DD216806A1 - TEST STRIPS FOR THE DETECTION OF PROTEINS IN URIN - Google Patents
TEST STRIPS FOR THE DETECTION OF PROTEINS IN URIN Download PDFInfo
- Publication number
- DD216806A1 DD216806A1 DD25322683A DD25322683A DD216806A1 DD 216806 A1 DD216806 A1 DD 216806A1 DD 25322683 A DD25322683 A DD 25322683A DD 25322683 A DD25322683 A DD 25322683A DD 216806 A1 DD216806 A1 DD 216806A1
- Authority
- DD
- German Democratic Republic
- Prior art keywords
- urine
- proteins
- test strip
- agents
- detection
- Prior art date
Links
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims abstract description 31
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims abstract description 31
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 11
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 claims abstract description 32
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 claims abstract description 7
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 claims abstract description 6
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 claims abstract description 6
- KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M lithium chloride Chemical compound [Li+].[Cl-] KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 6
- 239000003398 denaturant Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims abstract description 5
- DPKHZNPWBDQZCN-UHFFFAOYSA-N acridine orange free base Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC2=NC3=CC(N(C)C)=CC=C3C=C21 DPKHZNPWBDQZCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N benzoquinolinylidene Natural products C1=CC=CC2=CC3=CC=CC=C3N=C21 DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 230000003196 chaotropic effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 4
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 claims abstract description 3
- IZEKFCXSFNUWAM-UHFFFAOYSA-N dipyridamole Chemical compound C=12N=C(N(CCO)CCO)N=C(N3CCCCC3)C2=NC(N(CCO)CCO)=NC=1N1CCCCC1 IZEKFCXSFNUWAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 229960002768 dipyridamole Drugs 0.000 claims abstract description 3
- ZNNZYHKDIALBAK-UHFFFAOYSA-M potassium thiocyanate Chemical compound [K+].[S-]C#N ZNNZYHKDIALBAK-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 3
- 229940116357 potassium thiocyanate Drugs 0.000 claims abstract 2
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 claims description 5
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N Guanidine Chemical compound NC(N)=N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 4
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 claims description 3
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 claims description 3
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 claims description 3
- CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N N-methyl-guanidine Natural products CNC(N)=N CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims description 2
- SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N dimethylaminoamidine Natural products CN(C)C(N)=N SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 2
- 239000004745 nonwoven fabric Substances 0.000 claims description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims description 2
- 239000012876 carrier material Substances 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 abstract description 2
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 abstract 1
- 229960000789 guanidine hydrochloride Drugs 0.000 abstract 1
- PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N guanidinium chloride Chemical compound [Cl-].NC(N)=[NH2+] PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 abstract 1
- 239000003607 modifier Substances 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 12
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 6
- 238000005470 impregnation Methods 0.000 description 6
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 5
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 5
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 5
- BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N Bilirubin Chemical compound N1C(=O)C(C)=C(C=C)\C1=C\C1=C(C)C(CCC(O)=O)=C(CC2=C(C(C)=C(\C=C/3C(=C(C=C)C(=O)N\3)C)N2)CCC(O)=O)N1 BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 3
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 2
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N bromophenol blue Chemical compound C1=C(Br)C(O)=C(Br)C=C1C1(C=2C=C(Br)C(O)=C(Br)C=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 2
- -1 p-cylenol blue Chemical compound 0.000 description 2
- 201000001474 proteinuria Diseases 0.000 description 2
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 2
- WXHLLJAMBQLULT-UHFFFAOYSA-N 2-[[6-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]-2-methylpyrimidin-4-yl]amino]-n-(2-methyl-6-sulfanylphenyl)-1,3-thiazole-5-carboxamide;hydrate Chemical compound O.C=1C(N2CCN(CCO)CC2)=NC(C)=NC=1NC(S1)=NC=C1C(=O)NC1=C(C)C=CC=C1S WXHLLJAMBQLULT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYCLSQDXZMROJK-UHFFFAOYSA-N 2-bromo-4-[3-(3-bromo-4-hydroxyphenyl)-1,1-dioxo-2,1$l^{6}-benzoxathiol-3-yl]phenol Chemical compound C1=C(Br)C(O)=CC=C1C1(C=2C=C(Br)C(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 OYCLSQDXZMROJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MDGFKZKMIQQRPU-UHFFFAOYSA-N 2-bromo-4-[3-(3-bromo-5-chloro-4-hydroxyphenyl)-1,1-dioxo-2,1$l^{6}-benzoxathiol-3-yl]-6-chlorophenol Chemical compound C1=C(Br)C(O)=C(Cl)C=C1C1(C=2C=C(Br)C(O)=C(Cl)C=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 MDGFKZKMIQQRPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZPLCXHWYPWVJDL-UHFFFAOYSA-N 4-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-1,3-oxazolidin-2-one Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1CC1NC(=O)OC1 ZPLCXHWYPWVJDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OLQIKGSZDTXODA-UHFFFAOYSA-N 4-[3-(4-hydroxy-2-methylphenyl)-1,1-dioxo-2,1$l^{6}-benzoxathiol-3-yl]-3-methylphenol Chemical compound CC1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C(=CC(O)=CC=2)C)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 OLQIKGSZDTXODA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WUBBRNOQWQTFEX-UHFFFAOYSA-N 4-aminosalicylic acid Chemical compound NC1=CC=C(C(O)=O)C(O)=C1 WUBBRNOQWQTFEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FRPHFZCDPYBUAU-UHFFFAOYSA-N Bromocresolgreen Chemical compound CC1=C(Br)C(O)=C(Br)C=C1C1(C=2C(=C(Br)C(O)=C(Br)C=2)C)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 FRPHFZCDPYBUAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 102000014702 Haptoglobin Human genes 0.000 description 1
- 108050005077 Haptoglobin Proteins 0.000 description 1
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-M Thiocyanate anion Chemical compound [S-]C#N ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 1
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 229960004909 aminosalicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- ABIUHPWEYMSGSR-UHFFFAOYSA-N bromocresol purple Chemical compound BrC1=C(O)C(C)=CC(C2(C3=CC=CC=C3S(=O)(=O)O2)C=2C=C(Br)C(O)=C(C)C=2)=C1 ABIUHPWEYMSGSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 239000002872 contrast media Substances 0.000 description 1
- 238000010411 cooking Methods 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 1
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000003748 differential diagnosis Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- XJRPTMORGOIMMI-UHFFFAOYSA-N ethyl 2-amino-4-(trifluoromethyl)-1,3-thiazole-5-carboxylate Chemical compound CCOC(=O)C=1SC(N)=NC=1C(F)(F)F XJRPTMORGOIMMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000003020 moisturizing effect Effects 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940127017 oral antidiabetic Drugs 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 239000007793 ph indicator Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000002985 plastic film Substances 0.000 description 1
- 229920006255 plastic film Polymers 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- PZBRPDUUWGYUTE-IWSIBTJSSA-M sodium;2-[(z)-(3,5-dibromo-4-hydroxy-2-methylphenyl)-(3,5-dibromo-2-methyl-4-oxocyclohexa-2,5-dien-1-ylidene)methyl]benzenesulfonate Chemical compound [Na+].CC1=C(Br)C(=O)C(Br)=C\C1=C(C=1C(=CC=CC=1)S([O-])(=O)=O)/C1=CC(Br)=C(O)C(Br)=C1C PZBRPDUUWGYUTE-IWSIBTJSSA-M 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- PRZSXZWFJHEZBJ-UHFFFAOYSA-N thymol blue Chemical compound C1=C(O)C(C(C)C)=CC(C2(C3=CC=CC=C3S(=O)(=O)O2)C=2C(=CC(O)=C(C(C)C)C=2)C)=C1C PRZSXZWFJHEZBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 1
- 230000007306 turnover Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000001043 yellow dye Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Das Anwendungsgebiet der Erfindung ist die Laboratoriumsdiagnostik im Bereich des Gesundheitswesens. Ziel ist ein Teststreifen zum Nachweis von Proteinen im Urin. Der Teststreifen besteht aus einem Traegermaterial, das mit einem Farbindikator und Pufferungsmitteln impraegniert ist. Gegebenenfalls sind weitere Bestandteile Mittel zur Verhinderung von Auswascheffekten wie wasserloesliche Cellulosederivate, Mittel zur Hintergrundfaerbung wie Acridinorange, Echtlichtgelb oder Dipyridamol und Tenside wie Natriumdodecylsulfat, chaotrope Substanzen wie Kaliumrhodanid oder Lithiumchlorid und Denaturantien wie Harnstoff oder Guanidinhydrochlorid als Modifikatoren der Empfindlichkeit des Proteinnachweises. Der Teststreifen ist durch eine hohe Empfindlichkeit gekennzeichnet. Geringe Proteinkonzentrationen, d. aber bereits ueber d. normalerweise m. d. Urin ausgeschiedenen Proteinmenge liegen, werden m. einer deutlich sichtbaren Faerbung angezeigt. Mit dem Urin von gesunden Personen werden keine falsch-positiven Ergebnisse erhalten.The field of application of the invention is the laboratory diagnostics in the field of health care. The aim is a test strip for the detection of proteins in urine. The test strip consists of a carrier material which has been impregnated with a color indicator and buffering agents. Optionally, other ingredients are agents for preventing washout effects, such as water-soluble cellulose derivatives, aftertreatment agents such as acridine orange, true yellow or dipyridamole, and surfactants such as sodium dodecyl sulfate, chaotropic substances such as potassium thiocyanate or lithium chloride, and denaturants such as urea or guanidine hydrochloride as modifiers of protein susceptibility sensitivity. The test strip is characterized by a high sensitivity. Low protein concentrations, d. but already about d. usually m. d. Urine excreted protein amount are m. a clearly visible color displayed. With the urine of healthy persons no false-positive results are obtained.
Description
•Teststreifen zum nachweis von Proteinen im Urin• Test strips for the detection of proteins in the urine
Die Erfindung betrifft Teststreifen zum nachweis von Proteinen im Urin. Die Teststreifen werden in der Laboratoriumsdiagnostik angebende t. . ·The invention relates to test strips for the detection of proteins in urine. The test strips are indicated in the laboratory diagnostics t. , ·
Charakteristik der bekannten technischen LösungenCharacteristic of the known technical solutions
Die Untersuchung des Urins auf Proteine gehört,zu jeder medizinischen . Grunduntersuchung . zur frühzeitigen Erkennung von nierenkrankheiten. Der nachweis von Proteinen ist auch für die Verlaufskontrolle von Patienten mit Nierenerkrankungen sowie für. die rechtzeitige Erkennung von !Tierenschäden nach Gabe von einigen Arzneimitteln wie z. B. Antibiotika und Zytostatika von Bedeutung. 'The study of urine on proteins belongs to every medical. Basic examination. for early detection of kidney disease h nits. The detection of proteins is also useful for the follow-up of patients with kidney disease and for. the timely detection of! animal damage following the administration of some medicines, such as As antibiotics and cytotoxic agents of importance. '
Altere Methoden zum nachweis von Proteinen im Urin sind die heute nur noch vereinzelt durchgeführte Kochprobe mit Essigsäure und die HELLSRsche Ringprobe mit Salpetersäure. Weitverbreitet in den klinischen Laboratorien ist der SuIfosalicylsäuretest. ,Die Methode ist'ausreichend empfindlich und erfaßt alle Plasmaproteine, die im Urin vorkommen können, mi't gleicher Sensitivitat. Orale Antidiabetika, hohe Dosen von Antibiotika, p-Aminosalicylsäure und Röntgenkontrastmittel stören die Reaktion. Nachteilig ist.ein gewisser Aufwand (Zentrifugieren bzw. Filtrieren des1Urins, Ansetzen der Reagentien, Säuberung der Glasgeräte) (P. Balint (Hrsg.) : Klinische ' Laboratoriumsdiagnostik, 3d. 1. Volk und Gesundheit, Berlin 1962, Seite 284)..Older methods for the detection of proteins in urine are today only occasionally carried out cooking with acetic acid and the HELLSR ring sample with nitric acid. Widely used in clinical laboratories is the sulfosalicylic acid test. 'The method is sufficiently sensitive and detects all plasma proteins that can occur in the urine with the same sensitivity. Oral antidiabetics, high doses of antibiotics, p-aminosalicylic acid and X-ray contrast agents interfere with the response. .An disadvantage certain amount of effort (centrifuging or filtering the urine 1 and preparation of the reagents, cleaning of glassware) (P. Balint (eds). Clinical 'laboratory diagnostics, 3d 1. People and Health, Berlin 1962, page 284th) ..
-4Π GT -;. Λ -4Π GT - ;. Λ
Zum nachweis-einer Proteinurie' werden auch Teststreifen angewendet. Sie sind mit einem pH-Indikator imprägniert, der oberhalb einer definierten Proteinkonzentration mit einem Farbumschlag reagiert." Die Realctionszone ist in trockenem Zustand gelblich oder schwach, .grünlich gefärbt und soll Proteine in Abhängigkeit von ihrer Konzentration mit grüner bis blauer ,. Farbe 'anzeigen. ITach dem.Eintauchen an eine Untersuchungslösung erfolgt jedoch oftmals schon ,eine grünliche Färbung, auch wenn die Probe eiweißfrei ist. Dadurch ist es schwierig, negative von schwach positiven Reaktionen zu unterscheiden.For the detection of a proteinuria also test strips are used. They are impregnated with a pH indicator which reacts with a color change above a defined protein concentration. "The reaction zone is yellowish or pale, greenish in its dry state and should display proteins with green to blue 'color' depending on their concentration However, after immersing in a test solution, a greenish tint often occurs, even if the sample is protein-free, making it difficult to distinguish negative from weak positive reactions.
Ziel der Erfindung . · -.-. Object of the invention . · -.-.
Ziel der Erfindung ist es, die Eindeutigkeit der Farbreaktion beim Hachweis-von Proteinen im Urin mittels Teststreifen zu verbessern.The aim of the invention is to improve the uniqueness of the color reaction in the detection of proteins in urine by means of test strips.
Aufgabe der Erfindung ist es, einen Teststreifen mit einem saugfähigen Träger für den Farbindikator zu entwickeln. ' ·. ' The object of the invention is to develop a test strip with an absorbent carrier for the color indicator. '·. '
Die Aufgäbe wird erfindungsgemäß durch einen Teststreifen zum nachweis von Proteinen im Urin auf der Basis saugfähiger Materialien wie Papier oder Vliese gelöst.. Der erfindungsgemäße Teststreifen ist'dadurch gekennzeichnet, daß er als Farbindikator eine Verbindung der allgemeinen Formel I (vgl. Anlage) ,und Pufferungsmittel enthält, wobei als Puffer Citronensäure/ Phosphat, Citronensäure/UaOH ,oder Bernsteinsäure/I1TaOH verwendet wurden. -Weiterhin werden dem Streifen gegebenenfalls !Mittel zur Verhinderung von Auswascheffekten wie wasserlösliche Cellulosederivate, gegebenenfalls Farbstoffe zur Hintergrundfärbung sowie gegebenenfalls Tenside, ohaotrope Substanzen oder Denaturantien zur Modifizierung der Empfindlichkeit zugesetzt.According to the invention, the deposit is achieved by a test strip for detecting proteins in urine on the basis of absorbent materials such as paper or nonwovens. The test strip according to the invention is characterized in that it contains as color indicator a compound of the general formula I (see Appendix), and Buffering agent, wherein as a buffer citric acid / phosphate, citric acid / UaOH, or succinic acid / I 1 TaOH were used. Furthermore, the strip is optionally admixed with agents for preventing washout effects such as water-soluble cellulose derivatives, optionally colorants for background dyeing and optionally surfactants, ohaotropic substances or denaturants for modifying the sensitivity.
Bei einer durch eine liephropathie bedingten Proteinurie werden vorwiegend Albumine ausgeschieden. 7/eiterhinv liegen in wesent-1 lieh geringerer Konzentration die Antikörper IgM, IgG und IgA, Lambda- und Kappa-Ketten, Transferrin, Haptoglobin,- Lysozym sowie mehrere Globulinfraktionen vor. Für die Diagnose und Differentialdiagnose von liephropathien reicht es aus_,· wenn das Albumin als -Hauptbestandteil der Proteine im Urin nach-In case of a proteinuria due to a leuphropathy, mainly albumins are eliminated. 7 / eiterhin v are essential in 1 lent lower concentrations the antibody IgM, IgG and IgA, lambda and kappa chain, transferrin, haptoglobin, - lysozyme before and several globulin fractions. For the diagnosis and differential diagnosis of leu- phathathias it is sufficient if albumin, as the main constituent of the proteins in the urine, detects
_ 3 —_ 3 -
gewiesen wird und die Globuline und die anderen Proteinfrak- ' : tionen nur in einem geringeren Ausmaß erfaßt werden, da die Ausscheidung von Albumin sich in den meisten Fällen proportional zum Gesamtprotein verhält.is rejected and the globulins and other Proteinfrak- ': functions are listed only to a lesser extent, as the excretion of albumin is proportional in most cases to total protein.
Die Proteine, hauptsächlich aber das Albumin, binden Farbindikatoren der allgemeinen Formel I (vgl. Anlage) in ihrer anionischen Form. Bei dieser Bindung zeigen die Färbindikatoren einen Farbumschlag in Richtung auf die Salaform, obwohl der pH-Wert des Milieus konstant bleibt (Indikatorfehler). Es werden.solche Farbindikatoren gewählt, die einen deutlichen Farbumschlag zeigen. Die im Urin vorkommenden Salze dürfen dabei die Färbung nicht beeinflussen.The proteins, but mainly the albumin, bind color indicators of the general formula I (see Appendix) in their anionic form. In this binding, the color indicators show a color change towards the Salaform, although the pH of the environment remains constant (indicator error). Such color indicators are chosen which show a clear color change. The salts occurring in the urine should not influence the color.
Der -pH-Wert des zur Imprägnierung verwendeten Puffers richtet ' -sich nach dem Umschlagspunkt des Färbindikators der allgemeinen Formel I '(vgl, Anlage). Vorzugsweise 7/erden solche Färbstoffe in den Träger eingearbeitet, deren beide Umschlagspunkte sich im sauren.pH-Bereich befinden. Erfindungsgemäße Beispiele für die FärbIndikatoren sind m-Cresolpurpur, p-Zylenolblau, Thymolblau, Bromchlorphenolblau, Bromphenolblau, Bromcresolgrün, Ghlorphenolrot, Bromphenolrot, Bromcresolpurpur und Bromthymoiblau. Der pH-Wert des Puffers soll in der ITähe des .sauren Umschlagspunktes des Färb indika tors liegen.The -pH value of the buffer used for the impregnation depends on the transition point of the dye indicator of the general formula I '(cf. Appendix). Preferably, such dyes are incorporated in the vehicle whose two transition points are in the acidic pH range. Inventive examples of the color indicators are m-cresol purple, p-cylenol blue, thymol blue, bromochlorophenol blue, bromophenol blue, bromcresol green, ghlorophenol red, bromophenol red, bromocresol purple and bromothymol blue. The pH of the buffer should be close to the acidity of the acidic transition point of the dye indicator.
Sin saurer pH-Bereich wird auch deshalb gewählt, weil die Farbindikatoren eine maximale Bindung an die Proteine im sauren "Hilieü zeigen. Von Vorteil ist hierbei Weiterhin, daß eventuell an Albumin gebundenes und mit dem Urin ausgeschiedenes Bilirubin bei sauren pH-Werten freigesetzt wird, so daß Farbindikator und Bilirubin nicht um die Bindungsstellen am Proteinmolekül konkurrieren, λ The acidic pH range is also chosen because the color indicators show maximal binding to the proteins in the acidic environment, and it is further advantageous that bilirubin, possibly bound to albumin and excreted in the urine, is liberated at acidic pH values. so that color indicator and bilirubin do not compete for the binding sites on the protein molecule, λ
Der Puffer muß eine starke Pufferungskapazität haben. Durch die Pufferungs wird verhindert, daß die 0H~- und H -Ionen im Urin den pH-Wert des imprägnierten Trägers, nach dem An- feuchten verändern und eventuell schon einen Umschlag des Färbindikators hervorrufen, obwohl kein Protein im Urin vorhanden ist. . .The buffer must have a strong buffering capacity. Buffering prevents the 0H ~ and H ions in the urine from altering the pH of the impregnated carrier, after moisturizing, and possibly causing an inverted staining indicator even though no protein is present in the urine. , ,
Das Auswaschen des Pufferungsmittels und des Färbindikators wird dadurch verhindert, daß der Imprägnierlösung gegebenen-The washing out of the buffering agent and the dyeing indicator is prevented by adding the impregnating solution to
falls wasserlösliche Cellulosederivate wie z.B. Cellulosesulfat oder Carboxymethylcellulose zugesetzt werden. Dadurch bleibt die Pufferkapazität des imprägnierten Trägers nach·dem Eintauchen in den Urin konstant und es, wird vermieden, daß·,· ausgewaschene Pufferbestandteile und der Farbindikator weitere Untersuchungen, die mit der gleichen Urinprobe nach dem Prοteinnachweis erfolgen sollen, stören. ·if water-soluble cellulose derivatives such as e.g. Cellulose sulfate or carboxymethyl cellulose are added. As a result, the buffer capacity of the impregnated carrier remains constant after immersion in the urine and it is avoided that the buffer components washed out and the color indicator interfere with further examinations which are to be carried out with the same urine sample after the proof. ·
Die Konzentration des Färbindikators der allgemeinen Formel I (vgl. Anlage) hängt vom pH-7/ert' des Pufferungsmittels und dem verwendeten Trägermaterial ab. Bei einem Träger mit einer relativ starken Schichtdicke,'z. 3. Chromatographiepapier, und bei einem pH-Wert in der Nähe des sauren Umschlagspunktes kann die Imprägnierung mit einer niedrigeren. Farbindikatorkonzentration erfolgen. In diesem,Fall ergibt proteinfreier Urin bzw. Urin von gesunden Personen mit einer sehr geringen Proteinkonzentration· eine eindeutig negative Reaktion. Ein eventuell entstehender'Farbumschlag wird dann, sicher erkannt und ist. auf eine höhere (pathologische) Proteinkonzentration1 zurückzuführen, · Wählt man dagegen eine höhere Farbindikatorkonzentration und eine geringere Schichtdicke des Trägers·,' so , tritt auch'bei einer niedrigen Proteinkonzentration schon eine leichte Färbung auf,. die sich bei Anstieg der Proteinmenge verstärkt. Unterschiedliche Intensitäten eines Farbtons sind jedoch schwieriger zu differenzieren als ein Farbumschlag von einem Farbton in einen anderen.. . ! , 'The concentration of the dye indicator of the general formula I (see Appendix) depends on the pH of the buffering agent and the carrier material used. In a carrier with a relatively thick layer thickness, 'z. 3. Chromatography paper, and at a pH close to the acidic turnover point, the impregnation may be carried out with a lower. Color indicator concentration take place. In this case, protein-free urine or urine from healthy persons with a very low protein concentration results in a clearly negative reaction. A possible color change is then recognized and is safe. due to a higher (pathological) Protein concentration 1 · If one chooses the other hand, a higher color indicator concentration and a smaller layer thickness of the carrier ·, so ', already occurs auch'bei a low protein concentration, a slight coloration on ,. which increases as the amount of protein increases. However, different intensities of a hue are more difficult to differentiate than a hue from one hue to another. ! , '
Deshalb JLst die Zusammensetzung der Imprägnierlösung von dem Aufnahmevolumen des Trägermaterials und vom. Indikatorfehler des Färbindikators abhängig. Die günstigste Variante ist ein Träger mit hohem Aufnahmevolumen, der mit einer%Imprägnierlösung von geringer Farbindikatorkonzentration behandelt worden ist. ' Therefore, the composition of the impregnating solution of the receiving volume of the carrier material and of the. Indicator error of the dye indicator dependent. The most favorable variant is a support with a high absorption volume, which has been treated with a % impregnation solution of low color indicator concentration. '
Gegebenenfalls kann zusammen mit der Imprägnierung oder im Anschluß daran noch eine Hintergrundfärbung des Papiers mit gelben Farbstoffen erfolgen. Bewährt haben sich Echtlichtgelb, Acridinorange sowie Dipyridamol. Durch die Hintergrundfärbung wird die Unterscheidbarkeit zwischen negativen und schwach · positiven Reaktionen zusätzlich verbessert.Optionally, a background dyeing of the paper with yellow dyes can be carried out together with the impregnation or subsequently. True yellow, acridine orange and dipyridamole have proven successful. The background coloration further improves the distinctness between negative and weakly positive reactions.
" · - 5 - ' "- - 5 - '
Die Empfindlichkeit des Teststreifens kann dadurch gesteigert werden, daß der Imprägnierlösung Verbindungen, die Wasserstoffbrücken schwachen oder" lösen, zugesetzt werden«, Dazu gehören Tenside wie ITatriumdodecylsulf at, chaotrope Substanzen wie.-.. Kaliuinrhodanid und Lithiumchlorid und die Denaturantien Harnstoff und Guanidin. Durch diese Verbindungen kommt es konzentrationsabhängig zu einer Auffaltung bzw. Denaturierung der Proteine und die Anzahl der Bindungsstellen für die Farbindikatormoleküle nimmt zu. Daraus resultiert eine intensivere Färbung auch schon'bei geringer Proteinkonzentration im. Urin.'Sensitivity of the test strip can be increased by adding to the impregnating solution compounds that reduce or "dissolve" hydrogen bonds, including surfactants such as ITatriumdodecylsulfate, chaotropic substances such as potassium rhodanide and lithium chloride, and the denaturants urea and guanidine Depending on the concentration, these compounds develop or denature the proteins and the number of binding sites for the color indicator molecules increases, resulting in a more intense coloring even at a low protein concentration in the urine.
Der erfindungsgemäße Teststreifen zeichnet sich durch eine deutlich unterschiedliche Färbung in Abhängigkeit von der Prov· teinkonzentration im Urin aus. Durch den Zusatz von Denaturantien sowie von Tensiden und chaotropen Substanzen steigt,die Empfindlichkeit der Teststreifen um etwa 50 % an. Es wurden keine falsch-positiven Ergebnisse mit dem Urin von gesunden Personen erhalten. · ' 'The test strip according to the invention is distinguished by a distinctly different coloration as a function of the provitein concentration in the urine. The addition of denaturants as well as surfactants and chaotropic substances increases the sensitivity of the test strips by about 50 % . No false-positive urine results were obtained from healthy subjects. · ''
1". 20 mg Bromphenolblau werden in 100 ml Citronensäure/Phosphat-Puffer nach Mcllvain mit einem pH-V/ert von 2,7 gelöst. In diese Lösung wird entsprechend zugeschnittenes Chromatographiepapier gelegt und nach dem Herausnehmen und Abtropfen bei Raumtemperatur getrocknet. Das getrocknete Papier ist gelb gefärbt..20 mg of bromophenol blue are dissolved in 100 ml of Mcllvain's citric acid / phosphate buffer with a pH of 2.7. Tailored chromatography paper is placed in this solution and, after removal and draining, dried at room temperature Paper is dyed yellow ..
Das imprägnierte. Papier wird in Längsstreifen mit einer ·. Breite von 1 cm geschnitten und auf eine Kunststoffolie geklebt. Diese wird in Streifen von 0,5 cm Breite geschnitten. Jeder Teststreifen hat eine Reaktionszone von 0,5 x 1 cm.The impregnated. Paper is in longitudinal strips with a ·. Width of 1 cm cut and glued on a plastic film. This is cut into strips of 0.5 cm width. Each test strip has a reaction zone of 0.5 x 1 cm.
Zur Prüfung des Urins auf Proteine wird der Teststreifen einige Sekunden in die Untersuchungslösung getaucht und der nicht aufgesaugte Urin durch Abstreifen der seitlichen Kante am Gefäßrand entfernt. Die Reaktion wird nach. 30 bis 60 Sekunden abgelesen. Sine leichte Blaufärbung tritt, bei Anwesenheit von etwa 30 mg Serumprotein/100 ml Urin auf. Höhere Konzentrationen verursachen eine intensivere Blaufärbung. .To test the urine for proteins, the test strip is immersed in the test solution for a few seconds and the uninjected urine is removed by stripping off the lateral edge at the edge of the vessel. The reaction will be after. Read 30 to 60 seconds. A slight blue coloration occurs in the presence of about 30 mg serum protein / 100 ml urine. Higher concentrations cause a more intense blue coloration. ,
2. 100 ng Bromcresolgrün-Natriumsalz werden'in 100 ml einer 0,25 molaren Citronensäurelösung, die mit ITaOH auf einen pH-Y/ert von 3,5 eingestellt wurde, gelöst. Das weitere Vorgehen bei der Imprägnierung und Herstellung der Teststrei- . \ fen erfolgt wie unter Beispiel 1 beschrieben. Der Test- ' .streifen hat auch ähnliche Eigenschaften,2. Dissolve 100 ng Bromcresolgreen sodium salt in 100 ml of a 0.25 molar citric acid solution adjusted to pH 3.5 with ITaOH. The further procedure in the impregnation and production of the test strip. \ fen takes place as described in Example 1. The test strip also has similar properties,
3. 80 mg Bromcresolpurpur v/erden in 100 ml einer 0,10'molaren Bernsteinsäurelösung, die mit HaOH, auf einen pH-Wert von 4»7 eingestellt wurde, gelost. .Das nach der Imprägnierung getrocknete Papier ist gelb gefärbt und schlägt nach dem ,.Eintauchen in proteinhaltigen Urin in Abhängigkeit von der Prpteinkonsentration nach purpur um.3. Dissolve 80 mg of bromcresol purple in 100 ml of a 0,10 molar succinic acid solution adjusted to pH 4,7 with HaOH. .The paper dried after impregnation is dyed yellow and, after being immersed in protein-containing urine, turns purple depending on the concentration of the proteine.
4. Der Streifen wird hergestellt wie unter Beispiel'1· beschrieben, jedoch werden der Imprägnierlösung außerdem 500 mg' Cellulosesulfat, zugesetzt. Der auf diese Weise erhaltene Streifen zeigt eine leichte Farbverstärkung beim Eintauchen in proteinhaltigen Urin, da der Farbindikator und der'Puffer nicht in'die Untersuchungsprobe diffundieren.4. The strip is prepared as described in Example 1, except that 500 mg of cellulose sulfate are added to the impregnating solution. The strip thus obtained shows a slight color enhancement when immersed in proteinaceous urine, since the color indicator and the buffer do not diffuse into the test sample.
5v Der Streifen wird hergestellt wie unter Beispiel 1 beschrieben, jedoch werden der Imprägnierlösung außerdem :50 mg.,' Acridinorange zugesetzt> Der auf diese Weise erhaltene "Streifen.ist stark gelb gefärbt, so daß eine deutliche Unterscheidung gegenüber der Färbung, die'bei einer Proteiiikpnzentration von etwa 25 mg/100 ml Urin auftritt, möglich ist. . .. ' . . . .5v The strip is prepared as described in Example 1, but the impregnating solution is additionally : 50 mg., Acridine orange added. The strip obtained in this way is strongly yellow in color, so that a clear distinction from the dyeing is obtained a protein concentration of about 25 mg / 100 ml of urine occurs is possible.
,6. Der Streifen wird hergestellt wie unter Beispiel 1 beschrieben, jedoch werden der Imprägnierlösung außerdem 2g' Xaliumrhodanid zugesetzt. Der,auf diese Weise erhaltene Streifen ist gelblich gefärbt und zeigt eine Proteinkon,-zentration von etwa 15 mg/100 ml Urin an, : ',. 6 The strip is prepared as described in Example 1, but 2 g of xiumium rhodanide are also added to the impregnating solution. The strip obtained in this way is yellowish in color and indicates a protein concentration of about 15 mg / 100 ml of urine,
7. D:er Streifen wird hergestellt wie unter Beispiel 1 beschrieben, jedoch werden.der Imprägnierlösung außerdem 30 g ^G-uanidinhydrochlorid zugesetzt. Der auf diese Weise erhaltene Streifen ist leicht gelblich gefärbt und zeigt eine rroteinkonzentration von etwa 15 ing/100 ml Urin mit blauer Farbe an. ·, . \ '7. D: The strip is prepared as described in Example 1, but 30 g ^ G-uanidinhydrochlorid are also added to the impregnating solution. The strip obtained in this way is slightly yellowish in color and indicates a rrotein concentration of about 15 mg / 100 ml of blue-colored urine. ·,. \ '
Anlage , Plant ,
1111
R1 = RQ = H, AlkylR 1 = R Q = H, alkyl
R2 = R5 = Rg = R3 = H, Cl, Br,,Alkyl, IsopropylR 2 = R 5 = Rg = R 3 = H, Cl, Br ,, alkyl, isopropyl
H,' OH . · ;.H, 'OH. ·;.
-R7 = H, -.01, .Bi,. Alkyl. ·.-' = Ξ,' GOOH,r SO3H = H, OH .· . -R 7 = H, -.01, .Bi ,. Alkyl. ··· = Ξ, 'GOOH, r SO 3 H = H, OH ·.
R3 = R4 =R 3 = R 4 =
Claims (2)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DD25322683A DD216806A1 (en) | 1983-07-20 | 1983-07-20 | TEST STRIPS FOR THE DETECTION OF PROTEINS IN URIN |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DD25322683A DD216806A1 (en) | 1983-07-20 | 1983-07-20 | TEST STRIPS FOR THE DETECTION OF PROTEINS IN URIN |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DD216806A1 true DD216806A1 (en) | 1984-12-19 |
Family
ID=5549193
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DD25322683A DD216806A1 (en) | 1983-07-20 | 1983-07-20 | TEST STRIPS FOR THE DETECTION OF PROTEINS IN URIN |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| DD (1) | DD216806A1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1548443A4 (en) * | 2002-08-09 | 2006-09-06 | Arkray Inc | Test piece for protein assay and process for producing the same |
-
1983
- 1983-07-20 DD DD25322683A patent/DD216806A1/en not_active IP Right Cessation
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1548443A4 (en) * | 2002-08-09 | 2006-09-06 | Arkray Inc | Test piece for protein assay and process for producing the same |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE3015877C2 (en) | ||
| DE69128428T2 (en) | DIAGNOSTIC METHOD FOR DETECTING Tearing of FETAL MEMBRANES AND TEST SET FOR CARRYING OUT THE METHOD | |
| CH640638A5 (en) | TEST STRIP FOR GLUCOSE DETERMINATION. | |
| DE1944246A1 (en) | Method and device for the quantitative determination of chemical blood substances in blood derivatives | |
| DE3136579A1 (en) | ANALYSIS FOR THYROXIN AND 3, 5, 3'-TRIYODTHYRONINE | |
| DE3874623T2 (en) | ANALYTICAL METHOD AND ELEMENT FOR A PROTEIN SAMPLE. | |
| DE2016555C3 (en) | Method for the colorimetric or photometric determination of bilirubin | |
| DE1598756A1 (en) | Agent for the determination of urea in liquids | |
| DE2628468C2 (en) | Method for staining basophils and reagent for carrying out this method | |
| DE2602997C2 (en) | Lyophilized collagen preparation and process for their manufacture | |
| EP0077515B1 (en) | Method and composition for determining glycosylated hemoglobin | |
| DE2533458C2 (en) | Method and reagent for the determination of total calcium in body fluids | |
| DE3105555C2 (en) | ||
| EP0185335B1 (en) | Method for the determination of an allergy and method for the specific determination of the allergen responsible for the allergy | |
| EP1052512B1 (en) | Method and partial reagent for the determination of iron in serum | |
| DE69625024T2 (en) | Method for the detection of protein in urine | |
| DE60108316T2 (en) | Medical kit and method for the determination of a drug | |
| DE2850950C3 (en) | Use of native or thermally modified cytochrome c as a stabilizer for an immunochemical measuring reagent, an immunochemical measuring reagent and buffer solution for diluting samples in immunochemical measuring processes | |
| DE69114336T2 (en) | Dry analytical element for the determination of salicylate. | |
| DD216806A1 (en) | TEST STRIPS FOR THE DETECTION OF PROTEINS IN URIN | |
| DE2725594C2 (en) | Method for determining the concentration of free thyroid hormones in liquids, especially blood sera | |
| EP0358991B2 (en) | Test device for an optical determination of cations, anions or electrically neutral ionogenic species, and test method using said device | |
| DE2504994A1 (en) | PROCEDURE FOR CREATININE DETERMINATION | |
| DE2657926C3 (en) | Method for determining the antistreptolysin content in the blood | |
| EP0381091A2 (en) | Method for the determination of an enzyme from a mixture of isoenzymes, test carrier suited for the method and its use |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| ENJ | Ceased due to non-payment of renewal fee |