DE19626020A1 - Neue synthetische Siderophore als Metalltransporteure, Indikatoren zur schnellen Analytik pathogener Bakterien, als Wachtumsfaktoren und als chemotherapeutische Mittel - Google Patents
Neue synthetische Siderophore als Metalltransporteure, Indikatoren zur schnellen Analytik pathogener Bakterien, als Wachtumsfaktoren und als chemotherapeutische MittelInfo
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Description
Die Erfindung betrifft neue synthetische Siderophore der allgemeinen Form:
Für eine Reihe von unter anderen auch stark pathogenen Bakterien stellen die
Verbindungen 1-R-5 äußerst effektive Eisentransportsysteme dar.
Die Erfindung betrifft ferner den Siderophor Myxochelin F (1) sowie das Verfahren zur
Herstellung (7 Stufen) seiner D,L-Form, das exemplarisch für alle weiteren hier
beanspruchten Siderophore aufgezeigt wird.
Stufe 1: Darstellung von (D,L)-2-Amino-heptandicarbonsäure-dimethylester-
Hydrochlorid (1a):
5.0 g (28.5 mmol) (D,L)-2-Amino-heptandicarbonsäure (Fa. Bachem, Schweiz), werden in
ca. 100 ml trockenem Methanol suspendiert. Unter Rühren wird solange HClg eingeleitet,
bis die Lösung klar wird. Über Nacht wird gerührt, danach i.V. eingeengt. Das Rohprodukt
wird über eine Flash-Chromatographie an Kieselgel Si60 (Merck, Darmstadt) mit
n-Hexan/Essigsäureethylester= 7 : 3 gereinigt. Es werden 4.78 g (70%) an 1a isoliert.
APCI-MS: m/z (%)= 520 (50) [M+H]⁺, 542 (6) [M+Na]⁺, 317 (100). - ¹³C-NMR (75.4 MHz, DMSO-d₆): δ= 23.7 (t, C-4), 23.9 (t, C-3), 29.6 (t, C-5), 33.0 (t, C-6), 51.4 (d, C-2), 51.9 und 52.9 (q, O-CH₃), 170.2, 173.5 (-C=O). -
Für C₉H₁₈NO₄Cl (MG 239.5)
ber. C 45.09; H 7.52; N 5.85; Cl 14.82,
gef. C 45.07; H 7.66; N 5.64; Cl 15.28.
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Stufe 2: Darstellung von (D,L)-2-Amino-[N-(2,3-Dibenzyloxi-benzoyl)]heptandicarbonsäure
dimethylester (1b):
1.5 g 2,3-Dibenzyloxibenzoesäure (4.5 mmol), hergestellt nach /2/, werden in einem Kolben mit Trockenrohr in 50 ml absolutem Dichlormethan gelöst und nacheinander mit 1.08 g 1a (4.5 mmol), 1.44 g TBTU (4.5 mmol) sowie mit 1.74 g (13.5 mmol, drei Equiv.) Hünig- Base versetzt. Es wird für 72 h gerührt.
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Zur Aufarbeitung wird die organische Phase mit 1) 50 ml 5 proz. HCl, 2) mit gesättigter
NaHCO₃-Lösung und 3) mit ges. NaCl-Lösung gewaschen. Sie wird mit MgSO₄ getrocknet
und i.V. eingeengt. Gereinigt wird mittels Flash-Chromatographie an Kieselgel Si60
(Merck, Darmstadt), Laufmittel: n-Hexan-Essigsäureethylester = 1 : 1. Ausbeute: 630 mg
(27%, als heller Sirup).
IR (KBr): ν = 3360, (NH), 2925 (CH), 1730 (Ester-CO), 1655 (Amid-I), 1560 cm-1 (Amid- II). - APCI-MS: m/z (%) = 520 (50) [M+H]⁺, 542 (6) [M+Na]⁺, 317 (100). - ¹³C-NMR (75.4 MHz, CDCl₃): δ = 24.5 (t, C-4), 25.1 (t, C-5), 31.7 (t, C-3), 33.7 (t, C- 6), 51.6 (d, C-2), 52.3 und 52.6 (q, O-CH₃), 71.4 und 76.3 (t, O-CH₂-Phenyl), 117.4, 123.5, 124.7 (d, arom. =C-H), 126.8 (s, arom. =C-), 128.0, 128.7, 128.9, 129.0 (je 2 × d, arom. =C-H), 128.5 und 128.8 (s, arom. =C-), 136.5 und 136.6 (s, arom. =C-), 147.2 und 152.0 (s, arom. =C-O), 165.2 (s, Amid-CO), 173.0 und 174.0 (Ester-CO). -
Für C₃₀H₃₃NO₇ (MG 519.60)
ber. C 69.35; H 6.40; N 2.70;
gef. C 68.70; H 6.31; N 3.01.
IR (KBr): ν = 3360, (NH), 2925 (CH), 1730 (Ester-CO), 1655 (Amid-I), 1560 cm-1 (Amid- II). - APCI-MS: m/z (%) = 520 (50) [M+H]⁺, 542 (6) [M+Na]⁺, 317 (100). - ¹³C-NMR (75.4 MHz, CDCl₃): δ = 24.5 (t, C-4), 25.1 (t, C-5), 31.7 (t, C-3), 33.7 (t, C- 6), 51.6 (d, C-2), 52.3 und 52.6 (q, O-CH₃), 71.4 und 76.3 (t, O-CH₂-Phenyl), 117.4, 123.5, 124.7 (d, arom. =C-H), 126.8 (s, arom. =C-), 128.0, 128.7, 128.9, 129.0 (je 2 × d, arom. =C-H), 128.5 und 128.8 (s, arom. =C-), 136.5 und 136.6 (s, arom. =C-), 147.2 und 152.0 (s, arom. =C-O), 165.2 (s, Amid-CO), 173.0 und 174.0 (Ester-CO). -
Für C₃₀H₃₃NO₇ (MG 519.60)
ber. C 69.35; H 6.40; N 2.70;
gef. C 68.70; H 6.31; N 3.01.
Stufe 3: Darstellung von (D,L)-2-Amino-[N-(2,3-Dibenzyloxi-benzoyl)]heptandicarbonsäure
diamid (1c):
630 mg (1.2 mmol) 1b werden in 150 ml Methanol gelöst, die Lösung wird auf -5°C abgekühlt. Für 3 h wird durch die gekühlte Lösung NH₃-Gas geleitet. Die noch kühle Lösung wird in einen Autoklaven gegeben, der verschlossen für 4 Tage bei RT belassen wird. Nach vorsichtigem Belüften wird die Lösung i.V. eingeengt, Ausbeute 470 mg (80%) kristallines 1c, Fp. 200-203 °C.
IR (KBr): ν= 3390 (NH), 3180 und 3250 (NH₂), 2850, 2930, 3020, 3050 (CH), 1640 und 1650 (Amid-I), 1520 cm¹ (Amid-II). - CI-MS (NH₃): m/z(%) =490(22) [M+H]⁺, 472 (18) [M-H₂O+H]⁺, 455 (55), 365 (100), 337 (56), 275 (81), 247 (48), 11(76). -
¹³C-NMR (75.4 MHz, DMSO-d₆): δ (ppm) = 24.8 (t, C-4), 24.9 (t, C-5), 32.3 (t, C-3), 34.9 (t, C-6), 52.6 (d, C-2), 70.4 und 75.1 (t, -O-CH₂-Phenyl), 116.6, 121.6, 124.3 (d, arom. =C-H), 128.2, 128.2, 128.6, 128.8 (je 2 × d, arom. =C-H), 136.7 und 136.8 (s, arom. =C-), 145.8 und 151.8 (s, arom. =C-O), 164.5 (s Amid-CO), 173.6 und 174.3 (Ester-CO). -
Für C₂₈H₃₁N₃O₅ (MG 489.58)
ber. C 69.69; H 6.38; N 8.58;
gef. C 68.50; H 6.29; N 8.48.
630 mg (1.2 mmol) 1b werden in 150 ml Methanol gelöst, die Lösung wird auf -5°C abgekühlt. Für 3 h wird durch die gekühlte Lösung NH₃-Gas geleitet. Die noch kühle Lösung wird in einen Autoklaven gegeben, der verschlossen für 4 Tage bei RT belassen wird. Nach vorsichtigem Belüften wird die Lösung i.V. eingeengt, Ausbeute 470 mg (80%) kristallines 1c, Fp. 200-203 °C.
IR (KBr): ν= 3390 (NH), 3180 und 3250 (NH₂), 2850, 2930, 3020, 3050 (CH), 1640 und 1650 (Amid-I), 1520 cm¹ (Amid-II). - CI-MS (NH₃): m/z(%) =490(22) [M+H]⁺, 472 (18) [M-H₂O+H]⁺, 455 (55), 365 (100), 337 (56), 275 (81), 247 (48), 11(76). -
¹³C-NMR (75.4 MHz, DMSO-d₆): δ (ppm) = 24.8 (t, C-4), 24.9 (t, C-5), 32.3 (t, C-3), 34.9 (t, C-6), 52.6 (d, C-2), 70.4 und 75.1 (t, -O-CH₂-Phenyl), 116.6, 121.6, 124.3 (d, arom. =C-H), 128.2, 128.2, 128.6, 128.8 (je 2 × d, arom. =C-H), 136.7 und 136.8 (s, arom. =C-), 145.8 und 151.8 (s, arom. =C-O), 164.5 (s Amid-CO), 173.6 und 174.3 (Ester-CO). -
Für C₂₈H₃₁N₃O₅ (MG 489.58)
ber. C 69.69; H 6.38; N 8.58;
gef. C 68.50; H 6.29; N 8.48.
Stufe 4: Darstellung von (D,L)-2-Amino-[N-(2,3-dibenzyloxi-benzoyl)]heptandinitril (1d):
Es werden 450 mg (0.92 mmol) 1c, 0.3 ml (3.68 mmol) Pyridin und 200 mg (0.62 mmol) Triphosgen in 80 ml getrocknetem Dichlormethan gelöst und für 1 h bei RT gerührt. Zur Aufarbeitung wird die organische Phase mit 1) 5 proz. HCl und 2) mit ges. NaCl-Lösung extrahiert. Sie wird über MgSO₄ getrocknet und i.V. eingeengt; dabei werden 350 mg (84 %) reines 1d erhalten.
Es werden 450 mg (0.92 mmol) 1c, 0.3 ml (3.68 mmol) Pyridin und 200 mg (0.62 mmol) Triphosgen in 80 ml getrocknetem Dichlormethan gelöst und für 1 h bei RT gerührt. Zur Aufarbeitung wird die organische Phase mit 1) 5 proz. HCl und 2) mit ges. NaCl-Lösung extrahiert. Sie wird über MgSO₄ getrocknet und i.V. eingeengt; dabei werden 350 mg (84 %) reines 1d erhalten.
IR (KBr): ν = 3330 (-NH), 2870, 2925, 3020, 3055 (-CH), 2235 (-CN), 1650 (Amid-I),
1570 (Amid-II) cm-1. - CI-MS (NH₃): m/z (%) = 454 (100) [M+H]⁺, 471(8) [M+NH₄]⁺,
427 (39) [M-CN+H]⁺, 337 (89) [M-CN-Benzyl+H]⁺. -
¹³C-NMR (75.4 MHz, CDCl₃): δ (ppm) = 16.9 (t, C-4), 24.5 (t, C-5), 24.7 (t, C-3), 31.8 (t, C-6), 40.1 (d, C-2), 71.5 und 76.8 (t, -O-CH₂-Phenyl), 118.4 und 119.3 (s, -CN), 118.2, 123.7 und 124.8 (d, arom. =C-H), 125.2., 128.7, 128.7 (s, quart. arom. =C-), 129.0, 129,2, 129,3 (6C, d, arom. =C-H), 136.3 und 136.4 (s, arom. =C-), 147.4 und 151.9 (s, arom. =C-O), 164.8 (Amid-CO). -
Für C₂₈H₂₇N₃O₃ (MG 453.55)
ber. C 74.15; H 6.00; N 9.26;
gef. C 73.66; H 6.10; N 9.20.
¹³C-NMR (75.4 MHz, CDCl₃): δ (ppm) = 16.9 (t, C-4), 24.5 (t, C-5), 24.7 (t, C-3), 31.8 (t, C-6), 40.1 (d, C-2), 71.5 und 76.8 (t, -O-CH₂-Phenyl), 118.4 und 119.3 (s, -CN), 118.2, 123.7 und 124.8 (d, arom. =C-H), 125.2., 128.7, 128.7 (s, quart. arom. =C-), 129.0, 129,2, 129,3 (6C, d, arom. =C-H), 136.3 und 136.4 (s, arom. =C-), 147.4 und 151.9 (s, arom. =C-O), 164.8 (Amid-CO). -
Für C₂₈H₂₇N₃O₃ (MG 453.55)
ber. C 74.15; H 6.00; N 9.26;
gef. C 73.66; H 6.10; N 9.20.
Stufe 5.- Darstellung von (D,L)-1,2,6-Triamino-[N²-(2,3-dibenzyloxi-benzoyl)]heptan (1e):
300 mg (0.66 mmol) 1d und 200 mg Co₂B /3/ sowie 0,5 g NaBH₄ werden in 10 ml THF und 40 ml Methanol gelöst und für 2 h gerührt. Zur Aufarbeitung werden 5 proz. HCl zugefügt (pH 2-3), sodann wird mit NH₃ basisch gestellt und viermal mit 30 ml CHCl₃ extrahiert (bis der Extrakt auf DC aufgetüpfelt mit Ninhydrin keine positive Reaktion anzeigt!). Die Chloroform-Lösung wird über MgSO₄ getrocknet und i.V. eingeengt. Es werden 324 mg öliges Diamin-1e als Rohprodukt erhalten, das ohne Reinigung in die folgende Reaktion eingesetzt wird.
300 mg (0.66 mmol) 1d und 200 mg Co₂B /3/ sowie 0,5 g NaBH₄ werden in 10 ml THF und 40 ml Methanol gelöst und für 2 h gerührt. Zur Aufarbeitung werden 5 proz. HCl zugefügt (pH 2-3), sodann wird mit NH₃ basisch gestellt und viermal mit 30 ml CHCl₃ extrahiert (bis der Extrakt auf DC aufgetüpfelt mit Ninhydrin keine positive Reaktion anzeigt!). Die Chloroform-Lösung wird über MgSO₄ getrocknet und i.V. eingeengt. Es werden 324 mg öliges Diamin-1e als Rohprodukt erhalten, das ohne Reinigung in die folgende Reaktion eingesetzt wird.
C₂₈H₃₅N₃O₃ (MG 461.61)
Stufe 6: Darstellung von (D,L)-1,2,6-Triamino-tris-[N¹,N²,N⁶-(2,3-dibenzyloxi-benzoyl)]-
heptan (1f):
300 mg Rohprodukt 1e aus der Vorreaktion werden mit 417 mg TBTU (1.23 mmol), 0.43 g Dibenzyloxibenzoesäure (1.23 mmol) und 0.44 ml (2.6 mmol) Hünig-Base in 50 ml trockenem Dichlormethan gelöst und bei RT für 72 h gerührt. Die Aufarbeitung erfolgt wie für 1b beschrieben. Gereinigt wird mittels Flash-Chromatographie mit dem Laufmittel n-Hexan/Essigsäureethylester = 1 : 1. Es werden 311 mg 1f erhalten, 43% bezogen auf 1d aus Stufe 4.
300 mg Rohprodukt 1e aus der Vorreaktion werden mit 417 mg TBTU (1.23 mmol), 0.43 g Dibenzyloxibenzoesäure (1.23 mmol) und 0.44 ml (2.6 mmol) Hünig-Base in 50 ml trockenem Dichlormethan gelöst und bei RT für 72 h gerührt. Die Aufarbeitung erfolgt wie für 1b beschrieben. Gereinigt wird mittels Flash-Chromatographie mit dem Laufmittel n-Hexan/Essigsäureethylester = 1 : 1. Es werden 311 mg 1f erhalten, 43% bezogen auf 1d aus Stufe 4.
IR (KBr): ν = 3370 (NH), 2850, 2915, 3020, 3055 (CH), 1630 (Amid-I), 1565 cm-1
(Amid-II). - ESI-MS: m/z (%): 1094.4 (100) [M+H]⁺, 1116.5 (65) [M+Na]⁺, 1132.4 (36)
[m+K]⁺. - ¹³C-NMR (75.4 MHz, CDCl₃), δ (ppm) = 25.7 (t, C-5), 26.9 (t, C-4), 29.2 (t,
C-6), 32.3 (t, C-3), 39.7 (t, C-7), 43.5 (t, C-1), 49.9 (d, C-2), 71.4, 71.4, 71.4, 75.9,
76.2, 76.5 (t, -O-CH₂-Phe), 117.0, 117.1, 117.2 (d, arom. =CH-), 123.4, 123.6, 123.7
und 124.4, 124.5, 124.6 (d, arom. =CH-), 127.2, 127.7, 128.0 (s, quart. arom. =C-),
127.8, 127.9, 127.9, 128.5, 128.5, 128.7, 128.7, 128.8, 128.80, 128.85, 128.85, 128.90,
128.90, 128.93, 128.93 (alle als d, arom. =CH-), 136.57, 136.6, 136.6, 136.63, 136.7,
136.7, (s, quart. arom. =C-), 146.9, 147.0, 147.1 (s, quart. =C-O), 151.9, 152.0, 152.0
(s, quart. =C-O), 165.2, 165.4, 165.9 (s, Amid-CO). -
Für C₇₀H₆₇N₃O₉ (MG 1094.33)
ber. C 76.83; H 6.17; N 3.84;
gef. C 75.91; H 6.23; N 4.19.
Für C₇₀H₆₇N₃O₉ (MG 1094.33)
ber. C 76.83; H 6.17; N 3.84;
gef. C 75.91; H 6.23; N 4.19.
Stufe 7: Darstellung von (D,L)-1,2,6-Triamino-tris-[N¹,N²,N⁶-(2,3-dihydroxi-benzoyl)]heptan
(Myxochelin F, 1):
113 mg (0. 1 mmol) 1f werden in 20 ml THF und 30 ml Methanol gelöst und mit Pd/C-H₂ für 2 h bei Normaldruck hydriert. Über Kieselgur wird filtriert, die Lösung i.V. eingeengt, Ausbeute 50 mg, 87% . - IR (KBr): ν = 3360 (NH), 2920, 2850 (CH), 1640 (Amid-I), 1580 (Aromat), 1540 cm-1 (Amid-II). - ESI-MS: m/z (%) = 576 (100) [M+Na]⁺. -
¹³C-NMR (100.6 MHz, CD₃OD): δ (ppm) = 26.9 (t, C-4), 27.8 (t, C-5), 30.3 (t, C-6), 33.1 (t, C-3), 40.4 (t, C-7), 44.6 (t, C-1), 51.2 (d, C-2), 116.9, 116.9, 117.0 (s, quart. arom. =C-), 118.7, 118.9, 119.0, 119.6, 119.7, 119.7 (alle d, arom. =CH-), 147.3, 147.3, 147.4 (s, arom. =C-O-), 150.2, 150.2, 150.3 (s, arom. =C-O-), 171.5, 171.8, 172.0 (s,Amid-CO). -
Für C₂₈H₃₁N₃O₉ (MG 553.58)
ber. C 60.75; H 5.64; N 7.59;
gef. C 53.30; H 4.73; N 6.37.
113 mg (0. 1 mmol) 1f werden in 20 ml THF und 30 ml Methanol gelöst und mit Pd/C-H₂ für 2 h bei Normaldruck hydriert. Über Kieselgur wird filtriert, die Lösung i.V. eingeengt, Ausbeute 50 mg, 87% . - IR (KBr): ν = 3360 (NH), 2920, 2850 (CH), 1640 (Amid-I), 1580 (Aromat), 1540 cm-1 (Amid-II). - ESI-MS: m/z (%) = 576 (100) [M+Na]⁺. -
¹³C-NMR (100.6 MHz, CD₃OD): δ (ppm) = 26.9 (t, C-4), 27.8 (t, C-5), 30.3 (t, C-6), 33.1 (t, C-3), 40.4 (t, C-7), 44.6 (t, C-1), 51.2 (d, C-2), 116.9, 116.9, 117.0 (s, quart. arom. =C-), 118.7, 118.9, 119.0, 119.6, 119.7, 119.7 (alle d, arom. =CH-), 147.3, 147.3, 147.4 (s, arom. =C-O-), 150.2, 150.2, 150.3 (s, arom. =C-O-), 171.5, 171.8, 172.0 (s,Amid-CO). -
Für C₂₈H₃₁N₃O₉ (MG 553.58)
ber. C 60.75; H 5.64; N 7.59;
gef. C 53.30; H 4.73; N 6.37.
Die Erfindung betrifft ferner den Siderophor Myxochelin C-Nitril (2) sowie das Verfahren
zu seiner Herstellung.
Die neue bisher noch nicht bekannte Substanz wird im folgenden anhand ihrer Darstellung
und mit ihren spektroskopischen Eigenschaften beschrieben.
Sie wird erhalten aus: (L)-2,6-Diamino-bis-[N²,N⁶-(2,3-dibenzyloxi-benzoyl)]-hexan
carbonsäureamid (2a), das selbst aus dem käuflich zu erwerbenden L-Lysinamid dargestellt
wird. Die spektroskopischen Merkmale von 2a sind die folgenden:[α] = -9 (c = 0.5 in Aceton). - IR (KBr): ν = 3371, 3200 (NH), 3032, 2930 (CH),
1651 (Amid-I), 1526 cm-1 (Amid-II). - ¹³C-NMR (75.4 MHz, CDCl₃): δ (ppm) = 23.03 (t,
C-4), 28.9 (t, C-5), 30.6 (t, C-3), 39.1 (t, C-6), 53.1 (d, C-2), 71.3, 71.4, 76.3, 76.4 (t,
-O-CH₂-Phenyl), 116.9, 117.4, 123.0, 123.3, 124.4, 124.4 (d, arom. =CH-), 126.7, 127.3
(s, quart. arom. =C-), 127.6, 127.6, 127.8, 128.2 (d, arom. =CH-), 128.3 (d, 10 × arom.
-CH-), 128.7 (d, 5 × arom. =CH-), 128.9 (d, arom. =CH-), 136.2,136.3, 136.4, 136.4,
(s, quart. arom. =C-), 146.8, 146.9, 151.7, 151.7 (s, =C-O-), 165.1, 165.6 (s, sek. Amid-
C=), 173.7 (s, prim. Amid-CO). -
Für C₄₈H₄₇N₃O₇ (MG 777.34)
ber. C 74.16; H 6.10; N 5.41;
gef. C 72.60; H 6.07; N 4.60.
Für C₄₈H₄₇N₃O₇ (MG 777.34)
ber. C 74.16; H 6.10; N 5.41;
gef. C 72.60; H 6.07; N 4.60.
Synthese von (L)-2,6-Diamino-bis-[N²,N⁶,-(2,3-dibenzyloxi-benzoyl)]hexan-nitril (2b):
0.98 g (1.2 mmol) 2a werden in 15 ml absolutiertem Dichlormethan gelöst und mit 0.29 ml Pyridin und 176 mg Triphosgen versetzt. Nach Aufarbeiten - wie für 1d beschrieben - werden 670 mg 2b erhalten (73.6%).[α] = -16.1 (c = 1 in CHCl₃). -
IR (KBr): ν = 3367 (NH), 2866, 2927, 3031, 3064 (CH), 2230 (CN), 1661 (Amid-I), 1520 cm-1 (Amid-II). - ¹³C-NMR (75.4 MHz, CDCl₃): δ (ppm) = 22.7 (t, C-4), 28.4 (t, C-5), 32.1 (t, C-3), 39.0 (t, C-6), 40.3 (d, C-2), 71.3, 71.4, 76.4, 76.6 (t, -O-CH₂-Phe), 117.0, 117.9 (d, arom. =CH-), 118.5 (s, -CN), 123.3, 123.4, 124.4, 124.5 (d, arom. =CH-), 127.6, 127.6, 128.4, 128.4 (d, arom. =C-H), 128.3, 128.4 (s, quart. arom. =C-), 128.7 (4 × C), 128.8 (8 × C), 129.0 (4 × C, alle d, 16 arom. =CH- aus Bn-Gruppen), 135.9, 136.0, 136.2, 136.4 (s, arom. =C- aus Bn-Gruppen), 146.8, 147.1 (s, quart. arom. -O- C=), 151.6, 151.7 (s, quart. arom. O-C=), 164.5, 165.0 (s, Amid-CO). -
Für C₇₅H₄₅N₃O₆ (MG 759.91)
ber. C 75.87; H 5.97; N 5.53;
gef. C 72.18; H 5.63; N 4.16.
0.98 g (1.2 mmol) 2a werden in 15 ml absolutiertem Dichlormethan gelöst und mit 0.29 ml Pyridin und 176 mg Triphosgen versetzt. Nach Aufarbeiten - wie für 1d beschrieben - werden 670 mg 2b erhalten (73.6%).[α] = -16.1 (c = 1 in CHCl₃). -
IR (KBr): ν = 3367 (NH), 2866, 2927, 3031, 3064 (CH), 2230 (CN), 1661 (Amid-I), 1520 cm-1 (Amid-II). - ¹³C-NMR (75.4 MHz, CDCl₃): δ (ppm) = 22.7 (t, C-4), 28.4 (t, C-5), 32.1 (t, C-3), 39.0 (t, C-6), 40.3 (d, C-2), 71.3, 71.4, 76.4, 76.6 (t, -O-CH₂-Phe), 117.0, 117.9 (d, arom. =CH-), 118.5 (s, -CN), 123.3, 123.4, 124.4, 124.5 (d, arom. =CH-), 127.6, 127.6, 128.4, 128.4 (d, arom. =C-H), 128.3, 128.4 (s, quart. arom. =C-), 128.7 (4 × C), 128.8 (8 × C), 129.0 (4 × C, alle d, 16 arom. =CH- aus Bn-Gruppen), 135.9, 136.0, 136.2, 136.4 (s, arom. =C- aus Bn-Gruppen), 146.8, 147.1 (s, quart. arom. -O- C=), 151.6, 151.7 (s, quart. arom. O-C=), 164.5, 165.0 (s, Amid-CO). -
Für C₇₅H₄₅N₃O₆ (MG 759.91)
ber. C 75.87; H 5.97; N 5.53;
gef. C 72.18; H 5.63; N 4.16.
Synthese von (L)-2,6-Diamino-bis-[N²,N⁶-(2,3-dihydroxi-benzoyl)]hexannitril(Myxoc-helin C-
Nitril, 2):
Es werden 90 mg (0.12 mmol) 2b unter Standardbedingungen hydriert. Nach Filtration über Kieselgur und Einengen i.V. werden 45 mg (95%) 2 isoliert.[α] = -12 (c = 1 in Methanol). - MG 399.43.
Es werden 90 mg (0.12 mmol) 2b unter Standardbedingungen hydriert. Nach Filtration über Kieselgur und Einengen i.V. werden 45 mg (95%) 2 isoliert.[α] = -12 (c = 1 in Methanol). - MG 399.43.
Ferner betrifft die Erfindung das Myxochelin D-Nitril (3) und das Verfahren zu seiner
Herstellung. 3 wird - wie schon für 2 dargestellt - aus dem Tetra-benzyl-geschützten
Myxochelin D-Nitril (3a) durch hydrogenolytische Spaltung an Pd/C mittels H₂ erhalten.
3a ist wie folgt charakterisiert:
(L)-2,5-Diamino-bis-[N²,N⁵-(2,3-dibenzyloxi-benzoyl)]pentan-nitril
(Tetra-O-benzyl-Myxochelin D-Nitril, 3a):Fp. 134-136°C. - [α] = -18.4 (c = 1 in Methanol). - IR (KBr): ν = 3360 (NH), 3015,
3065, 2900, 2925, 2860 (CH), 1650 (Amid-I), 1520 cm-1 (Amid-II). -
CI-(+)-MS: m/z (%) = 746 (100) [M+H]⁺. -
¹³C-NMR (75.9 MHz, CDCl₃): δ (ppm) = 25.4 (t, C-4), 30.0 (t, C-3), 38.5 (t, C-5), 40.3 (d, C-2), 71.3, 71.4, 76.5, 76.7 (t, -O-CH₂-Phenyl), 117.1, 117.9 (d, arom. =CH-), 118.3 (s, -CN), 123.4, 123.5,124.4, 124.5 (d, arom. =CH-), 127.6, 127.7 (d, arom. =CH-), 128.3, 128.4 (s, quart. arom. =C-), 128.7, 128.8, 128.9, 129.1(18 C, d, arom. =CH-), 135.8, 136.2, 136.3, 136.4 (s, qart. arom. =C-), 146.9, 147.1 (s, quart. arom. -O-C=), 151.6, 151.63 (s, quart. arom. -O-C=), 164.4, 165.0 (s, sek. Amid-CO). -
Für C₄₇H₄₃N₃O₆ (MG 745.87)
ber. C 75.68; H 5.81; N 5.63;
gef. C 75.66; H 5.80; N 5.36.
¹³C-NMR (75.9 MHz, CDCl₃): δ (ppm) = 25.4 (t, C-4), 30.0 (t, C-3), 38.5 (t, C-5), 40.3 (d, C-2), 71.3, 71.4, 76.5, 76.7 (t, -O-CH₂-Phenyl), 117.1, 117.9 (d, arom. =CH-), 118.3 (s, -CN), 123.4, 123.5,124.4, 124.5 (d, arom. =CH-), 127.6, 127.7 (d, arom. =CH-), 128.3, 128.4 (s, quart. arom. =C-), 128.7, 128.8, 128.9, 129.1(18 C, d, arom. =CH-), 135.8, 136.2, 136.3, 136.4 (s, qart. arom. =C-), 146.9, 147.1 (s, quart. arom. -O-C=), 151.6, 151.63 (s, quart. arom. -O-C=), 164.4, 165.0 (s, sek. Amid-CO). -
Für C₄₇H₄₃N₃O₆ (MG 745.87)
ber. C 75.68; H 5.81; N 5.63;
gef. C 75.66; H 5.80; N 5.36.
Synthese von (L)-2,5-Diamino-bis-[N²,N5-(2,3-dihydroxi-benzoyl)]pentan-nitril (Myxochelin
D-Nitril, 3):
50 mg (7.7 × 10-5 mol) L-2,5-diamino-bis-[N²,N⁵-(2,3-dibenzyloxi-benzoyl)]-pentannitril (3a werden unter Standardbedingungen hydriert. Nach Filtration über Kieselgur und Einengen i.V. werden 24 mg (93.4%) 3 erhalten. -[α] = -14.5 (c = 0.9 in Methanol). -
IR (KBr): ν = 3360 NH), 2925 (CH), 2230 (CN), 1630 (Amid-I), 1525 cm-1 (Amid-II). -
¹³C-NMR (125.6 MHz, CD₃OD): δ (ppm) = 26.8 (t, C-4), 31.0 (t, C-3), 39.4 (t, C-5), 41.5 (d, C-2), 116.1, 116.7 (s, quart. arom. -C=), 118.7, 119.1 (d, arom. =CH-), 118.7 (s, -CN), 119.6, 119.7, 120.0, 120.4 (d, arom. =CH-), 147.3, 147.4, 150.2, 150.3 (s, quart. -O-C=), 171.1, 171.7 (s, sek. Amid-CO). -
¹H-NMR (500 MHz, CD₃OD): δ (ppm) = 1.02 (quin., J₁= 14.8 Hz, J₂= 7.4 Hz, 2H, 4-CH₂-), 1.25 (9 Linien, J₁= 15.5, J₂= 7.8, J₃= 7.7 Hz, 2H, 3-CH₂-), 2.67 (dd, J₁= 6.6, J₂= 7.0 Hz, 1H, 2-H), 5.91 (dd, J₁= 7.8, J₂= 8.1 Hz, 1H, meta-Harom.), 5.95 (dd, J₁= 8.1, J₂= 8.2 Hz, 1H, meta-Harom.), 6.13 (dd, J₁= 1.2, J₂= 7.8 Hz, 1H, para-Harom.), 6.17 (dd, J₁= 1.2, J₂= 7.8 Hz, 1H, para-Harom.), 6.41 (dd, J₁= 1.5, J₂= 8.1 Hz, 1H, ortho-Harom. ), 6.45 (d, J₁= 1.1, J₂= 8.1 Hz, 1H, ortho-Harom.). - ESI-(+)-MS: M/z (%) = 408 (100), [M+Na]⁺. -
Für C₁₉H₁₉N₃O₆ (MG 385.39)
ber. C 59.36; H 4.72; N 10.93;
gef. C 57.10; H 5.44; N 9.78.
50 mg (7.7 × 10-5 mol) L-2,5-diamino-bis-[N²,N⁵-(2,3-dibenzyloxi-benzoyl)]-pentannitril (3a werden unter Standardbedingungen hydriert. Nach Filtration über Kieselgur und Einengen i.V. werden 24 mg (93.4%) 3 erhalten. -[α] = -14.5 (c = 0.9 in Methanol). -
IR (KBr): ν = 3360 NH), 2925 (CH), 2230 (CN), 1630 (Amid-I), 1525 cm-1 (Amid-II). -
¹³C-NMR (125.6 MHz, CD₃OD): δ (ppm) = 26.8 (t, C-4), 31.0 (t, C-3), 39.4 (t, C-5), 41.5 (d, C-2), 116.1, 116.7 (s, quart. arom. -C=), 118.7, 119.1 (d, arom. =CH-), 118.7 (s, -CN), 119.6, 119.7, 120.0, 120.4 (d, arom. =CH-), 147.3, 147.4, 150.2, 150.3 (s, quart. -O-C=), 171.1, 171.7 (s, sek. Amid-CO). -
¹H-NMR (500 MHz, CD₃OD): δ (ppm) = 1.02 (quin., J₁= 14.8 Hz, J₂= 7.4 Hz, 2H, 4-CH₂-), 1.25 (9 Linien, J₁= 15.5, J₂= 7.8, J₃= 7.7 Hz, 2H, 3-CH₂-), 2.67 (dd, J₁= 6.6, J₂= 7.0 Hz, 1H, 2-H), 5.91 (dd, J₁= 7.8, J₂= 8.1 Hz, 1H, meta-Harom.), 5.95 (dd, J₁= 8.1, J₂= 8.2 Hz, 1H, meta-Harom.), 6.13 (dd, J₁= 1.2, J₂= 7.8 Hz, 1H, para-Harom.), 6.17 (dd, J₁= 1.2, J₂= 7.8 Hz, 1H, para-Harom.), 6.41 (dd, J₁= 1.5, J₂= 8.1 Hz, 1H, ortho-Harom. ), 6.45 (d, J₁= 1.1, J₂= 8.1 Hz, 1H, ortho-Harom.). - ESI-(+)-MS: M/z (%) = 408 (100), [M+Na]⁺. -
Für C₁₉H₁₉N₃O₆ (MG 385.39)
ber. C 59.36; H 4.72; N 10.93;
gef. C 57.10; H 5.44; N 9.78.
Ferner betrifft die Erfindung das Myxochelin DR-Nitril R-3, und das Verfahren zu seiner
Herstellung, die auf dem gleichen Weg wie für 3 beschrieben verläuft. Die Vorstufe R-3a
zeigt die gleichen spektroskopischen Eigenschaften wie 3a besitzt aber einen Drehwert von:[α] = +16.9 (c = 1 in Methanol). -
(R)-2,5-Diamino-bis-[N²,N⁵-(2,3-dihydroxi-benzoyl)]pentan-nitril(Myx-ochelinDR-Nitril, R-3):
Es werden 48 mg R-3a unter Standardbedingungen bei Normaldruck hydriert. Nach
Abfiltrieren über Kieselgur und Einengen i.V. werden 22 mg (88.7%) R-3 gewonnen.
Die spektroskopischen Eigenschaften siehe bei der Beschreibung für R-3.[α] = +16 (c = 1 in Methanol). -
Ferner betrifft die Erfindung das Enantiomere des Naturstoffs Myxochelin B das
Myxochelin BR (R-4) und das Verfahren zu seiner Darstellung.
Hierzu wird ausgegangen von R-2b, dessen spektroskopische Eigenschaften mit Ausnahme
des Drehwertes die gleichen wie für 2b sind /4/. Der Drehwert beträgt für R-2b: [α] =
+18.5 (c = 1 in CHCl₃). Das Nitril R-2b wird mittels NaCNBH₃ in das pimäre Amin
überführt, das durch Standardhydrierung bei RT und unter Normaldruck für 2h am Pd/C-
Katalysator hydriert wird:
(R)-1,2,6-Triamino-bis-[N²,N⁶-(2,3-dihydroxi-benzoyl)]hexan-hydrochl-orid (Myxochelin BR-
Hydrochlorid, R-4):
[α] = +7 (c = 0.5 in 6N HCl). - (Der Naturstoff Myxochelin B besitzt [α] = -8 (c = 1 in 6N HCl) /4/. -
¹³C-NMR (75.4 MHz, DMSO-d₆): δ (ppm) = 22.9 (t, C-4), 28.7 (t, C-5), 31.3 (t, C-3), 38.6 (t, C-6), 48.7 (d, C-2), 44.0 (t, C-1), 115.7, 115.7 (s, quart. arom. C), 114.1, 115.8, 116.0, 117.2, 117.8, 118.4 (d, arom. =CH-), 147.0, 147.6, 151.6, 153.6 (s, quart. -O- C=), 169.3, 169.9 (s, sek. Amid.CO). -
FAB-(+)-MS: m/z (%) = 404 (100) [M+H]⁺. - C₂₀H₂₅N₃O₆ (MG 403.44).
[α] = +7 (c = 0.5 in 6N HCl). - (Der Naturstoff Myxochelin B besitzt [α] = -8 (c = 1 in 6N HCl) /4/. -
¹³C-NMR (75.4 MHz, DMSO-d₆): δ (ppm) = 22.9 (t, C-4), 28.7 (t, C-5), 31.3 (t, C-3), 38.6 (t, C-6), 48.7 (d, C-2), 44.0 (t, C-1), 115.7, 115.7 (s, quart. arom. C), 114.1, 115.8, 116.0, 117.2, 117.8, 118.4 (d, arom. =CH-), 147.0, 147.6, 151.6, 153.6 (s, quart. -O- C=), 169.3, 169.9 (s, sek. Amid.CO). -
FAB-(+)-MS: m/z (%) = 404 (100) [M+H]⁺. - C₂₀H₂₅N₃O₆ (MG 403.44).
Ferner betrifft die Erfindung ein therapeutisches Mittel bestehend mindestens aus einem der
erwähnten Siderophore neben einem üblichen Träger und/oder Verdünnungsmittel.
Dieses Mittel kann zur Entfernung von Eisen und Aluminium bei den verschiedensten
Erkrankungen des Menschen und von Tieren z. B. bei der Hämosiderose oder der
Thalassämie oder auch bei Morbus Alzheimer eingesetzt werden.
Ferner betrifft die Erfindung ein therapeutisches Mittel bestehend mindestens aus einem der
erwähnten Siderophore neben einem üblichen Träger und/oder Verdünnungsmittel. Dieses
Mittel kann zur Bekämpfung von viraler, bakterieller oder parasitärer Erkrankungen von
Mensch und Tier eingesetzt werden.
Ferner betrifft die Erfindung ein therapeutisches Mittel bestehend mindestens aus einem der
erwähnten mit Eisen beladenen Siderophore neben einem üblichen Träger und/oder
Verdünnungsmittel.
Diese Mittel können zur chemo-therapeutischen Behandlung von Tumoren eingesetzt
werden. Dieser Einsatz ergibt sich aus der Tatsache, daß Eisen-Komplexe in der Lage sind,
Sauerstoff-Radikale zu erzeugen, die, wenn sie in die Nähe von DNA oder RNA gelangen,
diese zerstören.
Ferner betrifft die Erfindung ein Mittel bestehend mindestens aus einem der erwähnten
Siderophore neben einem üblichen Träger und/oder Verdünnungsmittel.
Dieses Mittel kann eingesetzt werden in seiner Eigenschaft als Chelator zur Entfernung von
Metallen allgemein, diese können selbstverständlich auch radioaktiv sein.
Ferner betrifft die Erfindung ein Mittel, bevorzugt die Stoffe R-4 und 5 von denen hiermit
bekannt ist, daß sie die bakterielle Zellwand in einem aktiven Transportvorgang überwinden
können. R-4 und 5 lassen sich, bevorzugt über eine amidische Bindung an eine Reihe von
Antibiotika kuppeln, für die die bakterielle Zellwand - oder Zellwände höherer Lebewesen -
ein Hindernis darstellt. Auf diesem Wege lassen sich Wirkkonzentrationen stark erniedrigen,
und damit Nebenwirkungen, die erst durch erhöhte Wirkkonzentrationen auftreten, drastisch
verringern.
Aber auch jede beliebig andere Amino-Funktion der beanspruchten Stoffe läßt sich für
diesen Zweck durch gängige Schutzgruppentechnik bei ihrer Herstellung freisetzen.
Ferner betrifft die Erfindung ein Mittel, bestehend mindestens aus einem der erwähnten
Siderophore, das sich zur schnellen Analytik von pathogenen Enterobakterien einsetzen läßt.
Hierzu werden mit pathogenen Enterobakterien belastete Abstriche in einem Eisen
mangel-Medium inkubiert. Durch Zusatz eines der genannten Mittel gelingt es, selektiv nur einen
pathogenen Bakterienstamm zum Wachstum anzuregen.
Beschreibung der Darstellung der Siderophore am Beispiel für 1:
Stufe 1: Darstellung von (D,L)-2-Amino-heptandicarbonsäuredimethylester-Hydrochlorid (1a):
5.0 g (28.5 mmol) D,L-2-Amino-heptandicarbonsäure (Fa. Bachem, Schweiz), werden in ca. 100 ml trockenem Methanol suspendiert. Unter Rühren wird solange HClg eingeleitet, bis die Lösung klar wird. Über Nacht wird gerührt, danach i.V. eingeengt. Das Rohprodukt wird über eine Flash-Chromatographie an Kieselgel Si60 (Merck, Darmstadt) mit n-Hexan/Essigsäureethylester= 7 : 3 gereinigt. Es werden 4.78 g (70%) an 1a isoliert.
APCI-MS: m/z (%)= 520 (50) [M+H]⁺, 542 (6) [M+Na]⁺, 317 (100). -
¹³C-NMR (75.4 MHz, DMSO-d₆): δ = 23.7 (t, C-4), 23.9 (t, C-3), 29.6 (t, C-5), 33.0 (t, C-6), 51.4 (d, C-2), 51.9 und 52.9 (q, O-CH₃), 170.2 (-C=O), 173.5 (-C=O). -
Für C₉H₁₈NO₄Cl (MG 239.5)
ber. C 45.09; H 7.52; N 5.85; Cl 14.82;
gef. C 45.07; H 7.66; N 5.64; Cl 15.28.
Stufe 1: Darstellung von (D,L)-2-Amino-heptandicarbonsäuredimethylester-Hydrochlorid (1a):
5.0 g (28.5 mmol) D,L-2-Amino-heptandicarbonsäure (Fa. Bachem, Schweiz), werden in ca. 100 ml trockenem Methanol suspendiert. Unter Rühren wird solange HClg eingeleitet, bis die Lösung klar wird. Über Nacht wird gerührt, danach i.V. eingeengt. Das Rohprodukt wird über eine Flash-Chromatographie an Kieselgel Si60 (Merck, Darmstadt) mit n-Hexan/Essigsäureethylester= 7 : 3 gereinigt. Es werden 4.78 g (70%) an 1a isoliert.
APCI-MS: m/z (%)= 520 (50) [M+H]⁺, 542 (6) [M+Na]⁺, 317 (100). -
¹³C-NMR (75.4 MHz, DMSO-d₆): δ = 23.7 (t, C-4), 23.9 (t, C-3), 29.6 (t, C-5), 33.0 (t, C-6), 51.4 (d, C-2), 51.9 und 52.9 (q, O-CH₃), 170.2 (-C=O), 173.5 (-C=O). -
Für C₉H₁₈NO₄Cl (MG 239.5)
ber. C 45.09; H 7.52; N 5.85; Cl 14.82;
gef. C 45.07; H 7.66; N 5.64; Cl 15.28.
Stufe 2: Darstellung von (D,L)-2-Amino-[N-(2,3-dibenzyloxibenzoyl)]heptandicarbonsäure
dimethylester (1b):
1.5 g 2,3-Dibenzyloxibenzoesäure (4.5 mmol), hergestellt nach /2/, werden in einem Kolben mit Trockenrohr in 50 ml absolutem Dichlormethan gelöst und nacheinander mit 1.08 g 1a (4.5 mmol), 1.44 g TBTU (4.5 mmol) sowie mit 1.74 g (13.5 mmol, drei Equiv.) Hünig- Base versetzt. Es wird für 72 h gerührt.
1.5 g 2,3-Dibenzyloxibenzoesäure (4.5 mmol), hergestellt nach /2/, werden in einem Kolben mit Trockenrohr in 50 ml absolutem Dichlormethan gelöst und nacheinander mit 1.08 g 1a (4.5 mmol), 1.44 g TBTU (4.5 mmol) sowie mit 1.74 g (13.5 mmol, drei Equiv.) Hünig- Base versetzt. Es wird für 72 h gerührt.
Zur Aufarbeitung wird die organische Phase mit 1) 50 ml 5 proz. HCl, 2) mit gesättigter
NaHCO₃-Lösung und 3) mit ges. NaCl-Lösung gewaschen. Sie wird mit MgSO₄ getrocknet
und i.V. eingeengt. Gereinigt wird mittels Flash-Chromatographie an Kieselgel Si60
(Merck, Darmstadt), Laufmittel: n-Hexan-Essigsäureethylester = 1 : 1. Ausbeute: 630 mg
(27%, als heller Sirup).
IR (KBr): ν = 3360, (NH), 2925 (CH), 1730 (Ester-CO), 1655 (Amid-I), 1560 cm-1 (Amid- II). - APCI-MS: m/z (%) = 520 (50) [M+H]⁺, 542 (6) [M+Na]⁺, 317 (100). -
¹³C-NMR (75.4 MHz, CDCl₃): δ = 24.5 (t, C-4), 25.1 (t, C-5), 31.7 (t, C-3), 33.7 (t, C- 6), 51.6 (d, C-2), 52.3 und 52.6 (q, O-CH₃), 71.4 und 76.3 (t, O-CH₂), 117.4, 123.5, 124.7 (d, arom. =C-H), 126.8 (s, arom. =C-), 128.0, 128.7, 128.9, 129.0 (je 2 × d, arom. =C-H), 128.5 und 128.8 (s, arom. =C-), 136.5 und 136.6 (s, arom. =C-), 147.2 und 152.0 (s, arom. =C-O), 165.2 (s, Amid-CO), 173.0 und 174.0 (Ester-CO). -
Für C₃₀H₃₃NO₇ (MG 519.60)
ber. C 69.35; H 6.40; N 2.70;
gef. C 68.70; H 6.31; N 3.01.
IR (KBr): ν = 3360, (NH), 2925 (CH), 1730 (Ester-CO), 1655 (Amid-I), 1560 cm-1 (Amid- II). - APCI-MS: m/z (%) = 520 (50) [M+H]⁺, 542 (6) [M+Na]⁺, 317 (100). -
¹³C-NMR (75.4 MHz, CDCl₃): δ = 24.5 (t, C-4), 25.1 (t, C-5), 31.7 (t, C-3), 33.7 (t, C- 6), 51.6 (d, C-2), 52.3 und 52.6 (q, O-CH₃), 71.4 und 76.3 (t, O-CH₂), 117.4, 123.5, 124.7 (d, arom. =C-H), 126.8 (s, arom. =C-), 128.0, 128.7, 128.9, 129.0 (je 2 × d, arom. =C-H), 128.5 und 128.8 (s, arom. =C-), 136.5 und 136.6 (s, arom. =C-), 147.2 und 152.0 (s, arom. =C-O), 165.2 (s, Amid-CO), 173.0 und 174.0 (Ester-CO). -
Für C₃₀H₃₃NO₇ (MG 519.60)
ber. C 69.35; H 6.40; N 2.70;
gef. C 68.70; H 6.31; N 3.01.
Stufe 3: Darstellung von (D,L)-2-Amino-[N-(2,3-dibenzyloxi-benzoyl)]heptandicarbonsäure
diamid (1c):
630 mg (1.2 mmol) 1b werden in 150 ml Methanol gelöst, die Lösung wird auf -5°C abgekühlt. Für 3 h wird durch die gekühlte Lösung NH₃-Gas geleitet. Die noch kühle Lösung wird in einen Autoklaven gegeben, der verschlossen für 4 Tage bei RT belassen wird. Nach vorsichtigem Belüften wird die Lösung i.V. eingeengt, Ausbeute 470 mg (80%) kristallines 1c, Fp. 200-203 °C.
IR (KBr): ν= 3390 (NH), 3180 und 3250 (NH₂), 2850, 2930, 3020, 3050 (CH), 1640 und 1650 (Amid-I), 1520 cm-1 (Amid-II). - CI-MS (NH₃): m/z(%) =490(22) [M+H]⁺, 472 (18) [M-H₂O+H]⁺, 455 (55), 365 (100), 337 (56), 275 (81), 247 (48), 11(76). -
¹³C-NMR (75.4 MHz, DMSO-d⁶): δ (ppm) = 24.8 (t, C-4), 24.9 (t, C-5), 32.3 (t, C-3), 34.9 (t, C-6), 52.6 (d, C-2), 70.4 und 75.1 (t, -O-CH₂-Phe), 116.6, 121.6, 124.3 (d, arom. =C-H), 128.2, 128.2, 128.6, 128.8 (je 2 × d, arom. =C-H), 136.7 und 136.8 (s, arom. =C-), 145.8 und 151.8 (s, arom. =C-O), 164.5 (s, Amid-CO), 173.6 und 174.3 (Ester- CO). -
Für C₂₈H₃₁N₃O₅ (MG 489.58)
ber. C 69.69; H 6.38; N 8.58;
gef. C 68.50; H 6.29; N 8.48.
630 mg (1.2 mmol) 1b werden in 150 ml Methanol gelöst, die Lösung wird auf -5°C abgekühlt. Für 3 h wird durch die gekühlte Lösung NH₃-Gas geleitet. Die noch kühle Lösung wird in einen Autoklaven gegeben, der verschlossen für 4 Tage bei RT belassen wird. Nach vorsichtigem Belüften wird die Lösung i.V. eingeengt, Ausbeute 470 mg (80%) kristallines 1c, Fp. 200-203 °C.
IR (KBr): ν= 3390 (NH), 3180 und 3250 (NH₂), 2850, 2930, 3020, 3050 (CH), 1640 und 1650 (Amid-I), 1520 cm-1 (Amid-II). - CI-MS (NH₃): m/z(%) =490(22) [M+H]⁺, 472 (18) [M-H₂O+H]⁺, 455 (55), 365 (100), 337 (56), 275 (81), 247 (48), 11(76). -
¹³C-NMR (75.4 MHz, DMSO-d⁶): δ (ppm) = 24.8 (t, C-4), 24.9 (t, C-5), 32.3 (t, C-3), 34.9 (t, C-6), 52.6 (d, C-2), 70.4 und 75.1 (t, -O-CH₂-Phe), 116.6, 121.6, 124.3 (d, arom. =C-H), 128.2, 128.2, 128.6, 128.8 (je 2 × d, arom. =C-H), 136.7 und 136.8 (s, arom. =C-), 145.8 und 151.8 (s, arom. =C-O), 164.5 (s, Amid-CO), 173.6 und 174.3 (Ester- CO). -
Für C₂₈H₃₁N₃O₅ (MG 489.58)
ber. C 69.69; H 6.38; N 8.58;
gef. C 68.50; H 6.29; N 8.48.
Stufe 4: Darstellung von (D,L)-2-Amino-[N-(2,3-dibenzyloxi-benzoyl)]heptan-dinitril (1d):
Es werden 450 mg (0.92 mmol), 1c 0.3 ml (3.68 mmol) Pyridin und 200 mg (0.62 mmol) Triphosgen in 80 ml getrocknetem Dichlormethan gelöst und für 1 h bei RT gerührt. Zur Aufarbeitung wird die organische Phase mit 1) 5 proz. HCl und 2) mit ges. NaCl-Lösung extrahiert. Sie wird über MgSO₄ getrocknet und i.V. eingeengt; dabei werden 350 mg (84 %) reines 1d erhalten.
IR (KBr): ν = 3330 (-NH), 2870, 2925, 3020, 3055 (-CH), 2235 (-CN), 1650 (Amid-I), 1570 cm-1 (Amid-II). - CI-MS (NH₃): m/z (%) = 454 (100) [M+H]⁺, 471(8) [M+NH₄]⁺, 427 (39) [M-CN+H]⁺, 337 (89) [M-CN-Benzyl+H]⁺.-
¹³C-NMR (75.4 MHz, CDCl₃): δ (ppm) = 16.9 (t, C-4), 24.5 (t, C-5), 24.7 (t, C-3), 31.8 (t, C-6), 40.1 (d, C-2), 71.5 und 76.8 (t, -O-CH₂-Phe), 118.4 und 119.3 (s, -CN), 118.2, 123.7 und 124.8 (d, arom. =C-H), 125.2., 128.7, 128.7 (s, quart. arom. =C-), 129.0, 129,2, 129,3 (6C, d, arom. =C-), 136.3 und 136.4 (s, arom. =C-), 147.4 und 151.9 (s, arom. =C-O), 164.8 (Amid-CO). -
Für C₂₈H₂₇N₃O₃ (MG 453.55)
ber. C 74.15; H 6.00; N 9.26;
gef. C 73.66; H 6.10; N 9.20.
Es werden 450 mg (0.92 mmol), 1c 0.3 ml (3.68 mmol) Pyridin und 200 mg (0.62 mmol) Triphosgen in 80 ml getrocknetem Dichlormethan gelöst und für 1 h bei RT gerührt. Zur Aufarbeitung wird die organische Phase mit 1) 5 proz. HCl und 2) mit ges. NaCl-Lösung extrahiert. Sie wird über MgSO₄ getrocknet und i.V. eingeengt; dabei werden 350 mg (84 %) reines 1d erhalten.
IR (KBr): ν = 3330 (-NH), 2870, 2925, 3020, 3055 (-CH), 2235 (-CN), 1650 (Amid-I), 1570 cm-1 (Amid-II). - CI-MS (NH₃): m/z (%) = 454 (100) [M+H]⁺, 471(8) [M+NH₄]⁺, 427 (39) [M-CN+H]⁺, 337 (89) [M-CN-Benzyl+H]⁺.-
¹³C-NMR (75.4 MHz, CDCl₃): δ (ppm) = 16.9 (t, C-4), 24.5 (t, C-5), 24.7 (t, C-3), 31.8 (t, C-6), 40.1 (d, C-2), 71.5 und 76.8 (t, -O-CH₂-Phe), 118.4 und 119.3 (s, -CN), 118.2, 123.7 und 124.8 (d, arom. =C-H), 125.2., 128.7, 128.7 (s, quart. arom. =C-), 129.0, 129,2, 129,3 (6C, d, arom. =C-), 136.3 und 136.4 (s, arom. =C-), 147.4 und 151.9 (s, arom. =C-O), 164.8 (Amid-CO). -
Für C₂₈H₂₇N₃O₃ (MG 453.55)
ber. C 74.15; H 6.00; N 9.26;
gef. C 73.66; H 6.10; N 9.20.
Stufe 5: Darstellung von (D,L)-1,2,6-Triamino-[N²-(2,3-dibenzyloxi-benzoyl)]heptan (1e):
300 mg (0.66 mmol) 1d und 200 mg Co₂B /3/ sowie 0,5 g NaBH₄ werden in 10 ml THF und 40 ml Methanol gelöst und für 2 h gerührt. Zur Aufarbeitung werden 5 proz. HCl zugefügt (pH 2-3), sodann wird mit NH₃ basisch gestellt und viermal mit 30 ml CHCl₃ extrahiert (bis der Extrakt auf DC aufgetüpfelt mit Ninhydrin keine Reaktion anzeigt!). Die Chloroform-Lösung wird über MgSO₄, getrocknet und i.V. eingeengt. Es werden 324 mg öliges Diamin-1e als Rohprodukt erhalten, das ohne Reinigung in die folgende Reaktion eingesetzt wird.
C₂₈H₃₅N₃O₃ (MG 461.61)
Stufe 6: Darstellung von (D,L)-1,2,6-Triamino-tris-[N,N,N-(2,3-dibenzyloxi-benzoyl)]heptan (Hexa-O-Benzyl-Myxochelin F, 1f):
300 mg Rohprodukt 1e aus der Vorreaktion werden mit 417 mg TBTU (1.23 mmol), 0.43 g Dibenzyloxibenzoesäure (1.23 mmol) und 0.44 ml (2.6 mmol) Hünig-Base in 50 ml trockenem Dichlormethan gelöst und bei RT für 72 h gerührt. Die Aufarbeitung erfolgt wie für 1b beschrieben. Gereinigt wird mittels Flash-Chromatographie mit dem Laufmittel n-Hexan/Essigsäureethylester= 1 : 1. Es werden 311 mg 1f erhalten, 43% bezogen auf 1d aus Stufe 4.
IR (KBr): ν = 3370 (NH), 2850, 2915, 3020, 3055 (CH), 1630 (Amid-I), 1565 cm-1 (Amid-II). - ESI-MS: m/z (%): 1094.4 (100) [M+H]⁺, 1116.5 (65) [M+Na]⁺, 1132.4 (36) [M+K]⁺. - ¹³C-NMR (75.4 MHz, CDCl₃), δ (ppm) = 25.7 (t, C-5), 26.9 (t, C-4), 29.2 (t, C-6), 32.3 (t, C-3), 39.7 (t, C-7), 43.5 (t, C-1), 49.9 (d, C-2), 71.4, 71.4, 71.4, 75.9, 76.2, 76.5 (t, -O-CH₂-Phe), 117.0, 117.1, 117.2 (d, arom. =CH-), 123.4, 123.6, 123.7 und 124.4, 124.5, 124.6 (d, arom. =CH-), 127.2, 127.7, 128.0 (s, quart. arom. =C-), 127.8, 127.9, 127.9, 128.5, 128.5, 128.7, 128.7, 128.8, 128.80, 128.85, 128.85, 128.90, 128.90, 128.93, 128.93 (alle als d, arom. =CH-), 136.57, 136.6, 136.6,136.63, 136.7, 136.7, (s, quart. arom. =C-), 146.9, 147.0,147.1 (s, quart. =C-O), 151.9, 152.0, 152.0 (s, quart. =C-O), 165.2,165.4, 165.9 (s, Amid-CO). -
Für C₇₀H₆₇N₃O₉ (MG 1094.33)
ber. C 76.83; H 6.17; N 3.84;
gef. C 75.91; H 6.23; N 4.19.
300 mg (0.66 mmol) 1d und 200 mg Co₂B /3/ sowie 0,5 g NaBH₄ werden in 10 ml THF und 40 ml Methanol gelöst und für 2 h gerührt. Zur Aufarbeitung werden 5 proz. HCl zugefügt (pH 2-3), sodann wird mit NH₃ basisch gestellt und viermal mit 30 ml CHCl₃ extrahiert (bis der Extrakt auf DC aufgetüpfelt mit Ninhydrin keine Reaktion anzeigt!). Die Chloroform-Lösung wird über MgSO₄, getrocknet und i.V. eingeengt. Es werden 324 mg öliges Diamin-1e als Rohprodukt erhalten, das ohne Reinigung in die folgende Reaktion eingesetzt wird.
C₂₈H₃₅N₃O₃ (MG 461.61)
Stufe 6: Darstellung von (D,L)-1,2,6-Triamino-tris-[N,N,N-(2,3-dibenzyloxi-benzoyl)]heptan (Hexa-O-Benzyl-Myxochelin F, 1f):
300 mg Rohprodukt 1e aus der Vorreaktion werden mit 417 mg TBTU (1.23 mmol), 0.43 g Dibenzyloxibenzoesäure (1.23 mmol) und 0.44 ml (2.6 mmol) Hünig-Base in 50 ml trockenem Dichlormethan gelöst und bei RT für 72 h gerührt. Die Aufarbeitung erfolgt wie für 1b beschrieben. Gereinigt wird mittels Flash-Chromatographie mit dem Laufmittel n-Hexan/Essigsäureethylester= 1 : 1. Es werden 311 mg 1f erhalten, 43% bezogen auf 1d aus Stufe 4.
IR (KBr): ν = 3370 (NH), 2850, 2915, 3020, 3055 (CH), 1630 (Amid-I), 1565 cm-1 (Amid-II). - ESI-MS: m/z (%): 1094.4 (100) [M+H]⁺, 1116.5 (65) [M+Na]⁺, 1132.4 (36) [M+K]⁺. - ¹³C-NMR (75.4 MHz, CDCl₃), δ (ppm) = 25.7 (t, C-5), 26.9 (t, C-4), 29.2 (t, C-6), 32.3 (t, C-3), 39.7 (t, C-7), 43.5 (t, C-1), 49.9 (d, C-2), 71.4, 71.4, 71.4, 75.9, 76.2, 76.5 (t, -O-CH₂-Phe), 117.0, 117.1, 117.2 (d, arom. =CH-), 123.4, 123.6, 123.7 und 124.4, 124.5, 124.6 (d, arom. =CH-), 127.2, 127.7, 128.0 (s, quart. arom. =C-), 127.8, 127.9, 127.9, 128.5, 128.5, 128.7, 128.7, 128.8, 128.80, 128.85, 128.85, 128.90, 128.90, 128.93, 128.93 (alle als d, arom. =CH-), 136.57, 136.6, 136.6,136.63, 136.7, 136.7, (s, quart. arom. =C-), 146.9, 147.0,147.1 (s, quart. =C-O), 151.9, 152.0, 152.0 (s, quart. =C-O), 165.2,165.4, 165.9 (s, Amid-CO). -
Für C₇₀H₆₇N₃O₉ (MG 1094.33)
ber. C 76.83; H 6.17; N 3.84;
gef. C 75.91; H 6.23; N 4.19.
Stufe 7: Darstellung von (D,L)-1,2,6-Triamino-tris-[N¹,N²,N⁶-(2,3-dihydroxi-benzoyl)]heptan
(Myxochelin F, 1):
113 mg (0.1 mmol) 1f werden in 20 ml THF und 30 ml Methanol gelöst und mit Pd/C-H₂ für 2 h hydriert. Über Kieselgur wird filtriert, die Lösung i.V. eingeengt, Ausbeute 50 mg, 87% . - IR (KBr): ν = 3360 (NH), 2920, 2850 (CH), 1640 (Amid-I), 1580 (Aromat), 1540 cm-1 (Amid-II). - ESI-MS: m/z (%) = 576 (100) [M+Na]⁺. -
¹³C-NMR (100.6 MHz, CD₃OD): δ (ppm) = 26.9 (t, C-4), 27.8 (t, C-5), 30.3 (t, C-6), 33.1 (t, C-3), 40.4 (t, C-7), 44.6 (t, C-1), 51.2 (d, C-2), 116.9, 116.9, 117.0 (s, quart. arom. =C-), 118.7, 118.9, 119.0, 119.6, 119.7, 119.7 (alle d, arom. =CH-), 147.3, 147.3, 147.4 (s, arom. =C-O-), 150.2, 150.2, 150.3 (s, arom. =C-O-), 171.5, 171.8, 172.0 (s,Amid-CO). -
Für C₂₈H₃₁N₃O₉ (MG 553.58)
ber. C 60.75; H 5.64; N 7.59;
gef. C 53.30; H 4.73; N 6.37.
113 mg (0.1 mmol) 1f werden in 20 ml THF und 30 ml Methanol gelöst und mit Pd/C-H₂ für 2 h hydriert. Über Kieselgur wird filtriert, die Lösung i.V. eingeengt, Ausbeute 50 mg, 87% . - IR (KBr): ν = 3360 (NH), 2920, 2850 (CH), 1640 (Amid-I), 1580 (Aromat), 1540 cm-1 (Amid-II). - ESI-MS: m/z (%) = 576 (100) [M+Na]⁺. -
¹³C-NMR (100.6 MHz, CD₃OD): δ (ppm) = 26.9 (t, C-4), 27.8 (t, C-5), 30.3 (t, C-6), 33.1 (t, C-3), 40.4 (t, C-7), 44.6 (t, C-1), 51.2 (d, C-2), 116.9, 116.9, 117.0 (s, quart. arom. =C-), 118.7, 118.9, 119.0, 119.6, 119.7, 119.7 (alle d, arom. =CH-), 147.3, 147.3, 147.4 (s, arom. =C-O-), 150.2, 150.2, 150.3 (s, arom. =C-O-), 171.5, 171.8, 172.0 (s,Amid-CO). -
Für C₂₈H₃₁N₃O₉ (MG 553.58)
ber. C 60.75; H 5.64; N 7.59;
gef. C 53.30; H 4.73; N 6.37.
Synthese von (L)-2,6-Diamino-bis-[N²,N⁶-(2,3-dibenzyloxi-benzoyl)]hexan-nitril (2b):
0.98 g (1.2 mmol) 2a werden in 15 ml absolutiertem Dichlormethan gelöst und mit 0.29 ml Pyridin und 176 mg Triphosgen versetzt. Nach Aufarbeiten - wie für 1d beschrieben - werden 670 mg 2b erhalten (73.6%).[α] = -16.1 (c = 1 in CHCl₃). -
IR (KBr): ν = 3367 (NH), 2866, 2927, 3031, 3064 (CH), 2230 (CN), 1661 (Amid-I), 1520 cm-1 (Amid-II). - ¹³C-NMR (75.4 MHz, CDCl₃): δ (ppm) = 22.7 (t, C-4), 28.4 (t, C-5), 32.1 (t, C-3), 39.0 (t, C-6), 40.3 (d, C-2), 71.3, 71.4, 76.4, 76.6 (t, -O-CH₂-Phe), 117.0, 117.9 (d, arom. =CH-), 118.5 (s, -CN), 123.3, 123.4, 124.4, 124.5 (d, arom. =CH-), 127.6, 127.6, 128.4, 128.4 (d, arom. =C-H), 128.3, 128.4 (s, quart. arom. =C-), 128.7 (4 × C), 128.8 (8 × C), 129.0 (4 × C, alle d, 16 arom. =CH- aus Bn-Gruppen), 135.9, 136.0, 136.2, 136.4 (s, arom. =C- aus Bn-Gruppen), 146.8, 147.1 (s, quart. arom. -O- C=), 151.6, 151.7 (s, quart. arom. O-C=), 164.5, 165.0 (s, Amid-CO). -
Für C₇₅H₄₅N₃O₆ (MG 759.91)
ber. C 75.87; H 5.97; N 5.53;
gef. C 72.18; H 5.63; N 4.16.
0.98 g (1.2 mmol) 2a werden in 15 ml absolutiertem Dichlormethan gelöst und mit 0.29 ml Pyridin und 176 mg Triphosgen versetzt. Nach Aufarbeiten - wie für 1d beschrieben - werden 670 mg 2b erhalten (73.6%).[α] = -16.1 (c = 1 in CHCl₃). -
IR (KBr): ν = 3367 (NH), 2866, 2927, 3031, 3064 (CH), 2230 (CN), 1661 (Amid-I), 1520 cm-1 (Amid-II). - ¹³C-NMR (75.4 MHz, CDCl₃): δ (ppm) = 22.7 (t, C-4), 28.4 (t, C-5), 32.1 (t, C-3), 39.0 (t, C-6), 40.3 (d, C-2), 71.3, 71.4, 76.4, 76.6 (t, -O-CH₂-Phe), 117.0, 117.9 (d, arom. =CH-), 118.5 (s, -CN), 123.3, 123.4, 124.4, 124.5 (d, arom. =CH-), 127.6, 127.6, 128.4, 128.4 (d, arom. =C-H), 128.3, 128.4 (s, quart. arom. =C-), 128.7 (4 × C), 128.8 (8 × C), 129.0 (4 × C, alle d, 16 arom. =CH- aus Bn-Gruppen), 135.9, 136.0, 136.2, 136.4 (s, arom. =C- aus Bn-Gruppen), 146.8, 147.1 (s, quart. arom. -O- C=), 151.6, 151.7 (s, quart. arom. O-C=), 164.5, 165.0 (s, Amid-CO). -
Für C₇₅H₄₅N₃O₆ (MG 759.91)
ber. C 75.87; H 5.97; N 5.53;
gef. C 72.18; H 5.63; N 4.16.
Synthese von (L)-2,6-Diamino-bis-[N²,N⁶-(2,3-dihydroxi-benzoyl)]hexannitril(Myxoc-helin C-
Nitril, 2):
Es werden 90 mg (0. 12 mmol) 2b unter Standardbedingungen hydriert. Nach Filtration über Kieselgur und Einengen i.V. werden 45 mg (95%) 2 isoliert.[α] = -12 (c = 1 in Methanol). -
MG 399.43.
Es werden 90 mg (0. 12 mmol) 2b unter Standardbedingungen hydriert. Nach Filtration über Kieselgur und Einengen i.V. werden 45 mg (95%) 2 isoliert.[α] = -12 (c = 1 in Methanol). -
MG 399.43.
Ferner betrifft die Erfindung das Myxochelin D-Nitril (3) und das Verfahren zu seiner
Herstellung. 3 wird - wie schon für 2 dargestellt - aus dem Tetra-benzyl-geschützten
Myxochelin D-Nitril (3a) durch hydrogenolytische Spaltung an Pd/C mittels H₂ erhalten.
3a ist wie folgt charakterisiert:
(L)-2,5-Diamino-bis-[N²,N⁵-(2,3-dibenzyloxi-benzoyl)]pentan-nitril
(Tetra-O-benzyl-Myxochelin D-Nitril, 3a):Fp. 134-136°C. - [α] = -18.4 (c = 1 in Methanol). - IR (KBr): ν = 3360 (NH), 3015,
3065, 2900, 2925, 2860 (CH), 1650 (Amid-I), 1520 cm-1 (Amid-II). -
CI-(+)-MS: m/z (%) = 746 (100) [M+H]⁺
¹³C-NMR (75.9 MHz, CDCl₃): δ (ppm) = 25.4 (t, C-4), 30.0 (t, C-3), 38.5 (t, C-5), 40.3 (d, C-2), 71.3, 71.4, 76.5, 76.7 (t, -O-CH₂-Phenyl), 117.1, 117.9 (d, arom. =CH-), 118.3 (s, -CN), 123.4,123.5, 124.4, 124.5 (d, arom. =CH-), 127.6, 127.7 (d, arom. =CH-), 128.3, 128.4 (s, quart. arom. =C-), 128.7, 128.8, 128.9, 129.1 (18 C, d, arom. =CH-), 135.8, 136.2, 136.3, 136.4 (s, qart. arom. =C-), 146.9, 147.1 (s, quart. arom. -O-C=), 151.6, 151.63 (s, quart. arom. -O-C=), 164.4, 165.0 (s, sek. Amid-CO). -
Für C₄₇H₄₃N₃O₆ (MG 745.87)
ber. C 75.68; H 5.81; N 5.63;
gef. C 75.66; H 5.80; N 5.36.
CI-(+)-MS: m/z (%) = 746 (100) [M+H]⁺
¹³C-NMR (75.9 MHz, CDCl₃): δ (ppm) = 25.4 (t, C-4), 30.0 (t, C-3), 38.5 (t, C-5), 40.3 (d, C-2), 71.3, 71.4, 76.5, 76.7 (t, -O-CH₂-Phenyl), 117.1, 117.9 (d, arom. =CH-), 118.3 (s, -CN), 123.4,123.5, 124.4, 124.5 (d, arom. =CH-), 127.6, 127.7 (d, arom. =CH-), 128.3, 128.4 (s, quart. arom. =C-), 128.7, 128.8, 128.9, 129.1 (18 C, d, arom. =CH-), 135.8, 136.2, 136.3, 136.4 (s, qart. arom. =C-), 146.9, 147.1 (s, quart. arom. -O-C=), 151.6, 151.63 (s, quart. arom. -O-C=), 164.4, 165.0 (s, sek. Amid-CO). -
Für C₄₇H₄₃N₃O₆ (MG 745.87)
ber. C 75.68; H 5.81; N 5.63;
gef. C 75.66; H 5.80; N 5.36.
Synthese von (L)-2,5-Diamino-bis-[N²,N⁵-(2,3-dihydroxi-benzoyl)]pentan-nitril (Myxochelin
D-Nitril, 3):
50 mg (7.7 × 10-5 mol) L-2,5-diamino-bis-[N², N⁵-(2,3-dibenzyloxi-benzoyl)]-pentannitril (3a) werden unter Standardbedingungen hydriert. Nach Filtration über Kieselgur und Einengen i.V. werden 24 mg (93.4%) 3 erhalten. -[α] = -14.5 (c = 0.9 in Methanol). -
IR (KBr): ν = 3360 NH), 2925 (CH), 2230 (CN), 1630 (Amid-I), 1525 cm-1 (Amid-II). - ¹³C-NMR (125.6 MHz, CD₃OD): δ (ppm) = 26.8 (t, C-4), 31.0 (t, C-3), 39.4 (t, C-5), 41.5 (d, C-2), 116.1, 116.7 (s, quart. arom. -C=), 118.7, 119.1 (d, arom. =CH-), 118.7 (s, -CN), 119.6, 119.7, 120.0, 120.4 (d, arom. =CH-), 147.3, 147.4, 150.2, 150.3 (s, quart. -O-C=), 171.1, 171.7 (s, sek. Amid-CO). -
¹H-NMR (500 MHz, CD₃OD): δ (ppm) = 1.02 (quin., J₁= 14.8 Hz, J₂= 7.4 Hz, 2H, 4-CH₂-), 1.25 (9 Linien, J₁= 15.5, J₂= 7.8, J₃= 7.7 Hz, 2H, 3-CH₂-), 2.67 (dd, J₁= 6.6, J₂= 7.0 Hz, 1H, 2-H), 5.91 (dd, J₁= 7.8, J₂= 8.1 Hz, 1H, meta-Harom.), 5.95 (dd, J₁= 8.1, J₂= 8.2 Hz, 1H, meta-Harom.), 6.13 (dd, J₁= 1.2, J₂= 7.8 Hz, 1H, para-Harom.), 6.17 (dd, J₁= 1.2, J₂= 7.8 Hz, 1H, para-Harom.), 6.41 (dd, J₁= 1.5, J₂= 8.1 Hz, 1H, Ortho-Harom. ), 6.45 (d, J₁= 1.1, J₂= 8.1 Hz, 1H, Ortho-Harom.). -
ESI-(+)-MS : M/z (%) = 408 (100), [M+Na]⁺. -
Für C,₉H₁₉N₃O₆ (MG 385.39)
ber. C 59.36; H 4.72; N 10.93;
gef. C 57.10; H 5.44; N 9.78.
50 mg (7.7 × 10-5 mol) L-2,5-diamino-bis-[N², N⁵-(2,3-dibenzyloxi-benzoyl)]-pentannitril (3a) werden unter Standardbedingungen hydriert. Nach Filtration über Kieselgur und Einengen i.V. werden 24 mg (93.4%) 3 erhalten. -[α] = -14.5 (c = 0.9 in Methanol). -
IR (KBr): ν = 3360 NH), 2925 (CH), 2230 (CN), 1630 (Amid-I), 1525 cm-1 (Amid-II). - ¹³C-NMR (125.6 MHz, CD₃OD): δ (ppm) = 26.8 (t, C-4), 31.0 (t, C-3), 39.4 (t, C-5), 41.5 (d, C-2), 116.1, 116.7 (s, quart. arom. -C=), 118.7, 119.1 (d, arom. =CH-), 118.7 (s, -CN), 119.6, 119.7, 120.0, 120.4 (d, arom. =CH-), 147.3, 147.4, 150.2, 150.3 (s, quart. -O-C=), 171.1, 171.7 (s, sek. Amid-CO). -
¹H-NMR (500 MHz, CD₃OD): δ (ppm) = 1.02 (quin., J₁= 14.8 Hz, J₂= 7.4 Hz, 2H, 4-CH₂-), 1.25 (9 Linien, J₁= 15.5, J₂= 7.8, J₃= 7.7 Hz, 2H, 3-CH₂-), 2.67 (dd, J₁= 6.6, J₂= 7.0 Hz, 1H, 2-H), 5.91 (dd, J₁= 7.8, J₂= 8.1 Hz, 1H, meta-Harom.), 5.95 (dd, J₁= 8.1, J₂= 8.2 Hz, 1H, meta-Harom.), 6.13 (dd, J₁= 1.2, J₂= 7.8 Hz, 1H, para-Harom.), 6.17 (dd, J₁= 1.2, J₂= 7.8 Hz, 1H, para-Harom.), 6.41 (dd, J₁= 1.5, J₂= 8.1 Hz, 1H, Ortho-Harom. ), 6.45 (d, J₁= 1.1, J₂= 8.1 Hz, 1H, Ortho-Harom.). -
ESI-(+)-MS : M/z (%) = 408 (100), [M+Na]⁺. -
Für C,₉H₁₉N₃O₆ (MG 385.39)
ber. C 59.36; H 4.72; N 10.93;
gef. C 57.10; H 5.44; N 9.78.
Ferner betrifft die Erfindung das Myxochelin DR-Nitril R-3, und das Verfahren zu seiner
Herstellung, die auf dem gleichen Weg wie für 3 beschrieben verläuft. Die Vorstufe R-3a
zeigt die gleichen spektroskopischen Eigenschaften wie 3a besitzt aber einen Drehwert von:[α] = +16.9 (c = 1 in Methanol). -
(R)-2,5-Diamino-bis-[N²,N⁵-(2,3-dihydroxi-benzoyl)]pentan-nitril(Myx-ochelin DR-Nitril, R-3):
Es werden 48 mg R-3a unter Standardbedingungen bei Normaldruck hydriert. Nach Abfiltrieren über Kieselgur und Einengen i.V. werden 22 mg (88.7%) R-3 gewonnen. Die spektroskopischen Eigenschaften siehe bei der Beschreibung für R-3.[α] = +16 (c = 1 in Methanol). -
Ferner betrifft die Erfindung das Enantiomere des Naturstoffs Myxochelin B das Myxochelin BR (R-4) und das Verfahren zu seiner Darstellung.
(R)-2,5-Diamino-bis-[N²,N⁵-(2,3-dihydroxi-benzoyl)]pentan-nitril(Myx-ochelin DR-Nitril, R-3):
Es werden 48 mg R-3a unter Standardbedingungen bei Normaldruck hydriert. Nach Abfiltrieren über Kieselgur und Einengen i.V. werden 22 mg (88.7%) R-3 gewonnen. Die spektroskopischen Eigenschaften siehe bei der Beschreibung für R-3.[α] = +16 (c = 1 in Methanol). -
Ferner betrifft die Erfindung das Enantiomere des Naturstoffs Myxochelin B das Myxochelin BR (R-4) und das Verfahren zu seiner Darstellung.
Hierzu wird ausgegangen von R-2b, dessen spektroskopische Eigenschaften mit Ausnahme
des Drehwertes die gleichen wie für 2b sind /4/. Der Drehwert beträgt für R-2b: [α]D= +
18.5 (c = 1 in CHCl₃). Das Nitril R-2b wird mittels NaCNBH₃ in das pimäre Amin
überführt, das durch Standardhydrierung bei RT und unter Normaldruck für 2h am Pd/C-
Katalysator hydriert wird:
(R)-1,2,6-Triamino-bis-[N²,N⁶-(2,3-dihydroxi-benzoyl)]hexan-hydrochl-orid (Myxochelin BR-
Hydrochlorid, R-4):[α] = +7 (c = 0.5 in 6N HCl). - (Der Naturstoff Myxochelin B besitzt [α] = -8
(c = 1 in 6N HCl) /4/. -
¹³C-NMR (75.4 MHz, DMSO-d₆): δ (ppm) = 22.9 (t, C-4), 28.7 (t, C-5), 31.3 (t, C-3), 38.6 (t, C-6), 48.7 (d, C-2), 44.0 (t, C-1), 115.7,115.7 (s, quart. arom. C), 114.1, 115.8, 116.0, 117.2, 117.8, 118.4 (d, arom. =CH-), 147.0,147.6, 151.6, 153.6 (s, quart. -O- C=), 169.3, 169.9 (s, sek. Amid.CO). -
FAB-(+)-MS: m/z (%) = 404 (100) [M+H]⁺. - C₂₀H₂₅N₃O₆ (MG 403.44).
¹³C-NMR (75.4 MHz, DMSO-d₆): δ (ppm) = 22.9 (t, C-4), 28.7 (t, C-5), 31.3 (t, C-3), 38.6 (t, C-6), 48.7 (d, C-2), 44.0 (t, C-1), 115.7,115.7 (s, quart. arom. C), 114.1, 115.8, 116.0, 117.2, 117.8, 118.4 (d, arom. =CH-), 147.0,147.6, 151.6, 153.6 (s, quart. -O- C=), 169.3, 169.9 (s, sek. Amid.CO). -
FAB-(+)-MS: m/z (%) = 404 (100) [M+H]⁺. - C₂₀H₂₅N₃O₆ (MG 403.44).
Die Wirkung von 1-5 und R-(1-5) wird mittels eines Bioassays bewiesen.
Folgende Stämme von Enterobakterien (gram-negative Bakterien) werden durch 1-5 und
R-(1-5) in der Konzentration von 5 µg/disc derart gut mit Eisen versorgt, daß die Stämme
in einem an Eisen verarmten Medium dennoch enorme Wachstumszonen (in mm) zeigen:
1: Y. enterocolitica (18), M. morganii (32, P. aeruginosa (17);
R-2: S. typhimurium (14), M. morganii (36), P. aeruginosa (18);
3: M. morganii (35), P. aeruginosa (19), M. smegmatis (20);
R-3: Y. enterocolitica (17), M. morganii (38), P. aeruginosa (27), M. smegmatis (20);
R-4: S. typhimurium (22), Y. enterocolitica (19), M. morganii (34), P. aeruginosa (20), M. smegmatis (22);
5: M.morganii (24). -
Die Testbedingungen sind publiziert /5,6/.
R-2: S. typhimurium (14), M. morganii (36), P. aeruginosa (18);
3: M. morganii (35), P. aeruginosa (19), M. smegmatis (20);
R-3: Y. enterocolitica (17), M. morganii (38), P. aeruginosa (27), M. smegmatis (20);
R-4: S. typhimurium (22), Y. enterocolitica (19), M. morganii (34), P. aeruginosa (20), M. smegmatis (22);
5: M.morganii (24). -
Die Testbedingungen sind publiziert /5,6/.
Claims (12)
1. Die Erfindung beansprucht neue synthetische Siderophore der allgemeinen Form:
Für eine Reihe von unter anderen auch stark pathogenen Enterobakterien stellen die
Verbindungen 1-5 und R-(1-5) äußerst effektive Eisentransportsysteme dar.
2. Myxochelin F (1), gekennzeichnet durch einen oder mehrere der folgenden Parameter
IR (KBr): ν = 3360 (NH), 2920, 2850 (CH), 1640 (Amid-I), 1580 (Aromat), 1540 cm-1
(Amid-II). - ESI-MS: m/z (%) = 576 (100) [M+Na]⁺. -
¹³C-NMR (100.6 MHz, CD₃OD): δ (ppm) = 26.9 (t, C-4), 27.8 (t, C-5), 30.3 (t, C-6), 33.1 (t, C-3), 40.4 (t, C-7), 44.6 (t, C-1), 51.2 (d, C-2), 116.9, 116.9,117.0 (s, quart. arom. =C-), 118.7, 118.9, 119.0, 119.6, 119.7, 119.7 (alle d, arom. =CH-), 147.3, 147.3, 147.4 (s, arom. =C-O-), 150.2, 150.2, 150.3 (s, arom. =C-O-), 171.5, 171.8, 172.0 (s, Amid-CO). -
Für C₂₈H₃₁N₃O₉ (MG 553.58)
ber. C 60.75; H 5.64; N 7.59;
gef. C 53.30; H 4.73; N 6.37.
¹³C-NMR (100.6 MHz, CD₃OD): δ (ppm) = 26.9 (t, C-4), 27.8 (t, C-5), 30.3 (t, C-6), 33.1 (t, C-3), 40.4 (t, C-7), 44.6 (t, C-1), 51.2 (d, C-2), 116.9, 116.9,117.0 (s, quart. arom. =C-), 118.7, 118.9, 119.0, 119.6, 119.7, 119.7 (alle d, arom. =CH-), 147.3, 147.3, 147.4 (s, arom. =C-O-), 150.2, 150.2, 150.3 (s, arom. =C-O-), 171.5, 171.8, 172.0 (s, Amid-CO). -
Für C₂₈H₃₁N₃O₉ (MG 553.58)
ber. C 60.75; H 5.64; N 7.59;
gef. C 53.30; H 4.73; N 6.37.
3. Myxochelin C-Nitril (2), gekennzeichnet durch einen oder mehrere der folgenden
Parameter:[α] = -12 (c = 1 in Methanol). -
MG 399.43.
MG 399.43.
4. Myxochelin D-Nitril (3) gekennzeichnet durch einen oder mehrere der folgenden
Parameter:[α] = -14.5 (c = 0.9 in Methanol). -
IR (KBr): ν = 3360 (NH), 2925 (CH), 2230 (-CN), 1630 (Amid-I), 1525 cm (Amid-II). -
¹³C-NMR (125.6 MHz, CD₃OD): δ (ppm) = 26.8 (t, C-4), 31.0 (t, C-3), 39.4 (t, C-5), 41.5 (d, C-2), 116.1, 116.7 (s, quart. arom. -C=), 118.7, 119.1 (d, arom. =CH-) 118.7 (s, -CN), 119.6, 119.7, 120.0, 120.4 (d, arom. =CH-), 147.3, 147.4, 150.2, 150.3 (s, quart. -O-C=), 171.1, 171.7 (s, sek. Amid-CO). -
¹H-NMR (500 MHz, CD₃OD): δ (ppm) = 1.02 (quin., J₁= 14.8 Hz, J₂= 7.4 Hz, 2H, 4-CH₂-), 1.25 (9 Linien, J₁= 15.5, J₂= 7.8, J₃= 7.7 Hz, 2H, 3-CH₂-), 2.67 (dd, J₁= 6.6, J₂= 7.0 Hz, 1H, 2-H), 5.91 (dd, J₁= 7.8, J₂= 8.1 Hz, 1H, meta-Harom.), 5.95 (dd, J₁= 8.1, J₂= 8.2 Hz, 1H, meta-Harom.), 6.13 (dd, J₁= 1.2, J₂= 7.8 Hz, 1H, para-Harom.), 6.17 (dd, J₁= 1.2, J₂= 7.8 Hz, 1H, para-Harom.), 6.41 (dd, J₁= 1.5, J₂= 8.1 Hz, 1H, ortho-Harom. ), 6.45 (d, J₁= 1.1, J₂= 8.1 Hz, 1H, ortho-Harom.). -
ESI-(+)-MS : M/z (%) = 408 (100), [M+Na]⁺. -
Für C₁₉H₁₉N₃O₆ (MG 385.39)
ber. C 59.36; H 4.72; N 10.93;
gef. C 57.10; H 5.44; N 9.78.
IR (KBr): ν = 3360 (NH), 2925 (CH), 2230 (-CN), 1630 (Amid-I), 1525 cm (Amid-II). -
¹³C-NMR (125.6 MHz, CD₃OD): δ (ppm) = 26.8 (t, C-4), 31.0 (t, C-3), 39.4 (t, C-5), 41.5 (d, C-2), 116.1, 116.7 (s, quart. arom. -C=), 118.7, 119.1 (d, arom. =CH-) 118.7 (s, -CN), 119.6, 119.7, 120.0, 120.4 (d, arom. =CH-), 147.3, 147.4, 150.2, 150.3 (s, quart. -O-C=), 171.1, 171.7 (s, sek. Amid-CO). -
¹H-NMR (500 MHz, CD₃OD): δ (ppm) = 1.02 (quin., J₁= 14.8 Hz, J₂= 7.4 Hz, 2H, 4-CH₂-), 1.25 (9 Linien, J₁= 15.5, J₂= 7.8, J₃= 7.7 Hz, 2H, 3-CH₂-), 2.67 (dd, J₁= 6.6, J₂= 7.0 Hz, 1H, 2-H), 5.91 (dd, J₁= 7.8, J₂= 8.1 Hz, 1H, meta-Harom.), 5.95 (dd, J₁= 8.1, J₂= 8.2 Hz, 1H, meta-Harom.), 6.13 (dd, J₁= 1.2, J₂= 7.8 Hz, 1H, para-Harom.), 6.17 (dd, J₁= 1.2, J₂= 7.8 Hz, 1H, para-Harom.), 6.41 (dd, J₁= 1.5, J₂= 8.1 Hz, 1H, ortho-Harom. ), 6.45 (d, J₁= 1.1, J₂= 8.1 Hz, 1H, ortho-Harom.). -
ESI-(+)-MS : M/z (%) = 408 (100), [M+Na]⁺. -
Für C₁₉H₁₉N₃O₆ (MG 385.39)
ber. C 59.36; H 4.72; N 10.93;
gef. C 57.10; H 5.44; N 9.78.
5. Myxochelin DR-Nitril (R-3), gekennzeichnet durch einen oder mehrere der folgenden
Parameter:
Die spektroskopischen Eigenschaften siehe bei der Beschreibung für R-3.[α] = +16 (c = 1 in Methanol). -
Die spektroskopischen Eigenschaften siehe bei der Beschreibung für R-3.[α] = +16 (c = 1 in Methanol). -
6. Myxochelin BR (R-3), gekennzeichnet durch einen oder mehrere der folgenden Parameter:[α] = +7 (c = 0.5 in 6N HCl). - (Der Naturstoff Myxochelin B besitzt [α] = -8
(c = 1 in 6N HCl). -
¹³C-NMR (75.4 MHz, DMSO-d₆): δ (ppm) = 22.9 (t, C-4), 28.7 (t, C-5), 31.3 (t, C-3), 38.6 (t, C-6), 48.7 (d, C-2), 44.0 (t, C-1), 115.7, 115.7 (s, quart. arom. C), 114.1, 115.8, 116.0, 117.2, 117.8, 118.4 (d, arom. =CH-), 147.0, 147.6,151.6, 153.6 (s, quart. -O- C=), 169.3, 169.9 (s, sek. Amid.CO). -
FAW(+)-MS: m/z (%) = 404 (100) [M+H]⁺. -
C₂₀H₂₅N₃O₆ (MG 403.44).
¹³C-NMR (75.4 MHz, DMSO-d₆): δ (ppm) = 22.9 (t, C-4), 28.7 (t, C-5), 31.3 (t, C-3), 38.6 (t, C-6), 48.7 (d, C-2), 44.0 (t, C-1), 115.7, 115.7 (s, quart. arom. C), 114.1, 115.8, 116.0, 117.2, 117.8, 118.4 (d, arom. =CH-), 147.0, 147.6,151.6, 153.6 (s, quart. -O- C=), 169.3, 169.9 (s, sek. Amid.CO). -
FAW(+)-MS: m/z (%) = 404 (100) [M+H]⁺. -
C₂₀H₂₅N₃O₆ (MG 403.44).
7. Ferner betrifft die Erfindung ein therapeutisches Mittel bestehend mindestens aus einem
der erwähnten Siderophore neben einem üblichen Träger und/oder Verdünnungsmittel.
Dieses Mittel kann zur Entfernung von Eisen und Aluminium bei den verschiedensten
Erkrankungen des Menschen und von Tieren z. B. bei der Hämosiderose oder der
Thalassämie oder auch bei Morbus Alzheimer eingesetzt werden.
8. Ferner betrifft die Erfindung ein therapeutisches Mittel bestehend mindestens aus einem
der erwähnten Siderophore neben einem üblichen Träger und/oder Verdünnungsmittel.
Dieses Mittel kann zur Bekämpfung von viraler, bakterieller oder parasitärer Erkrankungen
von Mensch und Tier eingesetzt werden.
9. Ferner betrifft die Erfindung ein therapeutisches Mittel bestehend mindestens aus einem
der erwähnten mit Eisen beladenen Siderophore neben einem üblichen Träger und/oder
Verdünnungsmittel. Diese Mittel können zur chemo-therapeutischen Behandlung von
Tumoren eingesetzt werden. Dieser Einsatz ergibt sich aus der Tatsache, daß Eisen-
Komplexe in der Lage sind, Sauerstoff-Radikale zu erzeugen, die, wenn sie in die Nähe von
DNA oder RNA gelangen, diese zerstören.
10. Ferner betrifft die Erfindung ein Mittel bestehend mindestens aus einem der erwähnten
Siderophore neben einem üblichen Träger und/oder Verdünnungsmittel.
Dieses Mittel kann eingesetzt werden in seiner Eigenschaft als Chelator zur Entfernung von
Metallen allgemein, diese können selbstverständlich auch radioaktiv sein.
11. Ferner betrifft die Erfindung ein Mittel, bevorzugt die Stoffe R-4 und 5 von denen
hiermit bekannt ist, daß sie die bakterielle Zellwand in einem aktiven Transportvorgang
überwinden können. R-4 und 5 lassen sich, bevorzugt über eine amidische Bindung an eine
Reihe von Antibiotika kuppeln, für die die bakterielle Zellwand - oder Zellwände höherer
Lebewesen - ein Hindernis darstellt. Auf diesem Wege lassen sich Wirkkonzentrationen
stark erniedrigen, und damit Nebenwirkungen, die erst durch erhöhte Wirkkonzentrationen
auftreten, drastisch verringern.
Aber auch jede beliebig andere Amino-Funktion der beanspruchten Stoffe läßt sich für
diesen Zweck durch gängige Schutzgruppentechnik bei ihrer Herstellung freisetzen, die
entsprechenden Verbindungen werden hiermit ebenfalls beansprucht.
12. Ferner betrifft die Erfindung ein Mittel, bestehend mindestens aus einem der erwähnten
Siderophore, das sich zur schnellen Analytik von pathogenen Enterobakterien einsetzen läßt.
Hierzu werden mit pathogenen Enterobakterien belastete Abstriche in einem Eisenmangel-
Medium inkubiert. Durch Zusatz eines der genannten Mittel gelingt es, selektiv nur einen
pathogenen Bakterienstamm zum Wachstum anzuregen. Dieser Anspruch bezieht sich
ausdrücklich auch auf die Hauptanmeldung, in der die Myxocheline C, D, E und ihre
Enantionmeren beansprucht sind.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE1996126020 DE19626020A1 (de) | 1994-12-22 | 1996-06-21 | Neue synthetische Siderophore als Metalltransporteure, Indikatoren zur schnellen Analytik pathogener Bakterien, als Wachtumsfaktoren und als chemotherapeutische Mittel |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE4447374A DE4447374A1 (de) | 1994-12-22 | 1994-12-22 | Myxochelin C und verwandte Verbindungen, neue Syntheseprodukte als Metalltransporteure und als chemo-therapeutische Mittel |
| DE1996126020 DE19626020A1 (de) | 1994-12-22 | 1996-06-21 | Neue synthetische Siderophore als Metalltransporteure, Indikatoren zur schnellen Analytik pathogener Bakterien, als Wachtumsfaktoren und als chemotherapeutische Mittel |
Publications (1)
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|---|---|
| DE19626020A1 true DE19626020A1 (de) | 1998-01-02 |
Family
ID=42315199
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DE4447374A Withdrawn DE4447374A1 (de) | 1994-12-22 | 1994-12-22 | Myxochelin C und verwandte Verbindungen, neue Syntheseprodukte als Metalltransporteure und als chemo-therapeutische Mittel |
| DE1996126020 Withdrawn DE19626020A1 (de) | 1994-12-22 | 1996-06-21 | Neue synthetische Siderophore als Metalltransporteure, Indikatoren zur schnellen Analytik pathogener Bakterien, als Wachtumsfaktoren und als chemotherapeutische Mittel |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DE4447374A Withdrawn DE4447374A1 (de) | 1994-12-22 | 1994-12-22 | Myxochelin C und verwandte Verbindungen, neue Syntheseprodukte als Metalltransporteure und als chemo-therapeutische Mittel |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0923538A1 (de) |
| AU (1) | AU6417296A (de) |
| DE (2) | DE4447374A1 (de) |
| WO (1) | WO1997049669A1 (de) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1999042435A3 (de) * | 1998-02-21 | 1999-12-16 | Analyticon Ag Biotechnologie P | Myxocheline |
| WO2008101909A1 (de) * | 2007-02-20 | 2008-08-28 | Henkel Ag & Co. Kgaa | Siderophor-metall-komplexe als bleichkatalysatoren |
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