CZ448699A3

CZ448699A3 - Inhibitory farnesyltransferasy v kombinaci s inhibitory HMG CoA reduktasy pro léčení rakoviny

Info

Publication number: CZ448699A3
Application number: CZ19994486A
Authority: CZ
Inventors: Shama Mohammed Kajiji
Original assignee: Pfizer Products Inc.
Priority date: 1998-06-05
Filing date: 1998-06-05
Publication date: 2000-04-12

Abstract

Předložené řešení se týká farmaceutické kompozice pro léčení rakoviny u savců, včetně člověka, která obsahuje inhibitor Ftasy v kombinaci s inhibitoremHMG CoA reduktasy.

Description

Inhibitory farnesyltransferasy v kombinaci s inhibitory HMG CoA reduktasy pro léčení rakoviny

Oblast techniky

Tento vynález se týká použití inhibitoru farnesyltransferasy (FTasy) v kombinaci s inhibitorem hydroxymethylglutarylkoenzymu A (HMG CoA) reduktasy k léčení rakoviny u savců.

Dosavadní stav techniky

Onkogeny jsou geny, které, když jsou aktivovány, kódují proteinové komponenty signálních transdukčních cest, které vedou k abnormální stimulaci buněčného růstu a k mitogenesi. Exprese onkogenů v kultivovaných buňkách vede k buněčné transformaci, která je charakterizována schopností buněk růst v měkkém agaru a růstem buněk jako stálých ohnisek postrádajících stykovou inhibici vykazovanou netransformovanými buňkami.

Mutace a/nebo nadexprese určitých onkogenů je často spojena s lidskými rakovinami a jinými poruchami zahrnujícími (například neregulovaný) růst buněk. Například růst benigních nebo maligních tumorů může být vyvolán expresí aktivovaného Ras onkogenů nebo aktivací Ras proteinu dalším genem, který podlehl onkogenické mutaci. Abnormální růst buněk, který se vyskytuje v benigních a maligních buňkách jiných proliferačních poruch může být vyvolán aberantní Ras aktivací. Mutované onkogenní formy Ras jsou často nalézány v mnoha lidských rakovinách nejpatrněji ve více než 50 % tlustostřevních a pankreatických karcinomů (Kohl a j., Science, sv.260, 1834-1837, 1993).

• · · · • · · · · · • · • · · ·

Ras onkogen je expr Tipován v asi 40 % tuhých maligních tumorů, které nereagují na konvenční chemoterapie.

K-Ras isoforma je expriraována v asi 90 % pankreatických tumorů a asi 40 % kolorektálních a plicních rakovin.

Η-Ras isoforma je exprimována v asi 40 % rakovin hlavy a krku.

Η-Ras isoforma je exprimována při většině rakovin štítné žlázy a při asi 20 % akutních myeloidních leukémií.

K získání potenciálu pro transformaci normálních buněk na rakovinné buňky nebo benigní buňky, které vykazují abnormální růst, jak je definováno níže, prekursor Ras onkoproteinu musí podstoupit farnesylaci cysteinového zbytku uloženého v karboxyterminálním tetrapeptidu. Inhibitory enzymu, které katalýzují tuto modifikaci, farnesylproteinové transferasy, jsou tudíž užitečné jako protirakovinové prostředky pro tumory, ve kterých Ras přispívá k transformaci.

K-Ras isoforma může být jak farnesylována, tak geranylována v intaktních buňkách. Silné inhibitory enzymu farnesyl(FTasy), které jsou vysoce selektivní pro FTasu oproti geranyltransferase I (GGTasa I) mohou být neschopné blokovat prenylaci mutantu K-Ras a tudíž neefektivní při inhibici růstu K-Ras expresujících tumorových buněk.

Vynálezce tohoto vynálezu zjistil, že podávání nízkých dávek inhibitoru HMG CoA reduktasy v kombinaci se silně selektivním inhibitorem FTasy blokuje K-Ras prenylaci a K-Ras funkci stejně jako Η-Ras prenylaci a funkci. Aktivita proteinových prenyltransferas FTasy a GGTasy I je závislá na koncentracích isoprenoidních substrátů, farnesyl- a geranylgeranylpyrofosfatů. Mevalonat je první předložený intermediat v isoprenoidní cestě a jeho syntéza je závislá na aktivitě HMG CoA reduktasy.

«· · ·· · * ·· ·· ··»· β · · · • · · · · · · · • · · ♦ ♦ · ······ • · · · · ·

Sloučeniny jako je lovastatin a kompaktin, které jsou pevně vázajícími inhibitory HMG CoA reduktasy, blokují tvorbu mevalonatu a tak blokují isoprenoidní cestu. Tudíž inhibují jak FTasu tak GGTasu I.

Terapeutický účinek sloučenin z těchto dvou výše uvedených tříd léčiv (inhibitor FTasy a inhibitor HMG CoA reduktasy) se považuje za synergický. Vynálezce zjistil, že kombinované podávání inhibitoru FTasy a HMG CoA reduktasy překonává omezení, která existují když jsou podávány odděleně. Očekává se tudíž, že kombinace bude účinná v případech, kde jakýkoli samotný postředek by nebyl účinný.

Japonská patentová přihláška JP7316076A, která byla publikována 5. prosince 1995, se týká protirakovinové farmaceutické kompozice, která obsahuje limonen, který, i když není inhibitorem FTasy, ukázal, že zhoršuje začlenění od mevalonové kyseliny odvozené isoprenové sloučeniny do Ras a K-Ras vztažených proteinů, a pravastatin, který je inhibitorem HMG CoA reduktasy.

Podstata vynálezu

Předložený vynález se týká farmaceutické kompozice pro léčení rakoviny nebo benigních proliferačních poruch u savců včetně člověka, zahrnující inhibitor FTasy, inhibitor HMG CoA reduktasy a farmaceuticky akceptovatelný nosič, přičemž aktivní složky této kompozice (to je inhibitor FTasy a inhibitor HMG CoA reduktasy) jsou přítomny v množstvích, která působí, že kompozice je efektivní při léčení rakoviny nebo benigních proliferačních poruch.

Tento vynález se také týká způsobu léčení rakoviny nebo benigních proliferačních poruch u savců včetně člověka, • · který zahrnuje podávání tomuto savci protirakovinně a antiproliferačně účinného množství farmaceutické kompozice obsahující inhibitor FTasy, inhibitor HMG CoA reduk-tasy a farmaceuticky akceptovatelný nosič.

Tento vynález se také týká způsobu léčení rakoviny nebo benigní proliferační poruchy u savců včetně člověka, který zahrnuje podávání inhibitoru FTasy a inhibitoru HMG CoA reduktasy v množství, která působí, že kombinace těchto dvou aktivních prostředků je účinná při léčení rakoviny nebo benigní proliferační poruchy.

Tento vynález se také týká farmaceutické kompozice pro inhibici abnormálního růstu buněk u savců včetně člověka, zahrnující inhibitor FTasy, inhibitor HMG CoA reduktasy a farmaceuticky akceptovatelný nosič, kde aktivní složky v této kompozici (to je inhibitor FTasy a inhibitor HMG CoA reduktasy) jsou přítomny v množstvích, která působí, že tato kompozice je účinná při inhibici tohoto abnormálního růstu buněk.

Vynález se také týká způsobu inhibice abnormálního růstu buněk u savců včetně člověka, zahrnujícího podávání tomuto člověku inhibitoru FTasy a inhibitoru HMG CoA reduktasy v množstvích, která působí, že kombinace těchto dvou aktivních složek je účinná při inhibici tohoto abnormálního růstu buněk.

Výraz léčení, jak je zde použit, se týká prevence, zadržování nebo inhibice postupu poruchy, ke které je tento termín použit.

Abnormální buněčný růst jak je zde použit se týká buněčného růstu, který je nezávislý na normálních regulačních mechanizmech (například ztráta kontaktní inhibice).

9 9 9 9 9 9 9 9 • · * « 9 9 9 9 9 9 9 99 « 9 9 9 9 9 9 • 99 99 «99 9··9 9· 9·

- 5 Το zahrnuje abnormální růst (1) nádorových buněk (tumorů) exprimujících aktivovaný Ras onkogen, (2) nádorových buněk, ve kterých Ras protein je aktivován jako výsledek onkogenní mutace v dalším genu, a (3) benigních a maligních buněk jiných proliferačních onemocnění, ve kterých se vyskytuje aktivace aberantního Ras.

Příklady takovýchto benigních proliferačních onemocnění jsou psoriáza, benigní hypertrofie prostaty a restenosa.

Pacienti, kteří mohou být léčení inhibitorem FTasy v kombinaci s inhibitorem HMG CoA reduktasy podle způsobů tohoto vynálezu nebo použitím farmaceutických kompozic tohoto vynálezu, zahrnují například pacienty, kteří byli diagnostikováni, že mají rakovinu plic, rakovinu kostí, rakovinu pankreatu, rakovinu kůže, rakovinu hlavy a krku, kožní nebo intraokulární melanom, rakovinu dělohy, rakovinu vaječníků, rakovinu rekta, rakovinu anální oblasti, rakovinu žaludku, rakovinu tlustého střeva, rakovinu prsu, gynekologické tumory, (například sarkom dělohy, karcinom vejcovodů, karcinom endometria, karcinom čípku, karcinom vagíny nebo karcinom rodidel), Hodkinovu nemoc, rakovinu jícnu, rakovinu tenkého střeva, rakovinu endokrinního systému (například rakovinu štítné žlázy, rakovinu příštitných tělísek nebo nadledvinek), sarkomy měkkých tkání, rakovinu uretry, rakovinu penisu, rakovinu prostaty, chronickou nebo akutní leukémii, tuhé tumory v dětství, lymfocitni lymfonasy, rakovinu měchýře, rakovinu ledvin nebo uretru (například karcinom ledvinových buněk, karcinom ledvinových pánviček), nebo neoplasmy centrálního nervového systému (například lymfom primární CNS, tumory páteře, gliomy mozkového kmene nebo adenomy hypofýzy) .

Pacienti, kteří mohou být léčeni inhibitorem FTasy v kombinaci s inhibitorem HMG CoA reduktasy podle způsobu

FFF

F F F F

FFF FFF

F F

FF FF tohoto vynálezu nebo použitím farmaceutických kompozic tohoto vynálezu mohou také zahrnovat pacienty trpící abnormálním růstem buněk, jak je definováno výše.

Specifičtější provedení tohoto vynálezu týkajícího se výše uvedených farmaceutických kompozic a způsobů léčení jsou ty, kde se inhibitor FTasy vybere ze sloučenin zahrnujících (a) sloučeniny vzorce I

2 kde R a R jsou nezávisle vybrány ze skupiny zahrnující — (CII₂ )p( 5-10členné heterocykly) , -(CH_2Qaryl), allyl, propar .gyl a C.-C^-alkyl, kde p je 0 až 3, přičemž uvedený ® 12 alkyl a alkylové části R a R skupin jsou případně substituoQ vány 1 až 3 R substituenty, a aryl a heterocyklické části v z v

R a R skupin jsou případně substituovány 1 až 3 substitu9 enty nezávisle vybranými z halogenu a R ,

R je - (CII₂ )_m( 1- nebo 2-adamantyl), - (CH₂ ^(C^-Cf gCyklo-

X⁴ — (A) (B) • « 9

9 9 9

999

9

99

9

99 kde m je O až 6 a uvedený cykloalkyl a alkyl případně obsahuje 1 nebo 2 dvojné nebo trojné vazby,

123

X , X a X jsou každý nezávisle C.-C-alkylen, případně obsa,·*· ' 4 hující 1 nebo 2 dvojné nebo trojné vazby, X je vazba nebo C,-C_alkylem případně obsahujícím 1 nebo 2 dvojné nebo trojné ·*· ' 4 X vazby a ve vzorci (B) je X část připojena k X části v jakémkoli dostupném uhlíku v X^ části,

R⁴ je Cg-C^Qaryl, 5ti až lOčlenný heterocyklyl nebo Cf-Cgalkyl, kde každá z uvedených R⁴ skupin je případně substituována 1 až 3 R⁸ substituenty, ,

každý R substituent je nezávisle vybrán ze skupiny zahrnující halogen, nitro, kyan, fenyl,

C(O)OR⁶, -SO2NR⁶R⁷, -NR⁶R⁸, -C(O)R⁶, -OR⁶, -C(O)NR⁶R⁶, -OC(O)NR⁶R⁶, -NR⁸C(O)NR⁸R⁶, -NR®C(O)R⁸, -NR^aC(O)O(C,-C< alkyl), -C(NR⁸)NR⁸R⁶, -C(NCN)NR⁸R⁸, -C(NCN)S(CrC₄ alkyl), -NR^BC(NCN)S(CrC4 alkyl), -NR^eC(NCN)NR^eR⁶, -NR⁸SO2(C,-C₄ alkyl), -S(O)_n(C,-C₄ alkyl), přičemž n je 0 až 2, -NR⁸G(O)C(O)NR⁸R⁸, -NR⁸C(O)C(O)R⁸, thiazolyl, imidazolyl, oxazolyl, pyrazolyl, triazolyl, tetrazolyl a C^-C^alkyl, případně substituovaný 1 až 3 fluor substituenty, β 7 každý R a R je nezávisle vodík nebo C^-C^alkyl, každý R⁸ je nezávisle R⁸ nebo -OR⁸, a každý R⁹ je nezávisle vybrán z kyan, R⁸, -OR⁸, -OC(O)R⁸, -C(O)OR⁸, -C(O)NR⁸R⁷, -NR⁸R⁷, -NR⁸R⁸, -SO₂NR⁸R⁷ a Cf-C^alkyl substituovaný hydroxy, a (b) sloučeniny vzorce IIA nebo IIB • 44 44 ·· »44 4 4 44 · • 4 4 4 ··· · 444·· ···

4 4 · ·

444 4444 44 44

(HA) (ΙΙΒ) kde R je vodík, halogen (například chlor, fluor, brom nebo 5 5 5 jod), kyan, hydroxy, nitro, trifluormethyl, -NHR , -NR R ,

R⁵, -OR⁵ nebo -S(0) -R⁵, m

R² je -(CH₂)_n-y nebo -OCOR⁵,

R je 4-, 3-, nebo 2-pyridyl, pyrimidyl, pyrazmyl,

2-fluor-4-pyridyl nebo 3-fluor-4-pyridyl,

R je 1-adamantyl nebo 2-adamantyl,

5 5 5 y je vodík, hydroxy, amino, kyan, -NHR , -NR R , -NHCOR , -NHCO„R⁵, halogen, OR⁵, -S(0) R⁵, -CO„H, -CO„R⁵, -CONR⁵R⁵, c c ΠΙ j- 2, j- £

-CONHR , -CONH₂, -COR , -CH=CIICO₂R , -OCOR , fenyl, fenyl substituovaný W, -C=CCO₂R⁵, -CH=CHR⁵ nebo -C^CR⁵, každý R je nezávisle (C^-C^Jnerozvětveny nebo rozvětvený alkyl, fenyl nebo benzyl, přičemž fenyl a fenylová část benzylu mohou být případně substituovány halogenem, hydroxy, nitro, kyanem, amino, (C^-C^)rozvětveným nebo nerozvětveným alkylem, (C^-C^j)rozvětveným nebo nerozvětveným alkoxy, fenylem, benzylem, (C^-C₄)alkylamino, di[(C^-C^)alkyl]amino nebo -S(0)^-(C^-C^)rozvětveným nebo nerozvětveným alkylem,

5 každý W je nezávisle halogen, R , hydroxy, -OR , nitro, amino, -NHR⁵, -NR⁵R⁵, kyan nebo -S(O)_m-R⁵, • 9 · * ·« » ♦ · · • · · · • · · · t • « ♦ · ··· ·· ··· ·· ·« • · · · · · • · · · 9 » ··· ··· * · · ··*· ·♦ m je O, 1 nebo 2, n je 1 až 7, p je 0 nebo 1, , . , ,

E a E jsou vybrány nezávisle ze skupiny zahrnující vodík, halogen, (C^^-C^Jalkyl, hydroxy, (C^-Cj)alkoxy, nitro, trifluormethyl, kyan, amino, (C^-C^)alkylamino a di[(C^-C₃)alkyl]amino, a jejich farmaceuticky akceptovatelné soli,

Heť a Iíeť' jsou vybrány nezávisle z 6členných heterocyklických kruhů obsahujících od 1 do 4 atomů dusíku jako část kruhu, případně substituovaných jedním substituentem vybraným z (C^-Cg)alkylu, halogenu, hydroxy, (C^-Cg)alkoxy, amino, (Ci“^C3)alkylamino a di[(C^-C^)alkyl]amino, a (c) sloučeniny vzorce III

(III) kde obě přerušované čáry představují případné dvojné vazby,

Z je kyslík nebo síra, když je dvojně vázán ke kruhu Λ a Z hydroxy, ₍ , kyl-SO₂~, adamant-2-yl-S-, naftyl-S-, benzyl-S-, fenyl-C(=O)CH₂~S-, (C₁-C_g)alkyl-O-C(=O)-CH₂-S- nebo (H,H)(to je,

Z představuje 2 atomy vodíku, z nichž každý je jednoduše vázán ke stejnému uhlíku kruhu A), když Z je jednoduše vázán ke kruhu A, a kde naftyl a fenyl a fenylová část benzylu ·♦ mohou být případně substituovány od 1 do 3 substituentů nezávisle vybraných ze skupiny zahrnující (C^-Cg)alkyl případně substituovaný 1 až 3 atomy fluoru, (C^-Cg)alkoxy případně substituovaný 1 až 3 atomy fluoru, halogen (například chlor, fluor, brom nebo jod), amino, (C^-Cg)alkylamino, di[(C^-Cg)alkyljamino, kyan, nitro, (C^-Cg)alkyl-SO_n~ kde n je 0, 1 nebo 2, -COOH, -COO(C₁~Cg ) alkyl a -C(O)NH(C^-Cg)alkyl,

X je NR¹ nebo CHR¹,

R¹ je vodík, (C^-Cg)alkyl nebo (C^-Cg)alkylfenyl, kde kruh A je nasycen (to je když kruh A neobsahuje žádnou dvojnou vazbu) a R^x je nepřítomen, když kruh A obsahuje dvojnou vazbu,

R je vybrán ze skupiny zahrnující naftyl, fenyl, (C^-Cg)alkylfenyl, 1-adamantyl, 2-adamantyl, (C^-Cg)rozvětvený nebo nerozvětvený alkyl, (Cg-C-^Q) cykloalkyl a (Cg-Cgg)bicyklický nebo tricyklický alkyl, přičemž (Cg-C^Q)cykloalkyl a (CgCgg)bicyklický nebo tricyklický alkyl může být případně substituován hydroxyskupinou, a přičemž adamantylová skupina může být případně substituována jedním až 3 substituenty nezávisle vybranými z (C^-Cg)alkylu, halogenu a hydroxy, a

R^ a R^ jsou nezávisle vybrány ze skupiny zahrnující benzyl, přičemž fenylová část tohoto benzylu může být případně substituována amino nebo nitroskupinou, vodík, fenyl, (N=C)-(C^Cg)alkyl, (C^-Cg)alkyl-O-C(=O)-(C^-Cg)alkyl a Het-CI^ t kde I-Iet je vybrán z 2-, 3- nebo 4-pyridinyl, furyl, tetrahydrofuryl, pyrimidyl, pyrazinyl, pyrazolyl, isoxazolyl, thiofenyl a tůiazolyl, za podmínky, že (a) ne více než 1 nebo 2 přerušované čáry mohou představovat dvojnou vazbu v kterékoli jedné sloučenině, (b) když Z je (Η,Η), X je CHgt © ·· ©· · © • # · • · · © • · · • · · © · © «··· ··· (c) když Z je kyslík nebo (11,11) a X je CIIR''', R^ musí být vodík, (d) když Z je síra a X je NR'’, R^ musí být vodík, a (e) jeden z R³ a R⁴ musí být Het-CH₂, a

(IV) a farmaceuticky akceptovatelné soli předcházejících sloučenin.

Jiná specifičtější provedení tohoto vynálezu se vztahují k jakékoli z výše uvedených farmaceutických kompozic a metod léčení, kde inhibitor FTasy je vybrán ze sloučenin 12 vzorce I definovaných výše, kde R a R jsou oba -(CH?) z p (5-10členné heterocykly), kde p je 1 nebo 2.

Jiná specifičtější provedení tohoto vynálezu se týkají kterékoli z výše uvedených farmaceutických kompozic a způsobů léčení, kde inhibitor FTasy je vybrán ze sloučenin vzorce I definovaných výše, kde R je -(CH₂) (pinan), kde m je 0, nebo 2 a zejména těch, kde R³ je pinanmethyl.

Jiná specifičtější provedení tohoto vynálezu se vztahují ke kterékoli z výše uvedených farmacutických kompozic a metod léčení, kde inhibitor FTasy je vybrán ze sloučenin 3 vzorce I definovaných výše, kde R je «·» ··

·· *· ·· • · · · · · • · · · · • · ·*··*· • · · ··©· ·* ♦© kde xY X², X² a Χ^ mají výše uvedený význam.

Jiná specifičtější provedení tohoto vynálezu se vztahují ke kterékoli z výše uvedených farmaceutických kompozic a metod léčení, kde inhibitor FTasy je vybrán ze sloučenin vzorce I jak jsou výše popsány, kde iY je fenyl případně 5 substituovaný 1 až 3 R substituenty.

Jiná specifičtější provedení tohoto vynálezu se vztahují ke kterékoli z výše uvedených farmaceutických kompozic a metod léčení, kde inhibitor FTasy je vybrán z následujících sloučenin:

2- [2-(4-bromfenyl)-2-oxoethyliden]-5,5-bispyridin-4-ylmethyl3- (2,6,6-trimethylbicyklo [3,1,1]hept-3-ylmethyl)imidazolidin4- on,

- [[5-oxo-4,4-bispyridin-4-ylmethyl-l-(2,6,6-trimethylbicyklo [3,1,^-hept-3-ylmethyl) imidazolidin-2-yliden]acetyl] benzonitril,

2- [2-(4-chlorfenyl)-2-oxoethyliden]-5,5-bispyridin-4-ylmethyl3- (2,6,6-trimethylbicyklo[3,1,l]hept-3-ylmethyl)imidazolidin4- on,

2-[2-(3,4-dichlorfenyl)-2-oxoethyliden] -5,5-bispyridin-4ylmethyl-3-(2,6,6-trimethylbicyklo[3,1,1]hept-3-ylmethy1)imidazolidin-4-on, • 9

9 9 • 99 99

99 ·9 99 «99 9 9 99 9 • 9 9 9 9 9 * 9 999999

9 9 9

9999999 99 99

2-[2-(3-nitrofenyl)-2-oxoethyliden]-5,5-bispyridin-4-ylmethyl-3-(2,6,6-trimethylbicyklo[3,1, l] hept-3-ylmethyl)imidazolidin-4-on,

2- [2-(4-methoxyfenyl)-2-oxoethyliden]-5,5-bispyridin-4-ylmethyl-3-(2,6,6-trimethylbicyklo[3,1,l]hept-3-ylmethyl)imidazolidin-4-on,

2-[2-(3-methoxyfenyl)-2-oxoethyliden]-5,5-bispyridin-4-ylmethyl-3-(2,6,6-trimethylbicyklo[3,1,l]hept-3-ylmethyl)imidazolidin-4-on,

2-[2-(2-methoxyfenyl)-2-oxoethyliden]-5,5-bispyridin-4-ylmethyl-3-(2,6,6-trimethylbicyklo[3,1,l]hept-3-ylmethyl)imidazolidin-4-on,

2- (2-bifenyl-4-yl-2-oxoethyliden)-5,5-bispyridin-4-ylmethyl3- (2,6,6-trimethylbicyklo[3,1,l]hept-3-ylmethyl)imidazolidin4- on,

2- (2-naftalen-2-yl-2-oxoethyliden)-5,5-bispyridin-4-ylmethyl3- (2,6,6-trimethylbicyklo [3,1,l]hept-3-ylmethyl)imidazolidin-4-on,

2- [2-(4-fluorfenyl)-2-oxoethyliden]-5,5-bispyridin-4-ylmethyl-3-(2,6,6-trimethylbicyklo[3,1,l]hept-3-ylmethyl)imidazolidin-4-on,

2- [2-(2,4-difluorfenyl)-2-oxoethyliden]-5,5-bispyridin-4ylmethyl-3-(2,6,6-trimethylbicyklo[3,1,l]hept-3-ylmethyl)imidazolidin-4-on,

4-£[5-oxo-4,4-bispyridin-4-ylmethyl-l-(2,6,6-trimethylbicyklo [3,1,l]hept-3-yl)imidazolidin-2-yliden]acetyl}benzonitril, • 9

9

4

4 ·

94 99

9 9 4 ·· «494 • 4 494 49«

9 4

44994 94 49

- 14 2- [2-(4-nitrofenyl)-2-oxoethyliden]-5,5-bispyridin-4-ylmethyl-3-(2,6,6-trimethylbicyklo[3,1,l] hept-3-ylmethyl)imidazolin-4-on,

2- [2-oxo-2-fenylethyliden]-5,5-bispyridin-4-ylmethyl-3-(2,6,6-trimethylbicyklo[3,1,1]hept-3-ylmethyl)imidazolidin4-on,

2- ^2-oxo-2-[4-(2H-tetrazol-5-yl)fenyl]ethyliden}-5,5-bispyridin-4-ylmethyl-3-(2,6,6-trimethylbicyklo[3,1,l]hept-3ylmethyl)imidazolidin-4-on,

3- £[5-oxo-4,4-bispyridin-4-ylmethyl-l-(2,6,6-trimethylbicyklo [3 , 1 , l] hept-3-ylmethyl)imidazolidin-2-yliden]acetyljbenzonitril, ethylester

4- [[5-OXO-4,4-bispyridin-4-ylmethyl-l-(2,6,6-trimethylbicyklo [3,1, l] hept-3-ylmethyl)imidazolidin-2-yliden]acetylj benzoové kyseliny,

2- £2-oxo-2-(4-trifluormethylfenyl)ethyliden]-5,5-bispyridin4-ylmethy1-3-(2,6,6-trimethylbicyklo[3,1,l]hept-3-ylmethyl)imidazolidin-4-on,

2- [2-(4-methansulfonylfenyl)-2-oxoethyliden]-5,5-bispyridin4-ylmethyl-3-(2,6,6-trimethylbicyklo[3,1,l] hept-3-ylmethyl)imidazolidin-4-on, — £ [l— ( 6,6-dimethylbicyklo[3,1,l]hept-2-ylmethyl)-5-oxo4,4-bispyridin-4-ylmethylimidazolidin-2-yliden]acetylj benzonitril,

4- [(1-bicyklo[2,2,2] okt-l-ylmethyl-5-oxo-4,4-bispyridin-4ylmethylimidazolidin-2-yliden)acetyl]benzonitril,

4- £ [l-(2-ethyl-6,6-dimethylbicyklo[3,1,l] hept-3-ylmethyl)5- oxo-4,4-bispyridin-4-ylmethylimidazolidin-2-yliden] acetylj benzonitril, • ·· «· · · • · · • · ♦ · • · ·

999 99

99 99 «·

9· 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 · 9 999 999

9 9 9

999 9999 99 99

4- [[l—(2-benzyl-6,6-dimethylbicyklo[3,1, l]hept-3-ylmethyl)5- oxo-4,4-bispyridin-4-ylmethylimidazolidin-2-yliden]aceyl} benzonitril,

4- {[l-(2-isopropenyl-6,6-dimethylbicyklo[3,1, l]hept-3-ylmethyl)

5- oxo-4,4-bispyridin-4-ylmethylimidazolidin-2-yliden]acetyl} benzonitril,

4- {[l- (2-isopropyl-6,6-dimethylbicyklo[3,1,l]hept-3-ylmethy1)5- oxo-4,4-bispyridin-4-ylmethylimidazolidin-2-yliden]acetyl}benzonitril —(£l—[2-(1-methoxyiminoethyl)-6,6-dimethylbicyklo[3,1,1]hept-3-ylmethyl]-5-oxo-4,4-bispyridin-4-ylmethylimidazolidin-2-yliden}acetyl)benzonitril,

4{[l-(6,6-dimethyl-2-methylenbicyklo[3,1, l]hept-3-ylmethyl)5-oxo-4,4-bispyridin-4-ylmethylimidazolidin-2-yliden]acetyl} benzonitril, — £[1—(2-hydroxy-2-hydroxymethyl-6,6-dimethylbicyklo[3,1, l] hept-3-ylmethyl)-5-oxo-4,4-bispyridin-4-ylmethylimidazolidin2- yliden] acetyl} benzonitril,

4- 1[l-(6,6-dimethyl-2-oxobicyklo [3,1,l}hept-3-ylmethyl)5- oxo-4,4-bispyridin-4-ylmethylimidazolidin-2-yliden}acetyl}benzonitril,

3- terjíc .butyl-2- (2-oxo-2-f enylethyliden) -5,5-bispyridin-4ylmethylimidazolidin-4-on,

4- f[l-(2,2-dimethylpropyl)-5-oxo-4,4-bispyridin-4-ylmethylimidazolidin-2-ylidenj acetyl} benzonitril,

4-{[l-(2-adamantan-l-ylethyl)-5-oxo-4,4-bispyridin-4-ylmethylimidazolidin-2-yliden}acetyl} benzonitril, • ·

3- cyklohexy1-2-(2-oxo-2-fenylethyliden)-5,5-bispyridin-4ylmethylimidazolidin-4-on,

4- [(l-adamant-l-ylmethyl-5-oxo-4,4-bispyridin-4-ylmethylimidazolidin-2-yliden)acetyl] benzonitril,

4-[(1-cyklohexylmethyl-5-oxo-4,4-bispyridin-4-ylmethylimidazolidin-2-yliden)acetyl]benzonitril,

3-hexyl-2-(2-oxo-2-fenylethyliden)-5,5-bispyridin-4-ylmethylimidazolidin-4-on,

3- naftalen-l-yl-2-(2-oxo-2-fenylethyliden)-5,5-bispyridin4- ylmethylimidazolidin-4-on,

3- adamantan-l-yl-2-(2-oxo-2-fenylethyliden)-5,5-bispyridin4- ylmethylimidazolidin-4-on,

3-adamantan-l-yl-2- [2-(4-nitrofenyl)-2-oxoethyliden] -5,5bispyridin-4-ylmethylimidazolidin-4-on,

4-[(l-benzyl-5-oxo-4,4-bispyridin-4-ylmethylimidazolidin2-yliden)acetyl]benzonitril,

4-[(1-ally1-5-oxo-4,4-bispyridin-4-ylmethylimidazolidin-2y liden)acetyl]benzonitril,

4-[(l-methyl-5-oxo-4,4-bispyridin-4-ylmethylimidazolidin2-yliden)acetyl]benzonitril,

4-£[l-(2,2-diethoxyethyl)-5-oxo-4, 4-bispyridin-4-ylmethylimidazolidin-2-yliden]acetyl}benzonitril,

4- [(l-adamantan-2-ylmethyl-5-oxo-4,4-bispyridin-4-ylmethylimidazolidin-2-yliden)acetyl]benzonitril,

4- [ (l-adamantan-2-yl-5-oxo-4,4-bispyridin-4-ylmethylimidazolidin-2-yliden)acetyl]benzonitril,

4[(5-oxo-l-fenyl-4,4-bispyridin-4-ylmethylimidazolidin-2yliden)acetyl]benzonitril, a

4-££4--terč .butylfeny 1-5-oxo-4,4-bispyridin-4-ylmethylimidazolidin-2-ylidenJ acetyl] benzonitril, a farmaceuticky akceptovatelné soli těchto sloučenin.

Jiná specifičtější provedení tohoto vynálezu se vztahují k jakékoli z výše uvedených farmaceutických kompozic a způsobů léčení, přičemž inhibitor HMG CoA reduktasy obsažený v takovéto kompozici nebo použitý takovouto metodou je vybrán ze skupiny zahrnující atorvastatin, pravastatin, niacin, gemfibrozil, klofibrat, lovastatin, fluvastatin, simvastatin a kompaktin a farmaceuticky akceptovatelné soli předcházejících sloučenin.

Jiná specifičtější provedení tohoto vynálezu se vztahují k jakékoli výše uvedené farmaceutické kompozici a způsobu léčení, kde inhibitor HMG CoA reduktasy obsažen v této kompozici nebo použitý v takovéto směsi, kterýmžto je atorvastatin.

Jiná specifičtější provedení tohoto vynálezu se vztahují k jakékoli z výše uvedených kompozic a způsobů léčení, přičemž inhibitor HMG CoA reduktasy, obsažený v takovéto kompozici nebo použitý v takovémto způsobu je lovastatin.

Jiná specifičtější provedení tohoto vynálezu se vztahují k jakékoli z výše uvedených farmaceutických kompozic a způsobů léčení, přičemž inhibitor FTasy obsažený v takovéto kompozici nebo použitý v takovémto způsobu je vybrán z:

• · · · ♦ · · • · « · · ······ (a) sloučenin vzorce IIA jak jsou definovány výše, přičemž 3

R je 4-pyndyl, 4-pynmidyl nebo 2-fluor-4-pyndyl, (b) sloučeniny vzorce IIA jak jsou definovány výše, přičemž R² je -(CH₂)_nY, (c) sloučenin vzorce IIA jak jsou definovaný výše, kde R je -(CH„) Y a n je celé číslo od 1 do 5, (d) sloučenin vzorce IIA nebo IIB jak jsou definovány výše, kde každý z R^, E^, E² a R^, je-li přítomen, je vodík, a (e) sloučenin vzorce IIA jak jsou definovaný výše, kde R je -(CH₂)_n-Y, r! je 4-pyridyl, 4-pyrimidyl nebo 2-fluor-4pyridyl, R⁵ je (C^-C2)alkyl a Y je -CO2R⁵, kyan, -CONHR^, CII=CHCO2R⁵ nebo -OCOR⁵.

Jiná specifičtější provedení tohoto vynálezu se vztahují ke kterékoli z výše uvedených farmaceutických kompozic a způsobů léčení, kde inhibitor FTasy obsažené v takovéto kompozici nebo použitý v takovémto způsobu není limonen nebo d-limonen.

Výraz alkyl jak je zde použit, pokud není označeno jinak, zahrnuje nasycené monovalentní uhlovodíkové skupiny mající nerozvětvené, rozvětvené nebo cyklické části nebo jejich kombinace.

Výraz halogen jak je zde použití se vztahuje k chloru, fluoru, bromu nebo jodu.

Výše uvedené sloučeniny vzorců I, IIA, IIB, III a IV mohou obsahovat jedno nebo více chirálních center a tudíž mohou existovat ve dvou nebo více enantiomerních a diastereoisomerních formách.

·· ·· 9 · · ······ • · · · · · · ·· · 99 <999999 99 99

- 19 Výše uvedené definice sloučenin majících vzorce I,

ΙΑ, IIB, III a IV zahrnují všechny enantiomery, diastereoisomery a jiné stereoisomery těchto sloučenin, stejně jako jejich směsi.

Následující odkazy se vztahují ke sloučeninám, které vykazují aktivitu jako inhibitory FTasy a které mohou být použity, v kombinaci s inhibitorem HMG CoA reduktasy, ve farmaceutických kompozicích a způsobech tohoto vynálezu, a k způsobům přípravy: Mezinárodní patentová přihláška PCT/US92/11292, která určuje Spojené státy a byla publiková22. července 1993 jako WO 93/14085, US patent 4 876 259, který byl vydán 24. října 1989, US patent ΙΊ1345, který byl vydán 2. srpna 1994, US patent 5 260 332, který byl vydán 9. listopadu 1993, US patent 5 262 435, který byl vydán

16. listopadu 1993, US patent 5 369 125, vydán 29. listopadu 1994, Světová patentová přihláška WO 93/24633, která byla publikována 9. prosince 1993, Světová patentová přihláška WO 94/03597, která byla publikována 17. února 1994, Světová patentová přihláška WO 94/16069, která byla publikována

21. června 1994, G.L.Bulton a j., 209. Národní mítink americké chemické společnosti, Anaheim, Ca, 2.-6.dubna 1995, Division of Med. Chem., Abs. č. 032, Světová patentová přihláška

WO 95/00497, která byla publikována 5. ledna 1995, US patent 5 260 479, který byl publikován 9. listopadu 1993, Světová patentová přihláška WO 95/10514, Světová patentová přihláška WO 95/10515, Světová patentová přihláška WO 95/10516, Světová patentová přihláška WO 95/12572, která byla publikována

11. května 1995, Světová patentová přihláška WO 95/11917, která byla publikována 4.května 1995, Světová patentová přihláška WO 94/26723, která byla publikována 24. listopadu 1994, Světová patentová přihláška WO 95/25086, která byla publikována 21. září 1995.

« · ·· · · .·· · · ·· · »·· · »···· ,, . . · · · ··»··· • » · · · · · .· * ·· ..·..·· ·· ··

- 20 Dále je to Kanda a j., AFMC, Mezinárodní symposium lékařské chemie AIMECS 95, Tokio, Japonsko, Poster P7M153,

4. září 1995, Světová patentová přihláška WO 96/10037, která byla publikována 4. dubna 1996, Světová patentová přihláška WO 96/10035, která byla publikována 4. dubna 1996, Světová patentová přihláška WO 96/10034, která byla publikována

4. dubna 1996, Světová patentová přihláška WO 96/10011, která byla publikována 6. dubna 1996, Světová patentová přihláška WO 96/10011, která byla publikována 6. dubna 1996, Světová patentová přihláška WO 96/09821, která byla publikována

4. dubna 1996, Světová patentová přihláška WO 96/09820, která byla publikována 4. dubna 1996, Quin a j., 211. Národní mítink Americké chemické společnosti, New Orleans, La, 24.28. března 1996, přednáška COMP 012, 24. března 1996, Světové patentové přihlášky WO 96/06609 a WO 96/06604, které obě byly publikovány 7. března 1996, Evropská patentová přihláška EP 696 593, která byla publikována 14. února 1996, Hartman, G.D., 14. Mezinárodní symposium lékařské chemie, Maastricht, Nizozemí, 8.-12. září 1996, přednáška SL-08.3, 10.9.96, Světová patentová přihláška WO 96/30363, která byla publikována 3. října 1996, Světová patentová přihláška WO 96/30343, která byla publikována 3. října 1996, Světová patentová přihláška WO 97/03050, Světová patentová přihláška WO 94/26723, která byla publikována 24. listopadu 1994, Mezinárodní patentová přihláška PCT/IB 95/00189, která určuje Spojené státy a byla přihlášena 20. března 1995, US patentová přihláška 08/236 743, která byla přihlášena 29. dubna 1994, US prozatímní přihláška nazvaná Adamantylem substituované oxindoly jako farmaceutické prostředky, která byla přihlášena 28. května 1996 na jméno R.A.Volkmanna a J.P.Lyssikatose, US patent 5 350 867, který byl vydán 27. září 1994, US patent 5 352 705, který byl vydán 4. října 1994, US patent 5 565 489, který byl vydán 15. října 1996, Evropská patentová přihláška EP 750 609, která byla publikována 2. ledna 1997, Evropská patentová přihláška 461 869, která byla publikována 18.12.1991, « 9

I 9 9 99 9

- 21 a Světová patentová přihláška 96/21456, která byla publikována 18. července 1996.

Následující odkazy se vztahují na sloučeniny, které vykazují aktivitu jako inhibitory HMG CoA reduktasy a které mohou být použity v kombinaci s inhibitorem FTasy ve farmaceutických kompozicích a způsobech tohoto vynálezu, a ke způsobům jejich přípravy: US patent 4 681 893 vydaná 21.července 1987, US patent 5 273 995, vydaný 28. prosince 1993,

US patent 5 385 929 vydaný 31. ledna 1995, US patent 4 957 971 vydaný 18. září 1990, US patent 5 102 893 vydaný 7. dubna 1992, US patent 4 957 940 vydaný 18. září 1990, US patent

950 675 vydaný 21. srpna 1990, US patent 4 929 620 vydaný

29. května 1990, US patent 4 923 861 vydaný 8. května 1990,

US patent 4 906 675 vydaný 6. března 1990, US patent 4 868 185 vydaný 19. září 1989, US patent 5 124 482 vydaný 23. června 1992, US patent 5 003 080 vydaný 26. března 1991, US patent

097 045 vydaný 17. března 1992, US patent 5 149 837 vydaný

22. září 1992, US patent 4 906 624 vydaný 6. března 1990,

US patent 4 761 419 vydaný 2. srpna 1988, US patent 4 735 950 vydaný 5. dubna 1938, US patent 4 808 621 vydaný 28.února 1989, US patent 4 647 576 vydaný 3. března 1987, US patent 5 118 882 vydaný 2. června 1992, US patent 5 214 197 vydaný

25. května 1993, US patent 5 321 046 vydaný 14. června 1994,

US patent 5 260 440 vydaný 9. listopadu 1993 a US patent 5 208 258 vydaný 4. května 1993.

Dále je to US patent 5 369 125 vydaný 29. listopadu 1994, US patent H1345 vydaný 2. srpna 1994, US patent 5 262 435 vydaný 16. listopadu 1993 a US patent 5 260 332 vydaný 9. listopadu 1993.

Dále je to britská patentová přihláška GB 2 055 100 publikovaná 25. února 1981, US patent 4 499 289 vydaný

12. února 1983, US patent 4 645 854 vydaný 24. února 1987,

US patent 4 613 610 vydaný 23. září 1986, US patent 4 668 699

Φ • φ r

♦ Φ · • · · ΦΦΦ • Φ

Φ · Φ Φ vydaný 26. května 1987, US patent 4 851 436 vydaný 25.7.1989 US patent 4 678 806 vydaný 7. července 1987, US patent 4 772 626 vydaný 20. září 1988, US patent 4 855 321 vydaný

8. srpna 1989, Evropská patentová přihláška EP 244 364 publikovaná 4. listopadu 1987, US patent 4 766 145 vydaný 23. srpna 1988, US patent 4 876 279 vydaný 24. října 1989, US patent 4 847 306 vydaný 11. července 1989, US patent 5 049 696 vydaný 17. září 1991, Evropská patentová přihláška EP 245 990 publikovaná 19. listopadu 1987, Evropská patentová přihláška EP 251 625 publikovaná 7. ledna 1988, US patent 4 719 229 publikovaný 12. ledna 1988 a japonská patentová přihláška 63014722 publikovaná 21. ledna 1988.

Dále je to US patent 4 736 064 vydaný 5. dubna 1988,

US patent 4 738 982 vydaný 19. dubna 1988, US patent

845 237 vydaný 4. července 1989, Evropský patent EP 306 263 udělený 18. března 1992, US patent 5 026 708 vydaný 25.6.1991, US patent 4 863 957 vydaný 5. září 1989, US patent 4 946 841 vydaný 7. srpna 1990, Evropský patent 339 358 udělený 13. července 1994, US patent 4 937 264, vydaný 26.6.1998, US patent 4 876 366 vydaný 24. října 1989, US patent 4 921 974 vydaný 1. května 1990, US patent 4 963 538 vydaný 16. října 1990, US patent 5 130 306 vydaný 14. července 1992, US patent 4 900 754 vydaný 13. února 1990, US patent 5 026 698 vydaný 25. června 1991, US patent 4 977 161 vydaný 11. prosince 1990, US patent 4 927 851 vydaný 22. května 1990, Evropská patentová přihláška EP 373 507 publikovaná 20. června 1990, US patent 4 939 143 vydaný 3. července 1990, US patent 4 939 159 vydaný 3. července 1990, US patent 4 940 727 vydaný 10. července 1990, US patent 5 116 870 vydaný 26.května 1992, australský patent AU 635 545, udělený 25. března 1993, US patent 5 098 391 vydaný 24. března 1992, US patent

294 724 vydaný 15. března 1994, US patent 5 001 255 vydaný 19. března 1991, US patent 5 149 834 vydaný 22. září 1992, • · t

- 23 US patent 5 089 523 vydaný 18. února 1992, Evropská patentová přihláška EP 465 265 vydaná 8. ledna 1992, US patent 5 476 846 vydaný 19. prosince 1995, US patent 5 321 046 vydaný 14. června 1994, US patent 5 106 992 vydaný 21. dubna 1992 a US patent 5 347 039 vydaný 13. září 1994.

Dále je to japonská patentová přihláška 4193836, publikovaná 13. července 1992, britská patentová přihláška 2253787 publikovaná 23. září 1992, US patent 5 411 969 vydaný 2. května 1995, japonská patentová přihláška 4 356 435 publikovaná 10. prosince 1992, US patent 5 266 707 vydaný

30. listopadu 1993, US patent 5 455 247 vydaný 3. října 1995, US patent 5 475 029 vydaný 12. prosince 1995, US patent 5 591 772 vydaný 7. ledna 1997, US patent 5 286 746 vydaný 15. února 1994, japonská patentová přihláška JP 7089898 publikovaná 4. dubna 1995, Evropská patentová přihláška EP 677 039 publikovaná 18. října 1995 a Světová patentová přihláška 96/08248 publikovaná 21. března 1996.

Vynález se týká jak způsobů léčení rakoviny, při kterých se inhibitor FTasy a inhibitor HMG CoA reduktasy podávají společně jako část téže farmaceutické kompozice, stejně jako způsobů, při kterých tyto dva aktivní prostředky se podávají odděleně jako část příslušného dávkovacího režimu určeného k získání výhod kombinační terapie. Příslušný dávkovači režim, množství každé podávané dávky a specifické intervaly mezi dávkami každého aktivního prostředku budou záviset na subjektu, který je léčen, typu rakoviny nebo abnormálního růstu buněk a závažnosti stavu.

Při provádění způsobů tohoto vynálezu inhibitor FTasy bude podáván v množstvích uvedených v literatuře nebo v množstvích, kterým se jinak věří, že jsou efektivní, pro podávání této sloučeniny jako jediného aktivního prostředku pro • * * · · · ··♦ ♦ · »· ♦

9 9 9 9 · 9 9 9

9* · · · ♦ · ······ · · 9 · 9 « ··· · · 9 9 9 9-·9 9 © · ··

- 24 léčení rakoviny nebo inhibici abnormálního růstu buněk,a inhibitor HMG CoA reduktasy bude podáván v množství, které je asi 1/4 až 1/2 množství uvedeného v literatuře nebo jiného, kterému se věří, že je účinné, pro podávání takovéto sloučeniny jako jediného prostředku pro léčení hypercholesterolemie.

Například při provádění předloženého vynálezu inhibitory FTasy vzoraců I, IIA, IIB a III budou typicky podávány průměrnému 70 kg těžkému dospělému člověku v množství v rozmezí od asi 0,005 do asi 0,6 mg/kg tělesné hmotnosti subjektu, který je léčen na den, v jedné nebo rozdělených dávkách a inhibitor HMG CoA reduktasy atorvastatin bude typicky podáván v množství v rozmezí od asi 0,07 do asi 3,6 mg na kg tělesné hmotnosti na den, v jedné nebo rozdělených dávkách.

Nicméně se mohou vyskytnout rozdíly v závislosti na druzích živočichů, kteří se mají léčit a jejich individuální odpovědi na uvedené léčivo stejně jako na typu zvolené farmaceutické formulace a na časové periodě a intevalu, ve kterých se takovéto podávání provádí. V některých případech dávkovači hladiny pod spodní hranici výše uvedeného rozmezí mohou být více než odpovídající, zatímco v jiných případech dávkovači hladiny vyšší než výše uvedená horní denní hranice mohou být použity bez vyvolání jakéhokoli škodlivého postranního účinku za podmínky, že takovéto vyšší dávky jsou podávány jako několik malých dávek pro podávání během dne.

Inhibitory FTasy a inhibitory HMG CoA reduktasy, které se využívají ve farmaceutických kompozicích a způsobech tohoto vynálezu, jsou dále také označovány jako terapeutické prostředky. Terapeutické prostřeadky mohou být podávány buá orální nebo parenterální cestou. Kompozice obsahující jak inhibitor FTasy tak inhibitor HMG CoA reduktasy budou obecně podávány orálně nebo paranterálně denně v jednotlivé nebo rozdělených dávkách tak, aby celkové množství každého podávaného aktivního prostředku spadalo do výše uvedených směrnic.

• ♦ • · · · · · · · · • F ·· F · * F« F F F · • · · · · · · ··« «· FFF FFFF FF FF

- 25 Terapeutické prostředky mohou být podávány samotné nebo v kombinaci s farmaceuticky akceptovatelnými nosiči nebo ředidly jakýmikoli cestami dříve indikovanými a toto podávání může být prováděno v jedné nebo více dávkách. Zejména nové terapeutické prostředky tohoto vynálezu mohou být podávány v široké rozmanitosti rozdílných dávkovačích forem, to je mohou být kombinovány s různými farmaceuticky akceptovatelnými inertními nosiči ve formě tablet, tobolek, pilulek, pastilek, tvrdých bonbónů, čípků, vodných suspenzí, injektovatelných roztoků, elixírů, sirupů a podobně. Takovéto nosiče zahrnují tuhá ředidla nebo plniva, sterilní vodná media a různá netoxická organická rozpouštědla a tak dále. Navíc orální farmaceutické kompozice mohou být vhodně oslazeny a/nebo ochuceny. Obecně terapeutické sloučeniny tohoto vynálezu, když se podávají odděleně, to je ne ve stejné farmaceutické kompozici, jsou přítomny v takovýchto dávkovačích formách v koncentračních úrovních v rozmezí od asi 5,0 % do asi 70 %hmotnostních.

Pro orální podávání tablety obsahující různé excipienty jako je mikrokrystalická celulosa, citran sodný, uhličitan vápenatý, fosforečnan dvojvápenatý a glycin, mohou být použity spolu s různými desintegranty jako je škrob (a výhodně kukuřičný, bramborový nebo tapiokový škrob), kyselina alginová a různé komplexní křemičitany, společně s granulačními pojivý jako je polyvinylpyrrolidon, sacharosa, želatina a akáciová pryskyřice. Navíc lubrikační prostředky jako je stearan hořečnatý, laurylsíran sodný a talek jsou často velmi užitečné pro tabletovací účely.

Tuhé kompozice podobného typu mohou být také použity jako náplně v želatinových tobolkách, výhodnými látkami

9 999

99 • 9 9 9

9 9 9

999 999

9

9 9 v tomto spojení jsou také laktosa nebo mléčný cukr stejně jako vysokomolekulární polyethylenglykoly. Když se požadují vodné suspenze a/nebo elixíry pro orální podávání, aktivní složka může být kombinována s různými sladidly nebo ochucovadly, barvicími látkami nebo barvivý a když je třeba, emulgátory a/nebo suspendujícími přípravky, stejně jako společně s takovými ředidly jako je voda, ethanol, propylenglykol, glycerin a různé jejich kombinace.

Pro parenterální podávání roztoky terapeutického prostředku v bučí sezamovém nebo arašídovém oleji nebo ve vodném propylenglykolu mohou být použity. Vodné roztoky by měly být vhodně pufrovány když je to třeba a kapalné ředidlo by nejdříve mělo působit isotonicky. Tyto vodné roztoky jsou vhodné pro intravenózní injekční účely. Olejové roztoky jsou vhodné pro intraartikulární, intramuskulární a subkutánní injekční účely. Příprava vašech těchto roztoků za sterilních podmínek se provádí snadno standardními farmaceutickými technologiemi dobře známými odborníkům v oboru.

Aktivita terapeutických sloučenin jako inhibitorů FTasy může být určena jejich schopností ve vztahu ke kontrole, k inhibici FTasy in vitro. Tento postup je popsán dále.

Surový přípravek FTasy obsahující cytosolní frakci homogenizované mozkové tkáně se použije pro třídění sloučenin v 96 důlkové zkušební plotně. Cytosolní frakce se připraví homogenizací přibližně 40 g čerstvé tkáně ve 100 ml sacharosy/t-IgC^/EDTA pufru (za použití Dounce homogenizátoru, až 15 zdvihů), odstředěním homogenátů při 1000 g po dobu 10 minut při 4 G, reodstředěním supernatantu při 17 000 g po dobu 15 minut při 4G a pak shromážděním výsledného supernatantu.

• » * · * · · · ♦ ♦ ♦ · · ·

9 9 9 9 9 9 9 9 ·» 9 9 9 9 9 999999

9 · · · · * *«* 9 9 99 9 9 999 99 99

- 27 Tento supernatant se zředí, aby obsahoval finální koncentraci 50 mM tris-HCl (pH 7,5), 5 mM DTT, 0,2 M IÍC1, 20 mM ZnCl₂, mM PMCF a znovuodstřeňuje při 178 000 g po dobu 90 minut při 4G. Supernatant, označený surová FTasa byl zkoušen na koncentraci proteinů, alikvotován a uskladněn při -70 °C.

Zkouška použitá pro měření in vitro inhibice lidské FTasy je modifikací metody popsané Amersham LifeScience pro použití jejich farnesyltransferasy (3H)Scintilation Proximity Assay (SPA) soupravy (TRKQ 7010).

Aktivita enzymu FTasy se určuje v objemu 100 ml obsahujícím 50 mM N-(2-hydroxyethyl)piperazin-N-(2-ethansulfonové kyseliny) (HEPES, pH 7,5, 30 mM MgCl₂, 20 mikromol KC1, mM Na^-IPO^, 5 mM dithiothreitolu (DTT), 0,01 % Triton X100, 5 % dimethylsulfoxidu (DMSO), 20 mg surové FTasy, 0,12mM [3hJ-farnesylpyrofosfatu ([3H]-FPP, 36 000 dpm/pmol, Amersham LifeScience) a 0,2 mM biotinylovaného Ras peptidu KTKCVIS (Bt-KTKCVIS), který je M-terminálně biotinylován ve své alfa-aminoskupině a byl syntetizován a vyčištěn HPLC v laboratoři. Reakce se iniciuje přídavkem enzymu a zakončuje přídavkem EDTA (dodána jako STOP reagent v soupravě TRKQ 7010), načež následuje 45minutová inkubace při 37 °C.

Prenylovaný a neprenylovaný Bt-KTKCVIS se zachytí přídavkem 10 ml steptavidinem povlečených SPA kuliček (TRKQ 7010) na důlek a inkubací reakční směsi po dobu 30 minut při teplotě místnosti. Množství radioaktivity vázané na SPA kuličky se určí pomocí MicroBeta 1450 deskového počítače.

Za těchto zkušebních podmínek je aktivita enzymu lineární s ohledem na koncentrace akceptoru prenylové skupiny, Bt-KTKCVIS a surové FTasy, ale nasycující s ohledem na prenylový donor, FPP. Reakční doba zkoušky je také v lineárním rozmezí.

• ·· * ·♦ ·· ·· 99 9 · 99 9 9 9 9 9 * ··· · · · · · * • · · · 9 9 9 999 999

9 · 9 · 9 9

999 99 999 9999 99 99

- 28 Zkoušené sloučeniny se rutinně rozpustí ve 100%ním DMSO. Inhibice aktivity farnesyltransferasy se určí výpočtem procentního začlenění tritiovaného farnesylu v přítomnosti testované sloučeniny oproti jeho začlenění v kontrolních důlcích (absence inhibitoru). Hodnoty IC^g, to je koncentrace požadovaná k vytvoření poloviny maximální farnesylace Bt-KTKCVIS se určí ze získaných dávkovačích odezev.

Fluorescenční zkouška pro aktivitu FTasy, která může být použita k třídění inhibitoru FTasy je popsána v UK patentové přihlášce GB 2 267 966, která byla publikována 22. prosince 1993.

Aktivita určitých terapeutických prostředků jako inhibitorů HMG CoA reduktasy může být určena postupem popsaným Duganem a j., Achiv.Biochem.Biophys., 1972, 152, 21-27.

Při tomto způsobu se úroveň aktivity HMG-CoA enzymu u standardních laboratorních krys určí nakrmením krys potravinovou dietou obsahující 5 % cholestylaminu po dobu 4 dnů, načež se krysy utratí. Játra krys se homogenizují a měří se začlenení cholesterol- ‘C-acetatu do nezmýdelnitelného lipidu v homogenátu krysích jater. Mikromolární koncentrace sloučeniny požadovaná pro 50%ní inhibici syntézy sterolu během lhodinové periody se měří a vyjadřuje jako IC,-q hodnota.

Druhá metoda (označená COR třídění) je taková, která je popsána T-Kitaou a j., J.Clin.Invest., (1980, 66:10941100). Při této metody se měří množství ^C-HMG-CoA přeměněného na ^c-mevalonat v přítomnosti vyčištěného enzymového přídavku HMG-CoA reduktasy. Mikromolární koncentrace sloučeniny požadované pro 50%ní inhibici syntézy cholesterolu se měří a zaznamenává jako ICjjq hodnota.

·· ··

9 9 ·

9 9 ♦

99 9 999

9

99

Různé metody tohoto vynálezu mohou být praktikována jako část terapie, která zahrnuje podávání jedné nebo vícae jiných protinádorových látek, například těch, které jsou vybrány z mitotických inhibitorů, například vinblastin, alkylačních prostředků, například cisplatinu, karboplatinu a cyklofosfamidu, antimetabolitů, například 5-fluoruracilu, cystosinarabinosy a hydroxymočoviny nebo například jednoho z výhodných antimetabolitů zveřejněných v Evropské patentové přihlášce č. 239 362 jako je N-{5-[n-(3,4-dihydro-2-methyl4-oxochinazolin-6-ylmethyl)-N-methylamino]-2-thenoyl^-L-glutamová kyselina, interkalárních antibiotik, například adriamycinu a bleomycinu, enzymů, například asparaginasy, inhibitorů topoisomerasy, například etoposidu, modifikátorů biologické odezvy, například interferonu a antihormonů, například antiestrogenů jako je NOLVADEX (tamoxifen) nebo antiandrogenů jako je CASODEX (4'-kyan-4-(4-fluorfenylsulfony1)2-hydroxy-2-methyl-3'-(trifluormethyl)propionanilid.

Takovéto terapie se mohou dosáhnout způsobem současného, postupného nebo odděleného dávkování jednotlivých složek terapie. Podle tohoto aspektu tohoto vynálezu je vytvořen farmaceutický produkt zahrnující farmaceuticky akceptovatelný nosič jak je popsáno výše, jeden nebo oba inhibitory HMG CoA reduktasy a FTasy a další protinádorový prostředek jak je výše popsáno.

Jak je označeno v následující tabulce 1, vynález ukázal, že účinnost sloučeniny 1, která má strukturu

« »· ·· ·· 99 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9

9 9 999999

9 9 9

999 9999 99 99

- 30 může být zvýšena minimálně účinnou dávkou lovastatinu.

Tabulka 1

Synergické účinky lovastatinu a léčebné sloučeniny I na prenylaci K-Ras 4B v intaktních buňkách

	% inhibice OF K-Ras 4B prenylace^X//
Sloučenina 1 (jjM)	kontrola	+ 5 yuM lovastatinu
0	0	23
0,1	0	56
1/0	0	83
10	0	96

x/ polosplývavé monovrstvy NIH-3T3 transfektantního nadeaxprimujícího mutantu K-Ras 4B byly zpracovávány po dobu 18 hodin při teplotě 38 °C rostoucími koncentracemi CP-390 392 v přítomnosti a nepřítomnosti 5 jul-l hydrolýzovaného lovastatinu. Buňky byly lýzovány v RIPA lýzním pufru (50 uM tris[hydroxymethyljaminomethanu, 0,15 M chloridu sodného, 1 % deoxychotu sodného, 1 % Triton X-100, 0,1 % SDS, 0,25 azidu sodného, pH 8,5) obsahujícím 1 mM DTT (dithiothreitol, Boehringer Mannheim, Indianopolis, IN) a inhibitory proteasy (aprotinin, leupeptin, anidpain, pefabloc v konečných koncentracích 10 mikrog/ml, 2 mikrog/ml, 2 mikrog/ml a 50 jim v pořadí, Boehringer Mannheim, Indianopolis, IN) a vařeny po dobu 3 minut.

Stejná množství proteinu (100 jum/pruh) byla rozštěpena pomocí SDS-PAGE na 12,5%ních gelech a převedeny do ImmobilonP membrán (Intergrated Separation Systems, Natick, MA) .

Tyto membrány byly imunoblotovány 5 mikrog/ml anti-Pan-ras (Ab-3) monoklonální antilátkou (Calbiochem, La Jolla, CA). Skvrny byly inkubovány s peroxidasou konjugovanou sekundární protilátkou a imunoblotovány Ras protein byl určen zvýšenou chemiluminiscencí (Amersham Life Products, Arlington, Heights, IL). Procento přenylovaného Ras bylo určeno densitometrickým skenováním za použití MasterScan 3.0 (Scanalytics, Billerica, Massachusettes). —

Claims

1. Farmaceutická kompozice pro léčení rakoviny nebo benigních proliferačních poruch u savců vyznačená tím, že zahrnuje inhibitor FTasy, inhibitor HMG CoA reduktasy a farmaceuticky akceptovatelný nosič, přičemž inhibitor FTasy a inhibitor HMG CoA reduktasy jsou přítomny v množstvích, která učiní kompozici účinnou při léčení rakoviny nebo benigních proliferačních poruch.

2. Farmaceutická kompozice podle nároku 1 vyznačená tím, že se inhibitor FTasy vybere ze sloučenin zahrnujících (a) sloučeniny vzorce I kde R a R jsou nezávisle vybrány ze skupiny zahrnující — (CII₂ ) (5-10členné heterocykly), -(CII₂)p(Cg-C^₀aryl), allyl, proparrgyl a C.-C_Aalkyl, kde p je 0 až

3, přičemž uvedený ^{X 0} 1 2 alkyl a alkylové části R a R skupin jsou případně substituo9 z vány 1 až 3 R substituenty, a aryl a heterocyklické části

1 2

R⁵ je -(CH₂)_m(l- nebo 2-adamantyl), -(CH₂J^ÍC^-C^gCyklo- (A) (B)

9 9 9 9

9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 ·

9 9 999 999 • 9 9

9 9 99 99 99 kde m je O áž 6 a uvedený cykloalkyl a alkyl případně obsahuje 1 nebo 2 dvojné nebo trojné vazby,

12 3 v v

X , X a X jsou každý nezávisle C.-C₇alkylen, případně obsa, ' 4 hující 1 nebo 2 dvojné nebo trojné vazby, X je vazba nebo

C.-C-alkylem případně obsahujícím 1 nebo 2 dvojné nebo trojné

1 / 4 1 v >

vazby a ve vzorci (B) je X část připojena k X části v jakémkoli dostupném uhlíku v X’' části,

R⁴ je C_r-C_inaryl, 5ti až lOčlenný heterocyklyl nebo

C.-C_ralkyl, kde každá z uvedených R skupin je připadne sub1 h v 5 stituována 1 až 3 R substituenty,

5 z každý R substituent je nezávisle vybrán ze skupiny zahrnující halogen, nitro, kyan, fenyl,

C(O)OR⁸, -SO2NR⁸R⁷, -NR⁸R⁸, -C(O)R^e, -OR⁶, -C(O)NR^SR⁸, -OC(O)NR⁸R⁸, -NR⁸C(O)NR⁸R⁸, -NR⁸C(O)R⁸, -NR⁸C(O)O(C,-C4 alkyl), -C(NR⁸)NR⁸R⁸, -C(NCN)NR^BR^e, -C(NCN)S(C,-C4 alkyl), -NR⁸C(NCN)S(CrC₄ alkyl), -NR⁸C(NCN)NR^BR⁶, -NR⁸SO₂(C,-C4 alkyl), -S(O)_n(C,-C₄ alkyl), přičemž n je 0 až 2, -NR⁸C(O)C(O)NR⁸R⁸, -NR⁸C(O)C(O)R⁸, thiazolyl, imidazolyl, oxazolyl, pyrazolyl, triazolyl, tetrazolyl a C^-C^alkyl, případně substituovaný 1 až 3 fluor substituenty,

Γ* 7 každý R^u a R' je nezávisle vodík nebo C^-C^alkyl, každý R⁸ je nezávisle R⁸ nebo -OR⁸, a každý r9 je nezávisle vybrán z kyan, R⁸, -OR⁸, -OC(O)R⁸, -C(O)OR⁸, -C(O)NR⁶R⁷, -NR⁸R⁷, -NR⁸R⁸, -SO₂NR⁶R⁷ a C^-C^alkyl substituovaný hydroxy, a (b) sloučeniny vzorce IIA nebo IIB

- III • ·· ·· · » • · · * · >

• « F • FF ·· * ·· M ·♦ ·· F · · · · · • · · · · · • F · FFF FF· • · · F

FF· FFFF ·· FF nebo (IIA) (IIB) kde R je vodík, halogen (například chlor, fluor, brom nebo 5 5 5 jod), kyan, hydroxy, nitro, trifluormethyl, -NHR , -NR R ,

R⁵, -OR⁵ nebo -S(0) -R⁵, m

R² je -(CIl₂)_n-y nebo -OCOR⁵,

R je 4-, 3-, nebo 2-pyridyl, pynmidyl, pyrazmyl,

2-fluor-4-pyridyl nebo 3-fluor-4-pyridyl,

R je 1-adamantyl nebo 2-adamantyl,

5 5 5 5 y je vodík, hydroxy, amino, kyan, -NHR , -NR R , -NHCOR , -NIICO„R⁵, halogen, OR⁵, -S(0) R⁵, -C0₉II, -CO„R⁵, -CONR⁵R⁵,

Z j- C tli p· Z J- Λ*

-CONIIR , -CONH₂, -COR , -CH=CIICO₂R , -OCOR , fenyl, fenyl substituovaný W, -C=CCO₂R⁵, -CH=CI1R⁵ nebo -C=CR⁵, každý R je nezávisle (C^-C^)nerozvětvený nebo rozvětvený alkyl, fenyl nebo benzyl, přičemž fenyl a fenylová část benzylu mohou být případně substituovány halogenem, hydroxy, nitro, kyanem, amino, (C^-C^)rozvětveným nebo nerozvětveným alkylem, (Cf-C₄)rozvětveným nebo nerozvětveným alkoxy, fenylem, benzylem, (Cf-C^)alkylamino, di[(Cf-C₄)alkyl]amino nebo -S(O)_m-(Cf-C₄)rozvětveným nebo nerozvětveným alkylem,

5 5 každý W je nezávisle halogen, R , hydroxy, -OR , nitro, amino, -NHR⁵, -NR⁵R⁵, kyan nebo -S(O)_m-R⁵, • 9

99 9 999

- IV in je O, 1 nebo 2, n je 1 až 7, p je 0 nebo 1,

E a E jsou vybrány nezávisle ze skupiny zahrnující vodík, halogen, (C^-C^)alkyl, hydroxy, (C^-Cg)alkoxy, nitro, trifluormethyl, kyan, amino, (C^-C^)alkylamino a diJÁC^-C^)alkyl]amino, a jejich farmaceuticky akceptovatelné soli,

Heť a Ilet jsou vybrány nezávisle z 6členných heterocyklických kruhů obsahujících od 1 do 4 atomů dusíku jako část kruhu, případně substituovaných jedním substituentem vybraným z (C.^-C₃) alkylu, halogenu, hydroxy, (C^-C^Jalkoxy, amino, (C^-C₃)alkylamino a di)alkyl]amino, a (c) sloučeniny vzorce III (III) kde obě přerušované čáry představují případné dvojné vazby, je kyslík nebo síra, když je je hydroxy, dvojně vázán ke kruhu A a ^(Ci^cio^)alkyl ^S0“' ^(Cl”^C10^)al kyl-SC>₂-, adamant-2-yl-S-, naftyl-S-, benzyl-S-, fenyl-C(=O)CH₂-S-, (C₁-C₆)alkyl-O-C(=O)-CH₂-S- nebo (H,H)(to je,

Z představuje 2 atomy vodíku, z nichž každý je jednoduše vázán ke stejnému uhlíku kruhu A), když Z je jednoduše vázán ke kruhu A, a kde naftyl a fenyl a fenylová část benzylu • · · · · · · • · · · • · · • · · • · · · · · mohou být případně substituovány od 1 do 3 substituentů nezávisle vybraných ze skupiny zahrnující (C^-Cg)alkyl případně substituovaný 1 až 3 atomy fluoru, (C-^-Cg)alkoxy případně substituovaný 1 až 3 atomy fluoru, halogen (například chlor, fluor, brom nebo jod), amino, (Cf-Cg)alkylamino, di[(C^-Cg)alkyl]amino, kyan, nitro, (Cf-Cg)alkyl-SO_n- kde n je 0, 1 nebo 2, -COOH, -COO(Cf-Cg )alkyl a -CÍONHÍCf-Cg )alkyl,

X je NR¹ nebo CHR¹,

R¹ je vodík, (Cf-Cg)alkyl nebo (C^-Cg)alkylfenyl, kde kruh A je nasycen (to je když kruh A neobsahuje žádnou dvojnou vazbu) a R¹ je nepřítomen, když kruh A obsahuje dvojnou vazbu,

R je vybrán ze skupiny zahrnující naftyl, fenyl, (C^-Cg)alkylfenyl, 1-adamantyl, 2-adamantyl, (C^-Cg)rozvětvený nebo nerozvětvený alkyl, (Cg-C^g)cykloalkyl a (Cg-C^g)bicyklický nebo tricyklický alkyl, přičemž (C^-C^q)cykloalkyl a (CgC^q)bicyklický nebo tricyklický alkyl může být případně substituován hydroxyskupinou, a přičemž adamantylová skupina může být případně substituována jedním až 3 substituenty nezávisle vybranými z (C^-Cg)alkylu, halogenu a hydroxy, a

R¹ a R⁴ jsou nezávisle vybrány ze skupiny zahrnující benzyl, přičemž fenylová část tohoto benzylu může být případně substituována amino nebo nitroskupinou, vodík, fenyl, (N=C)-(C^Cg)alkyl, (Cf-CgJalkyl-O-Ct^Oj-ÍCpCg)alkyl a Het-CH₂, kde Ilet je vybrán z 2-, 3- nebo 4-pyridinyl, furyl, tetrahydrofuryl, pyrimidyl, pyrazinyl, pyrazolyl, isoxazolyl, thiofenyl a triazolyl, za podmínky, že (a) ne více než 1 nebo 2 přerušované čáry mohou představovat dvojnou vazbu v kterékoli jedné sloučenině, (b) když Z je (II, Η), X je CH₂, • · ·· · ··· • · · ···· ·· · ·

VI (c) když Z je kyslík nebo (II,II) a X je CIIR^, R^ musí být vodík, (d) když Z je síra a X je NR^, R^ musí být vodík, a (e) jeden z a musí být Het-CH₂, a

CH, (IV) a farmaceuticky akceptovatelné soli předcházejících sloučenin

Á. Farmaceutická kompozice podle nároku 1 vyznačená tím, že inhibitor HMG CoA reduktasy se vybere ze skupiny zahrnující atorvastatin, pravastatin, lovastatin, kompaktin, fluvastatin a simvastatin, a farmaceuticky akceptovatelných solí předcházejících sloučenin.

4. Způsob léčení rakoviny nebo benigní proliferační poruchy u savců vyznačený tím, že se savcům podává farmaceutická kompozice podle kteréhokoli z nároků 1 až 3.

5. Způsob léčení rakoviny nebo benigní proliferační poruchy u savců vyznačený tím, že se savci podává inhibitor FTasy a inhibitor HMG CoA reduktasy, přičemž inhibitor FTasy a inhibitor HMG CoA reduktasy se podávají v množstvích, která učiní kombinaci těchto dvou aktivních činidel účinnou při léčení rakoviny nebo benigní proliferační poruchy.

- VII

6. Způsob podle nároku 5 vyznačený tím, že inhibitorem HMG CoA reduktasy je atorvastatin, pravastatin, fluvastatin, simvastatin, lovastatin nebo kompaktin nebo jejich farmaceuticky akceptovatelná sůl.

7. Farmaceutická kompozice pro inhibici abnormálního růstu buněk u savců vyznačená tím, že zahrnuje inhibitor FTasy, inhibitor HMG CoA reduktasy a farmaceuticky akceptovatelný nosič, přičemž aktivní složky v této kompozici jsou přítomny v množstvích, která učiní kompozici účinnou při inhibici abnormálního růstu buněk.

8. Způsob inhibice abnormálního růstu buněk u savců vyznačený tím, že se podává savci s abnormálním růstem buněk inhibující účinné množství farmaceutické kompozice zahrnující inhibitor FTasy, inhibitor HMG CoA reduktasy a farmaceutic ky akceptovatelný nosič.

9. Způsob inhibice abnormálního růstu buněk u savců vyzná čený tím, že se savci podává inhibitor FTasy a inhibitor

HMG CoA reduktasy v množstvích, která učiní kombinaci těchto dvou aktivních činidel účinnou při inhibici abnormálního růstu buněk.