DE60116313T2

DE60116313T2 - Verbindungen zur behandlung der alzheimerischen krankheit

Info

Publication number: DE60116313T2
Application number: DE60116313T
Authority: DE
Inventors: Y. Lawrence FANG; Varghese John
Original assignee: Elan Pharmaceuticals LLC
Current assignee: Elan Pharmaceuticals LLC
Priority date: 2000-06-30
Filing date: 2001-06-29
Publication date: 2006-08-31
Anticipated expiration: 2021-06-30
Also published as: WO2002002518A2; DE60112942D1; BR0111980A; KR20030058959A; ZA200209991B; ATE314343T1; AU2001273113A1; EP1299352B1; MXPA02012560A; WO2002002505A8; CA2410972A1; EP1299349B1; WO2002002506A8; CN1217920C; EP1299349A2; ATE302751T1; ES2252257T3; WO2002002505A2; DE60116313D1; US7034182B2

Description

Hintergrund der Erfindung
Gebiet der Erfindung
Die vorliegende Erfindung betrifft Verbindungen, die bei der Behandlung der Alzheimer-Krankheit und ähnlicher Krankheiten einsetzbar sind.
Beschreibung des Standes der Technik
Alzheimer-Krankheit (Alzheimer's disease, AD) ist eine fortschreitende degenerative Krankheit des Gehirns, die in erster Linie mit dem Altern in Verbindung steht. Eine klinische Präsentation von AD ist durch einen Verlust an Gedächtnis, Wahrnehmung, Denkvermögen, Urteilskraft und Orientierung gekennzeichnet. Wenn die Krankheit fortschreitet, werden auch die motorischen, sensorischen und linguistischen Fähigkeiten beeinträchtigt, bis es zu einer Gesamtverschlechterung mehrerer kognitiver Funktionen kommt. Diese kognitiven Verluste treten allmählich auf, führen aber typischerweise zu einer schweren Beeinträchtigung und eventuell zum Tod in einem Zeitraum von vier bis zwölf Jahren.
Die Alzheimer-Krankheit wird durch zwei pathologische Hauptbeobachtungen im Gehirn charakterisiert: neurofibrilläre Tangles und beta-Amyloid-(oder neuritische)Plaques, die vornehmlich aus einem Aggregat eines Peptidfragments, das als A-beta bekannt ist, bestehen. Personen mit AD weisen charakteristische beta-Amyloid-Ablagerungen im Gehirn (beta-Amyloid-Plaques) und in zerebralen Blutgefäßen (beta-Amyloid-Angiopathie) wie auch neurofibrilläre Tangles auf. Neurofibrilläre Tangles treten nicht nur bei Alzheimer-Krankheit, sondern auch bei anderen Demenz-induzierenden Störungen auf. Bei der Autopsie werden große Zahlen dieser Läsionen im Allgemeinen in Bereichen des menschlichen Gehirns, die für Gedächtnis und Wahrnehmung wichtig sind, gefunden.
Kleinere Anzahlen dieser Läsionen in einer eingeschränkteren anatomischen Verteilung werden in den Gehirnen der meisten alten Menschen gefunden, die keine klinische AD haben. Amyloidogene Plaques und vaskuläre Amyloid-Angiopathie charakterisieren auch die Gehirne von Personen mit Trisomie 21 (Down-Syndrom), hereditärer zerebraler Hämorrhagie mit Amyloidose des Dutch-Typs (HCHWA-D) und anderen neurogenerativen Störungen. beta-Amyloid ist ein definierendes Merkmal von AD, wobei jetzt davon ausgegangen wird, dass es ein ursächlicher Vorläufer oder Faktor bei der Entwicklung der Krankheit ist. Eine Ablagerung von A-beta in Bereichen des Gehirns, die für kognitive Aktivitäten verantwortlich sind, ist ein Hauptfaktor bei der Entwicklung von AD. Beta-Amyloid-Plaques bestehen hauptsächlich aus Amyloid-beta-Peptid (A-beta, manchmal auch als betaA4 bezeichnet). A-beta-Peptid wird durch Proteolyse des Amyloid-Vorläufer-Proteins (APP) abgeleitet und besteht aus 39–42 Aminosäuren. Bei der Prozessierung von APP sind verschiedene Proteasen, die Sekretasen genannt werden, involviert.
Eine Spaltung von APP am N-Terminus des A-beta-Peptids durch beta-Sekretase und am C-Terminus durch eine oder mehrere gamma-Sekretasen bildet den beta-amyloidogenen Weg, d.h., den Stoffwechselweg, durch den A-beta gebildet wird. Eine Spaltung von APP durch alpha-Sekretase produziert alpha-sAPP, eine sezernierte Form von APP, die nicht in einer beta-Amyloid-Plaquebildung resultiert. Dieser alternative Stoffwechselweg schließt die Bildung von A-beta-Peptid aus. Eine Beschreibung der proteolytischen Prozessierungsfragmente von APP wird z.B. in den US-Patenten Nr. 5 441 870, 5 721 130 und 5 942 400 gefunden.
Als das Enzym, das für die Prozessierung von APP an der beta-Sekretase-Spaltungsstelle verantwortlich ist, wurde eine Aspartylprotease identifiziert. Das beta-Sekretase-Enzym wurde unter Verwendung einer veränderten Nomenklatur offenbart, die BACE, Asp und Memapsin umfasst. Siehe z.B. Sinha et al., 1999, Nature 402: 537–554 (S. 501), und die veröffentlichte PCT-Anmeldung WO 00/17369.
Einige Beweislinien zeigen an, dass eine progressive zerebrale Ablagerung von beta-Amyloid-Peptid (A-beta) eine folgenreiche Rolle bei der Pathogenese von AD spielt und kognitiven Symptomen um Jahre oder Dekaden vorausgehen kann. Siehe z.B. Selkoe, 1991, Neuron 6: 487. Die Freisetzung von A-beta aus Nervenzellen, die in Kultur gewachsen sind, und das Vorliegen von A-beta in Zerebrospinalflüssigkeit (CSF), sowohl von normalen Personen als auch von AD-Patienten, wurden bewiesen. Siehe z.B. Seubert et al., 1992, Nature 359: 325–327.
Es wurde vorgeschlagen; dass A-beta-Peptid als Resultat der APP-Prozessierung durch beta-Sekretase akkumuliert; somit ist eine Hemmung der Aktivität dieses Enzyms für die Behandlung von AD wünschenswert. Es wird angenommen, dass eine in vivo-Prozessierung von APP an der beta-Sekretase-Spaltungsstelle ein Geschwindigkeits-limitierender Schritt bei der A-beta-Produktion ist und somit ein therapeutisches Ziel für die Behandlung von AD ist. Siehe z.B. Sabbagh, M., et al, 1997, Alz. Dis. Rev. 3, 1–19.
BACE1-Knockout-Mäuse können kein A-beta produzieren und weisen einen normalen Phänotyp auf. Wenn sie mit transgenen Mäusen, die APP überexprimieren, gekreuzt werden, zeigt die Nachkommenschaft reduzierte Mengen an A-beta in Gehirnextrakten, wenn man Vergleiche zu Kontrollmäusen anstellt (Luo et al., 2001 Nature Neuroscience 4: 231–232). Dieser Beweis stützt weiter den Vorschlag, dass eine Inhibierung von beta-Sekretase-Aktivität und eine Reduktion von A-beta im Gehirn ein therapeutisches Verfahren für die Behandlung von AD und anderen beta-Amyloid-Störungen liefert.
Die veröffentlichte PCT-Anmeldung WO 00/47618 mit dem Titel "Beta-Secretase Enzyme Compositions and Methods" identifiziert das beta-Sekretase-Enzym und Verfahren für seine Verwendung. Diese Publikation offenbart auch Oligopeptid-Inhibitoren, die die aktive Stelle des Enzyms binden und bei der Affinitätssäulenreinigung des Enzyms einsetzbar sind. Zusätzlich offenbart WO 00/77030 Tetrapeptid-Inhibitoren der beta-Sekretase-Aktivität, die auf einem Statinmolekül basieren.
Für die Behandlung der Alzheimer-Krankheit wurden verschiedene pharmazeutische Mittel vorgeschlagen, aber ohne wirklichen Erfolg. US-Patent Nr. 5 175 281 offenbart 21-Aminosteroide als zur Behandlung der Alzheimer-Krankheit nützlich. US-Patent Nr. 5 502 187 offenbart bicyclische heterocyclische Amine als zur Behandlung der Alzheimer-Krankheit nützlich.
US-Patente 4 616 088 und 4 665 193 offenbaren Hydroxyethylamin-Verbindungen infolge ihrer Fähigkeit, Renin zu inhibieren, als Antihypertensiva.
US-Patent 4 636 491 offenbart verschiedene Tetrapeptide, die als Renin-Inhibitoren einsetzbar sind.
US-Patent 4 749 792 offenbart Aminoverbindungen, die aufgrund ihrer Fähigkeit, eine Enkephalin-abbauende Aminpeptidase zu inhibieren, als Analgetika einsetzbar sind.
US-Patent 5 142 056 offenbart Peptid-Derivate mit einem C₂-symmetrischen Dihydroxyethylen-Kern als Inhibitoren retroviraler Protease.
US-Patente 5 461 067 und 5 753 652 offenbaren die Synthese von Inhibitoren der retroviralen Protease.
US-Patent 5 475 138 und 5 631 405 offenbaren Verfahren und verschiedene Zwischenprodukte, die bei der Synthese von ausgewählten Protease-Inhibitoren einsetzbar sind.
US-Patent 5 502 061 offenbart HIV-Protease-Inhibitoren, die einen ungesättigten Carbocyclus oder Heterocyclus am C-Terminus enthalten.
US-Patent 5 545 640 offenbart Verbindungen, die HIV-Protease-Aktivität inhibieren.
US-Patent 5 516 784 offenbart Verbindungen, die gegen Retroviren, einschließlich HIV, aktiv sind.
US-Patent 5 602 175 offenbart Hydroxyethylamin-Verbindungen als Inhibitoren der retroviralen Protease.
US-Patent 5 631 405 offenbart ein Verfahren zur Bildung von Intermediaten, die bei der Synthese ausgewählter Protease-Inhibitoren einsetzbar sind.
US-Patent 5 733 882 und die internationalen Veröffentlichungen WO 93/02057 und WO 93/17003 offenbaren Dipeptid-Analoga als Inhibitoren retroviraler Protease.
US-Patent 5 760 076 offenbart Hydroxyethylaminosulfonamid-Verbindungen als Inhibitoren von Retrovirus-Protease.
US-Patent 5 807 870 offenbart Hydroxyethylamin-Verbindungen für die Inhibierung von HIV-Protease.
US-Patent 5 827 891 offenbart HIV-Protease-Inhibitoren.
US-Patent 5 830 897 offenbart Hydroxyethylaminosulfonamid-Verbindungen als Inhibitoren von Retrovirus-Protease.
US-Patent 5 831 117 offenbart ein Verfahren und Intermediate, die in Inhibitormediaten für retrovirale Protease einsetzbar sind.
US-Patent 5 847 169 offenbart ein Verfahren zur Herstellung von Aminoepoxiden, das die Aktivierung des terminalen Hydroxids eines Aminodiols involviert.
US-Patent 5 849 911 offenbart Hydroxyethylamin-HIV-Protease-Inhibitoren, die mit einer der Aminogruppen Hydrazine bilden; diese Aminogruppe muss auch alkyliert sein.
US-Patent 5 922 770 offenbart Peptid-Derivate, die in der Behandlung von Störungen, die aus einer Defiziens an Wachstumshormon resultieren, einsetzbar sind.
US-Patent 6 013 658 offenbart Peptid-Derivate, die in der Behandlung von Störungen einsetzbar sind, die aus einer Defiziens an Wachstumshormon resultieren.
US-Patent 6 022 872 offenbart Hydroxyethylaminosulfonylharnstoff-Verbindungen als HIV-Protease-Inhibitoren.
Die US-Patent 6 060 476 offenbart Hydroxyethylaminosulfonamid-Verbindungen als HIV-Protease-Inhibitoren.
Die internationale Publikation WO 89/01488 offenbart Renin-inhibierende Peptide mit einem Hydroxyethylen oder Dihydroxyethylen-Isoster in der 10,11-Position des Renin-Substrats Angiotensinogen.
Die internationale Publikation WO 92/00750 offenbart Inhibitoren der retroviralen Protease.
Die internationale Publikation WO 94/04492 offenbart Hydroxyethylamin-Intermediate, die zur Behandlung von retroviralen Krankheiten, z.B. HIV, einsetzbar sind. Diese Offenbarung präsentiert auch Epoxide als Intermediate für die retroviralen Inhibitoren.
Die internationale Publikation WO 95/06030 offenbart Epoxide, Chlormethylketone und Alkohole, die als Intermediate für HIV-Protease-Inhibitoren hergestellt werden, mit einer einzelnen Schutzgruppe an der Amin- und Arylalkyl-Seitenkette, die mit Alkyl, Nitro, Nitril, Alkoxy und Thioalkoxy substituiert ist; eine bevorzugte Seitenkette ist 4-Fluorphenylmethyl.
Die internationale Publikation WO 98/29401 offenbart ein Verfahren für die Herstellung von Aminoepoxiden aus Aminoaldehyden, bei dem der Aminoaldehyd kontinuierlich in eine Mischzone fließt, die ein in situ gebildetes organometallisches Halogenmethyl-Reagens enthält.
Die internationale Publikation WO 98/33795 offenbart Nicht-Peptid-Inhibitoren von Cathepsin D.
Die internationale Publikation WO 98/50342 offenbart Bisaminomethylcarbonyl-Verbindungen als Inhibitoren von Cystein- und Serinproteasen.
Die internationale Publikation WO 00/056335 offenbart Nicht-Peptid-Inhibitoren von Aspartylproteasen. Diese Verbindungen beeinflussen die Prozessierung des Amyloid-Vorläufer-Proteins APP.
EP 0 609 625 offenbart HIV-Protease-Inhibitoren mit nur einem nicht-cyclisierten Stickstoffatom.
Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 5, 721–726 (1995) beschreibt die Synthese von Verbindungen, die für die Inhibierung von HIV-Protease einsetzbar sind, in denen der C- terminale Stickstoff der Hydroxyethylaminverbindung in ein Ringsystem so eingebaut ist, dass ein Piperidin-Ring mit einem Amid-Substituenten neben dem Stickstoff gebildet wird.
Der Hydroxyethylamin-"Kern" oder das Isoster, das in den Verbindungen der vorliegenden Erfindung vorliegt, wurde mit Erfolg auf dem Gebiet der HIV-Protease-Inhibierung verwendet. Viele dieser Hydroxyethylamin-Verbindungen sind bekannt, ebenso ihre Herstellung. Siehe z.B. J. Am. Chem. Soc., 93, 288–291 (1993), Tetrahedron Letters, 28 (45) 5569–5572 (1987), J. Med. Chem, 38 (4), 581–584 (1994), Tetrahedron Letters, 38 (4), 619–620 (1997).
US-Patent 5 648 511 offenbart ein zweifach geschütztes Aralkylepoxid.
US-Patente 5 482 947, 5 508 294, 5 510 349, 5 510 388, 5 521 219, 5 610 190, 5 639 769, 5760 064 und 5 965 588 offenbaren einfach geschützte (substituierte) Aralkylepoxide.
Tetrahedron Lett., 30 (40), 5425–5428 (1989) offenbart ein Verfahren, in dem zweifach geschützte alpha-Aminoaldehyde in die entsprechenden Aminoalkylepoxide transformiert werden.
J. Med. Chem, 36, 2300 (1993) offenbart ein Azid-substituiertes Benzylepoxid.
Tetrahedron Lett., 38, 3175 (1997) offenbart ein Verfahren für die Herstellung von N-BOC-geschützten Epoxiden aus geschützten Aminosäureestern.
J. Med. Chem., 35, 2525 (1992), offenbart Hydroxyethylamin-Inhibitoren der HIV-Protease.
US-Patent 5 481 011 offenbart Arylalkylaminoepoxide, in denen die Aminogruppe durch eine Carbamat-Funktionalität geschützt ist.
Synlett, 6, 902 (2000), offenbart die Herstellung von alpha-Chlorketonen von Aminogeschützten (substituierten) Benzylestern.
US-Patent 5 648 511 offenbart einen zweifach geschützten Aralkylalkohol.
Die US-Patente 5 482 947, 5 508 294, 5 510 349, 5 510 388, 5 521 219, 5 610 190, 5 639 769, 5 760 064 und 5 965 588 offenbaren einfach geschützte (substituierte) Aralkylalkohole.
Die US-Patente 5 482 947, 5 508 294, 5 510 349, 5 510 388, 5 521 219, 5 610 190, 5 639 769, 5 760 064 und 5 965 588 offenbaren ein Verfahren zur Entfernung der Schutzgruppe der monogeschützten (substituierten) Aralkylalkohole unter Erhalt des freien Aminoalkohol-Produktes als das Aminsalz.
US-Patent 5 648 511 offenbart die Entfernung der Aminoschutzgruppe von einem geschützten Aminoalkohol unter Erhalt eines freien Aminoalkohols.
US-Patent 6 150 344 offenbart Phosphat-enthaltende Verbindungen, die bei der Behandlung der Alzheimer-Krankheit nützlich sind.
EP 652 009 A1 offenbart Inhibitoren der Aspartylprotease, welche die beta-Amyloid-Peptid-Produktion in Zellkultur und in vivo inhibiert. Die Verbindungen, die eine intrazelluläre beta-Amyloid-Peptid-Produktion inhibieren, sind bei der Behandlung der Alzheimer-Krankheit nützlich.
WO 00/69262 offenbart eine neue beta-Sekretase und ihre Verwendung in Assays zur Durchmusterung von Arzneimittelkandidaten gegen Alzheimer-Krankheit.
WO 01/00663 offenbart Memapsin 2 (humane beta-Sekretase), wie auch katalytisch aktives, rekombinantes Enzym. Außerdem wird ein Verfahren zur Identifizierung von Inhibitoren von Memapsin 2 sowie zwei Inhibitoren offenbart. Beide Inhibitoren, die offenbart werden, sind Peptide.
WO 01/00665 offenbart Inhibitoren von Memapsin 2, die bei der Behandlung der Alzheimer-Krankheit nützlich sind.
WO 01/19797 offenbart Lactame der Formel -C-C-CO-N-Lactam-W-X-Y-Z, die bei der Behandlung der Alzheimer-Krankheit nützlich sind.
EP 98/14450 und J. Med. Chem., 41 (18), 3387–3401 (1998) offenbaren Aza-Analoga von HIV-Inhibitoren.
Derzeit gibt es keine wirksamen Behandlungen zum Aufhalten, zur Prävention oder zur Umkehr des Fortschreitens der Alzheimer-Krankheit. Daher besteht ein dringender Bedarf an pharmazeutischen Mitteln, die fähig sind, das Fortschreiten der Alzheimer-Krankheit zu verlangsamen und/oder sie als Erstes zu verhindern.
Verbindungen, die wirksame Inhibitoren von beta-Sekretase sind, die eine beta-Sekretase-vermittelte Spaltung von APP inhibieren, die wirksame Inhibitoren der A-beta-Produktion sind und/oder wirksam sind, um Amyloid-beta-Ablagerungen oder -Plaques zu reduzieren, werden für die Behandlung und Prävention einer Krankheit benötigt, welche durch Amyloid-beta-Abscheidungen oder -Plaques gekennzeichnet ist, z.B. AD.
Zusammenfassung der Erfindung
Offenbart wird ein substituiertes Amin der Formel (XV)
worin R₁
-CH₂-Phenyl ist,
das gegebenenfalls mit einem, zwei, drei oder vier der folgenden Substituenten am Phenylring substituiert ist:

(A) C₁-C₆-Alkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃ und C₁-C₃-Alkoxy, und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b -H oder C₁-C₆-Alkyl sind,
(B) C₂-C₆-Alkenyl mit einer oder zwei Doppelbindungen, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -F, -Cl, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy, und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b -H oder C₁-C₆-Alkyl sind,
(C) C₂-C₆-Alkinyl mit einer oder zwei Dreifachbindungen, gegebenenfalls substutiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -F, -Cl, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy, und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b -H oder C₁-C₆-Alkyl sind,
(D) -F, Cl, -Br oder -I,
(F) -C₁-C₆-Alkoxy, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei -F,
(G) -NR_N-2R_N-3, worin R_N-2 und R_N-3 wie unten definiert sind,
(H) -OH,
(I) -C≡N,
(J) C₃-C₇-Cycloalkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -F, -Cl, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy, und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b -H oder C₁-C₆-Alkyl sind,
(K) -CO-(C₁-C₄-Alkyl),
(L) -SO₂-NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind,
(M) -CO-NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, oder
(N) -SO₂-(C₁-C₄-Alkyl),

₂

₃

_N

_N-1

_N

_N-1

(A) R_N-Aryl, worin R_N-Aryl Phenyl ist, das gegebenenfalls mit einem, zwei oder drei der folgenden Substituenten substituiert ist, welche gleich oder unterschiedlich sein können und sind:
(1) C₁-C₆-Alkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind,
(2) -OH,
(3) -NO₂,
(4) -F, -Cl, -Br, -I,
(5) -CO-OH,
(6) -C≡N,
(7) -(CH₂)_0-4-CO-NR_N-2R_N-3, worin R_N-2 und R_N-3 gleich oder unterschiedlich sind und ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus:
(a) -H,
(b) -C₁-C₆-Alkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus:
(i) -OH und
(ii) NH₂,
(c) -C₁-C₆-Alkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei -F, -Cl, -Br oder -I,
(d) -C₃-C₇-Cycloalkyl,
(e) -(C₁-C₂-Alkyl)-(C₃-C₇-cycloalkyl),
(f) -(C₁-C₆-Alkyl)-O-(C₁-C₃-alkyl),
(g) -C₂-C₆-Alkenyl mit einer oder zwei Doppelbindungen,
(h) -C₂-C₆-Alkinyl mit einer oder zwei Dreifachbindungen,
(i) -C₁-C₆-Alkylkette mit einer Doppelbindung und einer Dreifachbindung,
(j) -R_1-Aryl, worin R_1-Aryl Phenyl, 1-Naphthyl, 2-Naphthyl und Indanyl, Indenyl, Dihydronaphthalyl oder Tetralinyl ist, gegebenenfalls am Arylring substituiert mit einem, zwei, drei oder vier der folgenden Substituenten:
(A) C₁-C₆-Alkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃ und C₁-C₃-Alkoxy, und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind,
(B) C₂-C₆-Alkenyl mit einer oder zwei Doppelbindungen, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -F, -Cl, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b -H oder C₁-C₆-Alkyl sind,
(C) C₂-C₆-Alkinyl mit einer oder zwei Dreifachbindungen, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -F, -Cl, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b -H oder C₁-C₆-Alkyl sind,
(D) -F, Cl, -Br oder -I,
(F) -C₁-C₆-Alkoxy, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei -F,
(G) -NR_N-2R_N-3,
(H) -OH,
(I) -C≡N,
(J) C₃-C₇-Cycloalkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -F, -Cl, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b -H oder C₁-C₆-Alkyl sind,
(K) -CO-(C₁-C₄-Alkyl),
(L) -SO₂-NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind,
(M) -CO-NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, oder
(N) -SO₂-(C₁-C₄-Alkyl) sind, (k) -R_1-Heteroaryl, worin R_1-Heteroaryl ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus: Pyridinyl, Pyrimidinyl, Chinolinyl, Benzothienyl, Indolyl, Indolinyl, Pyridazinyl, Pyrazinyl, Isochinolyl, Chinazolinyl, Chinoxalinyl, Phthalazinyl, Imidazolyl, Isoxazolyl, Pyrazolyl, Oxazolyl, Thiazolyl, Indolizinyl, Indazolyl, Benzothiazolyl, Benzimidazolyl, Benzofuranyl, Furanyl, Thienyl, Pyrrolyl, Oxadiazolyl, Thiadiazolyl, Triazolyl, Tetrazolyl, Oxazolopyridinyl, Imidazopyridinyl, Isothiazolyl, Naphthyridinyl, Cinnolinyl, Carbazolyl, beta-Carbolinyl, Isochromanyl, Chromanyl, Tetrahydroisochinolinyl, Isoindolinyl, Isobenzotetrahydrofuranyl, Isobenzotetrahydrothienyl, Isobenzothienyl, Benzoxazolyl, Pyridopyridinyl, Benzotetrahydrofuranyl, Benzotetrahydrothienyl, Purinyl, Benzodioxolyl, Triazinyl, Phenoxazinyl, Phenothiazinyl, Pteridinyl, Benzothiazolyl, Imidazopyridinyl, Imidazothiazolyl, Dihydrobenzisoxazinyl, Benzisoxazinyl, Benzoxazinyl, Dihydrobenzisothiazinyl, Benzopyranyl, Benzothiopyranyl, Coumarinyl, Isocoumarinyl, Chromonyl, Chromanonyl, Pyridinyl-N-oxid, Tetrahydrochinolinyl, Dihydrochinolinyl, Dihydrochinolinonyl, Dihydroisochinolinonyl, Dihydrocoumarinyl, Dihydroisocoumarinyl, Isoindolinonyl, Benzodioxanyl, Benzoxazolinonyl, Pyrrolyl-N-oxid, Pyrimidinyl-N-oxid, Pyridazinyl-N-oxid, Pyrazinyl-N-oxid, Chinolinyl-N-oxid, Indolyl-N-oxid, Indolinyl-N-oxid, Isochinolyl-N-oxid, Chinazolinyl-N-oxid, Chinoxalinyl-N-oxid, Phthalazinyl-N-oxid, Imidazolyl-N-oxid, Isoxazolyl-N-oxid, Oxazolyl-N-oxid, Thiazolyl-N-oxid, Indolizinyl-N-oxid, Indazolyl-N-oxid, Benzothiazolyl-N-oxid, Benzimidazolyl-N-oxid, Pyrrolyl-N-oxid, Oxadiazolyl-N-oxid, Thiadiazolyl-N-oxid, Triazolyl-N-oxid, Tetrazolyl-N-oxid, Benzothiopyranyl-S-oxid und Benzothiopyranyl-S, S-dioxid, worin Heteroaryl gegebenenfalls substituiert ist mit einem, zwei, drei oder vier aus:
(1) C₁-C₆-Alkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind,
(2) C₂-C₆-Alkenyl mit einer oder zwei Doppelbindungen, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -F, -Cl, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b -H oder C₁-C₆-Alkyl sind,
(3) C₂-C₆-Alkinyl mit einer oder zwei Dreifachbindungen, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -F, -Cl, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b -H oder C₁-C₆-Alkyl sind,
(4) -F, -Cl, -Br oder -I,
(6) -C₁-C₆-Alkoxy, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei -F,
(7) -NR_N-2R_N-3,
(8) -OH,
(9) -C≡N,
(10) C₃-C₇-Cycloalkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -F, -Cl, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b -H oder C₁-C₆-Alkyl sind,
(11) -CO-(C₁-C₄-Alkyl),
(12) -SO₂-NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind,
(13) -CO-NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, oder
(14) -SO₂-(C₁-C₄-Alkyl);
(8) -(CH₂)_0-4-CO-(C₁-C₁₂-Alkyl),
(9) -(CH₂)_0-4-CO-(C₂-C₁₂-Alkenyl mit einer, zwei oder drei Doppelbindungen),
(10) -(CH₂)_0-4-CO-(C₂-C₁₂-Alkinyl mit einer, zwei oder drei Dreifachbindungen),
(11) -(CH₂)_0-4-CO-(C₃-C₇-Cycloalkyl),
(12) -(CH₂)_0-4-CO-R_1-Aryl, worin R_1-Aryl wie oben definiert ist,
(13) -(CH₂)_0-4-CO-R_1-Heteroaryl, worin R_1-Heteroaryl wie oben definiert ist,
(14) -(CH₂)_0-4-CO-R_{1-Heterocyclus}, worin R_{1-Heterocyclus} ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Morpholinyl, Thiomorpholinyl, Thiomorpholinyl-S-oxid, Thiomorpholinyl-S,S-dioxid, Piperazinyl, Homopiperazinyl, Pyrrolidinyl, Pyrrolinyl, Tetrahydropyranyl, Piperidinyl, Tetrahydrofuranyl, Tetrahydrothienyl, Homopiperidinyl, Homomorpholinyl, Homothiomorpholinyl, Homothiomorpholinyl-S,S-dioxid, Oxazolidinonyl, Dihydropyrazolyl, Dihydropyrrolyl, Dihydropyrazinyl, Dihydropyridinyl, Dihydropyrimidinyl, Dihydrofuryl, Dihydropyranyl, Tetrahydrothienyl-S-oxid, Tetrahydrothienyl-S,S-dioxid und Homothiomorpholinyl-S-oxid, worin die R_{1-Heterocyclus}-Gruppe durch ein beliebiges Atom der Stamm-R_{1-Heterocyclus}-Gruppe, die durch Wasserstoff substituiert ist, so gebunden ist, dass die neue Bindung an die R_{1-Heterocyclus}-Gruppe das Wasserstoffatom und seine Bindung ersetzt, wobei der Heterocyclus gegebenenfalls mit einer, zwei, drei oder vier der folgenden Gruppen substituiert ist:
(1) C₁-C₆-Alkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind,
(2) C₂-C₆Alkenyl mit einer oder zwei Doppelbindungen, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -F, -Cl, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b -H oder C₁-C₆-Alkyl sind,
(3) C₂-C₆-Alkinyl mit einer oder zwei Dreifachbindungen, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -F, -Cl, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b -H oder C₁-C₆-Alkyl sind,
(4) -F, Cl, -Br oder -I,
(5) C₁-C₆-Alkoxy,
(6) -C₁-C₆-Alkoxy, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei -F,
(7) -NR_N-2R_N-3, worin R_N-2 und R_N-3 wie oben definiert sind,
(8) -OH,
(9) -C≡N,
(10) -C₃-C₇-Cycloalkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -F, -Cl, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b -H oder C₁-C₆-Alkyl sind,
(11) -CO-(C₁-C₄-Alkyl),
(12) -SO₂-NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind,
(13) -CO-NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind,
(14) -SO₂-(C₁-C₄-Alkyl) oder
(15) =O
(15) -(CH₂)_0-4-CO-R_N-4, worin R_N-4 ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Morpholinyl, Thiomorpholinyl, Piperazinyl, Piperidinyl, Homomorpholinyl, Homothiomorpholinyl, Homothiomorpholinyl-S-oxid, Homothiomorpholinyl-S,S-dioxid, Pyrrolinyl und Pyrrolidinyl, wobei jede Gruppe gegebenenfalls mit einem, zwei, drei oder vier C₁-C₆-Alkyl substituiert ist,
(16) -(CH₂)_0-4-CO-O-R_N-5, worin R_N-5 aus der Gruppe ausgewählt ist, bestehend aus
(a) C₁-C₆-Alkyl,
(b) -(CH₂)_0-2-(R_1-Aryl), worin R_1-Aryl wie oben definiert ist,
(c) C₂-C₆-Alkenyl, das eine oder zwei Doppelbindungen enthält,
(d) C₂-C₆-Alkinyl, das eine oder zwei Dreifachbindungen enthält,
(e) C₃-C₇-Cycloalkyl und
(f) -(CH₂)_0-2-(R_1-Heteroaryl), worin R_1-Heteroaryl wie oben definiert ist,
(17) -(CH₂)_0-4-SO₂-NR_N-2R_N-3, worin R_N-2 und R_N-3 wie oben definiert sind,
(18) -(CH₂)_0-4-SO-(C₁-C₈-Alkyl),
(19) -(CH₂)_0-4-SO₂-(C₁-C₁₂-Alkyl)
(20) -(CH₂)_0-4-SO₂-(C₃-C₇-Cycloalkyl)
(21) -(CH₂)_0-4-N(H oder R_N-5)-CO-O-R_N-5, worin R_N-5 gleich oder unterschiedlich sein können und wie oben definiert ist,
(22) -(CH₂)_0-4-N(H oder R_N-5)-CO-N(R_N-5)₂, worin R_N-5 gleich oder unterschiedlich sein können und wie oben definiert ist,
(23) -(CH₂)_0-4-N-CS-N(R_N-5)₂, worin R_N-5 gleich oder unterschiedlich sein können und wie oben definiert ist,
(24) -(CH₂)_0-4-N(-H oder R_N-5)-CO-R_N-2, worin R_N-5 und R_N-2 gleich oder unterschiedlich sein können und wie oben definiert sind,
(25) -(CH₂)_0-4-NR_N-2R_N-3, worin R_N-2 und R_N-3 gleich oder verschieden sein können und wie oben definiert sind,
(26) -(CH₂)_0-4-R_N-4, worin R_N-4 wie oben definiert ist,
(27) -(CH₂)_0-4-O-CO-(C₁-C₆-Alkyl),
(28) -(CH₂)_0-4-O-P(O)-(OR_N-Aryl-1)₂, worin R_N-Aryl-1 -H oder C₁-C₄-Alkyl ist,
(29) -(CH₂)_0-4-O-CO-N(R_N-5)₂, worin R_N-5 wie oben definiert ist,
(30) -(CH₂)_0-4-O-CS-N(R_N-5)₂, worin R_N-5 wie oben definiert ist,
(34) -(CH₂)_0-4-O-(C₁-C₆-Alkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei, drei, vier oder fünf -F)
(35) C₃-C₇-Cycloalkyl,
(36) C₂-C₆-Alkenyl mit einer oder zwei Doppelbindungen, gegebenenfalls substituiert mit C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy oder -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind,
(37) C₂-C₆-Alkinyl mit einer oder zwei Dreifachbindungen, gegebenenfalls substituiert mit C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy oder -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind,
(38) -(CH₂)_0-4-N(-H oder R_N-5)-SO₂-R_N-2, worin R_N-5 und R_N-2 gleich oder verschieden sein können und wie oben beschrieben sind, oder
(39) -(CH₂)_0-4-C₃-C₇-Cycloalkyl,

_A

(I) -C₁-C₁₀-Alkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₆-Alkoxy, O-Phenyl, -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, -OC=ONR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, -S(=O)_0-2R_1-a, worin R_1-a wie oben definiert ist, -NR_1-aC=ONR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, -CONR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, und -S(=O)₂NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind,
(II) -(CH₂)_0-3-(C₃-C₈)Cycloalkyl, worin Cycloalkyl gegebenenfalls mit einem, zwei oder drei Substituenten substituiert sein kann, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₆-Alkoxy, -O-Phenyl, -CO-OH, -CO-O-(C₁-C₄-Alkyl) und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind,
(III) -(CR_A-xR_A-y)_0-4-R_A-Aryl, worin R_A-x und R_A-y sind: (A) -H, und R_A-Aryl Phenyl ist, das gegebenenfalls substituiert ist, wie es oben für R_N-Aryl definiert ist, (XXVIII) -H, (XXX) -C=OR₇, worin R₇ C₁-C₃-Alkyl ist,

_B

(I) -C₁-C₁₀-Alkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₆-Alkoxy, O-Phenyl, -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, -OC=ONR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, -S(=O)_0-2R_1-a, worin R_1-a wie oben definiert ist, -NR_1-aC=ONR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, -CONR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, und -S(=O)₂NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind,
(II) -(CH₂)_0-3-(C₃-C₈)-Cycloalkyl, worin Cycloalkyl gegebenenfalls mit einem, zwei oder drei Substituenten substituiert sein kann, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₆-Alkoxy, -O-Phenyl, -CO-OH, -CO-O-(C₁-C₄-Alkyl) und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind,
(III) -(CR_B-xR_B-y)_0-4-R_B-Aryl, worin R_B-x und R_B-y sind: (A) -H, und R_B-Aryl Phenyl ist, das gegebenenfalls substituiert ist, wie es oben für R_N-Aryl definiert ist, (XXVIII) -H;

Offenbart wird die Verwendung einer Verbindung der Formel (XV)
worin R₁, R₂, R₃, R_N, R_A, R_B und X wie oben für die Verbindung der Formel (XV) definiert sind; und pharmazeutisch annehmbare Salze davon zur Herstellung eines Medikaments zur Verwendung bei der Behandlung eines Patienten oder zur Prävention bei einem Patienten mit einer Krankheit oder einem Zustand, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Alzheimer-Krankheit, zur Unterstützung der Prävention oder Verzögerung des Einsetzens der Alzheimer-Krankheit, zur Behandlung von Patienten mit milder kognitiver Beeinträchtigung (MCI) und zur Prävention oder Verzögerung des Einsetzens der Alzheimer-Krankheit bei denen, bei denen MCI zu AD fortschreiten würde, zur Behandlung des Down-Syndroms, zur Behandlung von Menschen, die hereditäre cerebrale Hämorrhagie mit Amyloidose des Dutch-Typs haben, zur Behandlung von cerebraler amyloider Angiopathie und zu Verhinderung ihrer potentiellen Folgen, d.h. einzelne und wiederkehrende Lappenhämorrhagien, zur Behandlung anderer degenerativer Demenz, einschließlich Demenz gemischten vaskulären und degenerativen Ursprungs, Demenz in Verbindung mit Parkinson-Krankheit, Demenz in Verbindung mit progressiver supranucleärer Lähmung, Demenz in Verbindung mit kortikaler Basaldegeneration, Alzheimer-Krankheit vom diffusen Lewy-Körper-Typ, und von dem, der einer solchen Behandlung bedarf.
Die vorliegende Erfindung stellt Verbindungen, Zusammensetzungen, Kits und Verfahren zur Inhibierung einer beta-Sekretase-vermittelten Spaltung des Amyloid-Vorläufer-Proteins (APP) bereit. Die Verbindungen, Zusammensetzungen und Verfahren der Erfindung sind insbesondere zur Inhibierung der Produktion von A-beta-Peptid und zur Behandlung oder Prävention einer humanen oder veterinären Krankheit oder eines humanen oder veterinären Zustands, der mit einer pathologischen Form von A-beta-Peptid verbunden ist, wirksam.
Die Verbindungen, Zusammensetzungen und Verfahren der Erfindung sind zur Behandlung von Menschen, die Alzheimer-Krankheit (AD) haben, zur Unterstützung der Prävention oder Verzögerung des Einsetzens von AD, zur Behandlung von Patienten mit milder kognitiver Beeinträchtigung (MCI) und zur Prävention oder Verzögerung des Einsetzens von AD bei den Patienten, bei denen andernfalls erwartet würde, dass MCI zu AD fortschreitet, zur Behandlung des Down-Syndroms, zur Behandlung hereditärer zerebraler Hämorrhagie mit Amyloidose des Dutch-Typs, zur Behandlung von zerebraler beta-Amyloid-Angiopathie und zur Verhinderung ihrer potentiellen Folgen, z.B. einzelne und wiederkehrende Lappenhämorrhagien, zur Behandlung anderer degenerativer Demenz, einschließlich Demenz gemischten vaskulären und degene rativen Ursprungs, zur Behandlung von Demenz in Verbindung mit Parkinson-Krankheit, Demenz in Verbindung mit progressiver supranucleärer Lähmung, Demenz in Verbindung mit cortikaler Basaldegeneration und AD vom diffusen Lewy-Körper-Typ.
Die Verbindungen, die in erfindungsgemäßen Verfahren verwendet werden, besitzen beta-Sekretase-inhibierende Aktivität. Die inhibierenden Aktivitäten der in den Verfahren der Erfindung verwendeten Verbindungen werden leicht bewiesen, z.B. unter Verwendung eines oder mehrerer der Assays, die hierin beschrieben sind oder auf dem Fachgebiet bekannt sind.
DETAILLIERTE BESCHREIBUNG DER ERFINDUNG
Die Erfindung umfasst Verbindungen der Formel (XV), die bei der Behandlung und Prävention der Alzheimer-Krankheit nützlich sind. Die Verbindungen gegen die Alzheimer-Krankheit der Formel (XV) werden durch Verfahren, die dem Fachmann gut bekannt sind, aus Ausgangsverbindungen, die dem Durchschnittsfachmann gut bekannt sind, hergestellt. Diese Verfahrenschemie ist dem Fachmann auf diesem Gebiet gut bekannt. Beispiele zur Herstellung verschiedener Verbindungen der Formel (XV) sind in den Schaubildern A–C enthalten. Ein Fachmann wird erkennen, dass es sich um allgemein bekannte Reaktionen der organischen Chemie handelt. Ein auf diesem Gebiet erfahrener Chemiker, der die chemische Struktur der biologisch aktiven Verbindungen der Formel (XV) der Erfindung kennt, wird fähig sein, diese durch bekannte Verfahren aus bekannten Ausgangsmaterialien ohne zusätzliche Informationen herzustellen. Die unten angegebene Erläuterung ist nicht notwendig, wird aber als für den Fachmann, der die Verbindungen der Erfindung herstellen möchte, als hilfreich erachtet.
SCHAUBILD A stellt ein allgemeines Verfahren zur Synthese von Verbindungen der Erfindung dar. Die Verbindungen der Formel (XV) gegen die Alzheimer-Krankheit werden, ausgehend von dem entsprechenden Epoxid (I), hergestellt. Die Epoxide (I) sind dem Fachmann gut bekannt oder können leicht aus bekannten Verbindungen durch dem Fachmann gut bekannte Verfahren hergestellt werden. Die Verbindungen der Formel (XV) der vorliegenden Erfindung haben wenigstens zwei enantiomere Zentren, welche vier Enantiomere liefern. Das erste dieser enantiomeren Zentren stammt aus dem Epoxid-Ausgangsmaterial (I). Wenn ein gewünschtes Enantiomer bevorzugt ist, so ist es bevorzugt, das gewünschte Enantiomer (S oder R) kommerziell zu erhalten oder zu produzieren, anstatt ein Enantiomer-unreines Gemisch zu produzieren und dann das gewünschte Enantiomer abzutrennen. Für das Epoxid (I) ist R₁:
-CH₂-Phenyl,
das gegebenenfalls mit einem, zwei, drei oder vier der folgenden Substituenten am Phenylring substituiert ist:

(A) C₁-C₆-Alkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃ und C₁-C₃-Alkoxy, und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b H oder C₁-C₆-Alkyl sind,
(B) C₂-C₆-Alkenyl mit einer oder zwei Doppelbindungen, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus -F, -Cl, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b -H oder C₁-C₆-Alkyl sind,
(C) C₂-C₆-Alkinyl mit einer oder zwei Dreifachbindungen, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus -F, -Cl, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy und -NR_1-aR_1-b, wobei R_1-a und R_1-b -H oder C₁-C₆-Alkyl sind,
(D) -F, -Cl, -Br oder -I,
(F) -C₁-C₆-Alkoxy, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei -F,
(G) -NR_N-2R_N-3, wobei R_N-2 und R_N-3 wie unten definiert sind,
(H) -OH,
(I) -C≡N,
(J) C₃-C₇-Cycloalkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus -F, -Cl, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b -H oder C₁-C₆-Alkyl sind,
(K) -CO-(C₁-C₄-Alkyl),
(L) -SO₂-NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind,
(M) -CO-NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, oder
(N) -SO₂-(C₁-C₄-Alkyl).

Das Epoxid (I) enthält auch die Gruppen R₂ und R₃. Im Epoxid (I) sind R₂ und R₃ jeweils:
(I) -H.
Bevor die Synthese begonnen wird, muss die freie Aminogruppe des Epoxids (I) mit einer Aminoschutzgruppe geschützt werden. Es gibt eine Reihe von Verfahren, die dem Fachmann zur Durchführung dieses Schritts bekannt sind. Aminoschutzgruppen sind dem Fachmann gut bekannt. Siehe z.B. "Protecting Groups in Organic Synthesis", John Wiley and Sons, New York, N. Y., 1981, Kapitel 7; "Protecting Groups in Organic Chemistry", Plenum Press, New York, N. Y., 1973, Kapitel 2. Die Funktion der Aminoschutzgruppe besteht darin, die freie Amino-Funktionalität (-NH₂) während nachfolgender Reaktionen an dem Epoxid (I) zu schützen, welche nicht gut ablaufen würden, entweder weil die Aminogruppe reagieren und in einer Weise funktionalisiert würde, die mit der Notwendigkeit, für anschließende Reaktionen frei zu sein, nicht übereinstimmt, oder die freie Aminogruppe die Reaktion stören würde. Wenn die Aminoschutzgruppe nicht länger benötigt wird, wird sie durch dem Fachmann gut bekannte Verfahren entfernt. Per Definition muss die Amino-Schutzgruppe durch Verfahren, die dem Fachmann gut bekannt sind, leicht entfernbar sein.
Eine geeignete Amino-SCHUTZGRUPPE wird ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus t-Butoxycarbonyl, Benzyloxycarbonyl, Formyl, Trityl, Acetyl, Trichloracetyl, Dichloracetyl, Chloracetyl, Trifluoracetyl, Difluoracetyl, Fluoracetyl, 4-Phenylbenzyloxycarbonyl, 2-Methylbenzyloxycarbonyl, 4-Ethoxybenzyloxycarbonyl, 4-Fluorbenzyloxycarbonyl, 4-Chlor benzyloxycarbonyl, 3-Chlorbenzyloxycarbonyl, 2-Chlorbenzyloxycarbonyl, 2,4-Dichlorbenzyloxycarbonyl, 4-Brombenzyloxycarbonyl, 3-Brombenzyloxycarbonyl, 4-Nitrobenzyloxycarbonyl, 4-Cyanobenzyloxycarbonyl, 2-(4-Xenyl)isopropoxycarbonyl, 1,1-Diphenyleth-1-yloxycarbonyl, 1,1-Diphenylprop-1-yloxycarbonyl, 2-Phenylprop-2-yloxycarbonyl, 2-(p-Toluyl)prop-2-yloxycarbonyl, Cyclopentanyloxycarbonyl, 1-Methylcyclopentanyloxycarbonyl, Cyclohexanyloxycarbonyl, 1-Methylcyclohexanyl-oxycarbonyl, 2-Methylcyclohexanyloxycarbonyl, 2-(4-Toluylsulfonyl)ethoxycarbonyl, 2-(Methylsulfonyl)ethoxycarbonyl, 2-(Triphenylphosphino)ethoxycarbonyl, Fluorenylmethoxycarbonyl, 2-(Trimethylsilyl)ethoxycarbonyl, Allyloxycarbonyl, 1-(Trimethylsilylmethyl)prop-1-enyloxycarbonyl, 5-Benzisoxalylmethoxycarbonyl, 4-Acetoxybenzyloxycarbonyl, 2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl, 2-Ethinyl-2-propoxycarbonyl, Cyclopropylmethoxycarbonyl, 4-(Decyloxy)benzyloxycarbonyl, Isobornyloxycarbonyl und 1-Piperidyloxycarbonyl, 9-Fluorenylmethylcarbonat, -CH-CH=CH₂ und Phenyl-C(=N-)-H. Es ist bevorzugt, dass die Schutzgruppe t-Butoxycarbonyl (BOC) und Benzyloxycarbonyl (CBZ) ist; es ist bevorzugter, dass die Schutzgruppe t-Butoxycarbonyl ist. Einem Fachmann werden die bevorzugten Verfahren zur Einführung einer t-Butoxycarbonyl- oder Benzyloxycarbonyl-Schutzgruppe geläufig sein, und er kann zusätzlich für eine Anleitung T. W. Green und P. G. M. Wuts in "Protective Groups in Organic Chemistry", John Wiley and Sons, 1991, zu Rate ziehen.
Sobald das Epoxid (I) geschützt ist, beginnt die Synthese mit einer Reaktion eines geschützten Epoxids (I) mit einem Hydrazin. Das Hydrazin liefert R_A und R_B, die in der Endverbindung (XV) vorliegen. Für das Hydrazin ist R_A:

(I) -C₁-C₁₀-Alkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₆-Alkoxy, -O-Phenyl, -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, -OC=ONR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, -S(=O)_0-2R_1-a, worin R_1-a wie oben definiert ist, -NR_1-aC=ONR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, -C=ONR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, und -S(=O)₂NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind,
(II) -(CH₂)_0-3-(C₃-C₈)-Cycloalkyl, worin Cycloalkyl gegebenenfalls mit einem, zwei oder drei Substituenten substituiert sein kann, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₆-Alkoxy, -O-Phenyl, -CO-OH, -CO-O-(C₁-C₄-Alkyl) und -NR_1-aR_1-b, wobei R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind,
(III) -(CR_A-xR_A-y)_0-4-R_A-Aryl, wobei R_A-x und R_A-y (A) -H sind, und R_A-Aryl Phenyl ist, das gegebenenfalls substituiert ist, wie es oben für R_N-Aryl definiert ist. (XXVIII) -H, (XXX) -C=OR₇, worin R₇ C₁-C₃-Alkyl ist.

Das Hydrazin stellt auch R_B in der Endverbindung (XV) bereit. Für das Hydrazin ist R_B:

(I) -C₁-C₁₀-Alkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₆-Alkoxy, -O-Phenyl, -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, -OC=ONR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, -S(=O)_0-2R_1-a, worin R_1-a wie oben definiert ist, -NR_1-aC=ONR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, -C=ONR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, und -S(=O)₂NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind,
(II) -(CH₂)_0-3-(C₃-C₈)-Cycloalkyl, worin Cycloalkyl gegebenenfalls mit einem, zwei oder drei Substituenten substituiert sein kann, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₆-Alkoxy, -O-Phenyl, -CO-OH, -CO-O-(C₁-C₄-Alkyl) und -NR_1-aR_1-b, wobei R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind,
(III) -(CR_B-xR_B-y)_0-4-R_B-Aryl, wobei R_B-x und R_B-y sind: (A) -H, und R_B-Aryl Phenyl ist, das gegebenenfalls substituiert ist, wie es oben für R_N-Aryl definiert ist; oder (XXVIII) -H.

Es ist bevorzugt, dass R_A und R_B unabhängig C₁-C₈-Alkyl, (CH₂)_0-3-(C₃-C₇)-Cycloalkyl oder (CR_A-xR_A-y)_0-4-R_A-Aryl sind. Es ist bevorzugter, dass R_A -(CH₂)_0-3-(C₃-C₇)-Cycloalkyl oder (CR_A-xR_A-y)_0-4-R_A-Aryl ist.
Am bevorzugtesten ist R_B (CR_C-xR_C-y)_0-4-R_C-Aryl.
Das Epoxid (I) wird in heißem Isopropanol mit dem Hydrazin kombiniert, was in der selektiven Bildung des Hydrazins (II) resultiert, das durch Alkylierung des nicht-substituierten Stickstoffs entsteht (M. Nakakata, Tetrahedron Letters 1993, 6095–6098). Eine Monoacylierung des Hydrazin-NH-NH- mit Benzyloxycarbonylchlorid oder einem anderen Acylierungsmittel liefert (III) und verringert die Reaktivität dieser Gruppe für eine weitere Acylierung, unabhängig davon, an welchen Hydrazinstickstoff die erste Acylgruppe gebunden wird (B. Gisin, Helv. Chim. Acta 1970, Bd. 53, 1030–1043. S. Shinagawa, Chem. Pharm. Bull. 1981, Bd. 29, 3630–3638). Eine Entfernung der tert.-Butoxycarbonyl-Schutzgruppe von (III) wird das freie Amin (IV) liefern, das an die Verbindung gekoppelt wird, die R_N liefert. R_N ist:
(I) R_N-1-X_N-, worin X_N für -CO- steht,
worin R_N-1 ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus:

(A) R_N-Aryl, worin R_N-Aryl Phenyl ist, das gegebenenfalls mit einem, zwei oder drei der folgenden Substituenten substituiert ist, welche gleich oder unterschiedlich sein können und sind:
(1) C₁-C₆-Alkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind,
(2) -OH,
(3) -NO₂,
(4) -F, -Cl, -Br, -I,
(5) -CO-OH,
(6) -C≡N,
(7) -(CH₂)_0-4-CO-NR_N-2R_N-3, worin R_N-2 und R_N-3 gleich oder unterschiedlich sind und ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus:
(a) -H,
(b) -C₁-C₆-Alkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus:
(i) -OH und
(ii) -NH₂,
(c) -C₁-C₆-Alkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei -F, -Cl, -Br oder -I,
(d) -C₃-C₇-Cycloalkyl,
(e) -(C₁-C₂-Alkyl)-(C₃-C₇-cycloalkyl),
(f) -(C₁-C₆-Alkyl)-O-(C₁-C₃-alkyl),
(g) -C₂-C₆-Alkenyl mit einer oder zwei Doppelbindungen,
(h) -C₂-C₆-Alkinyl mit einer oder zwei Dreifachbindungen,
(i) -C₁-C₆-Alkylkette mit einer Doppelbindung und einer Dreifachbindung,
(j) -R_1-Aryl, worin R_1-Aryl wie oben definiert ist, und
(k) -R_1-Heteroaryl, worin R_1-Heteroaryl wie oben definiert ist,
(8) -(CH₂)_0-4-CO-(C₁-C₁₂-Alkyl),
(9) -(CH₂)_0-4-CO-(C₂-C₁₂-Alkenyl) mit ein, zwei oder drei Doppelbindungen,
(10) -(CH₂)_0-4-CO-(C₂-C₁₂-Alkinyl mit ein, zwei oder drei Dreifachbindungen),
(11) -(CH₂)_0-4-CO-(C₃-C₇-Cycloalkyl),
(12) -(CH₂)_0-4-CO-R_1-Aryl, worin R_1-Aryl wie oben definiert ist,
(13) -(CH₂)_0-4-CO-R_1-Heteroaryl, worin R_1-Heteroaryl wie oben definiert ist,
(14) -(CH₂)_0-4-CO-R_{1-Heterocyclus}, worin R_{1-Heterocyclus} wie oben definiert ist,
(15) -(CH₂)_0-4-CO-R_N-4, worin R_N-4 ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus Morpholinyl, Thiomorpholinyl, Piperazinyl, Piperidinyl, Homomorpholinyl, Homothiomorpholinyl, Homothiomorpholinyl-S-oxid, Homothiomorpholinyl-S,S-dioxid, Pyr rolinyl und Pyrrolidinyl, worin jede Gruppe gegebenenfalls substituiert ist mit einem, zwei, drei oder vier C₁-C₆-Alkyl;
(16) -(CH₂)_0-4-CO-O-R_N-5, worin R_N-5 ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus:
(a) C₁-C₆-Alkyl,
(b) -(CH₂)_0-2-(R_1-Aryl), worin R_1-Aryl wie oben definiert ist,
(c) C₂-C₆-Alkenyl, das eine oder zwei Doppelbindungen enthält,
(d) C₂-C₆-Alkinyl, das eine oder zwei Dreifachbindungen enthält,
(e) C₃-C₇-Cycloalkyl und
(f) -(CH₂)_0-2-(R_1-Heteroaryl), worin R_1-Heteroaryl wie oben definiert ist,
(17) -(CH₂)_0-4-SO₂-NR_N-2R_N-3, worin R_N-2 und R_N-3 wie oben definiert sind,
(18) -(CH₂)_0-4-SO-(C₁-C₈-Alkyl),
(19) -(CH₂)_0-4-SO₂-(C₁-C₁₂-Alkyl)
(20) -(CH₂)_0-4-SO₂-(C₃-C₇-Cycloalkyl)
(21) -(CH₂)_0-4-N(H oder R_N-5)-CO-O-R_N-5, worin R_N-5 gleich oder unterschiedlich sein können und wie oben definiert ist,
(22) -(CH₂)_0-4-N(H oder R_N-5)-CO-N(R_N-5)₂, worin R_N-5 gleich oder unterschiedlich sein können und wie oben definiert ist,
(23) -(CH₂)_0-4-N-CS-N(R_N-5)₂, worin R_N-5 gleich oder unterschiedlich sein können und wie oben definiert ist,
(24) -(CH₂)_0-4-N(-H oder R_N-5)-CO-R_N-2, worin R_N-5 und R_N-2 gleich oder unterschiedlich sein können und wie oben definiert sind,
(25) -(CH₂)_0-4-NR_N-2R_N-3, worin R_N-2 und R_N-3 gleich oder verschieden sein können und wie oben definiert sind,
(26) -(CH₂)_0-4-R_N-4, worin R_N-4 wie oben definiert ist,
(27) -(CH₂)_0-4-O-CO-(C₁-C₆-Alkyl),
(28) -(CH₂)_0-4-O-P(O)-(OR_N-Aryl-1)₂, worin R_N-Aryl-1 -H oder C₁-C₄-Alkyl ist,
(29) -(CH₂)_0-4-O-CO-N(R_N-5)₂, worin R_N-5 wie oben definiert ist,
(30) -(CH₂)_0-4-O-CS-N(R_N-5)₂, worin R_N-5 wie oben definiert ist,
(34) -(CH₂)_0-4-O-(C₁-C₆-Alkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei, drei, vier oder fünf -F)
(35) C₃-C₇-Cycloalkyl,
(36) C₂-C₆-Alkenyl mit einer oder zwei Doppelbindungen, gegebenenfalls substituiert mit C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy oder -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind,
(37) C₂-C₆-Alkinyl mit einer oder zwei Dreifachbindungen, gegebenenfalls substituiert mit C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy oder -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind,
(38) -(CH₂)_0-4-N(-H oder R_N-5)-SO₂-R_N-2, worin R_N-5 und R_N-2 gleich oder verschieden sein können und wie oben beschrieben sind, oder
(39) -(CH₂)_0-4-C₃-C₇-Cycloalkyl,

Die Verbindung, die die Quelle für R_N ist, kann mit beliebigen bekannten Kupplungsmitteln gekuppelt werden, von denen Carbodiimid ein Beispiel ist. Eine Spaltung der Acylhydrazin-Bindung liefert die Verbindungen (XV).
SCHAUBILD A' gibt ein spezifischeres Beispiel für ein Verfahren zum Synthetisieren von Verbindungen der Erfindung (XV). Die Anti-Alzheimer-Verbindungen der Formel (XV) werden, ausgehend von dem Ausgangs-Epoxid (I), hergestellt. Die Epoxide (I) sind dem Fachmann gut bekannt oder können in einfacher Weise aus bekannten Verbindungen durch Verfahren, die dem Fachmann gut bekannt sind, hergestellt werden. Die Verbindungen der Formel (XV) der vorliegenden Erfindung haben wenigstens zwei enantiomere Zentren, die vier Enantiomere ergeben. Das erste dieser enantiomeren Zentren stammt aus dem Epoxid-Ausgangsmaterial (I). Wenn ein gewünschtes Enantiomer bevorzugt ist, ist es bevorzugt, das gewünschte Enantiomer (S oder R) im Handel zu beziehen oder zu produzieren anstatt ein Enantiomer-unreines Gemisch zu produzieren und dann das gewünschte Enantiomer abzutrennen.
Die beispielhafte Synthese beginnt mit der Umsetzung des Epoxids (I) mit einem aromatischen Hydrazin in heißem Isopropanol und resultiert in der selektiven Bildung der Hydrazine (II), die durch Alkylierung des nicht-substituierten Stickstoffs entstehen (M. Nakakata, Tetrahedron Letters 1993, 6095–6098). Eine Monoacylierung des Hydrazin-NH-NH- mit Benzyloxycarbonylchlorid oder einem anderen Acylierungsmittel liefert (III) und reduziert die Reaktivität dieser Gruppe für eine weitere Acylierung, unabhängig davon, an welchen Hydrazinstickstoff die erste Acylgruppe gebunden wird (B. Gisin, Helv. Chim. Acta 1970, Bd. 53, 1030–1043. S. Shinagawa, Chem. Pharm. Bull. 1981, Bd. 29, 3630–3638). Eine Entfernung der tert.-Butoxycarbonyl-Schutzgruppe von (III) wird das freie Amin (IV) liefern, das unter Verwendung von Carbodiimid oder anderen gut bekannten Kupplungsmitteln an die Isophthalsäure (XIV) gekuppelt wird. Eine Spaltung der Acylhydrazin-Bindung liefert eine erfindungsgemäße Verbindung (XV).
SCHAUBILD B bietet ein anderes Beispiel für ein Verfahren, das zur Herstellung von Verbindungen der Erfindung eingesetzt werden kann. Eine selektive Acylierung von Methylhydrazin an dem substituierten Stickstoff (D. Butler, J. Medicinal Chemistry 1971, Bd. 14, 1052–1054) wird Acylhydrazin VI liefern. Eine Behandlung dieses Hydrazids mit Epoxid I in heißem Isopropanol wird Addukt VII liefern (S. Wang, J. Medicinal Chemistry 1997, Bd. 40, 937–941. G. Bold, J. Medicinal Chemistry 1998, Bd. 41, 3387–3401). Eine Abspaltung der tert.-Butoxycarbonyl-Schutzgruppe und eine Kupplung an Isophthalsäure (XIV) wird eine Verbindung der Erfindung (XV) liefern.
SCHAUBILD C zeigt ein allgemeines Verfahren zur Herstellung von erfindungsgemäßen Verbindungen (XV), worin X für O steht. Ein allgemeines Verfahren zur Synthese von Verbindungen (XV) der Erfindung, worin X für O steht, beginnt mit einem geschützten Epoxid (I). Das Epoxid (I) dient dazu, R₁, R₂ und R₃ des Endproduktes (XV) zu liefern, wobei die Diskussion dieser Verbindung, die oben angeführt wurde, hier gleichermaßen Anwendung findet. Das Epoxid wird mit einem Hydroxylamin, das die Formel R_A-O-NH₂ hat, geöffnet. Das Hydroxylamin dient sowohl dazu, den Epoxidring zu öffnen, als auch R_A, für das Endprodukt (XV) bereitzustellen. Sobald das Hydroxylamin mit dem Epoxid (I) umgesetzt wurde, wird das Addukt (XI) gebildet. Addukt (XI) hat R₁, R₂, R₃ und R_A der Verbindungen (XV) der Erfindung. Die möglichen Identitäten von R₁, R₂, R₃ und R_A, wie auch die oben diskutierte Schutzgruppe, finden auch für Addukt (XI) Anwendung. Der nächste Schritt bei der Synthese von Verbindungen (XV) der Erfindung, worin X für O steht, ist eine Abspaltung der Schutzgruppe. Die Schutzgruppen und Verfahren zur Abspaltung, die oben diskutiert wurden, finden auch auf diese Verbindungen Anwendung. Nachdem die Schutzgruppe vom Addukt XI abgespalten wurde, beinhaltet der nächste Schritt eine Acylierung mit der Quelle für R_N.
SCHAUBILD C' bietet ein anderes spezifischeres, erläuterndes Beispiel für ein Verfahren zur Herstellung von Verbindungen (XV) der Erfindung, worin X für O steht. Eine Öffnung des Epoxids (I) mit O-Benzylhydroxylamin liefert das Addukt (XI) (S. Rosenberg, J. Medicinal Chemistry 1990, Bd. 33, 1582–1590). Eine Abspaltung der tert.-Butoxycarbonyl-Schutzgruppe und eine Acylierung mit Isophthalsäure (wie z.B. durch das Verfahren unten hergestellt) liefert die Zielverbindung (XIII).
Die Herstellung von Isophthalsäure zur Verwendung in der obigen Synthese kann z.B. durch die Synthese unten, die sich auf SCHAUBILD D unten bezieht, erreicht werden. Methylisophthalat (1 Äquiv., 11,1 mmol) wurde in 50:50 THF:DMF (20 ml) vor der Zugabe von 1,1'-Carbonyldiimidazol (CDI) (1,2 Äquiv., 13,3 mmol) bei Umgebungstemperatur gelöst. Nach Zugabe von CDI wurde eine Farbänderung von farblos nach gelb sowie eine Gasentwicklung (CO₂) beobachtet. Nachdem die Gasentwicklung nachgelassen hatte (etwa eine Minute oder weniger), wurde das Amin (1,2 Äquiv., 13,3 mmol), gelöst in DMF, und Diisopropylethylamin (12 Äquiv., 13,3 mmol) zugesetzt. Nach 12-stündigem Rühren bei Umgebungstemperatur wurde die Reaktion zwischen gesättigtem wässrigen NH₄Cl und Ethylacetat verteilt, und die wässrige Schicht wurde zweimal mit Ethylacetat extrahiert. Die organischen Extrakte wurden dann mit gesättigten wässrigen Lösungen von NaHCO₃ und NaCl gewaschen und über wasserfreiem MgSO₄ oder Na₂SO₄ getrocknet. Eine Filtration des Trocknungsmittels und Entfernung von Lösungsmitteln im Vakuum lieferte den roh-weißen Feststoff oder ein klares Öl. Eine Reini gung dieser Verbindungen wurde bei Bedarf durch Chromatographie an Silicagel mit 30–40% Ethylacetat in Hexanen durchgeführt (80–90% Ausbeute).
Das Methylisophthalatmonoalkyl- oder -dialkylamid (1 Äquiv., 11,1 mmol) wurde dann mit LiOH·H₂O (3 Äquiv., 33,3 mmol) in einer Mindestmenge von 1:2:1 THF:MeOH:H₂O behandelt und über Nacht bei Umgebungstemperatur rühren gelassen. Nach 12 Stunden wurden die Lösungsmittel im Vakuum entfernt, und es wurde anschließend zwischen H₂O und Ethylacetat verteilt. Wenn Emulsionen eine Trennung der zwei Schichten verhinderten, wurde eine geringe Menge an Kochsalz zugesetzt, um eine Trennung zu unterstützen. Die wässrige Schicht wurde einmal mit Ethylacetat extrahiert (um nicht-umgesetztes Ausgangsmaterial zu entfernen). Die wässrige Schicht wurde dann mit konzentrierter HCl bis pH ≤ 3 angesäuert. Die trüb-weiße, saure, wässrige Lösung, die so erhalten wurde, wurde dann dreimal mit Ethylacetat extrahiert. Diese kombinierten organischen Extrakte wurden über wasserfreiem MgSO₄ oder Na₂SO₄ getrocknet. Ein Abfiltrieren des Trocknungsmittels und eine Entfernung von Lösungsmitteln im Vakuum lieferten den roh-weißen Feststoff. Das Mono- oder Dialkylamidisophthalat wurde roh in der nächsten Reaktion verwendet (Ausbeute 90–100%).
Verbindungen der Erfindung können geometrische oder optische Isomere, wie auch Tautomere, enthalten. Somit umfasst die Erfindung alle Tautomeren und reinen geometrischen Isomeren, z.B. die geometrischen E- und Z-Isomeren, wie auch Gemische davon. Darüber hinaus beinhaltet die Erfindung reine Enantiomere und Diastereomere, wie auch Gemische davon, einschließlich racemische Gemische. Die einzelnen geometrischen Isomeren, Enantiomeren oder Diastereomeren können nach Verfahren, die auf dem Fachgebiet bekannt sind, hergestellt oder isoliert werden.
Verbindungen der Erfindung mit der in der Formel XV bezeichneten Stereochemie können in Gemischen, einschließlich racemischen Gemischen, mit anderen Enantiomeren, Diastereomeren, geometrischen Isomeren oder Tautomeren enthalten sein. Verbindungen der Erfindung mit der in der Formel XV angegebenen Stereochemie sind in diesen Gemischen typischerweise mit über 50 Prozent vorhanden. Vorzugsweise liegen die Verbindungen der Erfindung mit der in Formel XV bezeichneten Stereochemie in diesen Gemischen mit über 80% vor. Am bevorzugtesten liegen Verbindungen der Erfindung mit der in Formel XV bezeichneten Stereochemie in diesen Gemischen mit über 90% vor.
Die (S,R)-substituierten Amine (XV) sind Amine und bilden als solche Salze, wenn sie mit Säuren umgesetzt werden. Pharmazeutisch annehmbare Salze sind gegenüber den entsprechenden (S,R)-substituierten Aminen (XV) bevorzugt, da sie Verbindungen erzeugen, die wasserlöslicher, stabiler und/oder kristalliner sind.
Pharmazeutisch annehmbare Salze sind ein beliebiges Salz, das die Aktivität der Stammverbindung beibehält und keinen nachteiligen oder unerwünschten Effekt auf die Person, der es verabreicht wird, und in dem Kontext, in dem es verabreicht wird, ausübt. Pharmazeutisch annehmbare Salze umfassen Salze sowohl von anorganischen als auch von organischen Säuren. Die bevorzugten pharmazeutisch annehmbaren Salze umfassen Salze der folgende Säuren: Essigsäure, Asparaginsäure, Benzolsulfonsäure, Benzoesäure, Bicarbonsäure, Bischwefelsäure, Biweinsäure, Buttersäure, Calciumedetat, Camsylsäure, Kohlensäure, Chlorbenzoesäure, Citronensäure, Edetinsäure, Edisylsäure, Laurylschwefelsäure, Esylsäure, Esylinsäure, Ameisensäure, Fumarsäure, Gluceptinsäure, Gluconsäure, Glutaminsäure, Glykollylarsenilsäure, Hexamsäure, Hexylresorcinsäure, Hydrabamsäure, Bromwasserstoffsäure, Chlorwasserstoffsäure, Iodwasserstoffsäure, Hydroxynaphtoesäure, Isethionsäure, Milchsäure, Lactobionsäure, Maleinsäure, Äpfelsäure, Malonsäure, Mandelsäure, Methansulfonsäure, Methylsalpetersäure, Methylschwefelsäure, Schleimsäure, Muconsäure, Napsylsäure, Salpetersäure, Oxalsäure, p-Nitromethansulfonsäure, Pamoasäure, Pantothensäure, Phosphorsäure, Monohydrogenphosphorsäure, Dihydrogenphosphorsäure, Phthalsäure, Polygalactouronsäure, Propionsäure, Salicyclsäure, Stearinsäure, Bernsteinsäure, Sulfamsäure, Sulfanilsäure, Sulfonsäure, Schwefelsäure, Gerbsäure, Weinsäure, Teoclinsäure und Toluolsulfonsäure. Für weitere annehmbare Salze siehe Int. J. Pharm., 33, 201–217 (1986), und J. Pharm. Sci., 66 (1), 1, (1977).
Die vorliegende Erfindung stellt Verbindungen, Zusammensetzungen, Kits und Verfahren zur Inhibierung der beta-Sekretase-Enzym-Aktivität und der A-beta-Peptid-Produktion bereit. Eine Inhibierung der beta-Sekretase-Enzym-Aktivität hält die Produktion von A-beta aus APP an oder reduziert sie und reduziert oder eliminiert die Bildung von beta-Amyloid-Ablagerungen im Gehirn.
Verfahren der Erfindung (Verwendung gemäß der Erfindung)
Die Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung verwendet werden, und pharmazeutisch annehmbare Salze davon sind bei der Behandlung von Menschen oder Tieren einsetzbar, die an einem Zustand leiden, der durch eine pathologische Form von beta-Amyloid-Peptid gekennzeichnet ist, z.B. beta-Amyloid-Plaques, und sie sind zur Unterstützung oder Prävention oder Verzögerung des Einsetzens eines solchen Zustands einsetzbar. Z.B. sind die Verbindungen zur Behandlung der Alzheimer-Krankheit zur Unterstützung der Prävention oder Verzögerung des Einsetzens der Alzheimer-Krankheit, zur Behandlung von Patienten mit MCI (milder kognitiver Beeinträchtigung) und zur Verhinderung und Verzögerung des Einsetzens der Alzheimer-Krankheit bei solchen Personen, bei denen MCI zu AD fortschreiten würde, zur Behandlung des Down-Syndroms, zur Behandlung von Menschen, die hereditäre zerebrale Hämorrhagie mit Amyloidose des Dutch-Typs haben, zur Behandlung von zerebraler amyloider Angiopathie und zur Verhinderung ihrer potentiellen Folgen, d.h., einzelne und wiederkehrende Lappen-Hämorrhagien, zur Behandlung anderer degenerativer Demenz, einschließlich Demenz gemischten vaskulären und degenerativen Ursprungs, Demenz in Verbindung mit Parkinson-Krankheit, Demenz in Verbindung mit progressiver supranucleärer Lähmung, Demenz in Verbindung mit corticaler Basaldegeneration und Alzheimer-Krankheit vom diffusen Lewy-Körper-Typ einsetzbar. Die Verbindungen und Zusammensetzungen der Erfindung sind zur Behandlung oder Prävention der Alzheimer-Krankheit besonders nützlich. Wenn diese Krank heiten behandelt oder verhindert werden, können die in den Verfahren der Erfindung verwendeten Verbindungen entweder einzeln oder in Kombination eingesetzt werden, wie es für den Patienten das Beste ist.
Der Ausdruck "Behandeln" bzw. "Behandlung", wie er hierin verwendet wird, bedeutet, dass die in den Verfahren der Erfindung verwendeten Verbindungen bei Menschen mit wenigstens einer vorliegenden Krankheitsdiagnose verwendet werden können. Die in den Verfahren der Erfindung verwendeten Verbindungen werden das Fortschreiten der Erkrankung verzögern oder verlangsamen, wodurch dem Individuum eine besser nutzbare Lebenszeit gegeben wird.
Der Ausdruck "Verhindern" bzw. "Verhinderung" bzw. "Prävention" bedeutet, dass die im Verfahren der Erfindung verwendeten Verbindungen nützlich sind, wenn sie einem Patienten verabreicht werden, bei dem zum Zeitpunkt der Verabreichung nicht diagnostiziert wurde, dass er möglicherweise die Krankheit hat, von dem aber normalerweise erwartet wird, dass er die Krankheit entwickelt oder ein erhöhtes Risiko für die Krankheit hat. Die Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung verwendet werden, werden die Entwicklung von Krankheitssymptomen verlangsamen, das Einsetzen der Krankheit verzögern oder verhindern, dass das Individuum die Krankheit überhaupt entwickelt. Prävention beinhaltet auch Verabreichung der Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung eingesetzt werden, an solche Individuen, von denen angenommen wird, dass sie durch Alter, Familiengeschichte, genetische oder chromosomale Abnormalitäten und/oder infolge des Vorliegens eines oder mehrerer biologischer Marker für die Krankheit, z.B. bekannte genetische Mutation von APP oder APP-Spaltungsprodukten, im Gehirn, Geweben oder Flüssigkeiten, für die Krankheit prädisponiert sind.
Bei der Behandlung oder Prävention der obigen Krankheiten werden die Verbindungen, die in Verfahren der Erfindung verwendet werden, in einer therapeutisch wirksamen Menge verabreicht. Die therapeutisch wirksame Menge wird in Abhängigkeit von der besonderen verwendeten Verbindung und dem Verabreichungsweg variieren, wie es dem Fachmann auf dem Fachgebiet bekannt ist.
Bei der Behandlung eines Patienten, der einen beliebigen der diagnostizierten obigen Zustände zeigt, kann ein Arzt eine Verbindung, die im Verfahren der Erfindung verwendet wird, sofort verabreichen und bei Bedarf eine Verabreichung unbegrenzt fortsetzen. Bei der Behandlung von Patienten, bei denen die Alzheimer-Krankheit nicht diagnostiziert wurde, bei denen aber angenommen wird, dass sie ein substantielles Risiko für die Alzheimer-Krankheit haben, sollte der Arzt vorzugsweise eine Behandlung beginnen, wenn der Patient zum ersten Mal frühe Prä-Alzheimer-Symptome erfährt, z.B. Gedächtnisprobleme oder kognitive Probleme, die mit Alterung in Verbindung stehen. Außerdem gibt es einige Patienten, bei denen ein Risiko zur Entwicklung der Alzheimer-Krankheit durch die Detektion eines genetischen Markers, z.B. APOE4, oder anderer biologischer Indikatoren, die für die Alzheimer-Krankheit prädiktiv sind, bestimmt wurde. In diesen Situationen kann, selbst wenn der Patient keine Symptome der Krankheit hat, mit der Verabreichung der Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung verwendet werden, begonnen werden, bevor Symptome auftreten, und eine Behandlung kann zur Prävention oder Verzögerung des Einsetzens der Krankheit unbegrenzt fortgesetzt werden.
Dosierungsformen und -mengen
Die Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung verwendet werden, können oral, parenteral, (IV, IM, Depot-IM, SQ und Depot-SQ), sublingual, intranasal (Inhalation), intrathekal, topisch oder rektal verabreicht werden. Dosierungsformen, die dem Fachmann bekannt sind, sind zur Abgabe der Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung verwendet werden, geeignet.
Es werden Zusammensetzungen bereitgestellt, die therapeutisch wirksame Mengen der Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung verwendet werden, enthalten. Die Verbindungen werden vorzugsweise zu geeigneten pharmazeutischen Präparationen, z.B. Tabletten, Kapseln oder Elixieren, zur oralen Verabreichung oder in sterilen Lösungen oder Suspensionen zur parenteralen Verabreichung formuliert. Typischerweise werden die oben beschriebenen Verbindungen unter Verwendung von Techniken und Verfahren, die auf dem Fachgebiet gut bekannt sind, zu pharmazeutischen Zusammensetzungen formuliert.
Etwa 1 bis 500 mg einer Verbindung oder eines Gemisches von Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung verwendet werden, oder eines physiologisch annehmbaren Salzes oder Esters werden mit einem physiologisch annehmbaren Vehikel, Träger, Exzipiens, Bindemittel, Konservierungsmittel, Stabilisierungsmittel, Aromastoff, usw., in einer Einzeldosisform, wie sie in der anerkannten pharmazeutischen Praxis bezeichnet wird, compoundiert. Die Menge an aktiver Substanz in diesen Zusammensetzungen oder Zubereitungen ist so, dass eine geeignete Dosierung in dem indizierten Bereich erreicht wird. Die Zusammensetzungen werden vorzugsweise in Einzeldosisform formuliert, wobei jede Dosierung etwa 2 bis etwa 100 mg, bevorzugter etwa 10 bis etwa 30 mg, des aktiven Ingrediens enthält. Der Ausdruck "Einzeldosisform" bezieht sich auf physikalisch getrennte Einheiten, die als Einheitsdosierung für Menschen und andere Säuger geeignet sind, wobei jede Einheit eine vorbestimmte Menge an aktivem Material, die so berechnet ist, dass sie die gewünschte therapeutische Wirkung erzeugt, in Verbindung mit einem geeigneten pharmazeutischen Exzipiens enthält.
Um Zusammensetzungen herzustellen, wird eine Verbindung oder werden mehrere Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung verwendet werden, mit einem geeigneten pharmazeutisch annehmbaren Träger vermischt. Beim Mischen oder Zusetzen der Verbindung(en) kann das resultierende Gemisch eine Lösung, Suspension, Emulsion oder dergleichen sein. Liposomale Suspensionen können auch als pharmazeutisch annehmbare Träger geeignet sein. Diese können nach Verfahren, die dem Fachmann bekannt sind, hergestellt werden. Die Form des resultierenden Gemisches hängt von einer Reihe von Faktoren, einschließlich dem vorgesehenen Verabreichungsmodus und der Löslichkeit der Verbindung in dem gewählten Träger oder Vehikel, ab. Die wirksame Konzentration ist ausreichend zur Reduzierung oder Verbesse rung wenigstens eines Symptoms der Krankheit, Störung oder des Zustands, die/der behandelt wird, und kann empirisch bestimmt werden.
Pharmazeutische Träger oder Vehikel, die zur Verabreichung der hierin bereitgestellten Verbindungen geeignet sind, umfassen beliebige derartige Träger, die dem Fachmann als für den bestimmten Verabreichungsmodus geeignet bekannt sind. Außerdem können die aktiven Materialien mit anderen aktiven Materialien, die die gewünschte Wirkung nicht beeinträchtigen, oder mit Materialien, die die gewünschte Wirkung ergänzen oder die eine andere Wirkung haben, vermischt werden. Die Verbindungen können als das alleinige pharmazeutisch aktive Ingrediens in der Zusammensetzung formuliert werden oder können mit anderen aktiven Ingredientien kombiniert werden.
Wenn die Verbindungen unzureichende Löslichkeit aufweisen, können Verfahren zu ihrer Solubilisierung eingesetzt werden. Solche Verfahren sind bekannt und umfassen, sind aber nicht beschränkt auf, eine Verwendung von Co-Lösungsmitteln, z.B. Dimethylsulfoxid (DMSO), Verwendung von oberflächenaktiven Mitteln, z.B. Tween^®, und Auflösung in wässrigem Natriumbicarbonat. Derivate der Verbindungen, z.B. Salze oder Prodrugs, können bei der Formulierung wirksamer pharmazeutischer Zusammensetzungen eingesetzt werden.
Die Konzentration der Verbindung ist zur Abgabe einer Menge effektiv, welche nach Verabreichung wenigstens ein Symptom der Störung, für welche die Verbindung verabreicht wird, reduziert oder verbessert. Typischerweise werden die Zusammensetzungen als Einzeldosis-Verabreichung formuliert.
Die in den Verfahren der Erfindung eingesetzten Verbindungen können mit Trägern hergestellt werden, die sie gegen eine schnelle Eliminierung aus dem Körper schützen, z.B. Formulierungen mit parametrischer Freigabe oder Beschichtungen. Solche Träger umfassen Formulierungen mit kontrollierter Freisetzung, z.B., aber nicht beschränkt auf, mikroeingekapselte Abgabesysteme. Die aktive Verbindung ist in dem pharmazeutisch annehmbaren Träger in einer Menge enthalten, die ausreicht, um einen therapeutisch nützlichen Effekt in Abwesenheit von unerwünschten Nebenwirkungen bei dem behandelten Patienten auszuüben. Die therapeutisch wirksame Konzentration kann empirisch bestimmt werden, indem die Verbindungen in bekannten in vitro- und in vivo-Modellsystemen für die behandelte Störung getestet werden.
Die Verbindungen und Zusammensetzungen der Erfindung können in "multiple dose"- oder "single dose"-Behältern eingeschlossen sein. Die eingeschlossenen Verbindungen und Zusammensetzungen können in Kits bereitgestellt werden, die z.B. Komponententeile enthalten, die zur Verwendung kombiniert werden können. Z.B. können ein Verbindungs-Inhibitor in lyophilisierter Form und ein geeignetes Verdünnungsmittel als getrennte Komponenten zur Kombination vor der Verwendung bereitgestellt werden. Ein Kit kann einen Verbindungs-Inhibitor und ein zweites therapeutisches Mittel zur Co-Verabreichung enthalten. Der Inhibitor und das zweite therapeutische Mittel können als getrennte Komponententeile bereitgestellt werden. Ein Kit kann eine Vielzahl von Behältern umfassen, wobei jeder Behälter eine oder mehre re Einzeldosen der Verbindung, die im Verfahren der Erfindung verwendet werden, enthält. Die Behälter sind vorzugsweise für den gewünschten Verabreichungsmodus angepasst, einschließlich, aber nicht beschränkt auf, Tabletten, Gelkapseln, Kapseln mit verzögerter Freisetzung und dergleichen, zur oralen Verabreichung; Depot-Produkte, vorgefüllte Spritzen, Ampullen, Phiolen und dergleichen zur parenteralen Verabreichung und Pflaster, Medipads, Cremes und dergleichen zur topischen Verabreichung.
Die Konzentration der aktiven Verbindung in der Arzneimittelzusammensetzung wird von Absorptions-, Inaktivierungs- und Ausscheidungsraten der aktiven Verbindung, dem Dosierungsplan und der verabreichten Menge, wie auch von anderen Faktoren, die dem Fachmann bekannt sind, abhängen.
Das aktive Ingrediens kann auf einmal verabreicht werden oder kann in einer Reihe von kleineren Dosen, die in Zeitintervallen zu verabreichen sind, aufgeteilt sein. Es ist einzusehen, dass die genaue Dosierung und Behandlungsdauer eine Funktion der Krankheit, die behandelt wird, sind und dass diese empirisch unter Verwendung bekannter Testprotokolle oder durch Extrapolation aus in vivo- oder in vitro-Testdaten bestimmt werden können. Es wird betont, dass Konzentrationen und Dosierungswerte auch mit der Schwere des zu lindernden Zustands variieren können. Es ist außerdem einzusehen, dass für einen bestimmten Patienten spezifische Dosierungspläne entsprechend dem Bedarf des Patienten und der professionellen Beurteilung der Person, die die Zusammensetzungen verabreicht oder die Verabreichung der Zusammensetzungen überwacht, eingestellt werden sollten und dass die Konzentrationsbereiche, die hierin angegeben sind, nur exemplarisch sind und den Rahmen oder die Praxis der beanspruchten Zusammensetzungen nicht beschränken sollen.
Wenn eine orale Verabreichung gewünscht wird, sollte die Verbindung in einer Zusammensetzung bereitgestellt werden, die sie vor der sauren Umgebung des Magens schützt. Z.B. kann die Zusammensetzung in einer enterischen Beschichtung formuliert werden, die ihre Integrität im Magen aufrecht erhält und die aktive Verbindung im Darm freisetzt. Die Zusammensetzung kann auch in Kombination mit einem Antazidum oder einem anderen derartigen Ingrediens formuliert werden.
Orale Zusammensetzungen werden im Allgemeinen ein inertes Verdünnungsmittel oder einen essbaren Träger enthalten und können zu Tabletten komprimiert werden oder in Gelatinekapseln eingeschlossen werden. Zum Zwecke einer oralen therapeutischen Verabreichung kann die aktive Verbindung oder können die aktiven Verbindungen mit Exzipientien eng verbunden sein und in Form von Tabletten, Kapseln oder Lutschbonbons verwendet werden. Pharmazeutisch kompatible Bindemittel und Adjuvansmaterialien können als Teil der Zusammensetzung enthalten sein.
Die Tabletten, Pillen, Kapseln, Pastillen und dergleichen können beliebige der folgenden Ingredientien oder Verbindungen einer ähnlichen Natur enthalten: ein Bindemittel, z.B., aber nicht beschränkt auf, Tragantgummi, Akaziengummi, Maisstärke oder Gelatine; ein Exzi piens, z.B. mikrokristalline Cellulose, Stärke oder Lactose; ein Zerfallsmittel, z.B., aber nicht beschränkt auf, Alginsäure und Maisstärke; ein Schmiermittel, z.B., aber nicht beschränkt auf, Magnesiumstearat; ein Gleitmittel, z.B., aber nicht beschränkt auf, kolloidales Siliciumdioxid; ein Süßungsmittel, z.B. Saccharose oder Saccharin; und ein Aromamittel, z.B. Pfefferminz, Methylsalicylat oder Fruchtaroma.
Wenn die Dosiseinheitsform eine Kapsel ist, kann sie zusätzlich zu dem Material des obigen Typs einen flüssigen Träger, z.B. ein Fettöl, enthalten. Zusätzlich können Dosiseinheitsformen verschiedene andere Materialien enthalten, die die physikalische Form der Dosiseinheit modifizieren, z.B. Beschichtungen aus Zucker und anderen enterischen Mitteln. Die Verbindungen können auch als Komponente eines Elixiers, einer Suspension, eines Sirups, eines Wavers, eines Kaugummis oder dergleichen verabreicht werden. Ein Sirup kann zusätzlich zu den aktiven Verbindungen Saccharose als Süßungsmittel und verschiedene Konservierungsstoffe, Farbstoffe und Färbemittel und Aromamittel enthalten.
Die aktiven Materialien können auch mit anderen aktiven Materialien, die die gewünschte Wirkung nicht beeinträchtigen, oder mit Materialien, die die gewünschte Wirkung supplementieren, vermischt werden.
Lösungen oder Suspensionen, die zur parenteralen, intradermalen, sukutanen oder topischen Anwendung verwendet werden, können eine beliebige der folgenden Komponenten einschließen: ein steriles Verdünnungsmittel, z.B. Wasser zur Injektion, Kochsalzlösung, nicht-flüssiges Öl, ein natürlich vorkommendes Pflanzenöl, z.B. Sesamöl, Kokosnussöl, Erdnussöl, Baumwollsamenöl und dergleichen, oder ein synthetisches Fettvehikel, z.B. Ethyloleat und dergleichen, Polyethylenglykol, Glycerin, Propylenglykol oder anderes synthetisches Lösungsmittel; antimikrobielle Mittel, z.B. Benzylalkohol und Methylparabene; Antioxidantien, wie z.B. Ascorbinsäure und Natriumbisulfit; Gelatbildner, wie z.B. Ethylendiamintetraessigsäure (EDTA); Puffer, wie Acetate, Citrate und Phosphate; und Mittel für die Einstellung der Tonizität, z.B. Natriumchlorid und Dextrose. Parenterale Zubereitungen können in Ampullen, Einwegspritzen oder "multiple dose"-Phiolen aus Glas, Kunststoff oder anderem geeigneten Material eingeschlossen sein. Puffer, Konservierungsmittel, Antioxidantien und dergleichen können bei Bedarf eingearbeitet werden.
Bei intravenöser Verabreichung umfassen geeignete Träger physiologische Salzlösung, Phosphat-gepufferte Salzlösung (PBS) und Lösungen, die Verdickungs- und Solubilisierungsmittel, wie z.B. Glucose, Polyethylenglykol, Polypropylenglykol und Gemische davon, enthalten. Liposomale Suspensionen, einschließlich Gewebe-targetierter Liposome, können auch als pharmazeutisch annehmbare Träger geeignet sein. Diese können nach bekannten Verfahren hergestellt werden, wie z.B. in dem US-Patent Nr. 4 522 811 beschrieben.
Die aktiven Verbindungen können mit Trägern hergestellt werden, die die Verbindung gegen eine schnelle Eliminierung aus dem Körper schützen, z.B. Formulierungen mit parametrischer Freisetzung oder Beschichtungen. Solche Träger beinhalten Formulierungen mit kontrollierter Freisetzung, z.B., aber nicht beschränkt auf, Implantate und mikro-verkapselte Abgabesysteme und biologisch abbaubare, biokompatible Polymere, z.B. Collagen, Ethylenvinylacetat, Polyanhydride, Polyglykolsäure, Polyorthoester, Polymilchsäure und dergleichen. Verfahren zur Herstellung solcher Formulierungen sind dem Fachmann bekannt.
Die in den Verfahren der Erfindung verwendeten Verbindungen können oral, parenteral (IV, IM, Depot-IM, SQ und Depot-SQ, sublingual, intranasal (Inhalation), intrathekal, topisch oder rektal verabreicht werden. Dosierungsformen, die dem Fachmann bekannt sind, sind zur Abgabe der Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung verwendet werden, geeignet.
Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung verwendet werden, können enteral oder parenteral verabreicht werden. Wenn die Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung verwendet werden, oral verabreicht werden, dann können sie in üblichen Dosisformen zur oralen Verabreichung, wie sie dem Fachmann bekannt sind, verabreicht werden. Diese Dosisformen umfassen die üblichen festen Einzeldosisformen der Tabletten und Kapseln sowie flüssige Dosisformen, wie Lösungen, Suspensionen und Elixiere. Wenn die festen Dosisformen verwendet werden, ist es bevorzugt, dass sie zu dem Typ mit verzögerter Freisetzung gehören, so dass die Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung eingesetzt werden, nur einmal oder zweimal täglich verabreicht werden müssen.
Die oralen Dosisformen werden dem Patienten ein-, zwei-, drei- oder viermal täglich verabreicht. Es ist bevorzugt, dass die Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung verwendet werden, entweder drei- oder weniger Mal, bevorzugter ein- oder zweimal täglich, verabreicht werden. Demnach ist es bevorzugt, dass die in den Verfahren der Erfindung verwendeten Verbindungen in oraler Dosierungsform verabreicht werden. Es ist bevorzugt, dass, welche orale Dosisform auch immer verwendet wird, sie so konzipiert ist, dass sie die in den Verfahren der Erfindung zu verwendenden Verbindungen vor der sauren Umgebung des Magens schützt. Enterisch beschichtete Tabletten bzw. Magensaft-resistente Tabletten sind dem Fachmann gut bekannt. Außerdem sind dem Fachmann Kapseln, die mit kleinen Kügelchen gefüllt sind, welche jeweils zum Schutz vor dem sauren Magen überzogen sind, gut bekannt.
Bei oraler Verabreichung beträgt die verabreichte Menge, die therapeutisch wirksam ist, um beta-Sekretase-Aktivität zu inhibieren, um A-beta-Produktion zu inhibieren, um A-beta-Ablagerung zu inhibieren oder um eine Behandlung oder Prävention von AD durchzuführen, etwa 0,1 mg/Tag bis etwa 1.000 mg/Tag. Es ist bevorzugt, dass die orale Dosierung etwa 1 mg/Tag bis etwa 100 mg/Tag ist. Es ist bevorzugter, dass die orale Dosierung etwa 5 mg/Tag bis etwa 50 mg/Tag ist. Es ist einzusehen, dass, obgleich ein Patient mit einer Dosis beginnen kann, die Dosis mit der Zeit variiert werden kann, so wie sich der Zustand des Patienten verändert.
Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung verwendet werden, können vorteilhafterweise auch in einer Nanokristall-Dispersionsformulierung abgegeben werden. Die Herstellung von solchen Formulierungen ist z.B. im US-Patent 5 145 684 beschrieben. Nanokristal line Dispersionen von HIV-Protease-Inhibitoren und ihre Verwendungsverfahren sind im US-Patent 6 045 829 beschrieben. Die nanokristallinen Formulierungen erreichen typischerweise eine höhere Bioverfügbarkeit von Wirkstoffverbindungen.
Die Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung verwendet werden, können parenteral, z.B. durch IV, IM, Depot-IM, SC oder Depot-SC, verabreicht werden. Bei parenteraler Verabreichung sollte eine therapeutisch wirksame Menge von etwa 0,5 bis etwa 100 mg/Tag, vorzugsweise von etwa 5 bis etwa 50 mg täglich, abgegeben werden. Wenn eine Depotformulierung zur Injektion einmal im Monat oder einmal alle zwei Wochen verwendet wird, sollte die Dosis etwa 0,5 mg/Tag bis etwa 50 mg/Tag oder eine monatliche Dosis von etwa 15 mg bis etwa 1.500 mg sein. Zum Teil wegen der Vergesslichkeit der Patienten mit Alzheimer-Krankheit ist es bevorzugt, dass die parenterale Dosierungsform eine Depotformulierung ist.
Die Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung verwendet werden, können sublingual verabreicht werden. Wenn die Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung verwendet werden, sublingual gegeben werden, sollten sie ein- bis viermal täglich in Mengen, die oben zur IM-Verabreichung beschrieben sind, gegeben werden.
Die Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung verwendet werden, können intranasal verabreicht werden. Wenn sie auf diesem Weg gegeben werden, sind die geeigneten Dosierungsformen Nasenspray oder trockenes Pulver, wie es dem Fachmann bekannt ist. Die Dosierung der Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung eingesetzt werden, für eine intranasale Verabreichung ist die Menge, die oben für eine IM-Verabreichung beschrieben wurde.
Die Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung verwendet werden, können intrathekal verabreicht werden. Wenn sie auf diesem Weg gegeben werden, kann die geeignete Dosierungsform eine parenterale Dosierungsform sein, wie sie dem Fachmann bekannt ist. Die Dosierung der Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung verwendet werden, für eine intrathekale Verabreichung ist die Menge, die oben für die IM-Verabreichung beschrieben wurde.
Die Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung verwendet werden, können topisch verabreicht werden. Wenn sie auf diesem Weg gegeben werden, ist die geeignete Dosierungsform eine Creme, eine Salbe oder ein Pflaster. Wegen der Menge der Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung zu verabreichen ist, ist das Pflaster bevorzugt. Bei topischer Verabreichung ist die Dosierung etwa 0,5 mg/Tag bis etwa 200 mg/Tag. Da die Menge, die durch ein Pflaster verabreicht werden kann, begrenzt ist, können zwei oder mehr Pflaster verwendet werden. Die Zahl und Größe des Pflaster ist nicht wichtig, von Bedeutung ist, dass eine therapeutisch wirksame Menge der Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung verwendet werden, abgegeben wird, wie es dem Fachmann bekannt ist. Die Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung verwendet werden, können rektal durch ein Suppositorium verabreicht werden, wie es dem Fachmann bekannt ist. Bei Verabreichung durch ein Suppositorium ist die therapeutisch wirksame Menge etwa 0,5 mg bis etwa 500 mg.
Die in den Verfahren der Erfindung verwendeten Verbindungen können durch Implantate verabreicht werden, wie es dem Fachmann bekannt ist. Bei Verabreichung einer in den Verfahren der Erfindung verwendeten Verbindung durch ein Implantat ist die therapeutisch wirksame Menge die Menge, die oben für eine Depot-Verabreichung beschrieben wurde.
Die Erfindung hier betrifft neue Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung verwendet werden, und neue Verfahren unter Verwendung der Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung verwendet werden. Wenn eine bestimmte Verbindung, die in dem Verfahren der Erfindung verwendet wird, und eine gewünschte Dosierungsform gegeben sind, wird ein Fachmann wissen, wie er die geeignete Dosierungsform herstellen und verabreichen kann.
Die Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung verwendet werden, werden in der gleichen Art, durch dieselben Verabreichungswege, unter Verwendung derselben pharmazeutischen Dosierungsformen und mit demselben Dosierungsschema, wie oben beschrieben, zur Prävention einer Krankheit oder zur Behandlung von Patienten mit MCI (milder kognitiver Beeinträchtigung) und zur Prävention oder Verzögerung des Einsetzens der Alzheimer-Krankheit bei denen, bei denen MCI zu AD fortschreiten würde, zur Behandlung oder Prävention des Down-Syndroms, zur Behandlung von Menschen, die hereditäre zerebrale Hämorrhagie mit Amyloidose des Dutch-Typs haben, zur Behandlung von zerebraler amyloider Angiopathie und zur Verhinderung ihrer potentiellen Folgen, d.h., einzelne und wiederkehrende Lappen-Hämorrhagien, zur Behandlung anderer degenerativer Demenz, einschließlich Demenz gemischten vaskulären und degenerativen Ursprungs, Demenz in Verbindung mit Parkinson-Krankheit, Demenz in Verbindung mit progressiver supranucleärer Lähmung, Demenz in Verbindung mit corticaler Basaldegeneration, Alzheimer-Krankheit vom diffusen Lewy-Körper-Typ verwendet.
Die Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung verwendet werden, können in Kombination miteinander oder mit anderen therapeutischen Mitteln oder Ansätzen, die zur Behandlung oder Verzögerung der oben aufgelisteten Zustände eingesetzt werden, verwendet werden. Solche Mittel oder Ansätze umfassen: Acetylcholinesterase-Hemmer, z.B. Tacrin (Tetrahydroaminoacridin, auf dem Markt als COGNEX^®), Donepezilhydrochlorid (vermarktet als Aricept^®) und Rivastigmin (vermarktet als Exelon^®); gamma-Sekretase-Inhibitoren; antiinflammatorische Mittel, z.B. Cyclooxygenase-II-Inhibitoren; Antioxidantien, wie z.B. Vitamin E und Ginkolide; immunologische Ansätze, wie z.B. Immunisierung mit A-beta-Peptid oder Verabreichung von Anti-A-beta-Peptid-Antikörpern; Statine; und direkte oder indirekte neurotrope Mittel, wie z.B. Cerebrolysin^®, AIT-082 (Emilieu, 2000, Arch. Neurol. 57: 454), und andere neurotrope Mittel der Zukunft.
Dem Fachmann sollte klar sein, dass die genaue Dosierung und Verabreichungshäufigkeit von den bestimmten in den Verfahren der Erfindung verabreichten Verbindungen, dem besonderen Zustand, der behandelt wird, der Schwere des Zustands, der behandelt wird, dem Alter, dem Gewicht, dem allgemeinen physischen Zustand des bestimmten Patienten und anderer Medikation, die das Individuum einnehmen kann, abhängen wird, wie es dem verabreichenden Arzt auf dem Fachgebiet gut bekannt ist.
Inhibierung der APP-Spaltung
Die in den Verfahren der vorliegenden Erfindung verwendeten Verbindungen inhibieren eine Spaltung von APP zwischen Met595 und Asp596, die für die APP695-Isoform nummeriert sind, oder einer Mutante davon, oder an einer entsprechenden Stelle einer anderen Isoform, z.B. APP751 oder APP770 oder einer Mutante davon (manchmal als die "beta-Sekretase-Stelle" bezeichnet). Obgleich wir keine Bindung an eine bestimmte Theorie eingehen wollen, wird angenommen, dass eine Inhibierung der beta-Sekretase-Aktivität die Produktion von beta-Amyloid-Peptid (A-beta) inhibiert. Inhibitorische Aktivität wird in einem einer Vielzahl von Inhibierungsassays bewiesen, wobei eine Spaltung eines APP-Substrats in Gegenwart eines beta-Sekretase-Enzyms in der Gegenwart der Inhibitorverbindung unter Bedingungen analysiert wird, die normalerweise ausreichen, um in einer Spaltung an der beta-Sekretase-Spaltungsstelle zu resultieren. Eine Verringerung der APP-Spaltung an der beta-Sekretase-Spaltungsstelle im Vergleich zu einer unbehandelten oder inaktiven Kontrolle steht in Korrelation mit der Inhibitoraktivität. Assaysysteme, die verwendet werden können, um die Wirksamkeit der Verbindungsinhibitoren der Erfindung zu beweisen, sind bekannt. Repräsentative Assaysysteme werden z.B. in den US-Patenten Nr. 5 942 400, 5 744 346, wie auch in den Beispielen unten beschrieben.
Die enzymatische Aktivität von beta-Sekretase und die Produktion von A-beta kann in vitro oder in vivo analysiert werden, wobei natürliche, mutierte und/oder synthetische APP-Substrate, natürliches, mutiertes und/oder synthetisches Enzym und die Testverbindung verwendet werden. Die Analyse kann primäre oder sekundäre Zellen, die natives, mutantes und/oder synthetisches APP und Enzym exprimieren, Tiermodelle, die natives APP und Enzym exprimieren, involvieren, oder kann transgene Tiermodelle nutzen, die das Substrat und Enzym exprimieren. Eine Detektion der enzymatischen Aktivität kann durch Analyse eines oder mehrerer der Spaltungsprodukte, z.B. durch Immunoassay, fluorometrischen oder chromogenen Assay, HPLC oder andere Detektionsmittel erfolgen. Inhibitorische Verbindungen werden als solche bestimmt, die die Fähigkeit haben, die Menge an beta-Sekretase-Spaltprodukt, die im Vergleich zu einer Kontrolle produziert wird, bei der eine beta-Sekreatase-vermittelte Spaltung im Reaktionssystem in Abwesenheit von Inhibitorverbindungen beobachtet und gemessen wird, zu senken.
beta-Sekretase
Es sind verschiedene Formen von beta-Sekretase-Enzym bekannt und verfügbar und für einen Assay auf Enzym-Aktivität und Inhibierung der Enzymaktivität einsetzbar. Diese umfassen native, rekombinante und synthetische Formen des Enzyms. Humane beta-Sekretase ist bekannt als Beta Site APP Cleaving Enzyme (BACE), Asp2 und Memapsin 2 und ist z.B. in dem US-Patent Nr. 5 744 346 und in den veröffentlichten PCT-Patentanmeldungen WO 98/22597, WO 00/03819, WO 01/23533 und WO 00/17369, wie auch in Literaturveröffentlichungen (Hussain et al., 1999, Mol. Cell. Neurosci. 14: 419–427; Vassar et al., 1999, Science 286: 735–741; Yan et al., 1999, Nature 402: 533–537; Sinha et al., 1999, Nature 40: 537–540; und Lin et al., 2000, PNAS USA 97: 1456–1460) charakterisiert. Synthetische Formen des Enzyms wurden ebenfalls beschrieben (WO 98/22597 und WO 00/17369). beta-Sekretase kann aus humanem Gehirngewebe extrahiert und gereinigt werden und kann in Zellen, z.B. Säugerzellen, die rekombinantes Enzym exprimieren, produziert werden.
Nützliche inhibitorische Verbindungen sind wirksam, um 50% an beta-Sekretase-Enzym-Aktivität bei einer Konzentration von weniger als 50 Mikromolar, vorzugsweise bei einer Konzentration von 10 Mikromolar oder weniger, bevorzugter 1 Mikromolar oder weniger, und am bevorzugtesten 10 Nanomolar oder weniger, zu inhibieren.
APP-Substrat
Assays, die eine Inhibierung der beta-Sekretase-vermittelten Spaltung von APP beweisen, können eine beliebige der bekannten Formen von APP nutzen, einschließlich des "normalen" Isotyps mit 695 Aminosäuren, beschrieben von Karg et al., 1987, Nature 325: 733–6, des 770-Aminosäure-Isotyps, beschrieben von Kitaguchi et al., 1981, Nature 331: 530–532, und Varianten, z.B. die schwedische Mutation (KM670-1NL) (APP-SW), der London-Mutation (V7176F) und anderer. Für eine Übersicht bekannter Variantenmutationen siehe z.B. US-Patent Nr. 5 766 846 und auch Hardy, 1992, Nature Genet. 1: 233–234.
Weitere einsetzbare Substrate umfassen die dibasische Aminosäure-Modifikation, APP-KK, offenbart z.B. in WO 00/17369, Fragmente von APP und synthetische Peptide, die die beta-Sekretase-Spaltstelle enthalten, die Wildtyp (WT)- oder mutierte Form, z.B. SW, wie z.B. im US-Patent Nr. 5 942 400 und WO 00/03819 beschrieben.
Das APP-Substrat enthält die beta-Sekretase-Spaltstelle von APP (KM-DA oder NL-DA), z.B. ein vollständiges APP-Peptid oder eine Variante, ein APP-Fragment, ein rekombinantes oder synthetisches APP oder ein Fusionspeptid. Vorzugsweise enthält das Fusionspeptid die beta-Sekretase-Spaltstelle an ein Peptid fusioniert, das eine für den enzymatischen Assay nützliche Gruppierung hat, z.B. das Isolierungs- und/oder Detektionseigenschaften hat. Eine nützliche Gruppierung kann ein antigenes Epitop zur Antikörperbindung, eine Markierung oder eine andere Detektionsgruppierung, ein Bindungssubstrat und dergleichen sein.
Antikörper
Produkte, die für eine APP-Spaltung charakteristisch sind, können durch einen Immunoassay unter Verwendung verschiedener Antikörper gemessen werden, wie es z.B. in Pirttila et al., 1999, Neuro. Lett. 249: 21–4, und in dem US-Patent Nr. 5 612 486 beschrieben ist. Einsetzbare Antikörper, um A-beta zu detektieren, umfassen z.B. den monoklonalen Antikörper 6E10 (Senetek, St. Louis, MO), der spezifisch ein Epitop aus Aminosäuren 1–16 des A-beta-Peptids erkennt; Antikörper 162 und 164 (New York State Institute for Basic Research, Staten Island, NY), die für humanes A-beta 1–40 bzw. 1–42 spezifisch sind; sowie Antikörper, die die Junction-Region von beta-Amyloid-Peptid, die Stelle zwischen den Resten 16 und 17, erkennen, wie es in dem US-Patent Nr. 5 593 846 beschrieben ist. Antikörper, die gegen ein synthetisches Peptid mit den Resten 591 bis 596 von APP erzeugt werden, und SW192-Antikörper, der gegen 590–596 der schwedischen Mutation erzeugt wird, sind in einem Immunoassay auf APP und seine Spaltprodukte ebenfalls einsetzbar, wie es in den US-Patenten Nr. 5 604 102 und 5 721 130 beschrieben ist.
Assaysysteme
Assays zur Bestimmung einer APP-Spaltung an der beta-Sekretase-Spaltstelle sind auf dem Fachgebiet gut bekannt. Beispiele von Assays werden z.B. in den US-Patenten Nr. 5 744 346 und 5 942 400 beschrieben und in den Beispielen unten beschrieben.
Zellfreie Assays
Beispiele für Assays, die eingesetzt werden können, um die Inhibitor-Aktivität der in den Verfahren der Erfindung verwendeten Verbindungen zu beweisen, werden z.B. in WO 00/17369, WO 00/03819 und in den US-Patenten Nr. 5 942 400 und 5 744 346 beschrieben. Solche Assays können in zellfreien Inkubationen oder in zellulären Inkubationen unter Verwendung von Zellen, die eine beta-Sekretase exprimieren, und eines APP-Substrats, das eine beta-Sekretase-Spaltstelle hat, durchgeführt werden.
Ein APP-Substrat, das die beta-Sekretase-Spaltstelle von APP hat, z.B. ein vollständiges APP oder eine Variante, ein APP-Fragment oder ein rekombinantes oder synthetisches APP-Substrat, das die Aminosäuresequenz enthält: KM-DA oder NL-DA, wird in Gegenwart von beta-Sekretase-Enzym, einem Fragment davon oder einer synthetischen oder rekombinanten Polypeptid-Variante, die beta-Sekretase-Aktivität hat und wirksam ist, die beta-Sekretase-Spaltstelle von APP zu spalten, unter Inkubationsbedingungen, die für die Spaltungsaktivität des Enzyms geeignet sind, inkubiert. Geeignete Substrate umfassen gegebenenfalls Derivate, die Fusionsproteine oder -peptide sein können, die das Substratpeptid und eine Modifikation, die einsetzbar ist, um die Reinigung oder Detektion des Peptids oder seiner beta-Sekretase-Spaltprodukte zu erleichtern, enthalten. Nützliche Modifikationen umfassen die Insertion eines bekannten antigenen Epitops zur Antikörperbindung; die Verknüpfung einer Markierung oder detektierbaren Gruppierung, die Verknüpfung eines Bindungssubstrats und dergleichen.
Geeignete Inkubationsbedingungen für einen zellfreien in vitro-Assay umfassen z.B.: etwa 200 nanomolares bis 10 mikromolares Substrat, etwa 10 bis 200 picomolares Enzym und etwa 0,1 nanomolare bis 10 mikromolare Inhibitorverbindung in wässriger Lösung bei einem ungefähren pH von 4–7 bei etwa 37°C für einen Zeitraum von etwa 10 Minuten bis 3 Stunden. Diese Inkubationsbedingungen sind nur beispielhaft und können bei Bedarf für die bestimmten Assaykomponenten und/oder das gewünschte Messsystem variiert werden. Eine Optimierung der Inkubationsbedingungen für die besonderen Assaykomponenten sollte das spezifische ver wendete beta-Sekretase-Enzym und sein pH-Optimum, zusätzliche Enzyme und/oder Marker, die in dem Assay verwendet werden könnten, und dergleichen berücksichtigen. Eine derartige Optimierung ist Routine und wird kein unnötiges Experimentieren erfordern.
Ein nützlicher Assay verwendet ein Fusionspeptid, das ein Maltose-bindendes Protein (MBP), fusioniert an die C-terminalen 125 Aminosäuren von APP-SW, hat. Der MBP-Teil wird durch Anti-MBP-Fang-Antikörper an einem Assaysubstrat gefangen. Eine Inkubation des gefangenen Fusionsproteins in Gegenwart von beta-Sekretase resultiert in einer Spaltung des Substrats an der beta-Sekretase-Spaltstelle. Eine Analyse der Spaltungsaktivität kann z.B. durch Immunoassay von Spaltprodukten erfolgen. Ein solcher Assay detektiert ein eindeutiges Epitop, das am Carboxy-Terminus des gespaltenen Fusionsproteins exponiert ist, z.B. unter Verwendung des Antikörpers SW192. Dieser Assay wird z.B. im US-Patent Nr. 5 942 400 beschrieben.
Zellulärer Assay
Zahlreiche Assays auf Zellbasis können eingesetzt werden, um beta-Sekretase-Aktivität und/oder eine Prozessierung von APP unter Freisetzung von A-beta zu analysieren. Der Kontakt eines APP-Substrats mit einem beta-Sekretase-Enzym innerhalb der Zelle und in Gegenwart oder Abwesenheit eines Verbindungs-Inhibitors der Erfindung kann verwendet werden, um beta-Sekretase-Inhibitor-Aktivität der Verbindung zu beweisen. Vorzugsweise liefert ein Assay in Gegenwart einer nützlichen Inhibitorverbindung mindestens etwa 30%, am vorteilhaftesten mindestens etwa 50% Inhibierung der enzymatischen Aktivität, wenn man mit einer nicht-inhibierten Kontrolle vergleicht.
In einer Ausführungsform werden Zellen, die natürlicherweise beta-Sekretase exprimieren, eingesetzt. Alternativ werden Zellen modifiziert, um eine rekombinante beta-Sekretase oder ein synthetisches Variantenenzym zu exprimieren, wie es oben diskutiert wurde. Das APP-Substrat kann dem Kulturmedium zugesetzt werden und wird vorzugsweise in den Zellen exprimiert. Zellen, die natürlicherweise APP, Varianten- oder Mutanten-Formen von APP exprimieren, oder Zellen, die transformiert sind, um eine Isoform von APP, mutantes oder variantes APP zu exprimieren, rekombinantes oder synthetisches APP, APP-Fragment oder synthetisches APP-Peptid oder -Fusionsprotein, das die beta-Sekretase-APP-Spaltstelle enthält, kann verwendet werden, vorausgesetzt, dass das exprimierte APP mit dem Enzym in Kontakt kommen kann und die enzymatische Spaltungsaktivität analysiert werden kann.
Humane Zelllinien, die normalerweise A-beta aus APP prozessieren, liefern ein einsetzbares Mittel, um Inhibitor-Aktivitäten der in den Verfahren der Erfindung verwendeten Verbindungen zu analysieren. Eine Produktion und Freisetzung von A-beta und/oder anderen Spaltprodukten in das Kulturmedium kann z.B. durch Immunoassay, wie Western-Blot, oder Enzymgekoppelter Immunoassay (EIA), z.B. durch ELISA, gemessen werden.
Zellen, die ein APP-Substrat und eine aktive beta-Sekretase exprimieren, können in Gegenwart eines Verbindungs-Inhibitors inkubiert werden, um die Inhibierung der enzymatischen Aktivität im Vergleich zu einer Kontrolle zu beweisen. Die Aktivität von beta-Sekretase kann durch Analyse eines oder mehrerer Spaltprodukte des APP-Substrats gemessen werden. Z.B. würde eine Inhibierung der beta-Sekretase-Aktivität gegenüber dem Substrat APP unter Verringerung der Freisetzung spezifischer, durch beta-Sekretase induzierter APP-Spaltprodukte, z.B. A-beta, erwartet.
Obgleich sowohl Nervenzellen als auch Nicht-Nervenzellen A-beta prozessieren und freisetzen, sind die Level an endogener beta-Sekretase-Aktivität niedrig, und durch EIA oft schwer zu detektieren. Die Verwendung von Zelltypen, von denen bekannt ist, dass sie eine erhöhte beta-Sekretase-Aktivität, eine verstärkte Prozessierung von APP zu A-beta und/oder eine erhöhte Produktion von A-beta haben, sind daher bevorzugt. Z.B. liefert eine Transfektion von Zellen mit der schwedischen mutanten Form von APP (APP-SW); mit APP-KK oder mit APP-SW-KK Zellen mit erhöhter beta-Sekretase-Aktivität, die Mengen an A-beta produzieren, die leicht gemessen werden können.
In solchen Assays werden z.B. die Zellen, die APP und beta-Sekretase exprimieren, in einem Kulturmedium unter Bedingungen kultiviert, die für beta-Sekretase-Enzym-Aktivität an ihrer Spaltungsstelle an dem APP-Substrat geeignet sind. Wenn die Zellen dem Verbindungs-Inhibitor ausgesetzt werden, wird die Menge an A-beta, die in das Medium freigesetzt wird, und/oder die Menge an CTF99-Fragmenten von APP in den Zelllysaten im Vergleich zur Kontrolle verringert. Die Spaltungsprodukte von APP können z.B. durch Immunreaktionen mit spezifischen Antikörpern analysiert werden, wie es oben diskutiert wird.
Bevorzugte Zellen zur Analyse von beta-Sekretase-Aktivität umfassen primäre humane Nervenzellen, primäre transgene Tier-Nervenzellen, in denen das Transgen APP ist, und andere Zellen, wie z.B. solche einer stabilen 293-Zelllinie, die APP exprimieren, z.B. APP-SW.
In vivo-Assays: Tiermodelle
Es können verschiedene Tiermodelle eingesetzt werden, um beta-Sekretase-Aktivität und/oder eine Prozessierung von APP unter Freisetzung von A-beta, wie oben beschrieben, zu analysieren. Beispielsweise können transgene Tiere, die APP-Substrat und beta-Sekretase-Enzym exprimieren, eingesetzt werden, um Inhibitor-Aktivität der Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung eingesetzt werden, zu beweisen. Einige transgene Tiermodelle wurden z.B. in den US-Patenten Nr. 5 877 399, 5 612 486, 5 387 742, 5 720 936, 5 850 003, 5 877 015 und 5 811 633 sowie in Ganes et al., 1995, Nature 373: 523, beschrieben. Bevorzugt sind Tiere, die Merkmale aufweisen, die mit der Pathophysiologie von AD verbunden sind. Eine Verabreichung der Verbindungs-Inhibitoren der Erfindung an transgene Mäuse, die hierin beschrieben wird, liefert ein alternatives Verfahren zum Beweisen der Inhibitor-Aktivität der Verbindungen. Eine Verabreichung der Verbindungen in einem pharmazeutisch wirksamen Träger über einen Verabreichungsweg, der das Zielgewebe erreicht, in einer geeigneten therapeutischen Menge, ist ebenfalls bevorzugt.
Eine Inhibierung der beta-Sekretase-vermittelten Spaltung von APP an der beta-Sekretase-Spaltstelle und der A-beta-Freisetzung kann bei diesen Tieren durch Messen der Spaltungsfragmente in den Körperflüssigkeiten des Tiers, z.B. Zerebralflüssigkeit, oder in Geweben analysiert werden. Eine Analyse von Gehirngeweben auf A-beta-Ablagerungen oder -Plaques ist bevorzugt.
Bei In-Kontakt-Bringen eines APP-Substrats mit einem beta-Sekretase-Enzym in Gegenwart einer Inhibitorverbindung, die in den Verfahren der Erfindung verwendet wird, und unter Bedingungen, die ausreichen, um eine enzymatisch vermittelte Spaltung von APP und/oder eine Freisetzung von A-beta aus dem Substrat zu ermöglichen, sind die in den Verfahren der Erfindung verwendeten Verbindungen wirksam, um eine beta-Sekretase-vermittelte Spaltung von APP an der beta-Sekretase-Spaltungsstelle zu reduzieren, und/oder wirksam, um freigesetzte Mengen an A-beta zu verringern. Wenn ein solches In-Kontakt-Bringen die Verabreichung der Inhibitor-Verbindungen, die in den Verfahren der Erfindung verwendet werden, an ein Tiermodell, z.B. wie es oben beschrieben ist, ist, sind die Verbindungen wirksam, um eine A-beta-Ablagerung in Gehirngeweben des Tiers zu verringern und die Anzahl und/oder die Größe von beta-Amyloid-Plaques zu verringern. Wenn eine solche Verabreichung an einen Menschen erfolgt, sind die Verbindungen wirksam, um das Fortschreiten einer Krankheit, die durch erhöhte Mengen an A-beta charakterisiert ist, zu inhibieren oder zu verlangsamen, um das Fortschreiten von AD bei einem Patienten zu verlangsamen und/oder das Einsetzen oder die Entwicklung von AD bei einem Patienten, der ein Risiko für die Krankheit trägt, zu verhindern.
Wenn nichts anderes angegeben ist, haben alle wissenschaftlichen und technischen Ausdrücke, die hierin verwendet werden, dieselbe Bedeutung, wie sie üblicherweise von einem Fachmann auf dem Gebiet, zu dem die Erfindung gehört, verstanden wird. Alle hierin genannten Patente und Publikationen werden durch allgemeine Bezugnahme hier eingearbeitet.
DEFINITIONEN UND KONVENTIONEN
Die folgenden Definitionen und Erklärungen beziehen sich auf die Ausdrücke, wie sie durch das gesamte Dokument, einschließlich der Beschreibung und der Ansprüche, verwendet werden.
I. KONVENTIONEN FÜR FORMELN UND DEFINITIONEN VON VARIABLEN
Die chemischen Formeln, die verschiedene Verbindungen oder molekulare Fragmente in der Beschreibung und den Ansprüchen darstellen, können variable Substituenten zusätzlich zu ausdrücklich definierten Strukturmerkmalen enthalten. Diese variablen Substituenten werden durch einen Buchstaben oder einen Buchstaben mit einem numerischen Index identifiziert, z.B. "Z₁" oder "R_i", worin "i" eine ganze Zahl ist. Diese variablen Substituenten sind entweder monovalent oder bivalent, d.h., sie stellen eine Gruppe dar, die durch eine oder zwei chemische Bindungen an die Formel gebunden ist. Beispielsweise würde eine Gruppe Z₁ eine bivalente Variable darstellen, wenn sie an die Formel CH₃-C(=Z₁)H gebunden ist. Die Gruppen R_i und R_j würden monovalente variable Substituenten darstellen, wenn sie an die Formel CH₃-CH₂-C(R_i)(R_j)H₂ gebunden sind. Wenn chemische Formeln in linearer Art gezeichnet sind, z.B. die obigen, sind variable Substituenten, die in Klammern enthalten sind, an das Atom gebunden, das unmittelbar links zu dem in Klammern eingeschlossenen variablen Substituenten ist. Wenn zwei oder mehr aufeinanderfolgende variable Substituenten in Klammern eingeschlossen sind, so sind die aufeinanderfolgenden variablen Substituenten jeweils an das unmittelbar vorhergehende Atom an der linken Seite, das nicht in Klammern eingeschlossen ist, gebunden. Demnach sind in der obigen Formel R_i und R_j beide an das vorangehende Kohlenstoffatom gebunden. Für ein beliebiges Molekül mit einem festgesetzten System der Kohlenstoff-Nummerierung, z.B. Steroide, werden diese Kohlenstoffatome als C_i bezeichnet, worin "i" die ganze Zahl ist, die der Kohlenstoff-Nummer entspricht. Beispielsweise stellt C₆ die Position 6 oder die Kohlenstoffzahl im Steroidkern dar, wie dieser traditionell von einem Fachmann auf dem Gebiet der Steroidchemie bezeichnet wird. Entsprechend stellt der Ausdruck "R₆" einen variablen Substituenten (entweder monovalent oder bivalent) in der C₆-Position dar.
Chemische Formeln oder Teile davon, die in linearer Art gezeichnet sind, stellen Atome in einer linearen Kette dar. Das Symbol "-" stellt im Allgemeinen eine Bindung zwischen zwei Atomen in der Kette dar. Demnach stellt CH₃-O-CH₂-CH(R_i)-CH₃ eine 2-substituierte 1-Methoxypropanverbindung dar. In ähnlicher Weise stellt das Symbol "=" eine Doppelbindung dar, z.B. CH₂=C(R_i)-O-CH₃, und das Symbol "≡" stellt eine Dreifachbindung dar, z.B. HC≡C-CH(R_i)-CH₂-CH₃. Carbonylgruppen werden auf eine der folgenden zwei Arten dargestellt: -CO- oder -C(=O)-, wobei die Erstgenannte aus Gründen der Einfachheit bevorzugt wird.
Chemische Formeln von cyclischen (Ring-)verbindungen oder Molekülfragmente können in linearer Art dargestellt werden. Demnach kann die Verbindung 4-Chlor-2-methylpyridin in linearer Art durch N*=C(CH₃)-CH=CCl-CH=C*H mit der Konvention dargestellt werden, dass die mit einem Stern (*) markierten Atome aneinander gebunden sind, was in einer Bildung eines Rings resultiert. Entsprechend kann das cyclische Molekülfragment 4-(Ethyl)-1-piperazinyl durch -N*-(CH₂)₂-N(C₂H₅)-CH₂-C*H₂ dargestellt werden.
Eine starre cyclische (Ring)-Struktur für beliebige Verbindungen definiert hierin eine Orientierung bezüglich der Ebene des Rings für Substituenten, die an jedes Kohlenstoffatom der starren cyclischen Verbindung gebunden sind. Für gesättigte Verbindungen, die zwei Substituenten an ein Kohlenstoffatom, das Teil eines cyclischen Systems ist, gebunden haben, -C(X₁)(X₂)-, können die zwei Substituenten entweder in axialer oder äquatorialer Position bezüglich des Rings sein und können zwischen axial/äquatorial wechseln. Allerdings bleibt die Position der zwei Substituenten bezüglich des Rings und zueinander fixiert. Während jeder Substituent zeitweise in der Ebene des Rings (äquatorial) anstatt über oder unter der Ebene (axial) sein kann, ist ein Substituent immer über dem anderen. In chemischen Strukturformeln, die solche Verbindungen zeigen, wird ein Substituent (X₁), der "unter" einem anderen Substituenten (X₂) ist, als in der alpha-Konfiguration identifiziert werden und wird durch eine unterbrochene, gestrichelte oder gepunktete Linienbindung zu dem Kohlenstoffatom identifiziert, z.B. durch das Symbol "---" oder "...". Der entsprechende Substituent, der "über" (X₂) dem an deren (X₁) gebunden ist, wird als in der beta-Konfiguration identifiziert und wird durch eine nicht-gebrochene Linienverbindung zu dem Kohlenstoffatom angezeigt.
Wenn ein variabler Substituent zweiwertig ist, können die Valenzen in der Definition der Variablen zusammen oder getrennt oder beides genommen werden. Beispielsweise kann eine Variable R_i, die an ein Kohlenstoffatom als -C(=R_i)- gebunden ist, bivalent sein und als Oxo oder Keto definiert werden (somit eine Carbonylgruppe (-CO-) bilden) oder als zwei getrennt gebundene monovalente variable Substituenten alpha-R_i-j und beta-R_i-k definiert sein. Wenn eine bivalente Variable R_i so definiert ist, dass sie aus zwei monovalenten variablen Substituenten besteht, hat die Konvention, die verwendet wird, um die bivalente Variable zu definieren, die Form "alpha-R_i-j:beta-R_i-k" oder eine Variante davon. In einem solchen Fall sind sowohl alpha-R_i-j als auch beta-R_i-k an das Kohlenstoffatom unter Erhalt von -C(alpha-R_i-j)(beta-R_i-k)- gebunden. Wenn z.B. die bivalente Variable R₆ als -C(=R₆)- so definiert ist, dass sie aus zwei monovalenten variablen Substituenten besteht, sind die zwei monovalenten variablen Substituenten alpha-R_6-1:beta-R_6-2, ... alpha-R_6-9:beta-R_6-10 usw., was -C(alpha-R_6-2)(beta-R_6-2)- ... -C(alpha-R_6-9)(beta-R_6-10)- usw. ergibt. Entsprechend sind für die bivalente Variable R₁₁, -C(=R₁₁)-, zwei monovalente variable Substituenten alpha-R_11-1:beta-R_11-2. Für einen Ringsubstituenten, für den keine getrennten alpha- und beta-Orientierungen existieren (z.B. infolge des Vorliegens einer Kohlenstoff-Kohlenstoff-Doppelbindung im Ring), und für einen Substituenten, der an ein Kohlenstoffatom gebunden ist, das nicht Teil eines Rings ist, wird die obige Konvention noch verwendet, allerdings werden die alpha- und beta-Bezeichnungen weggelassen.
Ebenso wie eine bivalente Variable als zwei getrennte monovalente variable Substituenten definiert sein kann, können zwei getrennte monovalente variable Substituenten so definiert sein, dass sie zusammengenommen eine bivalente Variable bilden. In der Formel -C₁(R_i)H-C₂(R_j)H- (C₁ und C₂ definieren willkürlich ein erstes bzw. zweites Kohlenstoffatom), können R_i und R_j so definiert sein, dass sie zusammengenommen (1) eine zweite Bindung zwischen C₁ und C₂ bilden, oder (2) eine bivalente Gruppe, z.B. Oxa (-O-) bilden und die Formel daher ein Epoxid beschreibt. Wenn R_i und R_j zusammengenommen werden, um eine komplexere Einheit, z.B. die Gruppe -X-Y-, zu bilden, dann ist die Orientierung der Einheit so, dass C₁ in der obigen Formel an X gebunden ist und C₂ an Y gebunden ist. Somit bedeutet gemäß der Konvention die Bezeichnung "... R_i und R_j werden unter Bildung von -CH₂-CH₂-O-CO- zusammengenommen ..." ein Lacton, in dem das Carbonyl an C₂ gebunden ist. Wenn es heißt "... R_j und R_i werden unter Bildung von -CO-O-CH₂-CH₂- zusammengenommen", so bedeutet die Konvention ein Lacton, in dem das Carbonyl an C₁ gebunden ist.
Der Kohlenstoffgehalt von variablen Substituenten wird auf einem von zwei Wegen angegeben. Die erste Methode verwendet ein Präfix vor dem gesamten Namen der Variablen, z.B. "C₁-C₄", worin "1" und "4" beide ganze Zahlen sind, die die minimale und maximale Anzahl der Kohlenstoffatome in der Variablen darstellen. Das Präfix ist durch einen Bindestrich von der Variablen getrennt. Beispielsweise stellt "C₁-C₄-Alkyl" ein Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen dar (einschließlich isomerer Formen davon, wenn keine ausdrückliche Angabe für das Gegenteil gegeben wird). Wann immer dieses einzelne Präfix angegeben wird, gibt das Präfix den gesamten Kohlenstoffatomgehalt der Variablen an, die definiert wird. Somit beschreibt C₂-C₄-Alkoxycarbonyl eine Gruppe CH₃-(CH₂)_n-O-CO-, in der n null, eins oder zwei ist. Bei der zweiten Methode ist der Kohlenstoffgehalt nur jedes Teils der Definition getrennt angegeben, indem die "C_i-C_j"-Bezeichnung in Klammern gesetzt wird und unmittelbar (ohne Bindestrich bzw. Zwischenraum) vor den Teil der Definition, der definiert wird, gesetzt wird. Durch diese optionale Konvention hat (C₁-C₃)-Alkoxycarbonyl dieselbe Bedeutung wie C₂-C₄-Alkoxycarbonyl, da das "C₁-C₃" sich nur auf den Kohlenstoffgehalt der Alkoxygruppe bezieht. Während beide, C₂-C₆-Alkoxyalkyl und (C₁-C₃)-Alkoxy-(C₁-C₃)-alkyl, Alkoxyalkylgruppen definieren, die 2 bis 6 Kohlenstoffatome haben, unterscheiden sich die zwei Definitionen, da die erstgenannte Definition entweder den Alkoxy- oder Alkyl-Teil allein 4 oder 5 Kohlenstoffatome enthalten lässt, während die letztgenannte Definition jede dieser Gruppen auf 3 Kohlenstoffatome begrenzt.
Wenn die Ansprüche einen ziemlich komplexen (cyclischen) Substituenten enthalten, wird am Ende des Ausdrucks, der den bestimmten Substituenten benennt/bezeichnet, eine Angabe in (Klammern) sein, die dem Namen der Bezeichnung in einem der Schaubilder entspricht, die auch die chemische Strukturformel des bestimmten Substituenten angeben.
II. DEFINITIONEN
Alle Temperaturen sind in Grad Celsius.
DSC bezeichnet Dünnschichtchromatographie. psi bedeutet pounds/in².
HPLC bezeichnet Hochdruckflüssigkeitschromatographie. THF bedeutet Tetrahydrofuran.
DMF bedeutet Dimethylformamid.
EDC bedeutet Ethyl-1-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimid oder 1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimid-hydrochlorid.
HOBt bedeutet 1-Hydroxybenzotriazolhydrat.
NMM bedeutet N-Methylmorpholin.
NBS bedeutet N-Bromsuccinimid.
TEA bedeutet Triethylamin.
BOC bedeutet 1,1-Dimethylethoxycarbonyl oder t-Butoxycarbonyl, -CO-O-C(CH₃)₃.
CBZ bedeutet Benzyloxycarbonyl, -CO-O-CH₂-φ.
FMOC bedeutet 9-Fluorenylmethylcarbonat.
TFA bedeutet Trifluoressigsäure, CF₃-COOH.
CDI bedeutet 1,1'-Carbonyldiimidazol.
Salzlösung bezieht sich auf eine wässrige gesättigte Natriumchloridlösung.
Chromatographie (Säulen- und Flash-Chromatographie) bedeutet Reinigung/Trennung von Verbindungen, ausgedrückt als (Träger, Elutionsmittel). Es ist selbstverständlich, dass geeignete Fraktionen gesammelt und konzentriert werden, um die gewünschte Verbindung(en) zu erhalten.
CMR bezieht sich auf magnetische C-13-Resonanzspektroskopie, chemische Verschiebungen sind in ppm (δ) "downfield" zu TMS angegeben.
NMR bezieht sich auf magnetische Kern(protonen)resonanzspektroskopie, chemische Verschiebungen sind in ppm (d) "downfield" zu TMS angegeben.
IR bezieht sich auf Infrarotspektroskopie.
MS bezieht sich auf Massenspektrometrie, ausgedrückt als m/e, m/z oder Masse/Ladungs-Einheit. MH⁺ bezeichnet das positive Ion einer Stammverbindung plus Wasserstoffatom. EI bezieht sich auf den Elektronenstoß. CI bezieht sich auf chemische Ionisierung. FAB bedeutet "Fast Atom Bombardment" (Beschuss mit Atomen).
HRMS bedeutet Hochauflösungs-Massenspektrometrie.
Ether bedeutet Diethylether.
Pharmazeutisch annehmbar bezieht sich auf solche Eigenschaften und/oder Substanzen, die unter pharmakologischem/toxikologischem Gesichtspunkt für den Patienten annehmbar sind und für den herstellenden pharmazeutischen Chemiker aus physikalischem chemischem Gesichtspunkt im Hinblick auf Zusammensetzung, Formulierung, Stabilität, Patientenakzeptanz und Bioverfügbarkeit annehmbar sind.
Wenn Lösungsmittelpaare verwendet werden, werden die eingesetzten Lösungsmittelverhältnisse als Volumen/Volumen (V/V) angegeben.
Wenn die Löslichkeit eines Feststoffs in einem Lösungsmittel verwendet wird, so ist das Verhältnis des Feststoffs zu dem Lösungsmittel Gewicht/Volumen (G/V).
BOP bedeutet Benzotriazol-1-yloxy-tris(dimethylamino)phosphoniumhexafluorphosphat.
TBDMSCl bedeutet t-Butyldimethylsilylchlorid.
TBDMSOTf bedeutet t-Butyldimethylsilyltrifluorsulfonsäureester.
Trisomie 21 bedeutet Down-Syndrom.
Die folgenden Ausdrücke werden (in den Beispielen 321 und oben) für das Amid-bildende Mittel bzw. Amid-Bildungsmittel (IX) verwendet:
"PHTH" bedeutet (CH₃-CH₂-CH₂-)₂N-CO-Phenyl-CO-OH, wobei die Bindung an den -Phenyl-Ring 1,3- ist;
"5-Me-PHTH" bedeutet (CH₃-CH₂-CH₂-)₂N-CO-(CH₃)-Phenyl-CO-OH, wobei die Bindung an den -Phenyl-Ring 1,3- für die Carbonylgruppen und 5- für die Methylgruppe ist;
"3,5-Pyridinyl" bedeutet (CH₃-CH₂-CH₂-)₂N-CO-(Pyridinyl)-CO-OH, wobei die Bindung an den -Pyridinyl-Ring 3,5- für die Carbonylgruppen ist;
"-SO₂-" bedeutet (CH₃-CH₂-CH₂-)₂CH-SO₂-Phenyl-CO-OH, wobei die Bindung an den -Phenyl-Ring 1,3- ist;
"5-OMe-PHTH" bedeutet (CH₃-CH₂-CH₂-)₂N-CO-(CH₃-O-)-Phenyl-CO-OH, wobei die Bindung an den -Phenyl-Ring 1,3- für die Carbonylgruppen und 5- für die Methoxygruppe ist;
"5-Cl-PHTH" bedeutet (CH₃-CH₂-CH₂-)₂N-CO-(Cl-)-Phenyl-CO-OH, wobei die Bindung an den -Phenyl-Ring 1,3- für die Carbonylgruppen und 5- für das Chloratom ist;
"5-F-PHTH" bedeutet (CH₃-CH₂-CH₂-)₂N-CO-(F-)-Phenyl-CO-OH, wobei die Bindung an den -Phenyl-Ring 1,3- für die Carbonylgruppen ist und 5- für das Fluoratom ist;
"Thienyl" bedeutet (CH₃-CH₂-CH₂-)₂N-CO-Thienyl-CO-OH, wobei die Bindung an den -Thiophen-Ring 2,5- ist;
"2,4-Pyridinyl" bedeutet (CH₃-CH₂-CH₂-)₂N-CO-(Pyridinyl)-CO-OH, wobei die Bindung an den -Pyridinyl-Ring 2,4- für die Carbonylgruppen ist;
"4,6-Pyrimidinyl" bedeutet (CH₃-CH₂-CH₂-)₂N-CO-(Pyrimidinyl-)phenyl-CO-OH, wobei die Bindung an den -Pyrimidinyl-1-Ring 4,6- für die Carbonylgruppen ist;
"Morpholinyl" bedeutet Morpholinyl-CO-phenyl-CO-OH, wobei die Bindung an den -Phenyl-Ring 1,3- für die Carbonylgruppen ist.
APP, Amyloid-Vorläufer-Protein, ist als ein beliebiges APP-Polypeptid, einschließlich APP-Varianten, -Mutationen und -Isoformen, definiert, z.B. wie es im US-Patent Nr. 5 766 846 offenbart ist.
A-beta, Amyloid-beta-Peptid, ist als ein Peptid definiert, das aus einer beta-Sekretase-vermittelten Spaltung von APP resultiert, einschließlich Peptide mit 39, 40, 41, 42 und 43 Aminosäuren, und das sich von der beta-Sekretase-Spaltstelle zu Aminosäuren 39, 40, 41, 42 oder 43 erstreckt.
Beta-Sekretase (BACE1, Asp2, Memapsin 2) ist eine Aspartylprotease, die eine Spaltung von APP am Amino-terminalen Rand von A-beta vermittelt. Humane beta-Sekretase wird z.B. in WO 00/17369 beschrieben.
Eine therapeutisch wirksame Menge ist als eine Menge definiert, die wirksam ist, um wenigstens ein Symptom der Krankheit, die behandelt wird, zu reduzieren oder zu verringern, oder um das Einsetzen eines oder mehrerer klinischer Marker oder Symptome der Krankheit zu verringern oder zu verzögern.
Die vorliegende Erfindung stellt Verbindungen, Zusammensetzungen und Methoden zur Inhibierung der beta-Sekretase-Enzymaktivität und A-beta-Peptid-Produktion bereit. Eine Inhibierung der beta-Sekretase-Enzymaktivität hält die Produktion von A-beta aus APP an oder verringert sie oder verringert oder eliminiert die Bildung von beta-Amyloid-Ablagerungen im Gehirn.
CHEMISCHE BEISPIELE
Beispielhafte Verbindungen der Erfindung
Beispiele von Verbindungen, die im Rahmen der Erfindung liegen, umfassen, sind aber nicht beschränkt auf die, die unten angegeben werden.
Beispiel 1, N-[1-(3,5-Difluorbenzyl)-2-hydroxy-3-(N'-methyl-N'-phenylhydrazino)propyl]-5-methyl-N',N'-dipropylisophthalamid
Beispiel 2, N-{1-(3,5-Difluorbenzyl)-2-hydroxy-3-[N'-methyl-N'-(4-methylpentanoyl)hydrazino]propyl}-5-methyl-N',N'-dipropylisophthalamid
Beispiel 3, N-[1-(3,5-Difluorbenzyl)-2-hydroxy-3-phenoxyaminopropyl]-5-methyl-N',N'-dipropylisophthalamid
SCHAUBILD A
SCHAUBILD A' (Fortsetzung)
SCHAUBILD B
SCHAUBILD C
SCHAUBILD C' (Fortsetzung)
SCHAUBILD D SCHAUBILD D
BIOLOGISCHE BEISPIELE
Beispiel A
Enzym-Inhibierungs-Assay
Die Verbindungen der Erfindung werden durch Verwendung des MBP-C125-Assays auf Inhibitor-Aktivität analysiert. Dieser Assay bestimmt die relative Inhibierung einer beta-Sekretase-Spaltung eines Modell-APP-Substrats, MBP-C125SW, durch die analysierten Verbindungen im Vergleich zu einer unbehandelten Kontrolle. Eine detaillierte Beschreibung der Assayparameter kann z.B. im US-Patent Nr. 5 942 400 gefunden werden. Kurz ausgedrückt, das Substrat ist ein Fusionspeptid, das aus dem Maltose-bindenden Protein (MBP) und dem Carboxy-terminalen 125 Aminosäuren von APP-SW, der schwedischen Mutation, gebildet wird. Das beta-Sekretase-Enzym stammt aus humanem Gehirngewebe, wie es bei Sinha et al., 1999, Nature 40: 537–540, beschrieben ist, oder ist als Volllängen-Enzym (Aminosäuren 1–501) rekombinant produziert und kann z.B. aus 293 Zellen hergestellt werden, die die rekombinante cDNA exprimieren, wie es in WO 00/47618 beschrieben ist.
Eine Inhibierung des Enzyms wird z.B. durch Immunoassay der Enzym-Spaltprodukte analysiert. Ein beispielhafter ELISA verwendet einen Anti-MBP-Fang-Antikörper, der an vorbeschichteten und blockierten 96-Well-Platten mit hoher Bindung abgeschieden ist, gefolgt von Inkubation mit verdünntem Enzym-Reaktionsüberstand, Inkubation mit einem spezifischen Reporter-Antikörper, z.B. biotinylierter Anti-SW192-Reporter-Antikörper, und weitere Inkubation mit Streptavidin/alkalischer Phosphatase. In dem Assay resultiert die Spaltung des intakten MBP-C125SW-Fusionsproteins in der Erzeugung eines verkürzten Amino-terminalen Fragments, das ein neues SW-192-Antikörper-positives Epitop am Carboxy-Terminus freilegt. Die Detektion erfolgt durch ein fluoreszierendes Substratsignal bei Spaltung durch die Phosphatase. ELISA detektiert nur eine Spaltung nach Leu596 an der APP-SW751-Mutationsstelle des Substrats.
Spezifisches Assay-Verfahren
Verbindungen werden in einer 1:1-Verdünnungsreihe zu einer Sechs-Punkte-Konzentrationskurve (2 Wells pro Konzentration) in einer 96-Platten-Reihe pro getesteter Verbindung verdünnt. Jede der Testverbindungen wird in DMSO präpariert, um eine 10 millimolare Stammlösung herzustellen. Die Stammlösung wird in DMSO reihenverdünnt, um eine endgültige Verbindungskonzentration von 200 Mikromolar am höchsten Punkt einer 6-Punkte-Verdünnungskurve zu erhalten. Zehn (10) Mikroliter jeder Verdünnung werden dann zu jedem von zwei Wells der Reihe C einer entsprechenden V-Boden-Platte gegeben, zu der vorher 190 Mikroliter 52 millimolares NaOAc, 7,9% DMSO, pH 4,5, gegeben worden waren. Die Platte mit der mit NaOAc verdünnten Verbindung wird zentrifugiert, um ein Pellet zu präziptieren; 20 Mikroliter/Well werden zu einer entsprechenden Platte mit flachem Boden transferiert, in die 30 Mikroliter eines eiskalten Enzym-Substrat-Gemisches (2,5 Mikroliter MBP-C125SW-Substrat, 0,03 Mikroliter Enzym und 24,5 Mikroliter eiskaltes, 0,09% TX100 pro 30 Mikroliter) gegeben werden. Das Endreaktionsgemisch mit 200 mikromolarer Verbindung beträgt am höchsten Punkt der Kurve 5% DMSO, 20 Millimolar NaAc, 0,06% TX100, mit pH 4,5.
Ein Erwärmen der Platten auf 37 Grad Celsius startet die Enzymreaktion. Nach 90 Minuten bei 37 Grad Celsius werden 200 Mikroliter/Well kaltes Probenverdünnungsmittel zugesetzt, um die Reaktion zu stoppen, und 20 Mikroliter/Well werden auf eine entsprechende, mit Anti-MBP-Antikörper beschichtete ELISA-Platte zum Einfangen, die 80 Mikroliter/Well Probeverdünnungsmittel enthält, transferiert. Diese Reaktion wird über Nacht bei 4 Grad Celsius inkubiert, und der ELISA wird am nächsten Tag nach einer 2-stündigen Inkubation mit Anti-192SW-Antikörper, gefolgt von Streptavidin-AP-Konjugat und fluoreszierendem Substrat, entwickelt. Das Signal wird auf einem Fluoreszenzplatten-Lesegerät abgelesen.
Die relative Verbindungs-Inhibierungs-Wirksamkeit wird bestimmt, indem die Konzentration einer Verbindung, die eine 50%ige Reduktion beim detektierten Signal (IC₅₀) im Vergleich zu dem Enzymreaktionssignal in den Kontrollwells ohne zugesetzte Verbindung zeigt, berechnet wird. In diesem Assay wiesen die Verbindungen der Erfindung einen IC₅₀ von weniger als 50 Mikromolar auf.
Beispiel B
Zellfreier Inhibierungsassay, der ein synthetisches APP-Substrat verwendet
Ein synthetisches APP-Substrat, das durch beta-Sekretase gespalten werden kann und das N-terminales Biotin aufweist und durch die kovalente Bindung von Oregongrün an den Cys-Rest fluoreszent gemacht wurde, wird verwendet, um die beta-Sekretase-Aktivität in Gegenwart oder Abwesenheit der inhibitorischen Verbindungen der Erfindung zu analysieren. Einsetzbare Substrate umfassen die Folgenden:
Biotin-SEVNL-DAEFR[Oregongrün]KK [SEQ ID NO: 1]
Biotin-SEVKM-DAEFR[Oregongrün]KK [SEQ ID NO: 2]
Biotin-GLNIKTEEISEISY-EVEFRC[Oregongrün]KK [SEQ ID NO: 3]
Biotin-ADRGLTTRPGSGLTNIKTEEISEVNL-DAEF[Oregongrün]KK [SEQ ID NO: 4]
Biotin-FVNQHLCoxGSHLVEALY-LVCoxGERGFFYTPKA[Oregongrün]KK [SEQ ID NO: 5]
Das Enzym (0,1 Nanomolar) und Testverbindungen (0,001–100 Mikromolar) werden in vorblockierten, schwarzen Platten mit niedriger Affinität (384 Well) bei 37 Grad Celsius für 30 Minuten inkubiert. Die Reaktion wird durch Zusatz von 150 millimolarem Substrat zu einem Endvolumen von 30 Mikroliter pro Well initiiert. Die endgültigen Assaybedingungen sind: 0,001–100 Mikromolar Verbindungs-Inhibitor; 0,1 Molar Natriumacetat (pH 4,5); 150 Nanomolar Substrat; 0,1 Nanomolar lösliche beta-Sekretase; 0,001% Tween 20 und 2% DMSO. Das Assay-Gemisch wird für 3 Stunden bei 37°C inkubiert, und die Reaktion wird durch Zusatz einer sättigenden Konzentration an immunreinem Streptavidin beendet. Nach Inkubation mit Streptavidin bei Raumtemperatur für 15 Minuten wird die Fluoreszenzpolarisation gemessen, z.B. unter Verwendung eines LJL-Acqurest (Anregung 485 nm/Emission 530 nm). Die Aktivität des beta-Sekretase-Enzyms wird durch Änderungen bei der Fluoreszenzpolarisation detektiert, welche auftreten, wenn das Substrat durch das Enzym gespalten wird. Eine Inkubation in Gegenwart oder Abwesenheit von Verbindungs-Inhibitor beweist eine spezifische Inhibierung der enzymatischen Spaltung des synthetischen APP-Substrats durch beta-Sekretase. In diesem Assay zeigten erfindungsgemäße Verbindungen einen IC₅₀ von weniger als 50 Mikromolar.
Beispiel C
beta-Sekretase-Inhibierung: P26-P4'SW-Assay
Synthetische Substrate, die die beta-Sekretase-Spaltstelle von APP enthalten, werden verwendet, um die beta-Sekretase-Aktivität zu analysieren, wobei z.B. die Verfahren verwendet werden, die in der veröffentlichten PCT-Anmeldung WO 00/47618 beschrieben werden. Das P26-P4'SW-Substrat ist ein Peptid der folgenden Sequenz: (Biotin)-CGGADRGLTTRPGSGLTNIKTEEISEVNLDAEF [SEQ ID NO: 6]
Der P26-P1-Standard hat die Sequenz:
(Biotin)CGGADRGLTTRPGSGLTNIKTEEISEVNL [SEQ ID NO: 7]
Kurz ausgedrückt, die Biotin-gekoppelten synthetischen Substrate werden bei einer Konzentration von etwa 0 bis etwa 200 Mikromolar in diesem Assay inkubiert. Wenn Inhibitorverbindungen getestet werden, ist eine Substratkonzentration von etwa 1,0 Mikromolar bevorzugt. Testverbindungen, die in DMSO verdünnt sind, werden dem Reaktionsgemisch zugesetzt, wobei die End-DMSO-Konzentration 5% ist. Kontrollen enthalten ebenfalls eine End-DMSO-Konzentration von 5%. Die Konzentration an beta-Sekretase-Enzym in der Reaktion wird variiert, um Produktkonzentrationen mit dem linearen Bereich des ELISA-Assays, etwa 125 bis 2000 Picomolar, nach Verdünnung zu ergeben.
Das Reaktionsgemisch enthält auch etwa 20 Millimolar Natriumacetat, pH 4,5, 0,06% Triton X100 und wird bei 37 Grad Celsius für etwa 1 bis 3 Stunden inkubiert. Proben werden dann in Assay-Puffer verdünnt (z.B. 145,4 Nanomolar Natriumchlorid, 9,51 Millimolar Natriumphosphat, 7,7 Millimolar Natriumazid, 0,05% Triton X405, 6 g/Liter Rinderserumalbumin, pH 7,4), um die Reaktion abzuschrecken, dann für einen Immunoassay der Spaltprodukte weiter verdünnt.
Spaltprodukte können durch ELISA analysiert werden. Verdünnte Proben und Standards werden in Assayplatten, die mit Fang-Antikörper, z.B. SW192, überzogen sind, für etwa 24 Stunden bei 4 Grad Celsius inkubiert. Nach Waschen in TTBS-Puffer (150 Millimolar Natriumchlorid, 25 Millimolar Tris, 0,05% Tween 20, pH 7,5) werden die Proben mit Streptavidin-AP nach den Instruktionen des Herstellers inkubiert. Nach einer einstündigen Inkubation bei Raumtemperatur werden die Proben in TTBS gewaschen und mit Fluoreszenz-Substratlösung A (31,2 g/Liter 2-Amino-2-methyl-1-propanol, 30 mg/Liter, pH 9,5) inkubiert. Eine Reaktion mit Streptavidin-alkalischem Phosphat erlaubt eine Detektion durch Fluoreszenz. Verbindungen, die wirksame Inhibitoren der beta-Sekretase-Aktivität sind, zeigen eine verringerte Spaltung des Substrats im Vergleich zu einer Kontrolle.
Beispiel D
Assays unter Verwendung synthetischer Oligopeptid-Substrate
Synthetische Oligopeptid-Präparate werden hergestellt, die die bekannte Spaltungsstelle von beta-Sekretase und gegebenenfalls detektierbare Tags, z.B. fluoreszierende oder chouromogene Gruppierungen, einbauen. Beispiele für solche Peptide wie auch Verfahren zu ihrer Herstellung und Detektion sind im der US-Patent Nr. 5 942 400, das hier durch Referenz aufgenommen gilt, beschrieben. Spaltprodukte können unter Verwendung von Hochleistungsflüssigkeitschromatographie oder fluoreszenten oder chouromogenen Detektionsverfahren, die für das zu detektierende Peptid geeignet sind, nach Verfahren, die auf dem Fachgebiet gut bekannt sind, detektiert werden.
Beispielweise hat ein derartiges Peptid die Sequenz SEVNL-DAEF [SEQ ID NO: 8], und die Spaltstelle liegt zwischen den Resten 5 und 6. Ein anderes bevorzugtes Substrat hat die Sequenz ADRGLTTRPGSGLTNIKTEEISEVNL-DAEF [SEQ ID NO: 9], und die Spaltstelle liegt zwischen den Resten 26 und 27.
Diese synthetischen APP-Substrate werden in Gegenwart von beta-Sekretase unter Bedingungen, die ausreichen, in einer beta-Sekretase-vermittelten Spaltung des Substrats zu resultieren, inkubiert. Ein Vergleich der Spaltungsresultate in Gegenwart des Verbindungs-Inhibitors mit den Kontrollresultaten liefert ein Maß für die Inhibitor-Aktivität der Verbindung.
Beispiel E
Zellulärer Assay auf Inhibierung der beta-Sekretase-Aktivität
Ein beispielhafter Assay für die Analyse der Inhibierung der beta-Sekretase-Aktivität nutzt die humane Embryo-Nieren-Zelllinie HEKp293 (ATCC-Eingangsnr. CRL-1573), die mit APP751 transfiziert ist, das die natürlich auftretende Doppelmutation Lys651Met52 zu Asn651Leu652 (nummeriert für APP751) enthält, üblicherweise als die schwedische Mutation bezeichnet, von der gezeigt wurde, dass sie A-beta überproduziert (Citron et al., 1992, Nature 360: 672–674), wie es in US-Patent Nr. 5 604 102 beschrieben ist.
Die Zellen werden in Gegenwart/Abwesenheit der Inhibitor-Verbindung (verdünnt in DMSO) in der gewünschten Konzentration, im Allgemeinen bis zu 10 Mikrogramm/ml, inkubiert. Am Ende des Behandlungszeitraums wird das konditionierte Medium auf beta-Sekretase-Aktivität, z.B. durch Analyse von Spaltfragmenten, analysiert. A-beta kann durch Immunoassay unter Verwendung spezifischer Detektionsantikörper analysiert werden. Die enzymatische Aktivität wird in Gegenwart und Abwesenheit der Verbindungs-Inhibitoren gemessen, um eine spezifische Inhibierung der beta-Sekretase-vermittelten Spaltung von APP-Substrat zu beweisen.
Beispiel F
Inhibierung von beta-Sekretase in Tiermodellen für AD
Verschiedene Tiermodelle können eingesetzt werden, um auf Inhibierung der beta-Sekretase-Aktivität durchzumustern. Beispiele für Tiermodelle, die in der Erfindung einsetzbar sind, umfassen, sind aber nicht beschränkt auf, Maus, Meerschweinchen, Hund und dergleichen. Die verwendeten Tiere können Wildtyp-, transgene oder Knockout-Mndelle sein. Zusätzlich können Säuger-Modelle-Mutationen in APP, z.B. APP695-SW und dergleichen, die hierin beschrieben sind, exprimieren. Beispiele für transgene, nicht-humane Säuger-Modelle sind in den US-Patenten Nr. 5 604 102, 5 912 410 und 5 811 633 beschrieben.
PDAPP-Mäuse, die wie bei Games et al., 1995, Nature 373: 523–527, beschrieben, erzeugt werden, sind einsetzbar, um eine in vivo-Suppression der A-beta-Freisetzung in Gegenwart von vermeintlichen Inhibitor-Verbindungen zu analysieren. Wie in US-Patent Nr. 6 191 166 beschrieben wird, wird 4 Monate alten PDAPP-Mäusen eine Verbindung, die in einem Vehikel, wie z.B. Maisöl, formuliert ist, verabreicht. Den Mäusen wird eine Dosis der Verbindung (1–30 mg/ml; vorzugsweise 1–10 mg/ml) verabreicht. Nach einer gewissen Zeit, z.B. 3–10 Stunden, werden die Tiere getötet, und die Gehirne werden zur Analyse entfernt.
Transgenen Tieren wird eine Menge des Verbindungs-Inhibitors, die in einem Träger formuliert ist, der für den gewählten Verabreichungsmodus geeignet ist, verabreicht. Kontrolltiere bleiben unbehandelt, werden mit Vehikel behandelt oder werden mit einer inaktiven Verbindung behandelt. Eine Verabreichung kann akut sein, d.h., eine Einzeldosis oder Mehrfachdosen an einem Tag (bzw. single dose oder multiple dose), oder kann chronisch sein, d.h., die Dosierung wird täglich für einen Zeitraum von Tagen wiederholt. Beginnend zur Zeit 0 wird Gehirngewebe oder Zerebralflüssigkeit aus ausgewählten Tieren erhalten und auf Vorliegen von APP-Spaltpeptiden, einschließlich A-beta, z.B. durch Immunassay unter Verwendung spezifischer Antikörper zur A-beta-Detektion, analysiert. Am Ende des Testzeitraums werden die Tiere getötet, und Gehirngewebe oder Zerebralflüssigkeit wird auf das Vorliegen von A-beta und/oder beta-Amyloid-Plaques analysiert. Das Gewebe wird auch auf Nekrose analysiert.
Es wird erwartet, dass Tiere, denen die Verbindungs-Inhibitoren der Erfindung verabreicht wurden, im Vergleich zu nicht-behandelten Kontrollen reduziertes A-beta in Gehirngeweben oder Zerebralflüssigkeiten und reduzierte beta-Amyloid-Plaques im Gehirngewebe zeigen.
Beispiel G
Inhibierung der A-beta-Produktion bei menschlichen Patienten
Patienten, die an Alzheimer-Krankheit (AD) leiden, zeigen eine erhöhte Menge an A-beta im Gehirn. AD-Patienten wird eine Menge des Verbindungs-Inhibitors, der in einem für den gewählten Verabreichungsmodus geeigneten Träger formuliert ist, verabreicht. Die Verabreichung wird für die Dauer des Testzeitraums täglich wiederholt. Beginnend am Tag 0 werden kognitive und Gedächtnistests durchgeführt, z.B. einmal pro Monat.
Es wird erwartet, dass Patienten, denen die Verbindungs-Inhibitoren verabreicht werden, eine Verlangsamung oder Stabilisierung des Krankheitsfortschreitens zeigen, was durch Änderungen in einem oder mehreren der folgenden Krankheitsparameter analysiert wird: A-beta, das in CSF oder Plasma vorliegt; Gehirn- oder Hippocampus-Volumen; A-beta-Ablagerungen im Gehirn; Amyloid-Plaque im Gehirn; und Scores für kognitive und Gedächtnisfunktion, verglichen mit Kontrollen von nicht-behandelten Patienten.
Beispiel H
Prävention der A-beta-Produktion bei Patienten mit Risiko für AD
Patienten, die für eine Entwicklung von AD prädisponiert sind oder ein Risiko dafür tragen, werden entweder durch Kenntnis eines familiären Vererbungsmusters, z.B. Vorliegen der schwedischen Mutation, und/oder durch Überwachung von Diagnoseparameter identifiziert. Patienten, die als prädisponiert oder mit einem Risiko für die Entwicklung von AD identifiziert wurden, wird eine Menge des Verbindungs-Inhibitors, der in einem für den gewählten Verabreichungsmodus geeigneten Träger formuliert wurde, verabreicht. Die Verabreichung wird täglich für die Dauer des Testzeitraums wiederholt. Beginnend am Tag 0 werden kognitive und Gedächtnistests durchgeführt, z.B. einmal pro Monat.
Es wird erwartet, dass Patienten, denen die Verbindungs-Inhibitoren verabreicht wurden, eine Verlangsamung oder Stabilisierung des Krankheitsfortschreitens zeigen, wie es durch Änderungen in einem oder mehreren der folgenden Krankheitsparameter analysiert wird: A-beta, das in CSF oder Plasma vorliegt; Gehirn- oder Hippocampus-Volumen; Amyloid-Plaque im Gehirn; und Scores für kognitive und Gedächtnisfunktion, im Vergleich zu nicht-behandelten Kontroll-Patienten.
Es sollte betont werden, dass die Singularformen "ein", "eine" bzw. "eines" und "der" bzw. "die" bzw. "das", wie sie in dieser Beschreibung und den beigefügten Ansprüchen verwendet werden, Pluralformen beinhalten, wenn der Inhalt nicht klar etwas anderes diktiert. Somit beinhaltet z.B. eine Bezugnahme auf eine Zusammensetzung, die "eine Verbindung" enthält, auch ein Gemisch aus zwei oder mehr Verbindungen. Es sollte betont werden, dass der Ausdruck "oder" allgemein in dem Sinne verwendet wird, dass "und/oder" eingeschlossen sind, wenn der Inhalt nicht klar etwas anderes vorgibt.
Alle wissenschaftlichen und technischen Begriffe, die hierin verwendet werden, haben dieselbe Bedeutung, wie sie üblicherweise von einem Fachmann auf dem Gebiet, zu dem diese Erfindung gehört, verstanden wird, es sei denn, sie sind anders definiert.

Claims

Substituiertes Amin der Formel (XV)
worin R₁ -CH₂-Phenyl ist, das gegebenenfalls mit einem, zwei, drei oder vier der folgenden Substituenten am Phenylring substituiert ist: (A) C₁-C₆-Alkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃ und C₁-C₃-Alkoxy, und NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b -H oder C₁-C₆-Alkyl sind, (B) C₂-C₆-Alkenyl mit einer oder zwei Doppelbindungen, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -F, -Cl, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy, und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b -H oder C₁-C₆-Alkyl sind, (C) C₂-C₆-Alkinyl mit einer oder zwei Dreifachbindungen, gegebenenfalls substutiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -F, -Cl, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy, und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b -H oder C₁-C₆-Alkyl sind, (D) -F, Cl, -Br oder -I, (F) -C₁-C₆-Alkoxy, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei -F, (G) -NR_N-2R_N-3, worin R_N-2 und R_N-3 wie unten definiert sind, (H) -OH, (I) -C≡N, (J) C₃-C₇-Cycloalkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -F, -Cl, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy, und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b -H oder C₁-C₆-Alkyl sind, (K) -CO-(C₁-C₄-Alkyl), (L) -SO₂-NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, (M) -CO-NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, oder (N) -SO₂-(C₁-C₄-Alkyl), worin R₂ ist: (I) -H, worin R₃ ist: (I) -H, worin R_N ist: (I) R_N-1-X_N-, worin X_N für -CO- steht, worin R_N-1 ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus: (A) R_N-Aryl, worin R_N-Aryl Phenyl ist, das gegebenenfalls mit einem, zwei oder drei der folgenden Substituenten substituiert ist, welche gleich oder unterschiedlich sein können und sind: (1) C₁-C₆-Alkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, (2) -OH, (3) -NO₂, (4) -F, -Cl, -Br, -I, (5) -CO-OH, (6) -C≡N, (7) -(CH₂)_0-4-CO-NR_N-2R_N-3, worin R_N-2 und R_N-3 gleich oder unterschiedlich sind und ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus: (a) -H, (b) -C₁-C₆-Alkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus: (i) -OH und (ii) -NH₂, (c) -C₁-C₆-Alkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei -F, -Cl, -Br oder -I, (d) -C₃-C₇-Cycloalkyl, (e) -(C₁-C₂-Alkyl)-(C₃-C₇-cycloalkyl), (f) -(C₁-C₆-Alkyl)-O-(C₁-C₃-alkyl), (g) -C₂-C₆-Alkenyl mit einer oder zwei Doppelbindungen, (h) -C₂-C₆-Alkinyl mit einer oder zwei Dreifachbindungen, (i) -C₁-C₆-Alkylkette mit einer Doppelbindung und einer Dreifachbindung, (j) -R_1-Aryl, worin R_1-Aryl Phenyl, 1-Naphthyl, 2-Naphthyl und Indanyl, Indenyl, Dihydronaphthalyl oder Tetralinyl ist, gegebenenfalls am Arylring substituiert mit einem, zwei, drei oder vier der folgenden Substituenten: (A) C₁-C₆-Alkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃ und C₁-C₃-Alkoxy, und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, (B) C₂-C₆-Alkenyl mit einer oder zwei Doppelbindungen, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -F, -Cl, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b -H oder C₁-C₆-Alkyl sind, (C) C₂-C₆-Alkinyl mit einer oder zwei Dreifachbindungen, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -F, -Cl, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b -H oder C₁-C₆-Alkyl sind, (D) -F, Cl, -Br oder -I, (F) -C₁-C₆-Alkoxy, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei -F, (G) -NR_N-2R_N-3, (H) -OH, (I) -C≡N, (J) C₃-C₇-Cycloalkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -F, -Cl, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b -H oder C₁-C₆-Alkyl sind, (K) -CO-(C₁-C₄-Alkyl), (L) -SO₂-NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, (M) -CO-NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, oder (N)-SO₂-(C₁-C₄-Alkyl) sind, (k) -R_1-Heteroaryl, worin R_1-Heteroaryl ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus: Pyridinyl, Pyrimidinyl, Chinolinyl, Benzothienyl, Indolyl, Indolinyl, Pyridazinyl, Pyrazinyl, Isochinolyl, Chinazolinyl, Chinoxalinyl, Phthalazinyl, Imidazolyl, Isoxazolyl, Pyrazolyl, Oxazolyl, Thiazolyl, Indolizinyl, Indazolyl, Benzothiazolyl, Benzimidazolyl, Benzofuranyl, Furanyl, Thienyl, Pyrrolyl, Oxadiazolyl, Thiadiazolyl, Triazolyl, Tetrazolyl, Oxazolopyridinyl, Imidazopyridinyl, Isothiazolyl, Naphthyridinyl, Cinnolinyl, Carbazolyl, beta-Carbolinyl, Isochromanyl, Chromanyl, Tetrahydroisochinolinyl, Isoindolinyl, Isobenzotetrahydrofuranyl, Isobenzotetrahydrothienyl, Isobenzothienyl, Benzoxazolyl, Pyridopyridinyl, Benzotetrahydrofuranyl, Benzotetrahydrothienyl, Purinyl, Benzodioxolyl, Triazinyl, Phenoxazinyl, Phenothiazinyl, Pteridinyl, Benzothiazolyl, Imidazopyridinyl, Imidazothiazolyl, Dihydrobenzisoxazinyl, Benzisoxazinyl, Benzoxazinyl, Dihydrobenzisothiazinyl, Benzopyranyl, Benzothiopyranyl, Coumarinyl, Isocoumarinyl, Chromonyl, Chromanonyl, Pyridinyl-N-oxid, Tetrahydrochinolinyl, Dihydrochinolinyl, Dihydrochinolinonyl, Dihydroisochinolinonyl, Dihydrocoumarinyl, Dihydroisocoumarinyl, Isoindolinonyl, Benzodioxanyl, Benzoxazolinonyl, Pyrrolyl-N-oxid, Pyrimidinyl-N-oxid, Pyridazinyl-N-oxid, Pyrazinyl-N-oxid, Chinolinyl-N-oxid, Indolyl-N-oxid, Indolinyl-N-oxid, Isochinolyl-N-oxid, Chinazolinyl-N-oxid, Chinoxalinyl-N-oxid, Phthalazinyl-N-oxid, Imidazolyl-N-oxid, Isoxazolyl-N-oxid, Oxazolyl-N-oxid, Thiazolyl-N-oxid, Indolizinyl-N- oxid, Indazolyl-N-oxid, Benzothiazolyl-N-oxid, Benzimidazolyl-N-oxid, Pyrrolyl-N-oxid, Oxadiazolyl-N-oxid, Thiadiazolyl-N-oxid, Triazolyl-N-oxid, Tetrazolyl-N-oxid, Benzothiopyranyl-S-oxid und Benzothiopyranyl-S, S-dioxid, worin Heteroaryl gegebenenfalls substituiert ist mit einem, zwei, drei oder vier aus: (1) C₁-C₆-Alkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, (2) C₂-C₆-Alkenyl mit einer oder zwei Doppelbindungen, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -F, -Cl, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b -H oder C₁-C₆-Alkyl sind, (3) C₂-C₆-Alkenyl mit einer oder zwei Dreifachbindungen, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -F, -Cl, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b -H oder C₁-C₆-Alkyl sind, (4) -F, -Cl, -Br oder -I, (6) -C₁-C₆-Alkoxy, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei -F, (7) -NR_N-2R_N-3, (8) -OH, (9) -C≡N, (10) C₃-C₇-Cycloalkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -F, -Cl, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b -H oder C₁-C₆-Alkyl sind, (11) -CO-(C₁-C₄-Alkyl), (12) -SO₂-NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, (13) -CO-NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, oder (14) -SO₂-(C₁-C₄-Alkyl); (8) -(CH₂)_0-4-CO-(C₁-C₁₂-Alkyl), (9) -(CH₂)_0-4-CO-(C₂-C₁₂-Alkenyl mit einer, zwei oder drei Doppelbindungen), (10) -(CH₂)_0-4-CO-(C₂-C₁₂-Alkinyl mit einer, zwei oder drei Dreifachbindungen), (11) -(CH₂)_0-4-CO-(C₃-C₇-Cycloalkyl), (12) -(CH₂)_0-4-CO-R_1-Aryl, worin R_1-Aryl, wie oben definiert ist, (13) -(CH₂)_0-4-CO-R_1-Heteroaryl worin R_1-Heteroaryl, wie oben definiert ist, (14) -(CH₂)_0-4-CO-R_{1-Heterocyclus}, worin R_{1-Heterocyclus} ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Morpholinyl, Thiomorpholinyl, Thiomorpholinyl-S-oxid, Thiomorpholinyl-S,S-dioxid, Piperazinyl, Homopiperazinyl, Pyrrolidinyl, Pyrrolinyl, Tetrahydropyranyl, Piperidinyl, Tetrahydrofuranyl, Tetrahydrothienyl, Homopiperidinyl, Homomorpholinyl, Homothiomorpholinyl, Homothiomorpholinyl-S,S-dioxid, Oxazolidinonyl, Dihydropyrazolyl, Dihydropyrrolyl, Dihydropyrazinyl, Dihydropyridinyl, Dihydropyrimidinyl, Dihydrofuryl, Dihydropyranyl, Tetrahydrothienyl-S-oxid, Tetrahydrothienyl-S,S-dioxid und Homothiomorpholinyl-S-oxid, worin die R_{1-Heterocyclus}-Gruppe durch ein beliebiges Atom der Stamm-R_{1-Heterocyclus}-Gruppe, die durch Wasserstoff substituiert ist, so gebunden ist, dass die neue Bindung an die R_{1-Heterocyclus}-Gruppe das Wasserstoffatom und seine Bindung ersetzt, wobei der Heterocyclus gegebenenfalls mit einer, zwei, drei oder vier der folgenden Gruppen substituiert ist: (1) C₁-C₆-Alkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, (2) C₂-C₆Alkenyl mit einer oder zwei Doppelbindungen, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -F, -Cl, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b -H oder C₁-C₆-Alkyl sind, (3) C₂-C₆-Alkinyl mit einer oder zwei Dreifachbindungen, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -F, -Cl, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b -H oder C₁-C₆-Alkyl sind, (4) -F, Cl, -Br oder -I, (5) C₁-C₆-Alkoxy, (6) -C₁-C₆-Alkoxy, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei -F, (7) -NR_N-2R_N-3, worin R_N-2 und R_N-3 wie oben definiert sind, (8) -OH, (9) -C≡N, (10) -C₃-C₇-Cycloalkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -F, -Cl, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b -H oder C₁-C₆-Alkyl sind, (11) -CO-(C₁-C₄-Alkyl), (12) -SO₂-NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, (13) -CO-NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, (14) -SO₂-(C₁-C₄-Alkyl) oder (15) =O (15) -(CH₂)_0-4-CO-R_N-4, worin R_N-4 ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Morpholinyl, Thiomorpholinyl, Piperazinyl, Piperidinyl, Homomorpholinyl, Homothiomorpholinyl, Homothiomorpholinyl-S-oxid, Homothiomorpholinyl-S,S-dioxid, Pyrrolinyl und Pyrrolidinyl, wobei jede Gruppe gegebenenfalls mit einem, zwei, drei oder vier C₁-C₆-Alkyl substituiert ist, (16) -(CH₂)_0-4-CO-O-R_N-5, worin R_N-5 aus der Gruppe ausgewählt ist, bestehend aus (a) C₁-C₆-Alkyl, (b) -(CH₂)_0-2-(R_1-Aryl), worin R_1-Aryl wie oben definiert ist, (c) C₂-C₆-Alkenyl, das eine oder zwei Doppelbindungen enthält, (d) C₂-C₆-Alkinyl, das eine oder zwei Dreifachbindungen enthält, (e) C₃-C₇-Cycloalkyl und (f) -(CH₂)_0-2-(R_1-Heteroaryl), worin R_1-Heteroaryl wie oben definiert ist, (17) -(CH₂)_0-4-SO₂-NR_N-2R_N-3, worin R_N-2 und R_N-3 wie oben definiert sind, (18) -(CH₂)_0-4-SO-(C₁-C₈-Alkyl), (19) -(CH₂)_0-4-SO₂-(C₁-C₁₂-Alkyl) (20) -(CH₂)_0-4-SO₂-(C₃-C₇-Cycloalkyl) (21) -(CH₂)_0-4-N(H oder R_N-5)-CO-O-R_N-5, worin R_N-5 gleich oder unterschiedlich sein können und wie oben definiert ist, (22) -(CH₂)_0-4-N(H oder R_N-5)-CO-N(R_N-5)₂, worin R_N-5 gleich oder unterschiedlich sein können und wie oben definiert ist, (23) -(CH₂)_0-4-N-CS-N(R_N-5)₂, worin R_N-5 gleich oder unterschiedlich sein können und wie oben definiert ist, (24) -(CH₂)_0-4-N(-H oder R_N-5)-CO-R_N-2, worin R_N-5 und R_N-2 gleich oder unterschiedlich sein können und wie oben definiert sind, (25) -(CH₂)_0-4-NR_N-2R_N-3, worin R_N-2 und R_N-3 gleich oder verschieden sein können und wie oben definiert sind, (26) -(CH₂)_0-4-R_N-4, worin R_N-4 wie oben definiert ist, (27) -(CH₂)_0-4-O-CO-(C₁-C₆-Alkyl), (28) -(CH₂)_0-4-O-P(O)-(OR_N-Aryl-1)₂, worin R_N-Aryl-1 -H oder C₁-C₄-Alkyl ist, (29) -(CH₂)_0-4-O-CO-N(R_N-5)₂, worin R_N-5 wie oben definiert ist, (30) -(CH₂)_0-4-O-CS-N(R_N-5)₂, worin R_N-5 wie oben definiert ist, (34) -(CH₂)_0-4-O-(C₁-C₆-Alkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei, drei, vier oder fünf -F) (35) C₃-C₇-Cycloalkyl, (36) C₂-C₆-Alkenyl mit einer oder zwei Doppelbindungen, gegebenenfalls substituiert mit C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy oder -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, (37) C₂-C₆-Alkinyl mit einer oder zwei Dreifachbindungen, gegebenenfalls substituiert mit C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₃-Alkoxy oder -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, (38) -(CH₂)_0-4-N(-H oder R_N-5)-SO₂-R_N-2, worin R_N-5 und R_N-2 gleich oder verschieden sein können und wie oben beschrieben sind, oder (39) -(CH₂)_0-4-C₃-C₇-Cycloalkyl, worin R_A ist: (I) -C₁-C₁₀-Alkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₆-Alkoxy, O-Phenyl, -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, -OC=ONR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, -S(=O)_0-2R_1-a, worin R_1-a wie oben definiert ist, -NR_1-aC=ONR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, -CONR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, und -S(=O)₂NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, (II) -(CH₂)_0-3-(C₃-C₈)Cycloalkyl, worin Cycloalkyl gegebenenfalls mit einem, zwei oder drei Substituenten substituiert sein kann, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₆-Alkoxy, -O-Phenyl, -CO-OH, -CO-O-(C₁-C₄-Alkyl) und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, (III) -(CR_A-xR_A-y)_0-4-R_A-Aryl, worin R_A-x und R_A-y sind: (A) -H, und R_A-Aryl Phenyl ist, das gegebenenfalls substituiert ist, wie es oben für R_N-Aryl definiert ist, (XXVIII) -H, (XXX) -C=OR₇, worin R₇ C₁-C₃-Alkyl ist, worin X N oder -O ist, mit der Maßgabe, dass, wenn X O ist, R_B fehlt; und wenn X N ist, R_B ist: (I) -C₁-C₁₀-Alkyl, gegebenenfalls substituiert mit einem, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₆-Alkoxy, O-Phenyl, -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, -OC=ONR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, -S(=O)_0-2R_1-a, worin R_1-a wie oben definiert ist, -NR_1-aC=ONR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, -CONR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, und -S(=O)₂NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, (II) -(CH₂)_0-3-(C₃-C₈)-Cycloalkyl, worin Cycloalkyl gegebenenfalls mit einem, zwei oder drei Substituenten substituiert sein kann, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus C₁-C₃-Alkyl, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -SH, -C≡N, -CF₃, C₁-C₆-Alkoxy, -O-Phenyl, -CO-OH, -CO-O-(C₁-C₄-Alkyl) und -NR_1-aR_1-b, worin R_1-a und R_1-b wie oben definiert sind, (III) -(CR_B-xR_B-y)_0-4-R_B-Aryl, worin R_B-x und R_B-y sind: (A) -H, und R_B-Aryl Phenyl ist, das gegebenenfalls substituiert ist, wie es oben für R_N-Aryl definiert ist, (XXVIII) -H; oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon.
Substituiertes Amin nach Anspruch 1, worin R_A ist: -C₁-C₈-Alkyl, -(CH₂)_0-3-(C₃-C₇)-Cycloalkyl, -(CR_A-xR_A-y)_0-4-R_A-Aryl, worin X -N oder -O ist, mit der Maßgabe, dass, wenn X O ist, R_B fehlt; und wenn X N ist, R_B ist: -C₁-C₈-Alkyl, -(CH₂)_0-3-(C₃-C₇)-Cycloalkyl oder -(CR_A-xR_A-y)_0-4-R_A-Aryl.
Substituiertes Amin nach Anspruch 2, worin R_A ist: -(CR_A-xR_A-y)_0-4-R_A-Aryl; und worin R_B ist: -(CR_B-xR_B-y)_0-4-R_B-Aryl.
Substituiertes Amin nach Anspruch 1, wobei R₁ -CH₂-Phenyl, das mit zwei -F substituiert ist, ist.
Substituiertes Amin nach Anspruch 4, wobei die -F-Substitution 3,5-Difluorbenzyl ist.
Substituiertes Amin nach Anspruch 1, worin R_N R_N-1-X_N- ist, worin X_N -CO- ist, worin R_N-1 R_N-Aryl ist, worin R_N-Aryl, Phenyl ist, das mit einem -CO-NR_N-2R_N-3 substituiert ist, wobei die Substitution am Phenyl 1,3- ist.
Substituiertes Amin nach Anspruch 6, wobei R_N-2 und R_N-3 gleich sind und C₃-Alkyl sind.
Substituiertes Amin nach Anspruch 1, worin R_N R_N-1-X_N- ist, worin X_N -CO- ist und worin R_N-1 R_N-Aryl ist, worin R_N-Aryl Phenyl ist, das mit einem C₁-Alkyl und mit einem -CO-NR_N-2R_N-3 substituiert ist, wobei die Substitution am Phenyl 1,3,5- ist.
Substituiertes Amin nach Anspruch 8, worin R_N-2 und R_N-3 gleich sind und C₃-Alkyl sind.
Substituiertes Amin nach Anspruch 1, worin R_A ist: -(CR_A-xR_A-y)_0-4-R_A-Aryl, worin R_A-Aryl Phenyl ist.
Substituiertes Amin nach Anspruch 10, worin Phenyl in der 3-Position oder in den 3,5-Positionen substituiert ist.
Substituiertes Amin nach Anspruch 1, worin R_B -(CR_B-xR_B-y)_0-4-R_B-Aryl, worin R_B-Aryl Phenyl ist, ist.
Substituiertes Amin nach Anspruch 12, worin Phenyl in der 3-Position oder in den 3,5-Positionen substituiert ist.
Substituiertes Amin nach Anspruch 1, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus: N-[1-(3,5-Difluor-benzyl)-2-hydroxy-3-(N'-methyl-N'-phenyl-hydrazino)propyl]-5-methyl-N',N'-dipropyl-isophthalamid und N-[1-(3,5-Difluor-benzyl)-2-hydroxy-3-phenoxyamino-propyl]-5-methyl-N',N'-dipropyl-isophthalamid.
Substituiertes Amin nach Anspruch 1, wobei das pharmazeutisch annehmbare Salz aus der Gruppe ausgewählt ist, die aus Salzen der folgenden Säuren besteht: Essigsäure, Asparaginsäure, Benzolsulfonsäure, Benzoesäure, Bicarbonsäure, Bischwefelsäure, Biweinsäure, Buttersäure, Calciumedetat, Camsylsäure, Kohlensäure, Chlorbenzoesäure, Citronensäure, Edetinsäure, Edisylsäure, Laurylschwefelsäure, Esylsäure, Esylinsäure, Ameisensäure, Fumarsäure, Gluceptinsäure, Gluconsäure, Glutaminsäure, Glycollylarsanilsäure, Hexamsäure, Hexylresorcinsäure, Hydrabamsäure, Bromwasserstoffsäure, Chlorwasserstoffsäure, Iodwasserstoffsäure, Hydroxynaphthoesäure, Isethionsäure, Milchsäure, Lactobionsäure, Maleinsäure, Äpfelsäure, Malonsäure, Mandelsäure, Methansulfonsäure, Methylsalpetersäure, Methylschwefelsäure, Schleimsäure, Muconsäure, Napsylsäure, Salpetersäure, Oxalsäure, p-Nitromethansulfonsäure, Parmoasäure, Pantothensäure, Phosphorsäure, Monohydrogenphosphorsäure, Dihydrogenphosphorsäure, Phthalsäure, Polygalacturonsäure, Propionsäure, Salicylsäure, Stearinsäure, Bernsteinsäure, Sulfamsäure, Sulfanilsäure, Sulfonsäure, Schwefelsäure, Gerbsäure, Weinsäure, Teoclinsäure und Toluolsulfonsäure.
Geschützte Verbindung der Formel (II)
worin R₁, R₂, R₃, R_A und R_B wie in Anspruch 1 definiert sind, und worin die SCHUTZGRUPPE ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus: t-Butoxycarbonyl, Benzyloxycarbonyl, Formyl, Trityl, Acetyl, Trichloracetyl, Dichloracetyl, Chloracetyl, Trifluoracetyl, Difluoracetyl, Fluoracetyl, 4-Phenylbenzyloxycarbonyl, 2-Methylbenzyloxycarbonyl, 4-Ethoxybenzyloxycarbonyl, 4-Fluorbenzyloxycarbonyl, 4-Chlorbenzyloxycarbonyl, 3-Chlorbenzyloxycarbonyl, 2-Chlorbenzyloxycarbonyl, 2,4-Dichlorbenzyloxycarbonyl, 4-Brombenzyloxycarbonyl, 3-Brombenzyloxycarbonyl, 4-Nitrobenzyloxycarbonyl, 4-Cyanobenzyloxycarbonyl, 2-(4-Xenyl)isopropoxycarbonyl, 1,1-Diphenyleth-1-yloxycarbonyl, 1,1-Diphenylprop-1-yloxycarbonyl, 2-Phenylprop-2-yloxycarbonyl, 2-(p-Toluyl)prop-2-yloxycarbonyl, Cyclopentanyloxycarbonyl, 1-Methylcyclopentanyloxycarbonyl, Cyclohexanyloxycarbonyl, 1-Methylcyclohexanyloxycarbonyl, 2-Methylcyclohexanyloxycarbonyl, 2-(4-Toluylsulfonyl)ethoxycarbonyl, 2-(Methylsulfonyl)ethoxycarbonyl, 2-(Triphenylphosphino)ehoxycarbonyl, Fluorenylmethoxycarbonyl, 2-(Trimethylsilyl)ethoxycarbonyl, Allyloxycarbonyl, 1-(Trimethylsilylmethyl)prop-1-enyloxycarbonyl, 5-Benzisoxalylmethoxycarbonyl, 4-Acetoxybenzyloxycarbonyl, 2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl, 2-Ethinyl-2-propoxycarbonyl, Cyclopropylmethoxycarbonyl, 4-(Decyloxy)benzyloxycarbonyl, Isobornyloxycarbonyl und 1-Piperidyloxycarbonyl, 9-Fluorenylmethylcarbonat, -CH-CH=CH₂ und Phenyl-C(=N-)-H, mit der Maßgabe, dass, wenn SCHUTZGRUPPE t-Butoxycarbonyl ist und R₁ Benzyl ist, R_A und R_B nicht beide Wasserstoff sind.
Geschützte Verbindung nach Anspruch 16, worin R_A -C₁-C₈-Alkyl, -(CH₂)_0-3-(C₃-C₇)-Cycloalkyl, -(CR_A-xR_A-y)_0-4-R_A-Aryl ist, worin R_B -C₁-C₈-Alkyl, -(CH₂)_0-3-(C₃-C₇)-Cycloalkyl oder -(CR_A-xR_A-y)_0-4-R_A-Aryl ist.
Geschützte Verbindung nach Anspruch 16, wobei SCHUTZGRUPPE t-Butoxycarbonyl ist.
Geschützte Verbindung nach Anspruch 16, worin SCHUTZGRUPPE Benzyloxycarbonyl ist.
Geschützte Verbindung der Formel (III)
worin R₁, R₂, R₃, R_A und R_B wie in Anspruch 1 definiert sind; und worin SCHUTZGRUPPE ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus t-Butoxycarbonyl, Benzyloxycarbonyl, Formyl, Trityl, Acetyl, Trichloracetyl, Dichloracetyl, Chloracetyl, Trifluoracetyl, Difluoracetyl, Fluoracetyl, 4-Phenylbenzyloxycarbonyl, 2-Methylbenzyloxycarbonyl, 4-Ethoxybenzyloxycarbonyl, 4-Fluorbenzyloxycarbonyl, 4-Chlorbenzyloxycarbonyl, 3-Chlorbenzyloxycarbonyl, 2-Chlorbenzyloxycarbonyl, 2,4-Dichlorbenzyloxycarbonyl, 4-Brombenzyloxycarbonyl, 3-Brombenzyloxycarbonyl, 4-Nitrobenzyloxycarbonyl, 4-Cyanobenzyloxycarbonyl, 2-(4-Xenyl)isopropoxycarbonyl, 1,1-Diphenyleth-1-yloxycarbonyl, 1,1-Diphenylprop-1-yloxycarbonyl, 2-Phenylprop-2-yloxycarbonyl, 2-(p-Toluyl)prop-2-yloxycarbonyl, Cyclopentanyloxycarbonyl, 1-Methylcyclopentanyloxycarbonyl, Cyclohexanyloxycarbonyl, 1-Methylcyclohexanyloxycarbonyl, 2-Methylcyclohexanyloxycarbonyl, 2-(4-Toluylsulfonyl)ethoxycarbonyl, 2-(Methylsulfonyl)ethoxycarbonyl, 2-(Triphenylphosphino)ethoxycarbonyl, Fluorenylmethoxycarbonyl, 2-(Trimethylsilyl)ethoxycarbonyl, Allyloxycarbonyl, 1-(Trimethylsilylmethyl)prop-1-enyloxycarbonyl, 5-Benzisoxalylmethoxycarbonyl, 4-Acetoxybenzyloxycarbonyl, 2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl, 2-Ethinyl-2-propoxycarbonyl, Cyclopropylmethoxycarbonyl, 4-(Decyloxy)benzyloxycarbonyl, Isobornyloxycarbonyl und 1-Piperidyloxycarbonyl, 9-Fluorenylmethylcarbonat, -CH-CH=CH₂ und Phenyl-C(=N-)-H.
Geschützte Verbindung nach Anspruch 20, worin R_A: -C₁-C₈-Alkyl, -(CH₂)_0-3-(C₃-C₇)-Cycloalkyl oder -(CR_A-xR_A-y)_0-4-R_A-Aryl ist, worin R_B -C₁-C₈-Alkyl, -(CH₂)_0-3-(C₃-C₇)-Cycloalkyl oder -(CR_A-xR_A-y)_0-4-R_A-Aryl ist.
Geschützte Verbindung nach Anspruch 20, worin SCHUTZGRUPPE t-Butoxycarbonyl ist.
Geschützte Verbindung nach Anspruch 20, worin SCHUTZGRUPPE Benzyloxycarbonyl ist.
Geschützte Verbindung der Formel (IV)
worin R₁, R₂, R₃, R_A und R_B wie Anspruch 1 definiert sind; und wobei SCHUTZGRUPPE ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus t-Butoxycarbonyl, Benzyloxycarbonyl, Formyl, Trityl, Acetyl, Trichloracetyl, Dichloracetyl, Chloracetyl, Trifluoracetyl, Difluoracetyl, Fluoracetyl, 4-Phenylbenzyloxycarbonyl, 2-Methylbenzyloxycarbonyl, 4-Ethoxybenzyloxycarbonyl, 4-Fluorbenzyloxycarbonyl, 4-Chlorbenzyloxycarbonyl, 3-Chlorbenzyloxycarbonyl, 2-Chlorbenzyloxycarbonyl, 2,4-Dichlorbenzyloxycarbonyl, 4-Brombenzyloxycarbonyl, 3-Brombenzyloxycarbonyl, 4-Nitrobenzyloxycarbonyl, 4-Cyanobenzyloxycarbonyl, 2-(4-Xenyl)isopropoxycarbonyl, 1,1-Diphenyleth-1-yloxycarbonyl, 1,1-Diphenylprop-1-yloxycarbonyl, 2-Phenylprop-2-yloxycarbonyl, 2-(p-Toluyl)prop-2-yloxycarbonyl, Cyclopentanyloxycarbonyl, 1-Methylcyclopentanyloxycarbonyl, Cyclohexanyloxycarbonyl, 1-Methylcyclohexanyloxycarbonyl, 2-Methylcyclohexanyloxycarbonyl, 2-(4-Toluylsulfonyl)ethoxycarbonyl, 2-(Methylsulfonyl)ethoxycarbonyl, 2-(Triphenylphosphino)ethoxycarbonyl, Fluorenylmethoxycarbonyl, 2-(Trimethylsilyl)ethoxycarbonyl, Allyloxycarbonyl, 1-(Trimethylsilylmethyl)prop-1-enyloxycarbonyl, 5-Benzisoxalylmethoxycarbonyl, 4-Acetoxybenzyloxycarbonyl, 2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl, 2-Ethinyl-2-propoxycarbonyl, Cyclopropylmethoxycarbonyl, 4-(Decyloxy)benzyloxycarbonyl, Isobornyloxycarbonyl und 1-Piperidyloxycarbonyl, 9-Fluorenylmethylcarbonat, -CH-CH=CH₂ und Phenyl-C(=N-)-H.
Geschützte Verbindung nach Anspruch 24 worin R_A -C₁-C₈-Alkyl, -(CH₂)_0-3-(C₃-C₇)-Cycloalkyl, oder -(CR_A-xR_A-y)_0-4-R_A-Aryl ist, worin R_B -C₁-C₈-Alkyl, -(CH₂)_0-3-(C₃-C₇)-Cycloalkyl oder -(CR_A-xR_A-y)_0-4-R_A-Aryl ist.
Geschützte Verbindung nach Anspruch 24, worin SCHUTZGRUPPE t-Butoxycarbonyl ist.
Geschützte Verbindung nach Anspruch 24, worin SCHUTZGRUPPE Benzyloxycarbonyl ist.
Geschützte Verbindung der Formel (XI)
worin R₁, R₂, R₃ und R_A wie in Anspruch 1 definiert sind; und worin SCHUTZGRUPPE ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus t-Butoxycarbonyl, Benzyloxycarbonyl, Formyl, Trityl, Acetyl, Trichloracetyl, Dichloracetyl, Chloracetyl, Trifluoracetyl, Difluoracetyl, Fluoracetyl, 4-Phenylbenzyloxycarbonyl, 2-Methylbenzyloxycarbonyl, 4-Ethoxybenzyloxycarbonyl, 4-Fluorbenzyloxycarbonyl, 4-Chlorbenzyloxycarbonyl, 3-Chlorbenzyloxycarbonyl, 2-Chlorbenzyloxycarbonyl, 2,4-Dichlorbenzyloxycarbonyl, 4-Brombenzyloxycarbonyl, 3-Brombenzyloxycarbonyl, 4-Nitrobenzyloxycarbonyl, 4-Cyanobenzyloxycarbonyl, 2-(4-Xenyl)isopropoxycarbonyl, 1,1-Diphenyleth-1-yloxycarbonyl, 1,1-Diphenylprop-1-yloxycarbonyl, 2-Phenylprop-2-yloxycarbonyl, 2-(p-Toluyl)prop-2-yloxycarbonyl, Cyclopentanyloxycarbonyl, 1-Methylcyclopentanyloxycarbonyl, Cyclohexanyloxycarbonyl, 1-Methylcyclohexanyloxycarbonyl, 2-Methylcyclohexanyloxycarbonyl, 2-(4-Toluylsulfonyl)ethoxycarbonyl, 2-(Methylsulfonyl)ethoxycarbonyl, 2-(Triphenylphosphino)ehoxycarbonyl, Fluorenylmethoxycarbonyl, 2-(Trimethylsilyl)ethoxycarbonyl, Allyloxycarbonyl, 1-(Trimethylsilylmethyl)prop-1-enyloxycarbonyl, 5-Benzisoxalylmethoxycarbonyl, 4-Acetoxybenzyloxycarbonyl, 2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl, 2-Ethinyl-2-propoxycarbonyl, Cyclopropylmethoxycarbonyl, 4-(Decyloxy)benzyloxycarbonyl, Isobornyloxycarbonyl und 1-Piperidyloxycarbonyl, 9-Fluorenylmethylcarbonat, -CH-CH=CH₂ und Phenyl-C(=N-)-H, mit der Maßgabe, dass, wenn SCHUTZGRUPPE t-Butoxycarbonyl ist und R₁ Benzyl ist, R_A nicht Isopropyl, 1-Ethylpropyl, Cyclopentyl, Cyclohexyl oder tert-Butyl ist.
Geschützte Verbindung nach Anspruch 28, worin R_A: -C₁-C₈-Alkyl, -(CH₂)_0-3-(C₃-C₇)-Cycloalkyl, oder -(CR_A-xR_A-y)_0-4-R_A-Aryl ist.
Geschützte Verbindung nach Anspruch 28, worin SCHUTZGRUPPE t-Butoxycarbonyl ist.
Geschützte Verbindung nach Anspruch 28, worin SCHUTZGRUPPE Benzyloxycarbonyl ist.
Verbindung der Formel (XII)
worin R₁, R₂, R₃ und R_A wie in Anspruch 1 definiert sind, mit der Maßgabe, dass, wenn R₁ Benzyl ist, R_A nicht Cyclohexyl oder 1-Ethylpropyl ist.
Verbindung nach Anspruch 32, worin R_A -C₁-C₈-Alkyl, -(CH₂)_0-3-(C₃-C₇)-Cycloalkyl, oder -(CR_A-xR_A-y)_0-4-R_A-Aryl ist.
Verwendung eines substituierten Amins der Formel (XV)
worin R₁, R₂, R₃, R_N, R_A, R_B und X wie in Anspruch 1 definiert sind; oder pharmazeutisch annehmbare Salze davon zur Herstellung eines Medikaments zur Verwendung bei der Behandlung eines Patienten oder zur Prävention bei einem Patienten mit einer Krankheit oder einem Zustand, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Alzheimer-Krankheit, zur Unterstützung der Prävention oder Verzögerung des Einsetzens der Alzheimer-Krankheit, zur Behandlung von Patienten mit milder kognitiver Beeinträchtigung (MCI) und zur Prävention oder Verzögerung des Einsetzens der Alzheimer-Krankheit bei denen, bei denen MCI zu AD fortschreiten würde, zur Behandlung des Down-Syndroms, zur Behandlung von Menschen, die hereditäte cerebrale Hämorrhagie mit Amyloidose des Dutch-Typs haben, zur Behandlung von cerebraler amyloider Angiopathie und zu Verhinderung ihrer potentiellen Folgen, d.h. einzelne und wiederkehrende Lappenhämorrhagien, zur Behandlung anderer degenerativer Demenz, einschließlich Demenz gemischten vaskulären und degenerativen Ursprungs, Demenz in Verbindung mit Parkinson-Krankheit, Demenz in Verbindung mit progressiver supranucleärer Lähmung, Demenz in Verbindung mit kortikaler Basaldegeneration, Alzheimer-Krankheit vom diffusen Lewy-Körper-Typ.
Verwendung eines substituierten Amins der Formel (XV) nach Anspruch 34, wobei die Krankheit Alzheimer-Krankheit ist.
N-{1-(3,5-Difluor-benzyl)-2-hydroxy-3-[N'-methyl-N'-(4-methyl-pentanoyl)-hydrazin]-propyl}-5-methyl-N',N'-dipropyl-isophthalamid.