DK175916B1

DK175916B1 - System og fremgangsmåde til behandling af biologiske fluida

Info

Publication number: DK175916B1
Application number: DK199300505A
Authority: DK
Inventors: David B Pall; Vlado I Matkovich; Thomas Bormann; Thomas C Gsell
Original assignee: Pall Corp
Priority date: 1990-11-06
Filing date: 1993-05-04
Publication date: 2005-06-27
Also published as: AU9086191A; NL194639B; JP2570906B2; FI109336B; ES2153827T3; EP0556303A1; FI932031A0; EP0556303B1; CN1103317A; EP1038541A2; ATA902991A; KR100193172B1; US5100564A; GB2277464B; FI116366B; EP1348455A1; JPH06500942A; AT404674B; DK50593D0; GB2264884B

Description

i DK 175916 B1

Opfindelsen angår et behandlingssystem for et biologisk fluidum af den art, der er angivet i krav l's indledning, og dette system er ejendommeligt ved det i krav l's kendetegnende del angivne. Foretrukne udførelsesformer for 5 systemet er angivet i krav 2-11. Opfindelsen angår også en fremgangsmåde til behandling af et biologisk fluidum af den art, der er angivet i krav 12's indledning, hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved det i krav 12's kendetegnende del angivne. Foretrukne udførelsesformer for fremgangsmåden 10 er angivet i krav 13-15. Opfindelsen angår endvidere et biologisk fluidumbehandlingssystem af den art, der er angivet i krav 16's indledning, og systemet er ejendommeligt ved det i krav 16's kendetegnende del angivne. Foretrukne udførelsesformer for dette system er angivet i krav 17-25. Opfin-15 delsen angår tillige en fremgangsmåde til behandling af et biologisk fluidum af den art, der er angivet i krav 26's indledning, hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved det i krav 26's kendetegnende del angivne. Foretrukne udførelsesformer for fremgangsmåden er angivet i krav 27-32. Endelig 20 angår opfindelsen en fremgangsmåde til behandling af et biologisk fluidum af den art, der er angivet i krav 33's indledning, hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved det i krav 33's kendetegnende del angivne.

Den foreliggende opfindelse angår således et system 25 /til behandling af fx blod fra donorer med det formål at opnå terapeutisk transfusion af blodbestanddele, og der skal i det følgende især beskrives forbedrede metoder og apparater til ud fra donor-helblodet at fremstille blodplade-rigt plasma (herefter kaldet PRP), pakkede røde blodlegemer (her-* 30 efter kaldet PRC), blodplade-koncentrat (herefter kaldet PC) samt plasma.

Udviklingen af plast-blodopsamlingsposer har lettet adskillelsen af donor-helblod i dettes forskellige bestanddele og analoge produkter, hvorved disse forskellige blod-35 produkter, f.eks. blodplade-koncentrater, gøres tilgængelige som et transfusionsprodukt.

DK 175916 B1 I

I tidens løb og under akkumulering af researchdata I

og kliniske data er transfusionspraksis i høj grad blevet ændret. Ét aspekt ved den gængse praksis er, at helblod

sjældent indgives; i stedet gives der til patienter, der I

5 har behov for røde blodlegemer, pakkede røde blodlegemer, ' I

patienter, der har behov for blodplader, gives blodplade- I

koncentrat, og patienter, der har behov for plasma, gives ” I

plasma. I

Af denne grund har adskillelsen af blodet i dets I

10 bestanddele en væsentlig terapeutisk og økonomisk værdi.

Dette er intetsteds mere evident end ved behandlingen af

den forøgede beskadigelse af en patients immunsystem, der I

forårsages af de højere doser og kraftigere virkende læge- I

midler, der nu anvendes ved kemoterapi af cancerpatienter. I

15 Disse mere aggressive kemoterapi-behandlinger er direkte I

impliceret i formindskelsen af blodpladeindholdet i blodet til abnormt lave niveauer. Associeret indre og ydre blødning

kræver desuden mere hyppige transfusioner af PC, og dette I

har lagt pres på blodbanker til forøgelse af blodpladeudbyt- I

20 tet pr. enhed af blod. I

Ved en typisk blodbestanddel-adskillelsesprocedure, I

der anvendes i USA, citrat-phosphat-dextrose-adenin (CPDA- I

1)-systemet, benyttes der en række trin til adskillelse af I

donorblod i tre bestanddele, idet hver bestanddel har væ- I

25 sentlig terapeutisk og økonomisk værdi. Ved fremgangsmåden I

anvendes der typisk en blodopsamlingspose, der er integralt I

forbundet via et bøjeligt rør til mindst én, fortrinsvis to I

eller flere satellit-poser. Ved anvendelse af centrifugering I

kan helblod adskilles ved differentiel sedimentering i så- I

30 danne værdifulde blodbestanddele som plasma, pakkede røde *, I

blodlegemer (PRC), blodplader suspenderet i klart plasma j I

(blodplade-rigt plasma eller PRP), blodplade-koncentrat i I

(PC) og cryopræcipitat (der kan kræve ekstra behandling). 1 I

En typisk procedure til opsamling og behandling af I

35 helblod kan omfatte følgende: I

(1) En enhed af donor-helblod (ca. 4 50 ml i praksis I

DK 175916 B1 3 i USA) opsamles fra donorens vene direkte i blodopsamlings-posen, der indeholder CPDA-1 indeholdende næringsstof og anti-koagulationsmiddel.

(2) Blodopsamlingsposen centrifugeres (centrifugering 5 ved lav hastighed eller "soft-spin"-centrifugering) sammen med dens satellit-poser, hvorved man koncentrerer de røde blodlegemer som PRC i den nedre del af blodopsamlingsposen og i den øvre del af posen efterlader en suspension af PRP.

(3) Blodopsamlingsposen overføres, idet man drager 10 omsorg for ikke at forstyrre grænsefladen mellem det ovenstående .PRP-lag og det sedimenterede PRC-lag, i et organ, der er kendt som en "plasma-ekstraktor". Denne plasma-eks-traktor eller -ekspressor omfatter typisk front- og bagplader. De to plader er hængslet sammen ved deres nedre ender 15 og sidder fjederforspændt mod hinanden således, at der udvikles et tryk på ca. 90 mm Hg i det indre af posen.

Med blodopsamlingsposen anbragt mellem de to plader åbnes en ventil, en forsegling eller et lukke i eller på det fleksible rør, hvilket tillader, at de ovenstående PRP 20 strømmer ind i en første satellitpose. Efterhånden som PRP strømmer ud af blodopsamlingsposen, stiger grænsefladen med PRC. I gængs praksis må operatøren omhyggeligt iagttage positionen af grænsefladen, efterhånden som denne stiger, og afspærre forbindelsesrøret, når der efter hans bedømmelse 25 er overført så meget PRP som muligt, uden at man tillader røde blodlegemer at træde ind i den første satellitpose.

Dette er en arbejdsintensiv og tidsrøvende operation, under hvilken operatøren visuelt må overvåge posen og velovervejet og arbitrært afgøre, når der skal lukkes af for det forbin-* 30 dende rør.

Blodopsamlingsposen, der nu kun indeholder PRC, kan frigøres og opbevares ved 4°C, indtil den skal anvendes til transfusion til en patient, eller en ventil eller forsegling i røret kan åbnes således, at PRC kan overføres til en sa-35 tellitpose, idet der enten anvendes det tryk, der frembringes af plasma-ekstraktoren, eller ved anbringelse af blodopsam-

DK 175916 B1 I

lingsapparatet i en trykmanchet, eller ved elevering til H

opnåelse af strømning ved tyngdekraftens hjælp. H

(4) Den PRP-indeholdende satellitpose sammen med en H

anden satellitpose fjernes derpå fra ekstraktoren og centri- H

5 fugeres ved en forøget G-kraft (centrifugering ved høj ha- ' I

stighed eller "hard-spin”-centrifugering) med tiden og ha- H

stigheden indstillet således, at blodpladerne koncentreres ” I

i den nedre del af PRP-posen. Når centrifugeringen er fuld- H

stændig, indeholder PRP-posen sedimenterede blodplader i I

10 sin nedre del og klart plasma i sin øvre del. H

(5) PRP-posen anbringes derpå i plasma-ekstraktoren, H

og det meste af det klare plasma trykkes ud i en satellit- H

pose, hvorved man efterlader PRP-posen indeholdende kun de H

sedimenterede blodplader og ca. 50 ml plasma. I et efterføl- H

15 gende trin dispergeres dette blodplade-præparat derpå til H

dannelse af blodplade-koncentrat (PC). PRP-posen, der nu

indeholder et PC-produkt, frigøres derefter og opbevares i I

op til 5 døgn ved 20-24°C, indtil den kræves til en trans- H

fusion af blodplader. Multiple enheder af blodplader, f.eks. I

20 fra seks til ti donorer, såfremt der er tale om transfusion I

til en voksen patient, kan sammenbringes i en enkelt blod- H

plade-transfusion. H

(6) Plasmaet i satellitposen kan selv anvendes til H

transfusion til en patient, eller det kan adskilles ved H

25 komplekse processer i en række andre værdifulde produkter. H

Almindeligt anvendte systemer, udover CPDA-1, omfatter H

Adsol, Nutricell og SAG-M. I disse sidstnævnte systemer H

indeholder opsamlingsposen kun anti-koagulerende middel, og H

næringsstofopløsningen kan i forvejen være anbragt i en I

30 satellitpose. Denne næringsstofopløsning overføres i PRC- * I

produktet, efter at PRP er blevet adskilt fra PRC, hvorved H

der opnås et højere udbytte af plasma og længere opbevarings- H

levetid for PRC-produktet. H

I betragtning heraf er der et voksende behov for et H

35 effektivt system og en effektiv metode til adskillelse af H

et biologisk fluidum, f.eks. helblod, i dets bestanddele. H

DK 175916 B1 5

Blodbank-personale har reageret på det forøgede behov for blodbestanddele ved forsøg på at forøge PRC- og PC-udbytter på en række forskellige måder. Ved adskillelse af PRC- og PRP-fraktionerne, f.eks. trin 3 ovenfor, har blodbank-per-5 sonale forsøgt at udpresse mere PRP inden standsning af strømningen fra blodopsamlingsposen, men dette har ofte vist sig ikke at være produktivt, eftersom PRP og PC, som dernæst ekstraheres derfra, hyppigt forurenes af røde blodlegemer, hvilket giver en lyserød eller rød farve for det 10 normalt lysegule PC. Tilstedeværelsen af røde blodlegemer i PC er i så høj.grad uønsket, at lyserødt eller rødt PC ofte kasseres eller underkastes gencentrifugering, idet begge operationer forøger driftsomkostningerne og er arbejdsinten-sive. Som et resultat heraf må blodbank-personale være for 15 forsigtigt ved at standse strømningen af PRP, før det er blevet fuldstændigt presset ud. PC er således ikke-forurenet, men det ikke-udpressede plasma, der er værdifuldt, kan gå til spilde.

Dette afspejler et andet problem, når det forsøges 20 at forøge udbyttet af individuelle blodbestanddele. Om end hver bestanddel er værdifuld, kan besparelser resulterende fra en forøgelse af udbyttet blive modsvaret af den forøgede arbejdsomkostning, såfremt operatøren for behandlingssystemet kontinuerligt og omhyggeligt skal overvåge systemet for at 25 kunne forøge udbyttet.

De her beskrevne apparater og metoder letter de ovenfor beskrevne problemer og tilvejebringer desuden et højere udbytte af PRC og PC med overlegen kvalitet.

Adskillelsen af de forskellige blodbestanddele under 30 anvendelse af centrifugering medfører en række andre problemer. Når eksempelvis PRP centrifugeres til opnåelse af et lag, der hovedsageligt består af blodplader koncentreret ved bunden af den PRP-holdige pose, f.eks. i trin 4 ovenfor, har de således koncentrerede blodplader tendens til at danne 35 et tæt aggregat, der skal dispergeres i plasma til dannelse af blodplade-koncentrat. Dispersionstrinet udføres i almin-

DK 175916 B1 I

delighed ved forsigtig blanding, f.eks. ved anbringelse af H

posen på et bevægeligt bord, der roterer med en skråstillet H

bevægelse til behandling. Denne blanding kræver adskillige H

timer, en potentielt uønsket forsinkelse, og menes af mange H

5 research-sagkyndige at frembringe et partielt aggregeret ' I

blodplade-koncentrat. Det menes endvidere, at blodpladerne I

kan blive beskadiget af de kræfter, der påvirker dem under ' I

centrifugering. I

Endvidere er det et problem i forbindelse med adskil- I

10 leisen af forskellige blodbestanddele under anvendelse af I

et multipelt posesystem og centrifugering, at i høj grad I

værdifulde blodbestanddele bliver indfanget i de forbindel- I

sesledninger, der forbinder de forskellelige poser, og i I

de forskellige organer, der kan anvendes i systemet. I

15 Konventionelle behandlings- og opbevaringsmetoder kan også frembyde problemer. Eksempelvis kan luft, navnlig

oxygen, der er til stede i opbevaret blod og blodbestanddele, I

eller i opbevaringsbeholderen, føre til en forringelse af I

kvaliteten af blodbestanddelene og kan formindske deres I

20 opbevaringslevetid. Mere specifikt kan oxygen associeres I

med en forøget metabolisk hastighed {under glycolyse), der H

kan føre til formindsket opbevaringslevetid og formindsket I

levedygtighed og funktion af hele blodlegemer. Eksempelvis I

metaboliserer røde blodlegemer under opbevaring glucose, I

25 idet der dannes mælkesyre og pyrodruesyre. Disse syrer ned- I

sætter mediets pH-værdi, hvilket igen formindsker metaboliske I

funktioner. Endvidere kan tilstedeværelsen af luft eller I

gas i satellitposen frembyde en risiko, når en patient mod- I

tager transfusion med en blodbestanddel. Eksempelvis kan så I

30 lidt som 5 ml luft eller gas forårsage alvorlig beskadigelse . I

eller død. Til trods for den ødelæggende virkning af oxygen H

på opbevaringslevetiden og kvaliteten af blod og blodbe- H

standdele har den kendte teknik ikke bidraget til at afhjælpe H

behovet for at fjerne gasser fra blodbehandlingssystemer H

35 under opsamling og behandling. H

Udover de ovenfor angivne bestanddele indeholder H

DK 175916 B1 7 helblod hvide blodlegemer (kollektivt kendt som leucocyter) af forskellige typer, af hvilke de vigtigste er granulocyter og lymphocyter. Hvide blodlegemer giver beskyttelse mod infektion med bakterier og vira. Transfusionen af blodbe-5 standdele, der ikke er blevet befriet for leucocyter, er ikke uden risiko for den patient, der modtager transfusionen.

Nogle af disse risici er angivet nærmere i US patentskrift nr. 4.923.620 og i US patentskrift nr. 4.880.548, hvortil der henvises.

10 Ved den ovenfor beskrevne centrifugeringsmetode til adskillelse af blod i de tre grundlæggende fraktioner er leucocyterne til stede i væsentlige mængder i både fraktionerne med de pakkede røde blodlegemer og med det blodplade -rige plasma. Det er nu generelt accepteret, at det i høj 15 grad er ønskeligt at formindske leucocyt-koncentrationen i disse blodbestanddele til et så lavt niveau som muligt. Om end der ikke findes noget fast kriterium, er det generelt accepteret, at mange af de uønskede virkninger ved transfusion ville blive reduceret, såfremt leucocyt-indholdet 20 blev reduceret med en faktor på ca. 100 eller mere forud for indgivelsen til patienten. Dette svarer til omtrentlig en formindskelse af det gennemsnitlige totale indhold af leucocyter i en enkelt enhed af PRC til mindre end ca. 1 x 106, og i en enhed af PRP eller PC til mindre end ca. 1 x 25 105. Organer, der tidligere er blevet udviklet ved forsøg på at opnå dette formål, har været baseret på anvendelsen af pakkede fibre og er generelt blevet refereret til som filtre. Det fremgår imidlertid, at fremgangsmåder under anvendelse af filtrering baseret på separation efter stør-" 30 relse af to grunde ikke kan føre frem. For det første kan leucocyter være større end ca. 15μτη, f.eks. granulocyter og macrocyter, ned til en så ringe størrelse som 5-7 μτη, f.eks. lymphocyter. Tilsammen repræsenterer granulocyter og lymphocyter hovedandelen af alle leucocyterne i normalt blod.

35 Røde blodlegemer har en diameter på ca. 7 μτη, dvs. at de har ca. samme størrelse som lymphocyter, der er en af de to

DK 175916 B1 I

hovedklasser af leucocyter, der skal fjernes. For det andet H

deformeres alle disse celler således, at de er i stand til H

at passere gennem meget mindre åbninger end deres normale I

størrelse. Det er således i udstrakt grad blevet accepteret, I

5 at fjernelse af leucocyter hovedsageligt foretages ved ad- I

sorption på e indre overflader af porøse medier i stedet I

for ved filtrering. I

Leucocyt-f jernel se er særlig betydningsfuld med hensyn I

til en blodbestanddel såsom PC. Blodplade-koncentrater frem- I

10 stillet ved den differentielle centrifugering af blodbe-

standdele vil have varierende niveauer af leucocyt-forurening I

i relation til tiden og størrelsen af den kraft, der udvikles H

under centrifugering. Niveauet for leucocyt-forurening i I

ikke -filtrerede, konventionelle blodplade-præparater af I

15 seks til ti sammenførte enheder ligger generelt ved et niveau I

på ca. 5 x 108 eller højere. Det er blevet påvist, at leuco- I

cyt-fjernelseseffektiviteter på 81-85% er tilstrækkelige

til at formindske forekomsten af febrile reaktioner ved I

blodplade-transfusioner. Adskillige andre, for nylig udførte I

20 studier viser en reduktion i alloimmunisering og blodplade- I

modstandsdygtighed ved niveauer for leucocyt-forurening I

under ca. l x 107 pr. enhed. For en enkelt enhed af PC, der

viser et gennemsnitligt leucocyt-forureningsniveau (under I

gængs praksis) på ca. 7 x 107 leucocyter, er målet efter H

25 filtrering mindre end 1 x 106 leucocyter. De eksisterende I

undersøgelser antyder derfor ønskeligheden af i det mindste H

en to logaritmers (99%) reduktion af leucocyt-forurening. I

Mere nyligt udførte undersøgelser antyder, at en tre loga- H

ritmers (99,9%) eller endog en fire logaritmers (99,99%)

30 reduktion ville være signifikant mere gavnlig. „ I

Et yderligere ønskeligt kriterium er at begrænse I

blodpladetab til ca. 15% eller mindre af den oprindelige I

blodpladekoncentration. Blodplader er almindeligt kendte H

for at være "klæbende", et udtryk, der afspejler tendensen H

35 for blodplader, der er suspenderet i blodplasma, til at I

hænge ved enhver ikke-fysiologisk overflade, for hvilken de H

DK 175916 B1 9 udsættes. Under mange omstændigheder hænger de også kraftigt sammen med hverandre.

I ethvert system, der afhænger af filtrering til fjernelse af leucocyter fra en blodpladesuspension, vil der 5 være en væsentlig kontakt mellem blodplader og de indre overflader af filtersammensætningen. Filtersammensætningen må være således beskaffen, at blodpladerne har minimal adhæsion til og ikke signifikant påvirkes på uønsket måde ved kontakt med filtersammensætningens indre overflader.

10 Hvis leucocyt-fjernelsesorganet indeholder en porøs struktur, har mikroaggregater, geler, fibrin, fibrinogen og fedt-småkugler tendens til at samle sig på eller i porerne og forårsage blokering, der inhiberer strømningen. Konventionelle processer, ved hvilke filteret til fjernelse af 15 leucocyter fra PRC, for-konditioneres ved at føre saltvandsopløsning gennem filtersammensætningen med eller uden en saltvandsskylning efter filtreringen, er uønskede, eftersom væskeindholdet i transfusionen forøges i uønsket høj grad, hvorved patientens cirkulatoriske system overbelastes poten-20 tielt med væske. Et formål med en udførelsesform for den foreliggende opfindelse er tilvejebringelse af et leucocyt-fjernelsesorgan, der fjerner leucocyter og disse andre elementer med høj effektivitet og uden tilstopning, ikke kræver nogen for-konditionering forud for behandling af PRC, der 25 stammer fra frisk aftappet blod, og ikke kræver skylning efter filtrering til genvinding af røde blodlegemer, der forbliver i filteret.

På grund af de høje omkostninger og den begrænsede tilgængelighed af blodbestanddele bør et organ, der omfatter 30 et porøst medium, som anvendes til at fjerne leucocyter fra biologisk fluidum, levere den størst mulige andel af bestanddelen, der er til stede i donor-blodet. Et ideelt organ til leucocyt-fjernelse fra PRC eller PRP vil være forbundet med ringe omkostninger, være forholdsvis lille og være i stand 35 til hurtigt at behandle blodbestanddele opnået fra ca. én enhed eller mere af biologisk fluidum, f.eks. donor-helblod,

DK 175916 B1 I

i løbet af f.eks. mindre end 1 time. Ideelt set skal dette I

organ reducere leucocytindholdet til det lavest mulige ni- I

veau, idet udbyttet af en værdifuld blodbestanddel maksim- I

eres, medens en dyr, sofistikeret, arbejdsintensiv indsats I

5 af operatøren af systemet minimeres. Udbyttet af blodbe- I

standdelen bør maksimeres, medens der samtidig leveres en I

levedygtig og fysiologisk aktiv bestanddel, f.eks. ved mi- I

nimering af beskadigelse på grund af centrifugering og/eller

tilstedeværelsen af luft eller gas. Det kan også være fore- I

10 trukkent, at det PRC-porøse medium er i stand til at fjerne I

blodplader såvel som fibrinogen, .fibrinstrenge, meget små H

fedt-småkugler og andre bestanddele såsom mikroaggregater, H

der kan være til stede i helblod. H

De følgende definitioner anvendes i forbindelse med H

15 beskrivelsen af den foreliggende opfindelse: H

(A) Blodprodukt eller biologisk fluidum: antikoagule- H

ret helblod (AWB); pakkede røde blodlegemer opnået fra AWB; I

blodplade-rigt plasma (PRP) opnået fra AWB; blodplade-kon- I

centrat (PC) opnået fra AWB eller PRP; plasma opnået fra H

20 AWB eller PRP; røde blodlegemer adskilt fra plasma og gen- H

suspenderet i fysiologisk fluidum; og blodplader adskilt fra I

plasma og gensuspenderet i fysiologisk fluidum. Blodprodukt I

eller biologisk fluidum omfatter også ethvert behandlet eller I

ubehandlet fluidum, der er associeret med levende organismer, I

25 især blod, herunder helblod, varmt eller koldt blod, og I

opbevaret eller frisk blod; behandlet blod, f.eks. blod I

fortyndet med en fysiologisk opløsning, omfattende, men I

ikke begrænset til saltvandsopløsninger, næringsmiddelopløs- I

ninger og/eller anti-koaguleringsmiddelopløsninger; én eller I

30 flere blodbestanddele, f.eks. blodplade-koncentrat (PC), I

blodplade-rigt plasma (PRP), blodplade-frit plasma, blodpla- I

de-fattigt plasma, plasma, eller pakkede røde blodlegemer I

(PRC); analoge blodprodukter afledt af blod eller en blod- bestanddel eller afledt af benmarv. Det biologiske fluidum

35 kan indeholde leucocyter eller kan behandles til fjernelse I

af leucocyter. Som her anvendt refererer udtrykkene "blod- I

DK 175916 B1 11 produkt" eller "biologisk fluidum" til de ovenfor beskrevne bestanddele og til lignende blodprodukter eller biologiske væsker opnået ved andre midler og med tilsvarende egenskaber.

I overensstemmelse med opfindelsen behandles hvert af disse 5 blodprodukter eller biologiske fluida på den måde, der er beskrevet i nærværende beskrivelse.

(B) Enhed af helblod: I blodbanker i USA aftappes der almindeligvis ca. 450 milliliter (ml) blod fra donoren i en pose, der indeholder et antikoagulationsmiddel til 10 hindring af, at blodet sammenklumper. Den aftappede mængde varierer imidlertid fra patient til patient og fra aftapning til aftapning.' I den foreliggende beskrivelse er den mængde, der aftappes under en sådan donorafgivelse, defineret som en enhed af helblod.

15 (C) Enhed af pakkede røde blodlegemer (PRC), blodpla- de-rigt plasma (PRP) eller blodplade-koncentrat (PC): Som her anvendt er en "enhed" defineret ifølge USA-praksis, og en enhed af PRC, PRP, PC eller af røde blodlegemer eller blodplader i fysiologisk fluidum eller plasma er den mængde, 20 der er afledt af én enhed af helblod. Betegnelsen kan også referere til den mængde, der aftappes under en enkelt donorafgivelse. Typisk varierer rumfanget af en enhed. Eksempelvis varierer rumfanget af en enhed af PRC betydeligt, afhængigt af hæmatocriten (procentmængden af røde blodlegemer efter 25 rumfang) for det aftappede helblod, der almindeligvis ligger i området fra ca. 37 til ca. 54%. Den ledsagende hæmatocrit af PRC, der varierer i området fra ca. 50 til over 80%, afhænger delvis af, om udbyttet af ét eller et andet blodprodukt skal minimeres.. De fleste PRC-enheder ligger i om-30 rådet fra ca. 170 til ca. 300 ml, men variation under og over disse størrelser er ikke usædvanlig. Multiple enheder af nogle blodbestanddele, navnlig blodplader, kan slås sammen eller kombineres, typisk ved kombination af seks eller flere enheder.

35 (D) Plasmafattigt fluidum: Et plasmafattigt fluidum refererer til ethvert biologisk fluidum, fra hvilket der er

DK 175916 B1 I

blevet fjernet en eller anden mængde plasma, f.eks. det I

blodpladerige fluidum, der fås, når plasma adskilles fra PRP, I

eller det fluidum, der bliver tilbage, efter at plasma er H

fjernet fra helblod. I

5 (E) Porøst medium: referer til det porøse medium, I

gennem hvilket én eller flere blodbestanddele eller biolo- giske fluida passerer. Det PRC-porøse medium fjerner leuco-

cyter fra den bestanddel, der består af pakkede røde blod- I

legemer. Blodplade- eller det PRP-porøse medium refererer H

10 generisk til ethvert af de medier, der fjerner leucocyter I

fra ikke-PRC-blodbestanddelene, dvs. fra PRP eller PC. Bar-

rieremediet for røde blodlegemer blokerer passagen af røde I

blodlegemer og fjerner leucocyter fra PRP i en større eller I

mindre grad, idet passage af blodplader tillades. I

15 Som angivet nærmere i det følgende kan det porøse I

medium, der skal anvendes sammen med PRC, dannes ud fra I

ethvert naturligt eller syntetisk fibermateriale (eller ud I

fra andre materialer med lignende overfladeareal og porestør- I

relse), der er foreneligt med blod. Det porøse medium kan I

20 forblive ubehandlet. Fortrinsvis ligger den kritiske fugtede I

overfladespænding (CWST) for det porøse medium inden for et

betemt område som angivet nedenfor og som dikteret af dets I

tilsigtede anvendelse. Poreoverfladerne i mediet kan modi- I

ficeres eller behandles til opnåelse af den ønskede CWST. I

25 Eksempelvis er CWST for et PRC-porøst medium typisk over I

ca. 53 dyn/cm. I

Det porøse medium til anvendelse sammen med PRP kan I

fremstilles ud fra ethvert naturligt eller syntetisk fiber- . I

materiale eller andet porøst materiale, der er foreneligt I

30 med blod. Det porøse medium kan forblive ubehandlet. For- . I

trinsvis ligger CWST-værdien og zeta-potentialet for det I

porøse medium inden for visse grænser som angivet nedenfor I

og som dikteret af dets tilsigtede anvendelse. Eksempelvis I

ligger CWST for et PRP-porøst medium typisk over ca. 70 I

35 dyn/cm. I

De her omhandlede porøse medier kan være forbundet I

DK 175916 B1 13 til en ledning, der er anbragt mellem beholderne og kan være anbragt i et hus, der igen kan være forbundet til ledningen. Som anvendt her refererer en filtersammensætning til det porøse medium anbragt i et passende hus. Et eksempel 5 på en filtersammensætning kan omfatte en leucocyt-f jemelses-sammensætning eller et tilsvarende organ eller en barrieresammensætning eller et barriereorgan for røde blodlegemer.

Et biologisk fluidumbehandlingssystem, f.eks. et blodopsamlings- og behandlingssystem, kan omfatte porøse medier, 10 fortrinsvis som filtersammensætninger. Fortrinsvis danner det porøse medium en prespasning ved dets kanter, når det er samlet i huset.

Det porøse medium kan have konfiguration som et plant ark, et korrugeret ark, et væv eller en membran. Det porøse 15 medium kan være for-formet og konfigureret som hule fibre, om end det ikke er hensigten, at opfindelsen skal begrænses i denne henseende.

(F) Separationsmedium: Et separationsmedium refererer til et porøst medium, der er effektivt til adskillelse af 20 én bestanddel af et biologisk fluidum fra en anden bestanddel. Separationsmedierne ifølge opfindelsen er egnede til at lede i det mindste én bestanddel af blodproduktet eller det biologiske fluidum, især plasma, igennem disse, men ikke andre bestanddele af blodproduktet eller det biologiske 25 fluidum, navnlig blodplader og/eller røde blodlegemer.

Som angivet nærmere i det følgende kan separations-mediet til anvendelse i forbindelse med et biologisk fluidum dannes ud fra ethvert naturligt eller syntetisk fibermateriale eller ud fra en porøs eller permeabel membran (eller 30 ud fra andre materialer med lignende overfladeareal og porestørrelse) , der er forenelig med et biologisk fluidum. Overfladen af fibrene eller membranen kan være umodificeret eller kan modificeres til opnåelse af en ønsket egenskab.

Om end separationsmediet kan forblive ubehandlet, behandles 35 fibrene eller membranen fortrinsvis for at gøre dem endnu mere effektive til adskillelse af en bestanddel af et bio-

DK 175916 B1 I

logisk fluidum, f.eks. plasma, fra andre bestanddele af en I

biologisk fluidum, f.eks. blodplader eller røde blodlegemer. I

Separationsmediet behandles fortrinsvis til reducering eller I

eliminering af blodplade-vedhængning til mediet. Enhver I

5 behandling, der reducerer eller eliminerer blodplade-ved-

hængning, er omfattet af opfindelsens omfang. Endvidere kan I

mediet være overflademodificeret som beskrevet i US patent- I

skrift nr. 4.880.548, hvortil der henvises, til forøgelse I

af den kritiske fugtede overfladespænding (CWST) af mediet I

10 og til at være mindre vedhængende for blodplader. Defineret I

med hensyn til CWST ligger et foretrukkent område for CWST I

for et her omhandlet separationsmedium over ca. 70 dyn/cm, H

fortrinsvis over ca. 90 dyn/cm. Mediet kan også underkastes I

en gas-plasmabehandling til formindskelse af blodplade-ad- I

15 hæsion. Fortrinsvis ligger den kritiske fugtede overflade- H

spænding (CWST) af separationsmediet i et bestemt område I

som angivet nedenfor og som dikteret af dets tilsigtede I

anvendelse. Poreoverfladerne af mediet kan modificeres eller

behandles til opnåelse af den ønskede CWST-værdi. H

20 Separationsmediet kan være for-formet, være et fler- H

lags-medium og/eller kan behandles til modificering af over- H

fladen af mediet. Såfremt der anvendes et fibrøst medium, H

kan fibrene behandles enten før eller efter formingen af H

det fibrøse materiale. Det foretrækkes at modificere fiber- H

25 overfladerne før dannelsen af det fibrøse materiale, eftersom H

et mere sammenhængende og stærkere produkt fås efter varm H

sammenpresning til dannelse af et integralt filterelement. H

Separationsmediet er fortrinsvis for-formet. H

Separationsmediet kan være konfigureret på enhver I

30 passende måde, f.eks. som et plant ark, et korrugeret ark, H

et væv, hule fibre eller en membran. H

(G) Hulrumsrumfanget er det totale rumfang af alle H

porerne i et porøst medium. Hulrumsrumfanget udtrykkes i det H

følgende som en procentdel af det tilsyneladende rumfang af H

35 det porøse medium. H

(H) Måling af fiberoverfladeareal og af gennemsnitlig H

DK 175916 B1 15 i fiberdiameter: I forbindelse med opfindelsen betegnes en nyttig teknik til måling af fiberoverfladeareal, f.eks. ved gas-adsorption, generelt som "BET"-målingen. Overfladearealet af smelteblæste væv kan anvendes til beregning af 5 den gennemsnitlige fiberdiameter, idet der anvendes PBT som et eksempel:

Totalt rumfang af fiber i 1 gram = —cm3

1,3 B

10 (hvor 1,38 = fibermassefylde af PBT i g/cm3) hvorfor —— —— = --- (1) 4 1,38 15

Arealet af fiberen er mdL « Af (2)

Division af (1) med (2) giver —= -1-

4 1,38A

20 og d = -^- = 2,9 eller (0,345Af)-1 1.38A Af r ^vor L = den totale længde i cm af 1 g fiber, d = gennemsnitlig fiberdiameter i cm, og 25 Af = fiberoverfladeareal i cm2/g.

Hvis enhederne for d er mikrometer, bliver enhederne for Af m2/g, hvilket vil blive anvendt i det følgende.

(I) Kritisk fugtet overfladesplnding: Som angivet i 30 US patentskrift nr. 4.880.548 kan CWST-værdien for et porøst medium bestemmes med individuel påføring på dets overflade af en række væsker med overfladespændinger, der varierer med 2-4 dyn/cm, hvorpå man iagttager adsorptionen eller ikke-adsorptionen af hver væske i tidens løb. CWST-værdien 35 for et porøst medium i enheden dyn/cm defineres som middelværdien af overfladespændingen af den væske, der absorberes, og middelværdien af overfladespændingen af væsken med tilstødende overfladespænding, der ikke absorberes inden

DK 175916 B1 I

for en forudbestemt tidsramme. De absorberede og ikke-absor- B

berede værdier afhænger principielt af de foreliggende over- B

fladekarakteristika for det materiale, ud fra hvilket det B

porøse medium er fremstillet, og sekundært af det porøse B

5 mediums porestørrelsekarakteristika. B

Væsker med overfladespændinger lavere end CWST-værdien B

for et porøst medium vil spontant fugte mediet ved kontakt, B

og såfremt porerne i mediet forbindes indbyrdes, vil væske B

let strømme gennem mediet. Væsker med overfladespændinger I

10 højere end CWST-værdien for det porøse medium kan overhovedet B

ikke strømme ved lave differentielle tryk eller kan strømme fl

ujævnt ved tilstrækkeligt høje differentielle tryk til at B

tvinge væsken gennem det porøse medium. Til opnåelse af en B

passende priming af et fibrøst medium med en væske såsom B

15 blod har det fibrøse medium fortrinsvis en CWST-værdi i B

området fra ca. 53 dyn/cm eller højere. B

For det porøse medium, der anvendes til behandling B

af PRC, foretrækkes det, at CWST-værdien holdes inden for B

et område noget over CWST-værdien for ubehandlet polyester- B

20 fiber (52 dyn/cm), f.eks. over ca. 53 dyn/cm, og navnlig B

foretrukket over ca. 60 dyn/cm. For det porøse medium, der B

anvendes til behandling af PRP foretrækkes det, at CWST- I

værdien holdes i et område over ca. 70 dyn/cm. B

(J) Generel procedure til måling af zeta-potentiale: B

25 Zeta-potentiale måles under anvendelse af en prøve udskåret B

fra en ca. 12,7 mm tyk stak af væv. B

Zeta-potentialet måles ved anbringelse af prøven i I

en acrylisk filterholder, der holder prøven tæt mellem to B

platintrådssigter 100 x 100 mesh, dvs. 100 tråde i hver B

30 retning pr. ca. 25,4 mm. Maskerne forbindes under anvendelse B

af kobbertråd til terminalerne af et Triplett Corporation B

model 3360 volt-ohm-meter, idet masken på opstrømssiden af B

prøven forbindes til den positive terminal af måleinstrumen- B

tet. En pH-pufret opløsning ledes gennem prøven under anven- B

35 delse af en trykdifference på ca. 1143 mm vandsøjle over B

filterholderen, og den udstrømmende væske opsamles. Til B

DK 175916 B1 17 målinger ved pH 7 fremstilles der en pufret opløsning ved at sætte 6 ml puffer med en pH-værdi på 7 (Fisher Scientific Co., katalog nr. SB108-500) og 5 ml puffer med pH = 7,4 (Fisher Scientific Co., katalog nr. SB110-500) til 1 liter 5 pyrogenfrit, afioniseret vand. Til målinger ved en pH-værdi på 9 fremstilles der en pufret opløsning ved at sætte 6 ml puffer med en pH-værdi på 9 (Fisher Scientific Co., katalog nr. SB114-500) og 2 ml puffer med en pH-værdi på 10 (Fisher Scientific Co., katalog nr. SB116-500) til en 1 liter pyro-10 genfrit, afioniseret vand. Det elektriske potentiale over filterholderen måles under strømningen (der kræves ca. 30 sekunders strømning for at potentialet kan stabiliseres) og korrigeres for cellepolarisering ved subtraktion derfra af det elektriske potentiale, der måles, når strømningen stand-15 ses. Under tidsrummet for strømning måles pH-værdien af væsken under anvendelse af et Cole-Parmer model J-5994-10-pH-meter, der er udstyret med en in-line-model J-5993-90-pH-sonde. Ledningsevnen for væsken måles under anvendelse af en Cole-Parmer model J-1481-60-ledningsevnemåler udstyret 20 med en model J-1481-66-ledningsevnestrømningscelle. Dernæst reverseres polariteten af voltmeteret, og den udstrømmende væske ledes tilbage gennem filterholderen under anvendelse af en trykdifference på ca. 1143 mm vandsøjle. Som i det første tilfælde korrigeres det elektriske potentiale, der 25 måles under strømning, for cellepolarisation ved subtraktion derfra af det elektriske potentiale, der måles efter at strømningen er standset. Gennemsnitsværdien af de to korrigerede potentialer anvendes som strømningspotentialet.

Zeta-potentialet for mediet afledes af strømningspo-30 tentialet under anvendelse af den følgende relation (J.T.

Davis et al.. Interfacial Phenomena, Academic Press, New York, 1963) : 4 7T^

Zeta-potentiale = - * Εςλ 35 DP .

hvor n er viskositeten af den strømmende opløsning, D er

DK 175916 B1 I

dens dielektricitetskonstant, λ er dens ledningsevne, Eg er I

strømningspotentialet, og P er tryktabet over prøven under H

strømningsperioden. Ved disse forsøg er størrelsen 4 irn/DP H

= 0,800. I

5 (K) Tangentiel strømningsfiltrering: Som benyttet i I

nærværende beskrivelse refererer tangentiel strømningsfil- H

trering til passage eller cirkulation af et biologisk fluidum H

på en generelt parallel eller tangentiel måde i forhold til I

overfladen af separationsmediet. H

10 I de her omhandlede apparater eller organer og ved H

fremgangsmåderne ifølge opfindelsen udføres leucocyt-fjemel- I

se fra et biologisk fluidum, f.eks. PRC eller PRP, på det be-

handlingstidpunkt, der i USA i almindelighed ligger inden I

for ca. 6-8 timer fra det tidspunkt, på hvilket blodet aftap- H

15 pes. Når således et biologisk fluidum overføres fra den pose, I

i hvilken den er indeholdt, fjernes leucocyter af det egnede H

porøse medium, og leucocytfattigt biologisk fluidum opsamles . I

i satellitposen. I overensstemmelse med opfindelsen til- H

vejebringes der et system, i hvilket et biologisk fluidum H

20 såsom helblod behandles til dannelse af PRP og PRC. PRP I

befries for leucocyter ved indskydning mellem blodopsam- I

lingsposen og en første satellitpose af mindst ét porøst I

medium til fjernelse af leucocyter fra PRP; PRP befries for I

leucocyter ved indskydning mellem blodopsamlingsposen og en I

25 anden satellitpose af mindst ét porøst medium til fjernelse I

af leucocyter fra PRC. I

Der kan anvendes et centrifugeringssystem, i hvilket I

den ene eller begge af de indskudte leucocyt-fjernelses- I

filtersammensætninger er kooperativt anbragt sammen med en I

30 centrifugekurv på en sådan måde, at filtersammensætningen,

det porøse medium i filtersammensætningen og blodposerne H

ikke beskadiges af de særdeles store kræfter, der frembringes H

under centrifugeringsprocessen. H

Fremgangsmåder og systemer ifølge opfindelsen kan H

35 også omfatte et barrieremedium for røde blodlegemer, der H

tillader passagen af én bestanddel af det biologiske fluidum, H

DK 175916 B1 19 men hindrer passagen af en anden bestanddel gennem mediet, hvorved man eliminerer behovet for kontinuerlig overvågning af en operatør og forøger den effektivitet, med hvilken et biologisk fluidum, f.eks. helblod, opdeles i en eller flere 5 bestanddele.

Desuden kan fremgangsmåder og systemer ifølge opfindelsen omfatte et gasudløb, der tillader gas, der kan være til stede i systemet, at passere ud af dette.

Fremgangsmåder og systemer ifølge opfindelsen kan 10 også omfatte et gasindtag, der tillader indførsel af gas i systemet til udvinding af et biologisk fluidum, der kan indesluttes eller bibeholdes under behandling.

Opfindelsen omfatter også behandlingen af et biologisk fluidum til uden centrifugering at adskille mindst én be-15 standdel fra det biologiske fluidum, f.eks. behandling af PRP til opnåelse af plasma og PC, eller adskillelse af plasma fra helblod. Fremgangsmåder og organer eller apparater ifølge opfindelsen indebærer anvendelse af et separationsmedium, der tillader passagen af én bestanddel af det biologiske 20 fluidum, f.eks. plasma, men hindrer passage af andre bestanddele, f.eks. blodplader eller røde blodlegemer, gennem mediet, hvorved man eliminerer behovet for "hard-spin"-centrifugering som et behandlingstrin. Tangentiel strømning af et biologisk fluidum parallelt med opstrøms-overfladen af sepa-25 rationsmediet tillader passagen af plasma gennem mediet, idet tendensen for cellulære bestanddele eller blodplader til at vedhænge ved mediets overflade reduceres, hvorved der bidrages til hindring af passage af blodplader gennem separationsmediet. De hydrodynamiske forhold for strømning paral-30 lelt til en overflade antages faktisk at være således, at under strømning parallelt med overfladen udvikler blodplader et spin, der bevirker, at de kan udvindes fra overfladen.

På tegningen viser fig. 1 en udførelsesform for et behandlingssystem 35 for et biologisk fluidum ifølge opfindelsen, i hvilket biologisk fluidum adskilles i bestanddele ved centrifugesepara- 20

DK 175916 B1 I

c ion. I

Fig. 2 viser en anden udførelsesfortn for et behand- I

lingssystem for et biologisk fluidum ifølge opfindelsen, om- H

fattende et adskillelsesorgan uden centrifugering. I

5 Fig- 3 viser en udførelsesform for opfindelsen, der I

omfatter et gasindtag og et gasudtag. H

Fig. 4 er et eksploderet perspektivbillede af en I

udførelsesform for en filtersammensætning, en centrifugekurv H

og en holder til passende anbringelse af filtersammensætnin- I

10 gen på kurven. H

Fig. 5 viser et sidebillede af en udførelsesform for H

opfindelsen. H

Fig. 6 viser et tværsnit af en udførelsesform for H

opfindelsen udvisende den første fluidumstrømningsvej i et H

15 separationsorgan ifølge opfindelsen. H

Fig. 7 viser et snit i fig. 6 langs linien A-A. I

Fig. 8 viser et snit i fig. 6 langs linien B-B. I

Fig. 9 viser et tværsnit af en udførelsesform for I

opfindelsen udvisende den anden fluidumstrømningsvej i et I

20 separationsorgan ifølge opfindelsen. H

Fig. 10 viser et snit i fig. 9 langs linien C-C. I

Fig. li viser et snit i fig. 9 langs linien D-D.

Et opsamlings- og behandlingsorgan for et biologisk I

fluidum, fortrinsvis blod, omfatter en første beholder og I

25 en anden beholder samt en ledning, der indbyrdes forbinder I

den første beholder med den anden beholder, og mindst én I

tredje beholder og en ledning, der indbyrdes forbinder den H

første beholder med den tredje beholder, idet der indskudt I

mellem den første beholder og en anden beholder forefindes I

30 mindst ét første porøst medium, idet der indskudt mellem

den første og den tredje beholder forefindes mindst ét andet I

porøst medium. Det første porøse medium kan være et leucocyt- I

fjernelsesmedium, et barrieremedium for røde blodlegemer, I

en sammensætning omfattende et leucocyt-fjernelsesmedium og I

35 et barrieremedium for røde blodlegemer eller kombinationer I

deraf. Det andet porøse medium kan være et leucocyt-fjernel- I

DK 175916 B1 21 sesmedium, der om ønsket kan omfatte et mikroaggregat-filter-element og/eller et gel-forfilterelement. Som vist nærmere i det følgende kan sammensætningen også omfatte yderligere beholdere, porøse medier og ledninger, der indbyrdes for-5 binder beholderne og porøse medier.

Blodopsamlings- og -behandlingssammensætningen kan omfatte beholdere, der er indbyrdes forbundne med en ledning, og et porøst medium indskudt i ledningen til fjernelse af leucocyter fra PRC, hvor det porøse medium har en CWST-værdi 10 større end ca. 53 dyn/cm.

Blodopsamlings- og -behandlingssammensætningen kan omfatte beholdere indbyrdes forbundet med en ledning og et porøst medium indskudt i ledningen til fjernelse af leucocyter fra PRP, hvor det porøse medium har en CWST-værdi større 15 end ca. 70 dyn/cm.

Et behandlingssystem for et biologisk fluidum omfatter en første beholder, et første porøst medium indeholdende et barrieremedium for røde blodlegemer, der står i forbindelse med den første beholder, og definerer en første 20 strømningsvej, samt et andet porøst medium omfattende et leucocyt-fjernelsesmedium, der står i forbindelse med den første beholder og definerer en anden strømningsvej. Som vist nærmere i det følgende kan systemet også omfatte yderligere beholdere, strømningsveje og porøse medier.

25 Ved en fremgangsmåde til opsamling og behandling af blod opsamler man helblod i en beholder, centrifugerer helblodet, leder det ovenstående lag af det centrifugerede blod gennem et første porøst medium, idet det første porøse medium indeholder mindst ét leucocyt-fjernelsesmedium, et 30 barrieremedium for røde blodlegemer og et kombineret leucocyt-f jernelses-barrieremedium for røde blodlegemer, hvorpå sedimentlaget af det centrifugerede blod ledes gennem et andet porøst medium, hvor dette andet porøse medium indeholder et leucocyt-fjernelsesmedium.

35 En fremgangsmåde til behandling af et biologisk flui dum omfatter udpresning af et biologisk fluidum fra en første

DK 175916 B1 I

beholder til et første porøst medium indeholdende et bar- H

rieremedium for røde blodlegemer, og udpresning af et biolo- I

gisk fluidum fra den første beholder til et andet porøst me- H

dium. Som vist nærmere i det følgende kan metoden også om- H

5 fatte behandling af fluidet gennem yderligere beholdere, ad I

yderligere strømningsveje og med yderligere porøse medier. H

Et eksempel på et opsamlings- og behandlingsystem fl

for biologisk fluidum er vist på tegningen i fig. 1. Behand- I

lingssystemet for biologisk fluidum betegnes generelt ved 10. H

10 Det kan omfatte en første beholder eller opsamlingspose 11, I

en nål eller kanyle 1 egnet til indførsel i donoren, en H

eventuel barrieresammensætning for røde blodlegemer 12, en H

første leucocyt-fjernelses-sammensætning 13, en anden be- H

holder (første satellitpose) 41, en eventuel fjerde beholder H

15 (tredje satellitpose) 42, en anden leucocyt-fjemelsessammen- I

sætning 17 og en tredje beholder (anden satellitpose) 18. I

Hver af sammensætningerne eller beholderne kan være i fly- H

dende forbindelse gennem rør, fortrinsvis bøjelige rør 20, H

21, 25, 26, 27 eller 28. Den første leucocyt-fjernelses- I

20 sammensætning omfatter fortrinsvis et porøst medium til at H

lede PRP, og den anden leucocyt-fjernelses-sammensætning I

omfatter fortrinsvis et porøst medium egnet til passage af H

PRC. En forsegling, ventil, klemme eller overførselslukke I

eller kanyle (ikke vist på tegningen) kan også være anbragt I

25 i eller på rørene eller i opsamlings- og/eller satellitposer- I

ne. Forseglingen eller forseglingerne åbnes, når fluidet skal H

overføres mellem poser. I

I et andet eksempel på en konfiguration er blodbe- H

handlingssystemet vist i fig. 2 det samme som det eksempel I

30 på et system, der er vist i fig. 1, men med den undtagelse, H

at delen af systemet nedstrøms for leucocyt-fjernelsessam- I

mensætningen 13 omfatter en separationssammensætning 14, H

fortrinsvis en separationssammensætning uden centrifugering. H

I et andet eksempel på en konfiguration vist i fig. H

35 3 kan opfindelsen også omfatte mindst ét gasindtag 51, 53 I

og/eller mindst ét gasudtag 52, 54. Systemet vist i fig. 3 I

DK 175916 B1 23 · omfatter en første beholder eller opsamlingspose 11 i fluid forbindelse med en eventuel barrieresammensætning 12 for røde blodlegemer, et gasindtag 53, en leucocyt-fjernelses-sammensætning 13 og et gasudtag 54. Den første beholder 11 5 kan også være i fluid forbindelse med et gasindtag 51, et leucocyt-fjerneIses-organ 17 og et gasudtag 52. Som nærmere vist i det følgende kan sammensætningen også omfatte yderligere beholdere, strømningsveje og porøse medier.

Ethvert antal og kombinationer af sammensætninger 10 eller organer, porøse medier, beholdere og ledninger er egnet. En fagmand på området vil forstå, at opfindelsen som her beskrevet kan omkonfigureres i forskellige kombinationer, der falder inden for opfindelsesomfanget.

Hver af komponenterne i sammensætningen eller ap-15 paratet skal herefter beskrives i nærmere enkeltheder.

De beholdere, der anvendes i behandlingsapparatet for det biologiske fluidum, kan være konstrueret af ethvert materiale, der er foreneligt med et biologisk fluidum, f.eks. helblod eller en blodbe s tanddel, og er i stand til at modstå 20 en centrifugering og et steriliseringsmiljø. Et bredt udvalg af disse beholdere er allerede kendte i teknikken. Eksempelvis fremstilles blodopsamlings- og satellitposer typisk ud fra blødgjort polyvinylchlorid, f.eks. PVC blødgjort med dioctylphthalat, diethylhexylphthalat eller trioctyltrimel-25 litat. Poserne kan også fremstilles ud fra polyolefin, poly-urethan, polyester og polycarbonat.

Som her anvendt kan rørene være vilkårlige ledninger eller organer, der tilvejebringer fluid forbindelse mellem beholderne, og de er typisk fremstillet ud fra det samme 30 fleksible materiale, som anvendes til beholderne, fortrinsvis blødgjort PVC. Rørene kan strække sig ind i det indre af beholderne og kan f.eks. anvendes som en sifon. Der kan være et antal rør, der tilvejebringer fluid forbindelse til enhver individuel beholder, og rørene kan være orienteret 35 på forskellige måder. Eksempelvis kan der være mindst to rør orienteret ved toppen af opsamlingsposen eller ved bunden

DK 175916 B1 I

24 I

af posen, eller der kan forefindes et rør ved hver ende af I

posen. I

Desuden kan rørene, apparatdelene, porøse medier og I

beholdere være orienteret til at definere forskellige strøm- I

5 ningsveje. Når der f.eks. behandles helblod, kan PRP strømme

langs en første strømningsvej, f.eks. gennem barrieresamlin- I

gen for røde blodlegemer, såfremt en sådan er til stede, en I

PRP-leucocyt-fjernelsessammensætning og ind i en satellit- I

pose, f.eks. en anden beholder. På lignende måde kan PRC I

10 strømme langs en anden strømningsbane, f.eks. gennem PRC- I

leucocyt-fjernelsesorganet og ind i en satellitpose, f.eks I

en tredje beholder. Eftersom uafhængige strømningsbaner kan I

være til stede, kan biologiske fluida, f.eks. PRP og PRC, I

strømme samtidigt eller sekventielt. I

15 En forsegling, ventil, klemme, et overføringslukke H

eller lignende er typisk lokaliseret i eller på røret. Det H

er hensigten, at opfindelsen ikke skal begrænses af den type materiale, der anvendes til konstruktion af beholderne, eller den ledning, der forbinder beholderne.

20 Sammensætningen af de forskellige porøse medier vil I

afhænge delvis af den ønskede funktion, f.eks. blokering af I

røde blodlegemer eller leucocytfjernelse. En foretrukken

sammensætning af de forskellige porøse medier er en måtte I

eller et væv sammensat af fibre, der fortrinsvis er ter- H

25 moplastiske. Fibrene i de porøse medier kan omfatte vilkår- I

lige fibre, der er forenelige med biologisk fluidum, og de I

kan være enten naturlige eller syntetiske fibre. Ifølge

opfindelsen er fibrene fortrinsvis behandlet eller modifi- I

ceret til opnåelse eller forøgelse af CWST-værdien. Eksem- I

30 pelvis kan fibrene være overflademodificeret til forøgelse I

af den kritiske fugtede overfladespænding (CWST) for fibrene. I

Eksempelvis har de behandlede eller ubehandlede fibre, der I

anvendes i PRC-porøst medium, fortrinsvis en CWST-værdi I

over ca. 53 dyn/cm, og for PRP-porøst medium over ca. 70 I

35 dyn/cm. Fibrene kan også være bundet, sammensmeltet eller I

på anden måde fikseret til hverandre, eller de kan være I

DK 175916 B1 25 mekanisk sammensnoet. Andre porøse medier, f.eks. åbentcellet skumplast, der er overflademodificeret som ovenfor angivet, kan anvendes på tilsvarende måde.

Medens de porøse medier kan fremstilles ud fra ethvert 5 materiale, der er foreneligt med biologisk fluidum, dikterer praktiske overvejelser, at man først bør overveje anvendelsen af kommercielt tilgængelige materialer. De porøse medier kan fortrinsvis dannes ud fra f.eks. enhver syntetisk polymer, der er i stand til at danne fibre og tjene som et sub-10 strat for podning. Fortrinsvis bør den polymere være i stand til at reagere med mindst én ethylenisk monomer under indflydelse af ioniserende stråling, uden at matrixen signifikant eller ekscessivt påvirkes i uønsket retning af strålingen. Egnede polymere til anvendelse som substratet omfatter, 15 men er ikke begrænset til polyolefiner, polyestere, polyamider, polysulfoner, acrylharpikser, polyacrylonitriler, poly-aramider, polyarylenoxider og -sulfider, samt polymere og copolymere fremstillet ud fra halogenerede definer og umættede nitriler. Eksempler omfatter, men er ikke begrænset 20 til polyvinylidenfluorid, polyethylen, polypropylen, celluloseacetat og nylon 6 og 66. Foretrukne polymere er polyole-finer, polyestere og polyamider. Den mest foretrukne polymer er polybutylenterephthalat (PBT).

Overfladeegenskaber for en fiber kan forblive umodi-25 ficerede eller kan modificeres ved et antal metoder, f.eks. ved kemisk reaktion omfattende våd eller tør oxidation, ved overtrækning af overfladen ved afsætning af en polymer derpå eller ved podningsreaktioner, ved hvilke substratet eller fiberoverfladen aktiveres forud for eller under befugtning 30 af fiberoverfladen med en monomeropløsning ved udsættelse for en energikilde såsom varme, en Van der Graff-generator, ultraviolet lys eller for andre former for betråling, eller ved udsættelse af fibrene for gasplasma-behandling, En fo-retrukken metode er en podningsreaktion under anvendelse 35 af gamma-stråling, f.eks. fra en cobaltkilde. i

Ved et eksempel på en bestrålings-podningsteknik

DK 175916 B1 I

anvendes der mindst én af en række monomere, der hver in- H

deholder en ethylen- eller acrylisk del og en anden gruppe,

der foretrækkes at være en hydrofil gruppe, f.eks. -COOH H

eller -OH. Podning af det fibrøse medium kan også udføres I

5 med forbindelser indeholdende en ethylenisk umættet gruppe, I

f.eks. en acrylisk del, kombineret med en hydroxylgruppe, I

fortrinsvis monomere såsom hydroxyethylmethacrylat (HEMA) fl

eller acrylsyre. Forbindelserne indeholdende en ethylenisk H

umættet gruppe kan kombineres med en anden monomer, såsom H

10 methylacrylat (MA), methylmethacrylat (MMA) eller methacryl- I

syre (MAA). MA eller MAA inkorporeres fortrinsvis i det I

porøse medium, der anvendes til behandling af PRC, og MAA I

inkorporeres fortrinsvis i det porøse medium, der anvendes I

til at behandle PRP. Fortrinsvis kan vægtforholdet mellem I

15 MAA og HEMA-monomer i den modificerende blanding ligge mellem I

ca. 0,01:1 og ca. 0,5:1, og fortrinsvis kan vægtforholdet I

mellem MA eller MMA og HEMA-monomer i den modificerende I

blanding ligge mellem ca. 0,01:1 og ca. 0,4:1. Anvendelse I

af HEMA bidrager til en meget høj CWST-værdi. Analoge med I

20 lignende funktionelle karakteristika kan også anvendes til I

at modificere fibrenes overfladeegenskaber. I

Det er blevet iagttaget, at porøse medier, der er I

overfladebehandlet under anvendelse af nogle podemonomere I

eller kombinationer af monomere, opfører sig forskelligt I

25 med hensyn til forskellen mellem overfladespændingen af den I

væske, der absorberes, og overfladespændingen af den væske, I

der ikke absorberes, når CWST-bestemmes. Denne forskel kan I

variere fra mindre end 3 til så meget som 20 eller flere I

dyn/cm. Fortrinsvis har mediet en forskel mellem de absor- I

30 berede og ikke-absorberede værdier på ca. 5 eller færre I

dyn/cm. Dette valg afspejler den større præcision, med hvil- I

ken CWST-værdien kan reguleres, når der vælges snævrere I

forskelle, om end medier med videre forskelle også kan an- I

vendes. Anvendelsen af den mindre forskel foretrækkes til I

35 forbedring af produktkvalitetskontrol. I

Bestrålingspodning kan forøge fiber-til-fiber-binding H

DK 175916 B1 27 i et fibermedium. Således kan et fibermedium, der udviser lille eller ingen fiber-til-fiber-binding i en ubehandlet tilstand, udvise signifikant fiber-til-fiber-binding, efter at fibrene er blevet bestrålingspodede til forøgelse af 5 mediets CWST-værdi.

For de porøse medier til anvendelse i forbindelse med et biologisk fluidum, f.eks. PRP, ligger et foretrukkent område for CWST for fiberen fortrinsvis over ca. 70 dyn/cm, typisk fra ca. 70 til 115 dyn/cm, idet et mere foretrukkent 10 område ligger fra 90-100 dyn/cm og et specielt foretrukkent område ligger fra 93-97 dyn/cm. Et foretrukkent område for zeta-potentialet (ved pH-værdien '7,3 for plasma) er fra ca.

-3 til ca. -30 millivolt, et foretrukkent område ligger fra ca. -7 til ca. -20 millivolt og et specielt foretrukkent 15 område ligger fra ca. -10 til ca. -14 millivolt.

I de pakkede røde blodlegemer såvel som i helblod er de røde blodlegemer suspenderet i blodplasma, der har en overfladespænding på ca. 73 dyn/cm. Til fjernelse af leuco-cytindholdet af PRC er en CWST-værdi større end ca. 53 dyn/cm 20 ønskelig. CWST-værdien kan typisk ligge over fra ca. 53 til ca. 115 dyn/cm, men opfindelsen skal ikke begrænses herved.

En mere foretrukken CWST-værdi ligger over ca. 60 dyn/cm, og en endnu mere foretrukken CWST-værdi ligger fra ca. 62 dyn/cm til mindre end ca. 90 dyn/cm.

25 Om ønsket kan strømningshastigheden af biologisk

fluidum gennem filteret reguleres til opnåelse af en total strømningsperiode på fra ca. 10 til 40 minutter ved udvælgelse af passende elementdiameter, elementtykkeIse, fiberdiameter og massefylde, og/eller ved variation af diameteren I

30 af røret enten opstrøms eller nedstrøms fra filteret, eller | både op- og nedstrøms. Ved disse strømningshastigheder kan der opnås en leucocyt-fjernelseseffektivitet, der overstiger 99,9%. Såfremt PRP er det biologiske fluidum, der behandles, kan disse effektivitetsniveauer resultere i et PC-produkt 35 med mindre end ca. 0,1 x 10e leucocyter pr. enhed PC, sammenlignet med målsætningen på mindre end 1 x 106.

DK 175916 B1 I

Det leucocyt-fjernende PRC-porøse medium skal primært H

anvendes i forbindelse med PRC opnået fra donorblod inden H

for ca. 8 timer fra det tidspunkt, på hvilket blodet er H

aftappet. Det kan også anvendes til at filtrere PRC, der I

5 har været opbevaret ved 4°C i op til flere uger, men eftersom H

risikoen for tilstopning under filtrering forøges med op- H

bevaringstiden, kan risikoen f.eks. formindskes under anven- H

delse af for-filtre, der går forud for de her beskrevne H

medier. H

10 Et her omhandlet PRC-porøst medium kan fremstilles H

til at have et bredt område af effektiviteter til leucocyt- H

fjernelse. Hvis det porøse medium er sammensat af 2,6 μιη- H

fibre og vejer ca. H

15 p-^27,98 - gram (3) I

hvor p = fibermassefylde i gram/cm·3 H

©9 V — hulrumsrumfang i %,

20 kan, når det anvendes til leucocytf jernelse i PRC, logaritmen H

til effektiviteten, defineret som forholdet mellem den ind- H

strømmende leucocytkoncentration til den udstrømmende leu- H

cocytkoncentration, beregnes ud fra formlen H

25 Log effektivitet = 25,5 · Il - —— ) (4) I

V 100/ I

Til de fleste anvendelser er det ønskeligt at holde strøm- I

ningstiden for en enhed af PRC gennem det porøse medium, I

30 når der anvendes tryk på fra ca. 30 til 300 mm Hg, på mindre I

end ca. 30-40 minutter. Til opnåelse af denne strømningsha- H

stighed bør apparaturet fortrinsvis være udformet til et H

strømningsareal på fra ca. 30 til 60 cm2. H

Eksempelvis vil et 8,63 cm diameter (areal = 58,5 I

35 cm2) porøst medium fremstillet under anvendelse af 7,7 g af I

2,6 //m-diameter, 1,38 g pr. cm·3-massefylde-fiber med et hul- H

rumsvolumen på 76,5% opfylde kravene til ligning (3) og I

29 DK 175916 B1 dets leucocyt-fjernelseseffektivitet i overensstemmelse med ligning (4) vil være log 6. Hvis således den indstrømmende koncentration er 109 leucocyter/enhed, vil den udstrømmende koncentration være T§6 - 103 På tilsvarende måde, såfremt det porøse medium er 10 fremstillet med V = 88,2% under anvendelse af 2,6 μπι diameter-fibre med en massefylde på 1,38 g/cm3, vil vægten af det . porøse medium ifølge ligning (3) være følgende: 15 1,38-^27,98 - (29,2β X ffj2)! = 3,0 gram og logaritmen til effektiviteten vil ifølge ligning (4) være følgende: 20 Log effektivitet = 25,5*^1 - = 3,0

Hvis således den indstrømmende leucocytkoncentration 25 er 109 pr. enhed PRC, vil den udstrømmende koncentration være 109 c —3 = 10® pr. enhed 30 Ligningerne (3) og (4) kan anvendes til et hulrums rumfang i området fra ca. 73 til 88,5%, hvilket spænder over effektivitetsområdet fra ca. log 3 til log 7.

Ligningerne (3) og (4) giver særdeles nyttige retningslinier til udformning og opbygning af optimale eller 35 næsten optimale PRC-filtre, idet der kun kræves begrænsede forsøg. En person, der er bekendt med den pågældende teknik, vil imidlertid forstå, at afvigelser fra disse formler og modifikationer af de porøse medier kan foretages til frem- i

DK 175916 B1 I

3° I

stilling af nyttige produkter. Eksempler på modifikationer I

og deres virkning på ydeevneegenskaberne af de porøse medier I

fremgår af det følgende: I

DK 175916 B1 31 Ønskede filtereoenskaber Ændringer fra ligninger (3) og (4)_

Forøget leucocyt-fjer- o Nedsæt fiberdiameter nelseseffektivitet o Forøg vægt af fiber 5 o Nedsæt hulrumsrumfang

Formindsket sandsynlighed o Forøg filterelement-areal for tilstopning o Anvend for-filtrering 10 o Forøg hu1rumsrumfang

Formindsket indre "hold- o Nedsæt hu1rumsrumfang) up"-rumfang o Eliminér for-filtrering) o Anvend finere fiber 15

Forøget strømningshastig- o Behandl blodet således, at hed af PRC PRC har lavere hæmatokrit; derved lavere viskositet o Anvend højere hovede ved 20 filtrering o Forøg filterareal med samtidig reduktion af tykkelse o Forøg filterelernent-hulrums-rumfang 25

Modstandsdygtighed mod o Nedsæt element-hulrumsrumhøjere anvendt differentielt fang tryk o Anvend grovere fiber (på bekostning af reduceret 30 effektivitet) o Anvend fiber med højere modul

32 I

DK 175916 B1 I

(1) Anvendelse af en for lille fiberdiameter kan resultere I

i kollaps af filterelementet ved normalt arbejds- I

differentialtryk. I

(2) Kan resultere i ekscessivt lange filtreringstider I

5 eller fuldstændig tilstopning forud for fuldendelsen I

af en transfusion. I

Barrieremedium for røde blodlegemer I

Barrieresammensætninger for røde blodlegemer som I

10 f.eks. er indskudt mellem blodopsamlingsposen og PRP-posen, I

vil i almindelighed fjerne fra ca. 85-79% eller mere af de I

forekommende leucocyter, en fjernelsesgrad, der i givet I

fald ikke vil være tilstrækkelig til konsekvent at opnå en I

restleucocytmængde på mindre end 10® leucocyter pr. enhed I

15 PC. En principiel funktion af denne barrieresammensætning I

er imidlertid at fungere som en automatisk "ventil" under I

dekanteringsprocessen ved øjeblikkelig standsning af strømmen I

af et biologisk fluidum, f.eks. det ovenstående lag, f.eks. I

PRP, i det øjeblik, hvor røde blodlegemer kommer i kontakt

20 med porøse medier indeholdende det porøse medium. Mekanismen I

ved denne ventil-lignende virkning er ikke godt forklaret, I

men den kan afspejle aggregeringen af de røde blodlegemer, I

når de når den porøse overflade, idet de danner en barriere, I

der hindrer eller blokerer yderligere strømning af det oven- I

25 stående lag gennem det porøse medium. I

Aggregering af røde blodlegemer ved kontakt med det I

porøse filter synes at være relateret til CWST-værdien I

og/eller til andre, mindre godt forståede overfladeegenskaber I

for fibrene, der dannes ved den her beskrevne metode til I

30 modifikation af fibrene. Denne teori for den foreslåede I

mekanisme understøttes af eksistensen af filtre, der er i I

stand til at udøve højeffektiv leucocyt-fjernelse fra suspen- I

sioner af røde blodlegemer fra mennesker, og som har pore- I

størrelser så små som 0,5 μτα, gennem hvilke røde blodlegemer I

35 passerer frit og fuldstændigt uden tilstopning, med påsat I

tryk af samme størrelsesorden som anvendt ifølge opfindel- I

33 DK 175916 B1 sen.

På den anden side vil de omhandlede filtre, der typisk har porediametre større end ca. 0,5 μιη, brat standse strøm- ningen af røde blodlegemer, når det porøse medium bringes i 5 kontakt med de røde blodlegemer. Dette antyder, at den ventil-lignende virkning ikke er relateret til eller forårsaget af porestørrelse eller af en filtreringsmekanisme. Mekanismen for denne ventil-lignende virkning er ikke godt forstået, men den kan afspejle zeta-potentiale-relateret aggregering 10 af de røde blodlegemer, når de når filteroverfladen, idet de danner en barriere, der hindrer eller blokerer yderligere strømning af et biologisk fluidum indeholdende røde blodlegemer gennem det porøse medium.

Filtersammensætningen for røde blodlegemer omfatter 15 -fortrinsvis et foretrukkent område for fiberoverfladearealet på fra ca. 0,04 til ca. 0,3 m3, fortrinsvis fra ca. 0,06 til ca. 0,20 m2. Et foretrukkent område for strømningsarealet for det porøse medium er fra ca. 3 til ca. 8 cm2, og et mere foretrukkent område ligger fra ca. 4 til ca. 6 cm2. Et 20 foretrukkent område for hulrumsrumfanget ligger fra ca. 71 til ca. 83%, og et mere foretrukkent område fra ca.· 73 til ca. 80%. På grund af dets ringe størrelse udviser et foretrukkent organ i overensstemmelse med denne variation typisk et lavt "hold-up"-rumfang. Når f.eks. det biologiske fluidum, 25 der behandles, er PRP, tilbageholder organet i overensstemmelse med denne variation i det indre kun ca. 0,5 til ca. 1 cm3 PRP, hvilket repræsenterer mindre end et 0,5%'s tab af blodplader.

Med en anden variation af de omhandlede organer eller 30 sammensætninger ledes PRP afledt fra en enkelt enhed på ca.

450 cm3 humant blod, typisk under et strømningsinterval på fra ca. 10-40 minutter, gennem et filter indeholdende et porøst medium, fortrinsvis indeholdende podede fibre, med et overfladeareal i området fra ca. 0,08 til ca. 1,0 m2, og 35 mere fortrinsvis fra ca. 0,1 til ca. 0,7 m2, med et hulrumsrumfang i området fra ca. 50% til ca. 89%, fortrinsvis i----------—— -

DK 175916 B1 I

fra ca. 60 til ca. 85%. Filterelementet har fortrinsvis ret I

cylindrisk form med forholdet mellem diameter og tykkelse I

fortrinsvis i området fra ca. 7:1 til ca. 40:1. Området for I

fiberdiameteren foretrækkes at ligge fra ca. 1,0 til ca. 4 I

5 μτη, navnlig i området fra ca. 2 til ca. 3 μχη. I relation I

til den tidligere variation foretages denne variation med I

højere fiberoverfladeareal, højere gennemstrømningsareal I

for porøst medium, mindre massefylde for porøst medium og I

et forøget hulrumsvolumen. I

10 Alle disse parametre kan varieres. Eksempelvis kan I

diameteren af det porøse medium formindskes og tykkelsen I

forøges, idet man bibeholder det samme totale antal fibre, I

eller fibrene kan have en større diameter, idet den totale I

mængde fibre forøges, eller fibrene kan pakkes i modsætning I

15 til for-formning til en cylindrisk skive. Sådanne variationer I

falder inden for opfindelsens rammer. I

En anden variation kan omfatte et porøst medium, i I

hvilket opstrøms-delen har en højere massefylde end ned- I

strøms-delen. Eksempelvis kan det porøse medium indeholde I

20 et opstrømslag med højere massefylde til blokering af pas- I

sagen af røde blodlegemer og et nedstrømslag med lavere I

massefylde til fjernelsen af leucocyter. I

Ifølge én udførelsesform for opfindelsen er fibrene I

overflademodificeret på samme måde som i de forudgående I

25 versioner, men fiberoverfladearealelementet forøges, medens I

massefylden samtidig formindskes noget. På denne måde kom- I

bineres den automatiske blokering af strømning ved kontakt I

med røde blodlegemer med meget høj effektivitet af leucocyt- I

fjernelse. I

30 Et foretrukkent område for fiberoverfladeareal i I

forbindelse med denne variation af opfindelsen ligger fra H

ca. 0,3 til ca. 2,0 m2, og et mere foretrukkent område ligger H

fra ca. 0,35 til ca. 0,6 m2. De øvre grænser for fiberover- I

fladeareal afspejler ønsket om at gennemføre filtreringen i I

35 løbet af et forholdsvis kort tidsrum og kan forøges, såfremt I

længere filtreringstidsrum kan accepteres. Et foretrukkent H

DK 175916 B1 35 hulrumsrumfang for barrieresammensætningen for de røde blodlegemer ligger i området fra ca. 71 til ca. 83%, fortrinsvis fra ca. 75 til ca. 80%. Et foretrukkent strømningsareal ligger fra ca. 2,5 til ca. 10 cm2, og et mere foretrukkent 5 areal ligger fra ca. 3 til ca. 6 cm2. Leucocyt-fjernelses-effektiviteter ud over ca. 99,9%, der svarer til et gennemsnitligt resterende leucocytindhold pr. enhed på mindre end ca. 0,05 x 1O6, kan opnås.

Ved en foretrukken udførelsesform for opfindelsen 10 kan et porøst medium til anvendelse med et biologisk fluidum såsom et ovenstående lag, f .eks.. PRP, omfatte den type organ, der er beskrevet i US patentskrift nr. 4.880.548, hvortil der henvises. Ifølge en foretrukken udførelsesform for opfindelsen kan et porøst medium til anvendelse sammen med et 15 biologisk fluidum, f.eks. et sedimentlag, f.eks. PRC, omfatte den type organ, der er beskrevet i US patentskrift nr. 4.925.572 og i US patentskrift nr. 4.923.620, hvortil der henvises.

Som ovenfor angivet kan sediment1åget, f.eks. PRC, 20 når det udpresses fra opsamlingsposen, behandles gennem et organ med et leucocytfjernelseselement til formindskelse af leucocytindholdet i sedimentlaget. Ifølge opfindelsen omfatter det porøse medium til fjernelse af leucocyter fra den pakkede røde blodlegemebestanddel af et biologisk fluidum et 25 leucocytf jernelseselement eller porøst medium. Det foretrukne element fremstilles typisk under anvendelse af bestrålingspodede, smelteblæste fibre med en gennemsnitlig diameter på fra ca. 1 til ca. 4 μτη, fortrinsvis fra ca. 2 til ca. 3 μπκ Polybutylenterephthalat (PBT)-væv, der er et foretrukkent 30 materiale, kan varmkomprimeres til et hulrumsrumfang på ca.

65 til ca. 90%, fortrinsvis til ca. 73 til ca. 88,5%.

Separationssammensætning eller -organ

Den foreliggende opfindelse omhandler separation af 35 en eller flere bestanddele fra et biologisk fluidum. Et biologisk fluidum, navnlig blod, kan udsættes for et separa-

DK 175916 B1 I

tionsmedium, der er egnet til at lade mindst én bestanddel I

af det biologiske fluidum passere, navnlig plasma, igennem I

mediet, men ikke andre bestanddele af det biologiske fluidum, I

navnlig blodplader og/eller røde blodlegemer. Tilstopning I

5 af separationsmediet med disse andre bestanddele minimeres I

eller forhindres. I

I den udførelsesform, der omfatter en separationssam- I

mensætning 14, fortrinsvis et separationsorgan uden centrifu-

gering, kan det ovenstående lag, f.eks. PRP, ledes gennem H

10 et leucocytfjernelsesorgan og dernæst ledes gennem separa- I

tionsorganet 14 uden centrifugering, hvor det kan behandles I

og adskilles i bestanddele, der separat kan opsamles i en I

beholder 15 og en beholder 16. I en foretrukken udførelses- H

form kan den ovenstående væske, hvis denne er PRP, adskilles I

15 i plasma og blodpladekoncentrat, når PRP passerer gennem H

separationsorganet uden centrifugering. I

Som vist i fig. 5 omfatter et foretrukkent separa- I

tionsorgan et hus 210 med første og anden dele 210a, 210b H

forbundet på enhver bekvem måde. Eksempelvis kan de første H

20 og anden husdele 210a, 210b være forbundet ved hjælp af et I

klæbemiddel, et opløsningsmiddel eller et eller flere forbin- I

delsesorganer. Hust 210 har også et indløb 211 og første og I

anden udløb 212 og 213, således at der etableres en første

fluid strømningsbane 214 mellem indtaget 211 og det første I

25 udtag 212, og en anden fluid strømningsbane 215 etableres I

mellem indtaget 11 og det andet udtag 13. Et separationsme- I

dium 216 med første og anden overflader 216a, 216b er anbragt I

inden i huset 210 mellem de første og anden husdele 210a, I

210b. Endvidere er separationsmediet 216 anbragt parallelt H

30 med den første fluid strømningsbane 214 og tværs over den H

anden fluid strømningsbane 215. H

Udførelsesformer for den foreliggende opfindelse kan H

være udformet på en række forskellige måder til sikring af I

maksimal kontakt mellem det biologiske fluidum og den første I

35 overflade 216a af separationsmediet 216 og til formindskelse I

eller eliminering af tilstopning på den første overflade I

DK 175916 B1 37 216a af separationsmediet. Eksempelvis kan separationsorganet omfatte et første fladt kammer, der vender mod den første overflade 216a af separationsmediet 216. Det første kammer kan omfatte et arrangement af ribber, der spreder strømningen 5 af biologisk fluidum over hele den første overflade 216a af separationsmediet 216. Alternativt kan det første kammer omfatte én eller flere kanaler, riller, ledninger, passager eller lignende, der have serpentinekonfiguration, parallel, kurvet eller en lang række andre konfigurationer.

10 Fluidumstrømningskanalerne kan have enhver egnet ud formning og konstruktion. Eksempelvis kan kanalerne have et rektangulært, triangulært eller halvcirkulært tværsnit og en konstant dybde. Kanalerne har fortrinsvis et rektangulært tværsnit og varierer i dybde, f.eks. mellem indløbet 211 og 15 udløbet 212.

I den udførelsesform, der er vist i fig. 6, 7 og 8, er indløbet 211 i huset 210 forbundet til serpentine-fluidumstrømningskanaler 220, 221 og 222, der vender mod den første overflade 216a af separationsmediet 216. Disse kanaler 220-20 222 adskiller den indkommende strømning af biologisk fluidum i særskilte strømningsbaner tangentielt til den første overflade 216a af separationsmediet 216. Strækkende sig langs den første overflade 216a kan serpentine-f luidumstrømningska-naler 220, 221 og 222 genkombineres ved det første udløb 25 212 fra huset 210.

Udførelsesformer for opfindelsen kan også udformes på en række måder til minimering af tilbagetryk tværs over separationsmediet 216 og til sikring af en tilstrækkeligt høj hastighed for strømningen til det andet udløb 212 til 30 hindring af forurening af overfladen 216a, idet "hold-up"-rumfanget minimeres. Separationsorganet omfatter et andet fladt kammer, der vender mod den anden overflade 216b af separationsmediet 216. Ligesom det første kammer kan det andet kammer omfatte et arrangement af ribber eller kan 35 indeholde én eller flere kanaler, riller, ledninger, passager eller lignende, der kan have konfigurationer i form af ser-

DK 175916 B1 I

pentiner, parallelle eller kurvede eller en række andre I

konfigurationer. I

Fluidumstrømningskanalerne kan have enhver egnet ud- I

formning og konstruktion. Eksempelvis kan kanalerne have et I

5 rektangulært, halvcirkulært eller triangulært tværsnit og I

en konstant eller variabel dybde. I den udførelsesform, der I

er vist i fig. 9-11, vender flere serpentine-fluidumstrøm- I

ningskanaler 231, 232, 233, 234 og 235 mod den anden over- I

flade 216b af separationsmediet 216. Strækkende sig langs den I

10 anden overflade 216b kan serpentine-fluidumstrømningskanaler- I

ne 231-235 genkombineres ved det andet udløb 213. H

Ribber, vægge eller fremspring 241, 242 kan anvendes I

til at definere kanalerne 220-222, 231, 232-235 af det første I

og andet kammer og/eller kan understøtte eller anbringe I

15 seperationsmediet 216 i huset 210. I en foretrukken udførel- I

sesform for opfindelsen findes der flere vægge 242 i det andet kammer end i det første kammer til hindring af defor- mation af separationsmediet 216, forårsaget af trykdifferen-

tialet gennem separationsmediet. I

20 Ved anvendelsen ledes et biologisk fluidum, f.eks. I

helblod eller PRP, under tilstrækkeligt tryk ind i indløbet I

211 af huset 210 fra enhver egnet kilde til det biologiske I

fluidum. Eksempelvis kan det biologiske fluidum injiceres fra I

en injektionssprøjte i indløbet 211, eller det kan tvinges I

25 ind i indløbet 211 fra en fleksibel pose under anvendelse I

af tyngdekraftens påvirkning, en trykmanchet eller et udpres- I

ningsorgan. Fra indløbet 211 træder det biologiske fluidum I

ind i kanalerne 220-222 i det første kammer og passerer I

tangentielt eller parallelt til den første overflade 216a I

30 af separationsmediet 216 på vej til det første udløb 212 I

via den første fluidumstrømningsbane 214. Mindst én bestand- I

del af det biologiske fluidum, f.eks. plasma, passerer gennem I

separationsmediet 216, træder ind i kanalerne 231-235 i det I

andet kammer og ledes mod det andet udløb 213 via den anden H

35 fluidumstrømningsbane 215. Efterhånden som det biologiske I

fluidum fortsætter langs den første strømningsbane 214 tan- I

DK 175916 B1 39 gentielt eller parallelt med den første overflade 216a af separationsmediet 216, krydser mere og mere plasma separationsmediet 216. Et plasmafattigt fluidum udtræder derefter fra huset 210 ved det første udløb 212 og udvindes i en beholder 5 217, medens plasma træder ud af huset 210 ved det andet udløb 213 og opsamles i en anden beholder 218.

Om end ethvert biologisk fluidum indeholdende plasma kan anvendes i forbindelse med den foreliggende opfindelse, er opfindelsen navnlig velegnet til anvendelse i forbindelse 10 med blod og blodprodukter, navnlig helblod eller PRP. Ved at underkaste PRP behandling i overensstemmelse med den foreliggende opfindelse kan PC og blodplade-frit plasma opnås uden centrifugering af PRP og de dermed forbundne ulemper, der er diskuteret ovenfor. Ligeledes kan der fås 15 blodpladefrit plasma fra helblod. Det biologiske fluidum kan tilføres i enhver egnet mængde, der er forenelig med kapaciteten af det samlede organ og ved hjælp af vilkårlige egnede midler, f.eks. ved en batch-operation, f.eks. ved hjælp af en blodpose forbundet med et udpresningsorgan eller 20 en injektionssprøjte, eller ved en kontinuerlig operation som en del af f.eks. et aferesesystem. Eksempler på kilder til biologisk væske omfatter en injektionssprøjte 219 som vist i fig. 5 eller et opsamlings- og behandlingssystem for biologisk fluidum som f.eks. beskrevet i US patentansøgning 25 nr. 07/609.654, der er indleveret den 6. november 1990, og hvortil der henvises. En kilde til biologisk fluidum kan også omfatte et aferesesystem og/eller kan omfatte et system, i hvilket biologisk fluidum recirkuleres gennem systemet.

Separationsmediet og huset kan være fremstillet af 30 et vilkårligt egnet materiale og med vilkårlig konfiguration, og separationsmediet kan være anbragt i det her omhandlede organ ifølge opfindelsen på enhver egnet måde, blot den biologiske fluidumstrøm tangentielt eller parallelt med separationsmediet opretholdes i en tilstrækkelig grad til at 35 undgå eller minimere væsentlig blodplade-adhæsion til separationsmembranen. De hydrodynamiske strømningsforhold paral-

40 I

DK 175916 B1 I

lelt til en overflade antages faktisk at være således be- I

skafne, at blodplader under strømning parallelt med over- I

fladen udvikler et spin, der bevirker, at de kan udvindes I

fra overfladen. Medens det foretrukne organ har et indløb I

5 og to udløb, kan andre konfigurationer anvendes uden uønsket I

påvirkning af den korrekte funktion af organet. Eksempelvis I

kan der anvendes multiple indløb for et biologisk fluidum, I

blot det biologiske fluidum strømmer tangentielt tværs over I

overfladen af separationsmediet. Plasmaet kan fortrinsvis I

10 opbevares i et område adskilt fra separationsmediet til I

undgåelse af mulig reverseret strømning af plasmaet tilbage j I

tværs over separationsmediet til det plasmafattige fluidum. I

Fagmanden vil forstå, at blodplade-adhæsion kan re- I

guleres eller påvirkes ved manipulering af en vilkårlig af I

15 et antal faktorer: hastighed af fluidumstrømningen, kon- I

figuration af kanalen, dybde af kanalen, variation af kana- I

lens dybde, separationsmediets overfladekarakteristika, I

mediets overfladeglathed og/eller den vinkel, under hvilken I

fluidumstrømmen krydser overfladen af separationsmediet, I

20 blandt andre faktorer. Eksempelvis er hastigheden af den I

første fluidumstrømning fortrinsvis tilstrækkelig til fjer- I

nelse af blodplader fra overfladen af separationsmediet. I

Uden at skulle begrænses dertil har det vist sig, at en I

hastighed på mere end ca. 30 cm/sekund er passende. I

25 Hastigheden af fluidumstrømmen kan også påvirkes af I

rumfanget af det biologiske fluidum, ved variation af kanal- I

dybden, og ved hjælp af kanalbredden. Eksempelvis kan kanal- I

dybden varieres fra ca. 6,35 til ca. 0,025 mm som vist i I

fig. 7. Fagmanden vil forstå, at en ønsket hastighed kan I

30 opnås ved manipulation af disse og andre elementer. Endvidere I

er det muligt, at blodplader ikke vedhænger så let til et I

separationsmedium, der har en glat overflade, som til en I

membran, der har en mere ru overflade. I

Ifølge opfindelsen omfatter separationsmediet et I

35 porøst medium, der er egnet til gennemledning af plasma. I

Det her anvendte separationsmedium kan omfatte, men er ikke I

41 DK 175916 B1 begrænset til polymere fibre, herunder hule fibre, polymere fibermatrixer, polymere membraner og faste porøse medier. Separationsmedier ifølge opfindelsen fjerner plasma fra en biologisk opløsning indeholdende blodplader, typisk helblod 5 eller PRP, uden fjernelse af proteinholdige blodbestanddele og uden at tillade en væsentlig.mængde blodplader at passere igennem.

Et separationsmedium ifølge opfindelsen udviser fortrinsvis en gennemsnitlig porestørrelse, der generelt eller iO iboende er mindre end den gennemsnitlige størrelse af blodplader, og blodplader klæber fortrinsvis ikke til overfladen af separationsmediet, hvorved poreblokering formindskes. Separationsmediet bør også have eri lav affinitet til proteinholdige bestanddele i det biologiske fluidum, f.eks. PRP.

15 Dette forøger sandsynligheden for, at den blodpladefattige opløsning, f.eks. blodpladefrit plasma, vil udvise en normal koncentration af proteinholdige koagulationsfaktorer, vækstfaktorer og andre påkrævede bestanddele.

Til separation af ca. én enhed af helblod kan et 20 typisk separationsorgan ifølge opfindelsen omfatte en effektiv porestørrelse mindre end blodplader i gennemsnit, typisk mindre end 4 mikrometer, fortrinsvis mindre end 2 mikrometer. Permeabiliteten og størrelsen af separationsorganet er fortrinsvis tilstrækkelig til produktion af ca. 160 cm3 til 25 ca. 240 cm3 plasma ved rimelige tryk, f.eks. mindre end ca.

1,4 kg/cm^, i løbet af et rimeligt tidsrum, f.eks. mindre end 1 time. Ifølge opfindelsen kan alle disse typiske parametre varieres til opnåelse af et ønsket resultat, dvs. varieres fortrinsvis til minimering af blodpladetab og til 30 maksimering af blodpladefri plasmaproduktion.

I overensstemmelse med opfindelsen kan et separationsmedium fremstillet af fibre være kontinuerligt, indeholdende stabelfibre eller smelteblæste fibre. Fibrene kan fremstilles ud fra ethvert materiale, der er foreneligt med et biologisk 35 fluidum indeholdende blodplader, f.eks. helblod eller PRP, og kan behandles på en række forskellige måder til at gøre

DK 175916 B1 I

mediet mere effektivt. Fibrene kan også være bundet, sam- I

mensmeltet eller på anden måde fikseret til hverandre, eller I

de kan simpelthen være mekanisk sammensnoet. Et separations- H

medium tildannet af en membran, således som dette udtryk I

5 her anvendes, refererer til ét eller flere porøse polymere I

ark, f.eks. et vævet eller uvævet væv af fibre, med eller I

uden et fleksibelt porøst substrat, eller kan omfatte en I

membran tildannet ud fra en polymeropløsning i et opløsnings- I

middel ved fældning af en polymer, når polymeropløsningen I

10 bringes i kontakt med et opløsningsmiddel, i hvilket den I

polymere ikke er opløselig. Det porøse, polymere ark vil I

typisk have en i det væsentlige ensartet, kontinuerlig ma- I

trix-struktur indeholdende en myriade af små, i det væsent- I

lige indbyrdes forbundne porer. I

15 Separationsmediet ifølge opfindelsen kan f.eks. frem- I

stilles ud fra en vilkårlig syntetisk polymer, der kan danne I

fibre eller en membran. Om end det ikke er nødvendigt for

det omhandlede apparat eller den omhandlede metode, er den I

polymere ifølge en foretrukken udførelsesform i stand til I

20 at tjene som et substrat til podning med ethylenisk umættede I

monomere materialer. Den polymere bør fortrinsvis være i I

stand til at reagere med mindst én ethylenisk umættet monomer I

under indflydelse af ioniserende stråling eller andre akti- I

verende midler, uden at matrixen påvirkes i uønsket retning. I

25 Egnede polymere til anvendelse som substratet omfatter, men

er ikke begrænset til polyolefiner, polyestere, polyamider, I

polysulfoner, polyarylenoxider og -sulfider, og polymere og I

copolymere fremstillet ud fra halogenerede olefiner og umæt- I

tede nitriler. Foretrukne polymere er polyolefiner, poly- I

30 estere og polyamider, f.eks. polybutylenterephthalat (PBT) I

og nylon. I en foretrukken udførelsesform kan en polymer- I

membran fremstilles ud fra en fluoreret polymer såsom poly- I

vinylidendifluorid (PVDF) . De mest foretrukne separationsme- I

dier er en mikroporøs polyamidmembran eller en polycarbonat- I

35 membran. I

Overfladeegenskaberne for en fiber eller membran kan I

DK 175916 B1 43 påvirkes som ovenfor bemærket for et porøst medium. Et eksempel på bestrålings-podningsteknik gør anvendelse af mindst én af en række monomere, der hver indeholder en ethylen-eller acrylisk del og en anden gruppe, der kan vælges fra 5 hydrofile grupper, f.eks. -COOH eller -OH, eller hydrofobe grupper, f.eks. en methylgruppe eller mættede kæder såsom -CH2CH2CH3. Podning af fiberen eller membranoverfladen kan også udføres med forbindelser indeholdende en ethylenisk umættet gruppe, f.eks. en acrylisk molekyldel, kombineret 10 med en hydroxylgruppe, f.eks. hydroxyethylmethacrylat (HEMA). Anvendelse af HEMA som den monomere bidrager til en meget høj CWST-værdi. Analoge med lignende egenskaber kan også anvendes til at modificere fibrenes overfladeegenskaber.

I overensstemmelse med en udførelsesform for opfin-15 delsen kan separationsmediets overflade modificeres, typisk ved bestrålingspodning, til opnåelse af ønskede ydeevnekarakteristika, hvorved blodplader koncentreres med et minimidm af medieblokering, og hvorved den resulterende plasmaopløsning indeholder i det væsentlige alle dens native protein-20 holdige bestanddele. Eksempler på membraner med en lav affinitet for proteinholdige stoffer er beskrevet i US patent-skrifterne nr. 4.886.836, nr. 4.906.374, nr. 4.964.989 og nr. 4.968.533, hvortil der henvises.

Egnede membraner i overensstemmelse med en udførel-25 sesform for opfindelsen kan være mikroporøse membraner og kan fremstilles ved en opløsningsstøbningsmetode.

Som nævnt ovenfor bevirker etablering af en tangentiel strømning af det biologiske fluidum, der behandles, parallelt med eller tangentielt til overfladen af separationsmediet 30 minimering af blodpladeopsamling i eller passage gennem separationsmediet. Ifølge opfindelsen kan den tangentielle strømning fremkaldes ved enhver mekanisk konfiguration af den strømningsbane, der inducerer en høj lokal fluidumhastighed ved den umiddelbare membranoverflade. Det tryk, der 35 driver det biologiske fluidum tværs over separationsmediet, kan opnås på enhver egnet måde, f.eks. ved tyngdekraftens

DK 175916 B1 I

hjælp eller ved hjælp af et udpresningsorgan. I

Den tangentielle strømning af det biologiske fluidum I

kan rettes tangentielt eller parallelt til overfladen af I

separationsmediet på enhver egnet måde, fortrinsvis under I

5 anvendelse af en væsentlig del af separationsmediets over- I

flade under opretholdelse af tilstrækkelig strømning til I

sikring af, at blodpladerne ikke tilstopper eller blokerer I

porerne i separationsmediet. Strømmen af det biologiske I

fluidum er fortrinsvis rettet tangentielt eller parallelt med I

10 overfladen af separationsmediet ved anvendelse af mindst én I

serpentine-fluidumstrømningskanal, der er udformet til at I

maksimere udnyttelse af separationsmediet, sikre en til- I

strækkelig total arealkontakt mellem det biologiske fluidum

og separationsmediet samt opretholdelse af en tilstrækkelig I

15 strømning af biologisk fluidum til minimering eller hindring

af blodplade-adhæsion til separationsmediet. Fortrinsvis I

anvendes der flere, f.eks. tre eller flere fluidumstrømnings- I

kanaler til fiksering af separationsmediet på plads og til I

hindring af sætning af membranen på grund af det påførte I

20 tryk. Fluidumstrømningskanalerne kan have enhver egnet ud- I

formning og konstruktion og er fortrinsvis variable med I

hensyn til dybde, f.eks. dybde til opnåelse af optimalt I

tryk og fluidumstrømning tværs over overfladen af separa- I

tionsmediet. Fluidumstrømningskanaler kan også anvendes på I

25 siden af separationsmediet modsat den tangentielle strømning H

af biologisk fluidum til regulering af strømningshastigheden H

og tryktab for et blodpladefattigt fluidum, f.eks. plasma. H

Det her omhandlede organ kan ligeledes være del af H

et aferesesystem. Det biologiske fluidum, der skal behandles, H

30 den blodpladerige opløsning og/eller den blodpladefattige I

opløsning kan håndteres enten batchvis eller på kontinuerlig H

måde. Størrelsen, naturen og konfigurationen af det her I

omhandlede organ kan reguleres til variation af kapaciteten H

af organet til tilpasning til dets tilsigtede omgivelser. H

35 I

DK 175916 B1 45

Gasindløb/gasudtaq

Under visse omstændigheder kan det være ønskeligt at maksimere udvindingen af et biologisk fluidum tilbageholdt eller indesluttet i forskellige elementer af behandlings-5 systemet for det biologiske fluidum. Eksempelvis vil det biologiske fluidum under typiske betingelser under anvendelse af et typisk organ drænes gennem systemet, indtil strømningen standses, idet noget af fluidet efterlades i systemet. I én udførelsesform for opfindelsen kan dey tilbageholdte fluidum 10 udvindes ved anvendelse af mindst ét gasindløb og/eller mindst ét gasudtag. Et eksempel på konfigurationen af denne udførelsesform er vist i fig. 3.

Gasudløbet er et porøst medium, der tillader gas, der kan være til stede i et behandlingssystem for et biolo-15 gisk fluidum, når det biologiske fluidum behandles i systemet, at træde ud af systemet. Gasindløbet er et porøst medium, der indfører gas i et behandlingssystem for et biologisk fluidum.

Som her benyttet refererer udtrykket gas til ethvert 20 gasformigt fluidt medium, f.eks. luft, steriliseret luft, oxygen, carbondioxid og lignende. Det er hensigten, at opfindelsen ikke skal begrænses til den anvendte type gas.

Gasindløbet og gasudløbet vælges således, at systemets sterilitet ikke kompromitteres. Gasindløbet og gasudløbet 25 er særlig egnet til anvendelse i lukkede systemer, eller de kan anvendes senere, f.eks. indenfor ca. 24 timer fra åbningen af et system.

Gasindløbet og gasudløbet omfatter hver mindst ét porøst medium udformet til at tillade gas at passere igennem 30 det. En række forskellige materialer kan anvendes, forudsat at de pågældende egenskaber for det bestemte porøse medium opnås. Disse omfatter den nødvendige styrke til håndtering af de differentielle tryk, der forekommer ved anvendelsen, og evnen til at tilvejebringe den ønskede filtreringskapa-35 citet under tilvejebringelse af den ønskede permeabilitet, uden anvendelse af ekscessivt tryk. I et sterilt system bør i i

I DK 175916 B1 I

I 46 1

I det porøse medium også fortrinsvis have en porestørrelse på I

I ca. 0,2 mikrometer eller mindre til hindring af bakteriepas- I

I sage. I

I Gasindløbet og gasudløbet kan indeholde et porøst I

I 5 medium, f.eks. et porøst, fibrøst medium, såsom et dybfilter, I

I eller en porøs membran eller et porøst ark. Porøse medier I

I bestående af flere lag kan anvendes, f.eks. en flerlagsmi- I

I kroporøs membran, hvor ét lag er liquofobt og det andet er I

I liquofilt. I

I 10 Foretrukne udgangsmaterialer er syntetiske polymere, I

I herunder polyamider, polyestere, polyolefiner, navnlig poly- I

I propylen og polymethylpenten, perfluorerede polyolefiner, I

I f.eks. polytetrafluorethylen, polysulfoner, polyvinyliden- I

I difluorid, polyacrylonitril og lignende, og kompatible bian- I

I 15 dinger af polymere. Den mest foretrukne polymer er polyvinyl- I

I idendifluorid. Indenfor klassen af polyamider omfatter de I

I foretrukne polymerer polyhexamethylenadipamid, poly-e-capro- I

I lactam, polymethylensebacamid, poly-7-aminoheptanoamid, I

I polytetramethylenadipamid {nylon 46) eller polyhexamethyl- I

I 20 enazeleamid, idet polyhexamethylenadipamid (nylon 66) navnlig I

I foretrækkes. Særligt foretrukne er hudfri, i det væsentlige I

I alkohol-uopløselige, hydrofile polyamidmembraner såsom de, I

I der er beskrevet i US patentskrift nr. 4.340.479. I

I Andre udgangsmaterialer kan også anvendes til at I

I 25 fremstille de porøse medier, herunder cellulosederivater,

I f.eks. celluloseacetat, cellulosepropionat, celluloseacetat- I

I propionat, celluloseacetat-butyrat og cellulosebutyrat. I

I Ikke-harpiksholdige materiale, f.eks. glasfibre, kan også I

I anvendes. I

I 30 Hastigheden af luftstrøm gennem gasudløbet eller I

I gasindløbet kan tilpasses det specifikke biologiske fluidum I

eller de biologiske fluida, der har interesse. Hastigheden I

I af luftstrømmen varierer direkte med arealet af det porøse I

I medium og det påsatte tryk. Anmindeligvis er arealet af det I

I 35 porøse medium udformet til at bevirke, at behandlingssystemet I

I for det biologiske fluidum primes i et påkrævet tidsrum under I

DK 175916 B1 47 anvendelsesbetingelserne. Eksempelvis er det ved medicinske anvendelser ønskeligt at være i stand til at prime et intravenøst sæt i fra ca. 30 til ca. 60 sekunder. Ved sådanne anvendelser såvel som ved andre medicinske anvendelser er 5 det typiske porøse medium en membran, der kan have form af en skive med en diameter fra ca. 1 mm til ca. 100 mm, fortrinsvis fra ca. 2 mm til ca. 80 mm, og navnlig fra ca. 3 mm til ca. 25 mm.

I overensstemmelse med opfindelsen kan behandlings-10 sytemet være udstyret med et gasindløb for at tillade indføring af gas i systemet, og/eller med et gasudløb til at tillade gasser i de forskellige elementer i systemet at blive adskilt fra det biologiske fluidum, der skal behandles. Gasindløbet og gasudløbet kan anvendes sammen i forbindelse 15 med mindst ét samlet, porøst medium eller en beholder i systemet, eller de kan anvendes særskilt.

Til dette formål kan et gasindløb eller gasudløb være inkluderet i ethvert af de forskellige elementer af behandlingssystemet for det biologiske fluidum. Som illustra- 2 0 tion kan nævnes, at et gasindløb eller gasudløb kan være inkluderet i mindst én af de ledninger, der forbinder de forskellige beholdere, i en væg af beholderne, der modtager det behandlede biologiske fluidum, eller i en åbning på eller i én af disse beholdere. Gasindløbet eller gasudløbet kan 25 også være inkluderet på eller i en kombination af de ovennævnte elementer. En sammensætning eller et porøst medium kan også inkludere ét eller flere gasindløb eller gasudløb som ovenfor beskrevet. Generelt foretrækkes det imidlertid at inkludere et gasindløb eller gasudløb i de ledninger, 3 0 der forbinder beholderne, eller i det funktionelle medicinske organ. Omfattet af opfindelsens omfang er anvendelsen af | mere end ét gasindløb eller gasudløb i enhver ledning, modtagende beholder, sammensætning eller porøst medium.

Det vil være åbenbart for en fagmand på området, at 35 anbringelsen af et gasindløb eller et gasudløb kan optimeres til opnåelse af et ønsket resultat. Eksempelvis kan det

I DK 175916 B1 I

I 48 I

I være ønskeligt at lokalisere gasindløbet opstrøms fra et I

I porøst medium og i eller så tæt til den første beholder som I

I praktisk muligt til maksimering af udvindingen af biologisk I

I væske. Det kan også være ønskeligt at lokalisere gasudløbet I

I 5 nedstrøms for det porøse medium og så tæt til den modtagende I

I beholder som muligt til maksimering af det rumfang gas, der I

I fjernes fra systemet. I

I En sådan placering af gasindløbet eller gasudløbet I

I er navnlig ønskelig, når der kun forefindes ét gasindløb I

10 eller gasudløb i systemet. I

I Udvinding fra de forskellige elementer af behandlings- I

I systemet for det biologiske fluidum kan maksimeres. Eksenpel- I

I vis underkastes helblod et behandlingstrin, der resulterer I

I i særskilte PRP- og PRC-lag. Dernæst udpresses de særskilte I

I 15 fraktioner af blodbestanddele til deres respektive modtage- I

I beholdere gennem passende ledninger og porøse medier, såfremt I

I sådanne forefindes. Blodprodukt, der er blevet indesluttet I

I i disse elementer under behandlingen, kan udvindes enten I

I ved at lede skyllegas gennem ledningerne og porøse medier, I

I 20 eller ved tilvejebringelse af i det mindste et partielt I

I vakuum i systemet til udtrækning af det tilbageholdte blod- I

I produkt og for at tillade det at løbe ind i den pågældende I

I modtagebeholder eller sammensætning. I

I Skylle- eller rensegassen kan hidrøre fra en vilkårlig I

I 25 af et antal kilder. Eksempelvis kan behandlingssystemet for H

I det biologiske fluidum være udstyret med en opbevaringsbehol- I

I der til opbevaring af skyllegassen, og skyllegassen kan være I

I den gas, der fjernes fra systemet under behandlingsfunktio- I

I nen, eller skyllegassen kan injiceres aseptisk i systemet I

I 30 fra en ydre kilde, f .eks. gennem en injektionssprøjte. Eksem- H

I pelvis kan det være ønskeligt at anvende steril skyllegas, I

I der er blevet steriliseret i en særskilt beholder adskilt I

I fra behandlingssystemet for det biologiske fluidum. I

I En klemme, et lukke eller lignende kan være anbragt I

I 35 på eller i enhver af eller alle ledningerne til lettelse af H

I en ønsket funktion, dvs. etablering af en ønsket strømnings- H

DK 175916 B1 49 bane for biologisk væske eller gas. Når der f.eks. behandles et biologisk fluidum, f.eks. PRP, gennem et system, således som det er illustreret i fig. 3, kan det under fjernelsen af gasser fra ledningerne og leucocytfjernelsessammensætnin-5 gen være ønskeligt at afspærre ledningen umiddelbart under gasudløbet 54. Når det er ønskeligt at anvende gasindløbet 53 til at maksimere udvindingen af et biologisk fluidum, frigøres klemmen under gasudløbet 54, og en klemme i ledningen stødende op til gasindløbet 53 åbnes. Som eksemplificeret i 10 fig. 3 kan andre gasindløb og gasudløb, f.eks. 51 og 52, bringes til at fungere på lignende måde.

Under fortsat henvisning til fig. 3 vil en søjle af biologisk fluidum, f.eks. PRP, når den strømmer fra den første beholder 11 gennem ledningen og leucocytf j emel sessam-15 mensætningen 13 mod satellitposen 41, drive gassen i disse elementer mod gasudløbet 54.

Gasudløbet kan omfatte et forgreningselement med tre ben. Ét ben kan omfatte et liquofobt porøst medium, der fortrinsvis har en porestørrelse på ikke mere end 0,2 μ.

20 Ved forgreningselementet bevæger gas, der er foran søjlen af biologisk fluidum, sig ind i det ene ben af forgreningselementet. Eftersom gassen passerer gennem det liquofobe porøse medium, men det biologiske fluidum ikke gør dette, adskilles gassen fra PRP og hindres i at træde ind i satel-25 litposen 15.

De gasser, der adskilles ved gasudløbet 54, kan af-luftes fra systemet, eller de kan opsamles i en gasbeholder (ikke vist på tegningen) og returneres til systemet som en skyllegas til lettelse af udvindingen af biologisk fluidum, 30 der bliver indesluttet i de forskellige bestanddele af systemet .

Efter at systemet er primet, og gasudløbet er inak-tiveret, åbnes klemmen stødende op til beholderne eller sammensætningen for at tillade beholderne at blive fyldt 35 med behandlet biologisk fluidum. Dette fortsætter, indtil opsamlingsposen 11 kollapser. Til udvinding af det særdeles

50 I

DK 175916 B1 I

værdifulde biologiske fluidum, der er indeholdt i systemet, I

kan luft fra omgivelserne eller en steril gas føres ind i

systemet gennem gasindløb 51 eller 53. Såfremt gasindløb 51 I

eller 53 er manuelle indløb, åbnes et lukke, eller en klemme I

5 frigøres. Hvis gasindløbene 51 eller 53 er automatiske, vil I

trykforskellen mellem gasindløbet og beholderne bevirke, at I

luften eller gassen strømmer gennem ledningerne, gennem de I

porøse medier og mod de respektive beholdere. Ved fremgangs- I

måden udvindes tilbageholdt biologisk fluidum, der er inde- I

10 sluttet i disse elementer under behandlingen, fra disse kom- I

ponenter og opsamles i beholderne. Det skal bemærkes, at I

renseluft eller -gas fortrinsvis skilles fra det biologiske I

fluidum ved gasudløbene 52 eller 54, således at kun lidt, om I

nogen, rensegas vil blive modtaget af beholderne. Dette kan I

15 foretages ved at påsætte klemmer på ledningen nedstrøms fra I

gasudløbet 52 eller 54. I en anden udførelsesform for op- I

findelsen kan renseluft eller -gas skilles fra systemet I

gennem et gasudløb anbragt i selve posen.

20 Konsol eller støtte I

I en anden udførelsesform er der tale om en konsol I

eller støtte, der sikrer en filtersammensætning omfattende I

et porøst medium eller én eller flere komponenter af en I

sammensætning på plads under centrifugering, således at den I

25 eller de ikke beskadiges af de spændinger, der frembringes I

under centrifugering. I

Blodopsamlings- og -behandlingsorganet 10, med én I

eller flere satellitposer forbundet eller tilknyttet via en I

ledning, kan anvendes integralt til fraskillelse af bestand- I

30 dele fra helblod. Denne udførelsesform kan bedre forstås I

ved henvisning til den eksempelvise konfiguration, der er I

vist i fig. 4. Under centrifugeringstrinet, ved hvilket I

røde blodlegemer koncentreres ved bunden af opsamlingsposen, I

kan der frembringes kræfter på op til ca. 5000 gange tyngde- I

35 kraften (5000 G) eller mere. Opsamlingsposen er derfor for- I

trinsvis fleksibel, således som de øvrige poser er det, I

DK 175916 B1 51 hvilket tillader dem at falde ned på bunden og mod væggene af en centrifugekurv 120, således at poserne selv kun underkastes små eller ingen spændinger.

I modsætning til fleksibiliteten og bøjeligheden af 5 poserne og rørene er det porøse medium typisk indeholdt i et stift plasthus (idet kombinationen heraf betegnes en filtersammensætning). PRC-huset er typisk af større dimensioner end PRP-huset og er derfor udsat for en forøget sandsynlighed for at lide eller forårsage beskradigelse under 10 centrifugering. Eksempelvis kan en typisk PRC-filtersammensætning veje ca. 20 g, men dens effektive vægt kan være 5000 gange større, eller ca. 100 kg, under centrifugerings-betingelser ved 5000 G. I konventionelle centrifugeringssystemer er det derfor vanskeligt at undgå knusning af plast-15 huset. Selv omhyggelig placering af PRC-filtersammensætningen i centrifugekurven vil sandsynligvis resultere i beskadigelse af plastrøret eller poserne. Endvidere er det uønsket at forøge størrelsen af centrifugekurven til at rumme filtersammensætningen i kurven under centrifugeringen, eftersom 20 dette ikke blot ville kræve anvendelse af en større og mere kostbar centrifuge, men også ville kræve fornyet træning og oplæring af de tusinder af blodbehandlingsteknikere til på kyndig vis at samle blodposesættene i en ny type centrifugekurv.

25 Det er således ønskeligt, at et forbedret blodopsam lings- og -behandlingssystem eller -sæt skal kunne anvendes i forbindelse med eksisterende centrifugekurve. I overensstemmelse med opfindelsen udføres dette fortrinsvis ved at anbringe PRC-filtersammensætningen borte fra den største G-30 kraft; dette er fortrinsvis udenfor eller delvis udenfor den konventionelt anvendte centrifugekurv på den måde, der er vist i fig. 4.

I fig. 4 er kurven 120 en centrifugekurv således, som en sådan anvendes i almindelig blodbankpraksis. Disse 35 kurve er typisk konstrueret med tunge vægge af stål med høj styrke, der omslutter et åbent rum 121, i hvilket blodposen,

52 I

DK 175916 B1 I

dens satellitposer og de tilsluttede rør kan anbringes. Støt- I

ten 122, der anvendes til at holde en filtersammensætning, I

kan fremstilles af ethvert materiale med høj styrke, for- I

trinsvis metal eller en metallegering. Titan eller rustfrit I

5 stål foretrækkes navnlig på grund af deres styrke og den I

lethed, med hvilken sanitære betingelser kan opretholdes. I

Den nedre den 123 af støtten 122 er udformet til kooperativt I

at passe i hulheden 121, fortrinsvis ved en dybde på fra I

ca. 0,5 til ca. 1 cm. Fjederclips eller andre organer kan I

10 anvendes til at anbringe og/eller fastholde støtten 122 i I

kurven 120. Rillen eller fordybningen 124, der er anbragt i I

den øvre del af støtten 122, er fortrinsvis udformet til I

kooperativt at acceptere udgangsåbningen 125 af filtersam- I

mensætningen 114 og tillade bunddelen af filtersammensætnin- I

15 gen 114 at hvile på de plane øvre overflader af støtten 122 I

stødende op til rillen 124. Den centrale del 126 af rillen I

eller fordybningen 124 kan være dimensioneret således, at I

åbningen 125 i filtersammensætningen 114 passer ind i mindst I

én del af rillen eller fordybningen 124 med en friktionspas- I

20 ning. Enderne af fordybningen eller rillen 124 er fortrinsvis I

reduceret til en bredde således, at det fleksible rør 112 I

forbundet til indløbet og udløbet af filtersammensætningen I

114 fastholdes kraftigt, hvilket bidrager til at stabilisere I

filtersammensætningen 114, når den anbringes på støtten I

25 122. De uunderstøttede dele af det fleksible rør 112 falder I

dernæst ind i kurven i forbindelse med resten af blodopsam- I

lingssættet indeholdt deri. Det foretrækkes, at støtten 122 I

fastholder filtersammensætningen 114 således, at planen for I

det porøse medium er i det væsentlige vinkelret på den G- I

30 kraft, der frembringes under operation af centrifugen. Støt- I

te- og filtersammensætningen bør også være anbragt på eller I

i centrifugekurven uden at interferere med den normale frit- I

svingende virkning af kurven 120 i centrifugen under rota- I

tion. I

35 Eftersom PRP-filteret typisk er forholdsvis lille og I

meget let, kan det anbringes inden i kurven med poserne og I

DK 175916 B1 53 røret. I en anden udførelsesform kan rillen eller fordybningen 124 imidlertid være udformet til at holde mere end én filtersammensætning, f .eks. både en PRC- og en PRP-filtersam-mensætning.

5 Ifølge en anden udførelsesform kan der anvendes en større støtte til at holde en første filtersammensætning, og en anden støtte, der holder en anden filtersammensætning, kan anbringes på toppen af den første støtte og f iltersanmen-sætning. En fagmand vil være klar over de forskellige ud-10 formninger, konfigurationer og/eller organer, der kan anvendes til at opnå disse funktioner.

Anbringelsen og den måde, på hvilken det porøse medium, navnlig PRC-mediet, monteres på centrifugekurven under centrifugeringsoperationen, er beskrevet i det følgende.

15 Forsøg med et antal testfilterhuse, der er udformet til at passe i centrifugekurven, har på overbevisende måde vist, at perforering af rørledninger ved huset er en hyppigt forekommende foreteelse under centrifugering. Det er også særdeles vanskeligt at udforme et hus, der pålideligt kan modstå 20 påvirkningerne uden at blive ødelagt. Endvidere er de eksisterende centrifugekurve udformet til at bære konventionelle blodopsamlingssæt, der ikke omfatter nogen filterelementer. Indpasning af det yderligere materiale bestående af en PRC-filtersammensætning i en konventionel kurv var således 25 særdeles vanskeligt. Disse meget alvorlige problemer er blevet elimineret ved anbringelse af PRC-filtersammensætnin-gen på en støtte uden for kurven. Dette tilvejebringer passende understøtning for filtersammensætningen ved kooperativt arrangement af flangedelen 127 af støtten 122 (fig. 4) til 30 at rumme konturerne af centrifugekurven. Endvidere er støtten 122 fortrinsvis anbragt over toppen af kurven, en position, der er meget tættere på centret for rotation i centrifugen, ! således at den kraft, for hvilken filtersammensætningen udsættes, er ca. 40% til ca. 60% af kraften ved bunden af 35 kurven 120. Desuden fastholder de snævre åbninger ved hver ende af støtten rørforbindelserne fast og tillader rørene

DK 175916 B1 I

at gå tilbage i skålen. På overraskende måde tåler de suspen- H

derede dele af rørene centrifugeringsoperationen særdeles H

godt.

Et system ifølge den foreliggende opfindelse kan H

5 anvendes i forbindelse med andre sammensætninger eller porøse H

medier, herunder filtrerings- og/eller adskillelsesorganer, H

f.eks. et organ til fjernelse af leucocyter fra en blodpla-

deholdig opløsning eller et blodpladeholdigt koncentrat. H

Eksempler på sådanne organer er beskrevet i US patentskrift H

10 nr. 4.880.548 og nr. 4.925.572. I

Huse kan fremstilles ud fra et vilkårligt egnet uigen- I

nemtrængeligt materiale, herunder et uigennemtrængeligt H

termoplastisk materiale. Eksempelvis kan huset fortrinsvis H

fremstilles ved injektionsstøbning ud fra en transparent

15 eller gennemskinnelig polymer, f.eks. en acryl-, polystyren- H

eller polycarbonatharpiks. Ikke blot er et sådant hus let H

og økonomisk at fremstille, men det tillader også iagttagelse H

af passagen af væsken gennem huset. H

Det hus, i hvilket det porøse medium indesluttes H

20 eller fastgøres, er udformet til at give bekvem anvendelse, H

hurtig priming og effektivt luftspillerum. H

Om end huset kan udformes i en række forskellige kon- H

figurationer, indeholder huset af et porøst medium som her H

omhandlet fortrinsvis et hus såsom angivet i US patentskrif- H

25 terne nr. 4.880.548, nr. 4.923.620 og nr. 4.925.572, der I

generelt svarer til konfigurationen af huset 114 i fig. 4. H

Et antal yderligere beholdere kan være i forbindelse I

med behandlingssystemet for det biologiske fluidum og kan H

anvendes til at definere forskellige strømningsbaner. Eksem- H

30 pelvis kan en yderligere satellitpose indeholdende fysiolo- H

gisk opløsning anbringes i forbindelse med behandlingssy- H

stemet for det biologiske fluidum opstrøms for leucocytfjer- I

nelsesorganet, f.eks. gennem gasindløbet, og opløsningen H

kan ledes gennem leucocytfjernelsesorganet således, at det H

35 biologiske fluidum, der tilbageholdes i organet, kan opsam- H

les.

DK 175916 B1 55 På tilsvarende måde kan en satellitpose indeholdende fysiologisk opløsning anbringes i forbindelse med behandlingssystemet til det biologiske fluidum nedstrøms i forhold til leucocytfjernelsesorganet, f.eks. gennem gasudløbet, og 5 opløsningen kan ledes gennem leucocytfjernelsesorganet således, at det biologiske fluidum, der tilbageholdes i organet, senere kan opsamles.

Det vil forstås, at når det biologiske fluidum fra opsamlingsposen 11 trykkes ud mod beholderne, kan noget af 10 det biologiske fluidum indesluttes i ledningerne og/eller de porøse medier. Eksempelvis tilbageholdes der typisk fra 8 til 35 cm^ i systemet, men så lidt som fra 2 til så meget som 150 cm^ eller mere kan tilbageholdes i nogle typer systemer.

15 I én udførelsesform (ikke vist på tegningen), kan luft eller gas opbevares i mindst én gasbeholder. Ved åbning af ventil- eller klemorganer i ledningerne kan gas tilføres gennem dem til rensning eller skylning af ledningerne og sammensætningerne, hvorved man letter udvindingen af biolo-20 gi sk fluidum, der kan være blevet indesluttet vinder behandling .

Fortrinsvis føres skylleluften eller -gassen til ledningerne ved et punkt, der er så tæt som rimeligt muligt til beholderen 11 til maksimering af rumfanget af det ud-25 vundne biologiske fluidum. Luft- eller gasbeholderen er fortrinsvis fleksibel, således at gassen deri kan føres til systemet blot ved hjælp af simpel kompression. Beholderne for det biologiske fluidum og luft- eller gasbeholderne kan være sammensat af det samme materiale.

30 Priming, således som dette udtryk anvendes her, re fererer til fugtning eller priming af de indre overflader af et organ eller en sammensætning inden den faktiske anvendelse, hvilket tillader, at en særskilt sammensætning injiceres i systemet. En ventil eller klemme åbnes til at 35 tillade væske at strømme gennem sammensætningen. Dernæst, med passagen af væske gennem sammensætningen, udstødes gas

DK 175916 B1 I

56 I

nedstrøms i forhold til væsken gennem gasudløbet, indtil I

væsken når et forgreningselement, på hvilket punkt klemmen lukkes. Når klemmen er i en lukket stilling, kan forbindel- sesstykket nedstrøms fra gasudløbet åbnes eller gøres klar

5 til anvendelse uden væske i sammensætningen dryppende gennem H

forbindelsesstykket. I

Den biologiske fluidumopsamlings- og -behandlingssam- I

mensætning bør være i stand til at modstå kraftig sterilise- ring og centrifugering, typisk bestående af bestrålingsste-

10 rilisering (ved ca. 2,5 megarad) og/eller autoklavering I

(ved fra ca. 110 til ca. 120°C i fra ca. 15 til 60 minutter) I

og/eller centrifugering (typisk ved ca. 2500 til 3500 Gi I

fra ca. 5 til 15 minutter. Afhængigt af den biologiske flui- I

dumbestanddel, som ønskes udvundet maksimalt, kan centrifu- I

15 geringen imidlertid foregå ved ca. 5000 G i fra ca. 10 til I

20 minutter). I

Ved en fremgangsmåde til opsamling og behandling af H

blod opsamler man helblod i en beholder, centrifugerer hel- I

blodet og leder det ovenstående lag af det centrifugerede H

20 blod gennem et første porøst medium, hvilket første porøse I

medium indeholder mindst ét leucocytfjernelsesmedium, ét I

barrieremedium for røde blodlegemer og et kombineret leuco- I

cytfjernelsesmedium og barrieremedium for røde blodlegemer, I

hvorpå sedimentlaget af det centrifugerede blod ledes gennem I

25 et andet porøst medium, hvilket andet porøse medium indehol- I

der et leucocytfjernelsesmedium. I

Ved en fremgangsmåde til behandling af et biologisk I

fluidum leder man et biologisk fluidum fra en første beholder I

til et første porøst medium indeholdende et barrieremedium I

30 for røde blodlegemer, idet det biologiske fluidum ledes i en I

første strømningsbane, og et biologisk fluidum ledes fra en H

første beholder til et andet porøst medium indeholdende et I

leucocytfjernelsesmedium, idet det biologiske fluidum ledes I

i en anden strømningsbane. I

35 I almindelighed behandles donor-helblod så hurtigt I

som praktisk muligt til mere effektivt at reducere eller I

DK 175916 B1 57 eliminere forureningsfaktorer, herunder, men ikke blot leu-cocyter og mikroaggregater.

Leucucytfjernelse er tidligere typisk blevet udført under transfusion ved sengekanten, men i forbindelse med 5 den foreliggende opfindelse udføres leucucytfjernelse under den indledende behandling af helblodet, hvilket i praksis i USA i almindelighed foretages indenfor 8 timer fra aftapningen fra donoren. Efter at de røde blodlegemer er blevet sedimenteret ved centrifugering, udpresses den ovenstående 10 PRP fra blodopsamlingsposen i en første satellitpose gnenem et eller flere porøse medier, der formindsker mængden af leucocyter og/eller blokerer røde blodlegemer, og PRC, der forbliver i blodopsamlingsposen, ledes derpå gennem et porøst medium, der fjerner leucocyter i en anden satellitpose.

15 I almindelighed, jf. tegningens figurer, modtages | det biologiske fluidum, f.eks. donorens helblod, direkte i opsamlingsposen 11. Opsamlingsposen 11, med eller uden de øvrige elementer i systemet, kan dernæst centrifugeres til adskillelse af det biologiske fluidum i et ovenstående lag 20 31 og et sedimentlag 32. Efter centrifugering, såfremt der anvendes helblod, er det ovenstående lag primært PRP, og sedimentlaget er primært PRC. Det biologiske fluidum kan udpresses fra opsamlingsposen som særskilte ovenstående og sedimentlag. Der kan forefindes en klemme eller lignende 25 mellem opsamlingsposen 11 og det fleksible rør 25, eller inden i røret, til hindring af strømningen af det ovenstående lag i at træde ind i den forkerte ledning.

Bevægelse af det biologiske fluidum gennem systemet foretages ved opretholdelse af et trykdifferentiale mellem 30 opsamlingsposen og bestemmelsesstedet for det biologiske fluidum, f.eks. en beholder såsom en satellitpose eller en nål på enden af en ledning. Systemet ifølge opfindelsen er egnet til anvendelse sammen med konventionelle organer til etablering af trykdifferentialet, f.eks. en ekspressor.

35 Eksempler på organer til etablering af dette trykdifferentiale er organer til tilvejebringelse af tyngdekraftpåvirk-

DK 175916 B1 I

58 I

ning, påsætning af tryk på opsamlingsposen, f.eks. manuelt I

eller ved hjælp af en trykmanchet, eller ved anbringelse af I

den anden beholder, f.eks. satellitpose, i et kammer, f.eks.

et vakuumkammer, der etablerer et trykdifferentiale mellem I

5 opsamlingsposen og den anden beholder. Der kan også anvendes I

ekspressorer, der frembringer i det væsentlige samme tryk I

over hele opsamlingsposen. I

Når det biologiske fluidum passerer fra en pose til I

den næste, kan den passere gennem mindst ét porøst medium. I

10 Hvis det biologiske fluidum er det ovenstående lag, f.eks. I

PRP, kan det typisk passere fra opsamlingsposen gennem ét I

eller flere organer eller én eller flere sammensætninger I

indeholdende ét eller flere porøse medier - et leucocytfjer- I

nelsesmedium, et barrieremedium for røde blodlegemer, et 15 porøst medium, der kombinerer barrieren for røde blodlegemer med leucocytfjernelse i ét porøst medium, eller et leucocyt- fjernelsesmedium og et barrieremedium for røde blodlegemer

i serie. Det ovenstående lag 31 udpresses fra den første I

beholder 11, indtil strømningen standses, typisk ved lukning I

20 af en klemme i ledningen 20, eller automatisk, såfremt sam* I

mensætningen omfatter et barrieremedium 12 for røde blod- I

legemer. Fortrinsvis ledes det ovenstående lag gennem et I

barrieremedium for røde blodlegemer og dernæst gennem et I

leucocytfjernelsesmedium. Det ovenstående lag befries dernæst I

25 for leucocyter efter passage gennem leucucytf jemelsesmediet. I

Yderligere behandling kan om ønsket finde sted nedstrøms i I

forhold til leucocytf jemelsesmediet, enten i forbindelse I

med systemet eller efter at være adskilt fra systemet. I

Sedimentlaget 32 i opsamlingsposen 11 kan ledes gennem I

30 en leucocytf jernel sessammensætning 17 og ind i en beholder I

18, f.eks. en satellitpose. Opsamlingsposen 11, der nu in- I

deholder primært røde blodlegemer, underkastes derpå typisk I

et trykdifferentiale som ovenfor omtalt til priming af leu- I

cocytf jernel sesammensætningen 17 og til initiering af strøm- I

35 ning. I

I overensstemmelse med en yderligere udførelsesform I

59 DK 175916 B1 j i tilvejebringes der en fremgangsmåde, ved hvilken udvinding af forskellige biologiske fluida, der er indesluttet eller tilbageholdt i forskellige elementer af systemet, maksimeres, enten ved at bevirke, at et rumfang gas bag det indesluttede 5 eller tilbageholdte biologiske fluidum trænger væsken gennem disse elementer og ind i den udvalgte beholder, sammensætning eller porøse medium, eller ved at trække det indesluttede eller tilbageholdte fluidum ind i den pågældende beholder, sammensætning eller porøse medium ved hjælp af trykdifferen-10 tialet, f.eks. ved tyngdekraftens hjælp, ved hjælp af en trykmanchet, sugning eller lignende. Herved fås der en mere fuldstændig tømning af beholderen, sammensætningen eller det porøse medium. Når først beholderen er fuldstændig tømt, standses strømningen automatisk.

15 For at den her omhandlede opfindelse kan forstås fuldt ud, angives de følgende eksempler, der vedrører anvendelsen af opfindelsen.

Eksempler 20 Eksempel 1

Det behandlingssystem for biologisk fluidum, der anvendes i dette første eksempel, omfatter en blodopsamlingspose, særskilte PRP- og PRC-leucocytfjernelsesorganer, samt særskilte PRP- og PRC-satellitposer. Desuden hindrer 25 et barrieremedium for røde blodlegemer mellem opsamlingsposen og PRP-leucocytfjernelsesorganet strømningen af røde blodlegemer ind i PRP-satellitposen.

Barrieresammensætningen for røde blodlegemer omfatter et porøst medium til blokering af strømning ved kontakt med 30 røde blodlegemer, når PRP passerer fra opsamlingsposen. Barrieresammensætningen for røde blodlegemer er for-formet ud fra PBT-fibre med en gennemsnitlig diameter på 2,6 μπη, hvilke fibre er blevet overflademodificeret i overensstemmelse med de metoder, der er beskrevet i US patent skrift 35 nr. 4.880.548, under anvendelse af hydroxyethylmethacrylat og methacrylsyre i et monomerforhold på 0,35:1 til opnåelse

60 I

DK 175916 B1 I

af en CWST-værdi på 95 dyn/cm og et zeta-potentiale på I

-11,4 millivolt. Den effektive diameter af det porøse element I

er 2,31 cm, hvilket giver et filterareal på 4,2 cm^, tykkel- I

sen er 0,051 cm, hulrumsrumfanget er 75% (massefylde 0,34 I

5 g/cm3), og fiberoverfladearealet er 0,08 . I

Det rumfang PRP, der tilbageholdes i huset, er mindre I

end 0,4 cm3, hvilket repræsenterer et tab af PRP på grund I

af tilbageholdelse på mindre end 0,2%. Strømningen standser I

brat, når de røde. blodlegemer når opstrøms-overfladen af I

10 barrieresammensætningen for de røde blodlegemer, og der er I

ikke nogen synlige tegn på røde blodlegemer eller hæmoglobin I

nedstrøms. I

PRP-leucocytf j ernel sessammensætningen indeholdende I

et porøst medium til fjernelse af leucocyter fra PRP, efter I

15 PRP har passeret gennem barrieresammensætningen for røde I

blodlegemer, er beskrevet i US patentskrift nr. 4.880.548. I

På lignende måde er PRC-leucocytfjernelsessammensætningen, I

der indeholder et porøst medium til fjernelse af leucocyter I

fra enheden af PRC, beskrevet i US patentskrift nr. I

20 4.925.572. I eksemplet anvendes en enkelt enhed af helblod, I

der er givet af en frivillig donor. Enheden af blod opsamles I

i en opsamlingspose, der i forvejen er fyldt med 63 ml CPDA- I

ant ikoagula ti onsmiddel. Det opsamlede blod underkastes "soft- I

spin"-centrifugering i overensstemmelse med gængs blodbank- I

25 praksis. Opsamlingsposen overføres, idet man drager omsorg I

for ikke at forstyrre dens indhold, til en plasmaekstraktor, I

der er fjederpåvirket til udvikling af et tryk på ca. 90 mm I

Hg. I

Trykket fra ekspressoren driver PRP fra opsamlingspo- I

30 sen gennem barrieresammensætningen for røde blodlegemer, I

PRP-filterorganet (hvor det gøres leucocytfattigt) og dernæst I

til satellitposen. Når PRP træder ud af opsamlingsposen, I

stiger grænsefladen mellem PRC og PRP. Når de røde blod- I

legemer (der er til stede i den førende kant af PRC-laget) I

35 kommer i kontakt med barrieresammensætningen for røde blod- I

legemer, afsluttes strømningen automatisk og uden overvåg- I

DK 175916 B1 61 ning.

PRC, der bliver tilbage i opsamlingsposen, behandles også. Opsamlingsposen ophænges og sammentrykkes derefter ! til priming af PRC-leucocytf jernelsesfilteret, og PRC befries ! 5 for leucocyter. Når den ophængte opsamlingspose er tom, standser processen automatisk. Det fremkomne produkt af røde blodlegemer, der nu er befriet for leucocyter, opsamles dernæst i satellitposen og er tilgængeligt for transfusion til en patient efter behov.

10 PRP, der tidligere er opsamlet i satellitposen, be handles derpå under anvendelse af normale blodbankprocedurer, dvs. "hard-spin"-centrifugering, til fremstilling af PC og plasma.

15 Eksempel 2

Helblod opsamles i et Adsol®-donorsæt og behandles under standardbetingelser til opnåelse af én enhed af PRP.

PRP filtreres derpå til fjernelse af leucocyter under anvendelse af et filterorgan som beskrevet i US patentskrift nr.

20 4.880.548. Fjernelseseffektiviteten er større end 99,9%.

Den filtrerede PRP-enhed anbringes derpå i en trykmanchet, der udsættes for et tryk på 300 mm Hg. Røret, der træder ud af posen (klemmelukket på dette punkt) forbindes til indløbet af et adskillelsesorgan som vist i fig. 5, 6 25 og 9. En mikroporøs polyamidmembran med en porestørrelse på 0,65 μτη anvendes som separationsmediet i organet. Arealet af membranen er ca. 17,4 cm2. Dybden af de første fluidum-strømningsbanekanaler formindskes ca. 0,03 cm nær ved indløbet til ca. 0,01 cm nær ved udløbet. Dybden af de andre 30 fluidumstrømningsbanekanaler er ca. 0,025 cm. Udløbsåbningerne for organet forbindes til rør, der tillader rumfanget af fluidum, der træder ud af organet, at måles og blive tilbageholdt til analyse.

Afprøvningen af den foreliggende opfindelse påbegyndes 35 ved åbning af klemmen, hvorved man tillader PRP at træde ind i organet. Klar væske (plasma) iagttages at træde ud af

62 I

DK 175916 B1 I

én åbning, og uklar væske (blodpladekoncentrat) træder ud I

af den anden åbning. Varigheden af forsøget er 42 minutter,

i løbet af hvilket tidsrum der opsamles 154 ml plasma og 32 I

ml blodpladekoncentrat. Koncentrationen af blodplader i I

5 plasmaet findes at være 1,2 x 104 pr. μΐ, medens koncentra- I

tionen af blodplader i blodpladekoncentrationen findes at I

være 1,43 x 106 pr. μΐ. I

De ovenfor angivne resultater viser, at blodplader I

kan koncentreres til et nyttigt niveau, og at plasma kan I

10 udvindes på en rimelig tid ved hjælp af et organ som her I

omhandlet. I

Eksempel 3 I

Helblod opsamles og behandles til blodbestanddele I

15 som i eksempel 2, og der sammenlignes med det resultat, der I

opnås ved konventionel behandling. Resultaterne til sammen- I I

ligning af blodbestanddel-rumfangene og deres respektive I

leucocytantal er angivet i den følgende tabel I, der viser I

den forøgede effektivitet af leucocytfjemelse i forhold I

2 0 til de konventionelle metoder. Tabel I viser også det for- I

øgede udbytte af plasma og tilsvarende formindskede udbytte I

af PRC, hvilket er et resultat af anvendelsen af den fore- I

liggende opfindelse. I

Tabel I

63 DK 175916 B1

Konventionel Ifølge opfindelsen

Helblod 5 rumfang (cm3) 450 - 500 450 - 500 WBC-helblod 2 x 109 2 x 109 PC-rumfang {cm3) 50 - 65 50 - 65 WBC-PC =1 x 108 =1 x 105 P1asma-rumfang 10 (cm3) 165 - 215 170 - 220 WBC-plasma <108 <10® PRC-rumfang (cm3)* 335 320 WBC-PRC* 2 x 109 1 x 106 15 _

* med Adsol® I

Eksempel 4-8

De blodopsamlingssæt, der anvendes til gennemførelse 20 af eksemplerne, er i generel overensstemmelse med fig. 1,

uden det valgfri barrieremedium for røde blodlegemer, og I

proceduren er som tidligere beskrevet, idet der anvendes et apparat svarende til fig. 4 til det første centrifugeringstrin.

25 Det porøse medium til fjernelse af leucocyter fra

PRP er for-formet til et cylindrisk filterelement med en diameter på 2,5 cm og en tykkelse på 0,33 cm, idet der anvendes PBT-fibre med en gennemsnitlig diameter på 2,6 μιη og med en massefylde på 1,38 g/cm3, hvilke fibre er blevet 30 overflademodificeret i overensstemmelse med de metoder, der er beskrevet i US patentskrift nr. 4.880.548, under anvendelse af en blanding af hydroxyethylmethacrylat og methacryl-syremonomere i et vægtforhold på 0,3:1. Det porøse medium har en CWST-værdi på 95 dyn/cm og et zeta-potentiale på I

35 -11,4 millivolt ved plasmaets pH-værdi (7,3). Fiberoverflade arealet er 0,52 m2, og hulrumsrumfanget er 80%.

I DK 175916 B1 I

I 64 I

I Det porøse medium til fjernelse af leucocyter fra I

H PRC beregnes, i overensstemmelse med de i det foregående I

angivne ligninger (3) og (4), til opnåelse af en leucocyt- I

fjernelseseffektivitet, der er bedre end log 3 (dvs. >99,9%'s I

5 formindskelse af leucocytindholdet) . Dette opnås ved anven- I

delse af 3,4 g PBT-fiber med en diameter på 2,6 μτη, ca. 13% I

mere fiber end krævet ifølge ligningerne (3) og (4), og til I

yderligere forøgelse af leucocytfjernelseseffektiviteten I

formindskes hulrumsrumfanget til 81%. Disse ændringer bringer I

10 effektiviteten op på mere end log 4, dvs. op mere end 99,99%. I

Når PRC udpresses gennem dette filtermedium indeholdt i et I

hus med en diameter på 6,4 cm, opnås der strømningstider i I

I det ønskede område fra 10 til 40 minutter ved et påsat tryk I

på 90 mm Hg. Fiberoverfladerne er blevet modificeret på den I

15 måde, der er beskrevet i US patentskrift nr. 4.925.572, I

idet der anvendes en blanding af hydroxyethylmethacrylat og I

I methylmethacrylat i et vægtforhold på 0,27:1. Det porøse I

medium har en CWST-værdi på 66 dyn/cm. I

Det ovenfor beskrevne PRC-porøse medium har foran I

20 sig anbragt et for-filter bestående af fem lag PBT-smel- I

teblæst væv, der er oplagt i den i det følgende angivne I

orden til en total tykkelse på 0,25 cm: I

Vægt Fiberdiameter I

I 2 5 Kvalitet mq/cm^ um _ CWST I

I 2,0-0,6 0,002 12 50 I

I 2,0-1,0 0,002 9 50 I

I 2,5-3,5 0,003 4,5 66 I

I 5,6-7,1 0,006 3,0 66 I

I 30 5,2-10,3 0,006 2,6 66 . I

I I hvert af eksemplerne anvendes en enkelt enhed af I

I blod afgivet af en frivillig donor. Enheden af blod opsamles I

I i et blodopsamlingssæt udformet som vist i fig. l (uden det I

35 valgfri barrieremedium for røde blodlegemer), idet opsam- I

I lingsposen i sættet i forvejen er fyldt med 63 ml CPDA-an- I

DK 175916 B1 65 tikoagulationsmiddel. Det rumfang blod, der opsamles fra de forskellige donorer, er vist i søjle 1 i den følgende tabel II. Opsamlingssættet anbringes i centrifugekurven ifølge fig. 4 i overensstemmelse med almindelig blodbankpraksis, 5 men med den undtagelse, at PRC-filteret samles med støtten, der igen er anbragt på den øvre del af centrifugekurven, hvorved man sikrer PRC-filteret udenpå og over centrifugekurven .

Centrifugen roteres dernæst ved en hastighed, der 10 udvikler 2280 G <ved bunden af kurven) i 3 minutter, hvilket er tilstrækkeligt til at bevirke, at de røde blodlegemer sedimenterer i den nedre del af opsamlingsposen. Støtten fjernes derpå, og opsamlingsposen overføres, idet man drager omsorg for ikke at forstyrre dens indhold, til en plasma-15 ekstraktor, der er fjederpåvirket til udvikling af tryk på ca. 90 mm Hg. Brydning af forseglingen, der forbinder opsamlingsposen og PRP-filteret, og dernæst brydning af forseglingen, der forbinder PRP-filteret og satellitposen, tillader det PRP-ovenstående lag at strømme fra opsamlingsposen gennem 20 PRP-filteret ind i satellitposen. Efterhånden som PRP træder ud, stiger grænsefladen mellem PRC og PRP i opsamlingsposen, idet strømmen fortsætter i ca. 10 til 20 minutter, indtil alt PRP er passeret gennem PRP-filteret, på hvilket tidspunkt strømningen standser brat og automatisk, når den førende 25 kant at PRC-laget når PRP-filteret. Røret sammenklemmes derpå stødende op til opsamlingsposen og stødende op til satellitposen, og røret mellem de to klemmer og PRP-filteret opskæres. PRP-opsamlet i satellitposen behandles derpå under anvendelse af normale blodbankprocedurer til dannelse af 30 leucocytfattig PC og plasma. Rumfangene af PC og plasma er vist i tabel II sammen med antallet af resterende leucocyter i PC.

Opsamlingsposen, der nu kun indeholder de sedimenterede røde blodlegemer, fjernes fra plasmaekstraktoren, og 35 100 ml AS3-næringsopløsning, der er blevet anbragt i forvejen i den anden satellitpose, overføres i opsamlingsposen gennem L._ ...___

DK 175916 B1 I

PCR-filteret· Indholdet af opsamlingsposen sammenblandes I

derpå grundigt. Med et tryk på ca. 120 mm Hg påsat ved tyn- I

gdekraftens hjælp gøres PRC i opsamlingsposen derpå leuco- I

cytfattig ved at lede den gennem PRC-filteret til satellit- I

5 posen. PRC er herefter tilgængelig til transfusion i en I

patient efter behov. Rumfanget, hæmatokrit-værdier og antal- I

let af resterende leucocyter i PRC er angivet i tabel II. I

De leucocyt-værdier, der er angivet i tabellen, af- I

spejler følsomheden af de metoder, der anvendes til bestem- I

10 melse af antallet af resterende leucocyter i PRC- og PC- I

udstrømningerne. Der påvises faktisk ingen leucocyter i de I

for leucocyter befriede udstrømmende fluida i nogen af ek- I

semplerne. Parallele forsøg under anvendelse af mere følsom- H

me, men mere besværlige bestemmelsesmetoder viser, at leuco- I

15 cytfjernelseseffektiviteter er ca. 10 til 100 gange bedre I

end angivet ved de data, der fremgår af tabellen. I

DK 175916 B1 67

Tabel II

Test 1 Test 2 Test 3 Test 4 Test 5

Helblod opsamlet [ml) 407 387 399 410 410 5 Helblod-Hct (%) 45 42,5 40 41 38,5 PRP-filtreringstid (min.) 16 11 14 15 19 PRP-rumfang (ml) 211 173 196 177 232 10 PC-rumfang (ml) 47 52 49 69 61

Rest-WBC-PC* <l,0xl05 <l,lxl05 <-1,1x105 <l,5xl05 <l,3xl05 PRC-filtrerings- tid (min.) 15 18 11 11 12 15 PRC-rumfang (ml) 285 318 301 306 288 PRC-Hct (%) 64,5 67 51 52,5 60,5

Rest-WBC-PRC* <7,3xl06 <8,0xl06 <7,5xl06 <7,7xl06 <7,2xl06 * pr. enhed 20

Claims

68 I DK 175916 B1 I PATENTKRAV. I

1. Behandlingssystem for et biologisk fluidum af den I art, der omfatter en første beholder (11) , en anden beholder I (41) og en tredie beholder (18), hvor den første beholder I 5 (11) står i fluid forbindelse med den tredie beholder (18), I idet et porøst medium (17) er indskudt mellem den første I beholder (11) og den tredie beholder (18), hvor det porøse I medium (17) omfatter et leucocytfjernelsesmedium, og den I anden beholder (41) står i fluid forbindelse med den første I 10 beholder (11), kendetegnet ved, at et yderligere I porøst medium (12, 13) er indskudt mellem den første beholder I (11) og den anden beholder (41) i et lukket system, idet I det yderligere porøse medium (12, 13) omfatter et leucocyt- I fjernelsesmedium eller et kombineret leucocytfjernelses- og I 15 barrieremedium for røde blodlegemer. I

2. System ifølge krav 1, kendetegnet ved, I at det porøse medium (17) og det yderligere porøse medium I (12, 13) omfatter fibre. I

3. System ifølge krav 2, kendetegnet ved, I 20 at det porøse medium (17) og det yderligere porøse medium I (12, 13) indeholder fibre, der er blevet modificeret ved I udsættelse for en monomer indeholdende en polymeriserbar I gruppe og en hydroxylholdig gruppe . I

4. System ifølge krav 3, kendetegnet ved, I 25 at fibrene i det første porøse medium (17) og/eller det yder- I ligere porøse medium (12, 13) er blevet modificeret med en I blanding af monomerer indeholdende hydroxyethylmethacrylat I og methacrylsyre. I

5. System ifølge krav 4, kendetegnet ved, I 30 at vægtforholdet mellem methacrylsyre og hydroxyethylmeth- I acrylatmonomer i den modificerende blanding ligger mellem I 0,01:1 og 0,5:1. I

6. System ifølge ethvert af kravene 1-5,kende- I tegnet ved, at det yderligere porøse medium (12, 13) I 35 er et kombineret leucocytfjernelsesfilter og barrieremedium I for røde blodlegemer og tillader blodplader at passere igen- I 69 DK 175916 B1 nem, indtil røde blodlegemer blokerer mediet.

7. System ifølge ethvert af kravene 1-6, kendetegnet ved, at det yderligere porøse medium (12, 13) har et zeta-potentiale på fra -3 til -30 millivolt ved en 5 pH-værdi på 7,3.

8. System ifølge ethvert af kravene 1-7, kendetegnet ved, at det yderligere porøse medium (12, 13) har en CWST-værdi på mere end 70 dyn/cm.

9. System ifølge ethvert af kravene 1-7, kende-10 tegnet ved, at det porøse medium (17) har en CWST- værdi på mere end 53 dyn/cm. 1

10. System ifølge ethvert af kravene 1-9, kendetegnet ved, at det omfatter mindst ét gasindtag (53) .

11. System ifølge ethvert af kravene 1-10, ken detegnet ved, at det omfatter mindst ét gasudtag (54) .

12. Fremgangsmåde til behandling af et biologisk fluidum af den art, der omfatter adskillelse af det biologi - 20 ske fluidum i et overliggende lag og et sedimentlag og passage af sedimentlaget af det biologiske fluidum gennem et porøst medium (17), hvor det porøse medium (17) indeholder et leucocytfjernelsesmedium, kendetegnet ved, at -man leder det overliggende lag af det biologiske fluidum 25 gennem et yderligere porøst medium (12,13) i et lukket system, hvor det yderligere porøse medium (12,13) omfatter et leucocytf jernel sesmedium eller et kombineret leucocytf j emelses- og barrieremedium for røde blodlegemer.

13. Fremgangsmåde ifølge krav 12, kendete g-30 net ved, at der indføres gas gennem et gasindtag (53).

14. Fremgangsmåde ifølge ethvert af kravene 12-13, kendetegnet ved, at der uddrives gas gennem et gasudtag (54).

15. Fremgangsmåde ifølge ethvert af kravene 12-14, 35 kendetegnet ved, at passage af det biologiske fluidum gennem det yderligere porøse medium (12, 13) omfatter I DK 175916 B1 I I I I passage af det overliggende lag gennem et kombineret leuco- I I cytfjernelsesmedium og barrieremedium for røde blodlegemer, I indtil mediet er blokeret. I

16. Biologisk fluidumbehandlingssystem af den art, I m 5 der omfatter en første beholder (11), en anden beholder . I I (41) og en tredie beholder (18) , hvor den første beholder I I . (11) er i fluid forbindelse med den tredie beholder (18) , I I idet et porøst medium (17) er indskudt mellem den første I I beholder (11) og den tredie beholder (18), hvor det porøse ; I I 10 medium (17) indeholder et leucocytfjernelsesmedium, og den ! I I anden beholder (41) er i fluid forbindelse med den første I I beholder (11)»kendetegnet ved, at et barriererne- I I dium for røde blodlegemer (12, 13) er indskudt mellem den I I første beholder (11) og den anden beholder (41) i et lukket I I 15 system. I

17. System ifølge krav 16, kendetegnet I I ved, at det porøse medium (17) og barrieremediet for røde I I blodlegemer (12, 13) indeholder fibre. I

18. System ifølge krav 17, kendetegnet I I 2 0 ved, at det porøse medium (17) og barrieremediet for røde I I blodlegemer (12, 13) indeholder fibre, der er blevet modifi- I I ceret ved udsættelse for en monomer indeholdende en polymeri- I serbar gruppe og en hydroxylholdig gruppe. I

19. System ifølge krav 18, kendetegnet I I 25 ved, at fibrene i det porøse medium (17) og/eller barriererne- I I diet for røde blodlegemer (12, 13) er blevet modificeret I I med en blanding af monomerer indeholdende hydroxyethylmeth- I I acrylat og methacrylsyre. I

20. System ifølge ethvert af kravene 16-19, k e η- I I 30detegnet ved, at barrieremediet for røde blodlegemer I I (12, 13) tillader blodplader at passerer igennem, indtil I I røde blodlegemer blokerer mediet. I

21. System ifølge ethvert af kravene 16-20, k e η- I I detegnet ved, at barrieremediet for røde blodlegemer I I 35 (12, 13) har et zeta-potentiale fra -3 til -30 millivolt I I ved en pH-værdi på 7,3. I ί 71 DK 175916 B1

22. System ifølge ethvert af kravene 16-21, kendetegnet ved, at barrieremediet for røde blodlegemer (12,13) har en CWST-værdi på mere end 70 dyn/cm.

23. System iflge ethvert af kravene 16-21, k e n-5 detegnet ved, at det første porøse medium (17) har en CWST-værdi på mere end 53 dyn/cm.

24. System ifølge ethvert af kravene 1-11 og 16-23, kendetegnet ved, at det biologiske fluidum er et blodprodukt.

25. System ifølge ethvert af kravene 1-11 og 16-24, kendetegnet ved, at systemet er et lukket sterilt system.

26. Fremgangsmåde til behandling af et biologisk fluidum af den art, der omfatter adskillelse af det biolo- 15 giske fluidum i et overliggende lag og et sedimentlag og passage af sedimentlaget af det biologiske fluidum gennem et porøst leucocytfjernelsesmedium, kendetegnet ved, at man leder det overliggende lag af det biologiske fluidum gennem et barrieremedium (12,13) for røde blodlegemer 20. et lukket system.

27. Fremgangsmåde ifølge krav 26, kendetegnet ved, at der indføres af gas gennem et gasindtag (53).

28. Fremgangsmåde ifølge ethvert af kravene 26-27, kendetegnet ved, at der uddrives af gas gennem 25 et gasudtag (54).

29. Fremgangsmåde ifølge ethvert af kravene 26-28, kendetegnet ved, at passage af det biologiske fluidum gennem barrieremediet for røde blodlegemer (12, 13) omfatter passage af det overliggende lag gennem barrierelaget 30 for røde blodlegemer, indtil mediet er blokeret.

30. Fremgangsmåde ifølge ethvert af kravene 12-15 og 26-29, kendetegnet ved, at det biologiske fluidum er et blodprodukt.

31. Fremgangsmåde ifølge ethvert af kravene 12-15 og 35 26-30, kendetegnet ved, at man behandler det biologiske fluidum i et lukket sterilt system.

72 I DK 175916 B1 I

32. Fremgangsmåde ifølge ethvert af kravene 12-15 og I 26-31, kendetegnet ved, at man behandler det I biologiske fluidum indenfor ca. 8 timer fra det tidspunkt, I hvor det biologiske fluidum udtages fra et legeme. I

33. Fremgangsmåde til behandling af et biologisk flui- I dum, af den art, der omfatter passage af et biologisk fluidum I fra en første beholder gennem et første porøst medium, hvor I det første porøse medium indeholder et leucocytfjernelses- I medium, og adskillelse af det for leucocyter befriede biolo- I 10 giske fluidum i et overliggende lag (31) og et sedimentlag I (32), kendetegnet ved, at man leder det overlig- I gende lag (31) gennem et andet porøst medium, hvor det andet I porøse medium indeholder mindst ét af et leucocytf jernelses- I medium (13), et barrieremedium for røde blodlegemer (12) og I 15 et kombineret leucocytfjernelses- og barrieremedium for I røde blodlegemer (12). I