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DE10361599A1 - Flüssigformulierung von Antikörperkonjugaten - Google Patents

Flüssigformulierung von Antikörperkonjugaten Download PDF

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DE10361599A1
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DE
Germany
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pharmaceutical composition
antibody
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cyclodextrin
maytansinoid
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Withdrawn
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DE10361599A
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English (en)
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Patrick Garidel
Karoline Bechtold-Peters
Christian Berger
Stefan Bassarab
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Boehringer Ingelheim Pharma GmbH and Co KG
Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc
Original Assignee
Boehringer Ingelheim Pharma GmbH and Co KG
Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc
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Publication date
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Priority to PCT/EP2004/014589 priority patent/WO2005065717A2/de
Priority to TW093140301A priority patent/TW200529871A/zh
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Abstract

Die vorliegende Erfindung betrifft flüssige Zusammensetzungen von Antikörpern, bevorzugt von Antikörpern, die an ein Effektormolekül konjugiert sind. Insbesondere betrifft die vorliegende Erfindung stabile flüssige Formulierungen von Antikörper-DM1-Komplexen.

Description

  • HINTERGRUND DER ERFINDUNG
  • TECHNISCHES GEBIET
  • Die vorliegende Erfindung betrifft flüssige pharmazeutische Zusammensetzungen von Antikörpern, bevorzugt von Antikörpern, die an ein Effektormolekül konjugiert sind. Insbesondere betrifft die vorliegende Erfindung stabile flüssige Formulierungen von Antikörper-DM1 Komplexen.
  • Im Stand der Technik sind rekombinante Antikörpermoleküle seit längerer Zeit bekannt z.B. humanisierte Mausantikörper (Shin et al., 1989; Güssow et Seemann, 1991), bispezifische Antikörper (Weiner et al., 1993; Goodwin, 1989), single-chain-Antiköper (scFv, Johnson et Bird, 1991), komplette oder fragmentarische Immunglobuline (Coloma et al., 1992; Nesbit et al., 1992; Barbas et al., 1992) oder durch chain shuffling erzeugte Antikörper (Winter et al., 1994). Heutzutage können vollhumane Antikörper durch z.B. "phage display" Verfahren (Aujame et al., 1997; US 5,885,793 ; US 5,969,108 ; US 6,300,064 ; US 6,248,516 , US 6,291,158 ) oder mittels transgener Mäuse, die transgen für funktionelle humane Ig Gene sind, hergestellt werden ( EP 0 438 474 ; EP 0 463 151 ; EP 0 546 073 ).
  • Weiterhin sind Konjugate aus Antikörpern mit Effektormolekülen bekannt, wie z.B. single-chain-Antikörper/Toxin-Fusionsproteine (Chaudhary et al., 1990; Friedman et al., 1993); Konjugate aus Antikörpern mit radioaktiven Isotopen wie 131I, 1111n, 99mTc oder radioaktiven Verbindungen (Larson et al., 1991; Thomas et al., 1989; Srivastava, 1988), Enzymen wie Peroxidase oder alkalischer Phosphatase (Catty et Raykundalia, 1989), mit Fluoreszenzfarbstoffen (Johnson, 1989) oder Biotinmolekülen (Guesdon et al., 1979); Toxinen (Vitetta et al., 1991; Vitetta et Thorpe, 1991; Kreitman et al., 1993; Theuer et al., 1993), Zytostatika (Schrappe et al., 1992), Prodrugs (Wang et al., 1992; Senter et al., 1989), radioaktiven Substanzen, mit einem Zytokin oder einem anderen immunmodulatorischen Polypeptid verknüpft sein, z.B. mit Tumornekrosefaktor oder Interleukin-2.
  • CD44 ist ein Protein, dass in verschiedenen Isoformen auf einer Vielzahl von Zellen exprimiert wird (siehe z.B. für weitere Information WO02/094879A1; WO02/094325A2). Die Expression der Spleißvarianten jedoch, die die Domäne v6 (CD44v6) in der extrazellulären Region enthalten, ist auf einen Teil von Epitheliengewebe beschränkt. CD44v6, ebenso wie andere variante Exons (CD44v3, CD44v5, CD44v7/v8, CD44v10) ist ein Tumor-assoziiertes Antigen mit einem günstigen Expressionsmuster bei humanen Tumoren und normalem Gewebe (Heider et al., 1995; Heider et al., 1996; Dall et al., 1996; Beham-Schmid et al., 1998; Tempfer et al., 1998; Wagner et al., 1998). Es sind im Stand der Technik Antikörper bekannt, die für bestimmte Spleißvarianten von CD44 (CD44v, CD44var), welche nur auf einer Untergruppe von Epithelzellen exprimiert werden, spezifisch sind. Beispielsweise seien die CD44v6-spezifischen Antikörper genannt (WO02/094879A1), insbesondere auch als Konjugate mit radioaktiven oder cytotoxischen Substanzen, und besonders als Konjugate mit Maytansinoiden (WO02/094325A2).
  • Zur Verabreichung besagter Antikörperkonjugate an Patienten ist es notwendig, stabile Formulierungen zu entwickeln.
  • Eine Nachteil im Stand der Technik stellt die Abspaltung dieses funktionellen, chemischen Molekülteils vom Antikörper während der Lagerung des Produktes in einem flüssigen Zustand.
    •
  • Daher ist die Aufgabe der Erfindung, neue flüssige Formulierungen für Antikörperkonjugate bereitzustellen.
  • KURZE ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG
  • Die Aufgabe wurde im Rahmen der vorliegenden Beschreibung und Ansprüche gelöst.
  • Die vorliegende Erfindung umfasst flüssige pharmazeutische Zusammensetzungen bzw. Formulierungen von Antikörperkonjugaten aus Antikörpern, die an ein Effektormolekül konjugiert sind, mit Cyclodextrinen und/oder niedrigem pH Wert,. Insbesondere betrifft die vorliegende Erfindung stabile flüssige Formulierungen von Antikörper-DM1 Komplexen.
  • KURZE BESCHREIBUNG DER ZEICHNUNGEN
  • 1: Einfluss des pH Wertes auf die Bildung von freiem DM1 und deren Derivate in flüssig formulierten Antikörper-DM1 Komplexen. Stress-Stabilitätsstudie über 8 Wochen bei 40 °C. Dargestellt ist der Unterschied zwischen dem Gehalt der DM1-Derivaten des 4 Wochen Wertes zum Nullwert, als auch der Unterschied zwischen dem Gehalt der DM1-Derivaten des 8 Wochen Wertes zum Nullwert.
  • 2: Einfluss des Zusatzes verschiedener Cyclodextrine in den Gewichtsverhältnissen 1, 5 und 15 w% auf die Bildung von freiem DM1 und deren Derivate in flüssig formulierten Antikörper-DM1 Komplexen. Stress-Stabilitätsstudie über 8 Wochen bei 40 °C. Dargestellt ist der Unterschied zwischen dem Gehalt der DM1-Derivaten des 4 Wochen Wertes zum Nullwert, als auch der Unterschied zwischen dem Gehalt der DM1-Derivaten des 8 Wochen Wertes zum Nullwert.
  • DETAILLIERTE BESCHREIBUNG DER ERFINDUNG
  • Vor der Darstellung der bevorzugten Ausführungsformen der vorliegenden Erfindung sei angemerkt, dass in der Beschreibung und in den Ansprüchen die Verwendung des Singulars ("ein", "das" etc.) ebenso den Plural umfasst, falls sofern nicht ausdrücklich anders dargestellt oder offensichtlich aus dem Kontext. Alle verwendeten Begriffe haben die in der Fachwelt bekannte Bedeutung, sofern nicht anders definiert. Alle hier zitierten Publikationen und Patentschriften werden hiermit vollinhaltlich in die Beschreibung aufgenommen, insbesondere im referierten Kontext.
  • Flüssig-Formulierungen stellen eine vorteilhaft einfache, praktische und kostengünstige Darreichungsform dar.
  • Die momentan zur Verfügung stehenden Flüssig-Formulierungen von Antikörperkonjugaten erlauben nur eine Laufzeit von 12 Wochen bei einer Lagertemperatur von 2-8 °C.
  • Die vorliegende Erfindung betrifft daher pharmazeutische Zusammensetzungen enthaltend stabile Formulierungen von Antikörper-Effektormolekülkonjugaten sowie Methoden zur Herstellung von stabilen Antikörper-Effektormolekülkonjugaten. Ziel ist es die Reduzierung der Entstehung von freiem Effektormolekül während der Lagerung des Produktes.
  • Dies wurde überraschenderweise durch Erniedrigung des pH Wertes der Lösung erreicht.
  • Alternativ oder in Kombination mit der Erniedrigung des pH Wertes der Lösung erreicht man stabilere Flüssig-Formulierungen in überraschend vorteilhafter Weise durch Zugabe eines Cyclodextrins oder eines ampiphilen Moleküls, wie unten detaillierter beschrieben.
  • Als besonders geeignet zur Stabilisierung des Komplexes im flüssigen Zustand haben sich:
    • 1. eine Erniedrigung des pH Wertes auf pH 5-6, bevorzugt 5.5.
    • 2. Zugabe des Cyclodextrins in Konzentrationen von 0.01 – ca. 40 Gewichtsprozent (w%), vorzugsweise 0.1-20 w%, besonders bevorzugt 0.1 – 10 w% erwiesen.
  • Die Formulierung mit erniedrigtem pH und/oder mit Cyclodextrin kann die Abspaltung des konjugierten Effektormoleküls vom Antikörper in überraschend vorteilhafter Weise verhindern.
  • Bei den erfindungsgemäß zu verwendenden Cyclodextrinen (CD) handelt es sich um zyklische Oligosaccharide oder zyklische Polymere, deren Ringsysteme aus sechs, sieben oder acht α-1,4-verknüpften Glucose-Einheiten bestehen, und entsprechend ihrer Anzahl an Monomeren als α-, β- bzw. γ-Cyclodextrine bezeichnet werden. Von den Cyclodextrinen ist bekannt, daß sie mit verschiedenen Biomolekülen, wie z.B. Fettsäuren oder Aminosäuren, Inklusionskomplexe bilden, bzw. diese bis zur Sättigung einschließen können. Die verschiedenen zur Verfügung stehenden Cyclodextrine unterscheiden sich in erster Linie durch unterschiedliche Ringgröße (α-Cyclodextrine, β-Cyclodextrine, γ-Cyclodextrine). Außerdem gibt es verschieden substituierte Cyclodextrine, deren Toxizität und Protein-Cyclodextrin-Wechselwirkungseigenschaften unterschiedlich sind.
  • Zu den geeigneten Cyclodextrinen gehören beispielsweise substituierte β-Cyclodextrine (bestehend aus 7 Glucopyranoseeinheiten), Hydroxypropyl-β-Cyclodextrin (HP-β-CD), Sulfobutylether-β-Cyclodextrin (SBE-β-CD), γ-Cyclodextrin (bestehend aus 8 Glucopyranoseeinheiten) und Hydroxypropyl-γ-Cyclodextrin (HP-γ-CD).
  • Bevorzugt sind die erfindungsgemäßen Cyclodextrine Sulfoalkylether-Cyclodextrine (SAE-CD) der folgenden Formel verstanden:
    Figure 00050001
    worin
    n = 4, 5 oder 6
    die Reste R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8 und R9 jeweils, unabhängig, -O- oder eine -O-(C2-C6 Alkylen)-SO3-Gruppe ist,
    worin mindestens einer der Reste R1 und R2 unabhängig eine -O-(C2-C6 Alkylen)-SO3-Gruppe ist,
    bevorzugt eine -O-(CH2)mSO3-Gruppe,
    worin m 4 ist, (z.B. -OCH2CH2CH2SO3 – oder -OCH2CH2CH2CH2SO3-);
    und
    S1, S2, S3, S4, S5, S6, S7, S8 und S9 sind jeweils, unabhängig, ein pharmazeutisch akzeptables Kation, umfassend, z.B. H+, Alkalimetalle (z.B. Li+, Na+, K+), Erdalkalimetalle (z.B., Ca.++, Mg++), Ammoniumionen und Aminkationen wie z.B. die Kationen von (C1-C6) Alkylaminen, Piperidin, Pyrazin, (C1-C6) Alkanolamin und (C4-C8)-Cycloalkanolamin.
  • Besonders bevorzugte Cyclodextrine sind insbesondere gamma-Cyclodextrin (γ-CD), Hydroxypropyl-gamma-cyclodextrin (HP-γ-CD), Hydroxypropyl-beta-cyclodextrin (HP-β-CD) oder Sulfobutylether-beta-cyclodextrin (SBE-β-CD).
  • Von der sehr großen Anzahl der bisher publizierten Literatur, die sich mit der Herstellung und Verwendung von Cyclodextrinen, insbesondere der β-Cyclodextrine, befaßt, sollen nur beispielhaft die folgenden Publikationen genannt werden: Manning, M. et al., Pharm. Res. 6, 1903-1918, 1989; Yoshida, A. et al., Int. J. Pharm. 461, 217-222, 1988; Brewster, M. et al., Int. J. Pharm. 59, 231-243, 1980; Pitha, J. et al., Int. J. Pharm. 29, 73-82, 1986; Pitha, J. & Pitha J., J. Pharm. Sci. 74, 987-990, 1985; Brewster, M. et al., J Parent. Sci. Technol. 43, 231-240, 1978. Insbesondere wird von Pitha J. & Pitha, J., loc. cit. (1986) die Herstellung von Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (HP-β-CD) beschrieben, und es wird berichtet, daß durch Verwendung von HP-β-CD die Wasserlöslichkeit der verschiedensten Wirkstoffe und biologischen Markromoleküle verbessert wird. Hinsichtlich der Verwendung der Cyclodextrine auf pharmazeutischem Gebiet sei auf die Übersichtsartikel von Pitha, J. et al., in: Controlled Drug Delivery [Bruck, S.D., Hrsg.] Vol. I, CRC Press, Boca Raton, Florida, 125-148, 1983, verwiesen, oder auf Uekama, K., et al., in: CRC Critical Reviews in Therapeutic Drug Carrier Systems, Vol. 3 (1), 1-40, 1987; bzw. auf Uekama, K., in: Topics in Pharmaceutical Sciences 1987 [Breimer, D.D. and Speiser, P., Hrsg.] Elsevier Science Publishers B.V. (Biomedical Division), 181-194, 1987). Die Verwendung von insbesondere 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin zur Solubilisierung und Stabilisierung von verschiedenen biologisch aktiven Proteinen wird von Brewster, M.E. et al., Pharm. Res. 8, 792-795, 1991, näher beschrieben.
  • Besonders bevorzugt ist das erfindungsgemäße Cyclodextrin ein Cyclodextrin ausgewählt aus der folgenden Tabelle.
  • Tabelle 1
    Figure 00060001
  • Ein ganz besonders bevorzugtes Hydroxypropyl-γ-cyclodextrin mit einem molaren Substitutionsgrad von 0,5 bis 0,7 ist beispielsweise von der Firma Wacker-Chemie GmbH, D-Burghausen, unter dem Namen „CAVASOL® W8 HP Pharma" im Handel.
  • Besonders überraschend vorteilhaft hat sich die Formulierung unter Verwendung des Cyclodextrins Sulfobutylether-beta-Cyclodextrin (SBE-β-CD), auch kommerziell unter dem Namen Captisol (Firma CyDex, USA) erhältlich, erwiesen.
  • Das besagte ganz besonders bevorzugte Cyclodextrin ist in den bevorzugten erfindungsgemäßen Formulierungen in Gewichtsprozenten pro Volumen (w%) von 0.001 bis ca. 40 w %, vorzugsweise 0.1 -20 w%, besonders bevorzugt 0.1 – 10 w% oder 1-5 w% vorhanden. Ganz besonders bevorzugt ist das erfindungsgemäße Cyclodextrin zu ca. 1, 5 oder 15 w% vorhanden. Besonders bevorzugt ist SBE-β-CD zu ca. 1, 5 oder 15 w% vorhanden.
  • Die Erfindung betrifft Formulierungen von Antikörperkonjugaten. Die Begriffe „Antikörper" und „Antikörpermolekül" sind gleichbedeutend. Antikörper können vollständige Immunglobuline sein, enthaltend zwei schwere und zwei leichte Ketten, Fragmente solcher Immunglobuline wie z.B. Fab, Fab', or F(ab)2 Fragmente, rekombinant hergestellte Antikörpermoleküle wie chimäre, humanisierte oder ganz humane Antikörper. Unter Antikörperkonjugat wird ein Komplex aus Antikörper und Effektormolekül verstanden.
  • Beispielsweise seien als erfindungsgemäße Antikörper genannt: HER2 Antikörper wie z,B. Herceptin® (trastuzumab, Genentech, Inc.), VEGF spezifische Antikörper wie Bevacizumab (Genentech, Inc.); Rituxan (rituximab), Anti-EFGR Antikörper ABX-EGF; Antikörper ABX-CBL (Abgenix); Antikörper ICR-62 (ICR, Sutton, England Xolair (omalizumab), C242 (cantuzimab, ImmunoGen), Erbitux (Cetuximab, IMC-C225, ImClone Systems); monoklonaler Antikörper 425 (Merck KGaA); Mitumomab (Imclone Systems and Merck KGaA); Antegren (natalizumab). Ein erfindungsgemäßes Antikörperkonjugat kann aus einem der erfindungsgemäßen Antikörper und einem Effektormolekül hergestellt werden, optional in Kombination mit einem verbindenden Molekül, einem sog. Linker.
  • Beispielsweise für ein Effektormolekül seien genannt: Toxine, wie auch die weiter unten bevorzugten Maytansionoide oder das beispielhaft genannte DM1, radioaktive Isotope wie 131I, 111In, 99mTC, Enzyme wie Peroxidase oder alkalischer Phosphatase, Fluoreszenzfarbstoffe oder Biotinmoleküle, Zytostatika (Doxorubicin, Taxane wie Taxotere®, ( EP 0 253 738 , US 4,814,470 ) Docetaxel, Daunorubicin, Dactinomycin, Plicamycin, Mitomycin, Bleomycin, Idarubicin, Cyclophosphamid, Mechlorethamin, Melphalan, Chlorambucil, Procarbazin, Dacarbazine, altretamine, Cisplatin, Carboplatin, Oxaliplatin, Iproplatin, Ormaplatin, Tetraplatin), Methotrexat, Mercaptopurin, Thioguanin, Fludarabinphosphat, Cladribin, Pentostatin, Fluorouracil: 5-FU, Cytarabin, Azacytidin), Prodrugs, Zytokin, immunmodulatorisches Polypeptid wie z.B. Tumornekrosefaktor oder Interleukin-2.
  • Beispielsweise für erfindungsgemäße Antikörperkonjugate seien die Antikörperkonjugate AS1406 (Antisoma); der humanisierte Antikörper HMFG1, der an das Enzym RNase gebunden ist; Zevalin (Ibritumomab tiuxetan); Bexxar (Corixa, iodine I-131 tositumomab); oder die unten genannten Maytansinoid- oder DM1-Konjugate genannt.
  • Die erfindungsgemäße Konzentration des Antikörperkonjugat Komplexes beträgt zwischen 0.01 und 40 mg/ml, vorzugsweise zwischen 0.1 – 20 mg/ml, insbesondere zwischen 0.1 – 10 mg/ml.
  • Eine weitere Ausführungsform der Erfindung betrifft die Komplexierung des Antikörperkonjugates mit Cyclodextrinen und Hydroxysäuren. Dabei kann die benötigte Menge an Cyclodextrin durch die Bildung eines ternären Komplexes bestehend aus dem Antikörper-Konjugat, dem jeweiligen Cyclodextrin und einer Hydroxysäure reduziert werden. Zu den geeigneten Cyclodextrinen gehören beispielsweise, HP-β-CD, SBE-β-CD, γ-CD und HP-γ-CD. Neben dem Wirkstoff und dem Cyclodextrin können die zur parenteralen Anwendung bestimmten erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zusammensetzungen daher Hydroxysäuren wie beispielsweise Äpfelsäure, Milchsäure, Weinsäure, Bernsteinsäure oder Zitronensäure enthalten.
  • Das molare Verhältnis von Wirkstoff zu Cyclodextrin liegt erfindungsgemäß zwischen 1:1 und 1:3300. Bevorzugt ist ein molares Verhältnis von 1 : 100 bis 1 1500, insbesondere 1:100 bis 1:600. In Gegenwart von Hydroxysäure liegt das molare Verhältnis von Wirkstoff zu Cyclodextrin erfindungsgemäß wie vorgenannt vor.
  • Geeignete Amphiphile, die statt der erfindungsgemäßen Cyclodextrine verwendet werden für die erfindungsgemäßen pharmazeutische Zusammensetzungen sind beispielsweise Cholinderivate (C6-C20), natürlich vorkommende Choline (Ei- und Soja-Lecithin) beispielsweise wie Dimyristoylphosphatidylcholin (DMPC), Dipalmitoyl- phosphatidylcholin (DPPC); Dioleoylphosphatidylcholin (DOPC) oder Ethanolamin-derivate (C6 bis C20) natürlich vorkommende Ethanolamine (Ei- und Soja-Ethanolamine) beispielsweise wie Dimyristoylphosphatidylethanolamin (DMPE), Dipalmitoylphosphatidylethanolamin (DPPE), Dioleoylphosphatidylethanolamin (DOPE), wobei DOPE besonders bevorzugt ist. Desweiteren können als weitere Phospholipide die entsprechenden Glycerolderivate (C6-C20) oder Phosphatid-Säuren (C6-C20) mit gesättigten und ungesättigten Fettsäuren eingesetzt werden.
  • Gegebenenfalls enthalten die erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zusammensetzungen ferner übliche Hilfs- und Trägerstoffe wie beispielsweise die Isotonanzien Glucose, Mannitol oder Natriumchlorid oder Natriumacetat bzw. Natriumacetat-Trihydrat als Puffer in Verbindung mit Essigsäure oder einen Zitronensäure/Phosphat-Puffer bestehend z.B. aus Zitronensäure und Dinatriumhydrogenphosphat bzw. Dinatriumhydrogenphosphat-Dihydrat. Als Lösungsmittel dient üblicherweise Wasser für Injektionszwecke.
  • Die Konzentrationen solcher Hilfs- und Trägerstoffe sind dem Fachmann bekannt und beispielsweise aus Remington's Pharmaceutical Sciences (1990), 18th ed. Mack Publ., Easton, zu entnehmen.
  • Der pH kann mit folgenden Agenzien erniedrigt werden (sauer werden, je nach Start-pH Wert) werden: HCl, H3PO4 und andere Derivate der Phosphorsäure, HNO3, H2SO4, CH3COOH, oder alle pharmazeutisch akzeptablen, hierfür bekannten Säuren, oder durch Auswahl geeigneter Puffersysteme ausgewählt aus der Gruppe von Puffersystemen auf der Grundlage von monobasichen Säuren: Essig-, Benzoe-, Glucon-, Glycerin-, Lactat-; dibasische Säuren: Aconit-, Adipin-, Ascobin-, Karbon-, Glutamin-, Apfel-, Bernstein-, Tartrat-; polybasische Säuren: Citrat-, Phosphat-, oder Basen: Ammoniak, Diethanolamine, Glycine, Triethanolamine, Tromethamine und deren Salze eingestellt werden. Sollte wegen zu niedrigem pH Wert dieser erhöht werden müssen, kommen die einschlägig bekannten Substanzen bzw. Lösungen hiervon wie NaOH, KOH, Ammoniaklösung etc. in Frage.
  • Als weitere Inhaltsstoffe, als zusätzliche Stabilisatoren, kann die pharmazeutische Zusammensetzung auch Salze bzw. Salzlösungen enthalten, insbesondere pharmazeutisch akzeptable Salze, wie zum Beispiel anorganische Salze wie Chloride, Sulfate, Phosphate, di-Phosphate, Hydrobromide und/oder Nitrat-Salze. Ferner kann die Lipidsuspension auch organische Salze beinhalten, wie z.B. Malate, Maleate, Fumarate, Tartrate, Succinate, Ethylsuccinate, Citrate, Acetate, Lactate, Methansulfonate, Benzoate, Ascorbate, Paratoluensulfonate, Palmoate, Salicylate, Stearate, Estolate, Gluceptate oder Labionat-Salze.
  • Als weitere Hilfsstoffe kann die pharmazeutische Zusammensetzung verschiedene Aminosäuren wie Arginin und Glycin enthalten. Weitere geeignete Aminosäuren sind dem Fachmann bekannt.
  • Beispiele für optional in der erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zusammensetzung enthaltene Polymere umfassen Polyvinylpyrrolidone, derivatisierte Zellulosen, wie z.B. Hydroxymethyl-, Hydroxyethyl-, oder Hydroxypropyl-ethylzellulose, polymere Zucker wie z.B. Ficoll oder Dextran, Stärke wie z.B. Hydroxyethyl- oder Hydroxypropylstärke, Dextrine wie z.B. Cyclodextrine (2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin, Sulfobutylether-β-cyclodextrin), Polyethylene, Glykole, Chitosan, Collagen, Hyaluronsäure, Polyacrylate, Polyvinylalkohole und/oder Pektine.
  • Beispiele für optional in der erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zusammensetzung enthaltene Zucker sind Mono-, Di-, Oligo- oder Polysaccharide oder eine Kombination hieraus. Beispiele für Einfachzucker sind vorzugsweise die Aldohexosen, Ketohexosen und ihre Derivate und optischen Isomere, Fruktose, Maltose, Galaktose, Glucose, D-Mannose, Sorbose, D(+)-Glucose, D(+)-Mannose, D(+)-Galactose, D(-)-Fructose, D(+)-Sorbose, und der gleichen.
  • Zweifachzucker sind beispielsweise Laktose, Saccharose, Sucrose, Trehalose, Cellobiose, und dergleichen.
  • Als Mehrfachzucker oder Polysaccharide eignen sich insbesondere Raffinose, Melezitose, Dextrin, Stärke und dergleichen.
  • Beispiele für optional in der erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zusammensetzung enthaltene Zuckeralkohole sind neben Mannitol, bzw. D-Mannitol (D-Mannit), Xylitol, Maltitol, Galaktitol, Arabinitol, Adonitol, Laktitol, Sorbitol (Glucitol), Pyranosylsorbitol, Inositol, Myoinositol und dergleichen.
  • Als weitere Inhaltsstoffe kann die pharmazeutische Zusammensetzung auch Detergenzien enthalten, bevorzugt ausgewählt aus der Gruppe von Tween 20, Tween 60, Tween 80 (Polysorbat 20, 60, 80 Poloxamere (Pluronic) im Konzentrationsbereich von 0,01-5 Gewichtsprozent, bevorzugt 0,01-0,1 Gewichtsprozent, besonders bevorzugt 0,02-0,04 Gewichtsprozent.
  • Die erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zusammensetzungen können im Rahmen der Erfindung zur parenteralen systemischen, z.B. intravenösen, intravaskulären, intramuskulären, intraarteriellen, intraperitonealen, oder intrathekalen Applikation verwendet werden. Eine lokalere Darreichung der erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zusammensetzungen kann subkutan, intrakutan, intrakardiell, intralobal, intramedullär, intrapulmonar oder direkt in oder nahe dem zu behandelnden Organ erfolgen (Bindegewebe, Knochen, Muskel, Nerven- oder epitheliales Gewebe). Die erfindungsgemäße pharmazeutische Zubereitung kann für alle Arten der klinischen oder nicht-klinischen Anwendung genutzt werden, worin die toxischen Verbindungen auf Zellen, die CD44 exprimieren, gerichtet werden sollte.
  • In einer weiteren Ausführungsform der Erfindung betrifft die Erfindung ein Behandlungsverfahren von Krebs, indem eine erfindungsgemäße pharmazeutische Zubereitung einem bedürftigen Patienten in einer therapeutisch wirksamen Menge der erfindungsgemäßen pharmazeutische Zubereitung verabreicht wird. Bevorzugt ist der Krebs Plattenepithelkarzinom (z.B. „Head and Neck Squameous Cell Carcinoma (SCC)", Ösophagus SCC, Lungen SCC, Haut SCC, Brustadenocarcinom, Lungenadenocarcinom, Cervix SCC, Pankreasadenocarcinom, Colonadenocarcinom, Magenadenocarcinom).
  • In der klinischen Behandlung von Krebs wird die erfindungsgemäßen pharmazeutische Zubereitung z.B. nach folgenden Protokollen verabreicht, z.B. wöchentlich 1 bis 6 Wochen lang als i.v. Bolus oder kontinuierliche Infusion über 5 Tage.
  • Die Bolusdosis kann in 50 bis 100 ml normaler Saline verabreicht werden, zu der 5 bis 10 ml von humanem Serumalbumin hinzugefügt werden. Kontinuierliche Infusionen können in 250 bis 500 ml normaler Saline verabreicht werden, zu der 25 bis 50 ml von humanem Serumalbumin hinzugefügt werden pro 24 Stunden. Die Antikörperkonjugatdosis ist im Allgemeinen 10 mg to 400 mg/m2 Körperoberfläche pro Applikation. Die Dosis muss einerseits hoch genug sein, um effektiv zu sein, aber auch unterhalb der sog. „dose limiting toxicity" (DLT). Eine tolerierte, maximale Dosis unterhalb der DLT ist die "maximum tolerated dose" (MTD). Der Fachmann kennt die Bestimmung der MTD (Lambert et al., 1998). Für wöchentliche Darreichungen ist die MTD vermutlich im Bereich von 100 bis 200 mg/m2. Alternativ können die Abstände zwischen Verabreichungen länger sein, z.B. zwei bis vier Wochen, bevorzugt drei Wochen. In diesem Fall ist die zu erwartende MTD im Bereich von 200 bis 300 mg/m2. Alternativ kann die Darreichung in 5 täglichen Dosen, gefolgt von einer Pause von mehreren Wochen stattfinden. Dann ist die erwartende MTD niedriger als 100 mg/m2. Beispielsweise kann die erfindungsgemäße pharmazeutische Zubereitung als einzelne i.v. Infusion mit einer Rate von 3 mg/min alle 21 Tage erfolgen. Bis zu 7 Behandlungszyklen werden angewandt. Die angewandten Dosen können sich auch außerhalb der o.g. Bereiche bewegen, wenn die klinische Situation es erfordert. Beispielsweise, wenn die MTD als höher als dargestellt gefunden wird, so kann eine einzelne Gabe auch eine höhere Dosis als 400 mg/m2 sein, oder die wöchentliche Dosis höher als 200 mg/m2.
  • Eine erfindungsgemäße Ausführung einer parenteralen Zusammensetzung von Antikörperkonjugat enthält den Wirkstoff in Dosierungen von 1 mg/kg Körpergewicht bis 40 mg/kg Körpergewicht täglich, vorzugsweise im Bereich 3-15 mg/kg Körpergewicht. Bevorzugt sind auch Dosierungen ausgedrückt in [mg/m2]: 10 [mg/m2] bis 200 [mg/m2]; besonders bevorzugt 20 bis 100 [mg/m2], ganz besonders bevorzugt 10, 20, 40 oder 50 mg/m2.
  • Die Anwendung erfolgt in einer vorzugsweisen Ausführungsform über eine kontinuierliche Infusion über 0.5 bis hin zu 24 Stunden oder gegebenenfalls über mehrere Tage, um einen Steady-State Plasmaspiegel aufrechtzuerhalten. Die Applikationsvolumina liegen im Bereich von 50 bis 500 ml, vorzugsweise bei 100 bis 250 ml, d.h. die Anwendungskonzentrationen des Wirkstoffs liegen im Bereich 80 mg/500 ml = 0,16 mg/ml (0,015 %) bis 1500 mg/100 ml = 15 mg/ml (1,5 %).
  • Bevorzugt ist eine Wirkstoffkonzentration von 0,5 mg/ml = 0,05 % (g/v) bis 3,5 mg/ml = 0,35 % (g/v).
  • Ein Schwerpunkt der Erfindung sind Formulierungen bzw. pharmazeutische Zusammensetzungen von Antikörperkonjugaten aus Antikörpern gekoppelt an Maytansinoide. Ganz besonders bevorzugt sind Antikörper-DM1 Konjugate. Beispiele für erfindungsgemäße Antikörper-DM1 Konjugate sind das Antikörperkonjugat MLN2704 bestehend aus einem monoklonalen Antikörpervehikel T-MAV, das spezifisch an Prostata-spezifisches Membranprotein bindet, konjugiert an das Maytansinoid DM1; das C242/CanAb spezifische humanisierte monoklonale Antikörper-DM1 Konjugat cantuzumab-DM1 (Liu et al., 1996; Lambert et al., 1998); das humanisierte monoklonale Antikörper-DM1 Konjugat „huN901-DM1" spezifisch für das CD56 antigen (Chari et al., 2000); das humanisierte monoklonale Antikörper-DM1 Konjugat My9-6-DM1 spezifisch für das CD33 antigen (Aventis); humanisierte monoklonale Antikörper-DM1 Konjugate spezifisch für den IGF-1 receptor „anti-IGF1 hu MAbs" (MorphoSys/ImmunoGen); humanisierte monoklonale Antikörper-DM1 Konjugat anti-EGFRvIII-DM1 mit Zielmolekül EGFR (Abgenix).
  • Besonders bevorzugt sind pharmazeutische Zusammensetzungen von Antikörperkonjugaten der Formel A(LB)n worin
    A ein Antikörpermolekül ist;
    L eine Linkersubstanz ist;
    B eine für Zellen toxische Verbindung ist; und
    n eine Dezimalzahl n = 1 bis 10 ist.
  • Besonders bevorzugt sind weiterhin pharmazeutische Zusammensetzung der oben beschriebenen Formel, worin die Linkersubstanz eine chemische Bindung enthält, die innerhalb einer Zelle abgespalten werden kann. Besonders bevorzugt sind weiterhin pharmazeutische Zusammensetzung der oben beschriebenen Formel, worin die chemische Bindung eine Disulfidbindung ist.
  • Besagte Antikörper-DM1 Konjugate können in vorteilhafter Weise in jeder der oben genannten Weisen mit oben genannten Hilfsstoffen etc. formuliert werden.
  • Das Antikörpermolekül A hat eine Bindungsspezifizität für CD44, bevorzugt variantes CD44.
  • „Spezifisch für CD44" bedeutet, dass der Antikörper spezifisch an ein Epitop in der CD44 Region bindet. Bevorzugt bindet der erfindungsgemäße Antikörper an eine Aminosäuresequenz, die von dem varianten Exon v6 des humanen CD44 Gens kodiert ist. Ein bevorzugtes Antikörpermolekül bindet spezifisch an Peptide enhaltend oder bestehend aus der Sequenz SEQ ID NO: 1 des anliegenden Sequenzprotokolls, oder einer allelen Variante besagter Sequenz. Besonders bevorzugt bindet das erfindungsgemäße Antikörpermolekül spezifisch an die of Aminosäuresequenz SEQ ID NO: 2 oder SEQ ID NO: 3. Derartige Antikörper können mit Methoden aus dem Stand der Technik hergestellt werden (WO 95/33771, WO 97/21104), z.B. durch Immunsierung von Labortieren mit chemisch synthetisierten Peptiden der o.g. Sequenzen.
  • Bevorzugt ist der Antikörper der murine monoklonale Antikörper VFF-18, der durch die hinterlegte Hybridomzelllinie (hinterlegt 07. Juni 1994, Zugangsnummer DSM ACC2174 bei der DSM-Deutsche Sammlung für Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH, Mascheroder Weg lb, D-38124 Braunschweig, Deutschland). Ebenso bevorzugt sind humanisierte rekombinante Antikörper, bei denen die sog. „complementarity determining regions" (CDR's) von VFF-18 auf entsprechende Regionen von humanen leichten und schweren Ketten Immunglobulingenen aufgebracht wurden. "Complementarity determining regions" sind definiert analog Kabat et al., 1991, in Zusammenhang mit Chothia and Lesk, 1987.
  • Besonders bevorzugt ist der Antikörper A ein Antikörper enthaltend die leichten Ketten mit der Aminosäuresequenz SEQ ID NO: 4 und die schweren Ketten mit der Aminosäuresequenz SEQ ID NO: 6. Besagter Antikörper wird als BIWA4 bezeichnet und ist eine humanisierte Variante von VFF-18. Ebenso besonders bevorzugt ist der Antikörper A ein Antikörper enthaltend die leichten Ketten mit der Aminosäuresequenz SEQ ID NO: 8 und die schweren Ketten mit der Aminosäuresequenz SEQ ID NO: 6. Besagter Antikörper wird als BIWA8 bezeichnet und ist eine humanisierte Variante von VFF-18. Die Produktion der erfindungsgemäßen Antikörper kann analog WO02/094879A1 und WO02/094325A2 durchgeführi werden mit den Nukleotidsequenzen SEQ ID NO: 5 und SEQ ID NO: 7 (BIWA4) und SEQ ID NO: 9 und SEQ ID NO: 7 (BIWA8), respektive. Auch die Bindung an erfindungsgemäße Toxine ist in WO02/094325A2 ausführlich dargestellt und hiermit vollinhaltlich in die gegenwärtige Anmeldung aufgenommen.
  • „Toxisch" ist eine Substanz, die die Funktion von Zellen inhibiert oder völlig verhindert und/oder Zellzerstörung verursacht. Toxische Substanzen als Liganden können entweder cytostatisch oder cytotoxisch agieren und führen zu Zellcyclusarrest oder Zelltod. Diese Substanzen können an verschiedenen Punkten in den Zellzyklus eingreifen, durch Interaktion mit der Nukleinsäuresynthese, Inaktivierung von Nukleinsäuren, oder durch Tubulinbindung.
  • Bevorzugt ist die toxische Verbindung B ein Maytansinoid, d.h. ein Derivat von Maytansin (CAS 35846538). Bevorzugt ist B ein C-3 Ester von Maytansinol. Maytansinoide, die an Antikörper gekoppelt warden können, sind vorbeschrieben (Chari et al., 1992; Liu et al., 1996; U.S. Patent No. 5,208,020). Diese Maytansinoid können in der gegenwärtigen Erfindung benutzt werden. Bevorzugt ist die toxische Verbindung B N2'-deacetyl- N2'-(3-mercapto-1-oxopropyl)-Maytansin (CAS Number 139504-50-0), auch als DM1 bezeichnet. Bevorzugt ist besagtes Maytansinoid ein Maytansinol Derivat, dass an den Antikörper mit einer Disulfidbrücke an der C-3 Position von Maytansinol gekoppelt ist. Besonders bevorzugt ist das erfindungsgemäße Antikörper/Maytansinoidkonjugat aus einem Maytansinoid der folgenden Formel hergestellt Formel (II)
    Figure 00160001
    worin
    R1 bedeutet H oder SR4, worin R4 Methyl, Ethyl, linearer Alkyl, verzweigter Alkyl, Cycloalkyl, einfacher oder substituierter Aryl, oder heterocyclisch bedeutet;
    R2 bedeutet Cl oder H;
    R3 bedeutet H oder CH3; und
    m bedeutet 1, 2, or 3.
  • Bevorzugt ist R1 H, CH3, oder SCH3, R2 ist Cl, R3 ist CH3, und m = 2.
  • Die Verbindung mit R1 = H, R2 = Cl, R3 = CH3, und m = 2 wird in der Literatur als DM1 bezeichnet.
  • In einer bevorzugten Ausführungsform, hat die erfindungsgemäße Verbindung die Formel III
    Figure 00170001
    worin
    A ein Antikörpermolekül ist, das spezifisch für CD44 ist, bevorzugt spezifisch für das variante Exon v6, bevorzugt spezifisch für die Aminosäure Sequenz SEQ ID NO: 3;
    (L') ein optionales Linkermolekül ist
    p eine Dezimalnummer mit p = 1 to 10 ist.
  • Bevorzugt ist p = 3 bis 4, besonders bevorzugt ca. 3.5.
  • Verfahren zur Herstellung besagter Maytansinoide sind im Stand der Technik bekannt (insbesondere US 5,208,020 , Beispiel 1; WO02/094325A2).
  • In einer bevorzugten Ausführungsform, ist die Verbindung der Formel (I) weniger toxisch als die Verbindungen B, B-X oder B-L''-X, die nach intrazellulärer Abspaltung freigesetzt werden.
  • Bevorzugt werden mittels Disulfidbindungen verbundene Antikörper / Maytansinoidkonjugate, die Maytansinoidmoleküle freisetzen können. Derartige zellbindende Konjugate werden gemäß Verfahren im Stand der Technik hergestellt ( US 5,208,020 ; WO02/094325A2).
  • In einem weiteren Aspekt besteht das Konjugate aus einem CD44v6-spezifischen Antikörpermolekül und einem Maytansinoid. „CD44v6 spezifisch" bedeutet, dass der Antikörper eine spezifische Bindungsaffinität für ein Epitop hat, das in einem Peptid mit der Aminosäuresequenz, die durch das variante Exon v6 von CD44 kodiert wird, bevorzugt humanes CD44. Ein bevorzugtes Antikörpermolekül der Erfindung bindet spezifisch an Peptide oder Polypeptide umfassend oder genau mit der Aminosäuresequenz SEQ ID NO: 1 oder eine allele Variante besagter Sequenz. Bevorzugt bindet besagtes Antikörpermolekül spezifisch an ein Epitop in dieser Sequenz. Besonders bevorzugt bindet das erfindungsgemäße Antikörpermolekül spezifisch an die of Aminosäuresequenz SEQ ID NO: 2 oder SEQ ID NO: 3.
  • Bevorzugt ist das erfindungsgemäße Antikörpermolekül in besagtem Konjugat der monoklonale Antikörper VFF-18 (DSM ACC2174) oder ein rekombinanter Antikörper mit den Komplementbindungsregionen (CDRs) von VFF-18. Besonders bevorzugt enthält das erfindungsgemäße Antikörpermolekül die leichten Ketten mit der Aminosäuresequenz SEQ ID NO: 4 und die schweren Ketten mit der Aminosäuresequenz SEQ ID NO: 6. Ebenso besonders bevorzugt enthält das erfindungsgemäße Antikörpermolekül die leichten Ketten mit der Aminosäuresequenz SEQ ID NO: 8 und die schweren Ketten mit der Aminosäuresequenz SEQ ID NO: 6. Das Maytansinoid ist bevorzugt an den Antikörper über eine Disulfidbindung gekoppelt und hat die Formel Formel (IV)
    Figure 00190001
    worin die Verknüpfung mit dem Antikörper über das Schwefelatom in Formel IV an ein weiteres Schwefelatom im Antikörpermolekül erfolgt. Um ein solches Schwefelatom für eine Bindung im Antikörpermolekül zu erhalten, kann das Antikörpermolekül durch einen geeigneten Linker modifiziert warden, wie in WO02/094325A2 dargestellt. Vorzugsweise ist das Maytansinoid an das Antikörpermolekül durch eine S-CH2CH2-CO-, eine -S-CH2CH2CH2CH2-CO-, oder eine -S-CH(CH3)CH2CH2-CO- Gruppe gebunden. Das Schwefelatomatom in einer derartigen Linkergruppe bildet die Disulfidbindung mit dem Maytansinoid, wohingegen die Carbonylfunktion an eine Aminfunktion, die in einer Aminosäureseitenkette vorhanden sein kann, binden kann.
  • Auf diese Art und Weise können mehrere Maytansinoidreste an ein Antikörpermolekül gebunden werden. Bevorzugt sind 3 bis 4 gebundene Maytansinoid-Reste pro Antikörpermolekül.
  • Am bevorzugtesten ist ein Konjugat aus einem CD44v6-spezifischen Antikörpermolekül und einem Maytansinoid, worin das Antikörpermolekül die leichten Ketten mit der Aminosäuresequenz SEQ ID NO: 4 und die schweren Ketten mit der Aminosäuresequenz SEQ ID NO: 6 enthält, und worin das Maytansinoid die Formel
    Figure 00200001
    Formel (IV) hat und an den Antikörper über eine Disulfidbindung gekoppelt ist.
  • Bevorzugt ist die Linkergruppe -S-CH2CH2CH2CH2-CO- oder -S-CH(CH3)CH2CH2-CO-, und die Anzahl von gebundenen Maytansinoid-Resten pro Antikörpermolekül ist 3 bis 4.
  • Daher bestand eine bevorzugte Aufgabe der vorliegenden Erfindung folglich darin, die Reduzierung der chemischen, bevorzugt hydrolytischen, Abspaltung des Maytansinoid bzw. DM1 Molekülteils vom Antikörper-Maytansinoid bzw. -DM1 Komplex und somit zur Vermeidung von freiem Maytansinoid bzw. DM1 in der Formulierung.
  • Somit waren verschiedene physikalische und chemische Bedingungen zur Verfügung zu stellen, die eine hohe Lagerstabilität des Antikörper-DM1 Komplexes aufweisen. Dies wurde realisiert durch Veränderung der Flüssig-Formulierung und durch den Einsatz von neuen Hilfsstoffen.
  • Die vorliegende bevorzugten Methoden zur Herstellung von stabilen Antikörper-Maytansinoid bzw. -DM1 Komplexen führen zu einer Reduzierung der Entstehung von freiem Maytansinoid bzw. DM1 und deren Derivate während der Lagerung des Produktes.
  • Dies wird erreicht überraschenderweise erreicht durch Erniedrigung des pH Wertes. Alternativ oder in Kombination mit der Erniedrigung des pH Wertes der Lösung erreicht man stabilere Flüssig-Formulierungen in überraschend vorteilhafter Weise durch Zugabe eines oder mehrerer der oben beschriebenen Cyclodextrine oder eines ampiphilen Moleküls, wie oben detaillierter beschrieben.
  • Bevorzugte Cyclodextrine sind insbesondere gamma-Cyclodextrin (γ-CD), Hydroxypropyl-gamma-cyclodextrin (HP-γ-CD), Hydroxypropyl-beta-cyclodextrin (HP-β-CD) oder Sulfobutylether-beta-cyclodextrin (SBE-β-CD).
  • Besonders vorteilhaft hat sich die Verwendung des Cyclodextrin Captisol (SBE-β-CD: Sulfobutylether-β-Cyclodextrin) (0.001 bis 40.69 w%) erwiesen.
  • Als besonders geeignet zur Stabilisierung des Komplexes im flüssigen Zustand haben sich:
    • 1. eine Erniedrigung des pH Wertes auf pH 5-6, bevorzugt 5.5, besonders bevorzugt durch Natriumsuccinatpuffer gepuffert.
    • 2. Zugabe des Cyclodextrins in Konzentrationen von 0.01 – ca. 40 Gewichtsprozent (w%), vorzugsweise 0.1-20 w%, besonders bevorzugt 0.1 – 10 w% erwiesen.
  • Nach einer bevorzugten Ausführungsform beträgt die Konzentration des Antikörperkonjugat Komplexes zwischen 0.01 und 40 mg/ml, vorzugsweise zwischen 0.1 – 20 mg/ml, insbesondere zwischen 0.1 – 10 mg/ml.
  • Die Formulierung mit erniedrigtem pH und/oder mit Cyclodextrin kann die Abspaltung des konjugierten Effektormoleküls vom Antikörper in überraschend vorteilhafter Weise verhindern.
  • Durch entsprechende Kombination der oben erwähnten Methoden kann die Laufzeit einer Flüssig-Formulierung (gelagert bei 2-8°C) um den Faktor 3 bis 4 verlängert werden im Vergleich zu einer Referenzformulierung (vergleiche Beispiele).
  • Nach einer weiteren Ausführungsform betrifft die vorliegende Erfindung eine Methode zur Stabilisierung von Antikörper-DM1 Komplexen in einer Flüssig-Formulierung durch Kombination der beiden oben genannten Stabilisierungsmethoden: pH Erniedrigung und Anwesenheit von Captisol in der Formulierung.
  • Mit der vorliegenden Erfindung ist es gelungen, Methoden zur Vermeidung der DM1 Abspaltung vom Antikörper in einer Flüssig-Formulierung zur Verfügung zu stellen.
  • Die erfindungsgemäße Methoden zeichnet sich durch ein hohes Maß an Stabilität des Antikörper-DM1 Komplexes in wässriger Umgebung aus, was es ermöglicht, dieses Produkt als eine flüssige Darreichungsform zu formulieren für die parenterale Verabreichung, bevorzugt die intravenöse Applikation.
  • Überraschenderweise wurde gefunden, dass eine pH Erniedrigung und/oder die Anwesenheit von Captisol zur Stabilisierung von flüssig formulierten Antikörper-DM1 Komplexen führt.
  • Nach einer bevorzugten Ausführungsform beträgt die Konzentration des Antikörper-DM1 Komplexes zwischen 0.01 und 40 mg/ml, vorzugsweise zwischen 0.1 – 20 mg/ml, insbesondere zwischen 0.1 – 10 mg/ml. Als besonders geeignet zur Stabilisierung des Komplexes im flüssigen Zustand haben sich:
    • 3. eine Erniedrigung des pH Wertes auf pH 5-6, bevorzugt 5.5.
    • 4. Zugabe von Captisol (0.01 – ca. 40 w%), vorzugsweise 0.1 -20 w%, besonders bevorzugt 0.1 – 10 w% erwiesen.
  • Eine bevorzugte Formulierung enthält einen Phosphatpuffer, Kochsalz, Tween 20 sowie eines der oben beschriebenen Antikörperkonjugate, besonders bevorzugt das oben beschriebene Antikörperkonjugat aus CD44v6-spezifischem Antikörper gekoppelt an das Maytansinoid DM1. Besonders bevorzugt ist eine Formulierung enthaltend ein Phosphatpuffer aus 1-1,9 mM NaH2PO4 × H2O; 4-5 mM KH2PO4; 3,5-4,5 mM Na2HPO4, weiterhin enthaltend 30-100 mM NaCl; 0,01-0,05 w% Tween 20 und Antikörperkonjugat, bevorzugt Antikörper-DM1 Konjugat, besonders bevorzugt das oben beschriebene Antikörperkonjugat aus CD44v6-spezifischem Antikörper gekoppelt an das Maytansinoid DM1, in Konzentration von 1-5 mg/mL bei einem pH von 5-6. Besonders bevorzugt ist der pH 5,5.
  • Ganz besonders bevorzugt ist eine Formulierung enthaltend einen Phosphatpuffer aus ca. 1,45 mM NaH2PO4 × H2O, ca. 4,19 mM KH2PO4, ca. 3,91 mM Na2HPO4, sowie ca. 60 mM NaCl, sowie ca. 0,02 w% Tween 20 und Antikörperkonjugat, bevorzugt Antikörper-DM1 Konjugat, besonders bevorzugt das oben beschriebene Antikörperkonjugat aus CD44v6-spezifischem Antikörper gekoppelt an das Maytansinoid DM1, in einer Konzentration von 1-2,5 mg/ml, bevorzugt 1.8 mg/ml bei einem pH von 6,5, bevorzugt pH von 5,5.
  • Ganz besonders bevorzugt ist eine Formulierung aus 10mM Succinatpuffer, beispielsweise Natriumsuccinatpuffer, pro 2mg/ml Antikörperkonjugat, wobei das Antikörperkonjugat bevorzugt Antikörper-DM1 Konjugat ist, besonders bevorzugt das oben beschriebene Antikörperkonjugat aus CD44v6-spezifischem Antikörper gekoppelt an das Maytansinoid DM1 ist. Weitere optionale Bestandteile dieser besonders bevorzugten pharmazeutischen Zubereitung sind NaCl im Bereich von 30-100 mM NaCl, bevorzugt 60 mM NaCl, und/oder Tween 20 im Bereich von 0,01-0,05 w% Tween 20, bevorzugt 0,02 w%. Der pH wird auf 5-6 eingestellt, besonders bevorzugt 5,5.
  • Die folgenden Beispiele dient der weiteren Illustration der Erfindung, beschränken jedoch den Schutzumfang der Erfindung in keiner Weise.
    •
  • Ausführungsbeispiele
  • Die nachfolgenden Beispiele dienen zur weiteren Illustration der erfindungsgemäßen Gegenstände und Verfahren.
  • Material und Methoden:
  • Chemikalien:
  • Die verwendeten Hilfsstoffe entsprechen den Anforderungen an pharmazeutisch zugelassene Hilfsstoffe. In Tabelle 2 sind die verwendeten Hilfsstoffe zusammengefasst. WFI (water for injection) wird von Boehringer Ingelheim, Biberach, DE bezogen.
  • Tabelle 2
    Figure 00230001
  • Figure 00240001
  • Alle verwendeten Cyclodextrine sind käuflich erhältlich (vergleiche Tabelle 1).
  • Der verwendeten Antikörper-DM1 Komplex ist ein Konjugat aus einem CD44v6-spezifischen Antikörpermolekül und dem Maytansinoid DM1, worin das Antikörpermolekül die leichten Ketten mit der Aminosäuresequenz SEQ ID NO: 4 und die schweren Ketten mit der Aminosäuresequenz SEQ ID NO: 6 enthält, und worin das Maytansinoid die Formel
    Figure 00250001
    Formel (IV) hat und an den Antikörper über eine Disulfidbindung gekoppelt ist.
  • Herstellung einer Antikörper-DM1 Flüssigformulierung:
  • Zur Herstellung einer 1.8 mg/ml Antikörper-DM1 Lösung wird die Ausgangslösung in die neu zu testenden Lösungen umgepuffert (nach Standardverfahren) oder die entsprechenden Hilfsstoffe zusammen gegeben. Die genaue Zusammensetzung dieser Formulierungen wird in den Beispielen beschrieben.
  • Analytische Messmethoden:
    • – Die Bestimmung des pH-Wertes, der Osmolalität, Aussehen, Farbe und Klarheit wird nach den gültigen PharmEu und USP Vorschriften durchgeführi.
    • – HP-SEC (high performance exclusion chromatography). Mittels HP-SEC wird der Gehalt an Monomer in der Lösung bestimmt. T2 wird isokratisch von der SEC-Säule eluiert, und der Monomerpeak integrativ ausgeweriet.
    • – RP-HPLC (reversed phase high peformance liquid chromatography): Mittels RP-HPLC wird der Gehalt an freiem DM1 bestimmt. Diese Analysemethode beruht auf einer Kombination von HPLC mit einer „shieled" reversed-phase Kolonne, die es erlaubt kleine chemische Moleküle, die UV absorbierend sind in Gegenwart von Proteinmolekülen zu diskriminieren. Diese Kombinationsmethode vereint den Vorteil der „size-exlusion" und der Reversen-Phasen Chromatography. Grosse Moleküle können nicht in die poröse Kolonnenmatrix eindringen und somit können grosse Moleküle nicht im hydrophoben Inneren der Matrix binden. Kleine Moleküle dagegen können in die Kolonnenmatrix eindringen und an den hydrophoberen Innenraum binden. Die Antikörper-DM1 Komplex („gross") Lösung in Anwesenheit von freiem DM1 („klein") wird auf die Kolonne aufgetragen. Nur freies DM1 kann gebunden werden, der Antikörper-DM1 Komplex wird eluiert. Mittels eines Acetonitrilgradienten wird DM1 und entsprechende Ansamitocine-Derivate von der Säule eluiert.
  • Verwendete Primärpackmittel für die Stressstabilitäts-Studien
    • Vial: 20/25 ml Standard Vial (20R), farblos, GA1 Inj. (Firma Schott, DE)
    • Stopfen: Gusto WS 579, W 1888 grau, Teflon (Firma West, USA)
    • Bördelkappe: Kombika/Alu-KU (Firma West, DE)
  • Durchführung der Stressstabilitäts-Studien
  • Die verschiedenen zu testenden Flüssig-Formulierungen werden über einen Sterilfilter (0.22 micrometer, Firma Millipore) sterilfiltriert und in die Vials abegüllt. Das Füllvolumen beträgt 20 ml. Die Vials werden mittels Stopfen und Bördelkappe verschlossen und über Kopf gelagert.
  • Die Lagertemperature für die Stressstabilitäts-Studien beträgt 40 °C.
  • Die Probenziehungszeitpunkte betragen: 0, 4, und 8 Wochen.
  • Beispiel 1: Einfluss des pH Wertes auf die Stabilität von Antikörner-DM1 Komplexen
  • Die Proteinkonzentration (Antikörper-DM1 Komplex) beträgt 1.8 mg/ml für alle Formulierungen.
  • Die Vergleichsformulierung (Tabelle 3) besteht aus folgenden Hilfsstoffen:
  • Tabelle 3:
    Figure 00260001
  • Figure 00270001
  • Der pH Wert der verschiedenen zu untersuchenden Formulierungen wurden ausgehend von der Vergleichsformulierung (Tabelle 3) mit 1 N Phosphorsäure auf pH 6.0 und 5.5 eingestellt.
  • 20 ml der jeweiligen Formulierung wurde in ein 20 R Vial abgefüllt und die Vials kopfüber bei 40 °C gelagert.
  • Die Ergebnisse der Stress-Studie sind in 1 sowie in Tabelle 4 zusammengefasst.
  • Tabelle 4:
    Figure 00280001
  • In 1 ist der Unterschied von freiem DM1 Gehalt dargestellt. Dargestellt ist der Unterschied von freiem DM1 zwischen dem Nullwert und dem 4-Wochenwert, und der Unterschied zwischen dem Nullwert und dem 8-Wochenwert.
  • Beschreibung der Auswertung DM1 Gehaltsbestimmung: Die für die verschiedenen DM1-Moleküle gemessenen Flächen wurden für jeden Ziehungszeitpunkt addiert. Somit erhält man eine Flächensumme für DM1-Derivate in den einzelnen Proben. Die Grafiken zeigen den Anstieg dieser Flächen (den Anstieg an freien Maytansinoiden in der entsprechenden Formulierung) zwischen 0 und 4 Wochen (hell) und den Anstieg dieser Flächen zwischen 0 und 8 Wochen (dunkel) für jede Formulierung. Überraschenderweise wurde gefunden, dass der pH Wert einen erheblichen Einfluss hat auf die Stabilität des Antikörper-DM1 Komplex.
  • Aus 1 ist der Effekt des pH Wertes deutlich. Der Gehalt an freien DM1 ist um den Faktor 2-3 geringer bei Formulierungen mit pH 5.5 als bei pH 6.5.
  • Der Monomergehalt ist um 2-6 % höher für pH 5.5 als für Formulierungen bei pH 6.5. Einen vorteilhaften Einfluss hat die pH Erniedrigung auch auf den AFK (Aussehen, Farbe Klarheit) Parameter (vergleiche Tabelle 3).
  • Zusammenfassend kann man festhalten, dass eine Erniedrigung des pH Wertes von pH 6.5 auf pH 5.5 einen positiven Einfluss hat bezüglich der Stabilisierung von Antikörper-DM1 Komplexen. Im Vergleich zu der Formulierung mit pH 6.5 kann die Laufzeit der Lagerung bei 2-8 °C um den Faktor 2-3 verlängert werden.
  • Beispiel 2: Einfluss von Cvclodextrinen auf die Stabilität von Antikörner-DM1 Komplexen
  • In einem 2. Versuch wurde der Einfluss von Cyclodextrinen auf die Stabilität von
  • Antikörper-DM1 Komplexen in einer Stress-Studie evaluiert.
  • Es wurden 4 verschiedenen Cyclodextrine getestet:
    • • Hydroxy-Propyl-beta-Cyclodextrin (HP-β-CD)
    • • Hydroxy-Propyl-gamma-Cyclodextrin (HP-γ-CD)
    • • Gamma-Cyclodextrin (γ-CD)
    • • Sulfobutylether-beta-Cyclodextrin (SBE-β-CD, Captisol)
  • Die Grundformulierung besteht aus folgenden Hilfsstoffen (Tabelle 5):
  • Tabelle 5:
    Figure 00290001
  • Bei allen CD-Formulierungen wurde der pH Wert konstant auf pH 6.5 gehalten. Die Cyclodextringehalt wurde zwischen 1 und 15 w% variiert (Tabelle 6).
  • Tabelle 6:
    Figure 00300001
  • Basierend auf der Grundformulierung aus Tabelle 4 wurde durch Zugabe der entsprechenden Menge an Cyclodextrin, die in Tabelle 5 dargestellten 11 CD-Flüssig-Formulierungen hergestellt. 20 ml wurden jeweils in eine Vial (Röhrchen, n=2) angefüllt, die Vials verschlossen und über Kopf bei 40 °C gelagert. Die Bezeichnungen der jeweiligen Formulierungen findet man in Tabelle 5. Formulierung D1 bedeutet: 1 w% Cyclodextrin D (SBE-β-CD, Captisol).
  • Die Ergebnisse aus der Stressstudie sind in 3 sowie Tabellen 7-10 zusammengefasst. (zu der Darstellung der Ergebnisse vergleiche Beispiel 1).
  • Tabelle 7
    Figure 00300002
  • Tabelle 8:
    Figure 00310001
  • Tabelle 9:
    Figure 00310002
  • Tabelle 10:
    Figure 00310003
  • Aus 2 geht hervor, dass der Gehalt an freiem DM1 für die Formulierungen D (Captisol) am geringsten ist. Der Vergleich von z.B. Formulierung D1 mit B 1 (selber Gehalt an Cyclodextrin) zeigt, dass der freie DM1 Gehalt halbiert ist im Vergleich zu der Formulierung B 1. Einige Formulierungen zeigen sogar einen destabilisierenden Effekt auf Antikörper-DM1 Komplexen im Vergleich zu der Formulierung ohne Cyclodextrin.
  • Ein Vergleich der Formulierungen D mit der Formulierung ohne Cyclodextrin (1) zeigt für letztere, erhöhte (Verdoppelung) Werte für den DM1 Gehalt in der Formulierung für die 8-Wochenwerte.
  • Die Monomergehalte der verschiedenen Cyclodextrin-Formulierungen sind vergleichbar mit der Vergleichsformulierung bei pH 6.5 (Tabelle 3). Zusammenfassend kann man sagen, das die Formulierungen mit Cyclodextrinen, insbesondere Captisol zur Stabilisierung des Antikörper-DM1 Komplexes verhelfen.
  • Die Laufzeit des Produktes kann somit verlängert werden im Vergleich zur Vergleichsformulierung.
  • Literatur
    • Aguiar DJ, Knudson W, and Knudson CB. Internalization of the hyaluronan receptor CD44 by chondrocytes. Exp.Cell.Res. 252: 292-302, 1999.
    • Aujame L, Geoffroy F, Sodoyer R. High affinity human antibodies by phage display. Hum Antibodies 8(4):155-68 (1997).
    • Barbas C F, Björling E, Chiodi F, Dunlop N, Cababa D, Jones T M, Zebedee S L, Persson M A A, Nara P L, Norrby E, Burton D R. Recombinant human Fab fragments neutralize human type 1 immunodeficiency virus in vitro. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 89: 9339-9343 (1992)
    • Breitz H B, Weiden P L, Vanderheyden J-L, Appelbaum J W, Bjorn M J, Fer M F, Wolf S B, Ratcliff B A, Seiler C A, Foisie D C, Fisher D R, Schroff R W, Fritzberg A R, Abrams P G. Clinical experience with rhenium-186-labeled monoclonal antibodies for radioimmunotherapy: results of phase I trials. J. Nucl. Med. 33: 1099-1112 (1992)
    • Bazil V and Horejsi V. Shedding of the CD44 adhesion molecule from leukocytes induced by anti-CD44 monoclonal antibody simulating the effect of a natural receptor ligand. J Immunol 149 (3):747-753, 1992.
    • Blattier et al, Biochem. 24: 1517-1524 (1985).
    • Breiting F, Duebel S: Recombinant Antibodies. John Wiley, New York 1999.
    • Catty D. Antibodies. Oxford IR Press 1988.
    • Catty, D., Raykundalia, C. ELISA and related immunoassays. In: Catty, D (Hrsg). Antibodies Vol. II. IRL Press Oxford (1989), 97-152, s. S. 105-109
    • Catty, D., Murphy, G. Immunoassays using radiolabels. In: Catty, D (Hrsg). Antibodies Vol. II. IRL Press Oxford (1989), 77-96
    • Chari RVJ, Derr SM, Steeves RM, Widdison WC: Dose-response of the anti-tumor effect of HUN901-DM1 against human small cell lung cancer xenografts. Proceedings of the American Association of Cancer Research (2000) 41(April 1-5) Abs 4405. Carlsson et al, Biochem. J. 173: 723-737 (1978).
    • Chari RVJ, Marten BA, Gross JL, Cook SB, Shah SA, Blättler WA, McKenzie SJ, Goldmacher VS. Immunoconjugates containing novel maytansinoids: promising anticancer drugs. Cancer Research 52: 127-31, 1992.
    • Chari RVJ, Derr SM, Steeves RM, Widdison WC: Dose-response of the anti-tumor effect of HUN901-DM1 against human small cell lung cancer xenografts. Proceedings of the American Association of Cancer Research (2000) 41(April 1-5) Abs 4405. Chatal J-F, Saccavini J-C, Gestin J-F, Thedrez P, Curtet C, Kremer M, Guerreau D, Nolibé D, Fumoleau P, Guillard Y. Biodistribution of indium-111-labeled OC 125 monoclonal Antikörper intraperitoneally injected into patients operated on for ovarian carcinomas. Cancer Res. 49: 3087-3094 (1989)
    • Chaudhary V K, Batra J K, Galdo M G, Willingham M C, Fitzgerald D J, Pastan I. A rapid method of cloning functional variable-region Antikörper genes in Escherichia coli as single-chain immunotoxins. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 87: 1066 (1990)
    • Coloma M J, Hastings A, Wims L A, Morrison S L. Novel vectors for the expression of Antikörpermoleküls using variable regions generated by polymerase chain reaction. J. Immunol. Methods 152: 89-104 (1992)
    • Chothia and Lesk. J. Mol. Biol. 196: 901-917 (1987).
    • Frank et al. Methods Enzymol. 154: 221-249 (1984)
    • Friedmann P N, McAndrew S J, Gawlak S L, Chace D, Trail P A, Brown J P, Siegall C B. BR96 sFv-PE40, a potent single-chain immunotoxin that selectively kills carcinoma cells. Cancer Res. 53: 334-339 (1993)
    • Gait,M.J., Oligonucleotide Synthesis. A Practical Approach. IRL Press, Oxford, UK (1984).
    • Goldmacher et al., J Immunol 135: 3648-3651, 1985.
    • Goldmacher et al., J Cell Biol 102: 1312-1319, 1986.
    • Goodwin D A. A new appoach to the problem of targeting spezifisch monoclonal antibodies to human tumors using anti-hapten chimeric antibodies. J. Nucl. Med. Biol. 16: 645 (1989)
    • Günthert, U., Hofmann, M., Rudy, W., Reber, S., Zöller, M., Haußmann, I., Matzku, S., Wenzel, A., Ponta, H., and Herrlich, P. A new variant of glycoprotein CD44 confers metastatic potential to rat carcinoma cells. Cell 65: 13-24 (1991)
    • Guesdon, J. I., Ternynck, T., Avrameas, S. J. Histochem. Cytochem. 27: 1131 (1979)
    • Güssow D, Seemann G. Humanization of monoclonal antibodies. Methods Enzymol. 203: 99-121 (1991)
    • Guo YJ, Liu G, Wang X, Jin D, Wu M, Ma J, and Sy MS. Potential use of soluble CD44 in serum as indicator of tumor burden and metastasis in patients with gastric or colon cancer. Cancer Res 54 (2): 422-426, 1994.
    • Harlow L D. Antibodies. Cold Spring Harbor Lab.1988
    • Hayden et Mandecki. Gene synthesis by serial cloning of oligonucleotides. DNA 7(8): 571-7 (1988).
    • Heider, K.-H., Hofmann, M., Horst, E., van den Berg, F., Ponta, H., Herrlich, P., and Pals, S.T. A human homologue of the rat metastasis-associated variant of CD44 is expressed in colorectal carcinomas and adenomatous polyps. J. Cell Biol. 120: 227-233 (1993a)
    • Heider, K-H., Dämmrich, J., Skroch-Angel, P., Müller-Hermelink, H-K., Vollmers, H-P., Herrlich, P., and Ponta, H. Differential expression of CD44 splice variants in intestinal- and diffuse-type human gastric carcinomas and normal gastric mucosa. Cancer Res. 53: 4197-4203 (1993b)
    • Heider KH, Minder JWR, Ostermann E,Susani S, Patzelt E, Pals ST, Adolf GRA. Splice variants of the cell surface glycoprotein CD44 associated with metastatic tumor cells are expressed in normal tissues of humans and cynomolgus monkeys. Eur. J. Cancer 31A: 2385-2391, 1995.
    • Heider KH, Sproll M, Susani S, Patzelt E, Beaumier P, Ostermann O, Ahorn H, Adolf GRA. Characterization of a high affinity monoclonal antibody antibody specific for CD44v6 as candidate for immunotherapy of squamous cell carcinomas. Cancer Immunology Immunotherapy 43: 245-253, 1996.
    • Hofmann, M., Rudy, W., Zöller, M., Tölg, C., Ponta, H., Herrlich P., and Günthert, U. CD44 splice variants confer metastatic behavior in rats: homologous Sequenzs are expressed in human tumor cell lines. Cancer Res. 51: 5292-5297 (1991)
    • Johnson, G. D. Immunofluorescence. In: Catty, D (Hrsg). Antibodies Vol. II. IRL Press Oxford (1989), 179-200, s. S. 180-189
    • Johnson S, Bird R E. Construction of single-chain derivatives of monoclonal antibodies and their production in Escherichia coli. Methods Enzymol. 203: 88-98 (1991)
    • Kabat E. A., Wu T. T., Perry H. M., Gottesman K. S. and Foeller C. Sequences of Proteins of Immunological Interest (5th Ed.). NIH Publication No. 91-3242. U.S. Department of Health and Human Services, Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991).
    • Kearney, J.F., Radbruch A., Liesegang B., Rajewski K. A new mouse myeloma cell line that has lost imunoglobulin expression but permits construction of Antikörpersecreting hybrid cell lines. J. Immunol. 123: 1548 (1979)
    • Köhler, G., Milstein, C. Continous culture of fused cells secreting Antikörper of predefined specifity. Nature 265: 495 (1975
    • Klotz et al, Arch. Biochem. Biophys. 96: 605 (1962).
    • Koopman, G., Heider, K.-H., Horts, E., Adolf, G. R., van den Berg, F., Ponta, H., Herrlich, P., Pals, S. T. Activated human lymphocytes and aggressive Non-Hodgkin's lymphomas express a homologue of the rat metastasis-associated variant of CD44. J. Exp. Med. 177: 897-904 (1993).
    • Kreitman R J Hansen H J, Jones A L, FitzGerald D J P, Goldenberg D M, Pastan I. Pseudomonas exotoxin-based immunotoxins containing the antibody LL2 or LL2-Fab' induce regression of subcutaneous human B-cell lymphoma in mice. Cancer Res. 53: 819-825 (1993).
    • Lambert et al, Biochem. 22: 3913-3920 (1983).
    • Lambert JM, Derr SM, Cook S, Braman G, Widdison W, Chari RVJ. Pharmacokinetics, in vivo stability, and toxicity of the Tumor-activated prodrug, C242-DM1, a novel colorectal cancer agent. Proceedings of the American Association of Cancer Research (1998) 39: Abs 3550
    • Larson S M, Cheung N-K V, Leibel S A. Radioisotope Conjugates. In: DeVita V T, Hellman S, Rosenberg S A (Hrsg.). Biologic therapy of cancer. J. B. Lippincott Comp., Philadelphia, 496-511 (1991)
    • Liu et al, Biochem. 18: 690 (1979), Blakey and Thorpe, Antibody, Immunoconjugates and Radiopharmaceuticals, 1: 1-16 (1988).
    • Liu C, Tadayoni BM, Bourret LA, Mattocks KM, Derr SM, Widdison WC, Kedersha NL, Ariniello PD, Goldmacher VS, Lambert JM, Blättler WA, Chari RVJ. Eradication of large colon tumor xenografts by targeted delivery of maytansinoids. Proc Natl Acad Sci USA 93: 8618-23, 1996.
    • Martin S, Jansen F, Bokelmann J, and Kolb H. Soluble CD44 splice variants in metastasizing human breast cancer. Int J Cancer 74 (4): 443-445, 1997.
    • Mulshine J L, Magnani J L, Linnoila R I: Applications of monoclonal antibodies in the treatment of solid tumors. In: DeVita V T, Hellman S, Rosenberg S A (Hrsg.). Biologic therapy of cancer. J. B. Lippincott Comp., Philadelphia, 563-588 (1991)
    • Nesbit M, Fu Z F, McDonald-Smith J, Steplewski Z, Curtis P J. Production of a functional monoclonal Antikörper recognizing human colorectal carcinoma cells from a baculovirus expression system. J. Immunol. Methods 151: 201-208 (1992)
    • Press O W, Eary J F, Badger C C, Martin P J, Appelbaum F R, Levy R, Miller R, Brown S, Nelp W B, Krohn K A, Fisher D, DeSantes K, Porter B, Kidd P, Thomas E D, Bernstein I D. Treatment of refractory Non-Hodgkin's lymphoma with radiolabeled MB-1 (anti-CD37) Antikörper. J Clin. Oncol. 7: 1027-1038 (1989)
    • Rudy, W., Hofmann, M., Schwartz-Albiez, R., Zöller, M., Heider, K.-H., Ponta, H., Herrlich, P. The two major CD44 proteins expressed on a metastatic rat tumor cell line are derived from different splice variants: Each one individually suffices to confer metastatic behaviour. Cancer Res. 53: 1262-1268 (1993)
    • Schrappe M, Bumol T F, Apelgren L D, Briggs S L, Koppel G A, Markowitz D D, Mueller B M, Reisfeld R A. Long-term growth suppression of human glioma xenografts by chemoimmunoconjugates of 4-desacetylvinblastine-3-carboxyhydrazide and monoclonal Antikörper 9.2.27. Cancer Res. 52: 3838-3844 (1992)
    • Screaton, G.R., Bell, M.V., Jackson, D.G., Cornelis, F.B., Gerth, U., and Bell, J. I. Genomic structure of DNA encoding the lymphocyte homing receptor CD44 reveals at least 12 alternatively spliced exons. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 89: 12160-12164 (1992)
    • Sears H F, Mattis J, Herlyn D, Häyry P, Atkinson B, Ernst C, Steplewski Z, Koprowski H. Phase-I clinical trial of monoclonal Antikörper in treatment of gastrointestinal tumours. Lancet 1982 (1): 762-765 (1982)
    • Seiter, S., Arch, R., Reber, S., Komitowski, D., Hofmann, M., Ponta, H:, Herrlich, P., Matzku, S., Zöller, M. Prevention of tumor metastasis formation by anti-variant CD44. J. Exp. Med. 177: 443-455 (1993)
    • Senter P D, Schreiber G J, Hirschberg D L, Ashe S A, Hellström K E, Hellström I. Enhancement of the in vitro and in vivo antitumor activities of phosphorylated mitomycin C and etoposide derivatives by monoclonal Antikörper-alkaline phosphatase conjugates. Cancer Res. 49: 5789-5792 (1989)
    • Shin S-U, Morrison S L. Production and properties of chimeric antibody molecules. Methods Enzymol. 178: 459-476 (1989).
    • Sliutz G, Tempfer C, Winkler S, Kohlberger P, Reinthaller A, and Kainz C. Immunohistochemical and serological evaluation of CD44 splice variants in human ovarian cancer. Br.J.Cancer 72: 1494-1497 (1995).
    • Smith, D.B., Johnson, K.S. Single-step purification of polypetides expressed in Escherichia coli as fusions with glutathione S-transferase. Gene 67: 31-40 (1988)
    • Srivastava S C (Hrsg). Radiolabeled monoclonal antibodies for imaging and therapy. Life Sciences Series A 152, Plenum New York (1988)
    • Stemmer et al. Single-step assembly of a gene and entire plasmid from large numbers of oligodeoxyribonucleotides, Gene 164(1): 49-53 (1995).
    • Stroomer JW, Roos JC, Sproll M, Quak JJ, Heider KH, Wilhelm BJ, Castelijns JA, Meyer R, Kwakkelstein MO, Snow GB, Adolf GR, van Dongen GA. Safety and biodistribution of 99mTechnetium-labeled anti-CD44v6 monoclonal antibody BIWA 1 in head and neck cancer patients. Clin Cancer Res 6 (8):3046-55, 2000
    • Tölg, C., Hofmann, M., Herrlich, P., and Ponta, H. Splicing choice from ten variant exons establishes CD44 variability. Nucleic Acids. Res. 21: 1225-1229 (1993)
    • Theuer C P, Kreitman R J, FitzGerald D J, Pastan I. Immunotoxins made with a recombinant form of pseudomonas exotoxin A that do not require proteolysis for activity. Cancer Res. 53: 340-347 (1993)
    • Tolcher AW et al. SB-408075, a maytansinoid immunoconjugate directed to the C242 antigen: a phase I pharmacokinetic and biologic correlative study. Poster presented at 11th Symp. on new drugs in cancer therapy (Nov 7-10, 2000 in Amsterdam).
    • Thomas G D, Dykes P W, Bradwell A R. Antibodies for tumour immunodetection and methods for Antikörper radiolabeling. In: Catty D (Hrsg.). Antibodies. IRL Press Oxford, 223-244 (1989), 223-244 Urlaub and Chasin. Proc. Natl. Acad. Sci.. U.S.A. 77(7): 4216-20 (1980)
    • Urlaub et al., Cell 33: 405-412 (1983) Verel I, Heider KH, Siegmund M, Ostermann E, Patzelt E, Sproll M, Snow GB, Adolf GR, van Dongen GMS. Tumor targeting properties of monoclonal antibodies with different affinity for target antigen CD44v6 in nude mice bearing head-and-neck cancer xenografts. Int. J. Cancer 99: 396-402 (2002).
    • Vitetta E S, Thorpe P E. Immunotoxins. In: DeVita V T, Hellman S, Rosenberg S A (Hrsg.). Biologic therapy of cancer. J. B. Lippincott Comp., Philadelphia, 482-495 (1991
    • Vitetta E S, Stone M, Amlot P, Fay J, May R, Till M, Newman J, Clark P, Collins R, Cunningham D, Ghetie V, Uhr J W, Thorpe P E. Phase I immunotoxin trial in patients with B-cell lymphoma. Cancer Res. 51: 4052-4058 (1991)
    • Wang S-M, Chern J-W, Yeh M-Y, Ng J C, Tung E, Roffler S R. Spezifisch activation of glucuronide prodrugs by Antikörper-targeted enzyme conjugates for cancer therapy. Cancer Res. 52: 4484-4491 (1992)
    • Weiner L M, O'Dwyer J, Kitson J, Comis R L, Frankel A E, Bauer R J, Kopnrad M S, Groves E S. Phase I evaluation of an anti-breast carcinoma monoclonal Antikörper 260F9-recombinant ricin A chain immunoconjugate. Cancer Res. 49: 4062-4067 (1989)
    • Wielenga, V. J. M., Heider, K.-H., Offerhaus, G. J. A., Adolf, G. R., van den Berg, F. M., Ponta, H., Herrlich, P., Pals, S.T. Expression of CD44 variant proteins in human colorectal cancer is related to tumor progression. Cancer Res. 53: 4754-4756 (1993)
    • Winter, G., Griffith, A. D., Hawkins, R. E., Hoogenboom, H. R. Making antibodies by phage display technology. Ann. Rev. Immunol. 12, 433-455 (1994)
    • Worrell et al, Anti-Cancer Drug Design 1: 179-184 (1986).
    • Ye et al. Gene synthesis and expression in E. coli for pump, a human matrix metalloproteinase. Biochem Biophys Res Commun 186(1):143-9 (1992).
  • Es folgt ein Sequenzprotokoll nach WIPO St. 25. Dieses kann von der amtlichen Veröffentlichungsplattform des DPMA heruntergeladen werden.

Claims (21)

  1. Pharmazeutische Zusammensetzung enthaltend ein Gemisch aus einer Antikörperkonjugat, mindestens einem Cyclodextrin und Wasser.
  2. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 1, worin das Cyclodextrin ein β-Cyclodextrin ist.
  3. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 1, worin das Cyclodextrin ein γ-Cyclodextrin ist.
  4. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 1, worin das Cyclodextrin ein Sulfoalkylether-Cyclodextrin ist.
  5. Pharmazeutische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1, 2 oder 4, worin das Cyclodextrin ausgewählt aus der Gruppe von Sulfobutylether-β-Cyclodextrin, Hydroxy-Propyl-β-Cyclodextrin, Hydroxypropyl-γ-Cyclodextrin und γ-Cyclodextrin ist.
  6. Pharmazeutische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 5, worin das Cyclodextrin in 0,01-40 Gewichtsprozent, bevorzugt 0,1-20 Gewichtsprozent, besonders bevorzugt 0,1-10 Gewichtsprozent, ganz besonders bevorzugt 1 Gewichtsprozent enthalten ist.
  7. Pharmazeutische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 6, enthaltend einen Puffer ausgewählt aus der Gruppe der Phosphat-, Acetat-, Succinatpuffer.
  8. Pharmazeutische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 7, dadurch gekennzeichnet, dass sie auf einen pH Wert von 5-6 eingestellt ist, bevorzugt ein pH Wert von 5,5.
  9. Pharmazeutische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 8, enthaltend Zucker ausgewählt aus der Gruppe der Mannitole, Saccharose.
  10. Pharmazeutische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 9, zusätzlich enthaltend NaCl.
  11. Pharmazeutische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 10, enthaltend ein Detergenz ausgewählt aus der Gruppe von Tween 20, Tween 80.
  12. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 11, zusätzlich enthaltend das Detergenz nach Anspruch 11 in einer Konzentration von 0,01-1 Gewichtsprozent, bevorzugt 0,01-0,1 Gewichtsprozent, besonders bevorzugt 0,02-0,04 Gewichtsprozent.
  13. Pharmazeutische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 12, worin das Antikörperkonjugat ein Konjugat aus einem CD44v6 spezifischen Antikörpermolekül und einem Maytansinoid ist.
  14. Pharmazeutische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 13, worin das Antikörpermolekül spezifisch für ein Epitop innerhalb der Aminosäuresequenz SEQ ID NO: 3.
  15. Pharmazeutische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 14, worin das Antikörpermolekül der monoklonale Antikörper VFF-18 (DSM ACC2174) oder ein rekombinanter Antikörper mit den Komplementbindungsstellen („complementary determining regions" –CDRs) von VFF-18 ist.
  16. Pharmazeutische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 15, worin das Antikörpermolekül die leichten Ketten mit der Aminosäuresequenz SEQ ID NO: 4, oder SEQ ID NO: 8, und die die schweren Ketten mit der Aminosäuresequenz SEQ ID NO: 6 umfaßt.
  17. Pharmazeutische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 16, worin das Maytansinoid an das Antikörpermolekül mit einer Disulfidbindung gekoppelt ist.
  18. Pharmazeutische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 17, worin das Maytansinoid die Formel
    Figure 00400001
    Formel (IV) hat.
  19. Pharmazeutische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 18, worin das Antikörpermolekül die leichten Ketten mit der Aminosäuresequenz SEQ ID NO: 4, und die schweren Ketten mit der Aminosäuresequenz SEQ ID NO: 6 umfaßt, und worin das Maytansinoid die Formel
    Figure 00410001
    (Formel IV) hat und an den Antikörper durch eine Disulfidbindung gebunden ist.
  20. Pharmazeutische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 19, worin ein oder mehrere Maytansinoidreste an das Antikörpermolekül gebunden sind.
  21. Pharmazeutische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 20, worin 3 bis 4 Maytansinoidreste an das Antikörpermolekül gebunden sind.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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PE20120169A1 (es) * 2008-11-17 2012-02-29 Genentech Inc Metodo y formulacion para reducir la agregacion de una macromolecula bajo condiciones fisiologicas
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KR20250052501A (ko) * 2015-12-30 2025-04-18 제넨테크, 인크. 분해가 감소된 폴리소르베이트를 갖는 제형

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5208020A (en) * 1989-10-25 1993-05-04 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use
AR046774A1 (es) * 2003-12-24 2005-12-21 Boehringer Ingelheim Pharma Formulacion liofilizada de conjugados de anticuerpos

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