DE68905816T2

DE68905816T2 - Ecdysteroid enthaltende lipidische lamellare phasen oder liposomen.

Info

Publication number: DE68905816T2
Application number: DE89911565T
Authority: DE
Inventors: Frederic Bonte; Alain Meybeck
Original assignee: LVMH Recherche GIE
Current assignee: LVMH Recherche GIE
Priority date: 1988-10-03
Filing date: 1989-10-02
Publication date: 1993-10-14
Anticipated expiration: 2009-10-03
Also published as: EP0436650A1; FR2637182A1; EP0436650B1; US5198225A; WO1990003778A1; DE68905816D1; FR2637182B1; JPH04501410A; JP3009417B2

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft im wesentlichen Zusammensetzungen auf Basis von wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder von Liposomen, die ein Ecdysteroid, vorzugsweise Ecdysteron, oder eines seiner Derivate enthalten; und dieses enthaltende kosmetische, pharmazeutische, insbesondere dermatologische, Zusammensetzungen sowie solche für Seidenzucht oder Pflanzenschutz.
Ecdysteroide sind eine Gruppe von 2,3,14-Trihydroxy-Δ-7-6- ketosteroiden. Man kann α-Ecdyson oder (2β,3β,14α,22[R],25- Pentahydroxy-7-cholesten-6-on); 2-Desoxyecdyson oder (3β,14β,22[R], 25-Tetrahydroxy-5β-7-cholesten-6-on), Ecdysteron oder β-Ecdyson oder 2β,3β,14β,20β,22,25-Hexahydroxy-7-cholesten- 6-on; β-Ecdyson-22-acetat oder 20-Hydroxyecdyson-22-acetat oder 7-Cholesten-2β,3β,14,20,22[R],25-hexol-6-on-22-acetat; 5- Hydroxyecdysteron oder 5β,7-cholesten-2β,3β,5α,14,20,22[R],25- heptahydroxy-6-on; β-2-Desoxyecdyson oder 3β, 14,20, 22[R],25- pentapentahydroxy-5β,7-cholesten-6-on anführen. Ecdysteroide, insbesondere Ecdysteron (manchmal β-Ecdyson oder auch Crustecdyson genannt), sind in der Literatur wohlbekannt und im Merck Index, 10. Ausgabe, 1983, S. 505, Nr. 3470 zitiert.
Man weiß, daß Ecdysteroide, insbesondere Ecdysteron, eine bedeutende Rolle sowohl im Tierreich bei Insekten als auch im Pflanzenreich spielen. Bei den Insekten haben diese Hormone eine Schlüsselfunktion im Wachstum und in der Vermehrung. Ecdysteron greift insbesondere in die verschiedenen Metamorphosen bis zur Bildung des ausgewachsenen Insekts ein (siehe Veröffentlichung von CNRS: Biologie 1990, "Enjeux et Problématiques" von A. Berkaloff et al.).
Bei den Pflanzen ist die Aktivität dieser Substanzen noch nicht ganz klar. Es scheint, daß sie auf die Blütenbildung wirken (Scienca e Cultura (1980), Band 32, Nr. 10, S. 1384- 1390).
Außerdem ist die Verwendung von wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder von Liposomen in kosmetischen oder pharmazeutischen, insbesondere dermatologischen, Zusammensetzungen, in die verschiedene Wirkstoffe eingearbeitet werden, bereits bekannt (FR-A 2 540 381).
Es wurde nunmehr völlig überraschend und unerwartet gefunden, daß die Einarbeitung eines Ecdysteroids, vorzugsweise von Ecdysteron, oder eines Derivats des Ecdysteroids, oder eines das Ecdysteroid oder Ecdysteroidderivat enthaltenden pflanzlichen oder tierischen Extrakts zumindest in einen Teil einer wasserhaltigen lamellaren Lipidphase oder von Liposomen eine heftige Wirkung dieser Substanz bzw. dieses Extrakts bewirkt. Dies betrifft außerdem und ebenfalls ganz unerwartet sämtliche bekannten Aktivitäten des genannten Ecdysteroids oder eines dasselbe enthaltenden Extrakts. Eine noch stärkere Aktivitätssteigerung wurde bei der Aktivität zur Regeneration der Hautstruktur und der alterungshemmenden Aktivität festgestellt.
Folglich kommt es durch die Einarbeitung eines Ecdysteroids, vorzugsweise von Ecdysteron, oder eines Ecdysteroidderivats oder eines das Ecdysteroid enthaltenden pflanzlichen oder tierischen Extrakts zumindest in einen Teil der wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder von Liposomen zu einem Synergieeffekt.
Daher ist es Ziel der vorliegenden Erfindung, das neue technische Problem zu lösen, welches in der Schaffung einer neuen Formulierung aus einem oder mehreren Ecdysteroid(en), vorzugsweise Ecdysteron, oder einem Ecdysteroidderivat oder einem das Ecdysteroid enthaltenden pflanzlichen oder tierischen Extrakt besteht, mit der es möglich ist, die Wirksamkeit desselben zu erhöhen und seine Verwendung in kosmetischen, pharmazeutischen, insbesondere dermatologischen, Zusammensetzungen sowie Zusammensetzungen für die Seidenzucht und phytosanitäre Zusammensetzungen zu ermöglichen.
Die vorliegende Erfindung löst zum ersten Mal dieses neue technische Problem auf zufriedenstellende Weise.
Daher schafft die vorliegende Erfindung gemäß einem ersten Aspekt eine Zusammensetzung auf Basis von wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder von Liposomen, welche dadurch gekennzeichnet ist, daß die wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen bzw. die Liposoffle zumindest teilweise mindestens ein Ecdysteroid oder ein Ecdysteroidderivat oder einen ein solches Ecdysteroid oder Ecdysteroidderivat enthaltenden pflanzlichen oder tierischen Extrakt enthalten.
Gemäß einer speziellen Ausführungsform ist das Ecdysteroid Ecdysteron oder ein Ecdysteronderivat, insbesondere ein acyliertes, hydroxyliertes oder desoxyliertes Derivat davon.
Gemäß einer besonders vorteilhaften Art der Erfindung ist das Ecdysteronderivat ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus β- Ecdyson-2-acetat, β-Ecdyson-3-acetat, β-Ecdyson-2, 3-diacetat, β- Ecdyson-2,3, 22-triacetat, β-Ecdyson-2, 3,22, 25-tetraacetat, 5- Hydroxyecdysteron und 2 -Desoxyecdysteron.
Gemäß einer Ausführungsvariante ist das Ecdysteroid β- Ecdyson oder ein Derivat desselben, insbesondere ein Acetat.
Gemäß einem anderen besonderen Merkmal der Erfindung ist der das Ecdysteroid, vorzugsweise Ecdysteron, enthaltende tierische oder pflanzliche Extrakt ein Extrakt aus Polypodium vulgare, Ajuga decumbens oder Cyanotis arachnoidea.
Gemäß einem anderen besonderen Merkmal der Erfindung ist das Ecdysteroid oder Derivat desselben zumindest teilweise in der Lipidphase der wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder der Liposome eingearbeitet.
In der vorliegenden Beschreibung und den Ansprüchen umfaßt das Wort "Lipid" im Ausdruck "Lipidphase" oder "lamellare Lipidphase" sämtliche Substanzen, die eine fette Kohlenwasserstoffkette, d.h. im allgemeinen mit mehr als 5 Kohlenstoffatomen, aufweisen.
Erfindungsgemäß verwendet man amphiphile Lipide, d.h. solche, die aus Molekülen bestehen, welche eine entweder ionische oder nicht ionische hydrophile Gruppe und eine lipophile Gruppe besitzen, welche amphiphile Lipide in Gegenwart einer wässerigen Phase lamellare Lipidphasen oder Liposome bilden können. Insbesondere seien von diesen Lipiden genannt: Phospholipide, Phosphoaminolipide, Glycolipide, Polyoxyethylen- Fettalkohole, Ester von Polyolen, gegebenenfalls Polyoxyethylenester. Solche Substanzen bestehen beispielsweise aus Ei- oder Sojalecithin, Phophatidylserin, Sphyngomyelin, Ceramid, Cerebrosid oder Polyglycerinoxyethylenstearat.
Gemäß einer vorteilhaften Ausführungsform der Erfindung beträgt die Konzentration an Ecdysteroid zwischen 0,001 und 30 Gew.% der Lipidphase, vorzugsweise zwischen 0,01 und 10 Gew.%, der Lipidphase.
Die Herstellung der wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder der Liposome, die zumindest teilweise ein erfindungsgemäßes Ecdysteroid erhalten, kann nach einem der zur Einarbeitung von aktiven Substanzen, insbesondere Steroiden, in wasserhaltige lamellare Lipidphasen oder Liposome bekannten Verfahren erfolgen.
Das einfachste Verfahren ist jenes, das von Bangham in J. Mol. Biol. (1965) 13, S. 238-252 beschrieben ist und darin besteht, daß die Lipide in flüchtige organische Lösungsmittel eingebracht werden, dann das Lösungsmittel in einem Drehkolben derart abgedampft wird, daß sich ein dünnes Häutchen aus Lipiden im Inneren des Drehkolbens bildet, man dann Wasser in den Drehkolben gibt, wodurch unter Rühren eine Suspension von Liposomen erhalten werden kann. Das Verfahren wird noch besser, wenn man zur Homogenisierung der erhaltenen Liposome Ultraschall einsetzt.
Gemäß einer bevorzugten Ausführungsform verwendet man erfindungsgemäß ein Verfahren zur Zerstäubung der Bestandteile der Lipidphase, auf welche Zerstäubung eine Dispergierung in wässerigem Medium, gegebenenfalls mit anschließender Homogenisierung unter Druck, gemäß den in EP-B1-0087 993 und FR- A-2 534 487 oder EP-B1-107 559 beschriebenen Verfahren folgt.
Gemäß einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung wird das Ecdysteroid oder sein Derivat oder ein dieses enthaltender pflanzlicher oder tierischer Extrakt in die Lipidphase eingearbeitet. Man löst so das Ecdysteroid oder sein Derivat oder einen dieses enthaltenden Extrakt mit den Bestandteilen der Lipidphase vor der Zerstäubung in einem organischen Lösungsmittel, das mindestens ein amphiphiles Lipid, wie Sojalecithin, und gegebenenfalls eine lipophile hydrophobe Verbindung, wie Cholesterin oder β-Sitosterin, enthält. Vorzugsweise wird das Lösungsmittel ausgewählt aus Dich1ormethan, Chloroform oder Methanol oder einer Mischung davon.
Die organische Lösung kann vorteilhafterweise ein Antioxidans, wie β-Tocopherol, enthalten.
Das erhaltene Lipidpulver wird in einem geeigneten wässerigen Medium, z.B. einer PBS-Pufferlösung, einer Glucoselösung oder einer Natriumchloridlösung, dispergiert.
Man erhält so schwach wasserhaltige lamellare Lipidphasen oder eine Lösung von Liposomen, je nachdem, ob man das Lipidpulver in relativ wenig, d.h. etwa 50 bis etwa 90 %, oder mehr, d.h. mehr als 90 %, wässerigem Medium dispergiert hat, wie im genannten Dokument (EP-B1-0087 993) ausgeführt ist.
Gemäß einer vorteilhaften Ausführungsform werden, insbesondere im Fall einer Liposomenzusammensetzung, nachdem die erhaltene Zusammensetzung gegebenenfalls homogenisiert worden ist, die Zusammensetzungen von wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder Liposomen durch Mischen mit einem Gel, wie einem Vinylpolymergel, insbesondere dem unter dem Handelsnamen Carbopol 940 vertriebenen Gel, gelatiniert. Dieses Gelatinierungsverfahren ist auch in der EP-B1-0087 993, insbesondere in den Beispielen, beschrieben.
Die Ecdysteroide oder ihre Derivate, vorzugsweise Ecdysteron oder seine Derivate, werden in isolierter Form oder in Form eines Extrakts aus allen verfügbaren natürlichen Quellen oder auch durch ein chemisches Syntheseverfahren erhalten. Die hauptsächlichen natürlichen Ecdysteroidquellen sind Insekten und vor allem eine große Anzahl von Pflanzen. Es gibt auch eine Reihe von Syntheseverfahren.

Extraktion aus Insekten

Die Menge an in Insekten vorhandenem Ecdysteroid, insbesondere an α- oder β-Ecdyson, ist äußerst gering. Beim Schmetterling Bombyx mori liegt sie z.B. bei 5.10&supmin;&sup6; Gew.% Insekt (siehe A. Butenandt et al., Z. Naturforsch. B., 9, 389, (1954)).
Die Extraktion von Ecdysteroid aus Insekten kann also im allgemeinen kein industrielles Herstellungsverfahren darstellen.
Hingegen ist im Dokument Hunger-Ricci CH-A-478 565 die Extraktion von Ecdysteron aus verschiedenen Puppen zur Herstellung von kosmetischen Zusammensetzungen beschrieben.

Extraktion aus Pflanzen

Die Konzentration an Ecdysteroiden, insbesondere an Ecdysteronen, variiert von Pflanze zu Pflanze. Beispielsweise beträgt die Konzentration an Ecdysteron 0,025 % in den Körnern von Achyranthes aspera, 0,35 % in der Pflanze Sesuvium portulacastrum und 1,2 % bis 2,9 % in Cyanotis arachnoidea, je nach dem, ob man die ganze Pflanze oder die Wurzeln verwendet. Die Prozentangaben verstehen sich in Prozent Trockengewicht.
Unter den Pflanzen, die zur Extraktion der Ecdysteroide, insbesondere des Ecdysterons, verwendet werden können, kann man nennen: Serratula sogdiana und Rhaponticum integrifolium, die den Vorteil haben, daß sie kultiviert werden können (siehe Horticultural Abs. 00051-01546 unter Bezugnahme auf Rastitel'nye Resursy, (1980), Band 16, Nr. 2, S. 193-198 (russisch).
Man kann auch die Extrakte aus:
- Serratula tinctoria (HUT-029 390) ;
- Serratula inermis (SU-1 146 050)
- Achyranthes fauriei, Amaranthacea, (FR-1 525 385) ;
- Cyathula (FR-1 525 385 ) ;
- Ajuga decumbens (JP-46-014 665) ;
- Pfaffia iresinoides (Derwent 88-045806 oder JP-63 002 928) ;
- Pfaffia paniculaza (Derwent 84-052423 od. JP-59-010 600);
- Polypodium vulgare (J. JIZBA et aL. Tetrahedron Letters, (1967), Seite 1689, US 3 527 777, CS 131 136) ;
- Korn von Kaladana (DE-2 201 991) ;
- Ipomea petaloidea (DE-2 834 703) ;
- Silenes (HUT 029 390 et SU 924 051) ;
- Cyanotis arachnoidea (C.A. 89-176352 unter Bezugnahme auf die Publikation v. NIEN SCHUI LIN et al. ACTA CHIMICA SINICA 1978, Band 36, Nr. 2, S. 137-141 (chinesisch). nennen.
Diese Ecdysteroidquellen sind ohne einschränkenden Charakter angeführt und nicht erschöpfend.
Bestimmte Extrakte können neben Ecdysteron auch Acetylderivate enthalten (C.A. 89-176352).
Man kann die erfindungsgemäßen Ecdysteroide auch durch chemische Synthese erhalten (siehe z.B. US-A-3 354 152, US-3 354 154, US-3 378 549, US-3 455 905, FR-1 494 371 US-3 440 241 ; FR-1 524 924 ; US-3 378 549 und FR-A-1 498 237).
Ein Beispiel für ein allgemeines Verfahren zur Extraktion von Ecdysteroid, vorzugsweise Ecdysteron, aus Pflanzen ist in Chem. Pharm. Bull. (1969) 17 (2), 340-2 von S. Imai et al. beschrieben.
Man läßt die frische Pflanze in ihrem fünf fachen Gewicht Methanol auslaugen, homogenisiert und filtriert. Man wiederholt diesen Vorgang ein zweites Mal. Man konzentriert die Extrakte und gibt Wasser zu, bis sich eine 30 %ige Methanol-Wasser-Lösung bildet.
Diese Lösung wird mit Hexan extrahiert. Die 30 %ige Methanolfraktion wird neuerlich konzentriert und mit Ethylacetat extrahiert. Die wässerige Fraktion wird mit n-Butanol extrahiert. Der Butanolextrakt wird danach durch Eindampfen konzentriert und dann mittels Chromatografie auf Kieselgel mit einer Chloroform-Methanol-Mischung behandelt. Man erhält so Ecdysteron nach Umkristallisation aus einer Ethanol-Ethylacetat- Mischung in Form von farblosen Nadeln.
Außerdem ist eine gewisse Anzahl von Ecdysteroiden im Handel erhältlich. Beispielsweise Ecdysteron, 5-Hydroxyecdysteron, 2-Desoxyecdysteron, Ecdysteron-22-acetat, α-Ecdyson und 2-Desoxy-α-ecdyson sind bei SIGMA unter den Referenzen SIGMA H 5142, SIGMA P 9531, SIGMA D 7775, SIGMA H 5267, SIGMA E 9004, SIGMA D 7900 erhältlich.
Die zuvor beschriebenen erfindungsgemäßen Zusammensetzungen, die ein Ecdysteroid, vorzugsweise Ecdysteron, oder dessen Derivate zumindest teilweise in wasserhaltige lamellare Lipidphasen oder in Liposomen eingearbeitet enthalten, finden zahlreiche Anwendungen.
Daher betrifft die Erfindung gemäß einem zweiten Aspekt der Erfindung eine kosmetische oder pharmazeutische, insbesondere dermatologische, Zusammensetzung, die dadurch gekennzeichnet ist, daß sie eine Zusammensetzung auf Basis von wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder von Liposomen, wie zuvor definiert, umfaßt, welche zumindest teilweise ein Ecdysteroid oder ein Ecdysteroidderivat oder einen ein solches Ecdysteroid oder Ecdysteroidderivat enthaltenden pflanzlichen oder tierischen Extrakt enthält.
Der Einsatz von Ecdysteroid in der Kosmetik und Pharmazie bezieht sich insbesondere auf alterungshemmende Produkte, insbesondere Produkte gegen Faltenbildung, Regenerationsprodukte nach Sonnenbestrahlung, Haartonika, narbenbildungsfördernde Produkte insbesondere zur Behandlung von Wunden, Schorf, Venengeschwüren oder Verbrennungen, Produkte gegen Striemenbildung, Produkte zur Verbesserung der Festigkeit der Blutgefäßwände.
Desgleichen haben diese Substanzen in der Pharmazie eine hypoglykämische, hypolipidämische und antiatherosklerotische, analgetische Wirkung. Ecdysteron wird auch zur Herstellung von Vakzinen gegen Parasiten, insbesondere gegen Bilharziose, und zur Herstellung von antiviralen Mitteln verwendet.
Vorzugsweise beträgt die Gewichtskonzentration an Ecdysteroid oder dessen Derivaten in den Zusammensetzungen zwischen 0,001 und 5 %, noch bevorzugter zwischen 0,05 und 1 %, bezogen auf das Gesamtgewicht der Zusammensetzung.
Gemäß einem dritten Aspekt betrifft die vorliegende Erfindung auch noch eine Zusammensetzung für die Seidenzucht, welche dadurch gekennzeichnet ist, daß sie eine erfindungsgemäße Zusammensetzung auf Basis von wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder von Liposomen umfaßt, die zumindest teilweise ein Ecdysteroid oder ein Ecdysteroidderivat oder einen ein solches Ecdysteroid oder Ecdysteroidderivat enthaltenden pflanzlichen oder tierischen Extrakt enthält.
Die Gewichtskonzentration an Ecdysteroid oder seinen Derivaten in dieser Zusammensetzung für die Seidenzucht ist die klassische Konzentration und beträgt im allgemeinen zwischen 0,0001 und 1 Gew.%, vorzugsweise zwischen 0,0005 und 0,01 Gew.%, bezogen auf das Gesamtgewicht der Zusammensetzung.
Die Verwendung von Ecdysteron in der Seidenzucht als Metamorphosefaktor zur Erhöhung der Produktionsausbeute an Seide durch die Raupe Bombyx mori ist bekannt (siehe FR-A-2 212 094, JP 46-014 665; JP 45-037 554).
Die erfindungsgemäßen Zusammensetzungen können so durch Zerstäuben auf die Seidenraupenlarven oder durch Einarbeiten in ihre Nahrung angewendet werden.
Gemäß einem vierten Aspekt betrifft die Erfindung noch eine Pflanzenschutzzusammensetzung, die dadurch gekennzeichnet ist, daß sie eine erfindungsgemäße Zusammensetzung auf Basis von wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder von Liposomen, die zumindest teilweise ein Ecdysteroid oder ein Ecdysteroidderivat oder einen ein solches Ecdysteroid oder Ecdysteroidderivat enthaltenden pflanzlichen oder tierischen Extrakt enthalten, umfaßt.
Die Konzentration ist ebenfalls die übliche Konzentration, nämlich im allgemeinen zwischen 0,0001 und 5 Gew.%, vorzugsweise zwischen 0,0005 und 1 Gew.%, bezogen auf das Gesamtgewicht der Zusammensetzung.
Die Verwendung von Ecdysonen zur Herstellung von Insektiziden oder Nematoziden ist aus der NL-A-67 10529, JP 47- 003550; DE-2 201 991; FR-A-1 498 238, CS-131 136 bekannt.
Bei allen diesen Anwendungen bringt die zumindest teilweise Einarbeitung von Ecdysteroid, vorzugsweise Ecdysteron, in wasserhaltige lamellare Lipidphasen oder in Liposome einen unerwarteten Anstieg der Aktivität dieser Substanzen im Vergleich zu ihrer Aktivität im freien Zustand.
Diese stellt also einen für den Fachmann vollkommen unerwarteten, entscheidenden technischen Fortschritt dar.
Weitere Ziele, Merkmale und Vorteile der Erfindung gehen aus der folgenden erläuternden Beschreibung unter Bezugnahme auf mehrere Ausführungsbeispiele der Erfindung hervor, welche einfach zur Illustration angegeben sind und in keiner Weise den Umfang der Erfindung einschränken sollen.
In den Beispielen verstehen sich die Prozentangaben, wenn nicht anders angegeben, in Gewichtsprozent.

Beispiel 1 gemäß der Erfindung

Herstellung von Ecdysteron enthaltenden Liposomen

Man löst 0,25 g handelsübliches Ecdysteron, 4,5 g Sojalecithin und 0,5 g β-Sitosterin in einer Mischung Dichlormethan- Methanol 4:1. Diese Lösung wird unter reduziertem Druck (etwa 200 mm Hg) in einem auf 45ºC gebrachten Drehkolben eingedampft. Der erhaltene Lipidfilm wird in 119,75 g einer wässerigen Lösung von 0,2 g/l Monokaliumphosphat und 1,44 g/l Dinatriumphosphat unter einstündigem Rühren aufgenommen.
Man erhält so eine Liposomensuspension, die man einer Ultraschallhomogensierung unterzieht (15 min, 150 W, 4ºC). Diese Suspension wird danach in ein Gel übergeführt, indem sie zu gleichen Gewichtsteilen mit einem Carbopol 940 -Gel, das auf herkömmliche Weise mit 1,25 % hergestellt wurde, vermischt wird.
Man erhält so 250 g einer Gelzusammensetzung auf Basis von Liposomen, deren Gehalt an Ecdysteron 0,1 % beträgt.

Beispiele 2 und 3 gemäß der Erfindung

Herstellung von Ecdysteron sowie Ecdysteron-22-acetat enthaltenden wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen

In 300 ml Dichlormethan löst man die folgenden Verbindungen:
Sojalecithin 36,0 g
α-Tocopherol 0,5 g
β- Sitosterin 4,0 g
Ecdysteron* 0,3 g
Ecdysteron-22-acetat* 0,2 g
* handelsüblich
Die erhaltene Lösung wird nach dem im Dokument EP-B1 0087 993 beschriebenen Verfahren bei 55ºC derart zerstäubt, daß eine innige Mischung der Bestandteile in Form eines feinen Pulvers entsteht. 20 g des so erhaltenen zerstäubten Lipidpulvers werden danach in 80 g einer wässerigen Lösung, wie in Beispiel 1 beschrieben, mit einer Wälzmühle dispergiert.
Man erhält so eine schwach wasserhaltige lamellare Lipidphase mit etwa 0,24 % Ecdysteroiden (Beispiel 2).
Anderseits werden 15 g zerstäubte Lipidpulver in 485 g der genannten wässerigen Lösung unter sanftem Rühren 2 h lang dispergiert. Man erhält so eine wässerige Suspension aus stark wasserhaltigen lamellaren Phasen oder Liposomen, die man homogenisieren kann, z.B. mit einem Druckhomogenisator, wie im Dokument EP-B1-0 107 559 beschrieben. Die erhaltene homogenisierte Lösung (Beispiel 3) enthält Liposome, die durchschnittlich 100 nm groß sind.
Der Gehalt an Ecdysteroid beträgt etwa 0,04 Gew.% der wässerigen Suspension.

Beispiel 4

Nachweis der Aktivität der erfindungsgemäßen Verbindungen auf die Regeneration der Hautstruktur

Die Aktivität der erfindungsgemäßen Zusammensetzungen auf die Regeneration der Hautstruktur wurde bei der Ratte durch einen Test über die rasche Narbenbildung einer Hautverletzung nachgewiesen.
50 männliche Ratten Hairless von etwa 250 g werden in 5 Lots zu 10 Tieren aufgeteilt, davon 1 Kontroll-Lot ohne Behandlung.
Jedes mit Natriumpentobarbital anästhesierte Tier wird mit Hilfe einer mit flüssigem Stickstoff gekühlten Metallsonde mit 13 mm Durchmesser, die 15 s auf die Haut beim Schulterblatt appliziert wurde, verletzt.
Die Tiere von 4 Lots werden danach an 5 von 7 Tagen auf der Verletzungsstelle mit 0,5 ml des zu testenden Produkts behandelt.
Die Lots 1 bis 4 werden jeweils mit den folgenden Produkten A bis D behandelt:
Produkt A: Erfindungsgemäße Liposomensuspension gemäß Beispiel 1 mit 0,1 % Ecdysteron
Produkt B: Carbopol 940 -Gel zu 0,625 %, enthaltend 0,1 % freies Ecdysteron, Vergleich
Produkt C: Carbopol 940 -Gel zu 0,625 %, Vergleich
Produkt D: Nach Beispiel 1 hergestellte Liposomensuspension aber ohne Ecdysteron, Vergleich.
Die Tiere werden wähend der Verabreichung täglich beobachtet, um die Entwicklung der sich an der Verletzungsstelle bildenden Kruste zu verfolgen.
Das Verschwinden dieser Kruste bedeutet das Ende des Versuchs und die Tötung der Tiere, deren Haut man für die histologische Untersuchung der behandelten Region entnimmt.
Die zwischen dem Beginn der Behandlung mit den zu testenden Produkten und dem Verschwinden der Kruste verstrichene Zeit wird in Tagen notiert.
Die Anzahl an Narbenbildungstagen pro Lot ist das arithmetische Mittel pro behandeltem Tier. Jedes Mittel wird mit in einem Student-t-Test mit den anderen verglichen. Die Resultate scheinen in der Tabelle I auf. TABELLE I Nr. Lot Produkt Mittel (Tage) Standardabweichung t-Test (Erfindung) (Vergleich) Kontrolle
Diese Resultate zeigen ganz deutlich, daß die Ecdysteron enthaltenden Liposome (Produkt A) eine signifikante bzw. eine gegenüber den anderen hinsichtlich der kutanen Regeneration nach der Verletzung getesteten Produkten stark signifikante Aktivität aufweisen. Insbesondere ist diese Überlegenheit sehr deutlich im Vergleich mit dem Carbopolgel, das eine äquivalente Konzentration an Ecdysteron enthält (Produkt B).
Außerdem liefert die histologische Untersuchung der Narbenbildungszone bei den mit den Produkten A bzw. B behandelten Tieren die in Tabelle II aufscheinenden Resultate. TABELLE II Aufteilung der Tiere nach Narbenbildungsreaktion Intensität der Reaktion Nr. Lot Produkt (Erfindung) (Vergleich) Bezeichnungssakala: - : starke Narbenbildungsreaktion + : mäßige Narbenbildungsreaktion ++ : schwache Narbenbildungsreaktion +++ : normale Strukturen.
Die Narbenbildungsreaktion ist gekennzeichnet durch eine Akanthose der Epidermis mit einer unregelmäßigen Basalschicht, Ödem am dermoepidermalen Übergang, Dermis mit zahlreichen Fibroblasten.
Daher ist die Restrukturierung der Haut nach der Verletzung umso besser, je schwächer die Narbenbildungsreaktion ist.
Es geht dabei auch noch klar hervor, daß das Produkt A (erfindungsgemäße Zusammensetzung) eine bessere Restrukturierungswirkung als das Produkt B (freies Ecdysteron) hat.

Beispiel 5

Erfindungsgemäßes Hautgel

Die Zusammensetzung gemäß Beispiel 1 kann als solche als dermatologische Zusammensetzung in Gelform verwendet werden.
Dieses Gel wird bei Verbrennungen, Rissen oder Wunden während einer Dauer von etwa 8 bis 15 Tagen, vorzugsweise zweimal pro Tag, aufgetragen.
Es ist besonders nützlich zur Beschleunigung der Narbenbildung bei chirurgischen Wunden, insbesondere in der ästhetischen Chirurgie.

Beispiel 6

Erfindungsgemäße kosmetische Zusammensetzung nach Sonnenbestrahlung

Die Zusammensetzung gemäß Beispiel 3, nach Mischen mit 50- 50 (Gew.) mit einem Carbopol 940 -Gel zu 2 % gelatiniert, kann als reparative kosmetische Zusammensetzung von Sonnenelastosis und aktinischer Alterung verwendet werden.
Diese Zusammensetzung wird dabei vorzugsweise zweimal pro Tag drei Wochen lang auf die zu behandelnden Zonen aufgebracht.

Beispiel 7

Erfindungsgemäße kosmetische Creme zur Bekämpfung von Alterungserscheinungen

Die Cremezusammensetzung ist wie folgt:
Sojalecithin 1,95 g
β-Sitosterin 0,05 g
Ecdysteroide 0,2 g
(davon:
Ecdysteron* 0,12 g
Ecdysteron-22-acetat * 0,08 g
Exzipienten für Öl-in-Wasser- Emulsion, + qsp 100 g
Konservierungsmittel + Parfums
* handelsüblich
Man bereitet separat eine Liposomensuspension gemäß Beispiel 3 einerseits und eine Öl-in-Wasser-Emulsion auf Squalanbasis anderseits.
Danach mischt man diese beiden Präparationen, beispielsweise mit einem Propellerrührwerk bei mäßiger Geschwindigkeit in einer Menge von 1 Volumsteil Liposomen Suspension pro 5 Volumsteile Emulsion.
Die erhaltene Creme, wöchentlich auf das Gesicht aufgetragen, läßt die Haut wieder und anhaltend jugendlich und strahlend erscheinen.

Claims

1. Zusammensetzung auf Basis von wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder von Liposomen, dadurch gekennzeichnet, daß die wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen bzw. die Liposome zumindest teilweise ein Ecdysteroid oder ein Ecdysteroidderivat oder einen ein solches Ecdysteroid oder Ecdysteroidderivat enthaltenden pflanzlichen oder tierischen Extrakt enthalten.

2. Zusammensetzung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das Ecdysteroid Ecdysteron oder ein Ecdysteronderivat, insbesondere ein acyliertes, hydroxyliertes oder desoxyliertes Derivat davon, ist.

3. Zusammensetzung nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß das Ecdysteroid ein Ecdysteronderivat, ausgewählt aus β-Ecdyson-2-acetat, β-Ecdyson-3-acetat, β- Ecdyson-2,3-diacetat, β-Ecdyson-2,3,22-triacetat, β-Ecdyson- 2,3,22,25-tetraacetat, 5-Hydroxyecdysteron und 2- Desoxyecdysteron, ist.

4. Zusammensetzung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das Ecdysteroid β-Ecdyson oder ein Derivat desselben, insbesondere ein Acetat, ist.

5. Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß der das Ecdysteroid, vorzugsweise Ecdysteron, enthaltende Extrakt ein Extrakt aus Polypodium vulgare, Ajuga decumbens oder Cyanotis arachnoidea ist.

6. Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, daß das Ecdysteroid oder Derivat desselben bzw. ein dieses enthaltender pflanzlicher oder tierischer Extrakt zumindest teilweise in der Lipidphase der wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder der Liposome eingearbeitet ist.

7. Zusammensetzung nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, daß die Konzentration an Ecdysteroid zwischen 0,001 und 30 Gew.%, vorzugsweise zwischen 0,01 und 10 Gew.%, der Lipidphase beträgt.

8. Kosmetische oder pharmazeutische, insbesondere dermatologische, Zusammensetzung auf Basis von wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder von Liposomen, dadurch gekennzeichnet, daß sie eine Zusammensetzung auf Basis von wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder von Liposomen nach einem der Ansprüche 1 bis 7 aufweist.

9. Zusammensetzung nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, daß die Konzentration an Ecdysteroid zwischen 0,001 und 5 Gew.%, vorzugsweise zwischen 0,05 und 1 Gew.%, bezogen auf das Gesamtgewicht der Zusammensetzung, beträgt.

10. Zusammensetzung für die Seidenzucht, dadurch gekennzeichnet, daß sie eine Zusammensetzung auf Basis von wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder von Liposomen nach einem der Ansprüche 1 bis 6, vorzugsweise mit einer Gewichtskonzentration an Ecdysteroid zwischen 0,0001 und 1 Gew.%, vorzugsweise zwischen 0,0005 und 0,01 Gew.%, bezogen auf das Gesamtgewicht der Zusammensetzung, aufweist.

11. Pflanzenschutzzusammensetzung, dadurch gekennzeichnet, daß sie eine Zusammensetzung auf Basis von wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder von Liposomen nach einem der Ansprüche 1 bis 6, vorzugsweise mit einer Gewichtskonzentration an Ecdysteroid zwischen 0,0001 und 5 Gew.%, vorzugsweise zwischen 0,005 und 1 Gew.%, bezogen auf das Gesamtgewicht der Zusammensetzung, aufweist.

12. Kosmetische Zusammensetzung zur Regeneration der Hautstruktur, wie narbenbildungsfördernde Zusammensetzung oder Zusammensetzung gegen Falten, dadurch gekennzeichnet, daß sie eine Zusammensetzung auf Basis von wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder von Liposomen nach einem der Ansprüche 1 bis 7 oder wie in Anspruch 8 oder 9 definiert aufweist.

13. Pharmazeutische Zusammensetzung zur Regeneration der Hautstruktur, wie narbenbildungsfördernde Zusammensetzung oder Zusammensetzung gegen Falten, dadurch gekennzeichnet, daß sie eine Zusammensetzung auf Basis von wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder von Liposomen nach einem der Ansprüche 1 bis 7 oder wie in Anspruch 8 oder 9 definiert aufweist.