СОС1₃): δ 10,47 (5, 1Н), 7,80 (й, 1=2,1 Гц, 1Н), 7,42 (й, 1=2,1 Гц, 1Н), 7,41 (5, 1Н), 3,89 (Ьг 1, 1=5,9 Гц, 2Н), 2,90 (1, 1=6,4 Гц, 2Н), 1,42 (Ьг 5, 1Н).

Ароматическое промежуточное соединение 9.

-(2-Г идроксиэтил)фенетилметансульфонат

Метансульфонилхлорид (0,67 мл) в ОСМ (2 мл) по каплям при 0°С добавляли к перемешиваемому раствору 2,2'-(1,3-фенилен)диэтанол (1,30 г) и триэтиламина (1,36 мл) в ОСМ (30 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при 0°С и затем промывали водой. Водный слой повторно экстрагировали ОСМ и объединенные органические фазы сушили, фильтровали и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией на диоксиде кремния, используя 3%-ный метанол в дихлорметане в качестве растворителя. Фракции, содержащие продукт, упаривали досуха, что позволило получить указанное в заголовке соединение.

Выход: 0,52 г.

ΊI ЯМР (400 МГц, й₆-ЭМ§О): δ 7,22 (1, 1=7,6 Гц, 1Н), 7,15-7,07 (т, 3Н), 4,61 (1, 1=5,2 Гц, 1Н), 4,40 (1, 1=6,8 Гц, 2Н), 3,62-3,56 (т, 2Н), 3,09 (5, 3Н), 2,96 (1, 1=6,9 Гц, 2Н), 2,70 (1, 1=7,2 Гц, 2Н).

- 12 020566

Ароматическое промежуточное соединение 10. 4-(2-Гидроксиэтил)фенетилметансульфонат

Получали способом, описанным для получения ароматического промежуточного соединения 9, используя 2,2'-(1,4-фенилен)диэтанол (1,30 г) вместо 2,2'-(1,3-фенилен)диэтанола.

Выход: 0,56 г.

Ή ЯМР (400 МГц, ά₆-ΌΜ8Θ): δ 7,21-7,14 (т, 4Н), 4,60 (1, 1=5,3 Гц, 1Н), 4,38 (1, 1=6,8 Гц, 2Н), 3,603,55 (т, 2Н), 3,10 (5, 3Н), 2,95 (1, 1=6,8 Гц, 2Н), 2,69 (1, 1=7,2 Гц, 2Н).

Ароматическое промежуточное соединение 11.

2-Хлор-3 -(2-гидроксиэтил)бензальдегид

а) 3-(Бромметил)-2-хлорбензойная кислота

Бензоилпероксид (1,33 г) добавляли к суспензии 2-хлор-3-метилбензойной кислоты (25 г) и Ν-бромсукцинимида (28,7 г) в хлорбензоле (250 мл) и полученную смесь нагревали до 85°С в течение 4 ч. Смесь разбавляли этилацетатом (100 мл) и промывали 10%-ным водным рассолом (3x100 мл). Органический слой сушили над сульфатом магния, фильтровали и упаривали. Бежевое твердое вещество перекристаллизовывали из смеси этилацетат (примерно 75 мл)/изогексан (примерно 250 мл), получая указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества.

Выход: 25,3 г.

Ή ЯМР (400 МГц, СОС1₃): δ 7,93 (й, 1=7,7 Гц, 1Н), 7,66 (й, 1=7,4 Гц, 1Н), 7,36 (1, 1=7,7 Гц, 1Н), 4,67 (5, 2Н).

Не наблюдали одного обмениваемого протона.

Ь) 2-Хлор-3-(цианометил)бензойная кислота

Раствор 3-(бромметил)-2-хлорбензойной кислоты [ароматическое промежуточное соединение 11, стадия а] (13,2 г) в ΌΜΡ (150 мл) обрабатывали раствором цианистого калия (7,23 г) в воде (50 мл) и полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь разбавляли водой (200 мл) и осторожно подкисляли концентрированной соляной кислотой (25 мл), пропуская всю высвобождающуюся НСN через раствор хлорной извести с помощью потока азота. После перемешивания в течение 2 ч водную фазу экстрагировали этилацетатом (3x250 мл). Объединенные органические фазы промывали водой (3x250 мл) и рассолом (250 мл), сушили над сульфатом магния, фильтровали и упаривали, получая указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества.

Выход: 10,3 г.

Ή ЯМР (300 МГц, й₆-ЭМ8О): δ 13,54 (5, 1Н), 7,75-7,67 (т, 2Н), 7,48 (1, 1=7,7 Гц, 1Н),4,16(5, 2Н).

с) 3-(Карбоксиметил)-2-хлорбензойная кислота

а о

Концентрированную серную кислоту (60 мл) по каплям добавляли к ледяной воде (75 мл) и полученный раствор добавляли к 2-хлор-3-(цианометил)бензойной кислоте [ароматическое промежуточное соединение 11, стадия Ь] (14 г). Полученную суспензию нагревали до температуры дефлегмации (165°С) в течение 30 мин, в течение которых исходное вещество растворялось и наблюдалось образование нового осадка. Реакционную смесь оставляли охлаждаться, разбавляли водой (250 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x500 мл). Объединенные органические фазы промывали водой (250 мл) и рассолом (250 мл),

- 13 020566 затем сушили над сульфатом магния и упаривали, получая указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества.

Выход: 13,7 г.

'ίί ЯМР (400МГц, йе-ИМЗО): δ 7,62 (йй, 1=7,7; 1,8 Гц, 1Н), 7,54 (йй, 1=7,7; 1,8 Гц, 1Н), 7,37 (ΐ, 1=7,7 Гц, 1Н), 3,78 (в, 2Н).

Не наблюдали двух обмениваемых протонов. й) 2-(2-Хлор-3 -(гидроксиметил)фенил)этанол

Раствор борандиметилсульфидного комплекса (2 М в ТНР, 220 мл) добавляли порциями в течение 5 мин к суспензии 3-(карбоксиметил)-2-хлорбензойной кислоты [ароматическое промежуточное соединение 11, стадия с] (18,9 г) в безводном ТНР (800 мл) при комнатной температуре. Полученную выделяющую пузырьки газа суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, затем нагревали до температуры дефлегмации в течение 60 мин и оставляли охлаждаться до комнатной температуры в течение ночи. Смесь гасили, добавляя порциями метанол (100 мл) в течение 15 мин, и перемешивали до прекращения выделения пузырьков газа. Добавляли концентрированную водную НС1 (25 мл), смесь перемешивали в течение 30 мин и концентрировали при пониженном давлении. Липкий остаток распределяли между этилацетатом (500 мл) и водным НС1 (2 М, 200 мл). Фазы разделяли и водную фазу экстрагировали этилацетатом (2x300 мл). Объединенные органические фазы промывали рассолом (300 мл), сушили над сульфатом магния, фильтровали и упаривали, получая указанное в подзаголовке соединение в виде желтого масла.

Выход: 17,8 г.

'Н ЯМР (400 МГц, й₆-ЭМ8О): δ 7,40 (йй, 1=7,0; 2,2 Гц, 1Н), 7,29-7,21 (т, 2Н), 5,34 (ΐ, 1=5,5 Гц, 1Н), 4,71 (ΐ, 1=4,9 Гц, 1Н), 4,55 (й, 1=5,1 Гц, 2Н), 3,63-3,56 (т, 2Н), 2,87 (ΐ, 1=7,2 Гц, 2Н).

е) 2-Хлор-3 -(2-гидроксиэтил)бензальдегид.

Диоксид марганца(1У) (43,1 г) добавляли к слабой (вПдН1) суспензии 2-(2-хлор-3(гидроксиметил)фенил)этанола [ароматическое промежуточное соединение 11, стадия й] (18,5 г) в хлороформе (500 мл) и полученную суспензию нагревали при температуре дефлегмации в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали, фильтровали через целит и фильтрующую набивку промывали ИСМ (3x300 мл). Объединенные промывки и фильтрат упаривали и остаток очищали флэш-хроматографией на диоксиде кремния, элюируя градиентом изогексан:этилацетат от 3:1 до 1:1. Фракции, содержащие продукт, объединяли и упаривали, получая указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества.

Выход: 12,00 г.

'Н ЯМР (400 МГц, СИС1₃): δ 10,55 (5, 1Н), 10,54 (ΐ, 1=5,6 Гц, 1Н), 7,83 (йй, 1=7,74; 1,8 Гц, 1Н), 7,55 (йй, 1=7,4; 1,8 Гц, 1Н), 7,35 (ΐ, 1=7,6 Гц, 1Н), 3,94 (ц, 1=6,4 Гц, 2Н), 3,11 (ΐ, 1=6,5 Гц, 2Н).

В) Получение карбоновых кислот.

Карбоновая кислота 1.

2-Этилтиазол-4-карбоновая кислота

Пентасульфид фосфора (15,2 г) добавляли к суспензии пропионамида (20 г) в метил-третбутиловом эфире (900 мл) и смесь перемешивали в течение 18 ч. Смесь фильтровали через целит и концентрировали в вакууме, что позволило получить указанное в подзаголовке соединение в виде желтого масла.

Выход: 15,8 г.

'Н ЯМР (300 МГц, СИС1₃): δ 7,59 (5, 1Н), 6,88 (5, 1Н), 2,70 (д, 1=7,5 Гц, 2Н), 1,32 (ΐ, 1=7,5 Гц, 3Н).

- 14 020566

Ь) Этил-2-этилтиазол-4-карбоксилат

О

Этил-3-бром-2-оксопропаноат (24,7 мл) по каплям при 0-10°С в атмосфере азота добавляли в течение 10 мин к раствору пропантиоамида [карбоновая кислота 1, стадия а] (15,8 г) в этаноле (150 мл). По окончании добавления смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 18 ч. Смесь концентрировали в вакууме, остаток разбавляли водой и экстрагировали в этилацетат (х3). Объединенные экстракты промывали рассолом, сушили над сульфатом магния, фильтровали и растворитель удаляли. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией на диоксиде кремния, градиент элюирования 10-, 15- и 20%-ный этилацетат в изогексане. Фракции, содержащие продукт, упаривали досуха, что позволило получить указанное в подзаголовке соединение в виде бледно-зеленого твердого вещества.

Выход: 16,0 г.

Ή ЯМР (400 МГц, СЭСЕ): δ 8,06 (5, 1Н), 4,42 (ц, 1=7,1 Гц, 2Н), 3,10 (ц, 1=7,5 Гц, 2Н), 1,44-1,38 (т,

6Н).

с) 2-Этилтиазол-4-карбоновая кислота.

Концентрированную НС1 (75 мл) добавляли к суспензии этил-2-этилтиазол-4-карбоксилата [карбоновая кислота 1, стадия Ь] (16 г) в воде (75 мл) и смесь перемешивали при 100°С в течение 24 ч. Смесь охлаждали и концентрировали в вакууме. Остаток растирали с ацетоном, твердое вещество собирали фильтрованием и сушили в вакууме, что позволило получить указанное в заголовке соединение в виде серого твердого вещества.

Выход: 14,4 г.

т/ζ 158 (М+Н)+/156 (М-Н)^- (АРС1).

Ή ЯМР (400 МГц, ά₆-ΌΜ§0): δ 8,31 (5, 1Н), 3,01 (ц, 1=7,5 Гц, 2Н), 1,31 (ί, 1=7,6 Гц, 3Н).

Не наблюдали одного обмениваемого протона.

Карбоновая кислота 2.

2-Циклопентилтиазол-4-карбоновая кислота

а) Этил-2-(циклопентанкарбоксамидо)-3 -меркаптопропаноат

СЭ1 (8,5 г) добавляли к раствору циклопентанкарбоновой кислоты (5,2 мл) в ΌΜΡ (40 мл). Полученную смесь перемешивали в течение 1 ч и охлаждали в ледяной бане. Добавляли гидрохлорид этил-2-амино-3-меркаптопропаноата (8,88 г), затем триэтиламин (10 мл). Полученную смесь оставляли нагреваться до к.т. и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором бикарбоната натрия (50 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали ЭСМ (2х100 мл). Объединенные органические растворы промывали рассолом (100 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученное твердое вещество очищали хроматографией на силикагеле, элюируя градиентом изогексан:этилацетат от 4:1 до 1:1. Фракции, содержащие продукт, объединяли и упаривали, получая указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества.

Выход: 7,7 г.

Ή ЯМР (400 МГц, ά₆-ΌΜ§0): δ 8,15 (ά 1=7,7 Гц, 1Н), 4,41-4,34 (т, 1Н), 4,14-4,05 (т, 2Н), 2,89-2,61 (т, 3Н), 1,81-1,45 (т, 9Н), 1,18 (ί, 1=7,0 Гц, 3Н).

Ь) Этил-2-циклопентил-4,5-дигидротиазол-4-карбоксилат

Моногидрат тозиловой кислоты (0,78 г) добавляли к раствору этил-2-(циклопентанкарбоксамидо)3-меркаптопропаноата [карбоновая кислота 2, стадия а] (5 г) в толуоле (40 мл). Полученную смесь нагревали при температуре дефлегмации в условиях Дина и Старка в течение 6 ч. Реакционную смесь оставляли охлаждаться, затем толуольный раствор промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия (20 мл) и растворитель выпаривали. Остаток азеотропно отгоняли с толуолом. Полученное белое твердое вещество очищали хроматографией на силикагеле, элюируя смесью 9:1 изогексан:этилацетат. Фракции,

- 15 020566 содержащие продукт, объединяли и упаривали, получая указанное в подзаголовке соединение в виде прозрачного масла.

Выход: 3,2 г.

¹Н ЯМР (400 МГц, СОС1₃): δ 5,08-4,99 (т, 1Н), 4,26 (д, 1=7,2 Гц, 2Н), 3,56-3,44 (т, 2Н), 3,08-2,99 (т, 1Н), 2,03-1,93 (т, 2Н), 1,83-1,70 (т, 4Н), 1,64-1,59 (т, 2Н), 1,31 (1, 1=7,2 Гц, 3Н).

с) Этил-2-циклопентилтиазол-4-карбоксилат

Диоксид марганца (24 г) добавляли к раствору этил-2-циклопентил-4,5-дигидротиазол-4карбоксилата [карбоновая кислота 2, стадия Ь] (3,2 г) в ацетонитриле (100 мл) и полученную смесь нагревали при температуре дефлегмации в течение ночи. Реакционную смесь оставляли охлаждаться и фильтровали через набивку целита. Фильтрующую набивку промывали ацетонитрилом (2x100 мл) и объединенные фильтрат и промывки упаривали. Остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя смесью 9:1 изогексан:этилацетат. Фракции, содержащие продукт, объединяли, упаривали и повторно растворяли в этаноле (20 мл). Добавляли суспензию палладия на угле (5%-ную; 0,66 г) в воде (0,5 мл) и полученную суспензию перемешивали в атмосфере водорода под давлением 5 бар (500 кПа) в течение 2 ч. Смесь фильтровали через набивку целита, которую промывали этанолом (3x50 мл). Объединенные фильтрат и промывки упаривали, получая указанное в подзаголовке соединение в виде прозрачного масла.

Выход: 0,9 г.

Ή ЯМР (400 МГц, СЭС1₃): δ 8,04 (к, 1Н), 4,41 (д, 1=7,2 Гц, 2Н), 3,60-3,48 (т, 1Н), 2,29-2,18 (т, 2Н), 1,89-1,67 (т, 6Н), 1,40 (1, 1=7,0 Гц, 3Н).

б) 2-Циклопентилтиазол-4-карбоновая кислота.

Моногидрат гидроксида лития (0,67 г) добавляли к раствору этил-2-циклопентилтиазол-4карбоксилата [карбоновая кислота 2, стадия с] (0,9 г) в смеси ТНР (40 мл) и воды (10 мл). Полученную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь подкисляли водным НС1 (2 М; 10 мл) и растворитель выпаривали. Остаток распределяли между рассолом (50 мл) и этилацетатом (50 мл) и слои разделяли. Водную фазу экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Объединенные органические растворы сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали, получая указанное в заголовке соединение в виде бледно-желтого твердого вещества.

Выход: 0,77 г.

Ή ЯМР (400 МГц, 6₆-ΌΜ8Θ): δ 12,89 (к, 1Н), 8,30 (к, 1Н), 3,51-3,41 (т, 1Н), 2,17-2,07 (т, 2Н), 1,821,59 (т, 6Н).

Карбоновая кислота 3.

2-(Пентан-3 -ил)тиазол-4-карбоновая кислота

а) 2-Этилбутанамид

2-Этилбутаноилхлорид (5 г) осторожно по каплям добавляли к охлажденному во льду 35%-ному водному аммиаку (50 мл) и полученную суспензию перемешивали в течение 1 ч. Реакционную смесь экстрагировали ЭСМ (3x100 мл). Объединенные органические фазы промывали рассолом (100 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали, получая указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества.

Выход: 3,4 г.

Ή ЯМР (400 МГц, 6₆-ΌΜδΘ): δ 7,23 (к, 1Н), 6,71 (к, 1Н), 1,98-1,88 (т, 1Н), 1,50-1,27 (т, 4Н), 0,81 (1, 1=7,4 Гц, 6Н).

Ь) 2-Этилбутантиоамид

Получали согласно способу получения карбоновой кислоты 1, стадия а, используя 2-этилбутанамид [карбоновая кислота 3, стадия а] (3,4 г) вместо пропио намида.

- 16 020566

Выход: 3,8 г.

Использовали непосредственно.

с) Этил-2-(пентан-3 -ил)тиазол-4-карбоксилат

Получали согласно способу получения карбоновой кислоты 1, стадия Ь, используя

2- этилбутантиоамид [карбоновая кислота 3, стадия Ь] (3,8 г) вместо пропантиоамида.

Выход: 2,8 г.

¹Н ЯМР (400 МГц, й₆-ИМ8О): δ 8,42 (5, 1Н), 4,29 (ц, 1=7,1 Гц, 2Н), 2,99-2,89 (т, 1Н), 1,82-1,58 (т, 4Н), 1,30 (ΐ, 1=7,0 Гц, 3Н), 0,81 (ΐ, 1=7,4 Гц, 6Н).

й) 2-(Пентан-3-ил)тиазол-4-карбоновая кислота.

Получали согласно способу получения карбоновой кислоты 2, стадия й, используя этил-2-(пентан3- ил)тиазол-4-карбоксилат [карбоновая кислота 3, стадия с] (2,8 г) вместо этил-2-циклопентилтиазол-4карбоксилата.

Выход: 2,3 г.

'Н ЯМР (300 МГц, й₆-ИМ8О): δ 12,91 (5, 1Н), 8,34 (5, 1Н), 2,98-2,86 (т, 1Н), 1,84-1,56 (т, 4Н), 0,81 (ΐ, 1=7,3 Гц, 6Н).

С) Получение аминов.

Амин 2.

(К)-Ы-(2,2-Диметоксиэтил)-3-метилбутан-2-амин

2,2-Диметоксиацетальдегид (60%-ный в воде; 8,7 мл) добавляли к (К)-3-метилбутан-2-амину (5,0 г) в метаноле (25 мл) и смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение ночи. Добавляли суспензию палладия на угле (5%-ную; 1,2 г) в воде (10 мл) и смесь гидрировали под давлением 5 бар (500 кПа) при перемешивании в течение 3 ч. Смесь фильтровали через целит и фильтрующую набивку промывали метанолом (3x100 мл). Объединенные фильтрат и промывки концентрировали до объема примерно 10 мл и затем добавляли толуол (200 мл). Смесь концентрировали, добавляли дополнительное количество толуола (200 мл) и смесь концентрировали еще один раз, получая указанное в заголовке соединение в виде желтого масла.

Выход: 8,0 г.

'Н ЯМР (300 МГц, СИС1₃): δ 4,46 (ΐ, 1=2,4 Гц, 1Н), 3,38 (5, 6Н), 2,78 (йй, 1=5,5; 11,9 Гц, 1Н), 2,67 (йй, 1=5,5; 11,6 Гц, 1Н), 2,49-2,39 (т, 1Н), 1,76-1,62 (т, 1Н), 0,96 (й, 1=6,7 Гц, 3Н), 0,90 (й, 1=6,7 Гц, 3Н), 0,85 (й, 1=6,7 Гц, 3Н).

Не наблюдали одного обмениваемого протона.

Амин 6.

Ы-(2,2-Диметоксиэтил)циклопентанамин

Получали согласно способу получения амина 2, используя циклопентанамин (5,0 г) вместо (К)-3метилбутан-2-амина.

Выход: 9,4 г.

'Н ЯМР (400 МГц, СИС1₃): δ 4,47 (ΐ, 1=5,6 Гц, 1Н), 3,39 (5, 6Н), 3,05 (квинтет, 1=6,8 Гц, 1Н), 2,72 (й, 1=5,4 Гц, 2Н), 1,89-1,80 (т, 2Н), 1,73-1,62 (т, 2Н), 1,58-1,48 (т, 2Н), 1,36-1,27 (т, 2Н).

Не наблюдали одного обмениваемого протона.

Получение конечных соединений.

Все следующие далее конечные соединения выделяли в виде их дитрифторацетатных солей, если не указано иное.

Типичный пример 1.

Дитрифторацетат Ы-этил-Н-(2-(2-(4-гидрокси-2-оксо-2,3-дигидробензо[й]тиазол-7ил)этиламино)этил)-3-(4-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамида

- 17 020566

Моногидрат тозиловой кислоты (0,54 г) добавляли в виде одной порции к раствору ^(2,2-диметоксиэтил)-^этил-3-(4-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропанамида (0,26 г) в ОСМ (7 мл). Смесь перемешивали в течение 2 ч при 20°С. Осторожно добавляли насыщенный раствор бикарбоната натрия (10 мл) и полученную смесь энергично перемешивали в течение 10 мин. Смесь экстрагировали ОСМ, органический слой промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия (х2) и рассолом, затем сушили, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в метаноле (10 мл) и обрабатывали уксусной кислотой (0,023 мл), затем гидрохлоридом 7-(2-аминоэтил)-4-гидроксибензо[Д]тиазол-2(3Н)она (Огд. Ргос. Кез. Эеу., 2004, 8(4), 628) (0,15 г). Эту смесь перемешивали при 20°С в течение 10 мин и затем охлаждали в ледяной бане. Добавляли цианоборгидрид натрия (0,038 г) и реакционную смесь перемешивали при 20°С в течение 18 ч. Растворитель выпаривали при пониженном давлении и остаток очищали флэш-хроматографией на диоксиде кремния, используя в качестве растворителя 8%-ный метанол в дихлорметане, содержащем 1% '880' водного аммиака. Остаток очищали далее препаративной НРЬС (8ипйге™, градиент: 40-70% метанола в 0,2%-ной водной ТРА). Фракции, содержащие желаемый продукт, упаривали досуха, что позволило получить указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества.

Выход: 0,105 г.

т/ζ 793 М+ (режим мультимодальный+).

Ή ЯМР (400 МГц, Д₆-ЭМ8О, 90°С): δ 7,96 (з, 1Н), 7,17 (з, 4Н), 6,85 (Д, 1=8,2 Гц, 1Н), 6,75 (Д, 1=8,2 Гц, 1Н), 3,77-3,52 (т, 12Н), 3,43-3,27 (т, 7Н), 3,20-3,08 (т, 6Н), 3,00-2,93 (т, 2Н), 2,87-2,82 (т, 2Н), 2,80-2,75 (т, 2Н), 2,59-2,53 (т, 2Н), 2,13-2,02 (т, 2Н), 1,88-1,73 (т, 2Н), 1,36 (Д, 1=6,9 Гц, 6Н), 1,09 (I, 1=6,7 Гц, 3Н).

Не наблюдали пяти обмениваемых протонов.

^(2,2-Диметоксиэтил)-^этил-3-(4-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропанамид, используемый в качестве исходного вещества, получали следующим образом.

а) трет-Бутил-4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-карбоксилат

Раствор 2-изопропилтиазол-4-карбоновой кислоты (1 г) и гидрохлорида трет-бутил-1-окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-9-карбоксилата (^и Χί РЬагтаТесЬ.) (1,71 г) в ЭМР (30 мл) охлаждали в ледяной бане и обрабатывали триэтиламином (2,44 мл), затем НАТИ (2,89 г). Ледяную баню удаляли и смесь перемешивали при 20°С в течение 1 ч. Смесь распределяли между этилацетатом и рассолом, органический слой дважды промывали рассолом, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией на диоксиде кремния, используя 70%-ный этилацетат в изогексане в качестве растворителя. Фракции, содержащие продукт, упаривали досуха, что позволило получить указанное в подзаголовке соединение.

Выход: 2,0 г.

Ή ЯМР (400 МГц, Д₆-ЭМ8О, 90°С): δ 7,93 (з, 1Н), 3,71-3,63 (т, 6Н), 3,51-3,44 (т, 2Н), 3,35-3,26 (т, 1Н), 3,18-3,10 (т, 2Н), 1,74-1,67 (т, 2Н), 1,49-1,41 (т, 2Н), 1,39 (з, 9Н), 1,34(Д, 1=7,6 Гц, 6Н).

Ь) Трифторацетат (2-изопропилтиазол-4-ил)(1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-4-ил)метанона

Раствор трет-бутил-4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9карбоксилата [типичный пример 1, стадия а] (2,3 г) в смеси дихлорметана (40 мл) и трифторуксусной кислоты (10 мл) оставляли стоять при 20°С в течение 30 мин. Добавляли толуол (50 мл) и растворители выпаривали, затем этот процесс повторяли со следующей порцией толуола (50 мл). Остаток растирали с

- 18 020566 эфиром. Затем смолу растворяли в ацетонитриле и растворитель выпаривали, что позволило получить указанное в подзаголовке соединение.

Выход: 1,64 г.

т/ζ 310 (М+Н)+(АРС1).

с) (9-(4-(2-Гидроксиэтил)фенетил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-4-ил)(2-изопропилтиазол-4ил)метанон

Карбонат калия (0,634 г) добавляли к раствору трифторацетата (2-изопропилтиазол-4-ил)(1-окса4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-4-ил)метанона [типичный пример 1, стадия Ь] (0,971 г) и

4-(2-гидроксиэтил)фенетилметансульфоната [ароматическое промежуточное соединение 10] (0,56 г) в ацетонитриле (20 мл) и воде (0,3 мл). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 1 суток. Растворитель выпаривали при пониженном давлении и остаток распределяли между водой и этилацетатом. Водный слой повторно экстрагировали этилацетатом, объединенные органические фазы сушили, фильтровали и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали флэшхроматографией на диоксиде кремния, используя в качестве растворителя 2%-ный метанол в дихлорметане с 1% триэтиламина. Фракции, содержащие продукт, упаривали досуха, что позволило получить указанное в подзаголовке соединение.

Выход: 0,68 г.

'Н ЯМР (500 МГц, й₆-ЭМ8О, 90°С): δ 7,91 (5, 1Н), 7,08 (5, 4Н), 4,20 (1, 1=4,7 Гц, 1Н), 3,70-3,58 (т, 8Н), 3,35-3,27 (т, 1Н), 2,71-2,65 (т, 4Н), 2,57-2,32 (т, 6Н), 1,75-1,67 (т, 2Н), 1,59-1,52 (т, 2Н), 1,36 (й, 1=6,8 Гц, 6Н).

й) трет-Бутил-3 -(4-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропаноат

Гидроксид бензилтриметиламмония (40%-ный в метаноле; 0,031 мл) добавляли к раствору (9-(4-(2-гидроксиэтил)фенетил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-4-ил)(2-изопропилтиазол-4ил)метанона [типичный пример 1, стадия с] (0,62 г) в толуоле (20 мл). Растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток азеотропно отгоняли с толуолом. Полученную маловязкую жидкость со следами толуола обрабатывали по каплям трет-бутилакрилатом (0,225 г). Реакционную смесь перемешивали при 20°С в течение 18 ч. Смесь очищали флэш-хроматографией на диоксиде кремния, используя в качестве растворителя 2%-ный метанол в дихлорметане с 1% триэтиламина. Фракции, содержащие продукт, упаривали досуха, что позволило получить указанное в подзаголовке соединение.

Выход: 0,550 г.

т/ζ 586 (М+Н)+ (АРС1).

е) 3 -(4-(2-(4-(2-Изопропилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропионовая кислота

Трифторуксусную кислоту (10 мл) добавляли к раствору трет-бутил-3-(4-(2-(4-(2-изопропилтиазол4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропаноата [типичный пример 1, стадия й] (0,55 г) в ЭСМ (20 мл) и полученный раствор оставляли стоять при 20°С в течение 1 ч. Добавляли толуол (30 мл) и растворители выпаривали при пониженном давлении. Остаток азеотропно отгоняли с ацетонитрилом (х2), получая указанное в подзаголовке соединение.

Выход: 0,60 г.

т/ζ 530 (М+Н)+ (АРС1).

- 19 020566

ί) М-(2,2-Диметоксиэтил)-Н-этил-3-(4-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро [5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропанамид

ТЗР (1,6 М в ТНР; 0,33 мл) по каплям добавляли к перемешиваемому раствору 3-(4-(2-(4-(2изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропионовой кислоты [типичный пример 1, стадия е] (0,3 г) и Ы-этил-2,2-диметоксиэтанамина [И8 2707186] (0,062 г) и триэтиламина (0,46 мл) в ΌΜΡ (7 мл). Реакционную смесь перемешивали при 20°С в течение 3 ч. Смесь распределяли между этилацетатом и рассолом, органический слой промывали рассолом (х2), сушили, фильтровали и растворитель выпаривали при пониженном давлении, получая указанное в подзаголовке соединение.

Выход: 0,26 г.

т/ζ 645 (М+Н)+ (АРС1).

Типичный пример 2.

Дитрифторацетат Ы-циклогексил-М-(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин8-ил)этиламино)этил)-3-(4-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамида

Получали способом из типичного примера 1, используя П-циклогексил-П-(2,2-диметоксиэтил)-3-(4(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамид (0,32 г) вместо П-(2,2-диметоксиэтил)-П-этил-3-(4-(2-(4-(2изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропанамида и гидрохлорид 8-(2-аминоэтил)-5-гидрокси-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-3(4Н)-она |\УО 2008/075025] (0,17 г) вместо гидрохлорида 7-(2-аминоэтил)-4-гидроксибензо[й]тиазол-2(3Н)-она.

Выход: 0,102 г.

т/ζ 845 М+ (режим мультимодальный+).

'II ЯМР (400 МГц, ά₆-ΌΜ§0, 90°С): δ 9,39 (5, 1Н), 7,96 (5, 1Н), 7,17 (5, 4Н), 6,66 (й, 1=8,5 Гц, 1Н), 6,49 (й, 1=8,2 Гц, 1Н), 4,52 (5, 2Н), 3,73-3,57 (т, 11Н), 3,50-3,26 (т, 7Н), 3,19-3,06 (т, 4Н), 3,02-2,93 (т, 4Н), 2,84-2,74 (т, 4Н), 2,61-2,56 (т, 2Н), 2,12-2,00 (т, 2Н), 1,86-1,71 (т, 4Н), 1,67-1,56 (т, 3Н), 1,47-1,39 (т, 2Н), 1,37-1,26 (т, 8Н), 1,11-1,05 (т, 1Н).

Не наблюдали четырех обмениваемых протонов.

П-Циклогексил-П-(2,2-диметоксиэтил)-3-(4-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропанамид, используемый в качестве исходного вещества, получали следующим образом.

а) Ы-Циклогексил-Н-(2,2-диметоксиэтил)-3-(4-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро [5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропанамид

- 20 020566

НАТи (0,23 г) добавляли в виде одной порции к охлажденному на льду раствору 3-(4-(2-(4-(2изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропионовой кислоты [типичный пример 1, стадия е] (0,3 г) и Ы-(2,2-диметоксиэтил)циклогексанамина [©О 2008/075025] (0,087 г) и триэтиламина (0,26 мл) в ΌΜΡ (10 мл). Смесь перемешивали при 20°С в течение 1 ч, после чего распределяли между этилацетатом и рассолом. Органический слой промывали рассолом (х2), сушили, фильтровали и растворитель выпаривали при пониженном давлении, что позволило получить указанное в подзаголовке соединение.

Выход: 0,32 г.

т/ζ 699 (М+Н)+ (АРС1).

Типичный пример 3.

Дитрифторацетат 3 -(4-(2-(4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)-Ы-(2-(2-(4-гидрокси-2-оксо-2,3-дигидробензо[б]тиазол-7-ил)этиламино)этил)-Мпропилпропанамида

Получали способом из типичного примера 1, используя Ы-(2,2-диметоксиэтил)-3-(4-(2-(4-(2этилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)-Ы-пропилпропанамид (0,43 г) вместо Ы-(2,2-диметоксиэтил)-М-этил-3-(4-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро [5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропанамида.

Выход: 0,11 г.

т/ζ 793 М+ (режим мультимодальный+).

'Н ЯМР (400 МГц, СИзОИ): δ 7,92 (5, 1Н), 7,21-7,14 (т, 4Н), 6,89 (ά, 1=8,2 Гц, 1Н), 6,73 (б, 1=8,2 Гц, 1Н), 3,91-2,96 (т, 28Н), 2,89 (ΐ, 1=8,0 Гц, 2Н), 2,81 (ΐ, 6=7,1 Гц, 2Н), 2,62 (1, 1=6,6 Гц, 2Н), 2,30-2,21 (т, 2Н), 1,85-1,72 (т, 2Н), 1,65-1,54 (т, 2Н), 1,38 (ΐ, 1=7,6 Гц, 3Н), 0,91 (ΐ, 1=7,3 Гц, 3Н).

Не наблюдали пяти обмениваемых протонов.

Ы-(2,2-Диметоксиэтил)-3-(4-(2-(4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)-М-пропилпропанамид, используемый в качестве исходного вещества, получали следующим образом.

а) трет-Бутил-4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-карбоксилат

Т3Р (1,6 М в ТНР; 51,3 мл) по каплям добавляли к перемешиваемой суспензии гидрохлорида третбутил-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-карбоксилата (\ντι.Χί РйагтаТесй.) (18,1 г), 2-этилтиазол-4карбоновой кислоты [карбоновая кислота 1] (12 г) и триэтиламина (52 мл) в ΌΜΡ (120 мл) в атмосфере азота и смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 20 ч. Смесь разбавляли водой и экстрагировали в этилацетат (х3). Объединенные экстракты последовательно промывали 10%-ным рассолом, 30%-ным рассолом и насыщенным рассолом, сушили над сульфатом магния, фильтровали и растворитель удаляли. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией на диоксиде кремния, элюируя этилацетатом. Фракции, содержащие продукт, упаривали досуха, что позволило получить указанное в подзаголовке соединение в виде желтого масла.

Выход: 24,0 г.

т/ζ 340 (М-1Ви+Н)+ (АРС1).

Ь) Трифторацетат (2-этилтиазол-4-ил)(1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-4-ил)метанона

Получали способом из типичного примера 1, стадия Ь, используя трет-бутил-4-(2-этилтиазол-4карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-карбоксилат [типичный пример 3, стадия а] (24,0 г) вме- 21 020566 сто трет-бутил-4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9-карбоксилата. Растирание с эфиром позволило получить белое твердое вещество, которое собирали фильтрацией и сушили, получая указанное в подзаголовке соединение.

Выход: 27,7 г.

¹Н ЯМР (400 МГц, ά₆-ΌΜ§0): δ 8,55 (5, 1Н), 8,39 (5, 1Н), 8,04-8,00 (т, 1Н), 3,81-3,51 (т, 6Н), 3,182,91 (т, 6Н), 2,00-1,90 (т, 2Н), 1,72-1,56 (т, 2Н), 1,32 (ί, 1=7,2 Гц, 3Н).

с) (2-Этилтиазол-4-ил)(9-(4-(2-гидроксиэтил)фенетил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-4ил)метанон

Раствор 2-(4-(2-бромэтил)фенил)этанола [От§апоте1аШс5, 2002, 21(20), 4217] (1,71 г) в ΝΜΡ (5 мл) добавляли к суспензии трифторацетата (2-этилтиазол-4-ил)(1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-4ил)метанона [типичный пример 3, стадия Ь] (3,0 г) и карбоната цезия (5,60 г) в ΝΜΡ (10 мл) и смесь перемешивали при 75°С в атмосфере азота в течение 4 ч. Добавляли дополнительное количество 2-(4-(2бромэтил)фенил)этанола (0,65 г) и смесь перемешивали при 75°С в течение 18 ч. Смесь охлаждали, разбавляли водой и экстрагировали в этилацетат (х3). Объединенные экстракты промывали 10%-ным рассолом, 30%-ным рассолом и насыщенным рассолом, сушили над сульфатом магния, фильтровали и растворитель удаляли. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией на диоксиде кремния, последовательно элюируя 50%-ным этилацетатом в изогексане с 5% триэтиламина, затем 100%-ным этилацетатом с 5% триэтиламина, затем 10%-ным метанолом в этилацетате с 5% триэтиламина. Фракции, содержащие продукт, упаривали досуха, что позволило получить указанное в подзаголовке соединение в виде желтого масла.

Выход: 1,90 г.

т/ζ 444 (М+Н)+ (АРС1).

б) трет-Бутил-3 -(4-(2-(4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропаноат

Гидроксид ЩЩ^триметил-1-фенилметанаминия (40%-ный в воде; 0,51 мл) добавляли к раствору (2-этилтиазол-4-ил)(9-(4-(2-гидроксиэтил)фенетил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-4-ил)метанона [типичный пример 3, стадия с] (1,9 г) и трет-бутилакрилата (1,32 мл) в ацетонитриле (1,5 мл) и смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 4 ч. Смесь концентрировали в вакууме и неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией на диоксиде кремния, градиент элюирования 50-75% этилацетата в изогексане с 5% триэтиламина. Фракции, содержащие продукт, упаривали досуха, что позволило получить указанное в подзаголовке соединение в виде бесцветного масла.

Выход: 2,19 г.

т/ζ 572 (М+Н)+ (АРС1).

е) 3-(4-(2-(4-(2-Этилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропионовая кислота

Получали способом из типичного примера 1, стадия е, используя трет-бутил-3-(4-(2-(4-(2этилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропаноат [типичный пример 3, стадия б] (2,2 г) вместо трет-бутил-3-(4-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропаноата.

Выход: 3,36 г.

'Н ЯМР (400 МГц, СОС1₃): δ 7,90 (5, 1Н), 7,13 (бб, 1=29,9; 8,1 Гц, 4Н), 3,97-3,92 (т, 1Н), 3,82-3,77

- 22 020566 (т, 3Н), 3,74-3,67 (т, 4Н), 3,64-3,56 (т, 1Н), 3,35-3,27 (т, 1Н), 3,10-3,00 (т, 6Н), 2,85 (1, 1=6,5 Гц, 2Н), 2,61-2,55 (т, 2Н), 2,21-2,13 (т, 2Н), 2,03-1,92 (т, 6Н), 1,45-1,34 (т, 3Н).

Не наблюдали одного обмениваемого протона.

ί) Ы-(2,2-Диметоксиэтил)-3-(4-(2-(4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан9-ил)этил)фенетокси)-Ы-пропилпропанамид

НАТИ (0,33 г) добавляли к раствору 3-(4-(2-(4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропионовой кислоты [типичный пример 3, стадия е] (0,50 г), Ы-(2,2-диметоксиэтил)пропан-1-амина [ЫеЫдк Аппа1еп йег СНспйс. 1979, 11, 1818] (0,12 г) и триэтиламина (0,56 мл) в дихлорметане (5 мл) при 0°С в атмосфере азота и смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 2 ч. Смесь промывали водой, органическую фазу отделяли, сушили, фильтровали и концентрировали в вакууме, что позволило получить указанное в подзаголовке соединение в виде оранжевого масла.

Выход: 0,43 г.

т/ζ 645 (М+Н)+ (АРС1).

Типичный пример 7.

Дитрифторацетат Ы-циклогептил-3-(2-фтор-3-((4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)метил)фенетокси)-Ы-(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Нбензо[Ь] [ 1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)пропанамида

Моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (0,219 г) добавляли к раствору Ы-циклогептил-М-(2,2диметоксиэтил)-3 -(2-фтор-3 -((4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)пропанамида (0,165 г) в тетрагидрофуране (2 мл) и полученную смесь перемешивали в течение ночи при к.т. Затем этот раствор добавляли к суспензии гидрохлорида 8-(2-аминоэтил)-5гидрокси-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-3(4Н)-она [^О 2008/075025] (0,056 г) и бикарбоната натрия (0,116 г) в смеси ΝΜΡ (2 мл) и воды (0,2 мл). Полученный мутный раствор перемешивали в течение 10 мин. Затем добавляли уксусную кислоту (0,013 мл), после чего триацетоксиборгидрид натрия (0,122 г) и полученную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь распределяли между 2-метилтетрагидрофураном (15 мл) и насыщенным раствором бикарбоната натрия (15 мл). Органическую фазу отделяли, промывали 10%-ным водным рассолом (2x15 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали флэш-хроматографией на диоксиде кремния, градиент элюирования смесью дихлорметан:метанол:'880' водный аммиак от 97,25:2,5:0,25 до 92,3:7:0,7. Фракции, содержащие продукт, объединяли и упаривали. Полученную смолу очищали далее препаративной НРЬС (8ипйге™, градиент: 35-60% метанола в 0,2%-ной водной ТРА). Фракции, содержащие продукт, объединяли, упаривали и растирали с эфиром, получая указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества.

Выход: 0,069 г.

т/ζ 863 М+ (режим мультимодальный+).

ΊI ЯМР (500 МГц, ά₆-ΌΜ§0, 90°С): δ 9,39-9,29 (т, 1Н), 8,81-8,40 (т, 2Н), 7,99-7,87 (т, 1Н), 7,497,37 (т, 2Н), 7,24-7,12 (т, 1Н), 6,73-6,61 (т, 1Н), 6,56-6,44 (т, 1Н), 4,58-4,48 (т, 2Н), 4,38-4,29 (т, 2Н), 3,86-3,59 (т, 11Н), 3,49-3,00 (т, 11Н), 2,91-2,78 (т, 4Н), 2,64-2,55 (т, 2Н), 2,10-1,98 (т, 2Н), 1,85-1,30 (т, 19Н), 1,13-1,04 (т, 1Н).

Не наблюдали двух обмениваемых протонов.

АЦиклогептил-А(2,2-диметоксиэтил)-3-(2-фтор-3-((4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)метил)фенетокси)пропанамид, используемый в качестве исходного вещест- 23 020566 ва, получали следующим образом.

а) (9-(3 -(2-(трет-Бутилдиметилсилилокси)этил)-2-фторбензил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-4ил)(2-изопропилтиазол-4-ил)метанон

3-(2-(трет-Бутилдиметилсилилокси)этил)-2-фторбензальдегид [ароматическое промежуточное соединение 5] (4,07 г) добавляли к трифторацетату (2-изопропилтиазол-4-ил)(1-окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-4-ил)метанона [типичный пример 1, стадия Ь] (6,10 г) в смеси ^метил-2пирролидинона (50 мл) и уксусной кислоты (0,83 мл) и перемешивали в течение 30 мин. Затем добавляли триацетоксиборгидрид натрия (4,58 г) и смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь выливали в воду (100 мл), рН подводили до 8, используя насыщенный раствор бикарбоната натрия, и смесь экстрагировали этилацетатом (3x100 мл). Объединенные органические фазы промывали водой (3x100 мл) и рассолом (100 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали флэш-хроматографией на диоксиде кремния, используя в качестве растворителя смесь 77,5:17,5:5 изогексан:этилацетат:триэтиламин, с получением указанного в подзаголовке соединения в виде прозрачного масла.

Выход: 5,35 г.

Ή ЯМР (400 МГц, й₆-ЭМ8О. 90°С): δ 7,96 (5, 1Н), 7,29-7,18 (т, 2Н), 7,09 (1, 1=7,4 Гц, 1Н), 3,85 (1, 1=6,5 Гц, 2Н), 3,74-3,67 (т, 6Н), 3,54 (5, 2Н), 3,37 (септет, 1=6,9 Гц, 1Н), 2,88-2,82 (т, 2Н), 2,50-2,34 (т, 4Н), 1,79-1,71 (т, 2Н), 1,63-1,54 (т, 2Н), 1,42 (й, 1=6,9 Гц, 6Н), 0,87 (5, 9Н), 0,00 (5, 6Н).

Ь) (9-(2-Фтор-3-(2-гидроксиэтил)бензил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-4-ил)(2изопропилтиазол-4-ил)метанон

ТВАР (1 М в ТНР; 13,9 мл) добавляли к раствору (9-(3-(2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил)-2фторбензил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-4-ил)(2-изопропилтиазол-4-ил)метанона [типичный пример 7, стадия а] (5,35 г) в ТНР (50 мл) и полученную смесь перемешивали в течение 1 ч. Растворитель выпаривали и остаток распределяли между этилацетатом (100 мл) и водой (100 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали этилацетатом (2x100 мл). Объединенные органические фазы промывали рассолом (100 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией на диоксиде кремния, градиент элюирования от смеси 4:1 изогексан:этилацетат до 100%-ного этилацетата, получая указанное в подзаголовке соединение в виде прозрачного масла.

Выход: 3,90 г.

Ή ЯМР (300 МГц, й₆-ОМ8О): δ 7,93 (5, 1Н), 7,23-7,14 (т, 2Н), 7,03 (1, 1=7,5 Гц, 1Н), 4,48-4,40 (т, 1Н), 3,69-3,56 (т, 8Н), 3,48 (5, 2Н), 3,38-3,24 (т, 1Н), 2,75 (1, 1=6,9 Гц, 2Н), 2,45-2,23 (т, 4Н), 1,76-1,62 (т, 2Н), 1,60-1,47 (т, 2Н), 1,35 (й, 1=6,9 Гц, 6Н).

с) трет-Бутил-3-(2-фтор-3-((4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан9-ил)метил)фенетокси)пропаноат

Получали способом из типичного примера 1, стадия й, используя (9-(2-фтор-3-(2гидроксиэтил)бензил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-4-ил)(2-изопропилтиазол-4-ил)метанон [типичный пример 7, стадия Ь] (3,85 г) вместо (9-(4-(2-гидроксиэтил)фенетил)-1-окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-4-ил)(2-изопропилтиазол-4-ил)метанона. Неочищенный продукт очищали флэшхроматографией на диоксиде кремния, градиент элюирования от смеси 1:1 этилацетат:изогексан с 5% триэтиламина до смеси 95:5 этилацетат:триэтиламин. Фракции, содержащие продукт, упаривали досуха, что позволило получить указанное в подзаголовке соединение.

Выход: 3,95 г.

т/ζ 590 (М+Н)+ (АРС1).

- 24 020566

й) 3 -(2-Фтор-3 -((4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)пропионовая кислота

ТРА (10 мл) осторожно добавляли к раствору трет-бутил-3-(2-фтор-3-((4-(2-изопропилтиазол-4карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)метил)фенетокси)пропаноата [типичный пример 7, стадия с] (3,95 г) в ИСМ (40 мл). Полученную смесь перемешивали в течение 2 ч. Растворитель выпаривали и остаток дважды азеотропно отгоняли с ацетонитрилом. Остаток растворяли в свежеперегнанном 2-метилтетрагидрофуране (100 мл) и промывали 3 раза смесью рассола и насыщенного раствора бикарбоната натрия (10:1; 100 мл). Органическую фазу сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток 3 раза азеотропно отгоняли с изогексаном, получая указанное в подзаголовке соединение в виде белой пены.

Выход: 2,92 г.

т/ζ 534 (М+Н)+ (АРС1).

е) Ы-Циклогептил-Н-(2,2-диметоксиэтил)-3-(2-фтор-3-((4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9-ил)метил)фенетокси)пропанамид

Раствор НАТИ (0,143 г) в ИМР (0,5 мл) добавляли к раствору 3-(2-фтор-3-((4-(2-изопропилтиазол-4карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)метил)фенетоксипропионовой кислоты [типичный пример 7, стадия й] (0,133 г), основания Хюнига (0,22 мл) и Ы-(2,2-диметоксиэтил)циклогептанамина |\УО 2008/075025] (0,050 г) в ИМР (0,5 мл). Полученный темный раствор перемешивали в течение ночи при к.т. Растворитель выпаривали и остаток распределяли между этилацетатом (25 мл) и 20%-ным водным рассолом (25 мл). Органический слой отделяли и промывали 20%-ным водным рассолом (2x25 мл). Органический раствор упаривали и остаток очищали хроматографией на силикагеле, градиент элюирования смесью изогексан:этилацетат:триэтиламин от 65:30:5 до 47,5:47,5:5. Фракции, содержащие продукт, объединяли и упаривали, получая указанное в подзаголовке соединение в виде масла.

Выход: 0,165 г.

т/ζ 717 (М+Н)+ (АРС1).

Типичный пример 8.

Дитрифторацетат И-бензил-3-(2-фтор-3-((4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)метил)фенетокси)-И-(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Нбензо[Ь] [ 1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)пропанамида

Раствор Ы-бензил-Н-(2,2-диметоксиэтил)-3-(2-фтор-3-((4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)метил)фенетокси)пропанамида (0,114 г) в смеси воды (1 мл) и уксусной кислоты (1 мл) нагревали при 50°С в течение 2 ч. Смесь осторожно добавляли к насыщенному раствору бикарбоната натрия (30 мл) и полученную водную смесь экстрагировали этилацетатом (3x25 мл). Объединенные органические фазы промывали рассолом, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток растворяли в ИМР (1 мл) и добавляли к раствору гидрохлорида 8-(2-аминоэтил)-5гидрокси-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-3(4Н)-она [^О 2008/075025] (0,039 г) и бикарбоната натрия (0,013 г) в смеси ИМР (1 мл) и воды (0,2 мл). Затем добавляли уксусную кислоту (1 мл) и смесь перемешивали в течение 10 мин. Затем добавляли триацетоксиборгидрид натрия (0,085 г) и смесь перемешивали в течение ночи при к.т. Реакционную смесь распределяли между 2-метилтетрагидрофураном (15 мл) и насыщенным раствором бикарбоната натрия (15 мл). Органическую фазу отделяли, промывали 10%-ным вод- 25 020566 ным рассолом (2х15 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали флэш-хроматографией на диоксиде кремния, градиент элюирования смесью дихлорметан:метанол:'880' водный аммиак от 97,25:2,5:0,25 до 92,3:7:0,7. Фракции, содержащие продукт, объединяли и упаривали. Полученную смолу очищали далее препаративной НРЬС (8иийге™, градиент: 35-60% метанола в 0,2%ной водной ТРА). Фракции, содержащие продукт, объединяли, упаривали и растирали с эфиром, получая указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества.

Выход: 0,029 г.

т/ζ 857 М+ (режим мультимодальный+).

^!Н ЯМР (500 МГц, а₆-ЭМ8О, 90°С): δ 9,34 (5, 1Н), 8,64-8,27 (т, 1Н), 7,93 (5, 1Н), 7,42-7,14 (т, 8Н), 6,64 (ά, 1=8,4 Гц, 1Н), 6,48 (ά, 1=8,3 Гц, 1Н), 4,60 (5, 2Н), 4,49 (5, 2Н), 4,27-4,20 (т, 2Н), 3,73-2,98 (т, 21Н), 2,88-2,78 (т, 4Н), 2,66-2,59 (т, 2Н), 2,04-1,95 (т, 2Н), 1,81-1,70 (т, 2Н), 1,35 (ά, 1=6,8 Гц, 6Н).

Не наблюдали трех обмениваемых протонов.

ЮБензил-Ю(2,2-диметоксиэтил)-3-(2-фтор-3-((4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)метил)фенетокси)пропанамид, используемый в качестве исходного вещества, получали следующим образом.

а) ЮБензил-Ю(2,2-диметоксиэтил)-3-(2-фтор-3-((4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро [5.5]ундекан-9-ил)метил)фенетокси)пропанамид

Получали способом из типичного примера 7, стадия е, используя Юбензил-2,2-диметоксиэтанамин [1. СЬет. 8ос. Регкш Тгап5. 1, 1974, 19, 2185] (0,049 г) вместо Ю(2,2-диметоксиэтил)циклогептанамина.

Выход: 0,114 г. т/ζ 711(М+Н)+ (АРС1).

Типичный пример 9.

Дитрифторацетат Ν-этилЭ -(2-фтор-3 -((4-(2-(пентан-3 -ил)тиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)метил)фенетокси)-Ю(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Нбензо[Ь] [ 1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)пропанамида

Получали из (9-(2-фтор-3-(2-гидроксиэтил)бензил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-4-ил)(2(пентан-3-ил)тиазол-4-ил)метанона (0,32 г), используя способы, аналогичные описанным для типичных примеров 1-3.

Выход: 0,11 г.

т/ζ 823 М+ (режим мультимодальный+).

^!Н ЯМР (400 МГц, с1.-1)\18О. 90°С): δ 9,40 (5, 1Н), 7,96 (5, 1Н), 7,41 (ί, 1=7,2 Гц, 2Н), 7,19 (ί, 1=7,7 Гц, 1Н), 6,66 (ά, 1=8,5 Гц, 1Н), 6,48 (ά, 1=8,5 Гц, 1Н), 4,53 (5, 2Н), 4,34-4,20 (т, 2Н), 3,72-3,61 (т, 10Н), 3,52 (ί, 1=6,5 Гц, 2Н), 3,32 (ц, 1=7,0 Гц, 2Н), 3,14-3,03 (т, 8Н), 2,97-2,90 (т, 1Н), 2,87 (ί, 1=6,9 Гц, 2Н), 2,82 (ί, 1=7,8 Гц, 2Н), 2,55 (ί, 1=6,7 Гц, 2Н), 2,08-1,95 (т, 2Н), 1,82-1,64 (т, 6Н), 1,13-1,02 (т, 3Н), 0,84 (ί, 1=7,4 Гц, 6Н).

(9-(2-Фтор-3-(2-гидроксиэтил)бензил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-4-ил)(2-(пентан-3ил)тиазол-4-ил)метанон, используемый в качестве исходного вещества, получали следующим образом.

а) Трифторацетат 2,2,2-трифтор-1-( 1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-4-ил)этанона

- 26 020566

Раствор трифторуксусного ангидрида (9,6 мл) в ЭСМ (10 мл) по каплям добавляли в течение периода времени 15 мин к перемешиваемому раствору триэтиламина (15,2 мл) и гидрохлорида трет-бутилокса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-карбоксилата (\νιιΧί РПагтаТесП) (9,95 г) в ЭСМ (100 мл) при 0°С в атмосфере азота. Полученный раствор перемешивали при 0°С в течение 30 мин. Добавляли дополнительное количество триэтиламина (2,5 мл), затем дополнительное количество трифторуксусного ангидрида (1,6 мл) в ЭСМ (10 мл) и перемешивание при 0°С продолжали в течение 1 ч. Добавляли воду (100 мл) и смесь энергично перемешивали в течение 10 мин. Органический слой отделяли, сушили и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Остаток растворяли в ЭСМ (100 мл) и раствор обрабатывали трифторуксусной кислотой (25 мл). Эту смесь оставляли стоять при 20°С в течение 10 мин и затем разбавляли толуолом (40 мл). Растворители удаляли при пониженном давлении и остаток азеотропно отгоняли с дополнительным количеством толуола (х2), получая указанное в подзаголовке соединение.

Выход: 14,0 г.

т/ζ 253 (М+Н)+ (АРС1).

Ь) 2-(3 -(1 -Окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9-илметил)-2-фторфенил)этанол

3-(2-(трет-Бутилдиметилсилилокси)этил)-2-фторбензальдегид [ароматическое промежуточное соединение 5] (5,0 г) добавляли к раствору трифторацетата 2,2,2-трифтор-1-(1-окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-4-ил)этанона [типичный пример 9, стадия а] (9,3 г) и уксусной кислоты (1 мл) в ^метил-2-пирролидиноне (50 мл). Полученную смесь перемешивали в течение 15 мин, затем охлаждали в ледяной бане. Затем добавляли триацетоксиборгидрид натрия (5,64 г) и смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь гасили добавлением смеси насыщенного раствора бикарбоната натрия и рассола (1:5) и четыре раза экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы сушили (М§§0₄), фильтровали и концентрировали в вакууме, что позволило получить масло. Это масло растворяли в ТНР (100 мл) и обрабатывали ТВАР (1 М в ТНР; 18 мл). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 50 мин, затем добавляли дополнительное количество ТВАР (1 М в ТНР; 18 мл) и смесь перемешивали в течение следующих 100 мин. Затем раствор концентрировали в вакууме, что позволило получить масло. Это масло растворяли в метаноле (100 мл), раствор обрабатывали '880' водным аммиаком (20 мл), перемешивали при комнатной температуре в течение 50 мин, затем концентрировали в вакууме, получая масло. Это масло растворяли в метаноле и концентрировали на диоксиде кремния для флэш-хроматографии в вакууме. Полученный порошок очищали флэшхроматографией на диоксиде кремния, элюируя смесью '880' водный аммиак:метанол:дихлорметан (1:10:89), что позволило получить указанное в подзаголовке соединение в виде желтого масла.

Выход: 5,8 г; чистота 60%.

Использовали в неочищенном виде. т/ζ 309 (М+Н)+ (АРС1).

с) (9-(2-Фтор-3 -(2-гидроксиэтил)бензил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-4-ил)(2-(пентан-3 ил)тиазол-4-ил)метанон

НАТи (0,35 г) добавляли к бесцветному раствору 2-(3-(1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9илметил)-2-фторфенил)этанола [типичный пример 9, стадия Ь] (0,364 г), 2-(пентан-3-ил)тиазол-4карбоновой кислоты [карбоновая кислота 3] (0,141 г) и триэтиламина (0,30 мл) в ОМР (10 мл), предварительно охлажденному в ледяной воде. Полученную желтую смесь перемешивали в ледяной воде в течение 1 ч, затем при комнатной температуре в течение 1 ч. Раствор выливали в смесь воды и рассола и дважды экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические экстракты три раза промывали водой, один раз рассолом, затем сушили (М§§0₄), фильтровали и концентрировали на диоксиде кремния для флэш-хроматографии в вакууме. Полученный порошок очищали флэш-хроматографией на диоксиде кремния, элюируя смесью триэтиламин:метанол:дихлорметан (1:2:97), что позволило получить указанное в подзаголовке соединение.

Выход: 0,324 г.

т/ζ 490 (М+Н)+ (АРС1).

- 27 020566

Типичный пример 26.

Дитрифторацетат 3 -(2-хлор-3 -((4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)-Ы-этил-Ы-(2-(2-(4-гидрокси-2-оксо-2,3-дигидробензо[б]тиазол-7ил)этиламино)этил)пропанамида

Моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (0,51 г) добавляли к раствору 3-(2-хлор-3-((4-(2этилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)метил)фенетокси)-Ы-(2,2диметоксиэтил)-Ы-этилпропанамида (0,35 г) в ТНР (5 мл) и полученную смесь перемешивали в течение 15 мин при к.т. Затем этот раствор добавляли к суспензии гидрохлорида 7-(2-аминоэтил)-4гидроксибензо[б]тиазол-2(3Н)-она (Огд. Ргос. Рек. Эеу. 2004, 8(4), 628) (0,20 г) и бикарбоната натрия (0,29 г) в смеси ЫМР (2 мл) и воды (0,2 мл). Полученный мутный раствор перемешивали в течение 10 мин, затем добавляли триацетоксиборгидрид натрия (0,34 г) и полученную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом (15 мл) и насыщенным раствором бикарбоната натрия (15 мл). Органическую фазу отделяли, промывали 10%-ным рассолом (2x15 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали флэш-хроматографией на диоксиде кремния, градиент элюирования смесью дихлорметан:метанол:'880' водный аммиак от 97,25:2,5:0,25 до 92,3:7:0,7. Фракции, содержащие продукт, объединяли и упаривали. Полученную смолу очищали далее препаративной НРЬС (Оет1т™ ΝΧ, градиент: 27-62% метанола в 0,1%-ной водной ТРА). Фракции, содержащие продукт, объединяли и упаривали, получая указанное в заголовке соединение в виде белой пены.

Выход: 0,17 г.

т/ζ 799 М+ (режим мультимодальный+).

Ίί ЯМР (500 МГц, б₆-ЭМ8О, 90°С): δ 11,35 (к, 1Н), 7,95-7,90 (т, 1Н), 7,53-7,47 (т, 1Н), 7,44-7,38 (т, 1Н), 7,36-7,30 (т, 1Н), 6,87-6,81 (т, 1Н), 6,77-6,71 (т, 1Н), 4,36-4,23 (т, 2Н), 3,75-2,54 (т, 30Н), 2,061,94 (т, 2Н), 1,83-1,68 (т, 2Н), 1,38-1,29 (т, 3Н), 1,16-1,03 (т, 3Н).

3-(2-Хлор-3-((4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)-Ы-(2,2-диметоксиэтил)-Ы-этилпропанамид, используемый в качестве исходного вещества, получали следующим образом.

Т3Р (1,6 М в ТНР; 51 мл) по каплям добавляли к перемешиваемой суспензии гидрохлорида третбутил-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-карбоксилата (\νηΧί РЬагтаТесЬ) (18 г), 2-этилтиазол-4карбоновой кислоты [карбоновая кислота 1] (12,0 г) и триэтиламина (52 мл) в ЭМР (120 мл) в атмосфере азота и смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 20 ч. Смесь разбавляли водой и экстрагировали в этилацетат (х3). Объединенные экстракты последовательно промывали 10%-ным рассолом, 30%-ным рассолом и насыщенным рассолом, сушили над сульфатом магния, фильтровали и растворитель удаляли. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией на диоксиде кремния, элюируя этилацетатом. Чистые фракции упаривали досуха, что позволило получить указанное в подзаголовке соединение в виде желтого масла.

Выход: 24 г.

т/ζ 340 (М-1Ви+Н)+ (АРС1).

Трифторуксусную кислоту (20 мл) добавляли к раствору трет-бутил-4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-карбоксилата [типичный пример 26, стадия а] (24 г) в дихлорметане

- 28 020566 (100 мл) и смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 18 ч. Реакционную смесь разбавляли толуолом (50 мл) и концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в дихлорметане (50 мл), добавляли ТРА (50 мл) и смесь перемешивали в течение 4 ч. Смесь разбавляли толуолом (50 мл), концентрировали в вакууме, остаток растирали с эфиром и выпавшее в осадок твердое вещество собирали фильтрацией и сушили, что позволило получить указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества.

Выход: 28 г.

Ή ЯМР (400 МГц, 6₆-ΌΜ8Θ): δ 8,55 (к, 1Н), 8,39 (к, 1Н), 8,04-8,00 (т, 1Н), 3,81-3,51 (т, 6Н), 3,182,91 (т, 6Н), 2,00-1,90 (т, 2Н), 1,72-1,56 (т, 2Н), 1,32 (1, 1=7,2 Гц, 3Н).

с) (9-(2-Хлор-3-(2-гидроксиэтил)бензил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-4-ил)(2-этилтиазол-4ил)метанон

К суспензии 2-хлор-3-(2-гидроксиэтил)бензальдегида [ароматическое промежуточное соединение 11] (1,5 г) и трифторацетата (2-этилтиазол-4-ил)(1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-4-ил)метанона [типичный пример 26, стадия Ь] (4,25 г) в тетрагидрофуране (50 мл) добавляли триэтиламин (2,5 мл) в виде одной порции. Смесь перемешивали в течение 0,5 ч, затем добавляли триацетоксиборгидрид натрия (2,58 г) в виде одной порции и полученный раствор перемешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом (100 мл) и насыщенным раствором бикарбоната натрия (50 мл). Смесь энергично встряхивали в течение 10 мин и слои разделяли. Водную фазу экстрагировали этилацетатом (100 мл). Объединенные органические растворы промывали рассолом, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали флэш-хроматографией на диоксиде кремния, используя в качестве растворителя смесь 95:5 этилацетат:триэтиламин. Фракции, содержащие продукт, объединяли и упаривали, получая указанное в подзаголовке соединение в виде прозрачного масла.

Выход: 3,40 г.

Ή ЯМР (400 МГц, 6₆-ΌΜ8Θ, 90°С): δ 7,89 (к, 1Н), 7,33-7,28 (т, 1Н), 7,24-7,16 (т, 2Н), 4,35 (1, 1=5,4 Гц, 1Н), 3,68-3,60 (т, 8Н), 3,55 (к, 2Н), 3,02 (д, 1=7,5 Гц, 2Н), 2,89 (1, 1=6,9 Гц, 2Н), 2,46-2,31 (т, 4Н), 1,75-1,67 (т, 2Н), 1,59-1,51 (т, 2Н), 1,33 (1, 1=7,6 Гц, 3Н).

б) трет-Бутил-3 -(2-хлор-3 -((4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)пропаноат

Тритон-В (40%-ный в воде; 0,94 мл) добавляли к раствору (9-(2-хлор-3-(2-гидроксиэтил)бензил)-1окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-4-ил)(2-этилтиазол-4-ил)метанона [типичный пример 26, стадия с] (3,2 г) и трет-бутилакрилата (1,5 мл) в ацетонитриле (1 мл) и полученную смесь перемешивали в течение ночи при к.т. Растворитель выпаривали и остаток очищали флэш-хроматографией на диоксиде кремния с градиентом элюирования от смеси 1:1:0,05 этилацетат:изогексан:триэтиламин до смеси 95:5 этилацетат:триэтиламин, получая указанное в подзаголовке соединение в виде прозрачного масла.

Выход: 3,2 г. т/ζ 592 М+ (АРС1).

е) 3 -(2-Хлор-3 -((4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)пропионовая кислота

ТРА (10 мл) добавляли к раствору трет-бутил-3-(2-хлор-3-((4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)метил)фенетокси)пропаноата [типичный пример 26, стадия б] (3,1 г) в ЭСМ (30 мл) и полученную смесь перемешивали в течение 2 ч, затем упаривали. Остаток распределяли между этилацетатом (100 мл) и насыщенным раствором бикарбоната натрия (50 мл). Фазы разделяли и водную фазу еще раз промывали этилацетатом (2x100 мл). Водную фазу затем подкисляли, используя уксусную кислоту, и экстрагировали этилацетатом (3x100 мл). Объединенные органические растворы сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали, получая указанное в подзаголовке соединение в виде белой пены.

- 29 020566

Выход: 2,7 г.

'ΐΐ ЯМР (400 МГц, й₆-ЭМ8О. 90°С): δ 7,92 (5, 1Н), 7,60-7,53 (т, 1Н), 7,44-7,39 (т, 1Н), 7,32 (ΐ, 1=7,6 Гц, 1Н), 3,76-3,56 (т, 12Н), 3,12-2,92 (т, 8Н), 2,42 (ΐ, 1=6,4 Гц, 2Н), 2,01-1,73 (т, 4Н), 1,33 (ΐ, 1=7,6 Гц, 3Н).

Не наблюдали одного обмениваемого протона.

ί) 3-(2-Хлор-3-((4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)-Ы-(2,2-диметоксиэтил)-Н-этилпропанамид

НАТИ (1,06 г) добавляли к раствору 3-(2-хлор-3-((4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)метил)фенетокси)пропионовой кислоты [типичный пример 26, стадия е] (0,75 г), основания Хюнига (1,22 мл) и Ы-этил-2,2-диметоксиэтанамина [И8 2707186] (0,37 г) в ΌΜΡ (5 мл). Полученный темный раствор перемешивали в течение ночи при к.т. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом (25 мл) и 20%-ным рассолом (25 мл). Органический слой отделяли и промывали 20%-ным рассолом (2x25 мл). Органический раствор упаривали и остаток очищали хроматографией на силикагеле, градиентное элюирование от смеси изогексан:триэтиламин (95:5) до смеси этилацетаттриэтиламин (95:5). Фракции, содержащие продукт, объединяли и упаривали, получая указанное в подзаголовке соединение в виде масла.

Выход: 0,70 г. т/ζ 651 М+(АРС1).

Типичный пример 27.

Дитрифторацетат 3-(2-хлор-3-((4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)метил)фенетокси)-Ы-циклогексил-М-(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)пропанамида

Моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (0,29 г) добавляли к раствору 3-(2-хлор-3-((4-(2изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)метил)фенетокси)-Ы-циклогексилЫ-(2,2-диметоксиэтил)пропанамида (0,22 г) в ЭСМ (5 мл) и полученную смесь перемешивали в течение 3 ч при к.т. Затем раствор добавляли к суспензии гидрохлорида 8-(2-аминоэтил)-5-гидрокси-2Нбензо[Ь][1,4]оксазин-3(4Н)-она |\УО 2008/075025] (0,11 г) и бикарбоната натрия (0,17 г) в смеси ΝΜΡ (2 мл) и воды (0,2 мл) и полученный мутный раствор перемешивали в течение 10 мин. Затем добавляли уксусную кислоту (0,018 мл), после чего триацетоксиборгидрид натрия (0,16 г) и полученную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь распределяли между 2-метилтетрагидрофураном (15 мл) и насыщенным раствором бикарбоната натрия (15 мл). Органическую фазу отделяли, промывали 10%-ным рассолом (2x15 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали флэш-хроматографией на диоксиде кремния с градиентом элюирования смесью дихлорметан:метанол:'880' водный аммиак от 97,25:2,5:0,25 до 92,3:7:0,7. Фракции, содержащие продукт, объединяли и упаривали. Полученную смолу очищали далее препаративной НРЬС (8иийге™, градиент: 35-60% метанола в 0,2%-ной водной ТРА). Фракции, содержащие продукт, объединяли, упаривали и растирали с эфиром, получая указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества.

Выход: 0,037 г.

т/ζ 865 М+ (режим мультимодальный+).

ΊI ЯМР (400 МГц, й₆-ЭМ8О. 90°С): δ 9,40 (Ьг 5, 1Н), 8,40 (Ьг 5, 1Н), 7,93 (5, 1Н), 7,49 (й, 1=7,2 Гц, 1Н), 7,41 (й, 1=6,9 Гц, 1Н), 7,32 (ΐ, 1=7,4 Гц, 1Н), 6,66 (й, 1=8,2 Гц, 1Н), 6,49 (й, 1=8,2 Гц, 1Н), 4,53 (5, 2Н), 4,26 (Ьг 5, 2Н), 3,75-3,60 (т, 11Н), 3,51-2,93 (т, 13Н), 2,82 (ΐ, 1=7,6 Гц, 2Н), 2,60 (ΐ, 1=6,4 Гц, 2Н), 2,03-1,89 (т, 2Н), 1,82-1,69 (т, 4Н), 1,68-1,56 (т, 4Н), 1,50-1,23 (т, 4Н), 1,35 (й, 1=6,9 Гц, 6Н).

Не наблюдали трех обмениваемых протонов.

3-(2-Хлор-3-((4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)-^циклогексил-^(2,2-диметоксиэтил)пропанамид, используемый в качестве исходного вещества, получали следующим образом.

- 30 020566

а) Г идрохлорид (2-изопропилтиазол-4-ил)(1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-4-ил)метанона

Раствор 2-изопропилтиазол-4-карбоновой кислоты (12 г) и гидрохлорида трет-бутил-1-окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-9-карбоксилата [^ϋΧί РЬагтаТесЬ] (20 г) в 2-метилтетрагидрофуране (140 мл) охлаждали в ледяной воде и обрабатывали триэтиламином (47 мл), затем Т3Р (1,6 М в ТНР; 54 мл). Смесь оставляли нагреваться до к.т. и перемешивали в течение 1 ч. Добавляли воду (140 мл) при перемешивании, затем фазы разделяли. Органическую фазу промывали водой (80 мл) и затем концентрировали до объема (примерно 100 мл) при пониженном давлении, используя температуру меньше 30°С. Добавляли 1РА (75 мл) и смесь концентрировали до объема (примерно 100 мл). Еще раз добавляли 1РА (75 мл) и смесь вновь концентрировали до объема (примерно 100 мл). Добавляли раствор хлористого водорода в 1РА (примерно 6 М, 81 мл) при охлаждении в ледяной воде, затем смесь нагревали до 40°С и перемешивали в течение 3,5 ч. Смесь охлаждали до к.т., разбавляли МТВЕ (34 мл) и перемешивали в течение 30 мин. Полученное выпавшее в осадок твердое вещество извлекали фильтрацией и сушили в вакуумном сушильном шкафу при 55°С в течение ночи.

Выход: 20,5 г.

'Н ЯМР (400 МГц, й₆-ЭМ8О): δ 8,88 (й, 1=41,0 Гц, 2Н), 8,05 (5, 1Н), 3,86-3,46 (т, 6Н), 3,32 (квинтет, 1=6,7 Гц, 1Н), 3,17-3,02 (т, 2Н), 3,01-2,85 (т, 2Н), 1,96 (й, 1=14,1 Гц, 2Н), 1,81-1,55 (т, 2Н), 1,35 (й, 1=6,9 Гц, 6Н).

Ь) (9-(2-Хлор-3-(2-гидроксиэтил)бензил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-4-ил)(2изопропилтиазол-4-ил)метанон

Получали способом из типичного примера 26, стадия с, используя гидрохлорид (2-изопропилтиазол-4-ил)(1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-4-ил)метанона [типичный пример 27, стадия а] (1,37 г) вместо трифторацетата (2-этилтиазол-4-ил)(1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-4ил)метанона и 2-метилтетрагидрофуран (50 мл) вместо тетрагидрофурана.

Выход: 1,00 г.

'Н ЯМР (400 МГц, й₆-ЭМ8О. 90°С): δ 7,91 (й, 1=1,3 Гц, 1Н), 7,30 (й, 1=7,2 Гц, 1Н), 7,24-7,16 (т, 2Н), 4,36 (1, 1=5,1 Гц, 1Н), 3,73-3,59 (т, 8Н), 3,55 (5, 2Н), 3,32 (септет, 1=6,8 Гц, 1Н), 2,89 (1, 1=7,0 Гц, 2Н), 2,462,40 (т, 1Н), 2,40-2,28 (т, 1Н), 2,17 (1, 1=8,1 Гц, 1Н), 1,91 (квинтет, 1=7,5 Гц, 1Н), 1,77-1,65 (т, 2Н), 1,621,50 (т, 2Н), 1,36 (й, 1=6,5 Гц, 6Н).

с) трет-Бутил-3-(2-хлор-3-((4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)пропаноат

Получали способом из типичного Примера 7, стадия с, используя (9-(2-хлор-3-(2гидроксиэтил)бензил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-4-ил)(2-изопропилтиазол-4-ил)метанон [типичный пример 27, стадия Ь] (1,0 г) вместо (9-(2-фтор-3-(2-гидроксиэтил)бензил)-1-окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-4-ил)(2-изопропилтиазол-4-ил)метанона.

Выход: 0,93 г. т/ζ 606 М+ (АРС1).

й) 3 -(2-Хлор-3 -((4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)пропионовая кислота

Получали способом из типичного примера 7, стадия й, используя трет-бутил-3-(2-хлор-3-((4-(2- 31 020566 изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)метил)фенетокси)пропаноат [типичный пример 27, стадия с] (0,93 г) вместо трет-бутил-3-(2-фтор-3-((4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9-ил)метил)фенетокси)пропаноата.

Выход: 0,76 г. т/ζ 550 М+ (АРС1).

е) 3 -(2-Хлор-3 -((4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)-Н-циклогексил-Н-(2,2-диметоксиэтил)пропанамид

3-(2-хлор-3-((4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)пропионовую кислоту [типичный пример 27, стадия й] (0,28 г) вместо 3-(2-фтор-3((4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)пропионовой кислоты и N-(2,2-диметоксиэтил)циклогексанамин |\УО 2008/075025] (0,10 г) вместо N-(2,2-диметоксиэтил)циклогептанамина.

Выход: 0,11 г. т/ζ 719М+ (АРС1).

Следующие далее соединения получали из соответствующих карбоновых кислот и аминов, используя способы, аналогичные описанным выше.

Пример 33.

Дитрифторацетат 3 -(2-хлор-3 -((4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)-Н-циклопентил-Н-(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ъ][1,4]оксазин-8ил)этиламино)этил)пропанамида

т/ζ 837 М+ (режим мультимодальный+).

Ή ЯМР (500 МГц, й₆-ЭМ8О, 90°С): δ 9,37 (5, 1Н), 8,41 (5, 1Н), 7,92 (5, 1Н), 7,52-7,48 (т, 1Н), 7,447,39 (т, 1Н), 7,36-7,30 (т, 1Н), 6,66 (й, 1=8,3 Гц, 1Н), 6,48 (й, 1=8,3 Гц, 1Н), 4,53 (5, 2Н), 4,34-4,16 (т, 2Н), 3,74-2,96 (т, 25Н), 2,82 (ΐ, 1=7,6 Гц, 2Н), 2,62 (ΐ, 1=6,2 Гц, 2Н), 2,02-1,41 (т, 12Н), 1,32 (ΐ, 1=7,5 Гц, 3Н).

Не наблюдали трех обмениваемых протонов.

Пример 33а.

3-(2-Хлор-3-((4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)-Н-циклопентил-Н-(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ъ][1,4]оксазин-8ил)этиламино)этил)пропанамид, сульфатная соль

К раствору 3 -(2-хлор-3 -((4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)-Н-циклопентил-Н-(2,2-диметоксиэтил)пропанамида (9,6 г) в ТНЕ (80 мл) и ИМР (8 мл) добавляли тозиловую кислоту-Н₂О (13,25 г) и реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 30 мин.

Тем временем к раствору 8-(2-аминоэтил)-5-гидрокси-2Н-бензо[Ъ][1,4]оксазин-3(4Н)-она-НС1 (4,09 г) в ЯМР (48 мл) и воде (4,8 мл) добавляли бикарбонат натрия (7,84 г) и реакционную смесь пере- 32 020566 мешивали при температуре окружающей среды в течение 30 мин.

Вышеупомянутый раствор альдегида добавляли к раствору амина и реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин, после чего добавляли триацетоксиборгидрид натрия (8,86 г). Затем реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 90 мин.

Реакционную смесь разбавляли ЕЮАс (300 мл) и промывали насыщенным бикарбонатом натрия (2x300 мл) и рассолом. Этилацетатный раствор затем упаривали в вакууме. Неочищенный продукт очищали хроматографией на диоксиде кремния, элюируя ЭСМ (300 мл), затем смесью 6-9% 7н. ЫН₃/метанол в дихлорметане, что позволило получить 3-(2-хлор-3-((4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро [5.5]ундекан-9-ил)метил)фенетокси)-Ы-циклопентил-Ы-(2-(2-(5-гидрокси-3 -оксо-3,4-дигидро2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)пропанамид (4,90 г).

К раствору 3 -(2-хлор-3 -((4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)-Ы-циклопентил-Ы-(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-8ил)этиламино)этил)пропанамида (4,9 г) в этаноле (50 мл) добавляли серную кислоту (0,5 молярную водн.) (10,62 мл). Реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 5 мин.

Реакционную смесь упаривали в вакууме приблизительно до 5-10 мл, добавляли МеСЫ и растворитель выпаривали (х2), получая белое твердое вещество (5,2 г).

Вышеупомянутое вещество (5,2 г) растворяли в МеСН (100 мл), вносили затравку кристаллического вещества (см. ниже)* и перемешивали при температуре окружающей среды в течение 72 ч. Твердое вещество отфильтровывали, промывали Ме^Н и сушили в вакууме при температуре окружающей среды в течение ночи, получая 3-(2-хлор-3-((4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)-Ы-циклопентил-Ы-(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-8ил)этиламино)этил)пропанамид, сульфатную соль (3,04 г) в виде кристаллического белого твердого вещества.

[М+Н]+=837 (рассчитано 837) (режим мультимодальный').

Ή ЯМР (400 МГц, ά₆-ΌΜ§ϋ): δ 9,96-9,90 (т, 1Н), 9,82 (к, 1Н), 7,98 (к, 1Н), 7,40-7,18 (т, 3Н), 6,696,63 (т, 1Н), 6,51-6,45 (т, 1Н), 4,54 (к, 2Н), 4,17 (квинтет, 1=8,5 Гц, 1Н), 3,75-3,45 (т, 12Н), 3,37 (ί, 1=7,1 Гц, 2Н), 3,09-2,90 (т, 8Н), 2,77 (ί, 1=7,6 Гц, 2Н), 2,69-2,22 (т, 8Н), 1,84-1,21 (т, 16Н).

^Некоторое количество дитрифторацетатной соли (1,05 г) (пример 33) распределяли между ЭСМ (30 мл) и насыщенным бикарбонатом натрия (30 мл).

Водный слой далее экстрагировали ЭСМ. Объединенные органические экстракты сушили над Να₂§ϋ₄ и упаривали в вакууме, получая 3-(2-хлор-3-((4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро [5.5]ундекан-9-ил)метил)фенетокси)-Ы-циклопентил-Ы-(2-(2-(5-гидрокси-3 -оксо-3,4-дигидро2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)пропанамид (0,82 г) в виде белой пены.

К раствору 3 -(2-хлор-3 -((4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)-Ы-циклопентил-Ы-(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-8ил)этиламино)этил)пропанамида (230 мг) в этаноле (5 мл) добавляли серную кислоту (0,5 молярную водн.) (0,549 мл). Через 5 мин смесь упаривали в вакууме и азеотропно отгоняли с МеСЫ (х2), получая белое твердое вещество (280 мг). 50 мг этого вещества растворяли в метаноле (5 мл) и добавляли в течение 6 суток в условиях эксперимента с диффузией через пар (Ааронг ά^ΓΓик^οη ехрептеп! сοηά^ι^οηк) (используя диэтиловый эфир в качестве антирастворителя) 15 мл диэтилового эфира. Кристаллическое твердое вещество (20 мг) собирали фильтрацией.

3-(2-Хлор-3-((4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)-Ы-циклопентил-Ы-(2,2-диметоксиэтил)пропанамид

К раствору 3 -(2-хлор-3 -((4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)пропионовой кислоты (9,8 г) в ЭСМ (100 мл) добавляли основание Хюнига (9,58 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин, после чего добавляли Ы-(2,2-диметоксиэтил)циклопентанамин (4,12 г), затем НАТИ (7,65 г). Через 1 ч реакционную смесь разбавляли ЭСМ (200 мл) и промывали насыщенным бикарбонатом натрия (300 мл), затем водой (300 мл). ЭСМ-раствор сушили над №т§О₄ фильтровали и упаривали в вакууме. Неочищенный продукт очищали хроматографией на диоксиде кремния, элюируя смесью 2-5% 7н. ЫН₃/метанол в дихлорметане, что позволило получить 3 -(2-хлор-3 -((4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)-Ы-циклопентил-Ы-(2,2-диметоксиэтил)пропанамид (12,0 г) в виде бледно-желтой смолы.

т/ζ 691 [М+Н]+.

- 33 020566

Пример 33Ь.

3-(2-Хлор-3-((4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)^-циклопентил-^(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-8ил)этиламино)этил)пропанамид

а) трет-Бутил-4-(4-этилтиазол-2-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-карбоксилат

Смесь гидрохлорида трет-бутил-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-карбоксилата (лимитирующий реагент) и 4-этилтиазол-2-карбоновой кислоты (1 мол.экв.) суспендировали в ЭСМ (4,5 об.) и охлаждали до 16°С. Туда порциями добавляли триэтиламин (5 мол.экв.). Эту густую суспензию охлаждали до 6°С и по каплям добавляли Т3Р (1,1 мол.экв. 1,57 М в ТНР) при 5-15°С в течение 0,5 ч. Реакционную смесь оставляли нагреваться до 22°С и перемешивали при 22°С в течение 2 ч. Смесь разбавляли водой (6,5 объема, 4°С экзотерм.) и смесь перемешивали в течение 10 мин; водный слой отделяли и экстрагировали ЭСМ (4,5 об.). Объединенные органические экстракты промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (5,5 об.) и 20%-ным раствором рассола (1,5 об.). Органические экстракты сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и упаривали, получая коричневое масло.

Выход: 96% от теоретического.

т/ζ [М+Н]+=296-Ьос (трет-бутилоксикарбонил) (рассчитано 396) (режим мультимодальный+).

Ή ЯМР (500 МГц, СЭС1₃): δ 7,84 (5, 1Н), 4,08-3,51 (т, 10Н), 3,22 (йй, 7=15,0; 25,7 Гц, 2Н), 3,04 (η, 7=7,6 Гц, 2Н), 1,88-1,78 (т, 2Н), 1,55 (й, 7=26,2 Гц, 1Н), 1,45 (5, 9Н), 1,40 (1, 1=7,6 Гц, 3Н).

Ь)(2-Этилтиазол-4-ил)(1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-4-ил)метанон

К раствору трет-бутил-4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9карбоксилата (лимитирующий реагент) (стадия а) в 1РгОН (3 об.) добавляли хлористый водород (2 мол.экв. 5-6н. раствора в 1РгОН). Реакционную смесь нагревали и перемешивали при 49°С (внутренняя температура) в течение 18 ч, после чего охлаждали до 22°С. Добавляли ТВМЕ (4,3 об.) и суспензию перемешивали при 22°С в течение 3 суток. Твердое вещество собирали фильтрацией, промывали ТВМЕ (3,5 об.) и сушили на воздухе в течение 2 суток, получая беловатое твердое вещество.

Выход: 95% от теоретического.

т/ζ [М+Н]+=295 (рассчитано 295) (режим мультимодальный+).

Ή ЯМР (400 МГц, ЭМ8О): δ 8,03 (5, 1Н), 3,82-3,50 (т, 8Н), 3,14-2,86 (т, 8Н), 1,32 (1, 1=7,5 Гц, 3Н).

- 34 020566

К раствору 2-хлор-3-(2-гидроксиэтил)бензальдегида (1,1 мол.экв.) в ОСМ (12 об.) добавляли (2-этилтиазол-4-ил)(1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-4-ил)метанон (лимитирующий реагент) (стадия Ь). Добавляли триэтиламин (2 мол.экв.) и смесь перемешивали в течение 1,15 ч. Добавляли триацетоксиборгидрид натрия (2,5 мол.экв.) порциями в течение 15 мин, поддерживая температуру ниже 25°С. Реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 22,5 ч. Медленно добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (8 об.) и смесь перемешивали энергично в течение 1 ч; водный слой отделяли и экстрагировали ОСМ (5,3 об.). Объединенные органические экстракты промывали 20%-ным раствором рассола (5,3 об.), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и упаривали, получая коричневое масло.

Выход: 107% от теоретического.

т/ζ [М+Н]+=465 (рассчитано 465) (режим мультимодальный+).

Ή ЯМР (400 МГц, СОС1₃): δ 7,80 (з, 1Н), 7,38 (Д, 1=4,7 Гц, 1Н), 7,17 (Д, 1=4,3 Гц, 2Н), 3,89 (ДД, 1=15,4; 22,0 Гц, 4Н), 3,78 (з, 2Н), 3,63 (Д, 1=11,9 Гц, 3Н), 3,04 (I, 1=6,6 Гц, 4Н), 2,49 (з, 4Н), 1,85 (з, 3Н), 1,66 (Д, 1=74,8 Гц, 2Н), 1,42 (Д, 1=6,5 Гц, 3Н).

Д) трет-Бутил-3 -(2-хлор-3 -((4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)пропаноат

Тритон-В (0,3 мол.экв. 40%-ного раствора в воде) добавляли к раствору (9-(2-хлор-3-(2гидроксиэтил)бензил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-4-ил)(2-этилтиазол-4-ил)метанона (лимитирующий реагент) (стадия с) и трет-бутилакрилата (5 мол.экв.) в ацетонитриле (3,4 об.). Реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 1 ч. Растворитель выпаривали и остаток распределяли между водой (2 об.) и 2-МеТНР (2 об.). Слои разделяли и органические экстракты сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и упаривали, получая коричневое масло.

Выход: 94% от теоретического.

Ή ЯМР (500 МГц, СОС1₃): δ 7,80 (з, 1Н), 7,44-7,31 (т, 1Н), 7,22-7,09 (т, 2Н), 4,01-3,48 (т, 11Н), 3,10-2,95 (т, 4Н), 2,62-2,39 (т, 6Н), 1,94-1,63 (т, 2Н), 1,63-1,50 (т, 2Н), 1,47-1,35 (т, 13Н).

- 35 020566

Раствор трет-бутил-3-(2-хлор-3-((4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)пропаноата (лимитирующий реагент) (стадия й) в ЭСМ (2,8 об.) охлаждали до 5°С. Добавляли трифторуксусную кислоту (10 мол.экв.) в течение 15 мин (экзотермический эффект до 15°С). Реакционную смесь нагревали до температуры окружающей среды и перемешивали в течение 18 ч. Добавляли толуол (3 об.) и смесь упаривали. Полученную смолу растирали с толуолом (2х 1,5 об.) и упаривали, получая коричневую смолу.

Выход: 200% от теоретического (для конечного неочищенного вещества ЯМР-анализ показывает чистоту примерно 45 мас.%, при этом остальная масса обусловлена наличием ТРА в смоле).

'Н ЯМР (500 МГц, СОС1₃): δ 7,88 (5, 1Н), 7,40-7,33 (т, 2Н), 7,27-7,22 (т, 1Н), 4,42 (й, 1=5,0 Гц, 2Н), 3,90 (й, 1=8,6 Гц, 2Н), 3,82 (й, 1=6,8 Гц, 2Н), 3,77 (йй, 1=5,9; 10,6 Гц, 4Н), 3,69 (йй, 1=6,2; 11,8 Гц, 2Н), 3,65 (5, 2Н), 3,26-3,13 (т, 2Н), 3,09-2,98 (т, 4Н), 2,67 (й1, 1=5,8; 11,6 Гц, 1Н), 2,49 (ΐ, 1=5,7 Гц, 2Н), 2,16 (ΐ, 1=14,1 Гц, 2Н), 1,98 (йй, 1=8,5; 19,8 Гц, 2Н), 1,45-1,31 (т, 3Н).

ί) 3-(2-Хлор-3-((4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)-Ы-циклопентил-М-(2,2-диметоксиэтил)пропанамид

Раствор 3 -(2-хлор-3 -((4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)метил)фенетоксипропионовой кислоты (лимитирующий реагент) (стадия е) в ЭСМ (6,4 об.) охлаждали до 13°С. Добавляли триэтиламин (15 мол.экв.) в течение 80 мин (экзотермический эффект 5°С). Добавляли Ы-(2,2-диметоксиэтил)циклопентанамин (1,3 мол.экв.) в течение 5 мин (отсутствие экзотермического эффекта). Смесь оставляли нагреваться до температуры окружающей среды и перемешивали в течение 45 мин при 22°С. Добавляли Т3Р (2 мол.экв. 1,57 М раствора в ТНР) порциями в течение 10 мин (экзотермический эффект 8°С). Реакционную смесь перемешивали при 22°С в течение 1,5 ч. Добавляли насыщенный раствор бикарбоната натрия (4,2 об.) и смесь перемешивали в течение 5 мин. Слои распределяли и водный слой экстрагировали ЭСМ (1,4 об.). Объединенные органические экстракты промывали 20%-ным раствором рассола (1,4 об.), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Неочищенный остаток очищали δί-колоночной хроматографией (5пар-картридж (1500 г) от В|о1аде) с элюированием продукта смесью 95% ОСМ:5% (9:1 МеОН:водн. ΝΉ₃), получая желтое масло.

Выход: 79% от теоретического.

т/ζ [М+Н]+=691 (рассчитано 691) (режим мультимодальный+).

'Н ЯМР (500 МГц, СОС1₃): δ 7,81 (5, 1Н), 7,41-7,26 (т, 1Н), 7,15 (й, 1=3,4 Гц, 2Н), 4,69-4,62 (т, 1Н), 4,37 (йй, 1=6,8; 12,0 Гц, 1Н), 4,21-4,08 (т, 1Н), 3,99-3,52 (т, 12Н), 3,45-3,36 (т, 8Н), 3,28 (ΐ, 1=7,8 Гц, 2Н), 3,11-2,97 (т, 4Н), 2,70 (ΐ, 1=6,9 Гц, 2Н), 2,63-2,36 (т, 4Н), 1,93-1,32 (т, 16Н).

д) 3-(2-Хлор-3-((4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)-^циклопентил-^(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-8ил)этиламино)этил)пропанамид

Раствор 3 -(2-хлор-3 -((4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)^-циклопентил-^(2,2-диметоксиэтил)пропанамида (лимитирующий реагент) (стадия ί) в ТНР (9,5 об.) нагревали до 40°С. Добавляли моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (5 мол.экв.) и смесь выдерживали при 40°С в течение 10 мин. К реакционной смеси медленно добавляли раствор бикарбоната натрия (8 мол.экв.) в воде (16 об.). Как только прекращалось выделение пузырьков газа, водный слой экстрагировали этилацетатом (2х 16 об.). Объединенные органические экстракты сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток растворяли в ΝΜΡ (4 об.) и добавляли к суспензии 8-(2-аминоэтил)-5-гидрокси-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-3(4Н)-она-НС1 (1,2 мол.экв.)

- 36 020566 в ΝΜΡ (4 об.), воде (0,4 об.) и бикарбонате натрия (3 мол.экв.), которую перед этим перемешивали в течение 3 ч при температуре окружающей среды. Реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 30 мин. Добавляли триацетоксиборгидрид натрия (3 мол.экв.) в виде одной порции и смесь перемешивали в течение 90 мин при температуре окружающей среды. В реакционную смесь медленно добавляли насыщенный раствор бикарбоната натрия (16 об.) (бурное выделение пузырьков газа и экзотермический эффект 10°С). Добавляли 2-МеТНР (16 об.). Слои разделяли и водный слой экстрагировали 2-МеТНР (16 об.). Объединенные органические экстракты промывали водой, содержащей бикарбонат натрия (рН 8) (2х16 объемов раствора 15 г бикарбоната натрия в 2000 мл воды). Органические экстракты сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Неочищенный остаток очищали хроматографией на диоксиде кремния (5пар Ыо!аде колонка (750 г) от) с градиентом элюирования смесью от 1% аммиака/3% метанола в ЭСМ с увеличением до 1% аммиака/5% метанола в Όί','Μ для элюирования продукта. Чистые фракции упаривали досуха, что позволило получить беловатую хрупкую пену.

Выход: 33% от теоретического.

т/ζ [М+Н]+=837 (рассчитано 837) (режим мультимодальный+).

'II ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ, 90°С): δ 7,89 (б, 1=1,7 Гц, 1Н), 7,31 (б, 1=7,1 Гц, 1Н), 7,20 (6ΐ, 1=7,3; 14,7 Гц, 2Н), 6,61 (б, 1=8,2 Гц, 1Н), 6,43 (б, 1=8,2 Гц, 1Н), 4,46 (б, 1=1,4 Гц, 2Н), 4,29-4,13 (т, 1Н), 3,713,49 (т, 12Н), 3,18 (ί, 1=7,2 Гц, 2Н), 3,08-2,90 (т, 7Н), 2,71-2,29 (т, 12Н), 1,67 (б, 1=14,9 Гц, 6Н), 1,51 (б, 4=23,5 Гц, 6Н), 1,33 (бб, 1=6,0; 7,5 Гц, 3Н).

1ι) 3 -(2-Хлор-3 -((4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)Ш-циклопентилШ-(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-8ил)этиламино)этил)пропанамид, соль серной кислоты моногидрат.

Раствор 3 -(2-хлор-3 -((4-(2-этилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)метил)фенетокси)Ш-циклопентилШ-(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-8ил)этиламино)этил)пропанамида (лимитирующий реагент) (стадия д) (37,85 г; 45,20 ммоль) в метаноле (6 об.) нагревали до 50°С и по каплям в течение 10 мин добавляли серную кислоту (1 мол.экв.) в метаноле (6 об.). В смесь вносили затравку и перемешивали при 50°С в течение 1 ч. Смесь охлаждали до температуры окружающей среды в течение 2 ч и перемешивали в течение 18 ч. Осадок собирали фильтрацией и сушили в сушильном шкафу под вакуумом (без нагревания), получая белое твердое вещество.

Выход: 76% от теоретического.

'II ЯМР (500 МГц, ΌΜδΟ): δ 7,99 (5, 1Н), 7,43-7,16 (ш, 3Н), 6,67 (ί, 1=7,7 Гц, 1Н), 6,48 (ί, 1=7,3 Гц, 1Н), 4,59-4,36 (т, 2Н), 4,23-4,13 (т, 1Н), 3,63 (б£ 1=27,8; 53,1 Гц, 12Н), 3,37 (бб, 1=9,0; 16,1 Гц, 6Н), 3,112,89 (т, 8Н), 2,77 (ί, 1=7,6 Гц, 2Н), 2,64 (ί, 1=6,3 Гц, 2Н), 2,38 (бб, 1=33,4; 51,6 Гц, 4Н), 1,83-1,38 (т, 12Н), 1,32 (5, 3Н).

Соединения примеров 33, 33а получали, используя следующие карбоновые кислоты и амины:

Номер Примера	Карбоновая кислота	Амин
33, 33а	Карбоновая кислота 1	Амин 6

Пример 34.

Дитрифторацетат ^бутилШ-(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-8ил)этиламино)этил)-3 -(3 -(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамида

^БутилШ-(2,2-диметоксиэтил)-3 -(3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропанамид (0,45 г) растворяли в тетрагидрофуране (10 мл) и добавляли тозиловую кислоту (0,28 г). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, затем добавляли к смеси гидрохлорида 8-(2-аминоэтил)-5-гидрокси-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин3(4Н)-она |\УО 2008/075025] (0,245 г) и бикарбоната натрия (0,20 г) в ΝΜΡ (4 мл) и воде (0,5 мл) и перемешивали в течение 15 мин. Затем добавляли триацетоксиборгидрид натрия (0,35 г) и уксусную кислоту

- 37 020566 (0,5 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Смесь выливали в насыщенный раствор бикарбоната натрия и экстрагировали этилацетатом. Экстракты объединяли и упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали флэш-хроматографией на диоксиде кремния, используя в качестве растворителя 8%-ный метанол в дихлорметане, содержащем 1% '880' водного аммиака. Последующая очистка препаративной НРЬС (8ипйге™, градиент: 33-68% метанола в 0,1%-ной водной ТРА) позволила получить указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества.

Выход: 0,194 г.

т/ζ 819 М+(режим мультимодальный+).

ΊI ЯМР (400 МГц, й₆-ИМ8О, 90°С): δ 9,44-9,34 (т, 1Н), 8,36-8,27 (т, 1Н), 7,97 (в, 1Н), 7,26-7,19 (т, 1Н), 7,15-7,08 (т, 3Н), 6,68-6,63 (т, 1Н), 6,51-6,45 (т, 1Н), 4,53 (в, 2Н), 3,73-3,48 (т, 14Н), 3,37-2,52 (т, 20Н), 2,15-1,41 (т, 6Н), 1,36 (й, 1=6,9 Гц, 6Н), 1,32-1,25 (т, 2Н), 0,91 (ΐ, 1=7,4 Гц, 3Н).

Не наблюдали двух обмениваемых протонов.

Ы-Бутил-Н-(2,2-диметоксиэтил)-3 -(3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропанамид, используемый в качестве исходного вещества, получали следующим образом.

а) (9-(3 -(2-Г идроксиэтил)фенетил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-4-ил)(2-изопропилтиазол-4ил)метанон

Смесь гидрохлорида (2-изопропилтиазол-4-ил)(1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-4-ил)метанона [типичный пример 27, стадия а] (10 г), 2-(3-(2-бромэтил)фенил)этанола [Огдапоте!аШсв, 2002, 21(20), 4217] (10 г) и карбоната калия (16 г) в ацетонитриле (600 мл) и воде (10 мл) нагревали при 60°С в течение 36 ч. Растворитель декантировали и упаривали при пониженном давлении. Остаток распределяли между этилацетатом и рассолом, водный слой повторно экстрагировали этилацетатом и объединенные органические слои сушили, фильтровали и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали флэш-хроматографией на диоксиде кремния, используя в качестве растворителя 5%-ный метанол в этилацетате, содержащем 1% триэтиламина. Фракции, содержащие продукт, упаривали досуха, что позволило получить указанное в подзаголовке соединение.

Выход: 11 г.

т/ζ 458 (М+Н)+ (АРС1).

Ь) трет-Бутил-3 -(3 -(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропаноат

(9-(3-(2-Гидроксиэтил)фенетил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-4-ил)(2-изопропилтиазол-4ил)метанон [пример 34, стадия а] (2,4 г) растворяли в ацетонитриле (2 мл) и добавляли третбутилакрилат (1,7 мл), затем гидроксид бензилтриметиламмония (40%-ный в воде; 0,72 мл). Смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 3 ч. Летучие соединения удаляли при пониженном давлении и остаток очищали флэш-хроматографией на диоксиде кремния, элюируя 3%-ным метанолом в дихлорметане, содержащем 1% '880' водного аммиака, что позволило получить указанное в подзаголовке соединение.

Выход: 2,7 г.

т/ζ 586 (М+Н)+ (АРС1).

с) 3 -(3 -(2-(4-(2-Изопропилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропионовая кислота

трет-Бутил-3 -(3 -(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропаноат [пример 34, стадия Ь] (0,70 г) перемешивали в дихлорметане (8 мл) и до- 38 020566 бавляли трифторуксусную кислоту (2 мл). Раствор перемешивали в течение 18 ч, затем летучие соединения удаляли при пониженном давлении, что позволило получить указанное в подзаголовке соединение.

Выход: 1,0 г.

т/ζ 530 (М+Н)+ (АРС1).

ά) N-Бутил-N-(2,2-диметоксиэтил)-3-(3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро [5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропанамид

3-(3-(2-(4-(2-Изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропионовую кислоту [пример 34, стадия с] (0,50 г), основание Хюнига (0,58 мл) ^(2,2-диметоксиэтил)бутан-1-амин [I Ат. СЬет. §ос., 1949, 71(6), 2272] (0,12 г) растворяли в дихлорметане (10 мл). Затем добавляли НАТИ (0,33 г) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Смесь выливали в воду и экстрагировали дихлорметаном. Органические экстракты объединяли и упаривали при пониженном давлении, получая указанное в подзаголовке соединение.

Выход: 0,45 г.

т/ζ 673 (М+Н)+ (АРС1).

Пример 34а.

N-Бутил-N-(2-(2-(5-гидрокси-3 -оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)-3 (3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамид, сульфатная соль, модификация А.

К раствору ^бутил-^(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-8ил)этиламино)этил)-3 -(3 -(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамида (100 мг) (для получения см. ниже) в этаноле (20 мл) добавляли серную кислоту (244 мкл 0,5 М раствора в воде). Половину этого раствора отставляли на 16 ч и ^бутил^-(2-(2(5-гидрокси-3 -оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь] [ 1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)-3 -(3 -(2-(4-(2изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропанамид, сульфатную соль, модификация А, собирали фильтрацией.

Выход: 5 мг.

Моногидрат тозиловой кислоты (4,24 г) добавляли к раствору ^бутил-^(2,2-диметоксиэтил)-3-(3(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамида (3 г) в ТНР (30 мл) и полученную смесь перемешивали в течение 1 ч при к.т. Добавляли NΜР (1 мл) и данный раствор затем добавляли к суспензии 8-(2-аминоэтил)-5гидрокси-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-3(4Н)-она-НС1 (1,636 г) и бикарбоната натрия (3,00 г) в смеси NΜР (16 мл) и воды (1,6 мл), которую перемешивали в течение 45 мин. Колбу, в которой образовался альдегид, промывали NΜР (2 мл), промывки добавляли к суспензии и полученный мутный раствор перемешивали в течение 20 мин. Затем добавляли триацетоксиборгидрид натрия (2,83 г) и полученную смесь перемешивали в течение 1 ч.

Реакционную смесь распределяли между 2-метил-ТНР (200 мл) и насыщенным раствором бикарбоната натрия (150 мл). Добавляли воду (примерно 100 мл) до тех пор, пока осадки не растворялись. Смесь встряхивали в течение 10 мин (до прекращения выделения газа). Раствор в 2-метил-ТНР отделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали флэш-хроматографией на диоксиде кремния, элюируя 8%-ным метанолом в дихлорметане с 1% '880' аммиака. Чистые фракции упаривали досуха. Эту смолу растворяли в этаноле (30 мл) и обрабатывали 1 экв. серной кислоты (из 0,5 молярного водного раствора). Растворители выпаривали и остаток азеотропно отгоняли с ацетонитрилом (х2). Полученную смолу растворяли в этаноле (15 мл) и вносили затравку в виде сульфатной соли, модификация А (пример 34а, 10 мг). Смесь перемешивали при к.т. в течение 2 суток, отфильтровывали в атмосфере азота и промывали этанолом (5 мл), затем ацетонитрилом (5 мл), затем эфиром (10 мл).

Выход: 1,8 г.

т/ζ 819,4 (режим мультимодальный+).

- 39 020566

Смесь гидрохлорида (2-изопропилтиазол-4-ил)(1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-4-ил)метанона [типичный пример 27, стадия а] (13,6 г), 2-(3-(2-бромэтил)фенил)этанола [Огдапоте1аШс5, 2002, 21(20), 4217] (13,51 г) и карбоната калия (21,7 г) в ацетонитриле (700 мл) и воде (13 мл) нагревали при 60°С в течение 36 ч. Растворитель декантировали и упаривали при пониженном давлении. Остаток распределяли между этилацетатом и рассолом, водный слой повторно экстрагировали этилацетатом и объединенные органические слои сушили, фильтровали и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали флэш-хроматографией на диоксиде кремния, используя в качестве растворителя 5%-ный метанол в этилацетате, содержащем 1% триэтиламина. Фракции, содержащие продукт, упаривали досуха, что позволило получить указанное в подзаголовке соединение.

Выход: 13,2 г.

т/ζ 458 (М+Н)+ (АРС1).

Ь) трет-Бутил-3 -(3 -(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропаноат

(9-(3-(2-Гидроксиэтил)фенетил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-4-ил)(2-изопропилтиазол-4ил)метанон [пример 34а, стадия а] (13,2 г) растворяли в ацетонитриле (20 мл), добавляли третбутилакрилат (8,13 г), затем гидроксид бензилтриметиламмония (40%-ный в воде; 3,93 мл). Смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 3 ч. Летучие соединения удаляли при пониженном давлении и остаток очищали флэш-хроматографией на диоксиде кремния, элюируя 5%-ным метанолом и 1%-ным триэтиламином в этилацетате, что позволило получить указанное в подзаголовке соединение.

Выход: 13,2 г.

т/ζ 586 (М+Н)+ (АРС1).

с) 3 -(3 -(2-(4-(2-Изопропилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропионовая кислота, трифторацетатная соль

трет-Бутил-3 -(3 -(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропаноат [пример 34а, стадия Ь] (13,2 г) перемешивали в дихлорметане (150 мл) и добавляли трифторуксусную кислоту (50 мл). Раствор перемешивали в течение 1 ч. Растворители выпаривали при пониженном давлении, остаток растворяли в ацетонитриле и раствор упаривали при пониженном давлении, что позволило получить указанное в подзаголовке соединение.

Выход: 14,4 г.

т/ζ 530 (М+Н)+ (АРС1).

й) Ы-Бутил-Н-(2,2-диметоксиэтил)-3-(3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро [5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропанамид

Т3Р (15,67 мл 1,57 М раствора в ТНР) по каплям добавляли в течение 15 мин к перемешиваемому раствору трифторацетатной соли 3-(3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропионовой кислоты [пример 34а, стадия с] (14,4 г) и Ы-(2,2-диметоксиэтил)бутан-1-амина [1. Ат. СИет. 8ос., 1949, 71(6), 2272] (3,97 г) и триэтиламина (21,83 мл) в ОМР (180 мл). Смесь перемешивали при 20°С в течение 3 ч и затем распределяли между этилацетатом и водным рассолом. Органический слой промывали водным рассолом (х 2), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и растворитель выпаривали при пониженном давлении, получая указанное в подзаголовке соединение.

Выход: 15,00 г.

- 40 020566 т/ζ 673,4 (М+Н)+.

Пример 34Ь.

Ы-Бутил-Н-(2-(2-(5-гидрокси-3 -оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)-3 (3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамид.

Ы-Бутил-Н-(2-(2-(5-гидрокси-3 -оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин-8-ил)этиланино)этил)-3 (3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамид, сульфатную соль, модификация А (пример 34а) (1,73 г) растворяли в смеси ^СΜ/метанол, фильтровали и упаривали досуха. Полученную смолу распределяли между насыщенным водным бикарбонатом (100 мл) и свежеперегнанным ΜеТНР (150 мл) и смесь энергично перемешивали в течение 10 мин. Органический слой отделяли, промывали свежим бикарбонатом натрия (ж2), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении, получая указанное в заголовке соединение в виде пены.

Выход: 1,2 г.

т/ζ 819,4 (режим мультимодальный+).

Ή ЯМР (400 МГц, 6₆-ΌΜ8Θ, 90°С): δ 7,93 (к, 1Н), 7,13 (1, 1Н), 7,03-6,99 (т, 3Н), 6,60 (б, 1Н), 6,42 (б, 1Н), 4,45 (к, 2Н), 3,66-3,56 (т, 10Н), 3,31-3,20 (т, 5Н), 2,74 (1, 2Н), 2,70-2,36 (т, 16Н), 1,69-1,65 (т, 2Н), 1,55-1,53 (т, 2Н), 1,43 (к, 2Н), 1,35 (б, 6Н), 1,25-1,23 (т, 2Н), 0,87 (1, 3Н).

Кроме этого, не наблюдали 3 обмениваемых протонов.

Пример 34с.

Ы-Бутил-Н-(2-(2-(5-гидрокси-3 -оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)-3 (3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамид, сульфатная соль, модификация В.

Ы-Бутил-Н-(2-(2-(5-гидрокси-3 -оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)-3 (3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамид (пример 34Ь) (0,1 г) в этаноле (5 мл) обрабатывали серной кислотой (0,244 мл 0,5 М водного раствора). Растворители выпаривали при пониженном вакууме и остаток растирали с диэтиловым эфиром, получая белое твердое вещество. 10 мг этого твердого вещества суспендировали в смеси этанола и этилацетата (9:1, 1 мл) и перемешивали при к.т. в течение 1 недели. Полученное твердое вещество собирали фильтрацией, получая Ы-бутил-Н-(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Нбензо[Ь][1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)-3 -(3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропанамид, сульфатную соль, модификация В, в виде белого твердого вещества.

Выход: 3 мг. т/ζ 819,3 (М+Н)+.

Пример 34б.

Ы-Бутил-Н-(2-(2-(5-гидрокси-3 -оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)-3 (3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамид, сульфатная соль, модификация С.

Ы-Бутил-Н-(2-(2-(5-гидрокси-3 -оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)-3 (3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамид (пример 34Ь) (0,1 г) в этаноле (5 мл) обрабатывали серной кислотой (0,244 мл 0,5 М водного раствора). Растворители выпаривали при пониженном вакууме и остаток растирали с диэтиловым эфиром, получая белое твердое вещество. 10 мг этого твердого вещества суспендировали в смеси диоксана и этилацетата (9:1, 1 мл) и перемешивали при к.т. в течение 1 недели. Полученное твердое вещество собирали фильтрацией, получая Ы-бутил-Н-(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Нбензо[Ь][1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)-3 -(3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропанамид, сульфатную соль, модификация С, в виде белого твердого вещества.

Выход: 3 мг. т/ζ 819,3 (М+Н)+

Пример 34е.

Ы-Бутил-Н-(2-(2-(5-гидрокси-3 -оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)-3 (3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамид, сульфатная соль, модификация Ό.

Ы-Бутил-Н-(2-(2-(5-гидрокси-3 -оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)-3 (3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамид (пример 34Ь) (0,1 г) в этаноле (5 мл) обрабатывали серной кислотой (0,244 мл 0,5 М водного раствора). Растворители выпаривали при пониженном вакууме и остаток растирали с диэтиловым эфиром, получая белое твердое вещество. 10 мг этого твердого вещества суспендировали в 1,4-диоксане (1 мл) и перемешивали при к.т. в течение 12 суток. Полученное твердое вещество

- 41 020566 собирали фильтрацией, получая Ы-бутил-Н-(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Нбензо[Ь][1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)-3 -(3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропанамид, сульфатную соль, модификация Ό, в виде белого твердого вещества.

Выход: 3 мг. т/ζ 819,3 (М+Н)+.

Пример 34£.

Ы-Бутил-Н-(2-(2-(5-гидрокси-3 -оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)-3 (3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамид, сульфатная соль, модификация Е.

Ы-Бутил-Н-(2-(2-(5-гидрокси-3 -оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)-3 (3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамид (пример 34Ь) (0,1 г) в этаноле (5 мл) обрабатывали серной кислотой (0,244 мл 0,5 М водного раствора). Растворители выпаривали при пониженном вакууме и остаток растирали с диэтиловым эфиром, получая белое твердое вещество. 10 мг этого твердого вещества суспендировали в смеси диоксана и ΌΜΡ (9:1, 1 мл) и перемешивали при к.т. в течение 12 суток. Полученное твердое вещество собирали фильтрацией, получая Ы-бутил-М-(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Нбензо[Ь][1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)-3 -(3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропанамид, сульфатную соль, модификация Е, в виде белого твердого вещества.

Выход: 3 мг. т/ζ 819,3 (М+Н)+.

Пример 34д.

Ы-Бутил-Н-(2-(2-(5-гидрокси-3 -оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)-3 (3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамид, сульфатная соль, модификация Р.

Ы-Бутил-Н-(2-(2-(5-гидрокси-3 -оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)-3 (3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамид (пример 34Ь) (0,1 г) в этаноле (5 мл) обрабатывали серной кислотой (0,244 мл 0,5 М водного раствора). Растворители выпаривали при пониженном вакууме и остаток растирали с диэтиловым эфиром, получая белое твердое вещество. 10 мг этого твердого вещества суспендировали в смеси метанола и ацетонитрила (9:1, 1 мл) и перемешивали при к.т. в течение 1 недели. Полученное твердое вещество собирали фильтрацией, получая Ы-бутил-Н-(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)-3 -(3 -(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропанамид, сульфатную соль, модификация Р, в виде белого твердого вещества.

Выход: 3 мг. т/ζ 819,3 (М+Н)+.

Пример 341ι.

Ы-Бутил-Н-(2-(2-(5-гидрокси-3 -оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)-3 (3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамид, сульфатная соль, модификация О.

Ы-Бутил-Н-(2-(2-(5-гидрокси-3 -оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)-3 (3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамид (пример 34Ь) (0,1 г) в этаноле (5 мл) обрабатывали серной кислотой (0,244 мл 0,5 М водного раствора). Растворители выпаривали при пониженном вакууме и остаток растирали с диэтиловым эфиром, получая белое твердое вещество. 10 мг этого твердого вещества растворяли в воде при температуре дефлегмации (примерно 0,2 мл) и медленно добавляли ацетонитрил (примерно 4 мл). Полученную смесь оставляли охлаждаться в течение ночи. Полученный осадок выделяли фильтрацией и сушили под вакуумом, получая Ы-бутил-Н-(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Нбензо[Ь][1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)-3 -(3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропанамид, сульфатную соль, модификация О, в виде белого твердого вещества.

Выход: 2 мг.

К Ы-бутил-Н-(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)3-(3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамиду, сульфатной соли, модификация А (пример 34а) (0,117 г) добавляли затравку сульфатной соли, модификация О и добавляли 5%-ную воду в ацетонитриле (3 мл). Через 1 ч перемешивания образовывалась смола, а через 24 ч образовывалась белая суспензия. Через 72 ч Ν-бутилЫ-(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)-3-(3-(2-(4-(2изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропанамид, сульфатную соль, модификация О, в виде белого твердого вещества собирали фильтрацией.

- 42 020566

Выход: 101 мг. т/ζ 819,3 (М+Н)+.

¹Н (Экзотермический эффект (400 МГц, ά₆-ΌΜ80, 90°С): δ 9,33 (к, 1Н), 7,92 (к, 1Н), 7,16 (1, 1Н), 7,05-7,02 (т, 3Н), 6,65 (4, 1Н), 6,47 (4, 1Н), 4,51 (к, 2Н), 3,70-3,55 (т, 10Н), 3,50-2,40 (т, 23Н), 1,80-1,70 (т, 2Н), 1,65-1,55 (т, 2Н), 1,48 (к, 2Н), 1,36 (4, 6Н), 1,28-1,27 (т, 2Н), 0,90 (1, 3Н).

Кроме этого, не наблюдали 4 обмениваемых протонов.

Пример 34Ϊ.

АБутилА-(2-(2-(5-гидрокси-3 -оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)-3 (3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамид, нападизилатная соль, модификация В.

АБутилА-(2-(2-(5-гидрокси-3 -оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)-3 (3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамид (пример 34Ь) (332 мг) растворяли в 1РА (3 мл) и добавляли раствор тетрагидрата 1,5-нафталиндисульфоновой кислоты (144 мг) в 1РА (8 мл). После перемешивания в течение 10 мин полученное твердое вещество отфильтровывали и промывали небольшим количеством 1РА (1 мл) и затем эфиром. К 20 мг в метаноле (1 мл) добавляли затравку из примера 39а (0,5 мг) и перемешивали в течение 1 суток при к.т. АБутил-А(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-8ил)этиламино)этил)-3 -(3 -(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамид, нападизилатную соль, модификация В, отфильтровывали.

Выход: 10 мг. т/ζ 819,3 (М+Н)+ 'Н ЯМР (400 МГц, ά₆-ΌΜ80, 90°С): δ 9,36 (к, 1Н), 8,96 (4, 2Н), 8,30 (к, 1Н), 7,97 (4, 2Н), 7,35 (1, 2Н), 7,21 (1, 1Н), 7,10-7,06 (т, 3Н), 6,65 (4, 1Н), 6,48 (4, 1Н), 4,53 (к, 2Н), 3,72-3,50 (т, 12Н), 3,40-2,45 (т, 21Н), 2,07 (к, 2Н), 1,75 (к, 2Н), 1,46 (к, 2Н), 1,36 (4, 6Н), 1,29-1,26 (т, 2Н), 0,89 (1, 3Н).

Плюс 3 обмениваемых протона.

Пример 34).

АБутилА-(2-(2-(5-гидрокси-3 -оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)-3 (3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамид.

К суспензии гидрохлорида трет-бутил-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-карбоксилата и триэтиламина (5 мол.экв.) в ЭСМ (10 об.) по каплям в атмосфере азота в течение 50 мин добавляли 4-изопропилтиазол-2-карбоновую кислоту (1 мол.экв.), затем раствор Т3Р в ТНР (1,57 М раствор; 1,1 мол.экв.) [наблюдали экзотермический эффект 23 °С]. Смесь перемешивали в течение 4 ч, промывали водой (2х 1 л), сушили (№₂8О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме, получая оранжевый сироп.

Выход: 99% от теоретического.

'Н ЯМР (400 МГц, СОС1₃): δ 7,86 (к, 1Н), 4,06-3,86 (т, 2Н), 3,86-3,48 (т, 6Н), 3,30 (септет, 1=6,8 Гц, 1Н), 3,32-3,10 (т, 2Н), 1,87-1,79 (т, 2Н), 1,64-1,52 (т, 1Н), 1,52-1,40 (т, 1Н), 1,45 (к, 9Н) и 1,40 (4, 1=6,8 Гц, 6Н).

Ь) (2-Изопропилтиазол-4-ил)(1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-4-ил)метанон, гидрохлоридная соль

К раствору трет-бутил-4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9карбоксилата в 1РгОН (3 об.) при 40°С в атмосфере азота добавляли раствор 5-6н. НС1 в изопропаноле (2-2,4 мол.экв.). Смесь перемешивали при 40°С в течение 18 ч, охлаждали до комнатной температуры и разбавляли ТВМЕ (4 об.). Перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, собирали фильтрацией, промывали ТВМЕ и сушили на воздухе, получая беловатый порошок.

Выход: 97% от теоретического.

'Н ЯМР (400 МГц, СОС1₃): δ 9,74-9,59 (т, 1Н), 9,59-9,44 (т, 1Н), 7,88 (к, 1Н), 4,06-3,86 (т, 2Н), 3,86-3,58 (т, 4Н), 3,40-3,12 (т, 5Н), 2,28-2,06 (т, 2Н), 2,06-1,84 (т, 2Н) и 1,42 (4, 1=6,4 Гц, 6Н).

- 43 020566

с) 2,2'-(1,3-Фенилен)диэтанол

Раствор 2,2'-(1,3-фенилен)диуксусной кислоты (1,50 кг; 7,72 моль; 1,0 экв.) в Ме-ТНР (21,0 л; 14,0 об.) добавляли в течение 2 ч 06 мин к суспензии гранул алюмогидрида лития (1,25 кг; 32,81 моль; 4,25 экв.) в Ме-ТНР (12,00 л; 8 об.), поддерживая при этом температуру в диапазоне 31-40°С. Затем реакционную смесь нагревали до 50°С в течение 2 ч 10 мин и выдерживали при 50°С в течение следующих 15 ч 18 мин. Смесь охлаждали до 23 °С и избыток алюмогидрида лития гасили добавлением воды (1,25 л) в течение 2 ч 21 мин, 15%-ного (мас./об.) гидроксида натрия (1,25 л) в течение 41 мин и воды (1,25 л) в течение 13 мин, поддерживая при этом во время добавления температуру ниже 30°С. Суспензию фильтровали и осадок на фильтре повторно суспендировали в ЭСМ (2x15,00 л; 2х10 об.). Объединенные фильтраты концентрировали при 45°С, что позволило получить 1,18 кг вещества. После коррекции на содержание толуола на выходе получали 1,12 кг (87% от теоретического; 75 мас.%) вещества, которое выделяли в виде беловатого твердого вещества.

^!Н ЯМР (400 МГц, СЭ₃ОЭ): δ 7,0-7,25 (т, 4Н), 3,75 (ί, 4Н), 2,80 (ί, 4Н). ά) 2-(3-(2-Бромэтил)фенил)этанол

Суспензию 2,2'-(1,3-фенилен)диэтанола (стадия с) (1,03 кг; 6,22 моль; 1,0 экв.) в толуоле (13,49 л; 15,0 об.) и 48%-ном НВг (1,44 л; 12,75 моль; 2,05 экв.) нагревали при 87°С в течение 14 ч. Добавляли дополнительно 48%-ный (мас./мас.) НВг (0,35 л; 3,11 моль; 0,5 экв.) и смесь перемешивали при температуре дефлегмации в течение следующих 24 ч. Смесь охлаждали до температуры окружающей среды и слои разделяли. Органический слой концентрировали, что позволило получить 1,39 кг вещества. Для очистки вещество разделяли на две одинаковые партии по 800 г. Неочищенный метабромсодержащий спирт (800 г) растворяли в ЭСМ (1,6 л; 2 об. из расчета на массу неочищенного вещества) и наносили на набивку сухого силикагеля (3,6 кг; 4 мас.-экв.). Набивку элюировали смесью 10% 1РАс (изопропилацетат)/гептан (16 л) для удаления быстро двигающихся примесей, затем смесью 50% 1РАс/гептан (20 л) для вымывания продукта. Содержащие продукт фракции из каждой набивки силикагеля объединяли, концентрировали при 40-45°С и затем сушили до постоянной массы, что позволило получить 1,32 кг (81% от теоретического) метабромсодержащего спирта в виде бледно-желтого масла.

^!Н ЯМР (400 МГц, СЭ₃ОЭ): δ 7,0-7,25 (т, 4Н), 3,75 (ί, 2Н), 3,60 (ί, 2Н), 3,15 (ί, 2Н), 2,82 (ί, 2Н). е) (9-(3 -(2-Г идроксиэтил)фенетил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-4-ил)(2-изопропилтиазол-4ил)метанон

К суспензии гидрохлорида (2-изопропилтиазол-4-ил)(1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-4ил)метанона в растворе 2-(3-(2-бромэтил)фенил)этанола (1,15 мол.экв.) в ацетонитриле (10 об.) при комнатной температуре добавляли карбонат калия (4 мол.экв.), затем воду (0,167 об.). Смесь перемешивали при 60°С в течение 66 ч, охлаждали до комнатной температуры, фильтровали, промывали МеСN и концентрировали в вакууме, получая неочищенную оранжевую смолу. Згу смолу растворяли в ЕЮАс (3 об.) и промывали 2н. НС1 (1,1 мол.экв.). Водный слой подщелачивали, используя 2н. №ЮН (1,5 мол.экв.), и экстрагировали ТВМЕ (2x2 об.) (на границе раздела фаз появлялось масло, которое не растворялось в ТВМЕ). Объединенные органические экстракты и масло разбавляли ЕЮАс (1 об.) (масло растворялось), сушили (№₂8О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме, получая оранжевую смолу.

Выход: 88% от теоретического.

^!Н ЯМР (400 МГц, СЭС1₃): δ 7,84 (5, 1Н), 7,23 (ί, 1=8,0 Гц, 1Н), 7,08-7,06 (т, 3Н), 4,03-3,93 (т, 1Н), 3,93-3,83 (т, 1Н), 3,85 (ί, 1=6,4 Гц, 2Н), 3,82-3,74 (т, 4Н), 3,71-3,62 (т, 1Н), 3,32 (септет, 1=6,8 Гц, 1Н), 2,87-2,76 (т, 2Н), 2,84 (ί, 1=6,8 Гц, 2Н), 2,70-2,40 (т, 6Н), 1,96-1,85 (т, 2Н), 1,85-1,71 (т, 2Н), 1,71-1,53 (т, 2Н) и 1,41 (ά, 1=6,8 Гц, 6Н).

- 44 020566

ί) трет-Бутил-3 -(3 -(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропаноат

К суспензии (9-(3-(2-гидроксиэтил)фенетил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-4-ил)(2изопропилтиазол-4-ил)метанона (лимитирующий реагент) в ацетонитриле (5 об.) добавляли третбутилакрилат (5 мол.экв.), затем раствор гидроксида бензилтриметиламмония (40%-ный по массе в воде; 0,3 мол.экв.). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч.

Смесь концентрировали в вакууме, получая неочищенное коричневое масло, которое распределяли между МеТНР и водой (по 5 об. каждого). Органический слой сушили (№₂8О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме, получая светло-желтый сироп.

Выход: 106% от теоретического.

Ή ЯМР (400 МГц, СОС1₃): δ 7,83 (з, 1Н), 7,19 (ΐ, 1=8,0 Гц, 1Н), 7,07-7,00 (т, 3Н), 4,03-3,92 (т, 1Н), 3,92-3,84 (т, 1Н), 3,82-3,72 (т, 3Н), 3,684 (ΐ, 1=6,4 Гц, 2Н), 3,675 (ΐ, 1=6,4 Гц, 2Н), 3,64 (ΐ, 1=7,2 Гц, 2Н),3,31 (септет, 1=6,8 Гц, 1Н), 2,84 (I, 1=7,2 Гц, 2Н), 2,81-2,71 (т, 2Н), 2,68-2,50 (т, 3Н), 2,48 (I, 1=6,8 Гц, 2Н), 2,47 (I, 1=6,4 Гц, 2Н), 1,94-1,90 (т, 1Н), 1,90-1,85 (т, 1Н), 1,81-1,65 (т, 1Н), 1,63-1,51 (т, 1Н), 1,44 (з, 9Н) и 1,41 (Д, 1=6,8 Гц, 6Н).

д) ^(2,2-Диметоксиэтил)бутан-1 -амин и

К раствору бутан-1-амина (лимитирующий реагент) в ЕЮН (5 об.) добавляли 2,2-диметоксиацетальдегид (60%-ный) в воде (1 мол.экв.) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 суток. Добавляли суспензию 5%-ного палладия на угле (0,01 мол.экв.) в ЕЮН (1 об.) и смесь гидрировали под давлением 3 бар (300 кПа) в течение 20 ч. Смесь фильтровали через стекловолокнистую фильтровальную бумагу, промывали ЕЮН (2х3 об.) и маточную жидкость осторожно концентрировали, получая мутное коричневое масло. Это масло растворяли в ОСМ (15 об.), сушили (№₂8О₄), фильтровали и осторожно концентрировали в вакууме, получая оранжевое масло.

Выход: 101% от теоретического.

Ή ЯМР (400 МГц, СОС1₃): δ 4,48 (I, 1=5,6 Гц, 1Н), 3,39 (з, 6Н), 2,74 (Д, 1=5,6 Гц, 2Н), 2,62 (I, 1=7.2 Гц, 2Н), 1,48 (квинтет, 1=7,2 Гц, 2Н), 1,31 (секстет, .1=7,2 Гц, 2Н) и 0,92 (I, 1=7,2 Гц, 3Н).

1ι) ^Бутил^-(2,2-диметоксиэтил)-3-(3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро [5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропанамид

К раствору трет-бутил-3-(3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропаноата (лимитирующий реагент) в дихлорметане (4 об.) по каплям при 22°С в течение 1 ч добавляли ТРА (10 мол.экв.) (имел место экзотермический эффект 8°С после добавления примерно 5 мл ТРА, и через 1 ч температура упала до 25°С). Смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 72 ч, концентрировали в вакууме, повторно растворяли в ацетонитриле (4 об.) и охлаждали в ледяной бане. Добавляли триэтиламин (10 мол.экв.), затем ^(диметоксиэтил)-^бутиламин (1,2 мол.экв.), после чего по каплям добавляли 1,57 М раствор Т3Р в ТНР (1,3 мол.экв.). Смесь перемешивали при 22°С в течение 20 ч, концентрировали в вакууме, получая неочищенное красное масло. Повторно растворяли в ОСМ (4 об.) и промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия (4 об.). Сушили (№₂8О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме, получая красный сироп.

Выход: 106% от теоретического.

Ή ЯМР (400 МГц, СО₃ОЭ): δ 7,90 (з, 1Н), 7,17 (I, 1=7,6 Гц, 1Н), 7,11-6,98 (т, 3Н), 4,50-4,43 (т, 1Н), 3,90-3,59 (т, 10Н), 3,41-3,32 (т, 13Н), 2,78 (I, 1=6,8 Гц, 4Н), 2,68-2,54 (т, 8Н), 2,00-1,86 (т, 1Н), 1,80-1,43 (т, 3Н), 1,40 (Д, 1=6,8 Гц, 6Н), 1,35-1,22 (т, 2Н) и 0,97-0,88 (т, 3Н).

- 45 020566

ί) Ы-Бутил-Ы-(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)3-(3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамид

Моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (4 мол.экв.) добавляли к раствору Ы-бутил-Ы-(2,2диметоксиэтил)-3-(3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамида (лимитирующий реагент) в ТНР (10 об.) и полученную смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Затем раствор добавляли с помощью перистальтического насоса к суспензии гидрохлорида 8-(2-аминоэтил)-5-гидрокси-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-3(4Н)-она (1 мол.экв.) и бикарбоната натрия (6,5 мол.экв.) в смеси ЫМР (4 об.) и воды (0,45 об.), которую перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Полученный мутный раствор перемешивали в течение 30 мин, затем порциями добавляли триацетоксиборгидрид натрия (3 мол.экв.) и полученную смесь перемешивали в течение 1 ч.

Реакционную смесь гасили насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 об.), добавляли воду (5 об.) до растворения осадков и прекращения выделения газа (~15 мин). Экстрагировали, используя МеТНР (2x10 об.), объединенные экстракты промывали водой (10 об.), сушили (Ыа₂8О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме, получая коричневый сироп, который очищали на диоксиде кремния (10-кратная масса по отношению к неочищенной реакционной смеси), элюент ЭСМ/8% МеОН/1% аммиака.

Выход: 29% от теоретического.

¹Н ЯМР (400 МГц, б₆-ЭМ8О): δ 9,82 (к, 1Н), 8,01 (к, 1Н), 7,20-7,10 (т, 1Н), 7,10-6,95 (т, 3Н), 6,60 (б, 1=8,0 Гц, 1Н), 6,41 (б, 1=8,0 Гц, 1Н), 4,46 (к, 1Н), 3,80-3,45 (т, 9Н), 3,40-3,15 (т, 12Н), 2,78-2,17 (т, 14Н), 1,77-1,37 (т, 4Н), 1,34 (б, 1=6,8 Гц, 6Н), 1,30-1,14 (т, 2Н) и 0,91-0,82 (т, 3Н).

ί) Ы-Бутил-Ы-(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)3-(3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамид, моносульфатная соль

Ы-Бутил-Ы-(2-(2-(5-гидрокси-3 -оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо [Ь] [ 1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)-3 (3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамид (лимитирующий реагент) растворяли в ЕЮН (15 об.), добавляли 4,9 М серную кислоту (1 мол.экв.) и раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 48 ч. Осадок собирали, промывали ЕЮН (1 об.) и сушили под вакуумом (сушильный шкаф при 40°С, масляный насос), получая белое твердое вещество (выход 70%). Добавляли воду (5%) в МеСЫ (20 об.) и смесь перемешивали в течение 6 суток. Кристаллическое твердое вещество (форму О) затем собирали фильтрацией (выход 95%).

¹Н ЯМР (400 МГц, б₆-ЭМ8О): δ (млн^-1) 9,92 (к, 1Н), 8,02 (к, 1Н), 7,22-7,13 (т, 1Н), 7,12-6,98 (т, 3Н), 6,65 (б, 1=8,0 Гц, 1Н), 6,47 (б, 1=8,0 Гц, 1Н), 4,52 (б, 1=8,0 Гц, 2Н), 3,82-3,14 (т, 20Н), 3,04-2,90 (т, 4Н), 2,83-2,64 (т, 7Н), 2,63-2,47 (т, 4Н), 1,85-1,37 (т, 4Н), 1,35 (б, 1=6,8 Гц, 6Н), 1,32-1,16 (т, 2Н) и 0,92-0,83 (т, 3Н).

- 46 020566

Типичный пример 39.

Дитрифторацетат ^циклопентил-^(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь] [ 1,4]оксазин8-ил)этиламино)этил)-3-(3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-

Ή ЯМР (400 МГц, СОзОО): δ 7,95-7,91 (т, 1Н), 7,27-7,21 (т, 1Н), 7,17-7,08 (т, 3Н), 6,73-6,69 (т, 1Н), 6,49-6,46 (т, 1Н), 4,60 (5, 2Н), 4,28-4,19 (т, 1Н), 3,94-3,61 (т, 10Н), 3,53-3,45 (т, 3Н), 3,36-3,30 (т, 2Н), 3,26-3,13 (т, 6Н), 3,12-3,08 (т, 2Н), 3,04-2,99 (т, 2Н), 2,92-2,87 (т, 2Н), 2,85-2,81 (т, 2Н), 2,70-2,66 (т, 2Н), 2,29-2,22 (т, 2Н), 1,91-1,71 (т, 6Н), 1,63-1,56 (т, 2Н), 1,52-1,44 (т, 2Н), 1,40 (й, 1=6,9 Гц, 6Н).

Не наблюдали пяти обмениваемых протонов.

Типичный пример 39а.

N-Циклопенτил-N-(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-8ил)этиламино)этил)-3 -(3 -(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1 -окса-4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9ил)этил)фенетокси)пропанамид, нападизилатная соль, модификация А

Трифторацетатную соль ^циклопентил-^(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Нбензо[Ь][1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)-3 -(3-(2-(4-(2-изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропанамида (типичный пример 39) (700 мг) распределяли между насыщенным водным бикарбонатом натрия и свежеперегнанным 2-метилтетрагидрофураном. Органическую фазу промывали насыщенным водным бикарбонатом натрия (ж2), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и растворитель удаляли, что позволило получить ^циклопентил-^(2-(2-(5гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)-3-(3-(2-(4-(2изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропанамид в виде белой пены.

Выход: 0,49 г.

Тетрагидрат нафталин-1,5-дисульфоновой кислоты (52,5 мг) добавляли к раствору Ν-циклопентил^(2-(2-(5-гидрокси-3-оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-8-ил)этиламино)этил)-3-(3-(2-(4-(2изопропилтиазол-4-карбонил)-1-окса-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-ил)этил)фенетокси)пропанамида (121 мг) в метаноле (5 мл). 0,55 мл этого раствора упаривали досуха и добавляли этанол (0,5 мл). Смесь нагревали до 70°С и оставляли охлаждаться до комнатной температуры в течение 24 ч. Затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 11 суток. Белое твердое вещество затем собирали фильтрацией.

Соединения типичного примера 39 получали, используя следующие карбоновую кислоту и амин.

Номер Примера	Карбоновая кислота	Амин
39	2-изопропилтиазол-4- карбоновая кислота	Амин 6

- 47 020566

Соединения по изобретению можно тестировать на предмет фармацевтической активности, используя анализы, известные в данной области техники, такие как, например:

Анализ опосредованного адренергическим В2-рецептором продуцирования цАМФ.

Подготовка клеток.

Н292-клетки выращивали в 225 см² флаконах в инкубаторе при 37°С, 5% СО₂, в среде КРМ1 (Ко5че11 Рагк Метопа1 ПъШиЮ), содержащей 10% (об./об.) ЕВЗ (фетальная телячья сыворотка) и 2 мМ Ь-глутамин.

Методика эксперимента.

Прикрепленные Н292-клетки извлекают из флаконов для культур тканей посредством обработки в течение 15 мин раствором Асси1а5е™ для отсоединения клеток. Матрасы инкубируют в течение 15 мин в инкубаторе с увлажнением при 37°С, 5% СО₂. Отсоединенные клетки ресуспендируют в среде КРМ1 (содержащей 10% (об./об.) ЕВЗ и 2 мМ Ь-глутамин) в концентрации 0,1х10⁶ клеток на 1 мл. По 10000 клеток в 100 мкл добавляют в каждую лунку подготовленного для тканевых культур 96-луночного планшета и клетки инкубируют в течение ночи в инкубаторе с увлажнением при 37°С, 5% СО₂. Культуральную среду удаляют и клетки дважды промывают 100 мкл буфера для анализа и заменяют на 50 мкл буфера для анализа (раствор НВЗЗ (сбалансированный солевой раствор Хенкса), содержащий 10 мМ НЕРЕЗ (N-2-гидроксиэтил-пиперазин-N-2-этансульфоновая кислота), рН 7,4, и 5 мМ глюкозу). Клетки оставляют при комнатной температуре на 20 мин, после чего добавляют по 25 мкл ролипрама (1,2 мМ, приготовленного в буфере для анализа, содержащем 2,4% (об./об.) диметилсульфоксида). Клетки инкубируют с ролипрамом в течение 10 мин, после чего добавляют тестируемые соединения и клетки инкубируют в течение 60 мин при комнатной температуре. Конечная концентрация ролипрама в анализе составляет 300 мкМ, а конечная концентрация носителя-диметилсульфоксида составляет 1% (об./об.). Реакцию останавливают путем удаления супернатантов, делают однократную промывку с использованием 100 мкл буфера для анализа и замену на 50 мкл лизирующего буфера. Клеточный монослой замораживают при -80°С в течение 30 мин (или в течение ночи).

А1рЬаЗсгееп™-детекция цАМФ.

Концентрацию цАМФ (циклический аденозинмонофосфат) в клеточном лизате определяют, используя А1рЬаЗсгееп™-методологию. Планшет с замороженными клетками размораживают в течение 20 мин на планшетном шейкере, затем по 10 мкл клеточного лизата переносят в 96-луночный белый планшет. В каждую лунку добавляют по 40 мкл смешанных (т1хей) шариков для А1рЬаЗсгееп™ детекции, предварительно инкубированных с биотинилированным цАМФ, и планшет инкубируют при комнатной температуре в течение 3 ч в темноте. А1рЬаЗсгееп™-сигнал измеряют, используя спектрофотометр ЕпУ15юп (Регкш-Е1тег 1пс.) с рекомендованными производителем установочными параметрами. Концентрации цАМФ определяют относительно калибровочной кривой, определенной в том же эксперименте с использованием стандартных концентраций цАМФ. Строят кривые зависимости от концентрации и данные подгоняют к четырехпараметрическому логистическому уравнению с целью определения как рЕС₅₀, так и собственной (1п1пп51с) активности. Собственную активность выражают в виде доли максимальной активности, определенной для формотерола в каждом эксперименте.

Анализ связывания с мускариновым-3 рецептором.

Аффинность (рЕС₅₀) соединений, связывающихся с М₃-рецептором, определяют по конкурентному связыванию [ЗН^-метилскополамина (ММ8) с мембранами клеток СНО (яичников китайского хомячка)К1, экспрессирующих мускариновый ацетилхолиновый М₃-рецептор (М₃-АСЬ) человека, в формате сцинтилляционного анализа сближения (Зсшй11айоп ргох1тЪу а55ау, 8РА).

На ЗРА-гранулы предварительно наносят мембраны и затем проводят инкубацию 2 мг гранул на лунку с серийными разведениями соединений по изобретению, [³Н]ХМЗ в концентрации 0,1 нМ, равной одной четвертой части от Кй (экспериментально определенной константы диссоциации), и буфером для анализа (20 мМ НЕРЕЗ, рН 7,4, содержащий 5 мМ МдС12 и 0,1% (мас./об.) бычьего сывороточного альбумина). Анализ проводят в конечном объеме 200 мкл в присутствии 1% (об./об.) диметилсульфоксида (ЭМЗО). Общее связывание [³Н]ХМЗ определяют в отсутствие конкурирующего соединения, а неспецифическое связывание [³Н]ХМЗ определяют в присутствии 1 мкМ атропина. Планшеты инкубируют в течение 16 ч при комнатной температуре и затем прочитывают на ^Уа11ас МюгоЪеЮ™. используя нормализованный к ³Н протокол. Вычисляют величины р1С50, определенные как отрицательный логарифм молярной концентрации соединения, необходимой для снижения на 50% специфического связывания с р1|-\МЗ.

Соединения по изобретению были протестированы в вышеупомянутых анализах и были получены следующие результаты.

- 48 020566

№ Примера	Р2 РЕС50	Р2 Собственная активность	р1С;о Мз-Связывания
33	7,8	1,о	9,4
33а	7,8	1,0	9,3
34	8	1,0	9,0
34а	7,8	1,0	9,2

Данные ХКЭ.

Подробное описание приборов.

Дифракция рентгеновских лучей на порошке (ΧΚΡΌ) - устройство ΡΑΝαηαΙνΙίοαΙ Х'Рей в конфигурации 2θ-θ или устройство ΡΑΝαηαΙνΙίοαΙ СиЫх в конфигурации θ-θ с диапазоном сканирования от 2°С до 40°С 2θ и 100-секундным экспонированием на один шаг 0,02°С. Рентгеновские лучи генерировали с помощью медной острофокусной трубки, работающей на 45 кВ и 40 мА. Длина волны рентгеновского излучения, полученного с медного анода, составляла 1,5418 А. Данные собирали на держателях нулевого фона, куда помещали примерно 2 мг соединения. Держатель был изготовлен из монокристалла кремния, который был срезан вдоль нерассеивающей плоскости и затем отшлифован до оптически плоской поверхности. Рентгеновские лучи, падающие на такую поверхность, гасились согласно ослаблению по Брэггу.

Термограммы дифференциальной сканирующей калориметрии (Ό8Ο) измеряли, используя дифференциальный сканирующий калориметр ТА 01000 с алюминиевыми поддонами. Массы образцов изменялись в диапазоне от 0,5 до 5 мг. Процедуру выполняли в токе газообразного азота (50 мл/мин) и исследования проводили для температуры от 25 до 300°С при постоянной скорости увеличения температуры 10°С/мин.

Термограммы термогравиметрического анализа сорбции пара (ТНегтодгауиШпс Уароиг 8οιρΐίοη, ТОА) измеряли, используя термогравиметрический анализатор ТА 0500 с платиновыми поддонами. Массы образцов изменялись в диапазоне от 1 до 5 мг. Процедуру выполняли в токе газообразного азота (60 мл/мин) и исследования проводили для температуры в диапазоне от комнатной температуры до 300°С при постоянной скорости увеличения температуры 10°С/мин.

Профили гравиметрического анализа сорбции пара (0У8) измеряли, используя прибор для динамической сорбции пара ЭУ8-1 или усовершенствованный прибор для ЭУ8 от 8иг£асе Меа5игетеп15 8у5ΐет5. Твердый образец приблизительно 1-5 мг помещали в стеклянный или металлический сосуд и регистрировали массу образца, используя двойной циклический пошаговый метод (йиа1 сус1е 5ΐер теБюй) (относительная влажность (КН) 40, до 90, до 0, до 90, до 0%, с шагом 10% КН).

- 49 020566

Соединение примера 33 а, сульфатная соль (ΧΡΌ-спектр показан на фиг. 1)

Данные ХКЮ для соединения Примера 33а, сульфатной соли
2Θ	Относительная интенсивность, %	ά-межплоскост. расстояние
4,4	4,51	20,30048
6,1	100	14,50763
6,9	11,28	12,73003
7,8	14,82	11,26734
9,1	8,3	9,72695
9,5	3,59	9,29727
9,9	9,72	8,89847
11,8	35,65	7,48101
12,2	26,49	7,24933
13,1	10,86	6,77877
13,5	2,98	6,54974
14,0	11,03	6,34316
14,8	20,25	5,98558
15,4	8,96	5,76719
15,7	88,25	5,64579
16,4	10,06	5,4091
16,7	11,03	5,30622
17,3	6,3	5,12687
17,5	11,35	5,0547
18,0	16,65	4,91905
18,3	12,72	4,85584
19,0	7,3	4,7
19,7	49,7	4,5
20,2	17,4	4,4
20,8	9,5	4,3
21,4	61,6	4,2
21,9	8,1	4,1
22,1	9,1	4,0
22,4	19,4	4,0
22,7	18,3	3,9
23,6	23,0	3,8
24,2	9,7	3,7
24,5	47,9	3,6
25,0	10,3	3,6
25,6	2,5	3,5
26,1	8,4	3,4
26,9	10,2	3,3
27,2	8,5	3,3
27,5	9,8	3,2
29,7	2,2	3,0
30,8	21,6	2,9

- 50 020566

Соединение примера 34а, сульфат, форма А (ΧΚΌ-спектр показан на фиг. 2)

ΧΚΡϋ для соединения Примера 34, сульфата, формы А
2Θ	Относительная интенсивность, %	ά-меж пл оскост. расстояние
4,8	100,0	18,6
8,0	6,0	П,1
9,5	15,6	9,3
п,з	2,8	7,8
14,1	15,3	6,3
15,7	8,5	5,6
16,2	7,1	5,5
17,9	13,6	5,0
18,6	8,4	4,8
21,4	20,2	4,1
23,0	8,0	3,9
24,7	4,4	3,6
28,7	2,8	3,1
31,9	1,0	2,8
34,2	0,9	2,6

Точность ±0,1.

- 51 020566

Соединение примера 34с, сульфат.

Форма В (ΧΚΌ-спектр показан на фиг. 3)

ΧΚΡΌ для соединения Примера 34, сульфата, формы В
20	Относительная интенсивность, %	й-межплоскост. расстояние
4,6	67,8	19,1
7,9	20,7	П,1
9,3	84,0	9,6
10,0	10,7	8,9
11,2	7,0	7,9
12,1	4,2	7,3
13,9	100,0	6,4
15,3	29,3	5,8
16,2	15,7	5,5
18,0	14,1	4,9
18,5	22,2	4,8
20,1	24,0	4,4
21,2	19,4	4,2
22,2	15,0	4,0
23,2	10,7	3,8
24,7	15,7	3,6
25,7	15,1	3,5
26,6	8,0	3,4
27,9	27,8	3,2
30,1	4,3	3,0
34,4	3,2	2,6

Точность ±0,1.

- 52 020566

Соединение примера 34ά, сульфат.

Форма С (ХКЭ-спектр показан на фиг. 4)

ХКРЭ для соединения Примера 34, сульфата, формы С
2Θ	Относительная интенсивность, %	ό-межплоскост, расстояние
4,4	100	20,3
5,8	5,34	15,2
7,8	7,62	11,4
8,7	5,48	10,2
9,5	16,14	9,3
12,0	7,09	7,4
13,0	6,81	6,8
14,2	7,97	6,2
15,6	6,32	5,7
16,6	15,22	5,3
17,4	27,82	5,1
17,8	30,16	5,0
18,4	19,39	4,8
20,7	21,31	4,3
21,8	23.55	4,1
23,4	10,81	3,8
24,7	9,78	3,6
26,0	7,53	3,4
26,8	6,45	з,з
28,4	3,69	3,1
31,4	2,19	2,8
33,7	2,26	2,7
37,0	1,65	2,4

Точность ±0,1.

- 53 020566

Соединение примера 34е, сульфат, форма Ό (ΧΚΌ-спектр показан на фиг. 5)

ΧΚΡϋ для соединения Примера 34, сульфата, формы ϋ

20	Относительная интенсивность, %	ά-межплоскост ! расстояние
4,3	100,0	20,3
4,7	69,7	18,8
5,8	9,7	15,2
7,7	9,5	11,4
8,7	4,1	10,2
9,5	24,3	9,3
11,6	5,4	7,6
12,0	8,6	7,4
13,0	3,4	6,8
13,5	6,5	6,6
14,2	13,3	6,3
14,8	6,1	6,0
15,1	4,4	5,9
15,8	8,9	5,6
16,5	14,5	5,4
17,3	Ю,1	5,1
17,9	23,9	4,9
18,4	14,8	4,8
19,0	5,6	4,7
19,9	3,9	4,5
20,6	15,8	4,3
21,3	14,9	4,2
21,8	14,8	4,1
22,5	9,7	4,0
23,4	7,0	3,8
24,7	8,4	3,6
26,8	4,2	3,3
28,6	4,1	3,1
29,5	6,4	3,0
31,9	1,7	2,8
33,9	1,5	2,6

Точность ±0,1.

- 54 020566

Соединение примера 34ί, сульфат.

Форма Е (ΧΚΌ-спектр показан на фиг. 6)

ХКРР для соединения Примера 34, сульфата, формы Е

2Θ	Относительная интенсивность, %	4-межплоскост. расстояние
4,3	93,2	20,5
5,8	11,8	15,2
7,8	15,0	П,4
8,6	П,1	10,2
9,5	55,5	9,3
11,6	22,5	7,6
12,1	18,0	7,3
13,0	35,6	6,8
13,6	М	6,5
14,3	28,3	6,2
14,9	32,6	5,9
15,1	60,5	5,9
15,5	18,1	5,7
16,5	23,8	5,4
17,3	100,0	5,1
17,7	59,3	5,0
18,0	29,0	4,9
18,4	15,8	4,8
19,0	26,9	4,7
19,7	26,7	4,5
20,5	72,7	4,3
20,8	18,2	4,3
21,3	20,0	4,2
21,7	60,4	4,1
22,0	44,7	4,0
22,6	74,2	3,9
23,4	60,8	3,8
24,1	22,4	3,7
24,6	43,0	3,6
25,7	14,8	3,5
26,7	53,0	3,3
27,2	15,6	3,3
28,1	17,6	3,2
29,2	12,9	3,1
30,4	16,3	2,9
31,3	10,3	2,9
32,7	5,1	2,7
33,3	7,4	2,7
34,4	8,6	2,6
36,3	8,4	2,5
3,0	9,9	2,4

Точность ±0,1.

- 55 020566

Соединение примера 34д, сульфат.

Форма Р (ХРО-спектр показан на фиг. 7)

Данные ХКРО для соединения Примера 34, сульфата, формы Р
2Θ	Относительная интенсивность, %	ά-межплоскост. расстояние
4,7	100,0	18,8
7,9	18,7	п,з
9,4	10,2	9,4
9,7	19,6	9,1
11,3	14,5	7,8
13,6	12,3	6,5
14,2	15,5	6,3
15,3	12,6	5,8
15,8	23,4	5,6
17,1	13,8	5,2
17,9	51,2	5,0
18,6	20,0	4,8
19,8	38,6	4,5
20,3	9,7	4,4
21,4	37,8	4,1
22,9	14,5	3,9
24,8	14,3	3,6
26,3	9,7	3,4
28,1	8,2	3,2

Точность ±-0,1.

- 56 020566

Соединение примера 34И, сульфат. Форма С (ΧΡΌ-спектр показан на фиг. 8)

Данные ΧΚΡϋ для соединения Примера 34, сульфата, формы 0
2Θ	Относительная интенсивность, %	ά-межплоскост. расстояние
6,0	7,8	14,6
6,3	7,6	14,1
7,5	4,6	11,7
8,0	9,7	П,1
9,3	45,8	9,5
10,9	84,6	8,1
12,5	16,5	7,1
13,3	36,9	6,7
13,9	41,2	6,4
14,2	9,9	6,2
15,0	41,7	5,9
16,0	47,0	5,5
16,2	100,0	5,5
17,0	15,9	5,2
17,6	15,2	5,0
18,3	79,7	4,8
18,7	68,4	4,8
18,9	67,4	4,7
19,2	21,4	4,6
19,5	19,3	4,6
19,8	16,9	4,5
20,7	13,8	4,3
21,1	40,1	4,2
21,3	28,0	4,2
21,7	16,4	4,1
22,4	46,7	4,0
22,7	18,4	3,9
23,5	6,2	3,8
24,4	27,8	3,7
25,0	20,6	3,6
25,2	75,5	3,5
25,8	13,9	3,5
27,5	20,5	3,2
28,5	23,6	3,1
31,2	4,7	2,9
32,8	10,6	2,7
34,0	4,2	2,6

Точность ±0,1.

- 57 020566

Соединение примера 34ί, нападизилат, форма В

- 58 020566

Соединение типичного примера 39а, нападизилат, форма А (ΧΚΌ-спектр показан на фиг. 10)

Данные ΧΚΡϋ для соединения Примера 39, нападизилата, формы А
2Θ	Относительная интенсивность, %	ύ-меж плоскост. расстояние
6,3	36,8	14,0
7,6	11,8	П,7
8,5	26,7	10,4
9,4	7,6	9,4
10,4	31,6	8,5
10,8	19,8	8,2
п,з	46,1	7,8
11,9	4,5	7,4
12,3	12,6	7,2
12,6	10,5	7,0
12,9	3,9	6,9
13,9	8,2	6,4
15,1	63,8	5,9
15,5	78,0	5,7
15,9	85,3	5,6
16,6	4,7	5,3
17,1	19,3	5,2
17,4	24,8	5,1
17,9	14,2	5,0
18,2	7,8	4,9
18,5	5,3	4,8
19,1	18,8	4,6
19,5	100,0	4,6
20,0	45,9	4,4
20,2	26,6	4,4
20,9	41,6	4,3
21,2	31,1	4,2
21,5	П,2	4,1

- 59 020566

21,9	31,5	4,1
22,1	51,2	4,0
22,8	32,4	3,9
23,3	29,5	3,8
23,7	10,6	3,8
23,9	11,0	3,7
24,2	11,0	3,7
24,7	22,5	3,6
25,3	52,6	3,5
25,6	12,7	3,5
26,2	6,0	3,4
26,6	4,1	3,4
27,4	5,2	3,3
27,9	5,4	3,2
28,5	5,4	3,1
29,7	14,9	3,0
30,4	6,7	2,9
31,7	3,9	2,8
32,2	7,8	2,8
34,9	1,7	2,6
36,3	1,8	2,5

На фиг. на фиг. на фиг. на фиг. на фиг. на фиг. на фиг. на фиг. на фиг. на фиг.

Точность ±0,1.

показан ΧΡΌ-спектр для сульфатной соли соединения примера 33а;

показан ΧΡΌ-спектр для сульфата, формы А соединения примера 34а;

показан ΧΡΌ-спектр для сульфата, формы В соединения примера 34с;

показан ΧΡΌ-спектр для сульфата, формы С соединения примера 34б;

показан ΧΡΌ-спектр для сульфата, формы Ό соединения примера 34е;

показан ΧΡΌ-спектр для сульфата, формы Е соединения примера 34£;

показан ΧΡΌ-спектр для сульфата, формы Р соединения примера 34д;

показан ΧΡΌ-спектр для сульфата, формы С соединения примера 341ι;

показан ΧΡΌ-спектр для нападизилата, формы В соединения примера 34ί и показан ΧΡΌ-спектр для нападизилата, формы А соединения типичного примера 39.

- 60 020566

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Соединение, представляющее собой или его фармацевтически приемлемая соль.
2. Соединение по п.1, представляющее собой
3. Соединение, представляющее собой или его фармацевтически приемлемая соль.
4. Соединение по п.3, представляющее собой