DE2356388A1 - Cephalosporine und verfahren zu ihrer herstellung - Google Patents

Description

Cephalosporine und Verfahren zu ihrer Herstellung

Die Cephalosporine sind wertvolle, zur Behandlung pathogener Infektionen in der Human- und Veterinärmedizin verwendbare Antibiotika, welche sich außerdem für die verschiedensten industriell' len Anwendungszwecke eignen. Man kann diese Verbindungen aus anderen Cephalosporinen, wie Cephalosporin C und o(-Methoxy-7ß-(D-5- -carboxy-5-aminovaleramido) ^-carbamoyloxymethyl-B-c ephem-4-carbonfsäure, herstellen. Die genannten Ausgangsverbindurigen werden aus Fermentationsbrühen gewonnen, welche man durch Züchtung geeigneter Stämme von Mikroorganismen erzeugt. Beispielsweise kann Cefalotin dadurch hergestellt werden, daß man die Aminoadipoylseitenkette von Cephalosporin C durch eine 2-Thienylacetylgruppe ersetzt. Die Verfahren zur Herstellung von Cephalosporinen weisen jedoch mehrere Nachteile auf. Vor allem liefern die Fermentationsprozesse lediglich geringe Cephalosporinausbeuten; der Austausch der Aminoadipdylgruppe erfolgt ferner in mehreren Stufen, die sich im großtechnischen Maßstab nur mit Schwierigkeiten, durchführen, lassen.· Bekamt sind ferner andere, van Benicillinkern

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ausgehende Verfahren zur Herstellung von Cephalosporinen sowie synthetische Methoden. Diese Verfahren sind jedoch im großtechnischen Maßstab ebenfalls nur schwierig durchführbar und liefern lediglich niedrige Ausbeuten an den gewünschten Produkten. In der Fachwelt bestand daher ein Bedarf an anderen,-im großtechnischen Maßstab durchführbaren Methoden zur Herstellung von Cephalosporinverbindungen.

Ee ist die Aufgabe der vorliegenden Erfindung, ein neues Totalsyntheseverfahren für Cephalosporine zur Verfügung zu stellen. Ferner ist es die Aufgabe der Erfindung, neue Verbindungen zu schaffen, welche sich als Zwischenprodukte für die Herstellung neuer Cephalosporinverbindungen eignen.

Die Erfindung betrifft ferner neue Cephalosporinverbindungen mit antibio ti sehen Eigenschaften. Diese Cephalosporinverbindungen, . insbesondere deren Salze und instabilen Ester, stellen wertvolle neue Antibiotika dar, welche gegenüber verschiedenen gramriegativen und grampositiven Krankheitserregern wirksam sind.

Die neuen 3-Cephemverbindungen der vorliegenden Erfindung können durch die allgemeine Formel XI dargestellt werden

H ?

„ (XI)

. ff V^Y

COOH

in der Y -CHRj- oder R» ist (wobei R* einen aromatischen, heterocyclischen, substituierten aromatischen oder substituierten heterocyclischen Rest bedeutet und R₅ einen gerad- oder verzweigtkettigen C* ,-Alkylrest darstellt), R- ein Wasserstoff atom oder ein Acylrest, vorzugsweise ein von einer Carbonsäure abgeleiteter Acylrest, isir und B ein Wasserstoff atom, eine Methyl- oder Methoxygruppe oder ein Rest -SR (wobei R ein Alkyl- oder Arylrest ist) bedeutet. A im Rest JL₁₃ kann ein Wasserstoff- oderTfalogenatom oder eine Hydroxyl-, Mercapto-, Acyloxy-, Acylthio-, substituierte Hydroxyl-, substituierte Mercapto-, quaternäre-Ammonium-, Azido-, Cyan-, Amino- oder N-substituierte Aminogruppe sein. Wenn

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A eine Hydroxylgruppe darstellt, kann die Cephemverbindung auch als Lacton auftreten, welches sich durch innere Veresterung mit ' der Carboxylgruppe bildet.

Die Erfindung umfaßt auch die nicht-toxischen, pharmakologisch verträglichen Salze und Ester der vorgenannten Verbindungen, welche am Penicillin- und Cephalosporinsektor üblicherweise eingesetzt werden.

Der Acylrest R, kann ein Rest einer substituierten oder unsubstituierten aliphatischen^ aromatischen, heterocyclischen, araliphatischen oder heterocyclisch-aliphatischen Carbonsäure oder einer Thio carbonsäure sein, beispielsweise ein solcher Acylrest, wie ihn die bekannten Cephalosporine und Penicilline aufweisen. Diese Acylreste können durch die nachstehende allgemeine Formel dar-., gestellt werden

-CO(CH)_m(CH₂)_nR₃

■* ■ ι

• ^R2

in der R« einen der nachstehenden Reste bedeutet, m und η 0 bis 4 sind und R, einen Rest R" oder ZR", welche Reste nachstehend definiert sind, bedeutet.

Eine Gruppe von Acylresten kann durch die nachstehende allgemeine Formel dargestellt werden

0 H -C-R"

in der R" einen substituierten oder unsubstituierten, gerad- oder verzweigtkettigen Alkyl-, Alkenyl- oder Alkinylrest, einen Aryl-, Aralkyl-, Cycloalkyl-, Heteroaryl- oder Heteroalkylrest bedeutet. Diese Reste können unsubstituiert sein oder Substituenten aufweisen, beispielsweise OH, SH, SR (R = Alkyl oder Aryl), Alkyl- oder Alkoxyreste, Halogenatome, Cyan-, Carboxyl-, Sulfoamino-, Carbamoyl-, Sulfonyl-, Azido-, Amino- oder substituierte Aminogruppen, Halogenalkyl-, Carboxyalkyl-, Carbamoylalky 1- oder N-substitui$rte Carbamoylalkylreste, Guanidine - oder N-substituierte Guanidinogruppen oder Guanidinoalkylreste. Spezielle Beispiele für Acylreste dieses Typs sind jene, bei denen R" eine Benzyl-, p-Hydroxybenzyl-,

' - 3 409821/1U6

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^Amino^-carboxybutyl-, Methyl-, Cyanmethyl-, 2-Pentenyl-, n-Amyl-, n-Heptyl-, Äthyl-, 3- oder 4-Nitro benzyl-, Phenäthyl-, β,β-Diphenyläthyl-, Methyldiphenylmethyl-, Triphenylmethyl-, 2-4Sethoxyphenyl-, 2,6-Dimethoxyphenyl-, 2,4,6-Trimethoxyphenyl-, 3, i-Dimethyl^-isoxazolyl-, 3-Butyl-5-methyl-4-isoxazolyl-, S-Methyl^-phenyl^-isoxazolyl-, 3-( 2-Chlorphenyl) -5-methyl- -4-isoxazolyl-, 3-(2,6-Dichlorphenyl)-S-methyl^-isoxazolyl-, D-4-Ainino-4-carTx>xybutyl-, D-4-N-Benzoylamino^-carboxy-n-butyl-, p-Aminobenzyl-, 0-Aminobenzyl-, m-Aminobenzyl-, (3-I⁾yridyl)- -methyl-, 2-Äthoxy-1-naphthyl-, 3-Carboxy-2—chinoxalinyl—, 3-(2,6-Dichlorphenyl)-5-(2-furyl)-4-isoxazolyl-, 3-Phenyl-4- -isoxazolyl-, 5-Methyl-3-(4-guanidinophenyl)-4-isoxazolyl-, 4-Guanidinomethylphenyl—, 4-Guanidinomethylbenzyl-, 4-guanidinobenzyl, 4-Guanidinophenyl-, 2,6-Dimethoxy-4-guanidinophenyl-, o-Sulfobenzyl-, p-Carboxymethylbenzyl-, p-Garbamoylmethylbenzyl-, m-Pluorbenzyl-, m-Brombenzyl-, p-Chlorbenzyl-, p-Methoxybenzyl-, 1-Naphthylmethyl-, 3-Isothiazolmethyl-, 4-Isothiazolylmethyl-, 5-Isothiazolylmethyl-, 4-Pyridylmethyl-, 5-Isoxazolylmethyl-, 4-Methoxy-5-isoxazolylmethyl-, 4-Methyl-5-isoxazolyllnethyl-, 1-Imidazolylmethyl-, 2-Benzofuranylmethyl-, 2-Indolylmethyl-, 2-Phenylvinyl-, 2-Phenyläthinyl-, 2-(5-Nitrofuranyl)-vinyl-, Phenyl-, o-Methoxyphenyl-, o-Ghlorphenyl-, o-Phenylphenyl-, p-Aminomethylbenzyl-, 1-(5-Cyantriazolyl)-methyl-, Difluormethyl-, Dichlormethyl-, Dibrommethyl-, 1-(3-Methylimidazolyl)-methyl-, 2- oder 3-(5-Carboxyaethylthienyl)-methyl-, 2- oder 3-(4-<3arbamoylthienyl)-methyl-, 2- oder 3-( 5-Methylthienyl)-methyl-, 2- oder 3-(5-Methoxythienyl)-methyl-, 2- oder 3-(4-Chlorthienyl)- -methyl, 2- oder. 3-(5-Sulfothienyl)-methyl-, 2- oder 3-(5-Carboxythienyl)-methyl-, 3-(1,2,5-Thiadiazolyl)-methyl-, 3-(4-Methoxy- -1,2,5-thiadiazolyl)-methyl-, 2-Purylmethyl-, 2-(5-Nitrofuryl)- -methyl-, 3-Furylmethyl-, 2-Thienylmethyl-, 3-Thienylmethyl- oder Tetrazolylmethylgruppe ist.

Der Acylrest kann auch ein Rest der nachstehenden allgemeinen Formel sein

-C(CH₂)_nZR»

- 4 _
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in der η 0 bis 4 ist, Z ein Sauerstoff- oder Schwefelatom darstellt und H" die vorstehend angegebene Bedeutung hat. Spezielle Beispiele. für den Substituenten ·■■"-.

-(CH₂)_nZR»

sind die Allylthiomethyl-, Phenylthiomethyl-, Butylmercaptomethyl-, cL-Chlorcrotylmercaptomethyl-, Phenoxymethyl-, Phenoxyäthyl-, . Phenoxybutyl-, Phenoxybenzyl-, Diphenoxymethyl-, Dimethylmethoxymethyl-, Dimethylbutoxymethyl-, Dimethylphenoxymethyl-, 4-Guanidinophenoxymethyl-, 4-Pyridylthiomethyl-, p-(Carboxymethyl)- -phenoxymethyl-, p-(Carboxymethyl)-phenylthiomethyl-, 2-Thiazolylthiomethyl—,-p-(Sulfo)-phenoxymethyl-, p-(Carboxy)-phenylthiomethyl—, p-(Carboxymethyl)-phenoxymethyl-, p-CCarboxymethyl)?- phenylthiomethyl-, 2-Pyrimidinylthiomethyl-, Phenäthylthiomethyl-, 1 -(5,6,7,8-Tetrahydronaphthyl)-oxomethyl- und 6,8-Bis-(methylthio)T- -octanoylgruppe. , .

Beim Acylrest kann es sich auch um einen Rest der nachstehenden allgemeinen Formel handeln - · ■

-C-CHR"

Rt

in der R" die vorstehend angegebene Bedeutung hat und R^Mt beispielsweise ein Halogenatom oder eine Amino-, Hydroxyl-, Azido-, Carbamoyl-, Guanidino-, Acyloxy-, Sulfamino-, Tetrazolyl-, Sulfo-, Carboxyl- oder Carbalkoxygruppe darstellt.

In Frage kommt auch der Acylrest mit der nachstehenden Formel

₂C

Spezielle Beispiele für den Substituenten

-CHR"
R¹"

sind dieoi-Aminobenzyl-, o(-Aminö-2-thienyl-, o(-Methylaminobenzyl-, d -Amino-fflethylmercaptopropyl-, o(-Amino-3- oder 4-chlorbenzyl-, ci-Amino-3 oder 4-hydroxybenzyl-, c^-

" - 5 - .
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Ot-Amino^^-dichlorbenzyl-, ß(-)-d-Hydroxybenzyl-, o[-Carboxybenzyl-, ol-Amino-3-thienyl-, o(-Amino-2-thienyl-, D-(-)-d-Amino-3-chlor-4- -hydroxybenzyl-, D(-)-o(.-Amino-3-thienyl-, 1-Aminocyclohexyl-, C^-(5-Tetrazolyl)-benzyl-, 2-(oi-Carboxy)-thienylmethyl-, 3-(oU!arboxy)-thienylmethyl-, 2-(d-Carboxy)-furylmethyl, ß-(d-Carboxy)-furylmethyl-, oC-Sulf amino benzyl-, (λ-Sulf amino-3-thienyl-, Oi-(N-Methylsulfamino)-benzyl-, D(-)-ol-Guanidino-2-thienyl-_f D(-)-ol-Guanidinobenzyl-, d-Guanylureidobenzyl-, d-Hydroxybenzyl-, ot-Azidobenzyl-, Ql-Fluorbenzyl-, 4-(5-Methoxy-1,3-oxadiazolyl-aniinomethyl-, 4-(5- -Methoxy-1,3-oxadiazoIyI)-hydroxymethyl-, 4-( 5-Methoxy-1,3-oxadiazolyl)-carboxymethyl-, 4-( 5-Methoxy-1,3-Sulfadiazolyl)-aminomethyl-, 4-(5-Methoxy-1,3-sulfadiazolyl)-hydroxymethyl-, 4-(5-Methoxy-1,3- -sulfadiazolyl)-carboxymethyl-, 2-(5-Chlorthienyl)-aminomethyl-, 2-(5-Chlorthienyl)-hydroxymethyl-, 2-(5-Chlorthienyl)-carboxymethyl-, 3-( 1,2-Thiazolyl) -aminomethyl-, 3-( 1₁2-Thiazolyl)-hydroxymethyl-, 3-( 1,2-Thiazolyl)-carboxymethyl-, 2-( 1,4-Thiazoly'l)-aminomethyl-, 2-(1,4-ThiazoIyI)-hydroxymethyl-, 2-(1,4-Thiazolyl)-carboxymethyl—, 2-Benzothienylaminomethyl-, 2—Benzothienylhydroxymethyl-, 2-Benzothienylcarboxymethyl~, oi-Sulfοbenzyl-, ci-Phosphonobenzyl-, O(-Diäthylphosphono- iuid ct-Monoäthylphosphonogruppe.

Der Rest R^-N- kann auch eine SuIfonamidogruppe sein, beispielsweise eine Phenylsulfonamido-, Äthylsulf onamido-, Benzylsulfonamido-, 2,5-Dimethylsulfonamido-, 4-Chlorsulfonamido-, 4-Ghlorplienylsulfonamido- oder 4-Methoxysulf onamido gruppe.

Die Acylsubstituenten der nachstehenden allgemeinen Formel

R₁₁R₁₀CHCO

in der R₁₀ und R₁₁ die nachstehend angegebene Bedeutung haben, bilden, da sie im allgemeinen eine nützliche antibiotische Aktivität aufweisen, eine bevorzugte Gruppe von Substituenten. R₁Q ist ein Wasserstoff- oder Halogenatom oder eine Amino-, Guanidino-, Phosphono-, Hydroxyl-, Tetrazolyl-, Carboxyl-, Sulfo- oder SuIfaminogruppe. R₁₁ bedeutet eine Phenyl- oder substituierte Phenylgruppe, einen 5- oder 6gliedrigen mono cyclischen heterocyclischen Ring, welcher ein oder mehrere Sauerstoff-, Schwefel- oder Stickstoffatomee) innerhalb des Rings aufweist, einen substituierten heterocyclischen Rest, eine Phenylthiogruppe, eine hetero-

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cyclische oder substituiert-heterocyclische Thiogruppe oder eine Cyangruppe. Bei den Substituenten kann es sich um Halogenatome,' Carboxymethyl— oder Guanidino gruppen handeln*

Gemäß einer bevorzugten erfindungsgemäßen Ausführungsform besitzt R- die nachstehende allgemeine Formel

Il

in der X ein Wasserstoff- oder Halogenatom oder eine Amino—, Guanidino-, Phösphono-, Hydroxyl-, Tetrazolyl-, Carboxyl-, Sulfo- oder SuIf amino gruppe bedeutet und R-, eine Phenyl- oder substituierte Phenylgruppe, ein 5- oder ögliedriger mono cyclischer heterocyclischer Ring, welcher ein. oder mehrere Sauerstoff-, Schwefeloder Stickstoffatomee) innerhalb des Rings aufweist, ein substituierter heterocyclischer Rest, eine Phenylthio- oder Phenyloxygruppe, eine heterocyclische oder substituiert-rheterocyclische Thiogruppe, ein Nieder-alkylrest (1-6 Kohlenstoff atome) oder eine Cyangruppe ist, wobei die Substituenten am Rest R* Halogenatome oder Carboxymethyl-, Guanidino-, Guanidinomethyl-, Carboxyamidomethyl-, Aminomethyl—, Nitro—, Methoxy- oder Methylgruppen sind. Besonders bevorzugt werden Acylreste, bei denen X ein Wasserstoff atom oder eine Hydroxyl-, Amino- oder Carboxylgruppe darstellt und R^ eine Phenylgruppe, ein Nieder-alkylrest oder ein 5- oder 6gliedriger heterocyclischer Ring mit einem oder zwei Schwefel-, Sauerstoffoder Stickstoffheteroatom(en) ist. Spezielle Beispiele für bevorzugte Substituenten R, sind die Tetrazolyl-, OJhienyl-, Furyl- und Phenylgruppe.

A kann ein Halogen-, wie Chlor-, Brom- oder Fluoratora, sein.

Wenn A eine substituierte Hydroxyl- oder substituierte Mereaptogruppe ist, kann diese durch die nachstehende allgemeine Pormel dargestellt werden -

- -ZR_x

in der Z ein Sauerstoff- oder Schwefelatom bedeutet und R_x ein Aeylrest, ein gerad- oder verzweigtkettiger Nieder-alkylrest

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(1-6 Kohlenstoff atome), Alkenylrest (1-6 Kohlenstoff atome) oder Alkinylrest (1-6 Kohlenstoff atome) oder ein Arylrest, Aralkylrest oder heterocyclischer Rest, beispielsweise ein Heteroaryl— oder Heteroalkylrest, ist. Der heterocyclische Rest ist vorzugsweise ein 5- oder 6gliedriger Ring, welcher ein oder mehrere Schwefel-, Stickstoff- oder Sauerstoffatom^) enthält. Diese Reste können unsubstituiert sein oder Substituenten aufweisen, zum Beispiel AUcylreste (1-6 Kohlenstoff atome), Alkoxyreste (1-6 Kohlenstoffatome), Halogenatome, Cyan—, Carboxyl-, Carbamoyl-, Azido—, SuIfο-, Amino- oder substituierte Aminogruppen, Halogenalkyl-, Carboxyalkyl-, Carbamoylalkyl- oder N-substituierte Carbamoylalkylreste, Guanidino- oder N-substituierte Guanidinogruppen, Guanidinoalkylreste, SuIfamyl— oder substituierte Sulfamylgruppen.

Spezielle Beispiele für derartige Reste -ZR_x sind die Isoxazolylthio-, Pyrrolidenylthio-, 1,3»4-Thiadiazolylthio-, 1-Oxidopyridylthio-, Furazanylthio-, Tetrazolylthio-, Thienylthio-, Thiazolylthio-, Purylthio-, Pyranylthio-, Pyrrolylthio-, Imidazolylthio-, Pyrazolylthio-, Pyridyltlaio—, Pyrazinylthio-, Pyrimidinyltliio-, Pyridazinylthio-, Isothiazolylthio-, Methoxy-, n-Propoxy-, Methylthio-, Acetoxy-, Propionyloxy-, Benzoyloxy-, (p-Chlorbenzoyl)-oxy-, {p-Methylbenzoyl) -oxy-, Pivaloyloxy-, (1 -Adamantyl) -carboxy-, Butanoyloxy-, Carbamoyloxy-, (N-Methylcarbamoyl)-oxy-, (N-Äthylcarbamoyl)-oxy-, N-(2-Chloräthyl)-carbamoyl -oxy-, (N-Phenylcarbamoyl)-oxy-, (N-p-Suifoph.enylcarbamoyl)-oxy-, p-Carboxymethylphenylcarbamoyloxy-, Methoxycarbonyloxy-, Isobutanoyloxy-, Cyclobutylcarbonyloxy-, Carbamoylthio-, (Äthoxythiocarbonyl)-thio—, (N-Propoxythiocarbonyl)-thio-, (CyclopentanoxythiocarbonylJ-thio-, Methylthio-, Ν,Ν-Diäthylthiocarbamoylthio-, N-Methylpiperaziniumt^thiocarbonylthio-, N,N-Dimethylpiperazinium-1 -thiocarbonylthio-, 2-Puroylth.io-, Isotliiouronium—, (5-Meth.yl—1,3,4-thiadiazol-2-yl)- -thio-, p-Tolylsulfonylthio-, Mesyloxy-, 1-Mesyloxy-, 1-Methyl- -■Jf2,3,4-tetrazolyl-5-thio-,' Tosyloxy-, Sulfamoyloxy-, 1-Naphtoyloxy-, 2-Furylacetoxy-, Cinnamoyloxy-, p-Hydroxycinnamoyloxy-, p-Sulfocinnamoyloxy- und 1R:2S-Epoxypropylphosphonyloxygruppe.

Andererseits kann, wenn A eine Hydroxylgruppe ist, das Cephalosporin auch als Lacton auftreten, welches durch innere Veresterung mit

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der Carboxylgruppe entsteht.

A kann auch ein Rest der nachstehenden allgemeinen Formel sein

—Y

wobei Y.J eine Amino- oder substituierte Aminogruppe unter Einschluß der Stickstoff-Heterocyclen und entsprechenden substituierten heterocyclischen Reste darstellt. Spezielle Beispiele für derartige Reste sind die Amino-, Acetamido-, Carbamoylamino-, Ν,Ν-Dimethylamino-, N-(2-Chloräthyl)-amino-, 5-Cyantriazol-i-yl- und 4-Methoxycarbonyltriazol-1-ylgruppe.

Wenn A eine Aminogruppe ist, kann die Cephalosporinverbindung auch in Form des Lactams vorliegen, welches durch Wasserabspaltung mit der benachbarten Carboxylgruppe gebildet wird.

Spezielle Beispiele für als Rest A fungierende quaternäre Ammoniumgruppen sind die Pyridinium-, 3-Methylpyridinium-, 4-Methylpyridinium-, 3-Chlorpyridinium-, 3-Brompyridinium-, 3-Jodpyridinium-, 4-Carbamoylpyridinium-, 4-(N-Hydroxymethylcarbamoyl) -pyridinium-, 4-(N-Carbomethoxycarbamoyl) -pyridinium-, 4-(N-Cyancarbamoyl) -pyridinium-, 4-(Garboxymethyl)-pyridinium-, 4-(Hydroxymethyl)- -pyridinium-, 4-(Trifluormethyl)-pyridinium-, Chinolinium-, Picolinium- und Lutidiniumgruppe.

A ist vorzugsweise ein Wasserstoff- oder Halogenatom, eine Azido-, Cyan- oder Hydroxylgruppe, ein Alkoxy-, Aryloxy- oder Aralkyloxyrest, eine heterocyclisch substituierte Oxygruppe, eine Mercaptogruppe, ein Alkylthio-, Arylthio- oder Aralkylthiorest, eine heterocyclisch substituierte Thiogruppe, eine Aminogruppe, ein Alkylamino- oder Alkanoylaminorest, eine Hydroxyphenyl-, Acylthio-, Acyloxy-, Isothiouronium-, Sulfamoyloxy- oder quaternäre Ammoniumgruppe, ein heterocyclisches tertiäres Amin, ein Alkylsulfonyloxyrest oder eine (cis-1,2-Epoxypropyl)-phosphonogruppe. Bei den heterocyclischen Resten kann es sich um 5- oder 6gliedrige Heteroringe handeln, welche ein oder mehrere Stickstoff-, Sauerstoff- oder Schwefelatomee) enthalten. Der Acylrest kann ein Nieder- -alkanoylrest mit 2-6 Kohlenstoffatomen, eine Carbamoyl- oder Thio-

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JO

carbamoylgruppe oder ein davon abgeleitetes N-Alkyl oder I?,N- -Dialkylderivat sein. Der Alkylrest der vorgenannten Substituenten enthält 1—6 Kohlenstoffatome und kann weiter substituiert sein; die Substituenten sind beispielsweise Halogenatome·, Amino-, Cyan-, Carboxyl- oder Sulfogruppen oder Alkoxyreste.

Die neuen 3-Cephemverbindungen der Erfindung können nach den durch das folgende Heakt ions schema veranschaulichten Verfahren hergestellt «erden:

t ·

/ P (OR) „

HCN-CH

COOR,

Y-COCH₂X

CH

I» I ²

N CH-Y COOR,

IV

HC

O Il

N O
\P(OR)

0OR,

III

COOR₁

- 10 409821 /1146

VI

2356338

15 303 T

B

<Γ

VIII

IX

COOR,

VII

COOR-,

COOH

XI

Als Ausgangsverbindung in diesem Verfahren dient amidopho sphono ac et at ester der allgemeinen Formel Io Man kann die verschiedensten Ester der allgemeinen Formel I zu diesem Zweck einsetzen« Zu den verschiedenen geeigneten Pho sphono estern gehören zum Beispiel die Di-nieder-alkylester oder die Diarylester. typische verwendbare Ester sind jene, bei denen die Reste R gleich oder verschieden sind und beispielsweise Methyl-, Äthyl-, Propyl-, Butyl—ρ Pentyl— ₉ Phenyl— oder Benzylgruppen bedeuten.

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15 303 Y A

Die Carboxylgruppe der als Ausgangsmaterial verwendeten Phosphorverbindung kann blockiert bzw. gescMtzt sein. Pur diesen Zweck dient vorzugsweise ein Rest (R-j), bei dessen Abspaltung, die als letzte Stufe vorgenommen wird, man die freie Säureform des Cephalosporins ohne Aufspaltung des ß-Lactamanteils erhält. Schutzgruppen, «lie sich für den genannten Zweck eignen, sind bekannt. Brauchbare schützende Estergruppen leiten sich beispielsweise von Alkoholen oder Phenolen ab. E₁ ist vorzugsweise ein Alkyl- oder Aralkylrest, welcher 1 bis etwa 20 Kohlenstoff atome enthält. R^ kann somit ein Hleder-alkylrest, wie eine Methyl-, Äthyl- oder tert.-Butylgruppe, ein substituierter Alkylrest, wie eine Phthalimidomethyl-, Succinimidomethyl—, Phenacyl—, substituierte Phenacyl—, z.B. p-Bromphenacyl-, substituierte Äthyl-, zum Beispiel 2,2,2-Trichloräthyl-, 2-Methylthioäthyl— oder 2—(p-Methylphenyl)-äthylgruppe, ein Alkenylrest, wie eine 3-Buten-1-yl-, Propenyl- oder Allyl-¹ gruppe, ein Alkoxyalkylrest, wie eine Methoxymethylgruppe, ein Aryloxyalkylrest, wie eine p—Methoxyphenoxymethylgruppe, ein Aralkyloxyalkylrest, wie eine Benzyloxymethylgruppe, eine Benzyl- oder substituierte Benzylgruppe, zum Beispiel eine p-Nitrobenzyl-, p-T-Methoxybensyl-, 3>5-Dinitrobenzyl-, 2,4,6-Trimethylbenzyl- oder 3,5-Diehlor-4-hydroxybenzylgruppe, eine Benzhydryl- oder substituierte Benzhydrylgruppe, zum Beispiel eine p-Methoxybenzhydrylgruppe, sein. Bevorzugte blockierende Gruppen sind die Methyl-, tert.-Butyl-, Phenacyl-, p-Bromphenacyl-, p-Nitrobenzyl-, 2,2,2- -Trichloräthyl-, p-Methoxybenzyl-, Benzhydryl-, Methoxymethyl-'ond p-Methoxyphenoxymethylgruppe.

Spezielle Beispiele für verwendbare Ausgangsverbindungen (I). sind Trichloräthyl-ot,—thioformamido-diäthylphosphonoacetat, Srichloräthyl-Ot-thioformamido-diphenylphosphonoacetat, Phenyl-d- -t-hioformamido-dimethyl-phosphonoacetat, p-Methoxybenzyl-oG-thiofonnamido-diäthylphosphonoacetat, Benzhydryl-ot-thioformamidodiphenylphosphonoacetat, tert .-Butyl-oi-thioformamido-dimethylphosphonoacetat, tert .-Butyl-pi-thioformamido-dipropylphosphonoacetat, Methyl-d.-thiofοrmamido-diphenylphosphonoacetat, Phenacyloderp-Bronphenacyl-d-thioformamido-diäthylphosphonoacetat, Methoxymethyl-d-thioformamido-dimethylphosphonoacetat, p-Methoxyphenoxymethyl-ct-thioformamido-dimethylphosphonoacetat und p-Nitrobenzyl- -otrthioformamido-dimethylphosphonoacetat.

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Bei der Durchführung der ersten Stufe dss vor Verfahrens wird der Thiofomamiiisester (X) mit einem substituiertem Aceton der allgemeinen Formel II umgesetzt, wobei X ein abspaltfoares Atom oder eine abspaltbare Gruppe "bedeutetg sum Beispiel eine SuIfonatgruppe, wie eine p-iColuolsulfonat-.oder Methylsulfonatgruppe, eine Benzoatgruppe, wie eine p-Nitrobenzoatgrappe, ein Halogenatom, insbesondere ein Chlor- oder Bromatom« oder ©ine Trifluormethylsulfonyloxygruppe.

Y ist eine Phenylgruppe, ein heteroeycliseher Rest, eine substituierte Phenylgruppe oder ein substituierter heteroeyelischer Best. Der heterocyclische Rest ist vorzugsweise ein 5- oder ögliedriger Ring, der ein oder mehrere· Schwefel-, Stickstoff- oder Sauerstoffatome e) enthält; spezielle Beispiele für derartige heterocyclische Reste sind die Furyl-, Thienyl-, Thiazolyl-, Thia&iazolyl-, Pyridyl-, Pyrazolyl- und Tetrazolylgruppe_a Die Substituenten an der Phenylgruppe oder am heterocyclischen Rest können zum Beispiel Nieder-alkylreste (C. bis Cg), Nieder-Alkoxyreste (Cj bis Cg), Halogenatome, Cyangruppen, Garbo-nieder-alkoxyreste, Acylaminogruppen oder die Alkylaminoreste sein_e Y kann ferner ein Rest

Rc-OH- sein, wobei R,- ein gerad- oder verzweigtkettiger Alkylrest mit 1-3 Kohlenstoffatomen ist und A die vorstehend angegebene Bedeutung hat. Die Umsetzung kann bei Temperaturen von 0 bis 50 C in Gegenwart eines Säureakzeptors durchgeführt werden und liefert die entsprechende S-substituierte Thioformimidatverbindung der allgemeinen Formel III. Die Umsetzung wird zweckmäßig dadurch vorgenommen, daß man das Zwischenprodukt (I) mit dem substitutierten Aceton (II) in Gegenwart von etwa einem Äquivalent einer anorganischen Base, zum Beispiel eines. Alkalicarbonate, wie Kaliumcarbonat, oder einer nicht-nucleophilen organischen Base, zum Beispiel Diazobicyclononan, Bis-1,8-(dimethylamine)-naphthalin und Diisopropyläthylamin, bei Raumtemperatur zur Reaktion bringt. Nach dem vollständigen Ablauf der Umsetzung wird das Produkt zweckmäßig durch Filtrieren des Reaktionsgemisches und Eindampfen des Filtrats zur Trockene isoliert.

Spezielle Beispiele für erfindungsgemäß verwendbare substituierte Acetone sind i-Chlor-S-acetoxy-butan-S-on, 1-Brom-3-propionyloxy-

-toutan-2-on, 1-BΓom-3-l^utyrylo3cy-butan-2--on_f i-Chlor-^-propionyloxy-hexan-2-on, 1-Brom-3-aeetoxy-butan-2-on, 1-Ghlor-3-propionyl- oxy-butan-2-on, 1-ChlQr-3-butyryloxy-butan-2-on, i-Chlor-3-acetoxypentan-2-ott und 1-Brom-3~propionyloxy-hexan-2-on. Weitere Beispiele für geeignete Verbindungen sind Phenacylchlorid, p-Chlorphenaeyl- ehlorid, p-Cyanphenacylehlorid, p-Carfeomethoxyphenacylchlorid, 4-Cliloracetylpyridin, 2-Chloracetylfuran, 2-Chloracetyl-5-methyl- furan, 2-Chloracetylthiophen* 2-Bromacetylthiazol, 2-Chloraeetyl- thiadiazol, 4-Bromacetyl-pyrazol und 5~Brointetrazol.

Die als Zwischenprodukt anfallende S-substituierte Thioformimidat- verbindung (III) wird durch Umsetzung mit einer Base, beispielsweise einem Metallcarbonat oder -hydrid oder einer OrganoIithiumverbindung, wie Ph.enyllith.ixun, in die entsprechende Thiazinverbin- dung der allgemeinen Formel IV übergeführt. Man kann das Thiazin auch durch Kondensation des Thioformamidoderivates (I) und des substituierten Acetons (II) in Gegenwart von mehr als etwa 1 Äquivalent der Base herstellen. Das Thiazin entsteht somit nahezu ausschließlich, wenn man zwei oder mehr Äquivalente Kaliumcarbonat in der Kondensationsreaktion einsetzt.

Die als Zwischenprodukt erhaltene Thiazinverbindung IV oder das Gemisch dieser Verbindung mit der Acetony!verbindung (III) wird anschließend in Gegenwart eines Säureakzeptors und vorzugsweise in einem Lösungsmittel bei Temperaturen von -78 C bis 30 C mit einem Azidoacetylreagens zur 7-Azidoverbindung der allgemeinen Formel V umgesetzt.

Als Azidoacetylreagentien kommen insbesondere jena mit der allge-. meinen Formel IV¹ in Frage

CH-COX . (IV·)

in der B ein Wasserstoff atom oder eine Methyl-,. Methylthio- oder MethoxYgruppe bedeutet und X ein Halogenatom oder eine Gruppe -OSO₂CF₃ oder-OS0₂CR\ ist. Die Umsetzung wird vorzugsweise bei niedrigen Temperaturen, z.B. bei etwa O⁰C und in Gegenwart einer genügenden Menge einer Base (wie eines tertiären Amins), welche als Saure-

-H-409 821/1U6

akseptor fungiert und zusätzlich den lingschluß der Thiazinverbindung katalysiert, vorgenommen. Zur Durchführung der Reaktion trägt man zweckmäßig eine Lösung des Azids in Methylendichlorid in eine kühle Lösung des Thiazins und eines tertiären Amins (wie Triethylamin) im selben Lösungsmittel einj wobei man das Amin in äquimolarer Menge einsetzt. Das Reaktionsgemisch wird so lange in der Kälte gerührt, bis die Bildung der gewünschten 7-Azidoeephalosporinverbindung vollständig erfolgt ist«, Azido acetylhalogenide und 2-Azido-2-methylacetylhalogenide sind' bekannt und können nach herkömmlichen Methoden hergestellt- werden. Die Herstellung des 2- -Azido-2-metho^sracetylhalogenids und der Azido ac etylsulfonate sind nachstehend beschrieben. .

Spezielle Beispiele für geeignete Thiazoverbindungen (IY) sind folgendes '

JiH-OHE₅
{ 0R^s

COOR₁
R₁ R

Methoxymethyl GH₃-CO

C₂H₅-CO OH₃

CH₃-CO

p-Methoxybenzyl C₃H^-CO OH₃

^CT - G₂H₅-CO . O₃H,

C₄H₉-CO GH₃

" C₃H₇-CO

p-WitrobenzyX G ^Hg-C 0

G₄H₉-GO

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p-lf itro benzyl ^ 5^11 \

* C₅H₁₁-CO C₂H₅

Weitere Beispiele für verwendbare Thiazine sind p-Methoxybenzyl-5- »phenyl-6(H)-1,3-thiazin-4-carboxylat, p-Methoxybenzyl-5-p-chlorpäien3rl-6{H) -1,3-thiazin-4-carboxylat, p-Methoxybenzyl-5-p-cyanphenyl-6(H)-1,3-thiazin-4-carboxylat, p-Methoxybenzyl-5-p-carbomethoxyphenyl-6(H)~1,3-thiazin-4~carboxylat, p-Methoxybenzyl-5- -(4-pyridyl)-6(H)-1,3-thiazin-4-carboxylat, p-Methoxybenzyl-5-—(2—furyl)-6(H)-1,3-thiazin-4-carboxylat und p-Methoxybenzyl-5- -( 5-methyi-2-furyl)-6.(H) -1,3-thiazin-4-carboxylat.

Man kann die gewünschte 7-Azidoverbindung (V) auch dadurch erhalten, daß man ein Gemisch der acyclischen Verbindung (III) und der cyclischen Thiazinverbindung (IV) oder die acyclische Verbindung (III) als solche unter den vorstehend beschriebenen Bedingungen mit dem Azidoacetylreagens umsetzt. Wenn man die acyclische Verbindung (III) als solche mit dem Azido ac etylhalogenid zur Umsetzung bringt, wird angenommen-, daß sich eine cyclische Zwischenverbindung mit der nachstehenden allgemeinen Formel

CO₂R₁

bildet und daß dieses Produkt anschließend unter den Reaktionsbedingungen zur gewünschten 7-Azidoverbindung (V) cyclisiert wird.

Bei den vorgenannten Reaktionen I bis IV dient die Phosphonatgruppe als aktivierende Gruppe und wird schließlich bei der Herstellung der Thiazin-Zwischenverbindung abgespalten. Man kann auch andere Ausgangsverbindungen mit aktivierenden Gruppen, beispielsweise einer Methylsulfinyl- oder Dimethylsulfoniumgruppe, in analoger Weise in den vorgenannten Reaktionen einsetzen.

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In der nächsten Stufe der vorgenannten Rsaktionsfslg® wird die 7d-Azidoverbindung (V) zur entsprechenden Ibf-Aminoverbindung (VI) reduziert. Die Reduktion wird beispielsweise mit Vorteil nach herkömmlichen Methoden mittels Wasserstoff in Segenwart eines Edelmetallkatalysators, wie Platinoxid, durchgeführte Andere anwendbare Reduktionsmethoden arbeiten mit HoS/Triäthylamin, ΝΗ*Η3_? NaHS, Al/Hg-Tetrahydrofuran oder Cu/Phenylmercaptan.Die die Carboxylgruppe blockierende Gruppe ist leicht nach herkömmlichen Methoden abspaltbar, wobei man die 7oC~A.mino~3-Y-3-cephem-4-carbonsäuren erhält» Die Benzhydryl-, tert.-Butyl-, p-Methoxybenzyl- und p-Methoxyphenoxymethylgruppe werden beispielsweise mit Hilfe einer Säure, wie Trifluoressigsäure, die 2,2,2-Trichloräthyl- und Phenacylgruppe durch Reaktion mit Zink .und Essigsäure abgespalten=»

Wenn B eine Methyl- oder Methoxygruppe oder ein Rest SR ist (Verbindung V), erhält man eine Mischung des Tbi- und 7ß-Isomeren, wobei das 7ß-Isomere überwiegt.' Demgemäß kann die 7ß-Verbindung nach herkömmlichen bzw. hier beschriebenen Methoden direkt zur 7ß-Aminoverbindung (Verbindung IX) reduziert werden.

Die nach dem vorstehend beschriebenen Verfahren hergestellten Ή- -Azido- und 7dl-Aminocephalosporinverbindungen fallen als Gemische der d- und 1-Enantiomere an, welche nach herkömmlichen Methoden in die optisch aktiven Formen aufgespalten werden können. Die dl-"fc{-' -Aminoverbindungen oder deren Enantiomere können in die entsprechenden 7ß-Amlnocephalosporinverbindungen umgewandelt werden; diese ß-substituierten Verbindungen können acyliert werden, wodurch man Cephalosporine mit wertvollen antibiotischen Eigenschaften erhält.

Das Epimerisierungsverfahren, nach welchem die ^rfo(-Amino-3-cephemverbindungen in die entsprechenden 7ß-Amino-3-cephemverbindungen . umgewandelt werden, ist in der USA-Patentanmeldung Serial No.306066+) (eingereicht am 13. November 1972) beschrieben.

Das Epimerisierungsverfahren läuft wie folgt ab (B=H): Das 7o(.-Aminocephalosporin (VI) wird mit einem aromatischen Aldehyd zu einem Iminoaddukt der allgemeinen Forme], VII, in der Rg einen aromatischen Substituenten darstellt, umgesetzt. Als aromatischer

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+) vergl. gleichzeitig einge- '

reichte Patentanmeldung

Zeichen der Anmelderin: 15 31¹» .

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Aldehyd wird vorzugsweise Benzaldehyd oder ein substituierter Benzaldehyd eingesetzt, dessen Substituent sich in o- oder p-Stellung befindet; der Substituent ist beispielsweise ein Halogenatom oder eine Nitro-, Methyl-, Sulfonyl-, Cyan- oder Carboxylgruppe oder eine, davon abgeleitete Gruppe, wie eine Ester- oder Amidgruppe. Die bevorzugten aromatischen Aldehyde sind Benzaldehyd, p-ifitrobenzaldehyd, p-Glilorbenzaldehyd und Salicylaldehyd.

Andere carbonylhaltige Verbindungen, zum Beispiel Aldehyde und Ketone, wie Aceton, Hexafluoraceton oder Chloral, welche stabile Iminoderivate bilden, sind ebenfalls erfindungsgemäß verwendbar. Auch polycyclisch^ aromatische Aldehyde, d.h. solche mit 2 oder kondensierten Ringen, können eingesetzt werden.

Das '/bi-Aminocephalosporin (VI) und der aromatische Aldehyd werden in etwa äquimolaren Mengen in Gegenwart eines inerten Lösungsmittels miteinander vermischt. Spezielle Beispiele für geeignete Lösungsmittel sind Äthanol, Dioxan, Acetonitril, Dimethylformamid, Bimethylsulfoxid, Benzol, Toluol, Methylendichlorid und Chloroform. Die Reaktion läuft bei Temperaturen von Raumtemperatur bis zur - Hückflußtemperatur des Lösungsmittels rasch ab. Da die Kondensation eine Gleichgewichtsreaktion ist und Wasser eines der Reaktionsprodukte bildet, trennt man das Wasser nach einer beliebigen der zahlreichen herkömmlichen Methoden ab, beispielsweise durch azeotrope Destillation, mit Hilfs von Molekularsieben oder durch. chemische Bindung mit Hilfe von z.B. Kaliumcarbonat, Magnesiumsulfat oder Boratestern. Dadurch verhindert man, daß das Wasser bei den weiteren Reaktionen aktiv teilnimmt. Die jeweils angewendete Methode hängt von den exakten Reaktionsparametern ab. Die Umsetzung wird durch Abdampfen des Lösungsmittels abgebrochen. Das Tbi-Itninoderivat (VII) wird dann isoliert und in der nächsten Stufe eingesetzt.

Man löst das 7o/-Iminoderivat (VII) in einem inerten, nicht-protonenaktiven Lösungsmittel. Ein besonders gut geeignetes Lösungsmittel ist Tetrahydrofuran. Anschließend setzt man mindestens 1 Äquivalent einer starken Base zu. Die starke Base dient als "Aktivierungsmittel"; man kann entweder eine organische oder eine anorganische

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Base verwenden. Am besten geeignet sind Mthiumalkyle und Lithiumaryle, zum Beispiel Lithiumalkyl© mit 1 bis 4 Kohlenstoff atomen«, wie terto-Butylli^hiumj xs^Butyllithium oder PhenyllitMum· Auch Watriumhydrid und Li-thiumdiisopropylamid sind verwendbar.

Bas Aktivierungsmittel wird in die Lösung der Verbindung (VIl) "bei niedriger Temperatur (.-100 bis O⁰C, vorzugsweise -100 bis -60⁰C) und vorzugsweise in einer inerten Atmosphäre eingetragen. Man verwendet 1 bis 3 Äquivalente des-Aktivierungsmittels,

Hach Zugabe der· starken Base (besonders bevorzugt wird Phenyllithium) versetzt man die Mischung mit einem Hilfslösungsmitfcel (Cosolvens), doh. einem "dipolaren nicht-protonenaktiven Lösungsmittel"«, Unter einem "dipolaren nicht-protonenaktiven Lösungsmittel" ist ein stark dipolares Lösungsmittel, welches keine sauren Protonen aufweist, zu verstehen. Es sind zahlreiche Lösungsmittel geeignetJ ihre Verwendung entspricht der herkömmlichen Praxis, Bevorzugte Lösungsmittel sind beispielsweise Dimethylformamid, Dimethylsulfoxid, Hexamethylphosphoramid, N-Methylpyrrolidon und Dimethylacetamid.

Das Lösungsmittel und das Hilfslösungsmittel werden vorzugsweise₉ wie beschrieben, nacheinander eingesetzte Dies ist jedoch nicht zwingend? man kann das Lösungsmittel, dasHüfslosungsmittel und die starke Base vielmehr in jeder beliebigen Reihenfolge der 7o(-Iminaverbindung zusetzen.

Nachdem man die Td-Iminoverbindung mit dem Lösungsmittel, der Base ■and dem Hilfslösungsmittel versetzt hat, gibt man auf einmal und so rasch wie möglich eine überschüssige Menge (1 bis 5 Äquivalente) einer Säure hinzuo Man kann zu diesem Zweck eine beliebige organische oder anorganische Säure verwenden? die einzige Einschränkung besteht darin_s daß die Säure den Cephalosporinring nicht angreifen darf ο Vorzugsweise wird eine niedere Carbonsäure mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen verwendet. Wenn man eine Carbonsäure einsetzt, wird Essigsäure besonders bevorzugt? man kann -diese in Porm'einer f etrahydrofuranlösung .oder in G-egenwart von Wasser zugeben= Die Säure dient als Protonendonatorg die Protonen treten in der

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aktionslösung in solvatisierter Form auf.

Nach der Zugabe der Säuretritt, die Verbindung der allgemeinen Formel VIII, d.h. die 7ß-Iminoverbindung, im Reaktionsgemisch auf. Man kann diese Verbindung nach herkömmlichen Reinigungsmethoden isolieren.

Die 7ß-Iminoverbindung (VIII) kann sodann zur 7ß-Aminoverbindung der allgemeinen Formel IX regeneriert werden. Zu diesem Zweck wird die Verbindung (VIII) in Gegenwart eines Säurekatalysators mit einem Amin zur Umsetzung gebracht. Als Amin kann zum Beispiel Anilin, Hydrazin oder ein Hydrazinderivat, wie Phenylhydrazin oder 2,4-Dinitrophenylhydrazin, eingesetzt werden. Als Säurekatalysator kann man eine beliebige der üblicherweise verwendeten starken organischen oder anorganischen Säuren verwenden, zum Beispiel Salzsäure oder p-Toluolsulfonsäure. Eine bevorzugte Kombination .bildet Anilin-hydrochlorid, welche sowohl die Funktion der Säure als auch, jene des Amins ausübt. Eine weitere bevorzugte Kombination ist jene von 2,4-Dinitro phenylhydrazin und p-Toluolsulf onsäure. Die Reaktionsbedingungen bei der Regenerierung werden so gewählt, daß keine unerwünschte Hydrolyse oder Ringschädigung erfolgt. Man arbeitet vorzugsweise in einem Nieder-alkanol (1 bis 5 Kohlenstoff atome) als Reaktionsmedium, zum Beispiel in Methanol oder Äthanol; es können jedoch auch andere Lösungsmittel verwendet werden, zum Beispiel Dimethoxyäthan, Tetrahydrofuran oder Dimethylformamid. Die Temperatur entspricht jener der Umgebung. Die angewendeten relativen Anteile der Säure und des Amins hängen vom eingesetzten speziellen Aldehyd und Amin ab, da die Regenerierung eine Gleichgewichtsreaktion darstellt. Der Fachmann ist in der Lage, die jeweils notwendigen Anteile der Reaktionskomponenten zu bestimmen.

Die vorgenannten Reaktionsbedingungen eignen sich, zur Abspaltung schwierig hydrolysierbarer Schiff*scher Basen, wie von solchen mit stark elektronegativen Gruppen. Wenn die Schiffsche Base erzeugt wurde, beispielsweise mit Benzaldehyd, können die nachstehenden Methoden zur Regenerierung des Amins ebenfalls angewendet

werden. « 20 -

A 0 9 8 2 1 / 1 U 6

15 303 Y ".

Han kann die 7ß-Iminoverbindung in Äther lösen und die Lösung dann aälich in eine Ätherlösung von p-Toluolsulfonsäure eintragen. Es wird kein zusätzliches Amin "benötigt. Das entstehende Salz kristallisiert entweder aus der Lösung aus oder scheidet sich aus dieser in Form eines Öls ab. Wach der Entfernung des Äthers, die beispielsweise durch Dekantieren erfolgt, behandelt man das Tosylatsalz mit wäßriger Alkalilösung (pg 8)und extrahiert die gewünschte 7ß-Amino verbindung.

Eine andere Methode besteht darin, daß man die 7ß-Iminoverbindung 5 bis 15 Minuten mit einem Puffer (p_H 2-2,5) behandelt, mit Äther extrahiert, um den freien Aldehyd zu entfernen, anschließend bis zu einem ρττ-Wert von 8 neutralisiert und die 7ß-Amino verbindung extrahiert.

Alle im vorgenannten Reaktionsschema veranschaulichten Verbindungen stellen racemische Mischungen aus der d- und der 1-Form dar, da sie aus einer fotalsynthese hervorgehen,, Die Auftrennung der beiden optisch aktiven Komponenten kann zweckmäßig am Ende der angegebenen Synthese, d.h., wenn die Verbindung der allgemeinen Formel IX erhalten wird, vorgenommen werden«, Man kann, die Verbindung der allgemeinen Formel IX auch acylieren, wobei man dl-7ß-Acylarainocephalosporine erhält, und anschließend nach herköLamlichen Methoden eine Auftrennung vornehmen. Die Antipodenaufspaltung kann beispielsweise durch Umsetzung mit einer optisch aktiven Base, Trennung der gebildeten Diastereomere und Rückumwandlung·der Diastereomere in die freie Säure oder ihr Salz erreicht werden.

Durch Acylierung der in der vorstehend beschriebenen Weise hergestellten dl-7ß-Aminocephalosporinverbindungen (IX) erhält man neue dl-Cephalosporinverbindungen der allgemeinen Formel X, aus denen durch Abspaltung der blockierenden Gruppe die entsprechende freie Säure der allgemeinen Formel XI· gewonnen wird.

Gemäß einer weiteren erfindungsgemäßen Ausführungsform, wobei B ein Wasserstoff atom darstellt, wird die ■ dl~7oi-AzicLoverbindung der allgemeinen Formel XII gemäß dem nachstehenden Reaktionsschema zur entsprechenden neuen al-70£-Aminoverbindung der allge·=

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15 303,

meinen Pormel XIII reduziert:

N.

XIZ XEII

Die Reduktion zur Aminoverbindung wird zum Beispiel mit Vorteil lach herkömmlichen Methoden mittels Wasserstoff in Gegenwart eines Mfelmetallkatalysators, wie Platinoxid, von Aluminiumamalgam, Zink und Essigsäure oder Kupfer und Thiophenol durchgeführt. Die die Carboxylgruppe blockierende Gruppe kann leicht nach herkömmlichen Verfahren abgespalten werden, wobei man die Toi-Amino-S-Y-S-cephem-—4-carbonsäuren erhält. Die Benzhydryl-, tert.-Butyl—, p-Methoxybenzyl- und p-Methoxjrphenoxymethylgruppe werden beispielsweise mit Hilfe einer Säure, wie Trifluoressigsäure, und die 2,2,2- -Trichloräthyl- und Phenacylgruppe durch Umsetzung mit Zink und Essigsäure abgespalten. Der Ausdruck "blockierende Gruppe" wird hier in derselben Weise wie in der USA-Patentschrift 3 697 515 angewendet; hinsichtlich dieser blockierenden Gruppe wird auf die genannte Patentschrift bezuggenommen.

Die neuen Yd-Azidocephalosporinverbindungen und die daraus erhaltenen neuen Toi-Aminocephalosporinverbindungen (wobei B ein Wasserstoffatom ist) werden in Form von Gemischen der d- und 1-Enantiomere erhalten, welche nach herkömmlichem Methoden in die optisch aktiven Formen auf spalt "bar sindo Die neuen dl-7c(-Aiüinoverbindungen oder deren Enantiomere können nach im folgenden

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15 303

beschriebenen Methoden in die entsprechenden neuen dl-7ß-Aminoc ephalo sporinverbindungen umgewandelt werden. Die 7ß-substituierten Verbindungen können ihrerseits acyliert werden, wobei man neue dl-Cephalosporine mit wertvollen antibiotischen Eigenschaften erhält. Wie nachstehend gezeigt wird, kann man ferner die dl-ifcir —Azidoverbindungen in antibiotisch aktive 7—substituierte. Cephalosporine, zum Beispiel 7-Methaxy- oder 7-Methylc ephalo sporine, umwandeln·

Ein Verfahren, nach dem die dl-7-oi-Azidoverbindungen zu antibiotisch. aktiven 7-Methoxy-, 7-SR- oder 7-Methylcephalosporinen umgewandelt werden können, erfolgt gemäß dem nachstehenden Eeaktionssch-ema:

COOR,

XII

COOR,

XEII

XIV

- 23
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15 303 Y

XV

C=NlIlMi

XVT

Ν/'

COOR.

XVII

Ein vorteilhaftes herkömmliches Verfahren zur Antipodenaufspaltung der dl-C ephalo sporinverbindungen besteht in deren Umsetzung mit einer optisch aktiven Base, Trennung der gebildeten Diastereomere und Rückumwandlung der Diastereomere in die freie Säure oder ein Salz dieser Säure.

Kurz zusammengefaßt, besteht das Verfahren aus drei Hauptstufen. Die erste Stufe ist die Herstellung des Iminoderivates des 7-Amino-

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15 303 Y %g .

cephalosporins ο Dieses Iminoderivat wird anschließend einer Substitutionsreaktion mit dem Reaktionsmittel;, welches den gewünschten Rest B (CHp »SR oder OCH^) liefert ₉ unterworfen«, Das jeweils eingesetzte Reaktionsmittel hängt von der Art des Restes B afo_o Die dritte Stufe besteht dann in der Regenerierung der Aminogruppeo

Die als Ausgangsmaterial eingesetzte dl~7~d-Asidoverbindung wird nach herkömmlichen Methoden sum dl—T-O^Aminocephalosporin reduziert< > Das bei der Umsetzung mit der TcfrAminoverbindung eingesetzte Re=- äktionsmittel der allgemeinen Formel XIV ist ein aromatischer AM®·= £iyd_ff der gegebenenfalls mindestens einen o- oder p-elektronegativen Substituenten aufweist_o Anders ausgedrückt ₉ mindestens einer der Reste J₉ G und E kann ein Substituent aus der Gruppe Nitro_P Sulfonyl _s Carboxylderivate_s wie Ester oder Amide ₉ Cyam-Uo a Bei den anderen beiden der Reste J_s G- und K kann es sich, jeweils entweder um einen der vorgenannten elektronegativen Substituent es. oder um ein Wasserstoffatom handeln_o Die bevorzugten Realctioas= mittel sind p=Hitrobenzaldehyd (KelfitrOj, GsH₅ J-H) imä Benzaldehyd _c

Andere carbonylhaltige Verbindungen ₉ sram Beispiel Älfieliyd© Ketone ₉ wie Aceton^ Hexafluo race ton oder Ghloral^ wsieli© stabil© Iminoderivate bilden^ sind ebenfalls erfindungsgeaäß verwead"baro Auch polycyclisehe aromatische Aldehyde ₉ doho solelie mit 2 οοοσ⁵ 3 kondensierten Ringen_s können verwendet werdenο

Das dl=7d=Aminocephalosporin (XIII) und der aromatische Aldehyd (XIV) werden in etwa äquimolaren Anteilen in Gegenwart eines icirfesa Lösungsmittels miteinander vermischt_o Beispiele für geeignete lösungsmittel sind Äthanols, Dioxan₉ Acetonitril^ ■ Dimethylformamid₉ tetrahydro furan ₉ Dimethylsulfoxid;, Benzol ₉ Toluol _P Äethylenai«= chlorid und Chloroform Die Reaktion erfolgt rasch bei Tempers/öurea von Raumtemperatur bis zur Rückflußt.emperatur des iösungssaittelSo Da diese Kondensation eine Gleichgewichtsreaktion darstellt und Wasser eines der Reaktionsprodukte bildet ₉ entfernt man das Wasser nach einer der zahlreichen herkömmlichen Methoden _v beispielsweise durch azeotrope Destillation;, mit Hilfe von Molekularsieben oder durch chemische Bindung _Ό zum Beispiel mitt.els Kaliumcarbonat _g lagnesiumsulfat oder Boratestsrno Auf diese Weise wird-verhindert ₉

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daB das Wasser an den weiteren Reaktionen aktiv teilnimmt«. Bie jeweils angewendete Wasserabtrennungsmethode hängt von den exakten Seaktionsparametern ab. Die Umsetzung wird durch Abdampfung des LSsungsiaittels abgebrochen. Das Imino derivat (TJ) wird aascIilieSead isoliert und in der nächsten Stufe eingesetzt.

Die nächste Verfahrens stufe besteht darin, daß man den Rest B als Substituenten an dem dem Imino stickstoff benachbarten Kohlenstoff atom einführt«, Diese Reaktion erfolgt in Gegenwart eines inerten Lösungsmittels (beispielsweise eines der vorgenannten lösungsmittel) sowie zusätzlich eines Aktivierungsmittels,, und einer organischen oder anorganischen Base_o

Aktivierungsmittel eignen sich, zahlreiche organische oder anorganische Basen» Geeignet sind tertiäre Mi'eder-aliqfXamine_? 'wie

in oder Diisopropylaffiing die Kieasr-alkvlrests können f oder verschieden sein (inatsr einsa ^OTHied©r-alkjlrest'⁵ ist

M^;er? min solciier-' kit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen sn —erstehen," _o "'"^Miin ist" ebenfalls verwendbarc Sithiismalkyle vnä. ΊΛ~&ΏΜ^-^γΊ.@_v -,:?£, . -i*s£,iiimalk3fl® mit i "bis 4 EolilenstoffatGasiin zim Bsisgisl Batyllithium ©der Hieayllitiiiusip können ebenfalls eingesetzt ϊο Seeignet sind auek Hatriuinhydrid, hTGhivjaSmlae $ wie

und Ealiiia=terto-butylato

Bas ZJlrtivierungsEdttel wird in die-Lösung der Yerbindung (XV) Ttei isiedriger Temperatur (-100 bis O⁰C₉ vorzugsweise -100 bis «=§3®S} unä. in einer inerten Atmosphäre eingetragen«.

Sl/i aktivierte Verbindung (3Of) wird nicht isoliert _$ sondern man rfe die nächste. Realstionskoaponente direkt in das Reactions-

Ee Miiigt natürlich vom gewünschten Rest B a"b₉ welche spezielle Reaktionskomponent© man bei der Umsetzung ai« der ^aktivierten Yerbindung (XV) ₉ wodursla dez"^j 'öetref f snde Rest 3 als· rfel^rcituesr eingeführt werden soilj.

B eine MetSiosijgiTippg ist J₁- i'-sk^ ^aa als Eeals

k 0 S 8 2 1 / 'ϊ 1 4 S

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DimethyXperoxid, Methyl-tert.-butylperoxLd, Methylphenylsulfenat, o-ÄethyXdimethyXsulfοxöniummetliosulfat oder N-Methoxypyridiniummethosulfat verwenden. Eine abgewandelte Methode zur Einführung der Methoxygruppe besteht darin, daß man die aktivierte Verbindung (XV) mit einem Halogenierungsmittel, wie N-Brombernsteinsäureimid, umsetzt.und anschließend eine Methanolyse vornimmt. Wenn B eine Methylgruppe ist, eignen sich als Reaktionsmittel Methylsulf at, Methylchlorid, Methylbromid und Methyljodid.

Wenn man die Verbindungen (XVI) hergestellt hat, wird der Imino anteil in den Aminoanteil der Verbindung (XVII) umgewandelt.

Die Regenerierung der Verbindung (XVII) aus der Verbindung (XVI) erfolgt durch Umsetzung der Verbindung (XVI) mit einem Amin in Gegenwart eines Säurekatalysators. Als Amin kann man zum Beispiel Anilin, Hydrazin oder ein Hydrazinderivat, wie Phenylhydrazin oder 2,4-Dinitrophenylhydrazin, einsetzen. Als Säurekatalysator kann eine beliebige der üblicherweise verwendeten starken organischen oder, anorganischen Säuren, wie Salzsäure oder p-Toluolsulfonsäure, dienen· Eine bevorzugte Kombination bildet Anilin-hydroChlorid, welches sowohl die Funktion der Säure als auch jene des Amins ausübt. Eine weitere bevorzugte Kombination ist jene von 2,4-Dinitrophenylhydrazin und p-To.luolsuifonsäure ο Me Reaktionsbedingungen bei der Regenerierung werden so gewählt ^ daß keine imerwünselite Hydrolyse oder Ringschädigung erfolgt. Man arbeitet vorzugsweise in einem Nieder-alkanol (mit 1 bis 5 Kohlenstoff atomen), wie Methanol oder Äthanol, als Reaktionsmediumj man kann jedoch auch andere Lösungsmittel verwenden, zum Beispiel Dimethoxyäthan oder Dimethylformamid. Die Temperatur entspricht jener.der Umgebung. Die eingesetzten relativen Anteile der Säure und des Amins hängen vom speziellen verwendeten Aldehyd (XIV) und Amin ab, da die Regenerierung eine Gleichgewichtsreaktion darstellt. Der Pachmann ist in der Lage, die jeweils erforderlichen Anteile der Reaktionskomponenten zu bestimmen. Die Verbindung (XVl) kann mit Hilfe von PdCl₂ in Gegenwart von H₂O hydrolysiert werden«

Aus den bei den betreffenden Reaktionen gebildeten Verbindungen (XV) und (XVI) können wertvolle, gegenübfe,? gram-positiven und gram-

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negativen Bakterien wirksame antibakterielle Mittel hergestellt werden· Wenn die Aminogruppe der Verbindung (XVII) gemäß den nachstehenden Ausführungen acyliert wird, erhält man Produkte, die Aktivität gegenüber gram-negativen Organismen aufweisen·

Ein abgewandeltes Verfahren, nach welchem die neuen dl-7-Azidoverbindungen zu wertvollen, antibiotisch aktiven 7-Methoxycephalosporinen umgewandelt werden können, beruht auf dem folgenden Reaktionsschema:

XIII

XII

oor\ ^xx

XVIII

OOR,

XIX

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Im obigen. Eeaktionsschema besitasn di© angegebene Bedeutung_o

Substituenten die vorsteksiad

Ia vorstehend erläuterten Verfahre» wird di@ a@ia® äl-=»7-A2sidoverbindung (XEI) zum 7-Äminocephalosporin -(XEIX) reduziert_o Die 7™ Aminoverbindung wird durch Umsetzung mit litrit in den entsprechenden 7-Diazocephalosporinsäureester übergeführte Obwohl im obigen · leaktionsschema die Id-Äminoverbindung dargestellt ist,, erkennt JOBn₉ daß das durch Epimerisierung der 7oC-Aminoverbindung gebildet® 7ß-C ephalo sporin ebenfalls in der obigen, zu antibiotisch alctiveia 7-Methoxycephalosporinen führenden Eeaktionsfolge eingesetzt werden kann. Der 7-Diazocephalosporansäureester (Σ?ΙΙΙ) wird anschließenä mit einem Halogenazid (das heißt Broja-^ Chlor- oder Jodazid), vorzugsweise in Gegenwart eines tertiären Aminazids, zum 7-Halogen- -7-azidocephalosporansäureester (Hl) umgesetzt„'Dieser wird durch Umsetzung mit einer geeigneten nucleophilen Substanz in den gewünschten 7^CHy-7-AzidocephalQsporansäureester '(XI) übergeführt. Dieses Zwischenprodukt wird in einer Stufe reduziert und acyliert, wobei man den substituierten Cephalosporansäureester (XXII) erhalte Durch Abspaltung der blockierenden Gruppe kann aus diesem Ester, dis eephalosporansäure (XXIII) oder ein Salz dieser Säur© hergestellt

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15 303 Y ■ ^₀

werden« Ajatsrepseits kamms^wie aas dem Eealrfe ions schema ersichtlich ist, den T^CH^-^-Azidoeephalosporaasäureester (JX) zua T-OCE,-7- -Aminoeepiaalosporansäureester (XXI) reduzieren; dieser kann durch Acylierung in den 7-OCH,-7-Acylaminocephalosporansäureester (XXII) übergeführt werden. Andererseits kann· man die Estergruppe der Verbindung (XXI) abspalten und dadurch, die freie Säure (XIV) erzeugen, welche acyliert werden kann. Man erhält so das substituierte Cephalosporin oder dessen Salz. Die Abspaltung der blockierenden Gruppe wird leicht nach herkömmlichen Methoden erreicht. Beispielsweise wird ein Aralkylrest, wie die Benzylgruppe, durch Reduktion entfernt. Eine Silylgruppe kann durch Hydrolyse abgespalten werden, wobei man die freie Säure oder deren Salz erhält. Sie Benzhydrylgruppe wird leicht durch Umsetzung mit Trifluoressigsäure in Gegenwart von Anisol abgespalten. Im vorgenannten Verfahren können auch andere, leicht unter Bildung der freien Säure abspalt bare Estergruppen verwendet werden? spezielle Beispiele für geeignete Gruppen sind die Trichloräthyl-, Phthalimidomethyl-, Succinimidomethyl-, p-Methoxybenzyl-, p-Nitrobenzyl-, Phenacyi- und terte-Butylgruppe. Wie erwähnt, kann ferner der 3-Substituent am

il^^ephamkern nach herkömmlichen Methoden ausgetauscht werden, wobei man wertvolle Cephalosporine erhält.

Die Diazotierung des 7-Aminoesters wird nach herkömmlichen Methoden vorgenommen. Man führt sie mit Vorteil in einem wäßrigen oder wäßrig-organischen Lösungsmittelmedium, beispielsweise durch Umsetzung mit Natriuranitrit in Gegenwart ein.er. „Säure oder durch Umsetzung mit einem organischen Nitrit, durch. Zur Durchführung dieser Reaktion eignen sich jene organischen Lösungsmittel, welche kein aktives Wasserstoffatom aufweisen. Spezielle Beispiele für solche Lösungsmittel sind Methylendrchlorid, Äther, Benzol, Toluol und Chloroform. Die Umsetzung wird vorzugsweise bei Temperaturen von etwa Q'bis 5O⁰C vorgenommen; es ist gewöhnlich am zweckmäßigsten, wenn man bei Raumtemperatur arbeitet. Die Isolierung der gewünschten Diazoverbindung wird leicht nach bekannten Methoden vollzogen.

Zur Herstellung der Halogenazid-Zwischenverbindung wird die Diazoverbindung mit einem Halogenazid bei einer Temperatur von etwa

- 30 - ■■-■■■■.

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«=25 · Ms 50⁰G wätaemßL einer zur vollständigen Bildung der gewünschtem ¥erbis£|-s2Hg saasr@iela.end en Zeitspanne umgesetzt * Die Reaktion · wird T®^2ugsi7©is@ in einem geeigneten organischen Lösungsmittelsedius_p w@Xeh.es sick gegenüber, den Reaktionskomponenten inert verölt g isirelagefüiartο Verschiedene lösungsmittel, welche kein aktives Wasserstoff atom enthalten, wie Methylendichlorid, Chloroform^ Benzolg ϊοίτιοί oder Äther oder Gemische dieser !lösungsmittel, bilden geeignete Medien für die Durchführung der Umsetzung. Die Reaktion wird vorzugsweise in Gegenwart eines zweiten Azids, wie Lithiuasazid oder ein tertiäres Ammoniumazid, zum Beispiel Triäthylammoniumazid, vorgenommen, da unter diesen Bedingungen die Bildung der unerwünschten 7—Dibromverbindung verhindert wird· Das Halo genazid wird in geringfügigem Überschuß über die stöchiometrisch erforderliche Menge eingesetzt. Der Anteil des zweiten Azids ist nicht ausschlaggebend; es ist gewöhnlich vorteilhaft, einen Überschuß anzuwenden, um maximale Ausbeuten der gewünschten Halo genazid verbindung unter optimalen Bedingungen zu erzielen. Nachdem die Bildung des Halogenazide beendet ist, wird das Produkt isoliert. Es kann nach herkömmlichen Methoden weiter gereinigt werden, beispielsweise durch Chromatographie.

Die nächste Verfahrens stuf e, in der. der Halogensubstituent durch eine Methoxygruppe ersetzt wird, wird dadurch vorgenommen _? daß man das Halo genazid mit einer Substanz zur Umsetzung "bringt _ΰ v/eiche zur Abgabe einer das Halogenatom ersetzenden Kethoxygruppe befähigt ist. Diese Reaktion wird vorzugsweise in Gegenwart eines geeigneten, nicht-reaktiven Lösungsmittels, wie Methylendichlorid, Chloroform, Benzol, Toluol, Äther oder Petroläther, durchgeführt. Es ist auch in diesem Falle, zweckmäßig, auf die Verwendung irgendweicher Lösungsmittel, die ein aktives Wasserstoffatom enthalten, zu verzichten» Das den Substituentenaustausch bewirkende nueleophile Reagens kann somit Methanol sein, bei dessen Verwendung das ^älogenatom abgespalten und eine Mjethoxygruppe eingeführt werden. Die Reaktion wird vorzugsweise in Gegenwart eines SchwermetalH.at.ions, wie eines Silbersalzes, vorgenommen. ■ .

In der nächsten Stufe des verstehend beschriebenen Verfahrens wird die 7-Azido—7-OCHv-Verbindung: dann zur entsprechenden 7-Anü.nö-7- -

- 31 -

. U 0 9 8 2 1 / I 1 4 6

ZX

-OCH^-Verliindung reduziert. Man kann die Reduktion nach verschiedenen Methoden durchführen. Vorzugsweise wird die Reduktion der Azido— zur Aminogruppe jedoch durch katalytische Hydrierung mittels eines Edelmetallkatalysators, wie Platin, Palladium oder ein Oxid dieser Metalle, vorgenommen. Diese Verfahren werden in herkömmlicher Weise durchgeführt. Man kann die Reduktion auch in Gegenwart eines geeigneten Acylierungsmittels vornehmen, wobei man die gewünschte 7-Acylamido-7-OCH\-Verbindung erhält. Die 7-Aminoverbindung kann nach, herkömmlichen, im folgenden beschriebenen Methoden mit geeigneten Acylierungsmitteln zu den gewünschten 7-Acylamidoverbindungen umgesetzt werden.

Nach einer weiteren erfindungsgemäßen Ausführungsform können die neuen dl-Tß-Aminocephalosporinverbindungen der Erfindung acyliert werden, wobei man die entsprechenden neuen dl-Tß-Acylamidocephalosporinverbindungen erhält, welche gegenüber pathogenen gram-negativen und gram-positiven Bakterien aktiv sind. Durch Acylierung der neuen dl-70(-Aminocephalosporine erhält man neue dl-ToC-Acylamidoverbindungen, welche nach herkömmlichen Methoden zu neuen, antibiotisch aktiven dl^ß-Acylamidocephalosporinen umgewandelt werden können. Man kann die neuen dl-7-Acylamidocephalosporine nach bekannten Antipodenaufspaltungsmethoden in das d-bzw. 1-Isomere auftrennen. Die neuen dl-TbC-Azido- oder dl-Tbt-Aminocephalosporinverbindungen können, wie erwähnt, zum entsprechenden d- oder 1-Isomeren aufgetrennt werden, welche nach herkömmlichen Methoden zu bekannten, wertvollen Cephalosporinen umgewandelt werden können.

Die neuen dl-Tbt- oder 7ß-Cephalosporine der Erfindung besitzen die nachstehende allgemeine Formel (mit einbezogen sind die Salze und Ester dieser Verbindungen)

OOH

in der Y die vorstehend angegebene Bedeutung hat und E* einen Acyl rest darstellt, z.B. ein entsprechender Acylreat wie jene der bekannten wertvollen Penicilline oder Cephalosporine. Gemäß einer bevor-

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40982 1 / 1 HG

15 303 Y

zugten Ausführungsform,besitzt R^ die nachstehende allgemeine

Formel ■

in der X ein Wasserstoff- oder Halogenatom oder eine Amino-, Guanidino-, Phosphono-, Hydroxyl-, Tetrazolyl-, Carboxyl-, Sulfo- oder SuIf amino gruppe bedeutet und R, ein Wasserstoff atom, eine Phenyl-, substituierte Phenyl- oder N-substituierte Aeetimidoylaminogruppe, wie eine N-(Phenylacetimidöyl)-aminogruppe, einen 5- oder 6gliedrigen mono cyclischen heterocyclischen Ring, welcher ein oder mehrere Sauerstoff-, Schwefel- oder Stickstoffatomee) im Ring aufweist, einen substituierten heterocyclischen Rest, eine Phenylthio- oder Phenyloxygruppe, eine heterocyclische oder substitüiertheterocyclische Thiogruppe, einen Nieder-alkylrest (1 bis 6 Kohlenstoff atome) oder.eine Cyangruppe darstellt, wobei die Substituenten am Rest R^ Halogenatome oder Carboxyjaethyl-, Guanidino-, Guanidinomethyl-, Carboxamidomethyl-, Ainiiiomethyl-, Nitro-, Methoxy- oder Methylgruppen sind. Besonders bevorzugt werden Acylreste, bei denen X ein Wasserstoff atom oder eine Hydroxyl-, Amino- oder Carboxylgruppe ist und R·, eine Phenylgruppe, einen Nieder-alkylrest oder einen 5- oder ßgliedrigen heterocyclischen Ring mit T bis 4 Schwefel-, Sauerstoff- oder StickstoffheteroatomCen) darstellt. Spezielle Beispiele für bevorssugte Substituenten R-, sind somit die thiazolyl--j.Thienyl--| iitryl-, N-CPhenylacetimidoyiy-amino- und Phenylgrtippe* V ; ; ,

Brfindungsgemäßy.wurde gefunden, daß neue dl-7ß-Azid.p-7-methyl-(oder -7-methoxy- oder -7-SR^) eephalosporinverbindungen dadurch hergestellt werden können^ daß man einen 5-substituierten 6H-1,3- -Thiazin-4-carbonsäureester gemäß dem nachstehenden Reaktionsschema mit einem a-Azido-S-methoxyacetylhalogenid oder einem 2-Azido-2- -methylacetylhalogenid zur Umsetzung bringt.

N BH

13 N. " "

+ CH-COX

(IV)

- 33 -

40982 1/1 U6

15 303 Y

Im obigen Reaktionsschema besitzen R^, Y und X die vorstehend angegebene Bedeutung, während B eine Methyl- oder Methoxygruppe oder einen Rest -SR darstellt.

Gemäß einer weiteren erfindungsgemäßen Ausführungsform werden die neuen dl-7ß-Azido-7-methoxy- und dl^ß-Azido^-methylcephalosporinverbindungen der Erfindung reduziert, beispielsweise durch Hydrierung in Gegenwart eines Katalysators, vorzugsweise eines Edelmetallkatalysators, wie Platinoxid; dabei erhält man die entsprechenden dl-7ß-Amino-7-methoxy- und dl^ß-Amino^-methylcephalosporinverbindungen. Die erfindungsgemäßen racemischen 7ß-Azidoverbindungen können nach herkömmlichen Methoden zur Antipodenaufspaltung von Racematen in die einzelnen Isomeren aufgetrennt werden. Man kann auch die durch Acylierung der dl-7ß-Aminoverbindungen erhaltenen dl-Cephalosporinverbindungen der Antipodenauf spaltung unterwerfen.

Die neuen erfindungsgemäßen dl-7ß-Azido-7-methoxycephalosporinverbindungen und dl-7ß-Azido-7-methyl-(oder 7-SR-)cephalosporinverbindungen können zu neuen racemischen 7ß-Acylamido-7-methoxyodir -7'-niethylcephalosporinverbindungen umgewandelt werden. Zu diesem Zweck reduziert man das Azid zur entsprechenden 7ß-Aminoverbindung und acyliert das erhaltene Zwischenprodukt. Dabei erhält man den entsprechenden neuen dl^ß-Acylamido^-methoxycephalosporinester oder 7ß-Acylamido—7—methyl—(oder-7-SR-)cephalosporinester, aus dem man anschließend durch Abspaltung der blockierenden Gruppe die freie Säure und deren Salze gewinnt i Man kann somit aus den neuen racemischen Verbindungen der Erfindung racemische Cephalosporine herstellen, zum Beispiel 7-Methyl-7ß-(2-thienylaeetamido)-3-Y-cephem-4-carbonsäure und 7-Methoxy-7ß-(2-thienylacetamido)—3-Y-cephem-4-carbonsäure sowie die Salze dieser Säuren. Diese Produkte stellen Antibiotika dar, welche gegenüber verschiedenen gram-negativen und gram-positiven Krankheitserregern aktiv sind. Man kann die vorgenannten Racemate auch nach herkömmlichen Antipodenaufspaltungsmethoden in die einzelnen Isomeren auftrennen.

Gemäß einer weiteren erfindungsgemäßen Ausführungsform können die neuen dl-7ß-Aminocephalosporinverbindungen durch Acylierung in neue dl-Cephalosporinverbindungen der nachstehenden allgemeinen

- 34 -

409821/1146

23563B8

15 303 Y

Formel übergeführt werden £ sowie die entsprechenden Salze und Kater)

iit der T die vorstehiend angegebene Bedeutung fcat_f B eine töethy/1- oder Metno^gräppe oder einen Eest -SB: darstellt und R, ein ÄcjplL- rest des Vorstellend, definierten Typs ist,_;κ..Β.,ein entsprectiendfirAcylrestwieJaiederl)ekanntenBenicilline oder Cepnalosporine· Bie vorgenannten dii-Cepiialosporinverbindungen'. sind gegenüber gram-negativen und gram--positiven Batterien aktiv» Es sei festgestellt,, daß man aas den erfindungsgemäßen Racematen, welcire etwa die Hälfte-der des gewimschten speziellen Isomeren aufweisen, durch:

Äntipodenauf spaltungsmetlioden das aktive Enantiomere gewinnen kann. ~ _,_

Die neuen erfindungsgömaßen dl-Ceplialosporine werden durch: Acylierung der entsprechenden substituierten naiai dl-^AnmaocepMlosporansaureverMndungen: hierg^stellt· Mes© erfindungsgemäße AasfiJhrungsform durc3i das; naensteitende Reaktionssckema weranscfeauliclit werden:

COOM

COOM

IX·

In obigem Reaktionssch.ema bedeutet B ein Wasserstoff atom, eine Methyl- oder Methoxygruppe oder einea Rest -SR, M ist ein Wasser-

- 35 -

40 9 8.2 1/ 1 1 4 6

stoffatom, ein Metallkation oder ein von einem Amin abgeleitetes Ion, Y und E^ "besitzen die vorstehend angegebene Bedeutung und R^ stellt eine blockierende Gruppe dar. Gemäß dem obigen Reaktionsschema wird das dl-Ή- oder -Tß-Aminocephalosporanat der allgemeinen Formel IX zum entsprechenden Cephalosporinderivat der allgemeinen Pormel X acyliert, welches durch Abspaltung der blockierenden Gruppe in das entsprechende Cephalosporin der allgemeinen Formel X* oder dessen Salz umgewandelt wird. Nach einer abgewandelten Methode wird zuerst aus dem Aminocephalosporin durch Abspaltung der blockierenden Gruppe die entsprechende Säure oder deren Salz (allgemeine Formel IX·) hergestellt; dieses Zwischenprodukt wird dann acyliert, wobei man das gewünschte Cephalosporin oder dessen Salz erhält.

Die Acylierung der 7-Aminocephalosporansäureverbindung erreicht man leicht durch deren Umsetzung mit einem Acylierungsmittel, zum Beispiel einem Säurehalogenid (Chlorid oder Bromid) oder einem funktionell gleichwertigen Mittel, beispielsweise einem Säureanhydrid, einem gemischten Säureanhydrid (mit anderen Carbonsäuren) und insbesondere niederen aliphatischen Carbonsäureestern, ferner einer Carbonsäure in Gegenwart eines Carbodiimids, wie 1,3-Dicyclohexylcarbodiimid, oder einem aktivierten Ester; man kann auch eine enzymatische Acylierung nach den für die Herstellung der bekannten Cephalosporine angewendeten Acylierungsmethoden vornehmen.

Die der Acylierung unterworfene 7—substituierte 7-Aminoceplialospo ransäure verbindung kann, wie erwähnt, ein Ester mit geeigneter Blpclderung3fUnktion sein, beispielsweise der Benzhydryl-, p-Methoxybenzyl-, Trichloräthyl-, Trimethylsilyl-, Phenacyl- oder Methoxymethylester; die Estergruppe wird nach herkömmlichen Methoden entfernt, wobei man das gewünschte Cephalosporin oder ein Salz davon erhält. Wenn die blockierende Gruppe z.B. eine Benzhydrylgruppe ist, kann man sie leicht durch Umsetzung mit Trifluoressigsäure in Gegenwart von Anisol abspalten. Andererseits kann man den 7-Aminocephalosporansäureester zuerst nach dieser Methode in die freie Säure und deren Salz überführen; das Salz, beispielsweise das Natriumsalz oder ein Aminsalz, kann dann nach herkömmlichen

- 36 -

Λ09821/1146

■ ■ ■ ' "

Methoden, welche zur Umwandlung von 6-Aminopenicillansäure und 7-Aminocephalosporansäure in verschiedene Penicilline und Cephalosporine angewendet werden, acyliert werden·

Es sei erwähnt, daß der Substituent in 3-Stellung des Cephalosporinkerns nach herkömmlichen Methoden leicht in andere Substituenten Y umgewandelt oder durch solche Substituenten ersetzt werden kann. Durch Behandlung der 3-acetoxyäthylsubstituierten Cephalosporanate der Erfindung mit einem geeigneten Reagens oder einer Kombination von Reagentien kann beispielsweise die Aeetoxygruppe in 3-Stellung des Cephalosporinkerns durch, verschiedene andere Substituenten ersetzt werden» Beispiele für zu diesem Zweck verwendbare Reagentien sind Phosgen und ein sekundäres Amin, Isocyanate, Alkalitoluolsulfinate, Alkaliazide_y Polyhydroxybenzol, N-Nieder-alkylindole, Thioharnstoff ₉ Mercaptane, Phosphorpenta*· chlorid, Thiocyanate, heterocyclische Thiole, Qroloalkylxanifaogenate, Pyridin, Thiobenzoesäure, N-Alkyl- und NjN-Dialkylthioharnstoffe oder Alkali-N-ialkyl- und .-N,N-dialkylthiocarbamate«,

Durch, Umsetzung mit einem heterocyclischen !Dhiol, wie 1-Methyl- -1,2,3,4-tetrazol-5-thiol oder 5~Methyl-1,3,4~thiadiazol-2-thiol, wird 3~Acetoxycephalosporin z.B. in die entsprechende Heterothioäthylverbindung übergeführt.

Ferner wird das 3-Acetoxycephalosporin durch Umsetzung mit einer quaternären Ammoniumverbindung, wie Pyridin, in die entsprechende 3-Pyridinoäthylverbindung umgewandelt. Andererseits werden die 3-Acetoxycephalosporine durch Umsetzung mit Citrusacetylesterase in die entsprechenden 3-Hydro xyä thy lverbiiidungen übergeführt, welche durch Acylierung andere 3-Acyloxyäthylverbindungen,. wie Carbamoyloxyäthylverbindungen, oder Acylthioäthylverbindungen ergeben. Analog lassen sich andere 3-substituierte Cephalosporinverbindungen nach herkömmlichen Methoden herstellen.

Ein Verfahren zur Einführung eines •Ν,Ν-Di-nieder-alkylcarbamoyloxyäthyl- oder heterocyclischen Aminocarbonyloxyäthylrestes in 4ie 3-Stellung der beschriebenen Verbindungen besteht darin, daß

- 37 -

40982 1/1146

man eine analoge 3-Hydroxyäthylverbindung, wie 3-Hydroxyäthyl-7- -methoxy-7-( 2-thienylacetamido )-cephalospo ransäure, mit Phosgen und einem Di-nieder-alkylamin in Gegenwart einer Base umsetzt» Auf diese Weise können die nachstehenden Verbindungen erhalten werden: Natrium-dl-3-(N,N-dimethylcarbamoyloxyäthyl) -/7-methoxy-7-(2-thienylacetamido)-deceplxalosporanat und Natrium-dl-3-(pyrrolidinylcarbonyloxyäthyl) -7-methoxy-7-( 2-thienylacetamido) -decephalo sporanat.

Die N-mono substituiert en Carbamoyloxyäthylcephalosporinverbindungen werden durch Umsetzung eines B-Hydroxyäthyl^-amidodecephalosporanats mit einem geeigneten Isocyanat hergestellt· Auf diese Weise erhält man Natrium-dl-S-CN-methylcarbamoyloxyäthylJ^-methoxy^- -(2-thienylacetamido)-decephalosporanat durch Umsetzung mit Methylisocyanat in Gegenwart von Natriumbicarbonat.

Die unsubstituierte Carbamoyloxyäthylverbindung kann dadurch hergestellt werden, daß man eine N—mono— oder —di—substituierte Car— bamoyloxyäthylverbindung, wie das Ν,Ν-Dl-p-methoxybenzylcarbamoyloxyäthyl- oder N^^^-Trichloräthylcarbamoyloxyäthylderivat, einer Spaltung unterwirft. Eine andere Methode zur Einführung der Carbamoyloxyäthylgruppe in die 3-Stellung besteht darin, daß man die analoge 3-Hydroxyäthylverbindung mit Trichloracetyiisocyanat oder Chlorsulfonylisocyanat umsetzt und anschließend eine Hydrolyse vornimmt·

Die in der vorstehend beschriebenen Weise hergestellten neuen Cephalosporine der nachstehenden allgemeinen Formel (sowie deren Ester und Salze)

in der R. einen Acylrest darstellt und B, H* und R^ die vorstehend

409821 /1U6

angegebene Bedeutung haben, werden nach. Methoden, die. auf dem Cepkalosporing&biet zum Ersatz der Acetoxygruppe durch, andere Substituenten üblich sind, in die entsprechenden Verbindungen mit einem 3-Substituenten der Formel

A·

in der A· einen anderen Substituenten als einen liieder-alkanoyloxyrest bedeutet, übergeführt. Die AcetOxygruppe derartiger Verbindungen kann z.B. durch, enzymatische Hydrolyse mit Acetylesterase abgespalten werden, wo~bei man die entsprechende 3-Ό-Hydroxy)-alkyliverbindung erhält. Die dabei resultierende Hydroxylgruppe kann anschließend in andere Substituenten in 3-Stellung umgewandelt werden. Man kann die 3—Hydroxylgruppe Iseispieisweise neuerlich verestern und dabei einen Rest einer niederen Alkancarbonsäure oder einer ^aromatischen Carbonsäure einfuhrenj zu diesem Zweck- verwendet man als Äcylierungsmittel beispielsweise ein Halogenid oder Anhydrid einer niederen Alkancarbonsäure oder einer aromatischen Garbonsäure, ein substituiertes Carbamoylhalogenid oder ein Nieder-alkyliso- «yanat,. . - ,

Man kann die 3-JLeetoxygruppe auch durch andere analoge Gruppen aus- *auschen, indem man die Acetoxygmppe der Verbindung(I) durch nucleofihiip. stnctetoff-oder schweEelhaltige Gruppen ©rsstzt· Auf dem 0®phalssporingebiet sind zahlreiche nucleophile Stickstoff— und Schwefelverbindungen üekanntj die nachstehenden Beispiele sollen lediglich den verwendbaren Verbindungstyp erläutern, iür die Substitution geeignete Verbindungen sind z.B. tertiäre Amine, wie Pyridin, und Sgliedrige hetero cyclische Ihiole, wie 5-Methyl-1,3 * 4-thiadiazolyl-2-thio 1 oder N-Methyltetrazolylthiol. Die 3-Acetoxygruppe kann auch durch katalytisch^ Hydrierung abgespalten werden, wobei man die 3-(C₂- -C^)-Alkylverbindungen erhält.

Nach dem vorgenannten Verfahren erhält man somit die nachstehenden neuen 3-C ephemverbindungen: 3-( 1 -Carbamoyloxyäthyl) -7-( 2-thienylacetamido)-3-cephem-4-carbonsäure, 3-(1-Pyridiniumäthyl)-7-(2- -furylacetamido)-3-CePhBm-A-CaTbOnSaUrC, 3- D-(5-Methyl-1,3,4-thia-

A098-2

HO

diazol-2-yl) -äthyü -7~( 1 -tetrazolylacetamido) ^-cephenM-carbonsäure tuad 3-(1-Propyl)-7-(D-phenylglycylamido)-3-cephem-4-earbonsäure.

Wenn B ein Wasserstoff atom ist, ergibt die Reaktion mit dem Azidoacetylreagens ein 7-c/-Azidocephalosporin, während man, wenn B eine Methyl- oder Methoxygruppe oder ein Rest -SR ist, durch Umsetzung mit dem Azidometlioxyacetylhalogenid oder Azidometfaylacetylhalogenid eine 7-ß-Azidoverbindung erhält.

Zur Herstellung des 7-Azidocephalosporins kann man, wie erwähnt, das acyclische Vorprodukt des Thiazins oder ein Gemisch aus der acyclischen Verbindung und dem Thiazin verwenden. Im allgemeinen wird das Azidoacetylreagens jedoch bevorzugt mit dem Thiazin umgesetzt, da man unter diesen Bedingungen maximale Ausbeuten an den gewünschten Cephalosporinverbindungen erzielt.

In der vorgenannten Reaktionsfolge dient die Phosphonatgruppe als aktivierende Gruppe und wird schließlich bei der Herstellung des Thiazinzwischenprodukts abgespalten. Andere Verbindungen mit akti-

+ + Jf + vierenden Gruppen, wie -PR-,, -SR₂ , -S-R oder -SiR-,, wobei R ein Nieder-alkylrest (vorzugsweise eine Methylgruppe) oder ein Arylrest (z.B. eine Phenylgruppe) ist, können ebenfalls als Ausgangsverbindung (I) bei der Umsetzung mit einem Thionoformiatester eingesetzt werden; bei der Herstellung des Tliiazinzwischenproduktes werden die betreffenden Gruppen schließlich abgespalten.

Der im vorstehend beschriebenen Verfahren als Ausgangsverbindung eingesetzte oi-Aminophosphonoacetatester (I) wird nach den durch das folgende Reaktionsschema erläuterten Verfahren hergestellt:

- 40 -

40 9821/114 6

C₆H₅CH₂NH₂

XXIV

XXV

^HC1H2"\^ *««J 2^ C₆ ¹¹S⁰H₂ ¹³¹^ '.J (OR),

XXVII . '

XXVI

(OR)₂

H2Nn	^(OR)2	C6H5CH=
	XXVIII
H2N.	3 OR

xxix

XXXI J₀J_x

s ο

HCHN^^J(OR)₂ · ; '

Im obigen Reaktionsschema besitzen R und R₁ die vorstehend angegebene Bedeutung.

Gemäß der obigen Reaktions folge wird zunächst Benzylamin mit Formaldehyd zu dem 1,3,5-Tribenzyl-sym-hexahydrotriazin der allgemeinen Formel XXV umgesetzt. Diese Verbindung ergibt durch Umsetzung mit einem di-substituierten Phosphit das Phosphonat der allgemeinen Formel XXVI. Zur Durchführung dieser Reaktion erhitzt man zweckmäßig ein Gemisch des di-substituierten Phosphits und des Triazins so lange auf 10O⁰C, bis die Bildung, des gewünschten Zwischenproduktes vollständig ist. Das Zwischenprodukt wird dann zweckmäßig in Form eines Säuresalzes, z.B. des Hydrochlorids, isoliert. Durch Reduktion des als Zwischenprodukt erhaltenen N-Benzylaminomethyl-

- 41 -

40982*1/1 U6

phosphonat-Säuresalzes in Gegenwart von PalLadium-Aktivkohle erhält man das Salz der entsprechenden Aminoverbindung der allgemeinen Formel XXVII. Das Säuresalz wird durch Umsetzung mit Ammoniak in einem geeigneten Lösungsmittel, wie Chloroform, in. das Amin umgewandelt. Nach der Abtrennung des ausgeschiedenen Ammoniumsalzes kann das gewünschte Produkt leicht durch Abdampfen des Lösungsmittels gewonnen werden; man erhält den Amino methylphosphonat ester der allgemeinen Formel XXVIII. Man kann das Säuresalz (XXVII) auch mit wäßriger Kaliumhydrogenphosphatlösung neutralisieren und das freie Amin (XXVIII) in ein organisches Lösungsmittel, wie Methylendichlorid, extrahieren. Die letztere Verbindung wird durch Umsetzung mit einem Aldehyd, wie Benzaldehyd, in die entsprechende Schiff· sehe Base der allgemeinen Formel XXIX TimgewandQlt. Diese liefert durch Umsetzung mit einer starken Base, z.B. einer Organolithiumverbindung, wie Phenyllithium, 'und danach einem Halogenameisensäureester das Imin der allgemeinen Formel XXX. Durch Behandlung dieses Imins mit 2,4-Dinitrophenylhydrazin in Gegenwart von p-Toluolsulfonsäure-monohydrat oder p-Toluplsulfonsäure-hydrat in Äther und anschließende Neutralisation des Amin-Säuresalzes erhält man den gewünschten öl-Aminophosphonoacetatester der allgemeinen Formel XXXI, der mit Hilfe von Äthylthioformiat in Tetrachlorkohlenstoff den ot-Thioformamidophosphonoacetatester (I) ergibt.

Typische Beispiele für die neuen Cephalosporine, welche nach dem erfindtmgsgemäßen Verfahren hergestellt werden können, sind:

- 42 409821 /1 U6

303 τ " -23563g8

R₄-N-J

COOH

, NH

1-

Il

-CH.

O-

NH.

-CH,

-CH-

NH,

-CH.

-CH,

N'^'NH

-CH.

-oi

NH

I!

OCNH.

-OCH.

-O-CCH.

- 43 -

CH-

OCH-

409fÖ21/1 T 46

303 Y

Portsetzung

-CH

J-

C-OH

Il

VJ

J-

C-OH

Br

VV-CH

J-

-CH-

-GH-

-CH.

-CH-

-CH-

\V-CH

H0-.C-(

"^C2^H -OCCH-

OCH.

-OCNH.

-OCNH.

O. II'

-OCNH,

SCH-

2^H5 -OCNHCH.

- 44 -

A 0 9 8 2 1 / 1 U 6

Fortsetzung

HOC-NH-CH

2 \_

NO.

-CH-, C-

Cl.

-CH-C-

CH-

NH-C

-CCH.

'2^Λ5

-C₂H₅

-C₂H₅

k!*³

XH₃

-OC(j>

OH

Cl

Br

-CH.

OCH.

OCH-

OCH.

SCH-

OCH-

CH-

CH-

CH,

- 45 -

40982 1/1U6

303 Y

Foirtsetzung

CH₃O-

CH-

CH.

-CH.

J-

CH₂C-CH,

CH₂ Cl'

-CH^C-

-CH,

-CH-

-CH-

-CH-

'2"5

'2"5

- 46 -

-OCH.

-oi

NHCH.

-OCCH.

Cl

OCH-

OCH-

OCH.

OCH

409821/1U6

303

R«

^. Portsetzung

Cl

-CH₂C-

CH,

,1-

CH-,-C-

H-I-

)H

I'

CH.

CH.

CH.

N-. ' Ii-'

CH₂-C-

CH.

CH.

CH,

OCH.

CH₃ - 47-

CH.

OCH₃ ·

OCOCH-OC-NH-

OC-NH^

.N-H

-s

CH.

OCH-

-ι

40982 1/1146

303 Y

B H ί

COOH

-CH₃O-

CH₂C-

SCH₂C-

SCH₂C-

CNCH₂C-

HC-

-CN

)-C-CH_

OCH-

- 48 409821/1 U6

Fortsetzung

NH₂

lout

?O(OH)₂

SO₃H

0!

HC-H

____/ SO₂(OH)

-CH,

■-OU

- 49 -

OCH.

OCH.

OCH

OCH

OCH.

82 171146

303 Y

Fortsetzung

H.

.CH

.1

?■

CH₂-C-

.4-

OCH-

OCH.

—COOMe

.N(Me)

OCH.

He m Methyl j 0 = Phenyl; Ac ■ CH₃CO

- 50 -

A09821/1U6

15 303 υ

... . B e i s ρ i e 1

p-Methoxybenzyl-ot-Es-Cd^acetoxyy-propionylmethylthioimidatoJ-- . -diäthylpho sphono ac e t at -..-■.." . ■ Eine Mischung von 77 mg p-Methoxybenzyl^-thiofonnamidodiäthylpho sphono ac et at, 35 mg i-Chlor-3-acetoxybutan-2-on, 29 mg gepulvertem Kaliumcarbonat und 2 ml Aceton wird 18 Stunden unter Stickstoff bei Raumtemperatur gerührt, danach filtriert und schließlich eingedampft. Man erhält dabei in 92#iger Ausbeute rohes p-Methoxybenzyl-d.- |~S-(o(.-acetoxy) -propionylmethylthioimidatol -diäthylphosphonoacetat. -

Das als Ausgangsverbindung verwendete 1-Ohior-3-acetoxybutan-2-on wird wie folgt hergestellt:

Eine Lösung von 10g 2-Acetoxypropionylchlorid in wasserfreiem Äther wird innerhalb von 45 Minuten unter Rühren in eine eis— " kalte Lösung von 2,82 g Diazomethan und 6,7 g Triäthylamin in wasserfreiem Äther eingetropft. Die dabei erhaltene Mischung wird weitere 3 Stunden in der Kälte gerührt und anschließend durch einen Magnesiumsulf at bausch filtriert. Das ätherische Piltrat des rohen Diazoketons wird mit Hilfe eines Eisbades gekühlt, und man leitet 10 Minuten lang einen wasserfreien Chlorwasserstoffstrom durch die Lösung. Die erhaltene Mischung wird mit eiskaltem Wasser und eiskalter 5#iger wäßriger Natriumbicarbonatlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und bei vermindertem Druck eingedampft. Durch Destillation des Rückstandes erhält man 1-Chlor-3-acetoxybutan-2-on (Ausbeute 52 $). Dieses Produkt besitzt die nachstehenden physikalischen Eigenschaften: Kp. 43 bis 44⁹C/0,18 mm; . \ [
Massenspektrum M⁺. bei m/e 164;

IR (rein) 5,65, 5,75, 8,02, 9,1, 9,6, 10,5, 11,45, 12,8^;- NMR (CDCl₃) T 8,5 (d, 3, J=8 Hz, CHCH₃), 7,7 (s, J, CH₃CO), 5,89 (s, 2, ClCH₂CO), 4,6 (q>.1,J=8 Hz, CHCH₃).

B e i s ρ i' e 1

p-Methoxybenzyl-5-( 1 -acetoxyäthyl) -6(H) -1«3-thiazin-4-carboxylat p-Methoxybenzyl-o(-£s-(clc-acetoxy)-propionylmethylthioimidat<^ - -diäthylphosphonoacetat (hergestellt gemäß Beispiel 1) wird dreimal

40 9 8 2.17 T1Ä6

mit Tetrahydrofuran gespült, eingedampft, in 1 ml 1,2-Dimethoxyäthan gelöst und mit 5 g ölfreiem, in 1 ml 1,2-Dimethoxyäthan suspendiertem Natriumhydrid behandelt. Man rührt 5 Minuten und fügt Benzol hinzu. Die Lösung wird dann mit Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingedampft. Dabei erhält man p-Methoxybenzyl-5-(1-acetoxyäthyl)-6(H)-1,3-thiazin-4-carboxylat, welches die nachstehenden physikalischen Eigenschaften aufweist: -

Massenspektrum M -60 bei m/e 289;

NMR (CDCl₃) T 8,5 (d, 3, J=8 Hz, CHCH₃), 8,0 (s, 3, CH₃CO), 6,85 (m, 2, SCH₂), 6,2 (s, 3, OCH₃), 4,85 (s, 2, CH₃Ar), 3,85 (q, 1, J=8 Hz, CHCH₃), 2,95 (ABq, 4, ArH), 1,6 (s, 1, N=CH); IR (CHCl₃) 3,45, 5,78, 5,82, 6,21, 6,31, 6,62, 6,90, 7,30, 7,69, 8,2, 8,5, 8,85, 9,12, 9,45, 9,65, 9,85, 10,5, 12,05^.

Beispiel 3

p-Methoxybenzyl-5-( 1 -acetoxyäthyl) -6 (H) -1 , 3-thiazin-4-carböxylat Ein Gemisch von 1,73 g p-Methoxybenzyl-d.-thioformamidodiäthylphosphonoacetat, 1,83 g gepulvertem Kaliumcarbonat, 0,82 g 1- -Chlor-3-acetoxybutan-2-on und 30 ml Aceton wird 5 Stunden in einer Stickstoffatmosphäre gerührt. Man filtriert dann das Reaktionsgemisch und dampft das Filtrat bei vermindertem Druck ein. Der Rückstand wird in Tetrachlorkohlenstoff gelöst, mit Phosphatpuffer P₁T 9 und Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingedampft. Dabei erhält man das rohe p-Methoxybenzyl-5-(1-acetoxyäthyl)-6(H)-1,3-thiazin-4-carboxylat (Ausbeute 92 $). Das Produkt besitzt die nachstehenden physikalischen Eigenschaften:

IR (CHCl₃) 5,74, 5,84, 6,2, 6,3, 6,65, 6,9, 7,3, 7,69, 8,0, 8,5, 9,12, 9,95, 10,5, 12,(

Beispiel 4

p-Methoxybenzyl-dl-3-( 1 -acetoxyäthyl) -7o(razido-3-cephem-4-carboxylat .

p-Methoxybenzyl-5-(1-acetoxyäthyl)-6(H)-1,3-thiazin-4-carboxylat, hergestellt gemäß Beispiel 2 aus 462 mg (1,23 mMol) p-Methoxybenzyl-c(-thioformamidodiäthylphosphonoacetat), wird in 12 ml Methylendichlorid

- 52 -

409821 /1146

15 303 τ

gelost. Man fügt 0,834 ml Triäthylamin und anschließend bei O⁰C unter Stickstoff innerhalt) von 4 Stunden 0,214 ml Azidoacetylchlorid in 12 ml Methylendichlorid hinzu. Dann'läßt man die Mischung sich auf Raumtemperatur erwärmen und verdünnt sie mit 180 ml Benzol. Danach wäscht man dreimal mit Wasser (bei p_H-Werten von 3, 7 bzw. 8), trocknet über MgSO-, filtriert und dampft ein. Dabei erhält man p-Methoxybenzyl-dl-3-( 1 -acetoxyäthyl)-7c/-azido- -3-cephem-4-carboxylat (das Produkt enthält eine gewisse Menge ^²-Isomeres) . Nach Chromatographie an Kieselgel unt.er Verwendung von 30 Teilen Gel/Teil Produkt und Elution mit Äthylacetat/Benzol (5:95) wird die reine Verbindung in I3$iger Ausbeute gewonnen; Eigenschaften:

Massenspektrum M⁺ bei m/e 432;
IR (CHCl₃) 4,7, 5,55, 5,75, 6,18, 8,04, 9,64*1 ; NMR (CDCl₃) T 8,6 (d, 3, J=8 Hz, CHCH₃), 8,0 (s, 3, CH₃CO), 6,5 (s, 2, SCH₂), 6,2 (s, 3,. OCH₃), 5,58 (d, 1, J=1,5 Hz, H6 oder H7), 5,52 (d, 1, J=1,5 Hz, H7 oder H6), 4,8 (s, 2, CH₂Ar), 4,04 (q, 1, J=8 Hz, CHCH₃), 2,8 (ABq, 4, ArH).

Beispiel 5

p-Methoxybenzyl-dl-3-( 1—ac e toxyäthyl) -7o£-amino -3-c ephem-4- carboxylat

170 mg p-Methoxybenzyl-dl-3-( 1-acetoxyäthyl) -7c(-azido-3-cephem-4- -carboxylat und 170 mg PtO₂ in 25 ml Benzol werden 45 Minuten bei einem Druck von etwa 2,8 Atmosphären mit Wasserstoff behandelt.

Nach Filtration und Abdampfen des Lösungsmittels erhält man p- -Methoxybenzyl-dl-3-( 1 -acetoxyäthyl) -7c(-amino-3-cephem-4-carboxylat (Ausbeute 97 f°) i Eigenschaften:

IR (CHCl₃) 2,91, 3,35, 5,65, 5*78, 6,2, 6,3, 6,75, 6,85, 7,19, 7,30, 7,69, a,2, 8,5,,9,0, 9,85, 10,55, 10,98, 12,05^;

NMR (CDCl₃)T 8,85 (d^ 3, J=8H₂, CHCH₃), 8,i8 (br s, 2, Ng₂), 8,0

(s, 3, CH₃CO), 6,6 (s, 2, SCH₂), 6,2 (s, 3, OCH₃), 5,90 (d, 1,

J=1,2 Hz, H6 oder H7), 5,58* (et," 1, J=1,2 Hz, H7 oder H6) , 4,82 (s, 2, CH₂Ar), 2,85 (ABq, 4, ArH).

Die geiaäß Beispiel 5 hergestellte Tbt-Aminoverbindung wird wie folgt zur entsprechenden 7ß-Aminoverbindung epimerisiert:

- 53 -

40 98 21/11A6

Stufe 1; p-Methoxybenzyl-dl—3—(1—aeetoxyäthyl)-7ot-(p-nitro-

benzylidenamino ) — 3—cephem-4-carboxylat

101 mg p-MetlLOxybenzyl-dl-3-( 1-acetoxyäthyl) -7ö(-amino-3-cephem-4- -carboxylat werden 13 Stunden unter Rühren mit 36 mg p-Nitrobenzaldehyd und 0,7 g Magnesiumsulfat in-5 ml Methylendichlorid behandelt. t)ie Lösung wird dann filtriert und eingedampft. Dabei erhält man p-Methoxybenzyl-dl—3—(1—aeetoxyäthyl) —TöL—( p-nitrobenzylidenamino)-3—cephem-4-carboxylat (Ausbeute 80 fi); Eigenschaften: IR (CHCl₃) 3,45, 5,62, 5,78, 5,81, 6,1., 6,23, 6,68, 6,89, 7,3, 7,42, 8,2, 8,5, 8,9, 11,0, 11,65, 12,05,4t;

NMR (CDCl₃) T 8,56 (d, 3, J=8 Hz, CHCH₃), 8,0 (s, 3, CH₃CO), 6,5 (s, 2, SCH₂), 6,18 (s, 3, OCH₃), 5,15 (d, 1, J=1,2 Hz, H6 oder H7), 5,07 (d, 1, J=1,2 Hz, H7 oder H6), 4,75 (s, 2, ArCH₂), 4,0 (q, 1, J=8 Hz, CHCH₃), 2,82 (ABq, 4, ArH), 2,0 (ABq, 4,ArH), 1,42 (s, 1,

CH=N). ■'

Stufe 2; p-Methoxybenzyl-dl-3-(1-acetoxyäthyl)-7ß-(p-ni trobenzyli-

denamino ) —3-cenhem—4-carboxylat

130 mg p-Methoxybenzyl-dl-3-( 1-acetoxyäthyl)-7θί.-(p-nitrobenzylidenamino)-3-cephem-4-carboxylat werden in 4 ml Tetrahydrofuran gelöst. Dann fügt man bei -78⁰C unter Stickstoff 0,163 ml 2,3 m Phenyllithium hinzu; dabei bildet sich das 7-Lithiumderivat von p- -Methoxybenzyl-dl-3-( 1 -aeetoxyäthyl) -ldr{ p-ni trobenzylidenamino) _3__cephem-4-carboxylat. Dann werden 5 ml Dimethylformamid und anschließend eine Mischung von 3 ml Tetrahydrofuran, 0,063 ml Essigsäure und 0,02 ml Wasser zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wird auf Raumtemperatur erwärmt, mit 50 ml Benzol verdünnt und sechsmal mit Wasser gewaschen. Die zweite Waschflüssigkeit enthält einen Phosphatpuffer vom p_H 2 und die fünfte Waschflüssigkeit einen Phosphatpuffer vom p_H 8. Dann trocknet man über Magnesiumsulfat, filtriert xand dampft das Lösungsmittel ab. Man erhält ein Gemisch von p- -Methoxybenzyl-dl-3-(1-aeetoxyäthyl)-7ß-(p-nitrobenzylidenamino)- ^-cephemH-'-carboxylat und p-Methoxybenzyl-dl-3-( 1-acetoxyäthyl)- -7oi.-(p-nitrobenzylidenamino)-3-cephem-4-carboxylat (Ausbeute 85 f°). Das normale Isomere zeigt im Kernresonanzspektrum neue Banden bei X* 4,9 und 4,5 (H6 und H7) und J~ 1,2 (CH=N).

- 54 40982 1/1146

Stufe 3t p-Methoxybenzyl-dl-3-( 1 -acetoxyäthyl)-7ß-aminö-3--cephem~

Ein Gemisch, von p~Methoxybenzyl-rdi-3-(1-acetoxyätliyl)-7ß-(p-nitrobenzylidenamino)-3-cephem-4-carboxylat und dessen *fo(-Epimerem (180 mg) wird mit 163 mg 2,4-Dinitröphenylhydrazin-tosylat in 6 ml Äthanol behandelt. Das Gemisch, wird 30 Minuten gerührt und filtriert. Das FiItrat wird eingedampft und der Rückstand mit einem wäßrigen Puff er (p_H 8) versetzt. Man extrahiert anschließend dreimaLmit Äther. Die vereinigten Äther extrakte werden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingedampft; der Rückstand ist ein Gemisch von p-Methoxybenzyl-dl-3^(1-aeetoxyäthyl)-7ß-amirio-3- -cephem-4-carboxylat und dessen 'foi-Epimerem (Ausbeute 97 fi) · Die Eigenschaften des 7ß-Aminoderivates sind wie folgt: NMR (CDCl₃) T 8,72 (d, 3, J=8 Hz, CHCH₃), 8,0 (s, 3* CH₃CO), 7,5 (brs, 2, WH₂), 6,6 (s, 2, SCH₂), 6,3 (s, 3, OCH₃), 5,4 (d, 1, ' JM-, 5 Hz, H6 oder H7), 5,17 (d, 1, J=4,5 Hz, H7 oder H6), 4,8 (s, 2, CH₂Ar), 4,0 (q, 1, J=8 Hz, CHCH₃), 2,95 (ABq, 4, ArH)*

Die Reinigung durch Kieselgel-Säulenchromatographie oder durch präparative Kieselgel-Dünnschichtchromatographie liefert reines p-Methoxybenzyl-dl-3-( 1-acetoxyäthyl)-7ß-amino-3-cephem-4-carboxylät. - ;

Beispiel 6 .

p-Methoxybenzyl-dl-3-( 1 -acetoxyäthyl) -7ß-( 2-thienylac et amido ) -3- -cephem-4-carboxylat . " .

Eine Lösung von 140 mg eines Gemisches von p-Methoxybenzyl-dl-3- -(1-acetoxyäthyl)-7ß-amino-3-cephem-4-carboxylat und dessen ·&-Ερί-merem in 10 ml Methylendichlorid wird nacheinander mit 0,14 ml Pyridin und einer Lösung von 57 mg 2-Thienylacetylchlorid in 4 ml Methylendichlorid versetzt. Dann rührt man 5 Minuten bei Raumtemperatur, dampft das Lösungsmittel ab und ersetzt es durch Benzol. Die Lösung wird mit einem Phosphatpuffer (pg 2),-Wasser und einem weiteren Phosphatpuffer (p_H 8) gewaschen. Nach Trocknung über Magnesiumsulfat, Filtration und Eindampfen des Lösungsmittels erhält man p-Methoxybenzyl-dl-3-( 1 -acetoxyäthyl) -7-( 2-thienylac etamido) -3- -cephem-4-carboxylat. Das Produkt wird chromatographisch an Kiesel—

■ - 55 -;■■-'.. . '

40.98-2Λ71 146

St

gel gereinigtj dabei erhält man p-Methaxybenzyl-dl-3-(1-acetoxy- äthyl) -7ß-( 2-thienylac et amido) ^-cephem^-carboxylat (Ausbeute 17 £)» Eigenschaften:

Massenspektrum M⁺ bei m/e 53Of

IR(CHCl₃) 5,60, 5,79, 6,20, 6,64, 8,3, 9,66)«,; NMR (CDCl₃) 8,62 (d, 3, J=7 Hz, CHCH₃), 8,00 (s, 3, CH₃CO), 6,63 (s, 2, SCH₂), 6,20 (s, 3, OCH₃), 6,18 (s, 2, ArCH₂CO), 5,12 (d, 1, J=5Hz, H6), 4,80 (s, 2, ArCH₂O), 4,26 (dd,'1, J=5 Hz und J=9 Hz, H7), 3,98 (q, 1, J=7 Hz, CHCH₃), 3₉55 (d, 1, J=9 Hz, NH), 3,2-2,5 (m, 7, ArH).

Das gewonnene p-Methoxybenzyl-dl-3-( 1-acetoxyäthyl) -7cL-( 2-thienylacetamido)-3-cephem-4-carboxylat besitzt die nachstehenden Eigenschaften:

Massenspektrum M⁺ bei m/e 5305 ^J

IR (CHCl₃) 5,60, 5,78, 5,92, 6,19, 6,62, 8 ,.3"^; NMR (CDCl₃) 8_?63 (d, 3, J=7 Hz, CHCH₃), 8,03 (s, 3, CH₃CO), 6,65 (s, 2, SCH₂), 6,20 (s,. 5, OCH₃ und ArCH₂CO), 5,45 (d, 1, J=2 Hz, H6)j 5,10 (dd, 1, J=2 Hz und J=7 Hz,-H7), 4,76 (s, 2, ArCHgO), 4,10 (q, 1, J=7 Hz₉ CHCH₃), 3,33 (d, 1, J=7 Hz, MH), 3,25-2,5 (m, 7, ArH). .

Beispiel 7

Natrium-dl-3-(1-acetoxyäthyl)-7ß-(2-thienylacetamido)-3-cephem- -4-carbo xylat

Man löst 24 mg p-Methoxybenzyl-dl-3-(1-acetoxyäthyl)-7ß-(2- -thienylacetamido)-3-cephem-4-carbox3rlat in 0,5 ml Anisol und behandelt die Lösung 5 Minuten bei 0⁰C mit 2,5 ml Trifluoressig- . säure.. Anschließend werden die Trifluoressigsäure bei O⁰C im Vakuum und das Anisol bei etwa 30°C/0,1 ssa abgesaugt. Man fügt weiteres Anisol (2 ml) Mnzu und saugt nochmals ab. Die erhaltene dl-3-(1-Acetoxyäthyl)-7ß-(2-thienylacetamido)-3-cephem-4-carbonsäure besitzt die nachstehenden Eigenschaften: IR (CHCl₃) 5,60, 5,78, 5,94, 6,64, 8,32^J

KMR (CDCl₃) 8,58 (d, 3, J=7 Hz, CHCH₃), 7,97 (s, 3, CH₃CO), 6,60 (s, 2, SCH₂), 6,12 (s, 2, ArCH₂), 5,02 (d, 1, J=5 Hz, H6), 4,H (dd, 1, J=5 Hz und J=9 Hz, H7), 3,85 (q, 1, J=7 Hz, CHCH₃), 3,51

- 56 - -

409821/1148

(d_e 1, J=9 Hz, NH), 3,05-2,45 (m, 3, ArH).

Man nimmt die Säure in 5 ml Wasser, das 3 Äquivalente Natriumbiearbonat enthält, auf und wäscht dreinal mit Methylendichlorid. Die vsässrige Schicht wird mit einem Phosphatpuffer bis zu einem p_H-Wert von 2 angesäuert und mit Äthylacetat extrahiert. Die Äthylacetatlösung wird dann mit Wasser, welches 3 mg Natriumbicarbonat enthält, extrahiert und das Wasser lyophilisiert; dabei erhält man kristallines Natrium-dl-3-(1-acetoxyäthyl)-7ß-(2-thienylacetamido) ^-eephem-^carboxylat, welches antibaktefielle Aktivität aufweist,

In analoger Weis.e, wobei man jedoch an'Stelle von i-Chlor-3- -acetoxybutan-2-on andere Acyloxyverbindungen, wie 1-Brom-3-aeetoxybutan-2-on, 1-Chlor-3-propionyloxybutan-2-on_r 1-Chlor-3- -butyryloxybutan-2-on, 1-Chlor-3-acetoxypentan-2-on oder 1-Brom- ^-propionyloxyhexan^-on, als Ausgangsverbindungen einsetzt, erhält man die entsprechenden 3-(1'-Acyloxy)-nieder-alkylverbindüngen.

Beispiel 8

- p-Metho xybenzyl-ok- ( S -phenacylthio imidat ο) -diäthylpho sphono ac et at Eine Mischung von 77 mg p-Methoxybenzyl-N-thioformamido-O^-aminodiäthylphosphonoacetat, 32 mg Phenacylchlorid, 29 mg gepulvertem Kaliumcarbonat und 2 ml Aceton wird 18 Stunden unter Stickstoff bei Raumtemperatur gerührt und anschließend filtriert. Beim Eindampfen des Filtrats erhält man 111 mg rohes p-Methoxybenzyl-c(- -(S-phenacylthioimidato)-diäthylphosphonoacetat; Eigenschaften: IR 5,72yu, (Ester), 5,93^ (COPhenyl), 6,20, 6,28/t (Ar, G=N); NMR (S, CDCl₃) 1,08, 1,20, 1,32, 3,82, 3,95, 4,08, 4,20, 4,33 [P(OC₂H₅)Jj 3,79 (OCH₃); 4,56 (COCH₂S), 5,16 (OCH₂^); 8,45, 8,51 (SCH=N); weitere Peaks korrekt; 0 = Phenyl.

Wenn man p-Chlorphenacylchlorid, p-Cyanphenacylchlorid, p-Carbomethoxyphenacylchlorid, 4-Chloracetylpyridin, 2-Chloracetylfuran , und 2-Chloracetyl-5-methylfuran an Stelle von Phenacylchlorid im vorstehend, beschriebenen Verfahren einsetzt, erhält man p-Methoxybenzyl-dt-( S-p-chlorphenacylthioimidato) -d-iäthylpho sphonoacetat,

409 821/1146

St

p-Methoxybenzyl-cC-CS-p-cyanphenacylthioimidato ) -diäthylpho sphonoacetat, p-fflethoxybenzyl-c(-(S-p-carbomethoxyphenacylthio imidatο) -diäthylpho sphonoacetat , p-Methoxybenzyl-G(-[s-( 4-pyridylcarbonyl-methyl)-thioimidatq3 -diäthylphosphonoacetat, p-Methoxybenzyl-u(.- -(S-2-furoylmethylthioinddato)-diäthylphosphonoaeetat und p-Methoxybenzyl-o(-fe-( 5-methyl-2-furoylmethyl)-thioimidatoIi -diäthylpho sphono ac et at.

Das auf diese Weise erhaltene p-Methoxybenzyl-ct-(S-p-carbomethoxyph.enacylth.io imidat ο) -diäthylpho sphono ac etat besitzt die nachstehenden IR- und NMR-Werte:

IE (f)i 5,70 (Ester), 5,9 (COAr), 6,20, 6,28 (Ar, C=N); MMR (S, CDCl₃): 3,76 (ArOCHO, 3,94 (COOCH₃), 4,53 (COCH₂S), 5,12 (OGH₂Ar), 8,43, 8,50 (SCH=N), weitere Peaks korrekt.

Beispiel 9

p-Methoxybenzyl-5-phenyl-6(H)-1₁3-thiazin-4-carboxylat p-Methoxybenzyl-o(—( S—phenacylthio imidato) -diäthylpho sphono ac etat (hergestellt gemäß Beispiel 1) wird dreimal mit Tetrahydrofuran gespült, eingedampft, in 1 ml 1,2-Dimethoxyäthan gelöst und mit 5 mg SIfreiem, in 1 ml 1,2-Dimethoxyäthan suspendiertem Natriumhydrid behandelt. Dann rührt man 5 Minuten und fügt Benzol hinzu. Die Lösung wird mit Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingedampft. Dabei erhält man p-Methoxybenzyl-5-phenyl-6 (H) -1,3-thiazin-4-carboxylat; NMR (i, CDCl₃): 3,40, 3,59, 3,78, 3,97 (SCH₂); 3,8 (OCH₃); 5,0 (OCHpiO; 8,3 (SCH=N); weitere Peaks korrekt; 0 = Phenyl; MS 339, 307, 294, 203, 175, 137, 121.

Wenn man p-Methoxybenzyl-oKS-p-chlorphenacylthioimidato)-diäthylpho sphono ac etat , p-Methoxybenzyl-d-iS-p-cyanphenacylthioimidato )- -diäthylphosphonoaeetat, p-Methoxybenzyl-(/-(S-p-carbomethoxyphenacylthioimidato)-diäthylphosphonoaeetat, p-Methoxybenzyl-ö(- - jS-( 4-pyridylcarbonylmethyl) -thioimidatö] -diäthylpho sphono ac et at, p-Methoxybenzyl-o(-( S-2-f uroylmethylthioimidato) -diäthylpho sphono acetat und p-Methoxybenzyl-dl-C^s-(5-methyl-2-furoylmethyl)-thioiinidatoj-diäthylphosphonoacetat an Stelle von p-Methoxybenzyl-o(-

- 58 - .

409821/1146

•=(S-phenacylthioimidato)-diätliylphospiionoaeeTat im vorstehenä. beschriebenen Verfahren einsetzt ₉ erhält man p~Methoxybenzyl-5- =p-ehlorphenyl-6(H)-1 j3-thiazin-4-carlDoxylat_s p-Methoxybenz2fi-5-■=p~cyanphenyl-6(H)-1 s,3-thiazin-4=carboxylatp p-üethosy.benzyl-S- ' -p-carbomethoxyphenyl-6 (H) -1 , 3-thiazin-4-carbos:ylat , p-IIethQxybenzyl-5-(4-pyridyl)-6(H)-1 , 3-thiazin-4~earbo:xylat, p-Methoxybenzyl-5-(2-furyl)-6(H)-1, 3-thiazin~4-earbo:xylat und p-Methoxybenzyl-5-(5-methyl-2=f uryl)-6(H)-1_s 3-thiazin-4-carboxylat.

Das auf diese Weise hergestellte p-Metho^sybenzyl—S-p-earbometlioxyphenyl-6(H)-1,3-thiazin-4-carboxylat schailzt bei 144⁰G iand besitzt •die nachstehenden Ei genschaft ens

HMR (<$_s CDCl₃)S 3_?61 (SCHg) _y 3*81 (ArOCH₃), 3,97 (COOCH₃),. 4*98 (OCH₂Ar), 8,43 (SCH=N), weitere Peaks korrekt? :

MSs 397, 353, 277, 261, 233, 232, 188, .135, 12U ■ . -

Bei s pie I 10

p~Methoxybenzyl-dl-3-phenyl-7d-azido -3-c ephem-4~carböjqrlat p-Methoxybenzyl-5-phenyl-6(H) -T, 3=thiazin=4-earbö3cylat-,. hergestellt aus 462 mg (1_S23 mMol) p-Methoxybenzyl-lJ=thioformamido-=cir-amiiiodiäthylphosphonoacetat, wird in 12 il Methylendichlorid gelösto Man fügt 0,834 ml Triäthylamin und anschließend bei O⁰C unter Stickstoff innerhalb von 4 Stunden O₅ 214 22I Azido ac etylchloriö in 12 ml Methylendichlorid hinzu» Dann läßt man die Mischung siel, auf Raumtemperatur erwärmen, verdünnt mit 18O ml Benzol, wäscht dreimal mit Wasser (bei Pjr-Werten von 3, 7 bzw_o 8)', trocknet über MgSO^, filtriert und dämpft ein_o Dabei erhält man 450 mg p-Methoxybenzyl- -dl^-phenyl^d-azido^-cephem^-carboxylato Durch Chromatographie an 20 g Kieselgel und Elution mit Chlproform/Kthylacetat (10:1) erhält man p-lethoxybenzyl-dl-3-phenyl-7cί=·azido-3-cephem-4-carboxylat (das Produkt enthalt eine gewisse Menge A -Isomeres) !Ausbeute 170 mg« .

IR ψ)s 4_S72 (Azid), 5,59 (Lactam), 5_S72 (Ester)f ■ ■ KMR (89 CDCl₃)S 4„6d_s J=1,5 Hz| 4_s7d_s J=I₅5 Hs (H-6/H-7); weitere Peaks korrekt; . .

422_ff 394_? .229, 203_? 175.'. , "

. 409821/1146

CO

Wenn man p^Hethoxybenzyl-5-p-ehlorphenyl-6(H)-1,3-thiazin~4-carboxylat, p-Methoxybenzyl-S-p-cyanphenyl-e (H) -1,3-thiazin-4-carboxylat, p-Methoxybenzyl^-p-carbomethoxyphenyl-e (H) -1,3-thiazin-4- -carboxylat, p-^ethoxybenzyl-5-( 4-pyridyl)-6(H) -1,3-thiazin-4- -carboxylat, p-4Iethoxybenzyl-5-(2-furyl)-6(H)-1,3-thiazin-4-carboxylat und p-Methoxybenzyl-5-( 5-methyl-2-furyl)-6(H)-1,3-thiazin-4- -carboxylat an Stelle von p-Methoxybenzyl-5-phenyl-6(H)-1,3-thiazin-4-carboxylat im vorstehend beschriebenen Verfahren einsetzt, erhält man p-Methoxybenzyl-d.l-3-p-chlorphenyl-7o(7azid.o-3-cephem-4- -carboxylat, p-Methoxybenzyl-dl-3-p-cyanphenyl-7o(-azido--3-cephein~4- -carboxylat, p-Methoxybenzyl-dl-3-p-carbomethoxyphenyl-7ö(-azido--3- -cephexE-4-earboxylat, p-Uethoxybenzyl-dl-3-( 4-pyridyl) -7o(-azido-3- -cephem-4-carboxylat, p-Methoxybenzyl-dl-3-( 2-furyl) -TDt-azido-3- -cephem-4-carboxylat und p-Methoxybenzyl-dl-3-(5-methyl-2-furyl)- -7öl-azid.o-3-c ephem-4-c arbo xylat.

Das auf diese Weise erhaltene p-Methoxybenzyl-dl-3-p-carbomethoxyphenyl-7u/-azido-3-cephem-4-carboxylat besitzt die nachstehenden Eigenschaften:

IR (^): 4,72 (Azid), 5,61 (Lactam), 5,80 (Ester)?

NMR (i, CDCl₃): 3,61 (CH₂S), 4,61d, 4,70d, J=1,5 Hz (H-6, H-7), weitere Peaks korrekt;

MS: 480, 452, 316, 287, 121.

Beispiel 11

p-Methoxybenzyl-dl-3-phenyl-7o£-amino -3-c ephem-4-c arbo xylat 170 mg p-Methoxybenzyl-dl-3-phenyl-7ö(-azido-3-cephem-4-carboxylat und 170 mg PtOp in 25 ml Benzol werden 45 Minuten bei einem Druck von etwa 2,8 Atmosphären (40 psi) mit Wasserstoff behandelt. Nach Filtration und Abdampfen des Lösungsmittels erhält man 101 mg p-Meth.oxybenzyl-dl-3-phenyl-'/b(-amino -3-c ephem-4-carbo xylat; NMR (i, CDCl₃):' 4,16d, 4,52d, J=1,5 Hz (H-6, H-7); 2,0 breit (NH₂); weitere Peaks korrekt;
IR ^tO: 5,62 (Lactam), 5,72 (Ester).

Wenn man p-Methoxybenzyl-dl^-p-chlorphenyl^cZ-azido^-cephem^- -carboxylat, p-Methoxybenzyl-dl-3-p-cyanphenyl-^r/0(.-azido-3-eepheni-"

- 60 -

A09821/1U6

■; *

-4-carboxylat ₉ p^ethoxybenzyl^l^-p-carbomethoxyphenyl-Tc^-azido-■~3-cephem-4-carboxylat, p-Methoxybenzyi-dl-3-( 4-pyridyl) -TOf-azido- -3-cephem-4-caΓboxylat, p-Methoxybenzyl-dl-3-( 2-furyi) -7o(-azido- -3-cepl3iem-4-^:carboxylat und p-Methoxybenzyl-dl-3-( 5-methyl-2-furyl) =7d.-azido-3-cephem-4-carboxylat an Stelle von p-Methoxybenzyl-dl-—3-pb.enyl-7ol-azido-3-cephem-4-carboxylat im vorstehend beschriebenen Verfahren einsetzt, erhält man-p-Methoxybenzyl-dl-3-p-chlorphenyl-7d-amino-3-cephem-4-carboxylat, p-Methoxybenzyl-dl-3-p- -cyanphenyl-7d-amino-3-cephem-4-carboxylat, p-Methoxybenzyl-dl-3- -p-carbomethoxyphenyl-7d-amino-3-cephem-4-carboxylat, p-Methoxy- · benzyl-dl-3-( 4-pyridyl)-7C(-aiiiino-3-cephem-4-carboxylat, p-Methoxy-•benzyl-dl-3-( 2-furyl)-7o(-amino-3-cephem-4-carboxylat und p-Methoxybenzyl-dl-3-( 5-methyl-2-furyl) -7c(-amino-3-cephem-4-carboxylat.

Das auf diese Weise erhaltene p-Methoxybenzyl-dl—3-p-carbomethaxyphenyl-7o(-amino-3-cephem-4-carboxylat besitzt die nachstehenden Eigenschaften:

IR Oe): 3,0 (NH), 5,62 (Lactam), 5,79 (Ester);

RMR (S, CDCl₃)r 4,24d, 4,58d, J=2 Hz (H-6, H-7), 2,3 breit (NH₂),

weitere Peaks korrekt; ,

MSs 454, 398, 332₉ 232, 121_o

Die 7ct-Aminoverbindungen werden wie folgt zu den 7ß-Aminoverbindungen epimerisierts

Stufe 1; p-Methoxybenzyl-dl-3-phenyl-7o{-(p-nitrobenzylidenamino)-

-3-cephem-4-carboxylat

101 mg p-iiethoxybenzyl-dl-3-phenyl-7o(-amino-3-cephem-4-carboxylat werden .2 Stunden unter Rühren mit 36 mg p-Nitrobenzaldehyd und 0,7 g Magnesiumsulfat in 5 ml Methylendichlorid behandelt. Die Lösung wird filtriert und das Filtrat eingedampft. Man erhält 133 mg p-Methoxybenzyl-dl-3-phenyl-7(?(r-( p-nitrobenzylidenamino) ■"3-cephem— 4-carboxylat; · .- · _t.^·.

NMR (CDCl₃): CH=N bei 8,55<i. .

Wenn man p-Methoxybenzyl-dl-3-p-chlorphenyl-7oί-amino-3-cephem-4- -earboxylat, prMethoxybenzyl-dl-3-p-cyanplienyl-7ot-amino-3-cephem-

409821/1146

-4-carboxylat, p^ethoxybenzyl-dl^-p-carbometliciiyphönyl -7fl£-amino -3-cepliem-4-carboxylat, p-Jiethoxybenzyl-dl-3-( 4-pyridyl) -7o(-amino- -3-cephem-4-carboxylat, p-Methoxybenzyl-dl-3-( 2-furyl) -7o(-amino-3- -cephem-4-carboxylat und p-Methoxybenzyl-dl-3-( 5-methy 1-2-furyl) -Tb(r-amino-3-c ephem-4-carboxylat an Stelle von p-Methoxybenzyl-dl- -3-ph.enyl-'/CL-amino—3-cephem—4-carboxylat im vorstehend "beschriebenen Verfahren einsetzt, erhält man p-Methoxybenzyl-dl-3-p-chlorphenyl-7c(-(p-nitrobenzylidenamino )-O-eephem-^-earboxylat, p-Methoxybenzyl-dl-3-cyanphenyl-7oi-( p-nitrobenzylidenamino) -3-cephem-4- -carboxylat, p-Methoxybenzyl-dl-3-p-carbomethoxyphenyl-'ib(-(p-nitrobenzylidenamino )^-cephem^-carboxylat, p-Methoxybenzyl-dl-3-(4- -pyridyl) -7φ- (p-nitrobenzylidenamino) -3-c ephem-4-carlDoxylat, p-Methoxybenzyl-dl-3-( 2-furyl) -ld-{ p-nitrobenzylidenamino) -3- -cephem-4-carboxylat und p-Methoxybenzyl-dl-3-(5-methyl-2-furyl)- -Tö(r( p-nitrobenzylidenamino) -3-c ephem-4-carboxylat.

Das auf diese Weise hergestellte p-^Iethoxybenzyl-dl-3-p-carbomethoxyphenyl-7o(.-( p-nitrobenzylidenamino ) -3-c ephem-4-carboxylat besitzt die nachstehenden Eigenschaften: NMR (Sf CDCIo): 8,60 (CH=W), weitere Peaks korrekt.

Stufe 2; p-Methoxybenzyl-dl-3-phenyl-7ß-(p-nitrobenzylidenamino)-

—3-c ephem-4-carboxylat

130 mg p-^yiethoxybenzyl-dl—3—phenyl-7o(-( p-nitrobenzylidenamino ) - 3- -cephem-4-carboxylat werden in 4 ml Tetrahydrofuran gelöst. Man fügt dann bei -78⁰C unter Stickstoff 0,163 ml 2,3 m Phenyllithium hinzu; dabei bildet sich das 7-Lithiumderivat von p-Methoxybenzyl- -dl-3-phenyl-7d.-Cp-nitrobenzylidenamino) -3-c ephem-4-carboxylat. Man fügt 5 ml Dimethylformamid und anschließend eine Mischung von 3 ml Tetrahydrofuran, 0,063 ml Essigsäure und 0,02 ml Wasser hinzu. Das Reaktionsgemisch wird danach auf Raumtemperatur erwärmt, mit 50 ml Benzol verdünnt und sechsmal mit Wasser gewaschen. Die zweite Waschflüssigkeit enthält einen Phosphatpuffer vom p_H 2 und die fünfte Waschflüssigkeit einen'Phosphatpuffer· vom p_H 5. Nach Trocknung über Magnesiumsulfat, Filtration und Abjiampf-en des Irösungsmittels erhält man ein Gemisch (2:1) VOn₁ p-B£ethoxybenz/l*-di-3^::*' *"* -phenyl-7ß-( p-nitrobenzylidenamino )-3-cephem-4-carboxylat und p-

- 62 -

409821/1146

-Methoxybenzyl-dl-3-plienyl~7oi-( p-nitrobenzylidenamiriQ) -3-cephem- -4-carboxylat (im wesentlichen quantitative Ausbeute). Das Kernresonanzspektrum des pHaethoxybenzyl·^-3^7ß-pileayl^-nitΓobenz5ü±ienamino)-3-cephem-4-carboxylats ergibt CH=N bei 8,70JO

Wenn man p-Methoxybenzyl-dl-3-p-cnlorph.enyl-1Ci-(p-nttrobenzylidenamino) -3-cepiiem-4-carboxylat, p-Methoxybenzyl-dl-3-p-cyanphehyl- =7d~( p-nitrobenzylidenamino ) -3-cephem-4-carhoxylat , p-Metho xybenzyl-dl-3-p-carbomethoxyphenyl-7cl-( p-nitrobenzylidenamino ) -3- -ceph.em-4-carbo.xylat, p-Meth.oxybenzyl-dl-3-( 4-pyridyl) -7Ct-(p-nitrobenzylidenamino ) ^-cepheia^-carboxylat ₉ p-Methoxybenzyl-dl-3-( 2- -furyl)-7d-(p-nitrobenzylidenamino)-3-cephem-4-carbo^ylat und p-Methoxybenzyl-dl-3-( 5-methyl-2-furyl) -^-(p-nitrobenzylidenamino ■)- -3-cepliem-4-carboxylat an Stelle von p-Metlioxybenzyl-dl-3-ph.enyl-—7öl-(p—nitrobenzylidenamino) —3-cephem-4-carboxylat im vorstehend beschriebenen Verfahren einsetzt, erhält man p-Methoxybenzyl-dl- =3-p-chlorphenyl-7ß-(p-nitrobenzylidenamino) -3-cepheπι-4-Garboxylat, p-Metho xybenzyl-dl-3-p-cyanphenyl-7ß-( p-nitrqbenzylidenamino) -3- -cephem-4-carboxylat_? p-Methoxybenzyl-dl-3~p-carbomethoxyphenyl- -7ß-(p-nitrobenzylidenamino)-3-cephem-4~carboxylat, p-Methoxybenzyl-dl-3-( 4-pyridyl) -7ß-( p-nitrobenzylidenamino ) -3-cephem-4- -carboxylat _s p-Methoxybenzyl-dl-3=( 2-furyl) -7ß-( p-nitrobenzylidenamino)-3-cephem-4-carboxylat und p-Methoxybenzyl-dl-3-(5-methyl- -2-furyl) -7ß-( p-nitrobenzylidenamino) r-3-cephem-4-carboxylat.

■ ·

Das auf diese Weise hergestellte p-Methoxybenzyl-dl-3-p-carbomethoxyphenyl-7ß-(p-nitrobenzylidenamino)-3-cephem-4-carboxylat besitzt die nachstehenden Eigenschaften? -_m ■

KMR (iy CDClJ: 8,73 (CH=K) ,weitere Peaks korrekt»

Stufe 3 ' p-Methoxybenzyl-dl-3-phenyl-7ß-amino -3-c ephem-4- -carboxylat

180 mg p-Methoxybenzyl-dl-3~phenyl-7ß-(p-nitrobenzylidenamino ) -3-cephem-4-carboxylat werden mit 163 mg 2,4-Dinitrophenylhydrazintosylat in 6 ml Äthanol versetzt. Die Mischung wird 30 Minuten., gerührt, filtriert, eingedampft, mit einem wäßrigen Puffer (p_H 8) behandelt und dreimal mit Äther extrahiert. Die vereinigten Äther-

4098 2 1/1146

extrakte werden über MgSO. getrocknet, filtriert und eingedampft. Als Rückstand verbleiben 140 mg p-Methoxybenzyl-dl-3-phenyl-7ß- -aminb-3-cephem-4-carboxylat;
IR (Al): 3,0 (NH₂), 5,64 (Lactam), 5,74 (Ester).

Wenn man p-Meth.oxybenzyl-dl-3-p-chlorphenyl-7ß-(p-nitrobenzylidenamino) ^-cephem^-carboxylat, p-Methoxybenzyl-dl-3-p-cyanplienyl- -7ß-(p-nitrobenzylidenamino) -3-ceph.em-4-carboxylat, p-Methoxybenzyl-dl-3-p-carbomethoxyphenyl-7ß-(p-nitrobenzylidenamino) -O- -ceph.em-4-earboxylat, p-Methoxybenzyl-dl-3-( 4-pyridyl) -7ß-(p-nitrobenzylidenamino) -3-ceph.em-4-carboxylat, p-Methoxybenzyl-dl-3-( 2- -furyl) -7ß-(p-nitrobenzylidenamino) ~3-ceph.em-4-carboxylat und p-Methoxybenzyl-dl-3-( 5-methyl-2-furyl) -7ß-( p-nitrobenzylidenamino )- ^-cephem^-carboxylat an Stelle von p-Methoxybenzyl-dl-3-phenyl- -7ß-(p-nitrobenzylidenamino)—3-eephem-4-carboxylat im vorstehend beschriebenen Verfahren einsetzt, erhält man p-Methoxybenzyl-dl-3- -p-clilorplienyl-7ß-aiiiino-3-cepliem-4-carboxylat, p-lethoxybenzyl-dl- -3-p-cyanphenyl-7ß-amino-3-cephem-4-carboxylat, p-Methoxybenzyl- «cli_3-.p__Carbomethoxyphenyl-7ß-amino-3-cephem-4-carboxylat, p- -Meth.oxybenzyl-dl-3-( 4-pyridyl) -7ß-amino-3-cepliem-4-carboxylat, p-Meth.oxybenzyl-dl-3-( 2-furyl) -7ß-amino-3-ceph.em-4-carboxylat und p-Methoxybenzyl-dl-3-(5-methyl-2-furyl)-7ß-amino-3-cephem-4- -carboxylat.

Beispiel 12

p-Methoxybenzyl-dl-3-ph.enyl-7ß-( 2-th.ienylacetamido) -e-cephem^- carboxylat

Man versetzt eine lösung von 140 mg p—Methoxybenzyl—dl—3—phenyl— -7ß-amino-3-cephem-4-carboxylat in 10 ml Methylendichlorid nacheinander mit 0,14 ml Pyridin und einer lösung von 57 mg 2-Thienylacetylchlorid in 4 ml Methylendichlorido Man rührt 5 Minuten bei Raumtemperatur, dampft das Lösungsmittel ab und ersetzt es durch Benzol. Die Lösung wird mit einem Phosphatpuffer (p_H 2), Wasser und einem weiteren Phosphat puff er (p_H 8) gewaschen. Nach Trocknung über Magnesiumsulfat, Filtration und Abdampfen des Lösungsmittels erhält man p-Methoxybenzyl~dl-3-phenyl-7ß-(2-thienylacetamido)- -3-ceph.em-4-carboxylat. Dieses wird durch Chromatographie an 6 g

- 64 -

40982 1/114 6

Kieselgel unter Elution mit Ghloroform/Ithylacetat (10i1) gereinigte man erhält 27 mg p-=Methoxybenzyl->dl»3=phenyl-7ß=(2-=thienylacetamido) ~3-cephem~4-earboxylat g

IS C/ih 3,06 (KH), 5,63 (Lactam),"5,77 (Ester), 5,97 (Amid)s US (<$, CBCl₃)S 3,14, 3,59, 3₉82, 4,17 (SCH₂)s 3₉78 (CH₂CO)I 4,9m (OCH₂, 6-H)s' 5,76, 5,83, 5,90, 5^97 "(TbL-H) 5 MSs 520, 355, 339, 181 _o .

Wean man p-Methoxybenzyl-=dl=3=p-chlorp'henyl~7ß-amino-3-cephem-4- -carboxylat, p-&lethoxybenzyl-dl-3-p-cyanphenyl-=7ß-amino-3-cephem- =4-carboxylat, p-Methoxybenzyl-dl=3-p-carbomethoxyphenyl-7ß-amino-■=3-eephem-4=carboxylat, p-Methoxybenzyl-dl-3=( 4-pyridylj -7ß-amino-•=-3-=cephem-4-carboxylat_i, p=Methoxybenzyl-=dl=3^ra( 2-furyl) -7ß-amiho- =3«=cephem-4=carboxylat und p-Methoxybenzyl-dl-3-(5-methyl-2=furyl)- -7B-amino°3-cephem-4-carboxylat an Stelle γόη p-Methoxybenzyl=dl- -3=phenyl-7ß-amino-3-cephem-4-carboxylat im vorstehend beschriebenen Verfahren einsetzt,' erhält man p=Methoxybenzyl-dl-3-p-chlorphenyl-7ß—(2—thienylacetamido)-3-cephem-4-carboxylat, p-Methoxybenzyl-dl-3-p-cyanphenyl=7ß'=( 2-thienylac etamido) -3-cephem-4-—carboxylat, p=Methoxybenzyl-dl—3ⁱ⁼p-⁼carbomethoxyphenyl-7ß-( 2— =»t!xienylacetamido) -3-cephem=4=carboxylat, p-Methoxybenzyl~dl-3- ·=(4-pyridyl) -7ß-( 2-thienylacetamido)-3-cephem-4-=carboxylat, p- =-Methoxybenzyl-dl-3-( 2-furyl) -7ß~( 2-thienylac etamido) »3-cephem-4- -earboxylat und p-Methoxybenzyl-dl-3~(5=methyl-2=furyl)-7ß-(2- -tMenylacetamido)-3-cephem-4-carboxylatο

Das auf diese Weise erhaltene p-Methoxybenzyl-dl-3~p=carbomethoxyphenyl-7ß-(2-thienylacetamido)-3-cephem-4-carboxylat besitzt die· naekstehenden Eigenschaft eng
IR "(^) s 3,0 (im), 5,61 (Lactam), 5_S78 (Ester), 5_S94 (Amid) %

(COOCH₃), 4,91s (OCH₂, 6-H)₉ 5,76, 5p83_s 5_S91_S 5₉99 CU-H)₅ weiten Peaks korrekt§

SSSs 578, 457, 397, 261, 232_O ·

Beispiel 13

flatrium-dl—3—phenyl—7S—C 2-thienylac et amido) -3-cephem-4-carT3ox,ylat Han lost 24 mg p-Methoxybenzyl-dl~3-phenyl-7ß-(2-thienylacetamido)·

in 0,5 ml Anisol und behandelt die Lösung

5 Minuten bei 0⁰C mit 2,5 ml Trifluoressigsäure· Dann werden die Trifluor essigsäure im Vakuum bei 25°C und das Anisol bei etwa 30° 0,1 mm abgesaugt. Man fügt weiteres Anisol (2 ml) hinzu und saugt nochmals ab. Die Probe wird dann in 5 ml Wasser, das 3 Äquivalente Natrxumbicarbonat enthaU^ aufgenonmen. und· dreimal mit MeiigrlendiChlorid gewaschen. Die wäßrige Schicht wird mit einem Phosphatpuffer bis zu einem p„-Wert von 2 angesäuert. Dann extrahiert man mit Äthylaceta-t. Die Äthylacetatlösung wird anschließend mit Wasser, das 3 mg Natriumbicarbonat enthält, extrahiert und das Wasser lyophilisiert. Man erhält kristallines Natrium-dl-3-phenyl-7ß-(2-thienyl acetainido)-3-cephem-4-carboxylat (13 mg), welehes antibakterielle Aktivität aufweist!
IE (Säureform) ϊ 5 _f 60 ^- (Lactam)?

NME (Natriumsalz, D₂O„Ö ): 3»92 (SCH₂) ₉ 4,13 (CH₂CO), 4,86 (HDO), 5,38d_r 5,9Od, J=4,5 Kz (H-6, H-7)i

IS (hohe Auflösung) des Iffethylesters (aus der Säureform und CH₂N₂) 414_t0713i berechnet für C₂₀E₁₃Ii₂O₄S₂ 414,070?.

Wenn man p-Methoxybenzyl-dl~3~P~clilorphenyl-?ß-(2-thienylacet-amido}—3—oephem-4-carljoxylai;, p-ffiethcⁱⁱxybenzyl-dl-3-p-cyanplienyl- -7ß-( 2-thienylacetamido ) -3-cephem-4=-carl3Oxylat, p-Methoxybenzyl- _<il_3-.p_oarbomethoxyphenyl-7ß-C 2-thienylacetamido) -3-cephem-4- -carbozjrlai;, p-iSethoxsrbenzyl-fil-S-C 4-pyridyl)-7ß-( 2-thienylacet-

2-furyl)

und p-

sjflat aa Stalle toil p^stä.O2Qrüeiiz3fl-äl~3 J7lae©taiEiao)-3-egpäeEi-4-earibo2qrlat im -vorstehend beschrie eissets-ö^ erhält mes Ifatrius-dl-3-p-ehlorphenyl

ί -3=eeph.eEä~4-

4Ö8821/1146

ft

-cephem-4-carboxylat* lfatrium-äl-3-(2-±'ttryl)—7ß-( 2-thienylaeetamido) -3-c ephem-4-earboxylat und Natrium-dl-3-( 5-methyl-2-füryl) -7ß-( 2-thienylacetaxnido ) -3-cepliem-4-ca:rboxylat.

Das auf diese Weise erhaltene IfatriTim-dl-3-p~carbometho:3typhenyl- =7ß^2-thie:oylaeetaiiddo)-3-eephem-4-cart}oxylat besitzt die nachstehenden Eigenschaften?

HMR (ί, D₂O)I 3,68 (SCH₂), 3,88 (CH₂Cp) , 4,68 (HDO), 5_s16d_s 5,67d, J= 5 Hz (H-6, H—7) , weitere Peaks korrektf MS des Methylesrters (aus liatrium-^:^l-3-p-car'bomethoxyplienyl-7ß- ~(2=tliienylace"feamido)-3-"cepliem-4-car'boxylat und Diasomethan) s 472,07141 bereciinet für C₂₂H₂₀K₂OgS₂ 472j0763ο

Beispiel 14

p-MethoxybenzyX-<i-( S~4-pyridacyltliioimidato) -diäthylphosphono- > ac et at

Eine Mischung von 1 _S75 g M-Thioformamido-dc-aminodiäthylphosphonoacetat;, 1,8 g 4-—Pyridylchlormethylketon₉ 2₉58 g pulverisiertem Kaliumcarbonat und 40 ml Aceton wird 30 Minuten bei Raumtemperatur unter Stickstoff gerührt und anschließend filtrierte Hach dem Eindampfen des Filtrats erhält man p~Meth©xybenzyl=o£-(S-4-pyridacyl thio imidat ο ) -diäthylpho sphono ac et at _o OTR (ä, CDCl₃)t 1,2m, 4,0m, P(OC₂H₅J₂S 3_?80s_p OCH₃S 4,49s, COCH₂S; 5j2Os 0CH₂Phenyi; 8,44, 8,50, SCH=N| 6,80, 6,95, 7,26, 7_P41, C₅H₄; 7_?8m, 8,8m, Pyridyl.

Beispiel 15

p-Methoxybenzyl—5-(4~pyridyl)-6(H)-1 ₉ 3-thiazin-4-carboxylat p-Methoxybenzyl-c(r(S-4-pyridaeylthioimidato)-diäthylphosphonoacetat wird mit Benzol gespült, in 40 ml Äthylenglykoldimethyläther gelöst tjnd 5 Müaiten mit 115 mg' ΈΙΧ reieM NaH in 25 ml Äthyl englykoldimethyläther behandelt« Räch Zugabe von Benzol wäscht man die Lösung mit Wasser _s trocknet über Magnesiumsulfat_§ filtriert und dampft ein. Dabei erhält man 2,56 g p-Methoxybenzyl—5-(4- -pyridyl) -6 (H) -1,3~thiaisin-4-carboxylat i WSSL (&₉ CDCl₃)r 3₉58s, SCH₂? 4._y98e, OCH₂^i 8,27s, SCH=K| weitere Peaks korrekt; 0 = Phenyl.

_ 67 - .

40'9821/114S

Beispiel 16

p-Methosybenzyl-3-( 4-pyridyl) ^d-azidodecephalo sporanat Man versetzt 2,56 g p-Methoxybenzyl-5-( 4-pyridyl)-6(H)-1,3-thiazin- -4-carboxylat in 100 ml Methylendichlorid bei O⁰C tropfenweise mit einer Lösung von 2,5 ml Triäthylamin in 100 ml Methylendichlorid und anschließend mit 1,32 g Azidoacetylchlorid in 100 ml Methylendichlorid; dabei wird ständig unter Stickstoff gearbeitet. Das Reaktionsgemisch wird 5 Minuten bei 25· C stehengelassen, danach mit Benzol verdünnt, mit Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und schließlich filtriert. Nach dem Eindampfen des Filtrats erhält man 1,56 g rohes p-Methoxybenzyl-3-(4-pyridyl)- -Tc^-azidodecephalosporanat, welches chromatographisch an 30 g Eieselgel bei Elution mit Äthylacetat gereinigt wird; NMR (6, CDCl₃): 3,62s, SCH₂; 3,80s, OCH₃; 4,66d, 4,7Od, J=2 Hz, H-6 und H-7; 5,00s, OCH_₂0; weitere Peaks korrekt; 0 = Phenyl; ' IE (k, PiIm): 4,73, Azid; 5,61, ß-Lactam; 5,78, Ester; MS: 423, 395, 230, 175, 194, 121, 104.

Beispiel 17

p-Methoxybenzyl-3—(4-pyridyl) -Tgt-aminodecephalosporanat 117 mg p-Methoxybenzyl-3-( 4-pyridyl) ^dl-azidodecephalosporanat werden innerhall) von 1 Std. in 10 ml Benzol bei einem Druck von etwa 2,8 Atmosphären (40 psi) in Gegenwart von 100 mg PtO₂ hydriert. Die Hydrierung wird dann zweimal mit frischem Katalysator wiederholt. Nach Filtration und Eindampfen des Filtrats erhält man p-Methoxybenzyl—3-( 4-pyridyl) -Tj^-aminodecephalo sporanat; IR {p, Film): 3,0, NH₂; 5,63, ß-Lactam; 5,76, Ester; MS: 397, 356, 341, 218, 175, 121.

Beispiel 18

p-Methoxvbenzyl-3-( 4-pyridyl) -7ot-( p-nitrobenzylidenamino) -decephalo sporanat

50 mg p-ltethoxybenzyl-3-( 4-pyridyl)-701-aminodecephalo sporanat werden 2 Stunden mit 99 mg p-Nitrobenzaldehyd in 10 ml Methylendichlorid, das 1 g MgSO₄ enthält, behandelt. Nach Filtration und Eindampfen des Filtrats erhält man p-Methoxybenzyl-3-(4-pyridyl)-Td-(p-nit robenzylidenamino) -d e c ephalo spo r anat.

- 68 - '

409821/1U6

Bei spi el 19

p-Methoxybenzyl-3-( 4-pyridyl) -7ß-( p-nitrobenzylidenamino) -decepha-Iosporanat

120 mg p^SIethoxybenzyl-3-( 4-pyridyl)-70t-(P-nitrotienzylidenamino )- -decephalosporanat in 20 ml Tetrahydrofuran werden bei -78⁰C unter Stickstoff in eine Lösung von 130 λ 2,3m Phenyllithium in 6 ml Tetrahydrofuran eingetragen. Man fügt 15 ml Dimethylformamid und anschließend 0,3 ml Essigsäure in 2 ml Tetrahydrofuran hinzu. Das Reaktionsgemisch wird auf 25⁰C erwärmt, mit Benzol verdünnt und sechsmal mit Wasser gewaschen. Die fünfte Waschflüssigkeit ist ein Phosphatpuffer mit einem p^-Wert von 8. Nach Trocknung über Magnesiumsulfat, Filtration und Eindampfen des Filtrats erhält man p- -Methoxybenzyl-3-( 4-pyridyl) -7ß-( p-nitrobenzylidenamino) -decepha-' losporanat in Form einer Mischung (1:1) mit p-Methoxybenzyl-3- -C 4-pyridyl) -7ol-( p-nitrobenzylidenamino) -decephalo sporanat.

Beispiel 20

p-Methoxybenzyl-3-( 4-pyridyl) -7ß-aminodecephalo sporanat Man versetzt 88 mg 2_s4-Dinitrophenylhydrazin-tosylat in 5 ml Äthanol mit 120.mg p-Methoxybenzyl-3-(4-pyridyl)-7ß-(p-nitrobenzylidenamino) -decephalosporanat in 0_s5 ml Methylendichlorid. Der Ansatz wird 30 Minuten gerührt und filtrierte Das Filtrat wird eingedampft, und der Rückstand mit einer wäßrigen Phosphat lösung (p„ 8) versetzt. Man extrahiert dreimal mit Äther,-trocknet über Magnesiumsulfat und filtriert. Beim Eindampfen des Filtrats erhält man p-Methoxybenzyl-3-( 4-pyridyl) -7ß-aminodecephalosporanat.

B e i s pi el 21 - . .

p-Methoxybenzyl-3-( 4-pyridyl) -7ß-( 2-thi enylac et amido) -decephalosporanat ' . :

52 mg p-aiethoxybenzyl-3-( 4-pyridyl) -7ß-aminodecephalosporanat werden 15 Minuten mit 50 ml Pyridin und 25 mg 2-Thienyläeetylchlorid in 10 ml Methylendichlorid behandelte Dann verdünnt man axt Benzolp wäscht mit Wasser;, trocknet über Magnesiumsulfat und filtrierte Beim Eindampfen des Filtrats erhält man p-Methoxybenzyl- -3-( 4-pyridyl) -7ß-( 2-thienylacetamido) -decephalosporanat _v welches ehromatographisch an Eieselgel mit Äthylacetat gereinigt wird_o

i? A ίΠι O ^ 'S ß <3 <1 0 (fr

4Uel©2i/1 Ί 46

Beispiel 22

Natrium-3-( 4-pyridyl) -7ß-( 2-thienylac etamido) -dec e-phalo sporanat 20 mg reines p-Methoxybenzyl-3-(4-pyridyl)-7ß-(2-thienylacetamido)- -decephalosporanat werden 5 Minuten mit 0,5 ml Anisol und 2,5 ml Trifluoressigsäure behandelt. Nach Absaugen unter Hochvakuum spült man mit Anisol und trägt die Mischung in 5 ml Wasser, die 20 mg Natriumbicarbonat enthalten, ein. Man wäscht mit Äthylacetat, säuert bis zu einem Pg-Wert von 2 an und extrahiert in Äthylacetat. Das Natrium-3-( 4-pyridyl)-7ß-( 2-thienylacetamido) -decephalosporanat wird schließlich in 2 ml Wasser, die 3 mg Natriumbicarbonat enthalten, rückextraftiert und durch Lyophilisierung isoliert.

Beispiel 23 Thiazo1-4-carbonylchlorid

0,97 g Thiazol-4-carbonsäure werden 90 Minuten mit 10 ml Thionylchlorid unter Rückfluß gekocht. Man dampft anschließend ein, spült mit Benzol und kristallisiert aus 50 ml Hexan um. Dabei erhält man Thiazol-4-carbonylchlorid vom Fp. 85°Cj
IR (jVL, CHCl₃): 5,64|
NMR (S _f CDCl₃): 9,01d, 8,59d, J=2.

Beispiel 24 4-Thi azo lyld iazomethylke ton
4,01 g Thiazol-4-carbonylchlorid werden 30 Minuten bei O⁰C und danach 30 Minuten bei 25⁰C mit 680 ml 0,1 nCH^ in Äther behandelt. Nach dem Abdampfen des Lösungsmittels verbleibt gelbes, festes 4-Thiazolyldiazomethylketon, das man zweimal aus Äther umkristallisiert (Fp. 82⁰C);

NMR (<f, CDGl₃): 6,49s, COCHN₂I 8,27d, 8,85d, J=2 Hz, H-2 und H-5; IR (CUCIyM-)t 4,72, C=N=N; 6,17, Carbonyl.

Beispiel 25 4-Thiazolylc3ilormetliylketoii

0,1 g 4-Thiazoljldiazomethylketon werden in 1 ml Äthanol bei 0 C einige Sekunden mit Chlorwasserstoffgas behandelt. Beim Verdünnen mit Äther und Ankratzen bildet: sich ein voluminöser weißer Niederschlags der abfiltriert _f dreimal mit Äther gewaschen und in Wasser ■ .- - 70 -

409821/1U6

aufgenommen wird. Man stellt den Pg-Wert mit KpHPO* auf 7 ein und extrahiert dreimal mit Äther. Die Ätherlösung wird über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingedampft. Datei erhält man 77 mg 4-Thiazolylehlormethylketon;
IR (CHCl₃): 5,85/1 i
NMR (6, CDCl₃): 4,95d, J=1, CH₂Cl; 8,4m, 8,95m, J=I, H-2 und H-5.

Beispiel 26

p-?.!ethoxybenzyl-c(-( S-2-OXO-2- &-thiazolylJ -äthylthioimidato)- -diäthylpho sphonoacetat

-Ein Gemisch von 2,55 g N-thioformamido-^-aminodiäthylphosphonoacetat, 1,1 g 4-Thiazolylehlormethylketon, 2,82 g K₂CO₃ und 65 ml Aceton wird 1 Stunde unter Stickstoff gerührt, filtriert, eingedampft und an 170 g Kieselgel chromätographiert₉ wobei man mit Äther/Aceton (4:1) eluiert. Man erhält 1,24 g reines p-Methoxy-* benzyl-o(,-(S-2-oxo-2- [4-thiazolyl] -äthylthioimidatο) -diäthylphosphonoacetat;

IR (A, CHCl,): 5,74, Ester; 5,90, Keton; NMR (St CDCl₃): 1,3t, 4,1m, J=5, P(OC₂H₅T₂; 3,81s, OCH₃; 4,64s, SCH₂; 5,15s, OCH₂; 6,78, 6,95, 7,13, 7,27, C₅H₄; 8,45, 8,51, SCH=N; 8,3m, 8,9m, J= 1, Thiazol H-2 und H-5.

Beispiel 27

p-&Iethoxybenzyl~-5-( 4-thiazolyl) -6(H)-1,3-thiazin-4-car'boxylat p-Methoxy"benzyl-oi-(S-2-oxo -2- [4-thiazolyl·] -äthylthio imidat ο ) -diäthylpho sphonoacetat wird ohne chromatographische Reinigung in p-Methoxybenzyl-5-( 4-thiazolyl) -6 (H) -1,3-thiazin-4-carböxylat übergeführt. Die Ausgangsverbindung wird zweimal mit wasserfreiem Benzol gespült und 5 Minuten mit 57 mg ölfreiem BTaH in 35 ml Äthylenglykoldimethyläther behandelt. Man verdünnt mit Benzol und wäscht mit Wasser. Wach Trocknung über Magnesiumsulfat, Filtration und Eindampfen des Piltrats erhält man 1,105.g eines Öls, welches anschließend kristallisiert. Die Kristalle werden mit Benzol/Cyclohexan gewaschen und aus demselben lösungsmittel umkristallisiert. Dabei erhält man reines p-Methoxybenzyl-5-( 4-thiazolyl) -6(H) -1.·,3- ■ -thiazin—4-carboxylat vom Pp. 134°C; .

KMR (S, CDCl₃): 3,84s, OCH₃; 5,22s, OCH₂; 8,43s, TMazin SCH=N;

- 71 -

• 409821/1U6

1₅ 303 T

weitere Peaks korrekt;

MS: 346, 301, 210, 182, 137, 121.

Beispiel 28

p-Methoxybenzyl-3-( 4-thiazolyl) ^nt-azidodecephalo sporanat 87 mg p-Methoxybenzyl-5-( 4-thiazolyl)-6(H)-1,3-thiazin-4-carboxylat in 3 ml Methylendichlorid werden bei O⁰C unter Stickstoff mit 87λ Triäthylamin in 3 ml Methylendichlorid und anschließend mit 33 X Azidoacetylchlorid in 3 ml Methylendichlorid versetzt· Der Ansatz wird 5 weitere Minuten gerührt, mit Benzol verdünnt, mit einer wäßrigen Phosphatlösung (pg 3), Wasser und einer weiteren Phosphatlösung (pjj 8) gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und filtriert. Beim Eindampfen des Filtrats erhält man 71 mg p-Methoxy— benzyl-3-( 4-thiazolyl) -T^-azidodecephalosporanat;λ = 10~"^ ml; NMR (ί, CDCl₃): 4,68d, 4,72d, J=2 Hz, H-6 und H-7; 5,19s, OCH₂;' weitere Peaks korrekt;

IR Cd, Film): 4,72, Azid; 5,61, ß-Lactam; 5,77, Ester; MS: 429, 401, 265, 236.

Beispiel 29

p-Methoxybenzyl-3-( 4-thiazolyl) -7oC-aminodecephalo sporanat 485 mg p-3£ethoxybenzyl-3-( 4-thiazolyl) -T^-azidodecephalo sporanat werden bei einem Druck von etwa 2,8 Atmosphären (40 psi) in 50 ml Benzol innerhalb von 2 Stunden mit Hilfe von 400 mg PtO₂ und anschließend 30 Minuten mit Hilfe von weiteren 400 mg Katalysator hydriert. Der Katalysator wird durch Supercel/Kieselgel (1:1) abfiltriert und mit Äthylacetat ausgewaschen. Beim Eindampfen des Filtrats erhält man 254 mg p-Methoxybens;yl-3-( 4-thiazolyl)-Ib/- -aminodec ephalo sporanat.

IR ü/L, Film): 5,64, ß-Lactam; 5,76, Ester; NMR (S, CDCl₃): 2,25, NH₂; 4,3Od, 4,6Od, J=2, H-6 und H-7; weitere Peaks korrekt;

MS: 403, 347, 210, 181, 121.

- 72 -409821/1 U6

Vl

Beispiel 30

p-Methoxybenzyl-3-( 4-thiazolyl) -ifal-Cp-nitrobenzylidenamino) -decephalo sporanat

380 mg p-Methoxybenzyl-3~( 4-thiazolyl)-ToC-aminodecephalosporanat _w werden 2 Stunden mit 750 mg p-Nitrobenzaldehyd in 60 ml Methylendichlorid (enthaltend 2 g MgSO₄) behandelt. Nach Filtration und '. Eindampfen des Filtrats erhält man 420 mg eines rohen, kristallinen, Produkts, welches nach Umkristallisation aus Benzol/Cyclohexan 220 mg reines p-Methoxybenzyl-3-( 4-thiazolyl)-70(-(p-nitrobenzylidenamino)-decephalosporanat ergibtJ IR-CiI, Nujol): 5,58, ß-Lactamj' 5,76, Ester?

NMR (ί, CDGl₃): 5,03d, 5,06d, J=2, H-6 und.H-7i 5,26s, OCH₂J 8,58 OgNCgH/JKsN; weitere Peaks korrekt. ·

' Beispiel 31

p-Methoxybenzyl-3-( 4-thiazolyl) -7ß-( p-nitrobenzylid enamino) -decephalo sporanat

40 mg p-Methoxybenzyl-3-( 4-thiazolyl) -1üC-( p-nitrobenzylidenamino) -decephalosporanat in 7 ml Tetrahydrofuran werden bei -78 C unter Stickstoff in eine lösung von 10 λ Triäthylamin und 33 λ 2,3m Phenyllithium in 2 ml Tetrahydrofuran eingetragen. Man fügt 5 ml Dimethylformamid und anschließend 0,1 ml Essigsäure in 0,5 ml Tetrahydrofuran hinzu. Das Reaktionsgemisch wird auf 25⁰C erwärmt, mit Benzol verdünnt und sechsmal mit Wasser gewaschen? die zweite Waschflüssigkeit ist eine Phoephatlösung mit einem p_ß-Wert von 3, während die fünfte Waschflüssigkeit einen p_H-Wert von 8 aufweist. Nach Trocknung über Magnesiumsulfat und Eindampfen erhält man ein Gemisch (1?1) von p-Methoxybenzyl-3-( 4-thiazolyl)-7ß-(p-nitrobenzylidenamino)-decephalosporanat und p-Methoxybenzyl-3-(4-thiazolyl) -7d-(p-nitrobenzylidenamino)-decephalosporanat. Das IR-Spektrum entspricht jenem von p-Methoxybenzyl-3-(4-thiazolyl)- -*jCl-(p-nitrobenzylidenamino)-decephalosporanat. Das Kernresonanzspektrum (δ, CDClO zeigt p-Methoxybenzyl-3-( 4-thiazolyl) -"fct- -(p-nitrobenzylidenamino)-decephalosporanat und p-Methoxybenzyl- -3_( 4-thiazolyl)-7ß-( p-nitrobenzylidenamino) -decephalo sporanat: 5,15d, J=5, 6-Hi 5,55q, J=5, 1,5, 7-Hj 8,72, O₂NC₆H₄CH=N; weitere Peaks korrekt.

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Beispiel 32

iHffethoxybenzyl-3-( 4-thiazolyl) -Tß-aminodecephalosporanat 180 mg p-Äethoxybenzyl-3-( 4-thiazolyl) -7ß-( p-nitrobenzylidenamino ) -decephalosporanat in 0,5 ml Methylendichlorid werden in 131 mg 2_f4-Dinitrophenylhydrazin-tosylat in.5 ml Äthanol eingetragen. Man rührt den Ansatz 10 Minuten, filtriert ihn dann und dampft das Filtrat ein. Der Rückstand wird mit wäßriger PhosphatlSsung (p„ 8) versetzt. Man extrahiert dreimal mit Äther. Nach Trocknung über Magnesiumsulfat, Filtration und Eindampfen des Filtrats verbleibt p-MetlioxybenzyX-3-( 4-th.iazolyl) -7ß-aminodec ephalo sporanat; IR ψ, Film): 3,0, NH₂J 5,65, ß-Lactam; 5,80, Ester; HMR (O, CDCl₃): 4,73<1, 4,98d, J=5, H-6 und H-7; weitere Peaks korrekt.

Beispiel 33

p-Methoxybenzyl-3-( 4-thiazolyl) -7ß-( 2-thienylac etamido ) -decepha-Iosporanat

p-Methoxybenzyl-3-( 4-thiazolyl)^ß-aminodecephalosporanat wird 15 Minuten mit 35 λ Pyridin und 1? mg 2-Thienylacetylchlorid in 5 ml Methylendichlorid behandelt. Anschließend verdünnt man mit Benzol, wäscht mit wäßriger Phosphat lösung (p^ 3), Wasser und einer weiteren wäßrigen Phosphatlösung (pg 8), trocknet über Magnesiumsulfat und filtriert. Beim Eindampfen des Filtrats erhält an 39 mg rohes p-Methoxybenzyl-3-(4-thiazolyl) -7ß-( 2-thienylacetamido)-decephalosporanat. Das reine p-Methoxybenzyl-3-(4-thiaaolyl)-7ß-(2-thienylacetamido)-decephalosporanat wird durch Chromatographie an 2 g Kieselgel bei Elution mit Chloroform/Kthylacetat (10:1) erhalten;

IR ψ₉ Film): 3,0, NHj 5,62, ß-Lactamj 5,80, Ester? 5,95, Amid; HMR (ό, CDCl₃): 3,90s, CH₂CONH; 5,O8d, J=5, 6-H; 5,894 von d, Je5_f 10, 7-Hj 6,38d, J=10, NH; weitere Peaks korrekt; ■3: 527.

Beispiel 34

Hatriua-3-(4-thiazolyl)-7ß-(2-thienylac etamido)-decephalo sporanat p-Methoxybenzyl-3-( 4-thiazolyl) -7ß-( 2-thienylac etamido) -decepha-Iosporanat in 0,5 ml Anisol werden 4 Minuten bei 0⁰C mit 2,5 ml

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T-S

Trifluoressigsäure behandelt· Der Ansatz wird dann bei 30⁰C einem. Hochvakuum ausgesetzt. Man fügt weiteres Anisol hinzu und saugt nochmals ab. Der Rückstand wird mit einigen ml Wasser, welches 15 mg Natriumbicarbonat enthält, versetzt und zweimal mit Äthylacetat extrahiert. Der wäßrige Anteil wird anschließend mit Phosphorsäure bis zu einem p_H-Wert von 2 angesäuert und mit Äthylacetat extrahiert. Der letztere Äthylacetat extrakt wird sodann mit Wasser, welches 4 mg Natriumbicarbonat enthält, gewaschen. Die Lyophilisierung des wäßrigen Extrakts ergibt 22 mg Natrium-3-( 4-thiazolyl) -7ß- -(2-thienylaeetamido)-decephalosporanat; MS des Methylesters (erhalten mit CH₂N₂): 421. ·

Beispiel 35

Kalium-dl-3-( 1 -hydroxyäthyl) -7ß-( 2-thienylacetamido )-3-cephem-4- -carboxylat

Eine Losung 0,43 g Natrium-dl-3-(1-acetoxyäthyl)-7ß-(2-thienylacetamido )-3-cephem-4-carboxylat in 13 ml wäßriger Citrusacetylesterase wird in ein thermostatisiertes Bad (3O⁰C) gegeben und bei dieser Temperatur gerührt. Der p„-Wert der Lösung wird auf 6,7 eingestellt und durch Zugabe von 1 η Natronlauge bei 6,7 + 0,1 gehalten. Wenn man die Basenzugabe verlangsamt, kommt die Reaktion zum Stillstand. Das Gemisch wird auf Raumtemperatur gebracht, mit 4,5. g gepulvertem Natriumchlorid versetzt und gerührt. Die erhaltene dünne Suspension wird mit 20 ml Äthylacetat .überschichtet und mit 6 η Salzsäure bis zu einem Pg-Wert von 2,3 angesäuert. Man trennt die Schichten voneinander und extrahiert den wäßrigen Anteil mit weiterem (5 ml) Äthylacetat. Die vereinigte Äthylacetatlösung wird mit 50 ml Wasser urrterschichtet und mit. Hilfe von 6 η Kalilauge unter raschem Rühren auf einen p„-Wert von 5,4 eingestellt. Die wäßrige Phase wird abgetrennt, einem Hochvakuum unterworfen und lyophilisiert. Man erhält dabei Kalium-dl-3-( 1-hydroxyäthyl)-7ß-(2-thienylacetamido )- ^-cephem^-carboxylat.

Beispiel 36

dl-3-( 1 -Carbamoyloxyäthyl) -7ß-( 2-thienylacetamido ) -3-ce-phem-4— carbonsäure

Eine Lösung von 0,33 g dl-3-(1-Hydroxyäthyl)-7ß-(2-thienylacet-

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amido)-B-cephem^-carboxylat in 10 ml eines 0,05 m Phosphatpuffers (Pjj 7) wird mit 10 ml Äthylacetat vermischt und mit Hilfe eines Eisbades gekühlt. Der p^-Wert der wäßrigen Schicht wird mittels 2,5 η Salzsäure auf 2,2 eingestellt. Die wäßrige Schicht wird abgetrennt und mit weiterem Äthylacetat (2 χ 10 ml) extrahiert. Die vereinigte Äthylacetatlösung wird mit gesättigter Natriumchloridlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und filtriert. Beim Eindampfen des Piltrats im Vakuum erhält man dl-3-(1-Hydroxyäthyl) -7ß-( 2-thienylac et amido) -S-cephenM-carbonsäure.

Man löst die vorgenannte freie Säure in 15 ml wasserfreiem Tetrahydrofuran und kühlt die Lösung unter Stickstoff auf -40⁰C ab. Dann fügt man 0,09 ml Chlor sulfonyl! so cyanat hinzu. Die dabei erhaltene Lösung wird 4 Stunden "bei -4O⁰C gerührt und anschließend bei dieser Temperatur mit 1,5 ml eines 0,1 m Phosphatpuffers (p^ 7) versetzt. Das !Tetrahydrofuran wird dann im Vakuum abgedampft und der nasse Rückstand mit 10 ml eines 0,1 m Phosphatpuffers (p_H 7) und 10 ml Äthylacetat versetzt. Man rührt die Mischung 1 Stunde bei Raumtemperatur und stellt sie dann mittels 2,5 η Natronlauge und Trinatriumphosphat auf einen Pg-Wert von 8 ein. Der organische Anteil wird abgetrennt und mit 10 ml eines 0,1 m Phosphatpuffers (Ptj T) extrahiert. Die vereinigte wäßrige lösung wird mit 2,5 η Salzsäure bis zu einem p_H~Wert von 2,3 angesäuert und zweimal mit jeweils 20 ml Äthylacetat extrahiert. Die organischen Extrakte werden mit gesättigter Natriumchloridlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und filtriert. Beim Eindampfen des Filtrats im Vakuum erhält man dl-3-(1-Carbamoyloxyäthyl)— 7ß—(2—thienylacetamido)-3-cephem-4-earbonsäure.

Eine Teilmenge der vorgenannten Säure wird in Wasser, das 1,05 Äquivalente Natriumbicarbonat enthält, gelöst. Die erhaltene Lösung wird einmal mit Äthylacetat gewaschen, zur Entfernung des gelösten Äthylacetats einem Vakuum unterworfen und lyophilisiert. Dabei erhält man Natrium-dl-3-(1-carbamoyloxyäthyl)-7ß-(2-thienylacetamido)-3-cephem-4-carboxylat.

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Beispiel 37

dl- .W 1-Acetoxyäthyl) ^ß-amino^-cephenM-carbonsäure lan löst 0,6 g p-Methoxybenzyl-dl-3-(1-acetoxyäthyl)-7ß-amino-3- -cephem-4-earboxylat in 2 ml Anisol und kühlt die lösung auf O⁰C all· Anschließend fügt man 10 ml eiskalte Trifluoressigsäure hinzu und hält die entstehende Lösung 10 Minuten bei O⁰C. Dann wird die Trifluoressigsäure im Vakuum bei O⁰C abgedampft; man erwärmt dann unter Beibehaltung des Vakuums auf 30⁰C, um das überschüssige Anisol zu entfernen. Me erhaltene gummiartige Substanz wird einer Verteilung zwischen Wasser und Äthylacetat unterworfen. Der wäßrige Anteil wird abgetrennt und auf einen prr-Wert von 7 eingestellt, um die*"dl-3-(1-Acetoxyäthyl)-7ß-amino-3-cephem-4-carbonsäure zur Ausfällung zu bringen.

Beispiel 38

dl-7ß-AminQ-3-äthyl-3-ceT>hem-4-carbon3äure Bine Lösung von 0,23 g dl-3-(1-Acetoxyäthyl)~7ß-amino-3-cephem-4- -carbonsäure in 3,5 ml Wasser, welche 0,14 g Natriumbicarbonat enthält, wird bei einem Druck von etwa 2,8 Atmosphären (40 psi) über 5jS Palladium auf Bariumsulfat (0,88 g) hydriert. Der Katalysator wird unter Absaugen abfiltriert und mit 0,5 ml 5?&iger wäßriger Natriumbicarbonatlösung ausgewaschen. Das Filtrat wird mit der Waschflüssigkeit vereinigt. Man verdünnt dann mit 2 ml 6 η Salzsäure, fügt 0,3 g Aktivkohle hinzu und filtriert. Das klare · Piltrat wird mit Hilfe eines Eisbades abgekühlt und mit 2 η Natronlauge auf einen p_H-Wert von 3»8 eingestellt, wobei die dl-7ß-Hlmina-3-äthyl-3-cephem-4-carbonsäure ausfällt.

Beispiel 39

dl-7ß-(D-2-tert. -Butoxycarboxamido-2-phenylacetamido) -3-äthyl-3- -cephem-4-carbonsäure

Bine Lösung von 126 mg D^-tert.-Butoxycarboxamido^-phenylessigsäure und 70/1,1 Triäthylamin in 2 ml wasserfreiem Tetrahydrofuran wird bei -10⁰C in einer. Stickstoff atmosphäre gerührt. Dann fügt wen 65/CLChlorameisensäureisobutylester hinzu und rührt die Mischung 15 Minuten, bei -10⁰C. Während dieser Zeitspanne wird eine Lösung von TriäthylajimK)nium--dl-7ß-ainino-3-äthyl-3rcephem-4-carboxylat

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hergestellt, indem man 70 Al Triäthylamin unter Rühren in eine eiskalte Suspension von 114 mg dl-7ß-Amino~3-äthyl-3-cephem-4-carbonsäure in 2 ml 50^igem wäßrigem Tetrahydrofuran einträgt. Die kalte Salzlösung wird dann unter Rühren in.die lösung des gemischten Anhydrids eingetragen. Man rührt die erhaltene Mischung 1 Stunde bei O⁰C und anschließend 1 Stunde bei Raumtemperatur. Der nach dem Abdampfen des Tetrahydrofurans im Vakuum verbleibende Rückstand wird einer Verteilung zwischen 3 ml Wasser und 1 ml Äthylacetat unterworfen. Der wäßrige Anteil wird abgetrennt, mit Hilfe eines Bisbades abgekühlt, mit 3 ml Äthylacetat überschichtet und mit 2,5 η Salzsäure bis zu einem p_H~Wert von 3 angesäuert. Man trennt die Schichten voneinander und extrahiert den wäßrigen Anteil mit weiterem (2 ml) Äthylacetat. Die vereinigten Äthylacetatextrakte werden mit Wasser und Natriumchloridlb'sung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und filtriert. Beim Eindampfen des Piltrats im Vakuum erhält man dl-7ß-(D-2-tert.-Butoxycarboxamido-2-phenyiacetamido)-3-äthyl-3-c ephem-4-carbonsäure.

Beispiel 40

dl-7ß-CD-2-Amino-2-phenylacetamido)-3-äthyl-3-cephem-4-carbonsäure 100 mg dl-Tß-CD^-tert.-Butoxycarboxamido-a-phenylacetamido)^- -äthyl-3-cephem-4-carbonsäure werden in 1 ml eiskalter Trifluoressigsäure gelöst. Man rührt die Lösung bei 5⁰C bis zum Aufhören der Gasentwicklung und gießt sie dann in wasserfreien Äther ein, tun das Trifluoressigsäuresalz der Titelverbindung auszufällen. Das Salz wird in 0,5 ml Wasser gelöst und die Lösung mit einer 25#igen Lösung von Amberlite LA-1 (Acetatform) in 1 ml Methylisobutylketon versetzt. Nach einstündigem Rühren und Kühlen wird die ausgefallene dl-7ß-(D-2-Amino-2-phenylac et amido) -3-äthyl-3-c ephem-4-carbonsäure isoliert, mit Wasser und Methylisobutylketon gewaschen und im Vakuum getrocknet.

Beispiel 41

p-Methoxybenzyl-dl-3-( 1 -acetoxyäthyl) -7ß-( p-nitrobenzvlidenamino) -^HBethylthio^-cephem^-carboxylat

Bine Lösung von 1,08 g p-Methoxybenzyl-dl-3-(1-aceto3cy*thyl)-7i3(- -(p-nltrobenzylidenamino)-3-cephem-4-carboxylat in 30 si wmeeer-

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freiem Tetrahydrofuran wird gerührt und auf -78⁰C abgekühlt, wobei man in einer Stickstoff atmosphäre arbeitet. Dann fügt man 0,87 ml einer 2,3 m Lösung von Phenyllithium in Benzol/Ä'ther (7:3) hinzu, wobei sich das tiefblaue Anion bildet. Man rührt eine weitere Minute und setzt dann tropfenweise innerhalb von 4 Minuten 35 ml wasserfreies Dimethylformamid zu. Anschließend werden 0,17 g frisch zubereitetes Methylsulfenylchlorid in 5 ml Tetrahydrofuran innerhalb von einer Minute zugetropft. Man rührt das Reaktionsgemisch weitere 2 Minuten bei -78⁰C und läßt es dann sich innerhalb von 15 Minuten auf Raumtemperatur erwärmen. Dann werden 500 ml Benzol zugesetzt. Man wäscht die sich bildende orangefarbene Lösung sechsmal mit jeweils 300 ml Wasser und anschließend mit gesättigter Natriumchloridlösung. Die zweite Waschflüssigkeit wird mit einem 1 m Phosphatpuffer (p_H 3) angesäuert, während man die fünfte Waschflüssigkeit mit 1 m Dikaliumhydrogenphosphat alkalisch macht. Die Benzollösung wird über Magnesiumsulfat getrocknet und filtriert. Beim Eindampfen des Filtrats im Vakuum erhält man ein öl* Dieses liefert durch Chromatographie an 35 g Kieselgel unter Verwendung von 5$ Äthylacetat in Chloroform als Slutionsmittel p-Methoxybenzyl-dl-3-( 1 -acetoxyäthyl) -7ß-(p-nitrobenzylidenamino) -7-methylthio—3-cephem-4-carboxylat.

Beispiel 42

p-Methoxybenzyl-dl-3-( 1 -acetoxyäthyl) -7ß-amino-7-methylthio-3- -c ephem-4-carboxylat .

Eine Mischung von 0,23 g 2,4-Dinitrophenylhydrazin und 0,22 g p-Toluolsulfonsäure-monohydrat in 5 ml Tetrahydrofuran wird 30 Minuten bei Raumtemperatur gerührt. Dann wird eine Lösung von 0j67 g p-Methoxybenzyl-dl-3-(-1 -acetoxyäthyl)-7ß-(p-nitrobenzylidenaaino)-7-methylthiö-3-cephem-4-carboxylat in 5 ml Tetrahydrofuran zugesetzt und die, erhaltene Mischung 60 Minuten bei Raumtemperatur gerührt. Dann wird das Gemisch filtriert. Das Filtrat wird im Vakuum eingeengt. Man verdünnt den Rückstand mit 2,5 ml 1 m D ikal ium hydro genpho sphatlÖ sung und 17,5 ml Wasser. Danach extrahiert man dreimal mit jeweils 20 ml Äther. Die vereinigten Extrakte werden mit Wasser und gesättigter Natriumchloridlösüng gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und filtriert. Beim Eindampfen im

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15 303 T

Yakotim erhält man. ■-7-aetnylthio -3-eephem-

Beispiel

3-(1-acetoxyäthyl)-7B-amino-

In Form eines orangefarbenen 43

p^ethoxybenzyl-dl-3-°( 1 -aeetoxyäthyl) -7ß-( 2-thienylacetamido) -7» -methylthio -3-c gpliem-4-carboxylat

0,45 ml Pyridin und 0,18 g 2-TM,enyla,eetylchlorid werden unter Rühren in eine eiskalte Lösung von Oj 51 g p-Methoxybenzyl-dl--3- -C i-aeetoxyäthyXl^i-amino^-methylthio^-cephem^-carboxylat in 15 ml wasserfreiem Hetnylendiclilorid eingetragen. Die erhaltene Lösung wird 15 Mimten in der Kälte gerührt und anschließend mit 100 ml Benzol verdünnt. Man wäscht die Benzallösung mit 2 Anteilen eines Phosphat puffers (ρ** 2), Wasser ₉ einem weiteren Phosphatpuffer (Pg 9) * nochmals Wasser und gesättigter Natriumchloridlösung. ' Anschließend trocknet man über Magnesiumsulfat und filtriert. Beim Eindampfen des FiItrats im Vakuum erhält man ein Öl. Dieses Rohprodukt wird durch Säulenehromatographie an 20 g Kieselgel gereinigt. Die Elution mit 20 $ Xthylacetat in Benzol liefert p-Methoxy-"benzyl-dl-3-C 1 -acetoxyäthyl) -7ß-( 2-thienylacet amido) -7-methylthio- -3-cepB.eIa-4-earboxylat.

Beispiel 44

3-( 1-aceto3cyäthyl)-7ß-( 2-thienylacetamido)-7-—c ephem-4-°carboxylat

0,52 g p-Methoxybenzyl-dl-3-(1-acetoxyäthyl)-7ß-(2-thienylacetamido)-7-methyltM©»'3-eepliem-4~carl3Oxylat werden in 10 ml Methanol gelost. Man rührt die Losung bei Raumtemperatur, versetzt sie mit 0,4 g Thallium!III)-nitrat-trih,ydrät in 5 ml Methanol und rührt die erhaltene Mischung 10 Minuten bei Raumtemperatur. Anschließend werden 0,23 g Natriumbicarbonat zugesetzt. Man fährt mit dem Rühren weitere 2 Minuten fort und filtriert die Mischung anschließend. Das PiItrat wird bei vermindertem Druck eingeengt und der Rückstand in Hethylendichlorid aufgenommen. Man filtriert die Salze ab. Das Filtrat wird mit Wasser, verdünnter wäßriger Dikaliumhydrogenphosphatlösung, nochmals Wasser und Natriumchloridlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und filtriert. Beim Eindampfen des

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Filtrats erhält man sin öliges Eiprodukt, dag man aar 15 g Kiesel-• gel unter Verwendung von 20 f Ithylaeetat in Benzol als Elutionsmittel chromate graphiert£ dabei erhält man p-fflethQxybenzyl-dl-3- -(1 -acetoxyäthyl) -7ß-( 2-thienylac@tamido) -7-methQ3ey-3=-e@ph@Hi-4- -carboxylat ·

• Beispiel 45

fll-3-( 1 -Acetoxyäthyl) -7ß-( 2-thienylacetamido) -T-methoxr-l-ce-pJiem- -■»4-carbonsäure .

6,5 ml eiskalte Trifluoressigsäure werden in eine kalt® Mischung v©n 292- mg p-Methoxybenzyl-dl~3-( 1 -aeetoxyäthyl) -7ß-( 2-thienylac.etamido)-7-metho3cy-3-e@phem-4-carboxylat und 1,3 ml Anisol eingetragen. Man macht das Gemisch durch Aufwirbeln homogen und hält es dann 5 Minuten bei O⁰C, Die Trifluoressigsäure wird im Vakuum bei O⁰O abgedampft} dann läßt man den Rückstand unter Beibehaltung des" Vakuums sich auf Haumtemperatur erwärmen· Die entstehende gummiartige Substanz wird in 40 ml -Wasser, das 0,44 g Natriumbicarbonat enthält, aufgenommen» Bann extrahiert man zweimal mit jeweils 20 ml Methylendichiorid. Die wäßrige Phase wird mit einem 1 m Phosphatpuffer (ρ™ 2) bis zu einem pg-Wert von 2_f6 angesäuert und dreimal mit jeweils 20 ml Athylacetat extrahiert. Die vereinigten Ithylacetatextrakte werden über Magnesiumsulfat getrocknet und filtriert. Beim Eindampfen des Filtrats im Vakuum erhält man dl-3- -Ci-Acetoxyäthyl)-7ß-(2-thienylacetamido5-7-metho3cy-3-c@phem-4- -carbonsäure.

Die vorgenannte freie Säure wird 10 Minuten mit 48 mg Natriumbicarbonat in 15 ml Wasser gerührt. Dann wäscht man zweimal mit jeweils 5 ml Äthylacetat und lybphilisiert die wäßrige Lösung. Dabei erhält man Natrium-dl-3~(1-acetoxyäthyl)-7ß-(2-thienylacetamido)-7-methoxy-3-cephem-4-carboxylat in Form eines grauweißen Pulvers.

Beispiel 46

Kalium-dl-3-( 1 -hydro xyäthyl) -7ß-( 2-thienylacetamido ) -7-methoxy- -3-cephem-4-carboxylat

In einem 3,Tml-Fläschchen, das mit einem Magnetrührer ausgerüstet

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ist, werden 95 mg Natritun-dl-3-(1-ae®tQxyäthyl)~7B-(2-thienylacetamido)-7-metho3cy-3~cephem-4-carTDoxylat und 2,6 ml Citrusaeetylesterase vorgelegt. Man gibt die erhaltene lösung in ein thermoatatisiertes Bad von 3O⁰C und rührt sie bei dieser Temperatur. Der Pg-Wert des Reaktionsgemisches wird durch Zugabe von 1 η Natronlauge bei 6,7 + 0,1 gehalten. Nach 15 Stunden wird die Basenzugabe stark verlangsamt, und die Reaktion kommt zum Stillstand, Man bringt das Reaktionsgemisch auf Raumtemperatur, fügt 900 mg gepulvertes Natriumchlorid hinzu und rührt das Gemische Di® erhaltene Suspension wird mit 4 ml Äthylaeetat tiberschichtete Man stellt den Pg-Wert dann unter kräftigem Rühren mit β η Salzsäure auf 2,1 ein» Man trennt die Schichten voneinander und extrahiert den wäßrigen Anteil mit weiterem Äthylacetat (2x1 ml). Die vereinigte Äthylasetatlusung wird mit Wasser (2x2 ml) rückgewaschen, anschließend nit 12,5 ml Wasser unterschichtet und kräftig gerührt, wobei man den pg-Wert mit 6 η Kalilauge auf 5,4 einstellt« Die wäßrige Phase wird abgetrennt, im Vakuum vom gelösten Äthylacetat befreit und lyopMlisiert. Dabei erhält man Kalium-dl-3-(1-hydroxyäthyl)-7ß- -C 2-thienylacetamido) -7-methoxy-3-c epkiem-4-carboxylat ·

Beispiel 47

dl-ff-f 1-Carbamoyloxyäthyl) -7ß-( 2-thienylacetamido ) -7-methoxy-^- -cephem-4-carbonsäure

61 mg Kalium-dl-3-( 1 -hydroxyäthyl)-7Q-(2-thienylacetamido)-7- -methoxy-3-cephem-4-carboxylat werden in 2 ml eines 0,05 m Phosphatpuffers (pjj 7) gelost« Die Lösung wird mit 2 ml Äthylacetat überschichtet· Man rührt die Mischung am Eisbad und stellt den Pg-Wert mit 2,5 η Salzsäure auf 2,2 ein. Die organische Schicht wird abgetrennt und mit Äthylacetat (2 χ 2 ml) extrahiert. Die vereinigte Äthylacetatlösung wird mit gesättigter Natriumchloridlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und filtriert. Beim Eindampfen des Piltrats im Vakuum erhält man dl-3-(1-Hydroxyäthyl) -7ß-( 2-thienylacetamido) ^-methoxy^-cephenM-carbonsäure.

Die vorgenannte freie Säure wird in 3 ml wasserfreiem Tetrahydrofuran gelöst. Man kühlt die Lösung unter Stickstoff auf -40⁰C ab. Dann fügt man 15ytil Chlorsulfonylisocyanat hinzu und rührt die

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56388

sowie 2 ml Athylaeetat versetzte Bi® SSisehung wird 1 Straäe

wird abgetrennt und mit 'it 7) gewa,seSiep._e Die Tertini l_s5 si Salsssämre Ms su <sin<sm

0,1 m Phosphat!© Schichten werden j 2 angesäuert und

wsMQken_s über Natriumsulfat getrocknet land filtrierte Beim Ein&arap-

des FiItrats im. Vakuum =( 2-tM.enyiae et amido) -7-methoxy·

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lime iostmg τ©η 0,2 | dl=7ß-(2-

Pyridin in O₉5 sal"Wasser wird mit 8Seiger Phosphorsäure Ms im. eisern pj,-Wert vom β_ρ5 angesäuert und 4 Stunden in einem thermosta· tisiertea Bad (6Q⁰Q) gerührt<= lach dem Abkühlen auf Raumtemperat^: ®3Etrahiert man die Iiösung mit 25 % Äm"b®rlit@ LA-1 (Äcetatfo'ns) in Methylisobiityllceton (6x1 ml) (MTberlite - ·lonenaustaüseherhari Danach wäscht man mit 1 ml Methylisobutylketon. Die wäßrige lösussg wird-über Nacht-bei 5⁰G gehalten; dabei fällt das dl-7ß-(2- . «■Thi©nylacetamido ) -3~( 1 -pyridiniiünäthyl) -3-c ephem-4-carboxylat aus.

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ff

Beispiel 49

dl-7ß-Amino-3- El -(1 -methyl-1,2.3,4-tetrazol-5-yl) -thioäthyLJ -3- -cephem-4-carbonsäure

Ein Gemisch -von 286 mg dl-7ß-Amino-3-(1-acetoxyätiiyl)-3-cephem-4- -carbonsäure in 2 ml Wasser und 1ml Aceton wird unter Rühren mit gesättigter Natriumbiearbonatlösung auf einen p^-Wert von 7»9 eingestellt. Man gibt die erhaltene Lösung in ein thermo statisiertes Bad (60⁰C) und versetzt sie mit einer Lösung von 174 mg 1-Methyl-1,2,3,4-tetrazol- -5-thiol in 1 ml Aceton· Bas Gemisch wird 3 Stunden mit Hilfe des Bades auf 60 C erwärmt und anschließend mit Hilfe eines Eisbades gekühlt. Danach stellt man den p-g-Wert mit 6 η Salzsäure auf 4 ein. Die kalte Mischung wird 30 Minuten gerührt. Dann trennt man den Niederschlag ab, wäscht ihn mit Aceton und trocknet ihn in Vakuum. Dabei erhält man dl-7ß-Amino-3-D-(1 -methyl-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-thioäthylJ-3-cephem-4-carbonsäure.

Beispiel 50

dl-7ß-(D-2-gormyloxy-2-phenylacetamido) -3- B -(1 -methyl-1«2,314- -tetrazol-5-yl)-thioäthyj -3-cephem-4-carbonsäure Eine Losung von 199 mg D^-Pormyloxy^-phenylacetylchlorid in 2 ml Aceton wird in eine eiskalte Lösung von 171 mg dl-7ß-Amino-3-[i- -(1-methyl-1,2,3»4-tetrazol-5-yl)-thioäthylj -3-eephem-4-carbonsäure und 250 mg Natriumbicarbonat in 5 ml Wasser und 5 ml Aceton eingetragen. Die erhaltene Mischung wird 1 Stunde in der Kälte und eine weitere Stunde bei Raumtemperatur gerührt. Sann dampft man das Aceton im Vakuum ab. Der wäßrige Rückstand wird mit 5 ml Wasser verdünnt, mit 10 ml Xthylacetat überschichtet, mit Hilfe eines Eisbades gekühlt und unter Rühren mit 6 η Salzsäure bis zu einem p_H~ Wert von 2 angesäuert. Der Äthylacetatanteil wird dann abgetrennt, mit Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und filtriert. Beim Eindampfen des Piltrats im Vakuum erhält man rohe dl-7ß-(D-2- -Pormyloxy-2-phenylacetamido) -3-D -(¹ -methyl-1,2,3,4-t etrazol-5- -yl) -thioäthylj -S-cephesM^-carbonsäur e.

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Beispiel 51

dl~7ß-(D-2-Hydroxy^2-phenylaeetamiao ) ~3-Ci-( 1-methyl-i _B 2,3.4-tetrazol-5-yl)-thioäthyl3-3°-cephem-4-carbonsäure Eine Lösung von 246 mg dl-7ß-(D-2-Formyloxy-2-plienylacetamido)-3- * [i-( 1-methyl-1 ,2,3,4-tQtrazal-5-yl) -thioäthyl] -3-cepheio-4-carbonsäure in 3 ml Wasser, das 250 mg Natriumbicarbonat enthält, wird 3 Stunden bei Baumtemperatur gerührt« Die Lösung wird dann mit 5 ml Wasser verdünnt, mit 5 ml Äthylacetat überschichtet, mit Hilfe eines Eisbades gekühlt, gerührt und mit 6 η Salzsäure bis zu einem Pg-Wert von 2 angesäuert· Die Xthylacetatphase wird abgetrennt, mit Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und filtriert. Beim Eindampfen des Filtrats im Vakuum erhält man dl-7ß^(D-2-Hydroxy-2-phenylacet amido ) -3- Jj -C 1 -methyl-1,2 , 3,4-tetrazol-5-yl) -thioäthylj ^-cephem^-carbonsäure·

Eine Probe der freien Säure in Äthanol wird mit 1 Äquivalent 1 η . methanolischer Natriumacetat lösung versetzt. Durch Rühren und Kühlen bildet sich eine Fällung von Natrium-dl-7ß-(D-2-hydroxy-2- -phenylacetamido)-3-|j-( f-methyl-i ,2,3_s4^tetrazol-5-yl)-thioäthyiI -^-cephem^-earboxylat. . ■

Beispiel 52

dl-7ß~[i-( ^H)-!PetΓazolyl·acetamidcJ -3-( 1 -acetoxyäthyl) -3-CePhCm^- —c arbonsäure ' _r

Eine eiskalte Lösung von 0,29 g dl-7ß-Amino-3-(1-acetoxyäthyl)-3- -cephem-4-carbonsäure und 0,27 g Natriumbicarbonat in 5 ml Wasser und 3,5 ml Aceton wird tropfenweise unter Rühren mit einer Lösung von 0,22 g 1-(1H)-!Detrazolylacetylchlorid in 1,8 ml Aceton versetzt. Das Reaktionsgemisch wird 1 Stunde bei 5⁰C und 2 weitere Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Jüan hält den p_H-Wert durch Zugabe von gesättigter Natriumbicarbonatlösung bei 7,5 + 0,5. Das Aceton wird dann im Vakuum abgedampft. Man säuert den wäßrigen Rückstand mit 6 η Salzsäure bis zu einem p_fl-Wert von 1 an und extrahiert dann mit Äthylacetat. Der Äthylacetat extrakt wird im Vakuum eingedampft? als Rückstand verbleibt dl-7ß-[j-(1H)-Tetra- , zolylacetamido] -3-( 1-acetoxyäthyl) ^-cephenM-carbonsäure.

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15 3O3Y 23563SB

Beispiel 53

41-7ß-Ei-( 1H) -Tetrazo lylacetamido] -3- D -( 5-methyl-1₁3.4-tMadiazol- -2-yl)-thioäthyll-3-cephem-4-carbonsäure Bine Lösung von 100 mg dl-Tfi-O-OHj-TetrazolylacetamidoJ^-Ci- -aoetoxyäthyl^-cephem-A-carbonsäure, 20 mg Natriuräbicarbonat und 38 mg 2-Mercapto-5-methyl-1,3,4-thiadiazol in 2 ml eines Phosphatpuffers (pg 6_f4) wird 3 Stunden bei 60⁰C gerührt und anschließend auf Raumtemperatur abgekühlt. Sann säuert man das ReektionsgemiscJt ait 6 η Salzsäure bis zu einem p_H~Wert. von 2 an und extrahiert hierauf mit Äthylacetat. Sie organische Schicht wird abgetrennt, nit Natriumchloridlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und filtriert. Beim Eindampfen des Piltrats im Vakuum erhält man di_7ß_ fi-( 1H) -Tetrazolylacetamidq] -3- C¹ -( 5-methyl-1,3,4-thiadiazol- -2-yl)-thioäthyl] -3-cephem-4-carbonsäure.

Eine Probe (45 mg) der vorgenannten Säure in 0,1 ml Wasser, das 9 mg Natriumbicarbonat enthält, wird mit 0,5 ml Äthanol verdüi: -,t. Man läßt die lösung über Nacht im Kühlschrank stehen; dabei fällt Natrium-dl-7ß- \\ -(1H) -tetrazo lylacetamidoj -3- 0 -C 5-methyl-1 ,3*4- -thiadiazol-2-yl)-thioäthyl]-3-cephem-4-carboxylat aus, das man isoliert und im Vakuum trocknet.

Nach den Methoden der vorangehenden Beispiele, wobei man jedoch an Stelle des Phenacylchlorids heterocyclisch substituierte Verbindungen der nachstehenden allgemeinen Formel verwendet

ZCOCH₂X

in der I ein Halogen-, wie Brom- oder Chloratom, bedeutet und Z einen heterocyclischen Rest, beispielsweise eine Puryl-, Thienyl-, Thiazolyl-, Thiadiazolyl-, Pyridyl-, Pyrazolyl- oder Tetrazolylgruppe, oder einen substituierten heterocyclischen Rest mit einem oder mehreren Alkyl-, Alkoxy-, Halogen-, Cyan-, Carboalkoxy- oder anderen Substituenten darstellt, erhält man in analoger Weise die entsprechende 3-heterocyclische Cephemverbindung.

Die in der vorstehend beschriebenen Weise hergestellten neuen dl-Cephemverbindungen können nach herkömmlichen Antipodenaufspaltungsmethoden in die Enantiomeren getrennt werden. Beispielsweise kann

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a?

■an sas den Estern durch Aufspaltung die freien Säuren erzeugen, welcMe alt optisch aktiven Basen -umgesetzt werden können. Die dabei erhaltenen diastereomeren Salze können durch fraktionierende Kristallisation aufgetrennt werden· Die optisch aktiven Salze können in andere Salze, wie Amin- und Metallsalze, welche sich für therapeutische Zwecke eignen, umgewandelt werden.

Die dl-Cephemverbindungen und die aktiven Enantiomere sind wert-Tolle antimikrobi eile Substanzen, welche gegenüber verschiedenen gram-positiven und gram-negativen Krankheitserregern, wie Bacillus subtilis, Salmonella sehottmuelleri und Proteus vulgaris, wirksam sind. Die freie Säure und insbesondere deren Salze, wie die Amin- waä. Metallsalze, speziell die Alkali- und Erdalkali salze, sind wertvolle Bakterizide, welche zur Entfernung von empfänglichen Krankheitserregern von medizinischen und zahnärztlichen Geräten, zur Äbtrenmaig von Mikroorganismen sowie für therapeutische Zwecke in der Human- und Veterinärmedizin eingesetzt werden können. Pur den letzteren Zweck eignen sich pliarmakologisch verträgliche Salze mit anorganischen und organischen Basen, beispielsweise jene, die üblicherweise zur Verabfolgung von Penicillinen und Cephalosporinen eingesetzt werden<> Als Salze eignen sich z_eB. Alkali- und Erdalkalisalze sowie Salze primärer, sekundärer und tertiärer Amine» Diese Salze können mit pharmakologisch verträglichen flüssigen und festen Grundstoffen zu geeigneten Einheitsdosen, wie Pillen, Tabletten, Kapseln, Suppositoryen, Sirups oder Elixiere, welche nach herkömmlichen Methoden herstellbar sind, kombiniert werden.

Bei den vorangehenden, Beispielen wird die Carboxylgruppe dadurch blockiert oder geschützt, daß man einenp-Methoxybenzylester herstellt. Die p-Methoxybenzylgruppe wird später entfernt, wobei man die freie Säure erhält. An Stelle des p-Methoxybenzylesters können auch andere Ester, z.B. Nieder-alkylester, wie der Methyl-, Äthyl- oder tert.-Butylester, substituierte Alkylester, wie der Phthalimide-. methyl- oder Succinimidoäthylester, Alkoxyalkylester, wie der ' Methoxymethylester, der Phenacylester, substituierte Phenacylester, wie.der p-Bromphenacylester, Aryloxyalkylester, wie der p-Methoxy-

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phenoxymethyleater, Aralkyloxyalkylester, wie der Benzyloxymethylester, substituierte Benzylester, wie der p-Nitrobenzyl-, 3,5-Mnitrobenzyl-, 2,4,6-Trimethylbenzyl- oder 3,5-Dichlor-4-hydroxybenzylester, der Benzhydrylester, substituierte Benzhydrylester, wie der p-iietlioxybenzhydrylester, oder ß-substituierte Äthylester, wie der2,2^-Tiichlorätliyl- oder 2-Methylthioäthylester, verwendet werden. Spezielle Beispiele für andere geeignete Ausgangsverbindungen sind somit der Trichloräthyl-, Benzhydryl-, tert.-Butyl-, Methyl-, Phenacyl-, p-Bromphenacyl-, Methoxymethyl- und p-Methoxyphenoxyäthylester der Q^-Thiofοrmami dodiäthylphosphonoessigsäure.

Des in den vorangehenden Beispielen als Ausgangsverbindung verwendete p-Methoxybenzyl-oi-thioformamidodiäthylphosphonoacetat kann wie folgt hergestellt werden. Eine Lösung von Benzylamin in wasserfreiem Äthanol wird mit 37$iger wäßriger Formaldehydlösung (1 MoVMoI) versetzt. Das Reaktionsgemisch wird 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das bei der Umsetzung entstehende 1 ,3,5—Tribenzyl—sym— -hexahydrotriazin wird durch Extraktion mit Petroläther isoliert.

lach dem Eindampfen des Extrakts erhält man ein Produkt vom Fp. 48-5O°C · Dieses Produkt wird mit etwa 3 Mo3/Mol Diäthylphosphit 6 Stunden auf 10O⁰C erhitzt. Das dabei erhaltene Umsetzungsprodukt wird an Kieselgel unter Verwendung von 3 # Methanol in Methylendichlorid als Elutionsmittel chromatographiert. Nach der Abdampfung des Lösungsmittels erhält man Diäthyl-N-benzylaminomethylphosphonat in Form einer hellgelben, beweglichen Flüssigkeit. Die Hydrierung dieses Produkts in wasserfreiem Äthanol, welches eine geringe Menge BCl enthält, in Gegenwart eines Palladium-Aktivkohle-Katalysators ergibt Diäthylaminomethylphosphonat-hydrochlorid, welches durch Eindampfen der filtrierten Hydriermischung gewonnen wird. Das Hydro Chlorid wird in Chloroform mit Ammoniak umgesetzt. Die dabei erhaltene Lösung wird filtriert und eingedampft, wobei man Diäthylaninomethylphosphonat erhält. Diese Verbindung wird am Eisbad mit Benzaldehyd versetzt; dabei bildet sich Diäthyl-N-benzylidenamino-■ethylphosphonat, das man durch Verdünnen des Reaktionsgemisches ■it wasserfreiem Äthanol und Eindampfen der filtrierten Lösung gewinnt. Das Produkt wird dann weiter gereinigt, indem man es in wasserfreiem Benzol löst und das Lösungsmittel abdampft. Das

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Produkt fällt in Form eines hellgelben Öls an. Eine Lösung des Diäthyl-N-benzylidenaminomethylphosphonats in wasserfreiem Tetrahydrofuran wird dann mit einer Phenyllithiumlösung und hierauf langsam mit Chlorameisensäure-p-methoxybenzylester versetzt. Nach etwa 20 Minuten wird das Lösungsmittel bei vermindertem Druck abgedampft und der ölige Rückstand zwischen Äthyläther und einem Phosphatpuffer (p_H 3) aufgeteilt. Nach dem Abdampfen des Äthyläthers erhält man p-Methoxybenzyl-N-benzyliden-ci-aminodiäthylphosphonoacetat, welches man durch Chromatographie über Kieselgel unter Verwendung von Äthylacetat/Äthyläther (1:3) als Elutionsmittel reinigt. Das dabei erhaltene Produkt wird in Äthylätherlösung mit p-Toluolsulfonsäure zur Umsetzung gebracht. Das Reaktionsgemisch versetzt man mit Cyclohexan. Man dekantiert die Lösungsmittelschicht und wäscht die erhaltene Ölschicht neuerlich mit Äthyläther/Cyclohexan (2:1). Der ölige Rückstand wird in einer· wäßrigen Dikaliumphosphatlösung gelöst (pg-Wert etwa 7)· Durch Extraktion der Lösung mit Methylendichlorid erhält man eine Lösung des Produkts in diesem Lösungsmittel, welche beim Eindampfen p- -Methoxybenzyl-d-aminodiäthylphosphonoacetat ergibt. Durch Umsetzung dieser Verbindung mit Äthylthioformiat in Gegenwart von flüssigem Schwefelwasserstoff bei niedrigen Temperaturen erhält man rohes p-Methoxybenzyl-oJ.-thioformamidodiäthylphosphonoacetat. Diese Verbindung wird über Kieselgel gereinigt, wobei man das Produkt mit Äthylacetat eluiert. . · ■

Man erkennt, daß man andere Ester der Ausgangsverbindung in derselben Weise herstellen kann, wenn man in der vorstehend beschriebenen Synthese den passenden Chlorameisensäureester einsetzt.

Zu den pharmakoiogisch verträglichen Salzen, welche nach herkömmlichen Methoden aus den erfindungsgemäßen Verbindungen herstellbar sind, gehören (a) Salze anorganischer Basen, wie Alkalisalze, z.B. Natrium- und Kaliumsalze, sowie Erdalkalisalze, z.B. Calciumsalze, und Salze organischer Basen, wie die Salze von Procain und J)ibenzyläthylendiamin, sowie (b) Säureadditionssalze, z.B. mit Chlorwasserstoff-, Bromwasserstoff-, Schwefel-, Salpeter-, Phosphor_r, Toluol-p-sulfon- und Methansulfonsäure. Außer als Salze können die

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neuen erfindungsgemäßen Cephalosporine auch in Form von Estern (beispielsweise der vorstehend beschriebenen Ester) verabfolgt werden. Beispiele für geeignete Ester sind jene von Alkoholen, Phenolen, Mercaptanen und Thiophenolen mit der allgemeinen Formel -COXH^, wobei R^ den Rest eines Alkohols oder Thiols darstellt, beispielsweise eine Methyl-, Äthyl- oder tert.-Butylgruppe, einen substituierten Alkylrest, wie eine Phthalimidomethyl- oder Succinimidomethylgruppe, eine Phenacyl- oder substituierte Phenacylgruppe, z.B. eine p-Bromphenaoylgruppe, eine ß-substituierte Äthylgruppe, z.B. eine 2,2,2-Trichloräthyl-, 2-(p-Methylphenyl)-äthyl-, 2-(p-Methylphenyl)-sulfonyläthyl-=, 2-Methylaminoäthyl-, 2-Chloräthyl- oder 2-Bromäthylgruppe, eine Benzyl- oder substituierte Benzylgrup'pe, p-Nitrobenzyl-₉ p-Methoxybenzyl-, 3,5-Dintrobenzyl-, 2,4,6-Trimethylbenzyl- oder 3»5-Bichl©:p-4-hydroxybenzylgruppe, die Benzhydryl- oder eine substituierte Benzhydrylgruppe, z.B. die ' p-Methoxybenzhydrylgruppe, einen Acylosyalkylrest, z.B. die Acet— oxymethyl- oder Pivaloyloxymethylgruppe, einen Alkoxyrest·, z.B. die Methoxymethylgruppe, oder einen monoeyelischen Arylrest, z.B. die Phenylgruppe oder eine substituierte Phenylgruppe, z.B. die p-Nitrophenyl- oder 3$5-Dinitrop^enylgruppe. Geeignet sind auch die Alkenylester, z.B» der 3-Butan-i-ylester. Die vorgenannten Ester können leicht nach herkömmlichen Verfahren hergestellt werden.

Die neuen Cephalosporine sind wertvolle Antibiotika, welche gegenüber verschiedenen gram-positiven und gram-negativen Bakterien aktiv sind und demgemäß in der Human- und Veterinärmedizin eingesetzt werden können. Sie Verbindungen der Erfindung eignen sich somit als antibakterielle Arzneistoffe für die Behandlung von durch gram-positive oder gram-negative Bakterien verursachten Infektionen; man kann sie beispielsweise gegen Staphylococcus aureus (penicillinresistent), Escherichia coli, Elebsiella pneumoniae, Salmonella typhosa, Pseudomonas und Bacterium proteus einsetzen. Die erfindungsgemäßen antibakteriellen Cephalosporine können ferner als Zusätze für Tiernahrungsmittel, zur Konservierung von Nahrungsmitteln und als Desinfektionsmittel verwendet werden. Man kann sie beispielsweise in Form wäßriger Präparate, die Konzentrationen von 0,00001 bis 0,01 $ Antibiotikum (bezogen auf die Lösung) (0,1-100 ppm)

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aufweisen, zur Zerstörung und Inhibierung äes . Wachstums von schädliehen Bakterien auf medizinischen und sgahnär^tliehen Geräten anwenieri. Ferner kann man die erfindungsgemäßen Cephalosporine als Bakterizide für industrielle Zwecke einsetzen^ z.B. zur Inhibierung des Wachstums von Schadbakterien in Anstrichmitteln auf Wassergrundlage sowie im Abwasser von Papierfabriken.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen können allein oder in Kombination als Wirkstoff in den verschiedensten Arzneimitteln eingesetzt werden. Man kann die Antibiotika und deren entsprechende Salze in Form von Kapseln, Tabletten, Pulvern oder flüssigen Präparaten, wie Lösungen, Suspensionen oder Elixiere, anwenden. Sie Verabfolgung kann oral, intravenös oder intramuskulär erfolgen.

Die Arzneimittel werden vorzugsweise in einer Form dargeboten, die sich für die Aufnahme durch den Magen-Darm-Trakt eignet. Oral zu verabreichende Tabletten und Kapseln können als Einheitsdosen vorliegen und herkömmliche Grundstoffe enthalten, z.B. Bindemittel, wie Sirup, Gummiarabikum, Gelatine,Sorbit, Traganth oder Polyvinylpyrrolidon, Füllstoffe, wie Milchzucker, andere Zuckerarten, Maisstärke, Calciumphosphat, Sorbit oder Glycin, Gleitmittel, wie Magnesiumstearat, Talk, Polyäthylenglykol oder Siliciumdioxid, Sprengmittel, wie Kartoffelstärke, oder verträgliche Netzmittel, wie Natriumlaurylsulfat. Die Tabletten können nach herkömmlichen Methoden mit einem Überzug versehen werden. Die oral verabfolgbaren flüssigen Präparate können z.B. als wäßrige oder ölige Suspensionen, Lösungen, Emulsionen, Sirups oder Elixiere vorliegen oder als trockene Produkte dargeboten werden, aus welchen das jeweilige Präparat vor der Verwendung mit Hilfe von Wasser oder einem anderen geeigneten Medium zubereitet wird. Solche flüssigen Präparate kön-,nen herkömmliche Zusatzstoffe enthalten, z.B„ Suspendiermittel, wie Sorbitsirup, Methylcellulose, Glucose/Zuckersirup, Gelatine, Hydroxyäthyicellulose, Carboxymethylcellulose, Aluminiumstearatgel oder hydrierte Speisefette, Emulgiermittel, wie Lecithin, Sorbitanmonooleat oder Gummiarabikum, nicht-wäßrige Medien, z.B. Speiseöle, wie Mandelöl, fraktioniertes Kokosnußöl, ölige Ester, Propylenglykol oder Äthanol, und Konservierungsmittel, wie p-Hydroxybenzoe-

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aäuremethyl- oder -propylester oder Sorbinsäure. Die Suppositorien enthalten herkömmliche Suppositoriengrundmassai, wie Kakaobutter oder andere Glyceride.

Sie Injektionspräparate können als Einheitsdosen in Ampullen oder in Mehrfachdosen-Behältern mit einem zugesetzten Konservierungsmittel dargeboten werden. Die Präparate können in Form von Suspensionen, Lösungen oder Emulsionen in öligen oder wäßrigen Medien vorliegen und Zusatzstoffe, wie Suspendiermittel, Stabilisatoren und/oder Dispergiermittel,enthalten. Andererseits kann der Wirkstoff auch in Pulverform vorliegen, aus welchem das jeweilige Präparat vor der Verwendung mit Hilfe eines geeigneten Mediums, wie sterilem, pyrogenfreiem Wasser, hergestellt wird.

Die Arzneipräparate können auch in einer dafür geeigneten Form ' erzeugt werden, daß sie durch die Schleimhäute der Nase und des Rachens oder die Bronchialgewebe aufgenommen werden. Sie weisen dann zweckmäßig die Form von Pulvern oder flüssigen Sprüh- oder Inhalationsmitteln, Lutschtabletten (Pastillen), Halstinkturen u.a. auf. Für die medizinische Behandlung der Augen oder Ohren können die Präparate in Form von einzelnen Kapseln, in flüssiger oder halbfester Form oder als Tropfen angewendet werden. Lokal anzuwendende Präparate können mit Hilfe von hydrophoben oder hydrophilen Grundstoffen als Salben, Cremen, Lotionen, !Tinkturen, Pulver u.a. zubereitet werden.

Außer einem Träger können die erfindungsgemäßen Arzneimittel weitere Bestandteile enthalten, z.B. Stabilisatoren, Bindemittel, Oxidationsinhibitoren, Konservierungsmittel, Gleitmittel, Suspendiermittel, Viskositätsverbesserer oder Geschmackskorrigentien. Man kann den Präparaten ferner andere Wirkstoffe einverleiben, um für ein breiteres Spektrum an antibiotischer Aktivität zu sorgen.

Für die Veterinärmedizin können die Arzneimittel z.B. als intramammäre Präparate zubereitet werden, wobei man entweder Grundstoffe mit Langzeitwirkung oder solche, die eine rasche Freigabe bewirken, verwendet.

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Die zu verabfolgende Dosis hängt in hohem Maße vom Zustand des zu behandelnden Patienten, von dessen Körpergewicht und dem Weg und der Häufigkeit der Verabfolgung ab. Die parenterale Verabfolgungsmethode wird für allgemeine Infektionen, die orale Methode für Darminfektionen bevorzugt· Eine tägliche orale Dosis besteht im "allgemeinen aus etwa 15 bis etwa 600 mg Wirkstoff/kg Körpergewicht für eine oder mehrere Anwendungen pro Tag. Die bevorzugte tägliche Dosis liegt im Bereich von etwa 80 bis 120 mg Wirkstoff/kg Körpergewicht j ^und zwar allgemein wie auch gesondert für den Erwachsenen.

Die erfindungsgemäßen Arzneimittel können in Form verschiedenartiger Einheitsdosen, beispielsweise in fester oder flüssiger oral verträglicher Form, verabfolgt werden. Die Präparate können pro Einheitsdosis (flüssig oder fest) 0,1 bis 99 $ Wirkstoff enthalten. Der bevorzugte Wirkstoffanteil liegt im Bereich von etwa 10 bis^j 60 j5. Das Präparat enthält im allgemeinen etwa 15 mg bis etwa 1500 mg Wirkstoff, bezogen auf das Gesamtgewicht des Präparates; die bevorzugte Dosis liegt jedoch im Bereich iron etwa 250 bis 1000 mg. Bei der parenteralen Verabreichung besteht die Einheitsdosis gewöhnlich in einer Lösung der reinen Verbindung in schwach angesäuertem, sterilem Wasser, oder sie liegt als lösliches Pulver vor, aus dem später eine Lösung erzeugt werden kann. Nachstehend sind typische Rezepturen für bestimmte Produkte wiedergegeben.

Eine derartige Einheitsdosis erhält man dadurch, daß man 120 mg Natrium-3-(1-acetoxyäthyl)-7ß-(2-thienylacetamido)-3-cephem-4- -carboxylat mit 20 mg Milchzucker und 5 mg Magnesiumstearat vermischt und die Mischung (145 mg) in eine Gelatinekapsel Nr. 3 einfüllt. Dementsprechend kann man andere Dosen in Gelatinekapseln Nr. 3 eingeben, indem man eine größere Menge des Wirkstoffs und einen geringeren Anteil Milchzucker verwendet. Wenn es erforderlich sein sollte, mehr als 145 mg der Bestandteile zusammenzumischen, kann man auch größere Kapseln sowie gepreßte Tabletten und Pillen herstellen. Die nachstehenden Beispiele erläutern die. Herstellung von pharmazeutischen Präparaten:

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125	mg
6	mg
192	mg
190	mg

Tabletten ³ ^ Anteil pro Tablette

Natrium-dl-3-phenyl~7ß-(2-tkienylscetamido)-

-3-cephem-4-carboxylat Maisstärke, U.S.P.*) Dicalciumphosphat Milchzucker, U.S.P.*)

*) U.S.P. = Pharmakopöe der V.St.A.

Der Wirkstoff wird mit dem Dicalciumphosphat, dem Milchzucker und etwa der Hälfte der Maisstärke vermischt. Man granuliert die Mischung mit 15^iger Maisstärkepaste (6 mg) und nimmt eine Rohsiebung vor. Dann trocknet man das Präparat bei 45⁰C und siebt es neuerlich durch Siebe Nr. 16. Hierauf fügt man die restliche Maisstärke sowie das Magnesiumstearat hinzu und preßt die Mischung zu Tabletten mit einem Durchmesser von etwa 1,3 cm (etwa 0,5 Zoll) und einem Gewicht von jeweils 800 mg.

Parenteral verabfolgbare lösung Ampulle;

Natrium-3-(4-pyridyl)-7ß-(2-thienylacetamido)- -decephalosporanat 500 mg

Verdünnungsmittel: steriles Wasser für Injektionszwecke 2 ml

Wenn man an Stelle der 500 mg des im. vorstehend en Beispiel verwendeten Decephalosporanats die äquivalente Menge Natrium-3-( 4-thiazolyl)-7ß-(2-thienylacetamido)-decephalpsporanat einsetzt, erhält man ebenfalls ein für die parenterale Verabfolgung geeignetes Präparat·

Augenlösung

3_( i-Carbamoyloxyäthyl-7ß-(2-thienylacetamido)- -3-cephem-4-carbonsäure . 100 mg

Hydroxypropylmethylcellulose 5 mg

steriles Wasser Rest auf 1 ml

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Ohrenlösung

7ß-(D-2-Andno-2-phenylacetanddo)-3-äthyl-3--ceph.em- -4-carbonsäure 100 mg

Benzalkoniumehlorid 0,1 ig

steriles Wasser Rest auf 1 ml

Salbe für lokale Anwendungszwecke
3-( 1 -Carbamoyloxyäthyl) -7ß-( 2-th.ienylac et amido) -7-methoxy~3-cepheni-4-carbonsäure 100 mg

Polyäthylenglykol 4000, U.S.P. 400 mg

Polyäthylenglykol 400, U.S.P. 1,0g

Der Wirkstoff in den obigen Präparaten kann allein oder in Kombination mit anderen biologisch aktiven Bestandteilen, beispielsweise anderen antibakteriellen Mitteln, wie Lincomycin, einem Penicillin, Streptomycin, Novobiocin, Gentamicin, Neomycin, Colistin und Kanamycin, oder mit anderen therapeutischen Mitteln, wie Probeneeid, verabfolgt werden.

-95-409821/1 U6

Claims (1)

1. Patentansprüche 1. Cephalosporinverbindungen der nachstehenden allgemeinen Formel

   oOH

   in der R. ein Wasserstoffatom oder einen Acylrest bedeutet, B ein Wasserstoffatom, eine Methyl- oder Me thoxy gruppe oder einen Rest -SR (wobei R ein Aryl- oder Nieder-alkylrest ist) darstellt

   und Υ ein Rest -CH-Rc oder ein Rest R* ist, wobei R,- einen gerad- oder verzweigtkettigen Cj_,-Alkylrest bedeutet, A ein Wasserstoff- oder Halogenatom oder eine Hydroxyl-, substituierte Hydroxyl-, Mercapto-, substituierte Mercapto-, Azido-, Cyan-, Amino-, N-substituierte Amino-, Acyloxy-, Carbamoyloxy-, substituierte 'Carbamoyloxy- oder quaternäre Ammoniumgruppe darstellt und R^f eine Phenyl- oder substituierte Phenylgruppe oder einen heterocyclischen oder substituierten heterocyclischen Rest darstellt,
   sowie die Salze und Ester dieser Verbindungen.

   2. Cephalosporinverbindungen nach Anspruch 1 mit der nachstehenden allgemeinen Formel

   COOH

   in der R. ein Wasserstoff atom oder einen von einer Carbonsäure abgeleiteten Acylrest bedeutet, B ein Wasserstoffatom oder eine Methoxygruppe darstellt, R,- ein gerad- oder verzweigtkettiger Cj_,-Alkylrest ist und A ein Wasserstoff- oder Halogenatom oder eine Mercapto-, Hydroxyl-, quaternäre Ammonium-, Acyloxy-, he-

   - 96 -

   40982 1/1U6

   terocyciiscb. substituierte Thio-, Carbamoyloxy- oder substituierte Carbamoyloxygruppe bedeutet,
   sowie die Salze und Ester dieser Verbindungen.

   3. Verbindungen nach Anspruch 2, in denen R* ein Wasserstoff atom
   ist.

   4· Verbindungen nach Anspruch 2, in denen E* ein von einer Carbonsäure abgeleiteter Acylrest ist.

   5» dl-Form der Verbindungen nach Anspruch 2.

   6«. Verbindungen nach Anspruch 2, in denen B ein Wasserstoff atom
   ist.

   7· Verbindungen nach Anspruch 2, in denen B eine Methoxygruppe ist.

   8. Verbindungen nach Anspruch 2, in denen A eine Acetoxygruppe ist«

   9. Verbindungen nach Anspruch 2, in denen A eine Carbamoyloxygrupist.

   10. Natrium-dl-3-( 1-acetoxyäthyl)-7ß-( 2-thienylacetamido)-3-cephem- -4-carboxylat gemäß Anspruch 8.

   11. 3_( 1 -pyridiniumäthyl)-7ß-( 2-thienylacetamido)-3-cephem-4-carbonsäure gemäß Anspruch 4.

   12. 3-( 1-Carbamoyloxyäthyl)-7-( 2-thienylacetamido)^-cephem^-
   -carbonsäure gemäß Anspruch 9.

   13. 3_/i _(5-Methyl-1,3,4-thiadiazol-2-yl) -thioäthyl7-7ß-( 1 -tetrazolylacetamido)-3-cephem-4-carbonsäure gemäß Anspruch 4·

   14. p-Methoxybenzyl-dl-3-( 1-acetoxyäthyl>-7ß-amino-3-cephem-4-
   -carboxylat gemäß Anspruch 3· .-

   -.97 _
   40982 1/1H6

   9*

   15. p-Methoxybenzyl-dl-3-( 1-aceto:xymethyl)-7ci-amino-3-cephem- -4-carboxylat gemäß Anspruch 3·

   16. Kalium-dl-3-( 1 -hydroxyäthyl) -7ß-( 2-thienylac et amido) -3- -cephem-4-carboxylat gemäß Anspruch 4.

   17. dl-7ß-Amino-3-äthyl-3-cephein-4-carbonsäure gemäß Anspruch

   18. dl~7ß-(D-2-Amino-2-phenylacetamido)-3-äthyl-3-cephem-4- -carbonsäure gemäß Anspruch 4.

   19. dl-3-(1-Acetoxyäthyl)-7ß-(2-thienylacetamido)-7-methoxy-3- -cephem-4-carbonsäure gemäß Anspruch 7«

   20. Kalium-dl-3-(1-hydroxyäthyl)-7ß-(2-thienylacetamido)-7- -methoxy^-cephem^-earboxylat gemäß Anspruch 7.

   21. dl-3-( 1 -Carbamoyloxyäthyl) -7ß-( 2-thienylacetamido) -7-methoxy- -3-cephem-4-carbonsäure gemäß Anspruch 7·

   22. dl-7ß-/l-(1H)-Tetrazolylacetamido/-3-(1-acetoxyäthyl)-3-cephem- -4-carbonsäure gemäß Anspruch 8·

   23. dl-7ß-Zi-(tH)-Tetrazolylacetamido7-3-/i-(5-methyl-1,3,4-thiadiazol-2-yl)-thioäthyl/-3-cephem-4-carl)onsäure gemäß Anspruch

   24. 7ß-(D-2-Hydroxy-2-phenylacetamido) -3-/i-( 1-methyl-1,2,3,4- -tetrazol-5-yl)-thioäthyl7-3-cephem-4-carbonsäure gemäß Anspruch 4.

   25. dl-7ß-Amino-3-Zl -(¹ -methyl-1,2,3,4-tetrazol-5-yl) -thioathyl/- -3-cephem-4-carbonsäure gemäß Anspruch 3.

   26. dl-7ß-(D-2-Hydroxy-2-phenylac et amido) -3-/^-( 1-methyl-1,2,3,4 -tetrazol-5-yl)-thioäthyl7-3-cephem-4-carbonsäure gemäß Anspruch 4.

   - 98 409821 /1U6

   27« Cephalosporinverbindungen nach. Anspruch. 1 mit der nachstehenden allgemeinen Formel

   in der R, ein Wasserstoff atom oder einen von einer Carbonsäure abgeleiteten Acylrest bedeutet, B ein Wasserstoffatom oder eine methoxygruppe darstellt und R¹ eine Phenyl- oder substituierte Phenylgruppe oder einen heterocyclischen oder substituierten heterocyclischen Rest bedeutet, wobei der heterocyclische Rest ein 5- oder ögliedriger Ring ist, welcher ein oder mehrere Schwefel-, Stickstoff- oder Sauerstoffatome e) enthält,
   sowie die Salze und Ester dieser Verbindungen.

   28; Verbindungen nach Anspruch 27, in denen R. ein Wasserstoffatom ist.

   29· Verbindungen nach Anspruch 27irdenen R. ein von einer Carbonsäure abgeleiteter Acylrest ist.

   30· dl-Porm der Verbindungen nach Anspruch 27.

   31. Verbindungen nach Anspruch 27, in denen R· eine Phenyl- oder substituierte Phenylgruppe ist.

   32. Verbindungen nach Anspruch 27, in denen R* ein heteroeyclischer oder substituierter heterocyclischer Rest ist.

   ° Natrium-dl—3-phenyl—7ß-( 2-thienylac et amido) -^-cephemH·— -carboxylat gemäß Anspruch 31·

   34. Natrium-dl-3-p-chlorphenyl-7ß-( 2-thienylacetamido)-3-cephem- -4-carboxylat gemäß Anspruch 31 ·

   - 99 4.0982 1/1

   35· ρ-Methoxybenzyl-dl—3-phenyl-7<z-amino—3-cephem-4-carboxylat gemäß Anspruch 31·

   36· p-Methoxybenzyl-dl^-phenyl^ß-amino^-eephem^-carboxylat gemäß Anspruch 31 ·

   · Natrium-dl - 3 - P -cyanphenyl-7ß-( 2-thienylacetamido) -3-c ephem- -4-carboxylat gemäß Anspruch 31 ·

   38. Natrium-dl-3-carbomethoxyphenyl-7ß-(2-thi enylac etamido) -3- -cephem-4-carboxylat gemäß Anspruch 31·

   · Natrium-dl-3-( 4-pyridyl) -7ß-( 2-thi enylac etamido) -3-c ephem-—4—carboxylat gemäß Anspruch 32.

   40· p-Methoxybenzyl-3-( 4-thiazolyl) -Tfc^-aminodecephalosporanat gemäß Anspruch 32·

   41. p-Methoxybenzyl—3-(4-thiazolyl)-7ß-aminodecephalosporanat gemäß Anspruch 32.

   42. Natrium-3-(4-thiazolyl)-7ß-(2-thienylacetamido)-decephalosporanat gemäß Anspruch 32·

   43· Verfahren zur Herstellung von 7-Acylamidoverbindungen der nachstehenden allgemeinen Formel

   H B

   Y COOR₁

   in der B ein Wasserstoffatom, eine Methyl- oder Methoxygruppe oder einen Rest -SR (wobei R ein Aryl- oder Nieder-alkylrest ist) bedeutet, R₁ eine blockierende Gruppe darstellt, R_A ein

   ¹ A ⁴

   ' I

   Acylrest ist und Y einen Rest -CH-R₅ oder R» bedeutet, wobei R₅ ein gerad- oder verzweigtkettiger C₁_,-Alkylrest ist und A ein Wasserstoff- oder Halogenatom oder eine Hydroxyl—, sub-

   - 100 40982 1/1146

   stituierte Hydroxyl-* Mercapto-, substituierte Mercapto-, Azido-, Cyan-, Amino-, N-substituierte Amino-, Acyloxy-, Carbamoyloxy-, substituierte Carbamoyloxy- oder quateraäre Ammoniumgruppe bedeutet,

   dadurch gekennzeichnet, daß man eine 3-Cepheraverbindung der nachstehenden allgemeinen Formel

   -Y

   COOR₁

   mit einem Acylierungsmittel, wobei dessen Acylrest dem Rest E. entspricht, zur Umsetzung bringt¹.

   Verfahren nach Anspruch 43» dadurch gekennzeichnet, daß die' 3-0ephemverbindung die nachstehende allgemeine Formel aufweist

   (f

   in der B ein Wasserstoff atom oder eine Methoxygruppe bedeutet, R» einen Nieder-alkanoylrest darstellt, R₁ eine blockierende Gruppe ist und R^ einen gerad- oder verzweigtkettigen C₁ ,- -Alkylrest bedeutet.

   45. Verfahren nach Anspruch 44, dadurch gekennzeichnet, daß die 3-Cephemverbindung eine dl-Mischung darstellt.

   46. Verfahren nach Anspruch 45, dadurch gekennzeichnet, daß R' eine Acetylgruppe ist.

   47. Verfahren nach Anspruch 45, dadurch gekennzeichnet, daß B ein Wasserstoffatom ist.

   48. Verfahren nach Anspruch 45, dadurch gekennzeichnet, daß das

   - 101 -

   409821/1U6

   Acylierungsmittel das Säurechlorid, gemischte Anhydrid oder Halogenid einer Carbonsäure mit der nachstehenden allgemeinen Formel ist

   R₃-CH-COOH
   2

   in der X ein Wasserstoff- oder Halogenatom oder eine geschützte Hydroxyl-, geschützte Amino-, Azido-, Guanidino-, Phosphono-_f Formyloxy-, Tetrazolyl-, Carboxyl-, Sulfo- oder Sulfaminogruppe bedeutet und R, eine Phenyl- oder substituierte Phenylgruppe, einen 5- oder ögliedrigen monocyclischen heterocyclischen Ring, welcher ein oder mehrere Sauerstoff-, Schwefeloder Stickstoffatomee) innerhalb des Rings enthält, oder einen substituierten heterocyclischen Rest darstellt.

   49· Verfahren nach Anspruch 48, dadurch gekennzeichnet, daß man p-Methoxybenzyl-3-( 1 -acetoxyäthyl) -TB-amino^-cephem^-carboxylat mit 2—Thienylacetylchlorid in Gegenwart von Pyridin zur entsprechenden 7ß-(2-Thienylacetamido) -verbindung umsetzt.

   50. Verfahren nach Anspruch 49» dadurch gekennzeichnet, daß die 3-Cephemverbindung ein dl-Gemisch ist.

   51. Verfahren nach. Anspruch. 43, dadurch gekennzeichnet, daß die 3-Cepheraverbindung die nachstehende allgemeine Formel aufweist

   in der R^f eine Phenyl- oder substituierte Phenylgruppe oder einen heterocyclischen oder substituierten heterocyclischen Rest bedeutet, B ein Wasserstoff atom oder eine Methoxygruppe darstellt und R« eine blockierende Gruppe ist.

   52. Verfahren nach Anspruch 51, dadurch gekennzeichnet, daß die

   - 102 -

   A09821/1U6

   3-Cephemverbindung ein dl-Gemisch ist. ·

   53* Verfahren nach Anspruch 51, dadurch gekennzeichnet, daß R* eine Phenyl- oder substituierte Phenylgruppe ist.

   54. Verfahren nach Anspruch 51, dadurch gekennzeichnet, daß R¹ ein heterocyclische^ oder substituierter hetero cyclischer Rest ist. .

   55. Verfahren nach Anspruch 51 j dadurch gekennzeichnet, daß das Acylierungsmittel das Säurechlorid, gemischte Anhydrid oder Halogenid der Carbonsäure der nachstehenden allgemeinen Formel ist

   R₃-CH-COOH
   X

   in der X ein Wasserstoff- oder Halogenatom oder eine geschützte Amino-, Guanidirio-, Azido-, Phosphono-, geschützte Hydroxyl-, Tetrazolyl-, Carboxyl-, SuIfο- oder Sülfaminogruppe bedeutet, R^ eine Phenyl- oder substituierte Phenylgruppe oder einen 5- oder 6gliedrigen mono cyclischen heterocyclischen Ring, welcher ein oder mehrere Sauerstoff-, Schwefel- oder Stickstoffatome e) innerhalb des Rings enthält, oder einen substituierten heterocyclischen Rest darstellt.

   56. Verfahren nach Anspruch 55, dadurch gekennzeichnet, daß man p-Methoxybenzyl-3-phenyl-7ß-amino-3-cephem-4-carboxylat mit 2-Thienylacetylchlorid in Gegenwart von Pyridin zur entsprechenden 7ß-(2-Thienylacetamido)-verbindung umsetzt.

   57· Verfahren nach Anspruch 56, dadurch gekennzeichnet, daß die 3-Cephemverbindung ein dl-Gemisch ist.

   58. Verfahren zur Abspaltung der blockierenden Gruppe einer 3-Cephemverbindung der nachstehenden allgemeinen Formel

   - 103 40982T/1146

   in der R. ein Wasserstoffatom oder einen von einer Carbonsäure abgeleiteten Acylrest bedeutet, B ein Wasserstoff atom, eine Methyl- oder Methoxygruppe oder einen Rest -SR (wobei H ein Aryl- oder Nieder-alkylrest ist) darstellt, R₁ eine

   blockierende Gruppe ist undY einen Rest -GH-Rc oder R* bedeutet, wobei Rc einen gerad- oder verzweigtkettigen Alkylrest darstellt, A ein Wasserstoff- oder Halogenatom oder eine Hydroxyl-, substituierte Hydroxyl-, Mercapto-, substituierte Mercapto-, Azido-, Cyan-, Amino-, N-substituierte Amino-, Acyloxy-, Carbamoyloxy-, substituierte Carbamoyloxy- oder quaternäre Ammoniumgruppe darstellt und R* eine Phenyl- oder substituierte Ph.enylgru.ppe oder ein heterocyclischer oder substituierter heterocyclischer Rest ist, wobei man die entsprechende Säure oder ein Salz dieser Säure erhält.

   59· Verfahren nach Anspruch 58 zur Abspaltung der blockierenden Gruppe eines 3-Cephemesters der nachstehenden allgemeinen Formel

   in der R, ein Wasserstoff atom oder einen von einer Carbonsäure abgeleiteten Acylrest bedeutet, R* einen Nieder-alka— noylrest darstellt, B ein Wasserstoff atom oder eine Methoxygruppe ist, Rc einen gerad- oder verzweigtkettigen Cι ,-Alkylrest bedeutet und R₁ eine blockierende Gruppe darstellt, wobei man die entsprechende Säure oder ein Salz dieser Säure erhält.

   - 104 -

   409821/1146

   Vor

   60. Verfahren nach. Anspruch 59, dadurch gekennzeichnet, daß die 3-Cephemverbindung ein dl-Gemiseh ist.

   61. Verfahren nach Anspruch 60, dadurch gekennzeichnet, daß man p-Methoxybenzyl-3-( 1 -acetoxyäthyl) -7ß-( 2-thienylacetamido) ^-cephem^-carboxylat mit Trifluoressigsäure in Gegenwart von Anisol zur freien Säure umsetzt.

   62. Verfahren nach Anspruch 58 zur Abspaltung der blockierenden Gruppe einer 3-Cephemverbindung der nachstehenden all-r

   ' gemeinen Formel

   in der R- ein Wasser stoff atom oder einen von einer Carbon-4

   säure abgeleiteten Acylrest bedeutet,. R* eine Phenyl- oder substituierte Phenylgruppe oder einen heterocyclischen oder substituierten heterocyclischen Rest darstellt, B ein Wasserstoff atom oder eine Methoxygruppe ist und R₁ eine blockierende Gruppe darstellt, wobei man die entsprechende Säure oder ein Salz dieser Säure erhält.

   63. Verfahren nach Anspruch 62, dadurch gekennzeichnet, daß die 3-Cephemverbindung ein dl-Gemisch ist.

   64. Verfahren nach.Anspruch 63, dadurch gekennzeichnet, daß man p-Methoxybenzyl-3-phenyl-7ß-( 2-thienylacetamido) -3-cephem-4- -carboxylat mit Trifluoressigsäure in Gegenwart von Anisol zur freien Säure umsetzt.

   . Verfahren zur Herstellung von dl^-Amino-3-cephem-verbindungen, dadurch gekennzeichnet, daß man einC^rThioformamidophosphonoacetat der nachstehenden allgemeinen Formel

   - 105 ■' 409821/1 146

   HC-N-CH

   in der R einen Alkyl- oder Arylrest bedeutet und R₁ eine blockierende Gruppe darstellt, in Gegenwart einer Base mit einer Verbindung der nachstehenden allgemeinen Formel

   Y-COCH₂X
   in der X ein Halogenatom oder eine SuIf onat estergruppe be-

   deutet und Y einen Rest -CH-Rc oder R* darstellt, wobei Rc ein gerad- pder verzweigtkettiger C₁ _.,-Alkylrest ist, A ein Wasserstoff- oder Halogenatom oder eine substituierte Hydroxyl··, substituierte Mercapto-, Azido-, Cyan-, N-substituierte Amiho- oder quatemäre Ammoniumgruppe darstellt und R^f eine Phenyl- oder substituierte Phenylgruppe oder einen heterocyclischen oder substituierten heterocyclischen Rest bedeutet, zu Verbindungen der nachstehenden allgemeinen Formel umsetzt

   diese Verbindungen in Gegenwart eines Säureakzeptors mit einem Azido ac etylchlo rid der nachstehenden allgemeinen Formel

   CH-COX* B

   in der X* ein Halogenatom oder eine Gruppe -OSO₂CF-, oder -OSOgCH-i bedeutet und B ein Wasserstoff atom, eine Methyl- oder Hethoxygruppe oder einen Rest -SR (wobei R ein Nieder-alkyl- oder ein Arylrest ist) darstellt, zu einer dX-Verbindung der nachstehenden allgemeinen Formel umsetzt

   . - 106 409821/T U6

   -Y

   COOR₁
   und diese Verbindung zur entsprechenden dl-7-Aminoverbindung reduziert.

   66. Verfahren nach Anspruch 65, dadurch gekennzeichnet, daß Y ein Rest der nachstehenden allgemeinen Formel ist

   OR·

   ι ■ -

   in der R* einen Nieder-alkanöylrest bedeutet und R- ein gerad- oder verzweigtkettiger C,,-Alkylrest ist.

   67· Verfahren nach Anspruch 66, dadurch gekennzeichnet, daß Y ein Rest R* ist, wobei R* eine Phenyl- oder substituierte Phenylgruppe oder einen heterocyclischen oder substituierten heterocyclischen Rest darstellt.

   68. Verbindungen mit der nachstehenden allgemeinen Formel

   COOR₁

   in der R₁ eine blockierende Gruppe darstellt und Y einen Rest A ¹

   -CH-Rc oder R* darstellt, wobei Rc ein gerad- oder verzweigtkettiger C-jo-Alkylrest ist, A ein, Wasserstoff- oder Halogenatom oder eine Hydroxyl-, substituierte Hydroxyl-, Mercapto-, substituierte Mercapto-, Azido-, Cyan-, Amino-, N-substituierte Amino-, quaternäre Ammonium-, Carbamoyloxy- oder substituierte Carbamoyloxygruppe bedeutet und R* eine Phenyl- oder substituierte Phenylgruppe oder ein heterocyclischer oder substituierter heterocyclischer Rest ist.

   - 107 -

   409 8 2 1 /1 U 6 ' '.

   69. Verbindungen nach Anspruch 68 mit der nachstehenden allge meinen Formel

   H₂

   ^0Bf

   in der R* ein Nieder-alkanoylrest mit bis zu 6 Kohlenstoffatomen ist, Rc einen gerad— oder verzweigtkettigen C_1--J-Alkylrest bedeutet und H₁ eine blockierende Gruppe darstellt.

   70. p-Methoxybenzyl-5-( 1 -acetoxyäthyl) -6 (H) -1₁3-thiazin-4-carboxylat gemäß Anspruch 69,

   71. Verbindungen nach Anspruch 68 mit der nachstehenden allgemeinen Formel

   COOR₁

   in der R^f eine Phenyl— oder substituierte Phenylgruppe oder einen heterocyclischen oder substituierten heterocyclischen Rest bedeutet und R^ eine blockierende Gruppe darstellt.

   72. p-Methoxybenzyl-5-phenyl-6(H)-1,3-thiazin-4-carboxylat gemäß Anspruch 71.

   · p-Methoxybenzyl-5-( 4-pyridyl) -6 (H)-1,3-thiazin-4-carboxylat gemäß Anspruch 71.

   74. Verbindungen mit der nachstehenden allgemeinen Formel

   COOR₁

   in der R₁ eine blockierende Gruppe bedeutet, B ein Wasser

   - 108 -

   409821 /1146

   303 Y ^

   stoffatom, eine Methyl- oder Methoxygruppe oder einen Rest -SR (wobei R ein Nieder-alkyl- oder Arylrest ist) darstellt

   und Y einen Rest -CH-R^ oder R* bedeutet, wobei R₅ einen gerad- oder verzweigtkettigen C₁ ,-Alkylrest darstellt, A ein Wasserstoff- oder Halogenatom oder eine Hydroxyl-, substituierte Hydroxyl-, Mercapto-, substituierte Mercapto-, Azido-, Cyan-, Amino-, N-sübstituierte Amino-, quäternäre Ammonium-, Carbamoyloxy- oder substituierte Carbamoyloxygruppe ist und R* eine Phenyl- oder substituierte Phenylgruppe oder einen heterocyclischen oder substituierten heterocyclischen Rest bedeutet.

   75. Verbindungen nach Anspruch 74 mit der nachstehenden allgemeinen Formel

   in der R* einen Nieder-alkanoylrest bedeutet, Rc einen gerad- oder verzweigtkettigen C₁ n-Alkylrest darstellt, R₁ eine blockierende Gruppe ist und B ein Wasserstoffatom bedeutet. ·

   76. p-Methoxybenzyl-dl-3-(1-aeetoxyäthyl)-TöL-azido-3-cephem-4- -carboxylat gemäß Anspruch 75.

   77. Verbindungen nach Anspruch 74 mit der nachstehenden allgemeinen Formel ,

   N, H

   COOR₁

   in der R* eine Phenyl- oder substituierte Phenylgruppe oder einen heterocyclischen oder substituierten heterocyclischen

   - 109 -

   V0 9821/1U6

   Best bedeutet, R₁ eine blockierende Gruppe darstellt und B H-

   78. p-Metlioxybenzyl-dl-3-plienyl-'Jü(_i-azido-3-cephem-4-carboxylat gemäß Anspruch 77. '

   79. p-Methoxybenzyl-dl-3-(4~pyridyl)-7ot-azido-3-cephem-4-carboxylat gemäß Anspruch. 77.

   80. Verbindungen der nachstehenden allgemeinen Formel

   in der H₁ eine blockierende Gruppe bedeutet, B ein Wasserstoff ¹ A

   atom darstellt und Y ein Rest -CH-Rc oder R» ist, wobei R^ einen gerad- oder verzweigtkettigen C₁ ,-Alkylrest bedeutet, A ein Wasserstoff- oder Halogenatom oder eine Hydroxyl-, substituierte Hydroxyl-, Mercapto-, substituierte Mercapto-, Azido-, Cyan-, Amino-, N-substituierte Amino-, Acyloxy-, Carba-.moyloxy-, substituierte Carbamoyloxy- oder quaternäre Ammoniumgruppe ist und R¹ eine Phenyl- oder substituierte Phenylgruppe oder einen heterocyclischen oder substituierten heterocyclischen Rest bedeutet.

   81. Verbindungen der nachstehenden allgemeinen Formel

   in der B eine Methyl- oder Methoxygruppe oder einen Rest -SR (wobei R ein Nieder-alkyl- oder ein Arylrest ist) bedeutet,

   R^ eine blockierende Gruppe darstellt und Y ein Rest -CH-Rc oder R¹ ist, wobei Rc einen gerad- oder verzweigtkettigen

   - 110 -

   409821/1 U6

   (^,,-Alkylrest bedeutet, A ein Wasserstoff- oder Halogenatom oder eine Hydroxyl-, substituierte Hydroxyl-, Mercapto-, substituierte Mercapto^, Azido-, Cyan-, Amino-, N-substituierte Amino*-, Acyloxy-, Carbamoyloxy-, substituierte Carbamoyloxyöder quaternäre Ammoniumgruppe ist und R' eine Phenyl- oder substituierte Phenylgruppe oder einen heterocyclischen oder substituierten heterocyclischen Rest bedeutet.

   82. Natrium-3-( 1 -acetoxyäthyl) -7ß-( 2-thienylac et amido) -3-cephem- -4-carboxylat gemäß Anspruch 8»

   83· dl-3-( 1 ^Carbamoyloxyäthyl) -7-( 2-thienylacetamido)-3-cephem- -4-^carbonsäure gemäß Anspruch 9·

   84. dl-3-Zi-(5-Methyl-1,3,4-thiadiazol-2-yl)-thioäthyl7-7ß-(1- ' -tetrazolylacetamido)-3-cephem--4-carbonsäure gemäß Anspruch

   85. p-Meth.oxybenzyl-3-( 1 -acetoxyäthyl)-Tß-amino-^-cephenM-carboxylat gemäß Anspruch. 3·

   86. p-Methoxyl3enzyi-3-(1-acetoxymethyl)-7o/-amino-3-cephem-4- -carboxylat gemäß Anspruch 3*

   87. Kalium-3-( 1 -hydroxyäthyl) -7ß-( 2-thienylacetamido) -3-cephem- -4-carboxylat gemäß Anspruch. 4.

   88. 7ß-Amino-3-äthyl-3-cepliem-4-carbonsäure gemäß Anspruch 3·

   89. 7ß-(D-2-Amino-2-phenylacetamido) -3-äthyl-3-cephem-4-carbonsäure gemäß Anspruch 4.

   90. 3-( 1-Acetoxyäthyl-7ß-(2-thienylacetamido) -7-methόxy-3-cephem- -4-carbonsäure gemäß Anspruch 7.

   91. Kalium-3-( 1 r-hydroxyäthyl) -7ß-( 2-thienylac et amido) -7-methoxy- -3-cephem-4-carboxylat gemäß Anspruch 7.

   - 111 A09821 /1146

   92. 3-( l-Carbamoyloxyäthyl) -7ß-( 2-thienylac et amido) -7-mettioxy-—3-cephem— 4-carbonsäure gemäß Anspruch 7·

   93. 7ß-/i -(1H) -tetrazolylac etamidq/-3-( 1 -ac etoxyäthyl) -3-c ephem- -4-carbonsäure gemäß Anspruch 8.

   94. 7ß-/i-(1H)-tetrazolylacetamido7-3-/"i-(5-methyl-1,3,4-thiadiazol-2-yl)-thioäthyl/-3-cephem-4-earbonsäure gemäß Anspruch 4·

   95- 7ß-Amino-3-/i-( 1 -methyl-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-thioäthy:/- -3-cephem-4-carbonsäure gemäß Anspruch 3·

   96. Natrium-3—phenyl-7ß-( 2-thienylacetamido ) -3-cephem-4-carboxylat gemäß Anspruch 31·

   97. Natrium-3-p-chlorphenyl-7ß-( 2-thienylacetamido) -3-cephem-4- -carboxylat gemäß Anspruch 31·

   98. p-Methoxybenzyl-3-phenyl-ⁱ/Ci-amino-3-cephem-4-carboxylat gemäß Anspruch 31·

   99· p-Methoxybenzyl-3-phenyl-7ß-amino-3-cephem-4-carboxylat gemäß Anspruch 31 ·

   1CX). Natrium- 3-p-cyanphenyl-7ß-(2-thienylacetamido)-3-cephem-4- -earboxylat gemäß Anspruch 31·

   101. Natrium-3-carbomethoxyphenyl-7ß-( 2-thienylacetamido) -3- -cephem-4-carboxylat gemäß Anspruch 31·

   102. Natrium-3-( 4-pyridyl) -7ß-( 2-thienylac etamido) -3-c ephem-4- -carboxylat gemäß Anspruch 32.

   103. Natrium-3-( 4-thiazolyl)-7ß-( 2-thienylacetamido)-decephalosporanat gemäß Anspruch 32.

   - 112 -

   409821/1U6

   te

   303 Y

   104· Verbindungen der nachstehenden allgemeinen Formel

   BH

   in der H₁ eine blockierende Gruppe bedeutet, B eine Methyloder Methoxygruppe oder einen Rest -SR (wobei R ein Niederalkyl- oder ein. Arylrest ist) darstellt und Y ein Rest

   -OH-

   1-R₅ oder R^f ist, wobei R- einen gerad- oder verzweigtkettigen C, ,-Alkylrest bedeutet, A ein Wasserstoff- oder Halogenatom oder eine Hydroxyl-, substituierte Hydroxyl-, Mercapto-, substituierte Mercapto-, Azido-, Cyan-, Amino-, N-substituierte Amino-, Acyloxy-, CarbamoylDxy-, substituierte Carbamoyloxy-oier quaternäre Ammoniumgruppe ist und R· eine Phenyl- oder substituierte Phenylgruppe oder einen heterocyclischen oder substituierten heterocyclischen Rest bedeutet.

   105· dl-3-(1-Pyridiniumäthyl)-7ß-(2-thienylacetamido)-3-cephem- -4-carbonsäure gemäß Anspruch 4·

   106. 7ß-(D-2-Hydroxy-2-phenylac et amido ) -3-/1 -(1 -methyl-1,2,3 _y 4- -tetrazol-5-yl)-thioäthyl/-3-cephem-4-carbonsäure gemäß Anspruch 4·

   107. dl-7ß-(2-Carboxy-3-thienylacetamido)-7-methoxy-3-(1-carbamoyloxyäthyl)-r3-cephem-4-carbonsäure gemäß Anspruch 7.

   tO8, 7ß-(2-Carboxy-3-thienylacetamido)-7-methoxy-3-(1-carbamoyloxyäthyl)-3-cephem-4-carbonsäure gemäß Anspruch 7·

   · dl-3-( 1 -Acetoxyäthyl) -7-( 2-thienylac et amido ) -7-methyl-3- -cephem-4-carbonsäure gemäß Anspruch 4.

   110. 3-( 1 -Acetoxyäthyl) -7-( 2-thienylacetamido ) ^-methyl^-cephem -4-carbonsäure gemäß Anspruch 4.

   - 113 -■409821/1 ΊΑ6

   15 303 Y

   111. dl-3-( 1 -Acetoxyäthyl) -7ß-( 2-thienylacetamido) -7-methylthio- -3—cephem-4-carbonsäure gemäß Anspruch 4·

   112. 3-( 1 -Acetoxyäthyl) -7ß-( 2-thienylacetamido)^- -cepliem-4-carbonsäure gemäß Anspruch. 4.

   - 114 -

   409821/1U6