[go: up one dir, main page]

EA027810B1 - Гетероциклические карбоксамиды для лечения вирусных заболеваний - Google Patents

Гетероциклические карбоксамиды для лечения вирусных заболеваний Download PDF

Info

Publication number
EA027810B1
EA027810B1 EA201590297A EA201590297A EA027810B1 EA 027810 B1 EA027810 B1 EA 027810B1 EA 201590297 A EA201590297 A EA 201590297A EA 201590297 A EA201590297 A EA 201590297A EA 027810 B1 EA027810 B1 EA 027810B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
sun
meo
dosage form
meos
infection
Prior art date
Application number
EA201590297A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201590297A1 (ru
Inventor
Элиэзер Хуберман
Original Assignee
НОВАДРАГ, ЭлЭлСи
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by НОВАДРАГ, ЭлЭлСи filed Critical НОВАДРАГ, ЭлЭлСи
Publication of EA201590297A1 publication Critical patent/EA201590297A1/ru
Publication of EA027810B1 publication Critical patent/EA027810B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/45—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. cycloheximide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/454—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pimozide, domperidone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4545—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pipamperone, anabasine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4709—Non-condensed quinolines and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A61K31/497—Non-condensed pyrazines containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

Описаны способы, варианты использования, лекарственные средства и стандартные дозы для лечения вирусных заболеваний. Указанные способы, варианты использования, лекарственные средства и стандартные дозы включают замещенные пиперидинкарбоксамиды и пиперазинкарбоксамиды. Вирусные заболевания включают вирус гепатита С, ВИЧ, вирус бычьей вирусной диареи и коронавирусные инфекции.

Description

Изобретение, рассмотренное в этом описании, относится к замещенным пиперидинкарбоксамидам и пиперазинкарбоксамидам, а также к способам их применения в лечении вирусных заболеваний. Вирусные заболевания включают инфекции, вызванные вирусом гепатита С, вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), вирусом бычьей вирусной диареи (ВУЭУ) и коронавирусом.
Предпосылки создания изобретения
Вирус гепатита С (ИСУ) относится к семейству Р1а\а\апбае вирусов с плюс-одноцепочечной РНК. Геном НСУ кодирует полипротеин из приблизительно 3000 аминокислотных остатков, которые процессируются до структурных и неструктурных белков. Инфекция, вызываемая НСУ, представляет собой серьезную глобальную проблему здравоохранения; по оценкам Всемирной организации здравоохранения, более 170 миллионов человек являются носителями инфекции, вызываемой НСУ, которая, в конечном счете, может привести к хроническому гепатиту, циррозу и гепатоцеллюлярной карциноме. Сообщалось, что эти осложнения только в США ежегодно являются причиной приблизительно 10000-20000 смертных исходов, и что НСУ является главной причиной поздних стадий заболеваний печени и ведущей первопричиной для трансплантации печени. Современные методы терапии против инфекции, вызываемой НСУ, основаны на комбинации интерферона-α (ΙΡΝ) и рибавирина. Сообщается, что эта схема лечения вызывает нежелательные побочные эффекты, такие как лейкопения, тромбоцитопения и гемолитическая анемия, а также имеет недостаток, который заключается в том, что только приблизительно 50% пациентов достигают устойчивого вирусологического ответа. В последнее время к комбинации рибавирина и интерферона были добавлены новые лекарственные препараты из группы ингибиторов протеаз, а именно, телапревир (!е1аргеуи) (компания Уег1е\) и боцепревир (Ьосергеун) (компания Мегск), каждый из которых, как было установлено, сокращает время лечения и значительно увеличивает процент пациентов, достигших устойчивого вирусологического ответа. Тем не менее, проблема токсичности рибавирина и интерферона по-прежнему остается серьезным недостатком (см., например, Наиа/акк Сигг. Меб. Скет.: Аиб-Шес!. Адеи!8 2003, 2, 103; Ьаиег & Аа1кег. Ν. Еид1. 1. Меб. 2001, 345, 41; Согбои &. Ке11ег, 1. Меб. Скет. 2005, 48, 1; Таи е! а1., №1. Реу. Эгид Э18соуегу 2002, 1, 867; 1био & Ве11оЬиоио, Сигг. Ркагт. Эе8. 2002, 8, 959; Όί В18седке е! а1., Нера!о1оду 2002, 35, 224; §атие1, Ски. МюгоЬю1. Реу. 2001, 14, 778; КкЬаиоу е! а1., 2011, Ркагтасо!кегару 31, 951; Κ\\ό & 2као 2011, С1шк Ыуег Όί8. 15, 537; вышеприведенные публикации и каждая дополнительная цитируемая публикация в полном объеме включены в это описание посредством ссылки). Таким образом, крайне необходимы более эффективные и менее токсичные лекарственные препараты против НСУ.
Еще одним членом семейства Р1а\а\апбае вирусов с плюс-одноцепочечной РНК является вирус бычьей вирусной диареи (ВУЭУ). Инфицирование этим вирусом вызывает тяжелую вирусную диарею у крупного рогатого скота и других жвачных животных, а также свиней. Инфекции крупного рогатого скота, вызываемые ВУЭУ, характеризуются изъязвлением слизистой оболочки носовой полости, ротовой полости и желудочно-кишечного тракта, которое вызывает постоянное слюноотделение, выделения из носа, кашель и/или диарею. В результате происходит быстрое распространение вируса среди животных. Указанный вирус также является причиной того, что телята рождаются мертвыми, становятся персистентно инфицированными или страдают задержкой роста и/или имеют серьезные пороки развития нервной системы. Экономические потери от ВУЭУ являются значительными, хотя трудно точно оценить их уровень, поскольку некоторые инфекции остаются невыявленными или убытки не признаются как причиненные вирусом (см., например, Виск\уо1б е! а1., Аи!Мги8 Кезеагск 2003, 60, 1; РиббеГ/Юи! е! а1., 2010, Сиггеи! Мебюша1 Скет18бу 17, 2933). К числу других членов семейства Р1а\а\апбае относятся вирус лихорадки Западного Нила и вирус лихорадки денге. Таким образом, эффективные лекарственные препараты будут полезны для уменьшения экономических потерь от ВЭУО, вируса лихорадки Западного Нила и лихорадки денге.
Синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД) (1) представляет собой заболевание, вызванное ретровирусом, называемым вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), который принадлежит к роду Ьеи!Мги8 семейства Ре1го\апбае. Это состояние вызывает постепенное ослабление иммунной системы и ведет к тому, что ВИЧ-инфицированные индивидуумы становятся восприимчивыми к инфекциям, вызванным условно-патогенными микроорганизмами, и образованию опухолей, что в конечном итоге приводит к смерти. Для облегчения этих разрушительных заболеваний фармацевтическое сообщество предложило активную антиретровирусную терапию. Она включает коктейль лекарственных препаратов из
- 1 027810 группы ингибиторов ВИЧ-протеаз и обратной транскриптазы. Эта терапия приводит к значительному улучшению общего состояния здоровья и качества жизни многих ВИЧ-инфицированных индивидуумов. Это восстановление связано также с заметным снижением уровня ВИЧ-ассоциированной заболеваемости и смертности. Тем не менее, коктейль лекарственных препаратов из группы ингибиторов ВИЧ-протеаз и обратной транскриптазы не излечивает пациента от ВИЧ-инфекции и не предотвращает рецидива СПИДа после прекращения лечения. Таким образом, лечение для пациентов, прервавших курс лечения, оказывается бесполезным. Более того, для значительной доли больных СПИДом это лечение дает результаты, гораздо ниже оптимальных по причине непереносимости терапии, побочных эффектов терапии или инфицирования лекарственно-устойчивым штаммом ВИЧ. Чтобы преодолеть эти ограничения, существует потребность в дополнительных эффективных лекарственных препаратах против ВИЧ, и, в частности, препаратах против ВИЧ, которые имеют низкую токсичность (см., например, 5>срко\уЦ/ 2001, N. Еп§1. 1. Меб. 344, 1764; Ае188 1993, §аеисе 260, 1273; ЭуЬи1 е! а1. 2002, Апп. 1и1еги. Меб. 137, 381; Магбпе/-Рюабо е! а1. 2000, Ргос. №ц1. Асаб. δα. υ.δ.Α. 97, 10948).
Другим членом семейства РНК-содержащих вирусов являются коронавирусы, которые представляют собой вирусы, принадлежащие к подсемейству Согоиаушпае семейства Согоиаутбае. Коронавирусы представляют собой оболочечные вирусы с положительным РНК-геномом и нуклеокапсидом спиральной симметрии. Коронавирусы в первую очередь инфицируют верхние дыхательные пути и желудочнокишечный тракт млекопитающих и птиц. Четыре-пять различных известных в настоящее время штаммов коронавирусов инфицируют людей. Одним из более известных штаммов человеческого коронавируса является δΑΚδ-СоУ, который вызывает тяжелый острый респираторный синдром (ТОРС). Сообщают также, что коронавирусы вызывают значительный процент всех простудных заболеваний у людей. Также согласно сообщениям коронавирусы являются причиной пневмонии, как прямой вирусной пневмонии, так и вторичной бактериальной пневмонии. В последнее время сообщают о появлении у людей коронавируса, вызывающего ближневосточный респираторный синдром (МЕКБ-СоУ), δΑΚδ-подобного коронавируса. Коронавирусы также инфицируют сельскохозяйственных животных, например кур. Вирус инфекционного бронхита (1ВУ) представляет собой коронавирус, который поражает у кур не только дыхательные пути, но и мочеполовую систему. Упомянутый вирус в организме курицы может также распространяться на различных органы.
Согласно сообщениям коронавирусы вызывают целый ряд заболеваний у сельскохозяйственных и домашних животных, в том числе коронавирус свиней (коронавирус трансмиссивного гастроэнтерита свиней, ТОЕ), коронавирус крупного рогатого скота, каждый из которых вызывает диарею у молодых животных, коронавирус кошек, вызывающий, например, кошачий коронавирусный энтероколит, имеющий незначительную клиническую значимость, и кошачий инфекционный перитонит (ИР), заболевание, связанное с высокой смертностью, коронавирус собак (ССоУ), вирус гепатита мышей (МНУ) и др. Таким образом, для лечения коронавируса необходимы соединения, композиции и соответствующие способы лечения.
В настоящем изобретении показано, что пиперидинкарбоксамиды и пиперазинкарбоксамиды, в том числе соединения, рассмотренные в этом описании, являются активными противовирусными лекарственными средствами. В частности, в настоящем изобретении показано, что пиперидинкарбоксамиды и пиперазинкарбоксамиды являются активными анти-ВИЧ лекарственными средствами. Также в настоящем изобретении показано, что пиперидинкарбоксамиды и пиперазинкарбоксамиды являются активными анти-НСУ лекарственными средствами. Кроме того, в настоящем изобретении показано, что пиперидинкарбоксамиды и пиперазинкарбоксамиды являются активными лекарственными средствами против вирусов семейства Р1ау1ушбае и связанных с ними заболеваний. Кроме того, в настоящем изобретении показано, что пиперидинкарбоксамиды и пиперазинкарбоксамиды являются активными анти-ВУЭУ лекарственными средствами. Кроме того, в настоящем изобретении показано, что пиперидинкарбоксамиды и пиперазинкарбоксамиды являются активными лекарственными средствами против вируса лихорадки Западного Нила. Кроме того, в настоящем изобретении показано, что пиперидинкарбоксамиды и пиперазинкарбоксамиды являются активными лекарственными средствами против вируса лихорадки денге. Кроме того, в настоящем изобретении показано, что пиперидинкарбоксамиды и пиперазинкарбоксамиды являются активными антикоронавирусными лекарственными средствами.
Сущность изобретения
В одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложена дозированная лекарственная форма для лечения вирусной инфекции, которая содержит (а) терапевтически эффективное количество одного или более соединения(ий), представленного(ых) формулой
- 2 027810 или фармацевтически приемлемой соли такого соединения; где К представляет собой Н и варианты комбинаций Аг1, X и К2 представлены ниже:
Варианты комбинаций Аг1 X к2
16 3-(34Сб4)С64 сн2 хинолин-8-ил
17 4-(3-МеС6Н4)С6Н4 сн2 4-ОН-3-МеО-С6Н3
21 4-1240,,1140)0,,114 сн2 2-0Н-4-Ме0-С,4
22 2-(3-МеОС6Н4)С6Н4 сн2 хинолин-8-ил
23 4-(бензимидазол-2- ил)СбН4 сн2 2-МеО-С6Н4
24 2-(3-МеОС6Н4)С6Н4 сн2 4-ОН-3,5-Ме2-С6Н2
25 2-(3-МеОС6Н4)С6Н4 сн2 2-МеО-СбН,
26 3-(3-РС6Н4)С6Н4 сн2 4-ОН-С„4
27 3-(3-РС6Н4)С6Н4 сн2 2-(/>Ви)-имидазол-4-ил
28 4-(2-РС6Н4О)С6Н4 сн2 2,3-метилендиокси-СбНз
29 3-(3-РС6Н4)С6Н4 сн2 3-ОН-С64
30 3-(3-РС6Н4)С6Н4 сн2 2-ОН-6-МеО-С6Н3
31 3-(3-С1С6Н4)С6Н4 сн2 4-ОН-СбН,
32 2-(3-МеОС6Н4)С6Н4 сн2 3-Ме-4-МеО-С6Н3
33 2-(3-Ме0С64)С64 сн2 3-МеО-С6Н4
34 2-(3-Ме0С64)Сб4 сн2 44-2-МеО-С64
38 3-(2-индолил)СбН4 сн2 (1 -/-Рг-пиразол-4-ил)
39 2-(3-Ме0С64)С64 сн2 /-Ви
40 3-(2-фурил)С64 сн2 хинолин-8-ил
Варианты комбинаций Аг1 X к2
41 3-(2-Ме-1,3,4-тиазол-5ИЛ)С6Н4 С(=О) 2-фурил
42 3-(3-С1С64)Сб4 сн2 4-ОН-3-МеО-С6Н3
57 3-индол-2-ил-СбН4 С(О) ©Ξ©-©Η3
58 4-бе нз им и дазол- 2-и л- С/Нд сн2 3-МеО-С6Н4
59 4-бензимидазол-2-илСбН4 сн2 5-Е1-фуран-2-ил
60 3-индол-2-ил-СбН4 С(О) тиазол-5-ил
61 4-(2-ГСбН4О)С<,Н4 сн2 2-НО-3-МеО-Сб4
62 243-ЧеОС ,-,4)0,, 4 С4 2-НО-3-МеО-Сб4
63 ЗДЗ-С1С,-,1Ц)С„Н4 сн2 2-НО-3-МеО-С64
64 4-(2-РСб4О)Сб4 сн2 Е1
65 4-бензимидазол-2-ил-СбН4 сн2 3-МеО-С64
66 4-(3,5-Мег-пиразол-1 ил)С6Н4 04011-011(0, 2-МеО-С64
68 3-(3-РС64)Сб4 сн2 2-Е1-5-Ме-имидазол-4-ил
69 3-(3-МеОС6Н4)С64 сн2 СН=С(Ме)2
70 4-(24Сб40)С64 сн2 3-МеО-С64
71 2-(3-Ме0С64)Сб4 сн2 нафта-1 -ил
72 3-(3-С1СбН4)СбН4 сн2 1 -алл и л - 3 -Ме-п иразо л -4ил
73 4-(2-РСб4О)С6Н4 сн2 1 -Рг-5 -Ме-пиразол-4-и л
74 4-(24Сб40)С6Н4 сн2 Ме
75 4-(24Сб40)С64 - 1 -Е1-пиперидин-4-ил
76 3-(34Сб4)С64 сн2 1 - (ΐ -Рг)-3,5-Ме2-пиразол-4ил
77 2-РЬО-пиридин-5-ил сн2 РЬ
78 3-(3-С1Сб4)С64 сн2 1 -Е1-пиразол-4-ил
79 3-(34Сб4)Сб4 сн2 ЗД6-Мез-пиразин-2-ил
80 2-(3-Ме0Сб4)Сб4 сн2 1 -Рг- 5-Ме-пиразол-4-ил
81 4-(2-РСбН4О)С6Н4 сн2 2-НО-5-МеО-Сб4
82 3-(3-С1СбН4)СбН4 сн2 1 -0-Рг)-пиразол-4-11л
83 2-РЬО-пиридин-5-ил сн2 5-С1-тиен-2-ил
84 3-(3-РС6Н4)СбН4 сн2 2,3-(МеО)2-С6Н3
85 4-(2-РСбН4О)СбН4 сн2 4-НО-3-МеО-Сб4
86 4-(2-РСбН4О)С6Н4 сн2 5-б-Ви)-пиразол-3-ил
87 2-(3-МсСКбН|)С(ЛТ4 сн2 3,5,6-Мез-пиразин-2-ил
88 2-(3-МеОСб4)Сб4 сн2 2,5-Ме2-Сб4
90 3-(34Сб4)Сб4 сн2 бензо-2,1,3-тиадиазол-5- ил
91 3-(34Сб4)Сб4 сн2 2-НО-3-МеО-СбН3
92 4-(бензимидазол-2- ил)СбН4 сн2 циклогексен-4-ил
93 3-(3-РС64)Сб4 сн2 1-алл ил-З-Ме-пиразол-4ил
94 4-(2-РСб40)С6Н4 сн2 5-Ме-фуран-2-ил
95 3-(3-РСб4)С6Н4 сн2 1 -Е1-5-Ме-пиразол-4-ил
- 3 027810
(Ь) один или более фармацевтически приемлемый(ых) носитель(ей), наполнитель(ей) или разбавитель(ей) либо их комбинацию, причем вирусная инфекция выбрана из группы, которую составляют инфекция, вызванная вирусом гепатита С, инфекция, вызванная вирусом иммунодефицита человека, инфекция, вызванная вирусом бычьей вирусной диареи, инфекция, вызванная коронавирусом, инфекция, вызванная штаммом коронавируса, который вызывает тяжелый острый респираторный синдром.
В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложена дозированная лекарственная форма, где Аг1 представляет собой 2-(3-МеОСбН4)СбН4. В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложена дозированная лекарственная форма, где Аг1 представляет собой 2-РйО-пиридин-5-ил.
В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложена дозированная лекарственная форма, где Аг1 представляет собой 3-(3-С1С6Н4)С6Н4. В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложена дозированная лекарственная форма, где Аг1 представляет собой 3-(3-РС6Н4)С6Н4.
В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложена дозированная лекарственная форма, где Аг1 представляет собой 4-(2-РС6Н4О)С6Н4. В другом рассмотренном в этом описании варианте осуществления настоящего изобретения предложена дозированная лекарственная форма, где Аг1 представляет собой 4-(бензимидазол-2-ил)С6Н4.
В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложена дозированная лекарственная форма, где X представляет собой ацил. В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложена дозированная лекарственная форма, где X представляет собой связь.
В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложена дозированная лекарственная форма, где X представляет собой СН2СН=СН(Е). В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложена дозированная лекарственная форма, где X представляет собой СН2.
В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложена дозированная лекарственная форма, где К2 представляет собой 2-НО-3-МеО-С6Н3. В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложена дозированная лекарственная форма, где К2 представляет собой 2-МеО-С6Н4. В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложена дозированная лекарственная форма, где К2 представляет собой 3-МеО-СбН4.
В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложена дозированная лекарственная форма, где К2 представляет собой 4-ОН-3-МеО-С6Н3. В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложена дозированная лекарственная форма, где К2 представляет собой 4-ОН-С6Н4.
В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложена дозированная лекарственная форма, где К2 представляет собой хинолин-8-ил.
В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложена дозированная лекарственная форма, причем вирусная инфекция представляет собой инфекцию, вызванную вирусом гепатита С. В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложена дозированная лекарственная форма, причем вирусная инфекция представляет собой инфекцию, вызванную вирусом иммунодефицита человека. В еще одном из
- 4 027810 рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложена дозированная лекарственная форма, причем вирусная инфекция представляет собой инфекцию, вызванную вирусом бычьей вирусной диареи.
В еще одном из рассмотренных в этом описании иллюстративных вариантов осуществления настоящего изобретения предложена дозированная лекарственная форма, причем вирусная инфекция представляет собой инфекцию, вызванную коронавирусом. В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложена дозированная лекарственная форма, причем вирусная инфекция представляет собой инфекцию, вызванную штаммом коронавируса, который вызывает тяжелый острый респираторный синдром.
В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложен способ лечения вирусной инфекции в организме животного-хозяина, который включает стадию введения животному-хозяину терапевтически эффективного количества одной или более дозированной(ых) лекарственной(ых) формы(форм) по настоящему изобретению. В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложен способ лечения инфекции в организме животного-хозяина, причем животное-хозяин представляет собой человека. В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложен способ лечения инфекции в организме животного-хозяина, причем вирусная инфекция представляет собой инфекцию, вызванную вирусом гепатита С. В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложен способ лечения инфекции в организме животного-хозяина, причем вирусная инфекция представляет собой инфекцию, вызванную вирусом иммунодефицита человека.
В еще одном из рассмотренных в этом описании иллюстративных вариантов осуществления настоящего изобретения предложен способ лечения инфекции в организме животного-хозяина, причем вирусная инфекция представляет собой инфекцию, вызванную коронавирусом.
В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложен способ лечения инфекции в организме животного-хозяина, причем вирусная инфекция представляет собой инфекцию, вызванную штаммом коронавируса, который вызывает тяжелый острый респираторный синдром.
В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложен способ лечения инфекции в организме животного-хозяина, причем животное-хозяин представляет собой крупный рогатый скот. В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложен способ лечения инфекции в организме животногохозяина, причем вирусная инфекция представляет собой инфекцию, вызванную вирусом бычьей вирусной диареи.
В одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложена дозированная лекарственная форма, содержащая соединение, представленное формулой
Ар1'' .
или фармацевтически приемлемую соль такого соединения; где варианты комбинаций Аг1, X и К' представлены ниже:
- 5 027810
Варианты. комбинаций Аг1 X к2
16 3-(3-РС6Н4)С6Н4 сн2 хинолин-8-ил
21 4-(2-ГСбН4О)С6Н4 сн2 2-ОН-4-МеО-С6Нз
22 2-(3-МеОСбН4)С6Н4 сн2 хинолин-8-ил
23 4-(бензимидазол-2- ИЛ)С6Н4 сн2 2-МеО-СбН,
24 2-(3-МеОС6Н4)С6Н4 сн2 4-ОН-3,5-Ме2-С(.Н2
25 2-(3-МеОСбН4)СбН4 сн2 2-МеО-СбРЦ
26 3-(3-РС6Н4)С6Н4 сн2 4-ОН-СбН4
27 3-(3-РС6Н4)СбН4 сн2 2-(/>Ви)-имидазол-4-ил
28 4-(2-РС<,Н4О)С6Н4 сн2 2,3-метилендиокси-СбНз
57 3-индол-2-илСбН4 С(О) е=е-енз
58 4-бензимид азол-2-илС&Н4 сн2 З-МеО-СбРЦ
59 4-бензимид азол-2-илСбН4 сн2 5-Е(-фуран-2-ил
61 4-(2-РС6Н4О)С6Н4 сн2 2-НО-З-МеО-С.Н;
62 2( 3\1еОС(, Н4)С’о114 сн2 2-1 Ю-З-МеО-СЛ Г
63 3-(3-С1СбН4)С6Н4 сн2 2-НО-З-МеО-СбНз
64 4-(2-РС6Н4О)С6Н4 сн2 Е1
65 4-бензимидазол-2-илСбН4 СН2 З-МеО-СбРЦ
69 3-(3-МеОС6Н4)СбН4 сн2 СН=С(Ме)2
74 4-(2-РС6Н4О)СбН4 сн2 Ме
75 4-(2-РС6Н4ОХ;бН4 - 1 -Е1-пиперидин-4-ил
Варианты, комбинаций Аг1 X к2
76 3-(3-РС6Н4)С6Н4 сн2 1-(1-Рг)-3,5-Ме2-пиразол-4- ил
77 2-РНО-пиридин-5-ил сн2 РН
78 3-(3-С1С6Н4)С6Н4 сн2 1 -Е1-пиразол-4-ил
79 3-(3-РС6Н4)С6Н4 сн2 3,5,6-Мез-пиразин-2-ил
81 4-(2-РС6Н4О)С6Н4 сн2 2-НО-5-МеО-СбН;
83 2-РЮ-пиридин-5-ил сн2 5-С1-тиен-2-ил
85 4-(2-РС6Н4О)С6Н4 сн2 4-НО-3-МеО-С<,Н3
87 г-О-МеОСбНЦСбН, сн2 3,5,6-Мез-пиразин-2-ил
91 3-(3-РС6Н4)СбН4 сн2 2-НО-З-МеО-СбН,
93 З-Ц-РСбНЦСбН, сн2 1-аллил-3-Ме-пиразол-4- нл
95 3-(3-РС6Н4)С6Н4 сн2 1 -Е1-5-Ме-пиразол-4-ил
97 4-(2-РС6Н4О)С6Н4 сн2 1 -Εΐ-π и разол -4-ил
99 4-(бензимидазол-2-ил)РЬ X Μί
100 3-(индол-2-ил)РЬ X и? ¢9
101 4-(2-Р-РЬО)РЬ X
102 3-(3-Р-РЬ)РЬ 0^
В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложена дозированная лекарственная форма для лечения вирусной инфекции, содержащая соединение, представленное формулой
или его фармацевтически приемлемую соль такого соединения; где варианты комбинаций Аг1, X и К2 представлены ниже:
- 6 027810
Варианты, комбинаций Аг1 X к2
21 4-(2-РС6Н40)СбН4 сн2 2-ОН-4-МеО-С6Н3
22 2-И-МеОСбНЦСбЩ сн2 хинолин-8-ил
23 4-(бензимидазол-2- ИЛ)С6Н4 сн2 2-МеО-СбИ,
24 г-Ц-МеОСбНЦСбН, сн2 4-ОН-3,5-Ме2-С6Н2
75 4-(2-РС6Н4О)С6Н4 1 -Е1-пиперидин-4-ил
99 4-(бензимидазол-2-ил)РЬ
100 3-(индол-2-ил)РЬ X и? <4
102 3-(3-Р-РЬ)РЬ Σΰ И? 0^
В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложена дозированная лекарственная форма для лечения инфекции, вызванной вирусом иммунодефицита человека, содержащая (а) терапевтически эффективное количество соединения, представленного формулой
или фармацевтически приемлемой соли такого соединения;
(Ь) один или более фармацевтически приемлемый(ых) носитель(ей), наполнитель(ей) или разбавитель(ей) либо их комбинацию.
В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложена дозированная лекарственная форма для лечения инфекции, вызванной вирусом иммунодефицита человека, содержащая (а) терапевтически эффективное количество соединения, представленного формулой
или фармацевтически приемлемой соли такого соединения; и
Ь) один или более фармацевтически приемлемый(ых) носитель(ей), наполнитель(ей) или разбавитель(ей) либо их комбинацию.
В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложена дозированная лекарственная форма для лечения инфекции, вызванной вирусом иммунодефицита человека, содержащая (а) терапевтически эффективное количество соединения, представленного формулой
- 7 027810 или фармацевтически приемлемой соли такого соединения;
(Ь) один или более фармацевтически приемлемый(ых) носитель(ей), наполнитель(ей) или разбавитель(ей) либо их комбинацию.
Краткое описание фигур
На фиг. 1А, 1В и 1С показаны внутриклеточные уровни РНК НСУ для соединений примеров 22, 24 и 28 соответственно, в случае, когда культуры инкубируют с соединениями, рассмотренными как пример в этом описании, в указанных дозах. Каждое экспериментальное соединение показывает реакцию зависимости доза-эффект (мкМ). Не будучи связанными какой-либо теорией, в данном случае полагают, что при сравнении уровней РНК НСУ среди некоторых образцов данные могут указывать на то, что экспериментальные соединения вызывают дозозависимое снижение уровней РНК НСУ относительно псевдообработанного (без добавления экспериментального соединения) инфицированного НСУ контроля.
На фиг. 2 показано, что соединение примера 57 значительно ингибирует обратную транскрипцию
ВИЧ.
На фиг. 3 показано, что соединение примера 57 значительно ингибирует вирусную интеграцию
ВИЧ.
На фиг. 4А, 4В, 4С и 4Ό показана активность соединений примеров 58, 59, 60 и 65 соответственно, против ВИЧ в сравнении с ΑΖΤ-контролем.
На фиг. 5А, 5В и 5С показано, что соединение примера 57 значительно ингибирует транскрипцию
ВИЧ.
На фиг. 6 показаны иллюстративные данные зависимости доза-эффект для соединения примера 100 против ВУЭУ.
На фиг. 7 показана иллюстративная анти-СУ активность соединения примера 104. Противовирусное действие было определено способностью соединения примера 104 уменьшать СУ-индуцированный цитопатический эффект (СРЕ) в клетках МКС-5. Дозы на уровне 2 мкМ и выше показывают противовирусную активность.
Подробное описание
В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложены фармацевтические композиции, содержащие одно или более упомянутое(ых) соединение(ий). В другом варианте осуществления фармацевтические композиции предложены в форме унифицированной дозы, стандартной дозы или в виде стандартной дозированной лекарственной формы. Согласно одному из аспектов настоящего изобретения композиции, такие как стандартные дозы или стандартные дозированные лекарственные формы, содержат терапевтически эффективное количество одного или более упомянутое(ых) соединение(ий) для лечения пациента с вирусным заболеванием, таким как заболевание, вызванное НСУ, ВУЭУ, коронавирусом и/или ВИЧ. Следует понимать, что такие композиции могут содержать другие компоненты и/или ингредиенты, в том числе, но не ограничиваясь ими, другие терапевтически активные соединения, и/или один или более носитель(ей), разбавитель(ей), наполнитель(ей) и т.п. В этом описании рассмотрен также еще один вариант осуществления настоящего изобретения, в котором предложены способы применения упомянутых соединений и фармацевтических композиций для лечения пациентов с НСУ, ВУЭУ, коронавирусом и/или ВИЧ. Согласно одному из аспектов настоящего изобретения эти способы включают стадию введения одного(-ий) или более соединения(-ий) и/или композиций, согласно этому описанию, пациенту с НСУ, ВУЭУ, коронавирусом и/или ВИЧ. Согласно еще одному из аспектов настоящего изобретения эти способы включают введение терапевтически эффективного количества одного(-ий) или более соединения(-ий) и/или композиций, согласно этому описанию, для лечения пациентов с НСУ, ВУЭУ, коронавирусом и/или ВИЧ. В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложены варианты применения упомянутых соединений и композиций при изготовлении лекарственного средства для лечения пациентов с НСУ, ВУЭУ, коронавирусом и/или ВИЧ. Согласно одному из аспектов настоящего изобретения упомянутые лекарственные средства содержат терапевтически эффективное количество одного(ой) или более соединения(ий) и/или композиции(ий) для лечения пациента с НСУ, ВУЭУ, коронавирусом и/или ВИЧ.
Следует понимать, что соединения, рассмотренные в этом описании, могут быть использованы отдельно или в комбинации с другими соединениями, пригодными для лечения заболевания, вызванного НСУ, ВУЭУ, коронавирусом и/или ВИЧ, в том числе с теми соединениями, которые могут быть терапевтически эффективными в подобных или отличных способах действия. Кроме того, следует понимать, что соединения, рассмотренные в этом описании, могут быть использованы в сочетании с другими соединениями, которые вводят для лечения других симптомов НСУ, ВУЭУ, коронавируса и/или ВИЧ.
Способы и дозированные лекарственные формы, предлагаемые настоящим изобретением, раскрыты в этом описании выше.
В еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящего изобретения предложены различные виды и подвиды каждого из ^, Аг1, Аг2, X, X1 и К. Следует понимать, что все возможные комбинации различных видов и подвидов каждого из ^, Аг1, Аг2, X, X1 и К, рассмотренных в этом описании, представляют собой дополнительные иллюстративные варианты рассмотренных в этом
- 8 027810 описании соединений. Следует также понимать, что каждый из этих дополнительных иллюстративных вариантов осуществления соединений может быть использован в любой(ом) из композиций, методов и/или вариантов применения, рассмотренных в настоящем описании.
Следует понимать, что в каждом из указанных выше и последующих вариантов осуществления настоящего изобретения приведенные формулы включают и представляют собой не только все фармацевтически приемлемые соли соединений, но и включают любые и все гидраты и/или сольваты соединений. Следует понимать, что некоторые функциональные группы, такие как гидрокси, амино и им подобные группы, образуют комплексы и/или координационные соединения с водой и/или различными растворителями в различных физических формах соединений. Соответственно, приведенные выше формулы следует понимать как включающие и представляющие собой эти различные гидраты и/или сольваты. Следует также понимать, что в каждом из указанных выше и последующих вариантов осуществления настоящего изобретения приведенные формулы включают и представляют собой каждый возможный изомер, например, стереоизомеры и геометрические изомеры, как индивидуально, так и в любых и всех возможных смесях. Следует также понимать, что в каждом из указанных выше и последующих вариантов осуществления настоящего изобретения приведенные формулы включают и представляют собой любые и все кристаллические формы, частично кристаллические формы, а также некристаллические и/или аморфные формы соединений.
В каждом из указанных выше и последующих вариантов осуществления настоящего изобретения также описаны производные. Примеры производных включают, но не ограничиваются ими, те соединения, которые могут быть получены посредством синтеза из соединений, рассмотренных в этом описании, а также те соединения, которые могут быть получены таким же образом, как и те, что рассмотрены в этом описании, но отличающиеся в выборе исходных материалов. Например, в этом описании рассмотрены соединения, которые содержат различные функциональные группы на ароматических кольцах. Следует понимать, что производные этих соединений также включают соединения, имеющие, например, различные функциональные группы на ароматических кольцах, отличающиеся от тех, которые явно указаны в определении заместителей соединений. Кроме того, следует понимать, что производные этих соединений также включают соединения, имеющие те же самые или иные функциональные группы в разных положениях на ароматическом кольце. Подобным же образом производные включают параллельные варианты других функциональных групп на соединениях, рассмотренных в этом описании.
Следует понимать, что такие производные могут включать пролекарства соединений, рассмотренных в этом описании, соединения, рассмотренные в этом описании, которые содержат одну или более защитную(ых) группу(уп), в том числе соединения, которые используются при получении других соединений, рассмотренных в этом описании.
Кроме того, соединения, рассмотренные в этом описании, могут также содержать группы пролекарств, в том числе и соответствующие пролекарства различных производных. Кроме того, соединения, рассмотренные в этом описании, могут быть аморфными, а также представлять собой любые и все морфологические формы. Кроме того, соединения, рассмотренные в этом описании, могут иметь форму сольвата, включая гидраты или другие сольваты.
Соединения, рассмотренные в этом описании, могут содержать один или более хиральный(-ых) центр(-ов) или же, в противном случае, могут существовать в виде многочисленных стереоизомеров. Следует понимать, что, в одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящее изобретение не ограничивается каким-либо конкретным стереохимическим условием, и что соединения и композиции, способы, варианты применения и лекарственные средства, включающие их, могут быть оптически чистыми или могут представлять собой любую из числа разнообразных стереоизомерных смесей, включая рацемические и другие смеси энантиомеров, другие смеси диастереомеров и т.п. Также следует понимать, что такие смеси стереоизомеров могут включать отдельную стереохимическую конфигурацию в одном или более хиральном(ых) центре(ах), наряду с включением смесей стереохимической конфигурации в одном или более другом(их) хиральном(ых) центре(ах).
Кроме того, соединения, рассмотренные в этом описании, могут иметь геометрические центры, такие как цис, транс-, двойные связи Е и Ζ. Следует понимать, что в еще одном из рассмотренных в этом описании вариантов осуществления настоящее изобретение не ограничено каким-либо конкретным геометрическим требованием к изомеру и что соединения и композиции, способы, варианты применения и лекарственные средства, содержащие их, могут быть оптически чистыми или могут представлять собой любую из числа разнообразных смесей геометрических изомеров. Также следует понимать, что такие смеси геометрических изомеров могут включать отдельную конфигурацию с одной или более двойной(ыми) связью(ями), наряду с включением смесей геометрических изомеров с одной или более двойной(ыми) связью(ями).
В этом описании термин алкил означает цепочку атомов углерода, которая факультативно разветвлена. В этом описании каждый из терминов алкенил и алкинил означает цепочку атомов углерода, которая факультативно разветвлена, и содержит по крайней мере одну двойную связь или тройную связь соответственно. Следует понимать, что алкинил также может содержать одну или более двойную(ых) связь(ей). Следует также понимать, что в некоторых вариантах осуществления настоящего изо- 9 027810 бретения алкил преимущественно имеет ограниченную длину, в том числе С1-С24, С1-С12, С1-С8, С1-С6 и С1-С4. Например, такие алкильные группы особо ограниченной длины, в том числе С1-С8, С1-С6 и С1-С4, могут быть отнесены к низшим алкилам. Следует также понимать, что в некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения каждый алкенил и/или алкинил может быть преимущественно ограниченной длины, в том числе С2-С24, С2-С12, С2-С8, С2-С6 и С2-С4. Например, такие алкенильные и/или алкинильные группы особо ограниченной длины, в том числе С2-С8, С2-С6 и С2-С4, могут быть отнесены к низшим алкенилам и/или алкинилам. В данном случае следует обратить внимание на то, что более короткие алкильные, алкенильные и/или алкинильные группы могут придавать меньшую липофильность соединению и, соответственно, будут иметь различное фармакокинетическое поведение. В вариантах осуществления настоящего изобретения, рассмотренных в этом описании, в каждом случае следует понимать, что упоминание алкила относится к алкилу, как определено в этом описании, и факультативно к низшему алкилу. В вариантах осуществления настоящего изобретения, рассмотренных в этом описании, в каждом случае следует понимать, что упоминание алкенила относится к алкенилу, как определено в этом описании, и факультативно к низшему алкенилу. В вариантах осуществления настоящего изобретения, рассмотренных в этом описании, в каждом случае следует понимать, что упоминание алкинила относится к алкинилу, как определено в этом описании, и факультативно к низшему алкинилу. Алкильные, алкенильные и алкинильные групп представляют собой, например, но не ограничиваются ими, метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил, 2-пентил, 3-пентил, неопентил, гексил, гептил, октил и т.п., и соответствующие группы, содержащие одну или более двойную(ых) и/или тройную(ых) связь(ей) или их комбинацию.
В этом описании термин алкилен означает двухвалентную цепочку атомов углерода, которая факультативно разветвлена. В этом описании каждый из терминов алкенилен и алкинилен означает двухвалентную цепочку атомов углерода, которая факультативно разветвлена, и содержит по крайней мере одну двойную или тройную связь, соответственно. Следует понимать, что алкинилен также может содержать одну или более двойную(ых) связь(ей). Следует также понимать, что в некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения алкилен преимущественно имеет ограниченную длину, в том числе С1-С24, С1-С12, С1-С8, С1-С6 и С1-С4. Например, такие алкиленовые группы особо ограниченной длины, в том числе С1-С8, С1-С6 и С1-С4, могут быть отнесены к низшим алкиленам. Следует также понимать, что в некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения каждый алкенилен и/или алкинилен может быть преимущественно ограниченной длины, в том числе С2-С24, С2-С12, С2-С8, С2-С6 и С2-С4. Например, такие алкениленовые и/или алкиниленовые группы особо ограниченной длины, в том числе С2-С8, С2-С6 и С2-С4, могут быть отнесены к низшим алкениленам и/или алкиниленам. В данном случае следует обратить внимание на то, что более короткие алкиленовые, алкениленовые и/или алкиниленовые группы могут придавать меньшую липофильность соединению и, соответственно, будут иметь различное фармакокинетическое поведение. В вариантах осуществления настоящего изобретения, рассмотренных в этом описании, в каждом случае следует понимать, что упоминание алкилена, алкенилена и алкинилена относится к алкилену, алкенилену и алкинилену, как определено в этом описании, и факультативно к низшему алкилену, алкенилену, алкинилену. Например, алкильные группы представляют собой, но не ограничиваются ими, метилен, этилен, н-пропилен, изопропилен, н-бутилен, изобутилен, втор-бутилен, пентилен, 1,2-пентилен, 1,3-пентилен, гексилен, гептилен, октилен и т.п.
В этом описании термин циклоалкил означает цепочку атомов углерода, которая факультативно разветвлена, причем по крайней мере часть упомянутой цепочки представляет собой цикл. Следует понимать, что циклоалкилалкил принадлежит к циклоалкилам. Следует понимать, что циклоалкил может быть полицикличным. Например, циклоалкилы включают, но не ограничивается ими, циклопропил, циклопентил, циклогексил, 2-метилциклопропил, циклопентилэт-2-ил, адамантил и т. п. В этом описании термин циклоалкенил означает цепочку атомов углерода, которая факультативно разветвлена, и содержит по крайней мере одну двойную связь, причем по крайней мере часть упомянутой цепочки представляет собой цикл. Следует понимать, что одна или более двойная(ых) связь(ей) может(гут) быть в циклической части циклоалкенила и/или в нециклической части циклоалкенила. Следует понимать, что каждый из циклоалкенилалкила и циклоалкилалкенила принадлежит к циклоалкенилам. Следует понимать, что циклоалкил может быть полицикличным. Например, циклоалкенилы включают, но не ограничиваются ими, циклопентенил, циклогексилэтен-2-ил, циклогептенилпропенил и т.п. Следует также понимать, что цепь, образующая циклоалкил и/или циклоалкенил, имеет преимущественно ограниченную длину, в том числе С3-С24, С3-С12, С3-С8, С3-С6 и С5-С6. В данном случае следует обратить внимание на то, что более короткие алкильные и/или алкенильные цепочки, образующие циклоалкил и/или циклоалкенил, соответственно, могут придавать меньшую липофильность соединению и, соответственно, будут иметь различное фармакокинетическое поведение.
В этом описании термин гетероалкил означает цепочку атомов, которая содержит как углерод, так и по крайней мере один гетероатом, и факультативно разветвлена. Примеры гетероатомов включают атомы азота, кислорода и серы. Согласно некоторым вариантам примеры гетероатомов также включают фосфор и селен. В этом описании термин циклогетероалкил, включающий гетероциклил и гетероцикл, означает цепочку атомов, которая содержит как углерод, так и по крайней мере один гетероатом, такой
- 10 027810 как гетероалкил, и факультативно разветвлена, причем по крайней мере часть упомянутой цепочки представляет собой цикл. Например, гетероатомы включают атомы азота, кислорода и серы. Согласно некоторым вариантам примеры гетероатомов также включают фосфор и селен. Примеры циклогетероалкилов включают, но не ограничиваются ими, тетрагидрофурил, пирролидинил, тетрагидропиранил, пиперидинил, морфолинил, пиперазинил, гомопиперазинил, хинуклидинил и т. п.
В этом описании термин арил означает моноциклические и полициклические ароматические карбоциклические группы, каждая из которых может быть факультативно замещена. Примеры ароматических карбоциклических групп согласно этому описанию включают, но не ограничиваются ими, фенил, нафтил и т.п. В этом описании термин гетероарил означает ароматические гетероциклические группы, каждая из которых может быть факультативно замещена. Примеры ароматических гетероциклических групп включают, но не ограничиваются ими, пиридинил, пиримидинил, пиразинил, триазинил, тетразинил, хинолинил, хиназолинил, хиноксалинил, тиенил, пиразолил, имидазолил, оксазолил, тиазолил, изоксазолил, изотиазолил, оксадиазолил, тиадиазолил, триазолил, бензимидазолил, бензоксазолил, бензтиазолил, бензизоксазолил, бензизотиазолил и т. п.
В этом описании термин амино означает группу ΝΗ2, алкиламиногруппу и диалкиламиногруппу, причем две алкильные группы в диалкиламиногруппе могут быть одинаковыми или различными, т. е. алкилалкиламино-. Примеры аминогрупп включают метиламино-, этиламино-, диметиламино-, метилэтиламино- и т.п. Кроме того, следует понимать, что в случае, когда амино- модифицирует или модифицируется другим(ой) термином(-ин), например аминоалкил или ациламино-, в него включены указанные выше варианты термина амино. Примеры аминоалкилов включают Н2Калкил, метиламиноалкил, этиламиноалкил, диметиламиноалкил, метилэтиламиноалкил и т.п. Примеры ациламиногрупп включают ацилметиламино-, ацилэтиламино- и т.п.
В этом описании термин аминогруппа и ее производные означает аминогруппу, рассмотренную в этом описании, и алкиламино, алкениламино, алкиниламино, гетероалкиламино, гетероалкениламино, гетероалкиниламино, циклоалкиламино, циклоалкениламино, циклогетероалкиламино, циклогетероалкениламино, ариламино, арилалкиламино, арилалкениламино, арилалкиниламино, гетероариламино, гетероарилалкиламино, гетероарилалкениламино, гетероарилалкиниламино, ациламино и т.п., каждая из которых факультативно замещается. Термин аминопроизводное включает также мочевину, карбамат и т. п.
В этом описании термин гидроксигруппа и ее производные означает ОН и алкилокси, алкенилокси, алкинилокси, гетероалкилокси, гетероалкенилокси, гетероалкинилокси, циклоалкилокси, циклоалкенилокси, циклогетероалкилокси, циклогетероалкенилокси, арилокси, арилалкилокси, арилалкенилокси, арилалкинилокси, гетероарилокси, гетероарилалкилокси, гетероарилалкенилокси, гетероарилалкинилокси, ацилокси и т.п., каждая из которых факультативно замещена. Термин гидроксипроизводное включает также карбамат и т. п.
В этом описании термин тиогруппа и ее производные означает §Н и алкилтио, алкенилтио, алкинилтио, гетероалкилтио, гетероалкенилтио, гетероалкинилтио, циклоалкилтио, циклоалкенилтио, циклогетероалкилтио, циклогетероалкенилтио, арилтио, арилалкилтио, арилалкенилтио, арилалкинилтио, гетероарилтио, гетероарилалкилтио, гетероарилалкенилтио, гетероарилалкинилтио, ацилтио и т. п., каждая из которых факультативно замещена. Термин тиопроизводное включает также тиокарбамат и т.п.
В этом описании термин ацил означает формил и алкилкарбонил, алкенилкарбонил, алкинилкарбонил, гетероалкилкарбонил, гетероалкенилкарбонил, гетероалкинилкарбонил, циклоалкилкарбонил, циклоалкенилкарбонил, циклогетероалкилкарбонил, циклогетероалкенилкарбонил, арилкарбонил, арилалкилкарбонил, арилалкенилкарбонил, арилалкинилкарбонил, гетероарилкарбонил, гетероарилалкилкарбонил, гетероарилалкенилкарбонил, гетероарилалкинилкарбонил, ацилкарбонил и т.п., каждый из которых факультативно замещен.
В этом описании термин карбонил и его производные означает группы С(О), С(8), €'(N4) и их замещенные аминопроизводные.
В этом описании термин карбоновая кислота и ее производные означает группу СО2Н и ее соли, сложные эфиры, амиды и СК
В этом описании термин сульфиновая кислота или ее производное означает §О2Н и ее соли, сложные эфиры и амиды.
В этом описании термин сульфоновая кислота или ее производное означает §О3Н и ее соли, сложные эфиры и амиды.
В этом описании термин сульфонил означает алкилсульфонил, алкенилсульфонил, алкинилсульфонил, гетероалкилсульфонил, гетероалкенилсульфонил, гетероалкинилсульфонил, циклоалкилсульфонил, циклоалкенилсульфонил, циклогетероалкилсульфонил, циклогетероалкенилсульфонил, арилсульфонил, арилалкилсульфонил, арилалкенилсульфонил, арилалкинилсульфонил, гетероарилсульфонил, гетероарилалкилсульфонил, гетероарилалкенилсульфонил, гетероарилалкинилсульфонил, ацилсульфонил и т. п., каждый из которых факультативно замещен.
Термин факультативно замещенный в этом описании означает замену атомов водорода другими функциональными группами на радикале, который факультативно замещен. Такие другие функциональ- 11 027810 ные группы, например, включают, но не ограничиваются ими, амино, гидроксил, галоген, тиол, алкил, галогеналкил, гетероалкил, арил, арилалкил, арилгетероалкил, гетероарил, гетероарилалкил, гетероарилгетероалкил, нитро, сульфокислоты и их производные, карбоновые кислоты и их производные и т.п. Например, любая из групп амино, гидроксил, тиол, алкил, галогеналкил, гетероалкил, арил, арилалкил, арилгетероалкил, гетероарил, гетероарилалкил, гетероарилгетероалкил и/или сульфокислота факультативно замещена.
В этом описании термины факультативно замещенный арил и факультативно замещенный гетероарил означают замену атомов водорода другими функциональными группами на ариле или гетероариле, который факультативно замещен. Такие другие функциональные группы, например, включают, но не ограничиваются ими, амино, гидрокси, галоген, тио, алкил, галогеналкил, гетероалкил, арил, арилалкил, арилгетероалкил, гетероарил, гетероарилалкил, гетероарилгетероалкил, нитро, сульфокислоты и их производные, карбоновые кислоты и их производные и т. п. Например, любая из групп амино, гидрокси, тио, алкил, галогеналкил, гетероалкил, арил, арилалкил, арилгетероалкил, гетероарил, гетероарилалкил, гетероарилгетероалкил и/или сульфокислота факультативно замещена.
Примеры заместителей включают, но не ограничиваются ими, радикал -(ΟΗ2)χζχ, где х представляет собой целое число от 0 до 6, а Ζχ выбирают из группы, в состав которой входит галоген, гидрокси, алканоилокси, в том числе С1-С6-алканоилокси, факультативно замещенный ароилокси, алкил, в том числе С1-С6-алкил, алкокси, в том числе С|-С6-алкокси. циклоалкил, в том числе С3-С8-циклоалкил, циклоалкокси, в том числе С3-С8-циклоалкокси, алкенил, в том числе С2-С6-алкенил, алкинил, в том числе С2-С6алкинил, галогеналкил, в том числе С1-С6-галогеналкил, галогеналкокси, в том числе С1-С6галогеналкокси, галогенциклоалкил, в том числе С3-С8-галогенциклоалкил, галогенциклоалкокси, в том числе С3-С8 галогенциклоалкокси, амино, С1-С6-алкиламино, (С1-С6-алкил)(С1-С6-алкил)амино, алкилкарбониламино, Ы-(С1-С6-алкил)алкилкарбониламино, аминоалкил, С1-С6-алкиламиноалкил, (С1-С6алкил) (С1-С6-алкил)аминоалкил, алкилкарбониламиноалкил, Ы-(С1-С6-алкил)алкилкарбониламиноалкил, циано и нитро; или Ζ выбирают из числа -СО2К и -СОМК5К6, где К4 , К5 и К6, каждый независимо, в каждом случае выбирают из группы, в состав которой входит водород, С1-С6-алкил, арил-С1-С6-алкил и гетероарил-С1 -С6-алкил.
Термин пролекарство в этом описании, как правило, означает любое соединение, которое при введении в биологическую систему образует биологически активное соединение в результате одной или более спонтанной(ых) химической(их) реакции(й), катализируемой(ых) ферментом химической(их) реакции(й) и/или метаболической(их) химической(их) реакции(й) либо их комбинации. Ιη νίνο на пролекарство, как правило, воздействует фермент (например, эстеразы, амидазы, фосфатазы и т.п.), простые биохимические реакции или другие процессы ίη νίνο, для высвобождения или регенерации более фармакологически активного лекарственного средства. Эта активация может происходить под действием эндогенного фермента хозяина или неэндогенного фермента, который вводят хозяину перед, после или во время введения пролекарства. Дополнительные подробности использования пролекарств описаны в патенте США №5627165; и в Ра1йа1к е! а1., Εηζνιηίο рго1ес1тд дгоир ЮеНпкщсз ίη огдатс δγηΐ^δίδ, 81егео5е1. Вюса1а1. 775-797 (2000). Следует понимать, что пролекарство преимущественно преобразуется в истинное лекарственное средство, как только достигнута цель, такая как целевая доставка, безопасность, стабильность и т.п., с последующим быстрым выведением остатков группы, образующей пролекарство.
Пролекарства могут быть получены из соединений, рассмотренных в этом описании, путем присоединения групп, в конечном счете отщепляемых ίη νίνο, к одной или более функциональной(ым) группе(ам), присутствующей(им) в этом соединении, например -ОН-, -δΗ, -СО2Н, -ΝΚ2. Примеры пролекарств включают, но не ограничиваются ими, сложные эфиры карбоновых кислот, где упомянутая группа представляет собой алкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, ацилоксиалкил, алкоксикарбонилоксиалкил, а также сложные эфиры гидроксильных групп, сложные эфиры тиолов и аминов, где присоединяемой группой является ацильная группа, алкоксикарбонил, аминокарбонил, фосфат или сульфат. Примеры сложных эфиров, упоминаемых также как активные сложные эфиры, включают, но не ограничиваются ими, 1-инданил, Ν-оксисукцинимид; ацилоксиалкильные группы, такие как ацетоксиметил, пивалоилоксиметил, β-ацетоксиэтил, β-пивалоилоксиэтил, 1-(циклогексилкарбонилокси)проп-1-ил, (1-аминоэтил)карбонилоксиметил и т.п.; алкоксикарбонилоксиалкильные группы, такие как этоксикарбонилоксиметил, а-этоксикарбонилоксиэтил, β-этоксикарбонилоксиэтил и т.п.; диалкиламиноалкильные группы, в том числе ди(низший алкил)аминоалкильные группы, такие как диметиламинометил, диметиламиноэтил, диэтиламинометил, диэтиламиноэтил и т.п.; 2-(алкоксикарбонил)-2-алкенильные группы, такие как 2-(изобутоксикарбонил)пент-2-энил, 2-(этоксикарбонил)бут-2-энил и т.п.; и лактонные группы, такие как фталидил, диметоксифталидил и т.п.
Другие примеры пролекарств содержат химическую составляющую, такую как амид или фосфорная группа, функция которой заключается в повышении растворимости и/или стабильности соединений, рассмотренных в этом описании. Примеры других пролекарств для аминогрупп включают, но не ограничиваются ими, (С3-С20)алканоил; галоген-(С3-С20)алканоил; (С3-С20)алкеноил; (С4-С7)циклоалканоил; (С3С6)циклоалкил(С2-С16)алканоил; факультативно замещенный ароил, такой как незамещенный ароил или
- 12 027810 ароил, замещенный 1-3 заместителями, выбранными из группы, в состав которой входит галоген, циано, трифторметансульфонилокси, (С1-С3)алкил и (С1-С3)алкокси, каждый из которых факультативно дополнительно замещается одним или более (от 1 до 3) атомом(ами) галогена; факультативно замещенный арил(С2-С16)алканоил и факультативно замещенный гетероарил(С2-С16)алканоил, такой как арильный или гетероарильный радикал, незамещаемый или замещаемый 1-3 заместителями, выбранными из группы, в состав которой входит галоген, (С1-С3)алкил и (С1-С3)алкокси, каждый из которых факультативно дополнительно замещается 1-3 атомами галогена; и факультативно замещенный гетероарилалканоил, имеющий от одного до трех гетероатомов, выбранных из числа О, δ и N в гетероарильной составляющей, и от 2 до 10 атомов углерода в алканоильной составляющей, такой как гетероарильный радикал, незамещаемый или замещаемый 1-3 заместителями, выбранными из группы, в состав которой входит галоген, циано, трифторметансульфонилокси, (С1-С3)алкил и (С1-С3)алкокси, каждый из которых факультативно замещен 1-3 атомами галогена. Указанные примеры групп приведены для ознакомления, являются не исчерпывающими, и могут быть получены с помощью обычных процессов.
Следует понимать, что сами по себе пролекарства могут не обладать существенной биологической активностью, но, вместо этого, подвергаются одной или более спонтанной(ым) химической(им) реакции(ям), катализируемой(ым) ферментом химической(им) реакции(ям) и/или метаболической(им) химической(им) реакции(ям) либо их комбинации после их введения ίη νίνο с образованием рассмотренного в этом описании соединения, являющегося биологически активным или представляющим собой предшественник биологически активного соединения. Тем не менее следует понимать, что в некоторых случаях пролекарство является биологически активным. Понятно также, что пролекарства могут часто служит для повышения эффективности или безопасности лекарственного средства за счет улучшения пероральной биодоступности лекарственных форм, фармакодинамики полувыведения и т.п. К пролекарствам также могут быть отнесены производные соединений, рассмотренных в этом описании, которые включают группы, которые просто маскируют нежелательные свойства лекарственных средств или улучшают доставку лекарственных средств. Например, одно или более соединенее(ий), рассмотренное(ых) в этом описании, может(гут) проявлять нежелательные свойства (которое было бы предпочтительно блокировать или свести до минимального уровня), которые могут стать фармакологическими, фармацевтическими или фармакокинетическими барьерами в клиническом применении лекарственных средств, такие как низкая абсорбция лекарственного средства при пероральном приеме, отсутствие специфичности местоположения, химическая нестабильность, токсичность, плохая воспринимаемость пациентами (плохой вкус, запах, боль в месте инъекции и т.п.) и т.п. В данном случае следует понимать, что пролекарство или другая стратегия использования обратимых производных могут быть полезны в оптимизации клинического применения лекарственного средства.
Термин терапевтически эффективное количество в этом описании означает такое количество активного соединения или фармацевтического агента, которое вызывает биологический или медицинский ответ в тканевой системе, организме животного или человека, которого добивается исследователь, ветеринар, врач или другой клиницист, который включает облегчение симптомов заболевания или расстройства, подвергаемого лечению. Согласно одному из аспектов настоящего изобретения терапевтически эффективным является такое количество, которое может вылечить или облегчить заболевание или симптомы заболевания при разумном соотношении польза/риск, применимом к любому лечению. Тем не менее следует понимать, что общая суточная доза соединений и композиций, рассмотренных в этом описании, может быть определена лечащим врачом в рамках здравого медицинского суждения. Конкретный терапевтически эффективный уровень дозы для любого конкретного пациента будет зависеть от множества факторов, в том числе расстройства, подлежащего лечению, и тяжести заболевания; активности конкретного используемого соединения; конкретного используемого состава; возраста, массы тела, общего состояния здоровья, пола и диеты пациента; времени введения, пути введения и скорости выведения конкретного используемого соединения; продолжительности лечения; препаратов, используемых в комбинации или одновременно с конкретным используемым соединением; и подобных факторов, хорошо известных исследователю, ветеринару, врачу или другому клиницисту.
Необходимо также отметить, что терапевтически эффективное количество, независимо от того, идет ли речь о монотерапии или комбинированной терапии, преимущественно выбирают с учетом любой токсичности или других нежелательных побочных эффектов, которые могут иметь место во время введения одного или более соединения(ий), рассмотренное(ых) в этом описании. Кроме того, следует понимать, что комбинированное лечение, рассмотренное в этом описании, может обеспечить возможность введения более низких доз соединений, которые проявляют такую токсичность или другой нежелательный побочный эффект, при которой(ом) упомянутые более низкие дозы находятся ниже порогов токсичности или занимают более низкое положение в терапевтическом окне, чем дозы, которые бы, в противном случае, вводились при отсутствии комбинированного лечения.
В этом описании термин композиция, как правило, относится к любому продукту, содержащему определенные ингредиенты в определенных количествах, а также к любому продукту, получаемому, прямо или косвенно, в результате сочетаний определенных ингредиентов в определенных количествах. Следует понимать, что композиции, рассмотренные в этом описании, могут быть получены из отдельных
- 13 027810 соединений, рассмотренных в этом описании, или из солей, растворов, гидратов, сольватов и других форм соединений, рассмотренных в этом описании. Также следует понимать, что композиции могут быть получены из различных аморфных, неаморфных, частично кристаллических, кристаллических и/или других морфологических форм соединений, рассмотренных в этом описании. Также следует понимать, что композиции могут быть получены из различных гидратов и/или сольватов соединений, рассмотренных в этом описании. Соответственно, следует понимать, что такие фармацевтические композиции, содержащие соединения, рассмотренные в этом описании, включают каждую из или любую комбинацию различных морфологических форм и/или сольватированные либо гидратированные формы соединений, рассмотренных в этом описании. Композиции могут содержать, например, один или более носитель(ей), разбавитель(ей) и/или наполнитель(ей). Соединения, рассмотренные в этом описании, или композиции, содержащие их, можно вводиться в терапевтически эффективном количестве в любые стандартные дозированные лекарственные формы, подходящие для способов, рассмотренных в этом описании. Соединения, рассмотренные в этом описании, или композиции, содержащие их, можно вводить разнообразными обычными путями для способов, рассмотренных в этом описании, и в самых разнообразных дозировках, используя известные процедуры (см. РепипдЮп: ТНе 8с1еисе апб Ргаейее о£ РНагтасу, (213ί еб., 2005)).
Термин введение в этом описании включает все пути введения пациенту соединений и композиций, рассмотренных в этом описании, включая, но не ограничиваясь ими, пероральный (ро), внутривенный (ίν), внутримышечный (1т), подкожный (§с), трансдермальный, ингаляционный, трансбуккальный, глазной, сублингвальный, вагинальный, ректальный и т.п. Соединения и композиции, рассмотренные в этом описании, можно вводить в виде стандартных дозированных лекарственных форм и/или композиций, содержащих обычные нетоксичные фармацевтически приемлемые носители, адъюванты и наполнители. Следует понимать, что стандартные дозы и/или стандартные дозированные лекарственные формы, рассмотренные в этом описании, могут быть разовыми или разделенными на курс лечения. Следует понимать также, что стандартные дозы и/или стандартные дозированные лекарственные формы можно вводить с использованием различных дневных, недельных, месячных или квартальных схем приема лекарственного средства. Примеры схем приема лекарственного средства включают прием один раз в день, два раза в день, три раза в день или через день, раз в неделю, два раза в неделю, раз в месяц, раз в квартал и т.п. В каждом из этих случаев следует понимать, что дневная, недельная, месячная или квартальная доза соответствует терапевтически эффективным количествам, рассмотренным в этом описании. Кроме того, следует понимать, что в случае введения дозы, разделенной на курс лечения, соответствующие терапевтически эффективные количества соответствуют общей, разделенной на курс лечения, дозе.
Следует понимать, что в рассмотренных в этом описании способах одновременно вводимые отдельные компоненты или комбинации можно вводить любым подходящим средством одновременно, совместно, последовательно, раздельно или в одной фармацевтической композиции. В случае, если совместно вводимые соединения или композиции вводятся в виде стандартных дозированных лекарственных форм, количество доз каждого соединения, вводимых в течение дня, может быть одинаковым или различным. Соединения или композиции можно вводить одними и теми же или различными путями введения. Соединения или композиции можно вводить по одновременными или чередующимися схемам, в то же самое или разное время в течение курса терапии, одновременно в раздельных или единых формах.
Доза каждого соединения заявленных комбинаций зависит от нескольких факторов, в том числе от способа введения, состояния, подлежащего лечению, тяжести состояния, должно ли упомянутое состояние лечиться или предупреждаться, а также от возраста, массы и состояния здоровья человека, подвергаемого лечению. Кроме того, на используемую дозу может повлиять фармакогеномная (влияние генотипа на фармакокинетику, фармакодинамику или профиль эффективности лекарственного средства) информация о конкретном пациенте.
В дополнение к указанным выше примерам доз и схем приема лекарственного средства следует понимать, что эффективное количество любого одного из соединений или их смеси, рассмотренных(ой) в этом описании, может быть легко определено врачом, который назначает лечение, или терапевтом путем использования известных методов и/или путем наблюдения результатов, полученных в аналогичных условиях. При определении эффективного количества или дозы врач, который назначает лечение, или лечащий врач рассматривает ряд факторов, в том числе, но не ограничиваясь ими, вид млекопитающего, включая человека, его размер, возраст и общее состояние здоровья, конкретное вовлеченное в патологический процесс заболевание или расстройство, степень или вовлечение либо тяжесть заболевания или расстройства, реакция конкретного пациента, конкретное вводимое соединение, способ введения, характеристики биодоступности вводимого препарата, выбранная схема приема лекарственного средства, использование сопутствующего лекарственного средства и другие обстоятельства, имеющие значение.
При получении фармацевтических композиций из соединений, рассмотренных в этом описании, терапевтически эффективное количество одного или более соединения(ий) в любой из различных форм, рассмотренных в этом описании, может быть смешано с одним или более наполнителем(ями), разбавлено одним или более наполнителем(ями) либо заключено в такой носитель, который может иметь форму капсулы, саше, бумажной или другой емкости. Наполнители могут служить разбавителем и могут пред- 14 027810 ставлять собой твердые, полутвердые или жидкие материалы, которые действуют как наполнитель, носитель или среда для активного ингредиента. Таким образом, указанные композиции могут иметь форму таблеток, пилюль, порошков, лепешек, саше, крахмальных облаток, эликсиров, суспензий, эмульсий, растворов, сиропов, аэрозолей (в виде твердого вещество или в жидкой среде), мазей, мягких и твердых желатиновых капсул, суппозиториев, стерильных растворов для инъекций и стерильных упакованных порошков. Композиции могут содержать от приблизительно 0,1 до приблизительно 99,9% активных ингредиентов в зависимости от выбранной дозы и лекарственной формы.
Эффективное использование соединений, композиций и способов, рассмотренных в этом описании, для лечения или облегчения одного или более из НСУ, ВИЧ, коронавируса и/или ВУЭУ с использованием одного или более соединения(ий), рассмотренного(ых) в этом описании, может основываться на животных моделях, таких как мышиные, собачьи, свиные и отличных от человека приматных моделях болезни. Понятно, например, что НСУ, коронавирус, такой как δΑΚδ-СоУ или МЕКБ-СоУ, и/или ВИЧ в организме человека могут быть охарактеризованы потерей функции и/или развитием симптомов, каждый из которых может быть вызван у животных, таких как мыши и другие суррогатные экспериментальные животные. Понятно также, что ВУЭУ в организме крупного рогатого скота может быть охарактеризован потерей функции и/или развитием симптомов, каждый из которых может быть вызван у животныхзаменителей, таких как мыши и другие подопытные животные-модели. Такие животные модели могут быть использованы для оценки методов лечения и фармацевтических композиций, рассмотренные в этом описании, с целью определения терапевтически эффективных количеств, рассмотренных в этом описании.
Приведенные ниже примеры дополнительно иллюстрируют конкретные варианты осуществления настоящего изобретения; однако эти иллюстративные примеры никоим образом не должны истолковываться как ограничивающие настоящее изобретение.
Примеры
Пример. Исследуемые соединения.
Приведенные в качестве примера замещенные пиперидинкарбоксамиды и пиперазинкарбоксамиды, рассмотренные в этом описании, получены от коммерческих поставщиков (степень чистоты >90%) и используются в полученном виде. Другие приведенные в качестве примера замещенные пиперидинкарбоксамиды и пиперазинкарбоксамиды, рассмотренные в этом описании, получены обычными способами.
Пример. Определение фармакокинетики и толерантности исследуемых соединений на мышах линии КМТ™ тюе™.
Три возрастающие дозы каждого из исследуемых соединений вводят в объеме 5 мл на кг массы тела один раз в день посредством внутрибрюшинной (1Р) инъекции. Толерантность определяют в течение курса лечения продолжительностью четырнадцать дней. Подопытные животные включают три группы по 5 мышей на группу. Также включена одна контрольная группа из 5 мышей, которым вводят носитель из расчета 5 мл на кг массы тела. Указанные группы мышей включают самцов и самок КМТ™ тюе™ трехмесячного возраста массой >12,0 г. Пробы крови отбирают из центральной хвостовой артерии животного для измерения концентрации исследуемого соединения в сыворотке крови на утро 8-го дня непосредственно перед введением лекарственного препарата (отбор проб с 24-ч интервалом после введения дозы на 7 день) и на утро 15 дня (отбор проб с 24-ч интервалом после введения завершающей дозы на 14 день). Объем приблизительно 100 мкл собирают в пробирки, выдерживают до сворачивания при температуре 2-8°С, центрифугируют, сыворотку над сгустком крови удаляют и хранят в замороженном виде при температуре -80°С до готовности для измерения концентрации.
Пример. Химерная мышиная модель
В качестве подопытных животных используют мышей линии (А1Ь-иРА)/БСГО (альбумин-активатор плазминогена урокиназного типа/тяжелый комбинированный иммунодефицит) в гомозиготной форме, содержащихся в свободной от вирусов/антигенов среде до готовности к использованию. Используемая мышиная модель аналогична ранее описанным моделям (Кпе!етап КМ. е! а1., Нера!о1оду, 2006, 43, 1346; Кпе!етап КМ. е! а1., Нера!о1оду, 2009, 49, 745).
Выделение и трансплантация человеческих гепатоцитов.
Сегменты печеночной ткани человека (-20 см3) промывают холодным забуференным фосфатом солевым раствором и быстро транспортируют в лабораторию выделения ткани. Гепатоциты выделяют и очищают посредством перфузии раствором коллагеназы с раствором (0,38 мг/мл) ЫЬегаке С1 (компания ВоеЬгтдег МаппНейт) с использованием описанных ранее методов (Мегсег Ό£, е! а1., Нераббк С У1ги8 Керйсабоп ш Мюе \\'ЙН С1йтепс Нитап ЬКегк, №й. Меб. 2001, 7, 927-933). Мышей-реципиентов (мыши линии иРА/БСГО в возрасте 5-14 дней) наркотизируют галотаном/О2 и 1х106 жизнеспособных гепатоцитов вводят в нижний полюс селезенки. Потом гепатоциты самостоятельно перемещаются в печень, где внедряются и размножаются.
Анализ человеческого α-1-антитрипсина.
Анализ человеческого α-1-антитрипсина (НААТ) используют для подтверждения стабильного постоянного функционирования трансплантатов человеческих гепатоцитов и для определения, является ли
- 15 027810 какое-либо изменение титра НСУ обусловленым гибелью или повреждением гепатоцитов. Мышиную сыворотку анализируют посредством твердофазного иммуноферментного сэндвич-анализа, как описывалось ранее (Кпе1етап„ Ν.Μ. с( а1., Нера1о1о§у, 2006, 43, 1346). Вкратце, образцы мышиной сыворотки (2 мкл) разбавляют 1/100 в блокирующем буфере и анализируют посредством твердофазного иммуноферментного сэндвич-анализа (ЕЬ1§А) с использованием поликлонального козьего антитела против человеческого альфа-1-антитрипсина (бААТ) (компания ΌΙΑδΘΚΙΝ, № по каталогу 81902, §й11№а1ег, штат Миннесота) в качестве иммобилизованного антитела. Часть того же самого антитела сшивают с пероксидазой хрена (компания Иегее, № по каталогу 31489, Коск&гб, штат Иллинойс), и используют в качестве вторичного антитела с детекцией сигнала 3,3',5,5'-тетраметилбензидином (компания §1§та, δΐ. Ьошк, штат Миссури).
Выделение и количественное определение НСУ.
Анализ мышиной сыворотки осуществляют слепым способом с помощью системы Собак Атрбсог НСУ Монбог (компания Косбе Эхаднокйск). Нижний предел количественного определения составляет 600 МЕд/мл. Вирусную РНК экстрагируют с использованием буфера АУЪ от компании О|адеп (19073) в соответствии с инструкциями изготовителя. РНК транскрибируют на кДНК с помощью специфического праймера НСУ (51-АООТТТАООАТТСОТОСТСАТ) (последовательность δΕΟ ΙΌ ΝΟ: 13) с использованием набора Нфб Сарасбу КNΑ 1о с^NΑ (компания Аррбеб Вюку51ет5, № по каталогу 4369016) в соответствии с инструкциями изготовителя. КТ-РСК (полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией) выполняют с использованием системы АВ1 7300 Кеа1 Тине РСК и химии Тасрнап с дублированием всех измерений.
6-РАМ-САСССТАТСАООСАОТАССАСААООСС-ТАМКА (последовательность δΕΟ ΙΌ ΝΟ: 14) используют в качестве специфического детекторного зонда НСУ с набором праймеров, детектирующих консервативный участок 5'ИТК НСУ (5'-ТОСООААССООТОАОТАСА (последовательность δΕΟ ΙΌ ΝΟ: 15), 5'-АООТТТАООАТТСОТОСТСАТ (последовательность δΕΟ ΙΌ ΝΟ: 13)). Для абсолютного количественного определения, наряду с Οрί^ ОиаШ НСУ КЫА Ы§б еойго1 (компания Οрΐ^^ианί), строят стандартную кривую известных разведений плазмиды, содержащей последовательность варианта НСУ Н77с (рСУ-Н77с).
Проведение эксперимента.
Через шесть недель после трансплантации гепатоцитов мышей подвергают скринингу на уровень сывороточного бААТ, и животным с пороговой точкой выше 100 мкг/мл посредством внутрибрюшинной инъекции инокулируют 100 мкг человеческой сыворотки, нагруженной НСУ генотипа 1а (приблизительно 2х105 копий/мл). Исходные уровни НСУ определяют через 1 и 2 недели после инокуляции, и мышей с титром выше 2х10 копий/мл отбирают в подопытные группы. Посредством отбора стремятся сбалансировать группы по титрам НСУ, уровням бААТ, полу и массе по уменьшающемуся приоритету.
Пример. Эффективность против инфекции НСУ на мышах линии КМТ™ ннсе'1™.
Протокол включает три уровня доз, которые выбирают на основе переносимости и изучения фармакокинетики по результатам исследования, описанного в предыдущем примере. Эффективность каждого экспериментального соединения определяют в течение курса лечения продолжительностью четырнадцать дней и семидневного периода изучения отдаленных результатов с использованием трех возрастающих уровней дозы исследуемого соединения, вводимой в объеме 5 мл/кг один раз в день путем внутрибрюшинной инъекции. Исходные критерии приемлемости животных: минимальный уровень бААТ 80; минимальный уровень НСУ -1х10 МЕд/мл; пороговая точка статуса здоровья <1-2. Подопытных животных распределяют на три группы по 5 мышей. В исследование включают также одну контрольную группу из 5 мышей, которым вводят носитель из расчета 5 мл на кг массы тела. В указанные группы включены мыши (самцы и самки) линии КМТ ннсе 3-месячного возраста с массой в диапазоне >12,0 г. Для измерения исходных концентраций бААТ и НСУ в сыворотке на 3 день через центральную хвостовую артерию отбирают пробы крови. Последующие отборы крови производят утром на 7 день непосредственно перед введением исследуемого соединения, утром на 14 день, через двадцать четыре часа после введения завершающей дозы экспериментального соединения примерно в 08:00 предшествующего дня и на 21-й день, через семь дней после последней дозы исследуемого соединения. Объем приблизительно 100 мкл собирают в пробирки, выдерживают до сворачивания при температуре 2-8°С, центрифугируют и сыворотку над сгустком удаляют. Образцы сыворотки хранят замороженными при температуре -80°С до готовности для проверки уровней НСУ и бААТ.
Пример. Ιη убго анализ на анти-НСУ эффективность.
Исследования НСУ обычно включают инфицированных пациентов и шимпанзе. Однако в последнее время была разработана надежная система инфицирования НСУ с использованием клеток, полученных из клеточной линии гепатомы человека Ниб-7. Основу ее составляет уникальная консенсусная кДНК 1ЕН-1 НСУ, полученная от пациента, инфицированного НСУ. Посредством обратной генетики из этого клона НСУ может быть выделен инфекционный вирус. Выделенный жизнеспособный вирус 1РН можно серийно пассировать в клетках Ниб-7. Как следствие указанная система пригодна для оценки активности исследуемого соединения относительно анти-НСУ эффективности.
- 16 027810
Вкратце, 6х103 клеток Ний7-1 инкубируют в течение ночи в каждой лунке сенсибилизированных коллагеном 96-луночных планшетов ΒίοοοαΙ (компания ВИ Вю8С1епее8, ВсбГогб. штат Массачусетс) в 0,2 мл 10% среды, состоящей из модифицированной по способу Дульбекко среды Игла, дополненной 10% фетальной бычьей сыворотки. Далее, культуры с 2-дневными интервалами пополняют свежей 10% средой (0,2 мл). После слияния культур их с 2-дневными интервалами продолжают пополнять свежей 10% средой (0,2 мл), которая также содержит 1% диметилсульфоксида (ΗΜ8Ο). После пополнения в течение 20 дней культуры Ний7-1 инкубируют со свежей 1% средой (такой же, как и 10% среда, за исключением того, что содержание сыворотки составляет 1%), содержащей НСУ при множественности заражения (ΜΟΙ) 0,05 фокусобразующих единиц (ГГи) на клетку. Титр исходной культуры НСУ (6РН-1\у1 Ний7) составляет 1,5х10 ГГи на мл. На следующий день (день 1 после заражения) и через 2 дня (день 3 после заражения) среды пополняют свежей 1% средой, содержащей исследуемые соединения, растворенные в ΌΜδΟ. На 5-й день обработки упомянутыми соединениями клеточные лизаты собирают для выделения РНК и проведения количественной полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией в реальном масштабе времени (КТ-цРСК.) и культуральные среды собирают для анализа на цитотоксичность.
Тотальную РНК выделяют из клеток методом с использованием гуанидинтиоцианата по стандартным протоколам. Для синтеза кДНК с использованием реагентов для обратной транскрипции ТацМап (компания Аррйеб Вю8у81ет8, Ро81ет Сйу, штат Калифорния) с последующей полимеразной цепной реакцией в реальном масштабе времени с использованием термоциклера (амплификатора ДНК) Лррйеб Вю8у81еш8 7300 в реальном масштабе времени используют 1 мкг РНК. Термоциклическая обработка состоит из начальной 10 мин денатурации при температуре 95°С с последующими 40 циклами денатурации (15 с при температуре 95°С) и отжига/удлинения (1 мин при температуре 60°С). Уровни НСУ и уровни РНК человеческой глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы (САРИН) определяют по стандартной кривой серийных разведений плазмиды, содержащей 6РН-1 НСУ или кДНК САРИН. Для детектирования САРИН и НСУ были использованы следующие праймеры для ПЦР: САРИН (ΝΜΧ002046) 5'СААССТСААССТСССАСТС-3' (последовательность §Еф 1И ΝΟ: 16) (смысловой) и 5'СААСАТССТСАТСССАТТТС-3' (последовательность §Еф 1И ΝΟ: 17) (антисмысловой), 6РН-1 НСУ (АВ047639) 5'-ТСТССССААССССТСАСТА-3' (последовательность 8Еф ГО ΝΟ: 18) (смысловой) и 5'ТСАСССАСТАССАСААССС-3' (последовательность 8Еф ГО ΝΟ: 19) (антисмысловой).
Пример.
Соединения и антивирусная активность, представленные в нижеследующей таблице, рассмотрены в этом описании. Следует понимать, что в каждом из соединений, рассмотренных в этом описании, каждый атом содержит полную валентность, где каждый оставшийся атом представляет собой водород.
Приведенные в качестве примера соединения и противовирусная активность.
Все соединения, описанные в примерах и испытанные в многократных дозах, показывают реакцию зависимости доза-эффект.
Пример А? К Кольцевое соединение X К2 Анти-НСУ активность
16 3-(3-РС6Н4)С6Н4 н С4 СН2 хинолнн-8-ил ++
17 4-(3-МеС6Н4)С6Н4 н С4 сн2 4-ОН-3-МеО-С6Н3 +
19 3-(3-МеС6Н4)С6Н4 н сз (СИз)3 1-пиразолил ΝΤ
20 3-(3-МеС6Н4)С6Н4 н сз СНз 1-(2-пиримидинил)пиррол-2-ил ΝΤ
21 4-(2-РС6Н4О)С6Н4 н С4 СНз 2-ОН-4-МеО-С6Н3 +++
22 2-(3-МеОС6Н4)С6Н4 н С4 СН2 хинолин-8-ил +++
23 4-(бензимидазол-2- у1)СбН4 н С4 СНз 2-МеО-СбН4 +++
24 2-(3-МеОСбН4)СбН4 н С4 СНз 4-ОН-3,5-Мез-С6Нз +++
25 2-(3-МеОС6Н4)С6Н4 н С4 СНз 2-МеО-СбИ4 ++
26 3-(3-РС<,Н4)СбН4 н С4 СНз 4-ОН-С6Н, ++
- 17 027810
Пример Аг1 К Кольцевое соединение X к2 Анти-НСУ активность
27 3-(3-РС6Н4)С6Н4 н С4 сн2 2-(/>Ви)-имидазол-4-ил ++
28 4-(2-РСбН4О)СбН4 н С4 сн2 2,3-метилендиокси-С<$Н2 ++
29 ЗЧЗ-РСбН4»Н4 н С4 сн2 3-ОН-С6Н4 +
30 3-(3-РС6Н4)С6Н4 н С4 сн2 2-ОН-б-МеО-С6Н3 +
31 3-(3-С1С(,Н4)С6Н4 н С4 сн2 4-ОН-С6Н4 +
32 2-(3-МеОС6Н4)СбН4 н С4 сн2 3-Ме-4-МеО-С6Н3 +
33 г-О-МеОСбНЦСбН, н С4 сн2 З-МеО-СбН, +
34 гчз-меОСбНЦСбН, н С4 сн2 4-Р-2-МеО-С6Н3 +
35 3-(4-тиазолил)СбН4 н С4 сн2 3-(2-фурил)С6Н4 +
36 2-(3-МеОС6Н4)С6Н4 н С4 СН2СН2СН(Ме) РЬ +
38 3-(2-индолил)СбН4 н С4 СН2 (1 -/-Рг-пиразол-4-ил) +
39 2-(3-МеОСбН4)С6Н4 н С4 СН2 Г-Ви +
40 3-(2-фурил)СбН4 н С4 СН2 хинолин-8-ил +
41 3-(2-Ме-1,3,4-тиазол-5- ИЛ)С6Н4 н С4 С(=О) 2-фурил +
42 3-(3-С1С6Н4)СбН4 н С4 сн2 4-ОН-З-МеО-СбНз +
43 3-(5-пиразолил)СбН4 н С4 сн2 1-нафтил -
45 3-(2-индолил)СбН4 н С4 сн2 (5-Ме)-2-фурил -
46 3-(2-индолил)СбН4 н С4 СН2СН2СН2 ЗМе -
Пример Аг1 К Кольцевое соединение X к2 Анти-НСУ активность
47 4-(бензимидазол-2- ил)С6Н( Н С4 сн2 2-индолил
48 2-(3-МеОС6Н4)С6Н4 Н С4 сн2 4-ЕЮ-с6н4 -
49 3-(2-фурил)СбН4 Н С4 сн2 6-Р-бензимид азол-2 -у1 -
50 3-(3-С1С6Н4)С6Н4 Н С4 сн2 З-ОН-СбЩ -
51 3-(2-фурил)С6Н4 Н С4 С(=О) 3-фурил -
52 3-(4-тиазолил)С,,Н4 Н С4 СН2СН=СН (£) 4-Р-С6Н, -
53 3-(2-фурил)СбН4 Н С4 С(=О)СН2СН2 2-фурил -
54 3-(2-фурил)С6Н4 Н С4 С(=О) 4,5-триметиленпиразол-З-ил -
55 3-(2-фурил)СбН4 Н С4 СН2СН=СН (Е) 4-МеО-С6Н4 -
56 3-(3-РС6Н4)С6Н4 Н С4 сн2 2,3-метилендиокси-СбНз -
57 3-индол-2-ил-СбН4 Н С4 С(О) ++
58 (427) 4-бе нз и ми дазол-2 - илСбНд Н С4 сн2 З-МеО-СбРЦ ++
59 (252) 4-бензимидазол-2-ил- сбн4 Н С4 сн2 5-Е>фуран-2-ил ++
60 (308) 3-индол-2-ил-СбН4 н С4 С(О) тиазол-5-ил +
- 18 027810
Пример Аг1 К Кольцевое соединение X к2 Анти-НСУ активность
61 (Р101) 4-(2-РС6Н4О)С6Н4 И 04 сн2 2-НО-3-МеО-С6Н3 ++
62 (Р102) 2-(3-МеОС6И4)С6И4 и 04 сн2 2-НО-3-МеО-С6Н3 ++
63 (Р104) 3-(3-С1С6Н4)С6Н4 и 04 сн2 2-НО-3-МеО-С6Н3 ++
64 (Р106) 4-(2-РС6Н4О)С6Н4 н 04 сн2 Е1 ++
65 (Р107) 4-бензимидазол-2-ил- СбН, н С4 сн2 3-МеО-С6Н4 ++
66 4-(3,5-Ме2-пиразол-1 - ил)С6И4 н 04 СИ2СН=СН (£) 2-МеО-С6Н4 +
68 3-(3-РС6Н4)С6Н4 н 04 сн2 2-Е1-5-Ме-имидазол-4-ил +
69 З-р-МеОСбНбСбЩ и 04 сн2 СН=С(Ме)2 ++
70 4-(2^6^0)06¾ и 04 сн2 3-МеО-С6Щ +
71 г-р-МеОСбНЭСбШ и 04 сн2 нафта-Тил +
72 З-р-СЮбНбСбН, и 04 сн2 1-аллил-3-Ме-пиразол-4-ил +
73 4-(2-РСбН4О)СбН4 и 04 сн2 1-Рг-5-Ме-пиразол-4-ил +
74 4-(2^06^0)06¾ и 04 сн2 Ме -н-
Пример Аг1 к Кольцевое соединение X к2 Анти-НСУ активность
75 4-(2^4^0)06¾ и 04 -- 1 -Е1-пиперидин-4-ил -Н-+
76 ЦЗ-ГСбадСбЩ и 04 сн2 1 -0-Рг)-3,5-Ме2-пиразол-4-ил -н-
77 2-РЬО-пиридин-5-ил и С4 сн2 РЬ ++
78 3-(3-0106¾^¾ и С4 сн2 1 -Е1-пиразол-4-ил ++
79 и 04 сн2 3,5,6-Ме3-пиразин-2-ил -н-
80 2-(3^006¾ )06¾ и 04 сн2 1 -Рг- 5-Ме-пиразол-4-ил +
81 4-(2^^)06¾ и С4 сн2 2-ИО-5-МеО-С6Н3 ++
82 3-(3-0106¾^¾ и С4 сн2 1 -(ΐ -Рг)-пиразол-4-ил +
83 2-РЬО-пиридин-5-ил н 04 сн2 5-С!-тиени-2-!1л ++
84 З-О-ГСбадСбЩ и 04 сн2 2,3-(МеО)2-СбИ3 +
85 4-(2^06^)06¾ и С4 сн2 4-НО-3-МеО-С6Н3 ++
86 4-(2-РСбН4О)СбН4 н С4 сн2 5-0-Ви)-пиразол-3-ил +
87 2-(3-МеОС6Н4)С6Н4 н С4 сн2 3,5,6-Ме3-пиразин-2-ил ++
88 2-(3-МеОС6Н4)СбН4 н С4 сн2 2,5-Ме2-С6Н3 +
90 3-(3-РС6Н4)С6Н4 н С4 сн2 бензо-2,1,3-тиадиазол-5-ил +
91 3-(3-РС6Н4)С6Н4 н С4 сн2 2-НО-З-МеО-СбИз ++
92 4-(бензимидазол-2- ил)С6¾ н С4 сн2 циклогексен-4-ил +
93 3-(3-РС6Н4)С6Н4 н С4 сн2 1-аллил-3-Ме-пиразол-4-ил ++
Пример Аг1 К Кольцевое соединение X К2 Анти-НСУ активность
94 4-(2-РС6Н4О)С6Н4 Н 04 СН2 5-Ме-фуран-2-ил +
95 3-(3-РС6Н4)С6Н4 Н 04 СН2 1-Е1-5-Ме-пиразол-4-ил ++
96 4-(бензимидазол-2- ил)С6¾ н 04 сн2 3^06¾ +
97 4-(2-РС6Н4О)С6Н4 н 04 сн2 1 -Е1-пиразол-4-ил ++
98 3-(3-С1СбН4)С6Н4 н 04 сн2 пиридин-2-ил +
Антивирусная активность: Выживаемость клеток по сравнению с необработанным контролем.
+++ соответствует <30% вирусного титра при 5 мкМ концентрации ++ соответствует <60% вирусного титра при 5 мкМ концентрации + соответствует <60% вирусного титра при 15 мкМ концентрации
- соответствует >60% вирусного титра при 15 мкм концентрации (наивысшая испытанная концентрация)
ΝΤ - не испытывалось
- 19 027810
Пример. Испытание на НСУ-индуцированную цитотоксичность.
Исследуемые соединения испытывают на цитотоксичность в дозах, использованных при испытании эффективности, с применением аналитического набора Рготеда СуЮТох 96 Νοη-ΚαάίοαεΙίνο СеЮЮхюПу Аккау кй (компания Рготеда, Майкоп. штат Висконсин). С помощью этого набора в культуральной среде определяют уровни лактатдегидрогеназы (ЬПН), которая выделяется из клеток вследствие потери целостности или некроза плазматической мембраны. Для этого исследования из 5-дневных культур, описанных выше при изучении уровней РНК, отбирают 50 мкл образцы культуральной среды. Исследуемые соединения, рассмотренные в этом описании, как правило, не цитотоксичны в испытанных дозах, и, как правило, не вызывают явного повреждения клеток Ний7-1.
В дозах, превышающих 5 мкМ, соединения, рассмотренные в этом описании, являются столь же эффективными, как и 100 Ед/мл ΙΡΝ-β-1ϋ, 10 и 80 мкМ РВУ (рибавирин), 10 и 15 мкМ МА, в отношении снижения уровня НСУ-опосредованного повреждения клеток, как это наблюдалось в псевдообработанных, НСУ-инфицированных необработанных контрольных образцах.
Пример. Комбинированное лечение инфекции НСУ.
Сообщалось, что для эффективного лечения пациентов, инфицированных НСУ, требуется как рибавирин (РВУ), так и интерферон-^-1Ь (ΙΡΝ-Ρ-16), потому что эта комбинация является более сильнодействующей, нежели каждый из лекарственных препаратов сам по себе. Соединения, рассмотренные в этом описании, испытывают для того, чтобы определить, повышают ли они эффективность РВУ, ΙΡΝ-β-16 или их комбинации. Используя протокол, описанный для определения индуцированного химическими агентами снижения внутриклеточной РНК НСУ, клетки обрабатывают с и без 10 Ед/мл ΙΡΝ-β-16 в комбинации с 2,5 мкМ или 10 мкМ соединений, рассмотренных в этом описании, и, для сравнения, с 10 мкМ МА и 80 мкМ рибавирина.
Результаты, представленные в табл. 1, указывают, что эти комбинации являются более эффективными, чем отдельные лекарственные препараты. Наиболее активным лекарственным препаратом является ΙΝΕ-β-1ϋ плюс МА, а затем, в порядке убывания, ΙΡΝ-β-16 плюс соединение 16, затем ΙΡΝ-β-16 плюс рибавирин. Следует отметить, что комбинация ΙΡΝ-β-16 с соединением 16 является более эффективной, чем получаемая с рибавирином, несмотря на то, что рибавирин используют в дозе, почти на порядок превосходящей дозу соединения 16.
Результаты, приведенные в нижеследующей таблице, показывают, что сочетание соединения 16 с ΙΡΝ-β-16 снижает уровни внутриклеточной РНК НСУ более эффективно, чем каждый из агентов по отдельности.
Пример Среднее количество копий НСУ/мкгРНК Кратность ингибирования
Необработанный контроль 9,3410й 1
ΙΓΝ-β-ΙΒ 1,9x10’ 48
16 (2,5 мкМ) 3,Зх106 3
+ΙΡΝ-β-11> 1,1x10’ 85
16 (10 мкМ) 2,0х106 5
+ΙΡΝ-β-16 9,6х104 97
МА (10 мкМ) 1,7х106 5
+ΙΡΝ-β-16 4,4х104 211
КВУ (80 мкМ) 5,0х106 2
+ΙΡΝ-β-16 1,8x10’ 52
Пример. Анализ репликации ВИЧ в РВМС.
Для сбора крови от здоровых доноров с их согласия используют 10 мл сенсибилизированные гепарином пробирки ΒΌ Уасйашет (№ по каталогу 367874). Для определения общего количества крови, отобранной у каждого донора, используют в среднем 10х106 РВМС на 10 мл пробирку с кровью. Исследуемые соединения оценивают с использованием обычных методов анализа жизнеспособноси ΙΕ-2 и фитогемагглютинин-стимулированных (РНА-стимулированных) культивированных человеческих мононуклеарных клеток периферической крови (РВМС) в присутствии исследуемых соединений. Исследуемые соединения оценивают с использованием обычных методов анализа репликации ВИЧ в таких клетках, инфицированных ВИЧ. Жизнеспособность контрольных клеток определяют посредством колориметрического анализа, например, ΜΤδ (компания Рготеда, № по каталогу 03582), а репликацию ВИЧ - измерением уровня антигена р24 капсида ВИЧ (5), используя набор для постановки ЕШЗА (твердофазный иммуноферментный анализ), поставляемый ΝΙ4 (Национальный институт здоровья, США). Замещенные пиперидинкарбоксамиды и пиперазинкарбоксамиды растворяют в диметилсульфоксиде (ΌΜδΟ) и используют в конечной концентрации 25 мкМ. Конечная концентрация ΌΜδΟ в среде для выращивания составляет 0,5%. Азидотимидин (ΑΖΤ), в конечной концентрации 1 мкМ, служит положительным контролем, в то время как ΌΜδΟ в отсутствие пиперидинкарбоксамида и пиперазинкарбоксамида или ΑΖΤ служит отрицательным контролем.
- 20 027810
Пример. Выделение и стимуляция мононуклеарных клеток периферической крови (РВМС).
Для анализа жизнеспособности клеток и оценки уровня Р24 после лечения пиперидинкарбоксамидом и пиперазинкарбоксамидом у здоровых доноров с их согласия производят отбор свежей крови с использованием 10 мл сенсибилизированных гепарином пробирок ВО Уасйашег (№ по каталогу 367874). Собранную кровь, содержащую около 10 РВМС, разбавляют посредством смешивания с равным количеством забуференного фосфатом физиологического раствора (РВ8) в 50 мл пробирке. После этого смесь кровь/РВ8 (например, 40 мл) медленно наносят на 10 мл среды для разделения лимфоцитов (компания Ьопга, ^а1кег8уШе, штат Мериленд), и центрифугируют при 2000 об/мин в течение 15 мин при комнатной температуре в центрифуге Весктап О8-6К без перерыва. РВМС удаляют из 50 мл центрифужной пробирки посредством отсасывания с использованием стерильной пастеровской пипетки, и помещают в 15 мл центрифужную пробирку, в которую до заполнения добавляют РВ8. Для удаления тромбоцитов пробирку центрифугируют при 2000 об/мин в течение 5 мин (с перерывом) для того, чтобы осадить свежевыделенные РВМС. Лейкоцитарную пленку, содержащую РВМС, осторожно удаляют и промывают 3 раза РВ8 при 1400 об/мин для удаления остаточных тромбоцитов. Супернатант с тромбоцитами декантируют, в пробирку добавляют РВ8 до 15 мл объема, и центрифугируют при 1400 об/мин в течение 5 мин, после чего супернатант декантируют, а дебрис суспендируют в 5 мл среды для выращивания (среда КРМ1-1640 плюс 10% фетальной бычьей сыворотки, 1% раствора Ь-глутамина и 1% раствора пенициллин/стрептомицин) с 20 Ед/мл 1Ь-2 и 4 мкг/мл РНА, и инкубируют в течение одного дня в культуральных колбах Т25 при температуре 37°С и 5% СО2 во влажной камере. Для стимуляции к клеткам добавляют 4 мкг/мл РНА и 20 Ед/мл 1Ь-2, и инкубируют в колбе Т25 течение 24 ч при температуре 37°С и 5% СО2 во влажной камере. Все стадии проводят в стерильных условиях.
Пример. Заражение РВМС ВИЧ-1 Ва1.
ВИЧ-1 Ва1 (№Н СПИД КекеагсЬ апй КеГегепсе Кеадей Ргодгат, Ргейепск, штат Мериленд) в концентрации 2 нг вируса на 106 клеток добавляли к стимулированным РВМС и инкубировали в течение 5 ч при температуре 37°С и 5% СО2 во влажной камере. Затем клетки трижды промывали средой.
Пример. Анализ ВИЧ р24.
р24 является компонентом капсида ВИЧ, и его обнаружение используют для указания на присутствие вируса. Для анализа р24, 106 клеток на обработку ресуспендируют в 1 мл питательной среды КРМ1 полного состава с 20 Ед/мл 1Ь-2. Клетки не обрабатывают или обрабатывают 1,25 мМ раствором азидодезокситимидина ^ΖΈ), ингибитора обратной транскриптазы ВИЧ (Лдта, Сент-Луис, штат Миссури), в качестве положительного контроля, или 1,25 мМ раствором диметилсульфоксида (ΌΜ8Θ), в качестве контрольного носителя, или исследуемыми соединениями в различных концентрациях. Далее, для анализа р24 зараженные и обработанные клетки высевают в 96-луночный планшет с И-образным дном в количестве 200000 клеток в 200 мкл среды с четырьмя повторами в течение 6 дней при температуре 37°С и 5% СО2 во влажной камере.
Супернатанты собирают через 6 дней после инфицирования и лизируют буфером для лизиса р24 (10% тритона-Х100 в воде ΜίΙΙί-Щ) при соотношении 1:10 на 96-луночном культуральном планшете. Затем упомянутый планшет инкубируют при температуре 37°С в течение 1 ч для того, чтобы лизировать вирионы. Можно использовать наборы р24 ЕЫ8А, полученные от компании 8А1С-Ргейегюк (Ргейепск, штат Мериленд), анализ проводят в соответствии с протоколом производителя. Вкратце, исследуемый планшет трижды промывают 200 мкл промывочного буфера и 100 мкл серийно разведенных стандартов (исходная культура предоставляется), или образец добавляют в лунки, и инкубируют в течение 2 ч при температуре 37°С. Затем планшет трижды промывают 200 мкл промывочного буфера, в каждую лунку добавляют 100 мкл раствора первичного антитела (по рекомендации производителя для конкретно используемого набора), и планшет снова инкубируют в течение 1 ч при температуре 37°С. Планшет снова промывают три раза, в каждую лунку добавляют 100 мкл раствора вторичного антитела (по рекомендации производителя для конкретно используемого набора) с последующим инкубированием в течение 1 ч при температуре 37°С. Планшеты окончательно промывают три раза, в каждую лунку добавляют 100 мкл раствора ТМВ (3,3',5,5'-тетраметилбензидин) (компания КРЬ, ОаБЬегкЬигд, штат Мериленд), и инкубируют в течение 30 мин при комнатной температуре в темноте. Реакцию останавливают 100 мкл 1 н раствора ЫаС1, и планшет считывают на планшет-ридере со светофильтрами на 450 нм и 650 нм. Для построения стандартной кривой и вычисления концентрации на основании показаний оптической плотности используют четырехпараметрический анализ.
Для выделения РНК и последующего исследования с проведением ПЦР в реальном масштабе времени, 3х106 инфицированных и промытых клеток ресуспендируют в питательной среде КРМ1 полного состава с 20 Ед на мл 1Ь-2, подвергают соответствующей обработке, как указано выше, и культивируют в 1 мл объеме в 12-луночных культуральных планшетах на протяжении 1-3 дней (в зависимости от временных точек проверки цикла репликации ВИЧ) при температуре 37°С и 5% СО2 во влажной камере.
Пример.
Ингибирование репликации ВИЧ определяют путем анализа влияния исследуемых соединений на уровни белка р24 капсида ВИЧ (6) в ВИЧ-инфицированных РВМС. Количество р24 определяют с помо- 21 027810 щью аналитического набора для проведения сэндвич-ЕЫ§А, полученного от компании 8А1С-Ргебег1ск СПИД (Ргебепск, штат Мериленд), анализ проводят в соответствии с протоколом производителя. Указанный набор включает сенсибилизированный планшет, стандарты, первичное и вторичное антитела. Для этого определения Р24 на следующий день после стимуляции РВМС 1Ь-2 и РИА, образцы стимулированных РВМС, содержащие около 106 клеток, центрифугируют в течение 5 мин при 2000 об/мин. Супернатант декантируют, в каждый осадок добавляют 2 нг исходной культуры вируса ВИЧ-Ва1, предоставленной в рамках программы №Н ΛΙΩδ Кеадеп! апб КеГегепсе Ргодгат, и клетки суспендируют в среде для выращивания до общего объема 1 мл, и инкубируют при температуре 37°С и 5% СО2 во влажной камере. Через 4 ч клетки промывают три раза 5 мл среды для выращивания при 2000 об/мин в течение 5 мин. Конечный осадок ресуспендируют в свежей среде для выращивания, к которой добавляют 20 Ед на мл 1Ь-2. 1 мл аликвоты суспензии РВМС, содержащие приблизительно 10 клеток на мл, помещают в 1,5 мл микроцентрифужные пробирки, и обрабатывают исследуемыми химическими соединениями. Для каждой обработки каждую из четырех 200 мкл аликвот (приблизительно 2x10 клеток) разливают в отдельные лунки 96-луночного планшета с И-образным дном, и инкубируют при температуре 37°С и 5% СО2 во влажной камере.
После 7 дня инкубации супернатант из каждой лунки переносят на 96-луночный планшет с плоским дном, и лизируют 1/10 объема 10% раствора Тритон-Х 100 в деионизированной Н2О при температуре 37°С в течение 1 ч. Исследуемые планшеты промывают три раза 200 мкл промывочного буфера. На сенсибилизированный антигеном 96-луночный планшет добавляют 100 мкл стандарты (40, 20, 10, 5, 2,5, 1,25, 0,625, 0,3125, 0,1563 и 0 нг/мл) контрольного лизата р24, а также по 100 мкл исследуемых образцов, разведенных 1:10 в 1% растворе В8А, 0,2% растворе Твин 20 в среде КРМ1. Планшеты инкубируют при температуре 37°С в течение 2 ч и три раза промывают 200 мкл промывочного буфера. В каждую лунку добавляют 100 мкл раствора первичного антитела, разведенного 1:150 в растворе 10% фетальной бычьей сыворотки, 2% нормальной мышиной сыворотки в КРМ1, и планшеты инкубируют при температуре 37°С в течение 1 ч. После трех промывок 200 мкл промывочного буфера добавляют 100 мкл вторичного антитела, разведенного 1:50 в 2% нормальной мышиной сыворотке, 5% N08 (нормальная козья сыворотка), 0,01% Твин 20 в среде КРМ1. Планшеты инкубируют при температуре 37°С в течение 1 ч и промывают три раза 200 мкл промывочного буфера. В каждую лунку добавляют 100 мкл ТМВ, полученного смешиванием равных объемов каждого компонента раствора, поставляемых с набором КРЬ (компания КРЬ, ОабЪегкЬигд, штат Мериленд), и планшет инкубируют при комнатной температуре в темноте в течение 30 мин. Реакцию останавливают добавлением 100 мкл 1 н раствора ΝηΟ и планшеты считывают на планшет-ридере со светофильтрами на 450 и 650 нм. Для построения стандартной кривой и вычисления концентрации на основании показаний оптической плотности используют четырехпараметрический анализ.
Пример.
РВМС инфицируют в течение пяти часов и трижды промывают питательной средой. Затем РВМС обрабатывают исследуемым соединением с концентрацией, например, 2, 10 и 25 мкМ. ВИЧ р24 измеряют через 7 дней после инфицирования. Исследуемые соединения исследуют на ингибирование ВИЧ р24. РВМС обрабатывают исследуемыми соединениями с концентрацией, например, 2, 10 и 25 мкМ, в течение трех дней. Анализ ΜΤδ проводят через 3 дня после обработки и показания считывают при 490 нм. Клетки оценивают на жизнеспособность в присутствии исследуемых соединений.
Пример.
Жизнеспособность клеток оценивают с помощью аналитического набора С.'е11ТПег 96® АЦиеоик Опе 8о1ибоп Се11 РгоРГегабоп Аккау (компания Рготеда, № по каталогу 03582), который оценивает метаболическую активность клеток путем измерения их способности восстанавливать ΜΤδ (3-(4,5диметилтиазол-2-ил)-5-(3-карбоксиметоксифенил)-2-(4-сульфофенил)-2Н-тетразолий) в присутствии феназинметосульфата в формазановый продукт, который имеет максимум оптической плотности при 490500 нм (4). Для этого исследования 106 стимулированных РВМС в 1 мл среды для выращивания, разделенные на аликвоты, вносят в 1,5 мл микроцентрифужные пробирки, и обрабатывают замещенными пиперидинкарбоксамидами и пиперазинкарбоксамидами в конечной концентрации 25 мкМ. Контроль обрабатывают лишь конечной концентрацией 0,5% ЭМ8О. который является растворителем исследуемого соединения. После обработки каждую лунку 96-луночного планшета с плоским дном в 4 повторах для контроля инокулируют 10 РВМС в 100 мкл среды для выращивания и каждым из замещенных пиперидинкарбоксамидов и пиперазинкарбоксамидов. После 6 дней инкубации планшета при температуре 37°С с 5% СО2 во влажной камере в каждую лунку добавляют 20 мкл раствора ΜΤδ (компания Рготеда, № по каталогу 03582), и планшет инкубируют в течение 4 ч при температуре 37°С с 5% СО2 во влажной камере, после чего планшет-ридером при 490 нм считывают развившуюся окраску.
Пример. Проникновение ВИЧ.
Для исследования проникновения ВИЧ стимулированные РВМС предварительно обрабатывают исследуемыми соединениями в требуемых концентрациях, и А2Т (контроль) в течение 1 и 4 ч. Затем РВМС инфицируют ВИЧ-Ва1 (2 нг/мл на 10 клеток) в течение 5 ч. Затем клетки промывают питательной
- 22 027810 средой и обрабатывают трипсином для удаления связанного вируса. Клетки промывают еще два раза и из образцов с помощью набора КНЕаку ΜίηίΚίΙ (компания О1адсп) выделяют РНК. Загрязнение ДНК удаляют обработкой ΌΝΑδβΙ (компания §1§та) при комнатной температуре в течение 15 мин с последующей денатурацией ΌΝΑδβΙ при температуре 70°С в течение 10 мин. Синтез кДНК осуществляют с помощью ΟδαιϊρΙ οΌΝΑ §црегт1х. Используя эту кДНК, проводят ПЦР с обратной транскрипцией в масштабе реального времени для количественного определения генов-мишеней, представляющих интерес. Для амплификации транскриптов ВИЧ используют следующие праймеры: ВИЧ ЬТК (длинный концевой повтор), прямой 5'-ТСААСТСАСТССССССТТ (последовательность δΕΟ ГО N0: 1) и обратный 5'АССТССССТТТСТСТТТСССТ (последовательность δΕΕ) ГО N0: 2) и С.АР1)Н - прямой 5'ТОАСТТСААСАОСОАСАСССАСТ (последовательность δΕΟ ГО N0: 3) и обратный 5'АССАСССТСТТССТСТАСССАААТ (последовательность δΕΟ ΙΌ N0:4). САОРН используют в качестве эндогенного контроля. Соединение примера 57 (10 или 25 мкМ) не влияет на проникновение ВИЧ.
Пример. Исследование обратной транскрипции ВИЧ.
Соединения, рассмотренные в этом описании, ингибируют кольца 2ЬТК. Стимулированные РВМС инфицируют ВИЧ-Ва1 (2 нг/мл на 106 клеток) в течение 5 ч. Затем в течение 72 ч после инфицирования РВМС обрабатывают соединениями в требуемых концентрациях и А2Т (контролем). После этого клетки трижды промывают питательной средой, и с помощью набора 0№аку Βίοοά αηά Т|55ие Κίΐ (компания 01адеп) из образцов получают геномную ДНК. В рамках исследования с помощью ПЦР в масштабе реального времени для амплификации колец 2ЬТК (побочные продукты обратной транскрипции) используют следующие праймеры: прямой 5'-ААСТАСССААСССАСТССТТААС (последовательность δΕΟ ΙΌ N0:5) и обратный 5'-СССАСАААТСААССАТАТСТТСТС (последовательность δΕΟ ΙΌ N0: 6). А2Т (1,25 мкМ, ингибитор обратной транскриптазы в качестве положительного контроля) существенно ингибирует обратную транскрипцию ВИЧ. На фиг. 2 и 4 показано, что соединения, рассмотренные в этом описании, существенно ингибируют обратную транскрипцию при каждой концентрации и, по-видимому, начинают ингибирование на уровне обратной транскрипции. Все результаты представляют два или три независимых эксперимента, причем каждый из них был выполнен с четырьмя повторами; * - р<0,05, ** р<0,01, *** - р<0,001 по сравнению с носителем (1,25 мкМ ΌΜδ0).
Не будучи связанными какой-либо теорией, в данном случае полагают, что неравномерность некоторых результатов по ВИЧ может быть связана с изменчивостью реакций нормальных человеческих РВМС от разных индивидуумов. Общее количество доноров (п)=3. Данные показывают, что соединения, рассмотренные в этом описании, могут быть использованы при лечении ВИЧ-инфекций. Кроме того, данные показывают, что соединения являются в целом не цитотоксическими. Хотя данные свидетельствуют о тенденции к снижению жизнеспособности клеток, различия между контролем и каждой из экспериментальных доз в анализе цитотоксичности не были статистически значимыми. Таким образом, не будучи связанным какой-либо теорией, полагают, что эффективность против ВИЧ-инфекции обусловлена не цитотоксичностью. Клетки были все еще жизнеспособны при самой высокой испытанной концентрации (25 мкМ).
Пример. Интеграция геномной ДНК ВИЧ.
Соединения, рассмотренные в этом описании, проявляют ингибирование при интеграции вируса. Стимулированные РВМС инфицируют ВИЧ-Ва1 (2 нг/мл на 106 клеток) в течение 5 ч. Затем в течение 72 ч после инфицирования РВМС обрабатывают соединениями в требуемых концентрациях и А2Т (контролем). После этого клетки трижды промывают питательной средой. Геномную ДНК из образцов получают с помощью набора О№аку Βίοοά αηά Т|55ие Κίΐ (компания 01адеп). Для количественного определения интегрированного вирусного генома вначале проводят А1и-ПЦР с последующим проведением ПЦР в масштабе реального времени. Для амплификации транскриптов ВИЧ используют следующие праймеры: ВИЧ ЬТК (длинный концевой повтор), прямой 5'-ТСААСТСАСТССССССТТ (последовательность δΕΟ ΙΌ N0: 1) и обратный 5'-АССТССССТТТСТСТТТСССТ (последовательность δΕΕ) ΙΌ N0: 2), С.АР1)11прямой 5'-ТСАСТТСААСАСССАСАСССАСТ (последовательность δΕΟ ΙΌ N0:3) и обратный 5'АССАСССТСТТССТСТАСССАААТ (последовательность δΕΟ ΙΌ N0: 4). САОРН используют в качестве эндогенного контроля. А2Т (1,25 мкМ, ингибитор обратной транскриптазы) существенно ингибирует интеграцию ВИЧ. На фиг. 3 показано, что соединение примера 57 существенно ингибирует интеграцию вируса при каждой концентрации. Все результаты представляют два проведенных независимых эксперимента; * - р<0,05, ** - р<0,01, *** - р<0,001 по сравнению с носителем (1,25 мкМ ΌΜδ0).
Пример. Транскрипция ВИЧ.
Соединения ингибируют на уровне транскрипции вируса. Стимулированные РВМС инфицируют ВИЧ-Ва1 (2 нг/мл на 10 клеток) в течение 4-6 ч. Затем в течение 72 ч после инфицирования РВМС обрабатывают соединениями в требуемых концентрациях и А2Т (контролем). После этого клетки трижды промывают питательной средой и геномную ДНК из образцов получают с помощью набора ИКЕаку ΜίηίΚίί (компания 01адец). ПЦР с обратной транскрипцией в масштабе реального времени проводят для выявления зрелых ранних (Кеу) и поздних транскриптов вируса (Сад и Εην). Для амплификации транскриптов ВИЧ используют следующие праймеры: Ре\\ прямой 5'-ТССТТСССАСТТАТСТСССАССАТ (после- 23 027810 довательность δΕΟ ΙΌ ΝΟ: 7) и обратный 5'-ТСССАСААСТТССАСААТССТССТ (последовательность δΕΟ ΙΌ ΝΟ: 8); Еиу, прямой 5'-АССАССАТТСТССААСТТСТСССА (последовательность δΕΟ ΙΌ ΝΟ: 9) и обратный 5'-ТСССАТТСАССААССТААСАССАС (последовательность δΕΟ ΙΌ ΝΟ: 10); Сад, прямой 5'-АСАСААСССТТТСАССССАСААСТ (последовательность δΕΟ ΙΌ ΝΟ: 11) и обратный 5'ТССАСТССАТССАСТСТАТСССАТ (последовательность δΕΟ ΙΌ ΝΟ: 12); САРОН, прямой 5'ТСАСТТСААСАСССАСАСССАСТ (последовательность δΕΟ ΙΌ ΝΟ:3) и обратный 5'АССАСССТСТТССТСТАСССАААТ (последовательность δΕΟ ΙΌ ΝΟ: 4). САОРН используют в качестве эндогенного контроля. А2Т (1,25 мкМ, ингибитор обратной транскриптазы) существенно ингибирует транскрипцию ВИЧ. На фиг. 5А, 5В и 5С показано, что соединение примера 57 существенно ингибирует транскрипцию вируса при каждой концентрации. Все результаты представляют два проведенных независимых эксперимента; *** - р<0,001 по сравнению с носителем (1,25 мкМ ^МδΟ).
Пример. Анализ анти-ВУОУ эффективности.
Клетки носовой раковины (ВТ) крупного рогатого скота, поддерживаемые в виде монослоев в одноразовом лабораторном оборудовании для культуры клеток, используют для исследования противовирусной эффективности. Перед исследованием культуры клеток-хозяев высевают на 96-луночные культуральные планшеты, и используют их приблизительно через 48 ч после посева. Клетки культивируют до получения монослоев с 80-90% слиянием. Питательная среда для выращивания (СМ) и поддерживающая среда (ММ) содержат модифицированную по способу Дульбекко среду Игла (^МΕМ) с Ь-глутамином (АТСС (Американская коллекция типовых культур), № по каталогу 30-2002), 10% лошадиной сыворотки и раствор пенициллин/стрептомицин (10000 единиц пенициллина и 10000 мкг стрептомицина на мл, компания ЬгТе Тескио1од1е8, № по каталогу 15140-122 или аналогичные) до конечной концентрации 100 единиц пенициллина и 100 мкг стрептомицина в среде.
Используют вирус бычьей вирусной диареи, штамм ΝΆΌΌ из исходной культуры ΕδΕΙ вируса с высоким титром. Перед использованием отбирают и оттаивают аликвоты исходной культуры вируса, хранящиеся в морозильной камере (-70°С). ВУОУ разбавляют в поддерживающей среде (ММ) для получения 0,1 множественности заражения (Ι^ΟΙ).
Пример. Исследование цитопатогенного эффекта (СРΕ).
СРΕ означает дегенеративные изменения в культуре ткани ВТ, вызванные ВУОУ в результате его размножения. Клеточные культуры ВТ промывают РВδ, к клеткам добавляют 100 мкл аликвоты ММ и инкубируют в СО2-инкубаторе в течение 2 ч. После инкубации ММ удаляют; клетки снова промывают РВδ и покрывают 100 мкл исследуемых соединений различной концентрации. Планшеты инкубируют в СО2-инкубаторе в течение 48-72 ч. По окончании инкубации планшеты оценивают на индуцированное исследуемыми соединениями ингибирование СРЕ с использованием 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5дифенилтетразолия бромида (желтый тетразол, МТТ). Этот метод представляет собой колориметрический анализ, которым измеряют активность ферментов, восстанавливающих МТТ до формазанового красителя фиолетового цвета. СРЕ подтверждают с помощью сложного инвертированного микроскопа.
Перед исследованием СРЕ проводят испытания исследуемых соединений для определения самой высокой нецитотоксической концентрации. Клеточные культуры промывают РВδ, покрывают 100 мкл ММ и инкубируют в течение 2 ч. После инкубации ММ заменяют 100 мкл аликвотами исследуемых соединений различной концентрации. Испытание на цитотоксичность включает контроль ΌΙΗδΟ (доза не должна превышать 0,5%). Планшеты инкубируют в СО2-инкубаторе в течение 48-72 ч. Токсичность оценивают с помощью исследования МТТ. Исследования и анализы проводят дважды с двумя повторами. При получении результатов, показывающих существенное различие, испытания и анализа повторяют еще два раза.
Пример. Исследование МΤδ (жизнеспособности клеток).
Исследуемые соединения оценивают также с помощью обычного исследования цитотоксичности. Неинфицированные и стимулированные РВМС высевают в 96-луночный планшет с плоским дном в количестве 200000 клеток в 200 мкл объем среды с четырьмя повторами в течение 3 дней при температуры 37°С с 5% СО2 во влажной камере. В каждую лунку планшета добавляют 20 мкл реагента СеИТйег 96 АОиеои8 Οικ δо1и!^ои Реадеи! (компания Рготеда) и планшет инкубируют в течение 3 ч при температуре 37°С с 5% СО2 во влажной камере. Затем планшет считывают на планшет-ридере при 490 нм. После этого показания снимают в процентах жизнеспособности по отношению к контролю. Следует понимать, что отсутствие цитотоксичности подтверждает вывод о том, что активность экспериментального соединения в снижении титра вируса является специфической для вирусного заболевания.
Пример.
Соединения и их антивирусная активность, представленные в табл. 4, рассмотрены в этом описании. Следует понимать, что в каждом из соединений, рассмотренных в этом описании, каждый атом содержит полную валентность, где каждый оставшийся атом представляет собой водород. Соединения всех примеров, испытанные в множественных дозах, демонстрируют реакцию зависимости доза-эффект. Приведенные в качестве примера соединения и соответствующая антивирусная активность показаны в нижеследующих таблицах.
- 24 027810
Пример Аг1 К Кольцевое соедине-ние X к2 Анти-ВУОУ активность
57 З-индол-2-ил-РЬ Н С4 С(О) 6=6-6¾ +++
58 (427) 4-бензимидазол-2- ил-РН Н С4 сн2 3-МеО-РЬ +++
59 (252) 4-бензимидазол-2- ил-РН н С4 СН2 5-Е(- фуран-2- ил ++
60 (308) З-индол-2-ил-РЬ н С4 С(О) тиазол-5- ил +++
65 (Р107/765) 4-бензимидазол-2- ил-ΡΙι н С4 СН2 З-МеО-РЬ +++
99 4-(бензимидазол- 2-ил)РЬ н С4 — ΠΪ ¢9 +++
100 (2А) 3-(индол-2-ил)РЬ н С4 зс и 09 +++
101 4-(2-Р-РЬО)РЬ н С4 ψ ТЯ5 ++
102 (4А) 3-(3-Р-РЬ)РЬ н С4 — Д2 Я5 +++
Пример Аг1 К Кольцевое соедине-ние X к2 Анти-ВУОУ активность
103 З-Вг-РН н С4 — и? +
Антивирусная активность: Выживаемость клеток по сравнению с необработанным контролем.
+ соответствует выживаемости <50 клеток при 10 мкМ и улучшенной выживаемости по сравнению с необработанным контролем ++ соответствует выживаемости >50, но <75 клеток при 10 мкМ +++ соответствует выживаемости >75 клеток при 10 мкМ
Пример Аг1 К Кольцевое соединение X к2 Анти-Βνϋν активность
104 (4В) 4 -(бенз и мидаз о л 2-ил)РЬ н N1 сн2 хинолин-8- ил +++
105 4 -(бенз и ми даз о л 2-ил)РЬ н N1 сн2 5-Е(-фуран- 2-ил +
106 3-(индол-2-ил)РЬ н N1 С(О) 6=6-6¾ +
107 3-(индол-2-ил)РЬ н N1 С(О) тиазол-5-ил +++
108 3-Вг-РИ н N1 ~~ X П? <4 +
Антивирусная активность: выживаемость клеток по сравнению с необработанным контролем. + соответствует выживаемости <50 клеток при 10 мкМ и улучшенной выживаемости по сравнению с необработанным контролем ++ соответствует выживаемости >50, но <75 клеток при 10 мкМ +++ соответствует выживаемости >75 клеток при 10 мкМ
Пример. Исследование цитотоксичности на фибробластах легкого человека (клетки МКС-5). Клеточные культуры МКС-5 промывают ΡΒδ, и инкубируют с 100 мкл аликвотами питательной среды (ЕМЕМ (минимальная поддерживающая среда Игла) с 2% фетальной бычьей сыворотки). После 2 ч инкубации среду удаляют, клетки промывают ΡΒδ, обрабатывают 100 мкл среды, содержащей исследуемое соединение в различных концентрациях, и инкубируют в течение еще 72 ч. После этой инкуба- 25 027810 ции планшеты оценивают на клеточную токсичность с использованием исследования МТТ. Результаты представляют в виде процентного снижения жизнеспособности клеток, где 100% соответствует контролю ΌΜ8Θ без исследуемого соединения.
Пример. Антикоронавирусное исследование.
Клетки МКС-5 с 70-80% слиянием промывают забуференным фосфатом физиологическим раствором (РВ8), инфицируют 100 мкл аликвотами среды, содержащей штамм 229Е коронавируса человека с 0,1 ΜΟΙ, с последующим инкубированием в СО2-инкубаторе в течение 2 ч для осуществления адсорбции вируса. Температура инкубации составляет 35°С±2°С. После инкубации вирусный инокулят удаляют, инфицированные клетки промывают РВ8, обрабатывают 100 мкл среды, содержащей исследуемое соединение в различных концентрациях, и инкубируют в течение еще 72 ч. По окончании инкубации планшеты оценивают на СРЕ, индуцированный штаммом 229Е коронавируса, с помощью колориметрического анализа МТТ (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолия бромид). Это исследование позволяет оценить жизнеспособность клеток путем оценки способности ферментов, высвобожденных из поврежденных клеток, восстанавливать тетразолиевый краситель до его формазанового производного пурпурного цвета. Результаты представлены как процент ингибирования СРЕ, где 100% ингибирование СРЕ, вызванного вирусом, приблизительно соответствует среднему контроля ΌΜ8Ο без исследуемого соединения. Во всех исследованиях конечная концентрация ΌΜ8Ο в среде составляет 0,5%. Исследование проводят в 96-луночных планшетах для клеточных культур с плоским дном.
Каждое соединение показало улучшенную жизнеспособность клеток по сравнению с необработанным вирусным контролем. Результаты приведенных в качестве примера соединений приведены в нижеследующей таблице.
Пример СУ активность
100 (2А) >50% при 4 мкМ
102 (4А) >30% при 4 мкМ
104 (4В) >70% при 14 мкМ
ЛИСТИНГ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ <110> НОВАДРАГ, ЭлЭлСи <120> ГЕТЕРОЦИКЛИЧЕСКИЕ КАРБОКСАМИДЫ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ВИРУСНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ <130> 45988-701867 <140>
<141>
<150> 61/779,595 <151> 2013-03-13 <150> 61/695,869 <151> 2012-08-31 <160> 19 <170> РаЕепЕ1п νθΓΞίοη 3.5 <210> 1 <211> 18 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический праймер <400> 1
ЕсаадЕдадЕ дсссддЕЕ 18
- 26 027810
<210> 2 <211> 21 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность
<220> <223> Описание искусственной последовательности: Синтетический праймер
<400> 2 адсЕссддЕЕ ЕсЕсЕЕЕсдс Е 21
<210> 3 <211> 23 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность
<220> <223> Описание искусственной последовательности: Синтетический праймер
<400> 3 ЕдасЕЕсаас адсдасассс асЕ 23
<210> 4 <211> 24 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность
<220> <223> Описание искусственной последовательности: Синтетический праймер
<400> 4 ассасссЕдЕ ЕдсЕдЕадсс аааЕ 24
<210> 5 <211> 23 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность
<220> <223> Описание искусственной последовательности: Синтетический праймер
<400> 5 аасЕадддаа сссасЕдсЕЕ аад 23
<210> 6 <211> 24 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность
<220> <223> Описание искусственной последовательности: Синтетический праймер
<400> 6 сссасаааЕс ааддаЕаЕсЕ ЕдЕс 24
<210> 7 <211> 24 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность
<220> <223> Описание искусственной последовательности: Синтетический праймер
- 27 027810 <400> 7
ЕссЕЕддсас ЕЕаЕсЕддда сдаЕ 24 <210> 8 <211> 24 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический праймер
<400> 8 ЕсссадаадЕ ЕссасааЕсс ЕсдЕ 24
<210> 9 <211> 24 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность
<220> <223> Описание искусственной последовательности: Синтетический праймер
<400> 9 асдаддаЕЕд ЕддаасЕЕсЕ ддда 24
<210> 10 <211> 24 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность
<220> <223> Описание искусственной последовательности: Синтетический праймер
<400> 10 ЕддсаЕЕдад саадсЕааса дсас 24
<210> 11 <211> 24 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность
<220> <223> Описание искусственной последовательности: Синтетический праймер
<400> 11 ададааддсЕ ЕЕсадсссад аадЕ 24
<210> 12 <211> 24 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность
<220> <223> Описание искусственной последовательности: Синтетический праймер
<400> 12
ЕдсасЕддаЕ дсасЕсЕаЕс ссаЕ 24 <210> 13 <211> 21 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность
- 28 027810 <220>
<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический праймер
<400> 13 аддЕЕЕадда ЕЕсдЕдсЕса Е 21
<210> 14 <211> 27 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность
<220> <223> Описание искусственной последовательности: <400> 14 сасссЕаЕса ддсадЕасса сааддсс Синтетический зонд 27
<210> 15 <211> 19 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность
<220> <223> Описание искусственной последовательности: Синтетический праймер
<400> 15 Едсддаассд дЕдадЕаса 19
<210> 16 <211> 19 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность
<220> <223> Описание искусственной последовательности: Синтетический праймер
<400> 16 дааддЕдаад дЕсддадЕс 19
<210> 17 <211> 20 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность
<220> <223> Описание искусственной последовательности: Синтетический праймер
<400> 17 даадаЕддЕд аЕдддаЕЕЕс 20
<210> 18 <211> 19 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность
<220> <223> Описание искусственной последовательности: Синтетический праймер
<400> 18
ЕсЕдсддаас сддЕдадЕа 19 <210> 19 <211> 19 <212> ДНК
- 29 027810 <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический праймер <400> 19
ЕсаддсадЕа ссасааддс 19
Приведенные ниже публикации и каждая дополнительная публикация, цитируемая в настоящем документе, включены в настоящее описание посредством ссылки.
ЗеркотеНг, АГО8 - (Ьейгз! 20 уеагз N Еп§П Мед 344(23): 1764-72 (2001).
\Уе133, Ноте !оез ШУ саизе АГО8? Заепсе 260(5112): 1273-9 (1993)
ПуЬи1 е( а1, Рапе1 оп СПшса1 РгасНсев Гог Тгеа(теп( οί Ηΐν ''(тш!с1|пса Гог изт§ апНге1гоу(га1 ааетя апюп° Н1\' -ίηίεείε! а!и1(5 ап! а!о1езсеп(з Апп 1п(егп Ме! 137(5 Ρί 2):381-433 (2002).
Маг!пег-Р(са!о е( а1., Лпигеггоуп'а! гез15(апсе !шап° зиссеззГи1 (Ьегару оГ Ьитап 1ттипо!ейс1епсу νίηΐδ (уре 1 тГесйоп” Ргос Ка! Асад 8с1 ГГ8А 97(20): 10948-10953 (2000).
Согу е! а1., Ызе оГ ап ачиеоиз зо1иЫе (ейагоЬит/Гогтагап аззау Гог се11 @готе(Ь аззауз ίη сиНиге Сапсег Соттип 3(7) 207-212 (1991); Ι88Ν 0955-3541, РМГО 1867954.
НазЬЫа е1 а1, Моге геПаЫе ίΐίβρηοδίδ оПпГесйоп теПЬ Ьитап 1ттипо!ейс1епсу νίιχίδ (уре 1 (НГУ-1) Ьу !е(есйоп оГ апйЬойу 1уСгз (о ро1 ап! .рар ргсйетз оГ НГУ-1 ап! р24 апруеп оГН1У-1 ίη ийпе, заП\а, ап!/ог зегит τνίιΠ Ιϊίρΐιΐν зепзйтее ап! зреайс епгуте пптшюаззау йттипс сотр1ех (гапзГег епгуте 1ттипоаззау) .1 СПп ЬаЬ Апа1 (5):267-86 (1997). ЕггаШт ίη: ί СПп ЬаЬ Апа1 (1)76 (1998).
Надетеуег е( а1„ Βίο^βηεβίδ ап! йупапйсз οί (Не согогтапаз герПсапхе з(гис(игез
ХПгизез 4( 11) 3245-69 (2012).
Ве1оигаг! е( а1, МесПатзтз оГ согопааагиз се11 еп(гу п1есПа(с! Ьу (Не \ага зр1ке рго(ет УПгизез 4(6): 1011-33 (2012).
8ай)а εΐ ак, ТНе то1еси1аг Ь1о1о§у οί 8АК8 согопау1ГизАпп Ν Υ Аса! Зек 1102:26-38 (2007).
33+155 е( а1., СогопаУ1гиз ра(Ьо§епез1з Α!ν Υίηΐδ Кез 81 85-164 (2011).
КирГегзсЬтЫ!, Ьтсгрту скзеазса. КезеагсПегз зсгатЫе (о ип!егз(ап! сате1 соппесНоп (оМЕКЗ 8с1епсе 341(6147) 702 (2013).
Ьи е( а1., Μίϋΐε Еаз1 гезртаЮгу зупйготе согопаапиз (МЕКЗ-СоУ): сЬаПепцез ίη ϋειιΐίίνίπρ ί(8 зоигсе ап! соп1го1Ппу Нз вргеа! ЬПсгоЬез 1пГес( 15(8-9):625-9 (2013).

Claims (35)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Дозированная лекарственная форма для лечения вирусной инфекции, которая содержит:
    (а) терапевтически эффективное количество одного или более соединения(ий), представленного(ых) формулой или фармацевтически приемлемой соли такого соединения; где Κ представляет собой Н и варианты комбинаций Аг1, X и Κ2 представлены ниже:
    Варианты комбинаций Аг' X К* 16 3-(3-РСЙН4)СЙН4 сн7 хинолин-8-ил 17 4-(3-МеСбН4)СбН4 СН7 4-ОН-3-МеО-СбН3 21 4-(2-РС„Н4О)С„Н4 сн7 2-ОН-4-МеО-СйН3 22 2-(3-МеОС6Н4)СбН4 сн7 хинолин-8-ил 23 4-(бензимидазол-2- ил)С4Н4 сн2 2-МеО-С6Н4 24 2-(3-МеОС6Н4)СбН4 сн7 4-ОН-3,5-Ме7-СЩ> 25 2-(3-МеОС6Н4)СйН4 сн7 2-МеО-СбНд 26 3-(3-РСЙН4)СЙН4 сн7 4-ОН-С6Н4 27 3-(3-РС6Н4)С6Н4 сн2 2-(я-Ви)-имидазол-4- ил 28 4-(2-РС6Н4О)С6Н4 сн2 2,3-метилендиокси- С6н, 29 3-(3-РСЙН4)СЙН4 сн7 3-ОН-СбН4 30 3-(3-РСЙН4)СЙН4 сн, 2-ОН-б-МеО-СДЬ 31 3-(3-С1С4Н4)С4Н4 сн7 4-ОН-С6Нд 32 2-(3-МеОС6Н4)С6Н4 СН, 3-Ме-4-МеО-С6Н3 33 2-(3-МеОС6Н4)С6Н4 сн7 3-МеО-С6Н4 34 2-(3-МеОСйН4)С6Нд сн7 4-Р-2-МеО-С6Н3 38 3-(2-индолил)С(,Н4 сн2 (1 -/-Рг-пиразол-4'Ил) 39 2-(3-МеОС6Н4)С6Н4 сн2 (-Ви 40 3-(2-фурил)СйН4 сн? хинолин-8-ил 41 3-(2-Ме-1,3,4-тиазол5-ил)С^Н4 С(=О) 2-фурил 42 3-(3-С1С6Н4)С6Н4 сн7 4-ОН-3-МеО-С6Н3 57 З-индол-2-ил-СпНд С(О) с=с-сн3
    - 31 027810
    Варианты комбинаций Аг1 X Ц2 58 4-бензимидазол-2-ил- С6Н4 сн2 3-МеО-С6Н4 59 4-бензимидазол-2- илСбНд. сн2 5-Е1-фуран-2-ил 60 3-ишюл-2-ил-СбН4 С(О) тиазол-5-ил 61 4-(2-РСйН4О)С<;Н4 СН, 2-НО-3-МеО-С6Н3 62 2-(3-МеОС6Н4)СйН4 сн, 2-НО-3-МеО-С6Н, 63 3-(3-С1СЙН4)СЛН4 сн, 2-НО-3-МеО-САН3 64 4-(2-РС6Н4О)С6Н4 сн, Εΐ 65 4-бензимидазол-2-ил- СКН4 сн2 3-МеО-С6Н4 66 4-(3,5-Ме2-пиразол-1ил)СбН4 СН2СН=СН( 2-МеО-С6Н4 68 3-(3-РС6Н4)С6Н4 сн2 2-Е1-5-Ме-имидазол-4- ил 69 3-(3-МеОС6Н4)СпН4 сн, СН=С(Ме), 70 4-(2-РС6Н4О)С6Н4 сн, 3-МеО-С6Н4 71 2-(3-МеОСйН4)СбН4 сн, нафта-1-ил 72 3-(3-С1С6Н4)С6Н4 сн2 1 -аллил-З-Ме-пиразол4-ил 73 4-(2-РС6Н4О)С6Н4 сн2 1-Рг-5-Ме-пиразол-4- ил 74 4-(2-РС6Н4О)СпН4 СН, Ме 75 4-(2-РСйН4О)СбН4 — 1 -Е1-пиперидин-4-ил 76 3-(3-РС6Н4)С6Н4 сн2 1-(1-Рг)-3,5-Ме2- пиразол-4-ил 77 2-РНО-пиридин-5-ил сн, РИ 78 3-(3-С1СйН4)СйН4 СН, 1-Е1-пиразол-4-ил 79 3-(3-РС6Н4)С6Н4 сн2 3,5,6-Мез-пиразин-2- ил 80 2-(3-МеОС6Н4)С6Н4 сн2 1 -Рг-5-Ме-пиразол-4ил 81 4-(2-РСйН4О)С6Н4 сн, 2-НО-5-МеО-Сг,Н3 82 3-(3-С1СЙН4)С,,Н4 СН, 1-(1-Рг)-пиразол-4-ил 83 2-РНО-пиридин-5-ил сн, 5-С1-тиен-2-ил 84 3-(3-РСЙН4)С6Н4 СН, 2,3-(МеО),-СцН, 85 4-(2-РС6Н4О)СйН4 сн, 4-НО-3-МеО-С6Н, 86 4-(2-РС6Н4О)С6Н4 сн, 5-0-Ви)-пиразол-3-ил 87 2-(3-МеОС6Н4)С6Н4 сн2 3,5,6-Мез-пиразин-2- ил 88 2-(3-МеОС6Н4)С6Н4 сн, 2,5-Ме,-СбН3 90 3-(3-РС6Н4)С6Н4 сн2 бензо-2,1,3-тиадиазол5-ил 91 3-(3-РС6Н4)С6Н4 сн, 2-НО-З-МеО-СбН, 92 4-(бензимидазол-2- ил)С,,Н4 сн2 циклогексен-4-ил 93 3-(3-РС6Н4)С6Н4 сн2 1 -аллил-3-Ме-пиразол4-ил
    Варианты комбинаций Аг' X Ю 94 4-(2-РС6Н4О)СйН4 СН, 5-Ме-фуран-2-ил 95 3-(3-РС6Н4)С6Н4 сн2 1-Ет-5-Ме-пиразол-4- ил 96 4-(бензимидазол-2- ил)СаН4 сн2 3-РС6Н4 97 4-(2-РСйН4О)СйН4 сн, 1 - Е1-пиразол-4-ил 98 3-(3-С1СйН4)СйН4 сн, пиридин-2-ил 99 4-(бензимидазол-2- ил)РИ Ме 63 100 3-(индол-2-ил)РИ ✓Αν Ме 101 4-(2-Р-РЬО)РИ ✓А^ М е оЗ ЧЛй 102 3-(3-Р-РН)РН ✓Αν Ме 103 3-Вг-РН ✓Αν Ме
    (Ь) один или более фармацевтически приемлемый(ых) носитель(ей), наполнитель(ей) или разбавитель(ей) либо их комбинацию, причем вирусная инфекция выбрана из группы, которую составляют инфекция, вызванная вирусом гепатита С, инфекция, вызванная вирусом иммунодефицита человека, инфекция, вызванная вирусом бычьей вирусной диареи, инфекция, вызванная коронавирусом, инфекция, вызванная штаммом коронавируса, который вызывает тяжелый острый респираторный синдром.
  2. 2. Дозированная лекарственная форма по п.1, где Аг1 представляет собой 2-(3-МеОС6Н4)С6Н4.
  3. 3. Дозированная лекарственная форма по п.1, где Аг1 представляет собой 2-РНО-пиридин-5-ил.
  4. 4. Дозированная лекарственная форма по п.1, где Аг1 представляет собой 3-(3-С1С6Н4)С6Н4.
  5. 5. Дозированная лекарственная форма по п.1, где Аг1 представляет собой 3-(3-РС6Н4)С6Н4.
  6. 6. Дозированная лекарственная форма по п.1, где Аг1 представляет собой 4-(2-РС6Н4О)С6Н4.
  7. 7. Дозированная лекарственная форма по п.1, где Аг1 представляет собой 4-(бензимидазол-2- 32 027810 ил)С6Н4.
  8. 8. Дозированная лекарственная форма по любому из пп.1-7, где X представляет собой ацил.
  9. 9. Дозированная лекарственная форма по любому из пп.1-7, где X представляет собой связь.
  10. 10. Дозированная лекарственная форма по любому из пп.1-7, где X представляет собой СН2СН=СН(Е).
  11. 11. Дозированная лекарственная форма по любому из пп.1-7, где X представляет собой СН2.
  12. 12. Дозированная лекарственная форма по п.11, где К2 представляет собой 2-НО-3-МеО-С6Н3.
  13. 13. Дозированная лекарственная форма по п.11, где К2 представляет собой 2-МеО-С6Н4.
  14. 14. Дозированная лекарственная форма по п.11, где К2 представляет собой 3-МеО-С6Н4.
  15. 15. Дозированная лекарственная форма по п.11, где К2 представляет собой 4-ОН-3-МеО-С6Н3.
  16. 16. Дозированная лекарственная форма по п.11, где К2 представляет собой 4-ОН-С6Н4.
  17. 17. Дозированная лекарственная форма по п.11, где К2 представляет собой хинолин-8-ил.
  18. 18. Дозированная лекарственная форма по п.1, причем вирусная инфекция представляет собой инфекцию, вызванную вирусом гепатита С.
  19. 19. Дозированная лекарственная форма по п.1, причем вирусная инфекция представляет собой инфекцию, вызванную вирусом иммунодефицита человека.
  20. 20. Дозированная лекарственная форма по п.1, причем вирусная инфекция представляет собой инфекцию, вызванную вирусом бычьей вирусной диареи.
  21. 21. Дозированная лекарственная форма по п.1, причем вирусная инфекция представляет собой инфекцию, вызванную коронавирусом.
  22. 22. Дозированная лекарственная форма по п.1, причем вирусная инфекция представляет собой инфекцию, вызванную штаммом коронавируса, который вызывает тяжелый острый респираторный синдром.
  23. 23. Способ лечения вирусной инфекции в организме животного-хозяина, который включает стадию введения животному-хозяину терапевтически эффективного количества одной или более дозированной(ых) лекарственной(ых) формы(форм) по любому из пп.1-7.
  24. 24. Способ по п.23, причем животное-хозяин представляет собой человека.
  25. 25. Способ по п.23, причем вирусная инфекция представляет собой инфекцию, вызванную вирусом гепатита С.
  26. 26. Способ по п.23, причем вирусная инфекция представляет собой инфекцию, вызванную вирусом иммунодефицита человека.
  27. 27. Способ по п.23, причем вирусная инфекция представляет собой инфекцию, вызванную коронавирусом.
  28. 28. Способ по п.23, причем вирусная инфекция представляет собой инфекцию, вызванную штаммом коронавируса, который вызывает тяжелый острый респираторный синдром.
  29. 29. Способ по п.23, причем животное-хозяин представляет собой крупный рогатый скот.
  30. 30. Способ по п.23, причем вирусная инфекция представляет собой инфекцию, вызванную вирусом бычьей вирусной диареи.
  31. 31. Дозированная лекарственная форма по п.1, содержащая соединение, представленное формулой или фармацевтически приемлемую соль такого соединения; где варианты комбинаций Аг1, X и К2 представлены ниже:
    - 33 027810
    Варианты. комбинаций Аг1 X I К.2 16 3-(3-РСЙН4)СЙН4 СН, хинолин-8-ил 21 4-(2-РСйН4О)СйН4 СН, 2-ОН-4-МеО-СйН, 22 2-(3-МеОСйН4)СйН4 СН, хинолин-8-ил 23 4-(бензимидазол-2- ил)СйН4 сн2 2-МеО-СйН4 24 2-(3-МеОСйН4)СйН4 СН, 4-ОН-3,5-Ме,-С6Н, 25 2-(3-МеОСйН4)СйН4 СН, 2-МеО-СйН4 26 3-(3-РСЙН4)СЙН4 СН, 4-ОН-СйН4 27 3-(3-РС6Н4)С6Н4 СН2 2-(п- Ви)-имидазол-4ил 28 4-(2-РС6Н4О)С6Н4 СН2 2,3-метилендиокси- сйн, 57 3-индол-2-илСйН4 С(О) С=С-СНз 58 4-бензимид азол-2илСйН4 СН2 3-МеО-С6Н4 59 4-бензимидазол-2- илСйН4 СН2 5-Е1-фуран-2-ил 6! 4-(2-РСйН4О)СйН4 СН, 2-НО-3-МеО-СйН, 62 2-(3-МеОСйН4)СбН4 СН, 2-НО-3-МеО-СйН, 63 3-(3-С1СЙН4)СЙН4 СН, 2-НО-3-МеО-СйН, 64 4-(2-РСйН4О)СйН4 СН, Ег 65 4-бензимидазол-2- илСйН4 сн2 3-МеО-С6Н4 69 3-(3-МеОСйН4)СйН4 сн2 СН=С(Ме), 74 4-(2-РСйН4О)СйН4 СН, Ме 75 4-{2-РСйН4О)СйН4 — 1 - Е1-пиперидин-4-ил 76 3-(3-РС6Н4)С6Н4 сн2 1-<д-Рг}-3,5-Ме2- пиразол-4-ил 77 2-РЬО-пиридин-5-ил сн2 РН 78 3-(3-С1СЙН4)СЙН4 сн, 1-Е1-пиразол-4-ил 79 3-(3-РС6Н4)С6Н4 сн2 3,5,6-Мез-пиразин-2- ил 81 4-(2-РСйН4О)СйН4 сн, 2-НО-5-МеО-СйН, 83 2-Р11О-пиридин-5-ил сн, 5-С1-тиен-2-ил 85 4-(2-РСйН4О)СйН4 сн, 4-НО-3-МеО-СйН, 87 2-(3-МеОСйН4)С6Н4 сн2 3,5,6-Мез-пиразин-2ил 91 3-(3-РСЙН4)СЙН4 сн, 2-НО-3-МеО-СйН, 93 3-(3-РСЙН4)СЙН4 сн2 1-аллил-З-Ме-пиразол4-ил 95 3-(3-РС6Н4)СЙН4 сн2 1-Е1-5-Ме-пиразол-4- ил 97 4-(2-РСйН4О)СйН4 сн, 1-Е1-пиразол-4-ил 99 4-(бензимидазол-2- ил)РЬ «Λ».· Ме о5
    Варианты, комбинаций Аг1 X К2 100 3-(индол-2-ил)РН М е 101 4-(2-Ρ-Ρ1ιΟ)Ρ1ι Ме 05 102 3-(3-Ρ-Ρ1ι)ΡΗ ✓Λν Ме <4
  32. 32. Дозированная лекарственная форма по п.31, содержащая соединение, представленное формулой или фармацевтически приемлемую соль такого соединения; где варианты комбинаций Аг1, X и Р2 представлены ниже:
    - 34 027810
    Варианты, комбинаций Ат1 X к2 21 4-(2-рсйн4О)ОД4 СН, 2-ОН-4-МеО-С6Н, 22 2-(3-МеОС6Н4)С6Н4 СН? хинолин-8-ил 23 4-(бензимидазол-2- ил)СбН4 СН, 2-МеО-С6Н4 24 2-(3-МеОСйН4)СпН4 СН? 4-ОН-3,5-Ме?-СпН? 75 4-(2-РСйН4О)СйН4 — 1-ЕГ-пиперидин-4-ил 99 4-(бензимидазол-2- ил)РН Ме 07 100 3-(индол-2-ил)РЪ Ме оЗ 40 102 3-(3-Г-РЬ)РЬ уХх Ме 03 >0
  33. 33. Дозированная лекарственная форма для лечения инфекции, вызванной вирусом иммунодефицита человека, содержащая:
    (а) терапевтически эффективное количество соединения, представленного формулой или фармацевтически приемлемой соли такого соединения;
    (б) один или более фармацевтически приемлемый(ых) носитель(ей), наполнитель(ей) или разбавитель(ей) либо их комбинацию.
  34. 34. Дозированная лекарственная форма для лечения инфекции, вызванной вирусом иммунодефицита человека, содержащая:
    (а) терапевтически эффективное количество соединения, представленного формулой или фармацевтически приемлемой соли такого соединения;
    (б) один или более фармацевтически приемлемый(ых) носитель(ей), наполнитель(ей) или разбавитель(ей) либо их комбинацию.
  35. 35. Дозированная лекарственная форма для лечения инфекции, вызванной вирусом иммунодефицита человека, содержащая:
    (а) терапевтически эффективное количество соединения, представленного формулой или фармацевтически приемлемой соли такого соединения;
    (б) один или более фармацевтически приемлемый(ых) носитель(ей), наполнитель(ей) или разбавитель(ей) либо их комбинацию.
EA201590297A 2012-08-31 2013-08-30 Гетероциклические карбоксамиды для лечения вирусных заболеваний EA027810B1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261695869P 2012-08-31 2012-08-31
US201361779595P 2013-03-13 2013-03-13
PCT/US2013/057585 WO2014036443A2 (en) 2012-08-31 2013-08-30 Heterocyclyl carboxamides for treating viral diseases

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201590297A1 EA201590297A1 (ru) 2015-08-31
EA027810B1 true EA027810B1 (ru) 2017-09-29

Family

ID=50184664

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201590297A EA027810B1 (ru) 2012-08-31 2013-08-30 Гетероциклические карбоксамиды для лечения вирусных заболеваний

Country Status (14)

Country Link
US (1) US9511070B2 (ru)
EP (1) EP2922596B1 (ru)
JP (1) JP5976224B2 (ru)
KR (1) KR20150048132A (ru)
CN (1) CN104582794A (ru)
AU (1) AU2013308535B2 (ru)
CA (1) CA2881901C (ru)
EA (1) EA027810B1 (ru)
ES (1) ES2684396T3 (ru)
HK (1) HK1209674A1 (ru)
IL (1) IL237119A (ru)
IN (1) IN2015KN00302A (ru)
WO (1) WO2014036443A2 (ru)
ZA (1) ZA201501430B (ru)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2889757T3 (es) * 2012-09-06 2022-01-13 Plexxikon Inc Compuestos y procedimientos para la modulación de quinasas e indicaciones para estos
US9896450B2 (en) * 2015-05-04 2018-02-20 Ohio State Innovation Foundation Modulators of Clavibacter michiganensis and methods of making and using thereof
US12286401B2 (en) * 2018-07-31 2025-04-29 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Small molecules that sensitize HIV-1 infected cells to antibody dependent cellular cytotoxicity
JP2021138619A (ja) * 2020-03-02 2021-09-16 フマキラー株式会社 抗コロナウイルス剤
WO2022053993A2 (en) * 2020-09-12 2022-03-17 Mylan Laboratories Limited Treatments for sars-cov-2 infection (covid-19)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2792399A (en) * 1954-05-29 1957-05-14 Bofors Ab Anilides of heterocyclic compounds
US20050053625A1 (en) * 2001-10-30 2005-03-10 Block Timothy M Method of treating viral infections
US20050250677A1 (en) * 2002-08-30 2005-11-10 Jan Balzarini Glycopeptide antibiotic derivatives
US20110319412A1 (en) * 2009-03-05 2011-12-29 Shionogi & Co., Ltd. Piperidine and pyrrolidine derivatives having npy y5 receptor antagonism

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1999042455A1 (en) 1998-02-19 1999-08-26 Tularik Inc. Antiviral agents
JP2004519432A (ja) * 2000-11-28 2004-07-02 グラクソスミスクライン・ソシエタ・ペル・アチオニ 新規化合物
AP1753A (en) 2001-06-11 2007-07-18 Shire Biochem Inc Thiophene derivatives as antiviral agents for flavvivirus infection
KR100502394B1 (ko) 2003-06-04 2005-07-19 (주) 비엔씨바이오팜 2-[2-(4-모르포리노)에틸아미노]피리딘 유도체, 그제조방법 및 이를 포함하는 항바이러스용 약학적 조성물
US8188277B2 (en) * 2004-08-06 2012-05-29 Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. Aromatic compounds for suppressing the generation of collagen
GB0421908D0 (en) 2004-10-01 2004-11-03 Angeletti P Ist Richerche Bio New uses
EA012589B1 (ru) * 2004-12-30 2009-10-30 Янссен Фармацевтика Н.В. Производные фениламида 4-(бензил)пиперазин-1-карбоновой кислоты и родственные соединения в качестве модуляторов амида жирной кислоты гидролазы для лечения страхов, боли и других состояний
EP1899332A1 (en) 2005-06-24 2008-03-19 Gilead Sciences, Inc. Pyrido(3,2-d)pyrimidines and pharmaceutical compositions useful for treating hepatitis c.
WO2009010480A1 (en) * 2007-07-13 2009-01-22 Euroscreen S.A. 1-{2-[(diphenyl)amino]-ethyl}-piperidine-4-carboxylic acid benzylamide derivatives and related compounds as ccr5 agonists for the treatment of immune and inflammatory diseases
KR101168801B1 (ko) * 2009-03-27 2012-07-25 주식회사종근당 신규한 하이드록사메이트 유도체, 이의 제조방법, 및 이를 함유하는 약제학적 조성물
WO2010141738A2 (en) * 2009-06-03 2010-12-09 President And Fellows Of Harvard College Compositions and method for inhibiting tumor growth
WO2011060026A1 (en) * 2009-11-12 2011-05-19 Jansen Pharmaceutica Nv Piperazinecarboxamide derivative useful as a modulator of fatty acid amide hydrolase (faah)
WO2011060396A1 (en) * 2009-11-16 2011-05-19 Schering Corporation Aliphatic amines based heterocycles useful as hiv entry blockers
EP2515908A2 (en) 2009-12-22 2012-10-31 Merck Sharp & Dohme Corp. 1,4-substituted piperazine derivatives and methods of use thereof
WO2011091152A1 (en) * 2010-01-22 2011-07-28 Pablo Gastaminza Inhibitors of hepatitis c virus infection
GB201012889D0 (en) 2010-08-02 2010-09-15 Univ Leuven Kath Antiviral activity of novel bicyclic heterocycles
WO2013116491A1 (en) 2012-02-01 2013-08-08 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Carboxamide, sulfonamide and amine compounds and methods for using them

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2792399A (en) * 1954-05-29 1957-05-14 Bofors Ab Anilides of heterocyclic compounds
US20050053625A1 (en) * 2001-10-30 2005-03-10 Block Timothy M Method of treating viral infections
US20050250677A1 (en) * 2002-08-30 2005-11-10 Jan Balzarini Glycopeptide antibiotic derivatives
US20110319412A1 (en) * 2009-03-05 2011-12-29 Shionogi & Co., Ltd. Piperidine and pyrrolidine derivatives having npy y5 receptor antagonism

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DE AMICI et al. Antiviral activity of local anaesthetic agents J Antimicrob Chemother 37(3) 635,1996 [retrieved on 04 February 2014], Retrieved from the Internet <URL http//jac oxfordjournals org/content/37/3/635 1 full pdf+html> entire document *
DU et al. Neuropeptide Y Has a Protective Role dunng Munne Retrovirus-lnduced Neurological Disease J Virology, 84(21), 11076-11088, 2010, entire document *

Also Published As

Publication number Publication date
ES2684396T3 (es) 2018-10-02
US20150238489A1 (en) 2015-08-27
EA201590297A1 (ru) 2015-08-31
WO2014036443A2 (en) 2014-03-06
CA2881901A1 (en) 2014-03-06
US9511070B2 (en) 2016-12-06
WO2014036443A3 (en) 2014-04-24
IN2015KN00302A (ru) 2015-06-12
CA2881901C (en) 2017-10-10
ZA201501430B (en) 2016-01-27
AU2013308535B2 (en) 2016-10-20
KR20150048132A (ko) 2015-05-06
AU2013308535A1 (en) 2015-02-26
CN104582794A (zh) 2015-04-29
JP2015532652A (ja) 2015-11-12
IL237119A (en) 2017-08-31
EP2922596A2 (en) 2015-09-30
HK1209674A1 (en) 2016-04-08
JP5976224B2 (ja) 2016-08-23
EP2922596B1 (en) 2018-05-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101471238B1 (ko) 약물동력학을 개선하는 방법
US20080075695A1 (en) Combination therapy method for treating hepatitis c virus infection and pharmaceutical compositions for use therein
JP2012520884A (ja) フラビウイルス科ウイルス感染症を治療する方法および組成物
CN102666537A (zh) 治疗黄病毒科病毒感染的氮杂吲唑
US20110171174A1 (en) Synergistic Combinations of a Macrocyclic Inhibitor of HCV and a Nucleoside
EA027810B1 (ru) Гетероциклические карбоксамиды для лечения вирусных заболеваний
JP2020203947A (ja) Ｎｓ５ａ、ｎｓ５ｂまたはｎｓ３阻害剤を使用する、ｂ型肝炎ウイルス感染症を処置するための方法
JP2012520885A (ja) フラビウイルス科ウイルス感染症を治療する方法および組成物
AU2011223945B2 (en) Compositions and methods for treating viral diseases
US8815878B1 (en) Spiro hemiaminals for treating viral diseases
CA2846348C (en) Compositions comprising perhydropyrrolo[3,2-c]pyridines and methods for their use in treating viral diseases
JP2024064068A (ja) ウイルス増殖阻害剤

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM RU