DK148034B - Fremgangsmaade til fremstilling af ringforsnaevrede oleandomycinforbindelser - Google Patents

Description

1 148034

Opfindelsen angår en særlig fremgangsmåde til fremstilling af

ringforsnævrende oleandomycinforbindelse med den almene formel I

? «(CHO, ....

R^,, -4 L'''

V

li A. i C>° ^ 1%, 1" "o, ox ,-ch=ch2 V tf O 4„ 2 * OCH3 1 2 hvori R og R hver betegner hydrogen, acetyl eller propionyl, eller farmaceutisk acceptable syreadditionssalte deraf.

Oleandomycinderivater, i hvilke L-oleandrosyl-enheden er erstattet af et hydrogenatom, er beskrevet i USA-patentskrift nr. 3.144.466. Imidlertid er der ikke tidligere beskrevet oleandomycinderivater, i hvilke L-oleandrosyl-enheden er erstattet af andre he-terocycliske grupper.

Forbindelserne med formlen I er værdifulde som antibakteriel-le midler, navnlig i anvendelse hos pattedyr, specielt mennesker.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er ejendommelig ved, at man opvarmer et 4"-alkoxycarbonylsulfamoylderivat af oleandomycin med formlen N(CH,)9

„—o r2o, I

r19, ιι ''•‘f ^ο^γγ

O

I O-SO^-NH-COOR

ch3o δ 4 12 hvori R betegner alkyl med fra 1-5 carbonatomer, og R og R har den ovenfor anførte betydning, i et tørt carbonhydridopløsnings- 148034 2 middel til en temperatur i området fra ca. 130 til ca. 160°C, hvorpå man, om ønsket, overfører en således fremstillet forbindelse i et farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt.

Sædvanligvis varer det nogle få timer, inden reaktionen er praktisk taget afsluttet. F.eks. ved 140°C anvendes typisk en reaktionstid på 1-2 timer. En bekvem måde til udførelse af denne omdannelse omfatter opvarmning af forbindelsen med formlen II, N(CH_)_ o r2o i °tS π 'Vxx o '/ 4

I 0-S0„-NH-C00R

CH3° hvori R1, R2 og R4 har den ovenfor angivne betydning, i xylen under tilbagesvaling. Selv om det ikke er nødvendigt for reaktionens gennemførelse, er det ofte fordelagtigt at tilsætte en lille mængde lavtkogende hjælpeopløsningsmiddel, såsom chloroform, for at opnå en hurtig opløsning af forbindelsen med formlen II. Hjælpeopløsningsmidlet fjernes derpå ved destillation under omdannelsens tidlige trin. Produktet med formlen I kan udvindes ved siiru-pel afdampning efter reaktionens afslutning.

Den omlejring, der sker ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, er uventet som følge af, at, det ikke kunne forudses, at der ville ske en ringforsnævring, når en forbindelse med formlen II opvarmes i et tørt carbonhydridopløsningsmiddel.

Udgangsmaterialerne med formlen II, hvori R betegner hydro- 2

gen eller acetyl eller propionyl, R betegner acetyl eller propio-nyl, og R4 betegner C^_^-alkyl, fremstilles ved omsætning af det tilsvarende oleandomycinderivat med formlen III

148034 3 Ξ\ 2· ?(CH3J2 : ο RO.

• vy vs <ν, > I* ss° Ν ' 'f'«S . \^'V 111 Λ c .

'χΛΥΥ η 11 ο I ΟΗ ch30 1 21 hvori R er H, acetyl eller propionyl og R er acetyl eller pro- pionyl med det pågældende (alkoxycarbonylsulfamoyl)-triethylammoni-

umhydroxid indre salt med formlen IV

(c2h5)3S-so2-n-coor4 IV

4 hvori R er C^_5-alkyl.

Reaktionen udføres sædvanligvis ved at bringe forbindelsen med formlen III i kontakt med et overskud på ca. fire gange af forbindelsen med formlen IV i et ved reaktionen indifferent organisk opløsningsmiddel såsom benzen. Reaktionen udføres sædvanligvis ved ca. 25°C, og den tager sædvanligvis ca. 20 timer til afslutning. Efter fjernelse af urenheder ved filtrering, udvindes den tilsvarende forbindelse med formlen II ved afdampning af opløsningsmidlet.

Udgangsmaterialerne med formlen II, hvori R betegner nydro- 2 4 gen eller acetyl eller propionyl, R betegner hydrogen, og R betegner C^_3-alkyl, fremstilles ud fra den tilsvarende forbindelse II, hvori R2 betegner acetyl eller propionyl ved solvolytisk fjernelse af alka-noylgruppen fra C-2'. Dette udføres ved behandling med en med vand blandbar primær alkanol med fra 1 til 4 carbonatomer (fortrinsvis methanol) ved en temperatur i området fra ca. 15 til ca. 45°C i fra ca. 24 timer til ca. 3 uger. Sædvanligvis anvendes en tilstrækkelig 2 mængde alkanol til at opløse forbindelsen II, hvori R betegner alka-noyl.

Oleandomycinderivaterne med formlen III er enten kendte stoffer, eller de kan fremstilles ud fra kendte fremgangsmåder, eller de er homologe til kendte forbindelser, som kan fremstilles ved ana 148034 4 loge fremgangsmåder. Se f.eks. de amerikanske patentbeskrivelser nr. 3.022,219 og 3.144.466.

De indre (alkoxycarbonylsulfamoyl)-triethylammoniumhydroxid-salte med formlen IV fremstilles ved omsætning af chlorsulfonyliso- 4 cyanat og en tilsvarende alkohol med formlen R OH under tilstedeværelse af triethylamin efter sædvanlige metoder.

1 2

Forbindelserne med formlen I, hvori R og R har den ovenfor anførte betydning, danner syreadditionssalte, og fremstillingen af alle sådanne syreadditionssalte skal betragtes som faldende inden for opfindelsens rammer. Saltene fremstilles ved velkendte metoder såsom f.eks. ved at forene en opløsning af forbindelsen med formlen I i et opløsningsmiddel (f.eks. ether eller acetone) med en opløsning indeholdende et mol-ækvivalent af den pågældende syre. Hvis saltet udskilles, udvindes det ved filtrering, alternativt kan det udvindes ved afdampning af opløsningsmidlet. Selv om det ved terapeutisk anvendelse af en forbindelse, som fremstilles efter fremgangsmåden ifølge opfindelsen, er nødvendigt at anvende et farmaceutisk acceptabelt salt, kan andre salte end sådanne anvendes til et antal forskellige formål. Sådanne formål omfatter isolering og rensning af specielle forbindelser og anvendelse ved mellemreaktioner i forbindelse med fremstilling af farmaceutisk acceptable salte eller tilsvarende forbindelser som frie baser. Af særlig værdi er sulfat-,hydrochlorid-, - hydrobromid-, nitrat-, phosphat-, citrat-, tar-trat-, pamoat-, amsonat-, perchlorat-, sulfosalicylat-, p-toluen-sulfonat-, aspartat- og laurylsulfatsalte.

Oleandomycinderivaterne med formlen I udviser in vitro virkning mod et antal grampositive mikroorganismer, f.eks. Straphylo-coccus aureus og Streptococcus pyrogenes og mod visse gramnegative mikroorganismer, bl.a. sådanne af sfærisk eller ellipsoid form (coc-cer). Deres virkning kan let demonstreres ved in vitro forsøg med forskellige mikroorganismer i et hjerne-hjerte-infusionsmedium ved den sædvanlige to-folds-seriefortyndingsteknik.

Ved sådanne in vitro forsøg er der med forbindelsen med 1 2 formlen I, hvori R betegner en acetylgruppe og R betegner hydrogen, fundet følgende resultater: 148034 5

Microorganismer Stamme nr. MIC (mcg/ml)

Staphylococcus aureus 01A005 3,12

Staphylococcus aureus 01A052 6,25

Staphylococcus aureus 01A111 0,78

Staphylococcus aureus 01A400 6,25

Streptococcus faecalis 02A006 12,5

Streptococcus pyogenes 02C203 1,56

Bacillus subtilis 06A001 1,56

Pasteurella multocida 59A001 50,00

Neisseria sicca 66C000 ^ 0,10

Deres in vitro-aktivitet gør dem egnede til lokal anvendelse i form af salve, creme og lignende, til sterilisationsformål, f.eks. til sygeplejeremedier, og som industrielle antimikrobielle midler, f.eks. til vandbehandling, bekæmpelse af mikroorganismevækst og til bevaring af maling og træ.

Til anvendelse in vitro, f.eks. til lokal administrering, vil det ofte være bekvemt at oparbejde den udvalgte forbindelse med en farmaceutisk acceptabel bærer såsom en vegetabilsk eller mineralsk olie eller en blødgørende creme. Tilsvarende kan forbindelserne opløses eller dispergeres i flydende bærere eller opløsningsmidler såsom vand, alkohol, glykoler eller blandinger deraf eller andre farmaceutisk acceptable indifferente medier, dvs. medier som ikke har skadelig virkning på den aktive bestanddel. Til sådanne formål vil det sædvanligvis være acceptabelt at anvende koncentrationer af de aktive bestanddele på fra ca. 0,01 til ca. 10 vægtprocent, beregnet på vægten af det færdige præparat.

Endvidere er forbindelserne med formlen I aktive over for grampositive og gramnegative mikroorganismer in vivo ved oral og/el-ler parenteral administrering hos dyr omfattende mennesker. Deres in vivo aktivitet bestemmes ved den sædvanlige metode, som omfatter infektion af mus af praktisk taget ensartet vægt med prøveorganismen og påfølgende behandling oralt eller subkutant med forbindelsen, hvis virkning skal prøves. I praksis gives musene, f.eks. 10 stk., en intraperitoneal inoculation af passende fortyndede kulturer indeholdende ca. 1-10 gange LD^Q^-værdien (dvs. den laveste koncentration af organismen, som kræves til frembringelse af dødsfald i 100% af tilfældene). Der foretages samtidigt kontrolforsøg, ved hvilke musene modtager inoculum af svagere fortyndinger som en prøve for 6 148034 eventuel variation i prøveorganismens virulens. Forbindelsen, som skal prøves, administreres en halv time efter inoculeringen og administreringen gentages 4, 24 og 48 timer senere. Overlevende mus følges i fire dage efter sidste behandling, og antallet af overlevende iagttages.

Ved in vivo forsøg med Staphylococcus aureus 01 AO 05 udviste 1 2 forbindelsen med formlen I, hvori R betegner acetyl og R betegner hydrogen, en PD5Q-værdi på 73 mg/kg ved oral admins trering og en PD^-værdi på 38 mg/kg ved parenteral administrering.

Ved anvendelse in vivo kan de pågældende forbindelser administreres oralt eller parenteralt, f.eks. ved subcutan eller intramu-skulær injektion, i en dosis på fra ca. 1 mg/kg til ca. 200 mg/kg af legemsvægten. Det foretrukne dosisområde er fra ca. 5 mg/kg til ca. 100 mg/kg legemsvægt, og det mest foretrukne område fra ca.

5 mg/kg til ca. 50 mg/kg legemsvægt. Egnede bærere til parenteral injektion kan enten være vandige, såsom vand, isotonisk saltvand, isotonisk dextrose eller Ringer' opløsning, eller ikke-vandig såsom fede olier af vegetabilsk oprindelse (bomuldsfrøolie, jordnøddeolie, majsolie, sesamolie), dimethylsulfoxid og andre ikke-vandige bærere, som ikke interfererer med præparatets terapeutiske virkning, og som er utoxiske i det volumen eller det forhold, hvori de anvendes (glycerol, propylenglycol, sorbitol).

Endvidere kan der fremstilles midler, som er egnede til umiddelbar fremstilling af opløsninger før administreringen. Sådanne midler kan omfatte flydende fortyndingsmidler som f.eks. propylenglycol, diethylcarbonat, glycerol, sorbitol etc., stødpudestoffer, hy-aluronidase, lokal anæstetika og uorganiske salte til opnåelse af ønskede farmakologiske egenskaber. Disse midler kan også forenes med forskellige farmaceutisk acceptable, indifferente bærere omfattende faste fortyndingsmidler, vandige bærere, ikke-toxiske organiske opløsningsmidler i form af kapsler, tabletter, sugetabletter, trochisker, tørre blandinger, suspensioner, opløsninger, eliksirer og opløsninger eller suspensioner til parenteral anvendelse. Sædvanligvis anvendes forbindelserne i de forskellige doseringsformer i koncentrationer på fra ca. 0,5 til ca. 90 vægtprocent beregnet på præparatets totalvægt.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen illustreres nærmere ved hjælp af følgende eksempel.

148034 7

Eksempel 11,2'-Di-O-Acetyl-4"-0-(N-[methoxycarbonyl]-sulfamoyl) oleandomycin.

Til en opløsning af 11,5 g, 14,9 mmol, 11,2'-di-O-acetyl-oleandomycin i 100 ml tør benzen blev sat 10,6 g, 44,7 mmol, me-thoxy-(carbonylsulfamoyl)-triethylammoniumhydroxid (indre salt) i portioner i løbet af nogle få minutter. Reaktionsblandingen blev omrørt i 20 timer ved 25°C og derpå filtreret. Filtratet blev langsomt sat til 600 ml ether under kraftig omrøring. Det faste stof, som udskiltes, blev fjernet ved filtrering og omkrystalliseret fra chloroform-ether. Dette gav 12,0 g af den i overskriften nævnte forbindelse.

IR-spektografi af produktet (KBr-skive) viste absorptioner ved 3450, 2940, 1740, 1660, 1615, 1460, 1370, 1280, 1230, 1160, 1105, 1040, 890, 865, 770 og 745 cm"1.

11,2'-Di-O-Acetyl-3-des(oleandrosyloxy)-3-(2"-vinyl-3"-methoxy-tetrahydrofuran-5"-yloxy)oleandomycin.

En blanding af 10,0 g, 10,8 mmol, 11,2'-di-0-acetyl-4"-0-(N-[methoxycarbonyl]-sulfamoyl)oleandomycin, 160 ml tør chloroform og 400 ml tør xylen blev opvarmet under tilbagesvaling. Reaktionsblandingen blev tilbagesvalet i 1| time, idet der var tilsluttet en Dean-Stark-fælde. På dette tidspunkt blev det varme ovenstående opløsningsmiddel fjernet ved dekantering og henstillet til afkøling. Det faste stof, som udskiltes, blev fjernet ved filtrering og bortkastet, hvorpå filtratet blev inddampet i vakuum. Dette gav 5,5 g af et råt produkt i form af et gult skum. Dette rå produkt blev renset ved chromatografi under anvendelse af silicagel som absorptionsmiddel og en 1:1-blanding af chloroform-acetone som elue-ringsmiddel. Udbyttet af det rensede produkt var 1,0 g (12% udbytte) .

H Kernemagnetisk resonans (CDCl^): Absorptioner ved 5,96 (ddd, 1H, J=17,3, 10,2 og 7,3 Hz, C-5") 5,36 (d, 1H, J=17,1 Hz, C-6"), 5,29 (t, 1H, J=4,5 Hz, C-1"), 5,17 (d, 1H, J=10,5 Hz, C-6"). 4,33 (dd, 1H, J=7,3 og 3,7 Hz, C-4"), 3,76 (t, d, 1H, J=5,2 og 3,7 Hz, C-3") , 3,36 (s, 3H, 0CH3) , 2,25 (s, 6H, N(CH3)2), 2,16 (t, 2H, J=5 Hz, C-2") ppm fra tetramethylsilan.

Massespektrum; m/e 754 (P-H) , 627 (P-127), (P-342) , 351,.2191 (C21H31°5 * 1,9 PPm)' 200,1284 (C10H18NO3+ 0,2 base peak, 127,0763 (0?Η1102 + 0,4 ppm), 95,0493 (C^O + 0,3 ppm).

Claims (2)

13 g 148034 C Kernemagnetisk resonans (CDClg): Absorptioner ved 138,3 116,6 (vinylcarbonatomer) ppm fra tetramethylsilan.

1. Fremgangsmåde til fremstilling af ringforsnævrede olean-domycinforbindelser med den almene formel , N (CH,) - ”yS° . * .\'s \ 1 II * V' O- -CH = CH \v Ό'ο, ^ i V f O 41· 3 n OCH3 1 2 hvori R og R hver betegner hydrogen, acetyl eller propionyl, eller farmaceutisk acceptable syreadditionssalte deraf, kendetegnet ved, at man opvarmer et 4"-alkoxycarbonylsulfamoyl-derivat af oleandomycin med formlen N(CH, )_

2. J Δ R ^οί^0,ιγ°^ l kA, | O-SO -NH-COOR ch3o ^