DE10044027A1 - Rekombinant erzeugtes Mistellektin (ML III) - Google Patents
Rekombinant erzeugtes Mistellektin (ML III)Info
- Publication number
- DE10044027A1 DE10044027A1 DE2000144027 DE10044027A DE10044027A1 DE 10044027 A1 DE10044027 A1 DE 10044027A1 DE 2000144027 DE2000144027 DE 2000144027 DE 10044027 A DE10044027 A DE 10044027A DE 10044027 A1 DE10044027 A1 DE 10044027A1
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- polypeptide
- nucleic acid
- acid molecule
- encodes
- mistletoe
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Withdrawn
Links
- 241000221012 Viscum Species 0.000 title claims abstract description 22
- 235000014066 European mistletoe Nutrition 0.000 title claims abstract description 20
- 235000012300 Rhipsalis cassutha Nutrition 0.000 title claims abstract description 20
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 17
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 title claims abstract description 12
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 title claims abstract description 11
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 title claims abstract description 11
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 title claims abstract 14
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims abstract 14
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims 2
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 title abstract description 18
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 title abstract description 18
- 239000002523 lectin Substances 0.000 title abstract description 18
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 title 1
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 title 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 title 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims abstract description 6
- 230000035800 maturation Effects 0.000 claims abstract description 3
- 230000008827 biological function Effects 0.000 claims abstract 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 claims abstract 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 claims abstract 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 40
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 30
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 claims description 3
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 claims description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 claims 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 claims 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 claims 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 claims 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims 1
- 230000009144 enzymatic modification Effects 0.000 claims 1
- 238000000034 method Methods 0.000 claims 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims 1
- 230000008569 process Effects 0.000 claims 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 abstract description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 108090000829 Ribosome Inactivating Proteins Proteins 0.000 description 6
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 5
- 108010039491 Ricin Proteins 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 3
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 3
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 3
- OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N N-Acetyl-D-Galactosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N 0.000 description 2
- MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N N-acetyl-D-galactosamine Natural products CC(=O)NC(C=O)C(O)C(O)C(O)CO MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000221013 Viscum album Species 0.000 description 2
- 241001496958 Viscum album subsp. austriacum Species 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 230000008436 biogenesis Effects 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 2
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- MSWZFWKMSRAUBD-GASJEMHNSA-N 2-amino-2-deoxy-D-galactopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010082495 Dietary Plant Proteins Proteins 0.000 description 1
- 101710146739 Enterotoxin Proteins 0.000 description 1
- 108010031186 Glycoside Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 102000005744 Glycoside Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 125000003047 N-acetyl group Chemical group 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 235000008331 Pinus X rigitaeda Nutrition 0.000 description 1
- 235000011613 Pinus brutia Nutrition 0.000 description 1
- 241000018646 Pinus brutia Species 0.000 description 1
- 241000219000 Populus Species 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 235000004443 Ricinus communis Nutrition 0.000 description 1
- 240000000528 Ricinus communis Species 0.000 description 1
- 101500012028 Viscum album Beta-galactoside-specific lectin 1 chain B Proteins 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 1
- 239000000147 enterotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000655 enterotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 238000009413 insulation Methods 0.000 description 1
- 108010022050 mistletoe lectin I Proteins 0.000 description 1
- 108010034403 mistletoe lectin II Proteins 0.000 description 1
- 108010045515 mistletoe lectin III Proteins 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 1
- 210000001322 periplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000001323 posttranslational effect Effects 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 108010087967 type I signal peptidase Proteins 0.000 description 1
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/415—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from plants
- C07K14/42—Lectins, e.g. concanavalin, phytohaemagglutinin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
- C07K2319/02—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a signal sequence
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Botany (AREA)
- Immunology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
Die vorliegende Erfindung betrifft die Erzeugung und Verwendung eines bestimmten
rekombinanten Mistellektins als therapeutisch wirksame Substanz. Aus Extrakten der in
Europa verbreiteten Mistelpflanzen (Viscum album spec.) werden Mistel-Präparate
hergestellt, die u. a. in der Krebstherapie eingesetzt werden. Als eine der
Hauptwirkkomponenten dieser Extrakte wurde eine Gruppe von Proteinen identifiziert, deren
Vertreter in der Literatur als Mistellektin I, II und III (ML 1, ML 2 und ML 3) bezeichnet
werden. Jedes dieser Proteine setzt sich aus zwei Untereinheiten mit sehr verschiedenen
biologischen Aktivitäten zusammen.
Die jeweils kleineren Untereinheiten, die A-Ketten, stellen Glykosidasen dar, die
spezifisch bestimmte rRNA Moleküle modifizieren und dadurch die Aktivität von
eukaryotischen Ribosomen sehr effektiv hemmen. Aufgrund dieser Aktivität werden die
angesprochenen Proteine zu den sog. RIP II Proteinen (ribosome inactivating proteins, type
11) gezählt und sind in geeigneten Zellkultursystemen sehr potente Toxine.
Die B-Ketten dieser Proteine stellen hingegen Lektine (d. h. zuckerbindende Proteine)
dar. Die Zuckerspezifität dieser Lektinkomponenten ist unter den drei Mistellektinen nicht
einheitlich. Während die B-Kette des ML I sehr hohe Affinitäten zu Galaktose zeigt, ist die
Zuckerspezifität der B-Kette des ML III durch eine ausgesprochen hohe N-Acetyl-
Galaktosamin-Affinität gekennzeichnet. Die B-Kette des ML II liegt in ihrem
Bindungsverhalten zwischen den beiden beschriebenen Aktivitäten, d. h. sie bindet recht
stark sowohl an Galaktose wie auch an N-Acetyl-Galaktosamin.
Die Holoproteine vereinen die Aktivitäten ihrer A- und B-Ketten, d. h. sie sind sowohl
Lektine (wegen des Vorhandenseins der B-Kette) als auch potentielle Toxine (wegen der
Ribosomen inaktivierenden Eigenschaften der A-Kette). Ihre Wirksamkeit in oben erwähnten
Präparaten geht offensichtlich auf beide Eigenschaften zurück. Ein einfaches Model, das
jedoch keineswegs alle beschriebenen Effekte der Proteine gegenüber humanen Zellen
erklären kann, beschreibt die Wirkungsweise dieser Proteine wie folgt: Die Moleküle binden
über die Aktion ihrer B-Ketten an die Oberflächen von Zellen, die die geeigneten
Zuckerkomponenten tragen. Diese Bindung führt zur Aufnahme der Proteine in die Zellen
und ermöglicht der A-Kette (des Toxins) die Ribosomen der Zelle zu blockieren, was zum
Absterben der betroffenen Zelle führt.
Dieses Model entspricht der Wirkungsweise eines anderen pflanzlichen Vertreters
dieser RIP II-Proteingruppe, des Ricins aus der Rhizinus-Bohne. Ricin stellt eines der
giftigsten - wenn nicht das giftigste - pflanzliche Protein dar. Obwohl die Mistellektine
strukturell und funktionell dem Ricin sehr ähnlich sind, ist ihre Toxizität gegenüber
Organismen dramatisch reduziert. Der Grund ist bis heute nicht verstanden. Diese
herabgesetzte Toxizität ermöglicht es jedoch, Mistellektine gefahrlos in der humanen
Therapie einzusetzen, wogegen der Einsatz des Ricins sehr problematisch ist.
Neben diesen zytotoxischen-Aktivitäten sind in der Literatur eine Reihe von anderen
Effekten der Mistellektine auf humane Zellen beschrieben, die mit oben erwähntem Modell
nicht zu erklären sind. So wird ein gegenteiliger Effekt, die Stimulation zur Teilung
bestimmter immunkompetenter Zellen (immunstimulierender Effekt) ebenso bekannt, wie
z. B. die Freisetzung verschiedener Wachstumsfaktoren durch unterschiedliche Zelltypen.
Die entsprechenden Experimente wurden überwiegend mit dem ML I durchgeführt.
Dieses Protein ist der Vertreter der Mistellektine, der in Mistelpflanzen, die auf Laubbäumen
wachsen, bei weitem überwiegt. Die anderen zwei Vertreter (ML II und ML III) treten
dagegen in den Hintergrund und sind sehr viel schwieriger in hinreichenden Mengen zu
isolieren, was zum fast ausschließlichem Einsatz des ML I in oben genannten Studien
geführt hat.
Obwohl sich die drei Vertreter der RIP II-Mistellektine ähnlich sind, besitzen sie z. B.
unterschiedliche molekulare Massen und verschiedene Zuckerbindungseigenschaften. Die
"verwandtschaftlichen" Beziehungen dieser drei Proteine zueinander war bis vor kurzem
nicht klar. Die bis dahin vorliegenden biochemischen und strukturellen Daten ließen zwei
prinzipielle Möglichkeiten zu:
- - Jedes Protein wird von einem eigenen Gen kodiert und abgelesen, die zu beobachtenden Unterschiede zwischen den Proteinen gehen letztendlich auf Unterschiede in diesen Genen zurück.
- - Die unterschiedlichen Proteine entstehen durch unterschiedliche Modifizierungsschritte aus einem gemeinsamen Proteinvorläufer (oder auch Nukleinsäurevorläufers). Dieser wird durch ein Gen kodiert.
Im ersten Fall liegen mindestens so viele für Mistellektine kodierende Gene in Genom der
Mistelpflanze vor, wie Protein-Typen zu beobachten sind, im zweiten Fall existiert nur ein
Gen.
In dem Patent Nr. EP 0 751 221 A1 über ein rekombinantes Mistellektin wird
ausdrücklich von diesem zweiten Fall ausgegangen: Es wird angenommen, daß es nur
ein Gen gibt und die Nutzung des von diesem Gen kodierten Proteins wird unter Schutz
gestellt. Die Antragsteller umgingen damit das Problem, dass sie das Produkt (das kodierte
Protein; ML I, ML II oder ML III) nicht eindeutig benennen konnten.
Das hier beantragte Patent betrifft das N-Acetyl-Galaktosamin erkennende
Mistellektin ML III. Es wird von einem eigenen Gen kodiert und das exprimierte Protein
unterscheidet sich u. a. in seiner Aminosäurezusammensetzung, der Anzahl der
Aminosäuren, seiner Masse, der Art der posttranslationalen Veränderungen und seiner
biologischen Aktivität von dem in oben genanntem Patent unter Schutz gestellten Protein
(aus heutiger Kenntnis ML I) und weicht damit in wesentlichen biophysikalischen
Eigenschaften erheblich von diesem Protein ab. Zudem wurde das Gen aus einer anderen
Mistel-Unterart/Varietät isoliert (Kiefern-Mistel), als es in dem Patent Nr. EP 0 751 221
geschehen ist (Pappel-Mistel). Die Verwendung dieses anderen Pflanzenmaterials zur
Isolierung der hier beschriebenen Nukleinsäure und des von ihr codierten Proteins muß als
wesentliche Voraussetzung für die erfolgreiche Isolierung angesehen werden. In Kiefern-
Misteln dominiert das ML III im Gegensatz zu oben beschriebenen Verteilungsverhältnissen
bei weitem über die anderen RIP II-Proteine. In Abhängigkeit von anderen - nicht
verstandenen - Standortfaktoren der Wirtspflanzen ist das ML III häufig der einzige Vertreter
dieser Proteingruppe in der Kiefern-Mistel. Derartiges Material wurde für die Isolierung der
hier beschriebenen Nukleinsäure benutzt.
Die Abb. 1 zeigt die Gesamtsequenz des Präpro-ML III Leserahmens. Die aus
diesem Leserahmen im Zuge der Biogenese des Präproproteins entstehenden A- bzw. B-
Ketten sind in dem Dreibuchstaben-Code für Aminosäuren dargestellt, das Targetingpeptid
für den Eintransport in das Lumen des Endoplasmatischen Reticulums sowie das
Linkerpeptid, welches die A- und B-Kette während der frühen Biogeneseschritte verbindet
und am Ende der Reifung des Proteins proteolytisch entfernt wird, sind dagegen im
Einbuchstaben-Code wiedergegeben.
Das galaktoseerkennende Mistellektin (ML III) kann unter geeigneten Bedingungen in
homologen oder heterologen Expressionssystemen dargestellt werden. Die zu
verwendenden Vektoren müssen die für den jeweiligen Wirt passenden
Regulationssequenzen aufweisen. Als Beispiel sei hier die Expression in Escherichia coli
unter Kontrolle eines Bakteriophagen-Promoters (T7 Gen 10 Promotor) dargestellt.
Von dem dargestellten Plasmid kann eine Untereinheit des Mistellektins rekombinant
in E. coli erzeugt werden. Die Darstellung des Gesamt-Mistellektins (ML III) erfolgt nach der
getrennten Expression der beiden Untereinheiten durch Vereinigung der beiden Ketten in
vitro.
Zur Vermeidung der Ausbildung von nicht löslichen Proteinaggregaten wird das
exprimierte Protein in diesem Beispiel als Fusionsprotein mit einer E. coli Leadersequenz
des Enterotoxins II gebildet. Dieses Leaderpeptid wird von E. coli eigenen Leaderpeptidasen
erkannt und nach der Passage des Fusionsproteins in den Periplasmatischen Raum der
Zellen entfernt. Die entscheidende Sequenz um den Promotor ist dargestellt. Bis auf die für
das zu exprimierende Protein codierende Nukleinsäuresequenz können die beiden Plasmide
zur Expression der A- bzw. B-Kette gleich aufgebaut sein.
Claims (10)
1. Nukleinsäuremolekül, das
- a) ein Präproprotein codiert, das nach Reifung die biologische Funktion des Galaktose-erkennenden Mistellektindimers aufweist und die in Fig. 1 dargestellte Nukleotidsequenz aufweist;
- b) ein Fragment des Präproproteins gemäß (a) codiert;
- c) sich durch Degeneration des genetischen Codes vom Nukleinsäuremolekül gemäß (a) oder (b) unterscheidet und ein Polypeptid mit der in (a) oder (b) angegebenen biologischen Funktion codiert.
2. Vektor, der mindestens ein Nukleinsäuremolekül nach Anspruch 1 oder 2 enthält.
3. Wirt, der mindestens einen Vector nach Anspruch 2 enthält und pro- oder
eukaryotischer Natur ist.
4. Polypeptid, das von einem Nukleinsäuremolekül nach Anspruch 1 kodiert wird
oder von einem Vector nach Anspruch 2 in einem Wirt nach Anspruch 3
produziert wird.
5. Polypeptid nach Anspruch 4 das ein Fusionsprotein ist.
6. Polypeptid nach Anspruch 4 oder 5, das mindestens eine chemische oder
enzymatische Modifikation enthält.
7. Polypeptid mach Anspruch 4, 5 oder 6, das durch chemische oder enzymatische
Kopplung an beliebige andere Moleküle gebunden ist.
8. Oligomere Polypeptide in denen mindestens ein Monomer ein Polypeptid nach
Anspruch 4, 5, 6 oder 7 ist.
9. Verfahren zur Herstellung von Polypeptiden nach den Ansprüchen 4, 5, 6, 7 oder
8, bei denen man einen Wirt nach Anspruch 3 züchtet und ein Polypeptid nach
den Ansprüchen 4, 5, 6, 7 oder 8 isoliert.
10. Arzneimittel und diagnostische Zusammensetzungen, die
- a) ein Nukeinsäuremolekül nach Anspruch 1,
- b) einen Primer und/oder ein Primerpaar der/das spezifisch an das Nukleinsäuremolekül nach (a) oder an seinen Komplementärstrang bindet, und/oder
- c) ein Polypeptid nach den Ansprüchen 4, 5, 6, 7 oder 8 enthalten.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE2000144027 DE10044027A1 (de) | 2000-09-06 | 2000-09-06 | Rekombinant erzeugtes Mistellektin (ML III) |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE2000144027 DE10044027A1 (de) | 2000-09-06 | 2000-09-06 | Rekombinant erzeugtes Mistellektin (ML III) |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DE10044027A1 true DE10044027A1 (de) | 2002-03-14 |
Family
ID=7655257
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DE2000144027 Withdrawn DE10044027A1 (de) | 2000-09-06 | 2000-09-06 | Rekombinant erzeugtes Mistellektin (ML III) |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| DE (1) | DE10044027A1 (de) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE4424275A1 (de) * | 1994-07-09 | 1996-01-11 | Sifin Inst Fuer Immunpraeparat | Verfahren zur Erfassung von Mistellektinen in Mistelextrakten sowie von Mistellektin-spezifischen Immunglobulinen |
| EP0751221A1 (de) * | 1995-06-26 | 1997-01-02 | MADAUS AG Köln | Rekombinantes Mistellektin (rML) |
| DE19804210A1 (de) * | 1998-02-03 | 1999-08-12 | Biosyn Arzneimittel Gmbh | Rekombinante Mistellektine |
-
2000
- 2000-09-06 DE DE2000144027 patent/DE10044027A1/de not_active Withdrawn
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE4424275A1 (de) * | 1994-07-09 | 1996-01-11 | Sifin Inst Fuer Immunpraeparat | Verfahren zur Erfassung von Mistellektinen in Mistelextrakten sowie von Mistellektin-spezifischen Immunglobulinen |
| EP0751221A1 (de) * | 1995-06-26 | 1997-01-02 | MADAUS AG Köln | Rekombinantes Mistellektin (rML) |
| DE19804210A1 (de) * | 1998-02-03 | 1999-08-12 | Biosyn Arzneimittel Gmbh | Rekombinante Mistellektine |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE69018920T2 (de) | Verwendung von dns-fragmenten, die ein signalpeptid kodieren zur sekretion von reifen proteinen in rekombinanten hefen, expressions-kassetten, transformierte hefen und verfahren zur herstellung dieser proteine. | |
| DE3486216T2 (de) | Hybrid-DNS-Synthesis von reifen insulinähnlichen Wachstumsfaktoren. | |
| DE69434083T2 (de) | Expression eines fusionspolypeptides, das ohne leadersequenz aus dem cytoplasma transportiert wird | |
| DE69002395T2 (de) | N-terminale Fragmente von menschliches Serumalbumin enthaltenden Fusionsproteinen. | |
| DE69635653T2 (de) | Peptide als vektoren zur intrazellulären adressierung von aktiven molekülen | |
| EP3511338A2 (de) | Carrier zum targeting von nervenzellen | |
| DE69332740T2 (de) | Kationische peptide und verfahren zu deren herstellung | |
| EP0835934A2 (de) | Streptavidinmuteine | |
| DE3587407T2 (de) | Toxin-segment des kristallgens vom bacillus thuringiensis. | |
| DE10235248B4 (de) | Fusionsprotein mit verstärkter in vivo-Aktivität von Erythropoietin | |
| DE102004043009A1 (de) | Transportprotein zum Einbringen chemischer Verbindungen in Nervenzellen | |
| DE69232005T2 (de) | Biozide proteine | |
| WO2006076902A2 (de) | Rekombinante expression von proteinen in einer disulfidverbrückten, zweikettigen form | |
| EP0288809A1 (de) | Bifunktionelle Proteine | |
| EP0411096A1 (de) | Pth-varianten kodierende dna-sequenzen, pth-varianten, expressionsvektor, bakterieller wirt, verwendung und therapeutische zusammensetzung | |
| DE10108212A1 (de) | Fusionsprotein zur Sekretion von Wertprotein in bakterielle Überstände | |
| DE3609924A1 (de) | Herstellung des epidermalen wachstumsfaktors | |
| DE69125381T2 (de) | Proteinstruktur des pflanzlichen toxins gelonin | |
| DE3536939A1 (de) | Biologisch aktive derivate des human-(gamma)-interferons, ihre herstellung und arzneimittel, die solche derivate enthalten | |
| DE69025211T2 (de) | Protein-Antikrebsmittel | |
| DE68923496T2 (de) | Verfahren zur Herstellung von motilinähnlichen Polypeptiden und seine Expression. | |
| DE69408677T2 (de) | Nickelfreier hämoglobin und verfahren zu seiner herstellung | |
| DE10044027A1 (de) | Rekombinant erzeugtes Mistellektin (ML III) | |
| DE3884853T2 (de) | Angiogenininhibitoren. | |
| DE69905278T2 (de) | Insectizide mittel |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| OM8 | Search report available as to paragraph 43 lit. 1 sentence 1 patent law | ||
| 8127 | New person/name/address of the applicant |
Owner name: KLEFF, STEFAN, DR., 44137 DORTMUND, DE |
|
| 8139 | Disposal/non-payment of the annual fee |