EA007926B1 - Композиции для ингибирования протеинкиназы с-альфа для лечения сахарного диабета и сердечно-сосудистых заболеваний - Google Patents
Композиции для ингибирования протеинкиназы с-альфа для лечения сахарного диабета и сердечно-сосудистых заболеваний Download PDFInfo
- Publication number
- EA007926B1 EA007926B1 EA200500529A EA200500529A EA007926B1 EA 007926 B1 EA007926 B1 EA 007926B1 EA 200500529 A EA200500529 A EA 200500529A EA 200500529 A EA200500529 A EA 200500529A EA 007926 B1 EA007926 B1 EA 007926B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- protein kinase
- nucleic acid
- expression
- activity
- pkc
- Prior art date
Links
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 title claims abstract description 119
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 108010050276 Protein Kinase C-alpha Proteins 0.000 title claims description 84
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 title claims description 22
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 title description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title description 4
- 102000015537 Protein Kinase C-alpha Human genes 0.000 title 1
- 102100024924 Protein kinase C alpha type Human genes 0.000 claims abstract description 158
- 101710109947 Protein kinase C alpha type Proteins 0.000 claims abstract description 80
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 59
- 208000007342 Diabetic Nephropathies Diseases 0.000 claims abstract description 16
- 206010012689 Diabetic retinopathy Diseases 0.000 claims abstract description 15
- 208000033679 diabetic kidney disease Diseases 0.000 claims abstract description 15
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 claims abstract description 13
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 claims abstract description 13
- 208000032131 Diabetic Neuropathies Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 93
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 91
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 91
- 102100024923 Protein kinase C beta type Human genes 0.000 claims description 53
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 51
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 claims description 44
- 108010024526 Protein Kinase C beta Proteins 0.000 claims description 43
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 43
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 42
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 36
- 201000001474 proteinuria Diseases 0.000 claims description 36
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 34
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 30
- 102000003923 Protein Kinase C Human genes 0.000 claims description 29
- 108090000315 Protein Kinase C Proteins 0.000 claims description 29
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 27
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 26
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 claims description 24
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 claims description 24
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 23
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 23
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 claims description 22
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims description 19
- 208000035150 Hypercholesterolemia Diseases 0.000 claims description 18
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 18
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 claims description 18
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 17
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 claims description 16
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 claims description 15
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 15
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 claims description 14
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 claims description 13
- 208000019553 vascular disease Diseases 0.000 claims description 13
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 claims description 11
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 11
- 108020000948 Antisense Oligonucleotides Proteins 0.000 claims description 10
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 claims description 10
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 claims description 10
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 claims description 10
- 230000005945 translocation Effects 0.000 claims description 10
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 claims description 9
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 claims description 9
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 claims description 9
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 claims description 8
- 238000013518 transcription Methods 0.000 claims description 8
- 108090000144 Human Proteins Proteins 0.000 claims description 7
- 102000003839 Human Proteins Human genes 0.000 claims description 7
- 230000001434 glomerular Effects 0.000 claims description 7
- 230000035897 transcription Effects 0.000 claims description 7
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 claims description 6
- 208000014674 injury Diseases 0.000 claims description 6
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 claims description 5
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 claims description 5
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims description 5
- 238000012217 deletion Methods 0.000 claims description 5
- 230000037430 deletion Effects 0.000 claims description 5
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 claims description 5
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 claims description 5
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 5
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 4
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 claims description 4
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 claims description 4
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 claims description 3
- 208000009304 Acute Kidney Injury Diseases 0.000 claims description 2
- 208000022461 Glomerular disease Diseases 0.000 claims description 2
- 101001018100 Homo sapiens Lysozyme C Proteins 0.000 claims description 2
- 102100033468 Lysozyme C Human genes 0.000 claims description 2
- 206010038357 Renal amyloidosis Diseases 0.000 claims description 2
- 208000033626 Renal failure acute Diseases 0.000 claims description 2
- 201000011040 acute kidney failure Diseases 0.000 claims description 2
- 208000012998 acute renal failure Diseases 0.000 claims description 2
- 201000007891 familial visceral amyloidosis Diseases 0.000 claims description 2
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 claims 2
- 230000007211 cardiovascular event Effects 0.000 claims 1
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 claims 1
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 claims 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 44
- 229920002971 Heparan sulfate Polymers 0.000 abstract description 20
- 230000007823 neuropathy Effects 0.000 abstract description 3
- 238000002991 immunohistochemical analysis Methods 0.000 abstract 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 32
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 20
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 19
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 19
- 206010027525 Microalbuminuria Diseases 0.000 description 19
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 19
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 18
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 16
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 16
- 101710094033 Protein kinase C beta type Proteins 0.000 description 15
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 15
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 15
- KIWODJBCHRADND-UHFFFAOYSA-N 3-anilino-4-[1-[3-(1-imidazolyl)propyl]-3-indolyl]pyrrole-2,5-dione Chemical compound O=C1NC(=O)C(C=2C3=CC=CC=C3N(CCCN3C=NC=C3)C=2)=C1NC1=CC=CC=C1 KIWODJBCHRADND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 11
- 102000008055 Heparan Sulfate Proteoglycans Human genes 0.000 description 10
- 108090000054 Syndecan-2 Proteins 0.000 description 10
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 10
- 206010001580 Albuminuria Diseases 0.000 description 8
- 102100036597 Basement membrane-specific heparan sulfate proteoglycan core protein Human genes 0.000 description 8
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 8
- 108010049224 perlecan Proteins 0.000 description 8
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 7
- ZSJLQEPLLKMAKR-UHFFFAOYSA-N Streptozotocin Natural products O=NN(C)C(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O ZSJLQEPLLKMAKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 7
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 7
- 210000002469 basement membrane Anatomy 0.000 description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 7
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 7
- ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N streptozocin Chemical compound O=NN(C)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N 0.000 description 7
- 229960001052 streptozocin Drugs 0.000 description 7
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 6
- 229940088623 biologically active substance Drugs 0.000 description 6
- 238000012151 immunohistochemical method Methods 0.000 description 6
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 6
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 6
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 6
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N α-tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 6
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 5
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 5
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 5
- 150000004633 phorbol derivatives Chemical class 0.000 description 5
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 4
- 101001051777 Homo sapiens Protein kinase C alpha type Proteins 0.000 description 4
- 208000017442 Retinal disease Diseases 0.000 description 4
- 206010038923 Retinopathy Diseases 0.000 description 4
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 4
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 4
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 4
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 4
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 4
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 4
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 description 4
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 4
- 206010003210 Arteriosclerosis Diseases 0.000 description 3
- 108091016585 CD44 antigen Proteins 0.000 description 3
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 3
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 3
- 206010061216 Infarction Diseases 0.000 description 3
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 3
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 3
- 108010044467 Isoenzymes Proteins 0.000 description 3
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 3
- 206010036105 Polyneuropathy Diseases 0.000 description 3
- 102000016611 Proteoglycans Human genes 0.000 description 3
- 108010067787 Proteoglycans Proteins 0.000 description 3
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 3
- 206010038934 Retinopathy proliferative Diseases 0.000 description 3
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 3
- 208000011775 arteriosclerosis disease Diseases 0.000 description 3
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 3
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 3
- 230000036770 blood supply Effects 0.000 description 3
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 210000004351 coronary vessel Anatomy 0.000 description 3
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 3
- 150000004676 glycans Polymers 0.000 description 3
- -1 however Proteins 0.000 description 3
- 201000001421 hyperglycemia Diseases 0.000 description 3
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 3
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 3
- 230000007574 infarction Effects 0.000 description 3
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 3
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 3
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 230000003340 mental effect Effects 0.000 description 3
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 3
- 239000002644 phorbol ester Substances 0.000 description 3
- 150000004804 polysaccharides Polymers 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 2
- 206010002329 Aneurysm Diseases 0.000 description 2
- 206010059245 Angiopathy Diseases 0.000 description 2
- 108020005544 Antisense RNA Proteins 0.000 description 2
- 201000004569 Blindness Diseases 0.000 description 2
- 102000005701 Calcium-Binding Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010045403 Calcium-Binding Proteins Proteins 0.000 description 2
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 2
- 206010052895 Coronary artery insufficiency Diseases 0.000 description 2
- 229930105110 Cyclosporin A Natural products 0.000 description 2
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 2
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 2
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 2
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 2
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 2
- 208000009857 Microaneurysm Diseases 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 208000031481 Pathologic Constriction Diseases 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 108010073929 Vascular Endothelial Growth Factor A Proteins 0.000 description 2
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 2
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 2
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 2
- 229940087168 alpha tocopherol Drugs 0.000 description 2
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003727 cerebral blood flow Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 2
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 2
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 2
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N d-alpha-tocopherol Natural products OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 150000001982 diacylglycerols Chemical class 0.000 description 2
- 230000003292 diminished effect Effects 0.000 description 2
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 208000018769 loss of vision Diseases 0.000 description 2
- 231100000864 loss of vision Toxicity 0.000 description 2
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 206010062198 microangiopathy Diseases 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 201000001119 neuropathy Diseases 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 208000033808 peripheral neuropathy Diseases 0.000 description 2
- 230000007824 polyneuropathy Effects 0.000 description 2
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 2
- 108010008359 protein kinase C lambda Proteins 0.000 description 2
- 201000010384 renal tubular acidosis Diseases 0.000 description 2
- 210000001525 retina Anatomy 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000036262 stenosis Effects 0.000 description 2
- 208000037804 stenosis Diseases 0.000 description 2
- 229960000984 tocofersolan Drugs 0.000 description 2
- 229930003799 tocopherol Natural products 0.000 description 2
- 239000011732 tocopherol Substances 0.000 description 2
- 235000010384 tocopherol Nutrition 0.000 description 2
- 229960001295 tocopherol Drugs 0.000 description 2
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- 230000004393 visual impairment Effects 0.000 description 2
- 239000002076 α-tocopherol Substances 0.000 description 2
- 235000004835 α-tocopherol Nutrition 0.000 description 2
- QGVLYPPODPLXMB-UBTYZVCOSA-N (1aR,1bS,4aR,7aS,7bS,8R,9R,9aS)-4a,7b,9,9a-tetrahydroxy-3-(hydroxymethyl)-1,1,6,8-tetramethyl-1,1a,1b,4,4a,7a,7b,8,9,9a-decahydro-5H-cyclopropa[3,4]benzo[1,2-e]azulen-5-one Chemical compound C1=C(CO)C[C@]2(O)C(=O)C(C)=C[C@H]2[C@@]2(O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@@]3(O)C(C)(C)[C@H]3[C@@H]21 QGVLYPPODPLXMB-UBTYZVCOSA-N 0.000 description 1
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 description 1
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 206010003225 Arteriospasm coronary Diseases 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000029812 Cerebral Small Vessel disease Diseases 0.000 description 1
- 206010008190 Cerebrovascular accident Diseases 0.000 description 1
- 102000010831 Cytoskeletal Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010037414 Cytoskeletal Proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000012270 DNA recombination Methods 0.000 description 1
- 206010011878 Deafness Diseases 0.000 description 1
- 208000002249 Diabetes Complications Diseases 0.000 description 1
- 206010012655 Diabetic complications Diseases 0.000 description 1
- 208000008960 Diabetic foot Diseases 0.000 description 1
- 208000005189 Embolism Diseases 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000283074 Equus asinus Species 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000010412 Glaucoma Diseases 0.000 description 1
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 101001051767 Homo sapiens Protein kinase C beta type Proteins 0.000 description 1
- 101001026870 Homo sapiens Serine/threonine-protein kinase D1 Proteins 0.000 description 1
- 206010060840 Ischaemic cerebral infarction Diseases 0.000 description 1
- 102000057248 Lipoprotein(a) Human genes 0.000 description 1
- 108010033266 Lipoprotein(a) Proteins 0.000 description 1
- 101000930477 Mus musculus Albumin Proteins 0.000 description 1
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 101000971435 Oryctolagus cuniculus Protein kinase C gamma type Proteins 0.000 description 1
- 201000010183 Papilledema Diseases 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 208000005374 Poisoning Diseases 0.000 description 1
- 108010078137 Protein Kinase C-epsilon Proteins 0.000 description 1
- 102000014458 Protein Kinase C-epsilon Human genes 0.000 description 1
- 108010015499 Protein Kinase C-theta Proteins 0.000 description 1
- 102000001892 Protein Kinase C-theta Human genes 0.000 description 1
- 229940123866 Protein kinase C beta inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 101710144823 Protein kinase C gamma type Proteins 0.000 description 1
- 102100037314 Protein kinase C gamma type Human genes 0.000 description 1
- 101710201186 Protein kinase C-like 1 Proteins 0.000 description 1
- 208000037111 Retinal Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 206010038848 Retinal detachment Diseases 0.000 description 1
- 206010038886 Retinal oedema Diseases 0.000 description 1
- 239000008156 Ringer's lactate solution Substances 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 229940124639 Selective inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 102100037310 Serine/threonine-protein kinase D1 Human genes 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 1
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 1
- 206010053648 Vascular occlusion Diseases 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 238000002266 amputation Methods 0.000 description 1
- 206010002022 amyloidosis Diseases 0.000 description 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000879 anti-atherosclerotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002785 anti-thrombosis Effects 0.000 description 1
- 210000000702 aorta abdominal Anatomy 0.000 description 1
- 230000008321 arterial blood flow Effects 0.000 description 1
- 230000004872 arterial blood pressure Effects 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000037429 base substitution Effects 0.000 description 1
- 239000002876 beta blocker Substances 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000013043 chemical agent Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 208000020832 chronic kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 208000022831 chronic renal failure syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000004087 circulation Effects 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007596 consolidation process Methods 0.000 description 1
- 230000027326 copulation Effects 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 210000004292 cytoskeleton Anatomy 0.000 description 1
- 231100000895 deafness Toxicity 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 230000035487 diastolic blood pressure Effects 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 208000037765 diseases and disorders Diseases 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000005713 exacerbation Effects 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 210000000416 exudates and transudate Anatomy 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 210000000585 glomerular basement membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000024924 glomerular filtration Effects 0.000 description 1
- 230000004153 glucose metabolism Effects 0.000 description 1
- 208000018914 glucose metabolism disease Diseases 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 208000016354 hearing loss disease Diseases 0.000 description 1
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004217 heart function Effects 0.000 description 1
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000014617 hemorrhoid Diseases 0.000 description 1
- 230000003345 hyperglycaemic effect Effects 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 1
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001861 immunosuppressant effect Effects 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 201000006334 interstitial nephritis Diseases 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 1
- 238000005304 joining Methods 0.000 description 1
- 230000003907 kidney function Effects 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 210000003632 microfilament Anatomy 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000003533 narcotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 201000003142 neovascular glaucoma Diseases 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940046166 oligodeoxynucleotide Drugs 0.000 description 1
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 208000035824 paresthesia Diseases 0.000 description 1
- 230000003836 peripheral circulation Effects 0.000 description 1
- 210000000578 peripheral nerve Anatomy 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- QGVLYPPODPLXMB-QXYKVGAMSA-N phorbol Natural products C[C@@H]1[C@@H](O)[C@]2(O)[C@H]([C@H]3C=C(CO)C[C@@]4(O)[C@H](C=C(C)C4=O)[C@@]13O)C2(C)C QGVLYPPODPLXMB-QXYKVGAMSA-N 0.000 description 1
- BQJRUJTZSGYBEZ-YVQNUNKESA-N phorbol 12,13-dibutanoate Chemical compound C([C@]1(O)C(=O)C(C)=C[C@H]1[C@@]1(O)[C@H](C)[C@H]2OC(=O)CCC)C(CO)=C[C@H]1[C@H]1[C@]2(OC(=O)CCC)C1(C)C BQJRUJTZSGYBEZ-YVQNUNKESA-N 0.000 description 1
- PHEDXBVPIONUQT-RGYGYFBISA-N phorbol 13-acetate 12-myristate Chemical compound C([C@]1(O)C(=O)C(C)=C[C@H]1[C@@]1(O)[C@H](C)[C@H]2OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)C(CO)=C[C@H]1[C@H]1[C@]2(OC(C)=O)C1(C)C PHEDXBVPIONUQT-RGYGYFBISA-N 0.000 description 1
- 230000000865 phosphorylative effect Effects 0.000 description 1
- 231100000572 poisoning Toxicity 0.000 description 1
- 230000000607 poisoning effect Effects 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 208000022204 primary glomerular disease Diseases 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 1
- 108010027883 protein kinase C eta Proteins 0.000 description 1
- 210000000512 proximal kidney tubule Anatomy 0.000 description 1
- 230000009103 reabsorption Effects 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000009711 regulatory function Effects 0.000 description 1
- 230000004264 retinal detachment Effects 0.000 description 1
- 201000011195 retinal edema Diseases 0.000 description 1
- 208000032253 retinal ischemia Diseases 0.000 description 1
- 210000001210 retinal vessel Anatomy 0.000 description 1
- 235000002020 sage Nutrition 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 208000037921 secondary disease Diseases 0.000 description 1
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 230000000391 smoking effect Effects 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000002966 stenotic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004895 subcellular structure Anatomy 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000035488 systolic blood pressure Effects 0.000 description 1
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 1
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 1
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- YFDSDPIBEUFTMI-UHFFFAOYSA-N tribromoethanol Chemical compound OCC(Br)(Br)Br YFDSDPIBEUFTMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950004616 tribromoethanol Drugs 0.000 description 1
- 210000001364 upper extremity Anatomy 0.000 description 1
- 208000021331 vascular occlusion disease Diseases 0.000 description 1
- 210000004509 vascular smooth muscle cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000004304 visual acuity Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
- A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
- A61K31/235—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids having an aromatic ring attached to a carboxyl group
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
- A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline
- A61K31/353—3,4-Dihydrobenzopyrans, e.g. chroman, catechin
- A61K31/355—Tocopherols, e.g. vitamin E
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/12—Cyclic peptides, e.g. bacitracins; Polymyxins; Gramicidins S, C; Tyrocidins A, B or C
- A61K38/13—Cyclosporins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/45—Transferases (2)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Immunology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Obesity (AREA)
- Hematology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Настоящее изобретение относится к применению агентов, которые предотвращают экспрессию и/или активность протеинкиназы С-α (РКС-α), в особенности для лечения больных диабетом и осложнений, таких как диабетическая нефропатия, ретинопатия или невропатия. (Иммуногистохимическое исследование срезов показывает, что гепарансульфат-протеогликан у контрольных животных с диабетом (В) более не обнаруживается или едва обнаруживается, однако, у мышей РКС-αс диабетом (D) образуется в нормальной концентрации).
Description
Настоящее изобретение относится к применению агентов, которые уменьшают или ингибируют экспрессию и/или активность протеинкиназы С-α (РКС-α), для лечения и/или профилактики коронарной болезни сердца, инфаркта сердца, периферического облитерирующего заболевания, инсульта, ассоциированных с протеинурией болезней почек, диабетических поздних повреждений и/или сердечнососудистых осложнений у больных сахарным диабетом, сердечно-сосудистых осложнений у больных с гипертонией и сердечно-сосудистых осложнений у больных с гиперхолестеринемией.
Сахарный диабет представляет собой одно из самых частых заболеваний в западном мире, которое затрагивает примерно 5% населения. Сахарный диабет подразделяют на диабет типа I, который возникает, как правило, уже в молодости, и диабет типа II, называемый также старческим сахарным диабетом. Вследствие нарушения метаболизма глюкозы в случае обеих форм диабета имеет место устойчиво повышенный уровень глюкозы в крови, что у соответствующих больных спустя несколько лет приводит к различным осложнениям. Самыми частыми и одновременно чаще всего опасными осложнениями являются диабетическая ретинопатия, которая приводит к потере зрения, диабетическая невропатия, которая может простираться до ампутации стоп или нижних конечностей, и диабетическая нефропатия.
Диабетическая нефропатия развивается у примерно 40% всех больных диабетом и во всем мире является самой частой причиной хронической почечной недостаточности и лечения диализом. Примерно от 30 до 40% всех подвергаемых диализу больных имеют диабетическую нефропатию. Так как повреждение почек за счет диабета развивается медленно, большое клиническое значение имеет уже ранняя идентификация больных с повышенным риском развития почечной недостаточности, для того, чтобы предпринимать пригодные терапевтические меры. Одним из первых клинических признаков начинающегося повреждения почек является появление так называемой микроальбуминурии. При этом происходит выделение 30-300 мг альбумина в собранной за 24 ч моче. В нормальном случае выделяются менее чем 30 мг альбумина в сутки. Микроальбуминурия возникает в современных терапевтических условиях примерно у 25% диабетиков с диабетом типа I или типа II (АНаэб, Э|аЬе1ез Саге, 19, 79089 (1996); К1еш и др., Э1аЬе1ез Саге, 22, 743-751 (1999); Уа1табпб и др., Агсй. Шет. Меб., 160, 1093-1100 (2000)). Риск развивающейся почечной недостаточности у больных с микроальбуминурией примерно в 10 раз выше, чем у пациентов с нормальным выделением альбумина. Диабетическая нефропатия, которая характеризуется протеинурией более, чем 300 мг/сутки и/или ограниченной функцией почек, развивается у примерно 510% всех больных диабетом и микроальбуминурией в год. Также значительно повышен риск развивающейся диабетической ретинопатии у диабетиков с микроальбуминурией по сравнению с диабетиками без микроальбуминурии (У|дз1гир и Модепзеп, Ае1а ОрЫа1то1. (Сорепй.), 63, 530-534 (1985)).
Как показали продолжительные исследования, интенсивно проводимые более 10 лет, смертность от сердечно-сосудистых заболеваний у дибетиков с диабетом типа I и типа II уже на стадии микроальбуминурии повышена примерно в два раза по сравнению с диабетиками без микроальбуминурии, также с учетом обычных факторов риска, как холестерин и гипертония (Коззшд и др., Вт), 313, 779-784 (1996); Оет81еш и др., Э1аЬе1ез Саге, 23, 8ирр1. 2, В35-39 (2000); УаШабпб и др., (2000)). Повышенная смертность от сердечно-сосудистых заболеваний выявлена также в случае больных с микроальбуминурией без сахарного диабета (Оетз1ет и др., 1ата, 286, 421-426 (2001)).
Существуют различные гипотезы, почему микроальбуминурия представляет собой чрезвычайно важный маркер возникновения осложнений у больных диабетом. Согласно так называемой стеногипотезе (Эескеп, Ре1б1-Казтиззеп и др., П1аЬе1о1од1а, 32, 219-226 (1989)), потеря отрицательно заряженных, следовательно, анионных, молекул во внеклеточной матрице ответственна за возникновение альбуминурии, диабетической ретинопатии и сердечно-сосудистых осложнений, как, например, коронарная болезнь сердца. Эта гипотеза обосновывается данными, полученными как в случае человека, так и на животных модельных системах, и в последние годы подтверждена результатами других рабочих групп.
В почках моча отжимается в почечных тельцах, так называемых клубочках. Для предотвращения прохождения протеинов, например альбумина, кровь от мочи отделена мембраной, называемой базальной мембраной. Базальная мембрана имеет маленькие поры, которые позволяют проникать более мелким молекулам через базальную мембрану, в то время как протеиновые молекулы на основании их размера не могут проходить через мембрану. У больных микроальбуминурией все-таки происходит проникновение протеинов маленького размера, как альбумин, пока размер пор не увеличивается. В качестве объяснения этого явления можно указать на то, что в порах или на краю пор, имеются молекулы с отрицательным зарядом, которые отталкивают также отрицательно заряженные протеины (Куетпе1апб, Ре1б1Казтиззеп и др., П1аЬе1о1од1а, 29, 634-639 (1986); Эескеп, Ре1б1-Казтиззеп и др., К|бпеу Ш., 33, 100-106 (1988); Куегпе1апб, ХУеШбег и др., П1аЬе1о1од1а, 31, 708-710 (1988)). В случае этих молекул с отрицательными зарядами речь идет о протеогликанах. Протеогликаны представляют собой комплексные макромолекулы, которые состоят из протеинов, с которыми ковалентно связаны полисахаридные цепи. Полисахаридные цепи преимущественно состоят из гепарансульфата и сильно отрицательно заряжены. Чаще всего встречающимся в организме протеогликаном является перлекан. Перлекан представляет собой протеин массой 460 кДа и имеет несколько полисахаридных боковых цепей (Мигбосй и кххо, Уйс1ю\\'з Агсй. А. Ра)1ю1. Апа1. Н1з1ора1йо1., 423, 237-242 (1993); !оххо, Сойеп и др., Вюсйет. 1., 302, 625-639 (1994);
- 1 007926
МигПоск, Ьш и др., 1. Н1к1оскет. Су1оскет., 42, 239-249 (1994)). У больных диабетом и микроальбуминурией гепарансульфат практически отсутствует в гломерулярной базальной мембране. Также у больных с прогрессирующей диабетической нефропатией гепарансульфат более невозможно обнаружить в базальной мембране, хотя протеиновые цепи еще имеются. Этот эффект объясняется уменьшенным синтезом гапарансульфата в гипергликемических условиях, которые имеются у диабетиков (Раг!какага1ку и 8рйо, П1аЬе1ек, 31, 738-741 (1982); Ре1П1-Вактиккеп и др., (1988); Ыакатига и Муегк, П1аЬе1ек, 37, 1202-1211 (1988); №гкск и 8ск1е1скег, Ат. 1. Ра1ко1., 139, 889-899 (1991); 1кеПа и др., Ыеркгоп, 61, 415-421 (1992); 8сапП1шд и Муегк, К1Ппеу Ιηΐ., 41, 840-846 (1992); Уегшег, 81е££ек и др., К1Ппеу Ιηΐ., 41, 1070-1080 (1992); Таткта, уап Пеп Вогп и др., П1аЬе1о1од1а, 37, 313-320 (1994); 1оххо и 8ап Ап1ошот, 1. С1ш. 1пуек1., 108, 349-355 (2001)). Далее, показано, что гепарансульфат-протеогликаны не только предотвращают гломерулярную фильтрацию альбумина за счет отрицательного заряда, но и, вероятно, также совместно ответственны за целостность размера пор внутри базальной мембраны (Пескей, Ко£оеП-Епеуо1Пкеп и др., Э|аЬе1о1оща, 36, 244-251 (1993)). Таким образом, потеря гепарансульфат-протеогликанов с прогрессированием почечной недостаточности приводит к разрушению микроструктуры базальной мембраны. Эти изменения могли бы объяснить, почему протекание диабетической нефропатии приводит к большой, неселективной протеинурии с потерей более крупных протеинов, как иммуноглобулин. Гепарансульфатпротеогликаны также являются сильными ингибиторами мезангиальной экспансии в почечных тельцах. Это представляет большой интерес, так как у больных диабетом обычно происходит утолщение мезангиальной соединительной ткани. Поэтому не является неожиданным, что потерю гепарансульфатпротеогликанов у больных диабетом считают важной причиной мезангиальной экспансии.
Потеря гепарансульфата у диабетиков происходит, однако, не только в почках, но и почти во всех других органах. Так, отчетливое уменьшение количества гепарансульфата происходит в соединительной ткани сетчатки, скелетной мышцы, стенок артерий и кожи, а также в эритроцитах. Эндотелиальные клетки также проявляют уменьшенный синтез гепарансульфата (Уокоуата, Ноуег и др., П1аЬе1ек, 46, 18751880 (1997); уап Пег Ру1, Эака и др., П1аЬе1о1оща, 41, 791-798 (1998)). Так как гепарансульфатпротеогликаны обладают важными антитромботическими свойствами, потеря гепарансульфатпротеогликанов может способствовать образованию микротромбов, например, в сосудах сетчатки, и, таким образом, благоприятствовать возникновению диабетической ретинопатии (Магсит, Ргкхе и др., Ат. 1. Ркукю1., 245, Н275-33 (1983); Магсит, Мс Кеппеу и др., 1. С1ш. 1пуек1., 74, 341-350 (1984); Магсит и ВокепЬегд, Вюскеткйу, 23, 1730-1737 (1984); Магсит, А1ка и др., 1. Вю1. Скет., 261, 7507-7517 (1986)). Другие важные антиатеросклеротические функции гепарансульфат-протеогликанов (Н8НС) состоят в том, что Н8РС ингибируют пролиферацию гладкомышечных клеток сосудов, за счет чего происходит возникновение повреждений артериальных сосудов. Н8РС, далее, ингибируют образование моноцитов (воспалительные клетки) в субэндотелиальной соединительной ткани. Н8РС также ингибируют субэндотелиальное связывание и отложение липопротеина-а и окисленных ΕΌΕ, которые играют решающую роль в возникновении артериосклероза. Н8РС также являются важными регуляторами при ангиогенезе, то есть, при образовании новых сосудов в поврежденных областях организма (ВокепЬегд, 8к\гогак и др., 1. С1ш. 1пуек1., 100, 67-75 (1997); РШапкеШ, Тгепк СагПюуакс. МеП., 10, 60-65 (2000); 1оххо 8ап Ап1ошо, (2001)). Потеря гепарансульфат-протеогликана поэтому имеет значение не только в случае возникновения диабетической нефропатии и диабетической ретинопатии, но и при возникновении сердечно-сосудистых осложнений.
Одним важным аспектом является то, что у больных с гипертонией возникает микроальбуминурия. До сих пор это явление объясняли повышенным давлением в почечных тельцах, причем предполагали, что альбумин отжимается в повышенной мере. Однако, если это соответствует действительности, то нужно исходить из того, что больные с постоянным высоким артериальным кровяным давлением также обладают высоким риском сердечно-сосудистых заболеваний, независимо от того, есть ли у них микроальбуминурия. Это, однако, не соответствует действительности, как было показано при различных перспективных исследованиях. Больные с микроальбуминурией, страдающие гипертензией, имеют примерно в 2 раза более высокую смертность от сердечно-сосудистых заболеваний, чем страдающие гипертензией больные с иным сравнимым профилем риска, как, например, гиперхолестеринемия, анамнез за счет курения и диабет (81ещк1, 1. Вешп Апдю1епкш А1Пок1егопе 8ук1., 1, 18-20 (2000); Спрра, 1. Нит. Нурейепк., 16 (дополнение 1), 74-77 (2002); П1егскк, уап Воуеп и др., Сап. 1. СагПю1., 18, 525-535 (2002)). Соответственно этому, микроальбуминурия является независимым фактором риска возникновения и прогноза сердечно-сосудистых заболеваний. Это может объясняться только тем, что у больных с микроальбуминурией происходит изменение во всей сосудистой системе. До сих пор, однако, не ясно, какое нарушение у больных с гипертонией является причиной микроальбуминурии.
Техническая задача, на решение которой направлено настоящее изобретение, заключается в получении средств, которые можно использовать для лечения микроальбуминурии, в особенности у больных сахарным диабетом и больных с гипертонией, для лечения ассоциированных с диабетом поздних повреждений, в особенности диабетической ретинопатии, диабетической нефропатии и диабетической невропатии, и сердечно-сосудистых осложнений, а также ассоциированных с гипертонией сердечнососудистых осложнений, и/или их предотвращения.
- 2 007926
Поставленная техническая задача решается согласно изобретению применением агентов для лечения и/или профилактики заболеваний сосудов, сердечно-сосудистых заболеваний, ассоциированных с протеинурией заболеваний почек, диабетических поздних повреждений и/или сердечно-сосудистых осложнений у больных сахарным диабетом, сердечно-сосудистых осложнений у больных с ретинопатией и/или сердечно-сосудистых осложнений у больных с гиперхолестеринемией, которые уменьшают или предотвращают экспрессию и/или активность протеинкиназы С-α (РКС- α).
В уровне техники до сих пор предполагалось, что в2-изоформа протеинкиназы С ответственна за возникновение диабетических осложнений. в2-Изоформа, во-первых, в повышенной мере продуцируется в ткани больных диабетом животных (1иодисЫ и др., Ргос. №111. Асаб. 8с1. И8Л, 89, 11059-11063 (1992)) и, во вторых, специфичный к протеинкиназе С-β ингибитор Й-У333531 в случае грызунов с диабетом типа I и диабетом типа II приводит к меньшей протеинурии, как показателю уменьшенного повреждения почек фЬл и др., 1. Мо1. Меб., 76, 21-31 (1998); Коуа и др., РакеЬ 1., 14, 439-447 (2000)).
Созданные согласно изобретению, лишенные протеинкиназы С-α мыши, которые не могут вырабатывать протеинкиназы С-α, после провоцирования диабета с помощью стрептозотоцина неожиданно не имеют альбуминурии. Напротив, контрольные животные, которые вплоть до изменения экспрессии протеинкиназы С-α генетически были в значительной степени идентичны, проявляют отчетливую альбуминурию. Дальнейшее исследование лишенных протеинкиназы С-α животных совершенно неожиданно показало, что животные в условиях диабета способны были вырабатывать гепарансульфат в нормальной концентрации. Напротив, контрольные животные в условиях диабета едва еще могли продуцировать гепарансульфат.
Осуществляемые согласно изобретению гистологические исследования показали дальнейшие значительные изменения у лишенных протеинкиназы С-α мышей. При использовании иммуногистохимических способов согласно изобретению обнаружено, что отсутствие протеинкиназы С-α влечет за собой дальнейшие веские различия в экспрессии васкулярного эндотелиального фактора роста (УБОР) и относящегося к нему рецептора (УБОР-К II). В то время как в случае контрольных животных с диабетом можно обнаруживать значительное увеличение экспрессированных количеств УБОР и рецептора УЕОРК II, у лишенных протеинкиназы С-α животных установлено отчетливо меньшее увеличение экспрессированных количеств УЕОР и рецептора УЕОР-К II. Этот результат имеет огромное значение, поскольку повышенная экспрессия УЕОР рассматривается в качестве одного из важнейших медиаторов в отношении возникновения диабетической ретинопатии (А1е11о и \Уопд. К1биеу ЙИ. 8ирр1., 77, 113-119 (2000); Вещами, Ат. 1. РаШо1., 158, 1181-1184 (2001)).
Из результатов согласно изобретению следует, что протеинкиназа С-α играет центральную роль в регуляции образования гепарансульфат-протеогликана и при проявлении протеинурии. Полученные согласно изобретению результаты также показывают, что протеинкиназа С-α в случае проявления протеинурии играет значительно более важную роль, чем протеинкиназа С-β, однако, протеинкиназа С-β, повидимому, способна брать на себя по меньшей мере часть функций протеинкиназы С-α. Полученные согласно изобретению результаты показывают, что ингибирование α-изоформы протеинкиназы С приводит как к целенаправленной защите от развития диабетических поздних осложнений таких как диабетическая нефропатия, диабетическая ретинопатия и/или сердечно-сосудистые осложнения, так и к целенаправленной защите от развития заболеваний, которые ассоциируются с протеинурией.
Согласно изобретению предусматривается применение агентов, уменьшающих или ингибирующих экспрессию и/или активность протеинкиназы С-α (РКС-α), для лечения и/или профилактики заболеваний сосудов, сердечно-сосудистых заболеваний, ассоциированных с протеинурией болезней почек, диабетических поздних повреждений и/или сердечно-сосудистых осложнений у больных сахарным диабетом, сердечно-сосудистых осложнений у больных с гипертонией и/или сердечно-сосудистых осложнений у больных с гиперхолестеринемией.
Согласно настоящему изобретению под термином болезни или заболевания понимают нарушения жизненных процессов в органах или во всем организме последствием субъективно ощущаемых или объективно определяемых физических, психических или умственных изменений. Под термином осложнения или поздние повреждения понимают заболевания, вызванные определенной причиной или вторичные заболевания, то есть, присоединяющееся к первичной картине болезни второе заболевание.
Согласно изобретению в случае заболеваний, на которые направлено лечение, речь идет в особенности о заболеваниях сосудов, сердечно-сосудистых заболеваниях, ассоциированных с протеинурией болезнях почек, ассоциированных или не ассоциированных с сахарным диабетом повреждениях и/или сердечно-сосудистых осложнениях, ассоциированных или не ассоциированных с гипертонией сердечнососудистых осложнениях и/или ассоциированных или не ассоциированных с гиперхолестеринемией сердечно-сосудистых осложнениях.
Согласно настоящему изобретению под термином заболевания сосудов или ангиопатии понимают в особенности заболевания артерий, которые приводят к функциональным или органическим нарушениям кровотока. Согласно предпочтительному варианту осуществления изобретения заболевание сосудов представляет собой периферическое артериальное облитерирующее заболевание. Под термином
- 3 007926 артериальное облитерирующее заболевание понимают заболевание, которое провоцируется стенозирующими или облитерирующими изменениями в артериях и приводит к нарушениям кровотока с ишемией в тканях или органах зависимых от снабжения кровью. В случае сахарного диабета в особенности речь идет о хронических облитерирующих заболеваниях, которые провоцируются, в частности, облитерирующим артериосклерозом, также ангиопатиями и ангионевропатиями.
Под термином сердечно-сосудистые заболевания понимают заболевания и нарушения, которые затрагивают функцию сердца и кровообращение, как, например, состояние наполнения и тонуса сосудистой системы, мощность выброса сердца, нервные и гуморальные механизмы связывания между сердцем и циркуляцией и т.д. Согласно предпочтительному варианту изобретения, в случае сердечно-сосудистых заболеваний речь идет о коронарной болезни сердца, инфаркте сердца и инсульте.
Под термином коронарная болезнь сердца понимают клиническое проявление первичной коронарной недостаточности, причем за счет сужения или закупорки венечных сосудов сердца происходит уменьшение кровотока и тем самым уменьшение подвода поставляющих энергию субстратов и кислорода к сердечной мышце.
Под термином инфаркт сердца понимают некроз описанного участка сердечной мышцы, который непосредственно возникает чаще всего в виде осложнения при хронической коронарной болезни сердца. Причиной инфаркта сердца являются длительное критическое недостаточное кровоснабжение при коронарной недостаточности и продолжающиеся длительное время спазмы коронарных сосудов, в особенности в области предшествующего эксцентрического стеноза коронарных сосудов сердца. Инфаркт сердца часто возникает при физической или психической нагрузке вследствие повышения потребности в кислороде сердечной мышцы или при непосредственном прерывании кровоснабжения.
Под термином инсульт или апоплексия понимают ишемический инфаркт головного мозга вследствие артериального нарушения кровотока головного мозга. Инсульт провоцируется эмболиями, которые исходят от артериосклеротических изменений внечерепных сосудов или от сердца, реже вследствие стеноза или церебральных микроангиопатий.
Согласно настоящему изобретению под выражением ассоциированные с протеинурией заболевания почек понимают в особенности паренхиматозные заболевания почек, которые характеризуются наличием протеинов в моче. В случае протеинурии речь может идти о гломерулярной протеинурии, тубулярной протеинурии или гломерулярно-тубулярной смешанной протеинурии. Исключительно ренальное выделение альбумина и трансферрина характеризует селективную протеинурию, которая возникает, например, при нефропатии с минимальными изменениями. В случае неселективной протеинурии в моче также обнаруживают иммуноглобулин С (1дС). Эту форму протеинурии можно обнаружить, например, при амилоидозе почек, однако, также в прогрессирующей стадии диабетической нефропатии. Причиной тубулярной протеинурии являются туболоинтерстициальные заболевания, которые затрагивают реабсорбционные процессы, следствием чего является экскрекция низкомолекулярных протеинов. Клинически тубулярная протеинемия является значительной, в особенности, если она ассоциирована с другими дефектами проксимального канальца. Тубулярные протеинурии встречаются, в частности, при таких заболеваниях, как наследственная тубулопатия, ренально-тубулярный ацидоз, бактериально или медикаментозно индуцированный интерстициальный нефрит, острая почечная недостаточность, отравления тяжелыми металлами, нефропатия Вепсе-бопек и в послеоперационной фазе после трансплантации почек. Причиной гломерулярно-тубулярной смешанной протеинурии часто являются первичные гломерулярные заболевания с выраженными вторичными интерстициальными изменениями.
Согласно предпочтительному варианту изобретения в случае ассоциированных с протеинурией заболеваний почек речь идет в особенности о нефропатии с минимальными изменениями, прочих гломерулопатиях, амилоидозе почек, наследственной тубулопатии, ренально-тубулярном ацидозе, медикаментозно или бактериально индуцированной интерстициальной нефропатии, острой почечной недостаточности, нефропатии Вепсе-бопек и послеоперационной фазе трансплантации почек.
Согласно настоящему изобретению под термином сахарный диабет понимают различные формы нарушения метаболизма глюкозы с различной этиологией и симптоматикой. Общим характерным признаком является относительный или абсолютный дефицит инсулина. Заболевания сахарным диабетом отличаются долговременным повышением уровня глюкозы в крови (гипергликемия) или неадекватным по времени расходом вводимой глюкозы. Сахарный диабет подразделяют на тип I (ΙΌΌΜ) и тип II (ΝΙΌΌΜ).
Специфичными для диабета и ассоциированными с диабетом хроническими осложнениями являются микроангиопатия, как ретинопатия, нефропатия и невропатия, полиневропатия, диабетическая стопа, нарушение скелетной, опорной и соединительной ткани, а также магроангиопатия, в особенности коронарная болезнь сердца, церебральное нарушение кровотока и периферическое артериальное облитерирующее заболевание.
Под термином диабетическая ретинопатия понимают возникающую при сахарном диабете микроангиопатию глазного дна. Формами диабетической ретинопатии являются непролиферативная ретинопатия (ретинопатия глазного дна) такая как кровоизлияния в сетчатку, микроаневризмы, неровные экссудаты, отек сетчатки с потерей остроты зрения, а также пролиферативная ретинопатия, причем происходит дополнительное возникновение ватообразных очагов и неоваскуляризации сосудов в сетчатке и перед
- 4 007926 сетчаткой с кровоизлияниями в стекловидное тело за счет закупорки сосудов вследствие ишемии сетчатки. Пролиферативная ретинопатия может приводить к тракционной отслойке сетчатки, неоваскулярной глаукоме и потере зрения.
Согласно настоящему изобретению под термином диабетическая нефропатия, которую называют также как диабетический гломерулосклероз, понимают повреждение гломерулярных почечных капилляров. Диабетическая нефропатия клинически выражается в протеинурии, гипертонии, отеках, диффузном расширении базальной мембраны, увеличении мезангия и более поздних узелкообразных уплотнениях в клубочковых петлях с сужением просвета сосуда, а также в фибриноидных отложениях на стенке капилляра и микроаневризмах.
Согласно настоящему изобретению под термином диабетическая невропатия понимают заболевание периферических нервов. При этом в особенности речь идет о симметричной дистальной чувствительно-двигательной полиневропатии и автономной невропатии. Периферическая полиневропатия обычно проявляется в нижних конечностях, начинаясь со стоп, и продвигается проксимально дальше и нередко также затрагивает верхние конечности. Симптоматология значительно изменяется, причем недуги, такие как боли, ощущение глухоты и парестезия, часто приводят к экзацербации.
Под сердечно-сосудистыми осложнениями при диабете понимают, согласно изобретению, сердечно-сосудистые заболевания и заболевания сосудов, в особенности периферическое облитерирующее заболевание, коронарную болезнь сердца, инфаркт сердца и инсульт, которые возникают вследствие сахарного диабета.
Согласно настоящему изобретению под термином гипертония понимают высокое кровяное давление или гипертоническую болезнь, которое/которая характеризуется долговременным повышением кровяного давления до значений систолического давления более, чем 140 мм рт.ст., и диастолического давления более, чем 90 мм рт.ст. Под выражением асоциированные с гипертонией сердечно-сосудистые осложнения понимают, согласно изобретению, сердечно-сосудистые заболевания и заболевания сосудов, в особенности периферическое облитерирующее заболевание, коронарную болезнь сердца, инфаркт сердца и инсульт, которые возникают вследствие гипертонии.
Согласно настоящему изобретению под термином гиперхолестеринемия понимают повышенную концентрацию холестерина в крови, причем вследствие диабета может возникать первичная или вторичная гиперхолестеринемия.
Гиперхолестеринемия представляет собой фактор риска в отношении артериосклероза. Под выражением ассоциированные с гиперхолестеринемией сердечно-сосудистые осложнения понимают, согласно изобретению, сердечно-сосудистые заболевания и заболевания сосудов, в особенности периферическое облитерирующее заболевание, коронарную болезнь сердца, инфаркт сердца и инсульт, которые возникают вследствие гиперхолестеринемии.
Согласно настоящему изобретению под термином протеинкиназа С или РКС понимают семейство протеинов, которое играет существенную роль в трансдукции, причем протеины РКС выполняют внутриклеточные регуляторные функции путем фосфорилирования субстратов, как ферменты, факторы транскрипции и/или цитоскелетные протеины. Активация протеинов РКС приводит, например, к активации других протеинкиназ, включая митогенактивируемую протеинкиназу (МАРК), которые, таким образом, являются субстратом протеинов РКС. Протеины протеинкиназы С представляют собой основные рецепторы сложных эфиров форбола. Семейство протеинов протеинкиназы С в клетках млекопитающих включает по меньшей мере двенадцать изоформ, которые подразделяют на три различные подсемейства. Так называемые обычные (традиционные) изоформы протеинкиназы С (сРКС) включают изоформы РКС-α, РКС-βΙ и сплайсинговый вариант βΙΙ, а также РКС-γ. Так называемые новые изоформы протеинкиназы (пРКС) включают изоформы РКС-дельта, РКС-эпсилон, РКС-эта и РКС-тета. Так называемые атипичные изоформы протеинкиназы С (аРКС) включают изоформы РКС-дзета и РКС-лямбда (также известна как РКС-йота). Следующими изоформами являются РКС-мю (также обозначают как протеинкиназа Ό), а также родственные РКС киназы (РКК), которые представляют собой возможно собственные подсемейства (Токег, Бтопйетк ίη Вюкшепсек, 3, 61134-1147 (1998)). Изоформы РКС различаются как своими аминокислотными последовательностями, так и кодирующими аминокислотные последовательности нуклеотидными последовательностями (Соиккепк и др., 8с1епсек, 233, 859-866 (1986)). Протеины РКС все в целом обладают доменовой структурой. Также различаются их клеточные типы экспрессии, механизмы их активации и их специфичность к субстрату.
Большинство изоформ протеинкиназы С перед активацией не связано с мембраной и посредством диффузии распределено в цитоплазме. Активизация каждой изоформы за счет обработки клеток производным форбола 12-О-тетрадеканоилфорбол-13-ацетатом приводит к изоферментспецифическим изменениям клеточной морфологии, а также к быстрому селективному перераспределению различных изоферментов РКС в различных субклеточных структурах. α-Изоформа протеинкиназы С концентрируется в особенности в эндоплазматическом ретикулуме и на краю клетки, в то время как βΙΙ-изоформа РКС концентрируется в обогащенных актином микрофиламентах цитоскелета. Специфичность к субстрату изоформ РКС по меньшей мере частично опосредуется субклеточным распределением активированных
- 5 007926 изоферментов протеинкиназы С.
Под термином протеинкиназа С-α понимают протеин, который активируется ионами кальция и диацилглицерином, причем активированная протеинкиназа С-α концентрируется в особенности в эндоплазматическом ретикулуме и у края клетки. Аминокислотная последовательность РКС-α и кодирующая РКС-α нуклеотидная последовательность описаны Соиззепз и др., 8с1спес8. 233, 859-866 (1986). Протеин РКС-α обладает подобной доменовой структурой, как остальные протеины сРКС. Протеин включает псевдосубстратный домен, обогащенный цистеином участок, кальцийсвязывающий домен и каталитический домен. РКС-α может активироваться диацилглицерином, сложным эфиром форбола, фосфатидилсерином и кальцием.
Согласно настоящему изобретению под выражением агенты, уменьшающие или ингибирующие экспрессию протеинкиназы С-α следует понимать такие средства, которые, как в условиях ίη νίΐτο, так и в условиях ίη νίνο, полностью предотвращают или по меньшей мере уменьшают синтез функциональноспособного протеина РКС-α, причем ингибируются или уменьшаются транскрипция кодирующей РКС-α последовательности ДНК в комплементарной последовательности мРНК, процессинг мРНК, трансляция мРНК в полипептидной цепи, процессинг полипептида и/или посттрансляционные модификации полипептида. Применение агентов, которые уменьшают или ингибируют экспрессию протеинкиназы С-α, следовательно, может приводить к тому, что либо вообще не продуцируется функциональноспособный, например, активируемый, протеин РКС-α, либо, уменьшается количество продуцируемого функциональноспособного, например, активируемого, протеина РКС-α. Применение агентов, которые уменьшают или ингибируют экспрессию протеинкиназы С-α, однако, может приводить к тому, что продуцируется функциональнонеспособный, например, не активируемый, протеин РКС-α или только частично функциональноспособный протеин РКС-α.
Согласно настоящему изобретению под выражением агенты, уменьшающие или ингибирующие активность протеинкиназы С-α понимают такие средства, которые, как в условиях ίη νίΐτο, так и в условиях ίη νίνο, могут полностью или частично элиминировать биологическую активность функциональноспособного протеина РКС-α. Полную или частичную инактивацию протеина РКС-α можно осуществлять, например, тем, что используемый агент вводят непосредственно во взаимодействие с протеином РКС-α. Прямое взаимодействие между агентом и протеином РКС-α может осуществляться, например, за счет ковалентного или нековалентного связывания. За счет взаимодействия между агентом и протеином РКС-α могут происходить также, например, химические изменения протеинкиназы, которые приводят к потере биологической активности протеинкиназы. Взаимодействие может также приводить, например, к специфической деструкции РКС-α. Агенты, которые уменьшают или ингибируют активность протеинкиназы С-α, могут представлять собой также агенты, которые модифицируют или элиминируют или связывают специфические субстраты, структуры-мишени, или молекулы-мишени РКС-α так, что уменьшают или полностью парализуют биологическую активность протеина РКС-α. Агенты, которые уменьшают или ингибируют активность протеинкиназы С-α, могут представлять собой также агенты, которые предотвращают транслокацию РКС-α после активации, например, за счет обработки форболом, в эндоплазматический ретикулум или к краю клетки, так что РКС-α не может вступать во взаимодействие со специфичными к ней субстратами, структурами-мишенями или молекулами-мишенями.
Согласно особенно предпочтительному варианту осуществления изобретения в случае используемых согласно изобретению агентов речь идет об агентах, которые специфически уменьшают или ингибируют экспрессию и/или активность РКС-α, но, однако, не экспрессию и/или активность других изоформ РКС, например РКС-β.
Согласно изобретению агенты, которые специфически уменьшают или ингибируют экспрессию и/или активность РКС-α, выбирают из группы, состоящей из нуклеиновых кислот, которые уменьшают или ингибируют экспрессию гена протеинкиназы С-α; содержащих нуклеиновую кислоту векторов, содержащих векторы клеток-хозяев, ингибирующих или уменьшающих экспрессию протеинкиназы С-α веществ, ингибирующих транслокацию протеинкиназы С-α веществ, антагонистов активности протеинкиназы С-α и ингибиторов активности протеинкиназы С-α.
Согласно изобретению используемую нуклеиновую кислоту предпочтительно выбирают из группы, состоящей из
a) нуклеиновой кислоты, кодирующей человеческую протеинкиназу С-α, или ее фрагмента;
b) нуклеиновой кислоты, которая комплементарна нуклеиновой кислоте по п.а), или ее фрагмента;
c) нуклеиновой кислоты, которая получена путем замещения, присоединения, инверсии и/или делеции одного или нескольких оснований нуклеиновой кислоты по п.а) или п.Ь), или ее фрагмента; и
ά) нуклеиновой кислоты, обладающей гомологией более чем 80%, к нуклеиновой кислоте по пп.а)с), или ее фрагмента.
Согласно настоящему изобретению под понятием нуклеиновая кислота, кодирующая протеинкиназу С-α или ее фрагмент понимают нуклеиновую кислоту, кодирующую протеин РКС-α или его фраг
- 6 007926 мент, который включает функциональные домены, в особенности псевдосубстратный домен, обогащенный цистеином участок, кальцийсвязывающий домен и каталитический домен нативной протеинкиназы С-α. Согласно предпочтительному варианту осуществления изобретения используемая согласно изобретению нуклеиновая кислота кодирует человеческую РКС-α, соответственно, ее части.
Термин гомология означает согласно изобретению идентичность последовательностей по меньшей мере на 80%, предпочтительно по меньшей мере на 85% и особенно предпочтительно по меньшей мере более чем на 90, 95, 97 и 99%. Известное специалисту выражение гомология означает, таким образом, степень родства между двумя или несколькими молекулами нуклеиновых кислот, которая определяется совпадением между последовательностями.
В случае используемой согласно изобретению нуклеиновой кислоты речь может идти о последовательности ДНК или РНК, в особенности в линейной форме. Нуклеиновая кислота может представлять собой нуклеиновую кислоту, выделенную из естественных источников, например, из эукариотических тканей, предпочтительно из тканей млекопитающих, более предпочтительно из человеческих тканей, или может быть получена синтетическим путем.
Согласно изобретению в особенности предусматривается, что используемая в качестве агента нуклеиновая кислота, если она встроена в вектор, в особенности в вектор экспрессии, в клетке-хозяине в антисмысловой ориентации к промотору, может подавлять экспрессию гена человеческой протеинкиназы С-α. При инсерции в вектор используемой согласно изобретению нуклеиновой кислоты в антисмысловой ориентации, то есть, при наличии антисмысловой конструкции используемой согласно изобретению нуклеиновой кислоты, нуклеиновая кислота транскрибируется в качестве антисмысловой нуклеиновой кислоты. В случае транскрипции нативного гена РКС-α клетки полученный антисмысловой транскрипт используемой согласно изобретению нуклеиновой кислоты за счет копуляций азотистых оснований согласно Уотсону-Крику связывают с находящимся в смысловой ориентации транскриптом мРНК нативного гена протеинкиназы С-α с образованием дуплексной структуры. Таким образом селективно препятствуют трансляции мРНК нативного гена РКС-α в полипептиде и специфически ингибируют экспрессию нативной РКС-α, не ингибируя экспрессию других клеточных изоформ РКС.
Согласно предпочтительному варианту осуществления изобретения предусматривается, что используемая для получения антисмысловых конструкций нуклеиновая кислота включает не всю кодирующую РКС-α последовательность, а только ее фрагменты. Эти фрагменты включают по меньшей мере 10 нуклеотидов, предпочтительно по меньшей мере 50 нуклеотидов, особенно предпочтительно по меньшей мере 200 нуклеотидов, причем перенапряженные фрагментами нуклеотидные участки кодирующей РКС-α последовательности выбирают таким образом, что при экспрессии фрагментов в антисмысловой ориентации в клетке происходит специфическое ингибирование экспрессии РКС-α, в особенности человеческой РКС-α, но не ингибирование других изоформ РКС, например β-изоформ РКС.
Согласно изобретению предусматривается, что вышеуказанную нуклеиновую кислоту или ее пригодный фрагмент встраивают в вектор под контролем по меньшей мере одного элемента регуляции экспрессии, причем нуклеиновую кислоту или ее фрагмент встраивают в антисмысловой ориентации к элементам регуляции экспрессии. После введения вектора в клетку, например, клетку млекопитающего, в особенности в человеческую клетку, нуклеиновая кислота или ее фрагмент может экспрессироваться в антисмысловой ориентации и благодаря этому можно эффективно ингибировать экспрессию нативной РКС-α клетки. В случае вектора речь идет предпочтительно о плазмиде, космиде, бактериофаге или вирусе.
Настоящее изобретение поэтому относится также к вектору, который включает кодирующую РКСα нуклеотидную последовательность или фрагмент под функциональным контролем по меньшей мере одного элемента регуляции экспрессии, причем нуклеиновая кислота или ее фрагмент встраивается в антисмысловой ориентации к элементу регуляции. В случае элемента регуляции экспрессии речь идет в особенности о промоторе, месте связывания рибосом, сигнальной последовательности или 3'терминаторе транскрипции.
Следующий вариант осуществления изобретения относится к клетке-хозяину, которая содержит вышеописанный вектор. В случае клетки-хозяина речь идет в особенности о клетке млекопитающего, предпочтительно человеческой клетке. Согласно особенно предпочтительному варианту в случае человеческой клетки речь идет о зрелой стволовой клетке.
Согласно предпочтительному варианту осуществления изобретения для ингибирования экспрессии РКС-α используют синтетически получаемые антисмысловые олигонуклеотиды, которые включают по меньшей мере 10 нуклеотидов, предпочтительно по меньшей мере 50 нуклеотидов, особенно предпочтительно по меньшей мере 200 нуклеотидов. Такие антисмысловые олигонуклеотиды можно непосредственно использовать для ингибирования экспрессии РКС-α, то есть, не нужно встраивать в вектор и экспрессировать в условиях клетки. Согласно особенно предпочтительному варианту осуществления, в случае этих специфичных к РКС-α антисмысловых олигонуклеотидов речь идет о продукте 1818 3521 фирмы Ιδΐδ РйатшасеиДсаН, который является сильным селективным ингибитором экспрессии протеинкиназы-α. Согласно другому особенно предпочтительному варианту осуществления изобретения в случае ис
- 7 007926 пользуемых согласно изобретению специфичных к РКС-α антисмысловых олигонуклеотидов речь идет об антисмысловых олигодезоксинуклеотидах, описанных ВикиЛ и др., 1. 8итд. РаЛо1., 63, 137-142 (1996).
Согласно изобретению как вышеуказанные нуклеиновые кислоты, содержащие эти нуклеиновые кислоты векторы, также содержащие векторы клетки-хозяева можно использовать в качестве агентов для лечения и/или профилактики заболеваний сосудов, сердечно-сосудистых заболеваний, ассоциированных с протеинурией заболеваний почек, ассоциированных с сахарным диабетом поздних повреждений и/или сердечно-сосудистых осложнений, ассоциированных с гипертонией сердечно-сосудистых осложнений и/или ассоциированных с гиперхолестеринемией сердечно-сосудистых осложнений, например, в рамках генотерапии.
Согласно дальнейшему предпочтительному варианту осуществления изобретения предусматривается, что для ингибирования или уменьшения экспрессии протеинкиназы-α используют активатор протеинкиназы С-α. Активатором предпочтительно является производное форбола, в особенности 12-0тетрадеканоилфорбол-13-ацетат (ТРА) или форбол-12,13-дибутират (РЭВи). Известно, что инкубация клеток, например, с РЭВи в течение периода времени от 16 до 24 ч приводит к полной регуляции по типу обратной связи РКС-α (ВикиЛ и др., 1. 8игд. Век., 63, 137-142 (1996)). Также известно, что обработка с помощью более высокой концентрации ТРА, например 1,6 мкМ, полностью ингибирует экспрессию РКС-α. Согласно изобретению поэтому предусматривается обработка больной ткани с помощью сложных эфиров форбола в концентрации предпочтительно более, чем 1,6 мкМ, в течение периода времени по меньшей мере 15 ч для частичного или полного блокирования экспрессии РКС-α в соответствующих тканях или органах.
Согласно следующему предпочтительному варианту осуществления предусматривается использование ингибитора для ингибирования или уменьшения активности протеинкиназы-α. Согласно настоящему изобретению под термином ингибитор понимают вещество, которое конкурирующе ингибирует биологическую активность протеинкиназы С-α, аллостерически изменяет пространственную структуру РКС-α или ингибирует РКС-α путем ингибирования субстрата.
Согласно предпочтительному варианту осуществления изобретения ингибитором является специфически реагирующее с протеинкиназой С-α антитело. Под термином антитело понимают полипептиды, которые кодируются по существу геном иммуноглобулина или генами иммуноглобулинов, или их фрагменты, которые могут специфически связывать и распознавать анализируемое вещество, то есть, антиген. За счет связывания антитела с РКС-α ингибируется его биологическая активность. Согласно изобретению антитела против протеинкиназы С-α могут находиться в виде интактных иммуноглобулинов или в виде ряда фрагментов, которые образуются за счет расщепления с помощью различных пептидаз. Используемое согласно изобретению понятие антитело относится также к модифицированным антителам, например, олигомерным антителам, восстановленным антителам, окисленным антителам и маркированным антителам. Понятие антитело включает также фрагменты антител, которые получают либо путем модификации всего антитела, либо бе ηονο при использовании способов рекомбинации ДНК. Понятие антитело поэтому включает как интактные молекулы, так и также их фрагменты, как РаЬ, Р(аЬ')2 и Ρν, которые могут связываться с эпитопными детерминантами. Эти фрагменты антител сохраняют способность селективно связывать соответствующий антиген. Способы получения антител, соответственно, их фрагментов известны в уровне техники.
Согласно предпочтительному варианту осуществления изобретения используемым согласно изобретению для ингибирования активности протеинкиназы С-α антителом является моноклональное или поликлональное антитело. Согласно изобретению антитело может представлять собой также гуманизированное антитело. Согласно особенно предпочтительному варианту осуществления изобретения используемыми для ингибирования активности протеинкиназы С-α антителами являются таковые, описанные СообшдЫ и др., 1. Вю1. С1ет., 270, 9991-10001 (1995).
Согласно другому предпочтительному варианту осуществления изобретения предусматривается, что используемый согласно заявке для ингибирования РКС-α ингибитор изменяет статус фосфорилирования протеинкиназы С-α и благодаря этому ингибирует и по меньшей мере уменьшает активность РКСα. Из публикации Такша1о и др., Вюейет. 1., 334, 243-249 (1998), известно, что α-токоферол может инактивировать клеточную протеинкиназу С-α тем, что изменяется статус фосфорилирования РКС-α. Согласно особенно предпочтительному варианту осуществления изобретения поэтому предусматривается применение α-токоферола для ингибирования активности РКС-α и вследствие этого для лечения и/или профилактики заболеваний сосудов, сердечно-сосудистых заболеваний, ассоциированных с протеинурией заболеваний почек, диабетических поздних повреждений и/или сердечно-сосудистых осложнений у больных сахарным диабетом, сердечно-сосудистых осложнений у больных с гипертонией и/или сердечно-сосудистых осложнений у больных с гиперхолестеринемией.
Согласно дальнейшему предпочтительному варианту осуществления изобретения предусматривается применение антагонистов РКС-α для лечения и/или профилактики заболеваний сосудов, сердечнососудистых заболеваний, ассоциированных с протеинурией заболеваний почек, диабетических поздних
- 8 007926 повреждений и/или сердечно-сосудистых осложнений у больных сахарным диабетом, сердечнососудистых осложнений у больных с гипертонией и/или сердечно-сосудистых осложнений у больных с гиперхолестеринемией. Согласно настоящему изобретению под термином антагонист понимают вещество, которое конкурирует с РКС-α в отношении связывания со специфичным к РКС-α субстратом, однако, после связывания с субстратом не оказывая такого же действия, как РКС-α. Под антагонистами понимают также вещества, которые благодаря своей структуре адаптируются к инактивной конформации специфичного к РКС-α субстрата и поэтому предотвращают активацию субстрата за счет РКС-α.
Согласно предпочтительному варианту осуществления изобретения в качестве антагониста для ингибирования активности РКС-α используют производное РКС-α, которое, правда, может связываться с субстратами нативной РКС-α, однако, после связывания с ними не может оказывать такое же биологическое действие, как нативная РКС-α.
Согласно настоящему изобретению под производными понимают функциональные эквиваленты или производные протеинкиназы С-α, которые получают, при сохранении основной структуры РКС-α, за счет замены атомов или молекулярных групп, соответственно, остатков, и/или аминокислотные последовательности которых отличаются от естественно встречающихся человеческих или животных молекул РКС-α по меньшей мере в одном положении, которые, однако, по существу обладают высокой степенью гомологии в аминокислотной области. Согласно изобретению понятие производное включает также слитые протеины, в случае которых в Ν-терминальной части, соответственно, в С-терминальной части находятся функциональные домены другого протеина, например, другого ингибитора РКС-α.
Различие между производным и нативной РКС-α может возникать, например, за счет мутаций, например, за счет делеций, замещений, инсерций, присоединений, замены оснований и/или рекомбинаций кодирующих аминокислотные последовательности РКС-α неуклеотидных последовательностей. Понятно, что при этом речь может идти также о естественно встречающихся вариациях последовательностей, например, о последовательностях из другого организма или о последовательностях, которые мутируют естествнным образом, или мутациях, которые целенаправленно вводят в соответствующие последовательности с помощью обычных, известных специалисту средств, например, химических агентов и/или физических агентов.
Согласно следующему предпочтительному варианту осуществления изобретения в качестве антагониста для ингибирования активности РКС-α используют аналог РКС-α. Согласно настоящему изобретению под термином аналоги протеинкиназы С понимают соединения, которые не обладают идентичной с протеинкиназой С-α аминокислотной последовательностью, однако, трехмерная структура которых очень подобна структуре протеинкиназы С-α. Используемые согласно изобретению аналоги РКС-α предпочтительно обладают подобными, специфичными к субстрату свойствами, как РКС-α, то есть, могут связываться со специфичными к РКС-α субстратами, однако, предпочтительно не обладают каталитическими свойствами РКС-α. В случае используемых согласно изобретению аналогов протеинкиназы С-α поэтому речь может идти, например, о соединениях, которые содержат ответственные за связывание протеинканазы С-α с субстратами РКС-α аминокислотные остатки в пригодной конформации и которые поэтому могут имитировать основные свойства места связывания протеинкиназы С-α, однако, без обладания такими же каталитическими свойствами, как протеинкиназа С-α.
Согласно дальнейшему варианту осуществления изобретения предусматривается, что для лечения и/или профилактики заболеваний сосудов, сердечно-сосудистых заболеваний, ассоциированных с протеинурией заболеваний почек, диабетических поздних повреждений и/или сердечно-сосудистых осложнений у больных сахарным диабетом, сердечно-сосудистых осложнений у больных с гипертонией и/или сердечно-сосудистых осложнений у больных с гиперхолестеринемией используют агенты, которые уменьшают или ингибируют экспрессию и/или активность не только протеинкиназы С-α (РКС-α), но и также одновременно экспрессию и/или активность протеинкиназы С-β (РКС-β). ТакайакЫ и Каттига в 1. 1пус51. Эсгта1о1.. 117, 605-611 (2001), сообщают, что иммуносупрессор циклоспорин А одновременно уменьшает экспрессию α-, βΙ- и βΙΙ-изоформ протеинкиназы С. Согласно особенно предпочтительному варианту осуществления изобретения предусматривается применение циклоспорина А для уменьшения экспрессии РКС-α и РКС-β и, таким образом, для лечения вышеуказанных заболеваний.
Согласно следующему предпочтительному варианту осуществления изобретения предусматривается, что агент, который специфически уменьшает или ингибирует экспрессию и/или активность протеинкиназы С-α, используют в сочетании с агентом, который специфически уменьшает или ингибирует экспрессию и/или активность протеинкиназы С-β. Согласно изобретению под термином протеинкиназа Сβ понимают как протеинкиназу С-βΙ, так и сплайсинговый вариант βΙΙ.
Согласно изобретению предусматривается, что агент, уменьшающий или ингибирующий экспрессию и/или активность протеинкиназы С-β, выбирают из группы, состоящей из нуклеиновых кислот, которые уменьшают или ингибируют экспрессию гена протеинкиназы С-β, содержащих нуклеиновую кислоту векторов, содержащих векторы клеток-хозяев, ингибирующих или уменьшающих экспрессию протеинкиназы С-β веществ, ингибирующих транслокацию протеинкиназы С-β веществ, антагонистов ак
- 9 007926 тивности протеинкиназы С-β и ингибиторов активности протеинкиназы С-β.
Согласно предпочтительному варианту осуществления изобретения используемую в качестве агента нуклеиновую кислоту выбирают из группы, состоящей из
a) нуклеиновой кислоты, кодирующей человеческую протеинкиназу С-β, или ее фрагмента;
b) нуклеиновой кислоты, которая комплементарна нуклеиновой кислоте по п.а), или ее фрагмента;
c) нуклеиновой кислоты, которую получена путем замещения, присоединения, инверсии и/или делеции одного или нескольких оснований нуклеиновой кислоты по п. а) или Ь), или ее фрагмента; и
б) нуклеиновой кислоты, обладающей гомологией более чем 80%, к нуклеиновой кислоте по пп.а)с), или ее фрагмента.
Согласно предпочтительному варианту осуществления изобретения используемая согласно изобретению нуклеиновая кислота кодирует человеческую РКС-α, соответственно, ее части.
В случае используемой согласно изобретению нуклеиновой кислоты речь может идти о последовательности ДНК или РНК, в особенности в линейной форме. Нуклеиновой кислотой может быть нуклеиновая кислота, выделяемая из естественных источников, например, из эукариотических тканей, предпочтительно из тканей млекопитающих, более предпочтительно из человеческих тканей, или нуклеиновая кислота может быть получена синтетическим путем.
Согласно изобретению в особенности предусматривается, что используемая в качестве агента нуклеиновая кислота, если она встроена в вектор, в особенности в вектор экспрессии, в клетке-хозяине в антисмысловой ориентации к промотору, может ингибировать экспрессию гена человеческой протеинкиназы С-β. При инсерции в вектор используемой согласно изобретению нуклеиновой кислоты в антисмысловой ориентации, то есть, при наличии антисмысловой конструкции используемой согласно изобретению нуклеиновой кислоты, нуклеиновая кислота транскрибируется в качестве антисмысловой нуклеиновой кислоты. В случае транскрипции гена нативной РКС-β клетки, полученный антисмысловой транскрипт используемой согласно изобретению нуклеиновой кислоты можно связывать с находящимся в смысловой ориентации транскриптом мРНК гена нативной протеинкиназы С-β с образованием дуплексной структуры. Таким образом, селективно препятствуют трансляции мРНК гена нативной РКС-β в полипептиде и специфически ингибируют экспрессию нативной РКС-β, не ингибируя экспрессии других клеточных изоформ РКС.
Согласно предпочтительному варианту осуществления изобретения предусматривается, что используемая для получения антисмысловых конструкций нуклеиновая кислота включает не всю кодирующую РКС-β последовательность, а только ее фрагменты. Эти фрагменты включают по меньшей мере 10 нуклеотидов, предпочтительно по меньшей мере 50 нуклеотидов, особенно предпочтительно по меньшей мере 200 нуклеотидов, причем перенапряженные фрагментами нуклеотидные участки кодирующей РКС-β последовательности выбирают таким образом, что при экспрессии фрагментов в антисмысловой ориентации в клетке происходит специфическое ингибирование экспрессии РКС-β, в особенности человеческой РКС-β, но, не ингибирование других изоформ РКС.
Согласно изобретению предусматривается, что вышеуказанную нуклеиновую кислоту или ее пригодный фрагмент встраивают в вектор под контролем по меньшей мере одного элемента регуляции экспрессии, причем нуклеиновую кислоту или ее фрагмент встраивают в антисмысловой ориентации к элементам регуляции экспрессии. После введения вектора в клетку, например, клетку млекопитающего, в особенности в человеческую клетку, таким образом, нуклеиновая кислота или ее фрагмент может экспрессироваться в антисмысловой ориентации и благодаря этому можно эффективно ингибировать экспрессию нативной РКС-β клетки. В случае вектора речь идет предпочтительно о плазмиде, космиде, бактериофаге или вирусе.
Настоящее изобретение поэтому относится также к вектору, который включает кодирующую РКС-β нуклеотидную последовательность или фрагмент под функциональным контролем по меньшей мере одного элемента регуляции экспрессии, причем нуклеиновая кислота или ее фрагмент встраивается в антисмысловой ориентации к элементу регуляции. В случае элемента регуляции экспрессии речь идет в особенности о промоторе, месте связывания рибосом, сигнальной последовательности или З'-терминаторе транскрипции.
Следующий вариант осуществления изобретения относится к клетке-хозяину, которая содержит вышеописанный вектор. В случае клетки-хозяина речь идет в особенности о клетке млекопитающего, предпочтительно человеческой клетке. Согласно особенно предпочтительному варианту в случае человеческой клетки речь идет о зрелой стволовой клетке.
Согласно предпочтительному варианту осуществления изобретения для ингибирования экспрессии РКС-β используют синтетически получаемые антисмысловые олигонуклеотиды, которые включают по меньшей мере 10 нуклеотидов, предпочтительно по меньшей мере 50 нуклеотидов, особенно предпочтительно по меньшей мере 200 нуклеотидов. Такие антисмысловые олигонуклеотиды можно прямо использовать для ингибирования экспрессии РКС-β, то есть, не нужно встраивать в вектор и экспрессировать в клеточных условиях.
Согласно дальнейшему предпочтительному варианту осуществления изобретения для ингибирования активности протеинкиназы С-β предусматривается использование специфически реагирующего с
- 10 007926 протеинкиназой С-β антитела или его пригодного фрагмента. Согласно изобретению в случае антитела речь может идти о монокональном или поликлональном антителе. Используемым согласно изобретению антителом может быть также гуманизированное антитело.
Согласно следующему предпочтительному варианту осуществления изобретения для ингибирования активности протеинкиназы С-β предусматривается использование вещества, которое изменяет статус фосфорилирования протеинкиназы С-β.
Согласно другому предпочтительному варианту осуществления изобретения для ингибирования активности протеинкиназы С-β предусматривается использование производного или аналога протеинкиназы С-β, которые действуют в качестве антагонистов РКС-β. В случае используемых согласно изобретению производных или аналогов РКС-β речь идет о веществах, которые конкурируют с нативной РКС-β в отношении связывания со специфичными к РКС-β субстратами, однако, после связывания с субстратами не оказывая такого же действия, как РКС-β.
Согласно особенно предпочтительному варианту осуществления изобретения для специфического ингибирования или уменьшения экспрессии и/или активности протеинкиназы С-β используют соединения, описанные в следующих документах: патент США 5491242, патент США 5661173, патент США 5481003, патент США 5668152, патент США 5672618, заявка №0-95/17182, заявка №0-95/35294 и заявка №0-02/......
Следующий предпочтительный вариант осуществления изобретения относится к применению агентов, которые специфически уменьшают или ингибируют экспрессию и/или активность протеинкиназы Сα (РКС-α), для получения фармацевтической композиции для лечения и/или профилактики коронарной болезни сердца, инфаркта сердца, периферического облитерирующего заболевания, инсульта, ассоциированных с протеинурией заболеваний почек, диабетических поздних повреждений и/или сердечнососудистых осложнений у больных сахарным диабетом, сердечно-сосудистых осложнений у больных с гипертонией и сердечно-сосудистых осложнений у больных с гиперхолестеринемией. Согласно изобретению в случае сердечно-сосудистых осложнений речь идет предпочтительно о коронарной болезни сердца, инфаркте сердца, периферическом облитерирующем заболевании и инсульте. В случае диабетических поздних повреждений речь идет в особенности о диабетической ретинопатии, диабетической невропатии и диабетической нефропатии.
Согласно настоящему изобретению под фармацевтической композицией или лекарственным средством понимают используемую для диагностических, терапевтических и/или профилактических целей, следовательно, способствующую или восстанавливающую здоровье организма человека или животного, смесь, которая включает по меньшей мере одно натуральное или синтетически полученное биологически активное вещество, оказывающее терапевтическое действие. Фармацевтическая композиция может представлять собой как твердую, так и жидкую смесь. Например, фармацевтическая композиция, включающая биологически активное вещество, может содержать один или несколько фармацевтически приемлемых компонентов. Сверх того, фармацевтическая композиция может включать обычно используемые в данной области добавки, как, например, стабилизаторы, вспомогательные средства, смазки, порофоры, эмульгаторы или другие вещества, обычно используемые для получения фармацевтической композиции.
Согласно изобретению предусматривается в особенности применение агентов, которые специфически уменьшают или ингибируют экспрессию и/или активность протеинкиназы С-α (РКС-α), в качестве биологически активного вещества для получения лекарственного средства для лечения и/или профилактики вышеуказанных заболеваний. Согласно предпочтительному варианту осуществления изобретения используемые для получения фармацевтических композиций агенты выбирают из группы, состоящей из нуклеиновых кислот, которые уменьшают или ингибируют экспрессию гена протеинкиназы С-α; содержащих нуклеиновую кислоту векторов, содержащих векторы клеток-хозяев, ингибирующих или уменьшающих экспрессию протеинкиназы С-α веществ, ингибирующих транслокацию протеинкиназы С-α веществ, антагонистов активности протеинкиназы С-α и ингибиторов активности протеинкиназы С-α.
В случае используемых для получения предлагаемой согласно изобретению фармацевтической композиции агентов речь идет особенно предпочтительно о антисмысловых олигонуклеотидах кодирующего протеинкиназу С-α гена, токофероле, производных форбола, производных протеинкиназы С-α или аналогах протеинкиназы С-α.
Согласно предпочтительному варианту осуществления изобретения предусматривается, что фармацевтическую композицию используют для парентерального, в особенности внутривенного, внутримышечного, чрескожного или подкожного введения.
Лекарственное средство, содержащее используемые согласно изобретению агенты, предпочтительно находится в форме для инъекции или инфузии.
Согласно следующему варианту осуществления изобретения предусматривается, что фармацевтическую композицию, содержащую используемые согласно изобретению агенты, вводят перорально. Например, лекарственное средство вводят в жидкой форме такой как раствор, суспензия или эмульсия, или в твердой форме, такой как таблетка.
Настоящее изобретение поэтому относится также к фармацевтическим композициям для профилак
- 11 007926 тики и/или лечения коронарной болезни сердца, инфаркта сердца, периферического облитерирующего заболевания, инсульта, протекающих с протеинурией заболеваний почек, диабетических поздних повреждений и/или сердечно-сосудистых осложнений у больных сахарным диабетом, сердечно-сосудистых осложнений у больных с гипертонией и сердечно-сосудистых осложнений у больных с гиперхолестеринемией, включающим по меньшей мере один агент, который специфически уменьшает или ингибирует экспрессию и/или активность протеинкиназы С-α (РКС-α), в качестве биологически активного вещества.
Согласно предпочтительному варианту осуществления агенты, содержащиеся в фармацевтической композиции, выбирают из группы, состоящей из нуклеиновых кислот, которые уменьшают или ингибируют экспрессию гена протеинкиназы С-α; содержащих нуклеиновую кислоту векторов, содержащих векторы клеток-хозяев, ингибирующих или уменьшающих экспрессию протеинкиназы С-α веществ, ингибирующих транслокацию протеинкиназы С-α веществ, антагонистов активности протеинкиназы С-α и ингибиторов активности протеинкиназы С-α.
Предлагаемая согласно изобретению композиция особенно предпочтительно содержит антисмысловые олигонуклеотиды кодирующего протеинкиназу С-α гена, токоферол, производные форбола, производные протеинкиназы С-α или аналоги протеинкиназы С-α.
Согласно дальнейшему предпочтительному варианту осуществления предлагаемая согласно изобретению фармацевтическая композиция содержит по меньшей мере одно другое биологически активное вещество. В случае другого биологически активного вещества речь идет в особенности об агенте, который специфически уменьшает или ингибирует экспрессию и/или активность протеинкиназы С-β.
Агент, уменьшающий или ингибирующий экспрессию и/или активность протеинкиназы С-β, предпочтительно выбирают из группы, состоящей из нуклеиновых кислот, которые уменьшают или ингибируют экспрессию гена протеинкиназы С-β; содержащих нуклеиновую кислоту векторов, содержащих векторы клеток-хозяев, ингибирующих или уменьшающих экспрессию протеинкиназы С-β веществ, ингибиующих транслокацию протеинкиназы С-β веществ, антагонистов активности протеинкиназы С-β и ингибиторов активности протеинкиназы С-β.
Дальнейшие предпочтительные варианты осуществления изобретения следуют из зависимых пунктов формулы изобретения.
Изобретение поясняется подробнее с помощью следующих фигур и примеров.
На фиг. 1 представлено выделение альбумина в моче лишенных РКС-α мышей с сахарным диабетом и без сахарного диабета (контроль) и мышей 8У129 с диабетом и без диабета (контроль). При этом концентрацию альбумина определяли при использовании непрямого твердофазного иммуноферментного анализа (ЕЫ8А). Определенные величины содержания альбумина относили к концентрации креатинина. Мыши 8У129 и РКС-α7- без диабета имеют сравнимую долю альбумин/креатинин, которая, как правило, составляет менее 10 г/моль. Напротив, у мышей 8У129 с диабетом доля значительно выше (р=0,04). Значения в случае мышей РКС-α7^ диабетом были значительно ниже, чем значения в случае мышей 8У129 с диабетом (Р<0,001). Поперечная линия означает среднее значение. Значимость определяли с помощью υ-критерия Мапп-\С1Шпеу.
На фиг. 2 представлена гломерулярная экспрессия УЕСР в случае лишенных РКС-α мышей с сахарным диабетом и без сахарного диабета (контроль) и мышей 8У129 с диабетом и без диабета (контроль). При этом на группу животных полуколичественно оценивали иммуногистохимическими способами в каждом случае 40 клубочков, причем осуществляли подразделение на слабую, среднюю и сильную иммунофлуоресценцию. Значимость рассчитывали с помощью υ-критерия Мапп-\У1Шпеу. Экспрессия УЕСР в случае животных с диабетом была значительно выше, чем в случае контрольных животных (р<0,001). Однако экспрессия УЕСР в случае животных 8У129 с диабетом была значительно выше, чем в случае животных РКС-α7- с диабетом (р<0,001).
На фиг. 3 представлена гломерулярная экспрессия рецептора II УЕСР в случае лишенных РКС-α мышей с сахарным диабетом и без сахарного диабета (контроль) и мышей 8У129 с диабетом и без диабета (контроль). При этом на группу животных полуколичественно оценивали иммуногистохимическими способами в каждом случае 40 клубочков, причем осуществляли подразделение на слабую, среднюю и сильную иммунофлуоресценцию. Значимость рассчитывали с помощью υ-критерия Мапп-\С1Шпеу. Экспрессия УЕСРК.-П в случае животных с диабетом была значительно выше, чем в случае контрольных животных (р<0,001). Однако экспрессия УЕСРК.-П в случае животных 8У129 с диабетом была значительно выше, чем в случае животных РКС-α7- с диабетом (р<0,001).
На фиг. 4 представлена гломерулярная экспрессия перлекана в случае лишенных РКС-α мышей с сахарным диабетом и без сахарного диабета (контроль) и мышей 8У129 с диабетом и без диабета (контроль). При этом на группу животных полуколичественно оценивали иммуногистохимическими способами в каждом случае 40 клубочков, причем осуществляли подразделение на слабую, среднюю и сильную иммунофлуоресценцию. Значимость рассчитывали с помощью υ-критерия Мапп-\У1Шпеу. Экспрессия перлекана в случае животных 8У129 с диабетом была значительно ниже, чем в случае контрольных животных 8У129 (р<0,001).
- 12 007926
Пример 1. Экспериментальное провоцирование диабета.
При использовании мышей, которых содержали в стандартных условиях при температуре 22°С и которые имели свободный доступ к корму и воде, в соответствии с разрешением Общества по охране животных Нижней Саксонии, проводили следующие опыты.
Перед началом опыта у всех животных по сыворотке определяли уровень сахара в крови. Результаты представлены в таблице. У 16 контрольных мышей 8У129 и 14 лишенных протеинкиназы С-α (РКСα-/-) мышей 8У129 индуцировали диабет путем инъекции стрептозотоцина. Стрептозотоцин приводит к разрушению продуцирующих инсулин клеток островкового аппарата поджелудочной железы. За счет возникающего дефицита инсулина имеет место долговременное повышение уровня сахара в крови, то есть, гипергликемия, и тем самым сахарный диабет. Для провоцирования гипергликемии животным в дни 1 и 4 интраперитонеально вводили, в каждом случае 125 мг стрептозотоцина/кг массы тела. Для этого стрептозотоцин растворяли в 50 мМ растворе цитрата натрия со значением рН=4,5.
Для контроля 7 мышам 8У129 и 6 мышам РКС-а-/- интраперитонеально в дни 1 и 4 вводили только растворитель. Затем у мышей каждые 2 дня отбирали каплю крови из хвоста для контролирования уровня сахара в крови. Определение содержания сахара в крови осуществляли с помощью измерительного прибора С1исоте1ег Е1Де® фирмы Байер. Для определения использовали тест-полоски С1исоте1ег Εΐίΐο Зепзог®.
На 7-10 день у животных, которым был введен стрептозотоцин, был провоцирован диабет при содержаниях сахара в крови выше 350 мг/дл. Перед инъекцией стрептозотоцина исходные значения составляли в среднем 200 мг/дл. У животных, которые получали только растворитель, не произошло никакого повышения уровня сахара в крови и у них не обнаружили сахарного диабета. Спустя 10 дней после первой инъекции животных наблюдали в течение следующих 8 недель. В течение этого времени каждые две недели контролировали содержание сахара в крови, для того, чтобы удостовериться, что животные с диабетом далее оставались больными диабетом. Содержания сахара у животных с диабетом в течение этого времени колебались в среднем в пределах около 500-550 мг/дл, а в случае животных без диабета составляли около 200 мг/дл.
Спустя 8 недель животных анестезировали наркотическим средством авертином. Под наркозом затем из сплетения глазных вен отбирали 400 мкл крови и из мочевого пузыря путем пункции с помощью иглы 27 О отбирали всю мочу. После этого почки через брюшную аорту перфундировали с помощью лактатного раствора Рингера и почки удаляли. Животных тотчас после этого умерщвляли под наркозом. Содержания сахара в крови затем определяли по сыворотке. Уровни сахара в крови представлены в таблице. Как видно, животные с диабетом имеют примерно в 2,5-3 раза более высокие содержания глюкозы, чем в начале опыта и также по сравнению с контрольными животными без диабета.
Содержание глюкозы в сыворотке у мышей с диабетом и без диабета до начала опыта и в конце опыта
| Содержание глюкозы в сыворотке до начала опыта (мг/дл) | Содержание глюкозы в сыворотке в конце опыта (мг/дл) | |
| 5У129, контроль (п=7) | 205 ± 40 | 223 ± 43 |
| ЗУ129, с диабетом (п=1б) | 192 ± 36 | 505 ± 80* |
| РКС-а/”, контроль (п=6) | 223 ± 27 | 197 ± 21 |
| РКС-а/“, с диабетом (п=14) | 225 ± 31 | 589 ± 98* |
* р<0,001 по сравнению с контрольными животными без диабета
Пример 2. Определение концентрации альбумина.
Возникновение альбуминурии у больных диабетом представляет собой известное явление. Поэтому определяли выделение альбумина в моче лишенных РКС-α мышей с сахарным диабетом и без сахарного диабета (контроль) и мышей 8У129 с диабетом и без диабета (контроль). Для этого определяли концентрацию альбумина в собранной моче. Для определения концентрации альбумина использовали непрямой твердофазный иммуноферментный анализ (ЕЕ18Л) (Л1Ьитее11 М®, фирма Ехосе11 1пс., Филадельфия, США). Этот ЕЕ18Л специфичен для мышиного альбумина. Определение осуществляли соответственно
- 13 007926 указаниям изготовителя. Для того, чтобы можно было учитывать колебания в выделении мочи, определенные значения содержания альбумина соотносили к концентрации креатинина в моче. Результаты представлены на фиг. 1. При этом оказалось, что мыши ЗУ129 и РКС-α без диабета имеют сравнимый коэффициент альбумин/креатинин, который, как правило, составляет менее 10 г/моль. Напротив, в случае мышей ЗУ129 с диабетом этот коэффициент значительно выше (р=0,004). Среднее значение составляет 21,5 г/моль по отношению к 7,48 г/моль у контрольных животных ЗУ129 без диабета. По сравнению с этим, в случае мышей РКС-α- с диабетом не происходит никакого значительного увеличения альбуминурии. Коэффициент альбумин/креатинин составляет всегда ниже 20 г/моль и среднее значение соответствует 10,2 г/моль. Среднее значение в случае контрольных мышей РКС-а-/- без диабета составляет 8,5 г/моль. Значения в случае мышей РКС-а-/- с диабетом были значительно ниже, чем значения в случае мышей ЗУ129 с диабетом (Р<0,001). Результаты представлены на фиг. 1.
Пример 3. Определение экспрессии УЕСЕ и рецептора-ΙΙ УЕСЕ.
Как указано выше в примере 1, всех животных по окончании опыта умерщвляли. Непосредственно после этого извлекали почки и замораживали при температуре -70°С. Последующий анализ извлеченных почек показал в почечных тельцах (клубочках) контрольных животных с диабетом значительное увеличение экспрессии сосудистого эндотелиального фактора роста (УЕСЕ) и рецептора-ΙΙ УЕСЕ (УЕСЕК-ΙΙ). Обнаружение экспрессии УЕСЕ и УЕСЕК-ΙΙ осуществляли с помощью иммуногистохимических способов. Для этого замороженные при температуре -70°С почки разрезали в замороженном состоянии с получением срезов толщиной 6 нм и высушивали на воздухе. Затем замороженные срезы фиксировали с помощью холодного ацетона, высушивали на воздухе и промывали с помощью Трис-буфера (ТВЗ: 0,05М Трис-буфера, 0,15 М №101. рН=7,6). Замороженные срезы затем инкубировали в течение 60 мин во влажной камере с первичным поликлональным кроличьим антителом против мышиного УЕСЕ (8ап!а Сгих, А-20), соответственно, УЕСЕК-ΙΙ (8ап!а Сгих, С-1158). После новой промывки с помощью ТВЗ срезы инкубировали в течение 30 мин при комнатной температуре с Су3-маркированным вторичным антикроличьим антителом Оаскхоп [ттипгс5сагс11 ЬаЬогаЮпех, 711-165-152) и еще раз промывали с помощью ТВ8. Затем препараты оценивали и фотографировали при использовании микроскопа Хебх Ахюр1ап-2 (2е188, 1епа, Германия). В случае всех животных оценивали, в каждом случае 40 почечных телец, причем интенсивность флуоресценции подразделяли на сильную, среднюю и слабую. При этом у контрольных животных ЗУ129 с диабетом обнаружено значительное увеличение (р<0,001) экспрессии УЕСЕ и УЕСЕК-ΙΙ по сравнению с контрольными животными без диабета. По сравнению с этим увеличение экспрессии у мышей ЗУ129 и РКС-а-/-с диабетом выражено значительно меньше (р<0,001). Результаты представлены на фиг. 2 и 3.
Пример 4. Определение экспрессии перлекана.
Так как установленную различную экспрессию УЕСЕ можно объяснять не только различием в альбуминурии, исследовали экспрессию гепарансульфат-протеогликана, перлекана, в почках животных с диабетом и без диабета при использовании иммуногистохимических способов. При этом, как описано в Примере 3, готовили и фиксировали криосрезы почек. В качестве первого антитела использовали моноклональное крысиное антитело, направленное против мышиного перлекана (ΚΌΙ 8у51ет5, А7Ь6). В качестве вторичного антитела использовали СуЗ-маркированное ослиное антикрысиное антитело Оаскхоп ЬаЬогаЮпех, 712-165-153). Иммуногистохимическое исследование срезов совершенно неожиданно показало, что перлекан в случае контрольных мышей с диабетом более не обнаруживают или еще едва обнаруживают (см. фиг. 4). Таким образом, ни в клубочке, ни в стенке сосуда артериол перлекан нельзя обнаружить. Напротив, экспрессия перлекана в случае мышей ЗУ129 и РКС-α остается неизмененной или только незначительно уменьшается. Так как отсутствие гепарансульфата в качестве одного из основных медиаторов имеет значение при возникновении протеинурии, нужно исходить из того, что этот результат может объяснять отсутствие альбуминурии.
Claims (26)
1. Применение агентов, уменьшающих или ингибирующих экспрессию и/или активность протеинкиназы С-α (РКС-α), для получения фармацевтической композиции для лечения и/или профилактики заболеваний сосудов, сердечно-сосудистых заболеваний, коронарной болезни сердца, заболеваний со сниженным сердечным выбросом, инфаркта сердца, периферического облитерирующего заболевания, инсульта, ассоциированных с протеинурией заболеваний почек, диабетической ретинопатии, диабетической невропатии и диабетической нефропатии, сердечно-сосудистых осложнений у больных с гипертонией и/или сердечно-сосудистых осложнений у больных с гиперхолестеринемией, причем агенты выбраны из группы, состоящей из нуклеиновых кислот, которые уменьшают или ингибируют экспрессию гена протеинкиназы С-α; векторов, содержащих указанную нуклеиновую кислоту, клеток-хозяев, содержащих указанные векторы, веществ, ингибирующих или уменьшающих экспрессию протеинкиназы С-α, веществ, ингибирующих транслокацию протеинкиназы С-α, антагонистов активности протеинкиназы Сα и ингибиторов активности протеинкиназы С-α.
2. Применение по п.1, где ассоциированными с протеинурией заболеваниями почек являются па
- 14 007926 ренхиматозные заболевания почек, причем протеинурией является гломерулярная протеинурия, тубулярная протеинурия или гломерулярно-тубулярная смешанная протеинурия, заболеваниями почек являются нефропатия с минимальными изменениями, прочие гломерулопатии, амилоидоз почек, наследственная тубулопатия, ренально-тубулярный ацидоз, медикаментозно или бактериально индуцированный интерстициальный нефрит, острая почечная недостаточность, нефропатия Бенс-Джонс или трансплантация почек.
3. Применение по п.2, где нуклеиновая кислота в клетке-хозяине в антисмысловой ориентации к промотору может ингибировать экспрессию гена человеческой протеинкиназы С-α.
4. Применение по любому из пп.1-3, где агентами являются антисмысловые олигонуклеотиды гена, кодирующего протеинкиназу С-α, производные протеинкиназы С-α или аналоги протеинкиназы С-α.
5. Применение по п.2 и/или 3, где нуклеиновая кислота выбрана из группы, состоящей из
a) нуклеиновой кислоты, кодирующей человеческую протеинкиназу С-α или ее фрагмента;
b) нуклеиновой кислоты, которая комплементарна нуклеиновой кислоте по п.а), или ее фрагмента;
c) нуклеиновой кислоты, которая получена путем замещения, присоединения, инверсии и/или делеции одного или нескольких оснований нуклеиновой кислоты по п.а) или Ь), или ее фрагмента; и
б) нуклеиновой кислоты, обладающей гомологией более чем 80%, к нуклеиновой кислоте по пп.а)с), или ее фрагмента.
6. Применение по п.5, где фрагмент нуклеиновой кислоты включает по меньшей мере 10 нуклеотидов, предпочтительно по меньшей мере 50 нуклеотидов, особенно предпочтительно по меньшей мере 200 нуклеотидов.
7. Применение по любому из пп.2-6, где нуклеиновой кислотой является ДНК или РНК.
8. Применение по любому из пп.2-7, где нуклеиновая кислота или ее фрагмент встраивается в вектор под контролем по меньшей мере одного элемента регуляции экспрессии в антисмысловой ориентации к нему.
9. Применение по п.8, где вектором является плазмида, космида, бактериофаг или вирус.
10. Применение по п.8 или 9, где элементом регуляции экспрессии является промотор, место связывания рибосом, сигнальная последовательность или З'-терминатор транскрипции.
11. Применение по любому из пп.8-10, где вектор содержится в клетке-хозяине, такой как клетка млекопитающего, в особенности человеческая клетка, и клеткой-хозяином не является клетка человека или млекопитающего в своем естественном состоянии.
12. Применение по любому из пп.2-4, где веществом, ингибирующим или уменьшающим экспрессию протеинкиназы С-α, является антитело, реагирующее с протеинкиназой С-α, в частности, моноклональное или поликлональное антитело, такое как гуманизированное антитело, причем ингибитор изменяет статус фосфорилирования протеинкиназы С-α, и антагонистом является производное или аналог протеинкиназы С-α.
13. Применение по любому из пп.1-12, где агентом, уменьшающим или ингибирующим экспрессию и/или активность протеинкиназы С-α, является агент, который одновременно уменьшает или ингибирует экспрессию и/или активность протеинкиназы С-β.
14. Применение по любому из пп.1-12, где используется агент, который специфически уменьшает или ингибирует экспрессию и/или активность протеинкиназы С-α, в сочетании с агентом, который специфически уменьшает или ингибирует экспрессию и/или активность протеинкиназы С-β.
15. Применение по п.14, где агент, уменьшающий или ингибирующий экспрессию и/или активность протеинкиназы С-β, выбран из группы, состоящей из нуклеиновых кислот, которые уменьшают или ингибируют экспрессию гена протеинкиназы С-β, векторов, содержащих указанную нуклеиновую кислоту, клеток-хозяев, содержащих указанные векторы, веществ, ингибирующих или уменьшающих экспрессию протеинкиназы С-β, веществ, ингибирующих транслокацию протеинкиназы С-β, антагонистов активности протеинкиназы С-β и ингибиторов активности протеинкиназы С-β.
16. Применение по п.15, где нуклеиновая кислота выбрана из группы, состоящей из
a) нуклеиновой кислоты, кодирующей человеческую протеинкиназу С-β, или ее фрагмента;
b) нуклеиновой кислоты, которая комплементарна нуклеиновой кислоте по п. а), или ее фрагмента;
c) нуклеиновой кислоты, которая получена путем замещения, присоединения, инверсии и/или делеции одного или нескольких оснований нуклеиновой кислоты по п.а) или Ь), или ее фрагмента; и
б) нуклеиновой кислоты, обладающей гомологией более чем 80% к нуклеиновой кислоте по пп.а)с), или ее фрагмента.
17. Применение по п.16, где фрагмент нуклеиновой кислоты включает по меньшей мере 10 нуклеотидов, предпочтительно по меньшей мере 50 нуклеотидов, особенно предпочтительно по меньшей мере 200 нуклеотидов, причем нуклеиновой кислотой является ДНК или РНК.
18. Применение по любому из пп.15-17, где нуклеиновая кислота или ее фрагмент встраивается в вектор под контролем по меньшей мере одного элемента регуляции экспрессии, например, промотор, место связывания рибосом, сигнальная последовательность или 3'-терминатор транскрипции в антисмысловой ориентации к нему.
- 15 007926
19. Применение по п.18, где вектором является плазмида, космида, бактериофаг или вирус, например, промотор, место связывания рибосом, сигнальная последовательность или З'-терминатор транскрипции.
20. Применение по п.18 и/или 19, где вектор содержится в клетке-хозяине, в особенности клетке млекопитающего, в особенности человеческой клетке.
21. Применение по п.15, где ингибитором является антитело, реагирующее с протеинкиназой С-β, в частности, антителом является моноклональное или поликлональное антитело, предпочтительно гуманизированное антитело.
22. Применение по п.15, где ингибитор изменяет статус фосфорилирования протеинкиназы С-β.
23. Применение по п.15, где антагонистом является производное или аналог протеинкиназы С-β.
24. Фармацевтическая композиция для профилактики и/или лечения коронарной болезни сердца, инфаркта сердца, заболеваний со сниженным сердечным выбросом, периферического облитерирующего заболевания, инсульта, ассоциированных с протеинурией заболеваний почек, диабетических поздних повреждений и/или сердечно-сосудистых осложнений у больных сахарным диабетом, сердечнососудистых осложнений у больных с гипертонией и сердечно-сосудистых осложнений у больных с гиперхолестеринемией, включающая в качестве активного вещества по меньшей мере один агент, специфически уменьшающий или ингибирующий экспрессию и/или активность протеинкиназы С-α (РКС-α) и протеинкиназы С-β, причем агенты выбраны из группы, состоящей из нуклеиновых кислот, уменьшающих или ингибирующих экспрессию гена протеинкиназы С-α, векторов, содержащих указанную нуклеиновую кислоту, клеток-хозяев, содержащих указанные векторы, веществ, ингибирующих или уменьшающих экспрессию протеинкиназы С-α, веществ, ингибирующих транслокацию протеинкиназы С-α, антагонистов активности протеинкиназы С-α и ингибиторов активности протеинкиназы С-α.
25. Фармацевтическая композиция по п.24, где агентами являются антисмысловые олигонуклеотиды гена, кодирующего протеинкиназу С-α, производные протеинкиназы С-α или аналоги протеинкиназы С-α.
26. Фармацевтическая композиция по любому из пп.24 и/или 25, где агент, уменьшающий или ингибирующий экспрессию и/или активность протеинкиназы С-β, выбран из группы, состоящей из нуклеиновых кислот, уменьшающих или ингибирующих экспрессию гена протеинкиназы С-β, векторов, содержащих указанную нуклеиновую кислоту, клеток-хозяев, содержащих указанные векторы, веществ, ингибирующих или уменьшающих экспрессию протеинкиназы С-β, веществ, ингибирующих транслокацию протеинкиназы С-β, антагонистов активности протеинкиназы С-β и ингибиторов активности протеинкиназы С-β.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE10244453A DE10244453A1 (de) | 2002-09-24 | 2002-09-24 | Hemmung der Proteinkinase C-alpha zur Behandlung von Krankheiten |
| PCT/DE2003/003165 WO2004028516A2 (de) | 2002-09-24 | 2003-09-23 | Zusammensetzungen zur hemmung der proteinkinase c alpha zur behandlung von diabetes mellitus und kardiovaskulärer erkrankungen |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA200500529A1 EA200500529A1 (ru) | 2005-08-25 |
| EA007926B1 true EA007926B1 (ru) | 2007-02-27 |
Family
ID=31969524
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| EA200500529A EA007926B1 (ru) | 2002-09-24 | 2003-09-23 | Композиции для ингибирования протеинкиназы с-альфа для лечения сахарного диабета и сердечно-сосудистых заболеваний |
Country Status (19)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US20050250719A1 (ru) |
| EP (2) | EP2338498A1 (ru) |
| JP (1) | JP2006503841A (ru) |
| KR (1) | KR20050059180A (ru) |
| CN (1) | CN1684694A (ru) |
| AT (1) | ATE475422T1 (ru) |
| AU (1) | AU2003280288B2 (ru) |
| CA (1) | CA2499818A1 (ru) |
| DE (3) | DE10244453A1 (ru) |
| DK (1) | DK1545560T3 (ru) |
| EA (1) | EA007926B1 (ru) |
| ES (1) | ES2356286T3 (ru) |
| IS (1) | IS7777A (ru) |
| MX (1) | MXPA05002930A (ru) |
| NO (1) | NO20051242L (ru) |
| NZ (1) | NZ538857A (ru) |
| PL (1) | PL374829A1 (ru) |
| UA (1) | UA88257C2 (ru) |
| WO (1) | WO2004028516A2 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2765117C2 (ru) * | 2019-09-24 | 2022-01-25 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Уральский федеральный университет имени первого Президента России Б.Н. Ельцина" | Применение натриевой соли диэтилового эфира 4-оксо-1,4-дигидропиразоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-3,8-дикарбоновой кислоты, моногидрата в качестве средства лечения и профилактики поздних осложнений сахарного диабета |
Families Citing this family (31)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ITMI20031714A1 (it) | 2003-09-05 | 2005-03-06 | Gentium Spa | Formazioni ad azione antitumorale. |
| US20050066381A1 (en) * | 2003-09-19 | 2005-03-24 | Children's Hospital Medical Center | Regulation of cardiac contractility and heart failure propensity |
| US8258105B2 (en) * | 2003-10-07 | 2012-09-04 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Antisense oligonucleotides optimized for kidney targeting |
| US9144594B2 (en) * | 2005-11-08 | 2015-09-29 | University Of Miami | Cathepsin L mediated diseases and associated methods and products |
| WO2007067812A2 (en) * | 2005-12-09 | 2007-06-14 | Metaproteomics, Llc | Protein kinase modulation by hops and acacia products |
| WO2007108727A1 (en) * | 2006-03-22 | 2007-09-27 | Leangene Ab | Method for monitoring the effect of compounds on foxc2 expression |
| US9974764B2 (en) | 2007-01-31 | 2018-05-22 | Biosuccess Biotech Co. Ltd. | Compositions and methods of use of phorbol esters in the treatment of neoplasms |
| US9533938B2 (en) | 2007-01-31 | 2017-01-03 | Biosuccess Biotech Co., Ltd. | Compositions and methods of use of phorbol esters for the treatment of stroke |
| US9636317B2 (en) | 2007-01-31 | 2017-05-02 | Biosuccess Biotech Co. Ltd. | Compositions and methods of use of phorbol esters |
| EP2170053A4 (en) | 2007-01-31 | 2010-06-23 | Biosuccess Biotech Company | COMPOSITIONS AND METHODS FOR THE USE OF PHILOSOPHERS |
| US10369222B2 (en) | 2012-01-18 | 2019-08-06 | Biosuccess Biotech Co., Ltd. | Compositions and methods of use of phorbol esters for the treatment of stroke |
| US11696908B2 (en) | 2007-01-31 | 2023-07-11 | Biosuccess Biotech Co. Ltd. | Compositions and methods of use of phorbol esters |
| US11564901B2 (en) | 2007-01-31 | 2023-01-31 | Biosuccess Biotech Co., Ltd. | Compositions and methods of use of phorbol esters |
| EP1982722A1 (en) * | 2007-04-16 | 2008-10-22 | Gentium S.p.A. | Use of oligotide for the treatment of renal diseases |
| EP2483406A2 (en) | 2009-09-30 | 2012-08-08 | President and Fellows of Harvard College | Methods for modulation of autophagy through the modulation of autophagy-inhibiting gene products |
| EP2637672B1 (en) | 2010-11-12 | 2018-08-22 | Gentium S.r.l. | Defibrotide for use in prophylaxis and/or treatment of graft versus host disease (gvhd). |
| US9550722B2 (en) | 2012-01-18 | 2017-01-24 | Biosuccess Biotech Co. Ltd. | Compositions and methods of use of phorbal esters for the treatment of stroke |
| MY192285A (en) * | 2012-01-18 | 2022-08-17 | Biosuccess Biotech Co Ltd | Compositions and methods of use of phorbol esters for the treatment of stroke |
| US10099996B2 (en) | 2012-01-18 | 2018-10-16 | Biosuccess Biotech Co. Ltd. | Compositions and methods of use of phorbol esters in the treatment of neoplasms |
| WO2013182905A2 (en) * | 2012-06-05 | 2013-12-12 | Jonas Axelsson | Mechanism, diagnostic, and treatments for complications of renal failure |
| CA2874960C (en) | 2012-06-22 | 2021-05-18 | Gentium S.P.A. | Euglobulin-based method for determining the biological activity of defibrotide |
| TWI630909B (zh) * | 2013-01-18 | 2018-08-01 | 華鴻新藥股份有限公司 | 用於中風治療之巴豆酯組成物及使用方法 |
| TWI687217B (zh) * | 2014-01-10 | 2020-03-11 | 華鴻新藥股份有限公司 | 用於中風治療之巴豆酯組成物及使用方法 |
| EP3099312B1 (en) * | 2014-01-29 | 2018-12-05 | Université de Strasbourg | New target for diabetes treatment and prevention |
| US20180228907A1 (en) | 2014-04-14 | 2018-08-16 | Arvinas, Inc. | Cereblon ligands and bifunctional compounds comprising the same |
| WO2015160845A2 (en) * | 2014-04-14 | 2015-10-22 | Arvinas, Inc. | Imide-based modulators of proteolysis and associated methods of use |
| EP3026122A1 (en) | 2014-11-27 | 2016-06-01 | Gentium S.p.A. | Cellular-based method for determining the potency of defibrotide |
| JP2018527895A (ja) | 2015-06-29 | 2018-09-27 | リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ ミネソタ | 抗−ａｐｏｂｅｃ３抗体並びにその製造及び使用方法 |
| EP3421485A1 (en) | 2017-06-30 | 2019-01-02 | Université de Strasbourg | Peptides for treatment and prevention of hyperglycaemia |
| EP3687932A4 (en) * | 2017-09-29 | 2021-06-23 | SafeWorks, LLC | LIFTING SYSTEM WITH DC POWER SUPPLY |
| WO2022092884A1 (ko) * | 2020-10-29 | 2022-05-05 | 가톨릭관동대학교산학협력단 | 13-ｏ-아세틸포볼을 포함하는 골질환 및 혈관석회화증 예방 또는 치료용 약학적 조성물 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5674902A (en) * | 1991-04-08 | 1997-10-07 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Method of inhibiting hyperplasia to a mammal in need thereof |
| DE19740384A1 (de) * | 1997-09-08 | 1999-03-11 | Max Delbrueck Centrum | Antisense Oligodesoxynukleotide (ODN) gegen Proteinkinase C (PKC)-Isoformen, ihre Verwendung und pharmazeutische Zubereitungen dieser ODN |
| US6063814A (en) * | 1997-04-14 | 2000-05-16 | Chang; Richard L. | Phorbol esters as anti-neoplastic and white blood cell elevating agents |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3914764A1 (de) * | 1989-05-05 | 1990-11-08 | Goedecke Ag | Maleinimid-derivate und deren verwendung als arzneimittel |
| DE3924538A1 (de) * | 1989-07-25 | 1991-01-31 | Goedecke Ag | Indolocarbazol und dessen verwendung |
| MC2309A1 (fr) * | 1990-10-01 | 1993-09-27 | Brigham & Womens Hospital | Traitement a base de beta-carotene et de vitamines pour inhiber les accidents vasculaires majeurs |
| EP0507938A4 (en) * | 1990-11-02 | 1993-03-10 | Sphinx Pharmaceuticals Corporation | Bis-(hydroxyalkylamino)-anthraquinone inhibitors of protein kinase c |
| AU1339895A (en) | 1993-12-23 | 1995-07-10 | Eli Lilly And Company | Protein kinase c inhibitors |
| US5481003A (en) | 1994-06-22 | 1996-01-02 | Eli Lilly And Company | Protein kinase C inhibitors |
| US5491242A (en) | 1994-06-22 | 1996-02-13 | Eli Lilly And Company | Protein kinase C inhibitors |
| PE22798A1 (es) * | 1995-11-20 | 1998-05-11 | Lilly Co Eli | Inhibidor de proteina quinasa c |
| WO1997041127A1 (en) * | 1996-05-01 | 1997-11-06 | Eli Lilly And Company | Halo-substituted protein kinase c inhibitors |
| US20050066381A1 (en) * | 2003-09-19 | 2005-03-24 | Children's Hospital Medical Center | Regulation of cardiac contractility and heart failure propensity |
-
2002
- 2002-09-24 DE DE10244453A patent/DE10244453A1/de not_active Withdrawn
-
2003
- 2003-09-23 AU AU2003280288A patent/AU2003280288B2/en not_active Ceased
- 2003-09-23 DE DE10393825T patent/DE10393825D2/de not_active Expired - Fee Related
- 2003-09-23 EP EP10170970A patent/EP2338498A1/de not_active Withdrawn
- 2003-09-23 UA UAA200503856A patent/UA88257C2/ru unknown
- 2003-09-23 DK DK03770876.5T patent/DK1545560T3/da active
- 2003-09-23 AT AT03770876T patent/ATE475422T1/de active
- 2003-09-23 CA CA002499818A patent/CA2499818A1/en not_active Abandoned
- 2003-09-23 CN CNA038228017A patent/CN1684694A/zh active Pending
- 2003-09-23 US US10/528,806 patent/US20050250719A1/en not_active Abandoned
- 2003-09-23 WO PCT/DE2003/003165 patent/WO2004028516A2/de not_active Ceased
- 2003-09-23 JP JP2004538744A patent/JP2006503841A/ja active Pending
- 2003-09-23 EA EA200500529A patent/EA007926B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2003-09-23 DE DE50312935T patent/DE50312935D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2003-09-23 NZ NZ538857A patent/NZ538857A/en unknown
- 2003-09-23 MX MXPA05002930A patent/MXPA05002930A/es active IP Right Grant
- 2003-09-23 EP EP03770876A patent/EP1545560B1/de not_active Expired - Lifetime
- 2003-09-23 KR KR1020057004958A patent/KR20050059180A/ko not_active Ceased
- 2003-09-23 ES ES03770876T patent/ES2356286T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2003-09-23 PL PL03374829A patent/PL374829A1/xx unknown
-
2005
- 2005-03-10 NO NO20051242A patent/NO20051242L/no not_active Application Discontinuation
- 2005-03-30 IS IS7777A patent/IS7777A/is unknown
-
2008
- 2008-12-01 US US12/325,930 patent/US20090191194A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5674902A (en) * | 1991-04-08 | 1997-10-07 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Method of inhibiting hyperplasia to a mammal in need thereof |
| US6063814A (en) * | 1997-04-14 | 2000-05-16 | Chang; Richard L. | Phorbol esters as anti-neoplastic and white blood cell elevating agents |
| DE19740384A1 (de) * | 1997-09-08 | 1999-03-11 | Max Delbrueck Centrum | Antisense Oligodesoxynukleotide (ODN) gegen Proteinkinase C (PKC)-Isoformen, ihre Verwendung und pharmazeutische Zubereitungen dieser ODN |
Non-Patent Citations (9)
| Title |
|---|
| DATABASE BIOSIS 'Online! BIOSCIENCES INFORMATION SERVICE, PHILADELPHIA, PA, US; 2000, CARMO ANALIA ET AL.: "Effect of cyclosporin-A on the blood-retinal barrier permeability in streptozotocin-induced diabetes", XP002278387, Database accession no. PREV200100092751, abstract & MEDIATORS OF INFLAMMATION, vol. 9, no. 5, 2000, pages 243-248, ISSN: 0962-9351 * |
| DATABASE BIOSIS 'Online! BIOSCIENCES INFORMATION SERVICE, PHILADELPHIA, PA, US; 23 October 2001 (2001-10-23), VENUGOPAL SENTHIL KUMAR ET AL.: "alpha-Tocopherol inhibits hyperglycemia-induced superoxide anion release from human monocytes via inhibition of PKC-alpha", XP008034017, Database accession no. PREV200200276157, abstract * |
| DATABASE BIOSIS 'Online! BIOSCIENCES INFORMATION SERVICE, PHILADELPHIA, PA, US; September 2001 (2001-09), TAKAHASHI TOMOYA ET AL.: "Cyclosporin A promotes hair epithelial cell proliferation and modulates protein kinase C expression and translocation in hair epithelial cells", XP002292428, Database accession no. PREV200100483758, cited in the application & JOURNAL OF INVESTIGATIVE DERMATOLOGY, vol. 117, no. 3, September 2001 (2001-09), pages 605-611, ISSN: 0022-202X * |
| DATABASE MEDLINE 'Online! US NATIONAL LIBRARY OF MEDICINE (NLM), BETHESDA, MD, US; September 1997 (1997-09), HEMPEL A. ET AL.: "High glucose concentrations increase endothelial cell permeability via activation of protein kinase C alpha", XP002292426, Database accession no. NLM9285638, abstract & CIRCULATION RESEARCH. SEP 1997, vol. 81, no. 3, September 1997 (1997-09), pages 363-371, ISSN: 0009-7330 * |
| DATABASE MEDLINE 'Online!, US NATIONAL LIBRARY OF MEDICINE (NLM), BETHESDA, MD, US; June 1996 (1996-06), BUSUTTIL S. J. ET AL.: "Antisense suppresssion of protein kinase C-alpha and -delta in vascular smooth muscle", XP002292427, Database accession no. NLM8661186 cited in the application abstract & THE JOURNAL OF SURGICAL RESEARCH. JUN 1996, vol. 63, no. 1, June 1996 (1996-06), pages 137-142, ISSN: 0022-4804 * |
| KANG NINGLING ET AL.: "Differential expression of protein kinase C isoforms in streptozotocin-induced diabetic rats", KIDNEY INTERNATIONAL, vol. 56, no. 5, November 1999 (1999-11), pages 1737-1750, XP002278386, ISSN: 0085-2538, page 1737, right-hand column, paragraph 1 - page 1738, left-hand column, paragraph 1, page 1739, left-hand column, paragraph 3 - right-hand column, paragraph 1, page 1745, left-hand column, paragraph 1 - page 1747, left-hand column, paragraph 2, page 1748, left-hand column, paragraph 2 * |
| MEIER MATTHIAS ET AL.: "Knockout of protein kinase C alpha protects against the development of albuminuria but not renal hypertrophy.", DIABETES, vol. 52, no. Supplement 1, 2003, page A50, XP008029526, 63rd Scientific Sessions of the American Diabetes Association; New Orleans, LA, USA; June 13-17, 2003, ISSN: 0012-1797 (ISSN print), Zusammenfassung 215-OR * |
| MENNE J. ET AL.: "Protein kinase C alpha deficiency ameliorates the development of diabetic nephropathy in mice with streptozotocin-induced hyperglycemia", KIDNEY AND BLOOD PRESSURE RESEARCH, vol. 24, no. 4-6, 2001, page 231, XP008029527, Joint Scientific Meeting of the Nephrology Society and the German Working Group for Clinical Nephrol; Munster, Germany; September 29 October 02, 2001, ISSN: 1420-4096, Zusammenfassung V43 * |
| MENNE JAN ET AL.: "Proteinkinase C alpha deficiency ameliorates the development of diabetic nephropathy in mice with streptozotocin-induced hyperglycemia", JOURNAL OF THE AMERICAN SOCIETY OF NEPHROLOGY, vol. 12, no. Program and Abstract Issue, September 2001 (2001-09), page 151A, XP008029528, ASN (American Society of Nephrology)/ISN (International Society of Nephrology), World Congress of Nep; San Francisco, CA, USA; October 10-17, 2001, ISSN: 1046-6673, Zusammenfassung A0791 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2765117C2 (ru) * | 2019-09-24 | 2022-01-25 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Уральский федеральный университет имени первого Президента России Б.Н. Ельцина" | Применение натриевой соли диэтилового эфира 4-оксо-1,4-дигидропиразоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-3,8-дикарбоновой кислоты, моногидрата в качестве средства лечения и профилактики поздних осложнений сахарного диабета |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU2003280288B2 (en) | 2008-08-28 |
| EA200500529A1 (ru) | 2005-08-25 |
| US20090191194A1 (en) | 2009-07-30 |
| ATE475422T1 (de) | 2010-08-15 |
| PL374829A1 (en) | 2005-10-31 |
| NZ538857A (en) | 2010-10-29 |
| IS7777A (is) | 2005-03-30 |
| KR20050059180A (ko) | 2005-06-17 |
| US20050250719A1 (en) | 2005-11-10 |
| ES2356286T3 (es) | 2011-04-06 |
| DK1545560T3 (da) | 2010-11-22 |
| EP1545560B1 (de) | 2010-07-28 |
| NO20051242L (no) | 2005-06-01 |
| DE10393825D2 (de) | 2005-08-11 |
| WO2004028516A2 (de) | 2004-04-08 |
| DE10244453A1 (de) | 2004-04-01 |
| EP2338498A1 (de) | 2011-06-29 |
| EP1545560A2 (de) | 2005-06-29 |
| CN1684694A (zh) | 2005-10-19 |
| UA88257C2 (ru) | 2009-10-12 |
| AU2003280288A1 (en) | 2004-04-19 |
| JP2006503841A (ja) | 2006-02-02 |
| MXPA05002930A (es) | 2005-09-30 |
| WO2004028516A3 (de) | 2004-11-11 |
| DE50312935D1 (de) | 2010-09-09 |
| CA2499818A1 (en) | 2004-04-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EA007926B1 (ru) | Композиции для ингибирования протеинкиназы с-альфа для лечения сахарного диабета и сердечно-сосудистых заболеваний | |
| Watanabe et al. | Pharmacology of a non-selective ETA and ETB receptor antagonist, TAK-044 and the inhibition of myocardial infarct size in rats | |
| US9610318B2 (en) | Peptides for promoting angiogenesis and use thereof | |
| JP5400006B2 (ja) | 虚血性疾患の予防または治療剤 | |
| KR101297037B1 (ko) | 혈관신생촉진용 펩타이드 및 이의 용도 | |
| JP4808623B2 (ja) | 血管形成を減少させるためのクラスｉｉｉのｓｌｒｐのアゴニスト | |
| US7439077B2 (en) | Coumarin analog compounds for safer anticoagulant treatment | |
| AU756200B2 (en) | Method for treating ischemia | |
| EP1723956A1 (en) | Preventive or therapeutic agents for severe diabetic retinopathy | |
| EP2646047A2 (en) | Use of prokaryotic sphingosine-1-phosphate lyases and of sphingosine-1-phosphate lyases lacking a transmembrane domain for treating hyperproliferative and other diseases | |
| CN108047315B (zh) | 一类多肽药物Athycaltide及其用途 | |
| Simpson | Relation of hemodynamics to the incidence of diethylstilbestrol-induced aortic ruptures in hypertensive and hypotensive lines of turkeys | |
| HK1084325A (en) | Compositions for the inhibition of protein kinase c alpha for treatment of diabetes mellitus and cardiovascular diseases | |
| US20070185020A1 (en) | Methods and compositions for treating disorders of the extracellular matrix | |
| JP2003531114A (ja) | プロテインキナーゼα阻害剤の使用 | |
| EP1206942A1 (en) | Water channel opener compositions and medicinal compositions for ophthalmic use | |
| JP3817122B2 (ja) | 水チャンネルオープナー組成物及び眼科用医薬組成物 | |
| Streeter et al. | Role of erythropoietin in the correction of anemia in patients with heart failure | |
| Haynes et al. | The Endothelins | |
| AU2004253185A1 (en) | Methods and compositions for treating disorders of the extracellular matrix |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): AZ BY KZ TM RU |