[go: up one dir, main page]

DK160711B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af chirale 2-(2-benzyl-3-mercaptopropionyl)amino-1-alkanolderivater eller chirale 2-(2-benzyl-3-mercaptopropionyl)amino-4-methylthiosmoersyrer eller farmaceutisk acceptable kationsalte af syrerne - Google Patents

Analogifremgangsmaade til fremstilling af chirale 2-(2-benzyl-3-mercaptopropionyl)amino-1-alkanolderivater eller chirale 2-(2-benzyl-3-mercaptopropionyl)amino-4-methylthiosmoersyrer eller farmaceutisk acceptable kationsalte af syrerne Download PDF

Info

Publication number
DK160711B
DK160711B DK221182A DK221182A DK160711B DK 160711 B DK160711 B DK 160711B DK 221182 A DK221182 A DK 221182A DK 221182 A DK221182 A DK 221182A DK 160711 B DK160711 B DK 160711B
Authority
DK
Denmark
Prior art keywords
acid
benzyl
amino
chiral
mercaptopropionyl
Prior art date
Application number
DK221182A
Other languages
English (en)
Other versions
DK221182A (da
Inventor
Jasjit Singh Bindra
Original Assignee
Pfizer
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pfizer filed Critical Pfizer
Publication of DK221182A publication Critical patent/DK221182A/da
Publication of DK160711B publication Critical patent/DK160711B/da

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C319/00—Preparation of thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides
    • C07C319/14—Preparation of thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides of sulfides
    • C07C319/20—Preparation of thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides of sulfides by reactions not involving the formation of sulfide groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C59/00—Compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
    • C07C59/40—Unsaturated compounds
    • C07C59/58—Unsaturated compounds containing ether groups, groups, groups, or groups
    • C07C59/64—Unsaturated compounds containing ether groups, groups, groups, or groups containing six-membered aromatic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/50—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/51—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C323/60—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton with the carbon atom of at least one of the carboxyl groups bound to nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C327/00—Thiocarboxylic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C57/00—Unsaturated compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C57/52—Unsaturated compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms containing halogen
    • C07C57/58—Unsaturated compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms containing halogen containing six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C57/00—Unsaturated compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C57/52—Unsaturated compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms containing halogen
    • C07C57/58—Unsaturated compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms containing halogen containing six-membered aromatic rings
    • C07C57/60—Unsaturated compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms containing halogen containing six-membered aromatic rings having unsaturation outside the rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

i i
DK 16071 1 B
Opfindelsen angår en analogifremgangsmåde til fremstil- ling af hidtil ukendte chirale 2-(2-benzyl-3-mercapto- ! propiony1)-amino-l-alkanoler med de i krav l's indledning angivne formler I eller II eller chirale 2-(2-ben- j 5 zy1-3-mercaptopropionyl)amino-4-methylthiosmørsyrer med de i krav l's indledning angivne formler III eller IV eller farmaceutisk acceptable kationsalte af syrerne, hvilke forbindelser har gavnlige CNS (centralnervesystem ) -vi rkninger , herunder klinisk anvendelighed som 10 analgetica eller antikonvulsive midler eller til behand ling af forstyrrelser, hvorved endogene enkephalin-ni-veauer er under det normale. Det antages, at disse aktiviteter formidles via disse forbindelsers evne til at inhibere enkephalinase, en dipeptidylcarboxypeptidase, 34 15 som specifikt spalter Gly -Phe -bindingen i enkephali- ner. Enkephalinerne er forbindelser, som forstås at være signal-overførende forbindelser inden for centralnervesystemet. Inhibitorer for enkephaliner har nyttig CN'S-aktivitet.
20 Roques et al. [Nature 288, side 286-288 (1980)] har for nyligt rapporteret, at N-(2-benzyl-3-mercaptopropionyl)-glycin ("thiorphan") er en specifik enkephalinase-inhi- j bitor. Denne forbindelse rapporteres at udløse analgetisk j {antinociceptiv) aktivitet hos mus ved den såkaldte varm- | 25 plade-spring-prøvning, men ikke ved den såkaldte hale tilbagetrækningsprøvning.
Forbindelser med den meget brede formel
Rd
Rb RC I-(CH) aii I f q R -S-(CH)p-CH-C0-N-kCQRe i hvori
Ra er H eller RfC0, b c R og R er H, alkyl eller phenylalkyl, 2
DK 16071 1 B
er H, OH eller alkyl,
Re er OH, alkoxy eller ΝΗ»,
f L
R er alkyl, phenyl eller phenylalkyl, p er 0, 1 eller 2, og 5 q er 1 - 3, er blevet rapporteret af Ondetti et al. [US patentskrift nr. 4 046 889] som inhibitorer for angiotensin-omdannende enzym og nyttige som hypotensive midler. Ondetti et al.
definerer en undergruppe af "bredt foretrukne" forbindelser
Id c 10 som inkluderende R og R forskellige fra phenylalkyl, og "Særligt foretrukne" derivater er yderligere begrænset til prolin-derivater (dvs. q = 2, R^ = H). En forbindelse tilhørende denne klasse med formlen j*3 f~\ HSCH2
® COOH
er blevet tildelt det generiske navn captopril.
15 Analogifremgangsmåden ifølge opfindelsen er ejendommelig ved det, der er angivet i krav l's kendetegnende del.
Ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstilles på den ene side chirale 2-(2-benzyl-3-mercaptopropionyl)amino-1-alkanoler med de i krav l's indledning angivne formler I 20 og ii. Af særlig værdi er de forbindelser, hvori n er 2, m er 0, og R'L er methyl. Inden for denne undergruppe er den foretrukne værdi af R hydrogen, og de mest værdsatte forbindelser er dem, hvori X er p-chlor, p-methoxy eller hydrogen.
25 Ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstilles på den anden side chirale 2-(2-benzyl-3-mercaptopropionyl)amino- 4-methylthiosmørsyrer med de i krav l's indledning angivne almene formler III og IV og farmaceutisk acceptable kat-ionsalte deraf. De mest foretrukne af disse forbindelser 3
DK 16071 1 B
er dem, hvori X er hydrogen.
De farmaceutisk acceptable kationsalte inkluderer alkalimetalsaltene, såsom natrium- og kaliumsaltene, jordalka-limetalsaltene, såsom calcium- og magnesiumsaltene, alu-5 miniumsaltene, ammoniumsaltene og salte med organiske baser, f.eks. aminer, såsom benzathin (N,N'-dibenzylethylen-diamin), cholin, diethanolamin, ethylendiamin, meglumin (N-methylglucamin), benethamin (N-benzylphenethylamin), di-ethylamin, piperazin og tromethamin (2-amino-2-hydroxy-10 methyl-1,3-propandiol). Andre salte, f.eks. dicyclohexyl-aminsaltene, der ikke almindeligvis betragtes som farmaceutisk acceptable, kan også anvendes med henblik på isolering, rensning eller prøvning.
De ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser er enke-15 phalinase-enzym-inhibitorer. Det er ved denne mekanisme, at disse forbindelser antages at fungere som analgetiske og antikonvulsive midler hos pattedyr, herunder mennesket.
Forbindelserne kan anvendes til at lindre smerte (analgesia) eller forhindre kramper hos et pattedyr, ved at pattedyret 20 indgives en analgetisk eller antikonvulsiv mængde af en ifølge opfindelsen fremstillet forbindelse.
Hydroxy forbindelserne med formlerne I og II fremstilles let ved kobling af den passende, beskyttede mercaptosyre med den passende amin, dvs.
4
DK 16071 1 B
«C .
ps^fv0H +
CH2OH
<.
PS 1 f'»E 'm'
H u CH2OH
hvori R, X, n, m og R"*" har den i krav l's indledning angivne betydning, og P er en svovl beskyttende gruppe, såsom benzoyl eller acetyl, der selektivt fjernes ved et efterfølgende solvolyse-trin.
5 Koblingen af syren med aminen gennemføres ved en række forskellige metoder, som er velkendte inden for peptidkemien, idet der anvendes i hovedsagen molære ækvivalenter af syre og amin for at maksimere udbytterne og minimere eventuel acylering af alkoholen. I det foreliggende 10 tilfælde består en særligt hensigtsmæssig metode i simpelthen at omdanne syren til syrechlorid med et overskud af syrechlorid-dannede reagens (f.eks. oxalylchlorid, sulfonylchlorid) i et inert, lavtkogende opløsningsmiddel, såsom methylenchlorid. Temperaturen er ikke kritisk, men 15 temperaturer i området 20 - 50 °C foretrækkes (idet der 5
DK 16071 1 B
kræves moderat tryk ved den øvre ende af området, hvis methylenchlorid anvendes som opløsningsmiddel). Syre-chloridet isoleres frit for opløsningsmiddel og overskud af reagens ved simpel inddampning i vacuum, genopløses i 5 et inert opløsningsmiddel og sættes langsomt til en opløsning af aminoalkoholen og mindst ét molært ækvivalent af en tertiær amin, såsom triethylamin eller N-methylmorpho-lin. Temperaturen er igen ikke kritisk, men f.eks. 0 - 50 °C er velegnet. Temperaturer ved den laveste ende af området 10 foretrækkes. Hvis den til syntesen anvendte syre er ra- cemisk, er det derpå almindeligvis muligt at adskille det resulterende par af diastereoisomere (epimere) ved standardmetoder som fraktioneret krystallisation eller chro-matografi. Alternativt kan de diastereoisomere adskilles 15 ved de samme metoder efter fjernelse af den beskyttende gruppe. Når en bestemt diastereoisomer ønskes, fortrækkes det at anvende den tilsvarende chirale syre som udgangsmateriale. I hvert tilfælde fjernes den beskyttende gruppe P selektivt ved standardmetoder til solvolyse, hvorved 20 der almindeligvis anvendes en stærk base i vand og/eller en alkohol, eventuelt i nærvær af et reaktionsinert, med vand blandbart organisk opløsningsmiddel. En foretrukken fremgangsmåde er at omsætte acylthio-forbindelsen med mindst ét molært ækvivalent natriummethoxid i vandfrit 25 methanol. Almindeligvis anvendes i praksis ikke mere end et 20¾ molært overskud af methoxidet. Temperaturen er ikke kritisk (f.eks. er 0 - 50 °C velegnet), og hensigtsmæssigt anvendes omgivelsernes temperatur.
De racemiske syrer, der kræves til den ovennævnte syntese, 30 fremstilles let ved kondensation af en thiocarboxylsyre med den passende 3-phenyl-2-methylenpropionsyre:
PSH + OH PS
O H 8 6
DK 16071 1 B
De chirale former af disse syrer opnås, om ønsket, ued dannelse af salte med en chiral amin (f.eks. d(+)-a-methyl-benzylamin) og efterfølgende anvendelse af velkendt fraktioneret krystallisationsteknik til adskillelse af de dia-5 stereoisomere salte.
De chirale aminoalkoholer, der kræves til de omhandlede synteser, er i mange tilfælde kommercielt tilgængelige. Alternativt fremstilles de ved esterificering/hydrid-reduktion af chirale syrer/estere, som kan fås kommer-10 cielt eller fremstilles ved litteraturmetoder, dvs.:
R R R
hL/(CH,) -S-R1 HSK/(CH,) -S-R1 HH\/( CH,) -S-R1 T-H <°>m-► PH (°>M—> pH 'l0),n
COOH ; COOR CH2OH
hvori R, n, m og har den i krav 1 angivne betydning. Alternativt opnås den chirale aminoalkohol ved standardadskillelsesmetoder under anvendelse af en chiral amin i syretrinnet eller en chiral syre i syre-, ester- eller 15 alkoholtrinnet.
Carboxylsyrerne med formlerne III og IV fremstilles på lignende måde ved kobling af en beskyttet mercaptosyre med L-methioninester, nemlig: SX E2Rv^(CH2)2SCH3 ]''Ή pq I ·) COOa
H
(CH2) 2SCH3 COOR2 2 7
DK 16071 1 B
hvori P og R har den i krav 1 angivne betydning. Den 2 simplest mulige ester, dvs. R = methyl, er fuldstændig velegnet til dette formål. Koblingen gennemføres som beskrevet ovenfor for koblingen af en beskyttet mercaptosyre 5 med aminoalkoholer. I dette tilfælde kan der imidlertid, om ønsket, anvendes et overskud af syrechloridet (eller en anden egnet aktiveret form af syren), da der ikke forekommer nogen alkoholgruppe i aminoesteren. Tidligere anførte bemærkninger vedrørende adskillelse af diastereo-10 isomere eller anvendelse af chirale syrer som udgangsmaterialer gælder lige såvel i dette tilfælde. De beskyt- 2 tende grupper P og R fjernes ligeledes ved solvolyse, almindeligvis samtidigt ved anvendelse af mindst to ækvivalenter af en stærk base. En fremgangsmåde, som er sær-15 lig velegnet, består i at foretage hydrolyse ved anvendelse af et lille overskud af vandigt natriumhydroxid i et med vand blandbart reaktionsinert opløsningsmiddel, f.eks. en lavere alkohol eller 1,2-dimethoxyethan.
De farmaceutisk acceptable kationsalte af forbindelserne 20 med formlerne III og IV fremstilles let ved opvarmning af syreformerne med en passende base, sædvanligvis ét ækvivalent, i et fælles opløsningsmiddel. Typiske baser er natriumhydroxid, natriummethoxid, natriumethoxid, natrium-hydrid, kaliummethoxid, magnesiumhydroxid, calciumhydroxid, 25 ammoniumhydroxid, benzathin, cholin, diethanolamin, ethy-lendiamin, meglumin, benethamin, diethylamin, piperazin og tromethamin. Saltet isoleres ved koncentrering til tørhed eller ved tilsætning af et ikke-opløsningsmiddel. I nogle tilfælde kan salte fremstilles ved blanding af en 30 opløsning af syren med en opløsning af et andet salt af kationen (f.eks. natriumethylhexanoat, magnesiumoleat) under anvendelse af et opløsningsmiddel, hvori det ønskede kationsalt udfældes eller på anden måde kan isoleres ved koncentrering og/eller tilsætning af et ikke-opløsnings-35 middel. Når et salt, som ikke almindeligvis anses for at 8
DK 16071 1 B
være farmaceutisk acceptabelt, anvendes til isolering eller rensning, kan det let omdannes til den frie syreform ved syrning af en vandig opslæmning eller opløsning af saltet, ekstraktion i et med vand ublandbart organisk opløs-5 ningsmiddel og inddampning.
De ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser undersøges in vitro for inhibering af enkephalinase-enzym på følgende måde. Til fremstilling af enzymet fjernes hele hjernen (minus cerebellum) fra Sprague-Dawley CD hanrotter (Charles 10 River Breeding Laboratories, Inc., Wilmington, MA, U.S.A.j 200-250 g) efter halshugning. Vævet homogeniseres (Polytron, Brinkmann Instruments, Inc., Westbury, NY) i 30 voluminer (vægt/vol.) iskold 50 mM "Tris" [tris-(hydroxymethyl )methyl-amin-hydrochlorid, Fisher Scientific Co., Fair Lawn, NO, 15 U.S.A.1-HCl-puffer, pH 7,7. Homogenatet centrifugeres ved 50 000 G i 15 minutter. Pillen gensuspenderes i 50 mM "Tris"-HCl-puffer, pH 7,7 og centrifugeres ved 50 000 G i 15 minutter. Den resulterende pille gensuspenderes og centrifugeres tre gange til som beskrevet ovenfor. Membranpillen 20 dispergeres i 15 voluminer 50 mM "Tris"-HCl-puffer, pH 7,7, indeholdende 1% "Triton X-100" (Rohm and Haas, Philadelphia, PA) og inkuberes ved 37 °C i 45 minutter. Efter centrifugering ved 100 000 G i 60 minutter fryses de solubiliserede enzymer i 2 ml aliquoter (dette præparat kan opbevares 25 frosset i 3 måneder).
Til prøvning af inhibitorer for inhibering af enkephali-nase, inkuberes blandinger sammensat af 90 pi 50 mM "Tris"-HCl-puffer, pH 7,7, indeholdende puromycin-dihydrochlorid (Sigma Chemical Co., St. Louis, M0, U.S.A.), 3,2 mM, 200 pi 30 solubiliserende puffer (fra sidste trin af enzymfremstilling), 5 μΐ inhibitor (forskellige koncentrationer, opløst i vand), 200 ul enzym og 5 jul ^H-leucin-enkephalin (26,8 Ci/mmol,
New England Nuclear, Boston, MA, U.S.A.), 144 nM, in triplo i 1 time ved 37 °C i 1,8 ml polyethylenglas (Beckman 9
DK 16071 1 B
Microfuge tubes, Beckman Instruments, Inc., Palo Alto, CA, U.S.A.). Et sæt kontrolglas indeholder kogt enzym (opvarmet til 100 °C i 10 minutter) til blindprøvning.
Reaktionen standses ved kogning af glassene i 10 minutter 5 efterfulgt af centrifugering i 1 minut i "Beckman Micro-fuge"-centrifugen. En 10 pi aliquot af hver supernatant anbringes som plet på en tyndtlagschromatografi-plade ("Silica Gel 60", 20 x 20 cm, E. Merck, Darmstadt, FR Tyskland) under anvendelse af 1-8 prøver pr. plade. 10 pi 10 af en standardblanding bestående af 0,4 mg/ml tyrosin (tyr, Mann Research Laboratories, Inc., Nev/ York, NY, U.S.A.), 1 mg/ml L-tyrosylglycin (tyr-gly Sigma), 1 mg/ ml L-tyrosylglycylglycin (tyr-gly-gly, Sigma) og 1 mg/ml leucin-enkephalin (leu-E, Calbiochem-Behring Corp., La 15 Jolla, CA, U.S.A.) anbringes som plet oven på hver inku-bationsblandingsplet såvel som separat på hver plade for at hjælpe med til zoneidentifikation.
Pladerne tørres og anbringes i overdækkede glastanke ækvilibreret med 100 ml isopropanol/ethylacetat/5% eddike-20 syre (2:2:1). Efter udvikling af tyndtlagschromatografi-pladerne blev de adskilte produkter gjort synlige ved sprøjtning med en opløsning af ninhydrin i acetone (0,5%, vægt/vol.) og opvarmning i 10 minutter til 100 °C i en vacuumovn. R^-værdier af standardmarkører er: tyr 0,33, 25 tyr-gly 0,20, tyr-gly-gly 0,13, leu-E 0,47. De radioaktive pletter identificeres ved hjælp af de tilsatte markører og skrabes ind i scintillationampuller, hvortil der sættes 1 ml ethanol efterfulgt af 10 ml "Aquasol-2" (Nev/ England Nuclear). Ampullerne opbevares natten over og tælles for 30 radioaktivitet i en væskescintillationstæller. Tyr-gly-gly- ! dannelse er baseret på forskellen mellem totale tællinger pr. minut for denne tyndtlagschromatografizone minus den tilsvarende værdi opnået ved anvendelse af kogt enzym (blindprøve). Aktiviteten rapporteres som den inhiberende 35 molære koncentration (IC^g, M), som vil inhibere enzym-
DK 16071 1 B
ία
aktiviteten til 50?ό af dens normale værdi. Typiske resultater opnået med forskellige forbindelser fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen er anført i tabel I
1 sammenligning med thiorphan ved den samme prøvning.
TABEL I
Enkephalinase-inhiberinq F orbindelse
Formel X £ jn jn R_^ IC<-q, M
I Η H 2 0 CH3 4,8 x 10-7 II Η H 2 0 CH3 9,6 x 10-6 III - - 9,1 x 10“9 IV _____ 7 x 10-8 -8 - thiorphan - 1,5 x 10 5 Til prøvning for den analgetiske aktivitet af de ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser anvendes en kemisk nociceptiv stimulus, nemlig blokade af mavestrækning efter phenylbenzoquinon (PBQ). Caru/orth CF-1 musestammen anvendes, baseret på den kendsgerning, at denne stamme 10 udviser en særlig klar strækningsreaktion. Dyrene, som skal anvendes, suites i 15-16 timer før forsøgets start.
Der anvendes 15 mus (grupper på 5) med en vægt på 11-15 g pr. dosisniveau. Forbindelserne indgives ad den orale eller subcutane vej. Behandlingstiderne forud er 1 time 15 (p.o.) og 20 minutter (s.c.). Par af mus injiceres med 2 mg/kg PBQ i.p. og anbringes i en lucitkasse (30 x 18 x 24 cm) holdt ved 40 °C ved hjælp af et termostatkontrolleret vandbad. Begyndende 5 minutter efter iagttages dyrene i 5 minutter, og antallet af mavestrækn:ingsreaktioner 20 pr. dyr optegnes. En strækning anses for at repræsentere en mellemliggende kontraktion af bugen, strækning af baglem, bækkenrotation eller opisthotonos (musens bug berører burets gulv og slæbes burets længde). Graden af analgetisk beskyttelse udregnes på basis af undertrykkel- 11
DK 16071 1 B
sen af vridning i forhold til kontroldyr prøvet den samme dag (¾ MPE). Typiske resultater opnået med forbindelser fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen er vist i tabel II. Denne prøvning afspejler forbindelsernes ende-5 lige kliniske anvendelighed som analgetiske midler.
TABEL II
% Blokade af mavestrækning (?ί MPE) _efter phenylbenzoquinon
Forbindelse _ . , - , Dosis (s.c.
Formel _X F? ri m R_ % MPE mq/kq_ I Η H 2 0 CH3 100 320 69 233
23 170 I
I 4-0CH3 H 2 0 CH3 62 320 I 4-C1 H 2 0 CH3 86 320 II Η H 2 0 CH3 (a) 320 II 4-0CH3 H 2 0 CH3 46 320 II 4-C1 H 2 0 CH3 75 320 III _____ 57 160 IV _____ 48 160 (a) Ingen signifikant aktivitet bemærket ved dette dosisniveau
Den antikonvulsive aktivitet af de ifølge opfindelsen frem- o i stillede forbindelser bestemmes ved prøvning pa mus, nemlig Charles River hanner, svejtsisk CD-stamme (17-21 g), sultet i 18 timer før prøvningen. Grupper af mus behand-10 les med et område af dosisniveauer af prøveforbindelserne i og 1 time senere med supramaksimalt elektrokonvulsivt shock, udøvet i 0,2 s ved 50 mA, 60 Hz, igennem transcor-neale elektroder. Efter påføringen af den elektriske stimulus iagttages hver mus i 10 sekunder for forekom-15 sten eller fraværet af tonisk strækning af baglem. Alle
DK 160711 B
12 kontrolmus udviser sådanne kramper. Data er sammenfattet i tabel III. Blokade af supramaksimalt elektrokonvulsivt shock hos mus er en almindelig laboratorieprøvning for klinisk anvendelighed som antikonvulsivt middel, og visse 5 kendte antikonvulsive midler viser aktivitet ved denne prøvning. Det vil yderligere bemærkes, at thiorphan var inaktivt, selv i en meget højere dosis.
TABEL III
Anticonvulsiv virkning af enkephalinase-inhibitorer over for supramaksimalt elektro-konvulsivt shock hos mus_
Forbindelse Ε0ςη
Formel X £ m R_ (s. c ♦ , mq/kq) I Η H 2 0 CH3 178 III ----- 74,1 IV _____ 140,8 - thiorphan - 320
Hydroxyderivaterne (formlerne I og II) er på basis af de ovenfor beskrevne enkephalinase-inhiberende og analgetiske 10 aktiviteter klinisk nyttige som analgetiske midler, dvs. til brug ved lettelse af smerte, medens syrederivaterne på bais af deres enkephalinase-inhiberende og antikonvulsive aktiviteter er klinisk nyttige til forhindring af kramper.
15 I hvert tilfælde kan de ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser sammensættes i en lang række farmaceutiske præparater, som indeholder derivatet alene eller i kombination med farmaceutiske bærere, såsom inerte faste fortyndingsmidler, vandige opløsninger eller forskellige ikke-20 toxiske organiske opløsningsmidler og i doseringsformer, såsom gelatinekapsler, tabletter, pulvere, pastiller, sirupper, injicerbare opløsninger og lignende. Sådanne 13
DK 16071 1 B
bærere inkluderer vand, ethanol, gelatiner, laetose, stivelser, vegetabilske olier, petroleumvaseline, gummier, glycoler, talcum, benzoylalkoholer og andre kendte bærere for lægemidler. Om ønsket kan disse farmaceutiske præpa-5 rater indeholde yderligere materiale, såsom konserveringsmidler, befugtningsmidler, stabiliseringsmidler, glitte-midler, absorptionsmidler, puffermidler og isotoniske midler.
Derivaterne indgives en patient, som har behov for den be-10 stemte behandling, ad en række konventionelle indgivnings-veje, såsom oralt, intravenøst, intramuskulært eller sub-cutant. I almindelighed vil der fra starten blive indgivet små doser med en gradvis forøgelse i dosen, indtil det optimale niveau er bestemt. Imidlertid vil, som med ethvert 15 lægemiddel, den bestemte dosis, sammensætning og indgiv- ningsvej variere med den bestemte patients alder, vægt og reaktion og vil afhænge af lægens bedømmelse.
Ved det sædvanlige behandlingsforløb vil en total dosis af et derivat på fra omkring 0,1 til omkring 100 mg pr. dag i 20 enkelte eller opdelte doser give en effektiv behandling for den menneskelige patient. Når derivatet har en forlænget virkning, kan dosen indgives mindre hyppigt, såsom hveranden dag eller i én eller to delte doser pr. uge.
Fremgangsmåden ifølge opfindelsen belyses nærmere ved de 25 efterfølgende eksempler.
EKSEMPEL 1 14
DK 16071 1 B
Methyl-2S-(3-acetylthio-2R-benzylpropionylamino)-4-methyl- thiobutyrat_ og 5 Methyl-2S-(3-acetylthio-2S-benzylpropionylamino)-4-methyl- thiobutyrat_
Thioleddikesyre (10,65 g, 140,0 mmol) sættes til 2-benzyl-acrylsyre (10,0 g, 62,0 mmol), og den resulterende opløsning blev opvarmet til 90 °C under en nitrogenatmosfære i 10 1 time, ved hvilket tidspunkt silicagel-tyndtlagschromato- grafi (med ether som elueringsmiddel) viste, at reaktionen var i hovedsagen fuldført (R^ 0,3 for produkt, R^ 0,6 for udgangsmateriale). Reaktionsblandingen blev afkølet, og overskudet af thioleddikesyre blev fjernet under vacuum.
15 Remanensen blev inddampet azeotropt én gang med benzen, udrevet tre gange med hexan og dekanteret for at fjerne de sidste spor af thioleddikesyre. Den resterende røde olie blev straks opløst i methylenchlorid (25,0 ml) og behandlet med oxalylchlorid (21,8 g, 170,0 mmol). Opløsningen 20 blev opvarmet til 40 °C i en nitrogenatmosfære i 1 time, ved hvilket tidspunkt gasudviklingen var ophørt. Reaktionsblandingen blev afkølet, inddampet under vacuum og inddampet azeotropt med benzen én gang. Remanensen blev opløst i methylenchlorid (25,0 ml) og sat dråbevis i løbet af 0,5 25 time til en kold (0 °C) omrørt blanding af L-methionin-methylester-hydrochlorid (12,3 g, 61,6 mmol), methylenchlorid (75,0 ml) og triethylamin (14,51 g, 140,0 mmol).
Efter at tilsætningen var fuldført, blev reaktionsblandingen omrørt i 1 time ved stuetemperatur under en nitro-30 genatmosfære, ved hvilket tidspunkt tyndtlagschromatogra-fisk kontrol (ether) viste, at reaktionen var fuldført (R^ 0,48 og 0,51 for produkter, R^ 0,3 for udgangsmateriale). Reaktionsblandingen blev vasket med 2 N saltsyre (2 x 25,0 ml), vand (1 x 25,0 ml) og mættet natriumhydro- 15
DK 16071 1 B
gencarbonatopløsning (1 x 25,0 ml). Det organiske lag blev tørret over vandfrit magnesiumsulfat, filtreret og koncentreret under vacumm til opnåelse af 25,0 g af en blanding af de i overskriften angivne produkter som en 5 olie. Produktblandingen blev adskilt i to isomere ved middeltryks-væskechromatografi under anvendelse af en 7,5 g prøveblanding og eluering ved 241 kPa på en 25 mm x 1000 mm søjle med 20% ether/hexan, 25SS ether/hexan og 30% ether/hexan. Denne proces blev gentaget, indtil al 10 blandingen var adskilt. Der blev opnået methyl-2S-(3- acetylthio-2S-benzylpropionylamino)-4-methylthiobutyrat: 4,1 g (17,3% udbytte) farveløse krystaller, smp. 68-70 °C fra ether/hexan (1:1).
Analyse for C28H25°4NS2: 15 beregnet: C 56,37; H 6,57%; N 3,65; fundet: C 56,19; H 6,26; N 3,64.
og methyl-2S-(3-acetylthio-2R-benzylpropionylamino)-4-methylthiobutyrat: 5,4 g (22,8% udbytte) farveløse krystaller, smp. 65-67 °C fra ether/hexan (1:1).
20 Analyse for ^28^25^4^2: beregnet: C 56,37; H 6,57; N 3,65; fundet: C 56,48; H 6,35; N 3,68.
DK 160711 B
EKSEMPEL 2 16 2S-(2R-Benzyl-3-mercaptopropionylamino)-4-methylthio- smørsyre_ og 5 2S-(2S-benzyl-3-mercaptopropionylamino)-4-methylthio- smørsyre_
Produktblandingen af estere fra det forudgående eksempel (18,82 g, 49,0 mmol) i 1,2-dimethoxyethan (72,0 ml) blev omrørt ved stuetemperatur under en nitrogenatmosfære. Der 10 tilsattes 2 N natriumhydroxidopløsning (55,0 ml, 110 mmol), og den resulterende opløsning blev omrørt i 1 time, ved hvilket tidspunkt silicagel-tyndtlagschromatografi (9:1 chloroform/ethanol) viste, at reaktionen var fuldført (Rj. 0,2 for produkt; R^ 0,75 for udgangsmateriale). 1,2-15 Dimethoxyethan blev fjernet under vacuum, og remanensen gjort sur med 2 N saltsyre til pH 2. Remanensen blev ekstraheret med ethylacetat (3 x 100 ml), og de kombinerede ekstrakter blev tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Den tørrede opløsning blev koncentreret, hvorved 20 der blev opnået 16,4 g af et råt olieprodukt. Olien blev chromatograferet på 350 g silicagel (partikelstørrelse svarende til maskevidde 0,037-0,062 mm) under eluering med chloroform og derpå 1% ethanol/chloroform og endelig 2% ethanol/chloroform. Produktet blev isoleret som en 25 blanding af de to i overskriften angivne isomere: 3,4 g (21¾ udbytte) af et krystallinsk produkt, smp. 130-132 °C.
En omkrystallisation fra ethylacetat gav 2,3 g rent produkt, smp. 137-138 °C.
Analyse for ^25^21^3^^2: 30 beregnet: C 55,02; H 6,46; N 4,28; fundet: C 54,66; H 6,18; N 4,25.
DK 160711 B
EKSEMPEL 3 17
Dicyclohexylammonium-2S-(2R-benzyl-3-mercaptopropionyl-amino)-4-methylthiobutyrat_
En opløsning af methyl-2S-(3-acetylthio-2R-benzylpropio-3 nylamino)-4-methylthiobutyrat (0,5 g, 1,3 mmol) i 1,2-di-methoxyethan (1,9 ml) blev omrørt ved stuetemperatur under en nitrogenatmosfære. Der tilsattes 2 N natriumhydroxid-opløsning (1,3 ml, 2,6 mmol), og den resulterende opløsning blev omrørt i 1 time med tyndtlagschromatografisk 10 kontrol som i det forudgående eksempel. 1,2-Dimethoxy- ethan blev fjernet under vacuum, og remanensen gjort sur med 2 N saltsyre til pH 2. Den syrnede opløsning blev ekstraheret med ethylacetat (3 x 15 ml), og de kombinerede ekstrakter blev tørret over vandfrit magnesiumsulfat.
15 Den tørrede opløsning blev koncentreret, hvorved der blev opnået 484 mg af et råt olieprodukt. Olieproduktet blev omdannet til dicyclohexylamin-saltet i ether, hvorved der blev opnået 479 mg (72?ί udbytte) produkt, smp. 152-155 °C.
En omkrystallisation med isopropanol gav 171 mg rent pro-20 dukt, smp. 164-167 °C.
Analyse for ^5^21^3^25·^12^23^: beregnet: C 63,74; H 8,72; N 5,51; fundet: C 63,51; H 8,35; N 5,30.
EKSEMPEL 4 25 2S-(2S-Benzyl-3-mercaptopropionylamino)-4-methylthio- smørsyre_______ og dicyclohexylamin-salt
Ved proceduren fra det forudgående eksempel blev methyl-
DK 160711 B
18 2S-(3-acetylthio-2S-benzylpropionylamino)-4-methylthio-butyrat (1 g) omdannet til 939 mg af det i overskriften angivne produkt som en olie. Olien blev chromatograferet på 20 g silicagel (partikelstørrelse svarende til maske- j 5 vidde 0,037-0,062 mm) under eluering med ether, hvorved der blev opnået 716 mg (84¾ udbytte) rent i overskriften angivet produkt som en klar olie. En prøve på 565 mg af olien blev omdannet til dicyclohexylamin-saltet i ether, hvorved der blev opnået 565 mg produkt, smp. 136-141 °C.
10 En omkrystallisation med benzen gav 428 mg produkt, smp.
140-143 °C.
»
Analyse for ^5^21^3^2^*^12^23N: beregnet: C 63,74; H 8,72; N 5,51; fundet: C 63,96; H 8,58; N 5,29.
15 EKSEMPEL 5 2S-(3-Benzoylthio-2R-benzylpropiony1amino)-4-methyl- thio-l-butanol_ og 2S-(3-benzoylthio-2S-benzylpropionylamino)-4-methyl-20 thio-l-butanol_
En opløsning af 2-benzyl-3-benzoylthiopropionsyre (4,44 g, 14,8 mmol) i methylenchlorid (25,0 ml) blev omrørt ved stuetemperatur under en nitrogenatmosfære. Der tilsattes oxalylchlorid (9,3 g, 73 mmol), og den resulterende op-25 løsning blev opvarmet til 40 °C i 1 time, ved hvilket tidspunkt gasudviklingen ophørte. Reaktionsblandingen blev afkølet, inddampet under vacuum og inddampet azeo-tropt én gang med benzen til opnåelse af syrechloridet.
Det sidstnævnte blev opløst i methylenchlorid (25,0 ml) 30 og i løbet af 0,5 time sat dråbevist til en kold (0 °C) omrørt opløsning af 2S-amino-4-methylthio-l-butanol i 19
DK 16071 1 B
(2,0 g, 14,8 mmol) i methylenchlorid (50,0 ml) og triethyl-amin (1,65 g, 16,0 mmol). Efter at tilsætningen var fuldført, blev reaktionsblandingen omrørt i 1 time ved stuetemperatur under en nitrogenatmosfære. Reaktionen blev 5 kontrolleret ved tyndtlagschromatografi (silicagel) under anvendelse af 9:1 chloroform/ethanol, og efter 1 time var reaktionen fuldført (R^ 0,55 for produkterne; R^ 0,40 for udgangsmaterialet). Reaktionsblandingen blev vasket med 2 N saltsyre (2 x 25 ml), vand (1 x 25,0 ml) og mættet 10 natriumhydrogencarbonatopløsning (1 x 25,0 ml). Det organiske lag blev tørret over vandfrit magnesiumsulfat og koncentreret under vacuum, hvorved der blev opnået 5,4 g (87% udbytte) produkt, smp. 95-97 °C. En omkrystallisation fra ethylacetat gav en analytisk prøve af den i overskrif-15 ten angivne blanding af produkter, der smeltede ved 104-107 °C.
Analyse for ^2^27^3^2: beregnet: C 63,28; H 6,52; N 3,35; fundet: C 63,24; H 6,32; N 3,25.
20 EKSEMPEL 6 2S-(2R-Benzyl-3-mercaptopropionylamino )-4-methylthio- 1-butanol_ og 2S-(2S-benzyl-3-mercaptopropionylamino)-4-methylthio-25 1-butanol_
En opløsning af produktblandingen fra det forudgående eksempel (4,5 g, 10,8 mmol) i vandfrit methanol (50,0 ml) blev omrørt ved stuetemperatur under en nitrogenatmosfære.
Fast natriummethoxid (0,7 g, 12,96 mmol) tilsattes por-30 tionsvis i løbet af 10 minutter. Den resulterende opløs ning blev omrørt, og reaktionen kontrolleret ved tyndt-
DK 160711 B
20 lagschromatografi (silicagel) under anvendelse af 9:1 chloroform/ethanol. Efter 1 time var reaktionen fuldført (R^ 0,35 og 0,30 for produkterne; 0,40 for udgangsmaterialet). Reaktionsblandingen blev derpå inddampet un-5 der vacuum. Remanensen blev gjort sur med 2 N saltsyre til pH 2 og ekstraheret med ethylacetat (3 x 25,0 ml). De kombinerede ekstrakter blev tørret over vandfrit magnesiumsulfat og koncentreret under vacuum, hvorved der blev opnået 4,98 g af en rå olieagtig produktblanding. Produkt-10 blandingen blev chromatograferet på 150 g silicagel (partikelstørrelse svarende til maskevidde 0,037-0,062 mm) med chloroform som elueringsmiddel til opnåelse af to isomere: 2S-(2R-benzyl-3-mercaptopropionylamino)-4-methyl-thio-l-butanol, 0,564 g (16¾ udbytte) farveløse krystaller, 15 smp. 118-120 °C fra ether/petroleumsether;
Analyse for ci5H23°2NS25 beregnet: C 57,47; H 7,40; N 4,47; fundet: C 57,48; H 7,42; N 4,52.
og 2S-(2S-benzyl-3-mercaptopropionylamino)-4-methylthio-20 1-butanol, 0,6 g (17¾ udbytte) farveløse krystaller, smp. 67-69 °C fra ether/hexan.
Analyse for C25^23°2^S2: beregnet: C 57,47; H 7,40; N 4,47; fundet: C 57,43; H 7,20; N 4,42.
2S-[3-Benzoylthio-2R-(p-chlorbenzyl)propionylamino]- 4-methylthio-l-butanol_ EKSEMPEL 7 21
DK 16071 1 B
og 5 2S-[3-benzoylthio-2S-(p-chlorbenzyl)propionylamino]-4-methylthio-l-butanol_ 3-Benzoyl-2-(p-chlorbenzyl )propionsyre (6,34 g, 18,9 mmol) og oxalylchlorid (6,3 g, 4,5 ml, 51,6 mmol) i 40 ml meth-ylenchlorid blev opvarmet til 40 °C i 1 time. Reaktions-10 blandingen blev afkølet og inddampet til tørhed og inddampet azeotropt med benzen til opnåelse af det tilsvarende syrechlorid. 2S-Amino-4-mercapto-l-butanol (2,56 g, 18,9 mmol) og triethylenamin (2,76 ml, 19,8 mmol) blev kombineret i 50 ml methylenchlorid og afkølet til 0 °C.
15 Det ovennævnte syrechlorid blev opløst i 10 ml methylenchlorid og sat dråbevis til den afkølede opløsning. Reaktionsblandingen blev opvarmet til stuetemperatur, om-rørt i 16 timer, derpå vasket i rækkefølge med to 25 ml portioner 2 N saltsyre, 25 ml vand og 25 ml mættet na-20 triumhydrogencarbonatopløsning, tørret over vandfrit magnesiumsulfat, filtreret, inddampet til tørhed, og remanensen krystalliseret med ether, hvorved der blev opnået 6,69 g af de i overskriften angivne isomere som en blanding; smp. 116-121 °C; ir (KBr) 1645, 1659 cm 25 Inddampning af modervæsken gav yderligere 1,6 g mindre rent produkt.
2S-[2R-(p-Chlorbenzyl)-3-mercaptopropionylamino]-4- methylthio-l-butanol_
DK 16071 1 B
EKSEMPEL 8 22 og 2S-[2S-(p-chlorbenzyl)-3-mercaptopropionylamino]-4-5 methylthio-l-butanol_
Produktblandingen fra det forudgående eksempel (6,67 g, 14,76 mmol) blev solvolyseret ifølge eksempel 6, hvorved der blev opnået 6,27 g af en blanding af de i overskriften angivne isomere forbindelser. Den førstnævnte af disse 10 (2,0 g) krystalliserede direkte, når blandingen blev op taget i ether; smp. 152-134 °C. Omkrystallisation fra ethylacetat gav 1,2 g (smp. 154-155 °C) og en anden mængde på 0,37 g.
Analyse for ^22^26^3^^2: 15 beregnet: C 51,78; H 6,37; N 4,03; fundet: C 52,34; H 6,13; N 4,01.
Ether-modervæsken fra den første krystallisation af den første isomer blev inddampet til tørhed (4,2 g) og chro-matograferet ved middeltryks-væskechromatografi ved 20 483 kPa på en Brinkmann 25 x 1000 mm søjle med chloro form som elueringsmiddel. Fraktionerne af det andet isomere produkt blev opsamlet og inddampet til tørhed. Krystallisation fra ether gav 0,5 g af den anden i overskriften angivne isomere, smp. 89-91 °C. Omkrystallisa-25 tion fra ethylacetat/hexan gav en første mængde på 354 mg (smp. 90-92 °C) og en anden mængde på 145 mg.
23
DK 16071 1 B
Analyse for £22^26^3^^2: beregnet: C 51,78; H 6,37; N 4,03; fundet: C 52,06; H 6,25; N 4,05.
25-[3-Benzoylthio-2R-(p-methoxybenzyl)-propionylamino]-4- methylthio-l-butanol_ 24
DK 16071 1 B
EKSEMPEL 9 og 2- S[3-benzoylthio-2S-(p-methoxybenzyl)-propionylamino]- 5 4-methylthio-l-butanol_ 3- Benzoylthio-2-(p-methoxybenzyl)propionsyre (6,6 g, 0,02 mol) blev opløst i 20 ml methylenchlorid.Der tilsattes oxalylchlorid (4,8 ml, 0,035 mol), og blandingen blev opvarmet til 40 °C i en time. Det resulterende syrechlo- 10 rid blev isoleret ved inddampning til en olie og inddampet azeotropt 1 gang med benzen. Syrechloridet blev genopløst i 10 ml methylenchlorid og sat dråbevis til en kold (10 °C) opløsning af 2S-amino-4-methylthio-l-butanol (2,7 g, 0,02 mol) og triethylamin (3,0 ml, 0,0215 mol) i 15 30 ml methylenchlorid. Efter omrøring i 16 timer ved stue temperatur blev reaktionsblandingen i rækkefølge vasket med 25 ml portioner IN saltsyre, vand og mættet natrium-hydrogencarbonatopløsning, tørret over vandfrit magnesiumsulfat, filtreret og inddampet til opnåelse af 7,1 g 20 råt produkt. Det rå produkt blev chromatograferet ved mid- deltryk-væskechromatografi (silicagel, 25 x 1000 mm søjle, 444 kPa) med 10¾ ethanol i chloroform som eluerings-middel, hvorved der blev opnået en blanding af de i overskriften angivne produkter [4,3 g; R^. 0,16 (ether); smp.
25 88 - 92 °C]. Reaktionsproceduren blev gentaget undtagen at det rå produkt blev udrevet med hexan, hvilket gav et lavere udbytte (1,88 g, smp. 84 - 87 °C).
EKSEMPEL 10 2S-[3-Mercapto-2S-(p-methoxybenzyl)propionylamino]- 4-methylthio-l-butanol_ 25
DK 16071 1 B
og 2S-[3-mercapto-2R-(p-methoxybenzyl)propionylamino]-5 4-methylthio-l-butanol_
Blandingen af isomere fra det forudgående eksempel (5,69 g, 12,7 mmol) blev solvolyseret ved proceduren fra eksempel 6, hvorved der blev opnået 5,9 g råt produkt efter inddampning. Middeltryks-væskechromatografi på 10 Brinkmann silicagel (partikelstørrelse svarende til ma- sekvidde 0,037 - 0,062 mm, 25 x 1000 mm søjle) med chloroform som elueringsmiddel gav de adskilte i overskriften angivne isomere. Der blev opnået rene fraktioner 15 af den mindst polære, i overskriften først angivne isomer [1,2 g; voks m/e 342; 0,42 (19:1 chloroform/ethanol)], blandede fraktioner (0,4 g) og fraktioner af den mest polære, i overskriften sidst angivne isomer [1,2 g; 0,25 (19:1 chloroform/ethanol); smp. 130 - 134 °C]. Den 20 anden isomer blev omkrystalliseret fra ethylacetat (162 mg, smp. 138 - 140 °C).
Analyse for ^1^^25^3^25 beregnet: C 55,95, H 7,34, N 4,08, m/e 343.
fundet: C 56,16, H 6,89, N 4,08, m/e 343.
25 Præparation 1 p-Chlorphenylmethylenmalonsyre
Under nitrogen blev malonsyre (pulveriseret, 20 g,
DK 160711 B
26 0,192 mol) blandet med acetylchlorid (15 g, 0,192 mol) og opvarmet til 65 °C i et oliebad. Der tilsattes p-chlorbenzaldehyd (21,6 g, 0,153 mol), og blandingen blev dyerligere opvarmet til 80 °C. Der blev opnået en 5 gul, langsomt tilbagesvalende opløsning efterfulgt af langsommelig udfældning af fast stof. Blandingen blev afkølet, og produktet udvundet ved filtrering, gensuspenderet i vand, omrørt i 5 minutter og genfiltreret, hvorved der blev opnået det i overskriften angivne 10 produkt [21,1 g; 61¾ af teoretisk udbytte; smp. 215 °C (dek.) ].
Præparation 2 p-Methoxyphenylmethylenmalonsyre
Ved proceduren fra den forudgående præparation blev p-me-15 thoxybenzaldehyd (21 g, 0,154 mol) omdannet til det i overskriften angivne produkt (10,0 g, 58¾ af teoretisk udbytte).
Præparation 3 p-Chlorbenzylmalonsyre 20 p-Chlormethylenmalonsyre (71,1 g) i 600 ml ethylacetat blev hydrogeneret over 10¾ Pd/C (3 g) på en Paar-ryster ved 345 kPa overtryk, indtil der var forbrugt i det væsentlige 1 ækvivalent hydrogen. Katalysatoren blev udvundet ved filtrering, og modervæsken inddampet til 25 tørhed i vakuum. Remanensen blev udrevet med hexan, hvorved der blev opnået 69 g (90¾) af det i overskriften angivne produkt.
27
DK 16071 1 B
Præparation 4 P Methoxybenzylmalonsyre
Produktet fra præparation 2 (15 g) i 325 ml ethylacetat blev hydrogeneret over 1 g 50% Pd/C ifølge det forudgå-5 ende eksempel. Der blev opnået 9,8 g af det i overskrif ten angivne produkt.
Præparation 5 2-(p-Chlorbenzyl)acrylsyre
Produktet fra præparation 3 (35 g, 0,153 mol) blev kom-10 bineret med 20 ml vand, omrørt i et isbad, og der til sattes dråbevis 25% vandig dimethylamin til pH 7,5. En anden portion (35 g) af malonsyren blev tilsat og tilstrækkeligt yderligere vand til at opnå opløsning. Der tilsattes vandigt formaldehyd (35 ml 36%), og den om-15 rørte opløsning fik lov at opvarmes gradvist til stuetem peratur og blev omrørt i 17 timer. Det dimethylaminomethy-lerede mellemprodukt blev udvundet ved filtrering og delvis tørret ved sugning (108 g vådt). Det våde mellemprodukt blev kombineret med 500 ml vand og opvarmet på et 20 dampbad i 2 timer, hvorunder udviklingen af carbondioxid var tydelig. Reaktionsblandingen blev afkølet, pH-værdien indstillet til 2,0 med 6 N saltsyre, og det udfældede, i overskriften angivne produkt blev udvundet ved filtrering (35,3 g, smp. 95 - 96 °C).
25 Præparation 6 2-(p-Methoxybenzyl)acrylsyre
Forbindelsen fra præparation 4 (25 g, 0, 111 mol) blev kombineret med 25 ml vand, og pH-værdien indstillet til
DK 160711 B
28 7,3 med 25% vandig dimethylamin. Opløsningen blev afkølet i et is/acetone-bad, der tilsattes yderligere ma-lonsyre (25 g), og blandingen blev omrørt, indtil der var sket opløsning. Derpå tilsattes formaldehyd (35 ml 36% i 5 vand). Blandingen blev omrørt i kort tid i is/acetone- badet, og derpå opvarmet tilstuetemperatur. Det udfældede, i overskriften angivne produkt blev udvundet ved filtrering (21 g, 49% af teoretisk udbytte).
Præparation 7 10 3-Benzoylthio-2-(p-chlorbenzyl)propionsyre
En opløsning af 2-(p-chlorbenzyl)acrylsyre (3,93 g, 22 mmol) og thiobenzoesyre (2,6 ml, 20 mmol) i 40 ml me-thylenchlorid blev opvarmet til tilbagesvaling i 16 timer. Reaktionsblandingen blev inddampet til tørhed, og 15 produktet krystalliseret fra hexan (4,5 g). Yderligere produkt blev opnået ved inddampning af hexan i modervæsken og chromatografi af remanensen (7,1 g) på 200 g silicagel (partikelstørrelse svarende til maskevidde 0,037 - 0,062 mm) med chloroform som elueringsmiddel, 20 1,8 g, smp. 111 - 114 °C.
Præparation 8 3-Benzoylthio-2-(p-methoxybenzyl)propionsyre
Ved fremgangsmåden ifølge præparation 7 blev 2-(p-methoxy-benzyl)acrylsyre (3,84 g, 20 mmol) omsat med thioben-25 zoesyre til opnåelse af det i oevrskriften angivne pro dukt i hovedsagligt kvantitativt udbytte [6,6 g; R^.
0,48 (ether) ].
19
DK 16071 1 B
Præparation 9
Optisk adskillelse af 3-benzoylthio-2-benzylpropionsyre
Racemiske 3-benzoylthio-2-benzylpropionsyre (10 g) blev opløst i 130 ml ether og langsomt sat til 4,24 g (33 5 mmol) d-(+)-α-methy1benzylamin, hvorved der blev opnået 14 g salt [“539 (C = 1, CHCl^) +3,46°]. To omkrystallisationer fra methylenchlorid/hexan gav 3 g salt indeholdende mest 2(5)-isomer (“539 (C = 1, CHCl-j) -21,2°]. Yderligere 10 krystallisation fra isopropylalkohol gav 1,56 g salt af 2(S)-isomer [ca. 90% 2 (S)-isomer ], [“539 (C = 1, CHCl^) — 2 5 0 3 , smp. 131 - 133 °C. Den frie syre [ca. 90% 2(5)-isomer] blev frigjort ved opløsning i vand, tilsætning af 15 2 N saltsyre og ekstraktion af produktet i ethylacetat.
Tørring over Mg50. og koncentrering gav den frie 2(S)-syre, ø farveløse krystaller, smp. 64 - 67 °C [“539 (C = 1, CHC13) -36,39°].
Kobling med L-methioninol og fjernelse af beskyttelsen 20 gav hovedsagligt 2S-benzyl-3-mercatopropionylamino)- 4-methylthio-l-butanol ifølge eksempel 6.

Claims (9)

  1. 2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles en forbindelse, hvori n er 2, m er 0, og R"1 er methyl.
  2. 3. Fremgangsmåde ifølge krav 2, kendetegnet 10 ved, at der fremstilles en forbindelse, hvori R er hydrogen .
  3. 4. Fremgangsmåde ifølge krav 3, kendetegnet ved, at der fremstilles en forbindelse, hvori X er p-chlor.
  4. 5. Fremgangsmåde ifølge krav 3, kendetegnet ved, at der fremstilles en forbindelse, hvori X er p-methoxy.
  5. 6. Fremgangsmåde ifølge krav 3, kendetegnet ved, at der fremstilles en forbindelse, hvori X er 20 hydrogen.
  6. 7. Fremgangsmåde ifølge krav 6, kendetegnet ved, at der fremstilles en forbindelse med formlen (I). DK 16071 1 B
  7. 8. Fremgangsmåde ifølge krav 6, kendetegnet ved, at der fremstilles en forbindelse med formlen (II).
  8. 9. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles en forbindelse med formlen (III). “Nj
  9. 10. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles en forbindelse med formlen (IV).
DK221182A 1981-05-18 1982-05-17 Analogifremgangsmaade til fremstilling af chirale 2-(2-benzyl-3-mercaptopropionyl)amino-1-alkanolderivater eller chirale 2-(2-benzyl-3-mercaptopropionyl)amino-4-methylthiosmoersyrer eller farmaceutisk acceptable kationsalte af syrerne DK160711B (da)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US06/264,752 US4329495A (en) 1981-05-18 1981-05-18 Enkephalinase enzyme inhibiting compounds
US26475281 1981-05-18

Publications (2)

Publication Number Publication Date
DK221182A DK221182A (da) 1982-11-19
DK160711B true DK160711B (da) 1991-04-08

Family

ID=23007448

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK221182A DK160711B (da) 1981-05-18 1982-05-17 Analogifremgangsmaade til fremstilling af chirale 2-(2-benzyl-3-mercaptopropionyl)amino-1-alkanolderivater eller chirale 2-(2-benzyl-3-mercaptopropionyl)amino-4-methylthiosmoersyrer eller farmaceutisk acceptable kationsalte af syrerne

Country Status (24)

Country Link
US (1) US4329495A (da)
EP (1) EP0066956B1 (da)
JP (1) JPS57193450A (da)
KR (1) KR860001549B1 (da)
AR (1) AR231279A1 (da)
AT (1) ATE8881T1 (da)
AU (1) AU529511B2 (da)
CA (1) CA1179368A (da)
DE (1) DE3260531D1 (da)
DK (1) DK160711B (da)
ES (2) ES512278A0 (da)
FI (1) FI76555C (da)
GR (1) GR75496B (da)
HU (1) HU188058B (da)
IE (1) IE53226B1 (da)
IL (1) IL65799A (da)
IN (1) IN158365B (da)
NO (1) NO153768C (da)
NZ (1) NZ200639A (da)
PH (1) PH18206A (da)
PL (1) PL138043B1 (da)
PT (1) PT74913B (da)
YU (1) YU42468B (da)
ZA (1) ZA823386B (da)

Families Citing this family (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4432972A (en) * 1981-08-03 1984-02-21 E. R. Squibb & Sons, Inc. Phosphonamidate compounds
US4401677A (en) * 1981-10-09 1983-08-30 E. R. Squibb & Sons, Inc. Enkephalinase inhibitors
US4474799A (en) * 1981-10-09 1984-10-02 E. R. Squibb & Sons, Inc. Enkephalinase inhibitors
US4474795A (en) * 1981-10-09 1984-10-02 E. R. Squibb & Sons, Inc. Enkephalinase inhibitors
JPS58140065A (ja) * 1982-02-10 1983-08-19 Meito Sangyo Kk メルカプトベンジル脂肪酸誘導体類及びその製法
FR2540495B1 (fr) * 1983-02-07 1986-02-14 Roussel Uclaf Nouveaux derives de o-mercaptopropanamide et de ses homologues, leur procede de preparation, leur application comme medicaments, les compositions les renfermant et les nouveaux intermediaires obtenus
FR2540498B1 (fr) * 1983-02-07 1986-02-14 Roussel Uclaf Nouveaux medicaments derives d'amides d'acide mercaptoacetique et de l'acide 3-mercaptopropionique et les compositions pharmaceutiques les renfermant
FR2556721B1 (fr) * 1983-12-14 1986-05-16 Roussel Uclaf Nouveaux derives de o-mercaptopropanamide d'o amino-acides, leur procede de preparation, leur application comme medicaments et les compositions les renfermant
FR2559770B1 (fr) * 1984-02-20 1986-10-24 Roussel Uclaf Nouveaux derives de n-alkyl-o-mercaptopropanamide, leurs procedes de preparation, leur application comme medicaments, les compositions les renfermant et les nouveaux intermediaires obtenus
EP0254032A3 (en) * 1986-06-20 1990-09-05 Schering Corporation Neutral metalloendopeptidase inhibitors in the treatment of hypertension
EP0566157A1 (en) 1986-06-20 1993-10-20 Schering Corporation Neutral metalloendopeptidase inhibitors in the treatment of hypertension
US4929641B1 (en) * 1988-05-11 1994-08-30 Schering Corp Mercapto-acylamino acid antihypertensives
US4801609B1 (en) * 1987-03-27 1993-11-09 Mercapto-acylamino acid antihypertensives
US5262436A (en) * 1987-03-27 1993-11-16 Schering Corporation Acylamino acid antihypertensives in the treatment of congestive heart failure
EP0355784A1 (en) * 1988-08-24 1990-02-28 Schering Corporation Mercapto-acylamino acid antihypertensives
US4879309A (en) * 1988-09-27 1989-11-07 Schering Corporation Mercapto-acylamino acids as antihypertensives
ZA902661B (en) * 1989-04-10 1991-01-30 Schering Corp Mercapto-acyl amino acids
FR2652087B1 (fr) * 1989-09-15 1993-10-15 Bioprojet Ste Civile Derives d'amino-acides, leur procede de preparation et leurs applications therapeutiques.
US5599951A (en) * 1989-09-15 1997-02-04 Societe Civile Bioprojet Amino acid derivatives, the process for their preparation and their applications to therapy
AU7168091A (en) * 1989-12-22 1991-07-24 Schering Corporation Mercaptocycloacyl aminoacid endopeptidase inhibitors
EP0528997B1 (en) * 1990-05-17 1995-02-01 Schering Corporation Disulfide derivatives of mercaptoacylamino acids

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4046889A (en) * 1976-02-13 1977-09-06 E. R. Squibb & Sons, Inc. Azetidine-2-carboxylic acid derivatives
US4053651A (en) * 1976-05-10 1977-10-11 E. R. Squibb & Sons, Inc. Compounds and method for alleviating angiotensin related hypertension
EP0038046B1 (en) * 1980-04-11 1984-02-29 The Wellcome Foundation Limited Pharmaceutical amides, and preparation, formulations and use thereof
FR2480747A1 (fr) * 1980-04-17 1981-10-23 Roques Bernard Derives d'acides amines et leur application therapeutique

Also Published As

Publication number Publication date
FI76555C (fi) 1988-11-10
FI821736A0 (fi) 1982-05-17
IL65799A0 (en) 1982-08-31
ES519668A0 (es) 1984-03-01
NO153768B (no) 1986-02-10
US4329495A (en) 1982-05-11
AR231279A1 (es) 1984-10-31
AU529511B2 (en) 1983-06-09
IN158365B (da) 1986-11-01
YU42468B (en) 1988-08-31
GR75496B (da) 1984-07-24
CA1179368A (en) 1984-12-11
NZ200639A (en) 1985-08-30
DK221182A (da) 1982-11-19
NO821595L (no) 1982-11-19
DE3260531D1 (en) 1984-09-13
ES8306719A1 (es) 1983-06-01
YU104282A (en) 1985-06-30
ZA823386B (en) 1983-03-30
PL138043B1 (en) 1986-08-30
EP0066956A1 (en) 1982-12-15
IL65799A (en) 1985-12-31
PT74913A (en) 1982-06-01
HU188058B (en) 1986-03-28
AU8375982A (en) 1982-11-25
ES8403107A1 (es) 1984-03-01
EP0066956B1 (en) 1984-08-08
KR860001549B1 (ko) 1986-10-04
JPS637542B2 (da) 1988-02-17
KR830010063A (ko) 1983-12-24
IE821168L (en) 1982-11-18
IE53226B1 (en) 1988-09-14
PT74913B (en) 1985-05-16
PH18206A (en) 1985-04-25
ES512278A0 (es) 1983-06-01
PL236425A1 (en) 1983-08-01
ATE8881T1 (de) 1984-08-15
FI76555B (fi) 1988-07-29
NO153768C (no) 1986-05-21
JPS57193450A (en) 1982-11-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DK160711B (da) Analogifremgangsmaade til fremstilling af chirale 2-(2-benzyl-3-mercaptopropionyl)amino-1-alkanolderivater eller chirale 2-(2-benzyl-3-mercaptopropionyl)amino-4-methylthiosmoersyrer eller farmaceutisk acceptable kationsalte af syrerne
US4153725A (en) Relieving angiotension related hypertension with carboxyalkylacylamino acids
US4461896A (en) 1-[Acylthio) and (mercapto)-1-oxoalkyl]-1,2,3,4-tetrahydroquinoline-2-carboxylic acids
JPS6121226B2 (da)
JPH05310664A (ja) ビアリール置換４−アミノ酪酸アミド
US4937243A (en) Thiol carboxylic acid derivatives and their use as colagenase inhibitors
US4206232A (en) Relieving hypertension with carboxyalkylacylamino acids
US4500467A (en) Benzoylthio compounds, their preparation and their use as drugs
US4134991A (en) Derivatives of 2-(3-phenyl-2-aminopropionyloxy)-acetic acid
US5010097A (en) Novel compounds
EP0634396B1 (fr) Dérivés d&#39;amino-acides et leur utilisation comme inhibiteurs de l&#39;enképhalinase
NO863944L (no) L-dopa-derivater, fremgangsmaate til deres fremstilling og farmasoeytisk blanding inneholdende disse derivater.
FR2521992A1 (fr) Nouveaux composes de pyridine utiles comme medicaments
US5451606A (en) Anthraquinone compounds useful to treat osteoarticular conditions, pharmaceutical compositions and method of treatment
US5750524A (en) Remedy for hyperlipidemia
US4282235A (en) Derivatives of thiazolidinecarboxylic acids and related acids
CS199693B2 (cs) Způsob výroby derivátů thiazolidin-, thiazana morfolinkarboxylových kyselin
US3778511A (en) Alpha-(1,2,3,4-tetrahydro-6-quinoyl)-carboxylic acids and derivatives thereof for treating inflammation
NO751401L (da)
US4237134A (en) Derivatives of thiazolidinecarboxylic acids and related acids
US4237129A (en) Derivatives of thiazolidinecarboxylic acids and related acids
WO2006073042A1 (ja) Ｎｒｆ２依存遺伝子の活性化剤
US4207336A (en) Relieving hypertension with carboxyalkylacylamino acids
US4207342A (en) Relieving hypertension with carboxyalkylacylamino acids
US4192882A (en) Carboxyalkylacylamino acids

Legal Events

Date Code Title Description
PHB Application deemed withdrawn due to non-payment or other reasons