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DE69316633T2 - Nichtmetabolisierbare clomiphene-analoge zur behandlung von tamoxifen-resistenten tumoren - Google Patents

Nichtmetabolisierbare clomiphene-analoge zur behandlung von tamoxifen-resistenten tumoren

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Publication number
DE69316633T2
DE69316633T2 DE69316633T DE69316633T DE69316633T2 DE 69316633 T2 DE69316633 T2 DE 69316633T2 DE 69316633 T DE69316633 T DE 69316633T DE 69316633 T DE69316633 T DE 69316633T DE 69316633 T2 DE69316633 T2 DE 69316633T2
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DE
Germany
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ether
reaction mixture
give
treatment
tamoxifen
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DE69316633T
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DE69316633D1 (de
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Russell J. Cincinnati Oh 45238 Baumann
Alan J. Maineville Oh 45039 Bitonti
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Aventis Pharmaceuticals Inc
Original Assignee
Merrell Dow Pharmaceuticals Inc
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    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07CACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/23Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/24Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C323/25Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
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    • C07C211/00Compounds containing amino groups bound to a carbon skeleton
    • C07C211/43Compounds containing amino groups bound to a carbon skeleton having amino groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the carbon skeleton
    • C07C211/44Compounds containing amino groups bound to a carbon skeleton having amino groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the carbon skeleton having amino groups bound to only one six-membered aromatic ring
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Description

  • Diese Anmeldung betrifft nichtmetabolisierbare Analoga von Clomiphen, von denen gezeigt wurde, daß sie zur Verminderung der Proliferation von Zellinien, die gegen Tamoxifen, einem bekannten Antitumormittel, resistent sind, wirksam sind. Zwei Verbindungen, von denen insbesondere gezeigt wurde, daß sie erfindungsgemäß geeignet sind, wurden vor kurzem offenbart. Murphy und Sutherland im Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism, 57(2), 373 (1983) offenbarten, daß die Verbindung 2-(p-(2-Chlor-1,2-diphenylvinyl)-anilino]- triethylamin auch bei der Wachstumshemmung von MCF-7-Zellen, einer gegenüber Tamoxifen sensitiven Zellinie, wirksam ist. In FR-A-3575 wird die Verbindung 1-[(p-γ- Diethylaminopropyl)-phenyl]-1,2-diphenylchlorethylen offenbart. Zu diesem Zeitpunkt wurde angegeben, daß die Verbindung für die Behandlung von gynäkologischen Störungen und Hypercholesterinämie geeignet ist. In CA:63 535h wird die gleiche Verbindung gezeigt und ihre Verwendung als Inhibitor des Hypophysengonatropins wurde offenbart.
  • Zusammenfassung der Erfindung
  • Insbesondere betrifft die vorliegende Erfindung die Verwendung einer Verbindung der Formel:
  • in der R&sub1; und R&sub2; jeweils aus C&sub1;-C&sub4;-Niederalkylresten ausgewählt sind; X NH oder 5 bedeutet; und n eine ganze Zahl von 1 bis einschließlich4 ist; und wenn n=3 ist, X zusätzlich eine direkte Bindung darstellen kajin; sowie pharmazeutisch verträglicher Salze davon;
  • zur Herstellung eines Arzneimittels für die Behandlung von Tamoxifen-resistenten Tumoren.
  • Ausführliche Beschreibung der Erfindung
  • Wie hier verwendet, bedeutet die Bezeichnung "C&sub1;-C&sub4;" einen gesättigten geradkettigen oder verzweigten Kohlenwasserstoffrest mit einem bis zu vier Kohlenstoffatomen. Die Bezeichnung umfaßt die Methyl-, Ethyl, n-Propyl-, Isopropyl-, n-Butyl-, Isobutylgruppe und dergleichen.
  • Die erfindungsgemäßen Verbindungen können, wie in den Schemata A und B beschrieben, hergestellt werden. Alle Substituenten sind, sofern nicht anders angegeben, wie vorstehend definiert. Die Reaktionsteilnehmer und Ausgangsmaterialien sind für einen Fachmann ohne weiteres erhältlich. Schema A a) Substitution b) Grignard-Reaktiou c) Dehydrierung d) Chlorierung
  • In Stufe a wird 4-Brombenzophenon (2) zu dem Anion des in geeigneter Weise substituierten 2-Dialkylaminoethanthiols (1) gegeben, wobei das durch die Struktur (3) beschriebene Substitutionsprodukt erhalten wird.
  • Zum Beispiel wird 2-Diethylaminoethanthiol-Hydrochlorid mit zwei Äquivalenten einer geeigneten Base, wie Natriummethanolat in einem geeigneten Lösungsmittel, wie Ethanol, umgesetzt, wobei das Anion erzeugt wird. Zum diesem wird ein Äquivalent 4-Brombenzophenon und eine katalytische Menge Kupfer(II)-oxid gegeben. Das Reaktionsgemisch wird etwa 24 Stunden unter Rückfluß erhitzt. Das Lösungsmittel wird unter Vakuum entfernt und der Rückstand wird durch Verfahren, die einem Fachmann bekannt sind, gereinigt. Löse zum Beispiel den Rückstand in einem organischen Lösungsmittel, wie Ether, spüle mit Wasser, trockne über einem geeigneten Trockenmittel, wie wasserfreiem Magnesiumsulfat, filtriere und konzentriere unter Vakuum. Reinige den Rückstand durch Säulenchromatographie unter Verwendung eines geeigneten Eluenten, wie leichtem Petrolether, auf einer geeigneten stationären Phase, wie Alumiumiumoxid, wobei ein ein gereinigtes, durch die Struktur (3) beschriebenes Substitutionsprodukt erhalten wird.
  • In Stufe b wird das durch die Struktur (3) beschriebene Substitutionsprodukt mit einem geeigneten Grignardreagenz behandelt, wobei der durch die Struktur (4) beschriebene Alkohol erhalten wird.
  • Zum Beispiel wird ein passendes Grignardreagenz, wie Benzylmagnesiumchlorid, in einem geeigneten Lösungsmittel, wie Ether, zu dem durch die Struktur (3) beschriebenen Substitutionsprodukt gegeben und etwa 3 Stunden unter Rückfluß erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird durch Gießen in eine gesättigte Ammoniumchloridlösung abgeschreckt. Das Produkt wird durch Extraktionsverfahren aus dem Reaktionsgemisch gewonnen und durch Umkristallisationsverfahren, die einem Fachmann bekannt sind, gereinigt, wobei der durch die Struktur (4) beschriebene Alkohol erhalten wird.
  • In Stufe c wird der durch die Struktur (4) beschriebene Alkohol unter sauren Bedingungen dehydratisiert, wobei das durch die Struktur (5a) beschriebene Olefin erhalten wird.
  • Zum Beispiel wird der durch die Struktur (4) beschriebene Alkohol mit einer geeigneten Säure, wie 10%ige Chlorwasserstoffsäure in einem geeigneten organischen Lösungsmittel, wie Ethanol, behandelt und in einem Dampfbad etwa 4 Stunden erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird dann mit einer geeigneten Base, wie 40%ige Natriumhydroxidlösung, basisch gemacht. Das Produkt wird durch extraktive Verfahren, die einem Fachmann bekannt sind, aus dem Reaktionsgemisch gewonnen, wobei das durch die Struktur (5a) beschriebene Olefin erhalten wird.
  • In Stufe d wird das durch die Struktur (5a) beschriebene Olefin durch die Behandlung mit Chlor chioriert, wobei das durch die Struktur (Sb) beschriebene Vinylchlorid erhalten wird.
  • Zum Beispiel wird das durch die Struktur (5a) beschriebene Olefin in einem geeigneten Lösungsmittel, wie Chloroform, gelöst und mit einem Überschuß an Chlor, das in einem geeigneten Lösungsmittel, wie Ether, gelöst ist, behandelt. Das Reaktionsgemisch wird etwa 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt und etwa 2 Stunden unter Rückfluß erwärmt. Das Lösungsmittel wird dann unter Vakuum enifemt und der Rückstand wird in heißem Ethylacetat gelöst, abgekühlt und filtriert. Das Filtrat wird unter Vakuum konzentriert und durch die Behandlung mit einer geeigneten Base, wie 10%ige Natriumhydroxidlösung, in die freie Base überführt. Die freie Base wird in ein geeignetes Lösungsmittel, wie Ether, extrahiert und dann durch Verfahren, die einem Fachmann bekannt sind, in das Citratsalz überführt, wobei das durch die Struktur (Sb) beschriebene Vinylchlorid erhalten wird. Schema B a) Grignard-Reaktion b) Acetylierung/Dehydrierung b) Chlorierung ACNH d) N-Alkylierung e) Deacetylierung
  • In Stufe a wird 4-Aminobenzophenon (6) mit einem passenden Grignardreagenz behandelt, wobei der durch die Struktur (7) beschriebene Alkohol erhalten wird.
  • Zum Beispiel wird das 4-Aminobenzophenon (6) in einem geeigneten organischen Lösungsmittel, wie Ether, gelöst und ein Überschuß eines passenden Grignardreagenzes, wie Benzylmagnesiumchlorid, in Ether wird langsam zu der Lösung gegeben. Man läßt das Reaktionsgemisch etwa 18-24 Stunden rühren und gießt es dann in eine eiskalte gesättigte Ammoniumchloridlösung. Das Produkt wird durch Extraktionsverfahren aus dem Reaktionsgemisch isoliert und durch Umkristallisationsveffahren, die einem Fachmann bekannt sind, gereinigt, wobei der durch die Struktur (7) beschriebene Alkohol erhalten wird.
  • In Stufe b wird der durch die Struktur (7) beschriebene Alkohol durch die Behandlung mit Essigsäureanhydrid gleichzeitig acetyliert und dehydratisiert, wobei ein durch die Struktur (8a) beschriebenes Olefin erhalten wird.
  • Zum Beispiel wird der durch die Struktur (7) beschriebene Alkohol in einem geeigneten organischen Lösungsmittel, wie Pyridin, gelöst. Ein Überschuß an Essigsäureanhydrid wird langsam zu dem Reaktionsgemisch gegeben, das dann auf einem Dampfbad etwa 18-24 Stunden erhitzt wird. Nach dem Abkühlen wird das Lösungsmittel unter Vakuum entfernt und der Rückstand wird durch Extraktionsverfahren, die einem Fachmann bekannt sind, gereinigt, wobei das durch die Struktur (8a) beschriebene Olefin erhalten wird.
  • In Stufe c wird das durch die Struktur (8a) beschriebene Olefin durch die Behandlung mit Chlor chioriert, wobei das durch die Struktur (8b) beschriebene Vinylchlorid erhalten wird.
  • Zum Beispiel wird das durch die Struktur (8a) beschriebene Olefin in Essigsäure gelöst und zu der Lösung wird langsam ein Überschuß an in Tetrachlorkohlenstoff gelöstem Chlor gegeben. Das Reaktionsgemisch wird etwa 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührt und dann in einem Dampfbad etwa 2 Stunden erhitzt. Nach dem Abkühlen wird das Lösungsmittel unter Vakuum entfernt und der Rückstand wird durch Umkristallisationsverfahren, die einem Fachmann bekannt sind, gereinigt, wobei das durch die Struktur (8b) beschriebene Vinylchlorid erhalten wird.
  • In Stufe d wird däs durch die Struktur (8b) beschriebene Vinylchlorid durch die Behandlung mit einem passend substituierten 2-Dialkylaminoethylchlorid-Rydrochlorid in Gegenwart einer Base N-alkyliert, wobei das durch die Struktur (9a) beschriebene N-alkylierte Vinylchlorid erhalten wird.
  • Zum Beispiel wird das durch die Struktur (8b) beschriebene Vinylchlorid mit einem leichten Überschuß an 2-Diethylaminoethylchlorid-Hydrochlorid und einem Überschuß einer geeigneten Base, wie Kaliumhydroxid, in einem geeigneten organischen Lösungsmittel, wie Aceton, vereinigt. Das Reaktionsgemisch wird etwa 2 Stunden unter Rühren unter Rückflüß erhitzt. Dann wird das Reaktionsgemisch filtriert und unter Vakuum konzentriert. Der Rückstand wird durch Extraktionsverfahren, die einem Fachmann bekannt sind, gereinigt, wobei das durch die Struktur (9a) beschriebenes N-alkylierte Vinylchlorid erhalten wird.
  • In Stufe e wird das durch die Struktur (9a) beschriebene N-alkylierte Vinylchlorid durch Behandlung mit Säure deacyliert, wobei das durch die Struktur (9b) beschrieben deacetylierte Vinylchlorid erhalten wird.
  • Zum Beispiel wird das durch die Struktur (9a) beschriebene N-alkylierte Vinylchlorid mit einem Überschuß einer geeigneten Base, wie 10%ige Chlorwasserstoffsäure, behandelt und auf einem Dampfbad etwa 6 Stunden erhitzt. Nach dem Abkühlen wird das Reaktionsgemisch mit einer geeigneten Base, wie 10%ige Natriumhydroxidlösung, behandelt bis das Reaktionsgemisch basisch ist. Das Produkt wird durch Extraktionsverfahren, die einem Fachmann bekannt sind, isoliert. Es wird dann durch Behandlung mit Zitronensäure in das Citratsalz überführt und durch Umkristallisationsverfahren, die einem Fachmann bekannt sind, gereinigt, wobei das durch die Struktur (9b) beschriebene deacetylierte Vinylchlorid erhalten wird.
  • Die folgenden Beispiele stellen typische Synthesen dar, wie sie durch die Schemata A und B beschrieben werden. Es versteht sich, daß diese Beispiele veranschaulichend sind. Wie in den folgenden Beispielen verwendet, haben die folgenden Bezeichnungen die angegebenen Bedeutungen: "g" bedeutet Gramm, "mol" bedeutet Mol, "mmol" bedeutet Millimol, "ml" bedeutet Milliliter, "ºC" bedeutet Grad Celcius und "mg" bedeutet Milligramm. Beispiel 1
  • 2-[p-(2-Chlor-1,2-diphenylvinyl)-phenylthio]triethylamin-Dihydrogencitrat
  • Schema A, Stufe a: Vereinige 2-Diethylaminoethanthiol-Rydrochlorid (65,5 g, 0,39 mol) und Natriummethanolat (42,1 g, 0,78 mol) in Ethanol (1 l). Erhitze 15 Minuten unter Rückfluß. Gib dann 4-Brombenzophenon (100 g, 0,38 mol) und Kupfer(II)-oxid (1 g) dazu. Erhitze 24 Stunden unter Rückfluß Entferne das Lösungsmittel unter Vakuum und löse den Rückstand in Ether und Wasser. Trenne die Etherschicht ab und extrahiere mit 5%iger Chlorwasserstoffsäure. Behandle den sauren Extrakt bis zur basischen Reaktion mit Natriumhydroxid. Extrahiere dann die wäßrige bäsische Schicht mit Ether. Trockne den Etherextrakt über wasserfreiem Magnesiumsulfat, behandle mit Aktivkohle, filtriere und konzentriere unter Vakuum. Reinige den Rückstand durch Säulenchromatographie (leichter Petrolether auf Aluminiumoxid), wobei das substituierte Benzophenon der Struktur (3) erhalten wird, in der R&sub1; und R&sub2; Ethylgruppen darstellen (80 g, 67%).
  • Schema A, Stufe b: Gib Benzylmagnesiumchlorid (0,2 mol in Ether) zur dem vorstehend hergestellten substituierten Benzophenon (3) (31,3 g, 0,1 mol) in Ether und erhitze 3 Stunden unter Rückfluß Behandle nach dem Abkühlen das Reaktionsgemisch vorsichtig mit gesättigter Ammoniumchloridlösung. Trenne die Schichten, trockne die organische Phase über wasserfreiem Magnesiumsulfat, behandle mit Aktivkohle, filtriere und konzentriere unter Vakuum. Kristallisiere zweimal aus leichtem Petrolether um, wobei der Alkohol der Struktur (4) erhalten wird, in der R&sub1; und R&sub2; Ethylgr-uppen darstellen (31 g, 76%, Schmp. 60-62ºC).
  • Schema A, Stufe c: Vereinige den Alkohol (4) (26 g, 0,064 mol) mit 10%iger Chlorwasserstoffsäure (250 ml) und Ethanol (100 ml). Erhitze das Reaktionsgemisch auf einem Dampfbad 4 Stunden in einem offenen Kolben. Das gesamte Ethanol wird verdampft. Behandle das Reaktionsgemisch mit 40%iger Natriumhydroxidlösung bis es basisch wird. Extrahiere die basische wäßrige Phase mit Ether. Trockne den Etherextrakt über wasserfreiem Magnesiumsulfat, filtriere und konzentriere unter Vakuum, wobei das Olefin der Struktur (5a) erhalten wird, in der R&sub1; und R&sub2; Ethylgruppen darstellen (25 g, 100%).
  • Schema A, Stufe d: Löse das durch die Struktur (5a) beschriebene Olefin (25 g) in Chloroform (500 ml) und behandle mit Chlor (150 ml einer 0,53 M Lösung in Ether). Rühre 2 Stunden und erhitze dann 2 Stunden unter Rückfluß Gib eine zusätzliche Menge Chlor (150 ml einer 0,53 M Lösung in Ether) dazu und erhitze unter Rückfluß bis das DSC anzeigt, daß kein Ausgangsmaterial vorhanden ist. Entferne das Lösungsmittel unter Vakuum und löse den Rückstand in heißem Ethylacetat. Filtriere die Lösung nach dem Abkühlen und konzentriere das Filtrat unter Vakuum. Überführe den Rückstand durch Behandlung mit 10%igem Natriumhydroxid und Ether in die freie Base. Trenne die Schichten und trockne die organische Phase über wasserfreiem Magnesiumsulfat, filtriere und konzentriere unter Vakuum. Behandle den Rückstand mit Zitronensäure (12,8 g) in einer kleinen Menge Butanon und sammle den Feststoff Kristallisiere zweimal aus Butanonlethylacetat (1:1) um. Überführe dies, wie vorstehend durchgeführt, erneut in die freie Base und reinige die freie Base durch Chromatographie (10% Methylenchlorid/schwerer Petrolether, Aluminiumoxid). Behandle die gereinigte Base mit Zitronensäure (2,3 g) in Butanon und sammle den Feststoff Kristallisiere aus Butanon um, wobei die Titelverbindung der Struktur (5b) erhalten wird (5,5 g, Schmp. 107-112ºC Zers.) Elementaranalyse für C&sub2;&sub6;H&sub2;&sub8;CINS C&sub6;H&sub8;O&sub7;: ber. C 62,58; H 5,91; N 2,28. gef. C 62,54; H 6,06; N 2,19. Beispiel 2
  • 2-[p-(2-Chlor-1,2-diphenylvinyl)-anilino]triethylamin-Dihydrogencitrat
  • Schema B, Stufe a: Suspendiere 4-Aminobenzophenon (50 g, 0,25 mol) in Ether (500 ml) und gib langsam innerhalb von 1,5 Stunden Benzylmagnesiumchlorid (1 l einer 1 M Lösung in Ether) dazu. Laß das Reaktionsgemisch über Nacht rühren. Gieße das Reaktionsgemisch vorsichtig in Eis/Arnmoniumchlorid. Trenne die Schichten, wasche die organische Phase mit Wasser, trockne über wasserfreiem Magnesiumsulfat, filtriere und konzentriere unter Vakuum. Löse den Rückstand in heißem Isopropanol. Sannnle nach dem Abkühlen den Feststoff, wobei der Alkohol der Struktur (7) (47 g, 64%) erhalten wird, Schmp. 106-106ºC.
  • Schema B, Stufe b: Vereinige den vorstehend hergestellten Alkohol (7) (40 g, 0,138 mol) und Pyridin (75 ml). Gib langsam Essigsäureanhydrid (50 ml) zu dem Reaktionsgemisch und erhitze über Nacht auf einem Dampfbad. Entferne das Lösungsmittel nach dem Abkühlen unter Vakuum, löse den Rückstand in Ether und wasche mit Wasser. Trockne die organischen Phase über wasserfreiem Magnesiumsulfat, filtriere und konzentriere unter Vakuum, wobei das Olefin der Struktur (8a) (47 g) erhalten wird.
  • Schema B, Stufe c: Löse das vorstehend hergestellte Olefin (8a) in Essigsäure (250 ml) und gib langsam Chlor (350 ml einer 0,46 M Lösung in Tetrachlorkohlenstoff) zu der Lösung. Rühre das Reaktionsgemisch nach der Zugabe 1 Stunde bei Raumtemperatur und erhitze dann 2 Stunden auf einem Dampfbad. Konzentriere nach dem Abkühlen unter Vakuum. Reinige durch Umlrristallisieren aus 95%igem Ethanol, wobei das Vinylchlorid der Struktur (8b) erhalten wird, (14,8 g), Schmp. 189-191ºC.
  • Schema B, Stufe d: Vereinige das vorstehend hergestellte Vinylchlorid (8b) (17,4 g, 0,05 mol), 2-Diethylaminoethylchlorid-Hydrochlorid (10 g, 0,058 mol) und pulverisiertes Kaliumhydroxid (6,7 g, 0,12 mol) in Aceton (150 ml). Erhitze unter Rühren 2 Stunden unter Rückfluß Rltriere das Reaktionsgemisch und konzentriere auf einem Dampfbad. Löse den Rückstand in Ether und Wasser. Trenne die Schichten und wasche die organische Phase mit Wasser, trockne über wasserfreiem Magnesiumsulfat, flltriere und konzentriere unter Vakuum, wobei das N-alkylierte Vinylchlorid der Struktur (9a) erhalten wird, in der R&sub1; und R&sub2; Ethylgruppen darstellen (14 g, 67%).
  • Schema B, Stufe e: Löse die vorstehend hergestellte N-alkylierte Vinylchloridverbindung (9a) in 10%iger Chlorwasserstoffsäure (200 ml), gib konzentrierte Chlorwasserstoffsäure (10 ml) dazu und erhitze 6 Stunden auf einem Dampfbad. Laß das Reaktionsgemisch bei Raumtemperatur über Nacht stehen und behandle dann mit 10%iger Natriumhydroxidlösung bis die Lösung basisch wird. Extrahiere die basische Lösung mit Ether. Wasche die organische Phase mit Wasser, trockne über wasserfreiem Magnesiumsulfat, flitriere und konzentriere unter Vakuum. Behandle den Rückstand mit Zitronensäure (4,3 g) in Butanon, wobei 12 g Rohmaterial erhalten werden. Kristallisiere zweimal aus Butanon um, wobei die Titelverbindung der Struktur (9b) erhalten wird, (7,2 g), Schmp. 121-125ºC.
  • Elementaranalysefür C&sub2;&sub6;H&sub2;&sub9;CLN&sub2; C&sub6;H&sub8;O&sub7;: ber. C 64,36; H 6,25; Cl 5,94. gef. C64,68; H6,27; C16,14.
  • PROUFERATIONSHEMMUNG VON MENSCHLICHEN BRUSTKREBSZELLEN DURCH TRIPHENYLETHYLENE
  • BRUSTKREBSZELLEN:
  • MCF-7: Eine Zellinie, die gegen das Antiöstrogen Tamoxifen sensitiv ist.
  • LY-2: Eine Variante von MCF-7, die gegen Tamoxifen resistent ist.
  • Testverfahren zur Proliferationshemmung:
  • Die Tests wurden auf einer %er Mikrotiterplatte durchgeführt. In jede Vertiefung wurden 5 × 10³ Zellen gegeben. Mittels einer Perkin Eimer Cetus PRO/PETTE wurden
  • Kulturmedium und Arzneimittellösungen in die Vertiefungen gegeben. Bei dem Kulturmedium handelte es sich um IMEM, dem 5% fötales Rinderserum zugesetzt waren. In doppelter Versuchführung wurden acht Arzneimittelkonzentrationen, von 0,078 Mikromolar (µM) bis zu 10 µM getestet. Nach viertägi ger Inkubation wurde das Medium durch frisches arzneimittelhaltiges Medium ersetzt und nach insgesamt 7 Tagen wurden die einzelligen Zellschichten mit Trichloressigsäure fixiert und mit Sulforhodaminfarbstoff angefärbt. Die Absorptionen (492 nm) der extrahierten Farbstofflösungen wurden mit einem Titerek Multiscan- Plattenleser gemessen. Die Dosis-Wirkungs-Kurven (Prozent der Kontrollabsorptionen gegen Arzneimittelkonzentrationen) wurden analysiert, um die IC&sub5;&sub0;-Werte abzuschätzen, die als diejenigen Arzneimittelkonzentrationen (Mikromolar) definiert sind, die die Proliferation zu 50% hemmen. Wie in Tabelle 1 aufgeführt, waren die IC&sub5;&sub0;-Werte von MDL-6866F, MDL-1000F und MDL- 10222F niedriger als die IC&sub5;&sub0;-Werte von Tamoxifen gegenüber der Proliferation von beiden Zelllinien.
  • Bei MDL-6866F, MDL-10007F und MDL-10222F handelt es sich um erfindungsgemäße Verbindungen. MDL-10222F ist 2-[p-(2-Chlor-1,2-diphenylvinyl)-anilinojtriethylamin- Dihydrogencitrat. MDL-10007F ist 2-[p-(2-Chlor-1,2-diphenylvinyl)-phenylthiojtriethylamin- Dihydrogencitrat. MDL-6866F ist 1-[(p-y-Diethylaminopropyl)-phenyll-1,2-diphenylchlorethylen-Dihydrogencitrat. TABELLE 1: TRIPHENYLETHYLEN IC&sub5;&sub0;'s GEGEN BRUSTKREBSZELLEN
  • Die erfindungsgemäßen Verbindungen können auf eine Reihe von Applikationswegen verabreicht werden. Sie sind bei oraler Verabreichung wirksam. Die Verbindungen können auch parenteral (d.h. subkutan, intravenös, intramuskulär, intraperitoneal oder intrathecal) verabreicht werden.
  • Arzneimittel können unter Verwendung von im Fachgebiet bekannten Verfahren hergestellt werden. Typischerweise wird eine schützenden Menge der Verbindung mit einem pharmazeutisch verträglichen Träger gemischt.
  • Für die orale Verabreichung können die Verbindungen in feste oder flüssige Zubereitungen formuliert werden, wie Kapseln, Pillen, Tabletten, Pastillen, Schmelzen, Pulvern, Suspensionen oder Emulsionen. Bei festen Einheitsdosierungsformen kann es sich um Kapseln von herkömmlichen Gelatinetyp, die zum Beispiel oberflächenaktive Mittel, Gleitmittel und inerte Füllstoffe, wie Lactose, Rohrzucker und Maisstärke, enthalten, oder um Zubereitungen mit Langzeitwirkung handeln.
  • In einer anderen Ausführungsform können die erfindungsgemäßen Verbindungen mit herkömmlichen Tablettengrundstoffen, wie Lactose, Rokirzucker und Maisstärke, in Verbindung mit Bindemitteln, wie Gummi arabicum, Maisstärke oder Gelatine, Zerfallsmitteln, wie Kartoffelstärke oder Alginsäure, und einem Gleitmittel, wie Stearinsäure oder Magnesiumstearat, tablettiert werden. Hüssige Zubereitungen werden hergestellt, indem der Wirkstoff in einem wäßrigen oder nicht-wäßrigen, pharmazeutisch verträglichen Lösungsmittel gelöst wird, das auch Suspensionsmittel, Süßungsmittel, Geschmackstoffe und Konservierungsmittel wie im Fachgebiet bekannt, enthalten kann.
  • Für parenterale Verabreichung können die Verbindungen in einem physiologisch verträglichen pharmazeutischen Träger gelöst werden und entweder als eine Lösung oder eine Suspension verabreicht werden. Beispielhaft für geeignete pharmazeutische Träger sind Wasser, Kochsalzlösung, Dextroselösungen, Fructoselösungen, Ethanol oder Öle tierischen, pflanzlichen oder synthetischen Ursprungs. Die pharmazeutischen Träger können auch, wie im Fachgebiet bekannt, Konservierungsstoffe, Puffer usw. enthalten. Wenn die erfindungsgemäßen Verbindungen intrathecal verabreicht werden, können sie auch, wie im Fachgebiet bekannt, in einer cerebrospinalen Flüssigkeit verabreicht werden.
  • Die erfindungsgemäßen Verbindungen können auch topisch verabreicht werden. Dies kann erreicht werden, indem einfach eine Lösung der zu verabreichenden Verbindung hergestellt wird, vorzugsweise unter Verwendung eines Lösungsmittels, von dem bekannt ist, daß es die transdermale Absorption unterstützt, wie Ethanol oder Dimethylsulfoxid (DMSO), mit oder ohne anderen Exeipienten. Vorzugsweise wird eine topische Verabreichung dadurch erreicht, daß ein Pflaster entweder vom Reservoir- und vom porösen Membrantyp oder von der Sorte einer festen Matrix verwendet wird.

Claims (4)

1. Verwendung einer Verbindung der Formel:
in der R&sub1; und R&sub2; jeweils aus C&sub1;-C&sub4;-Niederalkylresten ausgewählt sind; X NH oder S bedeutet; und n eine ganze Zahl von 1 bis einschließlich 4 ist; und wenn n=3 ist, X zusätzlich eine direkte Bindung darstellen kann; sowie pharmazeutisch verträglicher Salze davon;
bei der Herstellung eines Arzneimittels für die Behandlung von Tamoxifen-resistenten Tumoren.
2. Verwendung einer Verbindung nach Anspruch 1, nämlich 2-[p-(2-Chlor-1,2-diphenylvinyl)-nilino]triethyiamin.
3. Verwendung einer Verbindung nach Anspruch 1, nämlich 1-((p-γ-Diethylaminopropyl)- phenyl]-1,2-diphenylchlorethylen.
4. Verbindung 2-[p-(2-Chlor-1,2-diphenylvinyl)-phenylthio]triethylamin.
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