EA003167B1 - Кристалл диуридин тетрафосфата или его соли и способ его получения и способ получения указанного соединения - Google Patents
Кристалл диуридин тетрафосфата или его соли и способ его получения и способ получения указанного соединения Download PDFInfo
- Publication number
- EA003167B1 EA003167B1 EA200100407A EA200100407A EA003167B1 EA 003167 B1 EA003167 B1 EA 003167B1 EA 200100407 A EA200100407 A EA 200100407A EA 200100407 A EA200100407 A EA 200100407A EA 003167 B1 EA003167 B1 EA 003167B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- uridine
- crystals
- salt
- tetraphosphate
- ump
- Prior art date
Links
- 239000013078 crystal Substances 0.000 title claims abstract description 83
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 title claims abstract description 63
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 28
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title description 6
- VBGNEGYAPSWNQQ-VWDXAFRGSA-N 1-[(2R,3R,4S,5R)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]pyrimidine-2,4-dione [hydroxy(phosphonooxy)phosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound OC[C@H]1O[C@H]([C@H](O)[C@@H]1O)n1ccc(=O)[nH]c1=O.OC[C@H]1O[C@H]([C@H](O)[C@@H]1O)n1ccc(=O)[nH]c1=O.OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O VBGNEGYAPSWNQQ-VWDXAFRGSA-N 0.000 title 1
- DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N Uridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N 0.000 claims abstract description 74
- DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N beta-L-uridine Natural products O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N 0.000 claims abstract description 37
- DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N uracil arabinoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 37
- 229940045145 uridine Drugs 0.000 claims abstract description 37
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 34
- YDHWWBZFRZWVHO-UHFFFAOYSA-H [oxido-[oxido(phosphonatooxy)phosphoryl]oxyphosphoryl] phosphate Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O YDHWWBZFRZWVHO-UHFFFAOYSA-H 0.000 claims abstract description 32
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims abstract description 21
- 239000002585 base Substances 0.000 claims abstract description 17
- DJJCXFVJDGTHFX-ZAKLUEHWSA-N uridine-5'-monophosphate Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](COP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DJJCXFVJDGTHFX-ZAKLUEHWSA-N 0.000 claims abstract description 16
- DJJCXFVJDGTHFX-UHFFFAOYSA-N Uridinemonophosphate Natural products OC1C(O)C(COP(O)(O)=O)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DJJCXFVJDGTHFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- PGAVKCOVUIYSFO-XVFCMESISA-N UTP Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 PGAVKCOVUIYSFO-XVFCMESISA-N 0.000 claims abstract description 13
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 13
- PGAVKCOVUIYSFO-UHFFFAOYSA-N uridine-triphosphate Natural products OC1C(O)C(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 PGAVKCOVUIYSFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 13
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims abstract description 12
- BHIIGRBMZRSDRI-UHFFFAOYSA-N [chloro(phenoxy)phosphoryl]oxybenzene Chemical compound C=1C=CC=CC=1OP(=O)(Cl)OC1=CC=CC=C1 BHIIGRBMZRSDRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 238000005571 anion exchange chromatography Methods 0.000 claims abstract description 10
- XCCTYIAWTASOJW-UHFFFAOYSA-N UDP-Glc Natural products OC1C(O)C(COP(O)(=O)OP(O)(O)=O)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 XCCTYIAWTASOJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- XCCTYIAWTASOJW-XVFCMESISA-N Uridine-5'-Diphosphate Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 XCCTYIAWTASOJW-XVFCMESISA-N 0.000 claims abstract description 7
- 235000011180 diphosphates Nutrition 0.000 claims abstract description 7
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims abstract description 7
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims abstract description 7
- 150000001447 alkali salts Chemical class 0.000 claims abstract description 6
- 239000007858 starting material Substances 0.000 claims abstract description 6
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J diphosphate(4-) Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J 0.000 claims abstract description 5
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 3
- 239000003245 coal Substances 0.000 claims description 2
- ASMQGLCHMVWBQR-UHFFFAOYSA-M diphenyl phosphate Chemical compound C=1C=CC=CC=1OP(=O)([O-])OC1=CC=CC=C1 ASMQGLCHMVWBQR-UHFFFAOYSA-M 0.000 abstract description 3
- 150000004677 hydrates Chemical class 0.000 abstract description 2
- 229940023032 activated charcoal Drugs 0.000 abstract 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 abstract 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 37
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 24
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 21
- 239000000047 product Substances 0.000 description 19
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- IMFACGCPASFAPR-UHFFFAOYSA-N tributylamine Chemical compound CCCCN(CCCC)CCCC IMFACGCPASFAPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 150000004689 octahydrates Chemical class 0.000 description 11
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000002441 X-ray diffraction Methods 0.000 description 10
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylacetamide Chemical compound CN(C)C(C)=O FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-N diphosphoric acid Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(O)=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical class CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- -1 UTP Chemical class 0.000 description 7
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 7
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 6
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 6
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 5
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 4
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 4
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 4
- 229940048084 pyrophosphate Drugs 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- OISVCGZHLKNMSJ-UHFFFAOYSA-N 2,6-dimethylpyridine Chemical compound CC1=CC=CC(C)=N1 OISVCGZHLKNMSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 3
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 3
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 3
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 3
- 230000003419 expectorant effect Effects 0.000 description 3
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 3
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 3
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 3
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 3
- 150000004685 tetrahydrates Chemical class 0.000 description 3
- CYSGHNMQYZDMIA-UHFFFAOYSA-N 1,3-Dimethyl-2-imidazolidinon Chemical compound CN1CCN(C)C1=O CYSGHNMQYZDMIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BWZVCCNYKMEVEX-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-Trimethylpyridine Chemical compound CC1=CC(C)=NC(C)=C1 BWZVCCNYKMEVEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JYYNAJVZFGKDEQ-UHFFFAOYSA-N 2,4-Dimethylpyridine Chemical compound CC1=CC=NC(C)=C1 JYYNAJVZFGKDEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FKNQCJSGGFJEIZ-UHFFFAOYSA-N 4-methylpyridine Chemical compound CC1=CC=NC=C1 FKNQCJSGGFJEIZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910002483 Cu Ka Inorganic materials 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 2
- 229920000388 Polyphosphate Polymers 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N Styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1 PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 2
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 2
- 150000004292 cyclic ethers Chemical class 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 2
- 239000003172 expectorant agent Substances 0.000 description 2
- 229940066493 expectorants Drugs 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 2
- 230000000865 phosphorylative effect Effects 0.000 description 2
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 2
- 239000001205 polyphosphate Substances 0.000 description 2
- 235000011176 polyphosphates Nutrition 0.000 description 2
- 239000012048 reactive intermediate Substances 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- BMVXCPBXGZKUPN-UHFFFAOYSA-N 1-hexanamine Chemical class CCCCCCN BMVXCPBXGZKUPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XWKFPIODWVPXLX-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-5-methylpyridine Natural products CC1=CC=C(C)N=C1 XWKFPIODWVPXLX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZJIJYZSGABIPDP-UHFFFAOYSA-N 2-n,4-n-dimethylpyridine-2,4-diamine Chemical compound CNC1=CC=NC(NC)=C1 ZJIJYZSGABIPDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004925 Acrylic resin Substances 0.000 description 1
- 229920000178 Acrylic resin Polymers 0.000 description 1
- IFHSFBQLZCGHRA-UHFFFAOYSA-N C1(=CC=CC=C1)[ClH]P(=O)[ClH]C1=CC=CC=C1 Chemical compound C1(=CC=CC=C1)[ClH]P(=O)[ClH]C1=CC=CC=C1 IFHSFBQLZCGHRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SBVYRQFJZOKNGO-XVFCMESISA-N [[(2r,3s,4r,5r)-5-(2,4-dioxopyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] [hydroxy(phosphonooxy)phosphoryl] hydrogen phosphate Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 SBVYRQFJZOKNGO-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003973 alkyl amines Chemical class 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 1
- 239000011260 aqueous acid Substances 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- JQVDAXLFBXTEQA-UHFFFAOYSA-N dibutylamine Chemical class CCCCNCCCC JQVDAXLFBXTEQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001177 diphosphate Substances 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- GNOIPBMMFNIUFM-UHFFFAOYSA-N hexamethylphosphoric triamide Chemical compound CN(C)P(=O)(N(C)C)N(C)C GNOIPBMMFNIUFM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 239000004570 mortar (masonry) Substances 0.000 description 1
- 150000002825 nitriles Chemical class 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 1
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 1
- 230000000171 quenching effect Effects 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 1
- UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N triphosphoric acid Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000825 ultraviolet detection Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/06—Pyrimidine radicals
- C07H19/10—Pyrimidine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/10—Expectorants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
- C07H1/06—Separation; Purification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
- C07H21/02—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids with ribosyl as saccharide radical
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
Настоящее изобретение раскрывает кристаллы Р,Р-ди(уридин 5'-)тетрафосфата или его соли; способ получения кристаллов; и способ получения Р,Р-ди(уридин 5'-)тетрафосфата (UP) или его соли из УМФ, служащего в качестве исходного вещества, и с использованием ДФХ и ПФ, включающий, по меньшей мере, одну из следующих стадий обработки: (а) добавление УМФ-дифенилфосфата (УМФ-ДФФ) отдельными порциями во время стадии взаимодействия УМФ-ДФФ с солью ПФ-органической щелочи; (b) проведение стадии взаимодействия УМФ-ДФФ с солью ПФ-органической щелочи в присутствии основания; и (с) дальнейшую обработку синтезированного UPщелочью. Кристаллы UPили его соли, полученные по способу в соответствии с изобретением, имеют высокую чистоту и стабильность и меньшую гигроскопичность по сравнению с лиофилизованным продуктом для того, чтобы служить, таким образом, полезным исходным веществом для получения фармацевтического препарата. Способ получения UPили его соли в соответствии с изобретением осуществляется с высоким выходом и делает возможным крупномасштабный синтез.
Description
Настоящее изобретение относится к стабильным кристаллам Р1,Р4-ди(уридин 5'-)тетрафосфата (и2Р4), или его соли, которые полезны в качестве активного ингредиента отхаркивающего средства или терапевтического средства при пневмонии; способу получения кристаллов; и способу эффективного получения и2Р4 или его соли.
Предшествующий уровень техники
Тетранатриевая соль Р1,Р4-ди(уридин 5'-)тетрафосфата (и2Р4-4Ыа), представленная следующей формулой (I):
оо
ΗΝ'ιΙ 0 0 00
I Η 9 II II II II)
Ο^Ν·^ НгС-О-Р -0 - Ρ-0 - Ρ-0-Ρ - О-СН, Ο^Ν·^ I ι · I Λ I . 0.I
ОИа 0«а ОНа 0«аД
I \ но он
ОН ОН( ξ ) обладает вызывающим отхаркивание действием и является соединением, которое, как ожидают, будет разработано в качестве отхаркивающего средства, или терапевтического агента при пневмонии (например, патенты США №№ 5789391, 5763447 и 5635160).
До настоящего времени, и2Р4 не был получен в кристаллическом виде, а был получен лишь в форме лиофилизованного продукта (см. пример 1 νθ 99/05155). Обычный и2Р4, полученный стандартным способом, имеет чистоту лишь 90% и содержит побочные продукты. Примеры побочных продуктов включают нуклеозид 5'-(поли)фосфаты, такие как уридин 5'тетрафосфат (ИР4), уридин 5'-трифосфат (УТФ) (ИТР), уридин 5'-дифосфат (УДФ) (НОР) и уридин 5'-монофосфат (УМФ) (иМР); и динуклеозид полифосфаты, такие как Р1,Р4-ди(уридин 5'-)трифосфат (и2Р3) и Р1,Р4-ди(уридин 5'-)дифосфат (и2Р2). В частности, от и2Р4 сложно отделить нуклеозид 5'-(поли)фосфаты, такие как УТФ, и и2Р4 высокой чистоты лишь с большим трудом был получен обычным способом очистки, т.е. ионообменной хроматографией (νθ 99/05155, ВюсЫшка с1 Вюрйубса Ас1а, 438 (1976) 304-309).
Указанный выше очищенный и лиофилизованный продукт имеет недостатки, такие, как высокую гигроскопичность. Поэтому получение фармацевтического препарата из и2Р4 должно проводиться на специальном оборудовании, обеспечивающем контроль влажности. Даже после получения фармацевтического препарата, продукт должен быть плотно упакован. Кроме того, поскольку фармацевтический препарат имеет очень короткий период доступности вследствие низкой стабильности лиофилизованного препарата, было бы желательно получить стабильные кристаллы и2Р4 высокой чистоты.
и2Р4 синтезируют из уридин 5'монофосфата (УМФ) путем использования активатора, такого как дифенилфосфорохлоридат (ДФХ) (БРС) (или хлорид дифенилфосфиновой кислоты) и фосфорилирующего агента, такого как пирофосфат (ПФ) (РР1). Однако, по обыч ному способу получается низкий выход синтеза, т. е. только приблизительно 10 мас.% (пример 4В νθ 99/05155), и он не может служить в качестве практического способа. Соответственно, было бы также желательно разработать способ получения и2Р4 с высоким выходом и в крупном масштабе.
В свете упомянутого выше, целью настоящего изобретения является обеспечение стабильных кристаллов и2Р4 или его соли. Другой целью изобретения является обеспечение способа получения кристаллов. Еще одной целью изобретения является обеспечение способа эффективного получения и2Р4 в крупном масштабе.
Описание изобретения
Авторы настоящего изобретения провели тщательные исследования способа очистки и2Р4 и способа синтеза и2Р4 из УМФ. Было найдено, что и2Р4, очищенный анионообменной хроматографией и хроматографией с использованием активированного угля (хроматография на активированном угле), можно легко кристаллизовать и что использование особых условий реакции приводит к значительному повышению выхода и2Р4 при синтезе и2Р4 или его соли из УМФ, служащего в качестве исходного вещества, и при использовании ДФХ и ПФ. Настоящее изобретение осуществлено на основе полученных данных.
Соответственно, настоящее изобретение обеспечивает кристаллы Р1.Р4-ди(уридин 5'-)тетрафосфата или его соли.
Настоящее изобретение обеспечивает также кристаллы тетранатриевой соли Р1,Р4ди(уридин 5'-)тетрафосфата с кристаллической структурой, проявляющей характеристические пики при дифракции рентгеновских лучей с использованием Си-Ка лучей около дифракционных углов (2θ) 5,9, 11,5, 12,4, 15,4, 17,2, 18,0, 19,8 и 20,5 (°).
Настоящее изобретение обеспечивает также кристаллы тетранатриевой соли Р1,Р4ди(уридин 5'-)тетрафосфата с кристаллической структурой, проявляющей характеристические пики в ИК-спектре поглощения при длинах волн около 1690, 1277, 1233, 1146, 1116 и 890 (см-1).
Настоящее изобретение обеспечивает также способ получения кристаллов Р1,Р4ди(уридин 5'-)тетрафосфата или его соли, включающий очистку сырого Р1,Р4-ди(уридин 5'-)тетрафосфата или его соли анионообменной хроматографией и хроматографией на активированном угле и добавление гидрофильного органического растворителя к раствору очищенного Р1,Р4-ди(уридин 5'-)тетрафосфата или его соли для осаждения, таким образом, кристаллов.
Настоящее изобретение предлагает также способ получения Р1,Р4-ди(уридин 5'-)тетрафосфата или его соли из уридин 5'монофосфата (УМФ), служащего в качестве исходного вещества, и путем использования дифенилфосфорохлоридата (ДФХ) и пирофосфата (ПФ), включающий, по меньшей мере, одну из следующих стадий обработки:
(a) добавление УМФ дифенилфосфата (УМФ-ДФФ) отдельными порциями во время стадии взаимодействия УМФ-ДФФ с солью ПФорганической щелочи;
(b) проведение стадии взаимодействия УМФ-ДФФ с солью ПФ-органической щелочи в присутствии основания; и (c) дальнейшая обработка синтезированного и2Р4 щелочью.
Краткое описание чертежей
На фиг. 1 представлен спектр дифракции рентгеновских лучей кристаллического тетрагидрата и2Р4 4Να, кристаллизованного из раствора этанола.
На фиг. 2 представлен спектр дифракции рентгеновских лучей кристаллического октагидрата и2Р4 4Να, кристаллизованного из раствора этанола.
На фиг. 3 представлен спектр дифракции рентгеновских лучей и2Р4, полученного путем лиофилизации.
Фиг. 4 представляет собой фотографию, на которой показана форма кристалла кристаллического октагидрата и2Р4 4Να, кристаллизованного из раствора этанола. Фотографию сняли под поляризационным микроскопом (увеличение: 440), при этом 1 см на изображении соответствует 23 мкм.
На фиг. 5 представлен ИК-спектр поглощения кристаллического октагидрата и2Р4 4Να, кристаллизованного из раствора этанола.
На фиг. 6 представлен ИК-спектр поглощения и2Р4, полученного путем лиофилизации.
На фиг. 7 представлен спектр дифракции рентгеновских лучей кристаллического октагидрата и2Р4 4Να, кристаллизованного из раствора метанола.
Наилучший способ воплощения изобретения
Кристаллы и2Р4 или его соли, в соответствии с настоящим изобретением, получают путем очистки сырого и2Р4 или его соли с использованием особых способов и добавления гидрофильного органического растворителя к раствору очищенного и2Р4 или его соли для осаждения таким образом растворенного вещества в виде кристаллов. Далее настоящее изобретение будет описано на основе (1) очистки и2Р4 или его соли и (2) кристаллизации и2Р4 или его соли.
(1) Очистка и2Р4 или его соли.
и2Р4 или его соль можно очистить методом анионообменной хроматографии и хроматографии на активированном угле, проводимых в сочетании. Хотя два хроматографических метода можно осуществлять в произвольном порядке, предпочтительно, чтобы анио-нообменная хроматография предшествовала хроматографии на активирован ном угле, принимая во внимание повышение чистоты и2Р4.
В качестве анионообменной смолы в описанном выше хроматографическом методе можно использовать стирольную или акриловую смолу. Примеры смол, которые можно использовать, включают сильноосновные анионообменные смолы, такие как АМВЕВЫТЕ ΙΡΛ 402 (Войт & Наак Со.), ΌΙΛΙΟΝ РА-312, и ΌΙΛΙΟΝ 8А-11А (МйкиЫкЫ Сйетка1 Со. Ыб.), и слабоосновные анионообменные смолы, такие как АМВЕКЬГГЕ 1ВА 67 (Войт & Наак Со.) и Ό^ΙΟΝ ХУА-30 (МЙ8иЬ18Й1 Сйет1са1 Со. Ыб.).
Активированный уголь может находится в форме активированного угля хроматографического качества, который измельчен или сформован в частицы, и может включать коммерчески доступные продукты (например, продукты ХУако Риге Сйетка1 ШбикРтек, Ыб. и БЫатита Кабаки Кодуо).
Хроматографию можно осуществить периодическим способом или путем использования колонки. При проведении колоночной хроматографии в качестве элюента для анионообменной хроматографии можно использовать водный раствор кислоты, или его смесь с солью, обладающей повышенной ионной силой, такой как хлорид натрия; а в качестве элюента для колоночной хроматографии на активированном угле можно использовать воду или водный раствор щелочи, такой как гидроксид натрия. Для того, чтобы соответствующим образом определить концентрацию каждого элюента в интервале от 0,001 до 10М, можно провести предварительный опыт на небольших количествах.
(2) Кристаллизация и2Р4 или его соли.
и2Р4 или его соль кристаллизуют путем добавления гидрофильного органического растворителя к раствору, содержащему очищенный таким образом и2Р4 или его соль.
Примеры гидрофильных органических растворителей, которые можно использовать, включают спирты, содержащие шесть или менее атомов углерода, такие как метанол и этанол; кетоны, такие как ацетон; простые эфиры, такие как диоксан; нитрилы, такие как ацетонитрил; и амиды, такие как диметилформамид. Из них, в частности, предпочтительны спирты, особенно, этанол.
Более конкретно, раствор очищенного таким образом и2Р4 или его соли, или суспензию, полученную при концентрировании раствора, необязательно обрабатывают для доведения таким образом рН до 6-9, и к раствору или суспензии добавляют гидрофильный органический растворитель при 60°С или ниже для осаждения таким образом растворенного вещества в виде стабильных кристаллов и2Р4.
Полученные таким образом кристаллы и2Р4 по настоящему изобретению содержат (1) и2Р4 в количестве 95% или более, и (2) другие гомологические соединения в количестве 5% или менее.
В настоящем изобретении другие гомологические соединения включают нуклеозид 5'(поли)фосфаты, такие как ИР4, УТФ, УДФ и УМФ; и динуклеозид полифосфаты, такие как и2Рз и и2р2.
Более предпочтительно, кристаллы и2Р4 содержат (1) и2Р4 в количестве 97% или более, (2) УДФ в количестве 1% или менее, и (3) УТФ в количестве 1% или менее. Особенно предпочтительно, кристаллы и2Р4 содержат (1) и2Р4 в количестве 98% или более, (2) УДФ в количестве 0,5% или менее, и (3) УТФ в количестве 0,5% или менее.
Такие кристаллы и2Р4 высокой чистоты могут находиться в форме соли, гидрата или гидратной соли. Примеры солей включают фармацевтически приемлемые соли, такие как соли щелочных металлов, такие как соли натрия и соли калия; соли щелочно-земельных металлов, такие как соли кальция и соли магния; и аммониевые соли. и2Р4 может быть замещен 1-4 атомами металла с образованием соли.
Указанный выше гидрат может содержать 3-8 молекул воды, связанных или сцепленных с одной молекулой и2Р4, а указанная выше гидратная соль может содержать 3-8 молекул воды, связанных или сцепленных с одной молекулой соли и2Р4 с щелочным металлом.
Примеры предпочтительных кристаллов и2Р4 включают кристаллы и2Р4 4Να и его гидраты. Кристаллы и2Р4 4Να проявляют характеристические пики при дифракции рентгеновских лучей при использовании Си-Ка лучей около углов дифракции (2θ) 5,9, 11,5, 12,4, 15,4, 17,2, 18,0, 19,8 и 20,5 (°) (диапазон ошибки ±0,1°) и проявляют характеристические пики в ИК-спектре поглощения при длинах волн около 1690, 1277, 1233, 1146, 1116 и 890 (см-1) (диапазон ошибки ±2 см-1). Кроме того, с кристаллами и2Р4 4Να просто манипулировать и они в высшей степени полезны по сравнению с обычными лиофилизованными продуктами, поскольку кристаллы стабильны при высокой температуре, в условиях высокой влажности, и содержание воды в кристаллах стабилизируется при 5-15 мас.% для подавления, таким образом, дальнейшей гигроскопичности.
Как описано выше, полученные таким образом кристаллы и2Р4 4Να по настоящему изобретению содержат (1) и2Р4 в количестве 95% или более, и (2) другие гомологические соединения в количестве 5% или менее. Кроме того, как описано выше, примеры предпочтительных кристаллов и2Р4 включают такие кристаллы, содержащие (1) и2Р4 в количестве 97% или более, (2) УДФ в количестве 1% или менее, и (3) УТФ в количестве 1% или менее, в особенности, кристаллы, содержащие (1) и2Р4 в количестве
98% или более, (2) УДФ в количестве 0,5% или менее, и (3) УТФ в количестве 0,5% или менее.
Более того, кристаллы и2Р4 или его соли, в соответствии с настоящим изобретением, включают также их таутомеры.
Кристаллы и2Р4 или его соли, в соответствии с настоящим изобретением, необязательно сушат обычным способом, таким как сушка при пониженном давлении, сушка в потоке воздуха, или сушка нагреванием, и помещают после этого в емкость (например, колбу, мешок, банку, ампулу). Упаковку в емкость можно осуществлять так, чтобы емкость была открыта, закрыта, герметично закрыта, или запечатана. Открытое состояние не является предпочтительным, принимая во внимание поддерживание устойчивости кристаллов при хранении.
Далее будет описан эффективный способ синтеза и2Р4.
Обычно и2Р4 или его соль преимущественно синтезировали из уридин 5'-монофосфата (УМФ), служащего в качестве исходного вещества, и с использованием активатора, такого как дифенилфосфорохлоридат (ДФХ) и фосфорилирующего агента, такого как пирофосфат (ПФ). Более конкретно, ДФХ и трибутиламин добавляют к трибутиламиновой соли УМФ с образованием при этом УМФ дифенилфосфата (УМФДФФ), служащего в качестве реакционноспособного промежуточного соединения, которое взаимодействует с пирофосфатом трибутиламина (ПФ-ТБА) с получением при этом и2Р4 или его соли с выходом приблизительно 9,6% (пример 4В νθ 99/05155).
Способ в соответствии с настоящим изобретением отличается тем, что проводят, по меньшей мере, одну из следующих стадий обработки: (а) добавление УМФ-ДФФ отдельными порциями во время обычной стадии взаимодействия УМФ-ДФФ с солью ПФ-органической щелочи; (Ь) осуществление взаимодействия
УМФ-ДФФ и соли ПФ-органической щелочи в присутствии основания; и (с) дальнейшая обработка синтезированного и2Р4 щелочью. Можно объединить две или более стадий описанной выше обработки.
Стадия «(а) добавления УМФ-ДФФ отдельными порциями» относится к добавлению УМФ-ДФФ, которое должно быть обеспечено в количестве по молям, составляющем, по меньшей мере, двукратное количество соли ПФорганической щелочи, в виде нескольких порций, а не одной порции. Например, соль ПФорганической щелочи подвергают взаимодействию с эквимолярным количеством УМФ-ДФФ и указанную стадию повторяют. Несмотря на то, что на количество порций УМФ-ДФФ не налагается никаких особых ограничений, предпочтительны 2-3 порции, принимая во внимание повышение выхода.
Примеры солей ПФ-органической щелочи включают соль гексиламина, соль дибутилами003167 на, соль триэтиламина и соль трибутиламина. При взаимодействии с УМФ-ДФФ соль ПФорганической щелочи можно растворить в растворителе. Примеры растворителей включают амиды, такие как ДМФ (диметилформамид), ДМА (диметилацетамид) и формамид; циклические простые эфиры, такие как диоксан и тетрагидрофуран; кетоны, такие как ацетон; и диметилимидазолидинон, гексаметилфосфотриамид, диметилсульфоксид, ацетонитрил, или смесь двух или более из них. После этого к раствору добавляют УМФ-ДФФ и дают смеси прореагировать при комнатной температуре в течение приблизительно от 30 мин до 5 ч.
Стадия «(Ь) осуществления взаимодействия УМФ-ДФФ с солью ПФ-органической щелочи в присутствии основания» относится к реакции, проводимой в присутствии основания. Примеры оснований включают пиридиновые основания, такие как пиридин, 2,6-лутидин, 2,4лутидин, α-, β-, γ-пиколин, 2,4-диметиламинопиридин и α-, β-, γ-коллидин, причем особенно предпочтительным является пиридин. Основный растворитель для реакции также входит в число оснований, используемых в настоящем изобретении. Концентрация основания особенно не ограничивается. Основание предпочтительно добавляют в количестве 6 эквивалентов или более относительно УМФ, более предпочтительно, 18 эквивалентов или более.
Кроме того, стадия «(с) дальнейшей обработки синтезированного и2Р4 щелочью» относится к гашению жидкости, содержащей синтезированный и2Р4, водой и обработке смеси раствором органической или неорганической щелочи, такой как гидроксид натрия, аммиак, гидроксид калия, пиридин, триэтиламин или карбонат натрия. Обычно погашенную жидкость, как таковую, непосредственно подвергают очистке. Однако обработка щелочью дает возможность улучшить выход выделенного и2Р4 по сравнению с обычным способом.
При обработке щелочью жидкость, содержащую синтезированный и2Р4, гасят водой и добавляют к смеси щелочь таким образом, что рН смеси составляет приблизительно 8-13, предпочтительно, 10-12. Смесь оставляют для взаимодействия при комнатной температуре в течение приблизительно от 10 мин до 5 ч.
УМФ-ДФФ можно синтезировать из УМФ обычным способом. Например, УМФ триалкиламиновую соль, такую как УМФ трибутиламиновую соль, полученную обычным способом, растворяют в растворителе. Примеры растворителей включают амиды, такие как диметилформамид (ДМФ) и диметилацетамид (ДМА); циклические простые эфиры, такие как диоксан и тетрагидрофуран; кетоны, такие как ацетон; и диметилимидазолидинон, гексаметилфосфотриамид, или их смесь. После этого к раствору добавляют ДФХ и, при необходимости, три алкиламин, и смесь оставляют для взаимодействия при комнатной температуре в течение приблизительно от 30 мин до 5 ч, для получения таким образом УМФ-ДФФ, служащего в качестве реакционноспособного промежуточного вещества.
Примеры
Далее настоящее изобретение будет описано более подробно путем примеров.
Пример 1. Синтез и2Р4 или его соли.
(1) Влияние основания
К дегидрированной соли уридин 5'монофосфата трибутиламина (УМФ-ТБА) (6,2 ммоль) добавили ДМА (8 мл) и к этой смеси при перемешивании добавляли по каплям ДФХ (1,7 мл). Полученную таким образом смесь оставили для взаимодействия при комнатной температуре в течение одного часа с образованием при этом УМФ-ДФФ, после чего ТБА (7,6 мл) добавили к реакционной смеси, которую перемешивали еще 10 мин. Тем временем, дегидрированный ТЭАПФ (3,0 ммоль) растворили в пиридине (1,7 мл) и полученный при этом раствор добавили к реакционной смеси УМФ-ДФФ. Затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение трех часов и добавили к этой смеси воду для прекращения, таким образом, реакции. Полученную реакционную смесь анализировали методом ВЭЖХ (при 262 нм), показавшим, что целевой и2Р4 был получен с выходом 18,3%.
Как очевидно из этого результата, когда УМФ-ДФФ взаимодействует с ТЭА-ПФ в присутствии основания (пиридина), и2Р4 можно синтезировать с выходом, примерно в два раза превышающим выход, полученный обычным способом.
(2) Влияние использования сочетания основания и обработки щелочью
К дегидрированной соли уридин 5'монофосфата трибутиламина (УМФ-ТБА) (6,2 ммоль) добавили ДМА (8 мл) и к этой смеси добавляли по каплям при перемешивании ДФХ (1,7 мл). Полученная при этом смесь реагировала при комнатной температуре в течение одного часа с образованием при этом УМФ-ДПФ, после чего к реакционной смеси добавили ТБА (7,6 мл) и перемешивали смесь еще 10 мин. Тем временем, дегидрированный ТЭА-ПФ (3,0 ммоль) растворили в пиридине (1,7 мл) и полученный при этом раствор добавили к УМФДФФ реакционной смеси. После этого, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение трех часов и к смеси добавили воду для того, чтобы остановить, таким образом, реакцию. К полученной таким образом реакционной смеси добавили 30% раствор гидроксида натрия с тем, чтобы довести рН до 11,0 и оставили смесь на ночь. Полученную реакционную смесь анализировали методом ВЭЖХ (при 262 нм), который показал, что целевой и2Р4 получили с выходом 29,7%.
Как очевидно из этого результата, когда УМФ-ДФФ взаимодействует с ТЭА-ПФ в присутствии основания (пиридина) и после этого проводят обработку щелочью, и2Р4 можно синтезировать с выходом, примерно в три раза превышающим выход, полученный по обычному способу.
(3) Влияние основания и добавления УМФ-ДФФ несколькими порциями.
К триэтиламиновой соли дегидрированной пирофосфорной кислоты (ТЭА-ПФ) (6 ммоль) добавили формамид (1,5 мл) и пиридин (1,5 мл) и перемешивали смесь в сосуде. Тем временем, в другом сосуде, к дегидрированной соли уридин 5'-монофосфата трибутиламина (УМФТБА) (12 ммоль) добавили ДМА (4,3 мл), диоксан (4,8 мл) и трибутиламин (ТБА) (5,8 мл) и смесь перемешивали. После этого к смеси добавили по каплям ДФХ (2,5 мл) и полученную при этом смесь перемешивали еще при комнатной температуре в течение одного часа для получения в результате УМФ-ДФФ. Половину реакционной смеси УМФ-ДФФ добавили по каплям в сосуд, содержащий ТЭА-ПФ, и оставили реакционную смесь для взаимодействия при комнатной температуре на один час. Затем к смеси добавили пиридин (1,5 мл) и в сосуд добавили по каплям оставшуюся реакционную смесь УМФ-ДФФ. После этого полученная реакционная смесь реагировала при комнатной температуре в течение часа и к смеси добавили воду для того, чтобы остановить, таким образом, реакцию. Полученную реакционную смесь анализировали методом ВЭЖХ (при 262 нм), который показал, что целевой и2Р4 получили с выходом 29,5%.
Из этого результата очевидно, что когда УМФ-ДФФ добавляют в виде двух порций и УМФ-ДФФ взаимодействует с ТЭА-ПФ в присутствии основания (пиридина), и2Р4 можно синтезировать с выходом, примерно в три раза превышающим выход, полученный по обычному способу. Из этого результата также очевидно, что добавление УМФ-ДФФ в виде двух порций обеспечивает выход 29,5%, что примерно в 1,6 раза больше выхода, полученного в описанном выше (1) (18,3%).
(4) Влияние обработки щелочью
К триэтиламиновой соли дегидрированной пирофосфорной кислоты (ТЭА-ПФ) (6 ммоль) добавили формамид (1,5 мл) и пиридин (1,5 мл) и перемешивали смесь в сосуде. Тем временем, в другом сосуде, к дегидрированной соли уридин 5'-монофосфата трибутиламина (УМФТБА) (12 ммоль) добавили ДМА (4,3 мл), диоксан (4,8 мл) и трибутиламин (ТБА) (5,8 мл) и смесь перемешивали. Затем к этой смеси добавили по каплям ДФХ (2,5 мл) и полученную при этом смесь перемешивали при комнатной температуре еще в течение одного часа для получения в результате УМФ-ДФФ. Половину реакционной смеси УМФ-ДФФ добавили по каплям в сосуд, содержащий ТЭА-ПФ и оставили реакционную смесь для взаимодействия при комнатной температуре на один час. Затем к смеси добавили пиридин (1,5 мл) и в сосуд добавили по каплям оставшуюся реакционную смесь УМФ-ДФФ. Затем полученная реакционная смесь реагировала при комнатной температуре в течение часа и к смеси добавили воду для того, чтобы остановить, таким образом, реакцию. К полученной таким образом реакционной смеси добавили 30% раствор гидроксида натрия с тем, чтобы довести рН до 11,0 и оставили смесь на ночь. Полученную реакционную смесь анализировали методом ВЭЖХ (при 262 нм), который показал, что целевой и2Р4 получили с выходом 32,2%.
Из этого результата очевидно, что когда к вышеописанному (3) добавляют обработку щелочью, выход увеличивается примерно на 10%, т.е. от 29,5 до 32,2%.
Пример 2. Получение кристаллов и2Р4 4Να.
К триэтиламиновой соли дегидрированной пирофосфорной кислоты (ТЭА-ПФ) (40,5 ммоль) добавили формамид (10 мл) и пиридин (15 мл) и перемешивали смесь в сосуде. Тем временем, в другом сосуде, к дегидрированной соли уридин 5'-монофосфата трибутиламина (УМФ-ТБА) (80 ммоль) добавили ДМА (50 мл), диоксан (34 мл) и трибутиламин (ТБА) (30 мл) и смесь перемешивали. После этого к смеси добавили по каплям ДФХ (17,8 мл) и полученную при этом смесь перемешивали еще при комнатной температуре в течение одного часа для получения в результате УМФ-ДФФ. Половину реакционной смеси УМФ-ДФФ добавили по каплям в сосуд, содержащий ТЭА-ПФ и оставили реакционную смесь для взаимодействия при комнатной температуре на один час. Затем к смеси добавили 4-диметиламинопиридин (ДМАП) (50 мг) и пиридин (15 мл) и в сосуд добавили по каплям оставшуюся реакционную смесь УМФ-ДФФ. Затем полученная реакционная смесь реагировала при комнатной температуре в течение двух часов и к смеси добавили воду для того, чтобы остановить, таким образом, реакцию. Реакционную смесь разбавили водой до общего объема 700 мл и добавили к раствору раствор гидроксида натрия для того, чтобы довести рН до 10. Раствор сконцентрировали до 200 мл и добавили к концентрированному раствору при перемешивании этанол (250 мл). Раствор оставили стоять при 4°С в течение ночи и отстоявшийся слой жидкости удалили декантацией. Полученный при этом раствор разбавили водой до общего объема 250 мл и анализировали методом ВЭЖХ (при 262 нм), который показал, что целевой и2Р4 получили с выходом 30,0%.
Полученный таким образом раствор (110 мл) разбавили водой до общего объема 2000 мл и разбавленный раствор внесли в колонну со слабоосновной анионообменной смолой (АМБЕКЬГГЕ 1КА-67) (С1 типа) (200 мл). Затем колонну промыли водой и элюировали побочные продукты 0,18М хлористо-водородной кислотой, после чего целевой и2Р4 элюировали раствором 0,005М хлористо-водородной кислоты, содержащим 0,35М ИаС1 (процент выделения: 82,7%).
К полученному при этом элюату добавили раствор гидроксида натрия для доведения, таким образом, рН до 2,5. Затем этот элюат внесли в колонну с активированным углем (Та1ко 8СР) и промыли колонну водой и элюировали раствором 0,05М гидроксида натрия (процент выделения: 84,9%).
рН полученного при этом элюата довели до 7,6 и концентрировали элюат до 38 мл. После этого к концентрированному раствору добавили этанол (57 мл), получив в результате 3,1 г кристаллов и2Р4 4Ν;ι (содержание воды: 7,8%) (выход после выделения: 18,4%).
Физические свойства кристаллов и2Р4 4Ν;·ι
Полученные в примере 2 кристаллы и2Р4 4Να сушили при 60°С в течение четырех часов с использованием воздушной сушилки в форсированном режиме и подвергли приборному анализу. Кроме того, получили лиофилизованный продукт и2Р4 4Να таким же образом, как в способе, описанном в примере 1 ХУО 99/05155 и полученный при этом продукт сравнили с данными кристаллами на основании физических свойств.
(1) Приборный анализ
1) Анализ чистоты
Кристаллы и2Р4 4Να, полученные в примере 2, и фракции, содержащие и2Р4 после очистки с использованием каждой хроматографии, подвергли анализу чистоты методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Результаты приведены в табл.1. Условия высокоэффективной жидкостной хроматографии описаны ниже.
Колонка: НПАСНЮЕЬ #3013-Ν (продукт НйаеЫ Ке18окик1 8егу1ее)
Элюент: 10% СН3СИ, 0,18М ИН4С1, 0,03М КН2РО4 и 0,03М К2НРО4
Метод определения: УФ-детектирование при 262 нм
Таблица 1
| Процент соединений (мас.%) | ||||
| Ж и его аналоги | Реакционная смесь | После анионообменной колонки | После колонки с активированным углем | После кристаллизации |
| УМФ | 7,5 | 0,5 | 0,3 | (-) |
| и2₽2 | 29,8 | 0,4 | (-) | (-) |
| удф | 2,5 | 0,1 | 0,2 | 0,1 |
| и2Р3 | 17,6 | 0,2 | (-) | (-) |
| УТФ | 13,0 | 0,8 | 0,4 | 0,1 |
| о.-с | 21,0 | 97,9 | 98,6 | 99,8 |
| иР4 | 7,3 | (-) | (-) | (-) |
(-): ниже предела обнаружения
2) Содержание воды
Кристаллы и2Р4 4Να подвергли измерению содержания воды по методу Карла Фишера, показав при этом, что содержание воды составляет 5-15 мас.%, которое изменяется в соответствии со степенью сушки. Эти результаты ясно показывают, что с одной молекулой и2Р4 связано или сцеплено от трех до восьми молекул воды.
3) Температура плавления
Кристаллы и2Р4 4Ν;ι подвергли определению температуры плавления обычным методом, получив при этом температуру разложения примерно 223 °С. Температура разложения лиофилизованного продукта составляла примерно 220°С.
4) Дифракция рентгеновских лучей
Кристаллы и2Р4 4Να подвергли определению методом дифракции рентгеновских лучей с использованием рентгеновской установки (модель: КШТ2500У, продукция Шдаки Эенк|) в следующих условиях. Полученные при этом спектры дифракции рентгеновских лучей представлены на фиг. 1 и 2, а значения пиков приведены в табл. 2 и 3.
Условия измерения
Ренгеновская трубка: Си-Ка
Мощность рентгеновских лучей: 50 кВ-300 мА. Скорость сканирования: 4,0°/мин Интервал сканирования: 0,02° Интервал измерения углов: 2-40° Щель: Ό8-0,5°, В8-0,15мм, 88-0,5°. Предварительная обработка: измельчение с использованием агатовой ступки
Таблица 2
| Пик № | 2Θ (°) | Относительная интенсивность (Ι/Ι0) |
| 1 | 5,96 | 100 |
| 5 | 11,58 | 38 |
| 6 | 12,42 | 79 |
| 10 | 15,42 | 48 |
| 13 | 17,18 | 45 |
| 15 | 18,04 | 55 |
| 16 | 19,86 | 84 |
| 17 | 20,56 | 73 |
| 18 | 21,18 | 51 |
| 19 | 21,40 | 51 |
| 25 | 25,22 | 42 |
| 29 | 27,52 | 45 |
| 30 | 27,98 | 47 |
| 35 | 30,60 | 40 |
Таблица 3
| Пик № | 2Θ (°) | Относительная интенсивность (Ι/Ι0) |
| 1 | 5,96 | 100 |
| 5 | 11,56 | 41 |
| 6 | 12,42 | 90 |
| 10 | 15,42 | 51 |
| 12 | 17,18 | 48 |
| 14 | 18,04 | 63 |
| 15 | 19,86 | 90 |
| 16 | 20,58 | 90 |
| 17 | 21,20 | 56 |
| 18 | 21,42 | 59 |
| 24 | 25,20 | 50 |
| 29 | 27,54 | 56 |
| 30 | 27,96 | 57 |
| 35 | 30,60 | 48 |
На фиг. 1 и в табл. 2 представлены данные для кристаллов тетрагидрата и2Р4 4Να, а на фиг. 2 и в табл. 3 представлены данные для кристаллов октагидрата и2Р4 4Να. Кроме того, в качестве ссылки на фиг. 3 приведен спектр дифракции ренгтеновских лучей лиофилизованного продукта.
5) Гигроскопичность
Кристаллы и2Р4 4Να (октагидрат) с содержанием воды приблизительно 14% оставляли на девять дней в следующих условиях: а) 25°С и относительная влажность 57%; Ь) 25°С и относительная влажность 75%; и с) 40°С и относительная влажность 75%. В указанных выше трех случаях не наблюдали разложения или изменения в массе. Кристаллы оказались стабильными и не обладающими гигроскопичностью. Кристаллы и2Р4 4Να (тетрагидрат) с содержанием воды приблизительно 8% оставили на девять дней в условиях 40°С и относительной влажности 75%. В этом случае, содержание воды увеличилось до 14-15%. Однако, в дальнейшем содержание воды не повышалось и кристаллы были стабилизированы.
В противоположность этому, когда лиофилизованный продукт (начальное содержание воды: приблизительно 1%) оставили на девять дней в условиях 40°С и относительной влажности 75%, содержание воды постепенно увеличивалось и на седьмой день хранения продукт перешел в глиноподобное состояние вследствие разжижения.
6) Стабильность
Кристаллы и2Р4 4Να (октагидрат) и лиофилизованный продукт поместили в соответствующие колбы, которые затем запаяли и оставили на 13 дней при 60°С (тест на ускорение). Разложения кристаллов не наблюдалось, хотя частичное разложение лиофилизованного продукта было подтверждено по снижению чистоты и2Р4 4Να приблизительно на 1,4%.
7) Форма кристалла
На фиг. 4 показана фотография типичной формы кристалла кристаллов и2Р4 4№1 (октагидрата).
8) ИК-спектры поглощения
ИК-спектры кристаллов и2Р4 4Να (октагидрат) и лиофилизованного продукта зарегистрировали обычным образом с использованием спектрофотометра 1Л8СО 5000. Результаты представлены на фиг. 5 и 6. В случае лиофилизованного продукта пики проявляются при 3416, 1702, 1266, 1116, 1079 и 906 (см-1) (фиг. 6), тогда как для кристаллов и2Р4 4Να пики проявляются при 3386, 1690, 1277, 1233, 1146, 1116 и 890 (см1) (фиг. 5).
Пример 3. Получение кристаллов октагидрата и2Р4 4Να.
Содержащую и2Р4 фракцию, полученную при обработке в колонне в примере 2, концентрировали, получив при этом суспензию, и довели ее рН до 7,0. К суспензии постепенно, при перемешивании, добавляли метанол и затем суспензию перемешивали при охлаждении до 10°С для осаждения, таким образом, кристаллов и2Р4-4Ыа.
Содержание воды в полученных при этом и высушенных кристаллах и2Р4 4Να измеряли по методу Карла Фишера, определив, таким образом, что кристаллы представляют собой октагидрат. Спектр дифракции рентгеновских лучей кристаллов представлен на фиг. 1, а значения пиков для него приведены в табл. 4.
Таблица 4
| Пик № | 2Θ (°) | Относительная интенсивность (Ι/Ι0) |
| 1 | 5,96 | 100 |
| 5 | 11,58 | 30 |
| 6 | 12,42 | 77 |
| 8 | 15,40 | 50 |
| 10 | 17,20 | 38 |
| 11 | 18,04 | 38 |
| 12 | 19,84 | 82 |
| 13 | 20,62 | 66 |
| 14 | 21,42 | 48 |
| 19 | 25,38 | 36 |
| 23 | 27,58 | 39 |
| 24 | 27,98 | 37 |
| 30 | 30,64 | 33 |
Промышленная применимость
Как описано выше, кристаллы и2Р4 или его соли, полученные по способу в соответствии с настоящим изобретением, имеют высокую чистоту и стабильность и меньшую гигроскопичность по сравнению с лиофилизованным продуктом, для того, чтобы служить, таким образом, полезным исходным веществом для получения фармацевтического препарата.
Способ получения и2Р4 или его соли, в соответствии с настоящим изобретением, осуществляется с высоким выходом и делает возможным крупномасштабный синтез.
Claims (14)
- ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Кристаллы Р1,Р4-ди(уридин 5'-)тетрафосфата или его соли.
- 2. Кристаллы по п.1, имеющие чистоту, по меньшей мере, 95%.
- 3. Кристаллы по п.1, имеющие чистоту, по меньшей мере, 97%, и содержащие уридин 5'трифосфат и уридин 5'-дифосфат, каждый, в количестве 1% или менее.
- 4. Способ получения кристаллов Р1,Р4ди(уридин 5'-)тетрафосфата или его соли, вклю15 чающий очистку сырого Р1,Р4-ди(уридин 5'-) тетрафосфата или его соли методом анионообменной хроматографии и хроматографии на активированном угле, и добавление гидрофильного органического растворителя к раствору очищенного Р1,Р4-ди(уридин 5'-)тетрафосфата или его соли для осаждения, таким образом, растворенного вещества в виде кристаллов.
- 5. Способ получения кристаллов Р1,Р4ди(уридин 5'-)тетрафосфата или его соли по п.4, в котором очистка включает анионообменную хроматографию с последующей хроматографией на активированном угле.
- 6. Способ по п.4, в котором сырой Р1,Р4ди(уридин 5'-)тетрафосфат или его соль получают из уридин 5'-монофосфата (УМФ) в качестве исходного вещества, и путем применения дифенилхлорфосфата (ДХФ) и пирофосфата (ПФ), используя, по меньшей мере, одну из следующих стадий обработки (а) - (с):(a) добавление УМФ-дифенилфосфата (УМФ-ДФФ) отдельными порциями во время стадии взаимодействия УМФ-ДФФ с солью ПФорганической щелочи;(b) проведение стадии взаимодействия УМФ-ДФФ с солью ПФ-органической щелочи в присутствии основания; и (c) дальнейшую обработку синтезированного и2Р4 щелочью.
- 7. Способ по п.6, в котором Р1,Р4ди(уридин 5'-)тетрафосфат или его соль получают, используя стадии (а) - (с), определенные в п.6.
- 8. Кристаллы Р1,Р4-ди(уридин 5'-)тетрафосфата 4Να.
- 9. Кристаллы гидратов Р1,Р4-ди(уридин 5'-)тетрафосфата 4№.
- 10. Кристаллы по п.9, содержащие 3-8 молекул воды, которые связаны или сцеплены с одной молекулой Р1,Р4-ди(уридин 5'-)тетрафосфата 4Να.
- 11. Кристаллы по п.9, содержащие 4 молекулы воды, которые связаны или сцеплены с одной молекулой Р1,Р4-ди(уридин 5'-)те-трафосфата 4Να.
- 12. Кристаллы по п.9, содержащие 8 молекул воды, которые связаны или сцеплены с одной молекулой Р1,Р4-ди(уридин 5'-)тетрафосфата 4Να.
- 13. Кристаллы по любому из пп.8-12, имеющие чистоту, по меньшей мере, 95%.
- 14. Кристаллы по любому из пп.8-12, имеющие чистоту, по меньшей мере, 97% и содержащие уридин 5'-трифосфат и уридин 5'дифосфат, каждый, в количестве 1% или менее.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP28166398 | 1998-10-02 | ||
| JP17068199 | 1999-06-17 | ||
| PCT/JP1999/005415 WO2000020430A1 (en) | 1998-10-02 | 1999-10-01 | Crystal of diuridine tetraphosphate or salt thereof and method for preparing the same, and method for producing said compound |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA200100407A1 EA200100407A1 (ru) | 2001-10-22 |
| EA003167B1 true EA003167B1 (ru) | 2003-02-27 |
Family
ID=26493605
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| EA200100407A EA003167B1 (ru) | 1998-10-02 | 1999-10-01 | Кристалл диуридин тетрафосфата или его соли и способ его получения и способ получения указанного соединения |
| EA200200695A EA004513B1 (ru) | 1998-10-02 | 1999-10-01 | Способ получения диуридинтетрафосфата или его соли |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| EA200200695A EA004513B1 (ru) | 1998-10-02 | 1999-10-01 | Способ получения диуридинтетрафосфата или его соли |
Country Status (21)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US6458946B1 (ru) |
| EP (1) | EP1043329B1 (ru) |
| JP (2) | JP3247685B2 (ru) |
| KR (1) | KR100475008B1 (ru) |
| CN (2) | CN100396692C (ru) |
| AT (1) | ATE222920T1 (ru) |
| AU (1) | AU747096C (ru) |
| BR (2) | BRPI9917911B1 (ru) |
| CA (1) | CA2345624C (ru) |
| CZ (1) | CZ300402B6 (ru) |
| DE (1) | DE69902624T2 (ru) |
| EA (2) | EA003167B1 (ru) |
| ES (1) | ES2183650T3 (ru) |
| HU (1) | HU228681B1 (ru) |
| IL (1) | IL142181A (ru) |
| MX (1) | MXPA01003377A (ru) |
| NO (1) | NO317305B1 (ru) |
| NZ (1) | NZ510748A (ru) |
| PL (1) | PL199434B1 (ru) |
| SK (1) | SK283729B6 (ru) |
| WO (1) | WO2000020430A1 (ru) |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7078391B2 (en) * | 1997-02-10 | 2006-07-18 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Method of treating edematous retinal disorders |
| US7223744B2 (en) * | 1997-02-10 | 2007-05-29 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Pharmaceutical formulation comprising dinucleoside polyphosphates and salts thereof |
| US6818629B2 (en) | 1997-02-10 | 2004-11-16 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Pharmaceutical formulation comprising P1-(2'-deoxycytidine 5'-)P4-(uridine 5'-) tetraphosphate |
| US6872710B2 (en) | 1997-07-25 | 2005-03-29 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Di(uridine 5′)-tetraphosphate and salts thereof |
| JP3421666B2 (ja) * | 1999-06-30 | 2003-06-30 | ヤマサ醤油株式会社 | ジヌクレオチド結晶 |
| US6867199B2 (en) | 2000-08-21 | 2005-03-15 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Dinucleoside polyphosphate compositions and their therapeutic use |
| CN100363376C (zh) * | 2006-06-12 | 2008-01-23 | 南京工业大学 | 一种5’-核苷三磷酸钠盐的结晶方法 |
| KR102116170B1 (ko) * | 2015-06-29 | 2020-05-27 | 야마사 쇼유 가부시키가이샤 | P1, p4-비스(5''-우리딜)테트라포스페이트 결정의 보관 방법 |
| CN109843901B (zh) * | 2016-10-25 | 2022-04-26 | Yamasa 酱油株式会社 | P1,p4-二(尿苷5’-)四磷酸的纯化方法 |
| KR20180091689A (ko) | 2017-11-06 | 2018-08-16 | 주식회사 종근당 | 무정형 디뉴클레오사이드 폴리포스페이트 화합물의 제조방법 |
| CN109021049B (zh) * | 2018-06-14 | 2020-12-08 | 扬子江药业集团北京海燕药业有限公司 | 一种尿苷5′-二磷酸-苯并咪唑二钠的合成方法 |
| KR20210110055A (ko) * | 2020-02-28 | 2021-09-07 | 주식회사 종근당바이오 | P1, p4-디(우리딘 5'-)테트라포스페이트 나트륨염 4 수화물 결정형 a의 제조방법 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6423694B1 (en) * | 1996-02-21 | 2002-07-23 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Method of treating otitis media with uridine triphosphates and related compounds |
| AU727314B2 (en) * | 1996-03-27 | 2000-12-07 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Method of treating ciliary dyskinesia with uridine triphosphates and related compounds |
| US6319908B1 (en) * | 1996-07-03 | 2001-11-20 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Method for large-scale production of di(uridine 5′-tetraphosphate) and salts thereof |
| US5763447C1 (en) * | 1996-07-23 | 2002-05-07 | Inspire Pharmaceuticals | Method of preventing or treating pneumonia in immobilized patients with uridine triphosphates and related compounds |
| DK1012154T3 (da) * | 1997-07-25 | 2004-07-26 | Inspire Pharmaceuticals Inc | Salte af di(uridin-5'-tetraphosphat), fremgangsmåde til fremstilling og anvendelser deraf |
-
1999
- 1999-10-01 EA EA200100407A patent/EA003167B1/ru not_active IP Right Cessation
- 1999-10-01 EA EA200200695A patent/EA004513B1/ru not_active IP Right Cessation
- 1999-10-01 CA CA002345624A patent/CA2345624C/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-10-01 MX MXPA01003377A patent/MXPA01003377A/es active IP Right Grant
- 1999-10-01 ES ES99970090T patent/ES2183650T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-10-01 KR KR10-2001-7004083A patent/KR100475008B1/ko not_active Expired - Lifetime
- 1999-10-01 BR BRPI9917911A patent/BRPI9917911B1/pt active IP Right Grant
- 1999-10-01 IL IL14218199A patent/IL142181A/xx not_active IP Right Cessation
- 1999-10-01 JP JP2000574541A patent/JP3247685B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1999-10-01 WO PCT/JP1999/005415 patent/WO2000020430A1/ja not_active Ceased
- 1999-10-01 CZ CZ20011028A patent/CZ300402B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1999-10-01 CN CNB2003101209181A patent/CN100396692C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1999-10-01 DE DE69902624T patent/DE69902624T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1999-10-01 AU AU60008/99A patent/AU747096C/en not_active Expired
- 1999-10-01 HU HU0103754A patent/HU228681B1/hu unknown
- 1999-10-01 NZ NZ510748A patent/NZ510748A/xx not_active IP Right Cessation
- 1999-10-01 AT AT99970090T patent/ATE222920T1/de not_active IP Right Cessation
- 1999-10-01 EP EP99970090A patent/EP1043329B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-10-01 PL PL347070A patent/PL199434B1/pl unknown
- 1999-10-01 BR BR9914453-0A patent/BR9914453A/pt not_active Application Discontinuation
- 1999-10-01 SK SK440-2001A patent/SK283729B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1999-10-01 CN CNB998117137A patent/CN1151166C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1999-10-01 US US09/582,642 patent/US6458946B1/en not_active Expired - Lifetime
-
2001
- 2001-03-30 NO NO20011634A patent/NO317305B1/no not_active IP Right Cessation
- 2001-08-06 JP JP2001237293A patent/JP3824894B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
2002
- 2002-04-12 US US10/120,367 patent/US6780988B2/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EA003167B1 (ru) | Кристалл диуридин тетрафосфата или его соли и способ его получения и способ получения указанного соединения | |
| CA2376860C (en) | Dinucleotide crystals | |
| JPWO2000020430A1 (ja) | ジウリジンテトラホスフェート又はその塩の結晶及びその製造法、並びに該化合物の製造法 | |
| CN100354296C (zh) | 二尿苷四磷酸或其盐的晶体和其制备方法、以及制备该化合物的方法 | |
| PL206867B1 (pl) | Sposób wytwarzania P1,P4-di(urydyno-5'-)czterofosforanu |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MK4A | Patent expired |
Designated state(s): RU |