DK169892B1

DK169892B1 - Fremgangsmåde til fremstilling af carbapenam-3-carboxylsyre- eller carbapen-2-em-3-carboxylsyreforbindelser eller farmaceutisk acceptable salte deraf

Info

Publication number: DK169892B1
Application number: DK211381A
Authority: DK
Inventors: Robert Louis Rosati
Original assignee: Pfizer
Priority date: 1980-05-14
Filing date: 1981-05-13
Publication date: 1995-03-27
Also published as: EP0040494B1; AR227425A1; NO157143C; DK211381A; IE51268B1; KR830006288A; IE811070L; YU43031B; FI72518C; PT73026B; NZ197072A; FI811471L; AU524882B2; KR840000722B1; EP0040494A1; YU122181A; AU7051381A; NO157143B; IL62848A; US4348264A

Description

DK 169892 B1 I litteraturen er omtalt et antal carbapenam- og carba-pen-2-em-forbindelser, blandt hvilke nogle angives at have anvendelighed som antibakterielle midler. Blandt disse sidstnævnte findes en række forskellige fermenteringspro-5 dukter, hvoraf det første var thienamycin:

OH

Ύυτ 10 //” rc-------‘\

" ^C02H

(Albers-Schonberg et al., J. Am. Chem. Soc. 100, 6491 (1978)). Andre forbindelser i denne familie af fermente-15 ringsprodukter inkluderer olivansyrer: NHCOCH- oso H oso H ,-^hcoch3 ^-τΛι. "S-ry 20 1 i J * Λ-n-1 «-\ or xcooh ^ coos n = 0 eller 1 25 (Brown et al., J. Chem. Soc. Chem. Commun., 523 (1977)); Corbett et al., ibid. 953 (1977)) og en forbindelse betegnet som PS-5: 30 _^hcoch3

S

—k—\

v COOH

35 DK 169892 B1 2 (Okamura et al., J. Antibiotics 31, 480 (1978)). Senere er et antal thienamycin-derivater angivet at have nyttig ΐε antibakteriel aktivitet, herunder carbapen-2-em- og car-bapenam-derivaterne: 5 ORb ORb -^6-[5¾ ------a .J7 A '3 I _ l| 10 0<y C00R 8 ”\:oorc u (belgisk patentskrift nr. 867 227), hvori R° bredt er de-15 fineret at inkludere hydrogen, acetyl og benzyloxycarbo-nyl, og Rc bredt er defineret at inkludere hydrogen og konventionelle carboxylbeskyttende grupper, såsom benzhy-dryl og 2-naphthylmethyl (der selektivt fjernes ved hy-drogenolyse), 2,2,2-trichlorethyl (der selektivt fjernes 20 ved mild zinkreduktion) og forskellige 1-alkoxycarbonyl-oxyalkylgrupper (der selektivt hydrolyseres under fysiologiske betingelser).

Thienamycin er ligeledes blevet fremstillet ved totalsyn-25 tese (Johnston et al., J. Am. Chem. Soc. 100, 313 (1978)), ligesom et esterforstadium (Kametani et al., He-terocycles 12 (9), 1189 (1979)) og et antal andre carba-penam- og carbapen-2-em-forbindelser, inklusive carbape-nam selv (Wong et al., J. Am. Chem. Soc. 99, 2823 (1977); 30 Busson og Vanderhaeghe, J. Org. Chem. 43, 4438 (1978)), p-nitrobenzyl- og 2,3-dihydro-3-oxobenzo[c]furan-l-yl-6-carboxylater (Onoue et al., Tetrahedron Letters (40), 5> 3867 (1979)), 3-methyl-carbapenam (Aida et al., Tetrahedron Letters (52), 4993 (1979)), p-nitrobenzyl-2-methyl- ^ f· 35 carbapen-2-em-carboxylat (Baxter et al., J. Chem. Soc.

Chem. Commun., 236 (1979)), natriumcarbapen-2-em-3-carbo-xylat, natrium-6-(1-hydroxyethyl)-carbapen-2-em-3-carbo- DK 169892 B1 3 xylat (Cama og Christensen, J. Am. Chem. Soc. 100, 8006 (1978)), benzyl-2-oxocarbapenam-3-carboxylat og 2-(4-me-thylphenylsulfonyloxy)-carbapen-2-em-3-carboxylat (Ratcliff e et al., Tetrahedron Letters (21), 31 (1980)). I 5 litteraturen er ligeledes angivet carbaceph-3-em-forbin-delser, såsom 7-acylamino-2-alkylcarbaceph-3-em-4-carbo-xylsyreester og 7-acylamino-2-acyloxycarbaceph-3-em-4-carboxylsyreester, som hydrolyseres in vivo, .dvs. under fysiologiske betingelser (belgisk patentskrift nr. 875 10 054). I intet tilfælde er disse forbindelser opnået ved omlejring af konventionelle Ø-lactam-derivater, ligesom ingen af disse forbindelser er substitueret i 1-stillin-gen.

15 For nyligt har man beskrevet fremstilling af forbindelser med strukturen:

HC

20 T i

λ-N-L

nco2h (Christensen et al., US patentskrift nr. 4 208 422). I 25 disse forbindelser er Rc substitueret eller usubstitueret alkyl, aryl eller aralkyl. Flertrinssyntesen af disse forbindelser ud fra et α,/5-umættet aldehyd, dvs.

CH0 30 tillader ikke syntese af de forbindelser der fremstilles ifølge den foreliggende opfindelse.

35 Af enkelheds-, klarheds- og bekvemmelighedsgrunde anvendes alment i denne beskrivelse med krav standard-"pen/ceph"-nomenklaturen ifølge litteraturen, f.eks.

4 DK 169892 B1 1 Ψ- J--J-N“-1 5 ceph-3-em penam nfl riT} λ-N- λ-n- 0/ cy 10 carbapenam carbapen-2-em

Et alternativt navn for carbapenam, som også findes i 15 litteraturen, er l-azabicyclo[3.2.0]heptan-7-on.

Den foreliggende opfindelse angår en fremgangsmåde til fremstilling af på forskellig måde substituerede 1-oxo-, 1-hydroxy- og l-acetoxy-carbapenam-3-carboxylsyre- og 20 -carbapen-2-em-3-carboxylsyreforbindelser med formlerne: P 1 .2 (I) 25 N x:oor3

^ AB

__ 6 5 \ (II) 30 4 3 é-Nt-SoOR3 Λ

1-jS

K

si 35 5 DK 169892 B1 hvori R1 betyder hydrogen, mono- eller disubstitueret acetami- do, 5-methyl-3-phenylisoxazol-4-carboxamido eller en 5 5 5 gruppe R -0-C-, hvori R betyder hydrogen, acetyl, ben-r6^ \*12 zyloxycarbonyloxy eller p-nitrobenzyloxycarbonyl, R^ be- 12 tyder hydrogen eller (C1~C5)alkyl, og R betyder hydro-10 gen eller methyl, 2 R betyder hydrogen eller methoxy med det forbehold, at 2 1 når R er methoxy, er R 2-phenoxyacetamido, 15 A og B enten tilsammen betyder oxygen eller hver for sig betyder henholdsvis hydrogen og hydroxy eller acetoxy, 3 R betyder hydrogen eller en konventionel carboxylbeskyt-tende gruppe, og 20 4 R betyder methyl, acetoxymethyl, methansulfonyloxy, OR eller SR, hvori R betyder (C^-Cg)alkyl, 2-benzyloxycarbo-nylaminoethyl, 2-(p-nitrobenzyloxycarbonylamino)ethyl, 2-acetamidoethyl, 2-aminoethyl eller 2-amidinoethyl, med 25 det forbehold, at når R4 betyder andet end methyl, har forbindelsen formlen (II), eller farmaceutisk acceptable kationsalte deraf, når forbindelsen indeholder en carboxylsyregruppe, eller farma-30 ceutisk acceptable syreadditionssalte deraf, når forbindelsen indeholder en amino- eller amidinogruppe.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er særegen ved det i krav l's kendetegnende del anførte.

35 6 DK 169892 B1

Udtrykket "konventionel, hydrogenolyserbar acylgruppe" 9 skal forstås at indbefatte benzyloxycarbonyl (carbobenz-oxy), p-nitrobenzyloxycarbonyl (p-nitrocarbobenzoxy) og lignende, som selektivt fjernes ved katalytisk hydrogeno-5 lyse. Når det påtænkes at anvende en zinkreduktion som et trin i syntesesekvensen, foretrækkes benzyloxycarbonyl-gruppen frem for p-nitrovarianten for at undgå komplicerende bireaktioner.

10 Udtrykket "konventionel penicillin-sidekæde" skal forstås at indbefatte den brede forskellighed af sidekæder i 6-stillingen i penicillinerne og i 7-stillingen i cephalo-sporinerne, som har fundet anvendelse i disse rækker af forbindelser, herunder de, hvori eventuelt tilstedeværen-15 de amino-, hydroxy- og carboxylgrupper er beskyttet af grupper, der selektivt fjernes ved hydrogenolyse. Særligt værdifulde sidekæder er 5-methyl-4-phenylisoxazol-4-car-boxamido og 2-mono- og 2,2-disubstitueret acetamido, hvor der som eksempler kan nævnes: 20 2-phenylacetamido; 2-thienylacetamido; 2-phenoxyacetamido; D-2-amino-2-phenylacetamido; 25 D-2-amino-2-(4-hydroxyphenyl)acetamido; D-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-l-carboxamido)-2-phenylacetamido; D-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-l-carboxamido)-2-(4-hy-droxyphenyl)acetamido; 30 2-hydroxy-2-phenylacetamido; 2-carboxyl-2-phenylacetamido; og de tilsvarende sidekæder, hvori hydroxy-, amino- og é carboxylgrupper er beskyttet af selektivt hydrogenolyser- ? bare grupper. *

Udtrykket "amino-, hydroxy- og carboxylgrupper, der er beskyttet af hydrogenolyserbare grupper" skal forstås at 35 DK 169892 B1 7 indbefatte hydroxy- og aminogrupper, der er substitueret med benzyloxycarbonyl og lignende, samt carboxylgrupper, der er forestrede med benzhydryl, benzyl, 2-naphthylme-thyl og lignende. Sådanne grupper fjernes selektivt ved 5 hydrogenolyse til dannelse af de tilsvarende hydroxy-, amino- eller carboxylgrupper.

Udtrykket "konventionelle carboxylbeskyttende grupper" skal forstås at henføre til grupper, der sædvanligvis an-10 vendes til at beskytte carboxylgruppen i penicilliner og cephalosporiner, idet de specifikt inkluderer: (1) Grupper, der selektivt hydrogenolyseres til dannelse af den tilsvarende syre. Som eksempler kan nævnes 15 benzyl-, p-nitrobenzyl-, benzhydryl- og 2-naphthylme- thylestere. Blandt disse foretrækkes benzyl-, benzhydryl- og 2-naphthylmethylestere, eftersom de let hydrogenolyseres, men til forskel fra p-nitrobenzyl-esteren ikke har nogen tendens til at komplicere de 20 ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen gennemførte zinkreduktioner.

(2) Grupper, der selektivt fjernes ved mild zinkreduktion. Som eksempel kan nævnes 2,2,2-trichlorethylgrup- 25 pen (jfr. Just og Grozinger, Synthesis, 457 (1976)).

(3) Grupper, der selektivt hydrolyseres under fysiologiske betingelser. Som eksempler på sådanne grupper kan nævnes acetoxymethyl, pivaloyloxymethyl, 1-ethoxycar- 30 bonyloxyethyl og l,3-dihydro-3-oxobenzo[c]furan-l-yl.

Sådanne estere er såkaldte pro-lægemidler, og de er særligt egnede som mere stabile former for den tilsvarende syre (frigjort under fysiologiske betingelser), ligesom de forbedrer den perorale absorption, 35 når en af de omhandlede forbindelser finder peroral anvendelse som systemisk antibakterielt middel.

8 DK 169892 B1

Opfindelsen omfatter også fremstilling af farmaceutisk acceptable salte af de omhandlede forbindelser, når de 3 indeholder en fri carboxylsyre (f.eks. R er hydrogen) 1 eller en fri amino- eller amidinogruppe (f.eks. R er 2-5 aminoethyl eller 2-amidinoethyl).

De ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser har antibakteriel aktivitet eller er mellemprodukter ved fremstillingen af forbindelser med en sådan 10 aktivitet. Forbindelsernes antibakterielle aktivitet bestemmes let ved den skive-plade-prøvningsmetode, der er beskrevet mere detaljeret nedenfor. Denne metode anvendes rutinemæssigt til at kontrollere mikroorganismers modtagelighed, inclusive dem, der lige er isoleret i klinisk 15 praksis. Den målte antibakterielle aktivitet er et udtryk for anvendeligheden til systemisk eller topisk behandling af infektioner hos dyr eller mennesker, som skyldes modtagelige bakterier, som vækstfremmende midler i dyrefoder eller til konservering af stoffer, som er biologisk ned-20 brydelige af modtagelige bakterier.

Nøgletrinnet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen er en for nylig opdaget fotolytisk katalyseret omlejring af et 2-diazo-l-oxoceph-3-em-4-carboxylat til et 1-oxocarbapen-25 2-em-3-carboxylat, nemlig: ao rzxV—1 Γ“0 ο^Ύ 8 <r^f 8

COOR COOR

A

s 35 * DK 169892 B1 9

Q

hvori R betyder en konventionel carboxylbeskyttende gruppe som defineret ovenfor. Et stort antal specifikke eksempler definerer det brede område. Disse specifikke eksempler kan opsummeres ved følgende omdannelse: 5 0 2 '

n R S -N

R 11_ 10 I fTTT\ i3CI1 COOR8

V

15 2 ' 0 o Εζΐ!_/γ9 i—«—\ „ (IV) 0 COOR8 20 2 8 i hvilke almene formler R og R er som tidligere defineret, 25 7 R betyder hydrogen, 2-phenoxyacetamido, D-2-(4-ethyl- 2,3-dioxopiperazin-l-carboxamido)-2-phenylacetamido, D-2- benzyloxycarbonylamino-2-phenylacetamido, en benzhydryl- ester, benzylester eller 2-naphthylmethylester af 2-car- 30 boxy-2-phenylacetamido, 5-methyl-3-phenylisoxazol-4-car- 5 5 5 12 boxamido eller en gruppe R -0-C-, hvori R , R og R er β/ \ 12

som tidligere R R

defineret, og 35 DK 169892 B1 10 9 10

R betyder methyl, acetoxymethyl, methansulfonyloxy, OR

eller SR10, hvori R1® betyder (C^-C^Jalkyl, 2-acetamido- ethyl, 2-benzyloxycarbonylaminoethyl eller 2-(p-nitroben- * zyloxycarbonylamino)ethyl.

5

Denne fotolytiske omlejring udføres bekvemt i et organisk opløsningsmiddel som fortyndingsmiddel i standard-labora-torieapparatur (Pyrex) over et meget bredt temperaturområde (f.eks. fra -100 til 35 °C), under forudsætning af 10 at opløsningsmidlet er en væske ved den anvendte temperatur.

Som eksempler på det meget brede udvalg af egnede organiske opløsningsmidler kan nævnes chlorerede carbonhydri-15 der (f.eks. methylenchlorid), lavere-alkanoler (f.eks. methanol) og aromatiske carbonhydrider (f.eks. toluen).

Simple forsøg vil fastlægge anvendeligheden af andre opløsningsmidler (ethere, ketoner etc.). Et foretrukket opløsningsmiddel er methylenchlorid, eftersom det er lavt-20 kogende og derfor let fjernes ved afdampning i vakuum under isoleringen. Til minimering af mulig Ø-lactam-ned-brydning foretrækker man at udføre fotolysen ved lavere temperaturer (f.eks. i området fra -45 til -85 °C), hensigtsmæssigt i et bad af tøris og acetone (ca. -78 °C).

25 Lyskilden er en, der giver lys af bølgelængde i samme område som en hvilken som helst standard-sollampe, dvs. ultraviolet og ind i det synlige. Fotolysens forløb følges let ved infrarød spektroskopi (forsvinden af det karakteristiske diazo-bånd) eller ved standard-tyndtlagskromato-30 grafi, idet komponenterne detekteres ved sprøjtning med alkalisk permanganat; eluenterne vælges således, at udgangsmaterialet og reaktionsproduktet adskilles; i det * foreliggende tilfælde er methylenchlorid eller chloroform - med varierende andele af ethylacetat hyppigt velegnede. * 35 Anvendelse af standard-lysfiltre fører let til fastlæg- # gelse af optimale bølgelængder for denne fotolysereaktion. Reaktionens biprodukter er nitrogengas og svovl.

11 DK 169892 B1 Når man ønsker carbapen-2-em-3-carboxylat (IV) af større renhed, omrøres reaktionsblandingen hensigtsmæssigt med Raney-nikkel til fjernelse af svovl. Eftersom Raney-nik-kel har tendens til også at adsorbere noget produkt og 5 dermed formindske udbyttet, foretrækkes det at udelade dette trin i isoleringen, når det dannede 1-oxocarbapen- 2-em-3-carboxylat yderligere forarbejdes ved en procedure forskellig fra hydrogenolyse. l-oxocarbapen-2-em-3-carbo-xylaterne er i sammenligning med de øvrige omhandlede 10 forbindelser forholdsvis ustabile forbindelser. Man holder derfor temperaturerne så lavt som muligt under denne isolering (f.eks. <25, fortrinsvis <5 °C), og forbindelserne fremstilles sædvanligvis kort før deres anvendelse eller opbevares ved fryseskabstemperatur.

15

De yderligere omdannelser af carbapen-2-em-3-carboxyla-ter, typisk af dem der anvendes til fremstilling af de øvrige omhandlede forbindelser, er sammenfattet i de følgende skemaer I og II.

20 25 30 35 „v12 DK 169892 B1

Carbapen-2-eiU'«3^ '»^^-koxylaters omdannelse Λ o 1 \h *Å**l*.

5 COOi^h^ COORSzn COOR8phy akt. C0QU .

Zn/H+ ’ a&t· att· v Zn/H+ Zn/H+ 10 o V . ▼ ό-.fo** >Å fcooA V V .

COOH COOR phy 15 H"

Η H

V

OH V V

OH OH

20 H2 '^\ H^phyX

Y‘ v-v coor h T T o COOH COOR phy

25 AcX AcX AcX

▼ 4 ? ?Ac OAc OAc

H2 RSphyX

30 > >-> > COORSh COOH COOR8phy 8 ^ R h = hydrogenolyserbar carboxylbeskyttende gruppe. - 8 R zn = mild zink-reducerbar carboxylbeskyttende gruppe. ^

O

gruppe.

X = en gruppe, der fraspaltes.

35 R phy = fysiologisk hydrolyserbar carboxylbeskyttende * DK 169892 B1 13

SKEMA II

Yderligere omdannelser af carbapen-2-em-3-carboxylater 5

O O O

COOR8h COOR8zn COOR8phy 10 r h“ h” h” T V v

OH .OH OH

H mild ^7 8 s COORn ΝΓ2 OH Zn/COOR zn COOR phy

AcX AcX AcX

20 COOH

V V v OAc OAc OAc ό :> o 7 8 V mild/7 g ^ 7 o 25 COOR°h \H2 Zn/ COOR zn COOR0phy * OAc

R8phyX

30 *

COOH

g R h = hydrogenolyserbar carboxylbeskyttende gruppe.

Q

R zn = mild zink-reducerbar carboxylbeskyttende gruppe.

g 35 R phy = fysiologisk hydrolyserbar carboxylbeskyttende gruppe.

X en gruppe, der fraspaltes.

DK 169892 B1 14

De 1 skemaerne I og II anførte hydrogenolysereaktioner, hvorved en hydrogenolyserbar carboxylbeskyttende gruppe 8 » (R h) fjernes ved hydrogenolyse, udføres ved for fagmanden velkendte metoder, f.eks. hydrogenering over en pas-5 sende katalysator, såsom palladium, platin eller rhodium, eventuelt anbragt på et bærerstof, såsom carbon, calcium-carbonat eller aluminiumoxid, i et inert opløsningsmiddel og på en sådan måde, at nedbrydningen af carbapenam eller carbapenem minimeres. Reaktionsbetingelserne er således 10 fortrinsvis nær neutrale ved stuetemperatur eller lavere og, bekvemt, ved lavt tryk (f.eks. 1-7 atmosfære). Ved "inert opløsningsmiddel" forstås et opløsningsmiddel, som klart vil solubilisere udgangsmaterialet uden at reagere væsentligt med udgangsmaterialet eller -materialerne, med 15 produktet eller produkterne eller med reaktanterne (i dette tilfælde hydrogen og katalysator). De foretrukne opløsningsmidler til hydrogenolysen er ligeledes sådanne, der er flygtige, og hvori produktet også er opløseligt, således at produktet kan udvindes ved simpel inddampning 20 under vakuum (eller frysetørring, hvis egnet) af filtratet efter genindvinding af katalysatoren. De foretrukne katalysatorer til hydrogenolysen er palladium-på-carbon eller palladium-på-calciumcarbonat. Sådanne af de omhandlede forbindelser, der indeholder hydrogenolyserbare 25 grupper bundet til en C-2 eller C-6 sidekæde amino-, hydroxy- eller carboxylgruppe (f.eks. benzyloxycarbonyl, p-nitrobenzyloxycarbonyl eller benzhydryl), hydrogenoly-seres på samme måde (f.eks. til amino-, hydroxyl- eller carboxylgrupper). Når hydrogenolysen udgør et af flere 30 behandlingstrin for en af de omhandlede forbindelser, og man har flere forskellige ruter at vælge imellem, foretrækkes det at udføre hydrogenolysen på en carbapenam-forbindelse i modsætning til en carbapen-2-em-forbindelse, eftersom den førstnævnte er mere stabil og lettere % 35 lader sig håndtere under reaktionsbetingelserne for hydrogenolyse. Analogt foretrækkes hydrogenolyse af en 1-acetoxycarbapen-2-em-forbindelse frem for hydrogenolyse DK 169892 B1 15 af en 1-oxo- eller 1-hydroxycarbapen-2-em-forbindelse, og hydrogenolyse af 1-acetoxy- eller 1-hydroxycarbapenamer foretrækkes frem for hydrogenolyse af 1-oxocarbapenamer.

De optimale reaktionsbetingelser (f.eks. tid, katalysa-5 torniveau, det anvendte fabrikationsnummer for katalysatoren) på hydrogenolysen for en hvilken som helst given forbindelse ifølge opfindelsen bestemmes let ved overvågning ved tyndtlagskromatografi under anvendelse af de ovenfor beskrevne fremgangsmåder.

10

Den i skemaerne I og II viste milde zinkreduktion, hvor-

O

ved en beskyttelsesgruppe (R Zn), såsom 2,2,2-trichlor-ethyl, fjernes, gennemføres i almindelighed, idet man følger den af Just og Grozinger anviste metode (Synthesis 15 (7), 457 (1976)), nemlig reduktion ved hjælp af en op slæmning af kommercielt zinkpulver i en blanding af vandig buffer (pH 4,2-7,2) og et inert med vand blandbart organisk opløsningsmiddel, såsom tetrahydrofuran, fortrinsvis ved stuetemperatur eller ved lavere temperatur.

20 Når den milde zinkreduktion udgør et af flere trin til opnåelse af en forbindelse ifølge opfindelsen, og man har andre mulige ruter, foretrækkes det at udføre den milde zinkreduktion på en carbapenam-forbindelse frem for på en carbapenem-forbindelse. Analogt foretrækkes det at udføre 25 den milde zinkreduktion på en l-acetoxycarbapen-2-em-for-bindelse frem for på en 1-oxo-eller l-hydroxy-carbapen-2-em-forbindelse. De milde zinkreduktioner overvåges ligeledes bekvemt ved tyndtlagskromatografi som ovenfor beskrevet .

30

Reduktionen af l-oxocarbapen-2-em-forbindelserne til 1- oxo-carbapenam-3-carboxylaterne (når den carboxylbeskyt- o 8 tende gruppe er R h eller R phy) eller til 1-oxocarbape-nam-3-carboxylsyrerne (når den carboxylbeskyttende gruppe

Q

35 er R zn) med zink/syre-par, er skematisk vist på skema I.

For at udføre denne reduktion rent under milde reaktionsbetingelser med hensyn til temperatur og tid, er det vig- DK 169892 B1 16 tigt at anvende særligt aktiveret zink. Særligt velegnet er det højaktive zink, der fremstilles som et sort pulver ved proceduren beskrevet af Rieke og Uhm (Synthesis (7), 452 (1975)), nemlig reduktion af et vandfrit zinksalt med 5 kalium i tetrahydrofuran under tilbagesvaling og under en inert atmosfære. Den foretrukne syre til disse reduktioner af aktiveret zink er eddikesyre. Den har tilstrækkelig syrestyrke til at lette reaktionen og er samtidig ikke så stærk, at den forårsager overdreven skade på 15-10 lactamen. Eddikesyre anvendes også samtidigt som opløsningsmiddel. Skønt man kan anvende temperaturer så høje som 35 eC til denne omsætning, foretrækker man temperaturer mellem -10 °C og 0 eC. Eftersom eddikesyre fryser ved ca. 17 °C, er det nødvendigt at tilsætte et inert fortyn-15 dingsmiddel, der virker som antifrysemiddel. Tetrahydrofuran (30 %) er velegnet til dette formål. De aktiverede zinkreduktioner ifølge den foreliggende opfindelse overvåges bekvemt og optimeres gennem anvendelsen af tyndt-lagskromatografi i overensstemmelse med de tidligere be-20 skrevne metoder. Med hensyn til aktiveret zinkreduktion af l-oxocarbapen-2-em-forbindelser med strukturformlen (IV) er denne reaktion kun blevet anvendt med held i de 4 9 tilfælde, hvor R /R er methyl.

25 De hydrid-reduktioner, der er opsummeret i skemaerne I og II (omdannelse af 1-oxocarbapenamer til 1-hydroxycarbape-namer og af l-oxocarbapen-2-emer til l-hydroxycarbapen-2-emer) udføres under anvendelse af selektive hydrid-reduk-tionsmidler (dvs. sådanne, som ikke vil have tilbøjelig-30 hed til at angribe estergruppen, Ø-lactamen eller amidsidekæden, dersom denne findes, eller som, når det drejer sig om l-oxocarbapen-2-emer, har tendens til at reducere dobbeltbindingen (1,4-tillejring af hydridet) frem for carbonylgruppen). Eftersom man foretrækker lave tempera- % 35 turer og aprotiske opløsningsmidler til reduktionen af disse forholdsvis reaktionsdygtige 15-laetamer, er tetra-alkylammoniumborhydrider i et inert, flygtigt opløsnings- DK 169892 B1 17 middel med lavt frysepunkt, såsom methylenchlorid, særlig velegnet til disse hydrid-reduktioner. Anvendelsen af methylenchlorid eller lignende som opløsningsmiddel tillader ligeledes bekvem overvågning af hydridreduktionerne 5 ved infrarød spektroskopi (forsvinden af det karakteristiske carbonylbånd) foruden tyndtlagskromatografi. Disse redskaber kan anvendes samtidigt med særlig virknings-fuldhed til optimering af de forskellige hydridreduktio-ner ifølge den foreliggende opfindelse.

10

Acetyleringerne af 1-hydroxycarbapenam-forbindelserne og l-hydroxycarbapen-2-em-forbindelserne, således som de er opsummeret i skemaerne I og II, udføres ved standardmetoder, idet man bekvemt anvender eddikesyreanhydrid eller 15 acetylchlorid (AcX) i nærvær af tilstrækkelig base (sædvanligvis en tertiær amin, såsom pyridin eller triethyl-amin) i en mængde, der er ækvivalent med en hvilken som helst carboxylgruppe i substratet såvel som det samtidigt dermed fremstillede eddikesyre eller saltsyre. Omsætnin-20 gen udføres sædvanligvis i et inert opløsningsmiddel (som ovenfor defineret) og fortrinsvis med yderligere katalysator (f.eks. 10 mol-% p-dimethylaminopyridin). Temperaturen kan strække sig over et bredt område (f.eks.

-100 eC til 35 eC); men omsætningen udføres fortrinsvis 25 ved en lav temperatur i et flygtigt opløsningsmiddel. Til dette formål er methylenchlorid særligt velegnet. Det er et godt opløsningsmiddel for udgangsmaterialerne og for reaktionskomponenterne, der har et lavt frysepunkt (-95 °C), således at omsætningen bekvemt kan udføres i et 30 bad af tøris og acetone (ca. -78 °C), og reaktionsprodukterne isoleres let ved afdampning af opløsningsmidlet under vakuum. Anvendelse af methylenchlorid tillader ligeledes særligt bekvemt overvågning af denne omsætning ved infrarød spektroskopi (tilsynekomsten af det karakteris-35 tiske ester-carbonyl-bånd) udover de tyndtlagskromatogra-fiske metoder, der er beskrevet ovenfor. Kombinationen af disse analytiske fremgangsmåder er særlig velegnet til DK 169892 B1 18 optimering af acetylerings-reaktionerne. Når de 1-hy- - droxycarbapenam-forbindelser eller l-hydroxy-carbapen-2-em-forbindelser, der skal acyleres, indeholder frie ami- * no- eller hydroxylgrupper i en sidekæde, acetyleres så-5 danne grupper ligeledes under de samme reaktionsbetingelser (faktisk acetyleres de præferentielt, når sidekæden er en amin eller en primær alkohol som hydroxymethylgrup-pen). Når man ligeledes ønsker at acylere sådanne sidekæ-degrupper, anvender man yderligere ækvivalenter reagens i 10 de påkommende tilfælde. Når man ønsker frie amino- eller hydroxylgrupper på sidekæden eller sidekæderne, fortrækkes det at acetylere det tilsvarende sidekæde-benzyloxy-carbonylerede derivat, idet man så fjerner beskyttelsesgruppen eller beskyttelsesgrupperne ved hydrogenolyse i 15 det sidste behandlingstrin.

Omdannelsen af 3-carboxylsyrerne til de tilsvarende be-

O

skyttede carboxylsyrer (dvs. R -esterne, således som de er defineret ovenfor) gennemføres ligeledes ved standard-20 metoder. Man omsætter carboxylsyren som carboxylatsaltet (dannet forud eller dannet in situ ved tilsætning af mindst én ækvivalent base) ved en standard-bimolekylær udskiftningsreaktion med det passende halogenid, mesylat

O

etc. (R phyX), f.eks. chlormethylpivalat, brommmethylace-25 tat, 1-ethoxy-carbonyloxyethylchlorid, l,3-dihydro-3-oxo- benzo[c]furan-l-yl-bromid, benzylchlorid, benzylbromid, benzylmesylat, 2-brom-methylnaphthalen, benzhydrylchlorid etc. Basen kan foreligge i form af en tertiær amin eller et hydrogencarbonat, og den kan anvendes i overskud for 30 at maximere koncentreringen af carboxylationen og på denne måde forøge reaktionshastigheden. Man kan også tilsætte natriumiodid som katalysator. Omsætningen udføres i et _ inert opløsningsmiddel (som defineret ovenfor), idet man * foretrækker polære, aprotiske opløsningsmidler, såsom di- * 35 methylformamid, eftersom man kan opnå hurtigere omsæt- - ningshastigheder uden tendens til angreb på Ø-lactamen i hverken substratet eller reaktionsproduktet. Omsætningens DK 169892 Bl 19 temperaturområde er ikke kritisk (f.eks. 0 til 50 °C); men den holdes fortrinsvis ved stuetemperatur eller lavere for at minimere nedbrydningen af Æ-laetamen. Disse esterificeringsreaktioner overvåges og optimeres under 5 anvendelse af et tyndtlagskromatografi som ovenfor beskrevet. De mindst mulige reaktionstider er ønskværdige for at minimere nedbrydningen af Ø-lactamerne ifølge opfindelsen under disse esterificeringsreaktioner. Man foretrækker af denne grund iodider frem for bromider, som 10 igen foretrækkes frem for chlorider til anvendelse som reagenser. Når man anvender bromider eller chlorider, er iodid-katalyse sædvanligvis gavnlig. Når syntesen af en bestemt forbindelse ifølge opfindelsen kræver dannelsen af en ester af denne type, og når syntesesekvensen tilla-15 der valgfri ruter, foretrækkes det at indføre estergruppen forud for omlejringstrinnet.

Esterforbindelserne ifølge opfindelsen fremstilles også ved omsætning af en passende diazo-forbindelse med car-20 boxylsyren. Man anvender et inert aprotisk opløsningsmiddel. Methylenchlorid er særligt velegnet, eftersom det er særdeles flygtigt, og reaktionsprodukterne let kan indvindes ved opkoncentrering under vakuum. Temperaturen er ikke kritisk, f.eks. -25 eC til 35 °C, idet man foretræk-25 ker stuetemperatur eller lavere. Som et eksempel på denne type esterdannelse kan nævnes omsætningen mellem diphe-nyldiazomethan og en carboxylsyre ifølge den foreliggende opfindelse i methylenchlorid til dannelse af de tilsvarende benzhydrylestere. Denne reaktion kan ligeledes 30 overvåges og optimeres ved anvendelsen af tyndtlagskromatografi og infrarød spektroskopi. Når som helst den passende diazoforbindelse er til rådighed, foretrækker man denne præparation frem for den umiddelbart ovenfor beskrevne udskiftningsreaktion på grund af de almindeligvis 35 mildere reaktionsbetingelser, der kræves.

DK 169892 B1 20

En tredie metode til syntese af esterne ifølge den fore- s liggende opfindelse er via dehydratiserende kobling mellem den passende alkohol (2,2-trichlorethanol, benzhydro, benzylalkohol, 2-hydroxymethylnapthol etc.) og omtrent en 5 ækvivalent af en af de omhandlede carboxylsyrer. Den de-hydratiserende koblingsreaktion gennemføres under anvendelse af et stort udvalg af midler, der sædvanligvis anvendes ved peptidsyntese. Som repræsentanter for sådanne midler kan nævnes Ν,Ν-carbonyldiimidazol, N,Ν'-carbonyl-10 di-s-triazin, ethoxyacetylen, 1,1-dichlordiethylether, diphenylketen-p-tolylimin, N-hydroxyphthalimid, N-hydroxysuccinimid, N-hydroxypiperidin, ethylenchlorphos-phit, diethylethylenpyrophosphit, N-ethyl-5-phenyl-isoca-zolium-3'-sulfonat, phenylphosphor-di-(l-imidazolat) og 15 carbodiimider, såsom dicyolohexylcarbodiimid, 1-cyclo- hexyl-3-(2-morpholinomethyl)carbodiimid, N-(3-dimethyl- aminopropyl)-N’-ethylcarbodiimid, hydrochlorid, 1-ethyl- 3-(3'-dimethylaminopropyl)carbodiimid, hydrochlorid samt diethylcyanamid. Man anvender i almindelighed mellem 1 og 20 1,2 ækvivalenter af det afvandende middel i nærvær af en tert.-amin-katalysator (f.eks. pyridin, triethylamin; sædvanligvis mellem 1 og 1,5 ækvivalenter). Man anvender et inert, aprotisk opløsningsmiddel. Temperaturen er ikke kritisk (f.eks. -25 °C til 40 °C), idet man dog fortrins-25 vis arbejder ved stuetemperatur eller lavere. Methylen-chlorid som opløsningsmiddel og stuetemperatur er bekvemme betingelser. Hydratiseret reagens fjernes ved filtrering, og produkter udvindes ved simpel koncentrering under vakuum. Reaktionerne overvåges ved tyndtlagskromato-30 grafi og ved infrarød spektroskopi. Man foretrækker denne esterificerings-fremgangsmåde, når passende alkoholer er tilgængelige, frem for den ovenfor beskrevne udskiftning ^ med halogenider, på grund af de mildere reaktionsbetingelser. Det er klart, at sidekædecarboxylgrupper under de 35 ovenfor beskrevne forskellige esterificerings-betingelser ~ ligeledes vil have en tilbøjelighed til at blive esteri-ficeret. Dersom man ønsker en fri carboxylsyregruppe i DK 169892 B1 21 sldekæden/ blokeres denne fortrinsvis med en beskyttelsesgruppe (f.eks. benzyl, benzhydryl, 2-naphthylmethyl, der lader sig fjerne ved selektiv hydrogenolyse, dersom man Ønsker en pivaloyloxymethyl- eller en 2,2,2-trichlor-5 ethylester i C-3 stillingen), idet man undgår kromatografisk adskillelse af komplekse blandinger.

Amidinerne ifølge opfindelsen fremstilles ud fra de tilsvarende aminer ved omsætning mellem de sidstnævnte og et 10 lavere-alkylformamidat (f.eks. ethylformamidat) ved svagt basisk pH, f.eks. 8,5-10,5) i et reaktionsinert vandigt eller organisk opløsningsmiddel og ved temperaturen 9-50 °C. Som eksempler på betingelserne for denne omsætning kan anføres vandig phosphatpuffer (pH ca. 9,5) i dime-15 thylformamid ved stuetemperatur.

Visse forbindelser ifølge opfindelsen fremstilles alternativt ud fra mesylater, f.eks.

20 0C0CH- 0C0CHo f J i 3 CH.-CH ÆSO-CH- ^ \ 9SCH2CH2NHC0CH3 L r \ > 0 C00CH-C-H- 25 2 6 5 0C0CH- 0C0CK-,

» o i J

,CH3-CH^ ^XSv^SCH2CH2NHC0CH3 30 " C00CH2C6H5

Omsætningen gennemføres i et basisk to-fase-system (f.eks. 0,02N natriumhydroxid/methylenchlorid) i nærvær 35 af stort set et molært ækvivalent af et lipophilt kvater-nært salt (f.eks. benzyltrimethylammoniumchlorid).

DK 169892 B1 22

Det vil ud fra ovenstående diskussion være klart for fag- ; manden, at der for de fleste af de omhandlede forbindelser findes mere end en tilgængelig rute, og at man i al- * mindelighed i forvejen kan fastlægge flere optimale ru-5 ter. Dersom man f.eks. ønsker at fremstille pivaloyloxy-methyl-l-acetoxy-6-[2-amino-2-(4-hydroxyphenyl)-acetami-do]-2-methylcarbapenam-3-carboxylat, ville den mest direkte rute, som ville involvere nødvendig esterificering, acetylering og hydrogenolyse i foretrukne behandlings-10 trin, være at omlejre pivaloyloxymethyl-7-[2-benzyloxy- carbonylamino-2-(4-benzyloxycarbonyloxyphenyl)acetamido]- 2- diazol-3-methyl-l-oxoceph-3-em-4-carboxylat efterfulgt i rækkefølge af aktiveret zinkreduktion, hydridreduktion, acetylering og hydrogenolyse. Dersom man ønsker at frem- 15 stille l-acetoxy-6-[2-carboxy-(4-hydroxyphenyl)-acetami- do]-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat, ville en typisk mest direkte rute, som involverer esterificering, acetylering og hydrogenolyse i foretrukne trin, være omlejring af benzhydryl-7-[2-benzhydryloxycarbonyl-2-(4-benzyloxy-20 carbonyloxyphenyl)acetamido]-2-diazo-3-methyl-l-oxoceph- 3- em-4-carboxylat efterfulgt i rækkefølge af hydridreduk-tion, acetylering og hydrogenolyse; dersom man ønsker at fremstille 6-(1-acetoxyethyl)-l-oxo-2-methylcarbapenam-3-carboxylsyre, er den mest direkte rute at omlejre 2,2,2- 25 trichlorethyl-7-(1-acetoxyethyl)-2-diazo-3-methyl-l-oxo- ceph-3-em-4-carboxylat efterfulgt af aktiveret zinkreduktion; osv.

De som udgangsmaterialer i de foreliggende synteser nød-30 vendige 2-diazo-l-oxoceph-3-em-4-carboxylater fremstilles ved i litteraturen angivne metoder eller ved de præparations-metoder, som er anført mere detaljeret i det følgende. Sluttrinnet i syntesen af udgangsmaterialet er sædvanligvis indføring af 2-diazo-gruppen. 2-diazo-l-Ø- ^ 35 oxoceph-3-em-forbindelserne fremstilles i overensstemmel- - se med den metode, der er angivet af Ebbinghaus et al.

[J. Org. Chem. 44 (25), 4697 (1979)], eller alternativt i DK 169892 B1 23 det yderligere nærvær af kalium-tert.-butoxid, som det er beskrevet i efterfølgende præparationer. Sidstnævnte metode er ligeledes velegnet til syntesen af de tilsvarende 2-diazo-l-a-oxoceph-3-em-forbindelser, idet man dog al-5 mindeligvis anvender noget kraftigere reaktionsbetingelser med hensyn til tid og temperatur. De påkrævede 1-oxo-ceph-3-em-4-carboxylater er i rigelig grad tilgængelige i litteraturen (jfr. Bruyns of Koning, US patentskrift nr.

4 182 870). De nødvendige oxider fremstilles let ved oxi-10 dation med persyre (mest bekvemt m-chlorperbenzoesyre) eller 30 % hydrogenperoxid/myresyre udført som det næstsidste behandlingstrin eller ved et andet egnet forstadietrin. I nogle tilfælde dannes herved blandinger af Ια- og 1-0-oxider, som kan adskilles; i andre tilfælde 15 dannes rene 1-0-oxider. I begge tilfælde er oxiderne egnede til yderligere bearbejdning ifølge den foreliggende opfindelse. De nødvendige carboxyl- og amino- samt, om ønsket, hydroxy-beskyttende grupper indføres på et passende trin ved syntesen af udgangsmaterialet, idet man 20 anvender de ovenfor beskrevne metoder. Eftersom Ø-lacta-merne i disse forstadier i almindelighed er mere stabile end Ø-lactamerne ifølge opfindelsen, er der sædvanligvis en mindre tydelig præference med hensyn til den bestemte metode, der vælges til esterificering. Acetylering af 25 passende forstadier udføres på den ovenfor beskrevne måde til acetylering af forbindelser ifølge opfindelsen. Ben-zyloxycarbonylering af passende forstadier udføres ved den samme fremgangsmåde som acetylering, idet man anvender et ækvivalent carbobenzoxychlorid i stedet for acety-30 leringsmidlet. Aminogrupper kan selektivt acetyleres frem for hydroxygrupper under anvendelse af et enkelt molært ækvivalent af acyleringsmidlet.

De farmaceutisk acceptable kationsalte af de forbindelser 35 ifølge opfindelsen, som har en fri carboxylsyregruppe, fremstilles let ved standardmetoder. Man forener f.eks. et ækvivalent af det tilsvarende kationhydroxid, -carbo- DK 169892 B1 24 nat eller -hydrogencarbonat med carboxylsyren i et orga- 5 nisk eller vandigt opløsningsmiddel. Saltet isoleres ved koncentrering og/eller ved tilsætning af et ikke-opløs-ningsmiddel. 1 visse tilfælde isoleres saltet direkte fra 5 en reaktionsblanding uden isolering af den frie syreform. Farmaceutisk acceptable kationsalte indbefatter, men er ikke begrænset til, sådanne, der dannes med natrium, kalium, calcium, N,N'-dibenzylethylendiamin, N-methylgluc-amin og diethanolamin.

10

De farmaceutisk acceptable syreadditionssalte af de forbindelser ifølge opfindelsen, som har en fri aminogruppe eller amidinogruppe, fremstilles ligeledes let ved standardmetoder. Man forener f.eks. et ækvivalent af syren 15 med amin eller amidin i et organisk eller vandigt organisk opløsningsmiddel. Saltet isoleres ved koncentrering og/eller ved tilsætning af ikke-opløsningsmiddel. I visse tilfælde isoleres saltet direkte fra en reaktionsblanding uden isolering af den frie amin eller amidin. Farmaceu-20 tisk acceptable syreadditionssalte omfatter, men er ikke begrænset til salte med saltsyre, svovlsyre, salpetersyre, phosphorsyre, citronsyre, maleinsyre, ravsyre og me-thansulfonsyre.

25 Anvendeligheden af de forskellige forbindelser som mellemprodukter for fremstillingen af andre forbindelser ifølge opfindelsen vil fremgå klart af den forudgående diskussion. Disse forbindelsers antibakterielle virkning, som er et udtryk for deres anvendelighed til bekæmpelse 30 af bakterieinfektioner hos mennesker og dyr, som dyrefoderadditiver til fremme af vækst eller som konserveringsmidler for materialer, der nedbrydes biologisk af følsomme mikroorganismer måles bedst ved skive-plade-standard-metoden, som rutinemæssigt anvendes i kliniske laborato-35 rier til bestemmelse af mikroorganismers følsomhed over 5 for antimikrobielle forbindelser. Skiver til følsomheds-måling fremstilles ved at dyppe en standard 6,2 mm papir- 25 DK 169892 B1 skive i en opløsning af den forbindelse, der skal afprøves (koncentration 1 mg/ml) i et flygtigt opløsningsmiddel (f.eks. methylenchlorid), og skiven tørres, hvorved der fremstilles skiver indeholdende ca. 25 mikrogram af 5 forbindelsen. Skiverne anbringes på overfladen af et agar-vækstmedium, der er podet med den mikroorganisme, der skal afprøves, og som forinden er udhældt i plader i Petri-skåle. Pladerne inkuberes natten over ved 35-37 °C.

Den afprøvede forbindelses aktivitet viser sig ved en in-10 hiberingszone for bakterievækst rundt Om afprøvningsskiven. Denne zonens diameter frembyder et kvantitativt mål for den antibakterielle forbindelses aktivitet. I tabel I er anført aktiviteten for forskellige af de omhandlede forbindelser. Til sammenligning er vist de resultater, 15 der opnås af skiver med 10 mikrogram ampicillin og penicillin G som positive kontrolforbindelser. Den alternative fremgangsmåde til udvælgelse, såkaldt "screening" in vitro, der involverer væksten af mikroorganismerne i glas, som indeholder serievis fortyndede koncentrationer 20 af den forbindelse, der skal afprøves, i hjerne-hjerte-infusionsvæske, genspejler ikke på korrekt måde de omhandlede forbindelsers antibakterielle aktivitet, hvilket er et resultat af deres manglende stabilitet i afprøvningsmedierne. Som eksempel viser en 25 mikrogram skive 25 af pivaloyloxymethyl-2-methyl-l-oxocarbapenam-3-carboxy- lat, som blev afprøvet over for Staphylococcus aureus ved skive-plade-afprøvningen, at denne forbindelse har en god aktivitet over for denne specielle mikroorganisme, til trods for den kendsgerning af den samme forbindelse og 30 den samme mikroorganisme udviste en minimal inhiberende koncentration på over 200 mikrogram/ml ved afprøvningen i de serievis fortyndede glas. Resultaterne af afprøvningen med serievis fortynding i glas af forbindelser ifølge opfindelsen er sammenfattet i tabel II.

35 26 DK 169892 B1

TABEL I

Antibakteriel_aktivitet_af = 2§£k§£§B§5il_22_2åEk3B§Dl2-em-fgrbindelser

Forbindelse Inhiberingszone (mm)

Rl^2 A^B^r4 Λ XT ( 7

Cp-“ tZOOr To

(I) I

Η-Ό S

O O* b4 Η· Cd H

R^ a R < H H-κ: o pj O

1 f i / 4 η· root-· n o o R / >C .r er o rt o o η- o S-r H b* Η· O O H o I I H- fl> b4 O O Η Ω J_w-!L 3 o b ro ω ω b b

/y H ^COOR H· b O O W W

o · *ϋ Ω (DC P

ro b4 ro ro ro ro ro

(II) b Η· H· p P

o ro ro tu h tr b o (+ p b rt ro

Η Ω (D b Γ+ H- P

, ,, , ro obroo h ro Ώ1 _,2 _3 4 _ b h rt e p b- R R R A B I/II ro h· ^ ro ro ro cn Η E POM CH3 -O- I - - 0 - 18 18 Η E POM CH3 H OH I - - 0 - 0 0 Η Η H CH3 H OAc I - - 0 -12 0 Η H POM CH3 -O- '11 14 0 18 26 37 22 Η H POM CH3 H OH II - 10 13 10 15 15 Η H POM CH3 H OAc II - - 0 0 14 13 Η Η H CH3 Ξ OAc II 18 0 8 - 13 Η H POM CH - -O- II - - 12 - - 0 OAc PMA E POM CE3 -O- I - 0 12 15 21 ' - PMA H POM CH3 H OH I - 0 17 14 23 20 PMA H POM CH3 H OAc I - 0 0 0 16 11 PMA Η H CH3 H OAc I - 0 0 0 0 0 ^ PMA OMe POM CH3 -O- I 0 0 0 -11 0* PMA OMe POM CH3 H OH I 0 0 0 - 11 23 ' PMA OMe POM CH3 -O- II 0 0 0 - 33 8 MPI H POM CH3 -O- I 0 0 11 - 15 0 DK 169892 B1 27 TABEL I (forts.)

Forbindelse Inhiberingszone .eP—N-^:oor3 g* g (I) Η··σ S 1 1 ' trb* η· w <j w h-k; o ro <5 H- tn o Η ϋ o · &1 Ω rt O O H· Λ a π . P4 η· o o h 1 \ A Η· (D Ο O 1—1 R yCjl o H P> O O p -r rr η· ι-s o o ω t O (DC p vr '1 q ro p* to ω ω to /y ^ tZOOR-3 ^ η· η· p rr o ro ω ro h tr ,TT\ 0 r+b P ft (II) P1 O CD Pi rt H· ro o p ro ro h P h* r+ P P H· τοοΛ , _ tø H- '-'tø to co R1 RZ RRA B I/II ___,_ MPI Η POM CH3 H OH I 13 0 14 - 16 MPI H POM CH3 -O- II ·· 0 0 9 - 21 EPA H POM CH3 -O- I 21 12 12 - 21 EPA H POM CH3 H OH I 24 20 10 - 17 EPA Η H CK3 H OH I 25 16 9 - 16 EPA H POM CH3 -O- II 20 00 0 0 HET Η H CH3 H OH I 23 - 39 29 HET Η H CH3 H OAc I - 0 - 13 16 HET Η H OCH3H OH I - 11 - 42 22 HET H POM CH3 H OH I - 14 - 31 24 '' AET Η H CH3 H OH I 16 0 - 20 15 AET Η H CH- H OAc I 10 0 - 26 25 3 (a)

Positive kontrolforbindelser:

Penicillin 33 16 0 45 32

Penicillin G_32_0 - 0 45 33 ; POM = pivaloyloxymethyl PMA = 2-phenoxyacetamido MPI = 5-methyl-3-phenylisoxazolcarboxamido EPA = D-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-l-carboxamido}-2-phenylacetamido HET = 1-hydroxyethyl AET = 1-acetoxyethyl ( 3.) 10 mikrogram skiver; alle andre 25 mikrogram skiver.

DK 169892 B1 28 „ , _ o o o o o in o

Staphylococcus aureus o o o o o cn o

—---*---'- - N O) N N H CN

ΑΛΛΑ Λ (3 (d

Staphylococcus aureus o o o o o o o mi -η (Antibiotikaresistent) 9{ 9\ ?{ 01 0)1 mi cci

Il I Escherichia coli g ° g g § g g 31 g X λ X Η Π

Ml o pr 01 M £

Vi ø Escherichia coli o o o o o o o f{ § (Antibiotikaresistent)

CNl 2' M

ti 0)1 Q) _ _ . O O O O O O O

di Ό' n Pseudomonas aeruqmosa o o o o o o o

mi 01 -H--*........... CN CN CN CN CM Ol CN

Si +|j -c ΛΛΛΛΛΑΛ (31 0 Ml

^1 Bl Ή . o O O O O O O

mi i! Klebsiella pneumoniae o o o o o o o oi^J| Λ Λ Λ Λ Λ Λ Λ tric'd „ ,. ooooooo οι 3 Serratia marcescens ο ο ο ο ο ο o

Η II w' s Λ A A A A A A

, §1 ci m nil .H| ooooooo 13 9 rai Enterobacter cloacae ooooooo

PQ 01 dl -- - CN CN CN CN CM CM CM

OJ N AAA A A A A

IH ral ^j| *pi JhI ., ooooooo 3 oi Citrobacter diversus ο o ο ο ο ο o

ϋ I A A A A A A A

i mi

'Ml -HI OOOOOOO

? Proteus morgani ooooooo

Si P A Λ Λ Λ Λ Λ Λ •ΜΙ 01 •HI C0I >!

•HI

•PI j, -¾1 w

(di M

HI Η H

01

Ml O 0 0 , £2 . S3 < , +ji ml i o o i i ο o

Ail o o o 01 m Mill m d OS <| £2 £2 £2 £2

-HI Ο O

4-) I rr ο Ν' O N· cooMcoMMcn p| d U dO0S|£2£2£2£2£2£2£2 .

<1 \, \_/ U U U U O U Ό p,/ i βν/Ί s a s s s s 0 Y X *o , ο ο ο ο ο o m rfA. \ oil d o« k d d d Ci H \—z y-a 0 1 —-

Ό I —. H

2 CN I H CM H CM

M OS j" Λ. ·— OS i \\ PS| £5 £2 £2 £2 £2 £2 £2 M ^ / \d h / 'o 0 ci q> n; (P <d

Im h 2 S S

dl £2 £2 £2 d CM CM CM

DK 169892 B1 29 VD , oooomotno! j

Staphvlccoccus aureus o o o o <n m - ο λ

-- * — fSJ CNI Η H iH iH LJ

A A (3 — u ·

(tf i O

— N Η Ό

Staphylococcus aureus oooooor-fo ih - · g- --—---— O O O O o O - O Hg o (Antibiotikaresistent) nioiHoacNCMroH o « •h A A A Λ S +) μ -—- ftf <ι> t (tf X o

lJ w m in 0 kJ

Π „ , . , . „n - OOOOCMOCNO ΜΗ n Escherichia coll oooo . o - ο -h >f m ........ (ίννηοηόν hc3 u ΑΛΑ Λ NO) rj fii o in CD di

X ·* rC I

ve-ho^i nhi a noli οοοοοοηισ ft™ (D jiScn~-t-icnia ooooooi—ίο I l £ P NCMMN WN ^

g (Antibiotikaresistent) A A A A A A A

u oooooooo ^-d T

A Pseudomonas aeruginosa oooooooo ^|

~ .Η Λ Λ Λ Λ ^ Λ Λ * I

”·Η οοοο-οοο π φ Μ Klebsiella pneumoniae oooor,omo mrd ΑΛΑ A A ι Ε w .¾ oooomooo £ ?

Η S erratic marc esc en s SC

h S “ A A A A A *3 m . rtf o H oooo -» o m o om q 8 Enterobacter cloacae ooooejmeio ^o | C A A A A g h >.

E4 in (tf n, c OOOO «. O JJ I M-

Citrobacter diversus °° ° ° ^ S 1 1 g g « Λ A A A ttf o c σ> >ιη α ooommoino. x p m

Proteus morgani ρ Λ μ

ΑΛΑ VI Λ (ΰ » .R

rC Μ C

ft I

IH· ΓΜ >1 t

Π C

H 11 +J

H . <D C

<1 A

Η : H ^ J- (¾ -r I >

O CM

as ta k k c ' * «II 0-0 I OO-OO-^Q tt „ m ? ? &» · i ro η i i i \ _i ..

^ f H*4 »H »fH l-f* H-f +J Γ—1 ti O O e η, r* f •a· O -tf O •tf m ro m ro ro n cn ro PS Tj l ; Pi o & O «IKSSKBKKSK xWma \ / \ / oouuoooo g g, l (H\) S S 2 2 2 >1 O O tf O Y Y ro O O O O O o P u ω <Λ *A I Ρϋρ,^ο,α,ο,κκκ 3 h -p c

H \—ta V— 2 ftf g >-i G

P — H 0 0 -Η X I 5- « rg H c* I HCM £2 _^__ ft O Η α Η H -A —' Pi r—Λ -- K| OO^Kv-ik—v-!»-'-! ti S / Vn . / \\ 11 ·' 5

O ''Ijj Pi 2 EH

pq H22CuduCUPt3H oM(tf «|0,Ρ.2ΗΗΜ3ΰ CM P! —' DK 169892 B1 30

De antibakterielle forbindelser ifølge opfindelsen, der er anvendelige til behandling af systemiske infektioner * hos dyr, herunder hos mennesker, der er forårsaget af følsomme mikroorganismer, doseres i et niveau på 5-250 5 mg/kg pr. dag, fortrinsvis 10-150 mg/kg pr. dag, sædvanligvis i opdelte doser. Doseringen vil kunne varieres, afhængigt af det individ, der skal behandles, og af mikroorganismens følsomhed. Disse forbindelser er mest effektive, når de indgives parenteralt, fortrinsvis intra-10 muskulært, i form af en suspension af en mere stabil, såkaldt pro-medikament-esterform (som det er defineret ovenfor). Følsomheden hos mikroorganismer, der er isoleret i klinikkerne, afprøves rutinemæssigt i kliniske laboratorier ved hjælp af den ovenfor beskrevne skive-pla-15 de-metode. Foretrukne forbindelser er sådanne, der viser den største inhiberingszonediameter over for de bakterier, som forårsager den infektion, der skal behandles.

De parenterale doseringsformer, der kræves til den oven-20 for omtalte systemiske anvendelse, fremstilles fortrinsvis i fint fordelt, tør pulverform, der opløses eller bringes i suspension umiddelbart før anvendelsen i et farmaceutisk acceptabelt bærestof, såsom vand, saltvand, sesamolie eller lignende. Man kan også tilsætte midler, 25 der forbedrer suspensionsevnen og dispersions-kvaliteterne. Fremstillingen af optimale doseringsformer foregår ved metoder, der er velkendte inden for farmacien.

De antibakterielle forbindelser ifølge opfindelsen, der 30 er nyttige til behandling af topiske infektioner hos dyr, herunder hos mennesker, som forårsages af følsomme mikroorganismer, fremstilles som lotioner, cremer, salver, ge- ^ ler eller lignende i koncentrationer i området 5-200 mg/- 3 cm af doseringsformen, fortrinsvis i området 50-100 mg/- *„ 3 ' 35 cm . Doseringsformen påføres infektionsstedet ad libitum, sædvanligvis mindst én gang om dagen. De mikroorganismer, som forårsager infektionerne, isoleres rutinemæssigt i DK 169892 B1 31 kliniske laboratorier, og disse mikroorganismers følsom-hed for forbindelserne ifølge opfindelsen bestemmes rutinemæssigt i samme laboratorier ved hjælp af den ovenfor beskrevne skive-plademetode. Foretrukne forbindelser er 5 sådanne, der viser den største inhiberingszone for de bakterier, der forårsager den infektion, der skal behand les.

Foretrukne doseringsformer til topisk anvendelse er fint 10 fordelte suspensioner af pro-lægemiddel-esteren i et inert, farmaceutisk acceptabelt bærestof. Fremstilling af optimale doseringsformer vil foregå ved metoder, der er velkendte inden for farmacien.

15 Når de antibakterielle forbindelser ifølge opfindelsen er nyttige som vækstfremmende midler i dyrefoder til husdyr, indgives de i lave doseringsniveauer (f.eks. 10 g - 100 g af forbindelsen pr. ton foder). Sammenblandingen af forbindelser med foderet foregår sædvanligvis i to trin, 20 først ved fremstillingen af en såkaldt præmix (f.eks. 10-100 g af forbindelsen opblandet med 5-10 kg af sojamelbi-produkt eller lignende), som derpå blandes med foderet, når dette fremstilles i foderfabrikken. Eftersom vækst-fremning frembringes ved et lavt aktivitetsniveau, og ef-25 tersom forbindelsen samtidig er udsat for forhold, som er uden for den videnskabelige medarbejders kontrol, er de forbindelser ifølge opfindelsen, der foretrækkes til denne form for anvendelse, sådanne, der har en bedre stabilitet, nemlig i faldende præference-rækkefølge 1-acetoxy-30 carbapenam-3-carboxylatestere, l-hydroxycarbapenam-3-car- boxylatestere og l-acetoxycarbapen-2-em-3-carboxylateste-re.

De antibakterielle forbindelser ifølge opfindelsen, der 35 er nyttige som konserveringsmidler for biologisk nedbry delige materialer, blandes simpelthen med det biologisk nedbrydelige materiale i en koncentration, som i det DK 169892 B1 32 mindste er tilstrækkelig til at inhibere væksten af de bakterier, der forårsager den biologiske nedbrydning. Man kan anvende rutinemæssige serievise fortyndingsteknikker til bestemmelse af de koncentrationer, der er nødvendige 5 for at opnå det ønskede resultat.

Den foreliggende opfindelse belyses ved de efterfølgende eksempler.

10 EKSEMPEL 1

Pivaloyloxymethyl-2-methyl-l-oxocarbapen-2-em-3-carboxy- lat 15 I en standard pyrex-kolbe blev pivaloyloxymethyl-2-diazo- 3-methyl-1-0-oxoceph-3-em-4-carboxylat (124 mg, 0,35 mmol) opløst i 124 ml methylenchlorid, og opløsningen blev afkølet til -78 °C og belyst med en sollampe i ialt 20 25 minutter, medens reaktionen blev overvåget til fuldfø relse ved IR-spektralanalyser. Reaktionsblandingen blev inddampet til tørhed i vakuum, hvilket gav råt pivaloyl-oxymethyl-l-oxo-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat [IR (CH2C12): 1815, 1750, 1720 cm-1].

25

Alternativt blev blandingen efter reaktionens afslutning omrørt med 1,24 g Raney-nikkel ved -78 °C i 30 minutter, filtreret, og filtratet inddampet i vakuum til opnåelse af det samme produkt i en højere renhedsgrad.

30

Ved de samme metoder omdannes pivaloyloxymethyl-2-diazo- 3-methyl-l-a-oxoceph-3-em-4-carboxylat til det samme pi- % t valoyloxymethyl-2-methyl-l-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat.

& < * 35 Ved de samme metoder omdannes de andre diazo-α- og /5-oxider fra præparation 3 til de tilsvarende acetoxymethyl-, 1,3-dihydro-3-oxobenzo[c]furan-l-yl- og 1-ethoxycarbonyl- 33 DK 169892 B1 oxyethy1-2-methyl-1-oxocarbapen-2-em-3-carboxylater.

EKSEMPEL 2 5 Pivaloyloxymethyl-2-methyl-l-oxocarbapenam-3-carboxylat

Metode A

10 Pivaloyloxymethyl-2-methyl-1-oxocarbapen-2-em-3-carboxy- lat, frisk fremstillet ud fra 50 mg pivaloyloxymethyl-1-/5-oxo-2-diazo-3-methylceph-3-em-4-carboxylat ved den i eksempel 1 angivne metode (idet man anvendte det alternative Raney-nikkel-behandlingstrin), blev optaget i ca.

15 0,25 ml tetrahydrofuran og sat til en opslæmning af 500 mg zinkpulver, som var specielt aktiveret under anvendelse af den af Rieke og Uhm angivne metode [Synthesis, 452 (1975)] i 15 ml 30 procentig eddikesyre i tetrahydrofuran ved 0 “C. Efter omrøring i 1 time ved denne temperatur 20 blev reaktionsblandingen fortyndet med toluen, inddampet i vakuum, og resten renset flere gange med toluen. Den vakuumpumpede inddampningsrest blev opløst i overskud af methylenchlorid, zinket blev fjernet ved filtrering, og filtratet blev geninddampet i vakuum, hvilket gav i ho- 25 vedsagen homogent pivaloyloxymethyl-2-methyl-l-oxocarba- penam-3-carboxylat (TLC: Rf 0,45 med 18:1 chloro form :ethylacetat som elueringsmiddel; IR 1780, 1760 cm~

V

30 Ved den samme metode omdannes de andre carbapen-2-em-es-tere fra eksempel 1 til de tilsvarende acetoxymethyl-, l,3-dihydro-3-oxobenzo[c]furan-l-yl- og 1-ethoxycarbonyl-oxyethyl-2-methyl-1-oxocarbapenam-3-carboxylater.

35 DK 169892 B1 34

Metode B 1

Ved metode B fra eksempel 69 omdannes natrium-2-methyl-l-oxocarbapenam-3-carboxylat til pivaloyloxymethyl-2-me-5 thyl-1-oxocarbapenam-3-carboxylat. Den samme metode, men under anvendelse af en ækvivalent mængde brommethylace-tat, 1,3-dihydro-3-oxobenzo[c]furan-l-yl-bromid eller 1-ethoxycarbonyloxyethylchlorid, anvendes til fremstilling af henholdsvis acetoxymethyl-, 1,3-dihydro-3-oxobenzo[c]-10 furan-l-yl- og l-ethoxycarbonyloxyethyl-2-methyl-l-oxo- carbapenam-3-carboxylat.

EKSEMPEL 3 15 Pivaloyloxymethyl-l-hydroxy-2-methylcarbapenam-3-carboxy- lat

Metode A

20

Pivaloyloxymethyl-2-methyl-1-oxocarbapenam-3-carboxylat (70 mg, 0,23 mmol) blev opløst i 3 ml methylenchlorid og afkølet til -78 eC. Der blev tilsat tetrabutylammonium-borhydrid (15 mg, 0,06 mmol), og reaktionsblandingen blev 25 omrørt i 1 time ved -78 °C, ved hvilket tidspunkt TLC (silicagel; 4:1 chloroform:ethylacetat som elueringsmid-del; detektion ved alkalisk permanganat-sprøjtning) viste at der ikke var noget udgangsmateriale tilbage. Der blev tilsat eddikesyre (1 ækvivalent, 0,24 mmol), og blandin-30 den blev derpå hældt ud i vand. Den organiske fase blev skilt fra, vasket med yderligere portioner vand og derpå med saltvand, tørret over vandfrit magnesiumsulfat, filtreret og inddampet til tørhed. Det således opnåede råprodukt blev kromatograferet på silicagel (4:1 methylen-35 chlorid:ethylacetat som elueringsmiddel), hvilket gav renset pivaloyloxymethyl-l-hydroxy-2-methylcarbapenam-3-carboxylat (TLC: Rf 0,14 med 4:1 chloroform:ethylacetat DK 169892 B1 35 som elueringsmiddel).

Den samme metode anvendes til at omdanne de andre 1-oxo-penamestere i eksempel 2 til de tilsvarende acetoxyme-5 thyl-, l,3-dihydro-3-oxobenzo[c]furan-l-yl- og 1-ethoxy-carbonyloxyethyl-l-hydroxy-2-methyl-carbapenam-3-carboxy-later.

Metode B

10

Ved metode B fra eksempel 69 omdannes natrium-1-hydroxy- 2-methylcarbapenam-3-carboxylat til pivaloyloxymethyl-1-hydroxy-2-methylcarbapenam-3-carboxylat.

15 Den samme metode, men under anvendelse af en ækvivalent mængde brommethylacetat, 1,3-dihydro-3-oxobenzo[c]furan- 1- yl-bromid eller 1-ethoxycarbonyloxyethylchlorid, anvendes til fremstilling af henholdsvis acetoxymethyl-, 1,3-dihydro-3-oxobenzo[c]furan-l-yl- og 1-ethoxycarbonyloxy- 20 ethyl-l-hydroxy-2-methylcarbapenam-3-carboxylat.

Metode C

Ved metoden fra eksempel 2 reduceres pivaloyloxymethyl-1-25 hydroxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat med særligt aktiveret zinkpulver i eddikesyretetrahydrofuran, idet reaktionen overvåges ved TLC (4:1 chloroform:ethylace-tat), og produktet isoleres, hvilket giver pivaloyloxyme-thyl-l-hydroxy-2-methylcarbapenam-3-carboxylat.

30

Ved den samme metode omdannes de andre 1-hydroxycarbapen- 2- em-estere fra eksempel 4 til de tilsvarende acetoxymethyl-, l,3-dihydro-3-oxobenzo[c]furan-l-yl- og 1-ethoxy-carbonyloxyethyl-1-hydroxy-2-methylcarbapenam-3-carboxy- 35 later.

DK 169892 B1 36

Ved den samme metode omdannes l-acetoxycarbapen-2-em-es- ? terne fra eksempel 5 til de tilsvarende pivaloyloxyme-thyl-, acetoxymethyl-, l,3-dihydro-3-oxobenzo[c]furan-1-yl- og 1-ethoxycarbonyloxyethy1-1-hydroxy-2-methylcarba-5 penam-3-carboxylater.

EKSEMPEL 4

Pivaloyloxymethyl-l-hydroxy-2-methylcarbapen-2-em-3-car-10 boxylat

Pivaloyloxymethyl-2-diazo-3-methyl-10-oxoceph-3-em-4-car-boxylat (150 mg, 0,42 mmol) blev omdannet til en methy-15 lenchloridopløsning af pivaloyloxymethyl-2-methyl-l-oxo- carbapen-2-em-3-carboxylat ved metoden fra eksempel 1.

Uden isolering, og mens temperaturen fortsat blev holdt ved -78 °C, tilsattes tetrabutylammoniumborhydrid (26,4 mg, 0,092 mmol), og blandingen blev omrørt i 30 minutter.

20 Reaktionen blev udslukt med eddikesyre (0,58 ækvivalen ter), blandingen blev ekstraheret to gange med vandig buffer (pH 8), tørret over vandfrit natriumsulfat og filtreret, hvilket gav en methylenchloridopløsning af piva-loyloxymethyl-l-hydroxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxy-25 lat [IR (CH2C12): 1780, 1745 cm"1; Rf 0,25 (4:1 chloro form :ethylacetat)]. Dette produkt kan om ønsket yderligere isoleres ved inddampning i vakuum, idet man holder temperaturen så lav som muligt for at minimere nedbrydning.

30

Ved de samme metoder omdannes de andre «- og 0-oxider fra præparation 3 til opløsninger af de tilsvarende 1-oxocar- * bapen-2-em-estere, og derpå til de tilsvarende acetoxymethyl-, l,3-dihydro-3-oxobenzo[c]furan-l-yl- og 1-hydroxy-35 2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylater.

37 DK 169892 B1 EKSEMPEL 5

Pivaloyloxymethyl-l-acetoxy-2-methylcarbapen-2-em-3-car- boxylat 5 -

Metode A

Til en frisk fremstillet methylenchloridopløsning af pi-10 valoyloxymethy1-1-hydroxy-2-methylcarbapen-2-em-3-car- boxylat fra eksempel 4, afkølet til -78 °C, blev tilsat eddikesyreanhydrid (0,17 ml, 1,68 mmol), pyridin (0,144 ml, 1,68 mmol) og 4-dimethylaminopyridin (10,5 mg, 0,086 mmol) i to aliguote dele i løbet af 2 timer. Reaktionen 15 blev overvåget ved TLC (3:1 chloroform:ethylacetat). Efter at reaktionsblandingen var blevet holdt ved tøristemperatur i ca. 16 timer, blev der tilsat yderligere 4-dimethylaminopyridin (0,5 mg), og reaktionen fortsatte i 2 timer ved -78 “C. Reaktionsblandingen blev ekstraheret to 20 gange med vandig buffer (pH 7), tørret over vandfrit natriumsulfat, filtreret og inddampet i vakuum. Inddamp-ningsresten blev kromatograferet på 8 g silicagel (6:1 chloroform:ethylacetat som elueringsmiddel, overvåget ved TLC eller IR spektralanalyse), hvilket gav pivaloyloxyme-25 thyl-l-acetoxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat [15 mg; IR (CH2C12) 1780, 1740 cm"1; Rf 0,75 (3:1 chloro form :ethylacetat).

Ved den samme metode omdannes de andre 4-hydroxycarbapen-30 2-em-estere fra eksempel 4 til de tilsvarende acetoxyme-thyl-, l,3-dihydro-3-oxobenzo[c]furan-l-yl- og 1-ethoxy-carbonyloxyethyl-1-acetoxy-3-methylcarbapen-2-em-3-car-boxylater.

35 DK 169892 B1 38

Metode B *

Ved metoden fra præparationerne 1, 12, 15, 21 etc. este-rificeres 1-acetoxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxy1syre 5 til dannelse af pivaloyloxymethyl-l-acetoxy-2-methylcar- bapen-2-em-3-carboxylat.

Ved den samme metode, men under anvendelse af en ækvivalent mængde brommethylacetat, l,3-dihydro-3-oxobenzo[c]-10 furan-l-ylbromid eller 1-ethoxycarbonyloxyethylchlorid, fremstilles henholdsvis acetoxymethyl-, 1,3-dihydro-3-oxobenzo[c]furan-l-yl- og 1-ethoxycarbonyloxyethyl-l-ace-toxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat.

15 EKSEMPEL 6

Benzhydry1-2-methyl-1-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat 20 Ved proceduren fra eksempel 1 (30-50 minutters bestrå lingstid, og idet man inkorporerede en behandling med 500 mg Raney-nikkel) blev benzhydryl-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat (50 mg) i 50 ml methylenchlorid omdannet til benzhydry1-2-methyl-1-oxocarbapen-2-em-3-25 carboxylat [IR (CH2C12) 1810 cm-1].

EKSEMPEL 7

Benzhydryl-2-methyl-l-oxocarbapenam-3-carboxylat 30 -

Det i eksempel 6 frisk fremstillede benzhydryl-2-methyl- s 1-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat blev reduceret ved den detaljerede procedure fra eksempel 2 til dannelse af * 35 benzhydryl-2-methyl-l-oxocarbapenam-3-carboxylat [37 mg, 86 %, Rf 0,59 (18:1 chloroform:ethylacetat), omkrystallisation fra methylenchlorid/hexan gav produktet med smel- DK 169892 B1 39 tepunkt 132-133 °C].

Røntgenkrystallografisk analyse indikerede, at dette produkt havde følgende struktur og relative stereokemi: 5 0 f T''CE„ H 3 i-N— ^ 10 o 'cooch(c6h5)2 15 EKSEMPEL 8

Benzhydryl-l-hydroxy-2-methylcarbapenam-3-carboxylat 20 Ved proceduren fra eksempel 3 blev benzhydryl-2-methyl-l-oxocarbapenam-3-carboxylat (53 mg i 3 ml methylenchlorid under anvendelse af kun de 10 mg reduktionsmiddel, der oprindelig blev tilsat) omdannet til renset benzhydryl-1-hydroxy-2-methylcarbapenam-3-carboxylat [53 mg, Rf 0,30 25 (4:1 chloroform:ethylacetat)].

EKSEMPEL 9

Benzhydryl-l-acetoxy-2-methylcarbapenam-3-carboxylat 30 -

Frisk fremstillet benzhydryl-l-hydroxy-2-methylcarbape-nam-3-carboxylat (53 mg, 0,15 mmol) blev opløst i 5 ml methylenchlorid og afkølet til -10 °C. Der blev tilsat 35 pyridin (12 mg, 0,15 mmol), eddikesyreanhydrid (15,4 mg, 0,15 mmol) og 4-dimethylaminopyridin (18,4 mg, 0,15 mmol), og blandingen blev omrørt 1 time ved -10 eC, på DK 169892 B1 40 hvilket tidspunkt TLC (4:1 chloroform:ethylacetat) indi- ' kerede en fuldstændig omdannelse til acetatesteren. Reaktionsblandingen blev kromatograferet på silicagel (9:1 methylenchlorid:ethylacetat som elueringsmiddel), hvilket 5 gav renset benzhydry1-1-acetoxy-2-methylcarbapenam-3-car-boxylat [Rf 0,65 (4:1 chloroform:ethylacetat)].

EKSEMPEL 10 10 1-acetoxy-2-methylcarbapenam-3-carboxylsyre

Benzhydryl-l-acetoxy-2-methylcarbapenam-3-carboxylat (26 mg) blev opløst i 3 ml ethylacetat. Der blev tilsat hy- 15 drogeneringskatalysator (10 % palladium-på-carbon, 26 mg), og reaktionsblandingen blev hydrogeneret ved stuetemperatur og atmosfæretryk i 1 time, på hvilket tidspunkt TLC (4:1 chloroform:ethylacetat) indikerede, at der ikke var noget udgangsmateriale tilbage. Katalysatoren 20 blev fjernet ved filtrering, og filtratet blev inddampet under vakuum, hvilket gav l-acetoxy-2-methylcarbapenam-3-carboxylsyre [15 mg, Rf 0,0 (4:1 chloroform:ethylacetat); IR (CH2C12) 1770, 1730 cm-1].

25 Triethylammoniumsaltet af produktet blev fremstillet ved opløsning i methylenchlorid, tilsætning af en ækvivalent mængde triethylamin og inddampning til tørhed. Andre farmaceutisk acceptable aminsalte fremstilles på samme måde.

30 Natriumsaltet af dette produkt fremstilles ved opløsning af den frie syre i vand under indvirkning af et ækvivalent natriumhydrogencarbonat og frysetørring af den såle- .

des fremstillede opløsning.

« 35 Under anvendelse af de samme metoder omdannes benzhydryl- 2-methyl-1-oxocarbapenam-3-carboxylat og benzhydryl-1-hydroxy- 2 -methylcarbapenam- 3 -carboxylat til henholdsvis na- DK 169892 B1 41 trium-2-methyl-1-oxocarbapenam-3-carboxylat og natrium-1-hydroxy-2-methylcarbapenam-3-carboxylat.

EKSEMPEL 11 5 2.2.2- trichlorethyl-2-methyl-l-oxocarbapen-2-em-3-car-boxylat 10 2,2,2-trichlorethyl-2-diazo-3-methyl-l-0-oxoceph-3-em-4- carboxylat blev omdannet til 2,2,2-trichlorethyl-2-me-thyl-l-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat Ifølge proceduren fra eksempel 1, idet reaktionen blev overvåget ved IR-spektralanalyse. I 10 mg målstok behøvedes 15 minutter 15 til at fuldføre reaktionen, medens der i 100 mg målestok behøvedes 40 minutter. Produktet blev isoleret ved ind-dampning af reaktionsblandingen i vakuum, uden behandling med Raney-nikkel.

20 EKSEMPEL 12 2.2.2- trichlorethyl-l-hydroxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat 25

Frisk fremstillet 2,2,2-trichlorethyl-2-ethyloxycarbapen- 2-em-3-carboxylat fremstillet ud fra 100 mg (0,317 mmol) af oxid-forstadiet ifølge eksempel 11, blev optaget i 2 ml methylenchlorid og afkølet til -78 °C. Der blev tilsat 30 trimethylammoniumborhydrid (23 mg, 0,075 mmol). Efter 30 minutter viste IR-spektralanalyse (1775 cm”"1·) en tilfredsstillende reduktion. Reaktionsblandingen blev ud-slukt med eddikesyre (0,58 ækvivalenter, 10 ul), ekstraheret to gange med vandig bufferopløsning (pH 7), tørret 35 over vandfrit magnesiumsulfat og filtreret, hvilket gav en opløsning af 2,2,2-trichlorethyl-l-hydroxy-2-methyl-carbapen-2-em-3-carboxylat. Om ønsket isoleres dette pro- 42 DK 169892 B1 dukt yderligere ved inddampning til tørhed under vakuum ved reduceret temperatur.

Ved den samme procedure omdannes benzhydry1-2-methyl-1-5 oxocarbapen-2-em-3-carboxylat til benzhydry1-1-hydroxy-2- methylcarbapen-2-em-3-carboxylat.

EKSEMPEL 13 10 2,2,2-trichlorethyl-l-acetoxy-2-methylcarbapen-2-em-3- carboxylat

Til en frisk fremstillet opløsning af 2,2,2-trichlor-15 ethyl-l-hydroxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat i me- thylenchlorid, fremstillet ud fra 100 mg (0,317 mmol) af 1- beta-oxidet ved eksemplerne 11 og 12) blev tilsat 24 dl (0,317 mmol) pyridin, 29 dl (0,317 mmol) eddikesyreanhy-drid og 4 mg 4-dimethylaminopyridin. Infrarød spektral- 20 analyse viste en klar omdannelse til det ønskede acetat.

Efter vask med vand og tørring gav inddampning til tørhed 2,2,2-trichlorethyl-l-acetoxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat [IR (CH2C12) 1780, 1725, 1700 cm"1, Rf 0,7 -0,75 (4:1 chloroform:ethylacetat)].

25

Ved den samme metode omdannes benzhydryl-1-hydroxy-2-me-thylcarbapen-2-em-3-carboxylat til benzhydryl-1-acetoxy- 2- methylcarbapen-2-em-3-carboxylat.

30 » Λ 35 EKSEMPEL 14 43 DK 169892 B1

Natrium-1-acetoxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat 5

Metode A

Selektiv, mild spaltning af 2,2,2-trichlorethylesteren blev opnået ifølge den metode, der er angivet af Just og 10 Grozinger [Synthesis, 457 (1976)]. 2,2,2-trichlorethyl-l-acetoxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat (46 mg) blev opløst i 0,812 ml tetrahydrofuran og afkølet til 0 °C.

Der blev tilsat zinkpulver (85 mg) efterfulgt af vandig phosphatbuffer (0,162 ml, pH 5,5). Reaktionsblandingen 15 blev holdt under omrøring ved 0 °C i 30 minutter, på hvilket tidspunkt TLC (4:1 chloroform:ethylacetat) indikerede, at der ikke var foregået reduktion i signifikant udstrækning. Blandingen blev opvarmet til stuetemperatur.

En langsom reaktion blev indikeret gennem TLC. Efter 15 20 minutter blev tilsat yderligere zinkpulver (85 mg), og omrøringen blev fortsat i 3 timer, på hvilket tidspunkt TLC indikerede, at omsætningen var stort set fuldført. Reaktionsblandingen blev filtreret, og tetrahydrofuran blev afdestilleret fra filtratet under vakuum. Den vandi-25 ge inddampningsrest blev justeret til pH 7,0 med natrium-hydrogencarbonat og frysetørret, hvilket gav natrium-1-acetoxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat [Rf 0,0, (4:1 chlorform:ethylacetat)].

30 Metode B

Ved metoderne fra eksempel 10 hydrogenolyseres benzhy-dryl-l-acetoxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat til dannelse af l-acetoxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylsy-35 re og dens natriumsalt.

EKSEMPEL 15 * 44 DK 169892 B1

Pivaloyloxymethyl-2-acetoxymethyl-l-oxocarbapen-2-em-3- carboxylat 5 -

Pivaloyloxymethyl-2-diazo-l-beta-oxocephalosporanat (25 mg) blev opløst 1 25 ml methylenchlorid, afkølet til -78 °C og bestrålet med en sollampe. Reaktionen blev 10 overvåget ved infrarød spektralanalyse, idet man fulgte diazo-båndets forsvinden. Reaktionen var stort set afsluttet efter 1 times forløb, hvilket førte til en opløsning i methylenchlorid af pivaloyloxymethyl-2-acetoxyme-thyl-l-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat [IR (CI^C^) 1810, 15 1740 cm”1]. Produktet blev isoleret i form af en olie ved inddampning under vakuum. Opretholdelsen af en lav temperatur forhindrer urimelig nedbrydning under isoleringen.

EKSEMPEL 16 20

Pivaloyloxymethyl-2-methyl-l-oxo-6-(2-phenoxyacetamido)-carbapen-2-em-3-carboxylat 25 Idet man fulgte den ene eller den anden af de alternative metoder fra eksempel 1, blev pivaloyloxymethyl-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxo-7-(2-phenoxyacetamido)ceph-3-em-4-car-boxylat (5 mg) i 5 ml methylenchlorid (under anvendelse af 30 minutters bestrålingstid) omdannet til pivaloyloxy-30 methyl-2-methyl-l-oxo-6-(2-phenoxyacetamido)carbapen-2- em-3-carboxylat [IR (CHjClg) 1805, 1740, 1715, 1680 cm” 1].

* 35

Pivaloyloxymethyl-2-methyl-l-oxo-6-(2-phenoxyacetamido)- carbapenam-3-carboxylat 5 - EKSEMPEL 17 45 DK 169892 B1

Frisk fremstillet pivaloyloxymethyl-2-methyl-1-oxo-6-(2-phenoxyacetamido)carbapen-2-em-3-carboxylat (fremstillet ud fra 200 mg pivaloyloxymethyl-2-diazo-3-methyl-l-beta-10 oxo-7-(2-phenoxyacetamido)ceph-3-em-4-carboxylat (og idet en behandling med 2 g Raney-nikkel blev inkorporeret i isoleringstrinnet)) blev optaget i 1 ml tetrahydrofuran og sat til en omrørt opslæmning af 2 g specielt aktiveret zinkpulver (eksempel 2) i 6 ml eddikesyre, indeholdende 15 30 % tetrahydrofuran, som blev holdt ved 0-5 °C. Efter omrøring i 1 time ved denne temperatur blev reaktionsblandingen fortyndet med toluen og inddampet til tørhed under vakuum, hvilket gav pivaloyloxymethyl-2-methyl-l-oxo-6-(2-phenoxyacetamido)carbapenam-3-carboxylat [Rf 20 0,34 (9:1 chloroform: ethylacetat); IR (CH2C12) 1790, 1750, 1680 cm-1].

EKSEMPEL 18 25 Pivaloyloxymethyl-l-hydroxy-2-methyl-6-2-(phenoxyacetami do )carbapenam-3-carboxylat

Ved procedurerne fra eksemplerne 3 og 6 blev pivaloyloxy-30 methyl-2-methyl-l-oxo-6-(2-phenoxyacetamido)carbapenam-3- carboxylat (102 mg, 0,23 mmol) i 3 ml methylenchlorid reduceret ved indvirkning af tetrabutylammoniumborhydrid (15 mg, 0,06 mmol) og isoleret, hvilket gav renset piva-loyloxymethy1-1-hydroxy-2-methyl-6-(2-phenoxyacetamido)-35 carbapenam-3-carboxylat [68 mg, Rf 0,26 (4:1 chloro form: ethylacetat); IR (CH2C12) 1775, 1750, 1675 cm”1].

Pivaloyloxymethyl-l-acetoxy-2-methyl-6-(2-phenoxyacetami do )carbapenam-3-carboxylat 5 - EKSEMPEL 19 46 DK 169892 B1

Ved proceduren fra eksempel 18 blev pivaloyloxymethyl-2-methy1-1-oxo-6-(2-phenoxyacetamido)carbapenam-3-carboxy-lat (135 mg, 0,3 mmol) reduceret med tetrabutylammonium-10 borhydrid, og Isoleringen blev ført til det stadium, hvor der forelå en vasket, tørret og filtreret opløsning af pivaloyloxymethy1-1-hydroxy-2-methyl-6-(2-phenoxyacetamido) carbapenam- 3- carboxy la t i methylenchlorid. Denne opløsning blev afkølet til -10 °C. Der blev i rækkefølge 15 tilsat pyridin (24 mg, 0,3 mmol), eddikesyreanhydrid (31 mg, 0,3 mmol) og 4-dimethylaminopyridin (4 mg, 0,3 mmol).

Efter omrøring i 1 time ved -10 eC indikerede TLC (4:1 chloroform:ethylacetat) fuldstændig acetylering. Reaktionsblandingen blev fortyndet med toluen og inddampet 20 til tørhed under vakuum efterfulgt af uddrivninger med toluen. Kromatografi på silicagel (20:1 methylenchlorid:-ethylacetat) gav pivaloyloxymethyl-l-acetoxy-2-methyl-6-(2-phenoxyacetamido)carbapenam-3-carboxylat [10 mg, 0,36 (4:1 chlorform:ethylacetat), IR (CH^C^) 1780, 1750, 25 1685 cm~^].

EKSEMPEL 20

Benzhydryl-2-methyl-l-oxo-6-2-(phenoxyacetamido Jcarbapen-30 2-em-3-carboxylat *

Benzhydryl-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxo-7-(2-phenoxyacetamido )ceph-3-em-4-carboxylat (200 mg) i 200 ml methylen-35 chlorid blev bestrålet ved -78 °C i en Pyrex-kolbe med en sollampe igennem 30 minutter. Reaktionsblandingen blev inddampet til tørhed, hvilket gav benzhydryl-2-methyl-l- 47 DK 169892 B1 oxo-6-(2-phenoxyacetamido)-carbapen-2-em-3-carboxylat [IR (CH2C12) 1810, 1720, 1690 can-1].

Ved den samme procedure omlejres 2,2,2-trichlorethyl-2-5 diazo-l-beta-oxo-7-(2-phenoxyacetamldo)ceph-3-em-4-car- boxylat [Ebblnghaus et al., J. Org., Chem. 44, 4697 (1979)] til 2,2,2-trichlorethyl-2-methyl-l-oxo-6-(2-phe-noxyacetamido)carbapen-2-em-3-carboxylat, og benzhydryl- 2-diazo-l-beta-oxo-7-(2-phenoxyacetamido)cephalosporanat 10 (Ebbinghaus et al., samme publikation) omlejres til benz-hydryl-2-(acetoxymethyl-1-oxo-6-(2-phenoxyacetamido)car-bapen-2-em-3-carboxylat.

EKSEMPEL 21 15

Benzhydryl - 2 -methyl -1 -oxo- 6 - (2-phenoxyacetamido) carbape-nam-3-carboxylat 20 Benzhydryl-2-methyl-1-oxo-6-(2-phenoxyacetamido)carbapen-

2-em-2-carboxylat (frisk fremstillet ud fra 200 mg benzhydryl -2-diazo-3-methyl-1-beta-oxo-7-(2-phenoxyacetami-do)ceph-3-em-4-carboxylat ifølge proceduren fra eksempel 20, blev opløst i den mindst mulige mængde tetrahydrofu-25 ran og sat til en blanding af 2 g af specielt aktiveret zinkpulver (eksempel 2), der var opslæmmet i en blanding af 4 ml eddikesyre og 2 ml tetrahydrofuran ved -10 °C. Reaktionsblandingen blev omrørt i 1 time ved -10 eC, fortyndet med toluen og inddampet til tørhed under vakuum 30 med toluenuddrivninger. Remanensen blev optaget i toluen, zink og zinksalte fjernet ved filtrering, og opløsningen geninddampet, hvilket gav benzhydryl-2-methyl-l-oxo-6-(2-phenoxyacetamido)carbapenam-3-carboxylat [140 mg, IR

(CH2C12) 1790, 1745, 1680 cm"1].

Ved den samme procedure med isolering i overensstemmelse med den analoge zinkreduktion fra eksempel 34, metode B, 35 DK 169892 B1 48 omdannes 2,2,2-trichlorethyl-2-methyl-l-oxo-6-(2-phenoxy-acetamido)carbapen-2-em-3-carboxylat til natrium-2-me-thyl-l-oxo-6-(2-phenoxyacetamido)carbapenam-3-carboxylat.

5 EKSEMPEL 22

Benzhydry1-1-hydroxy-2-methyl-6-(2-phenoxyacetamido)car-bapenam-3-carboxylat 10

Ifølge de procedurer, som er detaljeret beskrevet i eksempel 3, blev benzyhydryl-2-methyl-l-oxo-6-(2-phenoxy-acetamido)-carbapenam-3-carboxylat (138 mg, 0,28 mmol) i 15 ml methylenchlorid reduceret med tetrabutylammonium-15 borhydrid (18 mg, 0,07 mmol) ved -78 eC, overvåget og isoleret i form af en vasket, tørret methylenchloridop-løsning af benzhydryl-l-hydroxy-2-methyl-6-(2-phenoxy-acetamido)carbapenam-3-carboxylat (R^ 0,24 (4:1 chloroform :ethylacetat)]. Om ønsket, isoleres produktet yderli-20 gere ved inddampning til tørhed under vakuum.

EKSEMPEL 23

Benzhydry1-1-acetoxy-2-methyl-6-(2-phenoxyacetamido)car-25 bapenam-3-carboxylat

Den vaskede og tørrede methylenchloridopløsning af benz-hydryl-l-hydroxy-2-methyl-6-(2-phenoxyacetamido)carbape-30 nam-3-carboxylat, frisk fremstillet i overensstemmelse med eksempel 22, blev afkølet til -10 eC. Der blev i rækkefølge tilsat pyridin (22 mg, 0,28 mmol), eddikesyre-anhydrid (29 mg, 0,28 mmol) og 4-dimethylaminopyridin (3,4 mg, 0,028 mmol). Efter omrøring i 1 time ved -10 eC : 35 viste TLC (4:1 chloroform:ethylacetat), at acetyleringen var fuldstændig. Reaktionsblandingen blev inddampet til tørhed under vakuum med toluenuddrivninger. Kromatografi 49 DK 169892 B1 på silicagel under anvendelse af methylenchlorid-ethyl-acetat 1 stigende mængde (0 - 7,5 % ethylacetat) gav benzhydry1-1-acetoxy-2-methyl-6-(2-phenoxyacetamido)car-bapenam-3-carboxylat [18 mg, Rf 0,56 (4:1 chloro- 5 form:ethylacetat, IR (CHClg) 1780, 1730, 1680 cm”*].

EKSEMPEL 24 1- acetoxy-2-methyl-6-(2-phenoxyacetamido)carbapenam-3- 10 carboxylsyre

Benzhydryl-l-acetoxy-2-methyl-6-(2-phenoxyacetamido)car-bapenam-3-carboxylat (18 mg) blev opløst i 3 ml ethylace-15 tat. Der blev tilsat hydrogenerings-katalysator (18 mg, 10 % palladium-på-carbon), og blandingen blev hydrogene-ret ved atmosfæretryk og stuetemperatur i 1 time. Når det blev indikeret ved TLC (4:1 chloroform:ethylacetat), at der ikke fandt nogen ændring sted, blev der tilsat en an-20 den mængde katalysator (18 mg). I løbet af den næste time foregik nogen omdannelse ifølge afprøvning på TLC, hvorpå der blev tilsat en tredie mængde katalysator (18 mg). Efter afslutningen af endnu en times hydrogenering viste TLC-afprøvning, at reduktionen var fuldstændig. Katalysa-25 toren blev fjernet ved filtrering med vaskning med ethylacetat. Det samlede filtrat og vaske-væskerne blev inddampet til tørhed under vakuum til dannelse af 1-acetoxy- 2- methyl-6-(2-phenoxyacetamido)carbapenam-3-carboxylsyre [Rf 0,77 (18:1 acetone:vand), IR (CH2C12) 1775, 1725, 30 1675 cm *].

35

Pivaloyloxymethyl-6-methoxy-2-methyl-1-oxo-6-(2-phenoxy- acetamido)carbapen-2-em-3-carboxylat 5 - EKSEMPEL 25 50 DK 169892 B1

Metode A

Idet man fulgte eksempel 1, blev pivaloyloxymethyl-2-di-10 azo-7-methoxy-3-methyl-1-beta-oxo-7-(2-phenoxyacetamido)- ceph-3-em-4-carboxylat (15 g) 1 15 ml methylenchlorid bestrålet med en sollampe ved -78 eC i 10 minutter, på hvilket tidspunkt IR-analyse indikerede, at omlejringen var fuldstændig. Der blev tilsat Raney-nikkel (150 mg), 15 og omrøringen blev fortsat i 30 minutter ved -78 °C.

Raney-nikkel blev fjernet ved filtrering, og filtratet blev inddampet under vakuum, hvilket gav pivaloyloxyme-thyl-6-methoxy-2-methyl-l-oxo-6-(2-phenoxyacetamido)car-bapen-2-em-3-carboxylat [IR (CH2C12) 1810, 1750, 1715, 20 1690 cm"1].

Metode B

Idet man fulgte eksempel 1, blev pivaloyloxymethyl-2-di-25 azo-7-methoxy-3-methyl-l-beta-oxo-7-(2-phenoxyacetamido)- ceph-3-em-4-carboxylat (50 mg) i 50 ml methylenchlorid bestrålet med en sollampe ved -78 °C i 15 minutter, på hvilket tidspunkt IR-analyse indikerede, at omlejringen var fuldstændig. Inddampning af reaktionsblandingen under 30 vakuum gav pivaloyloxymethyl-6-methoxy-2-methyl-1-oxo-6- (2-phenoxyacetamido)-carbapen-2-em-3-carboxylat, der var egnet til yderligere forarbejdning.

* 35

Pivaloyloxymethyl-6-methoxy-2-methyl-l-oxo-6-(2-phenoxy- acetamldo)carbapenam-3-carboxylat 5 - EKSEMPEL 26 51 DK 169892 B1

Det frisk fremstillede pivaloyloxymethyl-6-methoxy-2-me-thyl-l-oxo-6-(2-phenoxyacetamido)carbapen-2-em-3-carboxy-lat fra eksempel 25, metode B, blev opløst i den minimalt 10 nødvendige mængde tetrahydrofuran og sat til en opslæmning af specielt aktiveret zinkpulver (eksempel 2; 500 mg) i en blanding af 1 ml eddikesyre og 0,5 ml tetrahydrofuran holdt ved 0 °C. Efter omrøring i 1 time ved 0 °C blev reaktionsblandingen fortyndet med toluen, inddampet 15 til tørhed under vakuum og uddrevet adskillige gange med toluen. Inddamningsresten blev genopløst i methylenchlo-rid, zinket fjernet ved filtrering, og filtratet igen koncentreret til tørhed under vakuum. Inddampningsresten blev optaget i ether, uopløselige urenheder blev fjernet 20 ved filtrering, og filtratet blev igen inddampet til tørhed under vakuum, hvilket gav pivaloyloxymethyl-6-me-thoxy-2-methyl-1-oxo-6-(2-phenoxyacetamido)carbapenam-3-carboxylat [20 mg, R^ 0,70 (4:1 chloroformrethylacetat)].

25 EKSEMPEL 27

Pivaloyloxymethyl-l-hydroxy-6-methoxy-2-methyl-6-(2-phenoxyacetamido )carbapenam-3-carboxylat 30

Pivaloyloxymethyl-6-methoxy-2-methyl-l-oxo-6-(2-phenoxy-' acetamido)carbapenam-3-carboxylat (79 mg, 0,17 mmol) i 10 ml methylenchlorid blev reduceret ved -78 °C med tetrabu-tylammoniumborhydrid (11 mg, 0,04 mmol), omsætningen blev 35 overvåget, og råproduktet blev isoleret ifølge eksempel 3. Kromatografi på silicagel (3:1 methylenchlorid:ethyl-acetat som elueringsmiddel), overvåget ved IR, gav piva- DK 169892 81 52 loyloxymethy1-1-hydroxy-6-methoxy-2-methyl-6-(2-phenoxy-acetamido)carbapenara-3-carboxylat [9,8 mg, 12 %; Rf 0,3 (4:1 chloroform :ethylacetat); IR (CH2C12) 1770, 1750, 1670 cm"1].

5 EKSEMPEL 28

Pivaloyloxymethyl-2-methyl-l-oxo-6-[2-phenyl-2-(4-ethyl- 2.3- dioxopiperazin-l-carboxamido)acetamido]carbapen-2-em- 10 3-carboxylat

Idet man fulgte eksempel 1, blev pivaloyloxymethyl-2-di-azo-3-methyl-l-beta-oxo-7-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-di-15 oxopiperazin-l-carboxamido)acetamido]ceph-3-em-4-carboxy- lat (10 mg) opløst i 10 ml methylenchlorld, afkølet til -78 °C og bestrålet med en sollampe 1 20 minutter. Reaktionsblandingen blev Inddampet til tørhed under vakuum, hvilket gav pivaloyloxymethyl-2-methyl-l-oxo-6-[2-phenyl-20 2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-l-carboxamido)acetamido]- carbapen-2-em-3-carboxylat [IR (CH2C12) 1815, 1750, 1700 cm-·*·].

EKSEMPEL 29 25

Pivaloyloxymethyl-2-methyl-l-oxo-6-[2-phenyl-2-(4-ethyl- 2.3- dioxopiperazin-l-carboxamido)acetamido]carbapenam-3-carboxylat 30

Metode A

Pivaloyloxymethyl-2-methyl-l-oxo-6-[2-phenyl-2-(4-ethyl- 2.3- dioxopiperazin-l-carboxamido)acetamido]carbapen-2-em-35 3-carboxylat [frisk fremstillet i overensstemmelse med eksempel 28 ud fra 127 mg (0,19 mmol) af den forudgående ceph-3-em-forbindelse] blev optaget i et minimum af te- 53 DK 169892 B1 trahydrofuran og sat til en opslæmning af aktiveret zinkpulver (1,27 g) i en blanding af 26 ml eddikesyre og 12 ml tetrahydrofuran ved 0 eC. Omrøring ved 0 °C blev fortsat i 1 time. Produktet blev Isoleret ifølge procedurer 5 beskrevet detaljeret i eksempel 2, efterfulgt af triturering med ether, hvilket gav pivaloyloxymethy1-2-methyl-1 -oxo-6-[2-phenyl-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-l-carboxami-do)acetamido[carbapenam-3-carboxylat [30 mg; Rf 0,91 (ethylacetat)]. Yderligere 13 mg mindre rent produkt blev 10 opnået ved inddampning af ether-trituratet til tørhed.

Metode B

Ved metode B fra eksempel 69 blev natrium-2-methyl-l-oxo-15 6-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-1-carboxamido)- acetamido]carbapenam-3-carboxylat esterificeret til dannelse af pivaloyloxymethyl-2-methyl-l-oxo-6-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-l-carboxamido)acetamido]car-bapenam-3-carboxylat.

20

Den samme metode, men under anvendelse af en ækvivalent mængde brommethylacetat, l,3-dihydro-3-oxobenzo[c]furan- 1-ylbromid eller 1-ethoxycarbonyloxyethylchlorid i de respektive tilfælde, anvendes til fremstilling af de til-25 svarende acetoxymethyl, 1,3-dihydro-3-oxobenzo[c]furan-1-yl og 1-ethoxycarbonyloxyethyl-2-methyl-1-oxo-6-[2-phe-nyl-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-l-carboxamido)acetamido] carbapenam-3-carboxylater.

30 35 EKSEMPEL 30 * 54 DK 169892 B1

Pivaloyloxymethyl-l-hydroxy-2-methyl-6-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-1-carboxamido)acetamido]carba-5 penam-3-carboxylat

Metode A

10 Pivaloyloxymethyl-2-methyl-l-oxo-6-[2-phenyl-2-(4-ethyl- 2,3-dioxopiperazin-l-carboxamido)acetamido]carbapenam-3-carboxylat (103 mg, 0,16 mmol) 1 10 ml methylenchlorid blev omsat med tetrabutylammoniumborhydrid (11 mg, 0,04 mmol) ved -78 eC. Efter 15 minutter viste TLC (ethylace-15 tat), at reduktionen var fuldstændig. Isolering ifølge eksempel 3, undtagen at der blev anvendt 1:1 chloroform :ethylacetat som elueringsmiddel ved kromatograferin-gen, gav pivaloyloxymethyl-1-hydroxy-2-methyl-6-[2-phenyl-2- (4-ethyl-2,3-dloxopiperazin-l-carboxamido)acetami-20 do]-carbapenam-3-carboxylat [15 mg, 15 %; IR (O^C^) 1775, 1760, 1720, 1690 cm-1; R^ 0,0 (ethylacetat)].

Ved den samme metode omdannes de andre estere fra eksempel 29 til de tilsvarende acetoxymethyl, 1,3-dihydro-3-25 oxobenzo[c]furan-l-yl og 1-ethoxycarbonyloxyethyl-l-hy- droxy-2-methyl-6-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin- 1-carboxamido)acetamido]carbapenam-3-carboxylater.

Metode B 30

Ved metode B fra eksempel 39 nedenfor omdannes natrium-1-hydroxy-2-methyl-6-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin- 1-carboxamido )acetamido]carbapenam-3-carboxylat til pivaloyloxymethyl-l-hydroxy-2-methyl-6-[2-phenyl-2-(4-35 ethyl-2,3-dioxopiperazin-l-carboxamido)acetatmido]carba- penam-3-carboxylat.

55 DK 169892 B1

Ved den samme metode, men under anvendelse af en ækvivalent mængde af det passende brommethylacetat, 1,3-dihy-dro-3-oxobenzo[c]furan-l-ylbromid eller 1-ethoxycarbonyl-oxyethylchlorid, fremstilles de tilsvarende acetoxyme-5 thyl, l,3-dihydro-3-oxobenzo[c]furan-l-yl og 1-ethoxycar- bonyloxyethyl-l-hydroxy-2-methyl-6-[2-phenyl-2-(4-ethyl- 2.3- dioxopiperazin-l-carboxamido)acetamido]carbapenam-3-carboxylater.

10 EKSEMPEL 31 2- naphthylmethyl-2-methyl-4-oxo-6-[2-phenyl-2-(4-ethyl- 2.3- dioxopiperazin-l-carboxamido)acetamido]carbapen-2-em- 3- carboxylat 15 -

Idet man fulgte proceduren fra eksempel 1 (uden Raney-nikkel-behandling) blev 2-naphthylmethyl-2-diazo-3-me-thyl-l-beta-oxo-7-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-dioxopipera-20 zin-l-carboxamido)acetamido]ceph-3-em-4-carboxylat (237 mg) omdannet til 2-naphthylmethyl-2-methyl-l-oxo-6-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-1-carboxamido)acet-amido]carbapen-2-em-3-carboxylat.

25 Ved denne samme metode omdannes 2,2,2-trichlorethyl-2-di- azo-3-methyl-l-beta-oxo-7-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-dioxo-piperazin-1-carboxamid)acetamido]ceph-3-em-4-carboxylat til 2,2,2-trichlorethyl-2-methyl-l-oxo-6-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-l-carboxamido)acetamido]carba-30 pen-2-em-3-carboxylat.

35 EKSEMPEL 32 56 DK 169892 B1 • 2-naphthylmethyl-2-methyl-l-oxo-6-[2-phenyl-2-(4-ethyl- 2,3-dioxopiperazin-l-carboxamido)acetamido]carbapenam-3-5 carboxylat 2-naphthylmethyl-2-methyl-l-oxo-6-[2-phenyl-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-l-carboxamido)acetamido]carbapen-2-em-3-10 carboxylatet fra eksempel 31 blev opløst 1 et minimum af tetrahydrofuran og sat til en opslæmning af aktiveret zink (2,37 g) i 5 ml eddikesyre - 30 % tetrahydrofuran ved 0 eC. Efter en time ved 0 eC blev produktet isoleret ifølge de procedurer, der er detaljeret beskrevet i ek-15 sempel 2. Det resulterende produkt blev opløst i ether, uopløselige bestanddele blev fjernet ved filtrering, og filtratet blev inddampet til tørhed under vakuum, hvilket gav 2-naphthylmethyl-2-methyl-l-oxo-6-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-l-carboxamido)acetamido]carbape-20 nam-3-carboxylat [36 mg, 16 %, Rf 0,48 (ethylacetat)].

EKSEMPEL 33 2-naphthylmethy1-1-hydroxy-2-methyl-6-[2-phenyl-2-(4-25 ethyl-2,3-dioxopiperazin-l-carboxamido)acetamido]carbape-nam-3-carboxylat 2-naphthylmethyl-2-methyl-1-oxo-6-[2-phenyl-2-(4-ethyl-30 2,3-dioxopiperazin-l-carboxamido)acetamido]carbapenam-3- carboxylat (36 mg, 0,056 mmol) i 3,6 ml methylenchlorid ved -78 °C blev reduceret med tetrabutylammoniumborhydrid (3,6 mg, 0,014 mmol). Efter 1 times omsætning ved -78 °C indikerede TLC (ethylacetat), at omdannelsen var fuld-35 stændig.

57 DK 169892 B1

Isolering ifølge eksempel 3 (uden kromatografi) gav 2-naphthylmethy1-1-hydroxy-2-methyl-6-[2-phenyl-2-(4-ethyl- 2,3-dioxopiperazin-1-carboxamido)acetamido]carbapenam-3-carboxylat [36 mg, 0,13 (ethylacetat)].

5 EKSEMPEL 34

Natrium-l-hydroxy-2-methyl-6-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-di-oxopiperazin-1-carboxamido)acetamido]carbapenam-3-carbo-10 xylat

Metode A

15 2-naphthylmethyl-l-hydroxy-2-methyl-6-[2-phenyl-2-(4- ethyl-2,3-dioxopiperazin-1-carboxamido)acetamido]carbape-nam-3-carboxylat (36 mg, 0,056 mmol) blev opløst i 2 ml dioxan. Der blev tilsat vand (1 ml), natriumhydrogencar-bonat (4,7 mg, 0,056 mmol) samt hydrogeneringskatalysator 20 (36 mg, 10 % palladium-på-carbon), og blandingen blev hy drogeneret ved 3,4 atmosfærer og stuetemperatur i 30 minutter. Overvågning ved TLC (9:1 acetone:vand og 90:10:2 chloroform:ethanol:eddikesyre) indikerede, at hydrogeneringen var ufuldstændig. Der blev tilsat yderligere 36 mg 25 10 % palladium-på-carbon, og hydrogeneringen blev genop taget under de samme reaktionsbetingelser i 30 minutter, på hvilket tidspunkt TLC-overvågning indikerede, at omsætningen var fuldstændig. Katalysatoren blev fjernet ved filtrering, og filtratet blev frysetørret, hvilket gav 30 natrium-l-hydroxy-2-methyl-6-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-di- oxopiperazin-l-carboxamido)acetamido]carbapenam-3-car-boxylat [10 mg, 34 %, Rf 0,3 (9:1 acetone:vand; Rf 0,3 (90:10:2 chloroform:ethanol:eddikesyre); IR (nujol mull) 1770, 1750, 1710 cm"1].

Ved den samme metode omdannes 2-naphthylmethyl-2-methyl- l-oxocarbapenam-3-carboxylat til natrium-2-methyl-l-oxo- 35 DK 169892 B1 58 carbapenam-3-carboxylat. 4

Metode B * 5 Under anvendelse af den i eksempel 2, 7, 17, 21 etc. angivne metode blev 2,2,2-trichlorethyl-2-methyl-l-oxo-6-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-l-carboxamido)-acetamido]carbapen-2-em-3-carboxylat reduceret (under samtidig deesterificering), hvilket gav 2-methyl-l-oxo-6-10 [2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-l-carboxamido)- acetamido]carbapenam-3-carboxylsyre, der blev isoleret som natriumsaltet ved filtrering af reaktionsblandingen, inddampning under vakuum, frysetørring af filtratet, opløsning af det ønskede produkt i vand ved pH 7,0 (med na-15 triumhydrogencarbonat), filtrering og frysetørring af filtratet.

Under anvendelse af den samme metode omdannes 2,2,2-tri-chlorethy1-2-methyl-1-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat til 20 natrium-2-methyl-l-oxocarbapenam-3-carboxylat.

EKSEMPEL 35

Pivaloyloxymethyl-2-methyl-6-(5-methyl-3-phenylisoxazol-25 4-carboxamido)-l-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat

Idet man anvendte de i detaljer i eksempel 1 beskrevne metoder, blev pivaloyloxymethyl-2-diazo-3-methyl-7-(5-me-30 thyl-3-phenylisoxazol-4-carboxamido)-l-beta-oxoceph-3-em- 4-carboxylat (222 mg) bestrålet, reaktionen blev overvåget, og reaktionsproduktet isoleret (uden behandling med Λ

Raney-nikkel), hvilket gav pivaloyloxymethyl-2-methyl-6-(5-methyl-3-phenylisoxazol-4-carboxamido)-1-oxocarbapen-35 2-em-3-carboxylat [IR (CH2C12) 1810, 1750, 1710, 1680 cm" h.

EKSEMPEL 36 59 DK 169892 B1

Pivaloyloxymethyl-2-methyl-6-(5-methyl-3-phenylisoxazol- 4-carboxamido)-l-oxocarbapenam-3-carboxylat g -

Det i eksempel 35 opnåede pivaloyloxymethyl-2-methyl-6-(5-methyl-3-phenylisoxazol-4-carboxamido)-1-oxocarbapen-

2-em-3-carboxylat blev reduceret med zink (2,22 g) 1 5,3 10 ml 30 procentig eddikesyre i tetrahydrofuran under anvendelse af de i eksempel 2 beskrevne metoder, hvorpå der blev Isoleret 1 overensstemmelse med de metoder, der er beskrevet i eksemplerne 2 og 32, hvilket gav pivaloyloxy-methyl-2-methyl-6-(5-methyl-3-phenylisoxazol-4-carboxami-15 do)-l-oxocarbapenam-3-carboxylat [100 mg, 50 % totalt; IR

(CH2C12) 1790, 1750, 1670 cm-"1].

EKSEMPEL 37 20 Pivaloyloxymethyl-l-hydroxy-2-methyl-6-(5-methyl-3-phe- nylisoxazol-4-carboxamido)carbapenam-3-carboxylat

Under anvendelse af de i eksempel 33 beskrevne metoder 25 blev pivaloyloxymethyl-2-methyl-6-(5-methyl-3-phenylis- oxazol-4-carboxamido)-l-oxocarbapenam-3-carboxylat (100 mg, 0,2 mmol) i 10 ml methylenchlorid ved -78 °C reduceret med tetramethylammoniumborhydrid (13 mg, 0,05 mmol), idet reaktionen blev overvåget, og produktet isoleret.

30 Endelig oprensning ved kromatografi på silicagel (3:1 me thylenchlorid : ethylacetat ) gav pivaolyloxymethyl-1-hydroxy- 2 -methyl- 6- ( 5-methyl-3-phenylisoxazol-4-carboxami-do)carbapenam-3-carboxylat [18 mg, IR (CH2C12) 1775, 1750, 1660 cm”1].

35 EKSEMPEL 38 60 DK 169892 B1

Pivaloyloxymethyl-6-D-(2-benzyloxycarbonylamino-2-phenyl-acetamido)-2-methyl-1-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat 5 -

Ved anvendelse af den metode, der er beskrevet 1 eksemplerne 1, 6, 11, 15, 16 etc., blev pivaloyloxymethyl-7-D-(2-benzyloxycarbonylaraino-2-phenylacetamido)-2-diazo-3-10 methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat omlejret til dannelse af pivaloyloxymethyl-6-D-(2-benzyloxycarbonylamino- 2-phenylacetamido)-2-methyl-l-oxocarbapen-2-em-3-carboxy-lat.

15 EKSEMPEL 39

Pivaloyloxymethyl-6-D-(2-benzyloxycarbonylamino-2-phenyl-acetamido)-2-methyl-l-oxocarbapenam-3-carboxylat 20

Ved anvendelse af metoden i eksemplerne 2, 7, 17, 21 etc. reduceres pivaloyloxymethyl-6-D-(2-benzyloxycarbonylami-no-2-phenylacetamido)-2-methyl-l-oxocarbapen-2-em-3-car-boxylat til pivaloyloxymethyl-6-D-(2-benzyloxycarbonyl-25 amino-2-phenylacetamido)-2-methyl-1-oxocarbapenam-3-car- boxylat.

EKSEMPEL 40 30 Pivaloyloxymethyl-6-D-(2-amino-2-phenylacetamido)-2-me- thyl-1-oxocarbapenam-3-carboxylat

Under anvendelse af den i eksempel 10 anførte metode hy- ' 35 drogenolyseres pivaloyloxymethyl-6-D-(2-benzyloxycarbo- nylamino-2-phenylacetamido)-2-methyl-1-oxocarbapenam-3-carboxylat til pivaloyloxymethyl-6-D-(2-amino-2-phenyl- DK 169892 B1 61 acetamido-2-methyl-1-oxocarbapenam-3-carboxylat. Katalysatoren Indvindes ved filtrering, og produktet indvindes ved inddampning af filtratet til tørhed i vakuum med uddrivninger med toluen.

5 EKSEMPEL 41

Pivaloyloxymethyl-6-D- (2-benzyloxycarbonylamino-2-phenyl-acetamido)-l-hydroxy-2-methylcarbapenam-3-carboxylat 10 -

Under anvendelse af den i eksemplerne 3, 8, 18, 22 etc. beskrevne metode reduceres pivaloyloxymethyl-6-D-(2-ben-zyloxycarbonylamino-2-phenylacetamido)-2-methyl-l-oxocar-15 bapenam-3-carboxylat til pivaloyloxymethyl-6-D-(2-benzyl- oxycarbonylamino-2-phenylacetamido)-l-hydroxy-2-methyl-carbapenam-3-carboxylat.

EKSEMPEL 42 20

Pivaloyloxymethyl-6-D-(2-amino-2-phenylacetamido)-1-hydroxy- 2-methylcarbapenam-3-carboxylat

25 Metode A

Under anvendelse af den i eksempel 40 beskrevne metode hydrogenolyseres pivaloyloxymethyl-6-D-(2-benzyloxycarbo-nylamino-2-phenylacetamido)-1-hydroxy-2-methylcarbapenam-30 3-carboxylat til dannelse af pivaloyloxymethyl-6-D-(2- amino-2-phenylacetamido)-l-hydroxy-2-methylcarbapenam-3-carboxylat.

Metode B 35

Under anvendelse af den metode, der er beskrevet i eksemplerne 3, 8, 18, 22 etc., reduceres pivaloyloxymethyl- 62 DK 169892 B1 6-D-(2-amino-2-phenylacetamido)-2-methyl-l-oxocarbapenam- 3-carboxylat til pivaloyloxymethyl-6-D-(2-amino-2-phenyl-acetatmido)-l-hydroxy-2-methylcarbapenam-3-carboxylat.

5 EKSEMPEL 43

Pivaloyloxymethyl-l-acetoxy-6-D-(2-benzyloxycarbonylami-no-2-phenylacetamido)-2-methylcarbapenam-3-carboxylat 10

Under anvendelse af metoden i eksemplerne 9, 19, 23 etc. acetyleres pivaloyloxymethyl-6-D-(2-benzyloxycarbonylami-no-2-phenylacetamido) -l-hydroxy-2-methylcarbapenam-3-car-boxylat til dannelse af pivaloyloxymethyl-l-acetoxy-6-D-15 (2-benzyloxycarbonylamino-2-phenylacetamido)-2-methylcar- bapenam-3-carboxylat.

EKSEMPEL 44 20 Pivaloyloxymethyl-l-acetoxy-6-D-(2-amino-2-phenylacetami- do)-2-methylcarbapenam-3-carboxylat

Under anvendelse af metoden beskrevet i eksempel 40 hy-25 drogenolyseres pivaloyloxymethyl-l-acetoxy-6-D-(2-benzyl- oxycarbonylamino-2-phenylacetamido)-2-methylcarbapenam-3-carboxylat til dannelse af pivaloyloxymethyl-l-acetoxy-6-D-(2-amino-2-phenylacetamido)-2-methylcarbapenam-3-car-boxylat.

30 35

Benzhydryl-6-D-(2-benzyloxycarbonylamino-2-phenylacetami- do)-2-methyl-l-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat 5 - EKSEMPEL 45 63 DK 169892 B1

Under anvendelse af metoden fra eksemplerne 1, 6, 11, 15 etc. blev benzhydryl-7-D-(2-benzyloxycarbonylamino-2-phe-nylaoetamido)-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-car-10 boxylat omlejret til benzhydryl-6-D-(2-benzyloxycarbonyl-ami no-2-phenylacetamido)-2-methyl-l-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat.

EKSEMPEL 46 15

Benzhydryl-6-D-(2-benzyloxycarbonylamino-2-phenylacetami-do)-2-methyl-l-oxocarbapenam-3-carboxylat 20 Under anvendelse af metoden i eksemplerne 2, 7, 17, 21 etc. blev benzhydryl-6-D-(2-benzyloxycarbonylamino-2-phe-nylacetamido)-2-methyl-l-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat reduceret til benzhydryl-6-D-(2-benzyloxycarbonylamino-2-phenylacetamido)-2-methyl-l-oxocarbapenam-3-carboxylat.

25 EKSEMPEL 47 6-D-(2-amino-2-phenylacetamido)-2-methyl-l-oxocarbapenam- 3-carboxylsyre 30 -

Under anvendelse af metoden fra eksempel 40 hydrogenoly-seres begge estergrupper i benzhydryl-6-D-(2-benzyloxy-carbonylamino-2-phenylacetamido)-2-methyl-1-oxocarbape-35 nam-3-carboxylat til dannelse af 6-D-(2-amino-2-phenyl-acetamido)-2-methyl-l-oxocarbapenam-3-carboxylsyre.

Benzhydryl-6-D-(2-benzyloxycarbony1amino-2-phenylacet ami do )-1-hydroxy-2-methylcarbapenam-3-carboxylat 5 - EKSEMPEL 48 64 DK 169892 B1

Ved den metode, der er angivet i eksemplerne 3, 8, 18, 22 etc. reduceres benzhydryl-6-D-(2-benzyloxycarbonylamino- 2-phenylacetamido)-2-methyl-1-oxocarbapenam-3-carboxylat 10 til benzhydryl-6-D-(2-benzyloxycarbonylamino-2-phenyl-acetamido)-l-hydroxy-2-methylcarbapenam-3-carboxylat.

EKSEMPEL 49 15 6-D-(2-amino-2-phenylacetamido)-l-hydroxy-2-methylcarba- penam-3-carboxylsyre

Ved den i eksempel 40 anførte metode omdannes benzhydryl-20 6-D-(2-benzyloxycarbonylamino-2-phenylacetamido)-1-hy- droxy-2-methylcarbapenam-3-carboxylat til 6-D-(2-amino-2-phenylacetamido)-l-hydroxy-2-methylcarbapenam-3-carboxyl-syre.

25 EKSEMPEL 50

Benzhydryl-l-acetoxy-6-D-(2-benzyloxycarbonylamino-2-phe-nylacetamido)-2-methylcarbapenam-3-carboxylat 30

Ved den metode, der er angivet i eksemplerne 9, 19, 23 etc. acetyleres benzhydryl-6-D-(2-benzyloxycarbonylamino- 2-phenylacetamido-1-hydroxy-2-methylcarbapenam-3-carboxylat til dannelse af benzhydryl-l-acetoxy-6-D-(2-benzyl-35 oxycarbonylamino-2-phenylacetamido)-2-methylcarbapenam-3- carboxylat.

EKSEMPEL 51 65 DK 169892 B1 1- acetoxy-6-D-(2-amino-2-phenylacetamido)-2-methylcarba-penam-3-carboxylsyre 5 -

Ved metoden anført i eksempel 40 omdannes benzhydryl-1-acetoxy-6-D-(2-benzyloxycarbonylamino-2-phenylacetamido)- 2- methylcarbapenam-3-carboxylat til l-acetoxy-6-D-(2-ami- 10 no-2-phenylacetamido)-2-methylcarbapenam-3-carboxylsyre.

EKSEMPEL 52

Pivaloyloxymethyl-6-(2-benzhydryloxycarbony1-2-phenyl-15 acetamido)-2-methyl-l-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat

Ved den metode, der er beskrevet i eksemplerne 1, 6, 11, 15 etc., omlejres pivaloyloxymethyl-7-(2-benzhydryloxy-20 carbonyl-2-phenylacetamido)-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxo- ceph-3-em-4-carboxylat til pivaloyloxymethyl-6-(2-benzhy-dryloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-2-methyl-l-oxocarba-pen-2-em-3-carboxylat.

25 Ved den samme metode omdannes de øvrige estere omtalt i præparation 55 til det tilsvarende pivaloyloxymethyl-6-(2-benzyloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-2-methyl-l-oxo-carbapen-2-em-3-carboxylat og 2-methyl-6-[2-(2-naphthyl-methoxycarbonyl)-2-phenylacetamido]-l-oxocarbapen-2-em-3-30 carboxylat.

35 EKSEMPEL 53

Pivaloyloxymethyl-6-(2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenyl- acetamido)-2-methyl-1-oxocarbapenam-3-carboxylat 5 - 66

Ved den metode, der er angivet i eksemplerne 2, 7, 17, 21 etc., reduceres pivaloyloxymethyl-6-(2-benzhydryloxycar-bony1-2-pheny1acetamido)-2-methyl-l-oxocarbapen-2-em-3-10 carboxylat til pivaloyloxymethyl-6-(2-benzhydryloxycarbo-nyl-2-phenylacetamido)-2-methyl-1-oxocarbapenam-3-carboxylat .

Ved samme metode reduceres de øvrige carbapen-2-em-estere 15 fra eksempel 52 til det tilsvarende pivaloyloxymethyl-6-(2-benzyloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-2-methyl-l-oxo-carbapenam-3-carboxylat og 2-methyl-6-[2-(2-naphthylme-thoxycarbonyl)-2-phenylacetamido]-l-oxocarbapenam-3-car-boxylat.

20 EKSEMPEL 54

Pivaloyloxymethyl-6-(2-carboxy-2-phenylacetamido)-2-me-thyl-l-oxocarbapenam-3-carboxylat 25 -—--

Ved den i eksempel 34 anviste metode hydrogenolyseres pi-valoyloxymethyl-6-(2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenylacet-amido)-2-methyl-l-oxocarbapenam-3-carboxylat til piva-30 loyloxymethyl-6-(2-carboxy-2-phenylacetamido)-2-methyl-l-oxocarbapenam-3-carboxylat, der isoleres som natriumsaltet.

Ved samme metode hydrogenolyseres de tilsvarende benzyl-35 og 2-naphthylmethyl-estere til dannelse af det samme produkt.

Pivaloyloxymethyl-6-(2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenyl- acetamido)-l-hydroxy-2-methylcarbapenam-3-carboxylat 5 - EKSEMPEL 55 67 DK 169892 B1

Under anvendelse af de metoder, der er beskrevet i eksemplerne 3, 8, 18, 22 etc., reduceres pivaloyloxymethyl- 6-(2-benzyloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-2-methyl-1-oxo-10 carbapenam-3-carboxylat til pivaloyloxymethyl-6-(2-ben-zyloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-l-hydroxy-2-methylcar-bapenam-3-carboxylat.

Under anvendelse af den samme metode omdannes de øvrige 15 4-oxocarbapenam-estere i eksempel 53 til de tilsvarende pivaloyloxymethyl-6-(2-benzyloxycarbonyl-2-phenylacetami-do)-l-hydroxy-2-methylcarbapenam-3-carboxylat og piva-loyloxymethyl-1-hydroxy-2-methyl-6-[2-(2-naphthylmethoxy-carbonyl)-2-phenylacetamido]carbapenam-3-carboxylat.

20 EKSEMPEL 56

Pivaloyloxymethyl-6-(2-carboxy-2-phenylacetamido)-1-hy-droxy-2-methylcarbapenam-3-carboxylat 25 -—-

Ved den i eksempel 34 beskrevne metode hydrogenolyseres pivaloyloxymethyl-6-(2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenyl-acetamido)-l-hydroxy-2-methylcarbapenam-3-carboxylat til 30 pivaloyloxymethyl-6-(2-carboxy-2-phenylacetamido)-1-hy- droxy-2-methylcarbapenam-3-carboxylat.

Under anvendelse af den samme metode omdannes de tilsvarende benzyl- og 2-naphthylmethylestere fra eksempel 55 35 til det samme produkt.

i EKSEMPEL 57 68 DK 169892 B1

Pivaloyloxymethyl-l-acetoxy-6-(2-benzhydryloxycarbony1-2-phenylacetamido)-2-methylcarbapenam-3-carboxylat 5 -

Ved den metode, der er beskrevet i eksemplerne 9, 19, 23 etc., acetyleres pivaloyloxymethyl-6-(2-benzhydryloxycar-bonyl-2-phenylacetamido)-l-hydroxy-2-methylcarbapenam-3-10 carboxylat til dannelse af pivaloyloxymethyl-l-acetoxy-6-(2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-2-methylcar-bapenam-3-carboxylat.

Under anvendelse af den samme metode omdannes de øvrige 15 hydroxyestere i eksempel 56 til det tilsvarende pivaloyloxymethyl-l-acetoxy-6- (2-benzyloxycarbonyl-2-phenylacet-amido)-2-methylcarbapenam-3-carboxylat og l-acetoxy-2-me-thyl-6-[2-(2-naphthylmethoxycarbonyl)-2-phenylacetamido]-carbapenam-3-carboxylat.

20 EKSEMPEL 58

Pivaloyloxymethyl-l-acetoxy-6- (2-carboxy-2-phenylacetami-do)-2-methylcarbapenam-3-carboxylat 25 -

Ved den i eksempel 34 beskrevne metode hydrogenolyseres pivaloyloxymethyl-l-acetoxy-6- (2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-2-methylcarbapenam-3-carboxylat til pi-30 valoyloxymethyl-l-acetoxy-6-(2-carboxy-2-phenylacetami- do)-2-methylcarbapenam-3-carboxylat.

Under anvendelse af den samme metode omdannes de tilsvarende benzyl- og 2-naphthylmethylestere fra eksempel 57 35 til det samme produkt.

Benzhydryl-6-(2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenylacetamido)- 2-methyl-l-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat 5 - EKSEMPEL 59 69 DK 169892 B1

Ved den metode, der er angivet i eksemplerne 1, 6, 11, 15 etc., omlej res benzhydryl-7-(2-benzhydryloxycarbony1-2-phenylacetamido)-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-10 carboxylat til benzhydryl-6-(2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-2-methyl-l-oxocarbapenam-2-em-carboxy-lat.

Ved den samme metode omdannes de øvrige diestere fra præ-15 paration 58 til de tilsvarende benzhydryl-, benzyl- og 2- naphthylmethyl-6-(2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenylacet-amido)-2-methyl-l-oxocarbapen-2-em-3-carboxylater, 6-(2- benzyloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-2-methyl-1-oxocarba-pen-2-em-3-carboxylater og 2-methyl-6-[2-(2-naphthylme-20 thoxycarbonyl)-2-phenylacetamido]-l-oxocarbapen-2-em-3- carboxylater.

EKSEMPEL 60 25 Benzhydryl-6-(2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenylacetamido)- 2-methyl-1-oxocarbapenam-3-carboxylat

Ved den metode, der er beskrevet i eksemplerne 2, 7, 17, 30 21 etc., reduceres benzhydryl-6-(2-benzhydryloxycarbonyl- 2-phenylacetamido)-2-methyl-l-oxocarbapen-2-em-3-carboxy-lat til benzhydryl-6-(2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenyl-acetamido)-2-methyl-l-oxocarbapenam-3-carboxylat.

35 Ved samme metode omdannes de øvrige carbapen-2-em-estere fra eksempel 59 til de tilsvarende benzhydryl-, benzyl-og 2-naphthylmethyl-6-(2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenyl)- DK 169892 B1 70 2- methyl-1-oxocarbapenam-3-carboxylater, 6-(2-benzyloxy- , carbonyl-2-phenylacetamido)-2-methyl-1-oxocarbapenam-3-carboxylater og 2-methyl-6-[2-(2-naphthylmethyl)-2-phe- , nylacetamido]-l-oxocarbapenam-3-carboxylater.

5 EKSEMPEL 61 6-(2-carboxy-2-phenylacetamido)-2-methyl-1-oxocarbapenam- 3- carboxylsyre 10 --

Ved den metode, der er beskrevet 1 eksempel 34, hydroge-nolyseres begge estergrupper i benzhydryl-6-(2-benzhy-dryloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-2-methyl-l-oxocarbape-15 nam-3-carboxylat til dannelse af 6-(2-carboxy-2-phenyl- acetamido)-2-methyl-l-oxocarbapenam-3-carboxylat.

Ved samme metode omdannes de øvrige benzhydryl-, benzyl-og 2-naphthylmethyl-diestere i eksempel 60 til det samme 20 produkt.

EKSEMPEL 62

Benzhydryl-6-(2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-25 1-hydroxy-2-methylcarbapenam-3-carboxylat

Under anvendelse af de metoder, der er beskrevet i eksemplerne 3, 8, 18, 22 etc., reduceres benzhydryl-6-(2-30 benzhydryloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-2-methyl-l- oxocarbapenam-3-carboxylat til benzhydryl-6-(2-benzhy-dryloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-l-hydroxy-2-methylcar-bapenam-3-carboxylat. f 35 Ved samme metode omdannes de øvrige oxocarbapenamer i ek sempel 61 til de tilsvarende benzhydryl-, benzyl- og 2-naphthylmethyl-6-(2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenylacet- DK 169892 B1 71 amido)-l-hydroxy-2-methylcarbapenam-3-carboxylater, 6-(2-benzyloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-l-hydroxy-2-methyl-carbapenam-3-carboxylater og 1-hydroxy-2-methyl-6-[2-(2-naphthylmethoxycarbonyl)-2-phenylacetamido]carbapenam-3-5 carboxylater.

EKSEMPEL 63 6-(2-carboxy-2-phenylacetamido)-l-hydroxy-2-methylcarba-10 penam-3-carboxylsyre

Under anvendelse af den metode, der er beskrevet i eksempel 34, hydrogenolyseres estergrupperne i benzhydryl-6-15 (2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-l-hydroxy-2- methylcarbapenam-3-carboxylat til dannelse af 6-(2-car-boxy-2-phenylacetamido)-l-hydroxy-2-methylcarbapenam-3-carboxy1syre.

20 Ved samme metode omdannes de øvrige benzhydryl-, benzyl- og 2-naphthylmethyl-diestere i eksempel 62 til det samme produkt.

EKSEMPEL 64 25

Benzhydryl-l-acetoxy-6-(2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenyl-acetamido)-2-methylcarbapenam-3-carboxylat 30 Ved den metode, der er beskrevet i eksemplerne 9, 19, 23 etc., acetyleres benzhydryl-6-(2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-l-hydroxy-2-methylcarbapenam-3-carboxy-lat til dannelse af benzhydryl-l-acetoxy-6-(2-benzhydryl-oxycarbonyl-2-phenylacetamido)-2-methylcarbapenam-3-car-35 boxylat.

DK 169892 B1 72

Ved samme metode omdannes de øvrige hydroxycarbapenamer i eksempel 62 til de tilsvarende benzhydryl-, benzyl- og 2- .

naphthylmethyl-l-acetoxy-6-(2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-2-methylcarbapenam-3-carboxylater, 1- 5 acetoxy-6-(2-benzyloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-2-me- thylcarbapenam-3-carboxylater og l-acetoxy-2-methyl-6-[2-(2-naphthylmethoxycarbonyl)-2-phenylacetamido]carbapenam- 3-carboxylater.

10 EKSEMPEL 65 l-acetoxy-6-(2-carboxy-2-phenylacetamido)-2-methylcarbapenam-3 -carboxylsyre 15

Ved den metode, der er beskrevet i eksempel 34 hydrogeno-lyseres benzhydryl-estergruppeme i benzhydryl-1-acetoxy- 6-(2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-2-methyl-carbapenam-3-carboxylat til dannelse af l-acetoxy-6-(2-20 carboxy-2-phenylacetamido)-2-methylcarbapenam-3-carboxyl- syre.

Under anvendelse af den samme metode omdannes de øvrige benzhydryl-, benzyl- og 2-naphthylmethyl-derivater i ek-25 sempel 64 til det samme produkt.

EKSEMPEL 66

Pivaloyloxymethyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyl-30 oxy)ethyl]-2-methy1-1-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat

Under anvendelse af den procedure, der er beskrevet i eksempel 1 bestråles pivaloyloxymethyl-7-alpha-[l-(p-nitro-35 benzyloxycarbonyloxy)ethyl]-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxo- ceph-3-em-4-carboxylat (120 mg) i 41 minutter i 120 ml methylenchlorid ved -55 °C. Inddampning til tørhed gav 73 DK 169892 B1 pivaloyloxymethyl-6-alpha-[l-(p-nitrobenzyloxy)-ethyl]-2-methyl-l-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat med kvantitativt udbytte [IR (CH2C12) 1810 cm”1].

5 Under anvendelse af den samme metode omlejres pivaloyl-oxymethyl-7-alpha-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxymethyl)-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat til piva-loyloxymethyl-6-alpha-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxyme-thyl)-3-methyl-1-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat ? 10 pivaloyloxymethyl-7-alpha-(1-acetoxyethyl)-2-diazo-3-me-thyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat og pivaloyloxyme-thyl-7-alpha-(1-acetoxyethyl)-2-diazo-3-methyl-l-alpha-oxoceph-3-em-4-carboxylat omlejres til pivaloyloxymethyl-15 6-alpha-(1-acetoxyethyl)-2-methyl-l-oxocarbapen-2-em-3- carboxylat; pivaloyloxymethyl-7-alpha-(acetoxymethyl)-2-diazo-3-me-thyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat og pivaloyloxyme-20 thyl-7-alpha- (acetoxymethyl) -2*-diazo-l-alpha-oxoceph-3- em-4-carboxylat omlejres til pivaloyloxymethyl-6-alpha-(acetoxymethyl)-2-methyl-l-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat; pivaloyloxymethyl-7-alpha-(2-acetoxy-2-propyl)-2-diazo-3-25 methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat omlejres til pi- valoyloxymethyl-6-alpha-(2-acetoxy-2-propyl)-2-methyl-l-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat; og pivaloyloxymethyl-7-alpha-(1-benzyloxycarbonyloxyethyl)-30 2-diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat omlej res til pivaloyloxymethyl-6-alpha-(1-benzyloxycarbonyl-oxyethyl)-2-methyl-l-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat.

35 EKSEMPEL 67 74 DK 169892 B1

Pivaloyloxymethyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy ) -ethyl] -l-hydroxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat 5 --

Under anvendelse af den procedure, der er beskrevet 1 eksempel 4 reduceredes det 1 det foregående eksempel frisk fremstillede 6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)- 10 ethyl]-2-methyl-l-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat til piva-loyloxymethyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)-ethyl]-l-hydroxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat. Råproduktet blev kromatograferet på silicagel med 20:1 chloroformrethylacetat som elueringsmiddel og med TLC-15 overvågning; udbytte: 62,5 mg; Rf 0,25 (4:1 chloro form :ethylacetat); R^ 0,75 (ethylacetat).

Ved den samme metode omdannes andre l-oxo-carbapen-2-em-forbindelser fra det foregående eksempel til: 20 pivaloyloxymethyl-6-alpha-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxyme-thyl)-l-hydroxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat; pivaloyloxymethyl-6-alpha-(1-acetoxyethyl)-l-hydroxy-2-2 5 methylcarbapen-2-em-3-carboxylat; pivaloyloxymethyl-6-alpha-(acetoxymethyl)-l-hydroxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat; 30 6-alpha-(1-benzyloxycarbonyloxyethyl)-l-hydroxy-2-methyl- carbapen-2-em-3-carboxylat.

35 75 DK 169892 B1 EKSEMPEL 68

Pivaloyloxymethyl-6-alpha-(1-hydroxyethyl)-l-hydroxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat 5 -

Under anvendelse af den procedure, der er beskrevet 1 eksempel 10 hydrogenolyseredes frisk fremstillet pivaloyl-oxymethyl-6-alpha-[l-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-10 l-hydroxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat (62,6 g) over 30 mg 5 % Pd/C til dannelse af, efter silicagel-kro-matografi med ethylacetat som elueringsmiddel, oprenset pivaloyloxymethyl-6-alpha-(1-hydroxyethyl)-l-hydroxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat [21,1 mg; R£ 0,6 (ethyl-15 acetat); Rf 0,0 (4:1 chloroform:ethylacetat)].

Ved samme metode omdannes pivaloyloxymethyl-6-alpha-(l-benzyloxycarbonyloxyethyl)-l-hydroxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat til det samme produkt, pivaloyloxymethyl-20 6-alpha-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxymethyl)-l-hydroxy-2- methylcarbapen-2-em-3-carboxylat omdannes til pivaloyl-oxymethyl-6-alpha-(hydroxymethyl)-l-hydroxy-2-methylcar-bapen-2-em-3-carboxylat, og pivaloyloxymethyl-6-alpha-[l-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-2-methyl-l-oxocarba-25 pen-2-em-3-carboxylat omdannes til pivaloyloxymethyl-6- alpha-(1-hydroxyethyl)-2-methyl-l-oxocarbapen-2-em-3-car-boxylat.

30 35 EKSEMPEL 69 76 DK 169892 B1

Pivaloyloxymethyl-6-(1-acetoxyethyl)-2-methyl-l-oxocarba-penam-3-carboxylat ------

Metode A

Under anvendelse af den metode, der er beskrevet 1 ek-10 semplerne 2, 7, 17, 21 etc., reduceres pivaloyloxymethyl- 6-(1-acetoxyethyl)-2-methyl-1-oxocarbapen-2-em-3-carboxy-lat (eksempel 66) til pivaloyloxymethyl-6-(1-acetoxyethyl )-2-methyl-l-oxocarbapenam-3-carboxylat.

15 Ved den samme metode omdannes de øvrige estere fra eksempel 66, alt efter hvad der er hensigtsmæssigt, til: pivaloyloxymethyl-6-alpha-(1-benzyloxycarbonyloxyethyl)- 2-methyl-1-oxocarbapenam-3-carboxylat; 20 pivaloyloxymethyl-6-alpha-(acetoxymethyl)-2-methyl-l-oxo-carbapenam-3-carboxylat; og pivaloyloxymethyl-6-alpha-(2-acetoxy-2-propyl)-2-methyl-25 l-oxocarbapenam-3-carboxylat.

Metode B

Natrium-6-(1-acetoxyethyl)-2-methyl-l-oxocarbapenam-3-30 carboxylat (eksempel 80) opløses i vand, pH justeres til ca. 2,0, og den frie syre ekstraheres over i methylen-chlorid. Idet de metoder, som er beskrevet i præparatio- *, nerne nr. 1, 12, 15, 21 etc. følges, esterificeres den frie syre til dannelse af pivaloyloxymethyl-6-(1-acetoxy- ? 35 ethyl)-2-methyl-l-oxocarbapenam-3-carboxylat.

DK 169892 B1 77

Ved den samme metode, men idet der substitueres med en ækvivalent mængde brommethylacetat, l,3-dihydro-3-oxoben-zo[c]furan-l-yl-bromid eller 1-ethoxycarbonyloxyethyl-chlorid, fremstilles følgende estere: 5 acetoxymethyl, 1,3-dihydro-3-oxobenzo[c]furan-l-yl og 1-ethoxycarbonyloxyethyl-6-(1-acetoxyethyl)-2-methyl-1-oxo-carbapenam-3-carboxylater.

10 EKSEMPEL 70

Pivaloyloxymethyl-6-(1-acetoxyethyl)-l-hydroxy-2-methyl-carbapenam-3-carboxylat 15

Metode A

Under anvendelse af den metode, der er beskrevet i eksemplerne 3, 8, 18, 22 etc., reduceres pivaloyloxymethyl-20 6-(1-acetoxyethyl)-2-methyl-l-oxocarbapenam-3-carboxylat til pivaloyloxymethyl-6-(1-acetoxyethyl)-l-hydroxy-2-me-thylcarbapenam-3-carboxylat.

Under anvendelse af den samme metode omdannes de øvrige 25 estere fra eksempel 69 til de tilsvarende: acetoxymethyl, l,3-dihydro-3-oxobenzo[c]furan-l-yl og 1-ethoxycarbonyloxyethyl-6-alpha-(1-acetoxyethyl)-l-hy-droxy-2-methylcarbapenam-3-carboxylater; og 30 pivaloyloxymethyl-6-alpha-(1-benzyloxycarbonyloxyethyl)- 1-hydroxy-2-methylcarbapenam-3-carboxylat; 6-alpha-(acetoxymethyl)-l-hydroxy-2-methylcarbapenam-3-35 carboxylat og DK 169892 B1 78 6-alpha-(2-acetoxy-2-propyl)-l-hydroxy-2-methyl-carbape-nam-3-carboxylat.

Metode B 5

Under anvendelse af den metode B, der er beskrevet 1 eksempel 69, omdannes natrium-6-(l-acetoxyethyl)-l-hydroxy- 2- methylcarbapenam-3-carboxylat (eksempel 81) til piva-loyloxymethyl-6-(1-acetoxyethyl)-l-hydroxy-2-methylcarba- 10 penam-3-carboxylat.

EKSEMPEL 71

Pivaloyloxymethyl-6-alpha-(1-hydroxyethyl)-l-hydroxy-2-15 methylcarbapenam-3-carboxylat

Under anvendelse af den metode, der er beskrevet i eksempel 68, hydrogenolyseres pivaloyloxymethyl-6-alpha-(l-20 benzyloxycarbonyloxyethyl)-1-hydroxy-2-methylcarbapenam- 3- carboxylat til pivaloyloxymethyl-6-alpha-(1-hydroxyethyl )-l-hydroxy-2-methylcarbapenam-3-carboxylat.

EKSEMPEL 72 25

Benzyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-2-methyl-1-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat 30 Under anvendelse af den metode, der er beskrevet i eksem pel 1, og under anvendelse af en bestrålingstid på 31 minutter, men uden behandling med Raney-nikkel, omdannes *

A

benzyl-7-alpha-[l-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-2- diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat (100 mg) 35 til benzyl-6-alpha-[l-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)- ethyl]-2-methyl-l-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat i hoved- »1 sageligt kvantitativt udbytte: IR (C^C^) 1810 cm .

DK 169892 B1 79

Ved den samme metode omlejres 6-alpha-[1-(p-nitrobenzyl-oxycarbonyloxy)propyl]-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat til benzyl-6-alpha-[l-(p-nitrobenzyloxy-carbonyloxy)-1-propyl]-2-methyl-1-oxocarbapen-2-em-3-car-5 boxylat.

EKSEMPEL 73

Benzyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-1-10 hydroxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat

Under anvendelse af den procedure, der er beskrevet i eksempel 4, blev det i det foregående eksempel frisk 15 fremstillede benzyl-6-alpha-[l-(p-nitrobenzyloxycarbonyl oxy )ethyl] -2-methyl-l-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat reduceret til benzyl-6-alpha-[l-(p-nitrobenzyloxycarbonyl-oxy)ethyl]-1-hydroxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat, kromatograferet på 5 g silicagel med 20:1 chloro-20 form:ethylacetat som elueringsmiddel. Udbytte 52,2 mg, Rf 0,5 (3:1 chloroform:ethylacetat).

Ved den samme procedure reduceres benzyl-6-alpha-[l-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)-1-propyl]-2-methyl-oxocarba-25 pen-2-em-3-carboxylat til benzyl-6-alpha-[l-(p-nitroben zyloxycarbonyloxy )-1-propyl]-1-hydroxy-2-methylcarbapen- 2-em-3-carboxylat.

EKSEMPEL 74 30

Benzyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-1-acetoxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat 35 De to forudgående eksempler blev gentaget op til det trin, hvor man var i besiddelse af en tørret methylen-chloridopløsning af råt benzyl-6-alpha-[l-(p-nitrobenzyl- 80 oxycarbonyloxy)ethyl]-l-hydroxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat. Sidstnævnte blev afkølet til -78 °C, og der ' blev tilsat eddikesyreanhydrid (18,7 μΐ), pyridin (15,8 μΐ) og 4-dimethylaminopyridin (4 mg). Efter omrøring il ' 5 time ved -78 °C blev reaktionsblandingen ekstraheret med vand, tørret over vandfrit natriumsulfat, filtreret og inddampet til tørhed. Resten blev kromatograferet på si-licagel med 10:1 chloroform:ethylacetat som elueringsmid-del; udbytte 32 mg, Rf 0,7 (3:1 chloroform:ethylacetat).

10

Ved den samme metode acetyleres benzyl-6-alpha-[l-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)-1-propyl]-l-hydroxy-2-methyl-carbapen-2-em-3-carboxylat til dannelse af benzyl-6-alpha- [1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)-1-propyl]-1-acetoxy-15 2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat.

EKSEMPEL 75

Natrium-6-alpha-(1-hydroxyethyl)-l-hydroxy-2-methylcarba-20 pen-2-em-3-carboxylat

Benzyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-1-hydroxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat (30 mg) i 6 ml 25 tetrahydrofuran og 6 ml vand blev hydrogenolyseret over 150 mg 5 % Pd/C i nærvær af 5,1 mg natriumhydrogencarbo-nat i overensstemmelse med eksempel 34. Efter fjernelse af katalysatoren blev tetrahydrofuranen fjernet ved afdampning i vakuum. Den vandige rest blev ekstraheret med 30 ethylacetat og frysetørret til dannelse af natrium-6-al- pha-(1-hydroxyethyl)-l-hydroxy-3-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat [20 mg; Rf 0,9 (9:1 acetone:vand); R^ 0,0 (4:1 chloroform:ethylacetat)]. .

35 Ved den samme metode omdannes benzyl-6-alpha-[l-(p-nitro- e benzyloxycarbonyloxy)-1-propyl]-2-methyl-1-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat til natrium-6-alpha-(1-hydroxy-1-propyl)- DK 169892 B1 81 1- hydroxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat.

EKSEMPEL 76 5 Natrium-6-alpha-(1-hydroxyethyl)-l-acetoxy-2-methylcarba- pen-2-em-3-carboxylat

Under anvendelse af den procedure, der er beskrevet i det 10 foregående eksempel blev benzyl-6-alpha-[l-(p-nitroben-zyloxycarbonyloxy)ethyl]-l-acetoxy-2-methylcarbapen-2-em- 3-carboxylat (10 mg) omdannet til natrium-6-alpha-(1-hydroxyethyl )-l-acetoxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat [12 mg; 0,0 (4:1 chloroform: ethylacetat); 0,0 15 (ethylacetat)].

Ved den samme metode hydrogenolyseres 6-alpha-[l-(p-ni-trobenzyloxycarbonyloxy)-1-propyl]-l-acetoxy-2-methylcar-bapen-2-em-3-carboxylat til natrium-6-alpha-(l-hydroxy-l-20 propyl)-l-acetoxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat.

EKSEMPEL 77

Benzyl-6-alpha-(1-acetoxyethyl)-2-methyl-l-oxocarbapen-2-25 em-3-carboxylat

Metode A

30 Under anvendelse af den metode, der er beskrevet i eksempel 1 blev benzyl-7-alpha-(1-acetoxyethyl)-2-diazo-3-me-thyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat (40 mg) bestrålet i 34 minutter. Der blev tilsat Raney-nikkel (0,4 g), og blandingen blev omrørt ved -78 eC i 30 minutter. Raney-35 nikkel blev genvundet ved filtrering. Inddampning af mo derluden til tørhed gav benzyl-6-alpha-(1-acetoxyethyl)- 2- methyl-l-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat, som i sin hel- DK 169892 B1 82 hed blev anvendt uden at blive vejet i det næste trin [IR * (CH2C12) 1805 cm"1].

Metode B 5

Man gentog metode A på 90 mg udgangsmateriale, idet man undlod behandling med Raney-nikkel. Der blev opnået det samme produkt i hovedsageligt kvantitativt udbytte [IR (CH2C12) 1805 cm-1].

10

Ved de samme metoder omdannes benzyl-7-alpha-(9-acetoxy- 1-propyl)-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxy-lat til benzyl-6-alpha-(l-acetoxy-l-propyl)-2-methyl-l-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat.

15 EKSEMPEL 78

Benzyl-6-alpha-(1-acetoxyethyl)-l-hydroxy-2-methylcarba-pen-2-em-3-carboxylat 2o -

Hele portionen af benzyl-6-alpha-(1-acetoxyethyl)-2-me-thyl-l-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat fra metode A i det foregående eksempel blev optaget i 10 ml methylenchlorid,

25 kølet til -78 °C og omsat med tetrabutylammoniumborhydrid i overensstemmelse med eksempel 4 og kromatograferet på silicagel med 1:1 chloroform:ethylacetat som eluerings-middel til dannelse af oprenset benzyl-6-alpha-(1-acetoxyethyl )-l-hydroxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat 30 [21 mg; NMR (pulse)/CDCl3/delta inkluderer 1,5 (d, 3H, J

= 6), 2,0 (s, 3H) og 5,4 ppm (s, 2H)].

é

Ved den samme metode reduceres den tilsvarende propyl-analoge fra det foregående eksempel til benzyl-6-alpha- - 35 (1-acetoxy-l-propyl)-l-hydroxy-2-methylcarbapen-2-em-3- carboxylat.

EKSEMPEL 79 83 DK 169892 B1

Benzyl-6-alpha-(1-acetoxyethyl)-l-acetoxy-2-methylcarba-pen-2-em-3-carboxylat 5 -;-

Under anvendelse af den metode, der er beskrevet 1 eksempel 74 og ved gentagelse af metode B fra eksemplerne 77 og 78, acetyleredes en tørret opløsning af rå benzyl-6-10 alpha-(1-acetoxyethyl)-l-hydroxy-2-methylcarbapen-2-em-3- carboxylat til benzyl-6-alpha-(1-acetoxyethyl)-l-acetoxy- 2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat, som blev kromatogra-feret på sillcagel med 4:1 chloroformrethylacetat som elueringsmiddel; udbytte 12,7 mg; NMR (pulseJ/CDCl^/delta 15 3,5 ppm (q, IH).

Ved den samme metode blev propyl-analogen fra det foregående eksempel acetyleret til benzyl-6-alpha-(l-acetoxy- 1-propyl)-l-acetoxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat.

20 EKSEMPEL 80

Natrium-6-alpha-(1-acetoxyethyl)-1-hydroxy-2-methylcarba-pen-2-em-3-carboxylat 25 -

Under anvendelse af den procedure, der er beskrevet i eksempel 75 blev benzyl-6-alpha-(l-acetoxy)-l-hydroxy-2-me-thylcarbapen-2-em-3-carboxylat (5,3 mg) i 2 ml dioxan og 30 1 ml vand hydrogeneret over 10,6 mg 5 % Pd/C i nærvær af natriumhydrogencarbonat (1,24 mg). Udbyttet af natrium-6-alpha-(1-acetoxyethyl)-l-hydroxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat var hovedsageligt kvantitativt, og produktet udviste de antimikrobielle egenskaber, der er detaljeret 35 beskrevet i tabel I.

DK 169892 B1 84

Ved den samme procedure blev den tilsvarende propyl-ana-loge omdannet til natrium-6-alpha-(1-acetoxy-l-propyl)-1-hydroxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat.

5 EKSEMPEL 81

Natrium-6-alpha-(1-acetoxyethyl)-l-acetoxy-2-methylcarba-pen-2-em-3-carboxylat 10

Under anvendelse af den procedure, der er beskrevet i det foregående eksempel, blev benzyl-6-alpha-(1-acetoxy-ethyl)-l-acetoxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat (4 mg) omdannet hovedsageligt til kvantitativt udbytte til 15 natrium-6-alpha-(1-acetoxyethyl)-l-acetoxy-2-methylcarba- pen-2-em-3-carboxylat med de antimikrobielle egenskaber, der er detaljeret beskrevet i tabel 1.

Ved den samme procedure blev den tilsvarende propyl-ana-20 loge omdannet til natrium-6-alpha-(l-acetoxy-l-propyl)-l- acetoxy-2-methylcarbapen-2-em-3-carboxylat.

EKSEMPEL 82 25 Benzyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-2- methyl-1-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat

Idet man anvendte metoden fra eksempel 1, blev benzyl-6-30 alpha-[l-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-2-diazo-3- methoxy-l-beta-oxoceph-3-em (31 mg) i 30 ml methylenchlo-rid bestrålet ved -50 °C igennem 10 minutter. Inddampning til tørhed under vakuum førte til benzyl-6-alpha-[l-(p- nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-2-methoxy-l-oxocarbapen-35 2-em-3-carboxylat med kvantitativt udbytte [IR (CI^C^) ? 1810 cm"1].

EKSEMPEL 83 85 DK 169892 B1

Benzyl-6-alpha-[l-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-1-hydroxy-2-methoxycarbapen-2-em-3-carboxylat 5 -

Under anvendelse af den metode, der er beskrevet 1 eksempel 4 blev det 1 foregående eksempel frisk fremstillede benzyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-2-10 methyl-l-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat reduceret til benzyl- 6 -alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-1-hy-droxy-2-methoxycarbapen-2-em-3-carboxylat, der blev kro-matograferet på silicagel med 100:1 chloroform :ethylacetat som elueringsmiddel; udbytte 5,8 mg; IR 15 (CH2C12) 1780 cm-1.

EKSEMPEL 84

Natrium-6-alpha-(1-hydroxyethyl)-1-hydroxy-2-methoxycar-20 bapen-2-em-3-carboxylat

Under anvendelse af den procedure, der er beskrevet i eksempel 75 blev benzyl-6-alpha-(1-hydroxyethyl)-l-hydroxy-25 2-methoxycarbapen-2-em-3-carboxylat (5,8 mg) hydrogenoly- seret over 17,4 mg 5 % Pd/C i 3 ml 1:1 dioxan:vand i nærvær af natriumhydrogencarbonat (1 mg). Udbyttet af faste stoffer var 8 mg, som indeholdt 2,6 mg af produktet. Dette produkt udviste de antimikrobielle egenskaber, der 30 er detaljeret beskrevet i tabel I.

35 EKSEMPEL 85 86 DK 169892 B1

Benzyl-6-alpha-[l-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-2-mesyloxy-l-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat S -

Under anvendelse af den metode, der er beskrevet 1 eksemplerne 1, 6, 11, 15 etc., omlejres benzyl-7-alpha-[l-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-2-diazo-3-mesyl-l-be-10 ta-oxoceph-3-em-4-carboxylat til benzyl-6-alpha-[l-(p-ni-trobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-2-mesyloxy-l-oxocarbapen- 2-em-3-carboxylat.

EKSEMPEL 86 15

Benzyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-1-hydroxy-2-mesyloxy-1-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat 20 Under anvendelse af den metode, der er beskrevet i eksempel 4 reduceres benzyl-6-alpha-[l-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy )ethyl] -2-mesyloxy-l-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat til benzyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)- ethyl]-1-hydroxy-2-mesyloxycarbapen-2-em-3-carboxylat.

25 EKSEMPEL 87

Natrium-6-alpha-(1-hydroxyethyl)-1-hydroxy-2-mesyloxycar-bapen-2-em-3-carboxylat 30 -

Under anvendelse af den metode, der er beskrevet i eksem- > pel 75 hydrogenolyseres benzyl-6-alpha-[l-(p-nitrobenzyl-oxycarbonyloxy)ethyl]-1-hydroxy-1-mesyloxycarbapen-2-em- e 35 3-carboxylat til dannelse af natrium-6-alpha-(1-hydroxyethyl )-l-hydroxy-2-mesyloxycarbapen-2-em-3-carboxylat.

EKSEMPEL 88 87 DK 169892 B1

Benzyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-2-[2-(p-nitrobenzyloxycarbonylamino)ethylthio]-1-oxocarba-5 pen-2-em-3-carboxylat

Under anvendelse af den metode, der er beskrevet 1 eksemplerne 1, 6, 11, 15 etc. omdannes benzyl-7-alpha-[Ι-ΙΟ (p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-3-[2-(p-nitrobenzyl- oxycarbonylamino)ethyl]-2-diazo-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat til benzyl-6-alpha-l-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy )ethyl]-2-[2-(p-nitrobenzyloxycarbonylamino)ethyl]- l-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat.

15

Ved den samme metode omdannes de øvrige forbindelser fra præparation 84 til: benzyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)-ethyl]-2-20 ethoxy-1-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat; benzyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)-ethyl]-2-i sopropoxy-1-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat; 25 benzyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)-ethyl]-2- (2-benzyloxycarbonylaminoethoxy)-l-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat; benzyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)-ethyl]-1-30 oxo-2-propylthiocarbapen-2-em-3-carboxylat; og benzyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)-ethyl]-2-(2-acetamidoethylthio)-l-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat.

35 88 DK 169892 B1 EKSEMPEL 89

Benzyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)-ethyl] - 2 -[2-(p-nltrobenzyloxycarbonylamlno)-ethylthio]-1-hydroxy-5 carbapen-2-em-3-carboxylat

Under anvendelse af den metode, der er beskrevet 1 eksempel 4 reduceres benzyl-6-alpha-[l-(p-nitrobenzyloxycarbo-10 nyloxy)ethyl]-2-[2-(p-nitrobenzyloxycarbonylamino)ethyl- thio]-l-oxocarbapen-2-em-3-carboxylat til benzyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-2-[2-(p-nitrobenzyloxycarbonylamino ) ethyl thio] -l-hydroxycarbapen-2-em-3-carboxylat.

15

Ved den samme metode reduceres de øvrige oxo-forbindelser fra det forudgående eksempel til:

Benzyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl] -2-20 ethoxy-l-hydroxycarbapen-2-em-3-carboxylat; benzyl-6-alpha-[l-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-2-isopropoxy-1-hydroxycarbapen-2-em-3-carboxylat; 25 benzyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-2- (2-benzyloxycarbonylaminoethoxy)-l-hydroxycarbapen-2-em- 3-carboxylat; benzyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-1-30 hydroxy-2-propylthiocarbapen-2-em-3-carboxylat; og

benzyl-6-alpha-[l-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-2-(2-acetamidoethylthio]-1-hydroxycarbapen-2-em-3-carboxylat. E

35 EKSEMPEL 90 DK 169892 Bl 89

Natrium-6-alpha-(1-hydroxyethyl)-2-(2-aminoethyl)-1-hy-droxycarbapen-2-em-3-carboxylat 5 -

Under anvendelse af den metode, der er beskrevet i eksempel 75 hydrogenolyseres benzyl-6-alpha-[l-(p-nitrobenzyl-oxycarbonyloxy)ethyl-2-[2-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)-10 ethylthio]-l-hydroxycarbapen-2-em-3-carboxylat til dan nelse af natrium-6-alpha-(1-hydroxyethyl)-2-(2-amino-ethyl)-l-hydroxycarbapen-2-em-3-carboxylat.

Ved den samme metode hydrogenolyseres de øvrige forbin-15 delser i det forudgående eksempel til dannelse af:

Natrium-6-alpha-(1-hydroxyethyl)-2-ethoxy-l-hydroxycarba-pen-2-em-3-carboxylat; 20 natrium-6-alpha-(1-hydroxyethyl)-2-(2-aminoethoxy)-l- hydroxycarbapen-2-em-3-carboxylat ? natrium-6-alpha-(1-hydroxyethyl)-2-propylthio-l-hydroxy-carbapen-2-em-3-carboxylat; og 25 natrium-6-alpha-(1-hydroxyethyl)-2-(2-acetamidoethyl)-1-hydroxycarbapen-2-em-3-carboxylat.

EKSEMPEL 91 30 6-alpha-[1-hydroxyethyl]-2-(2-amidinoethylthio)-1-hy-droxycarbapen-2-em-3-carboxylsyre 35 En opløsning af natrium-6-alpha-[1-hydroxyethyl]-2-(2-aminoethyl)-l-hydroxycarbapen-2-em-3-carboxylat (78 mg, 0,25 mmol) i 5 ml af en 2:1 blanding af 0,05N phosphat- DK 169892 B1 go buffer og dimethyl formamid justeres til pH 9,5 med 2,5N natriumhydroxid. Der tilsættes under omrøring ved stue-temperatur ethylformamidat, HC1 (24 mg, 0,25 mmol), og ' reaktionsblandingen holdes ved stuetemperatur i 1 time.

5 Reaktionsblandingens pH justeres til 6,0, og der inddampes til tørhed. Om ønsket kan den således dannede med salt kontaminerede 6-alpha-[1-hydroxyethyl]-2-(2-amidino-ethyl)-l-hydroxycarbapen-2-em-3-carboxylsyre renses ved kromatografi på silicagel.

10

Ved den samme metode omdannes den anden aminoethylforbindelse fra det foregående eksempel til 6-alpha-(1-hydroxyethyl )-2-(2-amidinoethoxy)-l-hydroxycarbapen-2-em-3-carboxy1syre.

15 PRÆPARATION 1

Pivaloyloxymethyl-3-methylceph-3-em-4-carboxylat 20 3-methylceph-3-em-4-carboxylsyre [12,9 g, 65 mmol; Kemp et al., Tetrahedron Letters, 3785 (1979)] blev opløst i 100 ml dimethylformamid. Der blev tilsat triethylamin (6,6 g, 65 mmol) (svag exotherm virkning blev bemærket), 25 og blandingen blev omrørt i 0,5 time ved stuetemperatur.

Derpå blev tilsat kaliumhydrogencarbonat (13 g, 130 mmol), og omrøringen blev fortsat i yderligere 1 time.

Til sidst blev tilsat chlormethylpivalat (10,8 g, 70 mmol), og reaktionsblandingen blev holdt under omrøring i 30 ca. 16 timer, på hvilket tidspunkt TLC (silicagel; 4:1 chloroform:ethylacetat som elueringsmiddel; detektering ved alkalisk permanganat-sprøjtning) indikerede, at omsætningen var tilendebragt. Reaktionsblandingen blev hældt ud i 1,5 1 ether, vasket med adskillige portioner .

35 vand, derpå med IN saltsyre, igen med vand og til sidst med saltvand, tørret over magnesiumsulfat og inddampet til tørhed i vakuum med uddrivninger med methylenchlorid DK 169892 B1 91 til dannelse af pivaloyloxymethyl-3-methylceph-3-em-4-carboxylat [15,8 g, 79 %? IR (CH2C12) 1770, 1750 cm-1].

Den samme metode anvendes, idet der dog substitueres en 5 ækvivalent mængde af henholdsvis brommethylacetat, 1,3-dihydro-3-oxobenzo[c]furan-l-yl-bromid eller 1-ethoxycar-bonyloxyethylchlorid, til fremstilling af de tilsvarende acetoxymethyl, l,3-dihydro-3-oxobenzo[c]furan-l-yl og 1-ethoxycarbonyloxyethyl-3-methyloeph-3-em-4-carboxylat.

10 PRÆPARATION 2

Pivaloyloxymethyl-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxy- lat 15 -

Pivaloyloxymethyl-3-methyl-3-em-4-carboxylat (15,5 g, 49 mmol) blev opløst i 1 liter methylenchlorid og kølet til 0 °C. Idet man opretholdt denne temperatur, blev der i 20 fem lige store portioner igennem 1 time tilsat 80 procen-tig m-chlorperbenzoesyre (10,6 g, 49 mmol). Efter at tilsætningen var tilendebragt, fortsattes omsætningen, indtil TLC (samme metode og elueringsmiddel som i præparation 1) indikerede, at der var indtruffet fuldstændig om-25 dannelse til de tilsvarende alpha- og beta-oxider (ca.

0,5 time). Reaktionsblandingen blev vasket adskillige gange med vand, derpå med mættet hydrogencarbonat, igen med vand og til sidst med saltvand, den blev tørret over magnesiumsulfat og strippet for opløsningsmiddel i va-30 kuum. Det således fremstillede reaktionsprodukt blev kro-matograferet på silicagel (20 vægtdele) med ethylacetat-10% methanol som elueringsmiddel til dannelse af piva-loyloxymethyl-3-methyl-l-betaoxocep-3-em-4-carboxylat (4,0 g; TLC: Rf 0,14 med 4:1 chloroform:ethylacetat som 3 5 elueringsmiddel).

DK 169892 B1 92

Det tilsvarende 1-alpha-oxid med lavere polaritet fremkom ligeledes fra søjlekromatografien, men i en ikke helt ren form. Sidstnævnte forbindelse oprensedes ved gentagen kromatografi under anvendelse af en højere vægtandel si-5 licagel i forhold til faststofindholdet (f.eks. 50 til 1) og et noget mindre polært elueringsmiddel (f.eks. ethyl-acetat-4 % methanol).

Under anvendelse af den samme metode omdannes de øvrige 10 estere fra præparation 1 til de tilsvarende acetoxyme-thyl, 1,3-dihydro-3-oxobenzo[c]furan-l-yl og 1-ethoxycar-bonyloxyethyl-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylater og 3-methyl-l-alpha-oxoceph-3-em-4-carboxylater.

15 PRÆPARATION 3

Pivaloyloxymethyl-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4- carboxylat 20

Pivaloyloxymethyl-3-methyl-1-beta-oxoceph-3-em-4-carboxy-lat (674 mg, 2,05 mmol) blev opløst i 75 ml methylenchlo-rid og kølet til 0 °C. Der blev tilsat diisopropylethyl-amin (397 mg, 3,08 mmol) samt kalium-tert.-butoxid (345 25 mg, 3,08 mmol) efterfulgt efter nogle få minutters forløb af picrylazid [1,04 g, 4,1 mmol; E: Schrader, Ber. 50, 777 (1917)]. Efter omrøring i 30 minutter viste IR-spek-tralanalyse tilstedeværelsen af et stærkt diazo-bånd. Der blev tilsat trifluoreddikesyre (2 ækvivalenter), derpå 30 blev blandingen filtreret, og filtratet strlppet ned til en gummi. Denne gummi blev kromatograferet på silicagel med 3:1 chloroform:ethylacetat som elueringsmiddel til dannelse af pivaloyloxymethyl-2-diazo-3-methyl-l-beta- * oxoceph-3-em-4-carboxylat [384 mg; IR (CI^Clj) 2080, 35 1790, 1725 cm"1].

93 DK 169892 B1

Ved den samme metode omdannes de øvrige 1-beta-oxid-este-re fra præparation 2 til de tilsvarende acetoxymethyl, 1,3-dihydro-3-oxobenzo[c]furan-l-yl og 1-ethoxycarbonyl-oxyethyl-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxy-5 later.

Ved den samme metode omdannes, idet der dog anvendes noget kraftigere reaktionsbetingelser med hensyn til temperatur og tid som angivet i præparation 24, 1-alpha-oxid-10 esterne fra præparation 2 til de tilsvarende pivaloyloxy- methyl, acetoxymethyl, l,3-dihydro-3-oxobenzo[c]furan-l-yl og l-ethoxycarbonyloxyethyl-2-diazo-3-methyl-l-alpha-oxoceph-3-em-4-carboxylater.

15 PRÆPARATION 4

Benzhydry1-3-methylceph-3-em-4-carboxylat 20 3-methyl-3-em-4-carboxylsyre (7,56 g, 38 mmol) blev op løst i 100 ml methylenchlorid. Der blev dråbevis tilsat diphenyldiazomethan (ca. 16,6 g, 85 mmol), indtil TLC (4:1 chloroform:ethylacetat) viste, at omsætningen var tilendebragt. Reaktionsblandingen blev inddampet til tør-25 hed, resten blev opløst i 50 procentig vandig ethylacetat, og pH blev justeret til 2,5. Ethylacetatlaget blev frasepareret, vasket adskillige gange med vand, blandet med et lige så stort rumfang vand, og pH blev justeret til 7,8. Ethylacetatlaget blev igen frasepareret, vasket 30 adskillige gange med vand og derpå med saltvand, tørret over vandfrit magnesiumsulfat, filtreret og inddampet til dannelse af benzhydryl-3-methylceph-3-em-4-carboxylat [11,4 g, 82 %; TLC: R- 0,75 med 4:1 chloroform:ethylace- 1 -1 tat som elueringsmiddel; IR (GH^C^) 1775, 1725 cm ].

35 PRÆPARATION 5 94 DK 169892 B1

Benzhydryl-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat ' 5

Benzhydryl-3-methylceph-3-em-4-carboxylat (11,4 g, 31 mmol) blev oxideret med 85 procentig m-chlorperbenzoesyre (7,0 g, 34 mmol, Idet det 10 procents overskud blev anvendt til at tvinge omsætningen til fuldstændiggørelse), 10 der blev isoleret en blanding af alpha- og beta-oxiderne i overensstemmelse med de i præparation 2 beskrevne procedurer. Råproduktet blev omkrystalliseret fra ethylace-tat til dannelse af benzhydryl-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat [2,63 g, 22 %; smeltepunkt 180-181 °C 15 (dekomponering); TLC: Rf 0,05 (4:1 chloroform:ethylacetat som elueringsmiddel)]. Filtratet blev inddampet til tørhed og kromatograferet på silicagel (samme elueringsmiddel) til dannelse af 3-methyl-l-alpha-oxoceph-3-em-4-car-boxylat [2,7 g, 22 %; smeltepunkt 163-165 “C (dekompone-20 ring); TLC: Rf 0,15 (samme elueringsmiddel)] samt yderligere 0,8 g (7 %) af 1-beta-oxidet.

PRÆPARATION 6 25 Benzhydryl-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-car- boxylat

Benzhydryl-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat (1,5 30 g, 4 mmol) i 160 ml methylenchlorid, diisopropylethylamin (568 mg, 4,4 mmol), kalium-tert.-butoxid (493 mg, 4,4 mmol) og picrylazid (2,03 g, 8 mmol) blev bragt til om-sætning, ved at følge de i præparation 3 angivne metoder. Omsætningen blev overvåget ved TLC (18:1 chloro-35 form:ethylacetat). Efter omrøring i 1 time ved 0 °C re sterede kun et spor af udgangsmateriale. Trifluoreddike-syre (2 ækvivalenter) blev tilsat, reaktionsblandingen 95 DK 169892 B1 blev filtreret, og filtratet strippet til en gummi. Ind-dampningsresten blev tritureret adskillige gange med ether, og resten tørret under høj vakuum i 10 minutter. Resten blev omkrystalliseret ud fra 3:1 methylchlo-5 rid:ethylacetat til dannelse af benzhydryl-2-diazo-3-me-thy1-1-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat [1 g, 62 %; R^ 0,4 (4:1 chloroform:ethylacetat); IR (CH2C12) 2080, 1805, 1745, 1680 cm-1].

10 Ved en anden præparation, i hvilken reaktionsproduktet ikke udkrystalliserede, blev råproduktet kromatograferet på silicagel (3:1 methylenchlorid:ethylacetat som elue-ringsmiddel), hvilket førte til et produkt med samme udbytte. Produktet fremstilles alternativt ved en tilsva-15 rende fremgangsmåde beskrevet af Ebbinghaus et al. [J.

Org. Chem. 44, 4697 (1979)].

PRÆPARATION 7 20 2,2,2-trichlorethyl-3-methylceph-3-em-4-carboxylat 3-methylceph-3-em-4-carboxylsyre (4 g, 20 mmol) opløstes i 200 ml methylenchlorid, der indeholdt pyridin (2,05 g, 25 26 mmol). Der blev tilsat 2,2,2-trichlorethanol (3 g, 20 mmol) efterfulgt af dicyclohexylcarbodiimid (4,5 g, 22 mmol). Reaktionsblandingen blev omrørt i ca. 16 timer ved stuetemperatur. Udskilte faste stoffer blev fjernet ved filtrering, og filtratet blev inddampet til tørhed under 30 vakuum. Resten blev opløst i ethylacetat og geninddampet, inddampningsresten blev tritureret med hexan og filtreret til dannelse af 2,2,2-trichlorethyl-3-methylceph-3-em-4-carboxylat [IR (CH2C12) 1775, 1730 cm-1].

35 PRÆPARATION 8 96 DK 169892 B1 2.2.2- trichlorethyl-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-car-boxylat 5 - 2.2.2- trichlorethyl-3-methylceph-3-em-4-carboxylat (3,1 g, 9 mmol) blev opløst 1 300 ml methylenchlorld med 85 % chlorbenzoesyre (1,9 g, 9 mmol), og der blev Isoleret en 10 blanding af alpha- og beta-oxiderne i overensstemmelse med de i præparation 2 beskrevne fremgangsmåder. Omkrystallisation af råprodukt førte til 2,2,2-trichlorethyl- 3- methyl-l-betaoxoceph-3-em-4-carboxylat (539 mg, smeltepunkt 166-170 °C). Filtratet, der blev inddampet til tør- 15 hed og kromatograferet på silicagel (9:1 ethylace-tat:methanol) førte til yderligere 1-beta-oxid [482 mg; smeltepunkt 169-170 °C; Rf 0,10 (4:1 chloroform:ethylace-tat)].

20 PRÆPARATION 9 2.2.2- trichlorethyl-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em- 4- carboxylat 25 2.2.2- trichlorethyl-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-car-boxylat (1,04 g, 3 mmol) i 75 ml methylenchlorld blev omsat med diisopropylethylamin, kalium-tert.-butoxid og pi-crylazid under anvendelse af de i præparation 3 angivne 30 ækvivalenter og procedurer. Isolering og oprensning ved metoder identiske med de i samme præparation anvendte gav 2.2.2- trichlorethyl-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em- 4-carboxylat [659 mg, 58 %; Rf (4:1 chloroform:ethylace-tat); IR (CH2C12) 2080, 1790, 1730 cm-1].

35 DK 169892 B1 97 PRÆPARATION 10 7-bromcephalosporansyre 5 7-aminocephalosporansyre (54,4 g, 0,20 mmol) blev bragt 1 suspension 1 en blanding af 1 liter vand og 0,25 liter methanol og kølet til 0-5 °C. Under omrøring, og idet dette temperaturområde blev opretholdt, blev dråbe for 10 dråbe tilsat hydrogenbromid (48 %, 338 ml, 0,20 mmol), efterfulgt af portionsvis tilsætning af natriumnitrit (20,7 g, 0,30 ml). En kraftig gasudvikling blev bemærket. Efter yderligere 60 minutters omrøring ved 0-5 eC blev reaktionsblandingen strippet for methanol under vakuum, 15 og reaktionsproduktet ekstraheredes med 8 portioner å 250 ml chloroform. Chloroformekstrakterne blev forenet, tilbagevasket med saltvand, tørret over vandfrit natriumsulfat, filtreret, og filtratet blev inddampet under vakuum til dannelse af 7-bromcephalosporansyre [25,2 g; 20 svagt gult skum; NMR (pulse) (CDCl^/TMS/delta): indbefatter 2,0 (s, 3H); 3,0 - 4,0 (m, 2H)].

PRÆPARATION 11 25 Cephalosporansyre

Hydrogeneringskatalysator (25,2 g, 5 % palladium-på-cal-ciumcarbonat) blev for-reduceret i 25 ml vand på et 30 "Paar"-rysteapparat. 7-bromcephalosporansyre blev opløst i en blanding af 50 ml tetrahydrofuran, og 50 ml vand og sat til opslæmningen af katalysator. pH blev justeret til 4,5 og blandingen blev hydrogeneret, indtil der ikke længere blev optaget hydrogen. Katalysatoren blev fjernet 35 ved filtrering over diatoméjord, og tetrahydrofuran blev strippet fra filtratet under vakuum. Til den vandige ind-dampningsrest blev tilsat et lige så stort rumfang ethyl- DK 169892 B1 98 acetat og pH blev justeret til 1,5. Ethylacetatlaget blev frasepareret, og det vandige lag blev ekstraheret med fire yderligere portioner ethylacetat. Ethylacetatekstrak-terne blev forenet, tilbagevasket med saltvand, tørret 5 over vandfrit natriumsulfat, filtreret og inddampet til tørhed under vakuum til dannelse af cephalosporansyre [13,2 g; skum; NMR (pulse) (CDCl^/TMS/delta): inkluderer 2,0 (s, 3H); 2,5 - 4,2 (m, 4h)].

10 PRÆPARATION 12

Pivaloyloxymethyl-cephalosporanat 15 Cephalosporansyre (5,0 g, 19,4 mmol) opløst i 50 ml dime-thylformamid blev omsat med triethylamin (1,96 g, 19,4 mmol), kaliumhydrogencarbonat (3,89 g, 38,9 mmol) og chlormethylpivalat (3,21 g, 3,07 ml, 21,4 mmol) i overensstemmelse med de i præparation 1 beskrevne procedurer.

20 Efter omrøring ved stuetemperatur i 16 timer viste TLC, at omsætningen var ufuldstændig. Der blev tilsat yderligere kaliumcarbonat (1,95 g) og chlormethylpivalat (3,21 g), og omsætningen blev fortsat i yderligere 6 timer, på hvilket tidspunkt der kun resterede en lille mængde ud- 25 gangsmateriale. Isolering, der ligeledes blev gennemført ifølge præparation 1, gav pivaloyoxymethylcephalosporanat [5,31 g; olie: IR (CH2C12) 1775, 1750 cm-1; Rf 0,7 (4:1 chloroform:ethylacetat)].

30 PRÆPARATION 13

Pivaloyloxymethyl-l-beta-oxocephalosporanat 35 Pivaloyloxymethyl-cephalosporanat (5,31 g, 14,3 mmol) i 50 ml chloroform blev omsat med 85 procentig m-chlorper-benzoesyre (2,46 g, 12,2 mmol) ved 0 °C i 1 time. Reak- DK 169892 Bl 99 tionsblandingen blev filtreret, filtratet blev vasket i rækkefølge med mættet natriumhydrogencarbonat, vand og saltvand, tørret over vandfrit natriumsulfat, filtreret, og filtratet inddampet under vakuum til dannelse af reak-5 tionsproduktet i form af en olie (4,97 g). Olien blev kromatograferet på 150 g silicagel med 12 ml fraktioner af ethylacetat-elueringsmidlet opsamlet. Fraktionerne 38-64 blev forenet og inddampet under vakuum til dannelse af pivaloyloxymethyl-l-alpha-oxocephalosporanat (625 mg).

10 Fraktionerne 110-183 blev forenet og inddampet under vakuum til dannelse af pivaloyloxymethyl-l-beta-oxocephalo-sporanat (984 mg; IR (CH2C12) 1790, 1745 cm"1).

PRÆPARATION 14 15

Pivaloyloxymethyl-2-diazo-l-beta-oxocephalosporanat

Ved i hovedsagen at følge den procedure, der er beskrevet 20 af Ebbinghaus et al. [J. Org. Chem. 44, 4697 (1979)], blev pivaloyloxymethyl-l-beta-oxo-2-diazocephalosporanat (120 mg, 0,31 mmol) opløst i 12 ml methylenchlorid og kølet til -10 °C. Der blev tilsat picrylazid (158 mg, 62 mmol) og diisopropylethylamin (80 mg, 62 mmol), og blan-25 dingen blev holdt under omrøring ved -10 °C i 90 minutter, på hvilket tidspunkt TLC (4:1 chloroform:ethylace-tat) viste, at omsætningen var fuldstændig. Reaktionsblandingen blev strippet for opløsningsmiddel under vakuum og kromatograferet på silicagel (3:1 methylenchlo-30 rid:ethylacetat som elueringsmiddel) til dannelse af pi-valoyloxymethyl-2-diazo-l-beta-oxocephalosporanat [89 mg, 61 %; Rf 0,2 (4:1 chloroform:ethylacetat); IR (CH2C12) 1795, 1750 cm"1].

35 PRÆPARATION 15 DK 169892 Bl 100

Pivaloyoxymethyl-3-methyl-7-(2-phenoxyacetamido)ceph-3-em-4-carboxylat 5 - 3-methyl-7-(2-phenoxyacetamldo)ceph-3-em-4-carboxylsyre (69,6 g, 0,2 mmol) blev opløst 1 300 ml dimethylformamid og omsat 1 rækkefølge med triethylamln (20,2 g, 0,2 mol), 10 kaliumhydrogencarbonat (40 g, 0,4 mol) og chlormethylpi- valat (33 g, 0,22 mol) 1 overensstemmelse med de procedurer, der er beskrevet i præparation 1. Til isolering af produktet blev reaktionsblandingen fortyndet med 3 1 ether, og den organiske opløsning blev vasket, tørret og 15 inddampet til tørhed, som beskrevet i præparation 1, hvilket førte til pivaloyloxymethyl-3-methyl-7-(2-phe-noxyacetamido)-ceph-3-em-4-carboxylat [75,5 g, 82 %; IR (CH2C12) 1776, 1750, 1685 cm"1].

20 PRÆPARATION 16

Pivaloyoxymethyl-3-methyl-l-beta-oxo-7-(2-phenoxyacetami-do)ceph-3-em-4-carboxylat 25

Pivaloyloxymethyl-3-methyl-7- (2-phenoxyacetamido )ceph-3-em-4-carboxylat (76,5 g, 0,16 mol) 121 methylenchlorid holdt ved 0-5 °C blev oxideret med 85 procentig m-chlor-perbenzoesyre (32,5 g, 0,16 mol), som blev tilsat i to 30 portioner igennem ca. 1 time. Omsætningen blev overvåget ved TLC (metode og elueringsmiddel som præparation 1). Efter at omsætningen var fuldstændig, fulgte isolering i overensstemmelse med metoderne beskrevet i præparation 2, hvilket førte til pivaloyloxymethyl-3-methyl-l-beta-oxo-35 7-(2-phenoxyacetamido)ceph-3-em-4-carboxylat (41 g, 54 %; smeltepunkt 138-140 °C), der havde en sådan renhed, at søjlekromatografi var unødvendig.

PRÆPARATION 17 101 DK 169892 B1

Pivaloyloxymethyl-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxo-7-(2-phen-oxyacetamido)ceph-3-em-4-carboxylat 5 -

Pivaloyloxymethyl-3-methyl-l-beta-oxo-7- (2-phenoxyacet-amido)ceph-3-em-4-carboxylat (4,78 g, 10 mmol) i 400 ml methylenchlorid blev omsat ved 0 °C med diisopropylalko-10 hol (1,9 g, 15 mmol), kalium-tert-butoxid (1,7 g, 15 mmol) og picrylazid (5,08 g, 20 mmol) i overensstemmelse med procedurerne detaljeret beskrevet i præparation 3. Reaktionen blev overvåget ved TLC (samme metode og elue-ringsmiddel som i præparation 1). 30 minutter efter til-15 sætning af azidet viste TLC; at al udgangsmateriale var forbrugt. Råproduktet, som blev isoleret i overensstemmelse med præparation 3, blev kromatograferet på silica-gel (4:1 methylenchlorid:ethylacetat som elueringsmiddel) til dannelse af pivaloyloxymethyl-2-diazo-3-methyl-l-be-20 ta-oxo-7-(2-phenoxyacetamido)ceph-3-em-4-carboxylat [1,5 g, 29 %; Rf 0,33 (4:1 chloroform:ethylacetat; IR (Ci^C^) 2080, 1800, 1725, 1720, 1690 cm-1].

PRÆPARATION 18 25

Benzhydryl-3-methyl-7-(2-phenoxyacetamido)ceph-3-em-4-carboxylat 30 3-methyl-7-(2-phenoxyacetamido)ceph-3-em-4-carboxylsyre (17,75 g, 51 mmol) blev opløst i 100 ml methylenchlorid.

Der blev tilsat dråbe for dråbe diphenyldiazomethan (ca.

75 mmol) under omrøring, indtil en purpurfarve holdt sig i reaktionsblandingen. Efter yderligere 30 minutters om-35 røring ved stuetemperatur blev methylenchloridet afdampet under vakuum. Resten blev opløst i en blanding af 100 ml vand, og den blev yderligere bearbejdet i overensstemmel- DK 169892 B1 102 se med præparation 4 til dannelse af benzhydry1-3-methy- * 7-(2-phenoxyacetamido)ceph-3-em-4-carboxylat [5,03 g; NMR (pulse) CDClg/TMS/delta): inkluderer 2,0 (s, 3H), 3,2 (m, 2H), 4,5 (s, 2H), 6,9-7,6 (m, UH)].

5 PRÆPARATION 19

Benzhydryl-3-methyl-l-beta-oxo-7-(2-phenoxyacetamido)-ceph-3-em-4-carboxylat 10 -

Benzhydryl-3-methyl-7-(2-phenoxyacetamido)ceph-3-em-4-carboxylat (18,0 g, 35 mmol) blev opløst i 100 ml chloroform, kølet til 0-5 °C, og der blev tilsat portionsvis 85 15 procentig m-chlorperbenzoesyre (7,1 g, 35 mmol). Blandingen blev opvarmet til stuetemperatur og holdt under omrøring i 1 time, på hvilket tidspunkt TLC indikerede fuldstændig omsætning. Der blev tilsat yderligere 85 procentig m-chlorperbenzoesyre (0,71 g, 3,5 mmol), og omrørin-20 gen blev fortsat i 1,5 timer, på hvilket tidspunkt der ikke længere var udgangsmateriale til stede ifølge TLC.

Isolering i overensstemmelse med proceduren i præparation 3 førte til benzhydryl-3-methyl-l-beta-oxo-7-(2-phenoxy-acetamido)ceph-3-em-4-carboxylat [14,0 g; NMR (pulse) 25 (CDClg/TMS/delta): inkluderer 2,0 (s, 3H), 3,3 (m, 2H), 6,1 (dd, IH, J = 5, 12)].

PRÆPARATION 20 30 Benzhydryl-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxo-7-(2-phenoxyacet amido ) ceph-3-em-4-carboxylat

Benzhydryl-3-methyl-l-beta-oxo-7-(2-phenoxyacetamido)- s 35 ceph-3-em-4-carboxylat (5,3 g, 10 mmol) i 250 ml me-thylenchlorid blev bragt til omsætning med samme reagenser og mængder af reagenser som i præparation 17 og som DK 169892 B1 103 detaljeret beskrevet i præparation 3. 30 minutter efter tilsætningen af azidet blev råproduktet isoleret i overensstemmelse med præparation 3. Kromatografi i overensstemmelse med præparation 17 gav benzhydryl-2-diazo-3-me-5 thyl-l-beta-oxo-7-(2-phenoxyacetamido)ceph-3-em-4-car- boxylat [1,1 til 1,7 g; IR (CH0C10) 2080, 1800, 1700 -1, Å Δ cm ].

PRÆPARATION 21 10

Pivaloyloxymethyl-7-methoxy-3-methyl-7-(2-phenoxyacetamido )ceph-3-em-4-carboxylat

15 Metode A

Ved at følge en procedure analog med den af Koppel og Koehler [J. Am. Chem. Soc. 95, 2403 (1973)] beskrevne, blev phenyllithium-opløsning (4,76 ml, 2,1 M i benzen-20 ether, 10 mmol) sat til 80 ml tørt tetrahydrofuran ved 0 "C. Der blev tilsat methanol (8,5 ml), og opløsningen blev omrørt i 2 minutter ved 0 “C, derpå blev den kølet til -46 °C, på hvilket tidspunkt der blev tilsat piva-loyloxymethyl-3-methyl-7-(2-phenoxyacetamido)ceph-3-em-4-25 carboxylat (924 mg, 2 mmol) efterfulgt efter 1 minuts forløb af tert.-butylhypochlorit (0,286 ml, 2,4 mmol), samt efter yderligere 2 minutters forløb en blanding af 8,5 ml eddikesyre og 8,5 ml tetrahydrofuran. Reaktions-blandingen fik lov at varme op til stuetemperatur, for-30 tyndet med toluen og inddampet under vakuum til tørhed. Resten blev opløst i toluen, vasket i rækkefølge med 10 procentig vandig natriumhydrogensulfit, vandig phosphat-buffer (pH 8) og saltvand, tørret over vandfrit magnesiumsulfat, filtreret og koncentreret til tørhed under 35 vakuum. Det således fremstillede råprodukt blev kromato-graferet på silicagel under anvendelse af en gradient med methylenchlorid-ethylacetat (0-10 % ethylacetat) til dan- 104 DK 169892 B1 nelse af pivaloyloxyraethyl-7-methoxy-3-methyl-7-(2-phe- * noxyacetamido)ceph-3-em-4-carboxylat [316 mg; 0,67 (ethylacetat); IR (CH2C12) 1775, 1740, 1690 cm”1]. 5

5 Metode B

Metode A blev gentaget, idet man dog erstattede phenylli-thlum med n-butyllithium (0,65 g, 20 mmol). Udbyttet fra søjlen var 416 mg (42 %).

10 PRÆPARATION 22

Pivaloyloxymethyl-7-methoxy-3-methyl-1-beta-oxo-7-(2-phenoxyacetamido)ceph-3-em-4-carboxylat 15 -

Pivaloyloxymethyl-7-methoxy-3-methyl-7-(2-phenoxyacetami-do)ceph-3-em-4-carboxylat (316 mg, 0,64 mmol) i 9 ml me-thylenchlorid ved 0 °C blev i overensstemmelse med den i 20 præparation 2 beskrevne metode oxideret med 80 procentig m-chlorperbenzoesyre (138 mg, 0,64 mmol), som blev tilsat i 10 lige store portioner igennem 1 time. En blanding af alpha- og beta-oxider blev isoleret i overensstemmelse med præparation 2 og kromatograferet på silicagel (3:1 25 methylenchlorid:ethylacetat) til dannelse af pivaloyl- oxymethyl-7-methoxy-3-methyl-l-beta-oxo-7-(2-phenoxyacet-amido)ceph-3-em-4-carboxylat [52-64 mg, 16-20 %; Rf 0,1 (4:1 chloroform:ethylacetat)] og pivaloyloxymethyl-7-me-thoxy-3-methyl-l-alpha-oxo-7-(2-phenoxyacetamido)ceph-3-30 em-4-carboxylat [65-67 mg, 20-21 %; Rf 0,2 (4:1 chloroform :ethylacetat)].

35 PRÆPARATION 23 105 DK 169892 B1

Pivaloyloxymethyl-2-diazo-7-methoxy-3-methyl-1-beta-oxo- 7-(2-phenoxyacetamido)ceph-3-em-4-carboxylat 5 - I overensstemmelse med de metoder, der er detaljeret beskrevet i præparation 3, blev pivaloyloxymethyl-7-me-thoxy-3-methyl-1-beta-oxo-(2-phenoxyacetamido)ceph-3-em-10 4-carboxylat (136 mg, 0,27 mmol) i 12 ml methylenchlorid ved -10 °C omsat med diisopropylethylamin (52 mg, 0,4 mmol), kalium-tert.-butoxid (45 mg, 0,4 mmol) og picryl-azid (136 mg, 0,54 mmol). Idet man holdt reaktionsblandingen på -10 eC, viste infrarød spektralanalyse ufuld-15 stændig omdannelse til azid 0,5 time efter tilsætningen af azidet, men fuldstændig omdannelse 1 time derefter. Råproduktet blev isoleret og kromatograferet ligeledes ifølge præparation 3 til dannelse af 2-diazo-7-methoxy-3-methyl-l-beta-oxo-7-(2-phenoxyacetamido)ceph-3-em-4-car-20 boxylat [65 mg, 45 %; IR (CH2C12) 2080, 1790, 1725, 1690 cm"1].

PRÆPARATION 24 25 Pivaloyloxymethyl-2-diazo-7-methoxy-3-methyl-l-alpha-oxo- 7-(2-phenoxyacetamido)ceph-3-em-4-carboxylat

Ved at følge den procedure, der er detaljeret beskrevet i 30 præparation 23 blev pivaloyloxymethyl-7-methoxy-3-methyl- 1-alpha-oxo-(2-phenoxyacetamido)ceph-3-em-4-carboxylat (178 mg, 0,35 mmol) i 15 ml methylenchlorid ved -10 eC omsat med diisopropylethylamin (68 mg, 0,525 mmol), ka-lium-tert.-butoxid (59 mg, 0,525 mmol) og picrylazid (178 35 mg, 0,7 mmol). Efter en time ved -10 eC indikerede IR-spektralanalyse en betydelig omdannelse til diazo-forbindelsen. Reaktionsblandingen blev opvarmet til stuetempe- 106 DK 169892 B1 ratur, på hvilket tidspunkt IR og TLC (4:1 chloroform :ethylacetat) Indikerede fuldstændig omdannelse. Isolering og kromatografi i overensstemmelse med præparatio- ‘ nerne 3 og 23 gav pivaloyloxymethyl-2-diazo-7-methoxy-3-5 methyl-l-alpha-oxo-7-(2-phenoxyacetamido)ceph-3-em-4-car-boxylat [54 mg, 29 %; IR (CH2C12) 2075, 1795, 1759, 1700, 1690 cm-1].

PRÆPARATION 25 10 3-methyl-7-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-l-car-boxamido)acetamido]ceph-3-em-4-carboxylsyre 15 Cephalexin (696 mg, 2 mmol) blev opløst i 10 ml vand ved 5 °C under indvirkning af kaliumcarbonat (304 mg, 2,2 mmol). Der blev tilsat ethylacetat (5 ml) og derpå 4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-l-carbonylchlorid (450 mg, 2,2 mmol) igennem en tid på 15 minutter og ved 0-5 °C. Efter 20 at tilsætningen var fuldstændig, blev reaktionsblandingen omrørt i yderligere 30 minutter, på hvilket tidspunkt ethylacetatlaget blev frasepareret, og den vandige fase vasket med en yderligere portion ethylacetat. Den vandige fase blev justeret til 2,5 og produktet ekstraheret over 25 i adskillige portioner frisk ethylacetat. De sure ethyl-acetat-ekstrakter blev forenet, tilbagevasket med vand, vasket med saltvand, tørret over vandfrit magnesiumsulfat, inddampet til tørhed under vakuum, og resten blev omkrystalliseret ud fra methylenchlorid til dannelse af 30 3-methyl-7-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-l-car- boxamido)acetamido]ceph-3-em-4-carboxylsyre (568 mg, smeltepunkt 199-200 °C).

* 35 DK 169892 Bl PRÆPARATION 26 107

Pivaloyloxymethyl-3-methyl-7-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-l-carboxamido)acetamido]ceph-3-em-4-car-5 boxylat 3-methyl-7-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-l-car-boxamido]ceph-3-em-4-carboxylsyre (3,5 g, 6,8 mmol) i 15 10 ml tørt dimethylformamid, triethylamin (0,69 g, 6,8 mmol), kaliumhydrogencarbonat (1,36 g, 13,6 mmol) og chlormethylpivalat blev omsat, og produktet blev isoleret i begge tilfælde i overensstemmelse med procedurerne i præparation 1, hvilket førte til pivaloyloxymethyl-3-me-15 thyl- 7 - [ 2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-1-carbox- amido)acetamido]ceph-3-em-4-carboxylat [1,62 g; R^ 0,48 (ethylacetat)].

PRÆPARATION 27 20

Pivaloyloxymethyl-3-methyl-l-beta-oxo-7-[2-phenyl-2-(4-ethy1-2,3-dioxopiperazin-1-carboxamido)acetamido]ceph-3-em-4-carboxylat 25

Pivaloyloxymethyl-3-methyl-7-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-di-oxopiperazin-l-carboxamido)acetamido]ceph-3-em-4-carboxy-lat blev opløst i 60 ml methylenchlorid og afkølet til 0 °C. Der blev tilsat i syv lige store portioner igennem 30 en time m-chlorperbenzoesyre (80 %, 720 mg, 3,3 mmol), idet temperaturen blev holdt ved 0 °C. Efter den sidste tilsætning indikerede TLC (ethylacetat), at oxidationen var fuldstændig. Isolering som detaljeret beskrevet i præparation 2 (idet kromatografi var unødvendig) førte 35 til pivaloyloxymethyl-3-methyl-l-beta-oxo-7-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-1-carboxamido)acetamido]ceph- 3-em-4-carboxylat [1,5 g, 70 %; R^ 0,19 (ethylacetat)].

PRÆPARATION 28 * 108 DK 169892 B1

Pivaloyloxymethyl-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxo-7-[2-phe-nyl-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-l-carboxamido)acetami-5 do]ceph-3-em-4-carboxylat

Pivaloyl-3-methyl-l-beta-oxo-7-[2-phenyl~2-(4-ethyl-2,3-dioxoplperazin-1-carboxamido)acetamido]ceph-3-em-4-car-10 boxylat (1,3 g, 2 mmol) i 130 ml methylenchlorid blev bragt til omsætning med diisopropylethylamin (387 mg, 3 mmol), kalium-tert.-butoxid (336 mg, 3 mmol) og picryl-azid, idet de i præparation 3 beskrevne procedurer blev fulgt. Isolering af råprodukt og kromatografi på silica-15 gel (ethylacetat som elueringsmiddel) førte til pivaloyl- oxymethyl-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxo-7-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-1-carboxamido)acetamido]ceph-3-em-4-carboxylat [750 mg; Rf 0,25 (ethylacetat)].

20 PRÆPARATION 29 2- naphthylmethyl-3-methyl-7-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-di-oxopiperazin-l-carboxamido)acetamido]ceph-3-em-4-carboxy-lat 25 - 3- methyl-7-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-1-carboxamido) acetamido]ceph-3-em-4-carboxylsyre (4,48 g, 8,7 mmol) blev opløst i 30 ml dimethylformamid. Der blev til- 30 sat triethylamin (8,79 mg, 8,7 mmol), og blandingen blev omrørt i 30 minutter. Der blev tilsat kaliumhydrogencar-bonat (1,74 g, 17,4 mmol), og omrøringen blev fortsat il s time. Til sidst blev tilsat natriumiodid (1,3 g, 8,7 mmol) og 2-(brommethyl)naphthalen (2,11 g, 9,6 mmol) (og = 35 der blev bemærket en svagt exotherm reaktion), og blandingen fik lov at stå under omrøring ca. 16 timer ved stuetemperatur. Eftersom overvågning ved TLC (9:1 ace- DK 169892 B1 109 tone:vand) af reaktionsblandingen gennem de næste 8 timer indikerede, at omsætningen var standset forud for fuldstændig omdannelse til esteren, blev der tilsat en tiendedel af mængderne af kaliumhydrogencarbonat, natriumio-5 did og 2-(brommethyl)naphthalen, og reaktionen fik lov til at fortsætte i yderligere 16 timer. Reaktionsblandingen blev fortyndet med 1:1 ethylacetat:vand, og det organiske lag blev frasepareret og tilbagevasket adskillige gange med vand. Den organiske fase blev lagdelt med frisk 10 vand, pH blev sænket til 2,5, og det organiske lag blev frasepareret, vasket med adskillige portioner vand, vasket med saltvand, tørret over vandfrit magnesiumsulfat, filtreret og inddampet under vakuum til dannelse af 2- naphthylmethyl-3-methyl-7-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-di- 15 oxopiperazin-1-carboxamido)acetamido]ceph-3-em-4-carboxy- lat [4,8 mg, 84 %; R^ 0,39 (ethylacetat)].

Under anvendelse af metoden i præparation 7 esterificeres 3- methyl-7-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-l-car- 20 boxamido)acetamido]ceph-3-em-4-carboxylsyre til dannelse af den tilsvarende 2,2,2-trichlorethylester, nemlig 2,2,2-trichlorethyl-3-methyl-7-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-l-carboxamido)acetamido]ceph-3-em-4-carbo-xylat.

25 PRÆPARATION 30 2-naphthylmethyl-3-methyl-l-beta-oxo-7-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-1-carboxamido)acetamido]ceph-3-30 em-4-carboxylat 2-naphthylmethyl-3-methyl-7-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-di-oxopiperazin-1-carboxamido Jacetamido]ceph-3-em-4-carboxy-35 lat (4,8 g, 7,3 mmol) i 480 ml methylenchlorid blev bragt til omsætning ved 0 eC med 80 procentig m-chlorbenzoesyre (1,6 g, 7,3 mmol), der blev tilsat i fem lige store por- DK 169892 B1 110 tioner igennem 1 time. TLC (ethylacetat) indikerede, at udgangsmaterialet var blevet opbrugt. Isolering i overensstemmelse med præparation 27 førte til 2-naphthylme- * thyl-3-methyl-l-beta-oxo-7-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-di-5 oxopiperazin-l-carboxamido)acetamido]ceph-3-em-4-carboxy- lat [3,3 g, 67 %; 0,13 (ethylacetat)].

Ved den samme metode omdannes 2,2,2-trichlorethyl-3-me-thyl-7-[2-phenyl-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-l-carboxami-10 do)acetamido]ceph-3-em-4-carboxylat til 2,2,2-trichlor- ethyl-3-methyl-l-beta-oxo-7-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-di-oxopiperazin-l-carboxamido)acetamido]ceph-3-em-4-carboxy-lat.

15 PRÆPARATION 31 2-naphthylmethyl-2-diazo-3-methyl-1-beta-oxo-7-[2-phenyl- 2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-l-carboxamido)acetamido]-ceph-3-em-4-carboxylat 20 - 2-naphthylmethyl-3-methyl-l-beta-oxo-7-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-l-carboxamido)acetamido]ceph-3-em-4-carboxylat (382 mg, 0,57 mmol) i 38 ml methylenchlo-25 rid ved -10 °C blev bragt til omsætning med diisopropyl-ethylamin (110 mg, 0,86 mmol), kalium-tert.-butoxid (96 mg, 0,86 mmol) og picrylazid (290 mg, 1,14 mmol) alt i overensstemmelse med de fremgangsmåder, der er beskrevet i præparation 3. Efter 0,5 times forløb ved -10 eC indi-30 kerede IR og TLC (ethylacetat) analyser, at omdannelsen var tilendebragt. Reaktionsproduktet blev isoleret og kromatograferet på silicagel (ethylacetat som eluerings-middel) i overensstemmelse med præparation 3 til dannelse af 2-naphthylmethyl-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxo-7-[2-phe- - 35 nyl-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-l-carboxamido)acetami-do]ceph-3-em-4-carboxylat [237 mg, 60 %; IR (CH2C12) 2080, 1800, 1760, 1740 cm R^ 0,25 (ethylacetat)].

111 DK 169892 B1

Ved den samme metode omdannes 2,2,2-trichlorethyl-3-me-thy1-1-beta-oxo-7-[2-phenyl-2-(4-ethyl-2,3-dioxopipera-zin-1-carboxamido)acetamido]ceph-3-em-4-carboxylat til 2,2,2-trichlorethyl-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxo-7-[2-phe-5 nyl-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-l-carboxamido Jacetami- do]ceph-3-em-4-carboxylat.

PRÆPARATION 32 10 3-methyl-7-(5-methyl-3-phenylisoxazol-4-carboxamido)ceph- 3-em-4-carboxylsyre 7-aminodesacetoxycephalosporansyre (7-amino-3-methylceph-15 3-em-4-carboxylsyre) (21,4 g, 0,1 mmol) blev opløst i 800 ml vand med indvirkning af natriumhydrogencarbonat (27,9 g, 0,33 mmol). Opløsningen blev fortyndet med 800 ml acetone og kølet til 0 °C. Der blev tilsat 5-methyl-3-phe-nylisoxazol-4-carbonylchlorid (27,7 g, 0,33 mmol), og 20 reaktionsblandingen blev holdt under omrøring i 2 timer ved 0 °C, derpå blev den holdt ved køleskabstemperatur i ca. 16 timer. Acetonen blev fjernet ved afdampning under vakuum, den vandige inddampningsrest blev ekstraheret adskillige gange med ethylacetat. Idet man lagdelte den 25 vandige fase med ethylacetat og justerede ned til 2,0, blev det ønskede reaktionsprodukt udfældet. Filtrering med ethylacetatvaskning førte til 3-methyl-7-(5-methyl-phenylisoxazol-4-carboxamido)ceph-3-em-4-carboxylsyre [27,5 g, NMR (pulse) (TMS/DMSO-dg) delta: inkluderer 2,0 30 (s, 3H); 2,4 (s, 3H); 3,4 (m, 2H); 7,2-7,8 (m, 5H)].

35 PRÆPARATION 33 112 DK 169892 B1

Pivaloyloxymethy1-3-methyl-7-(5-methyl-3-phenylisoxazol- 4-carboxamido)ceph-3-em-4-carboxylat 5 - 3-methyl-7-(5-methyl-3-phenylisoxazol-4-carboxamido)ceph- 3- em-4-carboxylsyre (25,9 g, 65 mmol) blev opløst i vand-frit dimethylformamid (150 ml). Der blev tilsat triethyl- 10 amin (19,7 g, 195 mmol), kaliumhydrogencarbonat (19,5 g, 195 mmol), natriumiodid (29,3 g, 195 mmol) samt chlorme-thylpivalat (29,3 g, 195 mmol). Man iagttog en exotherm reaktion, idet temperaturen steg til ca. 35 “C. Efter omrøring i 6 timer ved omgivelsernes temperatur indikerede 15 overvågning ved TLC (4:1 chloroform; ethyl acetat), at der var betydelige mængder af udgangsmaterialet tilbage. Der blev tilsat yderligere chlormethylpivalat (8,4 g, 65 mmol), og omrøringen ved omgivelsernes temperatur fortsatte i 16 timer. Isolering i overensstemmelse med præpa-20 ration 1 førte til pivaloyloxymethyl-3-methyl-7-(5-me- thyl-3-phenylisoxazol-4-carboxamido)ceph-3-em-4-carboxy-lat [25,3 g, 76 %; Rf 0,8 (4:1 chloroform:ethylacetat; IR (CH2C12) 1870, 1750, 1670 cm-1].

25 PRÆPARATION 34

Pivaloyloxymethyl-3-methyl-7-(5-methyl-3-phenylisoxazol- 4- carboxamido)-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat 30

Pivaloyloxymethyl-3-methyl-7-(5-methyl-3-phenylisoxazol- 4-carboxamido)ceph-3-em-4-carboxylat (24,6 g, 48 mmol) i 1200 ml methylenchlorid ved 0 °C blev omsat med 80 pro-centig m-chlorbenzoesyre (10,4 g, 48 mmol). Efter en ti- * 35 mes forløb førte isolering i overensstemmelse med præparation 2 (uden kromatografering) til pivaloyloxymethyl-3-methyl-7-(5-methyl-3-phenylisoxazol-4-carboxamido)-1-be- DK 169892 B1 113 ta-oxoceph-3-em-4-carboxylat [10,9 g, 43 %; Rf 0,4 (4:1 chloroform:ethylacetat)].

PRÆPARATION 35 5

Pivaloyloxymethyl-2-diazo-3-methyl-7-(5-methyl-3-phenyl-isoxazol-4-carboxamido)-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat 10 I overensstemmelse med de i præparation 3 beskrevne fremgangsmåder omsatte man pivaloyloxymethyl-3-methyl-7-(5-methyl-3-phenylisoxazol-4-carboxamido)-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat (2,1 g, 4 mmol) i 200 ml methylenchlorid ved -10 °C med diisopropylethylamin (774 mg, 6 mmol), 15 kalium-tert-butoxid (672 mg, 6 mmol) samt picrylazid (2,0 g, 8 mmol), omsætningen blev overvåget og produktet isoleret (med undtagelse af at man anvendte 3:1 methylenchlorid :ethylacetat som elueringsmiddel ved silicagel-kromatografi), hvilket førte til pivaloyloxymethyl-2-di-20 azo-3-methyl-7-(5-methyl-3-phenylisoxazol-4-carboxamido)-

l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat [1,09 g, 49 %; IR

(CH2C12) 2080, 1800, 1750, 1680 cnf1].

PRÆPARATION 36 25 7-D-(2-benzyloxycarbonylamino-2-phenylacetamido)-3-me-thylceph-3-em-4-carboxylsyre 30 Cephalexin (3,47 g, 10 mmol) opløstes i 250 ml dimethyl-formamid under indvirkning af diisopropylethylamin (2,58 g, 20 mmol). Opløsningen køles til 0 eC, og der tilsættes 4-dimethylaminopyridin (0,24 g, 2 mmol). Idet man holdt temperaturen ved 0-5 “C, blev der tilsat dråbe for dråbe 35 carbobenzoxychlorid (1,78 g, 10,5 mmol). Reaktionsblandingen fik lov at opvarme til stuetemperatur og holdt under omrøring i 30 minutter. Reaktionsblandingen blev ind- 114 DK 169892 B1 dampet til tørhed under vakuum, og inddampningsresten 1 blev opløst 1 250 ml methylenchlorid. Methylenchloridop-løsningen blev lagdelt med et lige så stort rumfang vand, og pH blev justeret til 2. Det organiske lag blev vasket 5 med saltvand, tørret over vandfrit natriumsulfat, filtreret og inddampet til tørhed under vakuum til dannelse af 7-(2-benzyloxycarbonylamino-2-phenylacetamido)-4-methyl-ceph-3-em-4-carboxylsyre.

10 PRÆPARATION 37

Pivaloyloxymethyl-7-D-(2-benzyloxycarbonylamino-2-phenyl-acetamido)-3-methylceph-3-em-4-carboxylat 15

Under anvendelse af metoden i præparationerne 1, 12, 15 etc. blev 7-D-(2-benzyloxycarbonylamino-2-phenylacetami-do)-3-methylceph-3-em-4-carboxylsyre esterificeret til dannelse af pivaloyloxymethyl-7-D-(2-benzyloxycarbonyl-20 amino-2-phenylacetamido)-3-methylceph-3-em-4-carboxylat.

PRÆPARATION 38

Pivaloyloxymethyl-7-D-(2-benzyloxycarbonylamlno-2-phenyl-25 acetamido)-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat

Under anvendelse af metoden fra præparation 16 oxideres pivaloyloxymethyl-7-D-(2-benzyloxycarbonylamino)-2-phe-30 nylacetamido)-3-methylceph-3-em-4-carboxylat til piva- loyloxymethyl-7-D-(2-benzyloxycarbonylamino-2-phenylacet-amido)-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat.

35 PRÆPARATION 39 115 DK 169892 B1

Pivaloyloxymethyl-7-D-(2-benzyloxycarbonylamino-2-phenyl-acetamido)-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-car-5 boxylat

Under anvendelse af den metode, der er beskrevet 1 præparationerne 3, 6, 9 etc., omdannes pivaloyloxymethyl-7-D-10 (2-benzyloxycarbonylamino-2-phenylacetamido)-3-methyl-l- beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat til pivaloyloxymethyl-7-D-(2-benzyloxycarbonylamino-2-phenylacetamido)-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat.

15 PRÆPARATION 40

Benzhydryl-7-D-(2-benzyloxycarbonylamino-2-phenylacetami-do)-3-methylceph-3-em-4-carboxylat 20

Under anvendelse af den metode, der er beskrevet i præparation 4, 18 etc., esterificeres 7-D-(2-benzyloxycarbo-nylamino-2-phenylacetamido)-3-methylceph-3-em-4-carboxyl-syre til dannelse af benzhydryl-7-D-(2-benzyloxycarbonyl-25 amino-2-phenylacetamido)-3-methylceph-3-em-4-carboxylat.

PRÆPARATION 41

Benzhydryl-7-D-(2-benzyloxycarbonylamino-2-phenylacetami-30 do)-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat

Under anvendelse af metoden fra præparation 16 oxideres benzhydryl-7-D-(2-benzyloxycarbonylamino-2-phenylacetami-35 do)-3-methylceph-3-em-4-carboxylat til benzhydry1-7-D-(2- benzyloxycarbonylamino-2-phenylacetamido)-3-methyl-l-be-ta-oxoceph-3-em-4-carboxylat.

PRÆPARATION 42 * 116 DK 169892 B1

Benzhydryl-7-D-(2-benzyloxycarbonylamino-2-phenylacetami- - do)-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat 5 -

Under anvendelse af den metode, der er beskrevet 1 præparationerne 3, 6, 9 etc., omdannes benzhydryl-7-D-(2-ben-zyloxycarbonylamino-2-phenylacetamido)-3-methyl-l-beta-10 oxoceph-3-em-4-carboxylat til benzhydryl-7-D-(2-benzyl-oxycarbonylamino-2-phenylacetamido)-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat.

PRÆPARATION 43 15 2-phenyl-2-benzhydryloxycarbonylacetylchlorid

Under anvendelse af den procedure, der er beskrevet af 20 Goldman et al., (US patentskrift nr. 3 773 757), blandes phenylmalonsyre (72 g, 0,40 mol), thionylchlorid (52,4 g, 0,44 mol) og dimethylformamid (0,070 ml) i diisopropyl-ether og holdes under tilbagesvaling i 2 timer. Den dannede opløsning af phenylmalonsyre-halvsyrechlorid afkøles 25 og opbevares under en inert atmosfære indtil anvendelsen.

Ved at følge en procedure, der er analog med den af Goldman et al. angivne, tilsættes benzhydrylalkohol (73,6 g, 0,40 mol) til opløsningen af halvsyrechlorid, og blandingen holdes igen under tilbagesvaling i 2 timer. Rum-30 fanget reduceres til halvdelen, hvorved der dannes en opløsning i diisopropylether af 2-phenyl-2-benzhydryloxy-carbonylacetylchlorid, som anvendes direkte i det næste trin.

35 Ved den samme procedure fremstilles, idet man dog substituerer en ækvivalent mængde af benzylalkohol eller 2-naphthylmethanol, de tilsvarende 2-phenyl-2-benzyloxycar- 117 DK 169892 B1 bonylacetyl og 2-(2-naphthylmethoxycarbonyl)-2-phenylace-tylchlorider.

PRÆPARATION 44 5 7-(2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-3-methyl-ceph-3-em-4-carboxylsyre 10 Ved at følge den procedure, der er analog med det af Goldman et al. beskrevne (ibid), opløses 7-aminodesace-toxycephalosporansyre (7-amino-3-methylceph-3-em-4-car-boxylsyre) (74,9 g, 0,35 mol) i vand, der er under grundig omrøring (200 ml) under langsom tilsætning af na-15 triumhydroxid (omtrent 75 ml af 4N styrke) til en pH på 7,5. Til denne opløsning sættes 200 ml acetone. Idet temperaturen holdes ved 10-15 eC, tilsættes under fortsat kraftig omrøring i løbet af 30 minutter den ovenfor fremstillede opløsning i isopropylether af 2-phenyl-2-benzhy-20 dryloxycarbonylacetylchlorid. pH holdes nær 6,5 ved tilsætning af 4N NaOH (ca. 160 ml). De organiske opløsningsmidler fjernes ved inddampning under vakuum. Det vandige lag fortyndes med et lige så stort rumfang ethylacetat, og pH justeres til 2. Ethylacetatlaget frasepareres, vas-25 kes med saltvand, tørres over vandfrit natriumsulfat, filtreres og inddampes under vakuum til dannelse af 7-(2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-3-methylceph-3-em-4-carboxylsyre.

30 Den samme metode anvendes til at omdanne de andre syre-chlorider fra præparation 51 til de tilsvarende 7-(2-ben-zyloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-3-methylceph-3-em-4-carboxylsyre og 3-methyl-7-[2-(2-naphthylmethoxycarbo-nyl)-2-phenylacetamido]ceph-3-em-4-carboxylsyre.

35 PRÆPARATION 45 118 DK 169892 B1

Pivaloyloxymethyl-7-(2-benzhydryloxycarbony1-2-phenyl-acetamido)-3-methylceph-3-em-4-carboxylat 5 -

Under anvendelse af den metode, der er beskrevet 1 præparation 1, 12, 15 etc., esterificeres 7-(2-benzhydryloxy-carbonyl-2-phenylacetamido)-3-methylceph-3-em-4-carboxyl-10 syre til dannelse af pivaloyloxymethyl-7-(2-benzhydryl- oxycarbonyl-2-phenylacetamido)-3-methylceph-3-em-4-carbo-xylat.

Ved anvendelse af den samme metode omdannes de andre sy-15 rer i præparation 52 til de tilsvarende pivaloyloxymethyl-7- ( 2-benzyloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-3-methyl-ceph-3-em-4-carboxylat og 3-methyl-7-[2-(2-naphthylme-thoxycarbonyl)-2-phenylacetamido]ceph-3-em-4-carboxylat.

20 PRÆPARATION 46

Pivaloyloxymethyl-7-(2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenylacetamido )-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat 25

Under anvendelse af metoden fra præparation 16 oxideres pivaloyloxycarbonyl-7-(2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenyl-acetamido)-3-methylceph-3-em-4-carboxylat til pivaloyl-oxymethyl-7-(2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-30 3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat.

Under anvendelse af den samme metode oxideres de øvrige , estere fra præparation 53 til de tilsvarende pivaloyloxymethyl-7- ( 2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenylacetamido) -3-35 methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat og 3-methyl-7-[2- (2-naphthylmethoxycarbonyl)-2-phenylacetamido]-1-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat.

PRÆPARATION 47 119 DK 169892 B1

Pivaloyloxymethyl-7-(2-benzhydryloxycarbony1-2-phenyl-acetamido)-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-car-5 boxylat

Under anvendelse af metoden beskrevet 1 præparation 3, 6, 9 etc. omdannes pivaloyloxymethyl-7-(2-benzhydryloxycar-10 bonyl-2-phenylacetamido)-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4- carboxylat til pivaloyloxymethyl-7-(2-benzhydryloxycarbo-nyl-2-phenylacetamido)-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat.

15 Under anvendelse af den samme metode omdannes de øvrige 1- beta-oxider fra præparation 46 til de tilsvarende pivaloyloxymethyl-7- ( 2-benzyloxycarbonyl-2-phenylacetamido)- 2- diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat og 2-diazo-3-methyl-7-[2-(2-naphthylmethoxycarbonyl)-2-phenyl- 20 acetamido]-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat.

PRÆPARATION 48

Benzhydryl-7-(2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-25 3-methylceph-3-em-4-carboxylat

Under anvendelse af den metode, der er beskrevet i præparationerne 4, 18 etc. esterificeres 7-(2-benzhydryloxy-30 carbonyl-2-phenylacetamido)-3-methylceph-3-em-4-carboxyl- syre til dannelse af benzhydryl-7-(2-benzhydryloxycarbo-nyl-2-phenylacetamido)-3-methylceph-3-em-4-carboxylat.

Under anvendelse af den samme metode omdannes de øvrige 35 syrer fra præparation 44 til de tilsvarende benzhydryl-7- (2-benzyloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-3-methylceph-3-em-4-carboxylat og 3-methyl-7-[2-(2-naphthylmethoxycarbo- 120 DK 169892 B1 nyl)-2-phenylacetamido]ceph-3-em-4-carboxylat. *

Under anvendelse af metoden 1 præparation 29 (Idet man anvender en ækvivalent mængde benzylbromld 1 stedet for 5 2-brommethylnaphthalen, når benzylesteren ønskes), omdan nes de tre syrer i præparation 44 til de tilsvarende benzyl- og 2-naphthylmethyl-7-(2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-3-methylceph-3-em-4-carboxylater, 7-(2-benzyloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-3-methylceph-3-em-4-10 carboxylater og 3-methyl-7-[2-(2-naphthylmethoxycarbo- nyl)-2-phenylacetamido]ceph-3-em-4-carboxylater.

PRÆPARATION 49 15 Benzhydryl-7-(2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenylacetamido)- 3-methyl-1-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat

Under anvendelse af metoden fra præparation 16 oxideres 20 benzhydryl-7-(2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenylacetamido)- 3-methylceph-3-em-4-carboxylat til dannelse af benzhydryl-7- ( 2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-3-me-thyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat.

25 Under anvendelse af den samme metode omdannes de øvrige estere fra præparation 48 til de tilsvarende benzhydryl-, benzyl- og 2-naphthylmethyl-7-(2-benzhydryloxycarbonyl- 2-phenylacetamido)-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylater, 7-(2-benzyloxycarbonyl-2-phenylacetamido)- 30 3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylater og 3-methyl- 7-[2-(2-naphthylmethoxycarbonyl)-2-phenylacetamido]-1-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylater.

35 PRÆPARATION 50 121 DK 169892 B1

Benzhydryl-7-(2-benzhydryloxycarbonyl-2-phenylacetamido)- 2-diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat 5 —--—--

Under anvendelse af den metode, der er beskrevet 1 præparationerne 3, 6, 9 etc., omdannes benzhydryl-7-(2-benzhy-dryloxycarbonyl-2-phenylacetamido)-3-methyl-l-beta-oxo-10 ceph-3-em-4-carboxylat til benzhydryl-7-(2-benzhydryloxy-carbony1-2-phenylacetamido)-2-diazo-3-methyl-1-beta-oxo-ceph-3-em-4-carboxylat.

Under anvendelse af den samme procedure omdannes de Øvri-15 ge estere fra præparation 49 til de tilsvarende benzhy-dryl-, benzyl- og 2-naphthyl-7-(2-benzhydryloxycarbonyl- 2-phenylacetamido)-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em- 4-carboxylater, 7-(2-benzyloxycarbonyl-2-phenylacetami- do)-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylater 20 og 2-diazo-3-methyl-7-[2-(2-naphthylmethoxycarbonyl)-2- phenyl]-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylater.

PRÆPARATION 51 25 Pivaloyloxymethyl-6,6-dibrompenicillanat 6,6-dibrompenicillansyre [Clayton, J. Chem. Soc. C, 2123 (1969); 10 g, 30 mmol] i 200 ml dimethyl formamid blev 30 bragt til omsætning med triethylamin (4,17 ml, 30 mmol), kaliumhydrogencarbonat (3,0 g, 30 mmol) og chlormethylpi-valat (4,3 ml, 30 mmol). Efter omrøring i 5 timer ved stuetemperatur indikerede TLC (18:1 acetone:vand), at der var betragtelige mængder udgangsmateriale til stede. Der 35 blev tilsat yderligere portioner chlormethylpivalat (4,3 ml, 30 mmol) og kaliumhydrogencarbonat (3,0 g, 30 mmol), og reaktionen fik lov til at fortsætte i yderligere 16 122 DK 169892 B1 timer ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen blev inddampet til tørhed under vakuum, og inddampningsresten , kromatograferedes på silicagel under anvendelse af 30:1 methylenchlorid:ethylacetat som elueringsraiddel, idet der 5 blev overvåget ved TLC og IR analyser. Dette resulterede i pivaloyloxymethyl-6,6-dibrompenicillanat [1,73 g; R^ 0,77 (18:1 acetone:vand); IR (CI^C^) 1790, 1750 cm-1].

PRÆPARATION 52 10

Pivaloyloxymethyl-6-alpha-brom-6-beta-(1-hydroxyethyl)-penicillansyre 15 I en flamme-tørret, trehalset kolbe på 50 ml blev under nitrogenatmosfære pivaloyloxymethyl-6,6-dibrompenicillan-syre (1,0 g, 2,33 mmol) opløst i tørt, frisk destilleret tetrahydrofuran og nedkølet til -78 °C. Der blev igennem en sprøjte tilsat tert.-butylmagnesiumchloridopløsning i 20 ether (1,03 ml med koncentrationen 2,7 M, 2,79 mmol), og reaktionsblandingen blev omrørt i 1 time ved -78 eC. Derpå blev tilsat acetaldehyd (0,29 ml, 5,23 mmol), og omsætningen fik lov at foregå i yderligere 1 time ved -78 eC. Reaktionsblandingen blev udslukket ved tilsætning 25 af eddikesyre (0,22 ml, 3,9 mmol), den fik lov at varme op til stuetemperatur, og den blev inddampet til tørhed under vakuum. Resten blev fordelt imellem lige store rumfang chloroform og vand. Den vandige fase blev ekstraheret med to friske portioner chloroform. Chloroformfasen 30 og vaskevæskerne blev forenet, tilbagevasket med vand, vasket med saltvand, tørret over vandfrit natriumsulfat, filtreret og inddampet til tørhed til dannelse af piva-loyloxymethyl-6-alpha-brom-6-beta-(1-hydroxyethyl)penicillansyre [1,01 g; olie; IR (CI^C^) 1775, 1750 cm”*].

Under anvendelse af den samme metode, men idet der anvendes en ækvivalent mængde formaldehyd (som opløsning i te- 35 DK 169892 B1 123 trahydrofuran) i stedet for acetaldehyd, omdannes piva-loyloxymethyl-6,6-dibrompenicillater til det tilsvarende pivaloyloxymethyl-6-alpha-brom-6-beta-(hydroxymethyl)pe-nicillanat. Idet der anvendes acetone i stedet for acet-5 aldehyd opnås 6-alpha-brom-6-beta-(2-hydroxy-2-propyl)pe- nicillanat.

PRÆPARATION 53 10 Pivaloyloxymethyl-6-alpha-(1-hydroxyethyl)penicillanat

En hydrogenerings-katalysator (1,01 g 10 % palladium-på-carbon) blev bragt i en opslæmning i 10 ml vand og præ-15 hydrogeneret i 10 minutter (3,4 atmosfære, stuetemperatur). Derpå blev tilsat pivaloyloxymethyl-6-alpha-brom-6-beta-(1-hydroxyethyl)-penicillanat (1,01 g) i 10 ml te-trahydrofuran, og hydrogeneringen blev genoptaget i 1,5 timer. Katalysatoren blev fjernet ved filtrering med vask 20 med vandig tetrahydrofuran. Tetrahydrofuran blev afdampet under vakuum fra det forenede og vaskevæskerne. Produktet blev ekstraheret fra den vandige rest over i fire portioner ethylacetat, og ethylacetatekstrakterne blev forenet, vasket med saltvand, tørret over vandfrit natriumsulfat, 25 filtreret og inddampet til dannelse af pivaloyloxymethyl- 6-alpha-(1-hydroxyethyl)penicillanat (249 mg). Katalysatorkagen blev genudrørt i ca. 100 ml tetrahydrofuran, katalysatoren blev fjernet ved filtrering, og filtratet inddampet under vakuum til dannelse af yderligere 278 mg 30 af det ønskede reaktionsprodukt [IR (CI^C^) 1770, 1760 cm-1; Rf 0,48 (4:1 chloroform:ethylacetat)].

Under anvendelse af den samme metode omdannes pivaloyl-oxymethyl-6-alpha-brom-6-beta-(hydroxymethyl)penicillanat 35 til pivaloyloxymethyl-6-alpha-(hydroxymethyl)penicilla- nat, og pivaloyloxymethyl-6-alpha-brom-6-beta-(2-hydroxy- 2-propyl)penicillanat omdannes til pivaloyloxymethyl-6- DK 169892 B1 124 alpha-(2-hydroxy-2-propyl)penicillanat.

PRÆPARATION 54 5 Pivaloyloxymethyl-6-alpha-(1-acetoxyethyl)penicillanat

Pivaloyloxymethyl-6-alpha-(1-hydroxyethyl)penicillanat (468 mg, 1,49 mmol) og dllsopropylethylamln (0,30 ml) 10 blev opløst i 50 ml methylenchlorid. Opløsningen blev kølet til 0 °C, der blev tilsat 4-dimethylaminopyridin (18,7 mg) og eddikesyreanhydrid (0,17 ml), og reaktionsblandingen blev omrørt i 30 minutter ved stuetemperatur, på hvilket tidspunkt overvågning ved TLC indikerede, at 15 acetyleringen var fuldstændig. Reaktionsblandingen blev ekstraheret med en vandig buffer (pH 7,0), tørret over vandfrit natriumsulfat, filtreret og inddampet til dannelse af det ønskede produkt. Kromatografi (30:1 chloroform :ethylacetat) førte til renset pivaloyloxymethyl-6-20 alpha-(1-acetoxyethyl)penicillanat [120 mg: IR (CHgClg) 1770, 1750 cm’"·*’: R^ 0,35 (30:1 chloroform:ethylacetat); 0,80 (15:1 methylenchlorid:ethylacetat)].

Under anvendelse af den samme metode acetyleres de øvrige 25 hydroxyestere fra præparation 53 til dannelse af piva-loyloxymethyl-6-alpha-(acetoxymethyl)penicillanat og pi-valoyloxymethyl-6-alpha-(2-acetoxy-2-propyl)penicillanat.

PRÆPARATION 55 30

Pivaloyloxymethyl-6-alpha-(1-acetoxyethyl)-1-beta-oxo-pe-nicillanat 35 Pivaloyloxymethyl-6-alpha-(1-acetoxyethyl)penicillanat (120 mg, 0,31 mmol) blev opløst i 10 ml methylenchlorid og kølet til -78 eC. Der blev tilsat i tre portioner for- DK 169892 B1 125 delt over 1 time m-chlorperbenzoesyre (85 %, 62 mg, 0,31 nunol). Efter 2,5 timers omrøring ved -78 °C indikerede overvågning ved TLC (15:1 chloroform:ethylacetat), at oxidationen var fuldstændig. Isolering ifølge præparation 5 2 (idet kromatografi var unødvendig) førte til pivaloyl- oxymethyl-6-alpha-(acetoxymethyl)-1-beta-oxopenicillanat [91 mg? IR (CH2C12) 1780, 1750 cm-1; Rf 0,22 (15:1 methy-lenchlorid:ethylacetat)].

10 Under anvendelse af den samme metode oxideres de øvrige esterprodukter fra præparation 54 til pivaloyloxymethyl- 6-alpha-(acetoxymethyl)-1-beta-oxopenicillanat og piva-loyloxymethyl-6-alpha-(2-acetoxy-2-propyl)-1-beta-oxopenicillanat .

15 PRÆPARATION 56

Pivaloyloxymethyl-7-alpha-(1-acetoxyethyl)-3-methylceph- 3-em-4-carboxylat 20 -

Ved at følge en procedure, der er analog til den, der er beskrevet af Morris et al. [J. Am. Chem. Soc. 85, 1896 (1973)], blev pivaloyloxymethyl-6-alpha-(1-acetoxyethyl)-25 1-beta-oxopenicillansyre (90,5 mg) opløst i 20 ml tør di-oxan anbragt i en kolbe i et Soxhlet-ekstraktionsapparat under nitrogen med en blanding i forholdet 50/50 af 4A molekylarsigte og neutral aluminiumoxid i ekstraktionsbægeret. Der blev tilsat pyridin (2 dråber) og 80 procentig 30 phosphorsyre (1 dråbe), og blandingen blev holdt under tilbagesvaling i 23 timer. Reaktionsblandingen blev af-dampet under vakuum til en olie, der blev opløst i en blanding 50/50 methylenchlorid/vand. Man iagttog en pH-værdi på ca. 2,5. Methylenchloridfasen blev frasepareret, 35 tilbagevasket med vand, fortyndet med yderligere vand, og pH-værdien blev justeret til 7-7,5. Methylenchloridfasen blev igen frasepareret, vasket med frisk vand og derpå DK 169892 B1 126 med saltvand, tørret over vandfrit natriumsulfat, filtreret og inddampet under vakuum til dannelse af det ønskede produkt (61 mg). Præparativ tyndtlagskromatografi (250 Mm tykkelse på silicagel), der blev fremkaldt med 30:1 me-5 thylenchloridsethylaoetat, idet hovedbåndet blev ekstraheret over i acetone og inddampet til tørhed, førte til pivaloyloxymethyl-7-alpha-(1-acetoxyethyl)-3-methylceph- 3-em-4-carboxylat 15,6 mg? IR (CH2C12) 1770, 1745 cm"1].

10 Under anvendelse af den samme metode omlejres de øvrige penicillanater fra præparation 55 til de tilsvarende pi-valoyloxymethyl-7-alpha-(acetoxymethyl)-3-methylceph-3-em-4-carboxylat og pivaloyloxymethyl-7-alpha-(2-acetoxy- 2- propyl)-3-methylceph-3-em-4-carboxylat.

15 PRÆPARATION 57

Pivaloyloxymethyl-7-alpha-(1-acetoxyethyl)-3-methyl-l-be-ta-oxoceph-3-em-4-carboxylat 20 -

Under anvendelse af den i præparation 55 angivne metode blev pivaloyloxymethyl-7-(1-acetoxymethyl)-3-methylceph- 3- em-4-carboxylat (15,6 mg, 0,04 mmol) oxideret og isole-25 ret til dannelse af en blanding af pivaloyloxymethyl-7- alpha-(1-acetoxyethyl)-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat og pivaloyloxymethyl-7-alpha-(1-acetoxyethyl)- 3-methyl-l-alpha-oxoceph-3-em-4-carboxylat [16 mg; IR (CH2C12) 1780, 1745 cm"1]. Disse isomere separeres ved 30 kromatografi, idet der anvendes de metoder, der er beskrevet i eksemplerne 54 og 56.

Under anvendelse af den samme metode oxideres det andet ceph-3-em-4-carboxylat fra eksempel 56 til de tilsvarende 35 alpha- og beta-oxider: pivaloyoxymethyl-7-alpha-(acetoxymethyl )-3-methyl-l-oxoceph-3-em-4-carboxylat og pivaloyl-oxymethyl-7-alpha-(2-acetoxy-2-propyl)-3-methyl-1-oxo- DK 169892 B1 127 ceph-3-em-4-carboxylat.

PRÆPARATION 58 5 Pivaloyloxymethyl-7-(1-acetoxyethyl)-2-diazo-3-methyl-l- beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat

Metode A

10

Blandingen fra præparation 57 af pivaloyloxymethyl-7-alpha-(1-acetoxyethyl)-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat og pivaloyloxymethyl-7-alpha-(1-acetoxyethyl)- 3-methyl-l-alpha-oxoceph-3-em-4-carboxylat (16 mg, 0,039 15 mmol) blev opløst i 2 ml methylenchlorid og kølet til -10 °C. Der blev tilsat diisopropylethylamin (13 ul, 0,078 mmol) og derpå picrylazid (19,9 mg, 0,078 mmol). Reaktionsblandingen blev holdt under omrøring i 5 timer, idet man holdt temperaturen imellem 0 "C og -10 °C, på 20 hvilket tidspunkt IR-analyse viste en kraftig dannelse af diazo-forbindelser. Efter at være blevet holdt ved køleskabstemperatur i ca. 16 timer blev reaktionsblandingen inddampet til tørhed til dannelse af en blanding af pivaloyloxymethyl-7- ( 1-acetoxyethyl )-2-diazo-3-methyl-l-be-25 ta-oxoceph-3-em-4-carboxylat [IR (Ci^C^) 2080, 1785, 1750 cm-1] og ikke-omsat pivaloyloxymethyl-7-alpha-l- (acetoxyethyl)-3-methyl-l-alpha-oxoceph-3-em-4-carboxy-lat. Disse forbindelser adskilles ved kromatografi, idet der anvendes metoderne fra eksemplerne 54 og 56.

30

Metode B

Pivaloyloxymethyl-7-alpha-(1-åcetoxymethyl)-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat (der var frasepareret fra 35 det tilsvarende alpha-oxid) omdannes til 2-diazo-deriva-tet ved den umiddelbart ovenfor beskrevne metode A, men fortrinsvis ved den metode, der ligeledes anvender ka- DK 169892 B1 128 lium-tert.-butoxid, således som det er beskrevet 1 forudgående præparationer 3, 6, 9 etc. Sidstnævnte metode til-lempes ligeledes under anvendelse af de noget kraftigere reaktionsbetingelser beskrevet i præparation 24 til om-5 dannelse af pivaloyloxymethyl-7-alpha-(1-acetoxymethyl)- 3-methyl-l-alpha-oxoceph-3-em-4-carboxylat til pivaloyl-oxymethyl-7-(1-acetoxymethyl)-2-diazo-3-methyl-l-alpha-oxoceph-3-em-4-carboxylat.

10 Metoderne A og B i det foreliggende eksempel anvendes, som det passer sig bedst, til omdannelse af de øvrige 1-oxoceph-3-em-4-carboxylater fra præparation 57 til de tilsvarende 2-diazo-derivater: pivaloyloxymethyl-7-alpha-(1-acetoxymethyl)-3-methyl-1-beta-oxoceph-3-em-4-carboxy-15 lat, 7-alpha-(1-acetoxymethyl)-3-methyl-1-alpha-oxoceph- 3-em-4-carboxylat, pivaloyloxymethyl-7-alpha-(2-acetoxy- 2-propyl)-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat og pivaloyloxymethyl-7-alpha-(2-acetoxy-2-propyl)-3-methyl- 1-alpha-oxoceph-3-em-4-carboxylat.

20 PRÆPARATION 59

Pivaloyloxymethyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyl-oxy)ethyl]penicillanat 25 -

Pivaloyloxymethyl-6-alpha-(1-hydroxyethyl)penicillanat (3,2 g) blev opløst i 100 ml methylenchlorid og kølet til 0 eC. Der blev tilsat diisopropylamin (2,19 ml), 4-dime-30 thylaminopyridin (1,28 g) samt 2,5 g p-nitrobenzyloxycar-bonylchlorid (p-nitrocarbobenzoxychlorid, 2,72 g). Reaktionsblandingen blev holdt under omrøring i 16 timer ved ? stuetemperatur. Reaktionsblandingen blev vasket med vand, tørret over vandfrit natriumsulfat, filtreret og inddam- * 35 pet til dannelse af et råprodukt. Dette råprodukt blev kromatograferet på silicagel med 15:1 chloroform:ethyl-acetat som elueringsmiddel til dannelse af oprenset pi- DK 169892 B1 129 valoyloxymethyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)-ethyl]penicillanat [5 g; Rf 0,75 (4:1 chloroform:ethyl-acetat; Rf 0,7 (ether); NMR (pulse)/CDClg/delta inkluderer 1,0 (s, 9H), 1,5 (d, 3H, J = 7), 4,2 ppm (s, IH)].

5

Under anvendelse af den samme fremgangsmåde omdannes den anden alkohol fra præparation 53 til pivaloyloxymethyl-6-alpha-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxymethyl)penicillanat.

10 Dersom man anvender en ækvivalent mængde benzyloxycarbo- nylchlorid i stedet for p-nitrobenzyloxycarbonylchlorid, opnås pivaloyloxymethyl-6-alpha-(1-benzyloxycarbonyloxy-ethyl)penicillanat.

15 PRÆPARATION 60

Pivaloyloxymethyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy )ethyl]-1-beta-oxopenicillanat 20

Under anvendelse af proceduren fra præparation 2 blev pi-valoyloxymethyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyl)ethyl]penicillanat (5 g) bragt til omsætning med m-chlorperbenzoesyre (2,2 g) i 200 ml methylenchlorid under anvendelse af en 25 reaktionstid på 16 timer ved 0 °C. Elueringsmidlet ved kromatografi var 4:1 chloroform:ethylacetat. Udbyttet af pivaloyloxymethyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy )ethyl] -1-beta-oxopenicillanat var 2,55 g; R^ 0,6 (4:1 chloroform:ethylacetat).

30

Under anvendelse af den samme metode omdannes de øvrige forbindelser fra forudgående præparation til pivaloyloxy-methyl-6-alpha-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxymethyl)-l-be-ta-oxopenicillanat og 6-alpha-(l-benzyloxycarbonyloxy-35 ethyl)-1-beta-oxopenicillanat.

PRÆPARATION 61 130 DK 169892 B1

Pivaloyloxymethyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyl- * oxy)ethyl]-3-methylceph-3-em-4-carboxylat 5 -

Pivaloyloxymethyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyl-oxy)ethyl]-l-beta-oxopenicillanat (2,5 g) i 400 ml di-oxan, 22 dråber 80 procentig phosphorsyre og 62 dråber 10 pyridin blev bragt til omsætning analogt med præparation 56. Kromatografi på en silicagelsøjle med 30:1 chloroform rethylacetat som elueringsmiddel og overvågning ved TLC førte til 380 mg af det rene produkt. Fraktioner (558 g), som indeholdt en mindre forurenende bestanddel, blev 15 kromatograferet på en tyktlagsplade til dannelse af yderligere 190 mg af det rensede produkt. Det samlede udbytte af pivaloyloxymethyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbo-nyloxy)ethyl]-3-methylceph-3-em-4-carboxylat var 570 mg, NMR (pulseJ/CDClg/delta inkluderer 1,5 (d, 3H, J = 7), 20 2,0 (s, 3H), 4,8 ppm (d, IH, J « 2).

Under anvendelse af den samme metode omdannes de øvrige forbindelser fra den forudgående præparation til piva-loyloxymethyl-7-alpha-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxyme-25 thyl)-3-methylceph-3-em-4-carboxylat og pivaloyloxyme- thyl-7-alpha-(1-benzyloxycarbonyloxyethyl)-3-methylceph- 3-em-4-carboxylat.

PRÆPARATION 62 30

Pivaloyloxymethyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyl-oxy)ethyl]-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat o u 35 Pivaloyloxymethyl-7-alpha-[l-(p-nitrobenzyloxycarbonyl- oxy)ethyl]-ceph-3-em-4-carboxylat (570 mg) blev opløst i 75 ml methylenchlorid. Der blev tilsat myresyre (0,30 ml) DK 169892 B1 131 og 30 procentig hydrogenperoxid (0,2 ml), og blandingen blev holdt under omrøring 1 2 dage ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen blev ekstraheret med vand, tørret over vandfrit natriumsulfat, filtreret og Inddampet under 5 vakuum. Inddampningsresten blev kromatograferet på sili-cagel under anvendelse af 1:3 chloroform:ethylacetat som eluerlngsmlddel og overvågning ved TLC. Udbyttet af piva-loyloxymethyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)-ethyl]-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat var 224 10 mg, 0,1 (4:1 chloroform:ethylacetat) IR (CI^C^) 1775 cm-1.

Under anvendelse af den samme metode omdannes de øvrige forbindelser fra den forudgående præparation til piva-15 loyloxymethyl-7-alpha-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxyme- thyl)-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat og piva-loyloxymethyl-7-alpha-(1-benzyloxycarbonyloxyethyl)-3-me-thyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat.

20 PRÆPARATION 63

Pivaloyloxymethyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy )ethyl] -2-diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-car-boxylat 25 -

Under anvendelse af metoden fra præparation 58 blev piva-loyloxymethyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)-ethyl]-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat (49,8 30 mg) bragt til omsætning med picrylazid (77,1 mg) i nærvær af diisopropylethylamin (28,8 al) i 15 ml methylenchlorid igennem 16 timer ved -10 °C til 0 °C. I løbet af de næste 2 dage blev tilsat yderligere reaktionskomponenter (azid, 35 mg, og amin, 10,8 al). Efter en samlet reaktionstid på 35 2,3 dage blev produktet isoleret i overensstemmelse med ovennævnte eksempel, og råproduktet blev kromatograferet på silicagel under anvendelse af 10:1 chloroform:ethyl- DK 169892 B1 132 acetat som elueringsmlddel til dannelse af renset piva-loyloxyraethyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)-ethyl]-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat ? [120 mg: IR (CH2C12) 2080 cm"1].

5

Under anvendelse af den samme metode omdannes de øvrige forbindelser fra forudgående præparation til pivaloyloxy-methyl-7-alpha-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxymethyl)-2-di-azo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat og piva-10 loyloxymethy1-7-alpha-(1-benzyloxycarbonyloxymethyl) -2- diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat.

PRÆPARATION 64 15 Benzyl-6,6-dibrompenicillanat

Dlbrompenlcillansyre (50 g, 0,30 mol) blev opløst 1 150 ml dimethylformamid. Opløsningen blev kølet til 0-5 “C, 20 der blev tilsat triethylamin (21,3 ml, 0,30 mol) og derpå benzylbromid (18,2 ml, 0,30 mol), og reaktionsblandingen blev holdt under omrøring i 16 timer ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen blev udslukket i is og vand og ekstraheret med fire portioner ethylacetat. De samlede orga-25 niske lag blev vasket i rækkefølge med 0,1N saltsyre, vand og saltvand, tørret over vandfrit natriumsulfat og inddampet til tørhed. Omkrystallisation ud fra ether førte til benzyl-6,6-dibrompenicillanat (61 g).

30 PRÆPARATION 65

Benzyl-6-alpha-brom-6-beta-(1-hydroxyethyl)penicillansyre * 35 Under anvendelse af den i præparation 52 beskrevne metode blev benzyl-6,6-dibrompenicillansyre (30 g) omdannet til benzyl-6-alpha-brom-6-beta-(1-hydroxyethyl)penicillansyre 133 DK 169892 B1 [31,4 g; olie; NMR (pulse)/CDCl^/delta Inkluderer 5,2 (s, 2H), 4,5 (s, IH)].

Under anvendelse af den samme metode, men Idet der an-5 vendtes en ækvivalent proplonaldehyd 1 stedet for acetal-dehyd, fremstilles benzyl-6-alpha-brom-6-beta-(1-hydroxy- 1-propyl)penicillansyre.

PRÆPARATION 66 10

Benzyl-6-alpha-(1-hydroxyethyl)penicillanat

Under anvendelse af proceduren i præparation 53 blev ben-15 zyl-6-alpha-brom-6-beta~(1-hydroxyethyl)penicillanat (31,4 g) hydrogeneret over 15,7 g 5 procentig Pd/CaCO^ i 150 ml af en blanding 2;1 tetrahydrofuran:vand, idet man var omhyggelig med at standse hydrogeneringen ved det break-point, hvor der stort set var blevet brugt et mo-20 lært ækvivalent hydrogen. Råproduktet (19,6 g), der blev isoleret i form af en olie, blev kromatograferet over 400 mg silicagel med 3:2 chloroform:ethylacetat som elue-ringsmiddel. Efter et første eluat på 500 ml blev opsamlet fraktioner på 12 ml. Fraktionerne 41-70 blev forenet 25 og inddampet til dannelse af renset benzyl-6-alpha-(l-hy-droxyethyl)-penicillanat [7,72 g; NMR (pulse)/CDCl3/delta 1,4 (s, 3H), 1,6 (s, 3H), 4,5 (s, IH), 5,1 (s, IH), 5,8 (s, IH), 7,3 ppm (s, 5H)].

30 Under anvendelse af den samme metode omdannes den anden brom-ester fra den foregående præparation til benzyl-6-alpha-(1-hydroxy-1-propyl)penicillanat.

35 PRÆPARATION 67 134 DK 169892 B1

Benzyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-pe- " nicillanat 5 -

Benzyl-6-alpha-(l-hydroxyethyl)penicillanat (7,7 g, 0,023 mol) blev opløst 1 125 ml methylenchlorid, og opløsningen blev kølet til 0 °C. Derpå blev tilsat i rækkefølge di-10 isopropylethylamin (4,8 ral, 0,028 mol), dimethylaminopy-ridln (2,8 g, 0,023 mol) samt p-nitrobenzylchlorformiat (6,0 g, 0,028 mol), og reaktionsblandingen blev holdt under omrøring ved stuetemperatur i 16 timer. Reaktions-blandingen blev vasket i rækkefølge med 100 ml IN saltsy-15 re, 100 ml vand, 100 ml mættet natriumhydrogencarbonat, 100 ml vand og 100 ml saltvand, den blev tørret over vandfrit natriumsulfat, filtreret og inddampet under vakuum til dannelse af et råprodukt. Kromatografi på sili-cagel under anvendelse af 15:1 chloroform:ethylacetat 20 førte til renset benzyl-6-alpha-[l-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy) ethyl]penicillanat [11,1 g; olie; NMR (pulse )/CDCl3/delta inkluderer 4,5 (s, IH), 5,2 ppm (s, 2H)].

Under anvendelse af den samme metode omdannes den anden 25 alkohol fra den forudgående præparation til benzyl-6-al-pha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)-1-propyl]penicillanat.

PRÆPARATION 68 30

Benzyl-6-alpha[l-(1-p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-1-beta-oxopenicillanat 35 Benzyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-pe nicillanat (10,95 g, 0,022 mol) blev bragt til omsætning med m-chlorperbenzoesyre i 400 ml methylenchlorid under 135 DK 169892 B1 anvendelse af den procedure, der er beskrevet 1 præparation 2, og idet der anvendtes en begyndende reaktionstemperatur på -78 °C efterfulgt af 16 timer ved 0 eC. Udbyttet af råprodukt var 11,6 g. Silicagel-kromatografering 5 under anvendelse af 10:1 chloroform:ethylacetat som elue-ringsmiddel førte til renset benzyl-6-alpha-[l-(p-nitro-benzyloxyarbonyloxy)ethyl]-1-beta-oxopenicillanat [4,1 g, IR (CH2C12) 1770 c,"1].

10 Under anvendelse af den samme metode blev den anden forbindelse i forudgående præparation omdannet til benzyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)-1-propyl]-1-beta-oxopenicillanat.

15 PRÆPARATION 69

Benzyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-3-methylceph-3-em-4-carboxylat 20

Ved at følge proceduren i præparation 56, blev benzyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-1-beta-oxopenicillanat omdannet til benzyl-7-alpha-l-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy )ethyl]-3-methylceph-3-em-4-carboxy- 25 lat, der blev oprenset ved silicagel-kromatografi under anvendelse af 30:1 chloroform:ethylcetat som eluerings-middel [1,4 g, NMR (pulse/CDCl^/delta inkluderer 2,0 (s, 3H) og 4,5 ppm (d, IH, J 2Hz)].

30 Under anvendelse af den samme metode omdannes den anden forbindelse i forudgående præparation til benzyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)-1-propyl]-3-methylceph- 3-em-4-carboxylat.

35 136 DK 169892 B1 PRÆPARATION 70

Benzyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat δ -

Benzyl-7-alpha-[1—(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl] -3 -methylceph-3-em-4-carboxylat (1,40 g, 2,82 mmol) blev opløst i 150 ml methylenchlorid. Der blev tilsat myresyre 10 (0,42 ml) og 30 procentig hydrogenperoxid (0,42 ml, 3,1 mmol), og reaktlonsblandlngen blev holdt under omrøring 1 2 dage. Reaktionsblandingen blev ekstraheret med vand, tørret over vandfrit natriumsulfat, filtreret og inddampet til dannelse af en blanding af alpha- og beta-oxider-15 ne. Blandingen blev kromatograferet på silicagel under anvendelse af 1:3 chloroform:ethylacetat som eluerings-middel. Det mindre polære alpha-oxid eluerede først [R^ 0,5 (1:3 chloroform:ethylactat)] efterfulgt af det mere polære beta-oxid (Rf 0,3). Yderligere beta-oxid blev iso-20 leret ved tyktlagskromatografering af de midterste fraktioner, som indeholdt begge de isomere. Det samlede udbytte af renset benzyl-7-alpha-[l-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy )ethyl] -3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat var 509 mg [IR (Ci^Cl^ 1780 cm-1].

25

Under anvendelse af den samme procedure omdannes den anden forbindelse i den forudgående præparation til benzyl- 7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyl-l-oxy)propyl]-3-me-thyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat.

30 35 PRÆPARATION 71 137 DK 169892 B1

Benzyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat 5 -

Under anvendelse af proceduren 1 præparation 14 omdannedes benzyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)- ethyl]-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat (509 mg) 10 til benzyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)- ethyl]-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat, der blev oprenset ved kromatografi på silicagel under anvendelse af 10:1 chloroform:ethylacetat som elueringsmid-del. Udbytte: 318 mg; Rf 0,4 (10:1 chloroform:ethylace-15 tat); IR (CH2C12) 1780, 2060 cm"1.

Under anvendelse af den samme procedure blev den anden forbindelse i den forudgående præparation omdannet til benzyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)-1-pro-20 Pyl]-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat.

PRÆPARATION 72

Benzyl-6-alpha-(1-acetoxyethylJpenicillanat 25 -

Under anvendelse af proceduren i præparation 54 blev ben-zyl-6-alpha-(l-hydroxyethyl)penicillanat (4 g) acetyle-ret, idet der anvendtes en reaktionstid på 7 timer, til 30 dannelse af uden kromatografi benzyl-6-alpha-(l-acetoxy- methyl)penicillanat [3,72 g; NMR(pulse)/CDCl3/delta inkluderer 5,2 (s, 2H) og 7,4 ppm (s, 5H)].

Under anvendelse af den samme metode omdannes den anden 35 forbindelse af den forudgående præparation til benzyl-6- alpha-(1-acetoxy-l-propyl)penicillanat.

PRÆPARATION 73 138 DK 169892 B1

Benzyl-6-alpha-(1-acetoxyethyl)-l-beta-oxopenicillanat 5

Under anvendelse af den samme procedure som 1 præparation 56 blev benzyl-6-alpha-(1-acetoxyethyl)penlclllanat (3,72 g) oxideret til benzyl-6-alpha-(1-acetoxyethyl)-l-beta-oxopenicillanat [3,7 g? NMR (pulse)/CDClg/delta inklude-10 rer 2,0 ppm (s, 3H)].

Ved den samme procedure omdannes den anden forbindelse af forudgående præparation til benzyl-6-alpha-(1-acetoxy-l-propyl)-1-beta-oxopenicillanat.

15 PRÆPARATION 74

Benzyl-7-alpha-(1-acetoxyethyl)-3-methylceph-3-em-4-carboxylat 20 -

Under anvendelsen af proceduren fra præparation 56 blev benzyl-6-alpha-(1-acetoxyethyl)-1-beta-oxopenicillanat (3,7 g) omsat med pyridin (2,5 ml) og phosphorsyre (42 25 dråber, 0,84 ml) i 500 ml dioxan, og råproduktet blev søjlekromatograferet over silicagel med 10:1 chloroform :ethylacetat som elueringsmiddel til dannelse af renset benzyl-7-alpha-(1-acetoxyethyl)-3-methylceph-3-em-4-carboxylat [922 mg; NMR(pulse)/CDCl^/delta inkluderer 1,4 30 (s, 3H, J = 6), 1,9 (s, 3H), 4,5 ppm (d, IH, J - 1)).

Under anvendelse af den samme metode omdannes den anden forbindelse fra forudgående præparation til benzyl-7-al-pha-(1-acetoxy-l-propyl)-3-methylceph-3-em-4-carboxylat.

35 PRÆPARATION 75 139 DK 169892 B1

Benzyl-7-alpha-(1-acetoxyethyl)-3-methyl-l-beta-oxoceph- 3-em-4-carboxylat 5 -

Under anvendelse af proceduren fra præparation 55 oxideres benzyl-7-alpha-(1-acetoxyethyl)-3-methylceph-3-em-4-carboxylat (922 mg) med m-chlorperbenzoesyre 1 methylen-10 chlorid igennem 20 timer ved -78 °C. Søjlekromatografi på silicagel førte til benzyl-7-alpha-(1-acetoxyethyl)-3-me-thyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat [331 mg; NMR-(pulse)/CDCl3/delta inkluderer 2,0 (br, s, 6H), 5,2 ppm (s, 2H)] samt, separat det tilsvarende alpha-oxid (265 15 mg).

Under anvendelse af den samme procedure omdannes den anden forbindelse i den forudgående præparation til benzyl- 7-alpha-(1-acetoxy-1-propyl)-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-20 em-4-carboxylat.

PRÆPARATION 76

Benzyl-7-alpha-(1-acetoxyethyl)-2-diazo-3-methyl-l-beta-25 oxoceph-3-em-4-carboxylat

Under anvendelse af proceduren beskrevet i præparation 3 omdannedes benzyl-7-alpha-(1-acetoxyethyl)-3-methyl-1-be-30 ta-oxoceph-3-em-4-carboxylat (331 mg) til benzyl-7-alpha- (1-acetoxyethyl)-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat, der blev oprenset ved silicagel-kromatografe-ring med 1:1 methylenchlorid:ethylacetat som eluerings-middel [130 mg; IR (CHClg) 2080 cm"1].

Under anvendelse af den samme metode omdannes den anden forbindelse i forudgående præparation til benzyl-7-alpha- 35 DK 169892 B1 140 (1-acetoxy-l-propyl)-2-diazo-3-methyl-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat.

PRÆPARATION 77 5

Benzyl-7-alpha[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy]-3-methy-len-1-beta-oxocepham-4-carboxylat 10 Benzyl-6-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-1- beta-oxopenicillanat (1,0 g) blev forenet med N-chlorsuc-cinimid (286 mg) 1 200 ml chloroform og holdt under tilbagesvaling i 16 timer. Reaktionsblandingen blev kølet til 0 °C, og der blev tilsat stannichlorid (SnCl^; 0,24 15 ml). Efter 8 timer blev reaktionsblandingen fortyndet med ethylacetat til opløsning af udfældede faste bestanddele, den blev vasket i rækkefølge med mættet natriumhydrogen-carbonat, vand og saltvand, tørret over vandfrit natriumsulfat og inddampet under vakuum. Resten blev kromatogra-20 feret på silicagel med 3:1 chloroform:ethylacetat som elueringsmiddel og overvågning ved TLC. Fraktionerne indeholdende rene produkter blev forenet og inddampet til dannelse af renset benzyl-7-alpha-l-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy )-3-methylen-l-beta-oxocepham-4-carboxylat (0,51 25 g; NMR(pulse)/CDClg/delta inkluderer 1,5 (d, 3H, J * 6), 4,7 (br, s, IH), 5,3 (s, IH), 5,7 ppm (s, IH).

PRÆPARATION 78 30 Benzyl-7-alpha[l-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-3- hydroxy-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat

Benzyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-3- - 35 methylen-l-beta-oxoceph-4-carboxylat (491 mg) blev opløst i 50 ml methylenchlorid, og opløsningen blev kølet til -78 °C. Ozon blev boblet ind i opløsningen i nogle få mi- 141 DK 169892 B1 nutter, indtil en blå farve holdt sig. Blandingen blev gennemblæst med nitrogen i 10 minutter, hvorpå der blev tilsat dimethylsulfid (0,2 ml). Blandingen blev varmet op til over 0 "C og vasket med vand. Vandfasen blev tilbage-5 vasket med methylenchlorid, og de to organiske lag blev forenet, vasket med saltvand, tørret over vandfrit natriumsulfat, filtreret og inddampet til dannelse af ben-zyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-3-hy-droxy-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat.

10 PRÆPARATION 79

Benzyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-3-methoxy-1-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat 15 -

Benzyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-3-hydroxy-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat (300 mg) blev opløst i 25 ml methylenchlorid og nedkølet til 0 °C. Der-20 på blev tilsat dråbe for dråbe diazomethan (5 ækvivalenter) i ether (30 ml), og blandingen blev holdt ved 0 °C i 1 time. Derpå blev tilsat tilstrækkelig eddikesyre til at ødelægge overskud af diazomethan, og blandingen blev vasket med vand, vasket med saltvand, tørret over vandfrit 25 natriumsulfat, filtreret og inddampet under vakuum. Resten blev kromatograferet over silicagel under anvendelse af 10:1 chloroform:ethylacetat som elueringsmiddel og under overvågning af TLC til dannelse af renset benzyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-3-methoxy-l-30 beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat [133 mg; Rf 0,2 (4:1 chloroform:ethylacetat); NMR(pulse)/CDCl^/delta inkluderer 1,4 (d, 3H, J * 6), 3,4 (s, 3H), 4,4 ppm (d, IH, J = 2)].

35 PRÆPARATION 80 142 DK 169892 B1

Benzyl-7-alpha-[l-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-3-methoxy-1-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat 5 -

Under anvendelse af proceduren i præparation 14 omdannedes benzyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)- ethyl]-3-methoxy-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat (134 10 mg, 0,24 mmol) til benzyl-7-alpha-[l-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy) ethyl ]-2-diazo-3-methoxy-l-beta-oxoceph-3-em- 4-carboxylat, der blev oprenset ved kromatografi på sili-cagel under anvendelse af 30:1 chloroform:ethylacetat som elueringsmiddel. Fraktioner indeholdende rene produkter 15 blev forenet og inddampet under vakuum til dannelse af 28 mg renset produkt [Rf 0,5 (ethylacetat), IR (CI^C^) 1800, 2090 cm-1]. Gentagen kromatografering af fraktioner, der var forurenet med mere polære urenheder (19 mg), førte til yderligere 3 mg af det rensede produkt.

20 PRÆPARATION 81

Benzyl-7-alpha-[l-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-3-mesyloxy-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat 25 -

Benzyl-7-alpha-[l-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-3-hydroxy-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat (439 mg) blev opløst i 60 ml methylenchlorid, og opløsningen blev kølet 30 til 0 °C. Der blev tilsat diisopropylethylamin (0,25 ml) og mesylchlorid (0,15 ml), og reaktionsblandingen blev holdt under omrøring ved 0 eC i 8 timer, derpå blev den vasket med mættet natriumhydrogencarbonat, vasket med saltvand og inddampet til tørhed (0,56 g). Råproduktet 35 blev kromatograferet på silicagel med 10:1 chloroform: ethylacetat som elueringsmiddel til dannelse af renset benzyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)- DK 169892 B1 143 ethyl]-3-mesyloxy-l-beta-oxoceph-3-era-4-carboxylat [O,27 g; 0,42 (1:1 chloroform:ethylacetat); NMR(pulse)/- CDC13/delta Inkluderer 3,1 ppm (s, 3H)].

5 PRÆPARATION 82

Benzyl-7-alpha-[l-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-2-diazo-3-mesyloxy-1-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat 10

Under anvendelse af metoden 1 præparation 80 omdannes benzyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-3-mesyloxy-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat til benzyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-2-diazo-3-15 mesyloxy-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat.

PRÆPARATION 83

Benzyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-3-20 [2-(p-nitrobenzyloxycarbonylamino)ethylthio]-1-beta-oxo- ceph-3-em-4-carboxy1at 2-(p-nitrobenzyloxycarbonylamino)ethylmercaptan (23,1 mg, 25 0,05 mmol) og triethylbenzylammoniumchlorid (11 mg, 0,04 mol) blev forenet med en blanding af 0,1N natriumhydroxid (0,5 ml), vand (2 ml) og methylenchlorid (2,5 ml). Der blev tilsat benzyl-7-alpha-[l~(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy )ethyl]-3-mesyloxy-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat 30 (25 mg, 0,04 mmol), og reaktionsblandingen blev holdt un der omrøring ved stuetemperatur i 16 timer. Lagene blev adskilt, og det vandige lag blev vasket med frisk methylenchlorid. De organiske lag blev forenet, tilbagevasket med vand, tørret over vandfrit natriumsulfat, filtreret 35 og inddampet til dannelse af produktet (41 mg). Kromato grafi på silicagel (10:1 chloroform:ethylacetat som elue-ringsmiddel) førte til renset benzyl-7-alpha-[l-(p-nitro- DK 169892 B1 144 benzyloxycarbonyloxy) ethyl] -3- [2- (p-nltrobenzyloxycarbo- * nylamino)ethylthio]-l-oxoceph-3-em-4-carboxylat [16 mg; NMR(pulse)/CDClg/delta Inkluderer 2,9 ppm (m, 2H)].

5 Under anvendelse af den samme metode, og Idet der anvendes den passende alkohol/mercaptan 1 stedet for 2-(p-ni-trobenzyloxycarbonylami.no) -ethylmercaptan, fremstilles følgende forbindelser: 10 Benzyl-7-alpha-[l-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-3- ethoxy-1-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat; benzyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-3-isopropoxy-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat; 15 benzyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-3-(2-benzyloxycarbonylaminoethoxy)-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat; 20 benzyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-3- propylthio-1-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat; og benzyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-3-(2-acetamldoethylthio)-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat.

25 PRÆPARATION 84

Benzyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-3-ethylthio-1-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat 30 -

Mesyloxyoxid fra præparation 81 (25 mg) blev ved O °C sat til en omrørt blanding af 5,5 μΐ ethylmercaptan i en tofaset blanding af 3 ml methylenchlorid, 1 ml O, IN na- * 35 triumhydroxid og 2,5 ml vand, og det blev holdt under omrøring i 8 timer ved stuetemperatur. Derpå blev tilsat yderligere 5,5 dl ethylmercaptan, og blandingen blev op- DK 169892 B1 145 bevaret ved -78 °C i 16 timer. Derpå blev tilsat 5,5 ul ethylmercaptan, 0,5 ml natriumhydroxid og 11 mg benzyl-triethylammoniumchlorid som katalysator. Reaktionen var tilendebragt inden for 1 time ved stuetemperatur. Lagene 5 blev separeret, og det vandige lag blev vasket med tre portioner methylenchlorid. Methylenchloridlagene blev forenet og tilbagevasket med vand og derpå med saltvand, tørret over vandfrit natriumsulfat, filtreret og inddampet til tørhed. Resten blev kromatograferet på silicagel 10 under anvendelse af 10:1 chloroformrethylacetat som elue-ringsmiddel og overvågning ved TLC. Udbytte 10,6 mg af det i overskriften nævnte reaktionsprodukt, R^ 0,5 (ethylacetat).

15 PRÆPARATION 85

Benzyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-3-[2-(benzyloxycarbonylamino)ethoxy]-2-diazo-l-beta-oxo-ceph-3-em-4-carboxylat 2o -

Under anvendelse af den i præparation 80 anviste metode omdannes benzyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)-ethyl-3-[2-(p-nitrobenzyloxycarbonylamino)ethoxy]-1-beta-25 oxoceph-3-em-4-carboxylat til benzyl-7-alpha-[l-(p-nitro- benzyloxycarbonyloxy)ethyl]-3-[2-(benzyloxycarbonylamino) ethoxy] -2-diazo-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat.

Under anvendelse af den samme metode omdannes de øvrige 30 oxy-forbindelser i præparation 83 til: benzyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-2-diazo-3-ethoxy-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat; og 35 benzyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-2- diazo-3-isopropoxy-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat.

PRÆPARATION 86 ' 146 DK 169892 B1

Benzyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-3-ethylthio-2-diazo-1-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat 5 -

Den 1 overskriften til præparation 84 beskrevne ethyl-thloforblndelse (37,5 mg) blev holdt under omrøring 1 10 ml vand og 10 ml methylenchlorld og kølet til 5 °C. Der 10 blev tilsat makrocyclisk ether-18-crown-6 (17,2 mg), benzyltriethylammoniumchlorid (15,2 mg), kaliumhydroxid (3,7 mg) og picrylazid (33,7 mg). Reaktionsblandingen blev holdt under omrøring i 8 timer ved 5 eC. Methylen-chloridlaget blev vasket med isvand og derpå med koldt 15 saltvand, tørret over vandfrit natriumsulfat, filtreret og inddampet til tørhed. Inddampningsresten blev kromato-graferet på silicagel med 4:1 chloroform:ethylacetat som elueringsmiddel. Udbyttet af det i overskriften nævnte reaktionsprodukt, der viste et stærkt diazo-bånd ved IR 20 (2080 cm"1), var 10 mg.

Under anvendelse af den samme metode omdannes de forskellige thio-forbindelser i præparation 83 til: 25 Benzyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-3- [2- (p-nitrobenzyloxycarbonylamino)ethylthio]-2-diazo-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat; benzyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-2-30 diazo-3-propylthio-l-beta-oxoceph-3-em-4-carboxylat; og benzyl-7-alpha-[1-(p-nitrobenzyloxycarbonyloxy)ethyl]-3-(2-acetamidoethylthio)-2-diazo-l-beta-oxoceph-3-em-4-car-boxylat. s 35 PRÆPARATION 87 147 DK 169892 B1

Ethylformamidat, hydrogenchlorid 5

En blanding af formamid (4,5 g, 4,0 ml, 0,10 mol) og ethanol (4,6 g, 5,8 ml, 0,10 mol) blev tilsat dråbe for dråbe til en opløsning af benzoylchlorid (14,1 g, 11,7 ml, 0,10 mol) i 70 ml ether ved 10 °C. Under omrøring 10 blev reaktionsblandingen til en opslæmning. Efter omrøring i 30 minutter blev reaktionsproduktet indvundet ved filtrering og tørret over P2°5* Udbyttet af ethylformamid, hydrogenchlorid, som blev opnået i form af et fast, hvidt stof, var 2,46 g.

15 20 25 30 35

Claims

148 DK 169892 B1 * ·>

1. Fremgangsmåde til fremstilling af carbapenam-3-carbo-5 xylsyre- eller carbapen-2-em-3-carboxylsyreforbindelser med formlerne: 10 Λ1 X,-4 (i) ^N-\ 3 O COOR . 15 eller . K2 V 4

20 R1--’ -K-^ (II) cr cooR·5 25 hvori R betyder hydrogen, mono- eller disubstitueret acetami- do, 5-methyl-3-phenylisoxazol-4-carboxamido eller en 5 5 30 gruppe R -0-C-, hvori R betyder hydrogen, acetyl, ben- *6/ X R12 zyloxycarbonyloxy eller p-nitrobenzyloxycarbonyl, R° be- 12 ^ tyder hydrogen eller (C.^-Cg) alkyl, og R betyder hydrogen eller methyl, s 35 2 149 DK 169892 B1 R betyder hydrogen eller methoxy med det forbehold, at 2 1 når R er methoxy, er R 2-phenoxyacetamido, A og B enten tilsammen betyder oxygen eller hver for sig 5 betyder henholdsvis hydrogen og hydroxy eller acetoxy, 3 R betyder hydrogen eller en konventionel carboxylbeskyt-tende gruppe, og 4 10. betyder methyl, acetoxymethyl, methansulfonyloxy, OR eller SR, hvori R betyder (C^-Cgjalkyl, 2-benzyloxycarbo-nylaminoethyl, 2-(p-nitrobenzyloxycarbonylamino)ethyl, 2-acetamidoethyl, 2-aminoethyl eller 2-amidinoethyl, med det forbehold, at når R^ betyder andet end methyl, har 15 forbindelsen formlen (II), eller farmaceutisk acceptable kationsalte deraf, når forbindelsen indeholder en carboxylsyregruppe, eller farmaceutisk acceptable syreadditionssalte deraf, når forbin-20 delsen indeholder en amino- eller amidinogruppe, kendetegnet ved, at man ved bestråling med lys i et reaktionsinert opløsningsmiddel og i temperaturområdet fra -100 til 35 °C omlejrer et 2-diazo-l-oxoceph-3-em-4-carboxylat med formlen: 25 2 0 R2 f • *\l ^Ξ-γΝ2 (III) 30 0Γ R COQR8 til et l-oxo-carbapen-2-em-3-carboxylat med formlen: 35 150 DK 169892 B1 p2 O 4~yV oi_H_iooR8 o i hvilke formler 7 10. betyder hydrogen, mono- eller disubstitueret acetami-do, hvori carboxylgrupper og aminogrupper er konventionelt beskyttede, 5-methyl-3-phenylisoxazol-4-carboxamido 5 5 5 12 eller en gruppe R -0-C-, hvori R , R og R har den tid-15 ligere anførte betydning; 2 R betyder hydrogen eller methoxy, med det forbehold, at 2 7 når R betyder methoxy, er R phenoxyacetamido; 20 O R betyder en konventionel carboxylbeskyttende gruppe; og 9 10 R betyder methyl, acetoxymethyl, methansulfonyloxy, OR eller SR10, hvori R10 betyder (C^-Cg)alkyl, 2-acetamido- 25 ethyl, 2-benzyloxycarbonylaminoethyl eller 2-(p-nitroben- zyloxycarbonylamino)ethyl, og derefter, om ønsket, gennemfører en eller flere af følgende reaktioner; 30 (a) reduktion med et hydrid af en dannet forbindelse med formlen (IV) til en forbindelse med formlen: * % 35 151 DK 169892 B1 r<L_X>9 i J-N-^ 8 (v) cr coor 2 7 8 9 5 hvori R , R , R og R har den tidligere anførte be tydning, og, om ønsket, acetylering af forbindelsen (V) til en forbindelse med formlen: „2 H OCOCH- 10 4_>ο 8 o COOR° 15 (b) reduktion med aktiveret zink af en dannet forbindelse g med formlen (IV), hvori R betyder methyl, til en forbindelse med formlen: 20 2 0 R?J ,-^VH3 I (vid -- N g cr coor 25 og, om ønsket, reduktion med et hydrid af forbindelsen med formlen (VII) til dannelse af en alkohol med formlen: 30 35 152 DK 169892 B1 * R2 H OH R7J >VCH3 5 (VIII) J-·Ν-2.1 O COOR·1· hvilken alkohol (VIII), om ønsket, acetyleres til en 10 forbindelse med formlen: H OCOCH R V r\-(IX) 15 J N \ 2.1 O COOR 2 7 8 hvori R , R og R har den tidligere anførte betyd-20 ning, og betyder hydrogen eller en konventionel carboxylbeskyttende gruppe forskellig fra en der fjernes ved zinkreduktion; (c) omdannelse af en dannet forbindelse indeholdende en 25 konventionel hydrogenolyserbar carboxylbeskyttende gruppe til en carboxylsyre; (d) omdannelse af en dannet forbindelse indeholdende en ved mild zinkbehandling reducerbar carboxylbeskytten- 30 de gruppe til en carboxylsyre; (e) omdannelse af en dannet forbindelse indeholdende en konventionel hydrogenolyserbar amino- eller hydroxyl- * beskyttende gruppe til en amin eller en alkohol; \ 35 (f) omdannelse af en dannet aminogruppe til en amidino-gruppe; DK 169892 B1 153 (g) omdannelse af en dannet syreforbindelse til en fysiologisk hydrolyserbar ester; og/eller (h) omdannelse af en dannet forbindelse indeholdende en 5 amino- eller amidinogruppe til et farmaceutisk accep tabelt syreadditionssalt deraf; eller (i) omdannelse af en dannet forbindelse indeholdende en carboxylsyregruppe til et farmaceutisk acceptabelt 10 kationsalt deraf.

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet 7 ved, at R betyder mono- eller disubstitueret acetamido valgt blandt: 15 2-phenoxyacetamido, D-2-(4-ethyl-2,3-dioxopiperazin-l-carboxamido)-2-phenyl-acetamido, D-2-benzyloxycarbonylamino-2-phenylacetamido, eller hen-20 holdsvis benzhydryl-, benzyl- eller 2-naphthylmethyleste-ren af 2-carboxy-2-phenylacetamido.

3. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet o ved, at R kan fjernes selektivt ved hydrogenolyse. 25

4. Fremgangsmåde ifølge krav 3, kendetegnet 8 ved, at R er benzyl, benzhydryl eller 2-naphthylmethyl.

5. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet Q 30 ved, at R kan fjernes selektivt ved mild zinkreduktion.

6. Fremgangsmåde ifølge krav 5, kendetegnet Q ved, at R er 2,2,2-trichlorethyl.

7. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet 8 ved, at R kan hydrolyseres selektivt under fysiologiske betingelser. 154 DK 169892 B1

8. Fremgangsmåde ifølge krav 7, kendetegnet 8 " ved, at R er pivaloyloxymethyl, acetoxymethyl, 1,3-dihy- dro-3-oxobenzo[c]furan-l-yl eller 1-ethoxycarbonyloxy- * ethyl. 5

9. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet 7 5 5 6 12 ved, at R er en gruppe R -0-C-, hvori R , R og R har 6^ ^ 12 den i krav 1 R° R-1 10 angivne betydning. 15 20 25 30 m Λ T 35