DK170946B1

DK170946B1 - Nitrogenholdge cykliske ligander, metalkomplekser dannet af disse ligander, diagnostiske præparater der indeholder disse komplekser samt fremgangsmåde til fremstilling af liganderne

Info

Publication number: DK170946B1
Application number: DK202788A
Authority: DK
Inventors: Michel Schaefer; Didier Doucet; Bruno Bonnemain; Dominique Meyer
Original assignee: Guerbet Sa
Priority date: 1987-04-14
Filing date: 1988-04-13
Publication date: 1996-03-25
Also published as: NO176839C; GR3007495T3; PT87216A; CN88102139A; DK202788D0; HU198501B; NO176839B; FI881708L; YU46691B; IL86059A; DK202788A; HRP920514A2; IE62582B1; JPH01211573A; ZA882552B; DE3877799T2; NO881567L; PT87216B; FI93830B; EP0287465A1

Description

i DK 170946 B1

Den foreliggende opfindelse angår hidtil ukendte nitrogenhol-dige cykliske ligander og metalkomplekser dannet af disse ligander, diagnostiske midler indeholdende disse komplekser som magnetisk-resonans-biliedgivende midler, som røntgenkontrast-5 midler og som reagenser, der giver kemiske skift in vivo.

Opfindelsen angår også en fremgangsmåde til fremstilling af liganderne.

EP nr. 124.766 omhandler kontrastmidler beregnet til enteral administration, der omfatter en paramagnetisk forbindelse i 10 kombination med en buffer og et stof, der er osmotisk aktivt.

Af skriftet fremgår det, at komplekser med formlen Ic

X-CH2 xCH2"X

' N-CH.-CH,-N

i 2 2» 5H2 C,H, N-CH.-CH.-M / 2 2 \ x-ch2 ch2-x kan anvendes som den paramagnetiske forbindelse. I skriftet foreslås anvendelse af 1,4,7,10-tetraazacyklododecantetraed-dikesyre (DOTA) som kompleksdannende syre til fremstilling af 15 de komplekse salte med formlen Ic jvf. side 9, linie 5 i skriftet, og som eksempel på velegnede paramagnetiske metalioner foreslås på side 5, linie 10 gadolinium(III)-ionen.

DE nr. 3.401.052 angår et diagnostisk middel, der som essentiel bestanddel omfatter mindst ét komplekssalt, som hidrører 20 fra en ligand og et eller flere metaller med atomnummer 21 til 29, 42, 44 eller 57 til 83. Til anvendelse i NMR-billed-givning fremhæves især gadolinium(III)-, terbium(III)-, dys-prosium(III)-, holmium (III)- og erbium(III)-ioner. Vedrørende den strukturelle formel af komplekssaltet, foreslås i DE 25 nr. 3.401.052 bl.a. den følgende formel Ic DK 170946 B1 2

X-CH2 /CH2-X

'N-CH--CH--N

i 2 2 \ CH2 CH, (CH- ) (CH~) * 2 «/ / 2 v N-CH0-CH,-N / 2 2 \ x-ch2 ch2-x

Det bemærkes, at eksempel 11 (side 40) angår gadolinium(III)-komplekset af 1,4,7,10-tetraazacyklododecantetraeddikesyre (DOTA).

WO nr. 86/02 352 omhandler et NMR-kontrastmiddel omfattende 5 et chelat af gadolinium med en forbindelse valgt blandt DOTRA, DOTA og NOTA.

De nitrogenholdige ligander ifølge opfindelsen adskiller sig fra de fra ovennævnte skrifter kendte ligander ved, at mindst én af de brodannende kæder, dvs. R1# som forbinder to nitro-10 genatomer, bærer en substituent, hvorimod der ikke er en sådan substituent til stede på tilsvarende sted i de kendte ligander.

Som det fremgår af det efterfølgende sammenligningseksempel 13, giver denne strukturelle forskel sig udslag i, at de her 15 omhandlede metalkomplekser mellem ligand og metalion har o-verlegne egenskaber i forhold til de kendte metalkomplekser i form af lavere toksicitet og lavere dissociationskonstant.

I forbindelse med NMR-billedgivning er stabiliteten af komplekset eller chelatet mellem metal og ligand af afgørende 20 betydning. Et af formålene med at anvende en metalchelateren-de ligand er netop at undgå frigørelse af det paramagnetiske metal, som i fri tilstand er yderst toksisk.

Størrelsen af dissociationskonstanten for komplekset mellem ligand og metal giver således et udtryk for den resulterende DK 170946 B1 3 toksicitet. Nærmere bestemt forholder det sig således, at jo højere dissociationskonstanten er, jo højere er toksiciteten.

Opfindelsen angår en ligand med formlen:

R R

I " i *

H00C - CH CH —- C00H

/ -\ (I) R3 "i \ / N- R -2 I 2

H00C- CH

R5 hvor 5 Ri betegner et radikal med formlen: “(CH2)m - CH - CH -

I I

1*6 R7

Rg vælges blandt gruppen bestående af Cj-C^-alkyl, Cj-C^hy-10 droxyalkyl og Cj-C^polyhydroxyalkyl og en gruppe med formlen: R- R _ 1 5 i 5

CH-C00H CH-C00H

Γ N - R1 - N

r J- \ R, - f” *, -"'“Γ / - ^ /

2 — R - N

2 I

CH-C00H I

R5.

Rn vælges blandt gruppen bestående af gruppen A og grupperne med formlen: DK 170946 B1 4 -(CH2)t - Y - A - Y - (CH2)t - A vælges blandt gruppen bestående af Cj-Cg-alkylen, Cj-Cg-hy-droxyalkylen og Cj-Cg-polyhydroxyalkylen, Y vælges blandt - C - 0 - og - O og t = 1 til 4,

5 II

o R7 vælges blandt gruppen bestående af hydrogen, Cj-C^-alkyl, Cj-C^-hydroxyalkyl og Cj-C^-polyhydroxyalkyl, m = 0 eller 1, 10 R2, r3, r4 er ens eller forskellige og betegner et radikal med formlen: -(CH) - CH -

I I

Rg R$ 15 Rg og R8 er ens eller forskellige og vælges blandt hydrogen, Cj-C^-alkyl, Cj-C^-hydroxyalkyl og Cj-C^-polyhydroxyalkyl, p er 1 eller 2, n er 0, 1 eller 2, og

Rj vælges blandt gruppen bestående af hydrogen, Cj-C4-alkyl, 20 Cj-C^-hydroxyalkyl og Cj-C4-polyhydroxyalkyl, og Z vælges blandt gruppen bestående af oxygen og en gruppe med formlen: \ N - R10 25 / R10 vælges blandt gruppen bestående af hydrogen, C1-C14-alkyl, Cj-C4-hydroxyalkyl, Cj-C^-p oly hydroxy al kyl, en gruppe med form DK 170946 B1 5 len -CH - COOH, hvor R5 er som defineret tidligere, og en % gruppe med formlen: P«. R- i 5 i 3

5 CH-C00H CH-COOH

/ - ’Jr \ \ /'

- R . - N -— R _ - N

12. 2 I

CH-COOH

*5 · R12 vælges blandt gruppen bestående af Cj-Cg-alkylen, Cj-Cg-hydroxyalkylen og Cj-C8-polyhydroxyalkylen, såvel som salte deraf.

Liganderne med formel I kan fremstilles ved omsætning af en 10 forbindelse med formlen: X - CH - COOH (II) % hvor 15 R5 er som defineret ovenfor, og X betegner en labil gruppe, såsom chlor, brom eller jod eller en tosyloxygruppe eller en mesyloxygruppe, med en cyklisk amin med formlen:

H H

/*— [s—A1 κζ \· (III) \ / N- R ---Z‘ hvor i z

H

20 r2, R3, R4 og n er som defineret ovenfor, DK 170946 B1 6 R' i betegner et radikal med formlen: -(CH2)m - CH - CH - R/6 *'7 5 R'6 vælges blandt gruppen bestående af Cj-C14-alkylf Cj-C^-hy- droxyalkyl, C1-c4-polyhydroxyalkyl og en gruppe med formlen:

H H

Γ"-βΓ|— \ /L . Jn \ R, - CH R- ^ I / - R .- CH / ” !c» i / \ /

2 · — R, - N

2 i

H

R2, R3, R4, R7, R11# m og n er som defineret ovenfor, og Z' vælges blandt oxygen og en gruppe med formlen: \ 10 N - R'10 / R'10 vælges blandt gruppen bestående af hydrogen, Cj-C^-al-kyl, Cj-^-hydroxyalkyl, Cp^-polyhydroxyalkyl og en gruppe med formlen: h h X /’

- R,2— N - R2— V

H

15 Rj, r2, r3, r4, r12 og n er som defineret ovenfor.

DK 170946 B1 7

Liganderne med formlen (I) kan også fremstilles ifølge en "StreckerM-reaktion ved omsætning af en cyklisk amin med formlen (III) med et aldehyd med formlen: R5 - CHO Ila 5 hvor R5 er som defineret tidligere, i nærværelse af hydrogencyanid eller mere almindeligt cyanidioner (KCN, NaCN).

Forbindelserne med formlen (III) , hvor Z' er en gruppe: \ N - R10 10 / kan fremstilles a) ved omsætning af en polyamin med formlen: R ‘

R'HN -- N^j-R· j-NHR' IV

n hvor n, Ri og R4 er som tidligere defineret, og R' betegner en tosyl-, mesyl- eller benzensulfonylgruppe, 15 med en forbindelse med formlen:

X-R, - N-R3-X V

i R' hvor R2, R3 og R' er som tidligere defineret, og X betegner en 20 labil gruppe, såsom en tosyloxy- eller mesyloxygruppe, eller chlor, brom eller jod, eller b) ved omsætning af en diamin med formlen:

R'HN - R'j - NH - R' X

DK 170946 B1 8 hvor R'i og R' er som tidligere defineret, med en forbindelse med formlen: Γ R'l R'

I I

5 X - R4 - N - R3 - N - R2 - X XI

n

Denne cykliseringsreaktion udføres med fordel i nærværelse af en faseoverførselskatalysator.

Polyaminerne med formlen IV kan opnås ud fra dihydroxylaminer 10 i henhold til det følgende skema: Π Η η

HO — R4 — N — R'j — OH VI

D

15 4 R'Cl/pyridin Γ R'l

R'O — R4 ~ N — R'j — OR' VII

- —* n 20 4· NaN3/CH3CN/H20 R' 1

N3 — R4 — N — R'j — N3 VIII

^ n

25 4 Reduktion H2 Pd/C

Γ R' 1

H2N — R4 — N -- R'j — NH2 IX

- J n 30 4 R'Cl/pyridin DK 170946 B1 9 r R' Ί

R'NH — R4 — N — R'j — NHR' IV

_ J n 5 Som et alternativ kan phthalimid omsættes med forbindelserne med formlen VII, og hydrazinolyse kan udføres med henblik på at omdanne forbindelserne med formlen VII til forbindelserne med formlen IX.

Forbindelserne med formlen III, som indeholder to nitrogen-10 holdige ringe, kan fremstilles ifølge de tidligere beskrevne metoder.

Således er det muligt at omsætte en polyamin med formlen:

/ \ XII

CH2 - CH CH - CH2 / \ I \ R’NH NHR’ R'NH NHR' hvor A og R' er som tidligere defineret, med en forbindelse med formlen XI med henblik på at opnå en forbindelse med 15 formlen III, hvor Ril er en gruppe A.

Polyaminen med formlen XII kan fremstilles ud fra et tetraha-logeneret derivat ved en nukleofil substitution i nærværelse af natriumazid efterfulgt af en reduktion i nærværelse af hydrogen og palladium på trækul.

20 Som et alternativ kan de forbindelser med formlen I, som består af to nitrogenholdige ringe, og hvor Rn er en gruppe A, fremstilles ved kondensation af en forbindelse med formlen:

EtOOC COOEt \ /

25 CH - A - CH XIII

/ \

EtOOC COOEt DK 170946 B1 10 med en polyamin med formlen: Η Η Η Γ Hl

II! I

HN - R2 - N - R3 - N - R4 - N - Η XIV

5 L Jn efterfulgt af reduktion med diboran ifølge en metode, som er beskrevet af Tabushi m.fl. (Tetra Letters 12, 1049, 1977).

Forbindelserne med formlen I, som består af to nitrogenhol-dige ringe, fremstilles derpå ud fra forbindelserne med form-10 len III med to ringe, som beskrevet tidligere.

Som et alternativ kan forbindelser med formlen I, som består af 2 nitrogenholdige ringe, fremstilles ved kondensation af en forbindelse med formlen I, hvor Rj er et radikal med formlen: 15 - (CH2)m - CH - CH -

Re R7 hvor R$ er en hydroxyalkylgruppe, med en aktiviserbar bifunktionel forbindelse med formlen: 20 Xj - A - Xj

Xj er en COOH-gruppe, en COCl-gruppe eller et syreanhydrid.

Forbindelserne med formlen I, som består af 2 nitrogenholdige ringe, kan også fremstilles ved kondensation af en forbindelse med formlen: DK 170946 B1 11 i5 ?

HOOC - CH CH - COOH

5 N- [r4 - Jl / \

R3 R"j XV

10 \ /

N- R2- N-H

HOOC - CH

15 R5 hvor R'1! er et radikal med formlen: - (CH2)m - CH - CH -

I I

R»6 R7 20 m og R7 er som tidligere defineret, og R"6 vælges blandt gruppen bestående af Cj-C^-alkyl, Cj-C^hydroxyalkyl og Cj-C^po-lyhydroxyalkyl, med en forbindelse med formlen:

X - R'12 - X XVI

X er som tidligere defineret, og R'12 betegner en eventuelt 25 mulig beskyttet R12-gruppe.

Således opnås forbindelser med formlen: DK 170946 B1 12 r5 r5 r5 r5

H00C - CH CH - COOH HOOC - CH CH - COOH

I r h I I

5 N - R4 - N N - R4 - N

/ 1 k / \ R3 R«! R"i R3 \ / \ /

N - R2 - N - R'12 - N - R2 - N

10 I I

HOOC - CH CH - COOH

I I

%

XVII

15 Endvidere angår den foreliggende opfindelse komplekser, som er dannet af ligander med formlen I med metalioner valgt blandt lanthanidioner med atomnumrene 57 til 71, overgangsmetalioner med atomnumrene 21 til 29, især Mn2+, Fe3+ og Cr*+, og metalioner med atomnumrene 55, 56, 82 og 83, såvel som 20 saltene af disse komplekser med farmaceutisk acceptable uorganiske eller organiske baser eller basiske aminosyrer.

I sådanne komplekser er metalionerne fortrinsvis gadolinium, europium, dysprosium, jern (Fe3+) og mangan (Mn2+) .

Som eksempler på salte kan nævnes dem, som er dannet med na-25 triumhydroxid, N-methylglucamin, diethanolamin, lysin og ar-ginin.

Komplekserne kan fremstilles ved, at man omsætter ligander med et metalsalt eller metaloxid i et vandigt opløsningsmiddel og eventuelt neutraliserer med henblik på at danne et 30 salt.

Det vil være indlysende, at den foreliggende opfindelse ikke kun omfatter liganderne med formlen I og komplekserne, som tidligere er defineret, i form af racemiske blandinger, men også de stereoisomere former af disse ligander og komplekser.

DK 170946 B1 13

Komplekserne ifølge opfindelsen kan endvidere bindes til et makromolekyle, som fortrinsvis kan bindes til et organ. Således kan komplekserne ifølge opfindelsen bindes til proteiner og i særdeleshed til antistoffer.

5 Desuden kan de også indkapsles, fortrinsvis i liposomer.

Komplekserne ifølge opfindelsen, som dannes af liganderne med formlen I med paramagnetiske ioner, og deres salte med farmaceutisk acceptable baser kan anvendes som magnetisk-resonans-billedgivende midler og som reagenser, der giver kemiske 10 skift in vivo.

Komplekserne ifølge opfindelsen, som er dannet af ligander med formlen I og lanthanidioner med atomnumrene 57 til 71 eller metalioner med atomnumrene 55, 56, 82 og 83, og deres salte med farmaceutisk acceptable baser, kan anvendes som 15 røntgenkontrastmidler.

Til dette formål foretrækkes især komplekser, dannet med de følgende metalioner foretrækkes især: Gd, Er, Dy, Tb, Ce, La,

Ba og Cs.

Dvs., at den foreliggende opfindelse også angår diagnostisk 20 middel, som kan administreres til mennesker, og som omfatter mindst ét kompleks dannet af en ligand med formlen I med metalioner, valgt blandt lanthanidionerne med atomnumrene 57 til 71, overgangsmetalionerne med atomnumrene 21 til 29 og metal- ionerne med atomnumrene 55, 56, 82 og 83, såvel som 25 saltene af disse komplekser med farmaceutisk acceptable uorganiske eller organiske baser eller basiske aminosyrer.

Disse midler kan foreligge især i form af opløsninger af et kompleks ifølge opfindelsen i et fysiologisk acceptabelt vandigt opløsningsmiddel.

DK 170946 B1 14

De diagnostiske midler ifølge opfindelsen kan administreres: parenteralt, inklusiv intravenøst, intraarterielt, intra-lymfatisk og subkutant, oralt, 5 - subarachnoidt, - intrabronkialt i form af en aerosol, intraartikulært, - lokalt til synliggørelse af hulheder (f.eks. livmoderen) ved billedgivning af magnetisk-resonans, er doserne meget va-10 riable afhængig af administrationsvejene.

Til intravenøs eller intraarteriel administration er dosen omkring 0,01 til 2 mM/kg.

Til oral administration kan denne dosis være så meget som 10 mM/kg.

15 Til andre administrationsveje er doserne sædvanligvis mindre end 1 mM/kg, og til den subarachnoide adminstrat ions vej er den sædvanligvis endda mindre end 0,05 mM/kg.

Doserne er de samme, når de anvendes som reagenser, der giver kemiske skift in vivo, og som kontrastmidler i radiologi, som 20 anvender røntgenstråler, undtagen ved de intravenøse eller intraarterielle administrationsveje, hvor doserne kan være højere end eller lig med 5 mM/kg.

Endvidere kan komplekserne ifølge opfindelsen, som er dannet af liganderne med formlen I og radioaktive ioner, såvel som 25 deres salte med farmaceutisk acceptable baser, anvendes som DK 170946 B1 15 diagnostiske midler eller terapeutiske midler i nuklear medicin. Eksempler på radioaktive ioner er radioisotoper af elementer, såsom kobber, kobalt, gallium, germanium, indium og frem for alt technetium (Tc 99 m).

5 De følgende eksempler illustrerer fremstillingen af forbindelserne i henhold til den valgte applikation.

I disse eksempler: blev NMR-spektrene optegnet på en i "Varian EM 360"-maskine ved 60 MHz med TM som intern reference. Med mindre 10 andet er angivet, er opløsningsmidlet CDC13.

blev IR-spektrene optegnet på et "Perkins-Elmer 1320"-ap-parat. Spektrene af de faste stoffer blev optegnet i form af KBr-skiver. I tilfældet af væsker (olier) blev disse optegnet i fravær af opløsningsmiddel.

15 - betegner ordet "puffer", anvendt i tyndlagskromatografi, en blanding af 1,5 M NH40H og 1,5 M (NH4)2C03.

- blev smeltepunkterne målt på en "Kofler-blok".

skal sætningen anvendt i relation til analyser under kompleksdannelse: "fravær af frit Gd3+ og af frie ligander" 20 skal forstås således, at det er indenfor de anvendte me toders detektionsgrænser, dvs. < 4 ppm og < 5 ppm for Gd3+ og ligand respektivt.

Eksempel 1 - Fremstilling af 2.6-dimethvl-l.4.7.10-tetraaza-cvklododecan-N.N'.N".N"/-tetraeddikesvre 25 a) Fremstilling af N-tosyl-bis-(2-tosyloxypropyl)amin.

En opløsning af 53,2 g (0,4 mol) diiso-propanolamin i 50 cm3 DK 170946 B1 16 pyrldin sættes dråbevis under afkøling til en opløsning af 248 g (1,3 mol) tosylchlorid i 200 cm3 pyridin ved 0°C , således at temperaturen fastholdes mellem 0 og 5°C . Blandingen henstår ved denne temperatur i 72 timer. Derpå udhældes den i 5 2 1 vand og is og 250 cm3 koncentreret saltsyre.

Tosylderivatet ekstraheres med 2 1 methylenchlorid. Den organiske fase tørres over natriumsulfat, filtreres og affarves derpå med 3 SA trækul og genfiltreres gennem et silicalag. Efter inddampning af saltet opnås 193,8 g af en gul olie (ud-10 bytte 81%, Rf = 0,7 silica/CH2Cl2/acetone/98/2), som anvendes i det næste trin uden rensning.

1HNMR-spektrum: 6H CH3 (dublet 1,2 og 1,3 ppm); 9H CH3 tosyl (singlet 2,5 ppm); 4H CH2 (multiplet centreret omkring 3,3 ppm); 2H CH (quadruplet mellem 4,7 og 5,1 ppm); 12H aromati-15 ske (multiplet 7,3 og 8 ppm).

b) Fremstilling af N-tosyl-bis(2-azidopropyl)amin.

Til 193,8 g (0,32 mol) af den i trin a) opnåede forbindelse i 1,2 1 acetonitril og 300 cm3 vand sættes 65,1 g natriumazid (1 mol) . Blandingen omrøres og opvarmes til 75°C i 48 timer.

20 Efter afkøling, afdampes acetonitrilen i vakuum.

Resten tages op i 1 1 methylenchlorid. Den organiske fase vaskes med vand, tørres og filtreres gennem et silicalag (200 g). Efter inddampning opnås 82 g af en klar gul olie (udbytte 75%, Rf = 0,85 silica/CH2Cl2/acetone/92/2) , som er tilstrække-25 lig ren til at blive anvendt direkte.

IR-spektrum N3 = 2100 cm'1 intens.

c) Fremstilling af N-tosyl-bis-(2-aminopropyl)amin.

82,0 g (0,244 mol) af den i trin b) opnåede forbindelse opløses i 500 cm2 ethanol, der indeholder 8 g af 5% palladium på DK 170946 B1 17 trækul ved 50% fugtighed.

Blandingen blev omrørt kraftigt, mens en svag strøm af hydrogen blev ledt igennem (udtømning af nitrogen som frigøres). Efter 8 timer ved omgivelsernes temperatur, TLC viser, at 5 azidet ikke er til stede. Blandingen filtreres derpå og inddampes. 68,4 g af en klar gul olie opnås (udbytte 98,5%, Rf = 0,6 silica/Me0H/NH40H/95/5), som anvendes uden rensning.

NMR-spektrum: 6H CH3 (dublet 0,9 og 1 ppm); 3H CH3 tosyl (singlet ved 2,4 ppm); 6H CH2 og CH (kompleks multiplet mellem 10 2,7 og 3,2 ppm; 4H aromatiske (multiplet mellem 7,1 og 7,7 ppm) .

d) Fremstilling af N-tosyl-bis[(tosylamino)propyl]amin.

93 g (0,5 mol) tosylchlorid sættes i portioner til 68,4 g (0,24 mol) af den i trin c) opnåede amin i 500 cm3 methylen-15 chlorid og 70 cm3 (0,5 mol) triethylamin ved 0°C . Efter at tilsætningen er fuldendt, omrøres blandingen i 6 timer ved omgivelsernes temperatur. Reaktionsblandingen vaskes derpå med 600 cm3 vand, den organiske fase tørres, inddampes til tørhed, og resten kromatograferes på en silicakolonne med 20 rent methylenchlorid og derpå med en methylenchlorid/metha-nol/98/2-blanding. Fraktionerne af interesse inddampes, og den faste rest omkrystalliseres fra ethanol. Efter filtrering og tørring opnås en mængde på 99,1 g (udbytte 70%).

NMR-spektrum: 6H CH3 (dublet 0,9, 1 ppm); 9H CH3 p-tosyl 25 (singlet 2,4 ppm), 4H CH2 (triplet centreret omkring 2,9 ppm); 2H CH (dublet 3,3 og 3,5 ppm); 12H aromatiske (multiplet centreret omkring 7,4 ppm).

e) Fremstilling af N-tosyl-bis(2-tosyloxyethyl)amin.

En opløsning af 32,5 g (0,31 mol) diethanolamin i 60 cm3 pyri- DK 170946 B1 18 din sættes langsomt til en opløsning af 185 g (0,97 mol) to-sylchlorid i 220 cm3 pyridin ved 0°C , således at temperaturen ikke overstiger 5°C . Efter tilsætningen er fuldendt, fastholdes blandingen ved denne temperetur i 1 time, og den udhældes 5 derpå i 220 cm3 isafkølet vand under kraftig omrøring. Efter filtrering, vask og tørring opnås 148,4 g præcipitat (udbytte 85%; Rf = 0,6 silica/CH2Cl2/acetone/98/2) .

NMR-spektrum: 9H CH3 tosyl (singlet 2,4 ppm); 4H CH2N (triplet ved 3,4 ppm); 4H CH2 (triplet ved 4,1 ppm); 12H aromatiske 10 (multiplet mellem 7,1, og 7,7 ppm).

f) Fremstilling af N,N',N",N"'-tetratosyl-2,6-dimethyl- 1,4,7,10-tetraazacyklododecan 65 g (0,11 mol) af den i trin d) opnåede forbindelse, opløst i 500 cm3 tør DMF, sættes dråbevis til 8,8 g (0,22 mol) af en 15 60% suspension af NaH i olie i 50 cm3 DMF. Tilsætningen udfø res ved omgivelsernes temperatur og på en sådan måde, at der er en vedholdende frigørelse af hydrogen. Efter tilsætningen er fuldendt, opvarmes blandingen til 100°C , og en opløsning af 68,1 g (0,12 mol) af den i trin e) opnåede forbindelse i 20 500 cm3 DMF tilsættes dråbevis. Reaktionsblandingen fastholdes ved denne temperatur i 24 timer under kraftig omrøring.

Opløsningsmidlet afdampes derpå i vakuum, og resten optages i en CH2Cl2/H20-blanding. Den organiske fase vaskes med vand, tørres og inddampes til tørhed. Resten (100 g) omkrystallise-25 res fra isopropanol og derpå fra toluen, og efter filtrering, vask med isopropylether og tørring opnås 36 g af et hvidt fast stof (udbytte 40%, Rf = 0,5-0,6 silica/CH2Cl2/acetone/9-8/2) .

NMR-spektrum: 6H CH3 (dublet ved 1 og 1,2 ppm); 12H CH3 tosyl 30 (singlet 2,4 ppm); 14H CH2 og CH (multiplet mellem 3 og 4,5 ppm); 16H aromatiske (multiplet mellem 7,1 og 7,7 ppm).

DK 170946 B1 19 g) Fremstilling af N,N',N",N"'-tetratosyl-2,6-dimethyl- 1,4,7,10-tetraazacyklododecan (variant).

En frisk fremstillet opløsning af natriumethylat (60 mmol) i 200 cm3 tør DMF sættes hurtigt til en opløsning af 17 g (28,7 5 mmol) af den i trin d) opnåede forbindelse i 100 cm3 ethanol og koges med tilbagesvaling. Den opnåede blanding bliver klar og koges med tilbagesvaling i 1 til 2 timer. Opløsningsmidlerne afdampes derpå til tørhed, resten tages op i 200 cm3 DMF og opvarmes til 100°C . En opløsning af 17 g (30 mmol) af den 10 i trin e) opnåede forbindelse i 100 cm3 DMF sættes til denne opløsning i løbet af en halv time. Reaktionsblandingen fastholdes ved 100 °C natten over. DMF afdampes derpå, og resten tages op i en H20/CH2Cl2-blanding. Produktet, som opnåedes fra den organiske fase, kromatograferes på en silicakolonne med 15 blandingen CH2Cl2/ethylacetat/98/2 som eluent. Produktet omkrystalliseres fra isopropylether og vejer 13,5 g efter tørring (udbytte 58%, Rf = 0,5 til 0,6 silica/CH2Cl2/acetone/98/- 2) .

Spektrum er identisk med det, som er opnået i trin f).

20 h) Fremstilling af 2,6-dimethyl-l,4,7,10-tetraazacyklododecan.

33 g af den i trin f) eller g) opnåede forbindelse opslæmmes i 80 cm3 98% svovlsyre og opvarmes til 100°C i en argonatmosfære i 72 timer. Efter at være blevet afkølet, sættes reak-25 tionsblandingen dråbevis til 1 1 ethylether ved 0°C . Det opnåede 2,6-dimethyl-l,4,7,10-tetraazacyklododecansulfat filtreres fra, tages op i vand, neutraliseres med natriumhydroxid og ekstraheres derpå med CH2C12. De organiske faser samles og inddampes til tørhed, og det resulterende 6 g faste stof 30 anvendes uden yderligere rensning (udbytte 75%, Rf = 0,65 aluminium/butanol/vand/eddikesyre/50/25/ll).

DK 170946 B1 20 NMR-spektrum (D20) : 6H CH3 (dublet 0,9 til 1 ppm); 14 CH2 og CH (multiplet centreret omkring 2,5 ppm).

i) Fremstilling af 2,6-dimethyl-l,4,7,10-tetraazacyklodode-can-N,N',NM,N"'-tetraeddikesyre.

5 En blanding af 5,7 g (60 mmol) monochloreddikesyre og 3,4 g (60 mmol) i 25 cm3 vand sættes til en opløsning af 3 g (15 mmol) af den i trin h) opnåede forbindelse i 25 cm3 vand. Den resulterende blanding opvarmes til 60°C , og en opløsning af kaliumhydroxid (3,4 g, 60 mol) i 25 cm3 vand tilsættes, såle-10 des at pH fastholdes mellem 9 og 10. Tilsætningen kræver 8 timer. Efter tilsætningen af kaliumhydroxid er fuldendt, bibeholdes opvarmning i 24 timer. Efter afkøling indstilles pH på 2,5 med koncentreret saltsyre. Det dannede præcipitat filtreres fra, vaskes med isafkølet vand og vejer 3 g efter tør-15 ring (udbytte 35%, Rf = 0,33 silica/ethylacetat/isopropan-ol/ammonium/12/35/3 0) . Denne forbindelse svarer til komplekset af 2,6-dimethyl-l,4,7,10-tetraazacyklododecan-N,N',N",-N”'-tetraeddikesyre med 2 KCl.

9,5 g af dette kompleks elueres med 200 cm3 10% eddikesyre på 20 en ionbytterharpiks IRA 958 (OH), som forud var blevet regenereret med 1 N NaOH og vasket med vand, indtil den blev neutral. De opnåede fraktioner blev inddampet til tørhed og taget op 3 gange i 50 cm3 vand med henblik på at fjerne spor af eddikesyre. Den opnåede rest blev findelt med ethylether 25 (100 cm3), og efter filtrering og tørring opnåedes 6,3 g af et hvidt fast stof. Udbytte: 89%.

NMR-spektrum: (D20) 6H CH3 (dublet 1,4 og 1,5 ppm); 14H CH2 og CH (kompleks multiplet centreret omkring 3,6 ppm); 8H CH2COOH (dublet ved 3,8 ppm).

DK 170946 B1 21

Eksempel 2: Fremstilling af aadoliniumkomplekset af 2.6-di- methvl-1.4.7.10-tetraazacvklododecan-N.N'.N".N"'-tetraeddike-svre (methvlalucaminsaltl

En suspension af 5,425 g (12,54 mmol) af den i eksempel 1 i) 5 opnåede 2,6-dimethyl-l,4,7,10-tetraazacyklododecan-N,N',N", N"'-tetraeddikesyre og 2,27 g Gd203 (6,27 mmol) i 125 cm3 vand opvarmes til 65°C i 24 timer. pH indstilles derpå til 7,4 ved tilsætning af methylglucamin. Efter bestemmelse af indholdet af frit Gd3+ ved xylenolorange/EDTA-metoden, sættes 650 mg 10 2,6-dimethyl-l,4,7,10-tetraazacyklododecan-N,N',N",N"'-tetra eddikesyre (1,5 mmol) til kompleksbinding af det resterende gadolinium. Fuldendelsen af kompleksbinding fastslås ved fraværet af frit Gd3+ (bestemt med xylenolorange) og af frie ligander (kompleksiometrisk bestemmelse med Cu2+). Bestemmelsen 15 af totalt gadolinium i opløsningen udføres ved atomemissions-spektroskopi i DCP på et "Spectrospan 4 Beckman"-apparat. Kvantitativt udbytte, Rf = 0,49 silica/ethylacetat/isopropa-nol/ammonium/12/35/30.

Eksempel 3; Fremstilling af 2-hexvl-l.4.7.10-tetraazocvklo-20 dodecan-N.N'.N".N"'-tetraeddikesyre a) Fremstilling af N-(2-hydroxyethyl)-N-(2-hexyl-2-hydroxye-thyl)amin.

50 g (0,39 mmol) 1,2-epoxy-octan sættes dråbevis til 250 cm3 (4 mol) ethanolamin ved 100°C. Opvarmning fortsættes i 1 time, 25 efter tilsætningen er fuldendt. Derpå destilleres det overskydende ethanolamin i vakuum. Efter filtrering og tørring omkrystalliseres resten fra 600 cm3 hexan. Den opnåede faste rest vejede 69 g (smp. 45°C , udbytte = 93%, Rf = 0,62 silica/ butanol/H20/eddikesyre/50/25/11) .

30 NMR-spektrum: 3H CH3 (triplet 0,9 ppm); 10H CH2 kæde (stor singlet ved 2,2 ppm); 7H CH2 og CH (2 dårligt opløste masser ved 2,8 og 3,8 ppm).

DK 170946 B1 22 b) Fremstilling af N-tosyl-N-(2-tosyloxyethyl)-N-(2-hexyl-2-tosyloxyethyl)amin.

47,3 g (0,25 mol) af den i trin a) opnåede forbindelse sættes i små portioner til en opløsning af 156 g (0,82 mol) tosyl-5 chlorid i 300 cm3 pyridin ved 0°C i løbet af 1 time. Blandingen fastholdes ved 0°C i 2 dage og udhældes derpå i en is/HCl-blanding (2/1). Produktet ekstraheres med CH2C12 og kromatograf eres derpå på en silicakolonne med CH2C12 som eluent. Den opnåede mængde er 118 g (udbytte 72%, Rf = 0,6 silica/CH2Cl2/ 10 acetone/98/2).

NMR-spektrum: 3H CH3 kæde (triplet ved 0,9 ppm) ; 10H CH2 kæde (stor singlet ved 1,3 ppm); 9H CH3 tosyl (singlet ved 2,4 ppm); 4H CH2N (dårlig opløst triplet ved 3,4 ppm); 3H CH20 og CH (multiplet ved 4,2 ppm); 12H aromatiske (multiplet mellem 15 7 og 7,7 ppm).

c) Fremstilling af N-tosyl-N-(2-azidoethyl)-N-(2-hexyl-2-azi-doethyl)amin.

87 g (0,133 mol) af den i trin b) opnåede forbindelse og 29,25 g (0,5 mol) natriumazid blandes med 350 cm3 acetonitril 20 og 80 cm3 vand. Blandingen opvarmes til 65°C i 3 dage. Aceto-nitrilen afdampes derpå i vakuum, og resten tages op i CH2Cl2; den organiske fase vaskes med vand, tørres og inddampes; 50 g af en gul olie udvindes og anvendes uden rensning (udbytte: 95%, Rf - 0,75 silica/CH2Cl2/acetone/98/2) .

25 NMR-spektrum: 3H CH3 kæde (triplet ved 0,9 ppm); 10H CH2 kæde (multiplet ved 1,4 ppm); 3H CH3 tosyl (singlet ved 2,4 ppm); 5H CH2 og CH (kompleks multiplet ved 3,4 ppm); 4H aromatiske (multiplet mellem 7,1 og 7,7 ppm).

IR-spektrum N3 = 2100 cm'1 intens.

DK 170946 B1 23 d) Fremstilling af N-tosyl-N-(2-aminoethyl)-N-(2-hexyl-2-ami-noethyl)amin.

71 g (0,18 mol) af det i trin c) opnåede diazid opløses i 500 cm3 ethanol, til hvilken 5 g palladium på trækul ved 50% fug-5 tighed er sat. Suspensionen omrøres meget kraftigt under en hydrogenstrøm ved omgivelsernes temperatur i 24 timer. Katalysatoren fjernes ved filtrering; efter inddampning af etha-nolen udvindes 61,5 g diamin, som anvendes uden rensning (udbytte: kvantitativt, Rf = 0,51 silica/MeOH:NH4OH/95/5) .

10 e) Fremstilling af N-tosyl-N(2-tosylaminoethyl)-N-(2-hexyl-2-tosylaminoethyl)amin.

68,6 g (0,36 mol) tosylchlorid sættes i portioner til en opløsning af 61,5 g (0,18 mol) af den i trin d) opnåede forbindelse i 500 cm3 CH2Cl2 og 52,5 cm3 (0,38 mol) triethylamin ved 15 0°C. Efter at være blevet omrørt i 2 timer ved omgivelsernes temperatur behandles reaktionsblandingen med 500 cm3 vand. Den organiske fase vaskes med vand, tørres og inddampes; olieresten kromatograferes på en silicakolonne med CH2C12 som eluent. Olien, som opnåedes efter afdampning af opløsningsmid-20 let, og som blev optaget i isopropylether, giver 60 g af et hvidt fast stof (smeltepunkt 120°C, udbytte 51%, Rf = 0,6 silica/ CH2Cl2/MeOH/98/2) .

NMR-spektrum: 13H hexyl kæde (dårligt opløst multiplet centreret ved 1 ppm); 9H CH3 tosyl (singlet ved 2,4 ppm); 7H CH2 25 og CH (multiplet centreret omkring 3,1 ppm).

f) Fremstilling af N,N',N",N"'-tetratosyl-2-hexyl-l,4,7,10-tetraazacyklododecan.

En blanding af 46,5 g (71,5 mmol) af forbindelsen opnået i trin d) ovenfor, 41,5 g (73 mmol) af forbindelsen opnået i 30 eksempel 1 e) og 24 g (70 mmol) tetrabutylammoniumhydrogen-sulfat suspenderes i 400 cm3 toluen og 200 cm3 20% natriumhy- DK 170946 B1 24 droxid. Blandingen omrores meget kraftigt ved 70°C i 24 timer. Efter afkøling vaskes den organiske fase med vand, tørres og inddampes. Resten krystalliseres fra ethanol og kromatografe-res derpå på en silicakolonne med CH2C12 som eluent. 35 g af 5 et fast stof opnås (smeltepunkt 154/161°C) . Udbytte 56%, Rf = 0,55 silica/CH2Cl2/acetone/98/2.

NMR-spektrum: 3H CH3 kæde (triplet ved 0,9 ppm); 10H CH2 kæde (multiplet ved 1,3 ppm); 12H CH3 tosyl (singlet ved 2,4 ppm); 15H CH2 og CH ring (multiplet ved 3,3 ppm); 16H aromatiske 10 (multiplet mellem 7,1 og 7,7 ppm).

g) Fremstilling af 2-hexyl-l,4,7,10-tetraazacyklododecan 12 g (13 mmol) af den i trin f) opnåede forbindelse opvarmes til 100°C i 40 cm3 98% svovlsyre under argon i 24 timer. Efter at være blevet afkølet sættes blandingen dråbevis til 500 ml 15 ethylether ved 0°C. Det opnåede sulfat filtreres og neutraliseres derpå med en 10% natriumhydroxidopløsning og ekstrahe-res med CH2C12. Den organiske fase tørres over natriumsulfat, inddampes derpå til tørhed til dannelse af 2 g af et cremeag-tigt fast stof (udbytte: 57%, Rf = 0,75 aluminium/butanol/-20 vand/eddikesyre/50/25/11).

Forbindelsen opbevares i form af oxalatet ved omsætning af en ethanolholdig opløsning af oxalsyre med 2-hexyl-l,4,7,10-tetraazacyklododecan natten over ved omgivelsernes temperatur. Oxalatet præcipiterer i form af et hvidt fast stof.

25 h) Fremstilling af 2-hexyl-l,4,7,10-tetraazacyklododecan-N,N',N",N"'-tetraeddikesyre.

En opløsning af 1,09 g (2,8 mmol) af det i trin g) opnåede oxalat i 13 cm3 vand og 20 ml ethanol neutraliseres med 470 mg (8,4 mmol) kaliumhydroxid. Til denne opløsning sættes kalium-30 monochloreddikesyre, som er fremstillet ud fra 1,063 g (11,25 mmol) monochloreddikesyre og 630 mg (11,25 mmol) kaliumhydro- DK 170946 B1 25 xid i 20 cm3 vand. Reaktionsblandingen opvarmes til 60°C, og pH fastholdes mellem 8 og 10 ved tilsætning af kaliumhydroxid. Tilsætningen kræver 3 timer, under hvilket tidsrum 10 cm3 vand indeholdende 630 mg kaliumhydroxid tilsættes. Efter en 5 reaktionstid på 3 timer, tilsættes 141 mg (1,5 mmol) chlored-dikesyre og 84 mg (1,5 mmol) kaliumhydroxid.

Blandingen fastholdes ved 60°C i 2 dage. Efter at være blevet afkølet og syrnet til pH 2,5 (6N HCl) ledes opløsningen gennem en kolonne af en stærkt basisk harpiks IRA 958. Eluering 10 med 100 cm3 10% myresyre giver 700 mg produkt. Gennemløbsfraktionerne (produkter, som ikke tilbageholdes) koncentreres og genbehandles på en identisk kolonne. Efter den samme behandling blev 2,5 g af produktet udvundet (udbytte: "38,4%, Rf = 0,65 silica/ethanol/puffer/2/1) .

15 NMR-spektrum: 3H CH3 kæde (triplet 0,9 ppm) ; 10H CH2 kæde (multiplet ved 1,4 ppm); 15H CH2 og CH ring (multiplet ved 2,3 ppm); 8H CH2 COOH (singlet ved 3,9 ppm). Spektrum registreret i D20.

Eksempel 4: Fremstilling af aadoliniumkomplekset af 2-hexvl- 20 1.4.7.10-tetraazacvklododecan-N.N' .N11 .N" ’ -tetraeddikesvre 488,6 mg (1 mmol) af den i eksempel 3 opnåede forbindelse og 181,3 mg (1 meq metal) gadoliniumoxid suspenderes i 40 cm3 vand og opvarmes til 65°C i 2 dage. Efter 2 timer er opløsningen klar. Kompleksdannelsens fremadskriden bliver overvåget 25 under reaktionen ved bestemmelse af frit gadolinium. Da den er tilendebragt, filtreres opløsningen gennem et Millipore-filterpapir, inddampes derpå til tørhed og krystalliseres fra ethylether. 550 mg af et hvidt fast stof udvindes således (udbytte: 85,5%, Rf = 0,65 EtOH/puffer/2/1).

DK 170946 B1 26

Eksempel 5: Fremstilling af aadoliniumkomplekset af 2-hexvl- 1.4.7.10-tetraazacyklododecan-N.Ν'.N".N"'-tetraeddikesvre fmethvlalucaminsaltl 488,6 mg (1 mmol) af den i eksempel 3 opnåede forbindelse og 5 181,3 mg (1 meq metal) gadoliniumoxid suspenderes i 40 cm3 vand og opvarmes til 65°C i 12 timer. Methylglucamin sættes til den klare opløsning for at bringe pH til 7,4. Tilsætninger af ligander foretages afhængigt af resultaterne af analyserne. Tilendebringelsen af kompleksdannelse fastslås ved 10 fraværet af Gd3+ (bestemmelse ved xylenolorange) og af frie ligander (kompleksiometrisk bestemmelse med kobber). Bestemmelsen af totalt gadolinium i opløsningen blev udført ved hjælp af atomemissionsspektroskopi på et "Spectrospan 4 Beckmann·' -apparat. Rf = 0,65 i EtOH/puffer/2/1).

15 Eksempel 6:_Fremstilling af 2-methvl-l.4.7.10-tetraazacvklo- dodecan-N.Ν'.N".N"/-tetraeddikesvre a) Fremstilling af N,N'-ditosyl-l,2-diaminopropan.

I en 1 1 trehalset flaske forsynet med en magnetisk omrører, et termometer og et beskyttelsesrør opløses 14,8 g 1,2-diami-20 nopropan i 500 ml CH2C12 og 58 cm3 EfcjN.

80 g tosylchlorid tilsættes i portioner i løbet af 1 time. Afkøling på et isbad er nødvendig med henblik på at fastholde en temperatur på 20°C.

Reaktionsblandingen omrøres derpå natten over ved stuetempe-25 ratur.

Reaktionsblandingen overføres til en 1 1 skilletragt og vaskes så med 2 x 260 cm3 vand.

Den organiske fraktion tørres over Na2S04, inddampes til tørhed og krystalliseres derpå fra isopropylether.

DK 170946 B1 27

Opnået vægt = 66 g Udbytte = 86%

Smeltepunkt = 98/100°C

NMR

5 1 ppm dublet (3H) 3,1 ppm multiplet (IH) 2,4 ppm singlet (6H) 5,5 ppm udskiftelig singlet (2H) 2,9 ppm dublet (2H) 7,1 til 7,8 ppm aromatiske (8H)

TLC

Si02 eluent CH2C12 90 10 MeOH, 10 Rf = 0,75.

b) Fremstilling af Ν,Ν'-ditosyl-bis-(2-tosyloxyethyl)ethylen-diamin.

I en 500 cm3 trehalset flaske forsynet med et termometer, et beskyttelsesrør og en magnetisk omrører afkøles en opløsning 15 af 162 g tosylchlorid i 300 ml pyridin til 0°C ved hjælp af et is-saltbad.

29,6 g af dette (2-hydroxyethyl)ethylendiamin tilsættes i portioner i løbet af 2 timer ved denne temperatur. På intet tidspunkt må temperaturen overskride 5°C. Reaktionsblandingen 20 omrøres i 4 timer ved denne temperatur, henstilles i 48 timer ved 6/8°C i køleskabet og derefter i 4 timer ved stuetemperatur.

Reaktionsblandingen udhældes i l 1 is og vand og 300 ml koncentreret HC1. Produktet ekstraheres med 500 ml CH2C12. Den 25 organiske fase tørres over Na2S04 og inddampes derpå til tørhed. Resten tages op i 250 cm3 ethanol under varme. Produktet krystalliserer. Det filtreres fra på en glasfritte og tørres ved 60°C i 48 timer.

Opnået vægt = 107,5 g 30 Udbytte * 70%

Smeltepunkt - 138/140°C

DK 170946 B1 28

NMR

2,4 ppm singlet (12H) 3,3 ppm singlet + triplet (8H) 4.2 ppm triplet (4H) 5 7,2 til 7,8 ppm multiplet (16H)

TLC

Si02 plade, eluent toluen 80, Rf = 0,6 acetone 20 c) Fremstilling af N,N',N",NM'-tetratosyl-2-methyl-l,4,7,ΙΟΙ 0 tetraazacyklododecan I en 1 1 trehalset flaske omrores en opløsning af 17,5 g Ν,Ν'-ditosyldiamino-l,2-propan i 500 ml tør DMF i en time ved omgivelsernes temperatur. 33 g Cs2C03 pulveriseres og sættes i suspension til denne opløsning. Suspensionen opvarmes 15 til 55°c ved hjælp af et oliebad i en inert atmosfære.

En opløsning af 35 g Ν,Ν'-ditosyl-bis-(2-tosyloxyethyl)ethy-lendiamin i 200 cm3 DMF tilsættes dråbevis ved denne temperatur i løbet af 2 timer. Efter tilsætningen er tilendebragt, fortsættes opvarmning i 48 timer. DMF fjernes derpå ved des-20 tillation i vakuum. Resten tages op i en vand/CH2Cl2-blanding.

Den organiske fase tørres over Na2S04. Opløsningsmidlet fjernes ved destillation i en rotationsfordamper.

Resten opvarmes og omrøres i 200 ml ethylacetat. Det forventede produkt krystalliserer. Det filtreres fra og tørres der-25 på ved 60°C i vakuum i 24 timer.

Opnået vægt — 22,5 g Udbytte =61%

Smeltepunkt = 274/275°C

NMR

30 1 ppm dublet (2H) 2.2 ppm singlet (12H) DK 170946 Bl 29 3 til 3,8 ppm multiplet (15H)

7,2 til 7,9 ppm multiplet (16H) aromatiske TLC

Si02 plade, eluent toluen 80 5 acetone 20, Rf = 0,56 d) Fremstilling af 2-methyl-l,4,7,10-tetraazacyklododecan I en 1 1 trehalset flaske forsynet med et termometer, en argonballon og en mekanisk omrører opvarmes en opløsning af 72,5 g af den i trin c) opnåede forbindelse i 300 ml 98% H2S04 10 til 100°C i 48 timer ved hjælp af et oliebad i en inert atmosfære.

Reaktionsblandingen afkøles til omgivelsernes temperatur, og 800 ml Et20, som er afkølet til 0°C ved hjælp af et ethylen-glycolbad og tøris, tilsættes i løbet af 1 time.

15 Det meget hygroskopiske sulfat præcipiterer. Det filtreres forsigtigt fra på en glasfritte under nitrogen og opløses derpå hurtigt i 200 ml vand. Denne opløsning gøres alkalisk (NaOH-perler) og ekstraheres derpå med 5 x 100 ml CH2C12.

De samlede organiske faser tørres over Na2S04, inddampes derpå 20 til tørhed til opnåelse af 15 g af et meget viskøst råprodukt, som krystalliserer ved henstand.

NMR

CDCl3 1,1 ppm dublet (2H)

Spektrum i + D20 2,7 ppm 2 singletter 25 som en multiplet (19H, 4 som er udskiftelige)

TLC

A1203 plade, eluent BuOH 50, Rf « 0,8 H20 25 AcOH 11 e) Fremstilling af komplekset af 2-methyl-l,4,7,10-tetraaza- cyklododecan-Ν,Ν',NM,N"'-tetraeddikesyre med 2 KC1.

DK 170946 B1 30 I en 250 ml trehalset flaske afkøles 34 g chloreddikesyre i 150 cm3 vand til 10°C på et isbad. 20 g kaliumhydroxid tilsæt-5 tes ved denne temperatur til neutralisering af syren.

Den i trin d) opnåede forbindelse opløses derpå i denne opløsning. Reaktionsblandingen opvarmes til 65°C ved hjælp af et oliebad.

En opløsning af 20 g KOH i 50 cm3 vand tilsættes forsigtigt i 10 løbet af 6 timer ved denne temperatur, mens pH fastholdes mellem 8 og 10.

Opvarmning fortsættes derpå i 72 timer, hvorefter reaktionsblandingen syrnes til pH = 2,5 med koncentreret HCl.

Komplekset præcipiterer. Det filtreres fra på en glasfritte, 15 renses med 50 cm3 vand og tørres derpå ved 60°C i 18 timer i en ovn.

Opnået vægt = 30 g Udbytte = 66%

Smeltepunkt > 300°C

20 f) Rensning af 2-methyl-l,4,7,10-tetraazacyklododecan- 1,4,7,10-tetraeddikesyre 30 g af det i trin e) opnåede kompleks suspenderes i nærværelse af 150 cm3 IRA 958 harpiks, som forud er blevet regenereret.

25 Efter opløsning af komplekset, påsættes denne suspension ho vedet af en kolonne, som indeholder 150 cm3 IRA, 958 harpiks.

DK 170946 B1 31

Elueringen udføres med en 5% eddikesyreopløsning i vand.

Fraktionerne, som indeholder det forventede rene produkt, inddampes til tørhed med henblik på fuldstændigt at fjerne eddikesyren.

5 Opnået vægt = 18,4 g Udbytte = 89%

Surhed = 100,3% (4 ækvivalenter) titreret med 0,1 M

NaOH.

TLC

10 Si02 eluent AcOEt 12, Rf * 0,36 isopropanol 35 NH3, H20 30 FAB-massespektrum: massetop ved M + 1 * 419.

Eksempel 7; Fremstilling af en opløsning af aadolinium-15 komplekset af 2-methyl-l.4,7.10-tetraazacvklododecan-N.N/,-Nll.N,t/- tetraeddikesvre (methvlalucaminsalt) 21 g (50 mmol) af den i eksempel 6 opnåede forbindelse og 9,05 g (25 mmol) gadoliniumoxid opløses i 50 ml dobbelt-de-stilleret, afluftet vand ved 70°C. Efter 1 time er opløsningen 20 tilendebragt, og pH er tæt på 3. Efter afkøling indstilles pH på 7,3 med methylglucamin. Opløsningen opfyldes til 100 ml og filtreres gennem en Millipore-membran 0,22 Mm. En opløsning med et Gd-indhold på 0,5 mol/1 opnås således. Denne opløsning har en viskositet ved 20°C på mindre end 4 mPa.s (frit Gd ikke 25 sporet).

Eksempel 8; 2-hvdroxvmethvl-l.4.7.10-tetraazacvklododecan- 4.7.10-trieddikesvre a) Fremstilling af N,N'-ditosyl-2,3-diaminopropionsyre.

Til en opløsning på 46 g natriumhydroxid i 500 cm3 vand sættes DK 170946 B1 32 40 g af monohydrochloridet af 2,3-diaminopropionsyre under kraftig omrøring. 200 cm3 ethylether efterfulgt af 110,5 g to-sylchlorid tilsættes portionsvis i løbet af 1 time. Omrøring bibeholdes i 12 timer, det dannede præcipitat filtreres fra 5 og vaskes derpå med vand og ethylether. Det opnåede faste stof suspenderes ill vand og syrnes derpå med 6 N HC1. Efter filtrering og vask med vand og ethylether tørres det faste stof i 24 timer ved 60°C i vakuum.

Opnået vægt = 76 g 10 Udbytte - 65%

Smeltepunkt = 200-201°C

TLC: Si02 CH2C12 80/MeOH 20

Rf = 0,5

NMR

15 - 2,4 ppm singlet 6H (CH3 fra tosylgruppen) - 2,8 ppm multiplet 3H (CH2, CH fra diaminokæden) - 3,5 til 5 ppm udstrakt multiplet 3H udskiftelig med D20 - 7,2 til 7,8 ppm multiplet 8H aromatiske.

b) Fremstilling af N,N/-ditosyl-2,3-diaminopropanol 20 I en 2 1 trehalset flaske omrøres en suspension af 40 g af den i trin b) opnåede forbindelse i 600 cm3 THF ved 20°C i en inert og vandfri atmosfære (argon).

En opløsning af 500 ml 1M BH3:THF tilsættes i en inert atmosfære i løbet af en halv time. Temperaturen af reaktionsblan-25 dingen stiger til 30°C. Omrøring fortsættes i 48 timer. Hydrolyse udføres forsigtigt med 20 ml vand. THF fjernes ved destillation i vakuum. Resten ekstraheres med en vand/ether-blanding. Den organiske fase vaskes med vand, tørres over Na2S04 og inddampes derpå til tørhed. Resten findeles med iso-30 propylether, indtil den krystalliserer. Efter filtrering og tørring opnås 35 g af produktet.

DK 170946 B1 33

Udbytte: 90%

Smeltepunkt: 126-127°C TLC: Si02 CH2C12 90/MeOH 10 Rf: 0,6

5 NMR

- 2,7 ppm singlet "CH3" fra tosyl (6H) - 3 til 3,7 ppm multiplet (7H, 2 som er udskiftelige) - 6,9 ppm triplet, udskiftelig alkoholisk OH (IH) - 7,3 til 7,9 ppm multiplet aromatiske (8H) 10 c) Fremstilling af N,N',N",N"'-tetratosyl-2-hydroxymethyl- 1,4,7,10-tetraazacyklododecan.

I en 2 1 trehalset flaske under argon opløses 35 g af den i trin b) opnåede forbindelse ill vandfri DMF, og derpå tilsættes 58,6 g vandfrit Cs2C03.

15 Denne suspension omrøres i 1 time ved omgivelsernes temperatur opvarmes derpå til 65°C ved hjælp af et oliebad. En opløsning indeholdende 69 g N,N'-ditosyl-bis-(2-tosyloxyethyl)-ethylendiamin i 600 cm3 vandfri DMF tilsættes dråbevis ved denne temperatur i løbet af 6 timer. Opvarmning til 65°C fast-20 holdes natten over; DMF fjernes ved destillation i vakuum. Resten tages op i en blanding af 400 ml vand og 400 cm3 di-chlormethan. Den organiske fase dekanteres, vaskes med 200 cm3 vand, tørres over Na2S04 og inddampes derpå til tørhed. Den resterende olie opløses ved 80°C i 200 cm3 toluen, henstilles 25 derefter i køleskab i 48 timer, så krystallisering kan finde sted. 24 g af produktet opnås.

Udbytte: 32%

Smeltepunkt: 143-145°C TLC: Si02 CH2C12 90/AcOEt 10 30 Rf: 0,5 DK 170946 B1 34

NMR

2,4 ppm singlet 12H CH3 tosyl

3.2 til 4,1 ppm multiplet 17 CH2 ring + CH2-0H

7.2 til 8,1 ppm multiplet 16H aromatiske 5 d) Fremstilling af 2-hydroxymethyl-l,4,7,10-tetraazacyklodo-decan.

20 g af den i trin c) opnåede forbindelse opløses i 100 cm3 98% H2S04. Oplosningen opvarmes til 100°C i 48 timer i en inert atmosfære. Reaktionsblandingen afkøles og tilsættes 10 derpå dråbevis til 1 1 ethylether, som er afkølet ved hjælp af et tøris/acetone-bad.

Præcipitatet af aminsulfatet filtreres fra på en glasfritte og vaskes derpå med ethylether. Det faste stof opløses straks i 200 cm3 vand, opløsningen indstilles til pH 12 med NaOH og 15 inddampes til tørhed. Efter tørring af det resterende faste stof i vakuum i nærværelse af P205 ekstraheres produktet ved kogning under tilbagesvaling med 2 x 100 cm3 THF. Inddampning af de efter ekstraktion opnåede fraktioner fører til en farveløs olie.

20 Opnået vægt: 4,5 g base Udbytte: 90% TLC: A1203 BuOH 50/vand 25/AcOH 11 Rf: 0,8 NMR (CDC13 spektrum) 25 2,8 ppm singlet (17H) + triplet 3,8 ppm udskiftelig singlet (5H) e) Fremstilling af 2-hydroxymethyl-l,4,7,10-tetraazacyklodo-decan-4,7,10-trieddikesyre.

I en 250 cm3 trehalset flaske udstyret med en varme-magnetisk 30 omrører, en temperatursonde og en pH-elektrode, forbundet med DK 170946 B1 35 et analogt pH-meter, og et system for tilsætning af reagens, korreleret med pH-værdien af mediet, neutraliseres en opløsning af 8,5 g af den i trin d) opnåede forbindelse, 15,8 g 2-chloreddikesyre og 100 ml vand til pH = 9,5 ved hjælp af en 5 opløsning af 15,8 g kaliumhydroxid i 50 cm3 vand. Derefter opvarmes reaktionsblandingen til 50°C på et oliebad i 72 timer. Endvidere fastholdes pH på 9,8 ved kontinuerlig tilsætning af en kaliumhydroxidopløsning. Blandingen afkøles, syrnes til pH = 5, fortyndes til 500 cm3 og påsættes en kolonne af 500 cm3 10 af den stærkt basiske anionbytterharpiks IRA 958, som forud er blevet regenereret. Alkyleringsprodukterne bindes til harpiksen. Den sidste renses med vand og elueres derpå med fraktioner af 5% eddikesyre. Fraktionerne inddampes til tørhed. Resten er et rå-pulver, som renses på en præparativ HPLC-ko-15 lonne med diameter 40, dækket med RP.18-podet silica.

Opnået vægt: 3,5 g rent produkt Udbytte: 22%

Smeltepunkt: 142-144°C

TLC: Si02, AcOEt 12/isopropanol 35/NH4OH 30 20 Rf: 0,35

Surhed: 198,7% (2 bølger)

Titrering med 0,1 M NaOH - korrigeret for H20 FAB-massespektrum: top ved M + 1 = 377

Eksempel 9: Fremstilling af en opløsning af cradoliniumkom- 25 plekset af 2-hvdroxvmethvl-l.4.7.10-tetraazacyklododecan- 4.7.10-trieddikesvre.

En suspension af 11,05 g 2-hydroxymethyl-l,4,7,10-tetraaza-cyklododecan-4,7,10-trieddikesyre og 5,07 g gadoliniumoxid i dobbelt-destilleret vand opvarmes til 80°C i 1 time.

30 Efter afkøling indstilles pH på 7,3 ved tilsætning af natriumhydroxid, og volumenet indstilles på 100 ml. Bestemmelse af total gadolinium udføres ved atomemissionsspektroskopi (0,2 DK 170946 B1 36

Ml-1).

Eksempel 10;_Fremstilling af 2-hvdroxvmethvl-l.4.7.10-te- traazacvklododecan-1.4.7.10-tetraeddikesvre.

I en reaktor på 50 cm3 udstyret med en magnetisk omrører, op-5 varmes en opløsning af 0,7 g 2-hydroxymethyl-l,4,7,10-tetra-azacyklododecan-4,7,10-trieddikesyre og 0,2 g chloreddikesyre i 15 cm3 vand til 70°C.

pH indstilles på 10,5 ved hjælp af en opløsning af kaliumhydroxid og fastholdes på denne værdi i 48 timer ved 70°C.

10 Når reaktionen er tilendebragt, indstilles pH på 5, og derefter påsættes opløsningen en IRA 958 harpiks.

Liganden kromatograferes på harpiksen ved eluering med 5% eddikesyre.

Efter inddampning til tørhed renses produktet ved præparativ 15 HPLC (RP18 - podet silica).

Således udvindes 0,15 g ligand i et udbytte på 18%.

TLC (silica), eluent ethylacetat 12 isopropanol 35, Rf = 0,25 NH3, H20 30 20 FAB-massespektrum: Top ved M + 1 = 435.

Eksempel 11: Fremstilling af 2-(2-hvdroxvmethvl)-1.4.7.10- tetrazaacvklododecan-N.N' .NH .N'^-tetraeddikesyre.

Denne ligand fremstilles ifølge den i eksemplerne 8 og 10 beskrevne metode for syntese af 2-hydroxymethyl-l,4,7,10-tetra-25 azacyklododecan-Ν,Ν' ,NH ,N" '-tetraeddikesyre, gående ud fra 3,4-diaminobutansyre (S. Kasina m.fl., J. Med. Chem., 29, 1933, 1986).

DK 170946 B1 37

Eksempel 12; Fremstilling af 2-methvl-l.4.7.10.13-pentaaza-cvklopentadecan-4.7.10.13-tetraeddikesvre iprodukt 12a) oa 2-methvl-l.4.7.10.13-pentaazacvklopentadecan-l.4.7.10.13-pen-taeddikesvre (produkt 12b^.

5 a) Fremstilling af l,4,7,10,13-pentatosyl-2-methyl-l,4,7,10, 13-pentaazacyklopentadecan.

35,7 g (0,093 mol) N,N'-ditosyl-1,2-diaminopropan, 75,7 g cæ-siumcarbonat (0,23 mol) og 800 ml DMF hældes i en 2 1 trehal-set flaske, udstyret med et kølemedium og en mekanisk om-10 rører.

Blandingen bringes under argon og opvarmes til 75°C.

En opløsning af 83 g (0,012 mol) 1,ll-mesyloxy-3,6,9-trito-syl-3,6,9-triazaundecan, som er syntetiseret ifølge Richman og Atkins, Organic Synthesis 58, side 86, i 700 ml DMF til-15 sættes i løbet af 4 timer ved 75°C.

Reaktionsblandingen fastholdes ved 75°C i 48 timer, filtreres derpå, og filtratet inddampes til tørhed.

Resten tages op i 700 ml ethanol, det faste stof filtreres fra og tages derpå op i 800 ml toluen under opvarmning.

20 Det faste stof filtreres fra ved stuetemperatur og tørres derefter ved 60°C.

Opnået vægt: 45,4 g Udbytte: 49%

Analyse: TLC: Sio2 60 F 254 Merck 25 Eluént CH2C12/acetone 98,2, Rf 0,45

Massespektrum DCI-metode (NH3)

Massetop ved 999.

DK 170946 B1 38 b) Fremstilling af 2-methyl-l, 4,7,10,13-pentaazacyklopenta-decan.

44 g (0,044 mol) af den i trin a) opnåede forbindelse fastholdes i 72 timer ved 100°c i 130 ml koncentreret svovlsyre.

5 Efter at være blevet afkølet udhældes reaktionsblandingen i en blanding af 250 ml ethylether og 250 ml ethanol ved 0°C.

Det faste stof filtreres fra, opløses derpå i 250 ml vand og behandles med kønrøg. Opløsningen gøres alkalisk med cæsiumhydroxid og ekstraheres derpå med CH2C12. Den organiske opløs-10 ning tørres over Na2S04 og inddampes til tørhed. Den således opnåede amin kan anvendes som sådan eller i form af dens hy-drochlorid.

Opnået vægt: M = 8,4 g som den frie base M = 13,2 g som 5 HC1 15 Udbytte: 72,8%

Analyse af hydrochloridet: TLC: A1203 F 254 Merck Eluent: ethanol/isopropylamin 80/20 Udvikler: jod, Rf: 0,85 20 NMR: 1,7 ppm 3H CH3 3,7 ppm 19H CH2 og CH.

c) Fremstilling af 2-methyl-l,4,7,10,13-pentaazacyklopentade-can-4,7,10,13-tetraeddikesyre (produkt 12a) og 2-methyl- 1,4,7,10,13-pentaazacyklopentadecan-l,4,7,10,13-pentaeddi- 25 kesyre (produkt 12b).

I en 500 ml trehalset flaske neutraliseres en opløsning af 25,7 g (0,27 mol) chloreddikesyre i 50 ml vand til pH * 5 ved T < 10°C ved hjælp af 5 M kaliumhydroxid.

10 g af den i trin b) opnåede forbindelse (10,043 mmol) oplø-30 ses i 20 mi vand og sættes til denne opløsning. Blandingen DK 170946 B1 39 opvarmes til 55°C, og 50 ml 5 M kaliumhydroxid tilsættes i løbet af 48 timer til fastholdelse af pH på 8,5-9,5. Efter at tilsætningen er tilendebragt, fortsættes opvarmningen natten over. Reaktionsblandingen afkøles og syrnes til pH = 3. Op-5 løsningen påsættes derefter 200 ml DOWEX 50 W harpiks. Elu-ering af harpiksen ved hjælp af 1 1 1 M aramoniumopløsning fører til udvindingen af 20 g råprodukt. Råproduktet opløses i 150 ml vand og påsættes 250 ml IRA 958 harpiks. Harpiksen vaskes med vand, elueres derpå med 2 1 0,1 M eddikesyre ef-10 terfulgt af 2 1 0,8 M eddikesyre.

9 g råprodukt 12a opnås ved inddampning af den 0,1 M eddikesyre. 2,5 g råprodukt 12b opnås ved inddampning af den 0,8 M eddikesyre.

Produkterne 12a og 12b renses derefter ved præparativ HPLC på 15 RP18-silica.

Opnået produkt: produkt 12a: M = 5 g produkt 12b: M = 1,1 g

Udbytte: 30%

Analyse: 20 TLC: si02 60 F 254 Merck

Eluent: ethylacetat/isopropanol/NH3 (30%)/12/35/30 Udvikler: jod Produkt 12a, Rf: 0,4 Produkt 12b, Rf: 0,27 25 Vandanalyse:

Produkt 12a: KF: 1,8%

Produkt 12b: KF: 2,8%

Surhedsanalyse ved hjælp af 0,1 M NaOH:

Produkt 12a: 2 surhedsanalyser 98,6% og 100,6%, titer: 99,6% 30 Produkt 12b: 3 surhedsanalyser 199,2% og 92,4%, titer: 97,3% FAB-massespektre: 12a top ved M + 1 462 12b top ved M + 1 520 DK 170946 B1 40

Sammenligningseksempel 13 Nærværende eksempel belyser et sammenligningsforsøg, som er blevet foretaget mellem det nærmestliggende kendte kompleks Gd-DOTA og Gd-MCTA, der svarer til metalkomplekset ifølge 5 eksempel 7 i nærværende tekst.

De strukturelle formler for henholdsvis DOTA og MCTA er som følger: ch3

HOOC—v / \ s—COOH HOOC—v f~\ ,—COOH

NN N N

(

NN NN

HOOC—/ ^—COOH HOOC—^ ^'—COOH

DOTA MCTA

Ved forsøget blev LD50-værdien (dvs. den dosis, der inducerer døden hos 50% af en population) bestemt ved intravenøs admi-10 nistration til mus og dissociationskonstanter for de to komplekser. Resultaterne er angivet i tabel 1 nedenfor.

TABEL 1

Forbindelser Gd-MCTA Gd-DOTA

LD50 IV (mus 15,37 11,5 15 (mmol/kg)

Dissociati- 2,7 · 10*9+4,5 10’7 (H+) 6 · 10'9+8 · 10'7 (H+) onskonstant ved pH > 6 ved pH > 6 K halveringstid > 8 år halveringstid > 3 år

Som det fremgår af tabellen, har Gd-MCTA ifølge opfindelsen 20 lavere dissociationskonstant og lavere toksicitet end den nærmestliggende kendte usubstituerede homolog Gd-DOTA.

Claims

1. Ligand, kendetegnet ved, at den har formlen: R, r5 i 3 i 3 H00C - CH CH COOH N —[ n] / "\ R, R, 1 \ / N N- R, -Z I £ H00C- CH R5 hvor

2 I H R2, R3, R4, R7, Rn, m og n er som defineret ovenfor, og Z' vælges blandt gruppen bestående af et oxygenatom og en gruppe med formlen: 10 \ N - R'10 / R'10 vælges blandt gruppen bestående af hydrogen, Cj-C^-al-kyl, Cj-C4-hydroxyalkyl, CX-C^-polyhydroxyalkyl og en gruppe 15 med formlen: H H \ / ’ — R,2— N — R2— Ϊ H Rj, R2, R3, R4, R12 og n er som defineret ovenfor. DK 170946 B1

2. R, - N

2. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den er 2,6-dimethyl-l,4,7,10-tetraazacyklododecan-N,N/,-

3 R· Irr \ / ' N-R -£·. I 2 4 H hvor R2, R3, R4 og n er som defineret ovenfor, R'j betegner et radikal med formlen: DK 170946 B1 “ (CH2) m - CH - CH - R/6 R? R'6 vælges blandt gruppen bestående af Cj-C14-alkyl, Cj-C^hy-5 droxyalkyl, C1-C4-polyhydroxyalkyl og en gruppe med formlen: H H ΓΑ-.,μ. n / J- \ R, -CH R / <CH ) / 'X /

3. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den er 2-hexyl-l,4,7,10-tetraazacyklodecan-N,N',N",N"'-te-traeddikesyre.

4. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, 20 at den er 2-methyl-l,4,7,10-tetraazacyklododecan-N,N',N", - N"'-tetraeddikesyre. DK 170946 B1

5. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den er 2-hydroxymethyl-l,4,7,10-tetraazacyklododecan-4,7,- 10-trieddikesyre.

5 Cj-C^-hydroxyalkyl, Cj-C^polyhydroxyalkyl, en gruppe med formlen -CH - COOH, hvor R5 er som defineret tidligere, og en *5 gruppe med formlen: I* 5 A’ C H-COOH CH-COOH / - '·!- \ \ /’ — R - N - - N 12. i CH-C00H *5

5 R1 betegner et radikal med formlen: -(CH2)m - CH - CH - I I *6 *7 vælges blandt gruppen bestående af C1 C14 -alkyl, C1-C4-hy-10 droxyalkyl og Cj-C4-polyhydroxyalkyl og en gruppe med formlen: r R I 3 I 5 CH-COOH CH-COOH p - %- \ R7_CH (CH ) / 'X / Z — R, - N 2 i CH-COOH R5 DK 170946 B1 Ru vælges blandt gruppen bestående af grupperne A og grupperne med formlen: ~(ch2)t - y - a - y - (CH2)t - A vælges blandt gruppen bestående af Cj-Cg-alkylen, Cj-Cg-hy-5 droxyalkylen og C^-Cg-polyhydroxyalkylen, Y vælges blandt -C-O- og - O og t = 1 til 4. o

6. Forbindelse ifølge krav l, kendetegnet ved, 5 at den er 2-hydroxymethyl-l,4,7,10-tetraazacyklododecan-l,4,- 7.10- tetraeddikesyre.

7. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den er 2-hydroxyethyl-l,4,7,10-tetraazacyklododecan-l,4,- 7.10- tetraeddikesyre.

8. Fremgangsmåde til fremstilling af en forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den omfatter omsætningen af en forbindelse med formlen: X - CH - COOH II

9. Fremgangsmåde ifølge krav S, kendetegnet, ved, at den omfatter fremstillingen af forbindelsen med formlen III ved omsætning af en polyamin med formlen:' r * R'H N _[„ _ νΊ_R’ 1 -NHR * IV 5 hvor Rj og R2 er som defineret i krav 8, og R' beregner en tosyl-, roesyl- eller benzensulfonylgruppe, med en forbindelse med formlen: X-R4-N-R3-X V

10. Fremgangsmåde ifølge krav 8, kendetegnet ved, at den omfatter fremstillingen af forbindelsen med formlen

10 R' hvor R3, R4 og R' er som defineret i krav 8, og X betegner en labil gruppe.

10 R12 vælges blandt gruppen bestående af Cj-Cg-alkylen, Cj-Cg- hydroxyalkylen og Cj-Cg-polyhydroxyalkylen, såvel som salte deraf.

10 R7 vælges blandt gruppen bestående af hydrogen, C^-C^-alkyl, Cj-C4-hydroxyalkyl og C1-C4-polyhydroxyalkyl, m = 0 eller 1, R2, R3, R4 er ens eller forskellige og betegner et radikal med formlen: 15 -(CH)_ - CH - I I Rg R9 Rg og R9 er ens eller forskellige og vælges blandt hydrogen, Cj-C^-alkyl, Cj-C^hydroxyalkyl og Cj-C4-polyhydroxyalkyl, 20. er 1 eller 2, n er 0, 1 eller 2, og R5 vælges blandt gruppen bestående af hydrogen, Cj-C4-alkyl, Cj-C4-hydroxyalkyl og Cj-C4-polyhydroxyalkyl, og Z vælges blandt gruppen bestående af oxygen og en gruppe med 25 formlen: \ DK 170946 B1 N - R10 / R10 vælges blandt gruppen bestående af hydrogen, C^-C^-alkyl,

11. Komplekser dannet af ligander med formlen I ifølge krav 1, kendetegnet ved, at det er komplekset af ligand DK 170946 B1 og metalioner valgt blandt gruppen bestående af lanthanidio-ner (atomnumre 57 til 71) , overgangsmetalioner (atomnumre 21 til 29) og metalioner med atomnumre 55, 56, 82 og 83, såvel som saltene af disse komplekser med farmaceutisk acceptable 5 uorganiske eller organiske baser eller med basiske aminosy rer.

12. Komplekser ifølge krav 11, kendetegnet ved, at metalionen vælges blandt gruppen bestående af gadolinium, europium, dysprosium, jern (Fe3+) og mangan (Mn2+) .

13. Kompleks ifølge krav 12, kendetegnet ved, at det er methylglucaminsaltet af gadoliniumkomplekset af 2,6-dimethyl-1,4,7,10-tetraazacyklododecan-N,N',N",N"'-tetraeddi-kesyre.

14. Kompleks ifølge krav 12, kendetegnet ved, at 15 det er methylglucaminsaltet af gadoliniumkomplekset af 2-he- xyl-1,4,7, 10-tetraazacyklododecan-N,N' ,NH,N"' -tetraeddikesy-re.

15. Kompleks ifølge krav 12, kendetegnet ved, at det er methylglucaminsaltet af gadoliniumkomplekset af 2-me- 20 thyl-1,4,7,lO-tetraazacyklododecan-Ν,Ν',N",N"'-tetraeddikesy-re.

15 III ved omsætning af en diamin med formlen: R'HN - R'j - NH - R' X hvor R'j og R' er som defineret i krav 8, med en forbindelse med formlen: Γ R1 R/

20. I X - R4 - N - R3 - N - R2 - X XI D hvor n, R2, R3, R4 og R' er som defineret i krav 8, og X betegner en labil gruppe.

15 R5 hvor R5 er som defineret i krav 1, og X betegner en labil gruppe eller et aldehyd med formlen: Rs - CHO Ila hvor R5 er som defineret i krav 1, i nærværelse af hydrogen-20 cyanid eller cyanidioner, med en cyklisk amin med formlen: « - H P '

15 N",NM'-tetraeddikesyre.

16. Kompleks ifølge krav 12, kendetegnet ved, at det er gadoliniumkomplekset af 2-hydroxymethyl-l,4,7,10-te-traazacyklododecan-4,7,10-trieddikesyre.

17. Diagnostisk middel, som kan administreres til mennesker, kendetegnet ved, at det omfatter mindst ét kompleks ifølge ethvert af kravene 11-16.

18. Middel ifølge krav 17, kendetegnet ved, at det består af en opløsning af komplekset i et vandigt opløsnings-30 middel. DK 170946 B1

19. Middel til magnetisk-resonansbilledgivning, kendetegnet ved, at det omfatter mindst et kompleks, som er dannet af en ligand ifølge krav 1, med paramagnetiske metalioner, og salte deraf med farmaceutisk acceptable baser. 5

20. Røntgenkontrastmiddel, kendetegnet ved, at det omfatter mindst ét kompleks, som er dannet af en ligand ifølge krav 1, med lanthanidioner med atomnumrene 57 til 71, og metalioner med atomnumrene 55, 56, 82 og 83 og salte deraf med farmaceutisk acceptable baser. 10