DK168216B1 - Substituerede 1,3,4,9-tetrahydropyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyrer, deres fremstilling samt farmaceutisk præparat indeholdende dem - Google Patents

Description

i DK 168216 B1

Den foreliggende opfindelse angår hidtil ukendte 1.3.4.9- tetrahydropyrano[3,4-b]-indol-derivater, en fremgangsmåde til deres fremstilling samt farmaceutiske præparater indeholdende disse derivater.

5 Til trods for de fremskridt, der er gjort inden for de sidste 40 år med hensyn til udviklingen af midler til behandling af smertevoldende og inflammatoriske tilstande, findes der stadig et behov for effektive midler uden de bivirkninger, der er forbundet med de terapeutiske midler, 10 der for øjeblikket anvendes hertil.

Opfindelsen angår især tricycliske eddikesyre-derivater, hvor disses tricycliske del er karakteristisk ved, at den har en indol-del annelleret til en pyranoring. Forbindelserne ifølge opfindelsen er især karakteristiske ved, at 15 de er derivater af følgende tricycliske eddikesyre-system 5 * :0oD'.

2° κ9|ί 8 I y 11

H CH2-C02H

1.3.4.9- tetrahydropyrano [3,4-b] indol-l-eddikesyre, hvor 25 carbonatomerne i 1- og 4-stillingen og eventuelt i 5-, 6-, 7- og 8-stillingen er yderligere substituerede.

Indol-derivaterne ifølge opfindelsen, der er defineret nedenfor, har vist sig at have nyttige farmakodynamiske egenskaber uden at fremkalde uønskede bivirkninger. Bemærkel-30 sesværdige sider ved denne virkning er anti-inflammatorisk og analgetisk aktivetet.

I US patentskrift nr. 3.939.178 omtales 1,3,4,9-te-trahydropyrano [ 3,4-b] indoler og 1,3,4,9-tetrahydrothiopyra-no[3,4-b]indoler med analgetisk og anti-inflammatorisk ak-’ 35 tivitet, men uden substituenterne i forbindelserne ifølge opfindelsen. US patentskrifterne nr. 3.974.179 og nr.

2 DK 168216 B1 3.843.681 omhandler beslægtede forbindelser, og specielt i US patentskrift nr. 3.974.179 er der tale om forbindelser med samme virkninger som forbindelserne ifølge opfindelsen, men med en 4-alkyl-substituent. Struktur-aktiviteten af 5 forbindelserne ifølge opfindelsen er omtalt i enkeltheder i J. Med. Chem. 31, 2211-2217 (1988), jf. især side 2212, højre spalte, til side 2214, venstre spalte f.o. Det fremgår heraf, at forbindelser ifølge opfindelsen, hvori 4-substitu-enten er allyl eller benzyl, har en særlig kraftig analgetisk 10 virkning, som ikke udvises af de nært beslægtede forbindelser, i hvilke 4-substituenten er propyl, vinyl, homoallyl, phenyl eller phenethyl. Det bemærkes især, at 4-propyl-for-bindelsen (forbindelse 19) er praktisk taget inaktiv, medens den tilsvarende 4-allyl-forbindelse (forbindelse 15) har 15 kraftig analgetisk virkning. Det bemærkes, at de to nævnte forbindelser tilhører tetrahydrocarbazol-rækken og ikke pyrano[3,4-b]indol-rækken, hvortil forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse hører, jf. den følgende definition af forbindelserne ifølge opfindelsen; der foreligger 20 ganske vist ikke data for 4-propyl-forbindelsen i pyrano[3,4-b]indol-rækken, men det fremgår dog klart af den ovennævnte artikel, at de opnåede farmakologiske resultater viser fagmanden på området, at såvel i tetrahydrocarbazol-rækken som i pyrano[3,4-b]indol-rækken er 4-allyl- og 4-benzyl-sub-25 stituenten af særlig kritisk betydning for aktiviteten. Det essentielle karakteristiske træk for disse substituenter er et 7r-system indeholdende mindst to sp2-hybridiserede C-atomer bundet til stilling 4 gennem en methylengruppe, og de 4-alkyl-substituerede forbindelser, der er beskrevet i US 30 patentskrift nr. 3.974.179 er ikke i besiddelse af dette karakteristiske træk.

Indol-derivaterne ifølge opfindelsen er ejendommelige ved, at de har den almene formel 35 3 DK 168216 B1 R3 S' 5 R* “2 Ι^Οχ0

10 R5 i R1 CH2-C00H

hvor R1 er C1_4-alkyl, R2 og R3 er hydrogen, eller R2 og R3 danner sammen 15 med de C-atomer, hvortil de er bundet, en benzenring, der eventuelt er substitueret med 4-halogen, 2,4-di-halogen, 3-trifluormethyl eller 4-methoxy, og R4 og R5 er hydrogen, C^-g-alkyl eller halogen, eller er farmaceutisk acceptable salte deraf.

20 Når R2 og R3 er forbundet til dannelse af en usubsti- tueret benzenring, kan R2 og R3 tilsammen gengives ved formlen -CH=CH-CH=CH-.

Når R2 og R3 er forbundet til dannelse af en benzenring, der er substitueret med 4-halogen, 2,4-dihalogen, 25 3-trifluormethyl eller 4-methoxy, har forbindelserne ifølge opfindelsen formlen & ** (XIV)

35 R5 i'P^CHj-COOR

4 DK 168216 B1 hvor R1, R4 og R5 har den ovenfor angivne betydning, og Y er 4-halogen, 2,4-dihalogen, 3-trifluormethyl eller 4-methoxy, eller er farmaceutisk acceptable salte deraf.

5 En foretrukken udførelsesform for opfindelsen er forbindelserne med den almene formel R3'

X

^^R2'

R4 " CH

V\ (II}

15 ' I p τι CH-— CO.H

κ Η T5 2 2 i hvilken R2' og R3' er hydrogen, eller R2' og R3' danner sammen med de C-atomer, hvortil de er bundet, en benzenring, 20 og R4' og R5' er hydrogen, Ci_4-alkyl eller halogen, og de farmaceutisk acceptable salte deraf.

Yderligere foretrukne forbindelser ifølge opfindelsen er forbindelser med formlen II, hvor R2 og R3 er hydrogen, eller R2 og R3 danner sammen med de C-atomer, hvortil de er 25 bundet, en benzenring, R4 er hydrogen eller 5-, 6- eller 7-halogen, R5 er hydrogen, methyl, ethyl eller propyl, samt de farmaceutisk acceptable salte deraf.

De mest foretrukne forbindelser ifølge opfindelsen er: 30 1-ethyl-l,3,4,9-tetrahydro-4-(phenylmethyl)- -pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre, 7.-chlor-1-ethyl-l ,3,4,9-tetrahydro-8-methyl--4- (2-propenyl) -pyrano[3,4-b] indol-l-eddikesyre, l-ethyl-7-fluor-l,3,4,9-tetrahydro-8-methyl-35 -4-(2-propenyl)-pyrano 13,4-b]indol-l-eddikesyre, DK 168216.B1 5 8-chlor-l-ethyl-l,3,4,9-tetrahydro-5-methyl--4-(phenylmethyl)-pyrano[3,4-b] indol-l-eddikesyre, 1.8- diethyl-l,3,4,9-tetrahydro-4-(2-propenyl)--pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre, 5 1-ethyl-l,3,4,9-tetrahydro-8-methyl-4-(2-pro penyl) -pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre, 7-chlor-l-ethyl-l,3,4,9-tetrahydro-4-(phenylmethyl) -pyrano [3 , 4^-b] indol-l-eddikesyre, 6-brom-l-ethyl-l,3,4,9-tetrahydro-4-(phenyl-10 methyl)-pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre, 5-chlor-l-ethyl-l,3,4,9-tetrahydro-8-methyl--4-(phenylmethyl)-pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre, 7.8- dichlor-l-ethyl-l,3,4,9-tetrahydro-4--(phenylmethyl)-pyrano 13,4-b]indol-l-eddikesyre, 15 7-chlor-l-ethyl-l,3,4,9-tetrahydro-8-methyl- -4-(phenylmethyl)-pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre, 1-ethyl-l,3,4,9-tetrahydro-8-methyl-4-(phenylmethyl )-pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre, 1-ethyl-l,3,4,9-tetrahydro-4-(2-propenyl)-8-20 -propyl-pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre og 1.8- diethyl-l,3,4,9-tetrahydro-4-(2-propenyl)--pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre.

Indol-derivaterne ifølge opfindelsen kan fremstilles ved en fremgangsmåde, der er ejendommelig ved, at man hydro-25 lyserer en ester med den almene formel 30 4 ?H, R* 2 (XVIII)

>]nO

35 / H 1/ \CH z R5 R 2 6 DK 168216 B1 hvor R1, R2, R3, R4 og R5 er som ovenfor defineret, og Z er -CO-OCH3 hvorpå man om ønsket opdeler den dannede syre i * dens optiske isomere og/eller danner et farmaceutisk acceptabelt salt deraf. Esteren kan hydrolyseres ved alkalisk 5 hydrolyse, f.eks. med NaOH eller KOH. Esterne med formlen (XVIII) er hidtil ukendte forbindelser.

Esterne (XVIII) kan fremstilles ved ringslutning af en jS-substitueret tryptophol med den almene formel r3 10 Λ R4 qTt ij i (vi) 15 æ

p-* I

R H

hvor R2, R3, R4 og R5 er som ovenfor defineret, med en 3-me-thoxy-2-alkensyre-methylester med den almene formel 20 (vid 0CH3 25 hvor R1 og Z er som ovenfor defineret.

Ringslutningen, fremstillingen af den ^-substituerede tryptophol og hydrolysen af esteren (XVIII) er alle eksemplificeret i reaktionsskemaerne for fremgangsmåderne A, B, C og D i det følgende. En alternativ metode til fremstilling 30 af esteren (XVIII) omfatter kondensation af den ^-substituerede tryptophol (VI) med en substitueret β-keto-ester med den almene formel R1COCH2COOCH3 ved en fremgangsmåde analog med den i US patentskrift nr.

35 3.939.178 beskrevne.

Reaktionsskemaerne, der illustrerer fremgangsmåderne A, B, C og D, er vist i det følgende: 7 DK 168216 B1

O

3

Fremgangsmåde A -R

5 A 2 Åx * & ,αΑ ' ίο H ch2-c-och3 r ^ (III) (IV) (VI) /*

15 1) R1 O

\ " „4 CH7 Y^^c-och3 R i 2 2) och3 (vii ) -Xn

KaOH w Uc li 1 6 ( I )

- -► iX

on . R5 l R XCH -C00H

20 Fremgangsmåde B 1 R3

H I 2 (IX) RX V

Cl h ( VIII ) 3 (* )

30 AR

Ar2 4 CH2 mil herefter t forbindelse ^ OH Frema.jnéde ^ med f°“aen 1 Η n (VI) Å DK 168216 B1 R3

O

8

Fremgangsmåde C

X, R » (XII) R3 i

/ ^ R

10 4 il A CH2 "&Χ“Λ ,! J5c^ ^

Rs/^ ' B 1χ! J herefter (XIII) fremg.måde

▼ B

forbindelser med formlen (I) 20 Fremgangsmåde D ίι^Ί „ - /U“ 4 o ch2 R CH.C-OCH. /X RAv ^ 1 . j&x * *> * i il2 W i (XVI) .

(VIII) J3"y r‘ L1A1H, £ΐΤΐΓ^ h-eft-_► FOrbindelSe —--► frema.måde m. formlen * H A (XIV) 35 ( XVII) 9 DK 168216 B1

Fremgangsmåde A er en fremgangsmåde til fremstilling af forbindelser med formlen (I), ved hvilken en substitueret isatin med formlen (III), hvor R4 og R5 er som defineret for formlen (I), kondenseres med enolatet af carboxylsyre-5 esteren med formlen (IV), hvor R2 og R3 er som defineret for formlerne (I) og (II), hvilket giver hydroxyester-mellemproduktet med formlen a3

io sR

X, r / CH« - ra I 2

I ' J

* H

(V) 20

Mellemproduktet med formlen (V) reduceres, uden at blive isoleret, ved hjælp af et hydrid, f.eks. LiAlH4, hvilket giver den β-substituerede tryptophol med formlen (VI), hvor R2, R3, R4 og R5 er som defineret ovenfor. Omsætning 25 af den β-substituerede tryptophol med formlen (VI) med f.eks.

3-methoxy-2-alkansyre-methylester med formlen (VII), hvor R1 er som defineret for formlen (I), i nærvær af en Lewis-syre, f.eks. bortrifluoridetherat, efterfulgt af alkalisk hydrolyse, giver forbindelser med formlerne (I) og (II).

30 Alternativt giver kondensation med en substitueret /3-keto-ester, efterfulgt af hydrolyse som beskrevet i US patentskrift nr. 3.939.178, forbindelser med formlerne (I) og (II).

Fremgangsmåde A anvendes til fremstilling af forbindelserne i eksemplerne 1 og 8-37, tabel II. De nødvendige 35 isatiner med formlen (III) fremstilles som beskrevet af 10 DK 168216 B1

Frank D. Popp i Advances in Heterocylic Chemistry 18, 1-58 (1975).

Fremgangsmåde B er en fremgangsmåde til fremstilling af forbindelser med formlen (I) og (II), ved hvilken en 5 substitueret indol-3-eddikesyre-methylester med formlen (VIII), hvor R4 og R5 er som defineret for formlen (I), alkyleres med et organisk halogenid med formlen (IX), hvor R2 og R3 er som defineret for formlen (I), hvilket giver den a-substituerede indol-3-eddikesyreester med formlen 10 (X), hvor R2, R3, R4 og R5 er som defineret ovenfor. Esteren med formlen (X) reduceres, f.eks. med LiAlH4, hvilket giver den jS-substituerede tryptophol med formlen (VI), der er vist under fremgangsmåde A ovenfor. Forbindelsen med formlen (VI) kan omdannes til en forbindelse med formlen (I) og/eller 15 (II) ved hjælp af fremgangsmåde A ovenfor.

Fremgangsmåde B anvendes til fremstilling af forbindelsen i eksempel 2, tabel II.

Fremgangsmåde C er en metode til fremstilling af forbindelser med formlen (I) og (II), ved hvilken en sub-20 stitueret indol med formlen (XI), hvor R4 og R5 er som defineret for formlen (I), omsættes med et substitueret syre-chlorid med formlen (XII), hvor R2 og R3 er som defineret · for formlen (I), hvilket giver den substituerede 3-acylindol med formlen (XIII), hvor R2 og R3, R4 og R5 er som defineret 25 ovenfor. Omlejring af forbindelsen med formlen (XIII) til mellemproduktet α-substitueret indol-3-eddikesyreester med formlen (X), der er beskrevet under fremgangsmåde B, sker ved hjælp af thallium(III)nitrat ifølge E.C. Tayler m.fl., J. Amer. Chem. Soc. 98, 3037 (1976).

30 Fremgangsmåde C anvendes til fremstilling af forbin delserne ifølge eksempel 4 og 5, tabel II.

Fremgangsmåde D er en fremgangsmåde til fremstilling af forbindelser med formlen (XIV), ved hvilken en substitueret indol-3-eddikesyre-methylester med formlen (VIII), hvor 35 R4 og R5 er som defineret for formlen (XIV), alkyleres med et substitueret benzylhalogenid med formlen (XV) , hvor Y er 11 DK 168216 B1 som defineret for formlen (XIV), hvilket giver den a-sub-stituerede indol-3-eddikesyreester med formlen (XVI), hvor R4, R5 og Y er som defineret ovenfor. Esteren med formlen (XVI) reduceres, f.eks. med LiAlH4, hvilket giver den β-sub-5 stituerede tryptophol med formlen (XVII). Forbindelsen med formlen (XVII) kan omdannes til en forbindelse med formlen (XIV) ved den ovenfor beskrevne fremgangsmåde A.

Fremgangsmåde D anvendes, til fremstilling af forbindelserne 40-45 i tabel II.

10 Den jø-substituerede tryptophol (VI) kan fremstilles ved en alternativ fremgangsmåde analog med den, der er beskrevet i US patentskrift nr. 4.585.877.

Udtrykket "alkyl", som det anvendes her, repræsenterer ligekædede alkylgrupper med 1-6 carbonatoroer og forgrenede 15 alkylgrupper med 3-4 carbonatomer og omfatter methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, pentyl og hexyl.

Udtrykket "lavere alkyl", som det anvendes her, repræsenterer ligekædede alkylgrupper med 1-4 carbonatomer og forgrende alkylgrupper med 3-4 carbonatomer og omfatter 20 methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl og isobutyl.

Udtrykket "halogen", som det anvendes her, omfatter fluor, chlor, brom og iod.

Forbindelserne med formlen (I) danner salte med passende farmaceutisk acceptable uorganiske og organiske baser. 25 Disse afledte salte har lignende aktiviteter som den oprindelige syre og er omfattet af opfindelsens omfang. Syren med formlen (I) omdannes i udmærket udbytte til de tilsvarende farmaceutisk acceptable salte ved neutralisation af " syren med en passende uorganisk eller organisk base. Saltene 30 indgives på samme måde som de oprindelige syreforbindelser. Egnede uorganiske baser til dannelse af disse salte omfatter f.eks. hydroxider, carbonater, bicarbonater eller alkoxider af alkalimetaller eller jordalkalimetaller, f.eks. natrium, kalium, magnesium og calcium. Det foretrukne salt er natri-35 umsaltet. Egnede organiske baser omfatter følgende aminer: lavere mono-, di- og tri-alkylaminer, hvis alkylgrupper 12 DK 168216 B1 indeholder op til tre carbonatomer, såsom methylamin, dime-thylamin, trimethylamin, ethylamin, di- og triethylamin og methylethylamin; mono-, di- og trialkanolaminer, hvis alka-nolgrupper indeholder op til tre carbonatomer, såsom mono-, 5 di- og triethanolamin; alkylendiaminer, som indeholder op til seks carbonatomer, såsom hexamethylendiamin; cycliske mættede eller umættede baser, der indeholder op til seks carbonatomer, såsom pyrrolidin, piperidin, morpholin, pi-perazin og deres N-alkyl- og N-hydroxyalkyl-derivater, 10 såsom N-methylmorpholin og N-(2-hydroxyethyl)-piperidin, samt pyridin. Desuden skal nævnes de tilsvarende kva-ternære salte, såsom tetraalkyl- (f.eks. tetramethyl-), alkyl-alkanol" (f.eks. methjitrimethanol- og trimethyl-mono-ethanol-) og cycliske ammoniumsalte, f.eks. N-methylpy-15 ridinium-/N-methyl-N- (2-hydroxyethyl)-morpholinium, N,N--dimethyl-morpholinium- og N,N-dimethyl-piperidiniumsalte, der udmærker sig ved god vandopløselighed. I princippet „ kan imidlertid alle ammoniumsalte anvendes, når de er fysiologisk acceptable.

20 Omdannelsen til salte kan foretages ved hjælp af en række forskellige kendte metoder. Når det således drejer sig om salte af uorganiske baser, foretrækkes det at opløse syren med formlen (I) i vand indeholdende mindst 1 ækvivalent mængde hydroxid, carbonat eller bicarbonat.

25 Det er en fordel at udføre reaktionen i et med vand blandbart organisk opløsningsmiddel, der er indifferent ved reaktionsbetingélserne, f.eks. methanol, ethanol eller dioxan, i nærvær af vand. Således giver anvendelse af natriumhydroxid, natriumcarbonat eller natrium-30 bicarbonat en opløsning af natriumsaltet. Inddampning af opløsningen eller tilsætning af et med vand blandbart opløsningsmiddel med en mere moderat polaritet, f. eks. en lavere alkanol, såsom butanol, eller en lavere alkanon, såsom ethylmethylketon, giver et fast salt,

O

13 DK 168216 B1 hvis det er dette, der ønskes.

Når man skal fremstille et aminsalt, opløses syren med formlen (I) i et passende opløsningsmiddel af enten moderat eller lav polaritet, f.eks. ethanol, ace-δ tone, ethylacetat, diethylether og benzen. Mindst en ækvivalent mængde af aminen svarende til den ønskede kation sættes derpå til opløsningen. Hvis det fremkomne salt ikke udfældes, kan det i reglen fås i fast form ved tilsætning af et blandbart fortyndingsmiddel med 10 lav polaritet, f.eks. benzen eller petroleumsether, eller ved inddampning. Hvis aminen er forholdsvis flygtig, kan eventuelt overskud let fjernes ved inddampning.

Det foretrækkes at anvende hovedsagelig ækvivalente mængder af de mindre flygtige aminer.

15 Salte, hvor kationen er kvaternært ammonium, fremstilles ved at blande syren med formlen (i) med en ækvivalent mængde af det tilsvarende kvaternære ammoniumhydroxid i vandopløsning efterfulgt af afdampning af vandet.

Den foreliggende opfindelse omfatter diastereo-20 isomerene, hvor 4-substituenten er enten cis eller trans i forhold til eddikesyrekæden i stilling 1.

Opfindelsen omfatter tillige de optiske isomere af forbindelserne med formlen (I) , som er resultatet af asymmetriske centre i disse. Sådanne isomere kan 25 fås i hovedsagelig ren form ved hjælp af klassiske ad- skillelsesraetoder og ved hjælp af sterisk reguleret syntese. Omfattet er den specifikke opdeling af l-ethyl-1,3,- 4,9-tetrahydro-4- (phenylmethyl) -pyrano [ 3,4-b] indol-l-ed-difcesyre i de optiske isomere ved adskillelse af den til-30 svarende [ (lS)-endo]-l,7,7-trimethyl-bicyclo[2,2,l]hep-tan-2-yl-ester, efterfulgt af basisk hydrolyse.

De nyttige anti-inflammatoriske virkninger af pyranoindoleddikesyre-derivaterne med formlen (i) kan påvises ved farmakologiske standardprøver, f.eks. den 35 prøve, der kaldes: præventiv adjuvans-ødem.

14 DK 168216 B1 0 Formålet med denne prøve er at fastslå prøve medikamentets evne til at give en akut anti-inflammatorisk virkning hos rotter. Denne prøve er en primær screening for anti-inflammatoriske præparater.

Arter; 5 Der anvendes Sprague Dawley-hanrotter (180-200 g) . Dyrene har fri adgang til vand, men berøves foder 18 timer før prøven.

Medikamenttilberedninger og indgift;

Der fremstilles Freund's komplette adjuvans ved at 10 suspendere 5 mg dræbt og tørret Mycobacterium butyricum (Difco) i 1 ml mineralolie. Prøveforbindelserne opløses eller suspenderes i 0,5%'s "Tween" 80 i destilleret vand alt efter deres opløselighed. Til primær screening indgives alle medikamenter via maveskylning i en arbitrær do-15 sis på 25 mg/kg peroralt i et volumen på 0,5 ml/100 g legemsvægt til grupper på 10 dyr.

Metodedetaljer;

Fremgangsmåden er i hovedtrækkene den, der er beskrevet af Wax m.fl. i J. Pharmacol. Exp. Ther. 192, 20 166-171 (1975). Grupper af rotter injiceres intradermalt i venstre bagpote med 0,1 ml Freund's komplette adjuvans. Prøveforbindelsen eller bærestoffet indgives limiddelbart før adjuvanset og 24_og 48 timer efter adju- vanset (dag 0, 1 og 2) . Voluminet af den injicerede bag-25 pote males før injektion af adjuvans og 24 timer efter sidste medikament indgi ft (dag 3) ved hjælp af et plethysmo-meter (Buxco Electronics Inc.). Forskellen mellem bag-potevoluminet på dag 0 og dag 3 repræsenterer ødemvolu- minet. "Etodolac" (25 mg/kg peroralt) medtages som po- 30 . . , sitiv kontrol.

Resultater;

Det gennemsnitlige ødemvolumen (udtrykt som ml + SEM) beregnes for hver gruppe, og den beskyttelse, der ydes af medikamentet, beregnes i procent: 35

O

15 DK 168216 B1 % beskyttelse = I^t-Li00 hvor c er det gennemsnitlige ødemvolumen for de med bærestof (0,5%'s "Tween" 80 i destilleret vand) behandle- 5 de kontroldyr, og t er det gennemsnitlige ødemvolumen hos den med medikament behandlede gruppe.

Analgetisk aktivitet

En yderligere prøve til bestemmelse af anvendeligheden af forbindelserne ifølge opfindelsen betegnes som medikamentvirkninger på af phenylbenzoquinon fremkaldt vridning hos mus.

Formålet med denne prøve er at bestemme prøvemedikamenternes evne til at inhibere nociceptivt (smerte) repons hos mus injiceret med et kemisk irriterende stof.

15 .

Denne prøve er en primær screening for bade perifert og centralt virkende analgetiske medikamenter.

Arter: c Schweizisk albinohanmus (15-25 g). Dyrene fastes i 18 timer før brug, men har fri adgang til vand.

20

Medikamenttilberedning og indgift;

Medikamenter opløses eller suspenderes ifølge deres opløselighed i 0,5%'s "Tween" 80 i destilleret vand.

De indgives via mavesonde i et volumen på 5 ml/kg. Til primær screening indgives alle medikamenter i en arbi- 25 trær dosis på 25 mg/kg peroralt til en gruppe på 10 mus. Metodedetaljer:

Der anvendes en modifikation af fremgangsmåden beskrevet af Siegmund m.fl. i Proc. Soc. Exp. Biol. Med.

95, 729-731 (1957). Grupper på 5 mus doseres med prøve-30 forbindelsen eller bærestof som kontrol. 60 minutter senere injiceres dyrene intraperitonealt med 0,3 ml/20 g legemsvægt af en 0,02%'s opløsning af phenylbenzoquinon (PBQ, 2-phenyl-l,4-benzoquinon) og anbringes i indivi-35 duelle observationsbure. Antallet af vridende eller ma-vekrympende bevægelser, der foretages af hver mus i den 16 DK 168216B1

O

følgende periode på 15 minutter, optælles. Forsøget gentages med en anden gruppe på 5 mus, og det gennemsnitlige antal vridninger pr. mus i en gruppe på 10 mus beregnes .

5 Resultater:

Med medikament behandlede og med bærestof behandlede kontrol-grupper sammenlignes, og den beskyttelse, der ydes af medikamentet, beregnes i procent: 10 % beskyttelse = ^ hvor c er det gennemsnitlige antal vridninger hos kontrolgruppen, og t er det gennemsnitlige antal vridninger hos den med medikament behandlede gruppe.

15 Endnu en prøve, der anvendes til at bestemme anvendeligheden af forbindelserne ifølge opfindelsen, er en Randall Selitto-prøve på rotter.

Formålet med denne prøve er at bedømme styrken af perifert og centralt virkende medikamenter med hensyn 20 til at inhibere rotters reaktion på smertefuld stimulation af en inflammeret pote.

Arter:

Sprague Dawley hanrotter (180-200 g) anvendes. Dyrene faster natten over før medikamentindgift.

25 Medikamenttilberedning og indgift:

Der fremstilles Freund's komplette adjuvans (FCA) ved at suspendere 5 mg dra±>t og tørret Mycobacterium butyri'cum (Difco) i 1 ml mineralolie. Prøveforbindelserne opløses eller suspenderes i 0,5%'s "Tween" 80 30 i destilleret vand efter deres opløselighed. De indgives via mavesonde i et volumen på 0,5 ml/10 0 g legemsvægt til grupper på 10 dyr.

Metodedetaljer: 35 Der anvendes 10 rotter pr. gruppe. Fremgangs måden er hovedsagelig som den, der er beskrevet af Ran-

O

17 DK 168216 B1 dali og Selitto i Arch. Int. Pharmacodyn. 111, 409 (1957), og det apparat, der anvendes til at påføre tryk på poten (analgesimeter til rottepoter, Ugo Basile, Comeria, Italien) er en modifikation af det, der er beskrevet af Gil-5 foil m.fl. i J. Pharmacol. 142, 1 (1963). I grundtrækkene er instrumentet en anordning, der udøver en kraft, som stiger med en konstant hastighed. Kraften overvåges kontinuerligt af en viser, der bevæger sig langs en lineær skala, og måles i gram. Den inflammatoriske re-10 aktion påføres den venstre bagpote på rotter ved at injicere 0,1 ml Freund's adjuvans intradermalt. Prøveforhin-delse eller bærestof indgives 24 timer efter adjuvanset. Smertetærsklen (lyd) bestemmes 1 time senere i den in-flammerede pote hos den behandlede gruppe og kontrolgrup-15 Pen·

Resultater og kriterier for aktivitet:

Hvert dyr, hvis aflæsning er 1,5 gange større end gennemsnitsaflæsningen hos kontrolgruppen, betragtes som reagerende (med analgetisk virkning) på behand-20 ling. Det antal dyr, der udviser analgetisk virkning, bestemmes derpå i hver gruppe.

EDj-ø (den dosis, der giver analgesi hos 50% af dyrene) ved anvendelse af mindst 3 doser bestemmes derpå ved hjælp af den fremgangsmåde, der er beskrevet 25 af Litchfield og Wilcoxon i J. Pharmacol. Exp. Ther. 96, 99-113 (1949).

Typiske resultater, der opnås med forbindelserne ifølge opfindelsen ved den ovennævnte prøve, er følgende: 30 * 35

O

18 DK 168216 B1

Tabel I

Substituerede 1,3,4,9-tetrahydropyrano[3,4-b]indol-1- -eddikesyrer R3 X, R* %

jXuO

R5 i r1 CH2- COOH

Randall-

Præventivt Phenylquinon- Selitto- 15 Eks. adjuv.-ødem _vr. hos mus prøve, rotte 1 37 (1.9) (07003) 2 - - - 3 - 19 - 4 15 86 (0,5) i 20 5 4 — — 6 (3,2) (18) - 7 37 15 — 10 (7,8) (7) 60b t 11 55 11 - 25 12 32a (9^5) (1) 13 36 2 - 14 46 21 — 15 30 25 - 16 (3) (5j5) (0,012) 30 17 44 11 — 18 15 (3.2) (0,8) 19 52 (3.3) (1.6) 20 34 11 - 35

O

19 DK 168216 B1

Randal1-

Præventivt Phenylquinon- Selitto-

Eks. adjuv.-ødem '_vr. hos mus ; prøve, rotte ' 5 21 40 11 - 22 47 (4}7) (0,25) 23 0 0,4) — 24 2 0 — 25 - (3;1) - 10 26 — 10 — 27 — 24 — 29 — (3,2) — 34 . - (1.4) - 40 60 47 _ 15 « 41 — 30 _ 42 18* 24* — 43 25* 47* — 44 25* 22* — 45 45* 29* — 20 £) De anførte tal er enten % inhibering ved 25 mg/kg eller ED,-q i rag/kg anført i parentes .

25 a Afprøvet ved 10 mg/kg b Afprøvet ved 5 mg/kg

Manglen på bivirkninger, der kendetegner forbindelserne ifølge opfindelsen, påvises ved akut-toksi-30 citets-standardprøver som beskrevet af R.A. Turner i "Screening Methods in Pharmacology", Academic Press,

New York og London, 1965, 152-163, og ved langvarig indgift af forbindelsen til varmblodede dyr.

Opfindelsen angår også farmaceutiske præparater, 35 der er ejendommelige ved det i krav 14 og 15's kendetegnende dele angivne.

Når forbindelserne ifølge opfindelsen anvendes som anti-inflammatoriske og analgetiske midler til varmblodede dyr, indgives de oralt, alene eller i dose-

O

20 DK 168216 B1 ringsformer, dvs. kapsler eller tabletter, kombineret med farmacologisk acceptable ekscipienser, såsom stivelse, mælkesukker osv., eller de indgives oralt i form af opløsninger i passende bærestoffer, såsom vegetabil-_ ske olier eller vand. Forbindelserne ifølge opfindelsen kan indgives oralt i en doseringsform til protraheret frigivelse eller transdermalt i salver eller plastre. Forbindelserne ifølge opfindelsen kan også indgives i form af suppositorier.

10 Doseringen af forbindelserne med formlen I

ifølge opfindelsen varierer alt efter den særlige forbindelse, der vælges, og indgiftsmåden. Desuden varierer den i overensstemmelse med det individ, der behand les. I reglen indgives forbindelserne ifølge opfindel-15 sen ved et koncentrationsniveau- , som sikrer effektivitet uden nogen skadelige bivirkninger. Disse effektive anti-inflammatoriske og analgetiske koncentrationsniveauer opnås i reglen inden for et terapeutisk interval på l,0^,ug til 500 mg/kg pr. dag, og det foretrukne 20 interval er l,0^,ug til 100 mg/kg pr. dag. Det foretrukne anti-inflammatoriske dosisinterval er 1-20 mg/kg b.i.d.

Den foretrukne analgetiske dosis er l^ug til 4 mg/kg b.i.d.

Forbindelserne ifølge opfindelsen kan indgives kombineret 25 med ikke-steroide anti-inflairmatoriske medikamenter, såsom "Acetoamino-phen", "Ibuprofen" og “Aspirin” og/eller sammen med opiat-analgetica, såsom codein, oxycodon og morfin sammen med de sædvanlige doser koffein. Når de anvendes kombineret med andre medikamenter, tilpasses doseringen af forbindelser ifølge opfindelsen i overensstemmelse hermed.

30 Forbindelserne ifølge opfindelsen har også antipyretisk aktivitet.

Opfindelsen vil i det følgende blive nærmere forklaret ved hjælp af eksempler.

35

O

21 DK 168216 B1

Eksempel 1 1-Ethyl-l/3,4,9-tetrahydro-4~(phenylmethyl)-pyrano[3,4-b] - 1 ? 3 indol-l-eddikesyre (isomer A) (I, R = 5' R°9 ^ = -CH=CH-CH=CH-, R4 og R5 = H) 5 Trin 1. Fremstilling af 3-phenylpropionsyre-methylester En blanding af 118,2 g (788 mmol) 3-phenylpro-pionsyre, 5,9 g svovlsyre og 100 ml methanol opvarmes ved tilbagesvaling natten over. TLC-analyse viser, at der ikke er udgangsmateriale til stede, og reaktionsblandin-10 gen inddampes i vakuum. Remanensen opløses i 200 ml e-thylether, vaskes med 100 ml natriumbicarbonat, tørres med magnesiumsulfat, filtreres og inddampes, hvilket giver 124,4 g (96,3%) ester som en gyldenbrun olie.

IR (rent) 3020, 2940, 1730 cm-1.

15 Trin 2. Fremstilling af β-(phenylmethyl)-lH-indol-ethanol Til en opløsning af lithium-diisopropylamin i tetrahydrofuran/cyclohexan (2,2 M, 136,4 ml, 300 mmol) afkølet til -78°C under nitrogenatmosfære sættes en opløsning af 44,6 g (272 mmol) 3-phenylpropionsyre-methy1-20 ester (fremstillet i trin 1) i 150 ml tør tetrahydrofu-ran. Blandingen omrøres i 30 minutter. En opløsning af 20,0 g (136 mmol) isatin i 300 ml tetrahydrofuran til-dryppes, og blandingen får lov at varme op til stuetemperatur i 3 timer. Reaktionen afbrydes med 500 ml mættet 25 ammoniumchlorid, og lagene adskilles; det vandige lag vaskes med 2 x 150 ml ether. De kombinerede organiske ekstrakter tørres med magnesiumsulfat, filtreres og inddampes, hvilket giver 71,8 g brun olie. 3-Phenylpro-pionsyre-methylester fjernes ved destillation (95°C/1,5 30 mm), og remanensen (50,6 g) opløses i 300 ml tør tetrahydrofuran og sættes langsomt til en afkølet (0°C) blanding af 18,56 g (489 mmol) lithxumaluminiumhydrid i 225 ml tetrahydrofuran. Blandingen får lov at varme op til stuetemperatur og opvarmes derpå under tilbagesvaling i 35 3 timer. Derpå afkøles blandingen i isvandsbad, og der tilsættes langsomt 250 ral vand. Saltene opsamles ved fil-

O

22 DK 168216 B1 trering og vaskes med 3 x 400 ml ether. Det organiske lag skilles fra filtratet og tørres med magnesiumsulfat, filtreres og inddampes, hvilket giver 35,5 g rødbrun o-lie. Dette materiale renses ved lynchromatografi (30% ethylacetat/hexan, silicagel), hvilket giver tryptophol

O

som en brun olie (16,02 g, 46,9%).

1H NMR (CDC13) : 8,08 (s, IH), 7,65 (d, IH, J = 7,5 Hz), 7,36 (d, IH, J = 7,5 Hz), 7,18 (m, 7H), 7,01 (d, IH, J = 2,0 Hz), 3,84 (d, 2H, J= 5,0 Hz), 3,43 (dt, IH, J = 7,5 Hz), 3,10 (d, 2H, J = 8,0 Hz) og * 1/79 (s, IH).

IR (rent) 3420, 3020 cm-1.

Trin 3. Fremstilling af l-ethyl-l,3,4,9--tetrahydro-4- - (phenyImethy1)-pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesvre--methylester 2Q En opløsning af 15,'97 g (63,6 mmol) £-(phenyl- methyl)-lH-indol-ethanol (fremstillet i trin 2), 9,95 g (76 mmol) methylpropionylacetat og 1,60 g p-toluensulfon-syre i 500 ml benzen opvarmes under tilbagesvaling i 3 timer, og vand opsamles med et Dean-Stark-apparat. Reaktionsblandingen afkøles til stuetemperatur og vaskes 25 med 200 ml 5%'s vandigt natriumbicarbonat, 200 ml vand, tørres med magnesiumsulfat, filtreres og inddampes, hvilket giver 21,37 g af det rå produkt. Diastereomere-ne fraskilles ved lynchromatografi (13% ethylacetat/hexan, silicagel), hvilket giver Isomer A (højest Rf, 2,26 30 g, 9,8%) og Isomer B (lavest Rf, 2,23 g, 9,8%) som gule olier.

35 23 DK 168216 B1 o

Isomer A;

Si NMR (cdci3) b’ s 9,17 (s, IH) , 7,42-7,00 (m, 9H), 3.80 (m, 2H) , 5 3,72 (s, 3H) , 3,20 (m, 2H) , 3,01 (d, IH, J = 17 Hz), 2.80 (d, IH, J = 17 Hz), 2,85 (m, IH), 10 2,05 (q, 2H, J = 7,5 Hz) og 0,90 (t, 3H, J = 7,5 Hz) .

IR (KBr) 3420, 1725 cm"1.

Isomer B: 15 ΧΗ NMR (CDC13)& : 8,88 (s, IH), ·'- 7,38-7,00 (m, 9H) , 3,84 (m, 2H), 3,70 (s, 3H), 3,04 (d, IH, J = 17,5 Hz), 20 2,78 (d, IH, J = 17,5 Hz) , 3,15 (m, 2H), 2,82 (m, IH), 2,20 (q, 2H, J = 7,5 Hz), og 0,82 (t, 3H, J = 7,5 Hz).

25 IR (KBr) 3440, 1725 cm"1.

Trin 4; Fremstilling af l-ethyl-l,3,4,9-tetrahydro-4- -(phenylmethyl)-pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre 3,0 g (8,25 mmol) l-ethyl-4-(phenylmethyl) --1,3,4,9-tetrahydropyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre-meth-30 ylester Isomer A (fremstillet i trin 3) opløses i 100 ml ethanol, og der tilsættes 100 ml 10%'s vandigt natriumhydroxid. Blandingen opvarmes under tilbagesvaling i 2 ti- · mer og inddampes derpå til en uklar vandig opløsning.

Der tilsættes saltsyre, indtil blandingen er sur. Derpå 35 vaskes den med 2 x 100 ml ether, og de kombinerede ether-ekstrakter tørres med magnesiumsulfat, filtreres og ind- DK 168216 Bl

O

24 dampes, hvilket giver 2,8 g næsten hvidt skum. Dette materiale omkrystalliseres fra benzen/petroleumsether, hvilket giver 2,30 g (80%) ren syre som hvidt fast stof, smeltepunkt 144-146°C.

5 XH NMR (CDC13) 8,70 (s, IH), 7,43-7,03 (m, 9H), 3,87 (d, 2H, J = 2,5 Hz), 3,23 (m, 2H), 2,97 (d, 2H, J = 3,0 Hz), 10 2,85 (m, IH), 2,04 (m, 2H) og 0,93 (t, 3H, J = 7,5 Hz).

IR (KBr) 3380, 3260, 1740 cm-1.

Analyse: Beregnet for C22H23N03: 15 C 75,62, H 6,63, N 4,01.

Fundet: C 75,96, H 6,43, N 3,99.

Fremstilling af l-ethyl-l,3,4,9-tetrahydro-4-(phenylmeth-yl)-pyrano[3,4-bjindol-l-eddikesyre, natriumsalt (Isomer A) 20 2,6 ml IN vandig NaOH-opløsning sættes til en omrørt opløsning af 0,965 g (2,76 mmol) 1-ethy1-1,3,4,9--tetrahydro-4-(phenylmethyl)-pyrano[3,4-b]indol-l-eddike-syre i 50 ml methanol. pH justeres til 7,75 ved tilsæt-* ning i portioner af l-ethyl-l,3,4,9-tetrahydro-4-(phenyl-25 methyl)-pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre. Den opnåede op løsning inddampes til tørhed og optages derpå i benzen og inddampes (2 gange). Remanensen opløses i 8 ml ethyl-acetat, og der tilsættes langsomt 30 ml petroleumsether (30-60°). Det bundfald, der dannes, omrøres i en time, 30 filtreres, vaskes med petroleumsether og tørres, hvilket giver 1,0 g (98%) af saltet som hvidt fast stof, smeltepunkt 180-190°C (sønderdeling).

35 25 DK 168216 B1 0 Kemisk NMR (DMSO-dg) : Antal protoner Type_forskydning (h) 3 CH3 0,84 (t, J = 8) 2 CH2 2,0 (2q, J = 8) 7 3CH2, CH 2,2-3,9 (m) 5 9 aromatiske 6,9-7,2 (m)

Analyse: Beregnet: C 71,14, H 5,97, N 3,77.

Fundet: C 70,41, H 6,03, N 3,74.

Eksempel 2 10 1-Ethyl-l,3,4,9-tetrahydro-4-(phenylmethyl)-pyrano[3,4-bj- indol-l-eddikesyre-methylester (Isomer A)

Trin 1. Fremstilling af indol-3-eddikesyre-methylester 25 g (143 mmol) indol-3-eddikesyre opløses i 500 ml methanol, og der tilsættes 5 ml koncentreret svovl- 1 ^ syre. Den opnåede opløsning opvarmes under tilbagesvaling natten over. TLC-analyse viser, at der ikke forekommer udgangsmateriale, og reaktionsblandingen inddampes i vakuum. Remanensen opløses i 300 ml ethylether, vaskes med 5%'s vandigt natriumbicarbonat (2 x 150 ml), tør- 20 res med magnesiumsulfat, filtreres og inddampes til 24,09 g (89,1%) af esteren som en bourgognefarvet olie.

IR (rent) 3400, 1720 cm NMR (CDC13) j : 8,17 (s, IH), 7,62 (d, IH J = 6,7 Hz), 25 7,32-7,07 (m, 4H), 3,79 (s, 3H) og 3,70 (s, 3H).

Trin 2. Fremstilling af g-(phenylmethyl)-lH-indol-3- -eddikesyre-methylester 30

Til en 2-liters 3-halset rundbundet kolbe udstyret med tilsætningstragt sættes under nitrogen 300 ml tør tetrahydrofuran (THF) og 68,75 ml (χ32 mmol) 1,92 M lithiumdiisopropylamid i cyclohexan/THF og en opløsning af 11,36 g (60 mmol) indol-3-eddikesyre-methyl-35 ester i 300 ml tør tetrahydrofuran tildryppes. Derpå får blandingen lov at forblive på -78°C i 15 minutter,

O

26 DK 168216 B1 hvorpå der tildryppes en opløsning af 7,59 g (60 inmol) benzylchlorid i 300 ml tetrahydrof ur an. Reaktionsblandingen skal omrøres kraftigt, så at den udfældede di-an-ion af indol-3-eddikesyre-methylester omsættes fuldstændig med benzylchloridet. Efter 3 timers forløb viser 5 TLC-analyse, at udgangsmaterialet er fuldstændig opbrugt, og der tilsættes 200 ml mættet vandigt ammoniumchlorid.

Det vandige lag fraskilles og vaskes med 2 x 100 ml e-ther. De kombinerede etherekstrakter sættes til det organiske lag, som tørres med magnesiumsulfat, filtreres 10 og inddampes til 15,0 g (kvantitativt udbytte) rødbrunolie. Dette materiale reduceres til den tilsvarende tryptophol uden yderligere rensning.

ΧΗ NMR (CDC13) 6 : 8,09 (s, IH), 7,73 (d, IH, J = 7 Hz), 15 7,40-7,09 (m, 9H), 4.19 (dd, IH), 3,59 (s, 3H), 3,47 (dd, IH) og 3.20 (dd, IH).

20 _i IR (rent) 3400, 1730 cm .

Trin 3. Fremstilling af β-(phenylmethyl)-lH-indol-ethanol

De 15 g rå a-(phenylmethyl)-lH-indol-3-eddike- syre-methylester, der fås i trin 2 (60 mmol), opløses i 100 ml tør tetrahydrofuran og tildryppes en afkølet sus-25 pension af 2,73 g (72 mmol) lithiumaluminiumhydrid i 300 ml tetrahydrofuran. Blandingen får lov at varme op til stuetemperatur og tilbagesvales derpå i 1,5 timer (opvarmning er i reglen ikke påkrævet til denne reaktion). Blandingen afkøles i et isvandsbad, og der tildryppes 150 ral 30 IN saltsyre. Det vandige lag fjernes, og det organiske lag vaskes med 2 x 100 ml mættet natriumbicarbonat, tørres med magnesiumsulfat, filtreres og inddampes, hvilket, giver 15,06 g (kvantitativt udbytte) brun olie med samme ^ fysiske egenskaber som det produkt, der fås i eksempel 1, trin 2. Dette materiale cycliseres til pyranoindolen i trin 4 uden yderligere rensning.

O

27 DK 168216 B1

Trin 4. Fremstilling af 1-ethyl-l,3,4 ,9-tetrahydro-4- -(phenylmethyl)pyrano[3,4-b]indol-l~eddikesyre--methylester

Den rå β-(phenylmethyl)-lH-indol-ethanol fra trin 3 (15,06 g, 60 mmol) opløses i 250 ml methylenchlorid.

5

Der tilsættes 10,68 g (72 mmol) 2-methoxy-2-penten-syre-methylester efterfulgt af 2,5 ml bortrifluorid-etherat, og blandingen omrøres ved stuetemperatur natten -over. TLC-analyse viser, at reaktionen er fuldstændig, og der tilsættes 200 ml mættet natriumbicarbonat. Det 10 organiske lag fraskilles og vaskes med 2 x 100 ml vand, tørres med magnesiumsulfat, filtreres og inddampes, hvilket giver et råprodukt, som renses ved lynchromato- grafi (13% ethylacetat/hexan, silicagel). Der fås 2,5 g (11,5% baseret på 3 trin) na^sten ren Isomer A. Proton-15 -NMR af denne forbindelse svarer til den prøve, der fremstilles som beskrevet i eksempel 1, trin 3.

Eksempel 3 1-Ethyl-l,3,4,9-tetrahydro-4-(phenylmethyl)-pyrano[3,4-b]- 20 12 3 indol-l-eddikesyre (Isomer Β) (I, R = -C2H5, R og R = -CH=CH-CH=CH-, R4 og R5 = -H) 2,19 g (6,0 mmol) 1-ethyl-l,3,4,9-tetrahydro--4-(phenylmethyl )—pyrano[3,4-b]indol-eddikesyre-methyl-ester Isomer B (fremstillet i eksempel 1, trin 3) sættes til en blanding af 65 ml 10%'s vandigt natriumhydroxid og 65 ml ethanol, og reaktionsblandingen opvarmes under tilbagesvaling i 2 timer. Derpå inddampes blandingen til tørhed, og der sættes en 1:1 blanding af 10%'s na-3Q triumhydroxid/ether til remanensen. Det vandige lag fraskilles, syrnes med koncentreret saltsyre og ekstraheres flere gange med ether. De kombinerede etherekstrakter tørres med magnesiumsulfat, filtreres og inddampes, hvilket giver 1,68 g (80%) læderbrungult fast stof. Dette 35 materiale renses ved hjælp af lynchromatografi (30% ethylacetat/hexan, silicagel), hvilket giver 410 mg materiale, som omkrystalliseres fra benzen/petroleumsehter, hvilket 28 DK 168216 B1 0 giver 315 mg (15%) syre som et hvidt fast stof/ smeltepunkt 171-173°C.

λΕ NMR (CDC13) b : 8,48 (s, IH), 7,39-7,01 (m, 9H), 3,90 (dd, 2H, J = 7,5 Hz, 5 J = 2,5 Hz), 3,19 (m, 2H), 3,02 (d, 2H, J = 3 Hz) , 2,88 (m, IH), 2,15 (m, 2H) og 10 0,89 (t, 3H, J = 7,5 Hz) .

I;R (KBr) 3390, 1722 cm"1.

Analyse: Beregnet for C22H23N03: C 75,62, H 6,63, N 4,01.

Fundet: C 75,76, H 6,35, N 3,95.

15

Eksempel 4 1,8-Diethyl-l ,3,4,9-tetrahydro-4- (phenylmethyl) -pyrano- [3,4-b] indol-l-eddikesyre (I, R1 = -C2H,-, R^ og R1 = -CH=CH-CH=CH-, R4 = -H, R5 = 8-CnHc) 20 2 5

Trin 1. Fremstilling af 1-(7-Ethyl-lH-indol-3-yl)-3--phenylpropanon

Til en kraftigt omrørt opløsning af ethylmag- nesiumbromid (2,85 M i ether, 0,07 mol, 24,6 ml) i 50 ml vandfri ether dryppes en opløsning af 7,25 g (0,05 mol) 25 7-ethyl-lH-indol i 25 ml benzen i løbet af 10 minutter.

Den opnåede bleggrønne blanding opvarmes ved tilbagesvaling i 2 timer og afkøles så til -10°C med et bad af tøris og methanol. En opløsning af 8,43 g (0,05 mol) hy-drocinnamoylchlorid i 20 ml benzen tildryppes i løbet af 45 minutter. Reaktionsblandingen får lov at varme op til stuetemperatur; efter yderligere 2 timer påvises intet udgangsmateriale ved TLC-analyse. Der sættes 30 ml 10%' s vandigt ammoniumchlorid til reaktionsblandingen, og der dannes et hvidt bundfald, som opsamles ved fil-35 trering, vaskes med ether og tørres i vakuum, hvilket giver 7,78 g (56%) ønsket keton, smeltepunkt 140-141,5°C.

O

29 DK 168216 B1 IR (CHC13) 3465, 1645 cm"1.

NMR (CDC13)S : 9,39 (s, IH), 8,30 (d, IH), 7.80 (d, IH), 5 3,12 (s, 4H), 2,88 (g, 2H) og 1,32 (t, 3H).

Trin 2. Fremstilling af 7-ethyl-a-(phenylmethyl)-1H- -indol-3-eddikesyre-methylester 10 Ifølge den af E.C. Taylor m.fl. i J. Amer.

Chem. Soc. 98, 3037 (1976) beskrevne metode sættes en opløsning af 2,77 g (10 mmol) 1-(7-ethyl-lH-indol-3-yl) - -3-phenylpropanon i en 1:1 blanding af methanol og tri- methylorthoformiat (25 ml) til 4,88 g (11 mmol) thallium-15 (III)-nitrat-trihydrat, og blandingen opvarmes ved tilbagesvaling, indtil udfældningen af thallium(I)nitrat er fuldstændig (ca. 3 timer). Den mørkebrune blanding fortyndes med 25 ml ether, og thallium(I)nitratet fjernes ved filtrering. Filtratet vaskes først med 1 x 50 ml 20 portioner af vand, derpå 5%'s vandigt natriumbicarbonat og endelig vand og tørres derpå med vandfrit MgS04·

Inddampning af filtratet og lynchromatografi af det rå produkt (20% ethylacetat/hexan, silicagel) giver esteren som 0,98 g (31,9%) rødbrun olie.

25 -1 IR (CHC13) 3485, 1735 cm .

NMR (CDCl^t*) : 8,35 (s, IH) , 7,70 (dd, IH), 7,15 (m, 3H), 4,28 (m, IH), 30 3,75 (s, 3H), 3,35 (s, 3H), 2.80 (q, 2H) og 1,25 (m, 3H).

35

O

30 DK 168216 B1

Trin 3. Fremstilling af 7-ethyl-g-(phenylmethyl)-1H--indol-ethanol

Til en omrørt suspension af 0,702 g (18,5 mmol) lithiumaluminiumhydrid i 80 ml vandfri tetrahydrofuran 5 under nitrogen ved 0°C sættes langsomt (ca. 1,5 timer) en opløsning af 5,17 g (16,8 mmol) 7-ethyl-a-(phenylme-thyl)-lH-indol-3-eddikesyre-methylester (fremstillet i trin 2) i 30 ml vandfri tetrahydrofuran. Den opnåede mørkerøde blanding opvarmes under tilbagesvaling i 2 ti-1Q mer. Den afkøles til 0°C, og reaktionen afbrydes ved tildrypning af 40 ml vand. De udfældede aluminiumsalte fjernes ved filtrering og vaskes med ether. Filtratlagene adskilles, og det vandige lag vaskes med ether. De kombinerede etherlag vaskes med mættet natriumchlorid, 15 tørres med· vandfrit magnesiumsulfat og inddampes, hvilket giver den ønskede alkohol som 4,51 g (96%) brun olie.

IR (CHC13) 3570, 3480 cm-1.

NMR (CDC13) b : 6,8-8,40 (m, 10H), 3,0-4,10 (m, 5H), 20 2,80 (g, 2H) og 1,32 (t, 3H).

Trin 4. Fremstilling af l,8-diethyl-l,3,4,9-tetrahydro--4-(phenylmethyl)-pyrano[3,4-b]indol-l-eddike-syre (Isomer A) 25 5,86 g (21,0 mmol) 7-ethyl-p-(phenylmethyl)- -IH-indol-ethanol (fremstillet i trin 3), 4,69 g (36,0 mmol) methylpropionylacetat og 0,49 g (2,6 mmol) p-tolu-ensulfonsyre opløses i 175 ml benzen og opvarmes under tilbagesvaling i 5 timer, og vand opsamles med et Dean & 30 Stark-apparat. Blandingen vaskes med 2 x 50 ml mættet natriumbicarbonat, tørres (MgSO^) , filtreres og inddampes, hvilket giver den rå methylester. Dette materiale opløses i en blanding af 125 ml ethanol og 125 ml 10%'s vandigt natriumhydroxid, og blandingen opvarmes under til-35 bagesvaling i 2,5 timer. Den inddampes derpå til tørhed, og der sættes en blanding af 100 ml ether og 50 ml 10%'s

O

31 DK 168216 B1 vandigt natriumhydroxid til remanensen. Lagene adskilles, og det vandige lag syrnes med koncentreret saltsyre og ekstråheres med 2 x 100 ml ether. De kombinerede etherekstrakter tørres med vandfrit MgSO^, filtreres og 5 inddampes, hvilket giver det rå produkt som et læderbrunt fast stof (udbytte 44%). Diastereomerene adskilles delvis ved lynchromatografi (30% ethylacetat/hexan, med.

H3PO4 behandlet silicagel), og en del af de blandede fraktioner fra kolonnen adskilles ved hjælp af HPLC (Waters 10 Assoc. C18, Prep 500). Isomeren, der elueres først på C18-kolonnen, betegnes Isomer A og har et smeltepunkt på 147-148,5°C; den anden isomer betegnes Isomer B og har et smeltepunkt på 158-159,5°C. Hver isomer omkrystalli-seres fra benzen/petroleumsether = 1:3.

Isomer A 15 - IR (KBr) 3600-2600, 3330, 1740 cm .

Analytisk HPLC; 97,88% isomerisk renhed.

Analyse: Beregnet for C24H27N03: C 76,35, H 7,22, N 3,71.

20

Pundet: C 76,28, H 7,25, N 3,81.

Eksempel 5 1,8-Diethyl-l, 3,4,9-tetrahydro-4- (phenylmethyl) -mrann- [3,4-b]indol-l-eddikesyre (Isomer B) 25

Fremstillet i eksempel 4, trin 4.

IR (KBr) 3600-2600, 3460, 1700 cm"1.

Analytisk HPLC: 96,90% isomerisk renhed.

Analyse: Beregnet for C24H27N03: C 76,35, H 7,22, N 3,71.

30

Fundet: C 76,28, H 7,25, N 3,81.

35

O

32 DK 168216 B1

Eksempel 6 1- Ethyl-7-f luor-1 /3,4,9-tetrahydro-8-methyl-4- (2-propen-yl)-pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre (Isomer A) (I, R^ = -C2H5/ R2 og R3 = -H, R4 = 7-F, R5 = 8-CH3) _ Trin 1. Fremstilling af 6-fluor-7-methylisatin O .......... 1 —1 - " -----

En blanding bestående af 21,9 g 3-fluor-2-me-thylanilin-hydrochlorid, 500 ml vand, 29 g hydroxylamin--hydrochlorid, 120 g natriumsulfat og nogle få dråber 6N HCl opvarmes til kogepunktet under kraftig omrøring.

10 Hertil sættes en kogende opløsning af 21,9 g chloral-hy-drat i 330 ml vand, og kogningen forsættes i 45 minutter.

Reaktionsblandingen afkøles og filtreres. Bundfaldet opløses i ether, tørres med natriumsulfat og inddampes, hvilket giver 18,7 g oxim (88%'s udbytte).

15 Oximet sættes portionsvis til 300 ml 90%1 s svovlsyre ved 65°C. Blandingen opvarmes til 80°C i 15 minutter og hældes derpå over isvand under omrøring. Filtrering og tørring giver 11,7 g (60%’s udbytte) 6--fluor-7-methylisatin, smeltepunkt 204-206°C.

2Q Trin 2. Fremstilling af 6-fluor-7-methylindol-3-(2- -allyl)ethanol

En opløsning af lithium-diiospropylamin (LDA) (2,2 M i cyclohexan, 110 ml) afkøles til -78°C i et bad af isopropylamin (IPA) og tøris. 24,0 g (0,206 mol) 25 methyl-4-pentenoat i 100 ml tør tetrahydrofuran indføres, og reaktionsblandingen omrøres i 0,5 time. En opløsning af 19 g (0,106 mol) 6-fluor-7-methylisatin (fremstillet i trin 1) i 150 ml tetrahydrofuran indeholdende 22 mmol 2- methylpyrrolidon sættes tilsættes langsomt, idet reak-3Q tionstemperaturen holdes under -60°C. Reaktionsblandingen omrøres ved -78°C i 2 timer og får derpå lov at nå stuetemperatur. Overskydende LDA ødelægges ved hjælp af mættet ammoniumchloridopløsning. Det organiske lag eks-traheres med 2 x 200 ml ether, tørres (Na^O^) og inddam- 35 pres, hvilket giver 40,0 g rå hydroxyester som mellemprodukt.

O

33 DK 168216 B1

En opløsning af dette hydroxyester-mellempro-dukt i tetrahydrofuran (500 ml) dryppes til en omrørt suspension af 9,8 g (0,258 mol) LiAlH^ i 200 ml tetrahydrofuran og tilbagesvales i 2 timer. Reaktionsblandingen afkøles i isbad, overskydende hydrid ødelægges med

O

tetrahydrofuran/H20 = 1:1, og blandingen filtreres, tørres (Na2S04) og inddampes, hvilket giver 30 g rå tryptophol. Lynchromatografi ved hjælp af 25% ethylacetat/hexan efterfulgt af 301 ethylacetat/hexan giver 11,7 g (48%'s ud-bytte) af den i overskriften nævnte forbindelse. Dette materiale anvendes umiddelbart i trin 3.

Trin 3. Fremstilling af l-ethyl-7-fluor-l,3,4,9-tetra-hydro-8-methyl-4- (2-propenyl) -pyrano[3,4-b] in-dol-l-eddikesyre (Isomer A) 1g En blanding af bestående af 11,0 g (0,048 mol) 6-fluor-7-methylindol-3-(2-allyl)ethanol (fremstillet i trin 2), 11 g 3-methoxy-2-pentensyre-methylester, 1 ml BF2.Et20 og 500 ml dichlormethan omrøres ved stuetemperatur i 2 timer, fortyndes med dichlormethan, va- 20 skes med 5%'s NaHCO^, vand, tørres (MgSO^) og inddampes, hvilket giver 21 g olie. Denne vaskes gennem en silica-gelkolonne ved hjælp af hexan efterfulgt af 5% ethylacetat/hexan som elueringsmiddel giver esterne (5 g af isomer A og 6,5 g af isomer B).

25 Isomer A-ester hydrolyseres ved tilbagesvaling ' med en blanding af 5 g KOH, 500 ml methanol og 10 ml vand i 2,5 timer. Reaktionsblandingen inddampes, fortyndes med vand og ekstraheres med ether. Den vandige fase syr-nes med 5%'s HC1 og ekstraheres med 3 x 200 ml chloroform.

30 De kombinerede ekstrakter vaskes med vand, tørres (MgSO^) og inddampes, hvilket giver 3 g syre i fast form. Omkrystallisation fra toluen/Detroleumsether giver 2,0 g (udbytte 12,6%) af den i overskriften nævnte forbindelse, smeltepunkt 159-160°C.

35 DK 168216 B1 34 o NMR (DMSO-dg.) : Kemisk

O

Antal protoner_Type_forskydning (>,) 3 CH3 0,72 (t, J = 7) 2 CH2 1,95 (m) 5 3 CH3 2,35 (s) 2 =CH2 5,1 (m) 1 H-C=C 5,8 (m) 2 aromatisk 10,6, 11,9 (s) IR (KBr, cm_1): 3070 (NH/OH), 1710 (CO).

10 Analyse: Beregnet: C 68,87, H 6,69, N 4,23.

Fundet: C 68,94, H 6,61, N 4,15.

Eksempel 7 l-Ethyl-7-fluor-1,3,4,9-tetrahydro-8-methyl-4-(2-propenyl)-15 -pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre (Isomer B) l-Ethyl-7-fluor-1,3,4,9-tetrahydro-8-methyl-4--(2-propenyl)-pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre-isomer B--ester, fremstillet i eksempel 6, trin 3, hydrolyseres som beskrevet i eksempel 6, trin 3, hvilket giver 2,1 g 20 hvidt fast stof. Omkrystallisation fra toluen/petroleums-ether giver 1,3 g (udbytte 8,1%) af den i overskriften nævnte forbindelse, smeltepunkt 138-140°C.

NMR (DMSO-dg): 25 Antal protoner Type_Kemisk skift ( ) 3 CH3 0,62 (t, J = 7) 1 CH3 2,35 (s) 2 CH3 2,06 (m) 2 =CH2 5,1 (m) 30 1 H-C=C 5,8 (m) 2 aromatisk 10,6, 11,9 (s) IR (KBr, cm"1): 3070 (NH/OH), 1710 (CO).

Analyse: Beregnet: C 68,87, H 6,69, N 4,23.

Fundet: C 68,98, H 6,77, N 4,18.

35 DK 168216 Bl

O

35

Eksempel 8

Opløsning af (+/-)-l-ethyl-l,3,4,9-tetrahydro-4-(phenyl-methyl)-pyrano13,4-b]indol-l-eddikesyre Trin 1. Fremstilling af 1-ethyl-l,3,4,9-tetrahydro-4-5 -(phenylmethyl)-pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre, [ (lS)-endo3-l,7,7-trimethyl-bicyclo[2,2,l}.hep- . tan-2-yl-ester 50 ml methylenchlorid sættes til en blanding af 3,50 g (10 mmol) 1-ethyl-l,3,4,9-tetrahydro-4-(phen-10 ylmethyl)-pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre, 1,70 g (11 mmol) [(lS)-endo]-(-)-borneol, 2,27 g (11 mmol) 1,3-di-cyclohexylcarbodiimid og 70 mg (0,57 mmol) 4-(N,N-dime-thylamino)pyridin. Blandingen omrøres ved stuetemperatur natten over linder nitrogenstrøm. Blandingen ledes 15 gennem en sintret glåstragt, og bundfaldet vaskes med 50 ml methylenchlorid. Filtratet hældes i 100 ml ether og vaskes med 2 x 50 ml IN saltsyre og 1 x 50 ml mættet natriumbicarbonat, tørres med magnesiumsulfat, filtreres og inddampes, hvilket giver 3,85 g rå esterblanding.

20 Lynchromatografi (10% ethylacetat/hexan, silicagel) giver 2,65 g diastereomer esterblanding som hvidt skum.

Esterne adskilles ved hjælp af HPLC (Waters Prep. 500 A, 4% ethylacetat/hexan, silicagel), hvilket giver 1,2 g Isomer A (først eluerede isomer), smeltepunkt 63-66°C, 25 og 1,15 g Isomer B (anden eluerede isomer) smeltepunkt 58-61°C.

Trin 2. Fremstilling af (+)-1-ethyl-l,3,4,9-tetrahy-dro-4-(phenylmethyl)-pyrano[3,4-b]indol-1--eddikesyre 30 1,20 g (2,5 mmol) af l-ethyl-l,3,4,9-tetrahydro- -4-(phenylmethyl)-pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre, [(IS) — -endo]-1,7,7-trimethyl-bicyclo[2,2,1]heptan-2-yl-ester (Isomer A) opløses i en blanding af 65 ml ethanol og 65 ml 10% natriumhydroxid, og blandingen opvarmes under til-35 bagesvaling i 5 timer. Derpå inddampes blandingen til en uklar vandig opløsning, afkøles i is/vandbad og syrnes

O

36 DK 168216 B1 med koncentreret saltsyre. Derpå ekstraheres den med 2 x 50 ml ether, og de kombinerede etherekstrakter tørres med magnesiumsulfat, filtreres og inddampes, hvilket giver 900 mg gul olie. Dette materiale omkrystalli-5 seres fra toluen, hvilket giver 397 mg (46%) af den rene syre som et hvidt fast stof, smeltepunkt 170-171,5°C.

Analyse: Beregnet for C22H23N03: C 75;62, H 6,63, N 4,01.

Fundet: C 75,63, H 6,44, N 4,17.

10 [0]2D5 = +62,9°.

Eksempel 9

Fremstilling af (-)-l-ethyl-l,3,4,9-tetrahydro-4-(phen-ylmethyl)-pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre 15 1-Ethyl-l, 3,4,9-tetrahydro-4- (phenylmethyl) - -pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre, [ (lS)-endo(-l,7,7-tri-methyl-bicyclo[2,2,l]heptan-2-yl-ester, Isomer B, fremstillet i eksempel 8, trin 1, hydrolyseres som beskrevet i eksempel 2, trin 2, hvilket giver 327 mg (41,3%) 20 ren syre som et hvidt fast stof, smeltepunkt 171-172°C. Analyse: Beregnet for ¢22^23^^^ C 75,62, H 6,63, N 4,01.

Fundet: C 75,55, H 6,42, N 4,31.

(a]2D5 = -60,3°.

25 30 35

O

37 DK 168216 B1

Tabel II

Substituerede 1,3,4,9-tetrahydropyrano[3,4-b]indol-eddi- kesyrer 5 R3 X, *4 CH2 tøj

R5 i r1 CH2-COOH

15

Eksempel R1 R2 R3 R4 R5 Isomer Smp. 0G

1 Et CH=CH-CH=CH HH A 145-147 2 Et CH=CH-CH=CH HH A - 3 Et CH=CH-CH=CH HH B 171-173 20 4 Et CH=CH-CH=CH H 8-C2H5 A 147-148;5 5 Et CH=CH-CH=CH H 8-C2H5 B 158-159,5 6 Et Η H 7-F 8-CH3 A 159-160 7 Et Η H 7-F 8-CH3 B 138-140 8 Et CH=CH-CH=CH Η H A(+) 170-171,5 25 9 Et CH=CH-CH=CH Η H A(-) 171-172 10 Et Η H 7-F 8-C2H5 A 91-93.5 11 Et H HH 8-C2H5 B 118-119.5 12 Et H HH 8-n-C3H7 A 99.5-101^5 13 Et H HH 8-n-C3H7 B 117-120 30 14 Et Η Η Η Η A 133-138 15 Et Η Η Η Η B 136-141 * 16 Et Η H 7-Cl 8-CH3 A 168-169 17 Et Η H 7-Cl 8-CH3 B 124-126 18 Et CH=CH-CH=CH 7-C1 8-C1 A 154-155 35

O

38 DK 168216 B1

Tabel II (forts.)

Eksempel Ri r2 r3 r4 r5 Isomer 3mp, 3 C

5 19 Et CH=CH-CH=CH 7-C1 8-CH3 A 158-159 20 Et CH=CH-CH=CH 7-C1 8-CH3 B 218-220 21 Et CH=CH-CH=CH H 8-CH3 B 174-176 · 22 Et CH=CH-CH=CH H 8-CH3 A 141-143 23 Et CH=CH-CH=CH 5-CH3 8-C1 A 151-152 10 24 Et CH=CH-CH=CH 5-CH3 8-C1 B 250-252 25 Et CH=CH-CH=CH 6-Br Η A 154-155,5 26 Et CH=CH-CH=CH 6-Br Η B 156-158,5 27 Et Η H 6-F Η B 145-147 28 Et CH=CH-CH=CH 6-F Η B 190-192 15 29 Et CH=CH-CH=CH 5-C1 8-CH3 A 172-173 30 Et CH=CH-CH=CH 5-C1 8-CH3 B 248-250 31 Propyl CH=CH-CH=CH HH A 139,5-141 32 Propyl CH=CH-CH=CH HH B 172-173 33 Et CH=CH-CH=CH H 7-C1 B 186,5-188 20 34 Et CH=CH-CH=CH H 7-C1 A 152,5-154 35 Et CH=CH-CH=CH 5-CH3 8-CH3 A 175-177 36 Et CH=CH-CH=CH 5-CH3 8-CH3 B 230-232 * 37 Et H HH 8-CH3 A 135-137 38 Et H HH 8-CH3 B 138-139 25 39 Methyl CH=CH-CH=CH HH A 157-158 30 35

O

39 DK 168216 B1

Substituerede l,3,4,9-tetrahydropyrano[3,4-b] indol-ed- dikesyrer jD" d4 CH, R i 2 (XIV) 10 / · r1-^ch2-cooh

Eksempel Ri Y R4 R5 Isomer SmP* eC

15 40 C2H5 4-C1 Η Η A 182-184 41 C2H5 4-OCH3 HH B 163^5—164^5 42 C2H5 4-C1 Η Η B 187,5-190 43 C2Hs 4-F Η Η A 126-128 44 C2Hs 3-CF3 Η Η B 164,5-166 20 45 C2H5 2,4-diF Η Η A 150-151.5 25 30 35

Claims (22)

1. 2. Indol-derivater ifølge krav 1, kendeteg-25 net ved, at R2 og R3 er hydrogen, eller R2 og R3 danner sammen med de C-atomer, hvortil de er bundet, en benzenring.
2. 3. Indol-derivater ifølge krav 1, kendetegnet ved, at de har den almene formel 30 35 DK 168216 B1 C *. ?H2 R (Iiy *VwS r5' H C^iC^ CH2-C02K 15 hvor R2' og R3' er hydrogen, eller R2' og R3' danner sammen med de C-atomer, hvortil de er bundet, en benzenring, og R4' og R5' er hydrogen, C;^-alkyl eller halogen, eller er farmaceutisk acceptable salte deraf.
3. 4. Indol-derivater ifølge krav 3, kendeteg net ved, at R4' er hydrogen eller 5-, 6- eller 7-halogen, og R^1 er hydrogen, methyl, ethyl eller propyl, eller er farmaceutisk acceptable salte deraf.
4. 5. Indol-derivat ifølge krav 1, kendeteg net ved, at det er l-ethyl-l,3,4,9-tetrahydro-4-(phenyl-methyl)-pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf.
5. 6. Indol-derivat ifølge krav 1, kendeteg- 30 net ved, at det er l-ethyl-l,3,4,9-tetrahydro-4-(phenyl-methyl) -pyrano [ 3,4-b] indol-l-eddikesyre-natriumsalt.
6. 7. Indol-derivat ifølge krav 1, kendetegnet ved, at det er (+)-l-ethyl-l,3,4,9-tetrahydro-4-(phe-nylmethyl)-pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre eller et far- 35 maceutisk acceptabelt salt deraf eller (-)-l-ethyl-l,3,4,9--tetrahydro-4- (phenylmethyl) -pyrano[3,4-b] indol-l-eddikesyre DK 168216 B1 eller er farmaceutisk acceptable salte deraf.
7. 5. Indol-derivat ifølge krav 1, kendetegnet ved, at det er 1-ethyl-l,3,4,9-tetrahydro-4-(phenyl-methyl)-pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre eller et farmaceutisk 5 acceptabelt salt deraf.
8. 6. Indol-derivat ifølge krav 1, kendetegnet ved, at det er l-ethyl-l,3,4,9-tetrahydro-4-(phenyl-methyl)-pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre-natriumsalt.
9. 7. Indol-derivat ifølge krav 1, kendeteg- 10 net ved, at det er (+)-1-ethyl-l,3,4,9-tetrahydro-4-(phe-nylmethyl)-pyrano[3,4-b]indo1-1-eddikesyre eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf eller (-)-1-ethyl-l,3,4,9--tetrahydro-4-(phenylmethyl)-pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf.
10. 8. Indol-derivat ifølge krav 5, kendeteg net ved, at det^er den diastereomere af 1-ethyl-l,3,4,9--tetrahydro-4-(phenylmethyl)-pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre med smp. ca. 144-146°C eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf.
11. 9. Indol-derivat ifølge krav 6, kendeteg net ved, at det er den diastereomere af 1-ethyl-l,3,4,9--tetrahydro-4-(phenylmethyl)-pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre-natriumsalt med smp. ca. 180-190°C.
12. 10. Indol-derivat ifølge krav 7, kendeteg- 25 net ved, at det er den isomere af (+)-1-ethyl-l,3,4,9-te-trahydro-4- (phenylmethyl) -pyrano [ 3,4-b] indol-l-eddikesyre med smp. ca. 170-171,5°C eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf eller den isomere af (-)-1-ethyl-l,3,4,9-tetra-hydro-4- (phenylmethyl) -pyrano [ 3,4-b] indol-l-eddikesyre med 30 smp. ca. 171-172°C eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf.
13. 11. Indol-derivat ifølge krav 1, kendetegnet ved, at det er 7-chlor-l-ethyl-l,3,4,9-tetrahydro--8-methyl-2-(2-propenyl)-pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre 35 eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf, l-ethyl-7--fluor-l,3,4,9-tetrahydro-8-methyl-4-(2-propenyl)-pyrano- DK 168216 B1 -8-methyl-4-(phenylmethyl)-pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf, 7,8-dichlor--1-ethyl-l,3,4,9-tetrahydro-4-(phenylmethyl)-pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre eller et farmaceutisk acceptabelt salt 5 deraf 7-chlor-l-ethyl-l,3,4,9-tetrahydro-8-methyl-4-(phenylmethyl) -pyrano[3,4-b]indol-l-eddikesyre eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf, l-ethyl-l,3,4,9-tetrahydro-8-methyl--4-(phenylmethyl)-pyrano-[3,4-b]-1-eddikesyre eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf eller l-ethyl-l,3,4,9-te- 10 trahydro-4-(2-propenyl)-8-propyl-pyrano[3,4-b]indol-l-ed-dikesyre eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf.
14. 12. Indol-derivat ifølge krav 1, kendetegnet ved, at det har den almene formel " 4 J03—' R4 fH2
15. 20 R5 g R1 CH2-COOH i hvilken R1 er C^-4-alkyl, R4 og R5 er hydrogen, C^g-alkyl eller halogen, og Y er 4-halogen, 2,4-dihalogen, 3-trifluor-methyl eller 4-methoxy, eller er et farmaceutisk acceptabelt 25 salt deraf.
16. 13. Fremgangsmåde til fremstilling af et indol-derivat ifølge krav 1, kendetegnet ved, at man hydrolyserer en ester med den almene formel
17. 30 Z""3
18. 4 R2 * \ |CH2 rN (XVIII)
19. 35. I M ' =ri/S:h2-2 DK 168216 B1 hvor R1, R2, R3, R4 og R5 er som defineret i krav 1, og Z er —COOCH3, hvorpå man om ønsket opdeler den dannede syre i dens optiske isomere og/eller danner et farmaceutisk acceptabelt salt deraf.
20. 14. Farmaceutisk præparat, kendetegnet ved, at det omfatter en forbindelse ifølge krav 1-12 og en farmaceutisk acceptabel bærer.
21. 15. Farmaceutisk præparat, kendetegnet ved, at det omfatter en forbindelse ifølge krav 1-12, en * 10 farmaceutisk bærer og et ikke-steroidt anti-inflammatorisk lægemiddel og/eller et opiat analgetikum.
22. 16. Indol-derivat ifølge krav 1-12 til anvendelse som lægemiddel. 15 20