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DE2408237A1 - Neue enzymaufbereitung, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung - Google Patents

Neue enzymaufbereitung, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung

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Publication number
DE2408237A1
DE2408237A1 DE19742408237 DE2408237A DE2408237A1 DE 2408237 A1 DE2408237 A1 DE 2408237A1 DE 19742408237 DE19742408237 DE 19742408237 DE 2408237 A DE2408237 A DE 2408237A DE 2408237 A1 DE2408237 A1 DE 2408237A1
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
beta
endo
enzyme
glucanase
aspergillus
Prior art date
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Withdrawn
Application number
DE19742408237
Other languages
English (en)
Inventor
Knud Aunstrup
Kirsten Hjortshoej
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Novo Terapeutisk Laboratorium AS
Original Assignee
Novo Terapeutisk Laboratorium AS
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Filing date
Publication date
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Withdrawn legal-status Critical Current

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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
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    • C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
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    • C12Y302/01039—Glucan endo-1,3-beta-D-glucosidase (3.2.1.39)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
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    • C12Y302/01075—Glucan endo-1,6-beta-glucosidase (3.2.1.75)
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
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Description

692 10/ir .1
NOVO TERAPEUTISK LlßORATOHIUM A/S, 2880 Bagsva-rd/Dänemark
Heue Enzymaufbereitung, Verfahren au ihrer Herstellung und ihre Verwendung
Die Erfindung betrifft eine neue Enzymaufbereitung mit einem das beta-G-lucan in Gerste oder verwandten G-lucanen hydrolysierenden Enzym, sowie ein Verfahren zur Herstellung einer solchen Aufbereitung sowie deren Verwendung beim Brauen, insbesondere um die Viskosität dar Würze und des Bieres herabzusetzen.
Die Umwandlung von Gerste in Malz stellt ein sehr zeitaufwendiges Verfahren dar, das verhältnismässig teure Anlagen erfordert. Um zu einem wirtschaftlicheren Einsatz von Malzenzymen zu kommen, hat man zusätzliche Kohlehydrate wie Mais,
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B-
Gerste, HsIs odsr Vsissn. varwend3t. In Europa stellt Gerste zwar einen üblichen Kohlehydratzusatz dar; ihre Verwendung bringt jedoch verfahrenstechnische Probleme mit sich, insbesondere dadurch, dass für die Filtration der Maische und des Bieres sehr viel Zeit erforderlich ist. Diese Schwierigkeit tritt auch bei wenig modifizierten Malzarten auf, d.h. bei Malzarten, die ungenügend Enzyme enthalten« Die verlängerten Filtrationszeiten sind durch die erhöhte Viskosität der Würze bedingt, was auf die Anwesenheit einer gummiartigen, hochmolekularen Polymersubstanz aus D-Glucose mit beta-1-3 und beta-1-4- glycosldischen Bindungen, also von Gerste-beta-Glucan zurückzuführen ist.
Es wurden Zugaben von microbieller Protease und Amylase verwendet, um einen ausreichenden Stickstoffspiegel für die Nährhefe aufrechtzuerhalten und die Saccharifizierung möglichst optimal zu gestalten und zwar sowohl durch Einmaisehen mit kohlehydratreichen Additiven als auch mit geringfügig modifizierten Malzarten. Diese bakteriellen Enzymaufbereitungen, die normalerweise durch Bacillus subtilis erzeugt werden, enthalten zwar einen Anteil an endo-beta-Glucanase, welche die Viskosität der Würze herabsetzt, Die Enzymaufbereitungen, welche endo-beta-Glucanase enthalten und bislang verwendet wurden besitzen jedoch ein pH Optimum der endo-beta-Glucana^e, das
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_ 3 —
wesentlich höher ist als das verhältnismässig niedrige pH Optimum bei der Bierfermentierung.
Die Entwicklung einer Enzymaufbereitung mit einem hohen Anteil an endo-beta-Glucanase Aktivität und einem verhältnismässig niedrigen pH Optimum entsprechend demjenigen bei der Bierfermentierung,würde den Vorteil mit sich bringen, dass die Viskositätsprobleme auf direktem Wege gelöst werden könnten und den Einsatz von vielfältigeren Zusammensetzungen von Mischungen aus Amylase, Proteinase und beta-Glucanase gestatten.
Es wurde nun gefunden, dass eine endo-beta-Glucanase Aufbereitung, die unwesentliche .Mengen an alpha-Amylase und verhältnisiaässsig wenig Protease enthält, durch Kultivierung von Aspergillus phoenicis (Cda.) Thorn (im folgenden kurz Aspergillus phoenicis genannt) unter aeroben Bedingungen in einem geeigneten Nährmedium und nachfolgende Isolierung des so erzeugten Enzyms erhalten werden kann.
Es wurde weiterhin festgestellt, dass eine in dieser Weise hergestellte beta-Glucanase Aufbereitung zur Einstellung der Viskosität von Würze oder Bier verwendet werden kann. Das neue Enzym kann der Würze oder dem Bier unabhängig davon zugesetzt werden, dass zusätzlich entweder noch microbielle
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Amylase und /oder microbielle Protease beigegeben wird.
3?ür die Herstellung der beta-Glucanase wird Aspergillus phoenicis gemäss der Erfindung auf einem Medium kultiviert, das assimilierbare Quellen von Kohlenstoff und Stickstoff zusammen mit anderen wesentlichen Nährstoffen enthält, wobei das Medium entsprechend den aus dem Stand der Technik bekannten Regeln zusammengesetzt ist.
Die Spezies Aspergillus phoenicis wird von Eaper und Fennell in dem Buch "The Genus Aspergillus", Baltimore 1965 S. beschrieben.
Zu bemerken ist noch, dass entsprechend dieser Definition Aspergillus saitoi var. kagoshimaensis identisch mit Aspergillus phoenicis ist.
In der nachstehenden Tabelle 1 werden die zwei Stämme, die in den folgenden Beispielen verwendet werden,mit dem als Prototyp anzusehenen Stamm verglichen, wie er in dem Buch "The Genus Aspergillus" beschrieben ist.
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Tabelle 1
Farbe NRRL 5684 GBS I37.52 A.phoenicis
Kolonien auf Rückseite der Kolonien (Cda.J Thorn
Czapek's Lösung-Agar
Durchmesser in cm Sklerotien
nach 7 Tagen bei 300G 5.5
2 Wochen bei 7.O
24-26°G
Durchmesser mm dunkelbraun 3.0 - 4.5
Konidienköpfe farblos dunkelbraun dunkelbraun
Form farblos weiss bis
weiss leicht grau
kugelförmig xfeiss
kugelförmig erzeugt in
einigen Stämmen.
Farbe 1-2 weiss kugelförmig
1-2 allgemein 1-2
Durchmesser /U lose
Konidiophore kolonnenartig lose
Farbe .kolonnenartig kugelförmig wem
jung aber aufge
spalten in weni
Länge mm braun bis ge Kolonnen
Durchmesser /u schwarz braun bis leicht lohfar-
^ände ι ca. 400 schwarz ben bis schwarz
ca. 450 3ΟΟ-5ΟΟ
leicht ge
färbt leicht ge in der Nähe der
färbt Vesikel leicht
bis zu 3-0 gefärbt
10-20 1.5 - 2.5 1.0 - 2.5
glatt 10-18 10-20
glatt glatt
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IiREL 5684 CBS 137.52 A.Dhoenicis
Dicke ,u
Vesikel		 1.5 - 2 1.5 - 2 (Cda.; Thorn
Form
Durchmesser /U
primäre Sterigmata		 kugelförmig
50-30		 kugelförmig
4-0-80		 1-2
Farbe
Grosse /U
sekundäre Sterigmata		 "bräunlicli
20-40 zu
5-8		 braunlich.
20-30 zu
5-7 		kugelförmig
45-65,galegenfc-
lich Ms zu
80-85
Grosse /U
Konidien.		 6-9 zu
2-3		 6-12 zu
2-4		 bräunlich
20-60 zu
5.5 - 7.5
Form
Durchmesser /U		 kugelförmig,
deutlich auf
gerauht
2.5 - 3-5 		kugelförmig,
deutlich auf
gerauht
3.0 - 3.5		 6.5 - 11.0 zu
3.0 - 3.5
kugelförmig,von
fast glatt bis
unregelmassig
aufgerauht
3.0 - 3.5 auf
bis zu 4.0
409835/096Ä
V-
Die Temperatur, bei der die Kultivierung normalerweise ausgeführt wird, liegt in dem Bereich, der gewöhnlich für die Kultivierung von Aspergillus phoenicis zur Anwendung kommt. Die Temperatur liegt vorzugsweise zwischen 25 und 35 G. Da die Kultivierung unter aeroben Bedingungen stattfinden soll, ■ist der Einsatz einer künstlichen Belüftung erforderlich, falls der Pilz in einer Submerskultur wachsen soll. Die Luftmenge entspricht derjenigen bei konventionellen Kultivierungsverfahren. Demnach wird vorzugsweise eine Belüftungsgeschwindigkeit von 0,5 bis 1,5 Luftvolumen pro iTüssigkeitsvolumen und pro Minute in einem geschlossenen Permentierungsbehalter angewandt♦
Während der Fermentierung Wird die Enzymaktivität in der Brühe regelmässig durch die nachfolgend beschriebenen Methoden bestimmt. Wenn kein weiterer Anstieg in der Aktivität stattfindet, wird, die Fermentierung abgeschlossen. Die Fermentierungszeit liegt im allgemeinen zwischen 3 und 15 Tagen.
Flüssige Enzymaufbereitungen können aus der Brühe durch Entfernung grober Teile aus der Brühe, beispielsweise durch Zentrifugieren oder Filtrieren, hergestellt werden. Die Aufbereitung kann dann durch Eindampfen bei niedrigen Temperaturen oder durch Umkehrosmose konzentriert werden. Schliesslich
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können der Brühe Konservierungsmittel zugesetzt werden.
Feste Enzymaufbereitungen können aus gereinigter und/oder konzentrierter Brühe durch Ausfällen mit Salzen, wie Natriumsulfat oder Ammoniumsulfat, oder mit mit Wasser vermischbaren Lösungsmitteln, wie Äthanol oder Azeton,hergestellt werden; das Wasser kann aus der Aufbereitung durch geeignete Trocknungsmethoden, wie Sprüh- oder Gefriertrocknung,entfernt werden.
Die Erfindung soll durch die nachfolgenden Beispiele weiter veranschaulicht werden, in denen die Glueanaseaktivitat wie nachfolgend beschrieben bestimmt wird.
Beta-Glucan wurde aus einem wässrigen Extrakt von gemahlener Gerste hergestellt, aus der die Stärke vermittels einer bakteriellen alpha-Amylaseaufbereitung, die keine beta-Glucanaseaktivität besass, entfernt war. Das stärkefreie Extrakt wurde dann mit Azeton ausgefällt, wieder in Wasser aufgelöst und nochmals mit 30%-igem Ammoniumsulfat ausgefällt. Der Niederschlag wurde dann eingehend gegen destilliertes Wasser dialysiert und gefriergetrocknet, wobei sich ein weisses fasriges Produkt ergab. Die Umsetzung mit dem Enzym wurde in einer 0,5%-igen beta-Glucanlösung, die auf einen pH von 5>5 abgepuffert war, durchgeführt; die Eeaktions-
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zeit betrug 30 Minuten, die Temperatur lag bei 3O°C. Die Aktivitätseinheit wurde als die Enzymmenge definiert, die pro Minute Reduktionsgruppen in einer Menge.freisetzte, die zu 1 /U Mol .Glucose äquivalent ist;; die Bestimmung erfolgt nach der Somoguy Felsonmethode.
Das neue Enzym hat ein pH Optimum bei 5»5» wie sich aus der nachfolgenden Tabelle ergibt.
pH % 2.0 3 .0 4.0 5-.5 6.0 7.0
Aktivität, 30 '.. 5 7 99 100 77 21
Die Stabilität des neuen Enzyms wurde unter verschiedenen Bedingungen untersucht, nämlich:
Fach 24 Stunden bsi 30°C beträgt die Restaktivität mehr als 95% der ursprünglichen Aktivität bei pH-Werten zwischen 2,5 unxL 7»0.
Nach 1 Stunde bei 50°0 beträgt die Bestaktivität mehr als 85% der ursprünglichen Aktivität bei pH-Werten zwischen 4,0 und 6,0.
Nach 1 Stunde bei 600G beträgt die Restaktivität mehr als 37% der ursprünglichen Aktivität bei pH-Werten zwischen 4,5 und 6,0.
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- ίο -
Zufolge des vorerwähnten Optimums bei niedrigen pH-Werten ist das erfindungsgemässe Enzym besonders für die Behandlung von Bier während des Fermentationsprozesses geeignet, nachdem hierbei der pH-Wert verhältnismässig niedrig liegt, etwa zwischen 4-,O und 5 »3·
Beispiel 1
In 500 ml Erlenmeyerkolben werden 100 ml Lösung eines Mediums folgender Zusammensetzung (g pro Liter) hergestellt:
gemahlene Gerste 100
Kartoffelstärke 40
Sojabohneninehl 30
Na2SO4 1
CaCOx 5
KH2PO4 3
Leitungswasser bis zur Volumenmarke
Die Kolben wurden im Autoklaven während 45 Minuten bei 120° sterilisiert. Nach dem Abkühlen auf Eaumtemperatur wurden sie mit Sporen von Aspergillus phoenicis NEEL 5684 beimpft.
Die beimpften Kolben wurden bei 30°C auf einem sich drehenden Schütteltisch inkubiert. Nach 6 und 12 Tagen wurde jeweils die beta-Glucanase Aktivität in einem Filtrat der Kulturflüssigkeit bestimmt. Hierbei wurden folgende Ergebnisse erhalten:
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6-tägige Inkubation.: 13,5 Einkerben pro ml 12-tägige Inkubation: 21,4 " " " ·
Beispiel 2
Der in Beispiel 1 beschriebene Versuch wurde wiederholt mit der Massgabe, dass die Kolben mit Sporen von Aspergillus saitoi var. kagoshimaensis (CBS 137·52, ATGC 11363, QM 8162) beimpft wurden.
Hierbei wurden folgende Ergebnisse erhalten:
6-tägige Inkubation: 11,7 Einheiten pro ml 12-tägige Inkubation: 2>,4 " ' " "
Beispiel 3
Der in Beispiel 1 beschriebene Versuch wurde wiederholt mit der Änderung, dass die Kolben mit Sporen von sechs verschiedenen Stämmen von Aspergillus phoenicis beimpft wurden, die von. der Kultursammlung des Centraalbureau voor Schimmelcultures in Baarn, Holland erhalten worden waren. Die mit diesen Stämmen erhaltenen maximalen Aktivitäten betrugen:
CBS 118,36 4,4 Einheiten pro ml CBS 114,37 17,2 " »η. CBS 139,48 5,8 " " "
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CBS 136,52 21,5 Einheiten pro ml CBS 137,54 11,8 " " "
CBS 107,55 9,3 ü " "
Beispiel 4
Es wird eine Impfkultur mib 200 ml der in Beispiel 1 beschriebenen Kulturflüssigkeit durch Inkubation bei 300C während 43 Stunden auf einem rotierenden Schütteltisch hergestellt. Das gesamte Volumen aus 200 ml wird in einen 10 Liter üfermentationstank überführt, der ein Substrat folgender Zusammensetzung enthält (in g pro Liter):
gemahlene Gerste 80 ,5
Sojabohnenmehl 50 Volumenmarke
Sucrose 40
EH2PO4 2
Leitungswasser bis zur
Luft wird zugeführt mit einer Geschwindigkeit von 1 v/v/min. Die Temperatur wird auf 300C gehalten und der Rührer mit einer Geschwindigkeit von 800 U/min-angetrieben. Der pH-Wert wird durch Zugabe von 1 M NaOH auf über 3»0 gehalten. Nach einer Fermentationszeit von 120 Stunden betrug die Aktivität 3350 Einheiten pro ml.
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Beispiel j?
Die Fälligkeit des erfindungsgemässen Enzyms, die Würzeviskosität herabzusetzen, wurde in folgender Weise veranschaulicht:
50 g gemahlene Gerste wurden in 200 ml Wasser suspendiert und bakterielle Amylase zugegeben (0,2 g BANL 120, IiOTO, hitzebehandelt zur Entfernung von beta-Glucanase). Die Maische wurde nach folgendem Programm erhitzt: 1 Stunde bei 500G, 1 Stunde bei 63°C, 30 Minuten bei 760G.
Hiernach wurde eine Würze durch Zentrifugation hergestellt, auf 10°B verdünnt und der pH-Wert auf 5?0 eingestellt. Der Würze wurde beta-Glucanase wie sie nach Beispiel 1 erhalten wurde, zugegeben, wonach die Würze während 120 Minuten bei 300G inkubiert wurde. Danach wurde die Viskosität mit einem Brookfield Viskosimeter bestimmt:
Beta-Glucanase Zugabe Viskosität i. Einheiten pro g Gerste cp
0 1,85
0,07 1,67
0,14 1,58
0,35 1,44
0,70 1,36
1,40 1,28
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Claims (9)

  1. Patentansprüche
    Endo-beta-Glucanase Aufbereitung, welche das beta-Glucan in Garste oder verwandten Glucanen hydrolysiert, erhältlich aus einem Stamm von Aspergillus phoenicis.
  2. 2. Endo-beta-Glucanase Aufbereitung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass sie nur unbedeutende Anteile an alpha-Amylase enthält.
  3. 3- Verfahren zur Herstellung einer endo-beta-Glucanase Aufbereitung nach einem oder beiden dervorhergehenden Ansprüche durch Züchten eines Pilzes der Gattung Aspergillus in einem Nährmedium, das assimilierbare Quellen von Kohlenstoff und Stickstoff enthält neben anderen wesentlichen Nährstoffen, dadurch gekennaeichnet, dass ein Stamm von Aspergillus phoenicis unter aeroben Bedingungen gezüchtet und das Enzym isoliert wird.
  4. 4-. Verfahren nach Anspruch 3> dadurch gekennzeichnet, dass die Temperatur während der Züchtung zwischen 25 und 3p°C liegt.
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  5. 5« Verfahren nach einem oder "beiden der vorhergehenden Ansprüche 3 und 4, dadurch gekennzeichnet, dass das Züchten in einer lauchkultur ausgeführt wird.
  6. 6. Verfahren nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, dass die Belüftungsmenge zwischen 0,5 und 1,5 Volumen
    pro VolumenKulturflüssigkeit und pro Minute beträgt.
  7. 7- Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche 3 "bis 6, dadurch gekennzeichnet, dass die !Fermentation nach einer Zeit zwischen 3 und 15 Tagen "beendet wird.
  8. 8. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche
    3 Ms 71 dadurch gekennzeichnet, dass zur Isolierung des Enzyms die gereinigte und/oder konzentrierte Brühe mit Ausfällungsmitteln, vorzugsweise mit Salzen oder mit Wasser vermisclibaren Lösungsmitteln, behandelt und das ausgefallene Enzym vorzugsweise durch Sprühtrocknen oder Gefriertrocknen getrocknet wird.
  9. 9. Verwendung von endo-beta-G-lucanase Aufbereitungen nach den vorhergehenden Ansprüchen zur Einstellung der Viskosität von Würze oder Bier.
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DE19742408237 1973-02-28 1974-02-21 Neue enzymaufbereitung, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung Withdrawn DE2408237A1 (de)

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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1984002533A1 (en) * 1982-12-22 1984-07-05 Norsk Hydro As PREPARATION OF THE ENZYME beta-GLUCANASE BY FERMENTATION OF FUNGI

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4501814A (en) * 1978-10-26 1985-02-26 The Amalgamated Sugar Company Process for producing a high fructose sweetener, high protein meal, and cereal germ oils
US4247636A (en) * 1978-10-26 1981-01-27 The Amalgamated Sugar Company Process for producing a high fructose sweetener, high protein meal, and cereal germ oils
NL8003723A (nl) * 1980-06-27 1982-01-18 Stamicarbon Inulinase.
ZA823690B (en) * 1981-06-11 1983-03-30 Novo Industri As Enzymatic treatment of wine and must
JPS5971688A (ja) * 1982-10-18 1984-04-23 Rooto Seiyaku Kk β−１，３−Ｄ−グルカナ−ゼの真菌溶解活性の活性化法
CA1272150C (en) * 1985-12-03 1990-07-31 Production of glucose syrups and purified starches from wheat and other cereal starches containing pentosans
JP4441740B2 (ja) * 1996-09-25 2010-03-31 グレースリンク リミテッド β−グルカン製品および穀類からの抽出方法
US6143883A (en) * 1998-12-31 2000-11-07 Marlyn Nutraceuticals, Inc. Water-soluble low molecular weight beta-glucans for modulating immunological responses in mammalian system
US6083547A (en) * 1999-01-14 2000-07-04 Conagra, Inc. Method for obtaining a high beta-glucan barley fraction
AU2003243934A1 (en) * 2002-07-25 2004-02-16 Novozymes A/S Mashing process
JP2006521828A (ja) * 2003-04-02 2006-09-28 カーギル，インコーポレイティド 低分子量グルカンを含んでなる、改良された食物繊維含有物質
EP2258829A3 (de) 2003-12-19 2013-03-27 Novozymes A/S Maischeverfahren
WO2009061745A2 (en) * 2007-11-05 2009-05-14 Energy Enzymes, Inc. Process of producing ethanol using starch with enzymes generated through solid state culture

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3251750A (en) * 1963-05-01 1966-05-17 Taisho Pharmaceutical Co Ltd Purification of cellulase
DE1243618B (de) * 1964-06-11 1967-07-06 Merck Ag E Verfahren zum Abbau von beta-Glucanen, insbesondere Cellulose
BE795716A (fr) * 1972-02-22 1973-08-21 Glaxo Lab Ltd Compositions enzymatiques thermostables
US3812013A (en) * 1972-03-01 1974-05-21 Gen Electric Soluble cellulase enzyme production

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1984002533A1 (en) * 1982-12-22 1984-07-05 Norsk Hydro As PREPARATION OF THE ENZYME beta-GLUCANASE BY FERMENTATION OF FUNGI

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