[go: up one dir, main page]

DE10163426A1 - New 1-(substituted methylene)-1H-indene derivatives, are Ras protein modulators useful for treating tumor or inflammatory diseases - Google Patents

New 1-(substituted methylene)-1H-indene derivatives, are Ras protein modulators useful for treating tumor or inflammatory diseases

Info

Publication number
DE10163426A1
DE10163426A1 DE10163426A DE10163426A DE10163426A1 DE 10163426 A1 DE10163426 A1 DE 10163426A1 DE 10163426 A DE10163426 A DE 10163426A DE 10163426 A DE10163426 A DE 10163426A DE 10163426 A1 DE10163426 A1 DE 10163426A1
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
alkoxy
cells
use according
ras
saturated
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
DE10163426A
Other languages
German (de)
Inventor
Ioanna-Maria Karaguni
Peter Herter
Eleni Courzoulidou
Mercedes Carpintero
Oliver Mueller
Herbert Waldmann
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Max Planck Gesellschaft zur Foerderung der Wissenschaften eV
Original Assignee
Max Planck Gesellschaft zur Foerderung der Wissenschaften eV
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Max Planck Gesellschaft zur Foerderung der Wissenschaften eV filed Critical Max Planck Gesellschaft zur Foerderung der Wissenschaften eV
Priority to DE10163426A priority Critical patent/DE10163426A1/en
Publication of DE10163426A1 publication Critical patent/DE10163426A1/en
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D307/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D307/56—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D307/64—Sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C229/00—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C229/40—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino groups bound to carbon atoms of at least one six-membered aromatic ring and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
    • C07C229/42—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino groups bound to carbon atoms of at least one six-membered aromatic ring and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton with carboxyl groups linked to the six-membered aromatic ring, or to the condensed ring system containing that ring, by saturated carbon chains
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/50—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/62—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atom of at least one of the thio groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring of the carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D307/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D307/38—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D307/54—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D333/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom
    • C07D333/06—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D333/24—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2602/00—Systems containing two condensed rings
    • C07C2602/02—Systems containing two condensed rings the rings having only two atoms in common
    • C07C2602/04—One of the condensed rings being a six-membered aromatic ring
    • C07C2602/08—One of the condensed rings being a six-membered aromatic ring the other ring being five-membered, e.g. indane

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

1-(Cyclopentadienyl-, furanyl-, thienyl- or pyrrolyl-methylene)-3-(substituted methyl)-1H-indene derivatives (I) are new. 1-(Cyclopentadienyl-, furanyl-, thienyl- or pyrrolyl-methylene)-3-(substituted methyl)-1H-indene derivatives of formula (I) and their salts and isomers are new. A1-A2-A3 = -X-C(R9)=C(R10)- or -C(R9)=C(R10)-X-; R1 - R11 = H, D (deuterium), halo, up to 8C, linear, branched or cyclic, saturated or unsaturated, optionally substituted hydrocarbyl (e.g. alkyl, cycloalkyl, aryl, alkaryl or alkaryl; optionally bonded to the basic structure via O (as e.g. in OMe) or S (as e.g. in SMe)), mono- or dihydrocarbylamino (e.g. NHMe, NMe2 or NHEt), NO2, CN, COOH, OSO3H, OH, CH2OH, NH2, amidino, guanidino or aminoacetate (at least one substituent preferably being halo, NH2, CN, COOH, 1-6C alkoxy or OH); or two adjacent groups may be linked to form a saturated or unsaturated carbocyclic or heterocyclic ring system; Q = NO2, CN, COOH, OSO3H, OH, CH2OH, OMe, amidino, guanidino, aminoacetate or COOR12; R12 = linear, branched or cyclic, saturated or unsaturated, optionally substituted hydrocarbyl or 1-8C alkoxy (where the substituents are preferably one or more of halo, NH2, CN, COOH, 1-6C alkoxy or OH); X = O, S, CR13R14 or NR15; and R13 - R15 = linear, branched or cyclic, saturated or unsaturated, optionally substituted hydrocarbyl, alkylthio or 1-8C alkoxy (where the substituents are preferably one or more of halo, NH2, CN, COOH, 1-6C alkoxy or OH). An Independent claim is included for the use of the cell lines MDCK (canine epithelial kidney cells) and/or C57MG (murine epithelial mammary gland cells) as test system for detecting the biological activity of test agents.

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft neue Inden-Derivate und deren Verwendung für pharmazeutische Zwecke, insbesondere zur Behandlung oder Prävention von mit einer erhöhten Zellproliferation assoziierten Krankheiten, z. B. Tumorerkrankungen. Insbesondere zeigen die erfindungsgemäßen Verbindungen eine Hemmung der durch das Ras Protein vermittelten Zelltransformation. The present invention relates to new indene derivatives and their Use for pharmaceutical purposes, in particular for treatment or prevention of associated with increased cell proliferation Diseases, e.g. B. tumor diseases. In particular, the compounds of the invention an inhibition of Ras Protein mediated cell transformation.

Die langfristige Gabe von nicht steroidalen Antiphlogistika (engl. NSAIDs für Non-Steroidal Anti Inflammatory Drugs) kann die Bildung und das Wachstum bösartiger Tumoren verzögern oder sogar verhindern (Giardiello, 1994; Luk, 1996). Das NSAID Sulindac wurde von Merck, Sharp & Dome ursprünglich als Indomethacin-Derivat entwickelt und aufgrund seiner entzündungshemmenden Wirkung in den 70er und 80er Jahren gegen rheumatoide Arthritis eingesetzt. (Reynolds et al., 1977; Green et al., 1977). In den frühen 80er Jahren wurde der allgemeine Zusammenhang zwischen verringertem Krebsrisiko und der langfristigen Einnahme von NSAIDs deutlich. Bald war klar, dass auch Sulindac das Risiko der Tumorbildung verringert, und auch, dass Sulindac sogar das Wachstum bereits gebildeter Tumoren verlangsamt (Belliveau et al., 1984). Mittlerweile gibt es zahlreiche klinische und wissenschaftliche Studien, die die Anti-Tumorwirkung von Sulindac ausführlich beschreiben (z. B. Winde et al., 1995). Das NSAID Sulindac wird derzeit zur Behandlung und zur Chemoprävention von Tumoren bei Patienten mit der vererbten Krebsprädisposition "Familiäre Adenomatöse Polyposis Coli" (FAP) klinisch eingesetzt (Pasricha et al., 1995; Winde et al., 1995). Long-term administration of non-steroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs for Non-Steroidal Anti Inflammatory Drugs) education and that Delay or even prevent the growth of malignant tumors (Giardiello, 1994; Luk, 1996). The NSAID Sulindac was developed by Merck, Sharp & Dome originally developed as an indomethacin derivative and because of its anti-inflammatory effects in the 70s and 80s rheumatoid arthritis. (Reynolds et al., 1977; Green et al., 1977). In the early 80's the general context became between reduced cancer risk and long-term use of NSAIDs clearly. It soon became clear that Sulindac was also at risk Tumor formation decreased, and also that Sulindac even growth tumors already formed slowed down (Belliveau et al., 1984). There are now numerous clinical and scientific studies that Describe Sulindac's anti-tumor effects in detail (e.g. Winde et al., 1995). The NSAID Sulindac is currently being used for treatment and Chemoprevention of tumors in patients with the inherited Clinical predisposition to "familial adenomatous polyposis coli" (FAP) used (Pasricha et al., 1995; Winde et al., 1995).

Die entzündungshemmende Wirkung der NSAIDs beruht auf der Hemmung der beiden Schlüsselenzyme des Eikosanoid-Stoffwechsels, der Cyclooxygenasen (COX) 1 und 2 (Vane und Botting, 1996). Auch die proliferationshemmende Wirkung wurde lange Zeit so erklärt. Sulindac verringert die Konzentration der COX Metaboliten (z. B. der Prostaglandine), die die Proliferationsrate von Tumorzellen erhöhen (Rao et al., 1995; Qiao et al., 1995). Die COX Hemmung durch Sulindac-Sulfid führt zur Anreicherung von Arachidonsäure, die die Ceramid bildende Sphingomyelinase aktiviert. Die resultierende hohe intrazelluläre Ceramidkonzentration führt zur Aktivierung der Apoptose (Chan et al., 1998). The anti-inflammatory effects of NSAIDs are based on inhibition of the two key enzymes of eikosanoid metabolism, the Cyclooxygenases (COX) 1 and 2 (Vane and Botting, 1996). Also the anti-proliferative effects have long been explained in this way. sulindac reduces the concentration of COX metabolites (e.g. prostaglandins), which increase the proliferation rate of tumor cells (Rao et al., 1995; Qiao et al., 1995). The COX inhibition by Sulindac sulfide leads to Enrichment of arachidonic acid, which forms the ceramide Sphingomyelinase activated. The resulting high intracellular Ceramide concentration leads to activation of apoptosis (Chan et al., 1998).

Allerdings kann die antiproliferative Wirkung von Sulindac nicht nur auf der Hemmung der COX Enzyme beruhen. Sulindac verursacht Apoptose in epithelialen Geweben und kultivierten Tumorzellen und hemmt die Tumorbildung auch unabhängig vom Eikosanoid-Metabolismus (Pasricha et al., 1995; Piazza et al., 1997a, b; Shiff et al., 1995). Auch Experimente mit der Min Maus, dem Tiermodell für FAP, zeigten, dass der Anti- Tumoreffekt von Sulindac unabhängig von der Prostaglandin-Biosynthese ist (Chiu et al., 1997). Eine wichtige COX unabhängige antiproliferative Wirkung ist die Hemmung eines Transkriptionsfaktors durch Sulindac (He et al., 1999). Außerdem hemmt Sulindac-Sulfid den Ras Signalweg. However, the antiproliferative effects of Sulindac are not limited to that Inhibition of COX enzymes are based. Sulindac causes apoptosis in epithelial tissues and cultured tumor cells and inhibits the Tumor formation independent of eikosanoid metabolism (Pasricha et al., 1995; Piazza et al., 1997a, b; Shiff et al., 1995). Also experiments with the Min Mouse, the animal model for FAP, showed that the anti Sulindac's tumor effect independent of prostaglandin biosynthesis (Chiu et al., 1997). An important COX independent antiproliferative Effect is the inhibition of a transcription factor by Sulindac (He et al., 1999). Sulindac sulfide also inhibits the Ras signaling pathway.

Mehr als ein Drittel aller menschlichen Tumoren tragen Mutationen im Ras Gen (Bos, 1989). Damit ist das Ras Gen das in menschlichen Tumoren am häufigsten mutierte Onkogen. Die wichtige Rolle des Ras Gens bei der Krebsentstehung wurde auch durch zahlreiche Laborexperimente bestätigt: Beispielsweise lassen sich primäre Zellen durch Transfektion des mutierten Ras Gens transformieren (Land et al., 1983). More than a third of all human tumors carry mutations in the ras Gen (Bos, 1989). The Ras gene is the most common in human tumors most common mutated oncogene. The important role of the Ras gene in Cancer development has also been confirmed by numerous laboratory experiments: For example, primary cells can be transfected by mutating Transform Ras Gens (Land et al., 1983).

Sulindac-Sulfon hemmt das Wachstum von Tumoren mit Mutationen im Ras Gen stärker als das Wachstum von Tumoren mit dem Wildtyp Ras Gen (Thompson et al., 1997). Die Apoptose induzierende Wirkung von Sulindac auf kultivierte Zellen kann durch Transfektion mit mutiertem Ras Gen aufgehoben werden (Arber et al., 1997). Außerdem hemmt Sulindac-Sulfid die Fokusbildung von kultivierten Primärzellen, ausgelöst durch das mutierte Ras Gen zusammen mit einem jeweils anderen Proto-Onkogen (Herrmann et al., 1998). Dieser Effekt ist nicht auf die allgemeine Hemmung der Zellteilung oder auf einen generellen cytotoxischen Effekt von Sulindac-Sulfid zurückzuführen. Sulindac-Sulfid bindet an p21ras und hemmt so die Interaktion zwischen p21ras und seinem Effektorprotein Raf Kinase sowie die p21ras Aktivierung durch das Austauschprotein CDC25. Sulindac-Sulfid hemmt dosisabhängig die Ras aktivierte Genexpression und die Aktivität der Raf Kinase. Diese Ergebnisse unterstreichen das Potential von Sulindac-Sulfid als eine Leitstruktur für die Entwicklung neuer Antitumor-therapeutika, die die Signalübertragung im Ras Signalweg inhibieren. Sulindac sulfone inhibits the growth of tumors with mutations in the Ras gene stronger than tumor growth with the wild type Ras gene (Thompson et al., 1997). The apoptosis inducing effect of Sulindac Cultured cells can be transfected with mutated Ras gene be abolished (Arber et al., 1997). It also inhibits sulindac sulfide the focus formation of cultivated primary cells, triggered by the mutated Ras gene together with a different proto-oncogene (Herrmann et al., 1998). This effect is not general Inhibition of cell division or on a general cytotoxic effect attributed to sulindac sulfide. Sulindac sulfide binds to p21ras and inhibits the interaction between p21ras and its effector protein Raf Kinase and p21ras activation by the exchange protein CDC25. Sulindac sulfide inhibits Ras-activated gene expression and the activity of the Raf Kinase. These results underscore the potential of Sulindac sulfide as a lead structure for the development of new ones Antitumor therapeutics that promote signal transmission in the Ras signaling pathway inhibit.

Aufgrund seines breiten Wirkungsspektrums und seiner starken Nebenwirkungen ist Sulindac jedoch als generelles Krebsmedikament ungeeignet. Because of its broad spectrum of activity and its strong However, side effects are Sulindac as a general cancer drug not suitable.

Sulindac und seine Metaboliten (siehe Abb. 1) unterscheiden sich in ihren biochemischen Wirkungen deutlich. Eine geringfügige Änderung der Molekülstruktur von Sulindac kann also zu einer sehr starken Änderung der Wirkungen führen. Damit könnte das Molekül als Modellstruktur bei der Suche nach neuen geeigneteren Therapeutika dienen. Das Ziel, neue und bessere Sulindac Derivate herzustellen, ist die Basis zahlreicher Publikationen und Patente (z. B. Thompson et al., 2000; Pamukcu & Piazza, 2000; Sperl, 2000). In diesen Publikationen sind die Synthese von Sulindac und verschiedener Derivate sowie deren Wirkungen auf die Zellteilung von Tumorzellen beschrieben. Außerdem wurden die Wirkungen dieser Substanzen auf verschiedene Signalwege, wie z. B. den p53- oder den Wnt- Signalweg, beschrieben. Eine Wirkung auf den Ras Signalweg ist bisher nur von Sulindac-Sulfid bekannt (Herrmann et al., 1998). Sulindac and its metabolites (see Fig. 1) differ significantly in their biochemical effects. A slight change in the molecular structure of Sulindac can lead to a very strong change in the effects. The molecule could thus serve as a model structure in the search for new, more suitable therapeutic agents. The goal of producing new and better Sulindac derivatives is the basis of numerous publications and patents (e.g. Thompson et al., 2000; Pamukcu & Piazza, 2000; Sperl, 2000). These publications describe the synthesis of sulindac and various derivatives and their effects on the cell division of tumor cells. In addition, the effects of these substances on various signaling pathways, such as. B. the p53 or the Wnt signal path described. An effect on the Ras signaling pathway is only known from sulindac sulfide (Herrmann et al., 1998).

Sulindac und seine Metabolite wirken zwar auf mehrere unabhängige mitogene Signalwege und entfalten so ihren starken antiproliferativen Effekt. Ein entscheidender Nachteil von Sulindac ist jedoch die notwendige hohe Dosierung und die damit verbundenen Nebenwirkungen. Dies hat mehrere Ursachen: Sulindac ist sehr schlecht wasserlöslich, weshalb nur geringe Menges des oral aufgenommenen Sulindacs im Magen-Darm-Trakt resorbiert werden. Mehr als die Hälfte wird direkt unverändert über den Darm, ein weiterer signifikanter Anteil in glykosylierter Form über die Niere in den ersten 12 Stunden nach der Applikation ausgeschieden. Das Problem der geringen Bioverfügbarkeit kann nur teilweise durch direkte lokale Applikation der Substanz gelöst werden. Das Sulindac Molekül selbst ist physiologisch unwirksam (Duggan et al., 1977). Erst durch die reversible Reduktion zum Sulfid oder durch irreversible Oxidation zum Sulfon (Abb. 1) mittels Fremdstoff metabolisierender intrazellulärer Enzyme entstehen Moleküle mit biologischer Wirkung. In Gegenwart von Luftsauerstoff oxidiert Sulindac-Sulfid auch spontan zum Sulindac und Sulindac zum Sulfon. Sulfid und Sulfon zeigen deutliche Unterschiede in ihrem Wirkungsspektrum. Beide Moleküle wirken auf mehrere unterschiedliche Signalwege, wie beispielsweise Signalwege zur Regulation der Blutgerinnung (Sulfid), der Entzündung (Sulfid), der Zellteilung (Sulfid, Sulfon) oder der Apoptose (Sulfon). Beide Sulindac-Metaboliten zeigen nur geringe Affinitäten zu ihren Zielproteinen, wirken also erst bei hohen Konzentrationen. Die notwendige hohe Dosierung und das breite Wirkunsspektrum der Sulindac-Metabolite sind somit die Ursache für die starken Nebenwirkungen bei der Sulindac-Behandlung von Tumorpatienten. Sulindac and its metabolites act on several independent mitogenic signaling pathways and thus develop their strong antiproliferative effect. A crucial disadvantage of Sulindac, however, is the high dosage required and the associated side effects. There are several reasons for this: Sulindac is very poorly water-soluble, which is why only a small amount of the oral Sulindac is absorbed in the gastrointestinal tract. More than half is excreted directly unchanged via the intestine, a further significant proportion in glycosylated form via the kidney in the first 12 hours after application. The problem of low bioavailability can only be partially solved by direct application of the substance locally. The Sulindac molecule itself is physiologically ineffective (Duggan et al., 1977). It is only through the reversible reduction to the sulfide or through the irreversible oxidation to the sulfone ( Fig. 1) that intracellular enzymes that metabolize foreign substances produce molecules with biological effects. In the presence of atmospheric oxygen, sulindac sulfide also spontaneously oxidizes to sulindac and sulindac to sulfone. Sulfide and sulfone show clear differences in their spectrum of activity. Both molecules act on several different signaling pathways, such as signaling pathways for regulating blood clotting (sulfide), inflammation (sulfide), cell division (sulfide, sulfone) or apoptosis (sulfone). Both Sulindac metabolites show only low affinities for their target proteins, so they only work at high concentrations. The necessary high dosage and the broad spectrum of action of the Sulindac metabolites are the cause of the strong side effects in the Sulindac treatment of tumor patients.

Sulindac-Sulfid ist das erste kleine synthetische Molekül, das einen direkten hemmenden Einfluss auf das Proto-Onkoprotein p21ras und seine biochemischen und biologischen Eigenschaften ausübt. Nach einer Substanz mit hemmenden Wirkungen auf das Proto-Onkoprotein p21ras wird schon gesucht seit man dessen entscheidende Rolle bei der Krebsentstehung erkannt hat (Sigal et al., 1987). Sulindac ist das einzige Pharmakon, das erfolgreich präventiv und therapeutisch bei Patienten mit erhöhtem erblichen Krebsrisiko eingesetzt wird. Wegen starker Nebenwirkungen im oberen Gastrointestinaltrakt und weiterer unspezifischer Wirkungen ist jedoch ein unkontrollierter Einsatz der Substanz in der Krebstherapie ohne Weiteres nicht möglich. Eine Substanz mit ähnlichen aber spezifischeren Wirkungen, und damit mit weniger und geringeren Nebenwirkungen, wäre ein Meilenstein auf der Suche nach einem neuen Krebsmedikament. Sulindac sulfide is the first small synthetic molecule to have a direct inhibitory influence on the proto-oncoprotein p21ras and its exerts biochemical and biological properties. After a Substance with inhibitory effects on the proto-oncoprotein p21ras has been sought since its crucial role in Cancer detection (Sigal et al., 1987). Sulindac is the only one Pharmakon, which is successfully preventive and therapeutic in patients with increased hereditary cancer risk is used. Because of stronger Side effects in the upper gastrointestinal tract and others unspecific effects is an uncontrolled use of the Substance is not easily possible in cancer therapy. A substance with similar but more specific effects, and thus with less and less side effects, would be a milestone in the search for a new cancer drug.

Die der vorliegenden Erfindung zugrunde liegende Aufgabe bestand somit darin, eine neue Antitumor-wirksame Verbindung bereitzustellen, bei der die geschilderten Nachteile des Standes der Technik zumindest teilweise beseitigt sind. The object underlying the present invention was therefore in providing a new antitumor-effective compound in which the disadvantages of the prior art described at least partially are eliminated.

Diese Aufgabe wird gelöst durch Bereitstellung einer neuen Verbindungsklasse ausgehend von 5-Fluor-2-methylinden-3-essigsäure, an die ein 5-Ring, vorzugsweise ein Heterozyklus, z. B. ein substituierter oder unsubstituierter Pyrrol-, ein Thiophen- oder Furanring oder ein 6-Ring über eine Methylenbrücke gekoppelt ist. This task is solved by providing a new one Compound class starting from 5-fluoro-2-methylinden-3-acetic acid which is a 5-ring, preferably a heterocycle, e.g. B. a substituted or unsubstituted pyrrole, a thiophene or furan ring or a 6-ring via a methylene bridge is coupled.

Ein Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind somit Verbindungen der allgemeinen Formeln (I) oder (II):


worin die Substituenten R1 bis R11 gleich oder verschieden sind und jeweils unabhängig für Wasserstoff, Deuterium, Halogen, eine lineare, verzweigte oder cyclische, gesättigte oder ungesättigte, gegebenenfalls substituierte Kohlenwasserstoffgruppe mit bis zu 8 Kohlenstoffatomen, z. B. eine Alkyl-, Cycloalkyl-, Aryl-, Alkaryl- oder Aralkylgruppe, die gegebenenfalls über ein O-Atom, ein S-Atom oder eine Aminogruppe an das Grundgerüst gebunden ist, z. B. eine Alkoxygruppe wie Methoxy, eine Thioalkylgruppe wie Methylsulfid oder eine einfach oder zweifach mit
Kohlenwasserstoffgruppen substituierte Aminogruppe wie Methylamino, Dimethylamino oder Ethylylamino, Nitro, Cyano, Carboxy, Sulfat, Hydroxy, Hydroxymethyl, Amino, Amidino, Guanidino oder Aminoacetat steht, wobei die Substitution vorzugsweise durch eine oder mehrere Gruppen ausgewählt aus Halogen, Amino, Cyano, Carboxyl, geradkettiges oder verzweigtes Alkoxy mit 1-6 Kohlenstoffatomen oder Hydroxy erfolgt, und wobei gegebenenfalls zwei benachbarte Substituenten miteinander verbrückt sind, um ein gesättigtes oder ungesättigtes, gegebenenfalls heterocyclisches Ringsystem zu ergeben,
der Substituent Z für Nitro, Cyano, Carboxy, Sulfat, Hydroxy, Hydroxymethyl, Methoxy, Amidino, Guanidino, Aminoacetat oder für einen Rest CO2R12 steht, wobei R12 eine lineare, verzweigte oder cyclische, gesättigte oder ungesättigte, gegebenenfalls substituierte Kohlenwasserstoffgruppe oder eine Alkoxygruppe mit 1-8 Kohlenstoffatomen steht, wobei die Substitution vorzugsweise durch eine oder mehrere Gruppen ausgewählt aus Halogen, Amino, Cyano, Carboxy, geradkettiges oder verzweigtes Alkoxy mit 1-6 Kohlenstoffatomen oder Hydroxy erfolgt,
und der Substituent X für Sauerstoff, Schwefel, einen Rest CR13R14 oder NR15 steht, wobei R13, R14 und R15 jeweils unabhängig für Wasserstoff oder für eine lineare, verzweigte oder cyclische, gesättigte oder ungesättigte, gegebenen falls substituierte Kohlenwasserstoffgruppe, eine Alkylthiogruppe oder eine Alkoxygruppe mit 1-8 Kohlenstoffatomen, steht, wobei die Substitution vorzugsweise durch eine oder mehrere Gruppen ausgewählt aus Halogen, Amino, Cyano, Carboxy, geradkettiges oder verzweigtes Alkoxy mit 1-6 Kohlenstoffatomen oder Hydroxy erfolgt, oder Salze und Isomere davon. The present invention thus relates to compounds of the general formulas (I) or (II):


wherein the substituents R 1 to R 11 are the same or different and each independently for hydrogen, deuterium, halogen, a linear, branched or cyclic, saturated or unsaturated, optionally substituted hydrocarbon group with up to 8 carbon atoms, e.g. B. an alkyl, cycloalkyl, aryl, alkaryl or aralkyl group, which is optionally bonded to the backbone via an O atom, an S atom or an amino group, e.g. B. an alkoxy group such as methoxy, a thioalkyl group such as methyl sulfide or a single or double with
Hydrocarbon-substituted amino groups such as methylamino, dimethylamino or ethyllylamino, nitro, cyano, carboxy, sulfate, hydroxy, hydroxymethyl, amino, amidino, guanidino or aminoacetate, the substitution preferably being selected by one or more groups selected from halogen, amino, cyano, carboxyl, straight-chain or branched alkoxy with 1-6 carbon atoms or hydroxy takes place, and optionally two adjacent substituents are bridged to one another to give a saturated or unsaturated, optionally heterocyclic ring system,
the substituent Z represents nitro, cyano, carboxy, sulfate, hydroxy, hydroxymethyl, methoxy, amidino, guanidino, aminoacetate or a radical CO 2 R 12 , where R 12 is a linear, branched or cyclic, saturated or unsaturated, optionally substituted hydrocarbon group or an alkoxy group with 1-8 carbon atoms, the substitution preferably being carried out by one or more groups selected from halogen, amino, cyano, carboxy, straight-chain or branched alkoxy with 1-6 carbon atoms or hydroxy,
and the substituent X represents oxygen, sulfur, a radical CR 13 R 14 or NR 15 , where R 13 , R 14 and R 15 each independently represent hydrogen or a linear, branched or cyclic, saturated or unsaturated, optionally substituted hydrocarbon group , an alkylthio group or an alkoxy group with 1-8 carbon atoms, the substitution being preferably carried out by one or more groups selected from halogen, amino, cyano, carboxy, straight-chain or branched alkoxy with 1-6 carbon atoms or hydroxy, or salts and isomers from that.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen sind erhältlich durch Kondensation von 5-Fluor-2-methylinden-3-essigsäure mit entsprechenden Aldehyden. 5- Fluor-2-methylinden-3-essigsäure wird hierzu in 5 Stufen aus käuflichen Ausgangsmaterialien (siehe z. B. Roth und Kleemann, 1982) hergestellt und dient dann als CH-acide Ausgangskomponente für die Aldolkondensation mit unterschiedlichen Aldehyden. Als Lösungsmittel kann hierzu beispielsweise Methanol verwendet werden, das mit 2-3 äquimolaren Mengen an Natriummethylat und den entsprechenden Reaktionspartnern versetzt wird. Erhitzen des Reaktionsgemisches unter Rückfluss ergibt in hohen Ausbeuten die erfindungsgemäßen Alkylidenverbindungen. Es wurde gefunden, dass Alkalimetallsalze, z. B. Natriumsalze, dieser Verbindungen sehr gut wasserlöslich sind. Vorzugsweise weisen die erfindungsgemäßen Verbindungen die Stereochemie des bekannten Sulidac-Z-Isomers bezüglich der exocyclischen Doppelbindung auf. The compounds according to the invention are obtainable by condensation of 5-fluoro-2-methylinden-3-acetic acid with corresponding aldehydes. 5 Fluorine-2-methylinden-3-acetic acid is commercially available in 5 steps Starting materials (see e.g. Roth and Kleemann, 1982) are produced and then serves as a CH-acidic starting component for the aldol condensation with different aldehydes. This can be used as a solvent For example, methanol can be used with 2-3 equimolar Amounts of sodium methylate and the corresponding reactants is transferred. Heating the reaction mixture under reflux gives in high yields of the alkylidene compounds according to the invention. It was found that alkali metal salts, e.g. B. sodium salts of these compounds are very soluble in water. Preferably, the invention Compounds related to the stereochemistry of the well-known Sulidac-Z isomer the exocyclic double bond.

In einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung steht der Substituent Z für Carboxy (d. h. COOH oder COOM, worin M ein Kation, insbesondere ein Alkalimetall-Kation, wie Na, bedeutet). In a preferred embodiment of the invention, the substituent is Z for carboxy (i.e. COOH or COOM, where M is a cation, in particular an alkali metal cation, such as Na).

Weiterhin ist bevorzugt, dass der Substituent X in erfindungsgemäßen Verbindungen für Sauerstoff, Schwefel oder CR13R14 steht. It is further preferred that the substituent X in compounds according to the invention stands for oxygen, sulfur or CR 13 R 14 .

Darüber hinaus ist bevorzugt, dass R3 für Wasserstoff, Halogen, z. B. F, Cl, Br oder I, insbesondere F, eine gegebenenfalls substituierte Kohlenwasserstoffgruppe, z. B. Methyl oder halogeniertes Methyl, Hydroxy oder eine Alkoxygruppe, z. B. Methoxy, steht. In addition, it is preferred that R 3 is hydrogen, halogen, e.g. B. F, Cl, Br or I, in particular F, an optionally substituted hydrocarbon group, for. B. methyl or halogenated methyl, hydroxy or an alkoxy group, e.g. B. methoxy.

R7 bedeutet vorzugsweise eine gegebenenfalls substituierte Kohlenwasserstoffgruppe, insbesondere Methyl oder Ethyl. R 7 preferably denotes an optionally substituted hydrocarbon group, especially methyl or ethyl.

R1, R2, R4, R5, R6 und R11 sind vorzugsweise Wasserstoff. Die Substituenten R8, R9, R10, R13 und R14 am heterocyclischen 5-Ring bzw. am 6-Ring sind vorzugsweise ausgewählt aus Wasserstoff, Alkyl, z. B. C1-5 Alkyl, wie Methyl oder Pentyl, substituiertem Alkyl, z. B. Hydroxymethyl oder Haloalkyl; Alkoxy, Aryloxy, Alkaryloxy oder Aralkyloxy, z. B. Methoxy oder Benzyloxy; Halogen, Cyano, Amino, ein- oder zweifach substituiertem Amino, z. B. Dimethylamino oder Ethylaminoh Hydroxy und Thioalkyl, z. B. Methylsulfid. Weiterhin können zwei Substituenten zusammen ein Ringsystem bilden, z. B. ein aromatisches oder heteroaromatisches System, wie etwa eine Indolgruppe. R 1 , R 2 , R 4 , R 5 , R 6 and R 11 are preferably hydrogen. The substituents R 8 , R 9 , R 10 , R 13 and R 14 on the heterocyclic 5-ring and on the 6-ring are preferably selected from hydrogen, alkyl, for. B. C 1-5 alkyl, such as methyl or pentyl, substituted alkyl, e.g. B. hydroxymethyl or haloalkyl; Alkoxy, aryloxy, alkaryloxy or aralkyloxy, e.g. B. methoxy or benzyloxy; Halogen, cyano, amino, mono- or disubstituted amino, e.g. B. dimethylamino or ethylaminoh hydroxy and thioalkyl, e.g. B. methyl sulfide. Furthermore, two substituents together can form a ring system, e.g. B. an aromatic or heteroaromatic system such as an indole group.

Spezifische Beispiele für erfindungsgemäße Verbindungen sind Ind4, Ind7, Ind9, Ind11 und Ind12 (siehe Abb. 2) oder Salze davon. Weitere spezifische Beispiele für erfindungsgemäße Verbindungen sind die in Abb. 6 gezeigten Verbindungen oder Salze davon. Specific examples of compounds according to the invention are Ind4, Ind7, Ind9, Ind11 and Ind12 (see Fig. 2) or salts thereof. Further specific examples of compounds according to the invention are the compounds shown in Fig. 6 or salts thereof.

Die erfindungsgemäßen Substanzen können als Modulatoren des Ras Proteins eingesetzt werden, vorzugsweise als Inhibitoren des Ras Signalwegs, beispielsweise durch Hemmung der Wechselwirkung von Ras und seinem Effektor Raf Kinase. Die Verbindungen können somit als Inhibitoren der Zellproliferation, z. B. als Inhibitoren einer durch das Ras Protein vermittelten Zelltransformation, verwendet werden. Überraschenderweise wurde festgestellt, dass sogar eine Reversion einer Zelltransformation, z. B. der Ras Transformation, erfolgen kann. Desweiteren sind die Verbindungen als Stimulatoren von apoptotischen Prozessen geeignet. The substances according to the invention can be used as modulators of Ras Protein are used, preferably as inhibitors of Ras Signaling pathways, for example by inhibiting the interaction of Ras and his effector Raf Kinase. The connections can thus as Inhibitors of cell proliferation, e.g. B. as inhibitors of the Ras Protein-mediated cell transformation can be used. Surprisingly, it was found that even a reversion of one Cell transformation, e.g. B. the Ras transformation can take place. Furthermore, the compounds are stimulators of apoptotic Suitable processes.

Ein weiterer Gegenstand der Erfindung ist somit eine pharmazeutische Zusammensetzung, die als Wirkstoff eine erfindungsgemäße Verbindung (einschließlich Isomeren oder Salzen davon) zusammen mit physiologisch verträglichen Hilfs- und Trägerstoffen enthält. Diese Zusammensetzung kann zur Prävention oder Behandlung von Krankheiten verwendet werden, die mit einer Störung der Zellproliferation assoziiert sind, insbesondere zur Prävention oder Behandlung von Krankheiten, die mit einer erhöhten Zellproliferation assoziiert sind, wie etwa entzündliche Prozesse oder Tumorerkrankungen. Besonders bevorzugt wird die Zusammensetzung zur Prävention oder Behandlung von mit dem Ras Protein assoziierten Tumorerkrankungen. Ebenfalls besonders bevorzugt ist die Verwendung der Verbindungen in Tumorerkrankungen, die mit dem Wnt Protein, dem APC Protein oder/und dem β-Catenin Protein assoziiert sind. Beispielsweise kann die Zusammensetzung bei Tumoren epithelialen Ursprungs (z. B. Tumoren des Pankreas, der Brust, des Dünn- und Dickdarms, der Haut, der Schleimhäute oder der Lunge) und nicht-epithelialen Ursprungs (z. B. Tumoren der Weichteile, des Bindegewebes oder des Gehirns) eingesetzt werden. Another object of the invention is therefore a pharmaceutical Composition containing a compound according to the invention as active ingredient (including isomers or salts thereof) along with physiological contains compatible auxiliaries and carriers. This composition can be used to prevent or treat diseases associated with cell proliferation disorder, especially for Prevention or treatment of diseases with an increased Cell proliferation are associated, such as inflammatory processes or Tumor diseases. The composition is particularly preferably used for Prevention or treatment of Ras protein associated Tumor diseases. The use of the is also particularly preferred Compounds in tumor diseases associated with the Wnt protein, the APC Protein or / and the β-catenin protein are associated. For example the composition of tumors of epithelial origin (e.g. tumors of the pancreas, breast, small and large intestine, skin, the Mucous membranes or the lungs) and non-epithelial origin (e.g. Tumors of the soft tissues, connective tissue or brain) are used become.

Die erfindungsgemäße pharmazeutische Zusammensetzung kann in Form von flüssigen Präparaten, z. B. oralen Lösungen oder Suspensionen oder injizierbaren Lösungen, in Form von festen Präparaten, z. B. Tabletten, Kapseln, Dragees, Suppositorien, Pulvern etc. oder in Form von Emulsionen, z. B. Salben, Cremes, Lotionen etc. vorliegen. Die Zusammensetzung kann je nach Art der zu behandelnden Erkrankung auf einem geeigneten Weg verabreicht werden, z. B. oral, nasal, rektal, topisch, parenteral etc. The pharmaceutical composition according to the invention can be in the form of liquid preparations, e.g. B. oral solutions or suspensions or injectable solutions, in the form of solid preparations, e.g. B. tablets, Capsules, dragees, suppositories, powders etc. or in the form of Emulsions e.g. B. ointments, creams, lotions, etc. are available. The Composition can vary depending on the type of disease being treated administered by a suitable route, e.g. B. oral, nasal, rectal, topical, parenteral etc.

Die Dosierung hängt von der Art und Schwere der zu behandelnden Erkrankung ab und kann beispielsweise im Bereich von 0,1 bis 100 mg pro kg Körpergewicht (Tagesdosis), besonders bevorzugt im Bereich von 1 bis 10 mg pro kg Körpergewicht (Tagesdosis) liegen. Die Verabreichung kann ein- oder mehrmals täglich oder in mehrtägigen Intervallen erfolgen. The dosage depends on the type and severity of the treatment Disease and can range, for example, in the range of 0.1 to 100 mg per kg body weight (daily dose), particularly preferably in the range from 1 to 10 mg per kg body weight (daily dose). The administration can one or more times a day or at intervals of several days.

Weiterhin kann man die erfindungsgemäße Verbindung auch in Kombination mit anderen Wirkstoffen, z. B. im Kombination mit anderen Antitumormitteln, wie etwa bekannten Cytostatika aus den chemischen Gruppen und Wirkungsklassen der Nukleotide oder Nukleotidanaloga (z. B. 5-Fluor-Uracil), der Steroide oder Steroidanaloga (z. B. Tamoxifen), der Substanzen, die die Cytoskelettbildung verhindern oder katalysieren (z. B. Taxol), der DNA-schädigenden Substanzen (z. B. Cis-Platin) oder/und der Wachstumsfaktorrezeptor blockierenden Proteine und Antikörper (z. B. Herceptin), verabreichen. Furthermore, the compound of the invention can also be found in Combination with other active ingredients, e.g. B. in combination with others Antitumor agents, such as known cytostatics from the chemical Groups and classes of action of the nucleotides or nucleotide analogs (e.g. 5-fluoro-uracil), the steroids or steroid analogs (e.g. tamoxifen), the Substances that prevent or catalyze cytoskeleton formation (e.g. Taxol), the DNA-damaging substances (e.g. cis-platinum) and / or the Growth factor receptor blocking proteins and antibodies (e.g. Herceptin).

Die Erfindung soll nun durch die nachfolgenden Abbildungen und Beispiele näher erläutert werden. The invention will now be illustrated by the following figures and examples are explained in more detail.

Es zeigen: Show it:

Abb. 1 Sulindac und seine physiologischen Hauptmetaboliten Sulindac-Sulfid und Sulindac-Sulfon. Reduktion und Oxidation können intrazellulär durch metabolisierende Enzyme erfolgen. Die Oxidation kann in Gegenwart von Luftsauerstoff auch spontan erfolgen. Fig. 1 Sulindac and its main physiological metabolites sulindac sulfide and sulindac sulfone. Reduction and oxidation can take place intracellularly through metabolizing enzymes. The oxidation can also take place spontaneously in the presence of atmospheric oxygen.

Abb. 2 5 Beispiele für erfindungsgemäße Substanzen. Neben den gezeigten Verbindungen wurden auch noch die Natriumsalze der Substanzen Ind7 (Ind7a) und Ind11 (Ind11a) hergestellt. Fig. 2 5 examples of substances according to the invention. In addition to the compounds shown, the sodium salts of the substances Ind7 (Ind7a) and Ind11 (Ind11a) were also prepared.

Abb. 3 MDCK Zellen (obere Reihe), unbehandelte Ras transformierte MDCK-f3 Zellen (mittlere Reihe) und MDCK-f3 zellen nach Behandlung mit einer Substanz, die zur Reversion der Transformation führt (untere Reihe) wurden analysiert durch Immunfluoreszenzmarkierung von F-Actin (linke Spalte), E- Cadherin (mittlere Spalte) und F-Actin und E-Cadherin (rechte Spalte). Fig. 3 MDCK cells (upper row), untreated Ras transformed MDCK-f3 cells (middle row) and MDCK-f3 cells after treatment with a substance which leads to the reversal of the transformation (lower row) were analyzed by immunofluorescence labeling of F-actin (left column), E-cadherin (middle column) and F-actin and E-cadherin (right column).

MDCK Zellen wachsen in einer epithelartigen Einzelzellschicht und exprimieren große Mengen des membrangebundenen Zelladhäsionsproteins E-Cadherin. Transformierte MDCK-f3 Zellen dagegen haben einen Fibroblasten ähnlichen Phänotyp ohne regelmäßige Zellkontakte und keine signifikante E-Cadherin-Expression. Behandlung mit einer Transformation revertierenden Substanz führt dazu, dass MDCK-f3 Zellen ihren Phänotyp zu nicht transformierten MDCK Zellen ändern, wobei die Menge des Membran gebundenen E-Cadherins ansteigt. Die Pfeilköpfe zeigen zwei exemplarische Zellkontakte mit E-Cadherin einer einzelnen behandelten MDCK-f3 Zelle. MDCK cells grow in an epithelial-like single cell layer and express large amounts of the membrane-bound cell adhesion protein E-cadherin. In contrast, transformed MDCK-f3 cells have one Fibroblast-like phenotype with no regular cell contacts and none significant E-cadherin expression. Treatment with a transformation reverting substance causes MDCK-f3 cells to change their phenotype change to untransformed MDCK cells, the amount of Membrane-bound E-Cadherin increases. The arrow heads show two exemplary cell contacts with E-Cadherin treated in a single MDCK-f3 cell.

Abb. 4 MDCK Zellen, unbehandelte Ras-transformierte MDCK-f3 Zellen und MDCK- f3 Zellen nach Behandlung mit einer Substanz, die zur Reversion der Transformation führt, in der rasterelektronenmikroskopischen Analyse. Deutlich erkennbar sind die morphologischen Unterschiede der beiden Zelltypen und die Reversion des transformierten Zelltyps durch die Behandlung. Fig. 4 MDCK cells, untreated Ras-transformed MDCK-f3 cells and MDCK-f3 cells after treatment with a substance that leads to the reversal of the transformation in the scanning electron microscope analysis. The morphological differences between the two cell types and the reversion of the transformed cell type through the treatment are clearly recognizable.

Abb. 5 Die Verbindungen (I) und (II) können auch durch kombinatorische Methoden, z. B. Synthese an einen 2-Chlortritylchlorid-Harz und Variationen von Substituenten, z. B. R, R', R" bzw. deren Anzahl (beispielsweise n), der Gruppe Z und der Anzahl m der C-Atome synthetisiert werden. Fig. 5 The compounds (I) and (II) can also by combinatorial methods, for. B. Synthesis to a 2-chlorotrityl chloride resin and variations of substituents, e.g. B. R, R ', R "or their number (for example n), the group Z and the number m of the C atoms can be synthesized.

Abb. 6 Weitere Beispiele für erfindungsgemäße Substanzen. Fig. 6 Further examples of substances according to the invention.

BeispieleExamples Beispiel 1example 1 Synthese der Verbindungen (I) und (II)Synthesis of compounds (I) and (II) 1.1 Allgemeine Synthesevorschriften1.1 General synthesis instructions

Die Verbindungen (I) und (II) können durch Aldolkondensation von 5-Fluor- 2-methylinden-3-essigsäure mit entsprechenden Aldehyden synthetisiert werden. Als Lösungsmittel ist beispielweise Methanol geeignet, das mit einer 2,5 äquimolaren Menge an Natriummethylat und den entsprechenden Reaktionspartnern versetzt wird. Erhitzen des Reaktionsgemisches unter Rückfluss ergibt in hohen Ausbeuten die jeweiligen Alkylidenverbindungen (I) und (II). The compounds (I) and (II) can be obtained by aldol condensation of 5-fluoro- 2-methylinden-3-acetic acid synthesized with appropriate aldehydes become. As a solvent, for example, methanol is suitable, which with a 2.5 equimolar amount of sodium methylate and the corresponding Reaction partners is transferred. Heating the reaction mixture under Reflux gives the respective alkylidene compounds in high yields (I) and (II).

Außerdem können die erfindungsgemäßen Verbindungen mit Methoden der kombinatorischen Festphasenchemie hergestellt werden. Dabei kann man von festphasengebundenen, jeweils unterschiedlich substituierten 2-Alkylinden-3-essigsäure-Derivaten ausgehen und die Substituenten an Position 1 des Inden-Grundgerüsts durch Kondensation mit unterschiedlichen aromatischen Aldehyden variieren. Abb. 5 zeigt eine schematische Darstellung der Synthesestrategie unter Verwendung eines 2- Chlortritylchlorid-Harzes. In addition, the compounds according to the invention can be prepared using methods of combinatorial solid-phase chemistry. You can start from solid-phase-bound, differently substituted 2-alkylinden-3-acetic acid derivatives and vary the substituents at position 1 of the indene backbone by condensation with different aromatic aldehydes. Fig. 5 shows a schematic representation of the synthesis strategy using a 2-chlorotrityl chloride resin.

Es wurden beispielsweise die in Abb. 2 und Abb. 6 dargestellten Verbindungen synthetisiert. For example, the compounds shown in Fig. 2 and Fig. 6 were synthesized.

1.2 Syntheseprotokoll am Beispiel von (6-Fluor-3-furan-3-ylmethylen-2- methyl-3H-inden)-essigsäure (Ind12)1.2 Synthesis protocol using the example of (6-fluoro-3-furan-3-ylmethylene-2- methyl 3H-indene) -acetic acid (Ind12)

1 mmol (205 mg) 5-Fluor-2-methylinden-3-essigsäure wird in 10 ml Methanol (trocken) gelöst und mit 2,5 Äquivalenten Natriummethylat versetzt. Zu dieser Lösung wird dann 1,05 mmol (100,8 mg) 3-Furaldehyd gegeben. Dann wird die farblose Lösung unter Argon bis zum Rückfluss erhitzt und die Reaktion mit Hilfe der HPLC (RP-18, Methanol/0.05 Ammoniumformiat (pH 5)) kontrolliert. Die Kondensationsverbindung zeigt charakteristische Retentionszeiten und entsprechende UV-Spektren (Tab. 1). Nach wenigen Minuten färbt sich die Lösung gelb und nach einer weiteren halben Stunde beginnt eine gelbe Verbindung auszufallen. Nach 4 h Rückfluss ist die Reaktion vollständig. Danach wird die Lösung abgekühlt, mit HCl neutralisiert und in Ether gefällt. Die abfiltrierten Kristalle werden in Methanol gelöst und erneut in Ether gefällt. Man erhält so 200 mg (Ausbeute 70%) eines gelben Pulvers. Das 1H-NMR zeigt im Verhältnis von 1 : 17 zwei isomere Kondensationsprodukte, wobei das Hauptisomer die Stereochemie des bekannten Sulindacs (Z-Isomer) aufweisen sollte. Mit Hilfe des 1H-NMR und 13C-NMR lassen sich eindeutig alle Strukturelemente der Verbindung Ind12 zuordnen. 1 mmol (205 mg) 5-fluoro-2-methylinden-3-acetic acid is dissolved in 10 ml methanol (dry) and mixed with 2.5 equivalents of sodium methylate. 1.05 mmol (100.8 mg) of 3-furaldehyde is then added to this solution. The colorless solution is then heated to reflux under argon and the reaction is checked using HPLC (RP-18, methanol / 0.05 ammonium formate (pH 5)). The condensation compound shows characteristic retention times and corresponding UV spectra (Tab. 1). After a few minutes the solution turns yellow and after another half an hour a yellow compound begins to fail. After 4 hours of reflux, the reaction is complete. The solution is then cooled, neutralized with HCl and precipitated in ether. The filtered crystals are dissolved in methanol and again precipitated in ether. This gives 200 mg (yield 70%) of a yellow powder. The 1 H-NMR shows two isomeric condensation products in a ratio of 1:17, whereby the main isomer should have the stereochemistry of the well-known sulindac (Z-isomer). With the help of 1 H-NMR and 13 C-NMR, all structural elements of the compound Ind12 can be clearly assigned.

1.3 (3-Furan-3-ylmethylen-2,6-methyl-3H-inden)-essigsäure1.3 (3-furan-3-ylmethylene-2,6-methyl-3H-indene) acetic acid

Polymergebundene (2,6-Dimethyl-3H-inden-1-yl)-essigsäure, 50 mg (54 µmol) an 2-Chlortritylchlorid-Harz (Novablochem, Beladung 1,08 mmol/g) wird in 0,5 ml trockenem Dimethylformamid suspendiert und 1 h bei Raumtemperatur geschüttelt. Man versetzt mit 81 mg (540 µmol) 1,8- Diazabicyclo[5,4,0]-undec-7-en und schüttelt für 1,5 h bei 60°C. Zu der Suspension werden 52 mg (540 µmol) Furan-3-carbaldehyd gegeben und 24 h bei 60°C geschüttelt. Man filtriert und wäscht dreimal mit je 6 ml Dimethylformamid, Methanol, Dichlormethan, Methanol und Dichlormethan. Zur Abspaltung wird das Harz dreimal mit je 1 ml, für einmal 10 min und zweimal 1 min mit 2%iger Trifluoressigsäure in Dichlormethan versetzt und die Lösung filtriert. Das Lösungsmittel wird unter vermindertem Druck entfernt. Es werden 8,0 mg eines gelbfarbenen Feststoffs erhalten (53% der theoretischen Ausbeute). Die Struktur der Substanz wurde mittels NMR bestätigt: 1H NMR (400.13 MHz, CDCl3): δ = 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.64 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 6.81 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.65 (s, 1H), 3.59 (s, 2H), 2.33 (s, 3H), 2.14 (s, 3H). Polymer-bound (2,6-dimethyl-3H-inden-1-yl) acetic acid, 50 mg (54 µmol) of 2-chlorotrityl chloride resin (Novablochem, loading 1.08 mmol / g) is dissolved in 0.5 ml of dry dimethylformamide suspended and shaken for 1 h at room temperature. 81 mg (540 μmol) of 1,8-diazabicyclo [5,4,0] -undec-7-ene are added and the mixture is shaken at 60 ° C. for 1.5 h. 52 mg (540 μmol) furan-3-carbaldehyde are added to the suspension and shaken at 60 ° C. for 24 h. It is filtered and washed three times with 6 ml of dimethylformamide, methanol, dichloromethane, methanol and dichloromethane. To split off, the resin is mixed three times with 1 ml, once for 10 min and twice for 1 min with 2% trifluoroacetic acid in dichloromethane and the solution is filtered. The solvent is removed under reduced pressure. 8.0 mg of a yellow-colored solid are obtained (53% of the theoretical yield). The structure of the substance was confirmed by NMR: 1 H NMR (400.13 MHz, CDCl 3 ): δ = 1 H-NMR (400 MHz, CDCl 3 ): δ 7.64 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 6.81 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.65 (s, 1H), 3.59 (s, 2H), 2.33 (s, 3H), 2.14 (s, 3H).

1.4 (6-chlor-2-methyl-3-thiophen-3-ylmethylen-3H-inden)-essigsäure1.4 (6-chloro-2-methyl-3-thiophene-3-ylmethylene-3H-indene) acetic acid

Polymergebundene (6-Chlor-2-methyl-3H-inden)-essigsäure, 60 mg (54 µmol) an 2-Chlortritylchlorid-Harz (Novablochem, Beladung 1,08 mmol/g) wird in 0,8 ml trockenem Toluol suspendiert und 20 min bei Raumtemperatur geschüttelt. Man versetzt mit 81 mg (540 µmol) 1,8- Diazabicyclo[5,4,0]-undec-7-en und schüttelt für 30 min bei 60°C. Zu der Suspension werden 61 mg (540 µmol) Thiophen-3-carbaldehyd gegeben und 48 h bei 60°C geschüttelt. Man filtriert und wäscht dreimal mit je 6 ml Dimethylformamid, Methanol, Dichlormethan, Methanol und Dichlormethan. Zur Abspaltung wird das Harz dreimal mit je 1 ml, für einmal 10 min und zweimal 1 min mit 2%iger Trifluoressigsäure in Dichlormethan versetzt und die Lösung filtriert. Das Lösungsmittel wird unter vermindertem Druck entfernt. Es werden 13,2 mg eines gelbfarbenen Feststoffs erhalten (78% der theoretischen Ausbeute). Die Struktur der Substanz wurde mittels NMR bestätigt: 1H NMR (400.45 MHz, CDCl3): δ = 7.41-7.43 (m, 2H), 7.38-7.40 (m, 1 H), 7.22 (m, 1H), 7.14 (m, 1H), 7.14 (s, 1H), 6.90 (m, 1H), 3.57 (s, 2H), 2.17 (s, 3H). Polymer-bound (6-chloro-2-methyl-3H-indene) acetic acid, 60 mg (54 µmol) of 2-chlorotrityl chloride resin (Novablochem, loading 1.08 mmol / g) is suspended in 0.8 ml of dry toluene and Shaken for 20 min at room temperature. 81 mg (540 μmol) of 1,8-diazabicyclo [5,4,0] -undec-7-ene are added and the mixture is shaken at 60 ° C. for 30 min. 61 mg (540 μmol) of thiophene-3-carbaldehyde are added to the suspension and shaken at 60 ° C. for 48 h. It is filtered and washed three times with 6 ml of dimethylformamide, methanol, dichloromethane, methanol and dichloromethane. To split off, the resin is mixed three times with 1 ml, once for 10 min and twice for 1 min with 2% trifluoroacetic acid in dichloromethane and the solution is filtered. The solvent is removed under reduced pressure. 13.2 mg of a yellow-colored solid are obtained (78% of the theoretical yield). The structure of the substance was confirmed by NMR: 1 H NMR (400.45 MHz, CDCl 3 ): δ = 7.41-7.43 (m, 2H), 7.38-7.40 (m, 1 H), 7.22 (m, 1H), 7.14 ( m, 1H), 7.14 (s, 1H), 6.90 (m, 1H), 3.57 (s, 2H), 2.17 (s, 3H).

Beispiel 2Example 2 Charakterisierung der VerbindungenCharacterization of the compounds 2.1 Physikalisch-chemische Charakterisierung2.1 Physico-chemical characterization

Die getesteten Substanzen sind in organischen Lösungsmitteln (DMSO, CHCl3, Ethanol) bis zu Konzentrationen ≥ 1 M und in wässrigen Pufferlösungen bis mindestens 500 µM löslich. Alle Substanzen sind bei Raumtemperatur in fester Form mindestens 6 Monate und in wässrigen Puffern bei pH 7,5 mindestens 24 Stunden stabil. The tested substances are soluble in organic solvents (DMSO, CHCl 3 , ethanol) up to concentrations ≥ 1 M and in aqueous buffer solutions up to at least 500 µM. All substances are stable at room temperature in solid form for at least 6 months and in aqueous buffers at pH 7.5 for at least 24 hours.

Die Substanzen zeigen charakteristische spektroskopische Eigenschaften (Tabelle 1).

The substances show characteristic spectroscopic properties (Table 1).

Tabelle 1 zeigt die UV/Vis spektroskopischen Eigenschaften ausgewählter Verbindungen. Die Substanzen wurden in einer Konzentration von 50 µM bei Raumtemperatur in PBS gelöst und ein Spektrum von 190 nm bis 800 nm aufgenommen. Die Wellenlängen der dabei festgestellten Adsporptionsmaxima sind angegeben. Bei diesen Wellenlängen wurden dann die Extinktionskoeffizienten anhand der Steigung von Eichgeraden über den Konzentrationsbereich von 5 µM bis 100 µM der Substanzen ermittelt. Table 1 shows the UV / Vis spectroscopic properties of selected Links. The substances were in a concentration of 50 µM dissolved in PBS at room temperature and a spectrum from 190 nm to 800 nm added. The wavelengths of the detected Adsorption maxima are given. At these wavelengths then the extinction coefficients based on the slope of calibration lines over the concentration range from 5 µM to 100 µM of the substances determined.

2.2 Biochemische Eigenschaften2.2 Biochemical properties

Der Einfluss der Substanzen auf mehrere biochemische Parameter des Proteins p21ras wurde gemessen. Alle Substanzen haben bis zu einer Konzentration von 150 µM keinen Einfluss auf die intrinisische GTPase Aktivität des p21ras Proteins. Die Substanzen zeigen außerdem bis zu einer Konzentration von 500 µM keine Wirkung auf den spontanen Austausch von p21ras gebundenen Nukleotiden. Damit konnte ausgeschlossen werden, dass die Wirkungen auf die unspezifische Proteindenaturierung zurückzuführen sind. Ind9 aktiviert die GAP katalysierte GTPase Reaktion, während Ind11 diese inhibiert. Ind11 hemmt die Bindung des Ras Effektors Raf Kinase an p21ras (Tabelle 2). Tabelle 2 Die biochemischen Effekte von Sulindac, Sulindac Sulfid und von vier Inden-Derivaten (IND3, IND9, IND11a, IND12)

a Es werden mikromolare Konzentrationen gezeigt, bei denen die halbmaximale Hemmung der COX Aktivität erhalten wurde (erste Reihe) oder eine halbmaximale Hemmung (-) bzw. eine halbmaximale Aktivierung (+) der GAP-katalysierten p21ras GTPase gemessen wurde (zweite Reihe). In der dritten Reihe sind mikromolare Konzentrationen gezeigt, bei denen eine halbmaximale Hemmung (-) der P21ras/Raf Interaktion gemessen wurde.
b Die Daten für Sulindac und Sulindac Sulfid wurden aus neueren Publikationen entnommen (Hermann et al., 1998; Jung et al., 2000).
c Die vier Verbindungen IND3, IND9, IND11a und IND12 wurden ausgewählt, da sie die Proliferation von H-Ras transformierten MDCK-f3 Zellen bei niedrigeren Konzentrationen hemmten als die Proliferation von untransformierten Zellen. The influence of the substances on several biochemical parameters of the p21ras protein was measured. Up to a concentration of 150 µM, all substances have no influence on the intrinsic GTPase activity of the p21ras protein. Up to a concentration of 500 µM, the substances also show no effect on the spontaneous exchange of p21ras-bound nucleotides. It was thus ruled out that the effects can be attributed to the unspecific protein denaturation. Ind9 activates the GAP-catalyzed GTPase reaction, while Ind11 inhibits it. Ind11 inhibits the binding of the Ras effector Raf Kinase to p21ras (Table 2). Table 2 The biochemical effects of Sulindac, Sulindac sulfide and four indene derivatives (IND3, IND9, IND11a, IND12)

a Micromolar concentrations are shown at which the half-maximal inhibition of COX activity was obtained (first row) or a half-maximal inhibition (-) or a half-maximal activation (+) of the GAP-catalyzed p21ras GTPase was measured (second row). The third row shows micromolar concentrations at which a half-maximal inhibition (-) of the P21ras / Raf interaction was measured.
b The data for Sulindac and Sulindac sulfide were taken from recent publications (Hermann et al., 1998; Jung et al., 2000).
c The four compounds IND3, IND9, IND11a and IND12 were selected because they inhibited the proliferation of H-Ras transformed MDCK-f3 cells at lower concentrations than the proliferation of untransformed cells.

Tabelle 2 zeigt die biochemischen Effekte der vier Substanzen, die alle die Proliferation von Ras-transformierten MDCK-Ras Zellen bei geringeren Konzentrationen hemmen als die Proliferation von nicht transformierten Zellen (siehe Tabelle 3). Angegeben sind die mikromolaren Konzentrationen, die zur halbmaximalen Hemmung (-) bzw. Aktivierung (+) der betreffenden Aktivität oder Reaktion führen. Die COX Aktivität wurde in Samenbläschen aus Schaf gemessen (Jung et al., 2000). Die Werte für Sulindac Sulfid stammen aus Hermann et al. (1998) und Jung et al. (2000). Sulindac und Sulindac Sulfon haben keine Wirkung auf COX und Ras. Interessant ist, dass die Substanzen Ind9 und Ind12 bei geringeren Konzentrationen als Sulindac Sulfid die COX Aktivität inhibieren und Ind11a und Ind12 bei geringeren Konzentrationen als Sulindac Sulfid auf p21ras wirken. Table 2 shows the biochemical effects of the four substances, all of which Proliferation of Ras-transformed MDCK-Ras cells at lower levels Concentrations inhibit the proliferation of untransformed Cells (see Table 3). The micromolar are indicated Concentrations that are used for half-maximal inhibition (-) or activation (+) of the activity or reaction in question. The COX activity was measured in seminal vesicles from sheep (Jung et al., 2000). The values for Sulindac sulfide are from Hermann et al. (1998) and Jung et al. (2000). Sulindac and Sulindac sulfone have no effect on COX and Ras. It is interesting that the substances Ind9 and Ind12 at lower Concentrations as sulindac sulfide inhibit COX activity and Ind11a and Ind12 at lower concentrations than Sulindac sulfide on p21ras Act.

2.3 Cytotoxische und zellbiologische Wirkungen2.3 Cytotoxic and cell biological effects

Der Einfluss der neuen Substanzen auf Zellteilung und -wachstum wurde quantifiziert in einem kolorimetrischen Proliferationsassay mit 3-[4,5- Dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazoliumbromid (MTT) als Indikator für die Anzahl lebender Zellen (Denizot und Lang, 1986). Dazu wurde die Teilungsrate verschiedener Zelllinien in Konzentrationsabhängigkeit der Substanzen gemessen (Tabelle 3). The influence of the new substances on cell division and growth was quantified in a colorimetric proliferation assay with 3- [4,5- Dimethylthiazol-2-yl] -2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) as an indicator of the number of living cells (Denizot and Lang, 1986). This was the Division rate of different cell lines depending on the concentration Substances measured (Table 3).

Die Zellen wurden in 96-Loch-Platten kultiviert. Die Substanzen wurden als 1000fach konzentrierte Stammlösung in Endkonzentrationen von 10 nM bis 1 mM zugegeben. Nach 24 h wurde die Hälfte des Mediums abgenommen und durch serumfreies Medium ersetzt, das 5 mg/ml MTT enthielt. Nach weiteren 3 h wurden die Zellen lysiert durch Zugabe einer Mischung von 2- Butanol/2-Propanol/1 M HCl (16/8/1 v/v/v). Dann wurde die Absorption bei 540 nm in einem Mikroplatten-Leser gemessen. The cells were cultured in 96-well plates. The substances were considered 1000 times concentrated stock solution in final concentrations from 10 nM to 1 mM added. Half of the medium was removed after 24 hours and replaced with serum-free medium containing 5 mg / ml MTT. To for a further 3 h the cells were lysed by adding a mixture of 2- Butanol / 2-propanol / 1 M HCl (16/8/1 v / v / v). Then the absorption at 540 nm measured in a microplate reader.

Die gemessene Absorption wurde in Prozent der Absorption in Abwesenheit der Substanz umgerechnet, und die Daten gegen die Substanzkonzentration aufgetragen. Der jeweilige IC50 Wert (Substanzkonzentration, bei der die Anzahl der lebenden Zellen auf 50% gesunken ist) wurde dann aus der grafischen Auftragung bestimmt. Die dabei gemessenen wirksamen Konzentrationen liegen in ähnlichen Größenordnungen, wie die wirksamen Konzentrationen der Sulindac Metaboliten. The measured absorption was expressed as a percentage of the absorption in Absence of the substance converted, and the data against that Substance concentration applied. The respective IC50 value (Substance concentration at which the number of living cells to 50% has decreased) was then determined from the graph. The the effective concentrations measured are similar Orders of magnitude, such as the effective concentrations of Sulindac Metabolites.

Von allen in Tabelle 3 getesteten Substanzen wirkt Ind7a bei den geringsten Konzentrationen.

Of all substances tested in Table 3, Ind7a works at the lowest concentrations.

Tabelle 3 zeigt die Hemmung des Zellwachstums durch die jeweiligen Substanzen MTT Assay. Angegeben sind die mikromolaren Konzentrationen, die zu 50% Wachstumshemmung der jeweiligen Zelllinie führen. Außer Ind4 und Ind7 zeigen alle getesteten Substanzen die Hemmung der beiden Tumorzelllinien SW 480 und MDCK-Ras bei geringeren Konzentrationen als Sulindac. Interessant ist außerdem, dass die Substanzen Ind9, Ind11a und Ind12 bei geringeren Konzentrationen (fett gedruckt) die Vermehrung von Ras transformierten Zellen (MDCK-Ras) inhibieren als die Vermehrung der entsprechenden nicht transformierten Zelllinie (MDCK). Dies lässt auf eine hemmende Wirkung dieser drei Substanzen auf den Ras Signalweg schließen. Table 3 shows the inhibition of cell growth by the respective Substances MTT assay. The micromolar are indicated Concentrations that inhibit growth of 50% of the respective cell line to lead. Except Ind4 and Ind7, all tested substances show the Inhibition of the two tumor cell lines SW 480 and MDCK-Ras lower concentrations than Sulindac. It is also interesting that the Substances Ind9, Ind11a and Ind12 at lower concentrations (bold printed) the multiplication of Ras transformed cells (MDCK-Ras) inhibit as the multiplication of the corresponding non-transformed Cell line (MDCK). This suggests an inhibitory effect from these three Connect substances to the Ras signal path.

Beispiel 3Example 3 Hemmung der ZelltransformationInhibition of cell transformation 3.1 Zellsysteme zur Messung von biologischen Wirkungen3.1 Cell systems for measuring biological effects

Zahlreiche kultivierte Säugerzelllinien verändern durch stabile Transfektion mit einem oder zwei Proto-Onkogenen ihre morphologischen oder biochemischen Eigenschaften. Diese Zelllinien sind als Modell zur qualitativen und quantitativen Messung von Wirkungen von Substanzen geeignet, die tumorrelevante Signalwege beeinflussen. Numerous cultured mammalian cell lines change through stable transfection with one or two proto-oncogenes their morphological or biochemical properties. These cell lines are used as a model qualitative and quantitative measurement of effects of substances suitable that influence tumor-relevant signaling pathways.

MDCK Nierenzellen des Hundes sind eine immortalisierte, epitheliale Zelllinie. Die Zellen sind rundlich und wachsen in Einzelzellschicht, mit regelmäßigen Zell-Zellkontakten, ausgebildet durch das Zelladhäsionsprotein E-Cadherin. Durch stabile Transfektion mit dem onkogenen H-ras Gen verliegen die Zellen ihren epithelialen Charakter (Behrens et al., 1989). Sie sind spindelförmig und wachsen unpolarisiert übereinander ohne Zell-Zellkontakte, die Menge des Membran gebundenen E-Cadherins ist deutlich verringert. Diese Unterschiede lassen sich als Parameter nutzen zur Messung von Wirkungen von Substanzen auf die Transformation, ausgelöst durch das H-ras Gen. Dog's MDCK kidney cells are an immortalized, epithelial Cell line. The cells are plump and grow in a single cell layer regular cell-cell contacts, formed by the Cell adhesion protein E-Cadherin. By stable transfection with the oncogenic H-ras gene, the cells lay their epithelial character (Behrens et al., 1989). They are spindle-shaped and grow unpolarized one above the other without cell-cell contacts, the amount of membrane bound E-Cadherins is significantly reduced. These differences can be seen as Use parameters to measure the effects of substances on the Transformation triggered by the H-ras gene.

C57MG Zellen sind epitheliale Brustdrüsenzellen der Maus. Analog zu den MDCK Zellen verändern die Zellen ihre Morphologie und ihr Wachstumsverhalten nach Transformation mit einem transformierenden Onkogen (Shimizu et al., 1997). Zur Messung von Wirkungen auf den tumorrelevanten Wnt/APC/β-Catenin Signalweg, können Wnt-transfizierte C57MG Zellen verwendet werden. C57MG cells are mouse epithelial mammary cells. Analogous to the MDCK cells change their morphology and their cells Growth behavior after transformation with a transforming Oncogene (Shimizu et al., 1997). To measure effects on the tumor-relevant Wnt / APC / β-catenin signaling pathway can be Wnt-transfected C57MG cells can be used.

Ein weiteres Beispiel für ein geeignetes Zellsystem zur Messung von Wirkungen auf die Zelltransformation sind primäre Fibroblasten des Rattenembryos. Nach Transformation mit den Onkogenen Ras und Myc bilden diese Zellen Mikrotumoren (sogenannte Foci), deren Anzahl ein Maß ist für das Ausmaß der Transformation. Bilden sich nach Transfektion unter Behandlung mit einer Substanz weniger Foci als bei den unbehandelten Zellen aus, so kann auf eine transformationshemmende Wirkung geschlossen werden.

Another example of a suitable cell system for measuring effects on cell transformation are primary fibroblasts of the rat embryo. After transformation with the oncogenes Ras and Myc, these cells form microtumors (so-called foci), the number of which is a measure of the extent of the transformation. If fewer foci form after transfection with treatment with a substance than with the untreated cells, a transformation-inhibiting effect can be concluded.

3.2 Protokoll des Assays3.2 Protocol of the assay

Zellen der betreffenden Zelllinie werden in 96-Loch-Mikrotiterplatten kultiviert. Die zu testende Substanz wird direkt ins Medium gegeben. Nach einer Inkubationszeit von 8 h werden die betreffenden Parameter analysiert. Zur besseren Sichtbarmachung der zellulären Morphologie können die Zellen mit einem Antikörper gegen F-Actin vor der lichtmikroskopischen Analyse immunmarkiert werden (Abb. 3). Zellkontakte können durch Immunmarkierung von E-Cadherin sichtbar gemacht werden. Die jeweiligen gebundenen primären Antikörper werden mit sekundären Antikörpern detektiert, die an Fluoreszenzfarbstoffe gekoppelt sind. Cells from the cell line in question are cultivated in 96-well microtiter plates. The substance to be tested is added directly to the medium. After an incubation period of 8 hours, the parameters in question are analyzed. To better visualize the cellular morphology, the cells can be immunolabelled with an antibody against F-actin before light microscopic analysis ( Fig. 3). Cell contacts can be made visible by immunolabelling E-Cadherin. The bound primary antibodies are detected with secondary antibodies, which are coupled to fluorescent dyes.

Um die im Verlaufe der Rücktransformation auftretenden feinstrukturellen Veränderungen der Zelloberfläche darzustellen und zu bewerten, müssen die Zellen mit einem Rasterelektronenmikroskop (REM) untersucht werden. Die Zellen werden auf Thermanox-Objektträgern kultiviert und mit Glutaraldehyd fixiert. Die Zellen werden dann entwässert in einer steigenden Alkoholreihe und in einer Kritisch-Punkt-Trocknungsanlage mit CO2 als Intermedium getrocknet. Um bei der Betrachtung im Elektronenmikroskop Aufladungs-Artefakte zu vermeiden, werden die Zellen zuvor mit einer leitenden, 5 nm dicken Goldschicht bedampft. Die so behandelten Zellen werden mit einem REM (Hitachi-S800) analysiert. Die Zelloberflächenmorphologie wird bei einer Beschleunigungsspannung von 20 kV und einem Arbeitsabstand von 10 mm mit dem Signal der Sekundärelektronen abgebildet. In order to visualize and evaluate the fine structural changes in the cell surface that occur in the course of the back transformation, the cells must be examined with a scanning electron microscope (SEM). The cells are cultivated on Thermanox slides and fixed with glutaraldehyde. The cells are then dewatered in an increasing alcohol series and dried in a critical point drying system with CO 2 as an intermediate. In order to avoid charging artefacts when viewed in an electron microscope, the cells are first vapor-coated with a conductive, 5 nm thick gold layer. The cells treated in this way are analyzed with an SEM (Hitachi-S800). The cell surface morphology is imaged at an acceleration voltage of 20 kV and a working distance of 10 mm with the signal of the secondary electrons.

3.4 Ergebnisse für Ind123.4 Results for Ind12

Der Übergang in eine Tumorzelle (Transformation) durch das onkogene Ras- Gen wird durch Ind12 aufgehoben. In Gegenwart von 100 µM Ind12 ändern Ras transformierte MDCK Zellen (MDCK-Ras) ihre Morphologie und ähneln untransformierten Zellen. Die Menge des Zelladhäsionsproteins Cadherin, die durch die Transformation deutlich verringert wird, steigt wieder an. Damit korreliert die zunehmende Anzahl von mikroskopisch sichtbaren Zell-Zellkontakten nach Ind12 Behandlung. Das Onkoprotein β- Catenin, das in proliferierenden und Ras transformierenden Zellen diffus im Cytoplasma und vor allem im Kern lokalisiert, findet sich nach Ind12 Behandlung ausschließlich an der inneren Seite der Zellmembran, wo es auch in normalen, nicht proliferierenden Zellen lokalisiert ist. Die Reversion der Ras Transformation durch Ind12 ist auf eine direkte Wirkung auf den Ras Signalweg zurückzuführen. Die Aktivität des Ras Effektors Raf Kinase ist nach Behandlung der Zellen mit Ind12 deutlich verringert. Außerdem ist die gemessene Menge an phosphorylierter und damit aktivierter MAP Kinase geringer in Ind12 behandelten Zellen als in unbehandelten Zellen. The transition to a tumor cell (transformation) through the oncogenic ras Gen is canceled by Ind12. In the presence of 100 µM Ind12 Ras transformed MDCK cells (MDCK-Ras) change their morphology and resemble untransformed cells. The amount of cell adhesion protein Cadherin, which is significantly reduced by the transformation, increases back to. This correlates with the increasing number of microscopic visible cell-cell contacts after Ind12 treatment. The oncoprotein β- Catenin, which diffuses in proliferating and Ras transforming cells According to Ind12, the cytoplasm and especially localized in the nucleus Treatment only on the inner side of the cell membrane, where it is also localized in normal, non-proliferating cells. The reversion the Ras transformation through Ind12 is said to have a direct effect on the Ra's signaling pathway. The activity of the Ras effector Raf Kinase is significantly reduced after treatment of the cells with Ind12. Besides, is the measured amount of phosphorylated and thus activated MAP Kinase lower in Ind12 treated cells than in untreated cells.

Anhand verschiedener Parameter (Morphologie, DNA Fragmentierung, Markerenzyme) konnte gezeigt werden, dass Ind12 auch Apoptose von bestimmten Tumorzellen verursachen kann. Der stärkste Apoptose induzierende Effekt konnte bei Tumorzellen der Maus beobachtet werden, die mit dem Onkogen Wnt transformiert worden war. Dieser Zelltyp gilt als Zellmodell für menschliche Tumoren mit Mutationen im APC Gen oder im β- Catenin-Gen. Based on various parameters (morphology, DNA fragmentation, Marker enzymes) it could be shown that Ind12 is also apoptosis of can cause certain tumor cells. The strongest apoptosis inducing effect could be observed in mouse tumor cells which had been transformed with the oncogene Wnt. This cell type is considered Cell model for human tumors with mutations in the APC gene or in the β- Catenin gene.

Beispiel 4Example 4 Ergebnisse für weitere SubstanzenResults for other substances

Die Ergebnisse für weitere getestete Substanzen sind in den Tabellen 5 und 6 dargestellt. Tabelle 5



Tabelle 6



The results for other substances tested are shown in Tables 5 and 6. Table 5



Table 6



Vorteile der neuen SubstanzenAdvantages of the new substances

Gegenüber Sulindac haben die neuen Substanzen mehrere Vorteile: Bessere Löslichkeit und höhrere Stabilität in wässrigen Lösungen, keine spontane Reduktion oder Oxidation und vor allem die geringere Wirkungskonzentration. Publikationen Arber et al., Gastroenterology 113 (1998), 1892-1900;
Behrens et al., J. Cell Biol. 108 (1989), 2435-2447;
Belliveau und Graham, Dis. Col. Rect. 27 (1984), 53-54;
Bos, Cancer Res. 49 (1989), 4682-4689;
Chan et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95 (1998), 681-686;
Chiu et al., Cancer Res. 57 (1997), 4267-4273;
Duggan et al., J. Pharmacol. Exp. Therap. 201 (1977), 8-13;
Giardiello, Cancer Metast. Rev. 13 (1994), 279-283;
Green et al., Lancet 1 (1977), 804;
He et al., Cell 99 (1999), 335-345;
Herrmann et al., Oncogene 17 (1998), 1969-1776;
Jung et al., Pharm. Pharmacol. Commun. 6 (2000), 217-221;
Land et al., Nature 304 (1983), 596-602;
Luk, Journal Suisse des Medicine 126 (1996), 801-812;
Pamukcu und Piazza, United States Patent 6,046,199 (2000);
Pasricha et al., Gastroenterology 109 (1995), 994-998;
Piazza et al., Cancer Res. 57 (1997a), 2909-2915;
Piazza et al., Cancer Res. 57 (1997b), 2452-2459;
Qiao et al., Biochimica et Biophysica Acta 1258 (1995), 215-223;
Rao et al., Cancer Res. 55 (1995), 1464-1472;
Reynolds et al., Curr. Med. Res. & Opin. 4 (1977), 485-491;
Roth und Kleemann, in: Arzneistoffsynthese, Thieme Verlag 1982, 73-74;
Shiff et al., J. Clin. Invest. 96 (1995), 491-503;
Shimizu et al., Cell Growth Differ. 8 (1997), 1349-1358;
Sigal et al., Anti-cancer Drug Design 2 (1987), 107-115;
Sperl, United States Patent 6,020,379 (2000);
Thompson et al., Cancer Res. 57 (1997), 267-271;
Thompson et al., Cancer Res. 60 (2000), 3328-3342;
Vane und Botting, Scandin. J. Rheumatology 102 (1996), 9-21;
Winde et al., Dis. Col. Rect. 38 (1995), 813-83. The new substances have several advantages over Sulindac: better solubility and greater stability in aqueous solutions, no spontaneous reduction or oxidation and, above all, the lower concentration of activity. Publications Arber et al., Gastroenterology 113 (1998), 1892-1900;
Behrens et al., 1989, J. Cell Biol. 108: 2435-2447;
Belliveau and Graham, Dis. Col. Rect. 27: 53-54 (1984);
Bos, Cancer Res. 49 (1989), 4682-4689;
Chan et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95: 681-686 (1998);
Chiu et al., Cancer Res. 57 (1997), 4267-4273;
Duggan et al., J. Pharmacol. Exp. Therap. 201: 8-13 (1977);
Giardiello, Cancer Metast. Rev. 13 (1994) 279-283;
Green et al., 1977, Lancet 1: 804;
He et al. (1999) Cell 99: 335-345;
Herrmann et al., Oncogene 17 (1998), 1969-1776;
Jung et al., Pharm. Pharmacol. Commun. 6: 217-221 (2000);
Land et al. (1983) Nature 304: 596-602;
Luk, Journal Suisse des Medicine 126 (1996), 801-812;
Pamukcu and Piazza, United States Patent 6,046,199 (2000);
Pasricha et al., 1995 Gastroenterology 109: 994-998;
Piazza et al., Cancer Res. 57 (1997a), 2909-2915;
Piazza et al., Cancer Res. 57 (1997b), 2452-2459;
Qiao et al., 1995, Biochimica et Biophysica Acta 1258: 215-223;
Rao et al., Cancer Res. 55 (1995), 1464-1472;
Reynolds et al., Curr. Med. Res. & Opin. 4: 485-491 (1977);
Roth and Kleemann, in: Drug Synthesis, Thieme Verlag 1982, 73-74;
Shiff et al., J. Clin. Invest. 1995, 96: 491-503;
Shimizu et al., Cell Growth Differ. 8: 1349-1358 (1997);
Sigal et al., Anti-cancer Drug Design 2 (1987), 107-115;
Sperl, United States Patent 6,020,379 (2000);
Thompson et al., Cancer Res. 57 (1997), 267-271;
Thompson et al., Cancer Res. 60 (2000), 3328-3342;
Vane and Botting, Scandin. J. Rheumatology 102: 9-21 (1996);
Winde et al., Dis. Col. Rect. 38: 813-83 (1995).

Claims (20)

1. Verbindungen der allgemeinen Formeln (I) oder (II):


worin die Substituenten R1 bis R11 gleich oder verschieden sind und jeweils unabhängig für Wasserstoff, Deuterium, Halogen, eine lineare, verzweigte oder cyclische, gesättigte oder ungesättigte, gegebenenfalls substituierte Kohlenwasserstoffgruppe mit bis zu 8 Kohlenstoffatomen, z. B. eine Alkyl-, Cycloalkyl-, Aryl-, Alkaryl- oder Aralkylgruppe, die gegebenenfalls über ein O-Atom, ein S-Atom oder eine Aminogruppe an das Grundgerüst gebunden ist, z. B. eine Alkoxygruppe wie Methoxy, eine Thioalkylgruppe wie Methylsulfid oder eine einfach oder zweifach mit Kohlenwasserstoffgruppen substituierte Aminogruppe wie Methylamino, Dimethylamino oder Ethylylamino, Nitro, Cyano, Carboxy, Sulfat, Hydroxy, Hydroxymethyl, Amino, Amidino, Guanidino oder Aminoacetat steht, wobei die Substitution vorzugsweise durch eine oder mehrere Gruppen ausgewählt aus Halogen, Amino, Cyano, Carboxyl, geradkettiges oder verzweigtes Alkoxy mit 1-6 Kohlenstoffatomen oder Hydroxy erfolgt, und wobei gegebenenfalls zwei benachbarte Substituenten miteinander verbrückt sind, um ein gesättigtes oder ungesättigtes, gegebenenfalls heterocyclisches Ringsystem zu ergeben,
der Substituent Z für Nitro, Cyano, Carboxy, Sulfat, Hydroxy, Hydroxymethyl, Methoxy, Amidino, Guanidino, Aminoacetat oder für einen Rest CO2R12 steht, wobei R12 eine lineare, verzweigte oder cyclische, gesättigte oder ungesättigte, gegebenenfalls substituierte Kohlenwasserstoffgruppe oder eine Alkoxygruppe mit 1-8 Kohlenstoffatomen steht, wobei die Substitution vorzugsweise durch eine oder mehrere Gruppen ausgewählt aus Halogen, Amino, Cyano, Carboxy, geradkettiges oder verzweigtes Alkoxy mit 1-6 Kohlenstoffatomen oder Hydroxy erfolgt,
und der Substituent X für Sauerstoff, Schwefel, einen Rest CR13R14 oder NR15 steht, wobei R13, R14 und R15 jeweils unabhängig für Wasserstoff oder für eine lineare, verzweigte oder cyclische, gesättigte oder ungesättigte, gegebenenfalls substituierte Kohlenwasserstoffgruppe, eine Alkylthiogruppe oder eine Alkoxygruppe mit 1-8 Kohlenstoffatomen, steht, wobei die Substitution vorzugsweise durch eine oder mehrere Gruppen ausgewählt aus Halogen, Amino, Cyano, Carboxy, geradkettiges oder verzweigtes Alkoxy mit 1-6 Kohlenstoffatomen oder Hydroxy erfolgt, oder Salze und Isomere davon. 1. Compounds of the general formulas (I) or (II):


wherein the substituents R 1 to R 11 are the same or different and each independently for hydrogen, deuterium, halogen, a linear, branched or cyclic, saturated or unsaturated, optionally substituted hydrocarbon group with up to 8 carbon atoms, e.g. B. an alkyl, cycloalkyl, aryl, alkaryl or aralkyl group, which is optionally bonded to the backbone via an O atom, an S atom or an amino group, e.g. B. an alkoxy group such as methoxy, a thioalkyl group such as methyl sulfide or an amino group substituted once or twice with hydrocarbon groups such as methylamino, dimethylamino or ethyllylamino, nitro, cyano, carboxy, sulfate, hydroxy, hydroxymethyl, amino, amidino, guanidino or aminoacetate, where the Substitution is preferably carried out by one or more groups selected from halogen, amino, cyano, carboxyl, straight-chain or branched alkoxy having 1-6 carbon atoms or hydroxyl, and where appropriate two adjacent substituents are bridged to one another to form a saturated or unsaturated, optionally heterocyclic ring system yield,
the substituent Z represents nitro, cyano, carboxy, sulfate, hydroxy, hydroxymethyl, methoxy, amidino, guanidino, aminoacetate or a radical CO 2 R 12 , where R 12 is a linear, branched or cyclic, saturated or unsaturated, optionally substituted hydrocarbon group or an alkoxy group with 1-8 carbon atoms, the substitution preferably being carried out by one or more groups selected from halogen, amino, cyano, carboxy, straight-chain or branched alkoxy with 1-6 carbon atoms or hydroxy,
and the substituent X represents oxygen, sulfur, a radical CR 13 R 14 or NR 15 , where R 13 , R 14 and R 15 each independently represent hydrogen or a linear, branched or cyclic, saturated or unsaturated, optionally substituted hydrocarbon group, an alkylthio group or an alkoxy group having 1-8 carbon atoms, the substitution preferably being carried out by one or more groups selected from halogen, amino, cyano, carboxy, straight-chain or branched alkoxy having 1-6 carbon atoms or hydroxy, or salts and isomers thereof , 2. Verbindungen nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass Z für Carboxyl steht. 2. Compounds according to claim 1, characterized, that Z stands for carboxyl. 3. Verbindungen nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass X für Sauerstoff oder Schwefel oder CR13R14 steht. 3. Compounds according to claim 1 or 2, characterized in that X represents oxygen or sulfur or CR 13 R 14 . 4. Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, dass R3 für Wasserstoff, Halogen, Hydroxy, eine gegebenenfalls substituierte Kohlenwasserstoffgruppe oder eine Alkoxygruppe steht. 4. Compounds according to any one of claims 1 to 3, characterized in that R 3 represents hydrogen, halogen, hydroxy, an optionally substituted hydrocarbon group or an alkoxy group. 5. Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 4 ausgewählt aus den in Abb. 2 und Abb. 6 dargestellten Verbindungen oder Salzen und Isomeren davon. 5. Compounds according to one of claims 1 to 4 selected from the compounds shown in Fig. 2 and Fig. 6 or salts and isomers thereof. 6. Verwendung von Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 5 als Modulatoren des Ras Proteins. 6. Use of compounds according to one of claims 1 to 5 as modulators of the Ras protein. 7. Verwendung nach Anspruch 6 als Inhibitoren der Wechselwirkung von Ras und Raf Kinase. 7. Use according to claim 6 as inhibitors of the interaction by Ras and Raf Kinase. 8. Verwendung nach Anspruch 6 oder 7 als Inhibitoren der Zellproliferation. 8. Use according to claim 6 or 7 as inhibitors of Cell proliferation. 9. Verwendung nach einem der Ansprüche 6 bis 8 als Inhibitoren einer durch Ras vermittelten Zelltransformation. 9. Use according to one of claims 6 to 8 as an inhibitor Ras-mediated cell transformation. 10. Verwendung nach einem der Ansprüche 6 bis 9 als Stimulatoren der Apoptose oder als Mittel zur Rücktransformation von Tumorzellen. 10. Use according to one of claims 6 to 9 as stimulators of Apoptosis or as a means of re-transforming tumor cells. 11. Pharmazeutische Zusammensetzung, dadurch gekennzeichnet, dass sie als Wirkstoff eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 5 zusammen mit physiologisch verträglichen Hilfs- und Trägerstoffen enthält. 11. Pharmaceutical composition, characterized, that they are a compound as claimed in one of claims 1 to 5 together with physiologically compatible auxiliary and Contains carriers. 12. Verwendung einer Zusammensetzung nach Anspruch 11 zur Prävention oder Behandlung von Krankheiten, die mit einer Störung der Zellproliferation assoziiert sind. 12. Use of a composition according to claim 11 for Prevention or treatment of diseases with a disorder associated with cell proliferation. 13. Verwendung nach Anspruch 12 zur Prävention oder Behandlung von Tumorerkrankungen oder von entzündlichen Erkrankungen. 13. Use according to claim 12 for the prevention or treatment of Tumor diseases or inflammatory diseases. 14. Verwendung nach Anspruch 13 zur Prävention oder Behandlung von einer mit dem einer Ras Protein assoziierten Tumorerkrankung. 14. Use according to claim 13 for the prevention or treatment of a tumor disease associated with a Ras protein. 15. Verwendung nach Anspruch 13 zur Prävention oder Behandlung von einer mit dem Wnt Protein, dem APC Protein oder/und dem β- Catenin Protein assoziierten Tumorerkrankung. 15. Use according to claim 13 for the prevention or treatment of one with the Wnt protein, the APC protein and / or the β- Catenin protein-associated tumor disease. 16. Verwendung nach einem der Ansprüche 12 bis 15, dadurch gekennzeichnet, dass man den Wirkstoff in einer Dosierung von 0,1 bis 100 mg pro kg Körpergewicht verabreicht. 16. Use according to one of claims 12 to 15, characterized, that the active ingredient in a dosage of 0.1 to 100 mg per kg body weight administered. 17. Verwendung nach einem der Ansprüche 12 bis 16, dadurch gekennzeichnet, dass man den Wirkstoff in Kombination mit anderen Antitumormitteln verabreicht. 17. Use according to one of claims 12 to 16, characterized, that you can combine the active ingredient with others Anti-tumor agents administered. 18. Verwendung der Zelllinie MDCK (epitheliale Nierenzellen des Hundes) oder/und der Zelllinie C57MG (epitheliale Brustdrüsenzellen der Maus) als Testsysteme zum Nachweis der biologischen Wirksamkeit von Testsubstanzen. 18. Use of the MDCK cell line (dog epithelial kidney cells) or / and the cell line C57MG (epithelial mammary cells of the Mouse) as test systems to demonstrate biological effectiveness of test substances. 19. Verwendung nach Anspruch 18 zum Nachweis der Antitumorwirksamkeit von Testsubstanzen, wobei die Zelllinien mit einem Onkogen, insbesondere dem ras- oder dem wnt-Onkogen transfiziert sind. 19. Use according to claim 18 for the detection of Antitumor activity of test substances, the cell lines with an oncogene, especially the ras or wnt oncogene are transfected. 20. Verwendung nach Anspruch 19, umfassend die Bestimmung eines oder mehrerer Messparameter ausgewählt aus (i) Morphologie, (ii) Apoptose oder/und (iii) Anzahl lebender Zellen. 20. Use according to claim 19, comprising determining a or several measurement parameters selected from (i) morphology, (ii) Apoptosis or / and (iii) number of living cells.
DE10163426A 2001-12-21 2001-12-21 New 1-(substituted methylene)-1H-indene derivatives, are Ras protein modulators useful for treating tumor or inflammatory diseases Withdrawn DE10163426A1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE10163426A DE10163426A1 (en) 2001-12-21 2001-12-21 New 1-(substituted methylene)-1H-indene derivatives, are Ras protein modulators useful for treating tumor or inflammatory diseases

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE10163426A DE10163426A1 (en) 2001-12-21 2001-12-21 New 1-(substituted methylene)-1H-indene derivatives, are Ras protein modulators useful for treating tumor or inflammatory diseases

Publications (1)

Publication Number Publication Date
DE10163426A1 true DE10163426A1 (en) 2003-07-03

Family

ID=7710476

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE10163426A Withdrawn DE10163426A1 (en) 2001-12-21 2001-12-21 New 1-(substituted methylene)-1H-indene derivatives, are Ras protein modulators useful for treating tumor or inflammatory diseases

Country Status (1)

Country Link
DE (1) DE10163426A1 (en)

Cited By (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005112921A3 (en) * 2004-04-26 2007-04-26 Univ Vanderbilt Indoleacetic acid and indenacetic acid derivatives as therapeutic agents with reduced gastrointestinal toxicity
US7736624B2 (en) 2006-06-19 2010-06-15 Univ Vanderbilt Methods and compositions for diagnostic and therapeutic targeting of COX-2
WO2011140525A2 (en) 2010-05-06 2011-11-10 Sanford-Burnham Medical Research Institute Methods and compositions related to a retinoid receptor-selective pathway
EP2701504A4 (en) * 2011-04-01 2014-09-10 Southern Res Inst SULINDAC DERIVATIVES, THEIR USE AND PREPARATION
US9346803B2 (en) 2011-10-17 2016-05-24 Vanderbilt University Indomethacin analogs for the treatment of castrate-resistant prostate cancer
WO2016100546A1 (en) * 2014-12-16 2016-06-23 Adt Pharmaceuticals, Inc. Method of treating or preventing ras-mediated diseases
WO2017106520A1 (en) * 2015-12-16 2017-06-22 Adt Pharmaceuticals, Inc. Compounds, compositions and methods of treating cancer
EP3269365A1 (en) 2016-07-14 2018-01-17 Friedrich-Alexander-Universität Erlangen-Nürnberg Kras inhibitor for use in treating cancer
JP2018505145A (en) * 2014-12-16 2018-02-22 エーディーティー ファーマシューティカルズ，エルエルシー Indenyl compounds, pharmaceutical compositions, and medical uses thereof
US11186596B2 (en) 2018-04-26 2021-11-30 Adt Pharmaceuticals, Llc Anticancer indenes, indanes, azaindenes, azaindanes, pharmaceutical compositions and uses
WO2021249529A1 (en) * 2020-06-12 2021-12-16 Nucmito Pharmaceuticals Co., Ltd. Indene compounds, pharmaceutical compositions thereof, and their therapeutic applications
WO2022242582A1 (en) * 2021-05-15 2022-11-24 Nucmito Pharmaceuticals Company Limited Indene compounds, pharmaceutical compositions thereof, and their therapeutic applications
WO2024104384A1 (en) * 2022-11-16 2024-05-23 Nucmito Pharmaceuticals Co. Ltd. Indene compounds, pharmaceutical compositions thereof, and their therapeutic applications

Cited By (45)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8168656B2 (en) 2004-04-26 2012-05-01 Vanderbilt University Indoleacetic acid and indenacetic acid derivatives as therapeutic agents with reduced gastrointestinal toxicity
JP2007534702A (en) * 2004-04-26 2007-11-29 バンダービルト・ユニバーシティ Indoleacetic acid and indeneacetic acid derivatives as therapeutic agents with low gastrointestinal toxicity
US7491744B2 (en) 2004-04-26 2009-02-17 Vanderbilt University Indoleacetic acid and indenacetic acid derivatives as therapeutic agents with reduced gastrointestinal toxicity
WO2005112921A3 (en) * 2004-04-26 2007-04-26 Univ Vanderbilt Indoleacetic acid and indenacetic acid derivatives as therapeutic agents with reduced gastrointestinal toxicity
US8865130B2 (en) 2006-06-19 2014-10-21 Vanderbilt University Methods and compositions for diagnostic and therapeutic targeting of COX-2
US8143302B2 (en) 2006-06-19 2012-03-27 Vanderbilt University Methods and compositions for diagnostic and therapeutic targeting of COX-2
US7736624B2 (en) 2006-06-19 2010-06-15 Univ Vanderbilt Methods and compositions for diagnostic and therapeutic targeting of COX-2
US9611235B2 (en) 2010-05-06 2017-04-04 Sanford-Burnham Medical Research Institute Methods and compositions related to a retinoid receptor-selective pathway
WO2011140525A2 (en) 2010-05-06 2011-11-10 Sanford-Burnham Medical Research Institute Methods and compositions related to a retinoid receptor-selective pathway
CN103002887A (en) * 2010-05-06 2013-03-27 桑福德-伯纳姆医学研究所 Methods and compositions involving retinoid receptor selective pathways
EP2571497A4 (en) * 2010-05-06 2013-12-04 Sanford Burnham Med Res Inst METHODS AND COMPOSITIONS RELATING TO THE SELECTIVE CHANNEL OF RETINOID RECEPTORS
US10087156B2 (en) 2010-05-06 2018-10-02 Sanford Burnham Prebys Medical Discovery Institute Methods and compositions related to retinoid receptor-selective pathway
CN107050007A (en) * 2010-05-06 2017-08-18 桑福德 - 伯纳姆医学研究所 It is related to the method and composition of Retinoid receptor selective channel
CN107050007B (en) * 2010-05-06 2020-06-30 桑福德-伯纳姆医学研究所 Methods and compositions involving retinoid receptor selective pathways
EP2701504A4 (en) * 2011-04-01 2014-09-10 Southern Res Inst SULINDAC DERIVATIVES, THEIR USE AND PREPARATION
AU2012236275B2 (en) * 2011-04-01 2016-09-08 Southern Research Institute Derivatives of sulindac, use thereof and preparation thereof
US9365528B2 (en) 2011-04-01 2016-06-14 Southern Research Institute Derivatives of sulindac, use thereof and preparation thereof
US11738004B2 (en) 2011-10-17 2023-08-29 Vanderbilt University Indomethacin analogs for the treatment of castrate-resistant prostate cancer
US10398678B2 (en) 2011-10-17 2019-09-03 Vanderbilt University Indomethacin analogs for the treatment of castrate-resistant prostate cancer
US9346803B2 (en) 2011-10-17 2016-05-24 Vanderbilt University Indomethacin analogs for the treatment of castrate-resistant prostate cancer
US9895351B2 (en) 2011-10-17 2018-02-20 Vanderbilt University Indomethacin analogs for the treatment of castrate-resistant prostate cancer
US9931315B2 (en) 2014-12-16 2018-04-03 Adt Pharmaceuticals, Inc. Method of selectively inhibiting Ras-mediated tumor growth in humans
US11130744B2 (en) 2014-12-16 2021-09-28 Adt Pharmaceuticals, Llc Indenyl compounds, pharmaceutical compositions, and medical uses thereof
US12479813B2 (en) 2014-12-16 2025-11-25 Adt Pharmaceuticals, Llc Method of therapeutically treating cancer
WO2016100546A1 (en) * 2014-12-16 2016-06-23 Adt Pharmaceuticals, Inc. Method of treating or preventing ras-mediated diseases
US10526307B2 (en) 2014-12-16 2020-01-07 Adt Pharmaceuticals, Llc Indenyl compounds, pharmaceutical compositions, and medical uses thereof
JP2020079307A (en) * 2014-12-16 2020-05-28 エーディーティー ファーマシューティカルズ，エルエルシー Indenyl compounds, pharmaceutical compositions, and medical uses thereof
EP3666268A1 (en) * 2014-12-16 2020-06-17 ADT Pharmaceuticals, LLC Method of treating or preventing ras-mediated diseases
EP3233794B1 (en) * 2014-12-16 2023-02-01 ADT Pharmaceuticals, LLC Indenyl compounds, pharmaceutical compositions and medical uses thereof
US10975054B2 (en) 2014-12-16 2021-04-13 Adt Pharmaceuticals, Llc Indenyl compounds, pharmaceutical compositions, and medical uses thereof
US10981886B2 (en) 2014-12-16 2021-04-20 Adt Pharmaceuticals, Llc Indenyl compounds, pharmaceutical compositions, and medical uses thereof
US11104658B2 (en) 2014-12-16 2021-08-31 Adt Pharmaceuticals, Llc Method of treating or preventing Ras-mediated diseases
JP2018505145A (en) * 2014-12-16 2018-02-22 エーディーティー ファーマシューティカルズ，エルエルシー Indenyl compounds, pharmaceutical compositions, and medical uses thereof
US11407727B2 (en) 2014-12-16 2022-08-09 Adt Pharmaceuticals, Llc Indenyl compounds, pharmaceutical compositions, and medical uses thereof
US11198679B2 (en) 2014-12-16 2021-12-14 Adt Pharmaceuticals, Llc Method of treating or preventing Ras-mediated diseases
WO2017106520A1 (en) * 2015-12-16 2017-06-22 Adt Pharmaceuticals, Inc. Compounds, compositions and methods of treating cancer
EP3269365A1 (en) 2016-07-14 2018-01-17 Friedrich-Alexander-Universität Erlangen-Nürnberg Kras inhibitor for use in treating cancer
WO2018011351A2 (en) 2016-07-14 2018-01-18 Friedrich-Alexander-Universität Erlangen-Nürnberg Kras inhibitor for use in treating cancer
US11186596B2 (en) 2018-04-26 2021-11-30 Adt Pharmaceuticals, Llc Anticancer indenes, indanes, azaindenes, azaindanes, pharmaceutical compositions and uses
US11680073B2 (en) 2018-04-26 2023-06-20 Adt Pharmaceuticals, Llc Anticancer indenes, indanes, azaindenes, azaindanes, pharmaceutical compositions and uses
WO2021249529A1 (en) * 2020-06-12 2021-12-16 Nucmito Pharmaceuticals Co., Ltd. Indene compounds, pharmaceutical compositions thereof, and their therapeutic applications
JP2023529011A (en) * 2020-06-12 2023-07-06 ヌクミト ファーマシューティカルズ シーオー．， エルティーディー． Indene compounds, pharmaceutical compositions thereof, and their therapeutic applications
CN116472034A (en) * 2020-06-12 2023-07-21 藤济(厦门)生物医药科技有限公司 Indene compounds, their pharmaceutical compositions and their therapeutic use
WO2022242582A1 (en) * 2021-05-15 2022-11-24 Nucmito Pharmaceuticals Company Limited Indene compounds, pharmaceutical compositions thereof, and their therapeutic applications
WO2024104384A1 (en) * 2022-11-16 2024-05-23 Nucmito Pharmaceuticals Co. Ltd. Indene compounds, pharmaceutical compositions thereof, and their therapeutic applications

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0001981B1 (en) 9-(omega-heteroarylamino-alkylamino)-erythromycins, their salts, processes for their preparation and medicaments containing them
DE10163426A1 (en) New 1-(substituted methylene)-1H-indene derivatives, are Ras protein modulators useful for treating tumor or inflammatory diseases
DE60005504T2 (en) CHINOLINE DERIVATIVES AS MEK ENZYME INHIBITORS
DE60023660T2 (en) ANTIZYM MODULATORS AND THEIR USE
DE69522490T2 (en) platinum complexes
DE60011755T2 (en) CALCIUM CHANNEL BLOCKER AS ANTICREMENT
EP0708640B1 (en) Pharmaceutical preparations with an active principle containing modified amidin groups
EP2467361A1 (en) Novel quinoline-hepcidine antagonists
EP2342185B1 (en) Sulfon substituted aniline pyrimidine derivatives as cdk inhibitors, their manufacture and use as medicine
DE112007003375B4 (en) Imidazole derivatives that induce apoptosis and their therapeutic use
DE3603577A1 (en) NEW SUBSTITUTED 2,4-DIAMINO-5-BENZYLPYRIMIDINE, THEIR PRODUCTION AND USE THEREOF AS A MEDICINE WITH ANTIBACTERIAL EFFECTIVENESS
Oggu et al. Synthesis, cytotoxicity and molecular docking studies of chalcone incorporated 1, 2, 3-triazol-1, 3, 5-triazin-quinazoline as anti-cancer agents
DE69813362T2 (en) Sulfonylpyrimidine derivatives with anti-tumor effects
DE69823707T2 (en) 2,4-bis [(4-amidino) phenyl] furans as anti-pneumocystis carinii agents
DE69623760T2 (en) POTASSIUM ION CHANNEL BLOCKER
EP0769296A1 (en) Use of isoxazole- and crotonamide derivatives for the manufacture of a medicament for the treatment of cancers
DE2234651B2 (en) SQUARE CLAMP ON 1- (P-CHLORBENZOYL) - 5-METHOXY-2-METHYL-3-INDOL SQUARE CLAMP ON -ACETOXYACETIC ACID, ITS SALTS WITH BASES, PROCESS FOR THEIR PRODUCTION AND PHARMACOLOGICAL PREPARATIONS
WO2004024676A1 (en) Compounds for modulating the glycolosis enzyme complex and/or transaminase complex
DE2830007C3 (en) Inosadiamine derivatives, process for their preparation and their use as anti-tumor agents
DE69922378T2 (en) OXIDIZED SULFURIZED DISTAMYCINE DERIVATIVES, METHOD FOR THE PRODUCTION THEREOF, AND THEIR USE AS ANTITUMUM AGENT
DE69211567T2 (en) HIGH-WATER SOLUBLE TO NAPHTHALIMIDE DERIVATIVES USEFUL AS CANCER
DE69724472T2 (en) Selenophene ANTITUMOR AGENTS
DE69708484T2 (en) Pyridine derivatives, as a medicine to treat ulcers and as an antibacterial agent
DE602004009097T2 (en) 1.3.4-TRIAZA-PHENALENE AND 1,3,4,6-TETRAAZAPHENAL DERIVATIVES
Dar et al. Steroidal imidazoles: Synthesis, characterization, molecular docking studies with DNA and in vitro cytotoxicity

Legal Events

Date Code Title Description
8139 Disposal/non-payment of the annual fee