DE1252686B

DE1252686B - Verfahren zur mikrobiologischen Oxydation organischer Verbindungen

Info

Publication number: DE1252686B
Application number: DENDAT1252686D
Authority: DE
Inventors: Amsterdam Gerard Johannes Emil Thijsse (Niederlande)
Original assignee: Shell Internationale Research Maatschappij N.V., Den Haag
Priority date: 1964-12-17
Publication date: 1967-10-26
Also published as: FR1417723A

Description

UNDESREPUBLIK DEUTSCHLAND

DEUTSCHES

PATENTAMT

AUSLEGESCHRIFT

Int.Cl,

C07c

C 0 7 J

Deutsche Kl.: 12 ο-27

Nummer: 1252686

Aktenzeichen: S 94671IV b/12 ο

Anmeldetag: 17. Dezember 1964

Auslegetag: 26. Oktober 1967

Es ist bekannt, daß gegebenenfalls substituierte Fettsäuren bei der mikrobiologischen Oxydation mit zur jß-Oxydation befähigten Mikroorganismen in der Regel in Carbonsäuren mit einer geringeren Anzahl Kohlenstoffatomen umgewandelt und diese im Verlauf S der weiteren Oxydation schließlich zu Kohlendioxyd und Wasser abgebaut werden. Die ^-Oxydation verläuft über eine «,^-ungesättigte Carbonsäure, eine ^-Hydroxycarbonsäure und eine ^-Ketocarbonsäure. Auch die entsprechenden Ester, Alkehyde, primären ίο Alkohole oder Kohlenwasserstoffe können auf demselben Wege durch Mikroorganismen abgebaut werden, wenn die Mikroorganismen in der Lage sind, diese Verbindungen zunächst durch Oxydation bzw. Hydrolyse in eine Carbonsäure umzuwandeln und anschließend eine /3-Oxydation herbeizuführen. Die mikrobiologische /?-Oxydation wird oft von anderen mikrobiologischen Reaktionen, z. B. einer ω-Oxydation, begleitet.

Es hat sich nun überraschenderweise herausgestellt, »0 daß die /3-Oxydation bedeutend gehemmt wird, wenn die mikrobiologische Oxydation in Gegenwart von Acrylsäure und/oder einem ihrer Salze, Ester oder Amide durchgeführt wird. Hierbei werden Oxydationsgemische mit einer Zusammensetzung erhalten, die sehr stark von der Zusammensetzung der durch mikrobiologische Oxydation in Abwesenheit von Acrylsäure oder funktionellen Derivaten derselben erhaltenen Gemische abweicht. Unterwirft man z. B. einen Kohlenwasserstoff der mikrobiologischen Oxydation in Gegenwart von Acrylsäure, so entsteht in guter Ausbeute eine Carbonsäure mit der gleichen Anzahl Kohlenwasserstoffatome wie das Ausgangsmaterial neben Ketonen und/oder Carbonsäuren mit weniger Kohlenstoffatomen und/oder Polycarbonsäuren.

Die Erfindung betrifft nun ein Verfahren zur mikrobiologischen Oxydation organischer Verbindungen der allgemeinen Formel

H H

I I

R'" — C — C—A

I I

R" R'

worin A eine Methylgruppe, eine gegebenenfalls veresterte Hydroxymethylgruppe, eine Formylgruppe, eine gegebenenfalls veresterte Carboxylgruppe, ein Metall- oder Ammoniumderivat der Carboxylgruppe oder eine Iminofonnylgruppe bedeutet und R', R" und R'" jeweils ein Wasserstoffatom oder ein gegebenenfalls durch Halogenatome, Methoxygruppen Verfahren zur mikrobiologischen Oxydation
organischer Verbindungen

Anmelder:

Shell Internationale Research

Maatschappij N. V., Den Haag

Vertreter:

Dr.-Ing. F. Wuesthoff, Dipl.-Ing. G. Puls und
Dipl.-Cb.em. Dr. rer. nat. E. Frhr. v. Pechmann,
Patentanwälte, München 9, Schweigerstr. 2

Als Erfinder benannt:

Gerard Johannes Emil Thijsse, Amsterdam

(Niederlande)

Beanspruchte Priorität:

Niederlande vom 19. Dezember 1963 (302 203)

oder Arylreste substituierter aliphatischer oder cycloaliphatischer Kohlenwasserstoffrest ist, zu aliphatischen, araliphatischen oder cycloaliphatischen Carbonsäuren und/oder aliphatischen, araliphatischen oder cycloaliphatischen Ketonen, wobei man eine oder mehrere Ausgangsverbindungen der angegebenen Formel entweder mit Sauerstoff und Mikroorganismen, die normalerweise die /S-Oxydation von Verbindungen der angegebenen Formel herbeiführen können und die, wenn der SubstituentA keine Carboxylgruppe ist, diesen zunächst in eine Carboxylgruppe überführen können, oder mit Sauerstoff und aus diesen Mikroorganismen isolierten Enzymsystemen bei einer Temperatur von etwa 15 bis etwa 40⁰C, vorzugsweise von etwa 20 bis etwa 37⁰C, insbesondere von etwa 28 bis 32⁰C zusammenbringt, und ist dadurch gekennzeichnet, daß man die Oxydation in Gegenwart von etwa 1 · 10~* bis etwa 50 · 10-·, vorzugsweise von 8 · 10"' bis etwa 15 · 10-* Mol Acrylsäure und/oder einem ihrer Salze, Ester oder Amide, bezogen auf 1 mg Trockengewicht der Mikroorganismen durchgeführt.

Bekanntlich wird angenommen, daß bei dem Abbau durch /ff-Oxydation die Carbonsäure an CoenzymA gebunden und daß die Aufspaltung des entstandenen aktivierten Komplexes aus der Ketocarbonsäure und Coenzym A durch die Einwirkung eines zweiten Coenzym-A-Moleküls herbeigeführt wird. Die Wirkung der Acrylsäure oder ihrer Salze, Ester oder Amide

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besteht möglicherweise darin, daß sie die aktivierende Die verwendeten aeroben Mikroorganismen können

Stufe und/oder das Abspalten der Ketocarbonsäure- Bakterien, Hefen oder Pilze sein. Als Beispiel für

gruppe hemmt. Bakterien seien die Familien Pseudomonaceae, Achro-

Wird eine Verbindung der obigen allgemeinen mobacteriaeeae.Coccaceae.Corynebacteriaceae.Myco-

Formel, worin A jedoch keine Carboxylgruppe ist, 5 bacteriaceae und Actinomycetaceae genannt, vor

als Ausgangsmaterial verwendet, so muß sie zunächst allem Arten der Gattung Pseudomonas, wie Ps. aeru-

in eine Carbonsäure der angegebenen Art übergeführt ginosa und Ps. fluorescens; der Gattung Achromo-

werden. Dies kann, wie schon erwähnt, sehr einfach bacter, wie A. agile; der Gattung Mycobacterium,

durch Wahl solcher Mikroorganismen geschehen, die wie M. lacticola und M. phlei; der Gattung Nocardia,

sowohl die Umwandlung in die Carbonsäure als auch io wie N. opaca; der Gattung Micrococcus, wie M. paraf-

die anschließende /^-Oxydation dieser Säure bewirken. finea; sowie Bakteriumarten, wie B. aliphaticum und

Gegebenenfalls kann jedoch die Carbonsäure ebenso B. aliphaticum liquefaciens, ferner Stämme von Co-

gut auch mit Hilfe von Mikroorganismen einer anderen rynebacterium. Beispiele für Hefen sind z. B. Mit-

Gruppe in situ oder in einem gesonderten Ansatz oder glieder der Gattung Candida, wie C. lipolytica und

durch eine rein chemische Reaktion hergestellt und 15 C. tropicalis; der Gattung Torulopsis, wie T. Collicu-

dann erst der /J-Oxydation unterworfen werden. losa, sowie Sacharomyceten, wie S. cerevisiae. Bei-

Die Erfindung bietet somit ein wertvolles Verfahren spiele für geeignete Pilze sind Aspergillusarten, wie

zur Umwandlung von Kohlenwasserstoffen, Alkoholen, A. flavus, und Penicilliumarten, wie P. notatum, ferner

Estern oder Aldehyden in die entsprechenden Carbon- Stämme von Botrytis cinera. Pseudomonasarten, ins-

säuren mit unverminderter Anzahl Kohlenstoffatome; ao besondere Ps. aeruginosa und Hefearten der Gattung

Da ein Teil der entstehenden Säure jedoch weiter- Candida, insbesondere C. lipolytica und C. tropicalis,

reagiert, so z. B. unter /ί-Oxydation zu einer anderen werden in dem erfindungsgemäßen Verfahren bevor-

Carbonsäure mit einer um 2 Kohlenstoffatome kür- zugt.

zeren Kette oder zu einem Methylketon, das nur Der erfindungsgemäßen Oxydation können Ver-1 Kohlenstoffatom weniger enthält als die Ursprung- «5 bindungen der angegebenen Formel unterworfen liehe Säure und vermutlich durch Decarboxylierung werden, in denen die Substituenten R', R" und R'" der als Zwischenprodukt auftretenden Ketocarbon- Wasserstoff oder gegebenenfalls durch Halogenatome, säure entsteht, sowie unter ω-Oxydation zu einer Methoxygruppen oder Arylgruppen substituierte Alkyl-Dicarbonsäure mit der gleichen Anzahl von Kohlen- gruppen und Cycloalkylgruppen und Arylgruppen Stoffatomen in dem Molekül, bietet das erfindungs- 30 oder Alkarylgruppen darstellen und der Substituent A gemäße Verfahren auch die Möglichkeit, verschiedene eine Methylgruppe, Formylgruppe, eine gegebenenwertvolle Produkte nebeneinander herzustellen. falls veresterte Hydroxymethyl- oder Carboxylgruppe,

Vorzugsweise werden in dem erfindungsgemäßen ein Metall- oder Ammoniumderivat einer Carboxyl-Verfahren Mikroorganismen verwendet, die auf Koh- gruppe oder eine Iminoformylgruppe ist. Der Substilenwasserstoffen unter Assimilation des Kohlenstoffs 35 tuent R'" enthält für gewöhnlich höchstens 28, voraus diesen Verbindungen wachsen können. Insbesondere zugsweise 2 bis 15, insbesondere 3 bis 8 Kohlenstoffgeeignet sind Mikroorganismen, die den notwendigen atome. Bevorzugt werden Verbindungen, in denen die Kohlenstoff aus Paraffinkohlenwasserstoffen oder Ge- Substituenten R', R" und R'" nicht oder nur wenig mischen derselben assimilieren können. Sehr gute verzweigt sind und in denen der Substituent A eine Ergebnisse werden erzielt, wenn man die Mikro- 40 Hydroxymethyl- oder eine Methylgruppe ist, insbeorganismen zunächst auf diesen Kohlenwasserstoffen, sondere Verbindungen, in denen R' und R" jeweils z. B. einem bestimmten Alkan oder einem Alkan- ein Wasserstoffatom, eine Methylgruppe oder eine gemisch wachsen läßt, wobei ausgezeichnete Ergebnisse Äthylgruppe darstellen, während der Substituent R'" erhalten werden, wenn der Kohlenwasserstoff ein vorzugsweise eine geradkettige Alkylgruppe ist. __ n-Alkan ist. Jedoch können auch verzweigtkettige 45 Beispiele für geeignete, erfindungsgemäß oxydier-Alkane und solche, die cyclische Gruppen enthalten, bare organische Verbindungen sind η-Hexan, n-Hepverwendet werden. Auch Olefine sind geeignet, wenn tan, 2-Methylhexan, n-Octan, n-Dodecan, n-Hexasie zumindest eine endständige Methylgruppe ent- decan, 1-Hepten, 1-Octen, 1-Hexadecen, 1-Hexanol, halten. Mineralöle oder -destillate oder Raffinatfrak- 1-Dodecanol, Cholesterin, Capronsäure, «-Methyltioneri derselben, wie Benzin, Kerosin, Schmieröl, so valeriansäure, Laurinsäure und Stearinsäure. Sehr Spindelöl, Gasöl und Paraffinwachs, und synthetische gute Ergebnisse wurden mit η-Hexan und n-Heptan Kohlenwasserstoffe, z. B. Produkte einer Fischer- erzielt. Kohlenwasserstoffgemische, ζ. Β. Benzin- oder Tropsch-Synthese, können ebenfalls verwendet werden. Kerosinf raktionen, können ebenfalls verwendet werden. Vielfach erwies es sich als besonders zweckmäßig, Die /J-Oxydation wird außer durch Acrylsäure auch Kohlenwasserstoffe mit der gleichen Anzahl Kohlen- 55 durch ihre Salze, Ester, Thioester oder Amide gestoffatome und den gleichen Verzweigungen zu ver- hemmt. Geeignet sind auch Verbindungen, die unter wenden wie die Verbindung, die mikrobiologisch den verfahrensmäßigen Bedingungen Acrylsäure oder oxydiert werden soll. Aus wirtschaftlichen Gründen eines der erwähnten Derivate bilden, z. B. Allylalkohol, werden im allgemeinen Kohlenwasserstoffgemische Bevorzugt werden jedoch Acrylsäure und/oder eines bevorzugt, die reich an solchen Kohlenwasserstoffen 60 ihrer AlkaUsale, insbesondere das Natriumsair versind, z. B. eine diesen Anforderungen entsprechende wendet.
Benzinfraktion. Im allgemeinen wird die Acrylsäure und/oder ihr

An Stelle der lebenden Mikroorganismen können Salz, Ester oder Amid in einer Menge von etwa 1 · 10-'

auch deren Enzymsysteme verwendet werden, die man bis etwa 50 · 10"· Mol/mg Mikroorganismen (Trocken-

in üblicher Weise isoliert, z, B. indem man die Mikro- 65 gewicht) angewandt. Sehr gute Ergebnisse wurden mit

Organismen der Plasmolyse unterwirft oder ihre Zellen Mengen von etwa 1 · 10-« bis etwa 40 · 1O^-6 Mol und

z. B. durch Ultraschallbehandlung aufbricht und an- insbesondere von etwa 8 · 10-· bis etwa 15 · 10-· Mol/mg

schließend die Enzymsysteme extrahiert. Mikroorganismen Trockengewicht erzielt.

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5 6

Das erfindungsgemäße Verfahren wird durchge- Candida, wie C. lipolytica und C. tropicalis, die als

führt, indem man die zu oxydierende organische Ver- Futtermittel für Rinder verwendet werden können,
bindung zusammen mit Acrylsäure oder einem ihrer

Derivate in innige Berührung mit Sauerstoff und den Beispiel

betreffenden Mikroorganismen oder deren Enzym- 5 , . _ .. _, , . .„

systemen bringt. Vorzugsweise wird in das Oxydations- <^a> ^Is0"^e"»S ^von Pseudomonas aerugmosa 473

gemisch ein sauerstoffhaltiges Gas, insbesondere Luft, 1 cm³ mit Öl stark verunreinigtes Hafenwasser

eingeführt. Die Mikroorganismen sind in dem Oxy- wurde dem Gemisch von 0,5 cm³ Kerosin und 50 cm³

dationsgemisch vorzugsweise in Form einer Suspension einer wäßrigen Lösung, enthaltend 4,5 g/l KHgPO₄,

in einem flüssigen, Wasser und mineralische Nähr- io 4,8 g/l Na₂HPO₄, 1,0 g/l KNO₃ und 0,005 g/l FeSO₄,

stoffe enthaltenden Medium anwesend. So kann z. B. pH-Wert 6,9, zugesetzt.

das Verfahren durchgeführt werden, indem ein fein- Das Gemisch wurde bei 30°C inkubiert und nach

zerteilter Luftstrom in eine Dispersion der organischen eingetretenem Wachstum eine Subkultur in einem

Verbindung in einer wäßrigen Lösung von Mineral- Gemisch aus Kerosin und einem mineralischen Me-

salzen, in der die Mikroorganismen suspendiert wurden, 15 dium der obigen Zusammensetzung hergestellt. Nach

unter kräftigem Rühren eingeleitet wird. der Entwicklung einer rasch wachsenden Mischkultur

Nach der Oxydation wird das Reaktionsgemisch wurde diese auf Agarplatten überimpft und eine Reinin üblicher Weise aufgearbeitet. Die Mikroorganismen kultur von Pseudomonas hergestellt. Diese Reinwerden von dem Oxydationsgemisch durch Filtrieren kultur erwies sich als ein Stamm (473) von Ps. aeru- oder Zentrifugieren abgetrennt und die Oxydations- ao ginosa.

produkte aus dem Filtrat, z. B. durch Extraktion, _{(b) züchtung der Bakterien}
gegebenenfalls nach Ansäuern, durch Wasserdampfdestillation oder nach anderen üblichen Verfahren Als Gärgefäß wurde ein Glasrohr von 1 m Länge gewonnen. Manchmal trennt sich eine Lösung der und 91 Inhalt verwendet, das am Boden mit einem Oxydationsprodukte in unverändertem Ausgangs- 45 gläsernen Filter versehen war, durch welches Luft material als organische Phase aus dem Oxydations- eingeblasen wurde. Ferner waren Einrichtungen für gemisch ab. Die Phasentrennung kann durch Zusatz die Zufuhr und Abfuhr der Suspension vorhanden, eines oberflächenaktiven Mittels unterstützt werden. Die Kolonne wurde mit einer Flüssigkeit der nach-Die entstandenen Carbonsäuren können leicht von stehenden Zusammensetzung gefüllt:
Ketonen und anderen Oxydationsprodukten über ihre 30 „ „ _po . ,

Salze abgetrennt werden. Zur Gewinnung der Reak- xr w ο ·* -f

tionsprodukte in reinem Zustand werden die üblichen Na₂HPO₄ 3,75 g

Verfahren, wie Destillation oder Extraktion, z. B. mit KNO₃ 5,0 g

Petroläther oder anderen geeigneten Lösungsmitteln MgSO₄ 0,25 g

angewandt. 35 H₃BO₃ 2,9 mg

Die Oxydation kann ansatzweise oder kontinuier- MnCl₂ · 4H₂O 1,8 mg

lieh, im Gleich- oder Gegenstrom, durchgeführt ZnSO₄ · 7H₂O 0,22 mg

werden. Vorzugsweise verwendet man ein Reaktions- CuSO₄ · 5H₂O 0,08 mg

rohr, durch das unter kräftigem Rühren die Suspension H₂MoO₄ · IH O o!oi5 mg

der Mikroorganismen abwärts fließt und mit einem 40 p_eQ O 005 mg

aufsteigenden Luftstrom in Berührung gebracht wird. ^s '

Die abfließende Suspension wird anschließend auf- die mit gereinigtem Wasser auf 11 aufgefüllt und deren

gearbeitet. Ebenso wie die Oxydation kann auch die pH-Wert auf 6,8 eingestellt war.

Züchtung der Mikroorganismen auf einem alkan- Der Kolonneninhalt wurde durch Umpumpen im

haltigen Nährmedium ansatzweise oder kontinuier- 45 Gegenstrom zu der am Boden eingeführten, aufsteigen-

lich erfolgen, wobei die entstandene Mikroorganismen- den Luft im Kreislauf geführt und die Kolonne selbst

suspension anschließend in die Oxydationszone ge- in vibrierender Bewegung gehalten, um eine gute

leitet wird. Dispergierung zu erzielen. Der Kolonneninhalt wurde

Die Temperatur und der pH-Wert werden im all- bei 25⁰C gehalten und η-Hexan in die im Kreislauf gemeinen derart gewählt, daß sie den Bedürfnissen der 50 befindliche Flüssigkeit eingespritzt,
verwendeten Mikroorganismen entsprechen. Es wird Nach dem Impfen des Kolonneninhalts mit einer im allgemeinen bei Temperaturen von etwa 15 bis Suspension des unter (a) beschriebenen Pseudomonas-40⁰C, vorzugsweise von etwa 20 bis etwa 37⁰C und Stammes wurde die Luftmenge und die Menge n-Hepinsbesondere von etwa 28 bis etwa 32" C gearbeitet. tan annähernd proportional zur Geschwindigkeit des Der pH-Wert kann etwa 4 bis 9 betragen. Ein ver- 55 Bakteriumwachstums allmählich gesteigert. Die zugehältnismäßig niederer pH-Wert kann manchmal führte Luftmenge betrug am 1. Tag 4 l/h, am 2. Tag zweckmäßig sein, um eine Infektion mit unerwünsch- 6 l/h und am 3. Tag 10 l/h. Schließlich verbrauchte ten Mikroorganismen zu verhüten. Vielfach werden die gut entwickelte Kultur etwa 50 % des eingeführten jedoch gute Ergebnisse bei Anwendung eines pH-Wer- atmosphärischen Sauerstoffs. Sobald eine Konzentrates von etwa 5 bis etwa 8 und insbesondere von etwa 60 tion von 10 g/l Bakterien (Feuchtgewicht) erreicht war, 6 bis etwa 7,2 erzielt. Das Verfahren wird gewöhnlich wurden die Bakterien abzentrifugiert.
unter Atmosphärendruck durchgeführt, doch können Für die unter (a) und (b) beschriebene Isolierung auch höhere Drücke, z. B. 5 at, angewendet werden. und Züchtung wird kein Schutz beansprucht.

Als Nebenprodukte werden bei der erfindungsge- .

mäßen Oxydation Mikroorganismen erhalten, die in 65 w Oxydation verschiedener

der Regel reich an Proteinen, Fetten und Vitaminen organischer Verbindungen

sind und daher als Futtermittel verwendet werden Aus dem nach (b) gewonnenen lebenden Bakterien

können. Das gilt insbesondere bei Hefen, z. B. der Art wurde eine Suspension in Sörensen-Phosphatpuffer

(pH 7,0) hergestellt, die 1 bis 2 mg/cm³ Bakterien (Trockengewicht) enthielt. 50 cm³ dieser Suspension, zusammen mit der zu oxydierenden organischen Verbindung, 50 mg Acrylsäure und Luft wurden in einem zugestopften Kolben 24 Stunden kräftig geschüttelt. Anschließend wurde die Suspension mit verdünnter Schwefelsäure angesäuert und 24 Stunden mit Äther kontinuierlich extrahiert. Der Extrakt wurde hierauf über Na₂SO₄ getrocknet, der Äther zum Teil abgedampft und der Rückstand mit Diazomethan zur Reaktion gebracht, um die vorhandenen Carbonsäuren in ihre Methylester überzuführen. Das so erhaltene Gemisch wurde gaschromatographisch analysiert. In den folgenden Tabellen sind die bei verschiedenen Oxydationen entstandenen Produkte aufgeführt.

Tabelle I

Oxydation von Alkanen bei pH-Wert 7

30

Organische

Verbindung

(0,5 cm")

n-Hexan
n-Heptan

Reaktionsprodukte (mg)

Hexansäure (34) Heptansäure (39) 2-Hexanon (12) Octansäure (2) 2-Pentanon (9)

Tabelle II

2-Pentanon (34) Pentansäure (7)

2-Heptanon (12)

Organische Verbindung (mg)	pH- Wert	Ausbe Hexar	Ute an säure Mol	2-Pen	tanon Mol·
		mg	pro	mg	pro-
			zent		zent
1-Hexanol (72)	7	44	45	12	20
1-Hexanol (72)	6	63	76	—	—
Hexansäure (78)	7	—	—	41	70
Hexansäure (52)*	6	—	—	16	41
Hexan [Dampf] (50)·*	7	5,1	22	8,6	50

35

* Es wurde auch Adipinsäure gefunden.

*♦ Die Umwandlung betrug 17,4 mg. Tn den anderen vier Versuchen wurde die organische Verbindung vollständig verbraucht.

Claims

Patentansprüche:

1. Verfahren zur mikrobiologischen Oxydation organischer Verbindungen der allgemeinen Formel

50

H H

I I

R'" —C —C —A

I I

R" R'

worin A eine Methylgruppe, eine gegebenenfalls veresterte Hydroxymethylgruppe, eine Formylgruppe, eine gegebenenfalls veresterte Carboxylgruppe, ein Metall- oder Ammoniumderivat der Carboxylgruppe oder eine Iminoformylgruppe bedeutet und R', R" und R'" jeweils ein Wasserstoffatom oder ein gegebenenfalls durch Halogenatome, Methoxygruppen oder Arylreste substituierter, aliphatischer oder cycloaliphatischer Kohlenwasserstoffrest ist, zu aliphatischen, araliphatischen oder cycloaliphatischen Carbonsäuren und/ oder aliphatischen, araliphatischen oder cycloaliphatischen Ketonen, wobei man eine oder mehrere Ausgangsverbindungen der angegebenen Formel entweder mit Sauerstoff und Mikroorganismen, die normalerweise die ^-Oxydation von Verbindungen der angegebenen Formel herbeirühren können und die, wenn der SubstituentA keine Carboxylgruppe ist, diesen zunächst in eine Carboxylgruppe überführen können, oder mit Sauerstoff und aus diesen Mikroorganismen isolierten Enzymsystemen bei einer Temperatur von etwa 15 bis etwa 40⁰C, vorzugsweise von etwa 20 bis etwa 37° C, insbesondere von etwa 28 bis etwa 32° C, zusammenbringt, dadurc hgekennze ic fane t, daß man die Oxydation in Gegenwart von etwa 1 · 10-* bis etwa 50 · 10-', vorzugsweise von 8 · 10-« bis etwa 15 · 10-· Mol Acrylsäure und/oder einem ihrer Salze, Ester oder Amide, bezogen auf 1 mg Trockengewicht der Mikroorganismen, durchführt.

2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man als Mikroorganismen Bakterien der Gattung Pseudomonas, vorzugsweise die Art Pseudomonas aeruginosa, verwendet.

3. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man als Mikroorganismen Hefen der Gattung Candida, vorzugsweise die Arten Candida lipolytica oder Candida tropicalis, verwendet.

4. Verfahren nach Anspruch 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß man die Oxydation bei einem pH-Wert von etwa 4 bis 9, vorzugsweise von etwa 5 bis etwa 8, insbesondere von etwa 6 bis etwa 7,2, durchführt.

5. Verfahren nach Anspruch 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß man als Ausgangsmaterial η-Hexan oder n-Heptan verwendet.

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