[go: up one dir, main page]

DK167816B1 - Glycopeptid antibiotikum, farmaceutisk acceptable kationssalte heraf, og fremgangsmaade til fremstilling deraf, fodermidler indeholdende dette antibiotikum og fremgangsmaade til at oege dyrs vaekst/foderudnyttelse under anvendelse af fodermidlet samt biologisk ren kultur af naevnte antibiotikumproducerende stamme - Google Patents

Glycopeptid antibiotikum, farmaceutisk acceptable kationssalte heraf, og fremgangsmaade til fremstilling deraf, fodermidler indeholdende dette antibiotikum og fremgangsmaade til at oege dyrs vaekst/foderudnyttelse under anvendelse af fodermidlet samt biologisk ren kultur af naevnte antibiotikumproducerende stamme Download PDF

Info

Publication number
DK167816B1
DK167816B1 DK538787A DK538787A DK167816B1 DK 167816 B1 DK167816 B1 DK 167816B1 DK 538787 A DK538787 A DK 538787A DK 538787 A DK538787 A DK 538787A DK 167816 B1 DK167816 B1 DK 167816B1
Authority
DK
Denmark
Prior art keywords
antibiotic
feed
growth
antibiotic compound
agar
Prior art date
Application number
DK538787A
Other languages
English (en)
Other versions
DK538787D0 (da
DK538787A (da
Inventor
Kelvin Scott Holdom
Hiroshi Maeda
John Cornish Ruddock
Junsuke Tone
Original Assignee
Pfizer Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pfizer Ltd filed Critical Pfizer Ltd
Publication of DK538787D0 publication Critical patent/DK538787D0/da
Publication of DK538787A publication Critical patent/DK538787A/da
Application granted granted Critical
Publication of DK167816B1 publication Critical patent/DK167816B1/da

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04Antibacterial agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00Antiparasitic agents
    • A61P33/02Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K9/00Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K9/006Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof the peptide sequence being part of a ring structure
    • C07K9/008Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof the peptide sequence being part of a ring structure directly attached to a hetero atom of the saccharide radical, e.g. actaplanin, avoparcin, ristomycin, vancomycin
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205Bacterial isolates
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12RINDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/045Actinoplanes
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215Microorganisms
    • Y10S435/822Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/827Actinoplanes

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Fodder In General (AREA)
  • Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
  • Feed For Specific Animals (AREA)
  • Display Devices Of Pinball Game Machines (AREA)

Description

i DK 167816 Bl
Den foreliggende opfindelse angår et hidtil ukendt glyco-peptid antibiotikum UK-68.597 og farmaceutisk acceptable kationssalte heraf, en gruppe forbindelser, der er karakteriseret biologisk ved deres gram-positive antibakteri-5 elle virkning, der skyldes hæmning af bakteriecellevægsbiosyntese. Opfindelsen angår også en fremgangsmåde til fremstilling af ovennævnte antibiotikum, fodermidler indeholdende dette samt fremgangsmåde til at forøge væksten hos dyr under anvendelse af fodermidlet. Endelig an-10 går opfindelsen også en biologisk ren kultur af stammen ATCC 53 533 eller en UK 68 597 producerende mutant heraf ).
Nævnte gruppe antibiotika omfatter velkendte midler, som 15 avoparcin; actaplanin; teichoplanin; A41030 kompleks og aridicinerne. Emnet er omhandlet i en oversigtsartikel af Williams og Barna. "Structure and mode of action of gly-copeptide antibiotics of the vancomycin group". Annual Rev. Microbiol., 38, 339, 1984.
20
Under' eftersøgningen efter antibiotika har man forsøgt strukturelle modifikationer, når dette har været muligt.
En sådan metode er imidlertid begrænset til modifikationer, der opretholder den ønskede aktivitet. Mange antibio-25 tika, herunder glycopeptiderne, har en sådan kompleks opbygning, at selv små forandringer kan være vanskelige at foretage rent kemisk. Fundet af nye antibiotika frembragt ved forgæringsmetoder foregår stadig og er stadig af stor vigtighed, selv i de tilfælde, hvor antibiotikummet, når 30 det først er fundet, er helt lig med et tidligere kendt antibiotikum.
Ovennævnte glycopeptid antibiotika er virksomme over for gram-positive bakterier. De kan derfor anvendes med va-35 rierende grad af succes til administrering til fjerkræ og andre husdyr, herunder drøvtyggere og svin, for at kontrollere infektioner og for at fremme vækst eller mælke- DK 167816 Bl 2 produktion.
Blandt en række tilstande, der kan behandles med disse midler, er enteritis, en sygdom, der kan forårsage alvor-5 lige økonomiske tab for husdyrproducenten. Enteritis forekommer hos kyllinger, svin, kvæg og får og skyldes især anaerobe bakterier, specielt Clostridium perfringens, og vira. Enterotoxemi hos drøvtyggere, og "forvommethed" hos får, er en sygdom forårsaget af C. perfringens infektion.
10
Forøgelse af udbytte (dvs. forøget vækst og/éller forøget udnyttelse af foderet) hos drøvtyggere, som f.eks. kvæg, og hos enmavede dyr, som svin, er et andet ønsket mål inden for veterinærvidenskaben. Af særlig interesse er 15 den forøgede effektivitet opnået ved at øge foderudnyttelsen. Udnyttelsesmekanismen for hovednæringsdelene af drøvtyggernes foder er velkendt. Mikroorganismer i rumen hos dyret nedbryder kulhydrater til frembringelse af mo-nosaccharider og omdanner disse monosaccharider til pyru-20 vatforbindelser. Pyruvater metaboliseres ved mikrobiologiske processer til dannelse af acetater, butyrater eller propionater, samlet betegnet flygtige, fede syrer. Skønt acetater og butyrater anvendes, udnyttes propionater med større effektivitet. Yderligere kan dyrene, dersom der er 25 for lidt propionat tilgængeligt, udvikle ketose. Et helbredende middel vil derfor stimulere dyrene til at frembringe en større del som propionat ud fra kulhydraterne, hvorved kulhydratudnyttelsen effektiviseres, og samtidig reduceres tilfældene af ketose.
30
Den foreliggende opfindelse angår et hidtil ukendt glyco-peptid antibiotikum betegnet UK-68.597 og farmaceutisk acceptable kationsalte heraf, som er kendetegnet ved den i krav l’s kendetegnende del angivne formel. Det frem-35 bringes ved neddykket aerob propagering i vandige næringssubstrater af en mikroorganisme, der er isoleret fra en jordprøve fra San Diego, Californien, USA. Denne frem- DK 167816 B1 3 gangsmåde ifølge opfindelsen er kendetegnet ved den i krav 2's kendetegnende del angivne fremgangsmåde. Dette antibiotikum er virksomt over for en hel række mikroorganismer og er i stand til at fremme vækst og forøge foder-5 udnyttelsesgraden hos fjerkræ, svin og drøvtyggere.
Mikroorganismen er i nærværende beskrivelse med krav betegnet Actinoplanes sp. ATCC 53533. Man har fundet, at den hører til en art af Actinoplanes på grund af dens 10 smalle hyfer, gul-orange til orange substratmycelium og sammensætningen af helcelle aminosyrerne og sukkerarterne.
Mikroorganismen ifølge opfindelsen er kendetegnet ved, at 15 den er stammen Actinoplanes ATCC 53.533 eller en UK-68.597 - producerende mutant heraf.
En kultur heraf betegnet N693-3 blev udsået fra en skråagar på ATCC nr. 172 bouillon og dyrket i fire dage ved 20 28 0C, og resultaterne blev aflæst på forskellige tids punkter, men sædvanligvis efter 14 dages forløb. Farverne blev beskrevet i almindelig terminologi, men nøjagtige farver blev bestemt ved sammenligning med farvestrimler fra Colour Harmony Manual, fjerde udgave. Analysemetoder-25 ne for helcelle aminosyrer og sukkerarter er de, der er beskrevet i Becker, B. et al., Appl. Microbiol. 12, 421-423, 1964; og i Lechevalier, M.P., J. Lab. Clin. Med., 71, 934-944, 1968.
30 De anvendte identifikationssubstrater til karakterisering af kulturen og deres sammensætning er følgende: 1 2
Trypton-gærekstrakt bouillon (ISP substrat nr. 1,
Difco).
35 2 Gærekstrakt-maltekstrakt-agar (ISP substrat nr. 2,
Difco).
LI IV I 0/0 IDDI
4 3. Havremelsagar (ISP substrat nr. 3, Difco).
4. Uorganiske salte-stivelsesagar (ISP substrat nr. 4,
Difco).
5 5. Glycerol-asparagin-agar (ISP substrat nr. 5, Difco).
6. Pepton-gærekstrakt-jern-agar (ISP substrat nr. 6, Difco).
10 7. Czapek-saccharose-ager - S.A. Waksman, The Actinomy-cetes, Vol. 2, substrat nr. 1, p. 328, 1961.
8. Glucose-asparagin-agar - Ibid, substrat nr. 2, p.
15 328.
9. Bennett's agar - Ibid, substrat nr. 30, p. 331.
10. Emerson's agar - Ibid, substrat nr. 28, p. 331.
20 11.. Næringsagar - Ibid, substrat nr. 14, p. '330.
12. Gærekstrat-agar - Ibid, substrat nr. 29, p. 331.
25 13. Pepton-Czapek-agar - J.N. Couch, J. Elisha Mitchell
Soc., 79, 53-70, 1963.
14. Hickey og Tresner's agar - R.J. Hickey og H.D. Tresner, J. Bacteriol., 64, 891-892, 1952.
30 15. Gordon og Smith's tyrosin-agar - R.E. Gordon - R.E. Gordon og M.M. Smith, J. Bact., 69, 147-150, 1955.
16. Kasein-agar - Ibid.
35 17. Calcium-maleat-agar - S.A. Waksman, Bact. Rev., 21, 1-29, 1957.
DK 167816 B1 5 18. Gelatine-agar - R.E. Gordon og J.M. Mihm, J. Bact., 73, 15-27, 1957.
19^ Stivelses-agar - Ibid.
5 20. Organisk nitratbouillon - Ibid.
21. Kartoffel-gulerods-agar - M.P. Lechevalier, J.Lab. og Clin. Med. 71, 934,044, 1968, men kun 30 g kartofler, 10 2,5 g gulerødder og 20 g agar.
22. 2% postvands-agar.
23. Dextrose-nitrat-bouillon - S.A. Waksman, The Actino- 15 mycetes, Vol. 2, substrat nr. 1, p. 328, 1961, med 3 g dextrose i stedet for 30 g saccharose og uden agar.
24. Cellulose udnyttelse 20 (a) H.L. Jensen (b) M. Levine og H.W. Schoenlein. A Compilation of Culture Media, substrat nr. 2511, 1930.
25 25. Skummetmælk - Difco.
26. Kulhydrater - G.M. Luedemann og B.C. Brodsky, Abtimi-crob. Agents Chemother., 1964,47, 1965, ISP substrat nr. 9, Difco.
30 27. Temperaturområde - ATCC substrat 172 i ATCC substrathåndbog, 1. udgave, p. 10, 1984.
Udseende og vækst på substraterne var følgende: 35 6 UK Tb/blb b l Gærekstrakt-maltekstrakt-agar
God vækst, orange til gullig-orange (5ia, 51a, 4ga), rynket, ophøjet, intet luftmycelium; på bagsiden det samme 5 som overfladen; intet opløseligt pigment.
Havremels-agar Vækst moderat til god, creme men svagt gullig-orange mod 10 kanten, moderat ophøjet, glat, intet luftmycelium; bagsiden svagt gullig-orange (3ca,3ea); intet opløseligt pigment.
Uorganiske salte - stivelsesagar 15
Moderat vækst, gullig-orange (4ea, 4ga), glat, svagt ophøjet, intet luftmycelium; bagsiden som overfladen; intet opløseligt pigment.
20 Glycerol-asparagin-agar
God vækst, orange til mørk-orange (41a, 51a), rynket, ophøjet, intet luftmycelium; bagsiden som overfladen; intet opløseligt pigment.
25
Czapek-saccharose-agar
Moderat vækst, svagt gullig-orange (3ca), glat, let ophøjet, intet luftmycelium; bagsiden svagt gullig-orange 30 (3ca, 3ea); intet opløseligt pigment.
Glucose-asparagin-agar
Moderat til god vækst, orange (4ga, 4ia), glat, men ryn- 35 ket ud mod kanten, moderat ophævet, intet luftmycelium; bagsiden orange (4ia, 41a), intet opløseligt pigment.
DK 167816 B1 7
Bennett’s agar
God vækst, gullig-orange (4ia, 4pa), rynket, ophævet, intet luftmycelium; bagsiden gullig-orange (41a, 4pa); in-5 tet opløseligt pigment.
Emerson's agar
God vækst, rødlig orange (6ia, 6%a), rynket, ophævet, in-10 tet luftmycelium; bagsiden som overfladen; opløseligt pigment gullig-brunt (41c).
Nærings-agar 15 Dårlig til moderat vækst, rødlig-orange (5ea, 5ga, 6ga), glat men rynket mod slutningen af udstrygningen, tynd men ophævet mod slutningen af udstrygningen, intet luftmycelium; bagsiden som overfladen; intet opløseligt pigment.
20 Glucose-gærekstrakt-agar
Glimrende vækst, orange (41a, 51a), rynket, svagt ophævet, intet luftmycelium; bagsiden som overfladen; opløseligt pigment gulligbrunt (31c).
25
Pepton-Czapek-agar
Spredt vækst, gullig-orange (4ia), granulær, ophævet, intet luftmycelium; bagsiden som overfladen; intet opløse- 30 ligt pigment.
Hickey og Tresner's agar
God vækst, gullig til gullig-orange (3ea, 3ia, 4ia), ryn-35 ket, ophævet, intet luftmycelium; bagsiden som overfla den; intet opløseligt pigment.
8 UK 1b/Blb B l
Gordon og Smith's tyrosin-agar
Moderat vækst, mørk rødlig (61e, 6%le), glat, men rynket mod afslutningen af udstrygningen, tynd til svagt ophæ-5 vet, intet luftmycelium; bagsiden brun til rødbrun (51e, 61a); opløseligt pigment mørkebrunt (5ng).
Kasein-agar 10 Moderat til god vækst, klart orange (5na, 5pa), rynket, moderat ophævet, intet luftmycelium; bagsiden som overfladen; opløseligt pigment gulligt (21c).
Calciummaleat-agar 15 Dårlig til moderat vækst, svagt gul-orange (3ea, 4ea), glat, tynd, intet luftmycelium; bagsiden som overfladen; intet opløseligt pigment.
20 Gelatine-agar
Moderat til god vækst, orange (5ga, 5ia), rynket, moderat ophævet, intet luftmycelium; bagsiden som overfladen; intet opløseligt pigment.
25
Stivelses-agar
God vækst, orange (5ia), rynket, ophævet, intet luftmycelium; bagsiden orange (5ia, 6ga); intet opløseligt pig-30 ment.
Kartoffel-gulerods-agar
Moderat vækst, orange-gul (3ea, 3ga), glat, tynd, intet 35 luftmycelium; bagsiden som overfladen; intet opløseligt pigment.
DK 167816 B1 9
Postevands-agar Dårlig til moderat vækst, cremefarvet (2ca); glat, tynd, intet luftmycelium; bagsiden farveløs til cremefarvet 5 (2ca); intet opløseligt pigment.
Morfologiske egenskaber
Vegetative hyfer smalle, lige eller bølgede, forgrenede, 10 0,4-1,0 m diameter, ingen sporer eller sporangier var frembragt efter syv ugers inkubation ved enten 21 °C eller 28 °C på havremels-agar, glycerol-asparagin-agar, Czapek-saccharose-agar, glucose-gærekstrakt-agar og på Hickey og Trenscher's agar blev der ikke frembragt sporer 15 eller sporangier.
Biokemiske egenskaber
Melanin produceredes ikke i trypton-gærekstrakt-bouillon; 20 hydrogensulfid produceredes på pepton-gærekstrakt-jern agar. Gelatine blev flydende; stivelse hydrolyseredes; nitrat reduceredes til nitrit i både uorganisk nitratbouillon og dextrose-nitratbouillon; god vækst, men intet henfald på begge cellulose-bouilloner; koagulering og 25 klaring på mælk; kaseinnedbrydning positiv; nedbrydning af kaliummaleat negativ; nedbrydning af tyrosin negativ. Kulhydratanvendelse: glucose, arabinose, fructose, inositol, mannitol, raffinose, rhamnose, saccharose, xylose, cellobiose, dulcitol, galactose, glycerol, lactose, man-30 nose, melezitose, melibiose, ribose, salicin, opløselig stivelse, sorbitol og trehalose anvendtes; adonitol og sorbose blev ikke nedbrudt.
35 DK 167816 Bl 10
TEMPERATURFORHOLD
. ,21 °C 28 °C 37 °C 45 °C
5 -
Glimrende Glimrende God til glim- Ingen vækst vækst rende vækst vækst 10 Cellevægsanalyse
Hydrolysater af hele celler indeholdt 3-hydroxydiaminopi-melinsyre, xylose, arabinose, glucose, mannose og ribose.
15 Kulturen N693-3 er karakteriseret ved gul-orange til orange substratmycelium, uden sporer eller sporangier og uden opløselige pigmenter på de fleste af de anvendte substrater. Forsøg på at inducere sporer eller sporangie-produktion lykkedes ikke. Negative reaktioner omfatter 20 melaninproduktion, henfald af cellulose, nedbrydning af calciummaleat eller tyrosin, anvendelse af adonitol og sorbose og vækst ved 45 °C. Følgende reaktioner er positive: gelatine flyder, stivelse hydrolyseres, nitrat reduceres, vækst på cellulose, koagulering dg klaring på 25 mælk, nedbrydning af kasein; anvendelse af alle sukkerarter bortset fra adonitol og sorbose; vækst ved 21 °C, 28 0C og 37 °C. Tilstedeværelsen af 3-hydroxydiaminopimelin-syre, xylose, arabinose, mannose og ribose indicerer, at kulturen hører til cellevægstype II.
30
Da den undersøgte kultur ikke producerer sporangier, og da inddeling i species af slægten Actinoplanes afhænger af størrelsen og udformningen af sporangierne, er identifikation af kulturen på speciesniveau umulig, og kulturen 35 N693-3 betragtes derfor som en species af slægten Actino planes og betegnes Actinoplanes sp. Den er deponeret i American Type Culture Collection, 12301 Parklawn Drive, DK 167816 B1 11
Rockville, Maryland 20852, U.S.A. under Budapesttraktaten den 3. september 1986 under registreringsnummeret ATCC 53533.
5 Dyrkning og isolering af antibiotikum UK-68.597 kan udføres under samme betingelser som de, der sædvanligvis anvendes til frembringelse af antibiotika ved forgæring. Dyrkningen foretages fortrinsvis i vandigt næringssubstrat under neddykkede aerobe betingelser under omrøring 10 ved en temperatur på 24 til 36 °C. Næringssubstratet til dyrkning omfatter en assimilerbar kilde for carbon, som sukkerarter, stivelsesarter og glycerol; en kilde for organisk nitrogen, som kasein, enzymatisk nedbrudt kasein, sojabønnemel, bomuldsfrømel, jordnøddemel, hvedegluten, 15 sojamel, kødmel og fiskemel. Kilder for vækstsubstanser, som f.eks. majsstøbevæske, fiskemel, bomuldsfrømel og gærekstrakt såvel som mineralsalte, som natriumchlorid og calciumcarbonat og sporstoffer, som jern, magnesium, kobber, zink, kobolt og magnesium, kan også anvendes med 20 heldige resultater. Dersom der forekommer for meget skumning under forgæringen, kan antiskummemidler, som poly-propylenglycoler eller siliconer, tilsættes forgæringssubstratet. Gennemluftning af substratet i tankene til neddykket vækst opretholdes fortrinsvis med en hastighed 25 på ca. k til 2 rumfang steril luft pr. rumfang forgæringsbouillon pr. minut tilført bouillonen via en gennem-lufter. Omrøringen kan opretholdes ved hjælp af omrørere, der er almindelige inden for forgæringsområdet. Omrøringshastigheden afhænger af den anvendte type omrører.
30 En rystekolbe behandles sædvanligvis med 150 til 200 bevægelser pr. minut, medens en fermentor sædvanligvis kører med 300 til 1700 omdrejninger pr. minut. Aseptiske betingelser skal naturligvis opretholdes under overførslen af organismen og under dennes vækst.
Inokulum til fremstilling af det omhandlede antibiotikum kan fås ved at anvende væksten fra en skråagar af en kul- 35 12 UK Ίο/οΊΟ bl tur eller fra Roux-kolber inokuleret med kulturen. Et fast substrat, der er velegnet til den første dyrkning af organismerne på skråagaren og i Roux-kolberne er ATCC substrat nr. 172. Væksten kan anvendes til at inokulere 5 enten kolber eller inokulum-tanke, eller ipokulum-tanke kan tilsås direkte fra rystekolberne. Væksten i rystekolberne når sædvanligvis maksimum i løbet af 4 til 5 dage, medens inokulum i neddykkede inokulum-tanke sædvanligvis vil være i den mest anvendelige tilstand i løbet af 3 til 10 6 dage.
Fremadskriden af antibiotikumproduktion under forgæring og bioaktiviteten af forgæringsbouillonen kan kontrolleres ved hjælp af biologisk undersøgelse af bouillonen, 15 under anvendelse af en følsom stamme af Staphylococcus aureus eller Bacillus subtilis. B. subtilis ATCC 6633 er en velegnet stamme til dette formål. Standardpladefor-søgsmetoden anvendes, hvor hæmningszonen omkring en filtrerpapirskive mættet med bouillonen anvendes til at måle 20 den antibiotiske aktivitet. Tyndtlagskromatografi under anvendelse af silicagel er også et værdifuldt værktøj til at afsløre de frembragte antibiotika i forgæringssubstratet og analysere sammensætningen af de urensede og rensede materialer, der ekstraheres fra forgæringsbouilloner-25 ne. Kromatogrammerne fremkaldes med acetonitril, vand, ammoniumhydroxid (3:1:7), og den fremkaldte plade dækkes med agar tilsået med enten S. aureus eller B. subtilis og inkuberes ved 37 °C i 16 timer for at visualisere de antibiotiske forbindelser.
30
Antibiotikum UK-68.597 frembragt ved forgæring af Actino-planes sp. ATCC 53533 kan fraskilles og fjernes ved justering af pH af hele bouillonen til pH 10 og filtrere bouillonen for at fjerne myceliet. Antibiotikummet kan 35 yderligere renses ved en række adsorptioner på passende adsorbenter, som f.eks. ionbytterharpikser, kemisk modificeret hydrofobe uorganiske understøttelseselementer, DK 167816 B1 13 som anvendes ved højtryks omvendt fase væskekromatografi eller høj porøsitetspolymere, idet den antibiotiske forbindelse i hvert tilfælde elueres med et passende opløsningsmiddel .
5
Den omhandlede antibiotiske forbindelse er sur og danner kationsalte ved omsætning med basiske midler. Alle sådanne salte falder inden for den foreliggende opfindelses rammer.
10
Antibiotikum UK-68.597 kan karakteriseres ved hjælp af følgende fysisk-kemiske egenskaber.
A) Ultraviolet absorptionsspektrum. Forbindelserne udvi- 15 ser følgende absorptions-maksima:
Opløsningsmiddel_λ max (nm) a) methanol 238, 280, 370 20 b) methanol, 0,1 M HC1 (9:1) 238, 286 c) methanol, 0,1 M NaOH (9:1) 264, 300, 358 B) Infrarødt absorptionsspektrum. Forbindelsen udviser følgende maksima (cm ^): 3700-3100; 1660; 1595; 1500; 25 1230; 1140; 1055; 1015; 990; 755.
C) Optisk drejning: [a] 250/D = -25,6° (c = 0,1, DMSO).
D) Tilbageholdelsestid (Rt) på 12,4 minutter, når der 30 analyseres ved omvendt fase HPLC under følgende betin gelser: Søjle: C-18 Micro-Bondapack, 3,9 mm (i.d.) x 150 mm (Waters).
Elueringsmiddel: CH^CN 10%, 0,1 M vandig ammoniumfor- miat 90%, indstillet til pH 7,4.
35
Ul\ 10/0 ΙΌ D I
14
Gennemstrømningshastighed: 2 ml/min.
Visualisering: U.V. ved 225 nm.
5 E) Molekylvægt afledt fra hurtigt atombombardementsmassespektrum, der viser M+ top ved m/e 1651.
På basis af det kernemagnetiske resonansspektrum sammen 10 med massespektroskopi har man fastlagt følgende formel for UK-68.597:
HO
15 Wo^p\j I I
ci o ci 20 L· li
HNv ° ° X
ho c^ jCX Jl jQ
lljl OH »H 1 2 3 4 5 6 2
Antibiotikum UK-68.597 udviser hæmmende virkning over for 3 væksten af en række gram-positive mikroorganismer. Tabel 4 I nedenfor angiver resultaterne af in vitro-forsøgene.
5
Til dette forsøg inokuleres hver organisme i en række 6 reagensglas indeholdende næringssubstrat og varierende koncentrationer af antibiotikum UK-68.597 for at bestemme den minimale koncentration af forbindelsen mcg/ml, der DK 167816 B1 15 hæmmer væksten af organismen over en periode på 24 timer (MIC).
TABEL I 5
Antibakteriel virkning MIC,* mcg/ml Stamme antibiotisk 10 Organisme nr. UK-68.597
Staphylococcus aureus 01A106 12,5 01A539 12,5 15 01A540 12,5
Actinomyces pyogenes 14D011 <0,2
Pasteurella multocida 59A006 >100
Clostridium perfringens 10A009 <0,2
Bacteroides fragilis 78C024 >100 20 Fusobacterium necrophorum 84C004 >100
Treponema hyodysenteriae 94A007 >100
Over for gram-negative bakterier, som Escherichia coli og 25 Pseudomonas aeruginosa, var MIC-værdierne i hvert tilfælde >100.
Opfindelsen angår også et fodermiddel til fjerkræ, svin og kvæg, der er ejendommeligt ved det i krav 5's kende-30 tegnende del angivne.
Herudover angår opfindelsen en fremgangsmåde til at fremme væksten og/eller forøge foderudnyttelsen hos svin og kvæg, hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved det i 35 krav 6’s kendetegnende del angivne.
Ulv 10/0 ΙΟ D I
16
Dyrefoders værdi er generelt blevet bestemt direkte ved fodring til dyr. Engelsk patentskrift nr. 1 197 826 beskriver detaljeret en in vitro vommetode, hvor forandringer, der forekommer i foderet, frembragt af mikroorganis-5 mer, måles lettere og med større nøjagtighed ved vurdering af dyrefoder. Denne metode indebærer anvendelsen af et apparat, hvori dyrenes fordøjelsesprocesser udføres og undersøges in vitro. Dyrefoderne, vominokulum og forskellige vækstfremmere indføres og fjernes fra en laborato-10 rieenhed under omhyggeligt kontrollerede betingelser, og de forandringer, der sker, undersøges omhyggeligt og fortløbende under mikroorganismernes nedbrydning af foderet. En forøgelse af propionsyreindholdet i vomvæsken indicerer, at der er sket et ønskeligt respons på drøvtyg-15 gerens totale tilstand fremkaldt af vækstfremmeren i foderet. En forandring i propionsyreindholdet udtrykkes som en procentdel af propionsyreindholdet fundet i kontrol-vomvæsken. Langtids in vivo fodringsundersøgelser anvendes til at påvise en ægte korrelation mellem stigningen i 20 propionsyre i vomvæsken og forbedret trivsel af dyret.
Vomvæsken opsamles fra en ko med fistel, der fodres en kommerciel opfedningsdiæt plus hø. Vomvæsken filtreres straks gennem osteklæde, og 10 ml sættes til en 50 ml ko-25 nisk kolbe indeholdende 400 mg standardsubstrat (69% majsstivelse + 17% cellulose + 15% ekstraheret sojabønnemel), 10 ml af en pH 6,8 puffer og forsøgsforbindelsen. Kolben gennemluftes med oxygenfri nitrogen i. ca. 2 minutter og inkuberes i et rystebad ca. 16 timer ved 39 °C.
30 Alle forsøg udføres tre gange.
Efter inkubation blandes 5 ml af prøven med 1 ml 25% me-taphosphorsyre. Efter 10 minutters forløb tilsættes 0,25 ml myresyre, og blandingen centrifugeres 10 minutter ved 35 1500 omdrejninger pr. minut. Herefter analyseres prøverne ved gas-væske-kromatografi således som beskrevet af D.W. Kellog, J. Dairy Science, 52, 1690, 1969. Højden af top DK 167816 B1 17 pene for eddikesyre, propionsyre og smørsyre bestemmes for prøver fra ubehandlede og behandlede inkubationskolber.
5 Når der undersøges ved denne in vitro metode, foranlediger antibiotikum UK-68.597 i en mængde på 10 mikrogram pr. milliliter en forøgelse på ca. 25% i produktionen af propionsyre i forhold til, hvad der frembringes i kontrolopløsningen uden tilsat antibiotikum UK-68.597. Ved 10 sammenligning med den kommercielt tilgængelige forbindelse salinomycin (et polyether-antibiotikum) i en mængde på 10 mcg/ml frembringes ca. en 46% stigning af propionsyren i forhold til kontrollen.
15 Disse resultater viser, at antibiotikum UK-68.597 vil forbedre foderudnyttelsen hos drøvtyggere, som f.eks. kvæg og får. Forbindelserne vil også have en lignende virkning på enmavede dyr, som svin og fjerkræ.
20 Som vist i tabel II er antibiotikum UK-68.597 i stand til at forbedre vækstforøgelsen og foderudnyttelsen hos fjerkræ.
Forbindelsen sattes til foderet, der gives til fire dage 25 gamle kyllinger, der var anbragt i udrugningsbure over hinanden, idet de havde fri adgang til foder. Efter ti dages forløb blev fuglene vejet, og den levende vægtforøgelse sammenlignet med en ubehandlet kontrolgruppe, hvorved man opnåede en procentvis forbedring i den leven-30 de vægtforøgelse. Mængden af forbrugt foder divideres med den levende vægt af dyrene i den pågældende gruppe ved forsøgets afslutning til opnåelse af et foderomdannelses-forhold (der giver et mål for den vægt af foder, der er nødvendig for at frembringe 1 kg forøgelse · i legemsvæg-35 ten), og denne sammenlignes også med kontrolgruppen, og forbedringen i foderomdannelsesforholdet beregnes som en procentdel. Resultaterne viser en signifikant forbedring
UIV 10/0 ΙΟ D I
18 både med hensyn til forøgelse af levende vægt og i foderomdannelseseffektiviteten, dersom antibiotikum UK-68.597 tilsættes foderet i en mængde på 10 ppm:
5 TABEL II
Forøgelse i ydelse af fjerkræ ved opdræt 10 Forøgelse i levende Foderomdannelses-
Ppm vægt (% forbedring) forhold (% forbedring) 10 4,3 2,7 15
Antibiotikum UK-68.597 kan inkorporeres i foderpræparater i form af den fri syre eller som et salt. Alternativt kan urensede former af antibiotikum UK-68.597 eller tørret forgæringsbouillon indeholdende de antibiotiske forbin-20 delser indarbejdes i fodermidler til opnåelse af den ønskede aktivitet af det pågældende antibiotikum.
Opfindelsen illustreres nærmere i de følgende eksempler.
25 EKSEMPEL 1 1. Fremstilling af inokulum
Et sterilt vandigt substrat med følgende sammensætning 30 fremstilledes:
Bestanddel Gram/liter
Glucose 1 35 Stivelse 24
Pepton 5 Gærekstrakt 5 DK 167816 Bl 19 Kødekstrakt 3
Calciumcarbonat 4
En' liter af substratet fordeles i 2,8 liters koniske kol-5 ber og steriliseres ved 120 °C i 30 minutter ved 15 p.s.i. Efter afkøling inokuleres substratet med en vegetativ cellesuspension fra en skråagarkultur af Actinopla-nes sp. ATCC 53533.
10 Kolberne rystes ved 28 °C på et roterende rystebord med en forskydning på 4-7 cm og 150-200 rystelser pr. minut i 3-5 dage.
2. Forgæring og isolering af antibiotikum UK-68.597 15 50 ml af inokulum-substratet beskrevet i eksempel 1 anvendtes til at inokulere hver af ni 5 liters forgæringsbeholdere indeholdende 2,5 liter sterilt substrat med følgende sammensætning, hvortil var sat 1 ml polypropy-20 lenglycol antiskummiddel:
Bestanddel Gram/liter
Cerelose 10,0 25 Majsstivelse 10,0
Sojamel 10,0
Mask 5,0
Natriumchlorid 5,0
Calciumcarbonat 5,0 30 Koboltchlorid 1,0
Vand indtil 1 liter pH 6,9-7,0
Forgæringen udførtes ved 28 °C under omrøring med 1500 35 omdrejninger pr. minut og gennemluftning med 1 rumfang luft pr. rumfang bouillon pr. minut, indtil der observeredes væsentlig aktivitet (baserer på det antibiotiske UIV 10/010 Dl 20 filtrerpapir-skiveforsøg over for B. subtilis ATCC 6633), sædvanligvis 4-6 dage. Bioaktiviteten af bouillonen og af efterfølgende udvindelsesstrømme fulgtes ved hjælp af en følsom stamme af Bacillus subtilis ATCC 6633 eller Sta-5 phyloccocus aureus ATCC 6538. Den antibiotiske komponent i bouillonen og udvindelsesstrømmene afsløredes efter kromatografisk adskillelse under anvendelse af silicagel-plader fremkaldt med acetonitril, vand, ammoniumhydroxid (3:1:0,7). Pladerne visualiseredes med UV-lys ved 254 nm 10 og dækkedes herefter med agar, tilsåedes med enten S. aureus eller B. subtilis, hvortil 1,0 ml af en 1% opløsning af 2,3,5-triphenyl-2H-tetrazoliumchlorid sattes, og der inkuberedes i 16 timer ved 37 °C for at visualisere den antibiotiske forbindelse, som et hvidt område mod en 15 lyserød baggrund.
Efter afslutningen af forgæringsproduktionstrinnet indstilledes bouillonen fra alle fermentorer til pH 10 og filtreredes for at udvinde myceliet. Den antibiotiske 20 forbindelse UK-68.597 adsorberedes på en affinitetssøjle bestående af en D-alanyl-D-alanin-ligand immobiliseret på en agarose-matrix (som beskrevet i europæisk patentskrift nr. 0132117), og der elueredes med en blanding af acetonitril og 0,1 N ammoniumhydroxid (30:70). Yderligere 25 rensning under anvendelse af væskekromatografi med høj ydeevne under anvendelse af silaniseret silicagel som understøttelse og acetonitril, 0,1 M vandig ammoniumformiat (pH 7,3) (1:9) som elueringsmiddel gav UK-68.597 i ren form.
30 EKSEMPEL 2
To liter af inokulummet fremstillet som beskrevet i eksempel 1 anvendtes til at inokulere 70 liter inokulum-35 substrat med sammensætning som beskrevet i eksempel 1 anbragt i en 100 liters fermentor. Dette andet trins inoku-lum inkuberedes ved 28 °C med en omrøringshastighed på DK 167816 B1 21 450 omdrejninger pr. minut og en luftgennemstrømningshastighed på 1 rumfang luft pr. rumfang bouillon pr. minut.
Efter 48 timers inkubation anvendtes inokulum til at ino-kulere 1200 liter substrat med følgende sammensætning an-5 bragt i en 2.000 liters fermentor:
Bestanddel Gram/liter
Cerelose 10 10 Majsstivelse 10
Sojamel 10
Kobaltchlorid 0,002
Mask 0,5
Natriumchlorid 5 15 Calciumcarbonat 1
Fermentoren holdtes på 28 °C under gennemluftning og omrøring ved 600 omdrejninger pr. minut. Efter 96 timer indstilledes hele bouillonens pH til pH 10,0, og der fil-20 treredes gennem en filterpresse forbeklædt med filterhjælp. Det faste materiale indeholdende mikroorganismerne bortkastedes, og filtratet indstilledes til pH 7,0. Filtratet ledtes gennem en søjle af Amberlite® XAD-2 (Rohm & Haas), søjlen vaskedes med vand, og antibiotikum UK-25 68.597 elueredes med 50% vandig acetone.
Eluatet koncentreredes til 12 liter. Efter fortynding med 1,75 liter 0,1 M vandig ammoniumformiat, anbragtes 3,5 liter af dette koncentrat på en C-18 Pre-Pak søjle i et 30 Waters prep 500 højtryksvæskekromatografisystem. Søjlen elueredes efter hinanden med følgende opløsningsmidler: 35
UK 10/0 ΙΟ D I
22
Rumfang
Opløsningsmiddel liter 0,1 M vandig ammonium-5 formiat 3 0,1 M vandig ammonium-formiat, acetonitril (1:19) 4,5 0,1 M vandig ammonium-formiat, acetonitril (1:9) 1,3 10 Vand 0,9
Acetonitril i vand (3:7) 5,5
De antibiotikumrige fraktioner koncentreredes og adsorbe-redes på Amberlite® XAD-2 harpiks. Eluering af harpiksen 15 under anvendelse af 50% vandig acetone, koncentrering af de relevante fraktioner og lyofilisering gav UK-68.597 i saltfri form.
20 25 30 35

Claims (8)

1. Den antibiotiske forbindelse UK-68.597, kende-5 tegnet ved, at den har formlen: Ho ho LXCH^On 10 \ Cl 0 Cl 9. jf H [ 9 HN\ 0 r^N ° hv^[ (f 1 IL jQ 20 ^ ^ OH eller et farmaceutisk acceptabelt kationsalt heraf.
2. Fremgangsmåde til fremstilling af den antibiotiske forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at man dyrker mikroorganismen Actinoplanes sp. ATCC 53533 eller en UK-68.597-producerende mutant heraf med evne til at producere den antibiotiske forbindelse ifølge krav 1 i 30 vandigt dyrkningssubstrat indeholdende en assimilerbar carbonkilde, nitrogen og uorganiske salte under neddykkede aerobe forgæringsbetingelser, indtil der opnås en udvindelig mængde af den antibiotiske forbindelse. 1
3. Fremgangsmåde ifølge krav 2, kendetegnet ved, at den antibiotiske forbindelse fraskilles forgæringssubstratet . LMv 10/0 m Dl 24
4. Fremgangsmåde ifølge krav 2, kendetegnet ved, at den antibiotiske forbindelse udvindes som et my-celiepræparat eller ved at spraytørre hele forgæringssub-stratet. 5
5. Fodermiddel til fjerkræ, svin eller kvæg, kendetegnet ved, at foderet indeholder den antibiotiske forbindelse ifølge krav 1 i en tilstrækkelig mængde til at fremme vækst og/eller forbedre foderudnyttelse og 10 fremme væksten af kvæg eller svin eller kontrollere coc-cidioseinfektioner hos fjerkræ.
6. Fremgangsmåde til at fremme vækst og/eller forøge foderudnyttelse hos svin eller kvæg, kendetegnet 15 ved, at man til svin eller kvæg administrerer en vækstfremmende eller foderudnyttelseseffektivitetsfremmende mængde af den antibiotiske forbindelse ifølge krav 1.
7. Fremgangsmåde ifølge krav 6, kendetegnet 20 ved, at den antibiotiske forbindelse administreres til svin eller kvæg ved at sætte den antibiotiske forbindelse til foderet, der indtages af de pågældende dyr.
8. Biologisk ren kultur af en stamme af slægten Actino-25 planes, kendetegnet ved, at den er stammen ATCC 53533 eller en UK-68.597-producerende mutant heraf. 30 35
DK538787A 1986-10-16 1987-10-15 Glycopeptid antibiotikum, farmaceutisk acceptable kationssalte heraf, og fremgangsmaade til fremstilling deraf, fodermidler indeholdende dette antibiotikum og fremgangsmaade til at oege dyrs vaekst/foderudnyttelse under anvendelse af fodermidlet samt biologisk ren kultur af naevnte antibiotikumproducerende stamme DK167816B1 (da)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB868624806A GB8624806D0 (en) 1986-10-16 1986-10-16 Glycopeptide antibiotic
GB8624806 1986-10-16

Publications (3)

Publication Number Publication Date
DK538787D0 DK538787D0 (da) 1987-10-15
DK538787A DK538787A (da) 1988-04-17
DK167816B1 true DK167816B1 (da) 1993-12-20

Family

ID=10605842

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK538787A DK167816B1 (da) 1986-10-16 1987-10-15 Glycopeptid antibiotikum, farmaceutisk acceptable kationssalte heraf, og fremgangsmaade til fremstilling deraf, fodermidler indeholdende dette antibiotikum og fremgangsmaade til at oege dyrs vaekst/foderudnyttelse under anvendelse af fodermidlet samt biologisk ren kultur af naevnte antibiotikumproducerende stamme

Country Status (12)

Country Link
US (2) US4992369A (da)
EP (1) EP0265143B1 (da)
JP (1) JPS63104998A (da)
AT (1) ATE56023T1 (da)
CA (1) CA1337759C (da)
DE (1) DE3764604D1 (da)
DK (1) DK167816B1 (da)
ES (1) ES2017722B3 (da)
GB (1) GB8624806D0 (da)
GR (1) GR3000885T3 (da)
IE (1) IE60376B1 (da)
PT (1) PT85921B (da)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PT90366A (pt) * 1988-04-28 1989-11-10 Beecham Group Plc Processo para a producao de compostos glicopeptidicos
ATE274524T1 (de) * 1995-07-05 2004-09-15 Aventis Bulk S P A Reinigung von dalbeheptide-antibiotika mittels isoelektrofokussierung

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3923980A (en) * 1972-07-31 1975-12-02 Lilly Co Eli Antibiotic A-2315 and process for preparation thereof
US4038383A (en) * 1975-01-17 1977-07-26 Pfizer Inc. Mixture of antibiotics produced by a species of actinoplanes
GB1533677A (en) * 1976-06-29 1978-11-29 Lepetit Spa Antibiotic
US4169887A (en) * 1978-02-21 1979-10-02 Pfizer Inc. Antibiotics produced by species of actinoplanes
ZA801629B (en) * 1979-04-07 1981-03-25 Lepetit Spa Antibiotic a/16686 and process for the preparation thereof
US4462942A (en) * 1982-07-30 1984-07-31 Eli Lilly And Company A47934 Antibiotic and process for production thereof
US4587218A (en) * 1983-10-21 1986-05-06 Eli Lilly And Company Novel bioconverting microorganisms
US4504467A (en) * 1983-10-21 1985-03-12 Eli Lilly And Company Glycopeptide derivatives
US4558036A (en) * 1984-02-17 1985-12-10 Eli Lilly And Company Actaplanin antibiotics

Also Published As

Publication number Publication date
PT85921A (en) 1987-11-01
AU7978987A (en) 1988-04-21
DK538787D0 (da) 1987-10-15
EP0265143A3 (en) 1988-07-27
ES2017722B3 (es) 1991-03-01
CA1337759C (en) 1995-12-19
JPS63104998A (ja) 1988-05-10
AU584525B2 (en) 1989-05-25
DE3764604D1 (de) 1990-10-04
EP0265143B1 (en) 1990-08-29
GR3000885T3 (en) 1991-11-15
IE60376B1 (en) 1994-07-13
ATE56023T1 (de) 1990-09-15
US4954482A (en) 1990-09-04
EP0265143A2 (en) 1988-04-27
DK538787A (da) 1988-04-17
GB8624806D0 (en) 1986-11-19
IE872775L (en) 1988-04-16
JPH0432080B2 (da) 1992-05-28
US4992369A (en) 1991-02-12
PT85921B (pt) 1990-08-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR900006233B1 (ko) 폴리사이클릭 에테르 항생물질의 제조방법
US4920215A (en) Antibiotic produced by fermentation
CA1337337C (en) Acidic polycyclic ether antibiotic having anticoccidial and growth promotant activity
DK167816B1 (da) Glycopeptid antibiotikum, farmaceutisk acceptable kationssalte heraf, og fremgangsmaade til fremstilling deraf, fodermidler indeholdende dette antibiotikum og fremgangsmaade til at oege dyrs vaekst/foderudnyttelse under anvendelse af fodermidlet samt biologisk ren kultur af naevnte antibiotikumproducerende stamme
CS229936B2 (en) Production method of polycyclic ehter type new acid antibiotic
US5147858A (en) Acidic polycyclic ether useful as an anticoccidial agent and as a growth promotant
US4083963A (en) Polypeptide antibiotic produced by a new subspecies of streptosporangium
US5206263A (en) Acidic polycyclic ether useful as an anticoccidial agent and as a growth promotant
US4637981A (en) Antibiotic A-4696 factor G
US5399675A (en) Acidic polycyclic ether antibiotics and microorganisms useful in the production thereof
US5891727A (en) Acidic polycyclic ether useful as an anticoccidial agent and as a growth promotant
US5478735A (en) Process for producing acidic polycyclic ether antibiotic having anticoccidial and growth promant activity with Actinomadura
GB2243610A (en) Cyclic glycopeptides
WO1989012105A1 (en) Acidic polycyclic ether antibiotic having anticoccidial and growth promotant activity
WO1992006091A1 (en) Anticoccidial and growth promoting polycyclic ether antibiotic

Legal Events

Date Code Title Description
B1 Patent granted (law 1993)
PBP Patent lapsed