DE102008031666B4

DE102008031666B4 - cryocontainers

Info

Publication number: DE102008031666B4
Application number: DE102008031666A
Authority: DE
Inventors: Günter R. Prof. Dr. Fuhr; Heiko Prof. Dr. Zimmermann
Original assignee: Fraunhofer Gesellschaft zur Foerderung der Angewandten Forschung eV
Current assignee: Fraunhofer Gesellschaft zur Foerderung der Angewandten Forschung eV
Priority date: 2008-07-04
Filing date: 2008-07-04
Publication date: 2010-05-12
Anticipated expiration: 2028-07-05
Also published as: ATE542603T1; EP2297001B1; DE102008031666A1; EP2297001B8; WO2010000463A1; EP2297001A1

Abstract

The invention relates to a cryogenic container being suitable for the storage and provision of frozen particles, comprising a thermally insulated container element having at least one accommodation chamber for frozen particles, and at least one outlet opening, a locking device, by means of which the at least one outlet opening can be closed, at least one opening element, which can be actuated in order to open the outlet opening, thus providing the frozen particles outside of the outlet opening, and an insulation element for the thermal insulation of the closing device. The invention further relates to a depot for providing frozen particles for a deposition device, a deposition device having a depot, and a method for providing frozen particles for a deposition.

Description

Die Erfindung betrifft einen zur Lagerung und Bereitstellung von gefrorenen Partikeln geeigneten Kryobehälter, ein Magazin zur Bereitstellung von gefrorenen Partikeln für eine Depositionsvorrichtung zur Deposition der gefrorenen Partikel unter Verwendung eines Kryobehälters, eine zur Deposition von gefrorenen Partikeln eingerichtete Depositionsvorrichtung mit einem Magazin, sowie ein Verfahren zur Bereitstellung von gefrorenen Partikeln für eine Depositionsvorrichtung unter Verwendung eines Kryobehälters.The The invention relates to a storage and supply of frozen Particles suitable cryocontainers, a magazine for providing frozen particles for a deposition apparatus for Deposition of the frozen particles using a cryogenic container, a Deposition device set up for the deposition of frozen particles with a magazine, as well as a method of providing frozen Particles for a deposition apparatus using a cryogenic container.

Aus der Praxis biologischer und medizinischer Anwendungen sind Verfahren und Vorrichtungen zur Deposition von Partikeln in einem Zielsubstrat bekannt. Besonders interessant für medizinische und biologische Zwecke ist die Deposition von biologischem Material, beispielsweise von lebenden Zellen. Für die Deposition biologischer Materialien in ein Zielsubstrat, insbesondere in ein biologischen Zielsubstrat, wie lebendes Gewebe, ist in der DE 10 2007 004 855 (deutsche Patentanmeldung, unveröffentlicht am Prioritätstag der vorliegenden Anmeldung) eine Depositionsvorrichtung und ein Verfahren beschrieben, womit biologisches Material enthaltende Partikel im gefrorenem Zustand in ein Zielsubstrat geschossen werden. Die Partikel haben dabei beispielsweise einen Querschnittsdurchmesser von weniger als einem Millimeter und eine Masse in der Größenordnung von weniger als 10 μg.From the field of biological and medical applications, methods and devices for the deposition of particles in a target substrate are known. Particularly interesting for medical and biological purposes is the deposition of biological material, such as living cells. For the deposition of biological materials into a target substrate, particularly a target biological substrate, such as living tissue, is known in the art DE 10 2007 004 855 (German patent application, unpublished on the priority date of the present application) describes a deposition apparatus and a method, wherein particles containing biological material are shot in the frozen state into a target substrate. The particles have, for example, a cross-sectional diameter of less than one millimeter and a mass of the order of less than 10 micrograms.

Da derart kleine gefrorene Partikel naturgemäß bei Raumtemperatur schnell auftauen, sind für die Vorbereitung der Parti kel für die Deposition besondere Vorkehrungen zu treffen. Für die Präparation der gefrorenen Partikel gibt es dabei die Möglichkeit, die Partikel unmittelbar vor der Deposition durch gezieltes Tiefgefrieren kleinster Mengen herzustellen. Eine andere Möglichkeit besteht darin, gefrorene Partikel herzustellen und bis zur Verwendung zur Deposition tiefgekühlt aufzubewahren. Insbesondere biologische Materialien müssen für längere Aufbewahrungszeiten in der Regel bei sehr tiefen Temperaturen, häufig von unter –100°C gelagert werden.There such small frozen particles naturally at room temperature quickly are thawing for the Preparation of the particles for the deposition to take special precautions. For the preparation of the frozen particles there is the possibility of the particles directly before deposition by targeted deep freezing of smallest quantities manufacture. Another possibility is to make frozen particles and to use Deep-frozen for deposition store. In particular, biological materials need for longer storage times usually at very low temperatures, often stored below -100 ° C become.

Daher besteht für die Lagerung und die Bereitstellung der Partikel ein Bedarf an einem Behältnis, welches über lange Zeiten (Monate bis Jahre) bei derart tiefen Temperaturen frost- bzw. kältebeständig ist. Gleichzeitig müssen die Partikel während der Lagerung sicher vor Kontamination geschützt sein. Darüber hinaus ist es bei den relativ kleinen gefrorenen Partikeln besonders wichtig, die Kühlkette von der Lagerung bis zur Deposition aufrechtzuerhalten, da sonst auch bei sehr kurzen Unterbrechungen die Gefahr des Schmelzens der Partikel besteht. Insbesondere bei der Vorbereitung der Partikel für die Deposition besteht die Gefahr von Unterbrechungen der Kühlkette und Verzögerungen, die ohne geeignete Schutzmaßnahmen schnell zu einem Schmelzen der Partikel führen können. Eine leichte Handhabung des Behältnisses ist daher wichtig, um Verzögerungen zu vermeiden.Therefore exists for the storage and provision of the particles a need for a Container, which over long periods (months to years) at such low temperatures frosty or is resistant to cold. At the same time the particles during Storage should be protected against contamination. Furthermore it is especially important for the relatively small frozen particles the cold chain from storage to deposition, otherwise even with very short interruptions, the risk of melting the Particle exists. Especially in the preparation of the particles for the Deposition involves the risk of interruptions of the cold chain and delays, without proper protective measures can quickly lead to melting of the particles. Easy handling of the container is therefore important to delays to avoid.

Aus dem Stand der Technik sind verschiedene Behältnisse für gefrorene Proben und Behältnisse zur Bereitstellung von Reaktionskomponenten bekannt: In der US 2006/0019233 A1 ist ein Behältnis zur Kryokonservierung beschrieben, welches röhrchenförmig, ähnlich einer Spritze ausgestaltet ist, wobei die gefrorene Probe zur Entnahme mit einem Stempel aus dem Behältnis herausgeschoben werden kann.Various containers for frozen samples and containers for the provision of reaction components are known from the prior art: In the US 2006/0019233 A1 a container for cryopreservation is described, which is tube-shaped, similar to a syringe, wherein the frozen sample can be pushed out for removal with a stamp from the container.

Die DE 10 2006 055 331 A1 offenbart ein modulares Lagersystem für die Kryokonservierung biologischer Proben. Das beschriebene System ist zur platzsparenden Lagerung von in getrennten Behältermodulen angeordneten Teilproben ausgelegt, wobei die einzelnen Teilproben gesondert gehandhabt werden können.The DE 10 2006 055 331 A1 discloses a modular storage system for the cryopreservation of biological samples. The described system is designed for space-saving storage of sub-samples arranged in separate container modules, wherein the individual sub-samples can be handled separately.

Ein Behältnis zur Bereitstellung von flüssigen Reaktionspartnern ist in der JP 2006094741 A beschrieben. Dabei sind Probenflüssigkeiten zunächst in einem von einem Reaktionsbehälter abgetrennten Lagerabteil enthalten. Zur Bereitstellung für eine Reaktion wird die Abtrennung mit einem Stempel durchstoßen, so dass die Probe in den Reaktionsbehälter gelangt.A container for providing liquid reactants is in the JP 2006094741 A described. In this case, sample liquids are initially contained in a separated from a reaction vessel storage compartment. To provide for a reaction, the separation is pierced with a stamp, so that the sample enters the reaction vessel.

Vor diesem Hintergrund ist es daher Aufgabe der Erfindung, einen Kryobehälter für die Lagerung und Bereitstellung von gefrorenen Partikeln für eine Deposition, eine Vorrichtung zur Bereitstellung und zur Deposition der gefrorenen Partikel, sowie ein Verfahren zur Bereitstellung der gefrorenen Partikel anzugeben, welche eine weitgehende Aufrechterhaltung der Kühlkette erlauben und einfach zu handhaben beziehungsweise durchzuführen sind.In front It is therefore an object of the invention to provide a cryogenic container for storage and storage Providing frozen particles for deposition, device for the provision and deposition of the frozen particles, as well to provide a method of providing the frozen particles which allow a substantial maintenance of the cold chain and easy to be handled or carried out.

Die Aufgabe der Erfindung wird gelöst durch einen Kryobehälter, ein Magazin, eine Depositionsvorrichtung bzw. ein Verfahren zur Bereitstellung von gefrorenen Partikeln für eine Depositionsvorrichtung mit den Merkmalen der unabhängigen Ansprüche. Vorteilhafte Weiterbildungen sind in den abhängigen Ansprüchen angegeben.The The object of the invention is achieved through a cryogenic container, a magazine, a deposition apparatus and a method for Provision of frozen particles for a deposition device with the characteristics of the independent Claims. advantageous Further developments are specified in the dependent claims.

Ein zur Lagerung und Bereitstellung von gefrorenen Partikeln geeigneter erfindungsgemäßer Kryobehälter umfasst ein thermisch isolierendes Behälterelement, welches mindestens einen Aufnahmeraum für gefrorene Partikel und mindestens eine Austrittsöffnung aufweist. Der erfindungsgemäße Kryobehälter umfasst ferner eine Verschlussvorrichtung, mit der die mindestens eine Austrittsöffnung verschließbar ist und mindestens ein Öffnungselement, welches betätigbar ist, um die Austrittsöffnung zu öffnen und dadurch die gefrorenen Partikel außerhalb der Austrittsöffnung bereitzustellen. Der erfindungsgemäße Kryobehälter umfasst weiter ein Isolationselement zur thermischen Isolierung der Verschlussvorrichtung.A cryogenic container according to the invention suitable for storing and providing frozen particles comprises a thermally insulating container element which has at least one receiving space for frozen particles and at least one outlet opening. The cryocontainer of the invention further comprises a closure device, with which the at least one outlet opening can be closed and at least one opening element, which is operable to open the outlet opening and thereby provide the frozen particles outside the outlet opening. The cryocontainer of the invention further comprises an insulation element for thermal insulation of the closure device.

Der erfindungsgemäße Kryobehälter ist vorzugsweise sowohl zur Langzeitlagerung geeignet als auch zur kurzfristigen Bereitstellung für die Deposition. Für die Langzeitlagerung werden die gefrorenen Partikel in der Regel bei Temperaturen unter –100°C aufbewahrt. Der erfindungsgemäße Kryobehälter ist daher vorzugsweise über lange Zeiträume, von beispielsweise länger als einem Jahr, kältebeständig. Zweckmäßig ist er geeignet für eine Lagerung bei einer Temperatur von flüssigem Stickstoff oder Trockeneis (CO₂). Das Material des Behälterelementes kann beispielsweise Kunststoff, PTFE oder Glas sein.The cryocontainer according to the invention is preferably suitable both for long-term storage and for short-term provision for deposition. For long-term storage, the frozen particles are usually stored at temperatures below -100 ° C. The cryocontainer according to the invention is therefore preferably resistant to cold over long periods of, for example, more than one year. Suitably, it is suitable for storage at a temperature of liquid nitrogen or dry ice (CO ₂ ). The material of the container element may be, for example, plastic, PTFE or glass.

Das thermisch isolierende Behälterelement umfasst einen Hohlraum, welcher einen Aufnahmeraum für gefrorene Partikel bil det. Das Behälterelement ist thermisch isolierend ausgestaltet, um nach einer Entnahme des mit gefrorenen Partikeln beladenen Kryobehälters aus einem Tiefkühllager wie einem Ultratiefkühlgerät oder einem Stickstoff-Lagerbehälter die Temperatur der Partikel weitgehend aufrechtzuerhalten. Die den Hohlraum umschließenden Wände sind daher vorzugsweise wärmeisolierend ausgestaltet. Dies umfasst beispielsweise Wände aus einem wärmeisolierenden Material aber auch doppelwandige Ausführungen, bei denen ein Zwischenraum zwischen zwei Wandschichten ähnlich einem Dewargefäß evakuiert ist. Darüber hinaus kann eine dicke Behälterwand eine hohe Wärmekapazität aufweisen und so nach der Entnahme aus einem Tiefkühllager eine Wärmesenke bilden, die entsprechend der hohen Masse und Wärmekapazität ein Auftauen der in dem Aufnahmeraum befindlichen Partikel verhindert.The thermally insulating container element comprises a cavity which forms a receiving space for frozen particles. The container element is designed thermally insulating to after removal of the cryogenic container loaded with frozen particles from a frozen storage like an ultra freezer or a Nitrogen storage tank Maintain the temperature of the particles largely. The the Cavity enclosing walls are therefore preferably designed heat-insulating. This includes, for example, walls a heat-insulating Material but also double-walled versions in which a gap similar between two wall layers evacuated a Dewar vessel is. About that In addition, a thick container wall have a high heat capacity and so after removal from a frozen storage a heat sink form, according to the high mass and heat capacity of a thawing in the receiving space located particles prevented.

Das Behälterelement umfasst vorzugsweise nur einen Aufnahmeraum, jedoch sind auch Ausführungen mit mehr als einem Aufnahmeraum für gefrorene Partikel möglich. Diese können dann entweder mit ein und derselben Verschlussvorrichtung verschließbar sein oder jeweils eine gesonderte Verschlussvorrichtung aufweisen. Jeder Aufnahmeraum weist eine Austrittsöffnung auf. Die Austrittsöffnung ist eine Öffnung, durch welche in dem Aufnahmeraum gelagerte gefrorene Partikel den Kryobehälter verlassen können. Die Austrittsöffnung kann auch zur Befüllung des Kryobehälters mit den gefrorenen Partikeln dienen. Es ist aber auch möglich, dass der Kryobehälter über eine zweite Öffnung mit den gefrorenen Partikeln beladen wird. In diesem Fall kann die Austrittsöffnung bereits bei Fertigung des ungefüllten erfindungsgemäßen Kryobehälters mit der Verschlussvorrichtung verschlossen werden. Andernfalls ist die Austrittsöffnung nach Befüllen des Kryobehälters mit den gefrorenen Partikeln durch die Verschlussvorrichtung verschließbar.The container element preferably includes only one receiving space, but are also embodiments with more than one space for frozen particles possible. These can then be closed with one and the same closure device or each have a separate closure device. Everyone Receiving space has an outlet opening. The outlet is an opening, through which stored in the receiving space frozen particles the Leave cryogenic container can. The outlet opening can also be used for filling of the cryocontainer to serve with the frozen particles. But it is also possible that the cryocontainer over a second opening loaded with the frozen particles. In this case, the outlet can already during manufacture of the unfilled cryocontainer according to the invention the closure device are closed. Otherwise, that is outlet opening after filling of the cryocontainer closed with the frozen particles through the closure device.

Zum Öffnen der Verschlussvorrichtung und Bereitstellung der gefrorenen Partikel für die Deposition weist der erfindungsgemäße Kryobehälter mindestens ein Öffnungselement auf, welches betätigt werden kann, um die Verschlussvorrichtung zu öffnen. Vorzugsweise wird die Verschlussvorrichtung dabei vom Inneren des Aufnahmeraumes her nach außen geöffnet. Das Öffnungselement kann beispielsweise ein Stempel oder ein Einschubbolzen sein, der von innen gegen die Verschlussvorrichtung gedrückt wird und die Verschlussvorrichtung durchstößt oder aufstößt.To open the Closure device and provision of the frozen particles for the Deposition, the cryocontainer of the invention has at least one opening element on which are operated can to open the shutter. Preferably, the Closure device thereby opened from the inside of the receiving space forth to the outside. The opening element may for example be a punch or a slide-in pin, the pressed against the closure device from the inside and the closure device pierces or regurgitates.

Um eine gute Isolierung und Aufrechterhaltung der Kühlkette zu gewährleisten, verfügt der erfindungsgemäße Kryobehälter außerdem über das Isolationselement zur thermischen Isolierung der Verschlussvorrichtung und des Aufnahmenraumes gegenüber der Umgebung. Das Isolationselement ist von der Verschlussvorrichtung trennbar. Es kann z. B. vollständig abnehmbar oder abklappbar sein, so dass die Verschlussvorrichtung vollständig freigelegt werden kann. Vorzugsweise ist das Isolationselement vollständig entfernbar. Das Isolationselement besteht vorzugsweise aus einem thermisch isolierenden Material und kann auch zur Verbesserung der Isolierung einen evakuierten Hohlraum aufweisen. Wie das thermisch isolierende Behälterelement kann es auch eine hohe Wärmekapazität aufweisen und mit einer großen Masse nach der Entnahme aus einer Kühleinrichtung z. B. einem Kryotank als Wärmesenke dienen.Around to ensure good insulation and maintenance of the cold chain has the cryocontainer according to the invention also via the insulating element for thermal insulation of the closure device and the receiving space relative to the Surroundings. The isolation element is of the closure device separable. It can, for. B. completely be removable or hinged, so that the closure device Completely can be exposed. Preferably, the isolation element is completely removable. The insulating element is preferably made of a thermally insulating Material and can also be used to improve the insulation evacuated Have cavity. Like the thermally insulating container element it can also have a high heat capacity and with a big one Mass after removal from a cooling device z. B. a cryotank as a heat sink serve.

Das Isolationselement ist vorzugsweise ein loses Bauteil, das eine zu der äußeren Oberfläche der Verschlussvorrichtung komplementäre Kontaktfläche aufweist. Das Isolationselement liegt vorzugsweise während der Langzeitlagerung und insbesondere nach einer Entnahme des Kryobehälters aus einer Kühleinrichtung mit seiner Kontaktfläche an der Außenseite der Ver schlussvorrichtung an und bedeckt diese vollständig. Somit dient es einerseits der thermischen Isolierung und andererseits als Schutz vor mechanischen Beschädigungen der Verschlussvorrichtung. Vorzugsweise ist das Isolationselement dabei lösbar an dem Kryobehälter befestigt. Die Befestigung kann beispielsweise durch eine Folienmanschette gebildet sein, die ein Auseinanderfallen von Kryobehälter und Isolationselement verhindert und sich durch Aufreißen lösen lässt. Auch eine lösbare Klebeverbindung ist zur Befestigung möglich.The Isolation element is preferably a loose component, the one to the outer surface of the Closure device complementary contact area having. The insulating element is preferably during the Long-term storage and in particular after removal of the cryocontainer a cooling device with its contact surface on the outside the Ver closing device and covers it completely. Consequently On the one hand it serves for thermal insulation and on the other hand as protection against mechanical damage of the closure device. Preferably, the insulation element is releasably attached to the cryocontainer. The attachment can for example by a film sleeve be formed, a falling apart of cryogenic containers and Isolation prevents and can be solved by tearing. Also a detachable adhesive bond is possible for attachment.

Wenn der Kryobehälter zur Vorbereitung einer Deposition aus einer Kühleinrichtung entnommen wird, soll das Isolationselement zum Schutz vor Beschädigungen und vor allem zur weiteren Isolation möglichst lange am Kryobehälter verbleiben. Für die Bereitstellung der gefrorenen Partikel zur Deposition mit einer Depositionsvorrichtung wird das Isolationselement entfernt, so dass die Verschlussvorrichtung frei liegt. Dies geschieht vorzugsweise erst kurz vor der Deposition, so dass die Isolation möglichst lange aufrechterhalten wird.When the cryocontainer is removed from a cooling device in preparation for deposition, the insulation element should protect against obstruction damage and especially for further isolation as long as possible to remain on the cryogenic container. For the provision of the frozen particles for deposition with a deposition device, the insulation element is removed so that the closure device is exposed. This is preferably done only shortly before deposition, so that the isolation is maintained as long as possible.

Der Kryobehälter wird dann mit der freiliegenden Verschlussvorrichtung an einer Öffnung einer Depositionsvorrichtung oder in einem Magazin zur Bereitstellung der gefrorenen Partikeln positioniert. Vorzugsweise ist das Magazin oder die Depositionsvorrichtung gekühlt, so dass der Kryobehälter mit den gefrorenen Partikeln sofort nach Abnahme des Isolationselements wieder in Kontakt mit einer Kühlvorrichtung oder zumindest einem gekühlten Körper gelangt, um ein Auftauen der gefrorenen Partikel im Aufnahmeraum des Kryobehälters auch nach Entfernung des Isolationselements zuverlässig zu vermeiden. Die Kühlung kann beispielsweise mit kaltem Stickstoffgas oder flüssigem Stickstoff bzw. mit CO₂-Trockeneis erfolgen.The cryocontainer is then positioned with the exposed closure device at an opening of a deposition apparatus or in a magazine for providing the frozen particles. Preferably, the magazine or the deposition device is cooled, so that the cryocontainer with the frozen particles comes back into contact with a cooling device or at least a cooled body immediately after removal of the insulating element, to thaw the frozen particles in the receiving space of the cryocontainer even after removal of the insulating element reliably avoid. The cooling can be done, for example, with cold nitrogen gas or liquid nitrogen or with CO ₂ dry ice.

Die Positionierung des Kryobehälters relativ zu einer Depositionsvorrichtung kann dadurch erfolgen, dass der Kryobehälter mit der freiliegenden Verschlussvorrichtung auf einer Ladeöffnung der Depositionsvorrichtung platziert wird. Die Ladeöffnung dient dazu, die Depositionsvorrichtung zu beladen, bzw. die gefrorenen Partikel in der Depositionsvorrichtung für die Deposition bereitzustellen. In der Depositionsvorrichtung werden dann die Partikel mit Hilfe einer Antriebseinrichtung, welche weiter unten näher beschrieben wird, beschleunigt. Um die Ladeöffnung herum weist die Depositionsvorrichtung vorzugsweise eine Auflagefläche auf, auf welcher der Kryobehälter mit der Verschlussvorrichtung positioniert werden kann. Dafür bildet die äußere Oberfläche der Verschlussvorrichtung eine Anlagefläche, die möglichst komplementär zu der Auflagefläche der Depositionsvorrichtung gestaltet ist, damit ein passgenauer Kontakt zwischen der Depositionsvorrichtung und dem Kryobehälter hergestellt werden kann. Eine andere Möglichkeit der Positionierung besteht mit Hilfe eines Magazins, welches weiter unten beschrieben wird.The Positioning of the cryocontainer relative to a deposition device can be done by that the cryocontainer with the exposed closure device on a loading opening of Deposition device is placed. The loading opening serves to the deposition device to load, or the frozen particles in the deposition device for the Deposition provide. In the deposition device then the particles by means of a drive device, which continues below closer described is accelerated. Around the loading opening, the deposition device has preferably a support surface on which the cryocontainer can be positioned with the closure device. For that forms the outer surface of the Closure device a contact surface, as complementary as possible to the bearing surface the deposition device is designed so that a fitting Contact established between the deposition device and the cryocontainer can be. Another possibility The positioning is done with the help of a magazine, which continues is described below.

Vorzugsweise ist die Anlagefläche durch die Grundfläche des Kryobehälters gebildet. Die Anlagefläche bildet vorzugsweise eine ebene Fläche, welche auf einer ebenen Auflagefläche der Depositionsvorrichtung passgenau aufgesetzt werden kann. Die Kontaktflächen zwischen dem verschlossenen Kryobehälter und der Depositionsvorrichtung bzw. dem Magazin können jedoch auch gekrümmt sein. Eine ebene Kontaktfläche hat den Vorteil, dass ein Kryobehälter, von dem das Isolationselement abgenommen wurde, zur Überbrückung einer Zeit bis zur Positionierung an der Depositionsvorrichtung auf einer gekühlten Platte zwischengelagert werden kann. Die durch die verschlossene Austrittsöffnung des Kryobehälters gebildete Anlagefläche ist vorzugsweise sowohl komplementär zur Auflagefläche der Depo sitionsvorrichtung als auch zur Kontaktfläche des Isolationselements gestaltet.Preferably is the contact surface through the base of the cryocontainer educated. The contact surface preferably forms a flat surface, which on a flat bearing surface the deposition device can be placed accurately. The contact surfaces between the closed cryocontainer and the deposition device or the magazine, however also curved be. A flat contact surface has the advantage that a cryocontainer, from which the insulation element was taken over to bridge one Time to positioning on the deposition apparatus on a refrigerated plate can be stored. The through the sealed outlet of the cryocontainer formed contact surface is preferably both complementary to the bearing surface of the Depo sitionsvorrichtung as well as the contact surface of the insulation element designed.

Nach der Positionierung des Kryobehälters relativ zu der Depositionsvorrichtung wird das Öffnungselement betätigt, so dass die Austrittsöffnung geöffnet wird und die gefrorenen Partikel außerhalb der Austrittsöffnung bereitgestellt werden. Die gefrorenen Partikel verlassen dabei den Aufnahmeraum des Behälterelementes durch die Austrittsöffnung, beispielsweise durch Herausfallen, Herausschieben, Herausstoßen und/oder Herausblasen mit Hilfe des Öffnungselementes.To the positioning of the cryocontainer relative to the deposition device, the opening element is actuated, so that the outlet opening is opened and the frozen particles outside the outlet opening to be provided. The frozen particles leave the Receiving space of the container element through the exit opening, for example by falling out, pushing out, pushing out and / or blowing out with Help of the opening element.

Ein erfindungsgemäßes Verfahren zur Bereitstellung von gefrorenen Partikeln für eine Depositionsvorrichtung mit Hilfe eines erfindungsgemäßen Kryobehälters umfasst die Schritte: Abnehmen des Isolationselements, Positionieren des Kryobehälters relativ zu einer Depositionsvorrichtung und Betätigen des Öffnungselements.One inventive method for providing frozen particles for a deposition device comprising by means of a cryocontainer according to the invention the steps: removing the insulation element, positioning the Cryogenic container relative to a deposition device and actuation of the opening element.

Das Öffnungselement kann ein Einschubbolzen (oder: Stempel) sein, der in den Aufnahmeraum hineinragt und bei Betätigung die Verschlussvorrichtung durch Druck aufstößt. Das Öffnungselement kann dabei so ausgestaltet sein, dass es ausschließlich auf die Verschlussvorrichtung Druck ausübt, ohne dabei einen Druck auf die gefrorenen Partikel im Inneren des Aufnahmeraumes auszuüben. Dadurch kann ein durch Druck bedingtes Anschmelzen und Zusammenbacken der gefrorenen Partikel verhindert werden. Alternativ kann das Öffnungselement beispielsweise auch als Hebel oder als Vorrichtung zur Erzeugung eines Überdrucks in dem Aufnahmeraum ausgestaltet sein.The opening element may be a slide-in bolt (or punch) that projects into the receiving space and when pressed the closure device pushes open by pressure. The opening element can be so be designed that it exclusively on the closure device Exerts pressure without doing a pressure on the frozen particles inside the receiving space exercise. This can cause a pressure-related melting and caking the frozen particles are prevented. Alternatively, the opening element, for example also as a lever or as a device for generating an overpressure be configured in the recording room.

Gemäß einer bevorzugten Variante ist das Öffnungselement eingerichtet, bei Betätigung die im Aufnahmeraum enthaltenen gefrorenen Partikel zur Austrittsöffnung zu bewegen. Dies kann durch ein stempelförmiges Öffnungselement erreicht werden, welches bei Betätigung auf die gefrorenen Partikel drückt und diese in Richtung der Austrittsöffnung schiebt, so dass der Druck weitergegeben wird an die Verschlussvorrichtung und diese dadurch geöffnet wird. Dies hat einen Vorteil, wenn die gefrorenen Partikel beispielsweise durch Kristallisation miteinander verbacken sind, und so durch Betätigung des Öffnungselements voneinander gelöst werden können. Darüber hinaus ist es mit einem solchen Öffnungselement auch möglich, die gefrorenen Partikel zur Austrittsöffnung hin zu bewegen, wenn die Bewegungsrichtung keine Komponente in Schwerkraftrichtung hat und somit die Partikel aktiv aus dem Aufnahmeraum befördert werden müssen. Die gefrorenen Partikel können somit mit Hilfe des Öffnungselementes aus dem Aufnahmeraum herausgeschoben oder gestoßen werden.According to a preferred variant, the opening element is adapted to move the frozen particles contained in the receiving space to the outlet opening upon actuation. This can be achieved by a punch-shaped opening element which, when actuated, presses on the frozen particles and pushes them towards the outlet opening, so that the pressure is passed on to the closure device and this is thereby opened. This has an advantage when the frozen particles are baked together, for example, by crystallization, and can be solved by actuation of the opening element from each other. In addition, it is also possible with such an opening element to move the frozen particles to the outlet opening when the direction of movement has no component in the direction of gravity and thus the particles active from the Aufnah must be transported. The frozen particles can thus be pushed or pushed out of the receiving space with the aid of the opening element.

Die Verschlussvorrichtung kann aus einer vom Inneren des Aufnahmeraumes her zu öffnenden Klappe bestehen. Gemäß einer bevorzugten Ausführungsform wird die Verschlussvorrichtung durch eine Folie gebildet, welche die Austrittsöffnung vollständig abdeckt. Die Folie schließt vorzugsweise bündig mit der die Austrittsöffnung begrenzenden Fläche des Behälterelementes ab und bildet die Anlagefläche des Kryobehälters.The Closure device may be from one of the interior of the receiving space openable flap consist. According to one preferred embodiment the closure device is formed by a film, which the exit opening completely covers. The foil closes preferably flush with the outlet opening limiting area of the container element and forms the contact surface of the Cryogenic container.

Die Verschlussvorrichtung wird vorzugsweise durch eine Folie gebildet, welche den Aufnahmeraum steril, luftdicht und wasserdicht verschließt. Die Folie besteht beispielsweise aus Kunststoff oder Metall. Die Dicke der Folie beträgt beispielsweise 0,01 mm bis 1 mm, vorzugsweise 20 μm bis 200 μm und besonders bevorzugt 50 μm oder 100 μm. Die Folie ist vorzugsweise so beschaffen, dass sie durch das Öffnungselement eingerissen werden kann. Vorteilhaft ist auch eine zusätzliche thermische Isolationsschicht an der Folie vorgesehen. Die Folie kann mit dem die Austrittsöffnung umgebenden Rand des Behälterelementes beispielsweise verschweißt sein. Die Austrittsöffnung des Behälterelementes wird dann vorzugsweise bereits bei der Fertigung des Kryobehälters verschlossen, solange der Kryobehälter noch unbefüllt ist. Der Kryobehälter kann in diesem Fall über eine zweite Öffnung befüllt werden.The Closure device is preferably formed by a film, which closes the receiving space sterile, airtight and waterproof. The foil For example, it is made of plastic or metal. The thickness of the Film is for example, 0.01 mm to 1 mm, preferably 20 .mu.m to 200 .mu.m, and especially preferably 50 microns or 100 μm. The film is preferably adapted to pass through the opening element can be torn. Another advantage is an additional thermal insulation layer provided on the film. The foil can with the the outlet opening surrounding edge of the container element for example, welded be. The outlet opening of the container element is then preferably already closed during the production of the cryocontainer, as long as the cryocontainer still unfilled is. The cryocontainer can over in this case a second opening filled become.

In einer bevorzugten Ausführungsvariante des erfindungsgemäßen Kryobehälters ist das Öffnungselement eingerichtet, die Verschlussvorrichtung bei Betätigung mechanisch zu öffnen. Im Fall einer aus Folie bestehenden Verschlussvorrichtung kann dieses Öffnen durch ein einfaches Durchstoßen der Folie mit einem bolzen- oder stempelförmigen Öffnungselement von innen erfolgen, wobei die Folie zerrissen wird.In a preferred embodiment of the Cryogenic container according to the invention is the opening element arranged to mechanically open the closure device when actuated. in the Case of a closure device consisting of foil, this opening by a simple puncture of the Foil with a bolt-shaped or punch-shaped opening element from the inside, whereby the film is torn.

Das Öffnungselement wird vorzugsweise durch Ausübung eines Drucks darauf betätigt. In einer besonders bevorzugten Variante besteht das Öffnungselement aus einem Einschubbolzen, welcher in den Aufnahmeraum ragt. Der Einschubbolzen ist beispielsweise ein zylinderförmiger Bolzen, welcher mit einem Ende in den Aufnahmeraum ragt und mit einem entgegengesetzten Ende aus dem Aufnahmeraum herausragt und durch Druck auf dieses entgegengesetzte Ende in den Aufnahmeraum geschoben werden kann. Vorzugsweise führt in dieser Ausführungsvariante die Betätigung des Einschubbolzens zu einem Durchstoßen der Verschlussvorrichtung. Dieses Durchstoßen der Verschlussvorrichtung kann entweder direkt durch direkten Kontakt des Einschubbolzens mit der Verschlussvorrichtung, beispielsweise einer Folie, geschehen oder durch indirekte Druckausübung durch Übertragung des Drucks über die gefrorenen Partikel. Der Einschubbolzen hat vorzugsweise eine derartige Länge, dass er nach Betätigung den Aufnahmeraum des Kryobehälters vollständig durchragt. Auf diese Weise kann sichergestellt werden, dass der Aufnahmeraum durch Betätigung des Öffnungs elements vollständig geleert wird. Dies ist sinnvoll für eine genaue Dosierung der gefrorenen Partikel für die Deposition. Vorzugsweise sind die Innenform des Behälterelements, d. h. die Form des den Aufnahmeraum bildenden Hohlraumes, und die Außenform des Öffnungselements so angepasst, dass nach Betätigung des Öffnungselementes keine Hohlräume im Aufnahmeraum bleiben, in welchem gefrorene Partikel bleiben können. Beispielsweise ist das Behälterelement hohlzylindrisch und das Öffnungselement zylindrisch geformt, wobei der Außendurchmesser des Öffnungselements dem Innendurchmesser des Behälterelements entspricht.The opening element is preferably by exercise a pressure on it pressed. In a particularly preferred variant, the opening element from a push-in pin, which projects into the receiving space. Of the Einschubbolzen is for example a cylindrical pin, which with a End protrudes into the receiving space and with an opposite end protruding from the receiving space and by pressure on this opposite End can be pushed into the recording room. Preferably leads in this variant the operation of the insertion bolt to a piercing of the closure device. This piercing the closure device can either directly by direct contact the insertion bolt with the closure device, for example a film, done or by indirect pressure by transmission the pressure over the frozen particles. The insertion bolt preferably has a such length, that he is after activity the receiving space of the cryocontainer Completely projects through. In this way it can be ensured that the Recording room by operation of the opening element Completely is emptied. This is useful for accurate dosage of frozen particles for the deposition. Preferably, the inner shape of the container element, d. H. the shape of the receiving space forming cavity, and the external form of the opening element adjusted so that after actuation of the opening element no cavities stay in the receiving space in which frozen particles can stay. For example is the container element hollow cylindrical and the opening element cylindrically shaped, wherein the outer diameter of the opening element the inner diameter of the container element equivalent.

Das Öffnungselement besteht vorzugsweise aus einem thermisch isolierenden Material. Dadurch kann das Innere des Aufnahmeraumes in dem Behälterelement gegenüber der Umgebung auch über das Öffnungselement thermisch isoliert sein. Dies ist insbesondere dann vorteilhaft, wenn das Öffnungselement per Hand betätigt wird, und so andernfalls eine Wärmeübertragung von der Hand an das Innere des Aufnahmeraumes zu befürchten wäre.The opening element is preferably made of a thermally insulating material. This allows the interior of the receiving space in the container element across from the environment too the opening element be thermally insulated. This is especially advantageous when the opening element operated by hand otherwise heat transfer will occur from the hand to the interior of the recording room would be feared.

Während der Lagerung des gefüllten Kryobehälters sollte eine Betätigung des Öffnungselements vermieden werden. Dafür ist in einer bevorzugten Variante des erfindungsgemäßen Kryobehälters ein Fixierungselement vorgesehen, welches das Öffnungselement in einem inaktiven Zustand fixiert. Inaktiver Zustand bedeutet unbetätigter Zustand. Bei einem Öffnungselement in Form eines Einschubbolzens wie oben beschrieben, kann das Fixierungselement zum Beispiel aus einem Splint oder einem Quereinschub bestehen, der das Behälterelement und das Öffnungselement zumindest teilweise durchragt und somit ein gegenseitiges Verschieben verhindert. Das Fixierungselement kann an einem Ende ein Griffelement z. B. in Form einer Zuglasche aufweisen, an welchem es aus dem Kryobehälter heraus gezogen werden kann, um die Fixierung zu lösen. Für die Bereitstellung der gefrorenen Partikel in einer Depositionsvorrichtung muss dann zunächst das Fixierungselement entfernt werden, bevor das Öffnungselement betätigt werden kann.During the Storage of the filled cryocontainer should be an operation of the opening element be avoided. Therefore is in a preferred variant of the cryocontainer according to the invention Fixing provided, which the opening element in an inactive Condition fixed. Inactive state means unactuated state. At an opening element in the form of a push-in bolt as described above, the fixing element for example, consist of a sapwood or a cross slide, the container element and the opening element at least partially penetrated and thus a mutual shifting prevented. The fixing element can at one end a handle element z. B. in the form of a pull tab on which it pulled out of the cryocontainer can be to solve the fixation. For the provision of the frozen Particles in a deposition device must then first Fixing element are removed before the opening element are actuated can.

Für die Lagerung der gefrorenen Partikel sollen diese vorzugsweise sicher vor eintretender Feuchtigkeit oder anderweitiger Kontamination durch Fremdeinflüsse geschützt werden. In einer bevorzugten Ausführungsvariante weist der erfindungsgemäße Kryobehälter daher eine Folienumhüllung auf, welche den Kryobehälter vor Fremdeinflüssen wie Feuchtigkeit und Kontamination schützt. Vorzugsweise ist die Folienumhüllung eine sterile Umhüllung. Die Folienumhüllung umschließt vorzugsweise alle Komponenten des Kryobehälters einschließlich des Isolationselements. Die Folienumhüllung kann somit auch als Befestigungsmittel für das Isolationselement dienen, indem das Behälterelement und das Isolationselement zusammen in einer Folienumhüllung verpackt sind. Vorzugsweise ist die Folienumhüllung entfernbar. Die Folienumhüllung kann beispielsweise aus einer Schrumpffolie bestehen. Sie weist vorzugsweise eine Aufreißlasche und/oder eine Sollbruchstelle auf, an welcher sie sich aufreißen lässt und daraufhin leicht von dem Kryobehälter und dem Isolationselement entfernt werden kann.For the storage of the frozen particles, they should preferably be protected against moisture or other contamination due to foreign influences. In a preferred embodiment, the cryocontainer according to the invention therefore has a film wrapping, which protects the cryocontainer from external influences such as Moisture and contamination protects. Preferably, the foil wrapper is a sterile wrapper. The film envelope preferably encloses all components of the cryocontainer including the isolation element. The film envelope can thus also serve as a fastening means for the insulating element, in that the container element and the insulating element are packed together in a film envelope. Preferably, the film wrapper is removable. The film wrapping may for example consist of a shrink film. It preferably has a pull-tab and / or a predetermined breaking point at which it can be torn open and can then be easily removed from the cryocontainer and the insulation element.

In einer bevorzugten Ausführungsform weist der erfindungsgemäße Kryobehälter außerdem ein Anzeigeelement auf zur Anzeige, ob der Kryobehälter eine vorgegebene Temperatur überschritten hat. Für die Lagerung der gefrorenen Partikel, welche vorzugsweise biologisches Material enthalten, sind abhängig von der Lagerdauer unterschiedliche kritische Temperaturen zu berücksichtigen, welche die Partikel während der Lagerung nicht überschreiten sollen. Diese kritischen Temperaturen sind abhängig von der Art der gefrorenen Partikel. Beispielhaft sind folgende kritische Temperaturen für verschie dene Lagerdauern vorgegeben: Für eine Lagerzeit der Partikel von länger als einem Jahr sollten die Partikel beispielsweise keine Temperaturen oberhalb von –100°C erreichen. Für eine Lagerdauer von 2 Monaten bis zu einem Jahr sollte die Lagertemperatur –80°C nicht überschreiten. Für eine Lagerung für 1 Woche bis zu 2 Monaten ist beispielsweise eine kritische Temperatur von –50°C ausreichend, die bei der Lagerung nicht überschritten werden sollte. Für eine Lagerdauer bis zu einer Woche sollte die Temperatur vorzugsweise –20°C nicht überschreiten. Dementsprechend weist der Kryobehälter vorzugsweise ein Anzeigenelement auf, welches zur Kontrolle dient, ob eine jeweilige kritische Temperatur während der Lagerung überschritten wurde und die Partikel daher möglicherweise zu verwerfen sind. Beispielsweise kann das Anzeigeelement die während der Lagerung erreichte Maximaltemperatur anzeigen. Das Anzeigenelement kann auch vorgesehen sein zur qualitativen Anzeige, ob jeweils bestimmte vorgegebene kritische Temperaturen überschritten wurden, ohne die jeweils erreichte Maximaltemperatur anzugeben. Das Anzeigeelement kann sich beispielsweise bei einer Überschreitung einer kritischen Temperatur verfärben. Als Anzeigelement ist auch ein Display oder ein Transpondersystem zur Kennzeichnung möglich. Das Anzeigeelement kann unterschiedliche Reaktionen für mehr als eine kritische Temperatur vorsehen. Es kann aber auch ein Anzeigeelement vorgesehen sein, welches lediglich die Überschreitung einer bestimmten kritischen Temperatur, beispielsweise –50°C, anzeigt. Das Anzeigeelement kann beispielsweise auf einer nach außen weisenden Seite des Isolationselementes angebracht sein.In a preferred embodiment the cryocontainer of the invention also has a display element to indicate if the cryocontainer exceeded a predetermined temperature Has. For the storage of the frozen particles, which are preferably biological Material included are dependent to consider different critical temperatures from the storage period, which the particles during do not exceed storage should. These critical temperatures depend on the type of frozen Particle. Exemplary are the following critical temperatures for various Storage times specified: For a storage time of particles of more than a year should For example, the particles do not reach temperatures above -100 ° C. For one Storage period from 2 months to one year should not exceed storage temperature -80 ° C. For one Storage for For example, 1 week to 2 months is a critical temperature sufficient from -50 ° C, not exceeded during storage should be. For a storage period of up to one week, the temperature should preferably not exceed -20 ° C. Accordingly, the cryocontainer preferably has a display element on which serves as a control, whether a respective critical temperature while the storage exceeded and therefore the particles might be to be rejected. For example, the display element can during the Storage reached maximum temperature display. The ad element can also be provided for qualitative display, whether specific predetermined critical temperatures were exceeded without the respective reached maximum temperature. The display element may be for example, if exceeded discolor a critical temperature. As a display element is also a display or a transponder system to mark possible. The Display element can have different reactions for more than provide a critical temperature. But it can also be an indicator be provided, which is only the exceeding of a certain critical temperature, for example -50 ° C indicates. The display element For example, on an outwardly facing side of the insulation element to be appropriate.

Alternativ kann das Anzeigeelement an der Folienumhüllung angebracht sein, so dass es direkt bei der Entnahme des in Folie verpackten Kryobehälters aus einem Kryoschrank überprüft werden kann. Andernfalls ist die Umhüllungsfolie vorzugsweise – zumindest teilweise – transparent und gibt somit die Sicht auf das Anzeigeelement frei, so dass Qualität und Verwendbarkeit eines in dem Kryobehälter gelagerten Materials überprüfbar ist, ohne zuvor die Folienumhüllung zu öffnen.alternative the display element may be attached to the film wrapping, so that it directly on the removal of the foil-packed cryocontainer be checked in a cryo cabinet can. Otherwise, the wrapping film is preferably - at least partially - transparent and thus releases the view of the display element, so that quality and usability one in the cryocontainer stored material is verifiable, without first the foil wrapping to open.

Die Aufgabe der Erfindung wird auch gelöst durch ein Magazin zur Bereitstellung von gefrorenen Partikeln für eine Depositionsvorrichtung zur Deposition der gefrorenen Partikel mit einer oder mehreren Aufnahmen für jeweils einen erfindungsgemäßen Kryobehälter, welches eingerichtet ist, jeweils einen Kryobehälter relativ zu der Depositionsvorrichtung zu positionieren, und welches ein Aktivierungselement aufweist, welches dazu eingerichtet ist, das Öffnungselement eines relativ zur Depositionsvorrichtung ausgerichteten Kryobehälters zu betätigen, so dass der Inhalt des Kryobehälters in die Depositionsvorrichtung eintreten kann und zur Deposition bereitgestellt wird. Vorzugsweise weist das erfindungsgemäße Magazin mehrere Aufnahmen für erfindungsgemäße Kryobehälter auf, die gleichzeitig mit erfindungsgemäßen Kryobehältern beladen werden können. Diese können dann aufeinander folgend relativ zur Depositionsvorrichtung positioniert werden, so dass jeweils nach Betätigung des Aktivierungselementes und der Öffnungselemente die Inhalte der Kryobehälter in die Depositionsvorrichtung gelangen und dort zur Deposition bereitgestellt werden.The The object of the invention is also achieved by a magazine for providing of frozen particles for a deposition device for the deposition of the frozen particles with one or more receptacles for a respective cryocontainer according to the invention, which is set up, each one cryocontainer relative to the deposition device to position, and which has an activation element, which is adapted to the opening element of a relative towards the deposition device oriented cryocontainer too actuate, so that the contents of the cryocontainer can enter the deposition device and for deposition provided. Preferably, the magazine according to the invention several shots for Cryogenic container according to the invention which can be loaded simultaneously with cryogenic containers according to the invention. These can then successively positioned relative to the deposition device so, after each actuation the activation element and the opening elements the contents the cryocontainer get into the deposition device and provided there for deposition become.

Die Ausrichtung oder Positionierung des Kryobehälters relativ zur Depositionsvorrichtung bedeutet hier, dass die Austrittsöffnung des Kryobehälters so zu einer Öffnung der Depositionsvorrichtung positioniert wird, dass bei Betätigung des Öffnungselementes des Kryobehälters die gefrorenen Partikel aus dem Kryobehälter in die Depositionsvorrichtung eintreten und damit zur Deposition bereitgestellt werden. Beispielsweise weist die Depositionsvorrichtung eine Antriebseinrichtung mit einem Beschleunigungsrohr auf, in dem die gefrorenen Partikel mit einer Antriebskraft beaufschlagt werden sollen. Das Beschleunigungsrohr hat beispielsweise eine seitliche Öffnung, durch welche die gefrorenen Partikel als Munition in das Beschleunigungsrohr gelangen. Mit dem erfindungsgemäßen Magazin wird ein erfindungsgemäßer Kryobehälter direkt an der seitlichen Öffnung des Beschleunigungsrohres positioniert, so dass sich die Verschlussvorrichtung des Kryobehälters und die Öffnung des Beschleunigungsrohres gegenüberstehen, beziehungsweise aneinander angrenzen. In diesem Fall ist es nicht nötig, dass eine Anlagefläche des Kryobehälters und eine Auflagefläche um die Ladeöffnung der Depositionsvorrichtung komplementär ausgestaltet sind. Das Magazin kann an dieser Stelle als Adapter dienen, um einen lückenlosen Kontakt zwischen Kryobehälter und Depositionsvorrichtung herzustellen. Grundsätzlich kann das Magazin auch nur eine einzige Aufnahme für einen Kryobehälter aufweisen. Es dient dann als Positionierhilfe für den Kryobehälter an der Depositionsvorrichtung.The orientation or positioning of the cryocontainer relative to the deposition device here means that the outlet opening of the cryocontainer is positioned to an opening of the deposition apparatus that upon actuation of the opening element of the cryocontainer, the frozen particles from the cryocontainer enter the deposition apparatus and are thus provided for deposition. For example, the deposition device has a drive device with an acceleration tube, in which the frozen particles are to be acted upon by a drive force. For example, the accelerating tube has a lateral opening through which the frozen particles enter the accelerating tube as ammunition. With the magazine according to the invention, a cryocontainer according to the invention is positioned directly on the lateral opening of the acceleration tube, so that the closure device of the cryocontainer and the opening of the acceleration tube face one another or adjoin one another. In this case it is not necessary that one Contact surface of the cryocontainer and a bearing surface are designed to be complementary around the loading opening of the deposition device. The magazine can serve as an adapter at this point to produce a seamless contact between cryocontainer and deposition device. In principle, the magazine can also have only a single receptacle for a cryocontainer. It then serves as a positioning aid for the cryocontainer at the deposition device.

Ein erfindungsgemäßes Verfahren zur Bereitstellung von gefrorenen Partikeln einer Depositionsvorrichtung mit einem erfindungsgemäßen Kryobehälter und einem erfindungsgemäßen Magazin umfasst die Schritte: Entfernen des Isolationselementes von dem Kryobehälter, Positionieren des Kryobehälters in einer Aufnahme des Magazins, Positionierung eines Kryobehälters relativ zur Depositionsvorrichtung und Betätigen des Aktivierungselementes.One inventive method for providing frozen particles of a deposition device with a cryocontainer according to the invention and a magazine according to the invention comprises the steps: removing the insulation element from the cryocontainer, positioning of the cryocontainer in a recording of the magazine, positioning a cryobank relative to the deposition device and actuation of the activation element.

In einer bevorzugten Ausführungsvariante umfasst das Magazin auch eine Kühlvorrichtung. Beispielsweise kann das Magazin mit flüssigem oder kaltem gasförmigen Stickstoff gespült werden, so dass die darin aufgenommenen Kryobehälter weiter gekühlt bleiben. Dies ist insbesondere sinnvoll, wenn mehrere Kryobehälter in dem Magazin aufgenommen sind und erst nach einander zur Depositionsvorrichtung positioniert werden, um die jeweils in dem positionierten Kryobehälter enthaltenen gefrorenen Partikel zur Deposition bereit zu stellen. Vorzugsweise ist das Magazin in allen Teilen gekühlt.In a preferred embodiment variant the magazine also has a cooling device. For example, the magazine with liquid or cold gaseous nitrogen rinsed so that the cryocontainers contained in it remain cooled. This is particularly useful when multiple cryocontainer in are added to the magazine and only after each other to the deposition device be positioned to contain each in the positioned cryocontainer to provide frozen particles for deposition. Preferably the magazine is cooled in all parts.

Vorzugsweise lässt sich das Magazin auf einer Depositionsvorrichtung befestigen, wobei das Magazin in sich so bewegbar ist, dass jeweils ein Kryobehälter bzw. eine Aufnahme für einen Kryobehälter relativ zur Depositionsvorrichtung positionierbar ist. Beispielsweise sind in einem erfindungsgemäßen Magazin mehrere Aufnahmen für Kryobehälter kreisförmig angeordnet und das Magazin ist auf der Depositionsvorrichtung drehbar befestigbar, so dass jeweils ein Kryobehälter durch Drehung des Magazins relativ zur Depositionsvorrichtung positionierbar ist. Ein solches Magazin kann ähnlich einer Revolvertrommel mit mehreren Kryobehältern beladen werden, wobei jeweils ein Kryobehälter durch Drehung des Magazins positioniert wird.Preferably let yourself attach the magazine to a deposition device, with the magazine in itself is movable so that in each case a cryocontainer or a recording for a cryocontainer relative can be positioned to the deposition device. For example in a magazine according to the invention several shots for cryocontainers circular arranged and the magazine is rotatable on the deposition device attachable, so that each one cryocontainer by rotation of the magazine relative can be positioned to the deposition device. Such a magazine can be similar a Revoltrommel be loaded with a plurality of cryobanks, wherein one cryogenic container each is positioned by turning the magazine.

Zur Betätigung des Öffnungselementes eines relativ zur Depositionsvorrichtung positionierten Kryobehälters weist das Magazin ein Aktivierungselement auf. Das Aktivierungselement selbst wird beispielsweise manuell ausgelöst oder automatisch angesteuert.to activity of the opening element a positioned relative to the deposition device cryocontainer has the magazine on an activation element. The activation element itself, for example, is triggered manually or controlled automatically.

Die Aufgabe der Erfindung wird außerdem durch eine Depositionsvorrichtung gelöst, welche zur Deposition von gefrorenen Partikeln in einem Zielsubstrat eingerichtet ist, und welche eine Ladeeinrichtung und eine Antriebseinrichtung umfasst. Die Ladeeinrichtung ist zur Bereitstellung der gefrorenen Partikel an der Antriebseinrichtung eingerichtet und umfasst ein erfindungsgemäßes Magazin. Die Antriebseinrichtung ist zur Ausübung einer Antriebskraft auf die gefrorenen Partikel zu deren Beschleunigung eingerichtet, und umfasst beispiels weise eine Beschleunigungsleitung, in welcher die gefrorenen Partikel aus einem erfindungsgemäßen Kryobehälter zur Deposition bereitgestellt werden. Der Kryobehälter wird mittels eines erfindungsgemäßen Magazins relativ zu der Beschleunigungsleitung positioniert und das Öffnungselement des Kryobehälters wird durch das Aktivierungselement betätigt. Dadurch wird die Verschlussvorrichtung des Kryobehälters geöffnet und die gefrorenen Partikel in der Beschleunigungsleitung der Depositionsvorrichtung bereitgestellt.The The object of the invention is also by solved a deposition device, which are for the deposition of frozen particles in a target substrate is set up, and which a charging device and a drive device includes. The charging device is for providing the frozen particles arranged on the drive device and comprises a magazine according to the invention. The drive device is to exercise a driving force set up the frozen particles for their acceleration, and example includes an acceleration line, in which the provided frozen particles from a cryocontainer according to the invention for deposition become. The cryocontainer will by means of a magazine according to the invention positioned relative to the acceleration line and the opening element of the cryocontainer is actuated by the activation element. This will make the closure device of the cryocontainer opened and the frozen particles in the acceleration line of the deposition device provided.

Mit dem erfindungsgemäßen Verfahren zur Bereitstellung von gefrorenen Partikeln für die Deposition werden vorzugsweise biologisches Material enthaltende gefrorene Partikel bereitgestellt. Beispielsweise enthalten die gefrorenen Partikel biologische Zellen, wie eukaryotische oder prokaryotische Zellen.With the method according to the invention for providing frozen particles for deposition are preferred provided with biological material containing frozen particles. For example, the frozen particles contain biological cells, such as eukaryotic or prokaryotic cells.

Die vorliegende Erfindung wird im Folgenden anhand der in den 1 bis 3 gezeigten Ausführungsbeispiele weiter erläutert. Es zeigen schematisch:The present invention will be described below with reference to the in the 1 to 3 embodiments shown further explained. They show schematically:

1A–1E einen erfindungsgemäßen Kryobehälter in Schnittansicht während verschiedenen Schritten des erfindungsgemäßen Verfahrens; 1A - 1E a cryocontainer according to the invention in a sectional view during various steps of the method according to the invention;

2A einen erfindungsgemäßen Kryobehälter aus 1 in einer zur Schnittansicht in 1 senkrechten Schnittansicht; 2A a cryocontainer of the invention 1 in a to the sectional view in 1 vertical sectional view;

2B den erfindungsgemäßen Kryobehälter aus 1 in Draufsicht auf die Grundfläche des Isolationselementes mit einem Anzeigeelement; und 2 B the cryocontainer according to the invention 1 in plan view of the base of the insulating element with a display element; and

3 eine Schnittansicht eines erfindungsgemäßen Magazins, welches auf einer Depositionsvorrichtung angeordnet ist und mit erfindungsgemäßen Kryobehältern beladen ist. 3 a sectional view of a magazine according to the invention, which is arranged on a deposition apparatus and is loaded with cryogenic containers according to the invention.

Die erfindungsgemäße Depositionsvorrichtung 60 wird in 3 nur schematisch in Bezug auf das erfindungsgemäße Magazin dargestellt. Für eine detailliertere Darstellung der Depositionsvorrichtung wird Bezug genommen auf die frühere deutsche Patentanmeldung DE 10 2007 004 855 der selben Anmelderin (unveröffentlicht am Prioritätstag dieser Anmeldung).The deposition device according to the invention 60 is in 3 shown only schematically with respect to the magazine according to the invention. For a more detailed illustration of the deposition apparatus, reference is made to the earlier German patent application DE 10 2007 004 855 the same applicant (unpublished on the priority date of this application).

Ein in 1 gezeigter Kryobehälter 40 weist ein hohlzylinderförmiges Behälterelement 41 mit einem Aufnahmeraum 41a für gefrorene Partikel und einer Austrittsöffnung 41b auf. Das hohlzylinderförmige Behälterelement 41 besteht aus einem thermisch isolierenden Material und ist dickwandig ausgeführt, um eine gute thermische Isolierung zwischen dem Aufnahmeraum 41a und der Umgebung zu gewährleisten. Die Austrittsöffnung 41b ist mit einer die Verschlussvorrichtung bildenden Folie 49 bündig verschlossen. Innerhalb des Aufnahmeraums befinden sich gefrorene Partikel 50. Auf der der Folie 49 gegenüberliegenden Seite des hohlzylinderförmigen Behälterelementes 41 ist der Aufnahmeraum 41a durch ein Öffnungselement 43 verschlossen. Das Öffnungselement 43 ist als langgestreckter zylinderförmiger Einschubbolzen gebildet, welcher mit einem Ende in den Aufnahmeraum 41a hineinragt und mit seinem anderen Ende an der Stirnseite des hohlzylinderförmigen Behälterelementes 41 hervorsteht. In seinem Außendurchmesser entspricht das zylinderförmige Öffnungselement 43 in etwa dem Innendurchmesser des hohlzylinderförmigen Behälterelements 41, so dass diese nahezu bündig miteinander abschließen.An in 1 shown cryocontainer 40 has a hollow cylindrical container element 41 with a recording room 41a for frozen particles and an outlet 41b on. The hollow cylindrical container element 41 consists of a thermally insulating material and is made thick-walled to provide good thermal insulation between the receiving space 41a and to ensure the environment. The outlet opening 41b is with a closure device forming the film 49 flush closed. Inside the recording room are frozen particles 50 , On the slide 49 opposite side of the hollow cylindrical container element 41 is the recording room 41a through an opening element 43 locked. The opening element 43 is formed as an elongated cylindrical insertion bolt, which has one end in the receiving space 41a protrudes and with its other end on the front side of the hollow cylindrical container element 41 protrudes. In its outer diameter corresponds to the cylindrical opening element 43 approximately the inner diameter of the hollow cylindrical container element 41 so that they almost flush with each other.

Auf der Außenseite der Folie 49 vom Aufnahmeraum 41a aus betrachtet weist der Kryobehälter 40 ein Isolationselement 45 auf. Wie das Behälterelement 41 sind das Öffnungselement 43 und das Isolationselement 45 aus thermisch isolierendem Material gefertigt und kompakt ausgebildet.On the outside of the slide 49 from the recording room 41a From the point of view, the cryocontainer points 40 an isolation element 45 on. Like the container element 41 are the opening element 43 and the isolation element 45 made of thermally insulating material and made compact.

Zur Fixierung des Öffnungselementes 43 in nichtaktivierter Form ist ein Fixierungselement 44 in Form eines querliegenden Splints vorhanden, welches ein relatives Verschieben des Behälterelementes 41 und des Öffnungselementes 43 zueinander verhindert. Das Fixierungselement 44 weist an einem Ende eine Zuglasche auf, mit welcher es aus dem Behälterelement 41 und dem Öffnungselement 43 herausziehbar ist, um die Fixierung zu lösen.For fixing the opening element 43 in non-activated form is a fixing element 44 in the form of a transverse cotter, which is a relative displacement of the container element 41 and the opening element 43 prevented each other. The fixing element 44 has at one end a pull tab with which it out of the container element 41 and the opening element 43 is removable to release the fixation.

Der Kryobehälter weist eine sterile Folienumhüllung 46 zum Schutz vor Feuchtigkeit oder anderweitiger Kontamination während der Lagerung auf. Die Folienumhüllung ist mit einer Aufreißlasche 47 ausgestattet, mit welcher sie aufgerissen werden kann, um sie von dem Kryobehälter zu entfernen.The cryocontainer has a sterile foil wrapper 46 to protect against moisture or other contamination during storage. The foil wrapper is with a tear tab 47 equipped with which it can be torn open to remove it from the cryocontainer.

Zur Bereitstellung von gefrorenen Partikeln für eine Depositionsvorrichtung mit dem Kryobehälter wird zunächst die sterile Folienumhüllung 46 durch Aufreißen mit dem Aufreißband 47 entfernt. Dann wird das Fixierungselement 44 mit der Zuglasche aus dem Behälterelement 41 und dem Öffnungselement 43 herausgezogen, um die gegenseitige Fixierung von Öffnungselement 43 und Behälterelement 41 zu lösen. Anschließend wird das Isolationselement 45 von der Verschlussvorrichtung abgenommen. Der Aufnahmeraum 41a des Kryobehälters 40 ist dann nunmehr nur durch die Verschlussvorrichtung in Form der dünnen Folie 49 von der Umgebung getrennt. Um ein Auftauen der gefrorenen Partikel 50 im Inneren des Aufnahmeraums 41a zu verhindern wird daher das Isolationselement 45 möglichst lan ge bis kurz vor der Bereitstellung zur Deposition an der Folie 45 gehalten.To provide frozen particles for a deposition apparatus with the cryocontainer, first the sterile foil wrapper is provided 46 by tearing open with the tear tape 47 away. Then the fixing element 44 with the pull tab from the container element 41 and the opening element 43 pulled out to the mutual fixation of opening element 43 and container element 41 to solve. Subsequently, the isolation element 45 removed from the closure device. The recording room 41a of the cryocontainer 40 is now only by the closure device in the form of thin film 49 separated from the environment. To thaw the frozen particles 50 inside the recording room 41a to prevent therefore the isolation element 45 as long as possible until shortly before the provision for deposition on the film 45 held.

Generell sollte das Verfahren vorzugsweise bei einer Umgebungstemperatur von weniger als –10°C durchgeführt werden, wenn der ganze Vorgang nicht länger als wenige Minuten dauert. Bei einer langsameren Handhabung sollten vorzugsweise weniger als –30°C vorliegen. Falls nach Abnahme des Isolationselements 45 ein längerer Zeitraum zu überbrücken ist, kann der Kryobehälter 40 ohne Isolationselement 45 beispielsweise auf eine gekühlte Platte gestellt werden, so dass von unten weiterhin eine Wärmezufuhr in den Aufnahmeraum 41a des Kryobehälters 40 unterbunden wird. Der Kryobehälter 40 wird anschließend möglichst schnell relativ zu einer Depositionsvorrichtung 60 positioniert, so dass die gefrorenen Partikel 50 nunmehr durch die Verschlussvorrichtung 49 von der Depositionsvorrichtung 60 getrennt sind. Die Depositionsvorrichtung 60 ist in 1E nur teilweise in schematischer Schnittansicht durch eine Beschleunigungsleitung gezeigt. Der Kryobehälter 40 liegt mit einer Anlagefläche 51 auf einer Auflagefläche 52 der Depositionsvorrichtung 60 auf. Die Auflagefläche 52 der Depositionsvorrichtung umschließt eine Ladeöffnung, durch welche die gefrorenen Partikel in die Depositionsvorrichtung eintreten können. Die Auflagefläche 52 der Depositionsvorrichtung 60 und die Grundfläche 51 des Kryobehälters 40, welche durch die Verschlussvorrichtung 49 gebildet ist, sind komplementär ausgestaltet. In diesem Fall sind beide als ebene Flächen gebildet. Das Öffnungselement 43 wird durch Druck auf die Oberseite des Einschubbolzens in Richtung des Aufnahmeraumes 41a betätigt, bis der Einschubbolzen 43 den Aufnahmeraum 41a vollständig durchragt. Dadurch wird die als Folie ausgebildete Verschlussvorrichtung 49 durchstoßen und die gefrorenen Partikel 50 aus dem Inneren des Aufnahmeraums 41a durch die Austrittsöffnung 41b und die von der Auf lagefläche umschlossene Öffnung in die Depositionsvorrichtung 60 befördert. Die Betätigung des Öffnungselementes erfolgt beispielsweise durch Druck per Hand.Generally, the process should preferably be performed at an ambient temperature of less than -10 ° C, if the whole process does not take longer than a few minutes. For slower handling, preferably less than -30 ° C should be present. If after removal of the insulation element 45 a longer period of time can be bridged, the cryocontainer can 40 without insulation element 45 For example, be placed on a cooled plate, so that from below continues to heat into the receiving space 41a of the cryocontainer 40 is prevented. The cryocontainer 40 is then as quickly as possible relative to a deposition device 60 positioned so that the frozen particles 50 now through the closure device 49 from the deposition device 60 are separated. The deposition device 60 is in 1E only partially shown in schematic sectional view through an acceleration line. The cryocontainer 40 lies with a contact surface 51 on a support surface 52 the deposition device 60 on. The bearing surface 52 the deposition device encloses a loading opening through which the frozen particles can enter the deposition device. The bearing surface 52 the deposition device 60 and the base area 51 of the cryocontainer 40 passing through the closure device 49 is formed, are designed complementary. In this case, both are formed as flat surfaces. The opening element 43 is by pressure on the top of the insertion bolt in the direction of the receiving space 41a operated until the insertion bolt 43 the recording room 41a completely penetrated. As a result, the sealing device formed as a film 49 pierced and the frozen particles 50 from the inside of the recording room 41a through the outlet 41b and the area enclosed by the on-opening in the deposition device 60 promoted. The actuation of the opening element takes place for example by pressure by hand.

2A zeigt eine zur Zeichenebene aus 1A senkrechte Schnittansicht des Kryobehälters aus 1A. Gezeigt ist ein hohlzylinderförmiges dickwandiges Behälterelement 41 mit einem zylinderförmigen Aufnahmeraum 41a, in welchem ein zylinderförmiges Öffnungselement 43 steckt. Behälterelement 41 und Öffnungselement 43 werden durch das Fixierungselement 44 mit der Zuglasche von der Seite durchragt. Der gesamte Kryobehälter ist von der sterilen, wasserdichten Folienumhüllung 46 umgeben, welche mit einem Aufreißband 47 zu öffnen ist. Von der Folienumhüllung ist auch ein Isolationselement 45 auf der Unterseite des Kryobehälters umschlossen, welches in 1C dargestellt ist. 2B zeigt den von Folie umschlossenen Kryobehälter 40 in Draufsicht auf die Unterseite des Isolationselements 45. Das Isolationselement 45 weist ein Anzeigenelement 48 auf, zur Anzeige, ob der Kryobehälter während der Lagerung eine vorbestimmte kritische Temperatur überschritten hat. Das Isolationselement ist leicht lösbar an die, die Verschlussvorrichtung bildende Folie geklebt. 2A shows one to the drawing level 1A vertical sectional view of the cryocontainer 1A , Shown is a hollow cylindrical thick-walled container element 41 with a cylindrical receiving space 41a in which a cylindrical opening element 43 plugged. container element 41 and opening element 43 be through the fixing element 44 with the pull tab protruding from the side. The entire cryocontainer is from the sterile, waterproof foil wrapping 46 around give, which with a tear tape 47 to open. Of the film wrapping is also an insulation element 45 enclosed on the bottom of the cryocontainer, which is in 1C is shown. 2 B shows the enclosed by foil cryocontainer 40 in plan view of the underside of the insulating element 45 , The isolation element 45 has an ad element 48 to indicate whether the cryocontainer has exceeded a predetermined critical temperature during storage. The insulating element is easily detachable adhered to the, the closure device forming film.

Ein Magazin 61 für die Bereitstellung von gefrorenen Partikeln für die Deposition mit einer Depositionsvorrichtung (gezeigt in 3) weist mehrere Aufnahmen 62 für jeweils einen Kryobehälter 40 auf. Das Magazin 61 ist trommelförmig ausgebildet und um eine Achse 64 drehbar an einer Depositionsvorrichtung 60 montiert. Für das Beladen des Magazins 61 mit einem Kryobehälter 40 werden zunächst die Folienumhüllung 46, das Fixierungselement 44 und das Isolationselement 45 entfernt. Dann wird der somit entsicherte Kryobehälter 40 mit der Verschlussvorrichtung 49 voraus in eine der Aufnahmen 62 gestellt, so dass die als Folie gebildete Verschlussvorrich tung 49 zur Depositionsvorrichtung 60 zeigt. Das Magazin 61 ist vorzugsweise gekühlt, so dass auch während der Aufbewahrung der Kryobehälter in dem Magazin 61 ein Auftauen der gefrorenen Partikel 50 verhindert wird.A magazine 61 for the provision of frozen particles for deposition with a deposition device (shown in U.S. Pat 3 ) has several shots 62 for each one cryocontainer 40 on. The magazine 61 is drum-shaped and about an axis 64 rotatable on a deposition device 60 assembled. For loading the magazine 61 with a cryogenic container 40 First, the foil wrapping 46 , the fixing element 44 and the isolation element 45 away. Then, the thus unlocked cryocontainer 40 with the closure device 49 ahead in one of the shots 62 placed so that the device formed as a film Verschlussvorrich 49 to the deposition device 60 shows. The magazine 61 is preferably cooled, so that even during storage of the cryocontainer in the magazine 61 a thawing of the frozen particles 50 is prevented.

Zur Bereitstellung von gefrorenen Partikeln 50 wird das Magazin 61 so verdreht, dass ein Kryobehälter 40 relativ zu der Depositionsvorrichtung 60 so positioniert wird, dass die Austrittsöffnung 41b des Kryobehälters 40 gegenüber einer Öffnung der Depositionsvorrichtung 60 platziert ist. Nun wird durch ein Aktivierungselement 65 das Öffnungselement 43 des Kryobehälters 40 betätigt. Die Verschlussvorrichtung 49 wird dadurch geöffnet und die gefrorenen Partikel aus dem Aufnahmeraum 41a geschoben, so dass sie in die Depositionsvorrichtung gelangen.To provide frozen particles 50 becomes the magazine 61 twisted so that a cryocontainer 40 relative to the deposition device 60 is positioned so that the outlet opening 41b of the cryocontainer 40 opposite an opening of the deposition device 60 is placed. Now it is activated by an activation element 65 the opening element 43 of the cryocontainer 40 actuated. The closure device 49 it will open and the frozen particles from the receiving space 41a pushed so that they get into the deposition device.

Die Depositionsvorrichtung 60 weist eine Beschleunigungsleitung 67 und ein Beschleunigungselement 68 auf, mit welchem eine Antriebskraft auf die nun in der Beschleunigungsleitung bereitgestellten gefrorenen Partikel 50 ausgeübt werden kann. Sobald der Inhalt eines Kryobehälters 40 verschossen wurde, kann durch Verdrehen des Magazins 61 der nächste Kryobehälter 40 an der Öffnung 66 der Beschleunigungsleitung 67 positioniert werden. Erneut kann das Öffnungselement 43 des nächsten Kryobehälters 40 durch das Aktivierungselement 65 betätigt werden. Magazin 61 und auch Depositionsvorrichtung 60 sind dabei vorzugsweise gekühlt, um ein Auftauen der gefrorenen Partikel 50 zu verhindern. Die gefrorenen Partikel 50 werden vorzugsweise so stark beschleunigt, dass sie das Zielsubstrat in gefrorenem Zustand erreichen.The deposition device 60 has an acceleration line 67 and an accelerator 68 with which a driving force on the now provided in the acceleration line frozen particles 50 can be exercised. Once the contents of a cryobank 40 was shot by twisting the magazine 61 the next cryocontainer 40 at the opening 66 the acceleration line 67 be positioned. Again, the opening element 43 the next cryogenic container 40 through the activation element 65 be operated. magazine 61 and also deposition device 60 are preferably cooled to thaw the frozen particles 50 to prevent. The frozen particles 50 are preferably accelerated so much that they reach the target substrate in the frozen state.

Claims

Cryogenic container ( 40 ), suitable for storage and provision of frozen particles ( 50 ), comprising: - a thermally insulating container element ( 41 ), the at least one receiving space ( 41a ) for frozen particles ( 50 ) and at least one exit opening ( 41b ), - a closure device ( 49 ), with which the at least one outlet opening ( 41b ) is closable, - at least one opening element ( 43 ), which is operable to the at least one outlet opening ( 41b ), and thereby the frozen particles ( 50 ) outside the outlet ( 41b ), and - an insulation element ( 45 ) for thermal insulation of the closure device ( 49 ).

Cryogenic container ( 40 ) according to claim 1, wherein the insulating element ( 45 ) is removable from the cryocontainer.

Cryogenic container ( 40 ) according to one of the preceding claims, wherein the opening element ( 43 ) is set up, when operated in the recording room ( 41a ) contained frozen particles ( 50 ) to the exit opening ( 41b ) to move.

Cryogenic container ( 40 ) according to one of the preceding claims, wherein the closure device ( 49 ) has a film.

Cryogenic container ( 40 ) according to one of the preceding claims, wherein the opening element ( 43 ), the closure device ( 49 ) mechanically open when actuated.

Cryogenic container ( 40 ) according to one of the preceding claims, wherein the opening element ( 43 ) is actuated by pressure.

Cryogenic container ( 40 ) according to one of the preceding claims, wherein the opening element ( 43 ) is a insertion bolt, which in the receiving space ( 41a ) and its operation pierces the closure device ( 49 ).

Cryogenic container ( 40 ) according to claim 7, wherein the opening element is dimensioned so that it the receiving space ( 41a ) completely penetrates after actuation.

Cryogenic container ( 40 ) according to one of the preceding claims, wherein the opening element ( 43 ) is thermally insulating.

Cryogenic container ( 40 ) according to one of the preceding claims, which is a fixing element ( 44 ) for fixing the opening element ( 43 ) in an inactive state.

Cryogenic container ( 40 ) according to one of the preceding claims, comprising a removable film wrapping ( 46 ) having.

Cryogenic container ( 40 ) according to one of the preceding claims, comprising a display element ( 48 ) for indicating whether the cryocontainer ( 40 ) has exceeded a predetermined temperature.

Magazine ( 61 ) for the provision of frozen particles ( 50 ) for a deposition apparatus ( 60 ) for the deposition of the frozen particles ( 50 ) with one or more recordings ( 62 ) for each cryocontainer ( 40 ) according to one of the preceding claims, which is arranged in each case a cryogenic container ( 40 ) relative to the deposition device ( 60 ), and that an activation element ( 65 ), which is arranged, the opening element ( 43 ) one to the deposition device ( 60 ) positioned cryocontainer ( 40 ), so that the contents of the cryocontainer ( 40 ) into the deposition apparatus ( 60 ) and is provided for deposition.

Magazine ( 61 ) according to claim 13, comprising a cooling device.

Magazine ( 61 ) according to one of claims 13 and 14, which is arranged on a deposition apparatus ( 60 ) to be attached.

Magazine ( 61 ) according to claim 15, which is applied to a deposition apparatus ( 60 ) is rotatably fastened, and in which several recordings ( 62 ) for cryocontainers ( 40 ) are arranged in a circle, so that by turning the magazine in each case a cryocontainer ( 40 ) relative to the deposition apparatus ( 60 ) is positionable.

Deposition device ( 60 ), designed for the deposition of frozen particles ( 50 ) in a target substrate, with a charging device and a drive device ( 67 ), wherein the charging device for providing the frozen particles ( 50 ) on the drive device ( 67 ) and the drive device ( 67 ) for applying a driving force to the frozen particles ( 50 ), characterized in that the loading device is a magazine ( 61 ) according to one of claims 13 to 16.

Method of providing frozen particles ( 50 ) for a deposition apparatus ( 60 ) with the help of a cryogenic container ( 40 ) according to any one of claims 1 to 12, comprising the steps of: - opening or detaching the insulating element ( 45 ), - positioning the cryocontainer ( 40 ) relative to a deposition apparatus ( 60 ), - actuating the opening element ( 43 ).

Method of providing frozen particles ( 50 ) for a deposition apparatus ( 60 ) with the help of a cryogenic container ( 40 ) according to one of claims 1 to 12 and a magazine ( 61 ) according to any one of claims 13 to 16, comprising the steps of: - opening or detaching the insulating element ( 45 ), - positioning the cryocontainer ( 40 ) in a recording ( 62 ) of the magazine ( 61 ), - positioning of a cryogenic container ( 40 ) relative to the deposition apparatus ( 60 ), - activating the activation element ( 43 ).

A method according to any one of claims 18 and 19, wherein the frozen particles ( 50 ) contain biological material.