DE3873278T2

DE3873278T2 - Aryl-substituierte thiophen-3-ole, ihre derivate und analoge als lipoxygenase-inhibitoren.

Info

Publication number: DE3873278T2
Application number: DE8888202030T
Authority: DE
Inventors: Debra L Allison; Charles G Caldwell; Kathleen Rupprecht; Bruce E Witzel
Original assignee: Merck and Co Inc
Current assignee: Merck and Co Inc
Priority date: 1987-09-22
Filing date: 1988-09-16
Publication date: 1993-02-25
Anticipated expiration: 2008-09-17
Also published as: JPH01186881A; DE3873278D1; EP0318066B1; EP0318066A1

Description

Hintergrund der Offenbarung

Die Erfindung betrifft arylsubstituierte Thiophen-3-ole, ihre Dihydroderivate, -1-oxid- und -1,1-dioxid-analoga wie auch arylsubstituierte Furane, alle mit der allgemeinen Formel:
worin Z die Zahl der Doppelbindungen darstellt und 1 oder 2 ist; Y S, SO, SO&sub2; oder O ist; R&sub1; ein Alkoholderivat oder eine Ester-, Acetal-, Carbonat-, Carbamat-, Aralkyl- oder Acetolgruppe bildet und R&sub2; H, Alkyl oder Aryl ist.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen sind 5-Lipoxygenaseinhibitoren und zur Behandlung von Entzündungen und anderen leukotrien-vermittelten Krankheiten verwendbar.
Unter den verschiedenen aus der Oxygenierung von Arachidonsäure hergeleiteten wirksamen biologischen Mediatoren wurden als Prostaglandine oder Leukotriene gekennzeichnete Verbindungen in Verbindung mit verschiedenen Krankheiten gebracht. Ganz besonders wurde die Biosynthese von Prostaglandinen als Ursache von Entzündungen, arthritischen Zuständen (beispielsweise rheumatoider Arthritis, Osteoarthritis und Gicht), Psoriasis, entzündlichen Darmkrankheiten und Schmerz identifiziert. Weiterhin wurde die Bildung von Leukotrienen mit unmittelbaren Überempfindlichkeitsreaktionen und proentzündlichen Wirkungen verbunden. Es ist etabliert, daß Arachidonsäure die Oxygenierung über zwei hauptsächliche enzymatische Wege eingeht:
(1) Den durch das Enzym Cyclooxygenase katalysierten Weg und
(2) den durch das Enzym 5-Lipoxygenase katalysierten Weg.
Die Unterbrechung dieser Wege durch Enzyminhibierung wurde mit dem Ziel einer wirksamen Therapie erforscht. Beispielsweise sind nichtsteroide entzündungshemmende Mittel (NSAID), wie Aspirin, Indomethacin und Diflunisal, bekannte Cyclooxygenaseinhibitoren, die den Prozeß inhibieren,in dem Arachidonsäure über Cyclooxygenase zu Prostaglandinen und Thromboxanen oxygeniert wird.
Kürzlich wurde beobachtet, daß bestimmte Leukotriene für Erkrankungen verantwortlich sind, die mit unmittelbaren Überempfindlichkeitsreaktionen zusammenhängen, wie Asthma, allergischen Störungen und Hautkrankheiten beim Menschen. Weiterhin spielen bestimmte Leukotriene und ihre Derivate eine wichtige Rolle bei der Verursachung von Entzündungen (B. Samuelson, Science, 220, 568 (1983); D. Bailey et al., Ann. Rpts. Med. Chem., 17, 203 (1982)).
Beispielsweise werden akute systemische Anaphylaxe und andere unmittelbare Überempfindlichkeitsreaktionen von der Freisetzung mehrerer Mediatoren begleitet, unter Einschluß dreier Leukotriene, LTC&sub4;, LTD&sub4; und LTE&sub4;. Diese drei Leukotriene haben die Eigenschaften, eine Bronchokonstruktion und Veränderung in der Gefäßpermeabilität zu induzieren. Ein viertes Leukotrien, LTB&sub4;, hat potente Auswirkungen auf die Chemotoxis und die Haftung von Leukozyten. Alle vier Leukotriene werden durch die Wirkung des Enzyms 5-Lipoxygenase auf Arachidonsäure erzeugt. Siehe beispielsweise D. R. Robinson et al., J. Exp. Med. 163, 1509 (1986).
Durch die jüngere Forschung wurden 5-Lipoxygenase-Inhibitoren auch mit der Behandlung von Augenentzündungen verbunden und als Zellschutzmittel verwandt.
Als wirksames und annehmbares topisches Mittel zur Behandlung von Augenentzündungen muß ein Medikament nicht nur in das Augengewebe eindringen, um die aktiven Stellen innerhalb des Auges zu erreichen, sondern auch frei von solchen Seiteneffekten sein, unter Einschluß von Irritationen, allergischen Reaktionen und dergleichen, die für die Langzeit-Verabreichung kontraindiziert sind.
Hinsichtlich der Zellschutzwirkung ist bekannt, daß (1) der gastrische Zellschutz nicht die Inhibierung der Magensäuresekretion inhibiert. Beispielsweise inhibiert Prostaglandin F2B nicht die Magensäuresekretion, induziert aber einen Zellschutz im Magen (S. Szabo et al., Experientia, 38, 254, 1982); (2) niedrigere wirksame Dosierungen an Zellschutzmittel benötigt werden, als an Magensäureinhibitoren; und (3) die Zellschutzwirkung einer Verbindung sowohl in Tieren als auch beim Menschen beobachtet werden kann, indem die erhöhte Widerstandskraft der Magen-Darm-Schleimhaut gegen starke Reizmittel festgestellt wird. Beispielsweise haben Tierstudien gezeigt, daß Zellschutzverbindungen durch die orale Verabreichung von starken Säuren, starken Basen, Ethanol, hypertonischer Salzlösung, etc. induzierten gastrischen Läsionen vorbeugen.
Eine Klasse von Benzothiophenen, insbesondere Derivate von 3- Hydroxybenzo[b]thiophen, ist in US-A-4 663 344 beschrieben. Von diesen Verbindungen wird festgestellt, daß sie entweder spezifische 5-Lipoxygenase oder duale Cyclooxygenase/5-lipoxygenase- Inhibitoren sind und daher zur Behandlung von prostaglandinund/oder leukotrien-vermittelten Krankheiten, wie Schmerz und Entzündungszuständen unter Einschluß von rheumatoider Arthritis, Osteoarthritis, Gicht, Psoriasis, entzündlichen Darmerkrankungen und Augenentzündungen wie auch Respirations-, HerzKreislauf- und Gefäß-internen Störungen sowie von Überempfindlichkeitsreaktionen, die Asthma und allergische Zustände verursachen, geeignet sind.

Kurze Beschreibung der Erfindung

Die erfindungsgemäßen Verbindungen, die neue Lipoxygenaseinhibitoren sind, sind zur Behandlung von Entzündungen, Schmerz und mit Entzündungen, arthritischen Zuständen, Asthma, allergischen Störungen, wie allergischer Rhinitis und chronischer Bronchitis verbundenem Fieber, Hautkrankheiten, wie Psoriasis und atopischem Ekzem, Herz-Kreislauf- oder Gefäßstörungen sowie anderer Krankheiten verwendbar, bei denen Leukotriene mitwirken.

Abkürzungen und Definitionen

Ac&sub2;O = Essigsäureanhydrid
aq. = wäßrig
DBU = 1,8-Diazobicyclo[5.4.O]undec-5-en
DDQ = 2,3-Dichlor-5,6-dicyan-1,4-benzochinon
4-DMAP = 4-Dimethylaminopyridin
Pyr = Pyridin
t-BuOK = Kalium-tert-butoxid
THF = Tetrahydrofuran

Detaillierte Beschreibung der Erfindung

A. Umfang der Produkte

Die erfindungsgemäßen Verbindungen umfassen speziell Lipoxygenaseinhibitoren der Formel:
oder physiologisch annehmbare Salze davon, worin Z die Zahl der Doppelbindungen im 5-gliedrigen Ring darstellt und Z = 1 oder 2. Y ist S, SO oder SO&sub2;.
Somit sind Dihydroanaloga von Thiophen einbezogen.
R¹ ist (a) H;
(b) - -R&sub3;, worin R&sub3; Niederalkyl, insbesondere C&sub1;-&sub6; Alkyl, wie Methyl, Ethyl, i-Propyl, n-Propyl, t-Butyl, n-Butyl, i-Pentyl, n-Pentyl oder n-Hexyl, ist, wobei R&sub3; auch Aryloxy, Niederalkoxy, Niederalkylthio, Mononiederalkylamino, Diniederalkylamino, Alkoxyalkyl oder Carboniederalkoxyniederalkyl sein kann;
(c) - -R&sub4;, worin R&sub4; Aryl ist, insbesondere C6-14-Aryl, beispielsweise Naphthyl, Anthryl, Phenyl oder substituiertes Phenyl der Formel
worin X&sub5; und X&sub6; unabhängig
1) Q, worin Q H, Niederalkyl, insbesondere C1-6-Alkyl, Halogenniederalkyl, insbesondere Fluor- oder Chlor-C1-6-alkyl, wie Trifluormethyl, Phenyl oder substituiertes Phenyl oder Naphthyl ist;
2) Halogen, insbesondere Chlor, Fluor, Brom oder Jod;
3) Niederalkenyl, insbesondere C2-6-Alkenyl, wie Ethenyl und Allyl;
4) Niederalkinyl, insbesondere C2-6-Alkinyl, beispielsweise Ethinyl oder n-Butinyl;
5) -SQ;
6) -OQ;
7) -CHQCOQ¹, worin Q¹ eine beliebige Spezies Q ist und gleich Q oder davon verschieden sein kann;
8) -CHQCOOQ¹;
10) -CH&sub2;SQ oder -CHQSQ¹;
11) -CH&sub2;OQ oder -CHQOQ¹;
12) -COQ;
13) -COOQ;
14) -OCOQ;
15) -NQQ¹;
16) -NQCOQ¹;
17) -NQ(OQ¹);
18) -NQ(SQ¹);
19) -NQSO&sub2;Q¹;
20) -SO&sub2;NQQ¹;
21) -SOQ;
22) -SO&sub2;Q;
23) -SO&sub3;Q;
24) -CN;
25) -NO&sub2;1;
26) -CONQQ¹
27) -NO;
28) -CSQ;
29) -CSNQQ¹;
30) -CF&sub2;SQ;
31) -CF&sub2;OQ;
32) -NQCONHQ¹ oder NQCONQ¹, worin Q² eine beliebige Spezies Q ist und Q¹ eine beliebige Spezies Q ist und Q² gleich Q¹ oder davon verschieden sein kann; sind,
(d) - -NH&sub2;;
(e) -R&sub3;-O-R&sub3;;
(f) -R&sub3;-S-R&sub3; oder
(g) -QOQ¹ und
R&sub2; ist (a) H;
(b) R&sub4;;
(c) Niedercycloalkyl, insbesondere C3-6-Cycloalkyl, beispielsweise Cyclopropyl, Cyclopentyl und Cyclohexyl;
(d) Halogen;
(e) Halogenniederalkyl, insbesondere Halogen-C1-6alkyl, beispielsweise CF&sub3;-, CHF&sub2;-, C&sub2;F&sub5;-;
(f) Heteroaryl oder mit X&sub5; und X&sub6; substituiertes Heteroaryl, insbesondere Pyridyl, Pyrryl, Furyl, oder Thienyl, worin X&sub5; und X&sub6; wie vorstehend definiert sind;
(g) Benzyl oder substituiertes Benzyl der Formel
worin X&sub5; und X&sub6; wie vorstehend definiert sind;
(h) Niederalkinyl, insbesondere C1-6-Alkinyl, wie C=CH; CH&sub3;-C=-C- oder HC=C-CH&sub2;-;
(i) Niederalkenyl, insbesondere C1-6-Alkenyl, wie CH&sub2;=CH-, CH&sub3;CH=CH-, CH&sub2;=CHCH&sub2;-, CH&sub3;CH=CH-CH&sub2; oder (CH&sub3;)&sub2;C=CH;
(j) -R&sub3;;
(k) -O-R&sub3;;
(l) -NHR&sub3;;
(m) -T¹-NH-T², worin T¹ eine beliebige Spezies R&sub3; ist und T² eine beliebige Spezies R&sub3; ist und T¹ gleich T² oder davon verschieden ist;
(n) -T¹OT²;
(o) -R&sub3;OH;
(p) -NH&sub2;;
(q) -NO&sub2;;
(r) -CN;
(s) - R&sub3;;
(t) - R&sub4;;
(u) -SR&sub3;;
(v) - R&sub3;;
(w) -SO&sub2;R&sub3;;
(x) -T¹-S-T²;
(y) -T¹- -T²;
(z) -T¹-SO&sub2;-T²;
(aa) -S-R&sub4;;
(ab) - -R&sub4;;
(ac) -SO&sub2;-R&sub4;;
(ad) Phenylniederalkenyl der Formel
worin X&sub5; und X&sub6; wie vorstehend definiert sind;
(ae) Phenylniederalkinyl der Formel
worin X&sub5; und X&sub6; wie vorstehend definiert sind;
(af) - R&sup5;, worin R&sup5; R&sub1; ist;
(ag) - O-R&sup5;;
(ah) - -NR&sup5;R&sup6;, worin R&sup6; R&sup5; ist und gleich R&sup5; oder davon verschieden sein kann;
(ai) - -SR&sup5;;
(aj) (CH&sub2;)m R&sup5;, worin m 1 oder 2 ist;
(ak) -(CH&sub2;)mO OR&sup5;;
(al) -(CH&sub2;)mNR&sup5;R&sup6; oder
(am) -(CH&sub2;)m-NR&sup5; R&sup6;; und
R&sub2; kann mit der angrenzenden R&sub2;-Gruppe ein verbrücktes Methylen von 3 bis 10 Kohlenstoffatomen bilden;
wenigstens eine Gruppe R&sub2; der Formel I ist entweder R&sub4; oder Heteroaryl oder mit X&sub5; oder X&sub6; substituiertes Heteroaryl, insbesondere Pyridyl, Pyrryl, Furyl oder Thienyl, worin X&sub5; und X&sub6; wie vorstehend definiert sind; und
jede Gruppe R&sub2; kann zu einer anderen Gruppe R&sub2; am gleichen Molekül gleich oder davon verschieden sein;
mit der Maßgabe, daß R&sub2; in der 2-Stellung weder - OR&sup5; noch -CN ist, wenn Y S ist, Z 2 ist und R&sub1; H ist;
mit der weiteren Maßgabe, daß R&sub2; in der 5-Stellung nicht Methyl ist, wenn Y S ist, Z 2 ist, R&sub1; H ist und R&sub2; in der 2-Stellung Phenyl ist;
mit der weiteren Maßgabe, daß wenn R&sub2; in der 2- und der 4- Stellung H ist, R&sub2; in der 5-Stellung Phenyl ist, Y S ist und Z 2 ist, dann R&sub1; nicht H, -COCH&sub3; oder -CO-CH(NH·Ts)-CH&sub3; sein kann.
Am meisten bevorzugt sind die erfindungsgemäßen Verbindungen chemischen Produkte der Formel:
worin R&sub1; H, Niederalkoxyniederalkyl oder -R&sub3; ist, wenn R&sub3; Niederalkyl ist, insbesondere C&sub1;&sub6;-Alkyl, wie Methyl, Ethyl, i-Propyl, n-Propyl, t-Butyl, n-Butyl, i-Pentyl, n-Pentyl oder n-Hexyl; R&sub3; kann auch Niederalkoxyniederalkyl sein;
R&sub2; Aryl in der 2-Stellung des Thiophens oder seiner 5-Stellung oder in beiden ist; oder deren physiologisch annehmbare Salze.

B. Synthesewege für die Verbindungen

Die neuen Thiophenderivate der Erfindung können über die Schritte
(a) einer Michael-Addition eines Carbanions, wie R-S&supmin;, an ein α,β-ungesättigtes Säurederivat; danach
(b) eines Ringschlusses zur Bildung eines 5-gliedrigen Ringes; und
(c) einer Oxidation, falls erforderlich, hergestellt werden.
Diese Abläufe wurden teilweise aus D. N. Reinhoudt et al., Synthesis 39, 368 (1978); K. Buggle et al., J.C.S. I, 2630 (1972); B. Hedegaard et al., Tetrahedron 27, 3853 (1971) und V. H. Scheibler et al., J. Prakt. Chem. 2, 127 (1955) abgeleitet.
Schematisch kann dieser Weg allgemein wie nachstehend dargestellt werden:
worin X, Y und Z jeweils gleich oder verschieden sind und jede Spezies R&sub2; darstellen, wie oben definiert.
Alternativ kann ein Dreifachbindungsreagens anstelle einer mit Doppelbindungen ungesättigten Verbindung verwandt werden, das heißt
Michael-Additionen werden typischerweise gemäß Organic Reactions 10, 182 (1959) durchgeführt.
Typische für die Ringschlußreaktion geeignete Lösungsmittel schließen Ac&sub2; O, Pyr, THF, Et&sub3;N oder CH&sub3;CN ein, ohne darauf beschränkt zu sein. Katalysatoren schließen NaOAc oder t-BuOK ein. DDQ kann zur Ringdehydrierung verwandt werden. Für Acetylierungen ist 4-DMAP der Katalysator der Wahl.
Die Bildung der erfindungsgemäßen Thiophene kann auch nach Methoden durchgeführt werden, die teilweise von H. Fiesselmann et al., Ber. 1907 (1956) abgeleitet sind. Nach diesen Methoden wird der Ringschluß an einem Aryl- oder Diaryl-δ-di-(alkylestermercapto)buttersäureester durchgeführt, das heißt
worin X und Y jeweils getrennt aus der aus im wesentlichen aus Aryl, Alkyl, Aralkyl oder Carboxyalkyl bestehenden Gruppe ausgewählt sind. Die Decarboxylierung der 2-Säure ergibt mit oder ohne Verwendung einer Hydroxyschutzgruppe das erwünschte Aryloder Diarylthiophen-3-ol.
Alternativ können Einschritt-Kondensationsreaktionen über eine neue Modifikation der Thiophendicarboxylatsynthese von T. Hinsberg, Ber. 43 901 (1910) durchgeführt werden. Beispielsweise
worin X 0, 1 oder 2 ist. Dieser Verfahrenstyp hat den Vorteil, die Zahl der Schritte in der Labor- oder kommerziellen Synthese zu vermindern.
Die entsprechenden Sulfone und Sulfoxide können, trotz niedriger Ausbeuten, durch direkte Oxidation des entsprechenden arylsubstituierten Thiophens synthetisiert werden. Das Peroxidsäureverfahren wird im allgemeinen bevorzugt. Bessere Ausbeuten werden erhalten, wenn das intermediäre Michael-Addukt zuerst am Schwefel zum erwünschten Oxidationszustand oxidiert wird und dann der Ring geschlossen wird.
Gesättigte, cyclische 4,5-disubstituierte 3-Acetoxy-2-arylthiophene können durch basenvermittelten Ringschluß des Dithioketals hergestellt werden.
Die Behandlung von 2-Carboethoxycycloalkanon (1) mit einem geeigneten Thiol unter dehydratisierenden Bedingungen und Säurekatalyse ergibt das Dithioketal (2), das dann mit einer starken Base (beispielsweise Lithiumdiisopropylamid (LDA), NaH, Kaliumt-butoxid) deprotonisiert werden kann, um die Cyclisierung zu (3) zu bewirken. Die 3-Hydroxygruppe kann durch Zugabe von Essigsäureanhydrid zur Reaktionsmischung in das Acetat umgewandelt werden oder direkt isoliert werden.
Analoga der 3-Acetoxy-2,5-diarylthiophene, in denen der 5-Arylsubstituent zur 4-Stellung des Thiophens mittels Kohlenwasserstoffbrücke verbrückt ist, können auf ähnliche Weise aus dem entsprechenden 2-Carbomethoxyarylcycloalkanon hergestellt werden.
In diesen Fällen wird beispielsweise Carbomethoxybenzocycloalkanon (4) durch Behandlung mit einem Diarylchlorphosphat und Base (beispielsweise Triethylamin, Kalium-t-butoxid, NaH) in einem Lösungsmittel, wie Tetrahydrofuran oder N,N'-Dimethylformamid, in das Enolphosphat umgewandelt und das Enolphosphat durch Michael-Addition/Eliminierung mit dem geeigneten Arylmethylmercaptan und Base (beispielsweise Triethylamin, Kaliumt-butoxid, NaH) im gleichen Lösungsmittel unter Erhalt der Verbindung 5 ersetzt. Deprotonierung mit einer starken Base cyclisiert und ergibt 6.
Weitere Reaktionsschemata können von S. Gronowitz (Hrsg.), Thiophene and Its Derivatives, I, John Wiley and Sons, 1985, passim, abgeleitet werden.

C. Brauchbarkeit der erfindungsgemäßen Verbindungen

Die Erfindung betrifft auch die Verwendung einer oder mehrerer der Enzyminhibitoren der Formel (I) zur Herstellung eines Medikaments, das zur Behandlung von Patienten (oder von Säugetieren, die in der Milch-, Fleisch- oder Pelzindustrie oder als Haustiere gehalten werden) geeignet ist, die an von Prostaglandinen und/oder Leukotrienen vermittelten Störungen oder Krankheiten oder an Magenreizungen oder -läsionen leiden.
Dementsprechend kann eine Verbindung der Formel (I) unter anderem zur Linderung von Schmerz und Entzündungen, zur Behebung von Atmungs-, Herz-Kreislauf- und intravaskularen Änderungen oder Störungen und zur Regulierung unmittelbarer Überempfindlichkeitsreaktionen, die beim Menschen Asthma und allergische Zustände bewirken, verwandt werden.
Zur Behandlung von Entzündungen, arthritischen Zuständen, Herz- Kreislauf-Störungen, Allergien, Psoriasis, Asthma oder anderen von Prostaglandinen und/oder Leukotrienen vermittelten Krankheiten kann eine Verbindung der Formel (I) oral, topisch, parenteral, durch Sprayinhalation oder rektal in Einheitsdosisformulierungen verabreicht werden, die herkömmliche, nicht toxische pharmazeutisch annehmbare Träger, Adjuvantien und Vehikel enthalten. Der Begriff parenteral, wie hier verwandt, schließt subkutane Injektionen, intravenöse, intramuskulare, intravaskulare Injektions- oder Infusionstechniken ein. Zusätzlich zur Behandlung von warmblütigen Tieren, wie Mäusen, Ratten, Pferden, Vieh, Schafen, Hunden, Katzen, etc. sind die erfindungsgemäßen Verbindungen auch bei der Behandlung von Menschen wirksam.
Die den Wirkstoff enthaltenden pharmazeutischen Zusammensetzungen können in einer für die orale Verwendung geeigneten Form vorliegen, beispielsweise als Tabletten, Pastillen, medizinischen Bonbons, wäßrigen oder öligen Suspensionen, dispergierbaren Pudern oder Körnchen, Emulsionen, harten oder weichen Kapseln, oder als Sirupe oder Elixiere. Für die orale Verwendung bestimmte Zusammensetzungen können nach beliebigen, auf dem Gebiet bekannten Methoden zur Herstellung von pharmazeutischen Zusammensetzungen hergestellt werden, wobei solche Zusammensetzungen ein oder mehrere aus der aus Süßstoffen, Geschmacksstoffen, Farbstoffen und Konservierungsstoffen bestehenden Gruppen ausgewählte Mittel enthalten können, um pharmazeutisch elegante und wohlschmeckende Zubereitungen bereitzustellen. Tabletten enthalten den Wirkstoff in Abmischung mit pharmazeutisch annehmbaren Exzipienten, die zur Herstellung von Tabletten geeignet sind. Diese Exzipienten können beispielsweise inerte Verdünnungsmittel, wie Calciumcarbonat, Natriumcarbonat, Lactose, Calciumphosphat oder Natriumphosphat; granulierende und disintegrierende Mittel, beispielsweise Kornstärke oder Alginsäure; Bindemittel, beispielsweise Stärke, Gelatine oder Akaziengummi, sowie Schmiermittel, beispielsweise Magnesiumstearat, Stearinsäure oder Talk, sein. Die Tabletten können unbeschichtet vorliegen oder nach bekannten Techniken beschichtet sein, um die Zersetzung und Absorption im Magen- Darm-Trakt zu verzögern und dadurch eine nachhaltige Wirkung über einen längeren Zeitraum herbeizuführen. Beispielsweise kann ein zeitverzögerndes Material, wie Glycerylmonostearat oder Glyceryldistearat, verwandt werden. Sie können auch nach den in den US-Patenten 4 256 108, 4 166 452 und 4 265 874 beschriebenen Techniken zur Bildung osmotischer therapeutischer Tabletten für die kontrollierte Freisetzung beschichtet sein.
Formulierungen für die orale Verwendung können auch als Hartgelatinekapseln dargeboten werden, in denen der Wirkstoff mit einem inerten festen Verdünnungsmittel, beispielsweise Calciumcarbonat, Calciumphosphat oder Kaolin gemischt ist, oder als Weichgelatinekapseln, worin der Wirkstoff mit Wasser oder einem Ölmedium, beispielsweise Erdnußöl, flüssigem Paraffin oder Olivenöl, gemischt ist.
Wäßrige Suspensionen enthalten die Wirkstoffe in Abmischung mit für die Herstellung von wäßrigen Suspensionen geeigneten Exzipienten. Solche Exzipienten sind Suspendiermittel, beispielsweise Natriumcarboxymethylcellulose, Methylcellulose, Hydroxypropylmethylcellulose, Natriumalginat, Polyvinylpyrrolidon, Tragacanthgummi und Akaziengummi; Dispergier- oder Benetzungsmittel können ein natürlich vorkommendes Phosphatid sein, beispielsweise Lecithin, oder Kondensationsprodukte eines Alyklenoxids mit Fettsäuren, beispielsweise Polyoxyethylenstearat, oder Kondensationsprodukte von Ethylenoxid mit langkettigen aliphatischen Alkoholen, beispielsweise Heptadecaethylenoxycetanol, oder Kondensationsprodukte von Ethylenoxid mit von Fettsäuren und einem Hexit abgeleiteten partiellen Estern, wie Polyoxyethylensorbitmonooleat, oder Kondensationsprodukte von Ethylenoxid mit von Fettsäuren und Hexitanhydriden abgeleiteten partiellen Estern, beispielsweise Polyethylensorbitanmonooleat. Die wäßrigen Suspensionen können auch ein oder mehrere Konservierungsmittel, beispielsweise Ethyl- oder n-Propyl-p-hydroxybenzoat, einen oder mehrere Farbstoffe, einen oder mehrere Geschmacksstoffe und einen oder mehrere Süßstoffe, etwa Saccharose oder Saccharin, enthalten.
Ölsuspensionen können durch Suspendieren des Wirkstoffs in einem Pflanzenöl, beispielsweise Erdnußöl, Olivenöl, Sesamöl oder Kokosöl, oder in einem Mineralöl, etwa flüssigem Paraffin, formuliert werden. Die Ölsuspensionen können ein Verdickungsmittel, beispielsweise Bienenwachs, Hartparaffin oder Cetylalkohol, enthalten. Süßstoffe, wie die oben genannten, und Geschmacksstoffe können zugefügt werden, um eine wohl schmeckende orale Zubereitung bereitzustellen. Diese Zusammensetzungen können durch Zugabe eines Antioxidans, etwa Ascorbinsäure, konserviert werden. Dispergierbare Pulver und Körnchen, die zur Herstellung einer wäßrigen Suspension durch Zugabe von Wasser geeignet sind, stellen den Wirkstoff in Abmischung mit einem Dispergier- oder Benetzungsmittel, einem Suspendiermittel und einem oder mehreren Konservierungsstoffen bereit. Geeignete Dispergieroder Benetzungsmittel und Suspendiermittel sind durch die bereits oben erwähnten beispielhaft belegt. Zusätzliche Exzipienten, beispielsweise Süßstoffe, Geschmacksstoffe und Farbstoffe, können ebenfalls vorhanden sein. Die erfindungsgemäßen Zusammensetzungen können auch in Form einer Öl-in-Wasser-Emulsion vorliegen. Die Ölphase kann ein Pflanzenöl, etwa Olivenöl oder Erdnußöl, oder ein Mineralöl, beispielsweise flüssiges Paraffin, oder Mischungen derselben sein. Geeignete Emulgiermittel können natürlich vorkommende Gummis sein, beispielsweise Akaziengummi oder Tragacanthgummi, natürlich vorkommende Phosphatide, beispielsweise Sojabohnenlecithin, sowie von Fettsäuren und Hexitanhydriden abgeleitete Ester oder partielle Ester, beispielsweise Sorbitanmonooleat und Kondensationsprodukte der partiellen Ester mit Ethylenoxid, beispielsweise Polyoxyethylensorbitanmonooleat. Die Emulsionen können auch Süßstoffe und Geschmacksstoffe enthalten.
Sirupe und Elixiere können mit Süßstoffen, beispielsweise Glycerin, Propylenglykol, Sorbit oder Saccharose, formuliert werden. Solche Formulierungen können auch ein schmerzlinderndes Mittel, ein Konservierungsmittel sowie Geschmacksstoffe und Farbstoffe enthalten. Die pharmazeutischen Zusammensetzungen können in Form einer sterilen injizierbaren wäßrigen oder öligen Suspension vorliegen. Diese Suspension kann nach dem Stand der Technik unter Verwendung solcher geeigneter Dispergieroder Benetzungsmittel sowie Suspendiermittel formuliert sein, die vorstehend erwähnt sind. Die sterile injizierbare Zubereitung kann auch eine sterile injizierbare Lösung oder Suspension in einem nicht toxischen parenteral annehmbaren Verdünnungsmittel oder Lösungsmittel, beispielsweise als Lösung in 1,3-Butandiol, vorliegen. Unter den annehmbaren Vehikeln und Lösungsmitteln, die verwandt werden können, befinden sich Wasser, Ringers Lösung und isotonische Natriumchloridlösung. Zusätzlich werden sterile, nicht trocknende Öle herkömmlicherweise als Lösungsmittel oder Suspendiermedium verwandt. Für diesen Zweck kann ein beliebiges, mildes, nicht trocknendes Öl unter Einschluß synthetischer Mono- oder Diglyceride eingesetzt werden. Zusätzlich finden Fettsäuren, wie Ölsäure, Verwendung bei der Zubereitung von Injizierbaren.
Die Verbindungen der Formel (I) können auch in Form von Suppositorien für die rektale Verabreichung des Mittels verabreicht werden. Diese Zusammensetzungen können durch Mischen des Mittels mit einem geeigneten nicht reizenden Exzipienten hergestellt werden, der bei Normaltemperatur fest ist, jedoch bei der Rektaltemperatur flüssig und daher im Rektum unter Freisetzung des Mittels schmilzt. Solche Materialien sind Kakaobutter und Polyethylenglykole.
Für die topische Verwendung werden Cremes, Salben, Gele, Lösungen oder Suspensionen, etc., die Verbindungen der Formel (I) enthalten, verwandt.
Dosen der Größenordnung von etwa 0,01 mg bis etwa 150 mg pro Kilogramm Körpergewicht pro Tag sind zur Behandlung der oben indizierten Zustände geeignet (etwa 0,5 mg bis etwa 7,5 g pro Patient pro Tag). Beispielsweise können Entzündungen wirksam durch Verabreichung von etwa 0,2 bis 50 mg der Verbindung pro Kilogramm Körpergewicht pro Tag wirksam behandelt werden (etwa 20 mg bis etwa 3,5 g pro Patient pro Tag). Vorzugsweise ergibt eine Dosis von etwa 1 mg bis etwa 20 mg pro kg Körpergewicht pro Tag gute Ergebnisse (etwa 25 mg bis etwa 1 g pro Patient pro Tag).
Die Menge an Wirkstoff, die mit den Trägermaterialien zur Erzeugung einer Einzeldosisform kombiniert werden kann, hängt von dem zu behandelnden Patienten und der jeweiligen Verabreichungsweise ab. Beispielsweise kann eine für die orale Verabreichung an den Menschen bestimmte Formulierung 0,5 mg bis 5 g Wirkstoff enthalten, der mit einer geeigneten und praktischen Menge Trägermaterial compoundiert ist, das von etwa 5 bis etwa 95% der gesamten Zusammensetzung ausmachen kann. Einheitsdosisformen enthalten gewöhnlich etwa 1 mg bis etwa 500 mg eines Wirkstoffs.
Insbesondere kann zur Verwendung bei der Behandlung von Augenstörungen unter Einschluß solcher, die mit erhöhtem Augeninnendruck verbunden sind, etwa bei Glaukomen oder anderen Augenentzündungen, der Wirkstoff topisch oder systemisch verabreicht werden, wenn dies geeignet erscheint. Die verabreichte Dosis kann von nur 0,1 bis 25 mg oder mehr pro Tag reichen, als Einzeldosis oder vorzugsweise in einem 2- bis 4-Dosen-pro-Tag-Regime, obwohl eine Einzeldosis pro Tag zufriedenstellend ist.
Wenn systemisch verabreicht, kann das Mittel auf jedem anderen Weg gegeben werden, obwohl der orale Weg bevorzugt ist. Bei der oralen Verabreichung kann das Mittel in jeder gewöhnlichen Dosisform eingesetzt werden, etwa als Tabletten oder Kapseln, entweder unter gleichzeitiger Abgabe oder in einer Form mit verzögerter Freisetzung. Eine beliebige Anzahl gewöhnlicher Exzipienten oder Tablettierungshilfen kann gleichermaßen einbezogen sein.
Wenn auf topischem Weg verabreicht, wird der Wirkstoff oder ein ophthalmologisch annehmbares Salz davon, etwa das Natriumoder Kaliumsalz, zu einer ophthalmischen Zubereitung formuliert. In solchen Formulierungen können 0,1 bis 15 Gew.% eingesetzt werden. Das Ziel ist die Verabreichung einer Dosis von 0,1 bis 10 mg pro Auge pro Tag an den Patienten, wobei die Behandlung so lange fortgesetzt wird, wie die Störung anhält.
Danach wird in einer ophthalmischen Lösung, einem Insert, einer Salbe oder einer Suspension für die topische Abgabe oder einer Tablette, einer intramuskularen oder intravenösen Zusammensetzung für die systemische Verabreichung das wirksame Medikament oder eine äquivalente Menge eines Salzes davon, eingesetzt, wobei der Rest Träger, Exzipienten, Konservierungsmittel und dergleichen sind, wie sie gewöhnlich in solchen Zusammensetzungen verwandt werden.
Die erfindungsgemäßen Wirkstoffe werden geeigneterweise in Form von ophthalmischen pharmazeutischen Zusammensetzungen verabreicht, die an die topische Verabreichung an das Auge angepaßt sind, etwa als Suspension, Salbe oder als festes Insert. Formulierungen dieser Verbindungen können 0,01 bis 15% und insbesondere 0,5 bis 2% Medikament enthalten. Höhere Dosierungen als beispielsweise etwa 10% oder niedrigere Dosierungen können verwandt werden, vorausgesetzt, daß die Dosis zur Verminderung oder Steuerung eines erhöhten Augeninnendrucks wirksam ist. Als Einheitsdosis werden im allgemeinen 0,001 bis 10,0 mg, vorzugsweise 0,005 bis 2,0 mg, und insbesondere 0,1 bis 1,0 mg der Verbindung auf das menschliche Auge angewandt, gewöhnlich auf einer täglichen Basis in Einzel- oder geteilten Dosen, solange die zu behandelnde Störung besteht.
Wie bei allen Medikationen sind Dosisanforderungen variabel und müssen auf Basis von Krankheit und Ansprechen des Patienten individualisiert werden.
Die pharmazeutische Zubereitung, die den Wirkstoff enthält, kann einfach mit einem nicht toxischen pharmazeutischen organischen Träger oder mit einem nicht toxischen pharmazeutischen anorganischen Träger vermischt werden. Typisch für pharmazeutisch annehmbare Träger sind beispielsweise Wasser, Mischungen aus Wasser und wassermischbaren Lösungsmitteln, wie niedere Alkohole oder Aralkanole, Pflanzenöle, Polyalkylenglykole, Gele auf Petroleumbasis, Ethylcellulose, Ethyloleat, Carboxymethylcellulose, Polyvinylpyrrolidon, Isopropylmyristat und andere herkömmlich verwandte annehmbare Träger. Die pharmazeutische Zubereitung kann auch nicht toxische Hilfssubstanzen enthalten, etwa Emulgiermittel, Konservierungsmittel, Benetzungsmittel, körperverleihende Mittel und dergleichen, wie beispielsweise die Polyethylenglykole 200, 300, 400 und 600, die Carbowachse 1000, 1500, 4000, 6000 und 10000, antibakterielle Komponenten, wie quaternäre Ammoniumverbindungen, Phenylquecksilber-II-salze, die für ihre kalt sterilisierenden Eigenschaften bekannt sind und die bei der Verwendung nicht verletzen, Thimerosal, Methyl- und Propylparaben, Benzylalkohol, Phenylethanol, puffernde Bestandteile, wie Natriumchlorid, Natriumborat, Natriumacetat, Gluconatpuffer und andere herkömmliche Bestandteile, wie Sorbitanmonolaurat, Triethanolamin, Oleat, Polyoxyethylensorbitanmonopalmitylat, Dioctylnatriumsulfosuccinat, Monothioglycerol, Thiosorbit, Ethylendiamintetraessigsäure und dergleichen. Weiterhin können geeignete ophthalmische Vehikel als Trägermedien für den erfindungsgemäßen Zweck verwandt werden, unter Einschluß herkömmlicher Phosphatpuffervehikelsysteme, isotonischer Borsäurevehikel, isotonischer Natriumchloridvehikel, isotonischer Natriumboratvehikel und dergleichen.
Die pharmazeutische Zubereitung kann auch in Form eines festen Inserts vorliegen, etwa eines, das nach Abgabe des Medikaments im wesentlichen intakt bleibt, oder eines bio-erodierbaren Inserts, das entweder in Tränenflüssigkeit löslich ist oder sich auf andere Weise zersetzt.
Die folgenden Beispiele für ophthalmische Formulierungen werden zum Zweck der Erläuterung gegeben. Beispiel A Verbindung der Formel I Monobasisches Natriumphosphat · 2H&sub2;O Dibasisches Natriumphosphat · 12H&sub2;O Benzalkoniumchlorid Wasser zur Injektion q. s. ad
Verbindung A, die Phosphatpuffersalze und das Benzalkoniumchlorid werden in Wasser gegeben und dann gelöst. Der pH-Wert der Zusammensetzung wird auf 6,8 eingestellt und es wird auf das Volumen verdünnt. Die Zusammensetzung wird durch ionisierende Strahlung steril gemacht.

Beispiel B

Verbindung der Formel (I) 5 mg
Petrolatum q.s. ad 1 g
Der Wirkstoff und das Petrolatum werden aseptisch miteinander kombiniert.

Beispiel C

Verbindung der Formel (I) 1 mg
Hydroxypropylcellulose q.s. 12 mg
Ophthalmische Inserte werden aus druckgeformten Folien erzeugt, die auf einer Carver-Presse durch Pressen der pulverisierten Mischung der vorstehenden Bestandteile mit einem Kompressionsdruck von 12 000 lbs (Manometer) bei 300ºF (149ºC) über eine bis vier Minuten hergestellt wurden. Die Folie wird unter Druck abgekühlt, indem kaltes Wasser in der Platte zirkulieren gelassen wird. Aus der Folie werden dann individuell ophthalmische Inserte mit einer stabförmigen Stanze geschnitten. Jedes Insert wird in eine Phiole gegeben, die dann zwei bis vier Tage in eine Feuchtigkeitskammer (88% relative Feuchtigkeit bei 30ºC) gestellt wird. Nach Entfernung aus der Feuchtigkeitskammer werden die Phiolen mit Stopfen und dann mit Kappen versehen. Die das hydratisierte Insert enthaltenden Phiolen werden dann bei 250ºF (121ºC) eine halbe Stunde im Autoklaven behandelt.

Beispiel D

Verbindung der Formel (I) 1 mg
Hydroxypropylcellulose q.s. ad 12 mg
Ophthalmische Inserte werden aus einer aus der Lösung gegossenen Folie erzeugt, die aus einer viskosen Lösung der pulverisierten, oben aufgeführten Bestandteile unter Verwendung von Methanol als Lösungsmittel hergestellt wurde. Die Lösung wird auf eine Teflonplatte gegeben und bei Umgebungsbedingungen trocknen gelassen. Nach dem Trocknen wird die Folie in eine Kammer mit 88% relativer Feuchtigkeit gegeben, bis sie schichtbar ist. Inserte geeigneter Größe werden aus der Folie geschnitten.

Beispiel E

Verbindung der Formel (I) 1 mg
Hydroxypropylmethylcellulose q.s. ad 12 mg
Ophthalmische Inserte werden aus einer aus der Lösung gegossenen Folie erzeugt, die aus einer viskosen Lösung der pulverisierten Mischung der oben genannten Bestandteile unter Verwendung eines Methanol/Wasser-Lösungsmittelsystems (10 ml Methanol wird zu 2,5 g der pulverisierten Mischung gegeben, wozu 11 ml Wasser (in drei getrennten Anteilen) gegeben wird) hergestellt wurde. Die Lösung wird auf eine Teflonplatte gegeben und bei Umgebungsbedingungen trocknen gelassen. Nach der Trocknung wird die Folie in eine Kammer mit 88% relativer Feuchtigkeit gegeben, bis sie schichtbar ist. Inserte geeigneter Größe werden dann aus der Folie geschnitten.

Beispiel F

Verbindung der Formel (I) 1 mg
Hydroxypropylmethylcellulose q.s. ad 12 mg
Ophthalmische Inserte werden aus druckgeformten Folien erzeugt, die auf einer Carver-Presse hergestellt wurden, indem die pulversierte Mischung der vorstehenden Bestandteile einem Kompressionsdruck von 12 000 lbs (Manometer) bei 350ºC (177ºC) über eine Minute ausgesetzt wurden. Die Folie wird unter Druck abgekühlt, indem kaltes Wasser in der Platte zirkulieren gelassen wird. Die ophthalmischen Inserte werden dann individuell mit einer Stanze aus der Folie geschnitten. Jedes Insert wird in eine Phiole gegeben, die dann zwei bis vier Tage in eine Feuchtigkeitskammer gestellt wird (88% relative Feuchtigkeit bei 30ºC). Nach Entfernung aus der Feuchtigkeitskammer werden die Phiolen mit Stopfen und danach mit Kappen versehen. Die das hydratisierte Insert enthaltenden Phiolen werden dann bei 250ºF (121ºC) eine halbe Stunde im Autoklaven behandelt.
Es ist stark bevorzugt, daß die festen Inserte gemäß der Erfindung dem Patienten in einem pathogenfreien Zustand zur Anwendung verfügbar sind. Es ist daher bevorzugt, die Inserte zu sterilisieren, weshalb zur Sicherung gegen Rekontamination die Sterilisation vorzugsweise nach dem Verpacken durchgeführt wird. Die beste Weise der Sterilisierung ist die Anwendung von ionisierender Strahlung unter Einschluß von Strahlung, die von Kobalt 60 oder hoch energetischen Elektronenstrahlen ausgeht.

Beispiel G

Die folgenden Materialien werden in einer Flasche von 1250 ml vermischt: 24 g Wirkstoff der Formel (I), was eine ausreichende Medikamentenmenge für eine Konzentration von 10 mg pro ml in den letztendlichen Proben ist und den zuvor etablierten Durchschnitt von 3,0% erlaubt; 0,4 g Natriumbisulfit, 12 g NaCl und 28 ml Wasser (bei 180ºF (82ºC)). Diese Mischung (I) wird 30 Minuten bei 121ºC unter 15 psi im Autoklaven behandelt. Getrennt davon werden 3 g Hydroxyethylcellulose im 720 ml Wasser (II) und 0,4 g Lecithin in 80 ml Wasser (III) 30 Minuten bei 121ºC im Autoklaven behandelt. Danach wird (III) mit (I) zwei Stunden gemischt und die resultierende Mischung in (II) gegossen. Eine andere Mischung (IV) wird aus 20 g Sorbit, 2,36 ml Benzalkoniumchlorid, 10 g Dinatriumedetat und Wasser unter Erhalt eines letztendlichen Lösungsvolumens von 900 ml hergestellt. Danach wird (IV) zu der Mischung aus (I), (II) und (III) in ausreichender Menge für 1,8 Liter insgesamt zugefügt. Die 1,8 l-Mischung aus I, II, III und IV wird dann unter Verwendung eines Homogenisators bei 2000 psi homogenisiert. Vorratslösungen werden dann für Polyoxyethylen(20)sorbitanmonooleat durch Auflösen von 3 g des Materials in 100 ml Wasser und jeweils Benzylalkohol/β-Phenylethylalkohol durch Zumischen von 50 ml eines jeden Alkohols hergestellt. Wechselnde Mengen der beiden Vorratslösungen werden dann vier 90 ml-Aliquoten der homogenisierten Mischung aus (I), (II), (III) und (IV), hergestellt wie oben beschrieben, zusammen mit ausreichend Wasser für insgesamt 100 ml einer jeden der vier verschiedenen Proben zugesetzt.
Andere Formulierungen für ein Ölvehikel und eine Salbe sind in den nachstehenden Beispielen beispielhaft belegt.

Beispiel H

Lösungszusammensetzung

Verbindung der Formel (I) 0,1 mg
Erdnußöl q.s. ad 0,10 mg
Die Lösung wird durch Filtration durch einen sterilisierenden Filter steril gemacht.

Beispiel J

Verbindung der Formel (I) 0,5 g
Petrolatum q.s. ad 1 g
Die Verbindung und das Petrolatum werden aseptisch miteinander kombiniert.
Es versteht sich gleichwohl, daß die spezifische Dosis für einen jeden Patienten von einer Anzahl von Faktoren abhängt, unter Einschluß der Wirksamkeit der jeweils verwandten Verbindung, des Alters, Körpergewichts, allgemeinen Gesundheitszustands, Geschlechts, der Diät, Zeit der Verabreichung, des Wegs der Verabreichung, der Ausscheidungsrate, Medikamentenkombination und Ernsthaftigkeit der der Therapie unterliegenden jeweiligen Krankheit.
In der Erfindung ist "Niederalkyl" als gesättigter Kohlenwasserstoffrest mit einem Gerüst von 1 bis 10 Kohlenstoffatomen, vorzugsweise 1 bis 6 Kohlenstoffatomen definiert. Insbesondere sind Methyl, Ethyl, i-Propyl, n-Propyl, t-Butyl, n-Butyl, i- Pentyl, n-Pentyl und n-Hexyl einbezogen.
Aryl umfaßt aromatische Reste von 6 bis 20 Kohlenstoffatomen, vorzugsweise aromatische Reste von 6 bis 14 Kohlenstoffatomen, beispielsweise Naphthyl, Anthryl, Phenyl oder substituiertes Phenyl.
Die folgenden Beispiele werden zum Zweck der Erläuterung der Erfindung gegeben, ohne den Schutzbereich, die Variation oder das Ausmaß des Erfindungsgegenstandes einzuschränken.

Beispiel 1

3-Acetoxy-2-phenyl-5-(2-thienyl)thiophen (I)

Schritt A: 3-Thia-2-phenyl-4-(2-thienyl)-glutarsäure (II)

Zu einer gerührten Suspension von 3-(2-Thienyl)-acrylsäure (3,6 g, 0,023 mMol), α-Mercaptophenylessigsäure (3,9 g, 0,023 mMol (J. Org. Chem. 33, 1831, 1968)) und trockenem Dioxan (15 ml) wurde tropfenweise bei Raumtemperatur und unter Stickstoffatmosphäre eine Lösung von Triethylamin (5,0 ml, 0,036 mMol) in Dioxan (5 ml) gegeben. Die sich aufwärmende Mischung wurde dann in ein Ölbad von 110ºC gesetzt und ca. 40 Stunden auf 110 bis 115ºC gehalten. Die abgekühlte Lösung wurde dann in Anteilen in eine gerührte Ether-Eis-Wasser-Mischung mit 2 N HCl (25 ml) gegeben und diese Mischung wurde auf Raumtemperatur kommen gelassen. Nach Auftrennung der Schichten wurde die Etherlösung zweimal mit Wasser gewaschen und über Natriumsulfat getrocknet. Die filtrierte und konzentrierte Mischung wurde dann mit einer geringen Menge Ether trituriert und dann mit Hexan turbulent gemacht. Nach dem Altern wurde die Mischung von einer geringen Menge eines Feststoffs abfiltriert, zu rohem öligem (II) (6,4 g) konzentriert und im folgenden Schritt verwandt.

Schritt B: 3-Acetoxy-2-phenyl-5-(2-thienyl)-dihydrothiophen (III)

Eine gerührte, stickstoffbedeckte Mischung aus (II) (1,2 g, 0,003 mMol), wasserfreiem Natriumacetat (0,4 g, 0,0049 mMol) und Essigsäureanhydrid (11 ml) wurde langsam auf Rückfluß erhitzt (Badtemperatur ca. 150ºC), etwa 5 Stunden bei dieser Temperatur gehalten und abkühlen gelassen. Nach Entfernung der Flüchtigen (Hochvakuum) wurde der Rückstand zwischen Ether und Wasser verteilt, die Etherschicht zweimal mit verdünnter Natriumhydrogencarbonatlösung, einmal mit Wasser gewaschen, getrocknet (Natriumsulfat), zu 1,1 g rohem (III) konzentriert und sofort im nächsten Schritt verwandt.

Schritt C: 3-Acetoxy-2-phenyl-5-(2-thienyl)-thiophen (I)

Zu einer gerührten Lösung von rohem (III) in Benzol (35 ml) bei Raumtemperatur wurde 2,3-Dichlor-5,6-dicyano-1,4-benzochinon (1,0 g, 0,0048 mMol) mit einem Mal gegeben und die Mischung über Nacht bei Raumtemperatur rühren gelassen. Die Mischung wurde dann filtriert, die Flüchtigen entfernt (Hochvakuum) und der Rückstand an Kieselgel chromatographiert (Methylenchlorid/Hexan), wobei 0,35 g der Titelverbindung erhalten wurden. MS: (M&spplus;) = 300; NMR: konsistent.

Beispiel 2

3-(3-Carbomethoxy)propionyloxy)-2,5-diphenylthiophen (I)

Zu einer gerührten, eisgekühlten Lösung von 2,5-Diphenyl-3hydroxythiophen (0,12 g, 0,5 mMol) in getrocknetem Pyridin (5,0 ml) unter einer Stickstoffatmosphäre wurde über etwa 20 Sekunden 3-Carbomethoxypropionylchlorid (0,1 g, 0,66 mMol) gegeben. Die Mischung wurde kalt 15 Minuten rühren gelassen und danach 4 Stunden bei Raumtemperatur. Die Mischung wurde in Portionen in eine gerührte Mischung aus Ether, Eis und Wasser sowie 2 N Salzsäure (40 ml) gegeben, die Etherschicht zweimal mit Wasser gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und zu 0,18 g öligem (I) konzentriert. MS: M&spplus; = 366; NMR: konsistent.

Beispiel 3

2,5-Diphenyl-3-(methoxymethoxy)-thiophen (II)

Zu einer gerührten, eiskalten Lösung von 2,5-Diphenyl-3-hydroxythiophen (0,12 g, 0,5 mMol) in getrocknetem N,N-Dimethylformamid (2 ml) wurde Natriumhydrid (30 mg einer 60%igen Suspension in Mineralöl) gegeben. Nach Abklingen der anfänglichen heftigen Reaktion (ca. 4 Minuten) wurde die Mischung bei Raumtemperatur 20 Minuten rühren gelassen und danach erneut abgekühlt. Chlormethylmethylether (0,055 ml, 0,7 mMol) wurde dann mit einem Mal zugegeben. Nach ca. 30-minütigem Rühren in der Kälte wurde die Mischung bei Raumtemperatur etwa 4 Stunden rühren gelassen und danach zu einer gerührten Ether/Wasser-Mischung gegeben. Die Etherschicht wurde dreimal mit Wasser gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet, filtriert, zu einem Rückstand konzentriert und an Kieselgel chromatographiert (Methylenchlorid/Hexan), wobei 0,13 g (II) erhalten wurden. MS: M&spplus; = 2%; NMR: konsistent.

Beispiel 4

3-Hydroxy-2,4,5-triphenylthiophen

Zu einer eiskalten, gerührten Lösung von Dibenzylsulfid (2,14 g, 0,01 m) in getrocknetem N,N-Dimethylformamid wurde Natriumhydrid (0,88 g, 0,022 mMol einer 60%igen Suspension in Mineralöl) gegeben. Die Mischung wurde allmählich auf 60ºC (Badtemperatur) aufgeheizt, dort 2 Stunden gehalten und abkühlen gelassen. Methylbenzoylformiat (1,42 ml, 0,01 mMol) wurde dann zugegeben und die Mischung eine Stunde auf 60ºC erhitzt, abgekühlt, zu einer gerührten Eis-verdünnte Salzsäure-Ether-Mischung gegeben, abgetrennt, wonach die wäßrige Schicht einmal erneut mit Ether extrahiert und die vereinigten organischen Schichten zweimal mit Wasser gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und zu einem Rückstand konzentriert wurde. Chromatographie an Kieselgel (einmal schnell mit 10% Ethylacetat/Hexan, gefolgt von einer sorgfältigen Chromatographie mit einer Methylenchlorid/Hexan-Mischung) ergab 50 mg der Produktverbindung als blaß-gelbes-weißes kristallines Material. MS: M&spplus; = 328; NMR: konsistent, identisch mit dem NMR-Spektrum von aus α-Phenylzimtsäure und α-Mercaptophenylessigsäure über Michael-Addition und Ringschluß hergestelltem Material.

Beispiel 5

3-Acetoxy-4-phenylthiophen

Atropinsäure (149 mg, 1,10 mMol) und Mercaptoessigsäure (80 ul, 106 mg, 1,15 mMol) wurden vereinigt und 18 Stunden bei 130ºC unter einer Stickstoffatmosphäre gerührt. Das resultierende rohe Produkt der Michael-Addition wurde in Essigsäureanhydrid gelöst (2,4 ml, 2,6 g, 25 mMol) und mit Natriumacetat (115 mg, 1,4 mMol) versetzt. Die Reaktion wurde in einem Ölbad erwärmt, wobei die Temperatur über eine Stunde auf 150ºC gesteigert wurde. Die Mischung wurde bei dieser Temperatur 2,5 Stunden gelassen, danach auf 25ºC abgekühlt und eingedampft. Der Rückstand wurde in 3,0 ml Dioxan gelöst und mit DDQ (200 mg, 0,88 mMol) in Anteilen über 10 Minuten versetzt. Die Reaktion wurde eine Stunden bei 25ºC gerührt, danach für 0,5 Stunden bei 50 bis 55ºC. Die Mischung wurde bei Raumtemperatur über Nacht stehengelassen, mit 3 ml Dichlormethan verdünnt und filtriert. Der Niederschlag wurde mit weiteren 3 ml Dichlormethan gespült. Die Lösung wurde eingedampft, in 25 ml Ethylacetat aufgenommen und mit zweimal 15 ml gesättigtem wäßrigem Natriumbicarbonat gewaschen, gefolgt von 15 ml gesättigtem wäßrigem Natriumchlorid. Der Rückstand wurde über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingedampft. Der Rückstand wurde in einer Mischung aus Ethylacetat und Dichlormethan gelöst und auf 1,5 g Kieselgel eingedampft. Blitz-Säulenchromatographie an 5 g Kieselgel ergab bei Elution mit 4% Ethylacetat in Hexan 84 mg (44% Ausbeute) 3-Acetoxy-4-phenylthiophen als nahezu farbloses Öl. Eine ähnlich hergestellte Probe wurde weiter durch Kolben-zu-Kolben- Destillation gereinigt, Kp. 85 bis 90ºC (0,2 mm).

Beispiel 6

3-Hydroxy-2,5-diphenylthiophen

Kalium-tert-butoxid (1,48 g, 13,2 mMol) wurde in 20 ml THF gelöst. Eine Lösung von Ethyl-Z-3-(benzylthio)-3-phenyl-2-propenoat (1,25 g, 4,39 mMol) in 5,0 ml THF wurde über 5 Minuten hinzugefügt, wobei weitere 2·2,0 ml THF danach zum Hineinspülen des Ausgangsmaterials in die Reaktion verwandt wurden. Die Reaktion wurde 20 Minuten bei 25ºC gerührt, danach durch tropfenweise Zugabe von 1,0 ml Eisessig gequenscht. Die Mischung wurde in 100 ml Ethylacetat gegossen und mit 40 ml gesättigtem wäßrigem Natriumchlorid, 10 ml 2 N wäßriger Salzsäure und 50 ml gesättigtem wäßrigem Natriumchlorid gewaschen. Die Lösung wurde über Natriumsulfat getrocknet, dekantiert und eingedampft. Der Rückstand wurde in Dichlormethan gelöst und auf 6 g Kieselgel eingedampft. Blitz-Säulenchromatographie an 30 g Kieselgel ergab bei Elution mit 1 l 7% Ethylacetat in Hexan 0,91 g flaumige weiße Kristalle mit einer Spur gelber Farbe. Umkristallisation aus einer Lösung aus 10 ml Hexan und 4 bis 5 ml Toluol ergab 0,75 g (68% Ausbeute) 3-Hydroxy-2,5diphenylthiophen, Fp. 118 bis 120ºC.

Beispiel 7

3-Hydroxy-2-(4-methoxyphenyl)-5-phenylthiophen

Schritt A: Herstellung von Methyl-Z-3-(4'-methoxybenzylthio)3-phenyl-2-propenoat

Z-3-(4'-Methoxybenzylthio)-3-phenyl-2-propensäure (5,46 g, 18,2 mMol) wurde in 22 ml trockenem Acetonitril suspendiert. Zugabe von DBU (3,30 ml, 22,1 mMol) ergab eine klare gelbe Lösung. Die Mischung wurde in einem Eisbad gerührt und Jodmethan (1,32 g, 21,2 mMol) danach über 5 Minuten hinzugefügt. Nach weiteren 15 Minuten wurde das Eisbad entfernt und die Lösung 1,25 Stunden gerührt. Die Reaktion wurde in 100 ml Ethylacetat gegossen und mit 75 ml Wasser, 2·25 ml 2 N wäßriger Salzsäure, 2·25 ml gesättigtem wäßrigem Natriumbicarbonat und 25 ml gesättigtem wäßrigem Natriumchlorid gewaschen. Die Ethylacetatlösung wurde über Natriumsulfat getrocknet, dekantiert und eingedampft und ergab 4,53 g rohes Methyl-Z-3-(4'-methoxybenzylthio)-3-phenyl-2-propenoat als blaß-gelbe Kristalle.

Schritt B: Herstellung von 3-Hydroxy-2-(4'-methoxyphenyl)-5phenylthiophen

Kalium-tert-butoxid (2,11 g, 18,8 mMol) wurde in 30 ml THF bei 25ºC gelöst. Eine Lösung von rohem Methyl-Z-3-(4'-methoxybenzylthio)-3-phenyl-2-propenoat (2,00 g, 6,36 mMol) in 10 ml THF wurde über 5 bis 10 Minuten hinzugefügt. Weitere 2·2 ml THF wurden verwandt, um das Ausgangsmaterial in die Reaktion hineinzuspülen. Nach weiterem Rühren über eine Stunde bei 25ºC wurde die Reaktion mit 1,5 ml Eisessig gequenscht und in 100 ml Ethylacetat gegossen. Nach Waschen mit, nacheinander, 50 ml gesättigtem wäßrigem Natriumchlorid, 15 ml 2 N wäßriger Salzsäure und 50 ml gesättigtem wäßrigem Natriumchlorid wurde die Lösung über Natriumsulfat getrocknet, dekantiert und eingedampft. Der Rückstand wurde in Dichlormethan gelöst und auf 10 g Kieselgel eingedampft. Blitz-Säulenchromatographie an 60 g Kieselgel ergab bei Elution mit 1 l 10% Ethylacetat in Hexan, gefolgt von 500 ml 12% Ethylacetat in Hexan, 3-Hydroxy-2-(4ma methoxyphenyl)-5-phenylthiophen in Form von 0,35 g nahezu weisma sen Kristallen.

Beispiel 8

3-Acetoxy-2-(4'-methxyphenyl)-5-phenylthiophen

3-Hydroxy-2-(4'-methoxyphenyl)-5-phenylthiophen (200 mg, 0,71 mMol) wurde in 2,0 ml Pyridin gelöst und mit Essigsäureanhydrid (0,50 ml, 5,3 mMol) behandelt. Die Lösung wurde 4 Stunden bei 25ºC gerührt und dann das meiste Essigsäureanhydrid und Pyridin mittels Rotationsverdampfer unter vermindertem Druck entfernt.
Der Rückstand wurde in 40 ml Ethylacetat gelöst und mit 2· 15 ml 2 N wäßriger Salzsäure, 15 ml gesättigtem wäßrigem Natriumbicarbonat und 15 ml gesättigtem wäßrigem Natriumchlorid gewaschen. Die Lösung wurde über Natriumsulfat getrocknet, dekantiert und eingedampft. Das verbleibende Öl (224 mg) begann beim Stehen über Nacht zu kristallisieren. Dies wurde mit anderem, auf die gleiche Weise hergestelltem Material vereinigt und zweimal aus 3 bis 4 ml 7% Ethylacetat in Hexan umkristallisiert und ergab 3-Acetoxy-2-(4'-methoxyphenyl)-5-phenylthiophen in Form von sehr blaß rosafarbenen Nadeln, Fp. 81 bis 82ºC.

Beispiel 9

3-Hydroxy-2-(3'-pyridyl)-5-phenylthiophen

Schritt A: Herstellung von Ethyl-3-(3'-pyridylmethylthio)-3phenyl-2-propenoat

Ethylphenylpropiolat (1,30 ml, 1,37 g, 7,86 mMol) und 3-Pyridinmethanthiol (1,00 g, 7,99 mMol) wurden vereinigt und in einem Eisbad abgekühlt. Piperidin (50 ul, 43 mg, 0,51 mMol) wurde tropfenweise über 10 Minuten hinzugefügt und ergab eine exotherme Reaktion. Nach weiteren 10 Minuten wurde das Eisbad entfernt und die Reaktion über Nacht stehengelassen. Die Reaktion wurde dann eine Stunde auf 100ºC erhitzt. Das rohe Ethyl-3-(3'-pyridylmethylthio)-3-phenyl-2-propenoat, erhalten als eine Mischung von Z- und E-Isomeren, wurde direkt zur Cyclisierung verwandt.

Schritt B: Herstellung von 3-Hydroxy-2-(3'-pyridyl)-5-phenylthiophen

Das rohe Produkt der Michael-Addition wurde in 5,0 ml THF gelöst und tropfenweise über 5 bis 10 Minuten mit einer eisgekühlten Lösung von Kalium-tert-butoxid (2,65 g, 23,7 mMol) in 25 ml THF versetzt. Weitere 2·3 ml THF wurden verwandt, um Ester-Ausgangsmaterial in die Reaktion hineinzuspülen. Das Eisbad wurde entfernt und die Reaktion 25 Minuten gerührt, danach in einem Eisbad abgekühlt und durch Zugabe von 11,9 ml 2,0 N wäßriger Salzsäure gequenscht. Die Reaktion wurde zwischen 50 ml gesättigtem wäßrigem Natriumchlorid und 50 ml Dichlormethan verteilt. Die organische Schicht wurde mit weiteren 50 ml gesättigtem wäßrigem Natriumchlorid gewaschen und über Natriumsulfat getrocknet. Die wäßrigen Schichten wurden nacheinander mit 2·50 ml gesättigtem wäßrigem Natriumchlorid gewaschen und die organischen Schichten über Natriumsulfat getrocknet. Die organischen Schichten wurden dekantiert und eingedampft und ergaben einen klebrigen kristallinen Rückstand. Rühren mit 10 ml Ethylacetat, Filtration und Wäsche mit 5 ml Ethylacetat hinterließ 1,25 g blaß-gelbe Kristalle. Umkristallisieren aus einer siedenden Mischung von 20 ml Ethylacetat und 10 ml Ethanol, die auf 25ºC abkühlen gelassen wurde, ergab 3-Hydroxy-2-(3'-pyridyl)-5-phenylthiophen in Form von 675 mg blaß-gelben Kristallen, Fp. 202 bis 204ºC.

Beispiel 10

3-Acetoxy-2-(3'-pyridyl)-5-phenylthiophen

3-Hydroxy-2-(3'-pyridyl)-5-phenylthiophen (115 mg, 0,454 mMol) wurde in 2,0 ml Acetonitril suspendiert und mit Triethylamin (130 ul, 94 mg, 0,93 mMol) versetzt, gefolgt von Dimethylaminopyridin (3 mg, 0,02 mMol). Die Hydroxyverbindung verblieb weiterhin großenteils ungelöst, jedoch ergab die Zugabe von Essigsäureanhydrid (130 ul, 141 mg, 1,38 mMol) eine Lösung, die über Nacht stehengelassen wurde. Die Reaktionsmischung wurde dann eingedampft und der Rückstand durch Blitz-Säulenchromatographie an 5 g Kieselgel durch Elution mit 10% Ethylacetat in Hexan gereinigt, wobei 132 mg blaß orangefarbene Kristalle erhalten wurden. Umkristallisation aus einer Lösung von 1 ml Hexan und 0,5 bis 0,75 ml Toluol bei 50ºC unter langsamer Abkühlung auf 0ºC ergab 96 mg 3-Acetxy-2-(3'-pyridyl)-5-phenylthiophen, Fp. 76 bis 77ºC.

Beispiel 11

3-Hydroxy-5-(2'-methylphenyl)-2-phenylthiophen

Eine Lösung aus Methyl-Z-3-(2'-methylphenyl)-3-benzylthio-2-propenoat (575 mg, 1,93 mMol) in 6,0 ml THF wurde mittels doppelseitiger Nadel in eine Lösung aus Kalium-tert-butoxid (650 mg, 5,79 mMol) in 8,0 ml THF bei Raumtemperatur gegeben. Weitere 2·1 ml THF wurden zum Einspülen des Esters in die Reaktion verwandt. Die leuchtend orange-grüne Reaktion wurde 20 Min. bei 25ºC gerührt, dann in einem Eisbad gekühlt und durch Zugabe von 3,5 ml 2,0 N wäßriger Salzsäure gequenscht. Die Reaktion wurde in 25 ml gesättigtes wäßriges Natriumchlorid gegossen und mit 2·25 ml Ethylacetat extrahiert. Die Ethylacetatschichten wurden nacheinander mit 25 ml gesättigtem wäßrigem Natriumchlorid gewaschen, vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet, dekantiert und eingedampft. Blitz-Säulenchromatographie an 15 g Kieselgel ergab bei Elution mit 500 ml 3% Ethylacetat in Hexan, gefolgt von 200 ml 6% Ethylacetat in Hexan, 3-Hydroxy-5-(2'methylphenyl)-2-phenylthiophen in Form eines blaß-gelben viskosen Öls (75% Ausbeute). Das Produkt konnte von Kolben-zu-Kolben destilliert werden, Kp. (0,4 mm) 140 bis 150ºC.

Beispiel 12

3-Hydroxy-2-(2'-methylphenyl)-5-phenylthiophen

Eine Lösung von Methyl-Z-3-(2'-methylbenzylthio)-3-phenyl-2propenoat (900 mg, 3,02 mMol) in THF (8 ml) wurde tropfenweise mittels doppelseitiger Nadel in eine Lösung von Kalium-tertbutoxid (1,02 g, 9,09 mMol) in THF (12 ml) gegeben. Weitere 2 ml THF wurden verwandt, den Ester in die Reaktion zu spülen. Die Reaktion wurde 30 Min. bei 25ºC gerührt, danach in einem Eisbad abgekühlt und durch Zugabe von 7,0 ml 2,0 N wäßriger Salzsäure gequenscht. Die Reaktion wurde in 50 ml gesättigte wäßrige Natriumchloridlösung gegossen und mit 2·50 ml Ethylacetat extrahiert. Die Ethylacetatschichten wurden nacheinander mit 50 ml gesättigtem wäßrigem Natriumchlorid gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingedampft. Blitz- Säulenchromatographie an 45 g Kieselgel ergab bei Elution mit 500 ml 4% Ethylacetat in Hexan, gefolgt von 500 ml 6% Ethylacetat in Hexan, 3-Hydroxy-2-(2'-methylphenyl)-5-phenylthiophen als 421 mg wiegendes Öl. Das Produkt konnte von Kolben-zu-Kolben destilliert werden, Kp. (0,4 mm) 140 bis 150ºC.

Beispiel 13

3-Acetoxy-2-(2'-methylphenyl)-5-phenylthiophen

3-Hydroxy-2-(2'-methylphenyl)-5-phenylthiophen (537 mg, 2,02 mMol) wurde in Acetonitril (4,0 ml) gelöst und mit 4-Dimethylaminopyridin (15 mg, 0,12 mMol) und Triethylamin (0,65 ml, 470 mg, 6,9 mMol) versetzt, gefolgt von Essigsäureanhydrid (0,65 ml, 700 mg, 6,9 mMol). Die Reaktion wurde über Nacht bei 25ºC gerührt. Die Reaktionsmischung wurde eingedampft und der Rückstand an 30 g Kieselgel chromatographiert, wobei mit 700 ml 15% Ethylacetat in Hexan eluiert wurde. 3-Acetoxy-2-(2'-methylphenyl)-5-phenylthiophen wurde als 370 mg viskoses Öl isoliert. Das Produkt konnte von Kolben-zu-Kolben destilliert werden, Kp. (0,4 mm) 140 bis 150ºC.

Beispiel 14

3-Acetoxy-2-(4-methoxyphenyl)-4,5,6,7-tetrahydrobenzo[b]thiophen

Schritt 1: Ethyl-2,2-bis-(4-methoxyphenyl)methylthiocyclohexancarboxylat

Eine Lösung von 1,70 g (10 mMol) Ethyl-2-oxocyclohexancarboxylat und 3,38 g (22 mMol) p-Methoxybenzylmercaptan in 20 ml Toluol wurde unter Stickstoff auf Rückfluß erhitzt. Danach wurden 0,10 g (0,48 mMol) p-Toluolsulfonsäuremonohydrat zugesetzt und die Lösung wurde mit einer Dean-Stark-Falle 4 Stunden unter Rückfluß erhitzt. Die Lösung wurde zwischen NaHCO&sub3; und Ether verteilt und die Etherschicht mit NaHCO&sub3; und Salzsole gewaschen und über MgSO&sub4; getrocknet. Die Lösung wurde konzentriert und der ölige Rückstand an Kieselgel chromatographiert (10% Ethylacetat-Hexan), wobei 2,82 g (62%) eines klaren Öls erhalten wurden. NMR (CDCl&sub3;, (CH&sub3;)&sub4;Si): δ 1,31 (3H, t, J = 7Hz), 1,6-2,1 (6H, m), 2,3-2,5 (2H, m), 2,93 (1H, t, J = 6Hz), 3,78-3,95 (10H, m), 4,20 (2H, q, J = 7Hz), 6,82, (2H, AB), 6,84 (2H, AB), 7,25 (2H, AB), 7,27 (2H, AB); Massenspektrum: m/e 452 (M&spplus;).

Schritt 2: 3-Acetoxy-2-(4-methoxyphenyl)-4,5,6,7-tetrahydrobenzo[b]thiophen

Eine Lösung von 1,5 ml (10,7 mMol) Diisopropylamin in 10 ml trockenem Tetrahydrofuran wurde unter Stickstoff auf -78ºC abgekühlt. Hierzu wurden 4 ml 2,5 M n-Butyllithium (in Hexan) und nach 15 Minuten eine Lösung von 1,36 g (3 mMol) Ethyl-2,2bis-(4-methoxyphenyl)methylthiocyclohexancarboxylat in 5 ml trockenem Hydrofuran gegeben, wonach die Lösung unter N&sub2; 2 Stunden gerührt wurde. Danach wurden 1,5 ml (15 mMol) Essigsäureanhydrid hinzugefügt und die Lösung bei Raumtemperatur eine Stunde gerührt. Die Lösung wurde zwischen Ether und NaHCO&sub3; verteilt und die Etherschicht mit NaHCO&sub3;, danach Salzsole gewaschen und über MgSO&sub4; getrocknet. Die Lösung wurde konzentriert und der Rückstand an Kieselgel chromatographiert (20% Ethylacetat-Hexan), wobei ein farbloses Öl erhalten wurde. Dies kristallisierte aus Ethylacetat-Hexan unter Erhalt von 0,394 g (47%) der Titelverbindung in Form eines weißen kristallinen Feststoffes, Fp. 81ºC. NMR (CDCl&sub3;, (CH&sub3;)&sub4;Si) δ 1,81 (4H, m), 2,25 (3H, s, CH&sub3;CO), 2,35 (2H, t, J = 6HZ), 2,71 (2H, t, J = 6Hz) 3,80 (3H, s, OCH&sub3;), 6,90 (2H, AB), 7,39 (2H, AB).

Beispiel 15

Schritt 1: Methyl-3-(4'-methoxyphenyl)methylthioinden-1H-2carboxylat

Eine Lösung von 3,80 g (20 mMol) Methyl-1-oxoindan-2-carboxylat und 5,90 g (22 mMol) Diphenylchlorphosphat in 100 ml trokkenem Tetrahydrofuran wurde unter Stickstoff auf 0ºC abgekühlt. Danach wurden 3,0 ml (22 mMol) Triethylamin hinzugefügt und die Lösung wurde eine Stunde bei 0ºC gerührt. Eine Lösung von 3,39 g (22 mMol) 4-Methoxybenzylmercaptan in 20 ml trockenem Tetrahydrofuran wurde hinzugefügt und nach 10 Minuten 3,3 ml (24 mMol) Triethylamin mittels Spritze. Die Mischung wurde bei Raumtemperatur 2 Stunden gerührt, danach zwischen Ether und Wasser verteilt. Die Etherschicht wurde mit NaHCO&sub3; und Salzsole gewaschen, über MgSO&sub4; getrocknet und konzentriert. Der Rückstand wurde an Kieselgel chromatographiert (10% Ethylacetat- Hexan) und ergab 5,96 g (85%) eines farblosen Öls. NMR (CDCl&sub3;, (CH&sub3;)&sub4;Si) δ 3,72 (2H, s, SCH&sub2; Ar), 3,77 (3H, s, COOCH&sub3;), 3,88 (3H, s, ArOCH&sub3;), 4,34 (2H, s, CH&sub2;), 6,78 (2H, AB), 7,21 (2H, AB) 7,39 (2H, m), 7,48 (1H, m), 7,74 (1H, m); Massenspektrum: m/e 336 (M&spplus;).

Schritt 2: 3-Acetoxy-2-(4'-methoxyphenyl)-4H-inden[1,2-b]thiophen

Eine Lösung von 3,0 ml (21,4 mMol) Diisopropylamin in 20 ml trockenem Tetrahydrofuran wurde unter Stickstoff auf -78º abgekühlt. Hierzu wurden 8 ml 2,5 M n-Butyllithium (in Hexan) und nach 15 Minuten eine Lösung von 3,26 g (10 mMol) Methyl-3-(4ma methoxyphenyl)methylthio-1H-inden-2-carboxylat gegeben, wonach die Lzesung bei -78º gerührt wurde. Nach 2 Stunden wurden 3 ml (30 mMol) Essigsäureanhydrid hinzugegeben und die Lösung wurde bei Raumtemperatur eine Stunde gerührt. Die Lösung wurde zwischen Ether und Wasser verteilt und die Etherschicht mit NaHCO&sub3; und Salzsole gewaschen, über MgSO&sub4; getrocknet und konzentriert. Der Rückstand wurde an Kieselgel chromatographiert (20% Ethylacetat-Hexan) und das Produkt aus Ethylacetat-Hexan unter Erhalt von 1,19 (35%) der Titelverbindung in Form weißer Nadeln, Fp. 129ºC, kristallisiert. NMR (CDCl&sub3;, (CH&sub3;)&sub4;Si) δ 2,35 (3H, s, CH&sub3;CO), 3,74 (2H, s, CH&sub2;), 3,95 (3H, s, ArOCH&sub3;), 6,95 (2H, AB) 7,1-7,4 (2H, m), 7,44 (2H, AB), 7,51 (2H, m).

Beispiel 16

Schritt 1: Methyl-1-(4'-methoxyphenoxy)methylthio-4,5-dihydro-3H-benzocyclohepten-2-carboxylat

Eine Suspension von 2,18 g (10,0 mMol) Methyl-1-oxo-2,3,4,5tetrahydro-1H-benzocyclohepten-2-carboxylat und 1,24 g (11,0 mMol) Kalium-t-butoxid in 50 ml Tetrahydrofuran wurde unter Rückfluß und Stickstoff erhitzt, bis sich der Feststoff auflöste. Danach wurden 2,86 g (11,0 mMol) Diphenylchlorphosphat zugefügt und es wurde weiter erhitzt. Nach 30 Minuten wurde eine Lösung von 1,69 g (11,0 mMol) 4-Methoxybenzylmercaptan in 10 ml trockenem Tetrahydrofuran zugefügt, gefolgt von drei Portionen (1,24 g (11,0 mMol) insgesamt) Kalium-t-butoxid. Die Lösung wurde unter Rückfluß 4 Stunden erhitzt, danach abgekühlt und zwischen Ether und Wasser verteilt. Die Etherschicht wurde mit NaHCO&sub3; gewaschen, danach mit Salzsole, über MgSO&sub4; getrocknet und konzentriert.
Der ölige Rückstand wurde an Kieselgel chromatographiert (10% Ethylacetat-Hexan) und ergab ein Öl, das zu 2,73 g (77%) der Titelverbindung in Form weißer Kristalle, Fp. 79 bis 81ºC führte. NMR (CDCl&sub3;, (CH&sub3;)&sub4;Si) δ 1,90-2,10 (6H, m), 3,55 (2H, s, SCH&sub2;Ar), 3,82 (3H, s, OCH&sub3;), 3,90 (3H, s, OCH&sub3;), 6,65 (2H, AB) 6,75 (2H, AB), 7,12 (1H, dd, J = 7, 1,5 Hz), 7,28 (1H, dt, J = 7, 1,5 Hz), 7,56 (1H, dd, J = 7, 1,5 Hz)

Schritt 2: 3-Acetoxy-5,6-dihydro-2-(4-methoxyphenyl)-4H-benzo[6,7]cyclohepta[1,2-b]thiophen

Eine Lösung von 1,0 ml (7,1 mMol) Diisopropylamin in 10 ml trokkenem Tetrahydrofuran wurde unter Stickstoff auf -78º abgekühlt. Hierzu wurden 2 ml 2,5 M n-Butyllithium (in Hexan) gegeben und nach 15 Minuten eine Lösung von 0,73 g (2,00 mMol) Methyl-1(4'-methoxyphenol)methylthio-4, 5-dihydro-3H-benzocyclohepten-2-carboxylat, wonach die Lösung bei -78º gerührt wurde. Nach 2 Stunden wurde 1 ml (10 mMol) Essigsäureanhydrid zugesetzt und die Lösung bei Raumtemperatur eine Stunde gerührt. Die Lösung wurde zwischen Ether und Wasser verteilt und die Etherschicht mit NaHCO&sub3; und Salzlösung gewaschen, über MgSO&sub4; getrocknet und konzentriert. Der Rückstand wurde an Kieselgel chromatographiert (20% Ethylacetat-Hexan) und das Produkt aus Ethylacetat-Hexan unter Erhalt von 0,263 g (36%) der Titelverbindung in Form weißer Nadeln, Fp. 154ºC, kristallisiert. NMR (CDCl&sub3;, (CH&sub3;)&sub4;Si) δ 2,10-2,25 (4H, m), 2,30 (3H, s, CH&sub3;CO), 2,50 (2H, t, J = 7,5Hz), 2,76 (2H, t, J = 7,5Hz), 3,95 (3H, s, OCH&sub3;) 6,92, (2H, AB), 7,2-7,3 (4H, m), 7,49 (2H, AB).

Beispiel 17

Tests der biologischen Aktivität

Zwei Screening-Methoden wurden zum Zweck der Bewertung der biologischen Aktivität der erfindungsgemäßen Verbindungen eingesetzt. Der PMN5LO-Test in ein direktes Maß für die Kapazität, 5-Lipoxygenase zu inhibieren. Die zweite Verfahrensweise, RSVM-CO, ist eine Methode zur Bestimmung der Inhibierung der Cyclooxygenaseenzymaktivität und dient als solche als negative Kontrolle.
Die Schritte zur Durchführung eines jeden der beiden biologischen Tests sind wie folgt:

A. PMN5LO-Testverfahren

Erregung von peritonealen polymorphonuklearen Leukocyten (PMN) der Ratte

Männlichen Sprague-Dawley-Ratten (etwa 350 g) wurde intraperitoneal am Tag vor der Verwendung 8 ml 12%iges Natriumcaseinat injiziert. Am nächsten Tag wurden die Tiere durch CO&sub2;-Atemstillstand getötet und die Peritonealhöhle zweimal mit 20 ml ausbalancierten Salzen nach Hanks mit 15 mM HEPES (pH 7,4), 1,4 mm Ca&spplus;&spplus; und 0,7 mm Mg&spplus;&spplus; (Hepes-Hanks) gewaschen. Die Suspensionen wurden durch ein Plastiksieb filtriert und bei 260 g 5 Minuten zentrifugiert. Die Zellen wurden erneut in 50 ml Hepes-Hanks suspendiert und erneut zentrifugiert. Die PMN-Pellets wurden vereinigt und mit 1,25·10&sup7; Zellen/ml suspendiert.

Inkubationen

Die Zellsuspension wurde dann 1:10 verdünnt, 5 Minuten bei 37ºC vorinkubiert und in 200 ul Aliquoten in den Vertiefungen von Mikrotiterplatten mit 96 Vertiefungen verteilt. Die Vertiefungen hatten zuvor Proben der erfindungsgemäßen Verbindungen, Kontrollen, etc., in 25 ul einer 0,001%igen fettsäurefreien BSA in Hepes-Hanks aufgenommen. Die Platten wurden 2 Minuten bei 37ºC inkubiert und danach die Zellen zur Erzeugung von LTB&sub4; durch Zugabe von 25 ul 100 um Calciumionophor, als A23187 bezeichnet, stimuliert. Nach 4 Minuten bei 37ºC wurden die Platten in Trockeneis gefroren.

Radioimmunassay (RIA) auf LTB&sub4;

Die gefrorenen Platten wurden auf 4ºC aufgetaut und 25 ul-Aliquote in Platten mit V-Eintiefungen gegeben. Antikörper auf LTB&sub4; (50 ul) wurde hinzugefügt und nach 15 Minuten bei Raumtemperatur wurden 50 ul ³H-LTB&sub4; zugesetzt, wonach die Platten über Nacht bei 4ºC aufbewahrt wurden, um die Equilibrierung herbeizuführen. Am nächsten Tag wurde das "freie" ³H-LTB&sub4; durch Adsorption an dextran-beschichteter Holzkohle (90 ul pro Vertiefung einer 4% Holzkohlesuspension mit 0,25% Dextran T-70 in 110 mM Kaliumphosphat (pH 7,3), die 1 mM EDTA und 0,25 mM Thimerasol enthielt) während einer 10-minütigen Inkubation bei Eistemperatur entfernt. Die Holzkohle wurde mit 10-minütigem Zentrifugieren bei 200 g entfernt. Aliquote der überstehenden Flüssigkeit wurden in einem Packard 460 gezählt, in einem Masscomp Computer analysiert, und die Daten wurden als Prozent Inhibierung der LTB&sub4;-Produktion aufgezogen.

B. Widder-Samenblasen-Mikrosomcyclooxygenase-Testverfahren (RSVM-CO)

Enzymzubereitung

Samenblasendrüsen des Widders wurden von Fett befreit und 50 g in Würfelform in 250 ml eiskalten 0,1 M Kaliumphosphatpuffer (pH 7,6) gegeben und unter Verwendung eines Brinkman Polytron homogenisiert. Die Suspension wurde 10 Minuten bei 10 Kg (4ºC) zentrifugiert und die überstehende Lösung durch zwei Käsetuchschichten filtriert. Das Filtrat wurde 160 Minuten bei 105 Kg zentrifugiert, die überstehende Flüssigkeit davon verworfen und die Pelletoberfläche mit einem kleinen Volumen Puffer gespült. Die Pellets wurden in einem kleinen Volumen vereinigt, kurz mit dem Polytron homogenisiert und in 0,5 ml Aliquoten bei -80ºC eingefroren. Die Proteinkonzentration betrug etwa 50 mg/ml.

Inkubation

Das aufgetaute Enzym wurde 1:63 mit 0,125 M Na-EDTA (pH 8,0) mit 50 ug/ml BSA verdünnt. Eine Substrat-Cofaktor-Vormischung wurde mit 66 um ¹&sup4;C-Arachidonsäure (etwa 20 K cm/12,5 ul) in 500 ul 0,125 M Na-EDTA (pH 8,0) plus 10 ul 50 mM Hydrochinon und 10 ul 200 mM Glutathion hergestellt. In jede Probenvertiefung einer Platte mit 96 Vertiefungen wurde in 0,5 u DMSO gelöstes Mittel gegeben, gefolgt von 12,5 ul des verdünnten Enzyms. Nach einer 4-minütigen Vorinkubation bei Raumtemperatur wurden 12,5 ul der Substrat-Cofaktor-Mischung zugegeben, um die Reaktion zu starten. Die Reaktion wurde nach 20 Minuten bei Raumtemperatur durch Zugabe von 25 ul Methanol beendet, das 200 ug PGE2 und 400 ug AA pro ml enthielt.

Test

Die gesamte Reaktionsmischung wurde auf eine präadsorbierte Kieselgel-GF-Dünnschichtplatte getupft und, nach 45-minütiger Trocknung an der Luft, 12 cm in Ethylacetat:Eisessig (99:1) entwickelt.
Die entwickelten Spuren wurden unter Verwendung eines Bioscan Imaging Detectors auf die Verteilung der Radiomarkierung hin abgetastet und die aufintegrierten Peaks mit Standards und Kontrollen verglichen, wobei sich die prozentuale Inhibierung ergab.
Die Ergebnisse sind unten aufgeführt.
1. In jedem Eintrag gibt die erste Zahl die Inhibitorkonzentration in ug/ml, die zweite Zahl die prozentuale Inhibierung. Danach gibt für Verbindung 1 eine Konzentration von 1 ug/ml eine Inhibierung von 18% nach dem in Teil A dieses Beispiels beschriebenen Test.
2. IC&sub5;&sub0; ist die geschätzte Konzentration, die für eine 50%ige Inhibierung benötigt wird.

Claims

1. Thiophenderivate, die ein-, zwei- oder dreimal mit Arylgruppen substituiert sind, der Formel

oder physiologisch annehmbare Salze davon, worin Z die Zahl der Doppelbindungen in dem 5-gliedrigen Ring angibt und Z = 1 oder 2 ist; Y S, SO oder SO&sub2; ist; R&sub1;

(a) H;

(b) - -R&sub3;, worin R&sub3; C1-10-Alkyl, insbesondere C1-6-Alkyl, wie Methyl, Ethyl, i-Propyl, n-Propyl, t-Butyl, n-Butyl, i-Pentyl, n-Pentyl oder n-Hexyl ist und R&sub3; auch C6-20-Aryloxy, C1-10-Alkoxy, C1-10-Alkylthio, Mono(C1-10)alkylamino, Di(C1-10)alkylamino, C1-10-Alkoxy(C1-10)alkyl, oder Carbo(C1-10)alkoxy(C1-10)alkyl sein kann;

(c) - -R&sub4;, worin R&sub4; C6-20-Aryl, insbesondere C6-14-Aryl, beispielsweise Naphthyl, Anthryl, Phenyl oder substituiertes Phenyl der Formel

ist, worin X&sub5; und X&sub6; unabhängig

1) Q, worin Q H, C1-10-Alkyl, insbesondere C1-6-Alkyl, Halogen(C1-10)alkyl, insbesondere Fluor- oder Chlor-C1-6-alkyl, wie Trifluormethyl, Phenyl oder substituiertes Phenyl oder Naphthyl ist;

2) Halogen, insbesondere Chlor, Fluor, Brom oder Jod;

3) Niederalkyl, insbesondere C2-6-Alkenyl, wie Ethenyl oder Allyl;

4) Niederalkinyl, insbesondere C2-6-Alkinyl, beispielsweise Ethinyl oder n-Butinyl;

5) -SQ;

6) -OQ;

7) -CHQCOQ¹, worin Q¹ jede Spezies von Q sein kann und zu Q gleich oder davon verschieden sein kann;

8) -CHQCOOQ¹;

10) -CH&sub2;SQ oder -CHQSQ¹;

11) -CH&sub2;OQ oder -CHQOQ¹;

12) -COQ;

13) -COOQ;

14) -OCOQ;

15) -NQQ¹;

16) -NQCOQ¹;

17) -NQ(OQ¹);

18) -NQ(SQ¹);

19) -NQSO&sub2;Q¹;

20) -SO&sub2;NQQ¹;

21) -SOQ;

22) -SO&sub2;Q;

23) -SO&sub3;Q;

24) -CN;

25) -NO&sub2;;

26) -CONQQ¹;

27) -NO;

28) -CSQ;

29) -CSNQQ¹;

30) -CF&sub2;SQ;

31) -CF&sub2;OQ;

32) -NQCONHQ¹ oder NQCONQ¹Q², worin Q² jede Spezies von Q ist und Q¹ jede Spezies von Q ist und Q² zu Q¹ gleich oder davon verschieden sein kann; sind;

(d) - -NH&sub2;;

(e) -R&sub3;-O-R&sub3;;

(f) -R&sub3;-S-R&sub3; oder

(g) QOQ¹ ist; und

R&sub2;(a) H;

(b) R&sub4;;

(c) Niedercycloalkyl, insbesondere C3-6-Cycloalkyl, beispielsweise Cyclopropyl, Cyclopentyl und Cyclohexyl;

(d) Halogen;

(e) Halogen(C1-10)alkyl, insbesondere Halogen-C1-6-alkyl, beispielsweise CF&sub3;-, CHF&sub2;-, C&sub2;F&sub5;-;

(f) Heteroaryl oder mit X&sub5; und X&sub6; substituiertes Heteroaryl, insbesondere Pyridyl, Pyrryl, Furyl oder Thienyl, worin X&sub5; und X&sub6; wie vorstehend definiert sind;

(g) Benzyl oder substituiertes Benzyl der Formel

worin X&sub5; und X&sub6; wie vorstehend definiert sind;

(h) Niederalkinyl, insbesondere C1-6-Alkinyl, wie -C- CH; CH&sub3;-C C- oder HC C-CH&sub2;-;

(i) Niederalkenyl, insbesondere C1-6-Alkenyl, wie CH&sub2;=CH-, CH&sub3;CH=CH-, CH&sub2;=CHCH&sub2;-, CH&sub3;CH=CH-CH&sub2;- oder (CH&sub3;)&sub2;C=CH;

(j) -R&sub3;;

(k) -O-R&sub3;;

(l) -NHR&sub3;;

(m) -T¹-NH-T², worin T¹ eine beliebige Spezies R&sub3; ist und T² eine beliebige Spezies R&sub3; ist und T¹ zu T² gleich oder davon verschieden ist;

(n) -T¹OT²;

(o) -R&sub3;OH;

(p) -NH&sub2;;

(q) -NO&sub2;;

(r) -CN;

(s) - R&sub3;;

(t) - R&sub4;;

(u) -SR&sub3;;

(v) - R&sub3;;

(w) -SO&sub2;R&sub3;;

(x) -T¹-S-T²;

(y) -T¹- -T²;

(z) -T¹-SO&sub2;-T²;

(aa) -S-R&sub4;;

(ab) - -R&sub4;;

(ac) -SO&sub2;-R&sub4;;

(ad) Phenylniederalkenyl der Formel

worin X&sub5; und X&sub6; wie vorstehend definiert sind;

(ae) Phenylniederalkinyl der Formel

worin X&sub5; und X&sub6; wie vorstehend definiert sind;

(af) - R&sup5;, worin R&sup5; R&sub1; ist;

(ag) - O-R&sup5;;

(ah) - -NR&sup5;R&sup6;, worin R&sup6; R&sup5; ist und gleich zu R&sup5; oder davon verschieden sein kann;

(ai) - -SR&sup5;;

(aj) (CH&sub2;)m R&sup5;, worin m 1 oder 2 ist;

(ak) -(CH&sub2;)mO OR&sup5;;

(al) -(CH&sub2;)mNR&sup5;R&sup6; oder

(am) -(CH&sub2;)m-NR&sup5; R&sup6; ist und

R&sub2; eine Methylenbrücke mit zwischen 3 und 10 Kohlenstoffatomen mit einer angrenzenden R&sub2;-Gruppe bilden kann; und jede R&sub2;-Gruppe gleich oder verschieden von jeder anderen R&sub2;-Gruppe am gleichen Molekül sein kann, mit der Maßgabe, daß wenigstens eine Gruppe R&sub2; der Formel I entweder R&sub4; oder Heteroaryl oder mit X&sub5; oder X&sub6;, insbesondere Pyridyl, Pyrryl, Furyl oder Thienyl, substituiertes Heteroaryl ist, worin X&sub5; und X&sub6; wie vorstehend definiert sind;

mit der Maßgabe, daß R&sub2; in der 2-Stellung weder - OR&sup5; noch -CN ist, wenn Y S ist, Z 2 ist und R&sub1; H ist;

mit der weiteren Maßgabe, daß R&sub2; in der 5-Stellung nicht Methyl ist, wenn Y S ist, Z 2 ist, R&sub1; H ist und R&sub2; in der 2-Stellung Phenyl ist;

mit der weiteren Maßgabe, daß wenn R&sub2; in der 2- und 4-Stellung H ist, R&sub2; in der 5-Stellung Phenyl ist, Y S ist und Z 2 ist, dann R&sub1; nicht H, -COCH&sub3; oder -CO-CH(NH·Ts)-CH&sub3; sein kann.

2. Thiophenderivate nach Anspruch 1, worin Y = S; R&sub1; H oder -R&sub3; ist; und R&sub2; R&sub4; in der²-Stellung und der 5-Stellung ist sowie physiologisch annehmbare Salze davon.

3. Thiophenderivat nach Anspruch 1 mit der Struktur

oder physiologisch annehmbare Salze davon.

4. 2,5-Diphenylthiophen oder physiologisch annehmbare Salze davon.

5. Thiophenderivat nach Anspruch 1 mit der Struktur

oder physiologisch annehmbare Salze davon.

6. Thiophenderivat nach Anspruch 1 mit der Struktur

oder physiologisch annehmbare Salze davon.

7. Thiophenderivat nach Anspruch 1 mit der Struktur

oder physiologisch annehmbare Salze davon.

8. Pharmazeutische Zusammensetzung, welche wenigstens eine Verbindung nach Anspruch 1 zusammen mit einem pharmazeutisch annehmbaren Träger enthält.

9. Verwendung einer Verbindung nach Anspruch 1 zur Herstellung eines Medikaments, das zur Behandlung von Entzündungen oder anderen leukotrien-vermittelten Krankheiten geeignet ist.