CZ288160B6

CZ288160B6 - Pyrido[2,3-D]pyrimidines and pharmaceutical compositions based thereon

Info

Publication number: CZ288160B6
Application number: CZ19973275A
Authority: CZ
Inventors: Clifton John Dr Blankley; Diane Harris Boschelli; Annette Marian Doherty; James Marino Hamby; Silvester Klutchko; Robert Lee Panek
Original assignee: Warner Lambert Co
Priority date: 1995-05-03
Filing date: 1996-04-26
Publication date: 2001-05-16
Also published as: CA2214219A1; PL323089A1; ES2274526T3; NO310110B1; EA000897B1; BG62617B1; CN1183099A; DE69636671T2; HUP9801704A2; SK283952B6; DE69636671D1; SK141097A3; NO975033D0; CA2214219C; EE03770B1; PL184093B1; WO1996034867A1; HUP9801704A3; JP3885116B2; NO975033L

Description

Pyrido[23-D]pyrimidiny a farmaceutické kompozice na jejich bázi

Oblast techniky

Vynález se týká určitých pyrido[2,3-D]pyrimidinů a farmaceutických kompozic na jejich bázi. Tyto sloučeniny inhibují proteinkinázu a jsou tedy vhodné především pro léčení buněčných proliferativních chorob a obecně pro inhibici enzymatické aktivity proteinkinázy.

Dosavadní stav techniky

Mnoho chorobných stavů je charakterizováno nekontrolovanou proliferací a diferenciací buněk. Tyto stavy zahrnují různé buněčné typy a nemoci jako je rakovina, ateroskleróza, a restenóza. Stimulace růstového faktoru, autofosforylace a fosforylace intracelulámích proteinových substrátů jsou důležitými biologickými událostmi v pathomechanismu proliferativních chorob.

V normálních buňkách má fosforylace tyrosinových zbytků kritickou funkci v intracelulámím růstu signální dráhy iniciované stimulovanými extracelulámími receptory. Například spojení růstových faktorů jako je od destiček odvozený růstový faktor (PDGF), fibroblastový růstový faktor (FGF) a epidermální růstový faktor (EGF) s jejich odpovídajícími extracelulámími receptory aktivuje intracelulámí tyrosin kináza enzymové domény těchto receptorů, čímž katalyzují fosforylaci buď intracelulámích substrátů nebo receptorů samotných. Fosforylace receptorů růstových faktorů v odpovědi k ligandové vazbě je známá jako autofosforylace.

Například EGF receptor má jako své dva nejdůležitější ligandy EGF a transformační růstový faktor a, (Transformin Growth Factor α -TGFa). Receptory se jeví jako mající pouze malé funkce u normálních dospělých lidí, ale jsou implikovány v chorobných procesech u velké části všech rakovin, zejména rakoviny střeva a prsu. Blízce příbuzné Erb-2 a Erb-3 receptory mají rodinu Heregulins jako své hlavní ligandy a receptorová nadměrná exprese a mutace nepochybně demonstrovány jako hlavní rizikový faktor ve špatné prognóze rakoviny prsu.

Proliferace a řízená migrace vaskulámích hladkých svalových buněk (VSMC - vascular smooth muscle cells) jsou důležitými složkami v takových procesech jako je vaskulámí přestavba, restenóza a ateroskleróza. Od destiček odvozený růstový faktor byl identifikován jako jeden z nejpotentnějších endogenních VSMC mitogenů a chemoatraktantů. Zvýšená vaskulámí mRNA exprese PDGF-A a -B řetězců a PDGF receptorů byla pozorována v balónkem poškozených krysích arteriích corotis (J. Cell. Biol·. 111:2149-2158 (1990)). V tomto modelu poškození infůze PDGF také silně zvyšuje intimální ztluštění a migraci VSMC (J. Clin. Invest.. 89:507-511 (1992)). Dále PDGF-neutralizující protilátky výrazně redukují intimální ztluštění po balónkovém poškození (Science, 253:1129-1132(1991)). Tyrphostin receptor tyrosin kináza inhibitorů, které blokují PDGF signální transdukční dráhu byly zjištěny jako vykazující inhibici PDGF stimulované receptor tyrosin kináza fosforylace in vivo v modelu poškození krysí manžety (Drug Develops. Res., 29:158-166 (1993)).

Jak acidický fibroblastový růstový faktor (aFGF) a bazický fibroblastový růstový faktor (bFGF) mají mnoho biologických aktivit, zahrnujících schopnost promotovat buněčnou proliferací a diferenciaci. Přímá evidence podpory FGF zahrnutí do VSMC byla uvedena Lindnerem aReidym (Proč. Nati. Acad. Sci. USA, 88:3739-3743 (1991)), kteří demonstrují, že systémová injekce neutralizující protilátky proti bFGF před balónkovou angioplastií krysích arteria carotis inhibuje poškození vyvolané mediální SMC proliferací z více než 80 % měřeno 2 dny po poškození. Je pravděpodobné, že bFGF uvolněný z poškozených buněk působí parakrinálním způsobem pro vyvolání VSMC růstu. V poslední době Lindner a Reidy (Cir. Res.. 73:589-595 (1993)) demonstrovali zvýšenou expresi jak mRNA pro bFGF tak FGFR-1 v replikaci VSMC a endothelu v en face preparacích balónkem poškozených krysích arteria carotis. data poskytují

-1 CZ 288160 B6 zjištění, že poškozené arterie ligand/receptor systému bFGF a FGFR-1 mohou být zahrnuty do kontinuální proliferativní odezvy VSMA vedoucí k formaci neointimy.

Buchdunger a spol., Proč, Nati. Acad. Sci.. Vol. 92, březen 1995, 2558-2562, uvádějí inhibici PDGF signální transdukční dráhy jak in vitro tak in vivo PDGF receptor tyrosin protein kinázovým inhibitorem. Sloučenina vykazuje protinádorovou aktivitu v nádorových modelech za použiti astrocytoma buněčných linií.

Tak EGF, PDGF, FGF a jiné růstové faktory hrají pivotální úlohy v patomechanismu buněčných proliferativních chorob jako je rakovina, ateroskleróza a restenóza. Po spojení s jejich odpovídajícími receptory stimulují tyto růstové faktory aktivitu tyrosin kinázy jako jedné i počátečních biochemických událostí, vedoucích kDNA syntéze a buněčnému dělení. Z toho vyplývá, že sloučeniny, které inhibují protein tyrosin kinázy spojené s transdukčními dráhami intracelulámího růstového faktoru jsou vhodnými činidly pro léčení buněčných proliferativních chorob.

Nyní bylo objeveno, že určité pyrido[2,3-d]pyrimidiny inhibují protein tyrosin kinázy a jsou vhodné pro léčení a prevenci aterosklerózy, restenózy a rakoviny.

Některé pyrido[2,3-d]pyrimidiny jsou známé. Například US patent 3534039 popisuje série 2,7diamino-6-aiylpyrido[2,3-d]pyrimidinových sloučenin jako diuretických činidel; US patent 3639401 popisuje série 6-aryl-2,7-bis[(trialkylsilyl)amino]pyrido[2,3-d]pyrimidinových sloučenin jako diuretických činidel; US patent 4271164 popisuje série 6-substituovaných-arylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-aminů a jejich derivátů jako antihypertenzivních činidel; evropská zveřejněná přihláška 0537463 A2 popisuje série substituovaných-pyrido[2,3-d]pyrimidinu vhodných jako herbicidy. Podobné sloučeniny jsou také popsány v J. Med. Chem. 26 (1983), str. 403 až 411 a v US-A-5 364 860 a US-A-5 409 930. Žádný z předcházejících odkazů nepopisuje sloučeniny podle předloženého vynálezu nebo nenaznačuje, že takové sloučeniny jsou vhodné pro léčení aterosklerózy, restenózy, psoriázy a rakoviny.

Podstata vynálezu

Předmětem vynálezu jsou pyrido[2,3-D]pyrimidiny obecného vzorce I

(I) kde

X představuje skupinu vzorce NH, N-acyl, O nebo S, přičemž acyl představuje alkanoylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, která je popřípadě substituována skupinou NR5R& kde R₅a Rý mají dále uvedený význam, karboxyskupinou nebo heterocyklickou skupinou s 5 až 6 členy, z nichž 1 nebo 2 jsou heteroatomy zvolené z dusíku, substituovaného dusíku, kyslíku nebo síry, přičemž pod označením „substituovaný dusík“ se rozumí dusík nesoucí alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo skupinu (CH₂)_nPh, kde n a Ph mají dále uvedený význam, nebo acyl představuje fenylkarbonylskupinu nebo (substituovaný fenyl)karbonylskupinu, kde termín „substituovaný fenyl“ má dále uvedený význam;

Ri představuje skupinu vzorce NR3R4, SR₃, OR₃, SOR₃ nebo SO₂R₃;

každý ze symbolů

R₂, R₃ a R4 nezávisle představuje atom vodíku, skupinu vzorce (CH₂)_nPh, kde Ph znamená fenylskupinu nebo substituovanou fenylskupinu a n je číslo 0, 1, 2 nebo 3; cykloalkylskupinu se 3 až 6 atomy uhlíku, alkanoylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkenylskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku nebo alkinylskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku, přičemž tyto alkylskupiny, alkenylskupiny a alkinylskupiny jsou popřípadě substituovány skupinou NR₅R«, fenylskupinou, substituovanou fenylskupinou, thioalkylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, alkoxyskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, hydroxyskupinou, karboxyskupinou, halogenem nebo cykloalkylskupinou se 3 až 6 atomy uhlíku, kde R₅ a Re každý nezávisle představuje vodík, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkenylskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku, alkinylskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku, skupinu (CH₂)_nPh, kde Ph představuje fenylskupinu nebo substituovanou fenylskupinu a n znamená číslo 0, 1, 2 nebo 3; cykloalkylskupinu se 3 až 6 atomy uhlíku nebo R5 a Re brány dohromady s atomem dusíku, k němuž jsou připojeny, mohou tvořit kruh obsahující 3 až 7 atomů uhlíku a popřípadě obsahující další 1, 2 nebo 3 heteroatomy zvolené z dusíku, kyslíku a síry; přičemž

R4 může kromě toho představovat též skupinu vzorce -C(=O)R₃, -C(=O)OR₃, -SO₂R₃, -SO₂NR₅Re, -C(=O)NR₅Re, -C(=S)NR_sRe, -C(=NH)R₃ nebo -C(=NH)NR₅Re; a

R₃ a R4 brány dohromady s atomem dusíku, k němuž jsou připojeny, mohou navíc tvořit kruh obsahující 3 až 7 atomů uhlíku a popřípadě obsahující další 1, 2 nebo 3 heteroatomy zvolené z dusíku, kyslíku a síry;

Ar představuje fenylskupinu nebo substituovanou fenylskupinu;

přičemž pod pojmem „substituovaná fenylskupina“ se rozumí fenylskupina substituovaná 1, 2 nebo 3 skupinami zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, alkylskupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, alkoxyskupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, merkaptoskupiny, alkylthioskupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, hydroxyskupiny, alkylkarbonylskupiny s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části, kyanoskupiny, nitroskupiny, trifluormethylskupiny, alkylkarbonyloxyskupiny s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části, aminoskupiny, alkylaminoskupiny s 1 až 6 atomy uhlíku a dialkylaminoskupiny s 1 až 6 atomy uhlíku v každé z alkylových částí;

a jejich farmaceuticky vhodné soli.

Tyto sloučeniny jsou vhodné pro inhibici proteinkináz a jsou tak účinné při léčení buněčných proliferativních chorob, aterosklerózy, restenózy, psoriázy a rakoviny.

Preferované sloučeniny mají výše uvedený vzorec, kde Ar je fenyl nebo fenyl substituovaný 1 nebo 2 skupinami vybranými z Ci-Cealkylu nebo halogenu, zejména halogenu jako je chlor nebo brom.

Další preferované sloučeniny jsou ty, kde R₂ je Ci-C₆alkyl, Cr-Cealkenyl, (CH₂)_nPh jako je fenyl a benzyl, nebo C₃-C₆cykloalkyl jako je cyklopropyl.

Zvláště preferovaná skupina sloučenin má výše uvedený vzorec, kde X je O.

Jiná preferovaná skupina sloučenin jsou ty, kde X je NH. Toto jsou iminy a jsou zejména vhodné jako meziprodukty, vedoucí ke sloučeninám, kde X je O.

Další preferované sloučeniny mají výše uvedený vzorec, kde Ri je NH₂ nebo NHR₃, kde R₃ je Ci-Cealkyl popřípadě substituovaný NR5R6.

-3CZ 288160 B6

Zvláště preferovaná skupina sloučenin podle vynálezu má vzorec

kde Ri je NR3R4, OR₃ nebo SR3, kde R₃ je vodík nebo Ci-Cealkyl a R4 je vodík nebo C_tC₆alkanoyl; R₂ je Ci-C₆alkyl a R₇ a Rg nezávisle jsou Ci~C₆alkyl nebo halogen, zejména chlor, fluor nebo brom. Preferované alkylové skupiny jsou substituovány NRsRj, kde R₅ a Ré jsou vodík nebo alkyl, nebo spolu s dusíkem, ke kterému jsou připojeny tvoří cyklický kruh, mající 2 heteroatomy, například

RqN N-- ^a ⁹V_/	O·
kde R, je vodík, Ci-C₆alkyl nebo (CH₂)„Ph. 15 Další preferovaná skupina sloučenin má vzorec

kde R], R₂, R₇ a Rg mají výše definovaný význam.

-4CZ 288160 B6

Další preferovaná skupina sloučenin má vzorec

kde R_b R₂, R₇ a Rg mají výše definovaný význam.

Je třeba vzít na vědomí, že jestliže R₂ je vodík, sloučeniny mohou existovat v tautomemí formě jak je uvedena dále

Nejpreferovanější sloučeniny podle vynálezu mají vzorec

kde Ri, R₂, R₇ a Rg mají výše definovaný význam. Ideálně je R₂ alkyl jako je methyl nebo ethyl a R₇ a Rg je halogen jako je chlor nebo brom. Nejpreferovanější Ar skupina je fenyl, ideálně fenyl substituovaný jednou, dvěma nebo třemi skupinami vybranými z halogenu, Ci-Céalkylu, hydroxy, Ci-C₆alkoxy, karboxy, Ci-C₆alkoxykarbonylu a Ci-C₆alkylu substituovaného hydroxy, karboxy, alkoxykarbonylem, amino, Ci-C6alkylamino a di-Ci-C₆alkylamino. Zvláště preferovaná skupina takových sloučenin má vzorec

-5CZ 288160 B6

kde Rio je fenyl, chlor, brom, methyl, methoxy, hydroxy, hydroxymethyl, 2-diethylaminoethoxy, methoxykarbonylmethyl, karboxy, karboxymethyl, ethoxykarbonyl, 2-karboxyethyl nebo 2ethoxykarbonylethyl.

Tento vynález také poskytuje farmaceutické formulace, obsahující sloučeninu obecného vzorce I společně s farmaceuticky přijatelným nosičem, ředidlem nebo přísadou.

Sloučeniny v rozsahu předloženého vynálezu mají specifickou afinitu proti jednomu nebo více substrátovým místům tyrosin kináza domén EGF nebo jiné EGF rodiny receptorů jako je erb B2, 3 a 4; FGF, PDGF, V-src a C-src. Sloučeniny v rozsahu předloženého vynálezu účinně inhibují PDGF autofosforylaci receptorů a inhibují proliferaci a migraci vaskulámích hladkých svalových buněk.

Jako inhibitory protein kináz, sloučeniny podle předloženého vynálezu jsou vhodné pro kontrolu proliferativních chorob, zahrnujících leukémii, rakovinu, psoriázu, proliferaci vaskulámích hladkých svalů a postchirurgickou vaskulámí stenózu a restenózu u savců.

Dalším provedením tohoto vynálezu je způsob léčení subjektů, postižených chorobami vyvolanými proliferaci vaskulámích hladkých svalů. Způsob poskytuje inhibici proliferace a/nebo migrace vaskulámích hladkých svalů podáním účinného množství sloučeniny obecného vzorce I subjektu v případě potřeby takové léčby.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou existovat v nesolvatované formě jakož i v solvatovaných formách, zahrnujících hydratované formy. Obecně jsou solvatované formy, zahrnující hydratované formy, ekvivalentní nesolvatovaným formám a jsou zahrnuty do rozsahu předloženého vynálezu.

Ve sloučeninách obecného vzorce I výraz „Ci-C₆alkyl“ znamená přímý nebo rozvětvený uhlovodíkový radikál, mající 1 až 6 atomů uhlíku a zahrnující, například methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, sek.butyl, isobutyl, terc.butyl, n-pentyl, n-hexyl a podobně.

„Halogen“ zahrnuje fluor, chlor, brom a jod.

„C2-C₆alkenyl“ představuje přímé a rozvětvené uhlovodíkové radikály, mající od 2 do 6 atomů uhlíku a 1 dvojnou vazbu a zahrnující ethenyl, 3-buten-l-yl, 2-ethenylbutyl, 3-hexen-l-yl a podobně. Typicky Cr-Cealkinylové skupiny zahrnují propinyl, 2-butin-l-yl, 3-pentin-l-yl a podobně.

„Cí-Cecykloalkyl“ znamená cyklickou hydrokarbylovou skupinu jako je cyklopropyl, cyklobutyl, cyklohexyl a cyklopentyl.

-6CZ 288160 B6 „Ci-Cealkoxy“ znamená alkylové skupiny uvedené výše navázané přes kyslík, jejich příklady zahrnují methoxy, ethoxy, ísopropoxy, terc.butoxy a podobně.

„Ci-C₆alkanoyl“ skupiny jsou alkyl připojený přes karbonyl,

O

II např. Ci-Csalkyl C-. Takové skupiny zahrnují formyl, acetyl, propionyl, butyryl a isobutyryl.

O

II „Acyl“ znamená alkyl nebo aryl (Ar) skupinu navázanou přes karbonylovou skupinu (-C-). Například acyl zahrnuje Ci-Cealkanoyl, zahrnující substituovaný alkanoyl, kde alkylová část může být substituována NR₅R^ nebo karbocyklickou nebo heterocyklickou skupinu. Typické acylové skupiny zahrnují acetyl, benzoyl a podobně.

Alkylové, alkenylové, alkoxylové a alkinylové skupiny popsané výše mohou být substituovány. Skupiny substituentů, které mohou být částí alkylových, alkenylových, alkoxylových a alkinylových skupin jsou NR«, fenyl, substituovaný fenyl, thioalkyl (Cj-Cé), Ci-c₆alkoxy, hydroxy, karboxy, Ci-C₆alkoxykarbonyl, halogen, cykloalkyl a 5- nebo 6-ti členný karbocyklický kruh nebo heterocyklický kruh, mající 1 nebo 2 heteroatomy vybrané z dusíku, substituovaného dusíku, kyslíku a síry. „Substituovaný dusík“ znamená dusík, nesoucí C]-C₆alkyl nebo (CH₂)_nPh.

Příklady substituovaných alkylových skupin tak zahrnují 2-aminoethyl, 2-diethylaminoethyl, 2dimethylaminopropyl, ethoxykarbonylmethyl, 3-fenylbutyl, methylsulfanylmethyl, methoxymethyl, 3-hydroxypentyl, 2-karboxybutyl, 4-chlorbutyI, 3-cyklopropylpropyl, 3-morfolinopropyl, piperazinylmethyl a 2-(4-methylpiperazinyl)ethyl.

Příklady substituovaných alkenylových skupin tak zahrnují 2-diethylaminoethenyl, 3-amino-2butenyl, 3-(l-piperazinyl)-l-propenyl, 3-hydroxy-l-propenyl, 2-(l-s-triazinyl)ethenyl, 3fenyl-3-pentenyl a podobně.

Příklady substituovaných alkinylskupin zahrnují 2-methoxyethenyl, 2-ethylsulfanylethinyl, 4(l-piperazinyl)-3-(butinyl), 3-fenyl-5-hexinyl, 3-diethylamino-3-butinyl, 4-chlor-3-butinyl,

4-cyklobutyl-4-hexinyl a podobně.

Typické substituované alkoxyskupiny zahrnují aminomethoxy, trifluormethoxy, 2-diethylaminoethoxy, 2-ethoxykarbonylethoxy, 3-hydroxypropoxy, 6-karboxyhexyloxy a podobně.

Dále zahrnují příklady substituovaných alkyl, alkenyl a alkinylskupin dimethylaminomethyl, karboxymethyl, 4-diethylamino-3-buten-l-yl, 5-ethylmethylamino-3-pentin-l-yl, 4-morfoIinobutyl, 4-tetrahydropyridinylbutyI-3-imidazolidin-l-yIpropyl, 4-tetrahydrothiazol-3-yibutyl, fenylmethyl, 3-chlorfenylmethyl a podobně.

Výraz „Ar“ označuje nesubstituované a substituované aromatické a heteroaromatické skupiny. Heteroaromatické skupiny mají od 4 do 9 atomů v kruhu, z nichž jeden až čtyři jsou vybrány z O, S a N. Preferované skupiny mají 1 nebo 2 heteroatomy v 5- nebo 6-členném aromatickém kruhu. Mono a bícyklické kruhové systémy sem rovněž spadají. Typické Ar skupiny zahrnují fenyl, 3chlorfenyl, 2,6-dibromfenyl, pyridyl, 3-methylpyridyl, benzothienyl, 2,4,6-tribromfenyl, 4ethylbenzothienyl, furanyl, 3,4-diethylfuranyl, naftyl, 4,7-dichlomaftyl a podobně.

Preferované Ar skupiny jsou fenyl a fenyl substituovaný 1, 2 nebo 3 skupinami nezávisle vybranými z halogenu, alkylu, alkoxylu, thio, thioalkylu, hydroxy, alkanoylu, -CN, -NO₂,

-7CZ 288160 B6

-COORg, -CF3, alkanoyloxy nebo amino vzorce -NR5R. Alkyl a alkoxyskupiny mohou být substituovány jak je definováno výše. Například typické skupiny jsou karboxyalkyl, tj. Ci~C₆aIkyl, alkoxykarbonylalkyl, Ci-C₆alkyl, hydroxyalkyl a

I I

COOH COOalkyl hydroxyalkoxy, (O)₀ nebo i-Ci-C₆alkyl a alkoxyalkyl, tj. Ci-Cňalkyl. Disubstituovaný fenyl je preferován a

Ó alkyl

2,6-disubstituovaný fenyl je zejména preferován.

Typické Ar substituované fenyl skupiny, které jsou preferovány zahrnují 2-aminofenyl, 3-chlor-

4-methoxyfenyl, 2,6-dimethylfenyl, 2,6-diethylfenyl, 2-n-hexyl-3-fluorfenyl, 3-hydroxyfenyl, 4-hydroxymethylfenyl, 3,4-dimethoxyfenyl, 2,6-dichlorfenyl, 4-(3-aminopropoxy)fenyl-, 2,6difluorfenyl, 2-chlor-6-methylfenyl, 2,4,6-trichlorfenyl, 2,6-dimethoxyfenyl, 4-(diethylaminoethoxy)fenyl, 2,6-dihydroxyfenyl, 2,6-dibromfenyl, 2,6-dinitrofenyl, 2,6-di(trifluormethyl)fenyl, 3-(dimethylaminoethyl)fenyl, 2,6-dimethylfenyl, 2,3,6-trimethylfenyl, 2,6-dibrom-4methylfenyl a podobně.

V preferovaném provedení Ri ve vzorci I je skupina NR3R4, kde R₃ a R4 jsou vodík, Ci-C₆-alkyl, Ci-C₆-alkyl substituovaný skupinou NR5R6 a kde R₃ je vodík a R4 je Ci-Cy-alkanoyl nebo alkanoyl substituovaný COOH.

Příklady takových NR3R4 skupin zahrnují amino, methylamino, di-isopropylamino, acetylamino, propionylamino, 3-aminopropylamino, 3-ethylaminobutylamino, 3-di-n-propylamino-propylamino, 4-diethylaminobutylamino, a 3-karboxypropionylamino. R3 a R4 mohou spolu s dusíkem, ke kterému jsou připojeny tvořit kruh, který může obsahovat 2 nebo více heteroatomů, výhodně dusík. Příklady takových cyklických NR3R4 skupin zahrnují pyrrolidinyl, piperazinyl, 4-methylpiperazinyl, 4-benzylpiperazinyl, pyridinyl, piperidinyl, pyrazinyl, morfolinyl a podobně. R3 a R* může navíc tvořit cyklický kruh, který je substituován 1 nebo 2 oxoskupinami. Například jestliže O

II

R3 je vodík a Rt je alkanoyl (tj. Cj-Cs-alkyl C), kde alkyl nese substituent jako je karboxy nebo halogen, mohou být takové skupiny cyklizovány za vzniku cyklických ketonů. Typické skupiny zahrnují 2-ketopyrrolidinyl a l-pyrrolidinyl-2,5-dion. Jak je uvedeno výše, preferovanou skupinou sloučenin jsou ty, kde R3 je vodík a Rt je aryl, zejména fenyl a fenyl substituovaný skupinami jako je aminoalkyl a aminoalkoxy, např. dimethylaminoethyl a dimethylaminoethoxy.

Sloučeniny vzorce I jsou schopny dále tvořit jak farmaceuticky přijatelné adiční sole s kyselinami a/nebo bázemi. Všechny tyto formy jsou v rozsahu předloženého vynálezu.

Farmaceuticky přijatelné adiční sole s kyselinami sloučenin vzorce I zahrnují sole odvozené od anorganických kyselin jako je kyselina chlorovodíková, dusičná, fosforitá, sírová, bromovodíková, jodovodíková, fosforečná a podobně jakož i sole odvozené od organických kyselin, fenylsubstituovaných alkanových kyselin, hydroxyalkanových kyselin, alkandiových kyselin, aromatických kyselin, alifatických a aromatických sulfonových kyselin atd. Takové sole zahrnují sulfáty, pyrosulfáty, bisulfáty, sulfity, bisulfíty, nitráty, fosfáty, monohydrogenfosfáty, dihydrogenfosfáty, metafosfáty, pyrofosfáty, chloridy, bromidy, jodidy, acetáty, propionáty, kapryláty, isobutyráty, oxaláty, malonáty, sukcináty, suberáty, sebakáty, fumaráty, maleáty, mandláty, benzoáty, chlorbenzoáty, methylbenzoáty, dinitrobenzoáty, ftaláty, benzensulfonáty, toluensulfonáty, fenylacetáty, citráty, laktáty, maleáty, tartráty, methansulfonáty a podobně. Zahrnuty rovněž jsou sole aminokyselin jako jsou argináty a podobně a glukonáty, galaktouronáty (viz např. Berge S. M. a spol., „Pharmaceutical Salts“, J. of Pharmaceutical Science. 66:1-19 (1977)).

-8CZ 288160 B6

Adiční sole bazických sloučenin s kyselinami se připraví kontaktem formy volné báze s dostatečným množstvím požadované kyseliny za vzniku soli běžným způsobem. Forma volné báze může být regenerována stykem solné formy s bází a izolací volné báze běžným způsobem. Formy volné báze se poněkud liší od svých odpovídajících solných forem určitými fyzikálními vlastnostmi jako je rozpustnost v polárních rozpouštědlech, ale jinak jsou sole ekvivalentní jejich odpovídající volné bázi pro účely předloženého vynálezu.

Farmaceuticky přijatelné adiční sole bází se tvoří s kovy nebo aminy jako jsou sole alkalických kovů a kovů alkalických zemin nebo organických aminů. Příklady kovů použitých jako kationty jsou sodík, draslík, hořčík, vápník a podobně. Příklady vhodných aminů jsou N,N'-dibenzylethendiamin, chlorprokain, cholin, diethanolamin, ethylendiamin, N-methylglukamin a prokain (viz např. Berge S. M. a spol., „Pharmaceutical Salts“, J. of Pharmaceutical Science, 66:1-19 (1977)).

Adiční sole s bázemi kyselých sloučenin (například když R₃ je karboxy alkylskupina jako je karboxymethyl nebo 3-karboxybutyl) se připraví stykem formy volné kyseliny s dostačujícím množstvím požadované báze za získání sole běžným způsobem. Forma volné kyseliny může být regenerována kontaktem solné formy s kyselinou a izolací volné kyseliny obvyklým způsobem. Formy volné kyseliny se liší od svých odpovídajících solí poněkud v určitých fyzikálních vlastnostech jako je rozpustnost v polárních rozpouštědlech, ale jinak jsou sole ekvivalentní jejich odpovídající volné kyselině pro účely předloženého vynálezu.

Zatímco zde uvedené formy vynálezu tvoří preferovaná provedení, je možných i mnoho jiných. Není možno zde uvést všechny možné ekvivalentní formy nebo rozvětvení vynálezu. Je třeba chápat, že zde používané výrazy jsou spíše popisné než omezující a že je možno provést různé změny aniž by byl narušen rozsah a myšlenka vynálezu.

Sloučeniny vzorce I mohou být připraveny podle syntéz uvedených ve schématech I až VII. I když tato schémata často uvádějí přesné struktury, jsou metody široce aplikovatelné na analogické sloučeniny vzorce I, za pomoci vhodného chránění nebo deprotekce reaktivních skupin metodami, které jsou v oboru organické chemie standardní. Například hydroxyskupiny, za účelem prevence před neočekávanými vedlejšími reakcemi, obecně vyžadují, aby byly převedeny na ethery nebo estery během chemických reakcí na jiných místech molekuly. Hydroxy-chránící skupina se snadno odsraní za poskytnutí volné hydroxyskupiny. Aminoskupiny a karboxylové kyselé skupiny jsou podobně derivatizovány pro jejich ochranu proti neočekávaným vedlejším reakcím. Typické chránící skupiny a metody pro jejich připojení a odštěpení jsou plně popsány v práci Greene a Wuts v Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons, New York (2. vyd; 1991) a McOmie, Protective Groups in Organic Chemistiy, Plenům Press, New York, 1973.

Schéma I popisuje typickou metodu přípravy pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-onů a 7-(8H)imidů podle vynálezu, sloučenin vzorce I, kde X je O nebo NH. Syntéza začíná reakcí kyanoacetátu jako je ethylethoxymethylenkyanoacetát s thiopseudomočovinou jako je 2-methyl-2thiopseudomočovina-sulfát za získání 5-kyano-4-hydroxy-2-(methylsulfanyl)pyrimidinu. Tato reakce je podrobněji popsána v Helv. Chim. Acta., 42:763-772 (1959). 4-Hydroxypyrimidin v následujícím stupni reaguje s halogenačním činidlem jako je fosforoxychlorid nebo thionylchlorid za získání 4-halogenpyrimidinu, například 5-kyano-4-chlor-2-(methylsulfanyl)pyrimidinu. Halogenpyrimidin pak reaguje s aminem R₂NH₂ za poskytnutí 5-kyano-4-substituovaného amino-2-(methylsulfanyl)pyrimidinu. Použitý amin může mít R₂, která je skupinou požadovanou v konečném produktu vzorce I, například alkyl jako je methyl nebo R₂ může být skupina, která se později odstraní, například benzyl nebo podobně, za vzniku sloučeniny vzorce I, kde R₂ je vodík. Sloučeniny, kde R₂ je vodík mohou být alkylovány nebo acylovány standardními metodami.

-9CZ 288160 B6

Reakce mezi halogenpyrimidinem a aminem R2NH2 se typicky provádí smísením ekvimolámích množství halogenpyrimidinu a aminu v nereaktivním organickém rozpouštědle jako je toluen, xylen, methylenchlorid nebo podobně, při teplotě od asi 50 °C do asi 150 °C. Přebytek aminu je možno použít, je-li to potřeba. 4-Aminopyrimidin, který je získán, pak reaguje s hydrazinem nebo substituovaným hydrazinem pro nahrazení 2-methylsulfanylskupiny za získání 2hydrazino-4-substituovaného amino-5-kyano-pyrimidinu- Hydrazino-pyrimidin reaguje s dusitanem sodným ve vodné anorganické kyselině pro provedení diazotace hydrazinové skupiny za poskytnutí 2-azido-4-(substituovaný amino)-5-kyano-pyrimidinu. Reakce této sloučeniny s redukčním činidlem jako je Raney nikl probíhá hydrogenace jak kyanoskupiny tak azidoskupiny za získání 2-amino-4-(substituovaný amino)-5-pyrimidinkarboxaldehydu.

4-(Substituovaný amino)-5-pyrimidinkarboxaldehydy mohou být alternativně připraveny tak, že se vyjde z komerčně dostupného esteru 4-halogen-5-pyrimidinkarboxylové kyseliny. Například ethylester kyseliny 2-methylsulfanyl-4-chlor-5-pyrimidinkarboxylové (dostupný od Aldrich Co.) může reagovat s aminem R2NH2 jako je methylamin, benzylamin, nebo podobně, k nahrazení 4-chlorskupiny a poskytnutí odpovídajícího ethylesteru kyseliny 2-methylsulfanyl-4(substituovaný amino)-5-pyrimidinkarboxylové. Esterová skupina se redukuje na alkohol, například reakcí s lithiumaluminiumhydridem v tetrahydrofuranu a alkoholová skupina se pak oxiduje na aldehyd reakcí s oxidantem jako je dichromát sodný, oxid manganatý nebo podobně, za získání odpovídajícího 2-methylsulfanyl-4-(substituovaný amino)-5-pyrimidinkarboxaldehydu. 2-Methylsulfanylová skupina se vytěsní hydrazinem a hydrazinoskupina se diazotizuje a následně redukuje jak je popsáno výše za poskytnutí požadovaného 2-amino-4-(substituovaný amino)-5-pyrimidinkarboxaldehydu.

Pyrimidinkarboxaldehyd pak reaguje s arylacetonitrilem za přítomnosti báze a v rozpouštědle jako je xylen, 2-ethoxyethanol, dioxan nebo podobně jak je uvedeno ve schématu I. Typické báze, které mohou být použity zahrnují hydrid sodný, methoxid sodný, kovový sodík, uhličitan draselný a podobně. Pyrimidinkarboxaldehydy a aiylacetonitrily jsou typicky používány v přibližně ekvimolámích množstvích. Typické arylacetonitrily, které mohou být použity zahrnují fenylacetonitril, 2,6-dichlorfenylacetonitril, 2,6-dimethylfenylacetonitril, o-tolylacetonitril, pyridylacetonitril, furanylacetonitril, naftylacetonitril a podobně. Reakce se typicky provádí v nereaktivním rozpouštědle jako je methyl nebo ethylcellosolve, diglym, dimethylformamid nebo podobně a při zvýšené teplotě asi 50 °C až asi 200 °C a obecně je v podstatě hotová během asi 2 až asi 4 hodin. Produkt 6-aiyl-7-imino-8-substituovaný-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamin vzorce I, kde X je NH a R] je NR3R4, se snadno izoluje přídavkem vody k reakční směsi, což obecně působí vysrážení produktu. Produkt imin může být dále čištěn, je-li to potřeba rekrystalizaci z rozpouštědel jako je ethylacetát, aceton, isopropanol a podobně, nebo chromatografii přes pevné nosiče jako je silikagel.

6-Aryl-7-imino-8-substituovaný-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamin takto připravený má vzorec

kde R₂, R₃, R4 a Ar mají výše definovaný význam. Typické iminy takto získané zahrnují následující:

-10CZ 288160 B6

R₂ R₃ R4 Ar

ch₃	H	ch₃	fenyl
cyklopropyl	ch₃	ch₃	3-methoxyfenyl
3-butinyl	Et	acetyl	1—naftyl
3-chlorfenyl	H	H	3—pyridyl
3-aminopropyl	H	2-furyl	2-thienyl
benzyl	-CH₂-CH₂-CH2-CH2	2,3,5-tribromfenyl.HCl
Et	Et	Et	fenyl
Et	H	r-y --CH₂CHyN^ X—ch₃	fenyl
Et	H	“O	2-jodfenyl
Me	H	/=\ —6a—OOtjCSjK ^xch₃	2,6-dibromfenyl

6-Aryl-7-imino-8-substituované-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylaminy jsou vhodné jako terapeutická činidla, stejně jako meziprodukty, protože jsou snadno konvertovatelné na odpovídající 7-ketoderiváty jednoduchým zahřátím v anorganické kyselině nebo podobně. Hydrolýza je v podstatě úplná po asi 5 až 24 hodinách, jestliže se provádí při asi 60 °C až asi 200 °C. Produkt, 2-amino-6-aryl-8-substituovaný -pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on se snadno izoluje odstraněním reakčního rozpouštědla, například odpařením za sníženého tlaku a krystalizací z běžných rozpouštědel jako je ethylacetát, aceton, tetrahydrofuran a podobně.

7-Oxo-pyrido[2,3-d]pyrimidiny podle vynálezu mohou být připraveny jednoduchou hydrolýzou 7-amino-pyridopyrimidinů v anorganické kyselině jak je ilustrováno ve schéma II. 7-Aminopyridopyrimidiny jsou snadno dostupné metodami popsanými v US patentu 3534039. 7-aminopyridopyrimidiny se jednoduše rozpustí v anorganické kyselině jako je koncentrovaná kyselina chlorovodíková, kyselina sírová, kyselina fosforečná nebo podobně. Hydrolyzační reakce je obecně úplná po asi 12 až asi 24 hodinách, jestliže se provádí při asi 80 až asi 200 °C. Produkt se snadno izoluje odstraněním reakčního rozpouštědla a krystalizací z rozpouštědla jako je dimethylsulfoxid, dimethylformamid, dioxan nebo podobně.

7-oxo~pyrido[2,3-d]pyrimidiny mohou být alternativně připraveny reakcí 2,4-diamino-5pyrimidinokarboxaldehydů s arylacetoesterem jak je uvedeno dále:

O 11	Ar \|	báze	___ -Ar
0	_XC—H	CH, 1	>	N 11	^1
+		A <2 N
^R3^R4^{N N}	'NH I	c=o 1 O alkyl	r₃r₄n^x	O 1
	1 ^r2				^r2

-11CZ 288160 B6 kde R₂, R₃, Ri a Ar mají výše definovaný význam a alkyl je nižší alkylskupina jako je methyl, ethyl, isobutyl a podobně. Reaktanty jsou obecně smíseny s nereaktivním rozpouštědlem jako je dimethylformamid, tetrahydrofuran nebo ethylacellosolve a arylacetoester je obecně používán v přebytku, například v 0,5 až 1,0 molámím přebytku vzhledem k pyrimidinu. Reakce se provádí za přítomnosti báze jako je methoxid sodný nebo hydrid sodný a obecně je úplná během asi 2 až 24 hodin, provádí-li se při zvýšené teplotě od asi 50 do asi 120 °C. Produkt 7-oxo-pyrido[2,3djpyrimidiny se získají odstraněním rozpouštědel a krystalizaci produktu z organického rozpouštědla jako je methanol, ethylacetát nebo podobně. Proces může být proveden se 2-oxy (Ri= -OR₃) a 2-thio (R]= -SR₃) 4-amino-5-pyrimidinkarboxaldehydy za poskytnutí odpovídajících

7- oxo-2-oxy- a 2-thio pyrido[2,3-d]pyrimidinů podle vynálezu.

Sloučeniny podle vynálezu, kde R₂ ve vzorci I je jiný než vodík, se připraví snadno použitím substituovaného aminu R₂NH₂ v reakci popsané výše, nebo alternativně alkylací pyridopyrimidinů, kde R₂ je vodík, například jak je ilustrováno ve schématu II. Reakce se obecně provádí smísením pyridopyrimidinu s ekvimolámím množstvím nebo přebytkem alkylačního činidla, například alkylhalogenidu jako je methyljodid, benzylbromid, 3-hexen-l-yl-jodid nebo podobně ve vzájemném rozpouštědle jako je toluen, xylen, dimethylformamid nebo podobně. Báze jako je hydrid sodný může být přidána pro katalýzu reakce a pro působení jako lapač kyseliny. Produkt

8- substituovaný pyridopyrimidin se snadno izoluje odstraněním reakčnich rozpouštědel a dále se čistí, je-li to žádoucí chromatografií nebo krystalizaci z toluenu, acetonu nebo podobně.

Schéma III ilustruje reakci 2-aminopyridopyrimidinů s acylačními činidly a diacylačními činidly za vzniku amidů a cyklických amino systémů. Například 2-aminopyridopyrimidiny vzorce

kde R₂ je jiný než vodík, X je O nebo S a Ar má výše definovaný význam, mohou reagovat s ekvimolámím množstvím nebo slabým přebytkem halogenidu kyseliny nebo anhydridu kyseliny za dosažení acylace 2-aminoskupiny. Typické halogenidy kyseliny zahrnují acetylchlorid, benzoylbromid, propionyljodid a podobně. Běžně používané anhydridy zahrnují acetanhydrid, propionylanhydrid a směsné anhydridy jako anhydrid kyseliny octové a máselné. Acylační činidla jako je anhydrid kyseliny jantarové a podobně, mohou být použita za vzniku cyklických imidů jak je popsáno ve schématu III.

Sloučeniny podle vynálezu, kde X je S mají vzorec

kde Ri, R₂ a Ar mají výše definovaný význam. Tyto pyridopyrimidinthiony se připraví reakcí odpovídajících 7-oxosloučenin (tj. kde X = O) s ekvivalentním množstvím Lawessonova činidla nebo sulfidu fosforečného v rozpouštědle, výhodně pyridinu nebo toluenu, při zvýšené teplotě asi 90 °C až asi 125 °C po dobu asi 1 až asi 24 hodin. Produkt se snadno izoluje jednoduchým

-12CZ 288160 B6 odstraněním všeho reakčního rozpouštědla a dále je možno provést, je-li to žádoucí, čištění, rutinními metodami jako je krystalizace, chromatografíe a podobně.

2-Oxy, 2-thio a 2-amino-pyridopyrimidiny podle vynálezu, sloučeniny vzorce

mohou alternativně být připraveny jak je popsáno ve schématech IV a V.

Schéma IV popisuje způsob syntézy sloučenin, majících bazický řetězec ve 2-poloze pyrido[2,3djpyrimidinového kruhového systému, například, kde Rj je NR3R4 a R₃ je vodík nebo QC₆alkyl, substituovaný NR₅R^ a R4 je vodík. V prvním stupni kondenzuje aldehyd jako je 4methylamino-2-methylsulfanyl-pyrimidin-5-karbaldehyd s arylacetonitrilovým derivátem jako je 2,6-dichlorfenylacetonitril, ve vzájemném rozpouštědle jako je Ν,Ν-dimethylformamid a za přítomnosti 1 až 5 molámího přebytku báze, výhodně práškovaného uhličitanu draselného nebo uhličitanu cesia, při teplotách výhodně v rozmezí 110 až 153 °C po dobu 0,5 až 25 hodin. Výsledné 7-imino-2-methylsulfanyIové deriváty jsou použitelné pro přípravu různých 2-aminoderivátů. Například zpracováním se 100 až 500 procentním molámím přebytkem primárního aminu jako je Ν,Ν-diethylaminopropylamin, při teplotě v rozmezí 100 až 150 °C po asi 1 až asi 24 hodin, se získají odpovídající 2-substituované aminoderiváty. V případě aminů, které vrou pod méně než asi 100 °C, např. methylaminu, ethylaminu, propylaminu a podobně, může být použita vhodná tlaková bomba pro dosažení požadovaných reakčních teplot. Výsledné 2-amino7-iminoderiváty jsou snadno hydrolyzovatelné, je-li to žádoucí, na 2-amino-7-oxoderiváty reakcí se silnou anorganickou kyselinou, jako je koncentrovaná kyselina chlorovodíková nebo kyselina sírová, při teplotě refluxu po prodlouženou dobu, v rozmezí 6 hodin až Ί dnů.

Alternativně 7-imino-2-methylsulfanylderiváty mohou být acylovány reakcí s acylhalogenidem nebo acylanhydridem, například acetylchloridem nebo anhydridem kyseliny propionové, za získání odpovídajících 7-acylimino-2-methylsulfanylpyridopyrimidinů. Tyto sloučeniny mohou reagovat s aminem jak je popsáno výše pro uskutečnění odstranění 2-methylsulfanylskupiny a poskytnutí 2-aminopyridopyrimidinů, majících acyliminoskupinu v poloze 7 (tj. X = N acyl). 7Acylimidoderiváty mohou reagovat se silnou kyselinou jak je popsáno výše za dosažení hydrolýzy 7-acyliminoskupiny na 7-oxoskupinu.

Sulfanylsloučeniny vzorce I, tj. kde Ri je SR3, se snadno oxidují na odpovídající sulfoxidy a sulfony reakcí s činidly jako je kyselina m-chlorperbenzoová, peroxid vodíku, perboritan sodný, hydrogenpersíran draselný a podobně. Jak je uvedeno výše, sulfanyl, sulfínyl a sulfonylderiváty vzorce I jsou zejména vhodné pro výrobu odpovídajících aminoderivátů, protože snadno reagují s aminy (HNR3R4) po té, co byly podrobeny nukleofílnímu odstranění. Toto je zvláště výhodná metoda pro výrobu 2-arylamino- a 2-heteroarylaminosloučenin podle vynálezu (např. kde R₃ je fenyl nebo pyridyl). Předchozí oxidační a nukleofilní odstraňovači reakce jsou ilustrovány ve schématu VI.

Oxidace sulfanylsloučeniny vzorce I se provede její reakcí s ekvimolámím množstvím oxidantu, výhodně kyseliny m-chlorperbenzoové, za získání odpovídajícího sulfoxidu nebo se dvěma molámími ekvivalenty za získání odpovídajícího sulfonu. Oxidace se typicky provádí v organickém rozpouštědle jako je chloroform nebo dichlormethan, a typicky je kompletní během 1 až

-13CZ 288160 B6 hodin, jestliže se provádí při 25 až 45 °C. Velká množství oxidantu a delší reakční doby zajišťují úplnou tvorbu sulfonu. Odpovídající sulfoxid nebo sulfon se snadno izoluje filtrací nebo odstraněním reakčního rozpouštědla odpařením za sníženého tlaku.

Aminy snadno nahrazují sulfanyl, sulfínyl a sulfonylskupiny za vzniku sloučenin vzorce I, kde Ri je NR3R4. Toto je zvláště preferovaná metoda pro výrobu arylaminosloučenin, tj. fenylamino, substituovaných fenylamino, heteroarylamino (např. pyridylamino, thienylamino) a substituovaných heteroarylamino (např. ethylpyridylamino). Vytěsnění se provádí smísením sulfanyl, sulfínyl nebo sulfonylsloučeniny s aminem, výhodně primárním nebo sekundárním aminem. Amin se obecně používá v přebytku, například od asi 20 do 500 molámím přebytku vzhledem k sulfanyl, sulfínyl nebo sulfonylsloučenině. Reaktanty se obecně mísí čisté nebo ve vzájemných organických rozpouštědlech, například jako je dimethylformamid, (ethoxyethyl)ether, ledová kyselina octová, dimethylsulfoxid a podobně. Reakce je obecně kompletní po asi 5 minutách až asi 6 hodinách, jestliže se provádí při zvýšené teplotě asi 100 do asi 250 °C. Produkt, sloučenina vzorce I, kde R! je NR₃Rj, se snadno izoluje filtrací nebo odstraněním reakčního rozpouštědla odpařením. Produkt může být dále čištěn, je-li to žádoucí, krystalizací, chromatografií nebo podobně.

2-Aminopyridopyrimidiny podle vynálezu (vzorce I, kde Ri je NR₃R4) mohou být alternativně připraveny reakcí 2,4-diamino-5-pyrimidinkarboxaldehydu s arylacetonitrilem (ArCH₂CN).

2.4- Diamino-5-pyrimidinkarboxaldehydy mohou být připravena ze snadno dostupných 2sulfanyl nebo sulfinylpyrimidinů nukleofílním vytěsněním aminem jak je popsáno výše. Například 2-sulfanyl-4-substituovaný amino-5-alkoxykarbonylpyrimidin může reagovat s oxidačním činidlem jako je oxaziridin za získání odpovídajícího sulfoxidu nebo sulfonu. Sulfoxidový nebo sulfonový substituent se snadno vytěsní reakcí s aminem (HNR₃R|), za získání odpovídajícího

2.4- diamino-5-alkoxykarbonylpyrimidinu. Alkoxykarbonylová skupina může být převedena na aldehydovou skupinu standardními metodami (tj. redukcí na alkohol a oxidací alkoholu na aldehyd). 2,4-Diamino-5-pyrimidinkarboxaldehyd snadno reaguje s arylacetonitrilem za získání 2-amino-6-aiyl-pyridopyrimidinů podle vynálezu. Přecházející reakce jsou znázorněny ve schématu VII.

Jak je uvedeno dříve, některé ze sloučenin podle vynálezu jsou bazického charakteru, díky substituované skupině, která je bazická, jako jsou například aminoskupiny. Sloučeniny vzorce I, kde R| je NR₃R|, jsou typicky bazické. Takové bazické sloučeniny snadno tvoří farmaceuticky přijatelné sole s jakýmkoliv množstvím anorganických a organických kyselin. Sole jsou typicky krystalické ajsou tak dobře vhodné pro orální podání a podobně.

Schéma V popisuje syntézu 2-oxypyridopyridinů. 2-Methylsulfanylové meziprodukty, jak jsou popsány výše, mohou reagovat s alkoholáty jako je ethoxyethanolová sodná sůl, která se obecně připraví s ekvivalentním množstvím hydridu sodného a alkoholu. Jako reakční rozpouštědlo se typicky používá ethoxyethanol. Reakce se nejlépe provádí při zvýšené teplotě asi 100 až asi 150 °C a normálně je kompletní za asi 15 min až 6 hodin. Výsledný 2-(2-ethoxy)-ethoxyether se snadno převede na 2-hydroxysloučeninu reakcí se silnou anorganickou kyselinou, výhodně 6N kyselinou chlorovodíkovou, po asi 5 min až asi 1 hodina. 2-Hydroxy-7-iminoderivát může být hydrolyzován na 7-oxo-sloučeninu prodlouženou reakcí se silnou anorganickou kyselinou, výhodně koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou, při teplotě refluxu po dobu 6 hodin až 7 dnů. Alkylace a aralkylace 2-hydroxyderivátu (výhodně je-li R₂ jiný než vodík), může být provedena jak je požadováno reakcí s alkylačním činidlem jako je methyljodid, benzylbromid, diethylaminoethylchlorid a podobně ve vzájemném rozpouštědle, výhodně dimethylformamidu, typicky za přítomnosti báze jako je práškovaný uhličitan draselný. Takové reakce jsou normálně kompletní během asi 2 hodin, jestliže se provádějí při teplotě asi 25 °C až 100 °C. Produkt se snadno izoluje odstraněním reakčních rozpouštědel a další čištění může být provedeno krystalizací, chromatografií nebo podobně.

-14CZ 288160 B6

Schéma I

Et

1/2 h₂so₄

NaOMe

-----►

MeOH

ť^il	X^CN aq HCO₂H
1	Ra/Ni
3 ^N	nhr₂

		^CHO	AZ
	1	+	1
	1 *		CN
h₂it	N	^^xnhr₂

-15CZ 288160 B6

Schéma II

			_xAr	h\
h₂it	1 1 N	N	^xnh₂	Δ

h₂

		diacylační činidlo
1		S. 0
H₂1T n		^0 II
	1	/C—L
	^R2	1 («bJm-g-I· 0

kde L je odštěpitelná skupina jako je chlor nebo brom a m je celé číslo 1,2, 3 nebo 4

-16CZ 288160 B6

Schéma IV

nr₅r₆

-17CZ 288160 B6

Schéma V

OEt

6N HC1

----->

reflux

I Konc.HCl I reflux

-18CZ 288160 B6

Schéma VI

Schéma VII

O

r₂hh₂

......—►

redukce

-19CZ 288160 B6

Schéma VII (pokrač.)

Následující podrobné příklady blíže ilustrují syntézu sloučenin podle vynálezu. Příklady jsou pouze ilustrativní a nejsou míněny jako omezující vynález z jakéhokoliv hlediska.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

5-Kyano-4-hydroxy-2-(methylsulfanyl)-pyrimidin

K roztoku čerstvě destilovaného ethyl-ethoxymethylen-kyanoacetátu (118,99 g) v methanolu (8001) při 5°C se přidá 2-methyl-2-thiopseudomočovina (107,69 g). Ktéto směsi se přidá roztok methoxidu sodného v methanolu připravený rozpuštěním kovového sodíku (35,59 g) v methanolu (800 ml). Reakční směs se nechá ohřát na teplotu místnosti a míchá se 6 hodin. Po stání přes noc se rozpouštědlo odstraní za sníženého tlaku, zbytek se rozpustí v 1500 ml vody při 50 °C za míchání a roztok se za horka zfiltruje. Filtrát se okyselí na pH 2 koncentrovanou HC1 a ponechá stát přes noc při teplotě místnosti. Produkt se shromáždí filtrací a sušením se získá 48,33 g 5-kyano-4-hydroxy-2-methylsulfanyl-pyrimidinu. Tento produkt se použije v následujícím stupni bez dalšího čištění.

-20CZ 288160 B6

Příklad 2

4-Chlor-5-kyano-2-methylsulfanyl-pyrimidin

Směs 5-kyano-4-hydroxy-2-methylsulfanyl-pyrimidinu (48,33 g) z příkladu 1 a fosforoxychloridu (150 ml) se zahřívá pod refluxem 3 hodiny. Reakční směs se nechá zchladnout na teplotu místnosti, zfiltruje a filtrát se zahustí dosucha ve vakuu. Zbytek se rozdělí mezi methylenchlorid a ledovou vodu. Organická vrstva se oddělí, promyje se vodou, suší se nad síranem hořečnatým, filtruje a odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se zahřívá pod refluxem v hexanu (750 ml) za míchání. Horký hexanový roztok se slije z nerozpustného materiálu a ponechá zchladnout na teplotu místnosti, získá se 32 g titulní sloučeniny 4-chlor-5-kyano-2-methylsulfanyl-pyrimidinu.

Příklad 3

5-Kyano-4-methylamino-2-methylsulfanyl-pyrimidin

Studeným (5 °C) roztokem 4-chlor-5-kyano-2-methylsulfanyl-pyrimidinu z příkladu 2 v diethyletheru (700 ml) se probublává plynný methylamin po dobu 20 minut. Reakční směs se míchá 30 min při 5 °C, pak se nechá ohřát na teplotu místnosti a míchá se přes noc. Chromatografie na tenké vrstvě ukazuje, že reakce není úplná. Reakční směs se znovu ochladí na 5 °C a plynný methylamin se probublává suspenzí za míchání dalších 20 minut. Reakční směs se míchá při 25 °C 6 hodin, pak se nechá stát přes noc. Nerozpustný produkt se oddělí a suspenduje se ve vodě za míchání. Suspenze se zfiltruje ve vakuu za získání 25,87 g titulní sloučeniny 5kyano-4-methylamino-2-methylsulfanyl-pyrimidinu; t.t. 185 až 187 °C.

Elementární analýza pro C7H8N4S:

vypočteno 46,65 % C, 4,47 % H, 31,09 % N, nalezeno 46,62 % C, 4,61 % H, 31,43 % N.

Příklad 4

5-Kyano-2-hydrazino-4-methylamino-pyrimidin

Směs 5-kyano-4-methylamino-2-methylsulfanyl-pyrimidinu (25,86 g) z příkladu 3 a hydrazinhydrátu (52 ml) v ethanolu (250 ml) se zahřívá pod refluxem za míchání 3 hodiny. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti a nerozpustný produkt se odstraní filtracím, promyje studeným vodným ethanolem (1:1) za získání 23 g titulní sloučeniny. Krystalizaci z ethanolu se získá analyticky čistý vzorek 5-kyano-2-hydrazino-4-methylamino-pyrimidinu, t.t. 247 až 249 °C.

Elementární analýza pro C6H₈N₆:

vypočteno 43,90 % C, 4,91 % H, 51,21 % N, nalezeno 44,05 % C, 4,92 % H, 51,39 % N.

Příklad 5

2-Azido-5-kyano-4-methylamino-pyrimidin

Ke studenému (5 °C) roztoku 5-kyano-2-hydrazino-4-methylamino-pyrimidinu (21,7 g) z příkladu 4 ve směsi vody (260 ml) a koncentrované HCl (26,5 ml) se po kapkách přidá roztok

-21CZ 288160 B6

NaNO₂ (10,03 g) ve vodě (25 ml) s horním mechanickým mícháním. Vytvoří se bílá sraženina a po ukončení přidávání se reakční směs míchá dalších 20 minut při 5 °C. Nerozpustný produkt se zfiltruje a promyje se studenou vodou za získání 22,4 g titulní sloučeniny po sušení při 23 °C za vysokého vakua přes noc. Krystalizací z ethanolu se získá analyticky čistý vzorek 2-azido-5kyano-4-methylamino-pyrimidinu, t.t. 225 až 230 °C.

Elementární analýza pro C₆H₅N₇:

vypočteno 41,14 % C, 2,88 % H, 55,99 % N, nalezeno 40,88 % C, 2,81 % H, 55,82 %N.

Příklad 6

2-Amino-4-methylamino-5-pyrimidinkarboxaldehyd

K suspenzi 2-azido-5-kyano-4-methylaminopyrimidinu (22,24 g) z příkladu 5 ve 400 ml 50% vodné kyseliny mravenčí se přidá Raney-niklový katalyzátor (5 g). Reakční směs se třepe pod atmosférou vodíku (40,1 psi) v Parrově hydrogenační aparatuře. Při třepání směsi při teplotě místnosti došlo k intenzivnímu vývoji plynu. Po 30 minutách bylo zařízení odvětráno, byl přidán další Raney-nikl (5 g), zařízení znovu naplněno vodíkem a směs třepána přes noc. Katalyzátor byl odstraněn filtrací a filtrát byl odpařen za vysokého vakua. Zbytek byl suspendován ve vodě a filtrován. Nerozpustný materiál byl oddělen a rozpuštěn ve 450 ml vroucí vody. Vodný roztok byl zfiltrován a pH filtrátu bylo upraveno na 7 IN hydroxidem sodným. Vysrážený produkt byl oddělen filtrací a rekrystalizován z ethanolu za získání 5,0 g 2-amino-4-methylamino-5pyrimidinkarboxaldehydu.

Příklad 7

6-(2,6-Dimethylfenyl)-7-imino-8-methyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamin

Ke 2-ethoxyethanolu (7 ml) při -10 °C se přidá opatrně hydrid sodný (60% suspendovaný v minerálním oleji, 83 mg, 2,08 mmol) za míchání. Směs se nechá ohřát na teplotu místnosti a přidá se 2,6-dimethylfenylacetonitril (1,5 g, 10,33 mmol), a potom 2-amino-4-methylamino-

5- pyrimidinkarboxaldehyd (1,5 g, 9,86 mmol) z příkladu 6. Výsledná reakční směs se zahřívá pod refluxem 2 hodiny, nechá se ochladit na teplotu místnosti a nalije do vody. Nerozpustný surový produkt se oddělí a suší na filtru. Produkt se čistí rozpuštěním ve vroucím ethylacetátu a přidáním horkého hexanu těsně v momentě před srážením. Horký roztok se filtruje a po ochlazení vysráženého produktu se získá 1,22 g 6-(2,6-dimethylfenyl)-7-imino-8-methyl-7,8dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylaminu; t.t. 197 až 198 °C.

Elementární analýza pro Ci6H₁₇N₅.0,15H₂O vypočteno 68,14 % C, 6,18 % H, 24,83 % N nalezeno 68,19 % C, 6,14 % H, 24,60 % N.

Příklad 8

6- (2-Methylfenyl)-7-imino-8-methyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamin

Titulní sloučenina se připraví podobným způsobem jak je popsán v příkladu 7 výše, vychází se ze 2-methylfenylacetonitrilu (0,72 g, 5,45 mmol) a 2-amino-4-methylamino-5-pyrimidinkarboxaldehydu (0,79 g, 5,19 mmol). Jak je popsáno výše jako příslušná báze a rozpouštědlo se použijí hydrid sodný (60% suspenze v minerálním oleji, 0,083 g, 2,08 mmol) a 2-ethoxyethanol. Produkt

-22CZ 288160 B6 se čistí krystalizaci z ethylacetátu-hexanu a získá se 0,68 g 6-(2-methylfenyl)-7-imino-8methyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylaminu, t.t. 189 až 190 °C.

Elementární analýza pro C15H15N5:

vypočteno nalezeno

67,91 % C, 5,70 % H, 26,40 % N, 67,52 % C, 5,71 % H, 26,33 % N.

Příklad 9

6-Fenyl-7-imino-8-methyl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamin

Titulní sloučenina se připraví podobným způsobem jak je popsán výše v příkladu 7, vychází se z fenylacetonitrilu (6,5 ml) a 2-amino-4-methylamino-5-pyrimidinkarboxaldehydu (8,10 g). V této reakci se však použije methoxid sodný (0,5 g) místo hydridu sodného. Produkt se čistí rekrystalizací z isopropylalkoholu za získání 9,2 g 6-fenyl-7-imino-8-methyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylaminu, t.t. 201 až 203 °C.

Elementární analýza pro C14H13N5:

vypočteno nalezeno

66,91 % C, 5,21 % H, 27,87 % N, 66,74 % C, 5,22 % H, 27,90 % N.

Příklad 10

2,7-Diamino-6-(2,6-dichlorfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidin (Příprava metodou podle US patentu 3534039). K roztoku 2-ethoxyethoxidu sodného připraveného z 0,14 g sodíku a 60 ml 2-ethoxyethanolu se přidá 2,07 g 2,4-diamino-5-pyrimidinkarboxaldehydu a 2,79 g 2,6-dichlorfenylacetonitrilu. Směs se zahřívá na teplotu refluxu 4 hodiny, nechá ochladit na teplotu místnosti a vysrážený produkt se zfiltruje a promyje diethyletherem za získání 2,7-diamino-6-(2,6-dichlorfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidinu, t.t. 325 až 332 °C.

Příklad 11

2-Amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ol

Roztok 2,7-diamino-6-(2,6-dichlorfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidinu (30,6 g) z příkladu 10 v koncentrované HC1 (200 ml) se zahřívá pod refluxem 24 hodin. Reakční směs se nechá vychladnout na teplotu místnosti, filtruje, promyje se vodou a sušením ve vakuu se získá 16,5 g surového produktu. Filtrát se refluxuje dalších 24 hodin a po ochlazení se získá dalších 8,8 g produktu. Tyto dva výtěžky se spojí, promyjí se dvakrát diethyletherem a sušením ve vakuu se získá 5,9 g 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-olu, t.t. rozkl. 410 °C.

Elementární analýza pro C13H8CI2N4O:

vypočteno 50,84 % C, 2,62 % Η, 18,24 % N, nalezeno 50,45 % C, 2,87 % Η, 18,09 % N.

-23CZ 288160 B6

Příklad 12

2-Amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on

Ke směsi 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-olu (3,7 g) příkladu 11 v dimethylformamidu se přidá NaH (50% suspenze v minerálním oleji, 0,64 g). Výsledná kaše se zahřívá na 65 °C 0,5 hodiny do vytvoření roztoku. Tento se pak ochladí na 50 °C a k reakční směsi se po kapkách přidá roztok methyljodidu (2,0 g) v dimethylformamidu (10 ml). Reakční směs se ohřeje a udržuje mezi 60 až 80 °C po 3 hodiny. Po ochlazení na teplotu místnosti se reakční směs nalije do ledové vody. Nerozpustný bílý produkt se zfíltruje, promyje se vodou a rekrystaluje z ethanolu za použití aktivního uhlí, získá se 1,9 g 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)8-methyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-onu, t.t. 235 až 237 °C.

Elementární analýza pro C14H10CI2N4O:

vypočteno 52,36 % C, 3,14 % H, 17,44 % N, nalezeno 52,03 % C, 3,24 % Η, 17,46 % N.

Příklad 13

2-Amino-6-(2,6-dimethylfenyl)-8-methyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on

Směs 6-(2,6-dichlorfenyl)-7-imino-8-methyl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylaminu (0,96 g) z příkladu 7 a vodné 6N HCI (25 ml) se zahřívá pod refluxem 2 dny. Směs se nechá vychladnout na teplotu místnosti. Nerozpustná bílá pevná látka se oddělí filtrací, promyje se vodou a suší vzduchem. Surový produkt se rozpustí v horkém ethanolu, za přidání horkého ethylacetátu těsně před krystalizací a horký roztok se zfíltruje. Po ochlazení se surový produkt kiystaluje za získání 25 mg 2-amino-6-(2,6-dimethylfenyl)-8-methylpyrido[2,3-d]pyrimidin7(8H)-onu, t.t. postupně rozkl. nad 235 °C.

Elementární analýza pro Ci₆Hi6N₄O.l HCl.0,15 H₂O:

vypočteno 59,38 % C, 5,53 % Η, 17,31 % N, nalezeno 59,42 % C, 5,37 % H, 17,53 % N.

Příklad 14 až 18

2-Amino-6-(2-methylfenyl)-8-methyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on

Ke směsi 6-(2,6-dimethylfenyl)-7-imino-8-methyl-7,8-<iihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2ylaminu (0,30 g) z příkladu 8 a koncentrované HCI (0,6 ml) se přidá voda (11 ml). Reakční směs se refluxuje 20 hodin, pak se nechá vychladnout na teplotu místnosti. Bílá sraženina z reakční směsi se zfíltruje a promyje vodou. Produkt se suší ve vakuu a získá se 0,21 g 2-amino-6-(2methylfenyl)-8-methyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-onu,t.t. 239 až 241 °C.

Elementární analýza pro Ci₅Hi4N₄O.l,46 HCI: vypočteno 56,45 % C, 4,88 % Η, 17,55 % N, nalezeno 56,47 % C, 4,68 % Η, 17,59 % N.

-24CZ 288160 B6

Příklad 18A

Alternativní syntéza 4-methylamino-2-methylsulfanyl-pyrimidin-5-karboxaldehydu

K roztoku 4-chlor-2-methylsulfanyl-5-pyrimidinkarboxylát-ethylesteru (18,66 g, 80,4 mmol) ve 260 ml tetrahydrofuranu se přidá triethylamin (34 ml, 244 mmol), následovaný 30 mi 40% vodného roztoku methylaminu. Roztok se míchá 30 min při 25 °C a pak se zahustí ve vakuu a rozdělí se mezi chloroform a nasycený vodný hydrogenuhličitan sodný. Organická vrstva se promyje solankou, suší nad síranem hořečnatým, filtruje a zahuštěním se získá bílá pevná látka. Pevná látka se suspenduje v hexanu a filtrací se získá 14,70 g (81 %) 4-methylamino-2-methylsulfanyl-5-pyrimidinkarboxylát-ethylesteru; t.t. 91 až 93 °C.

Elementární analýza pro C9H13N3O2S:

vypočteno 47,56 % C, 5,76 % Η, 18,49 % N, nalezeno 47,93 % C, 5,67 % Η, 18,58 % N.

Roztok 4-methylamino-2-methylsulfanyl-5-pyrimidinkarboxylát-ethylesteru (4,36 g, 19,3 mmol) v 60 ml tetrahydrofuranu se přidá po kapkách při teplotě místnosti k suspenzi lithiumaluminiumhydridu (1,10 g, 29,0 mmol) ve 40 ml tetrahydrofuranu. Po 10 minutách se reakce opatrně přeruší 2 ml vody, 2 ml 15% NaOH a dalšími 7 ml vody. Směs se míchá 1 hodinu a vytvořená bílá sraženina se odstraní filtrací a promyje se ethylacetátem. Filtrát se zahustí ve vakuu a přidá se 3:1 hexan:ethylacetát. Pevné látky se oddělí a získá se 2,99 g (84%) 4methylamino-2-ethylsulfanyl-5-pyrimidin-methanolu; t.t. 155 až 157 °C.

Elementární analýza pro C7HHN3OS:

vypočteno 45,39 % C, 5,99 % H, 22,68 % N nalezeno 45,32 % C, 5,93 % H, 22,42 % N.

4-Methylamino-2-methylsulfanyl-5-pyrimidin-methanol (2,40 g, 13,0 mmol) v 7 ml kyseliny octové se přidá k roztoku dihydrátu dvojchromanu sodného (1,30 g, 4,6 mmol) v 6 ml kyseliny octové. Po 2 hodinách při teplotě místnosti se přidá další dihydrát dvojchromanu sodného (0,3 g, 1,0 mmol) v 1 ml kyseliny octové. Po 3,5 hodinách reakce celkem se odstraní jasně zelená pevná látka filtrací. K filtrátu se přidá voda (30 ml) následovaná vodným hydroxidem amonným až do alkality (pH 9,0). Směs se chladí v chladničce po 30 min. Sraženina se oddělí a rozpustí v ethylacetátu a roztok se suší nad síranem hořečnatým. Filtrací a zahuštěním ve vakuu se získá 0,72 g (30 %) 4-methylamino-2-methylsulfanyl-5-pyrimidinkarboxaldehydu; t.t. 99 až 101 °C.

Elementární analýza pro C7H9N3OS:

vypočteno 45,89 % C, 4,95 % H, 22,93 % N, nalezeno 45,80 % C, 4,96 % H, 22,86 % N.

Příklad 19

6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ylidenamin

Práškovaný uhličitan draselný (0,8 g; 5,8 mmol) se přidá k roztoku 0,220 g (1,2 mmol) aldehydu z příkladu 10 a 0,235 g (1,26 mmol) (asi 5% přebytek) 2,6-dichlorfenylacetonitrilu v 2,0 ml dimethylformamidu. Směs se zahřívá za míchání na 125 °C 6 Hodin. K ochlazené směsi se přidá ethylacetát (5 ml) a pevné látky se odfiltrují a promyjí se ethylacetátem. Filtrát se zahustí za sníženého tlaku. Zbylá guma se trituruje s 10 ml vody a výsledná pevná látka se odfiltruje, dobře se promyje vodou a suší. Tento surový materiál se chromatografuje nanesením chloroformového roztoku na silikagelový sloupec zvlhčený chloroformem. Sloupec se eluuje 1:1 (obj./obj.) hexa

-25CZ 288160 B6 nem:ethylacetátem, oddělí se frakce, které podle tle obsahují skvrnu Rf0,25 (1:1 hexan:ethylacetát). Odpařením rozpouštědla se získá pevná látka. Pevný produkt se rozpustí v asi 0,5 ml methylenchloridu. Vyvinou se krystaly. Přidá se petrolether (asi 2 ml) a krystaly se odfiltrují za získání 0,168 g (40%) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-meťhylsulfanyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-ylidenaminu, t.t. 198 až 200 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 351 (M+l).

Elementární analýza pro C15H12CI2N4S:

vypočteno 51,29 % C, 3,44 % Η, 15,95 % N nalezeno 51,31 % C, 3,41 % Η, 15,73 % N.

Příklad 20 [6-(2,6-Dichlorfenyl)-7-imino-8-methyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]-(3diethylaminopropyl)amin

Roztok 0,275 g (0,78 mmol) methylsulfanylového derivátu z příkladu 19 ve 3 ml N,N-diethylaminopropylaminu se zahřívá za míchání v olejové lázni na 135 °C (t. nádoby asi 125 °C) po 16 hodin. Přebytek aminu se odpaří za sníženého tlaku a zbylý olej se rozpustí v 10 ml diethyletheru. Kalný roztok se vyčeří „celitem“, filtruje a zahustí se. Zbytek se trituruje s petroletherem a filtruje; hmotn. 0,288 g (85% výtěžek). Rekrystalizací z ethylacetátu-petroletheru se získá čistý produkt identifikovaný jako [6-(2,6-dichlorfenyl)-7-imino-8-methyI-7,8-dihydropyrido[2,3d]pyrimidin-2-yl]-(3-diethylaminopropyI)amin; t.t. 154 až 156 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 433 (M).

Elementární analýza pro C₂iH₂₆Cl₂N6.0,25 H₂O vypočteno 57,60 % C, 6,10 % H, 19,19 % N, nalezeno 57,46 % C, 5,85 % H, 19,16 % N.

Příklad 21 [6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]-(3diethylaminopropyl)amin

Roztok 0,111 g (0,25 mmol) iminoderivátu z příkladu 20 v 5 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové se zahřívá pod refluxem 6 dnů. Vodná kyselina se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se rozpustí v 1,0 ml vody. Pro úplné vysrážení gumy se přidá vodný 10% roztok uhličitanu draselného. Rozpouštědlo se slije, a guma se rozpustí v 15 ml methylenchloridu. Roztok se suší nad bezvodým uhličitanem draselným, filtruje a filtrát se odpaří. Zbylá guma se rozpustí v 0,5 ml diethyletheru. Krystalický produkt, který vznikl, se odfiltruje a sušením se získá [6-(2,6-dichlorfenyl}-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]-(3diethylaminopropyl)amin.

Hmotové spektrum (Cl) 434 (M⁺).

-26CZ 288160 B6

Příklad 22

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-(2-ethoxy-ethoxy)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7ylidenamin

40,0 mg (1,0 mmol) 60% hydridu sodného v minerálním oleji se přidá za míchání k 5,0 ml ethoxyethanolu. Po ukončení uvolňování vodíku se přidá 0,351 g (1,0 mmol) methylsulfanylového derivátu z příkladu 19. Roztok se zahřívá na 135 °C 15 minut. Reakční směs se ochladí. Pro vysrážení gumovité pevné látky se přidá ledová voda (50 ml). Tento materiál se extrahuje do diethyletheru, roztok se suší (uhličitan draselný) a zahustí se na objem 15 ml. Oddělené krystaly se odfiltrují a promyjí se diethyletherem za získání produktu identifikovaného jako 6-(2,6dichlorfenyl)-2-(2-ethoxy-ethoxy)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ylidenaminu; t.t. 133 až 135 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 393 (M+l).

Elementární analýza pro C18H18CI2N4O2:

vypočteno 54,97 % C, 4,61 % H, 14,25 % N nalezeno 55,05 % C, 4,65 % H, 14,15 % N.

Příklad 23

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-hydroxy-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ylidenamin

Roztok 78,0 mg (0,20 mmol) ethoxyethyletheru z příkladu 22 v 1,0 ml 6N kyseliny chlorovodíkové se zahřívá pod refluxem 5 minut. Rozpouštědlo se odstraní odpařením za sníženého tlaku. Zbylá pevná hydrochloridová sůl se rekiystaluje z ethanolu-ethylacetátu a získá se krystalický 6(2,6-dichlorfenyl)-2-hydroxy-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ylidenamin, hydrochlorid; t.t. 225 až 260 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 321 (M+l).

Elementární analýza pro CuHioCyW-HCl.O/J C₂H₅OH:

vypočteno 47,21 % C, 3,48 % Η, 15,08 % N nalezeno 47,21 % C, 3,40 % H, 14,73 % N.

Příklad 24

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-hydroxy-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Roztok 76,0 mg (0,19 mmol) iminoderivátu z příkladu 23 v 5,0 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové se zahřívá pod refluxem 3 dny a rozpouštědlo se pak odpaří. Zbytek se trituruje s vodou, filtruje a suší. Získá se 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-hydroxy-8-methyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-on jako hydrát.

Hmotové spektrum (Cl) 322 (M⁺).

Elementární analýza pro Ci₄H9Cl₂N₃O2.1,25 H₂O:

vypočteno 48,78 % C, 3,37 % Η, 12,19 % N, nalezeno 48,68 % C, 3,25 % Η, 11,96 % N.

-27CZ 288160 B6

Příklad 25

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-[2-(diethylamino)ethoxy]-8-methyl-8H-pýrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,173 g (0,5 mmol) 2-hydroxyderivátu z příkladu 24,0,086 g (0,5 mmol) hydrochloridu 2diethylaminoethylchloridu, 3 ml dimethylformamidu a 1,0 g práškovaného bezvodého uhličitanu draselného se míchá při teplotě místnosti 24 hodin. Přidá se voda (25 ml) pro vysrážení surového produktu. Čištění se provede silikagelovou chromatografií za získání požadované sloučeniny identifikované jako 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[2-(diethylamino)ethoxy]-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on.

Příklad 26

2-Amino-6-fenyl-8-methyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on

Tato sloučenina se připraví ze 6-fenyl-7-imino-8-methyl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylaminu z příkladu 9 postupem kyselé hydrolýzy podobným postupu z příkladu 14; t.t. 250 až255°C.

Příklad 27

2-Amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-thion

Směs 0,321 g (1,0 mmol) 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin7(8H)~onu z příkladu 12 a 0,404 g (1,0 mmol) Lawessonova činidla v 10 ml pyridinu se zahřívá pod refluxem za míchání 24 hodin. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se trituruje se 20 ml vody, filtruje a koláč se dobře promyje vodou. Čištěním chromatografií na silikagelu se získá požadovaná sloučenina identifikovaná jako 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8methyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-thion.

Příklad 28

N-[6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yliden]acetamid

Směs 0,161 g (0,46 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-ylidenaminu z příkladu 19 a 1,0 ml acetanhydridu se zahřívá do roztoku při teplotě varu. Po 2 minutách refluxu se roztok zahustí na jednu polovinu objemu přičemž se vytvoří krystaly. Směs se ochladí, přidají se 2 ml etheru a produkt se odfiltruje a promyje se etherem; t.t. 229 až 231 °C.

-28CZ 288160 B6

Hmotové spektrum (Cl) 393 (M⁺).

Elementární analýza pro C17H14CI2N4OS:

vypočteno 51,92 % C, 3,59 % H, 14,25 % N nalezeno 52,12 % C, 3,62 % H, 14,20 % N.

Příklad 29

N-[6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-(4-diethylaminobutylamino)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yliden]-acetamid

Směs 0,112 g (0,29 mmol) N-[6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yliden]-acetamidu z příkladu 28 a 1,0 ml (velký přebytek) 4—(diethylamino)butylaminu se zahřívá ve 135 °C olejové lázni za míchání. Po 1 hodině se roztok zahustí za sníženého tlaku a zbytek se trituruje s 1 ml ethylacetátu. Přidá se petrolether (1 ml) a produkt se filtruje.

Hmotové spektrum (Cl) 489 (M⁺).

Příklad 30

2-Amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 27 mg) v 5 ml dimethylformamidu se přidá 2-amino6-(2,6-dichlorfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on (172mg, 0,56 mmol) z příkladu 11.

Směs se zahřívá na 50 °C 1 hodinu za vzniku čirého roztoku. Přidá se ethyljodid (60 μΐ, 0,75 mmol) a roztok se míchá při 50 °C 3,5 hodiny, ochladí se na teplotu místnosti a nalije do 30 ml ledové vody. Výsledná sraženina se odstraní filtrací a rozdělí se mezi ethylacetát a vodu. Organická vrstva se oddělí a suší se nad síranem hořečnatým, filtruje a zahustí se ve vakuu. Rychlá chromatografie za eluce ethylacetátem poskytne 104 mg (55%) 2-amino-6-(2,635 dichlorfenyl)-8-ethyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-onu; t.t. 207 až 209 °C.

Elementární analýza pro C15H12CI2N4O:

vypočteno 53,75 % C, 3,61 % H, 16,71 % N, nalezeno 53,84 % C, 3,67 % Η, 16,57 % N.

-29CZ 288160 B6

Příklad 31

2-Amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-propyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 31 mg) v 6 ml dimethylformamidu se přidá 2-amino6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on z příkladu 11 (205 mg, 0,67 mmol). Směs se zahřívá na 50 °C 1 hodinu za získání čirého roztoku. Přidá se 1-jodpropan (100 μΙ, 1,03 mmol) a roztok se míchá při 50 °C 10 minut, pak se ochladí na teplotu místnosti a nalije na 400 ml ledové vody. Výsledná sraženina se odstraní filtrací a promyje se vodou. Zbytek se suší a čistí rychlou chromatografií za eluce 1:1 hexanem:ethylacetátem za získání 159 mg (68 %) 2amino-(2,6-dichlorfenyl)-8-propyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu; t.t. 196 až 197 °C.

Elementární analýza pro C16H14CI2N4O:

vypočteno 55,03 % C, 4,04 % H, 16,04 % N, nalezeno 55,28 % C, 4,22 % Η, 15,81 % N.

Příklad 32

2-Amino-8-butyl-6-(2,6-dichlorfenyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 34 mg) v 6 ml dimethylformamidu se přidá 2-amino6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on (202 mg, 0,66 mmol). Směs se zahřívá na 50 °C, vznikne čirý roztok. Přidá se 1-jodbutan (105 μΐ, 0,92 mmol) a roztok se míchá při 50 °C 30 minut, potom se ochladí na teplotu místnosti a nalije se na 40 ml ledové vody. Výsledná sraženina se odstraní filtrací a promyje se vodou. Zbytek se suší a čistí rychlou chromatografií, eluuje se gradientem 1:1 hexan:ethylacetát až pouze ethylacetát za získání 152 m (64%) 2amino-8-butyl-6-(2,6-dichlorfenyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu; t.t. 202 až 205 °C.

Elementární analýza pro CnHi6C12N₄0.0,08 EtOAC:

vypočteno 56,18 % C, 4,52 % H, 15,13 %N, nalezeno 56,39 % C, 4,64 % H, 14,99 % N.

Příklad 33

2-Amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-isobutyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 36 mg) v 8 ml dimethylformamidu se přidá 2-amino6-(2,6-dichlorfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on (205 mg, 0,67 mmol). Směs se zahřívá na 60 °C po 20 minut za vzniku čirého roztoku. Přidá se l-jod-2-methylpropan (110 μΐ, 0,94 mmol) a roztok se míchá při 50 °C 30 minut. Přidá se další množství l-jod-2-methylpropanu (40 μΐ, 0,34 mmol) a roztok se míchá při 50 °C 40 minut, potom se ochladí na teplotu místnosti a nalije se na 40 ml ledové vody. Vzniklá sraženina se odfiltruje a promyje se vodou. Gumovitý zbytek se rozpustí v ethylacetátu a promyje vodou. Organická vrstva se suší nad síranem hořečnatým, filtruje a zahustí se ve vakuu. Výsledná pevná látka se čistí rychlou chromatografií, eluce 1:1 hexanem:ethylacetátem poskytne 123 mg (51%) 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-isobutyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu; t.t. 193 až 195 °C.

Elementární analýza pro C17H16CI2N4O:

vypočteno 56,21 % C, 4,44 % Η, 15,42 % N, nalezeno 56,60 % C, 4,59 % Η, 15,11 % N.

-30CZ 288160 B6

Příklad 34

2-Amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-(3-dimethylaminopropyl)-8H-pyndo[2,3-d]pyrimidin-7-on

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 50 mg) v 8 ml dimethylformamidu se přidá 2-amino6-(2,6-dichlorfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on (319 mg, 1,04 mmol). Směs se zahřívá na 70 °C 1,5 hodiny za vzniku čirého roztoku. Do druhé baňky, obsahující NaH (60% v minerálním oleji, 68 mg) v 6 ml dimethylformamidu se přidá hydrochlorid 3-dimethylaminopropylchloridu (248 mg, 1,56 mmol). Tato suspenze se míchá při teplotě místnosti 30 minut, pak se zahřívá na 70 °C 10 minut a přidá se kvýše uvedenému roztoku sodné sole 2-amino-6-(2,6dichlorfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)onu. Výsledná suspenze se zahřívá na 70 °C 3 hodiny, pak se ochladí na teplotu místnosti a filtruje za promytí ethylacetátem. Filtrát se zahustí ve vakuu a přidá se ethylacetát a hexan. Výsledná pevná látka se oddělí filtrací a sušením ve vakuu se získá 216 mg (53 %) 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-(3-dimethylaminopropyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu; t.t. 136 až 141 °C.

Elementární analýza pro C18H19CI2N5O:

vypočteno 55,11 % C, 4,88 % Η, 17,85 % N, nalezeno 55,07 % C, 5,00 % Η, 17,53 % N.

Příklad 35

Methylester kyseliny [2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-7-oxo-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-8-yl]octové

K. suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 38 mg) v 6 ml dimethylformamidu se přidá 2-amino6-(2,6-dichlorfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on (203 mg, 0,66 mmol). Směs se zahřívá na 50 °C 40 minut za vzniku čirého roztoku. Přidá se methylchloracetát (90 μΐ, 1,03 mmol) a roztok se zahřívá na 50 °C 20 minut, potom se ochladí na teplotu místnosti a nalije se na 30 ml ledové vody. Výsledná sraženina se odstraní filtrací a promyje se vodou. Vodný filtrát se extrahuje ethylacetátem a organická vrstva se suší nad síranem hořečnatým, filtruje a zahustí. Pevné látky se spojí a čistí rychlou chromatografií za eluce gradientem 1:1 hexan:ethylacetát až pouze ethylacetát za získání 152 mg (61 %) methylesteru kyseliny [2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-7-oxo-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-8-yl]-octové; t.t. 188 až 190 °C.

Elementární analýza pro C16H12CI2N4O3:

vypočteno 50,68 % C, 3,19 % H, 14,77 % N, nalezeno 50,74 % C, 3,31 % H, 14,39 % N.

Příklad 36 terc.Butylester kyseliny [2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-7-oxo-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-8yljoctové

K suspenzi NaH (60% v minerální oleji, 7 mg) v 10 ml dimethylformamidu se přidá 2-amino-6(2,6-dichlorfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on (398 mg, 1,30 mmol). Směs se zahřívá na 45 °C až 55 °C 40 minut za vzniku čirého roztoku. Přidá se terc.butylbromacetát (250 μΐ, 1,69 mmol) a roztok se míchá při 50 °C několik minut, potom se ochladí na teplotu místnosti a nalije se na 60 ml ledové vody. Výsledná sraženina se odstraní filtrací a promyje se vodou. Pevná látka se čistí rychlou chromatografií, eluce gradientem 1:2 hexan:ethylacetát až pouze

-31CZ 288160 B6 ethylacetát za získání 165 mg (30 %) terc.butylester kyseliny [2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-7oxo-7H-pyrido[2_J3-d]pyrimidin-8-yl]-octové;t.t. 171 až 173 °C.

Elementární analýza pro C19H18CI2N4O3:

vypočteno 54,17 % C, 4,31 % Η, 13,30 % N nalezeno 54,17 % C, 4,34 % H, 13,08 % N.

Příklad 37

6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Roztok 0,20 g (0,51 mmol) N-[6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yIiden]-acetamidu z příkladu 28 ve 2,0 ml 6N kyseliny chlorovodíkové se zahřívá za míchání na teplotu varu. Ihned se vylučují krystaly. Hustá směs se zahřívá další 2 minuty na teplotu varu, ochladí a filtruje. Koláč se promyje dobře vodou a suší; hmotn. 0,175 g (92%);t.t. 249 až 251 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 352 (M⁺).

Elementární analýza pro Ci₅HnCI₂N3OS.l,4 H₂O:

vypočteno 47,58 % C, 3,57 % H, 11,16 % N nalezeno 47,60 % C, 3,12 % Η, 11,14 % N.

Příklad 38

6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-methyl-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)-propylamino]-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-on

Směs 0,152 g (0,43 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37 a 1,0 g (6,40 mmol) l-(3-aminopropyl)-4-methylpiperazinu se zahřívá za míchání ve 170 °C olejové lázni (T nádoby = asi 160 °C) po 3 hodiny. Přebytek aminu se odpaří za sníženého tlaku. Přidá se voda (5 ml) a oddělená guma se extrahuje do 50 ml 10% methylenchloridu-etheru. Organická fáze se promyje třikrát 10 ml vody, suší (uhličitan draselný), čistí aktivním uhlím, filtruje a zahustí. Zbylá guma se rozpustí ve 3 ml etheru. Krystaly, které se vytvoří, se odfiltrují a promyjí se etherem; hmotn. 0,033 g; t.t. 170 až 172 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 461 (NT)

Elementární analýza pro C₂₂H₂₆C1₂N₆O:

vypočteno 57,27 % C, 5,68 % Η, 18,21 % N nalezeno 57,39 % C, 5,70 % H, 18,10 % N.

Příklad 39

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-methansulfonyl-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

0,346 g (1,00 mmol) 50% až 60% m-chlorbenzoové kyseliny (celkem přítomno 50 % kyseliny) se přidá při 25 °C k míchanému roztoku 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37 v 15 ml chloroformu a roztok se míchá přes noc. Pro odstranění jakéhokoliv přebytku kyseliny se přidá 0,25 g (3,20 mmol) dimethylsulfoxidu. Po 15 minutách se chloroformový roztok promyje 30 ml nasyceného hydrogenuhličitanu sodného a pak vodou. Oddělená organická vrstva se suší nad síranem sodným,

-32CZ 288160 B6 filtruje a zahustí na asi 5 ml objem. Oddělí se krystaly. Přidá se asi 5 ml petroletheru a filtruje; hmotn. 0165 g (92 %); t.t. > 290 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 384 (M⁺)

Elementární analýza pro CisHnChNjOjS:

vypočteno nalezeno

46,89 % C, 2,89 % H, 10,94 % N 47,14 % C, 2,96 % H, 10,87 % N.

Příklad 40

6-(2,6-Dichlormethyl)-8-methyl-2-methylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37 se umístí do tlakové trubky s magnetickou míchací tyčinkou. Trubka se ochladí v lázni suchý led-aceton a v trubce kondenzuje asi 3 ml monoethylaminu. Přidá se dimethylformamid (1,0 ml) a trubka se uzavře a ponechá ohřát na teplotu místnosti. Za míchání se reakční směs zahřívá za štítem ve 110 °C olejové lázni. Po 10 minutách je veškerá pevná látka v roztoku. Roztok se zahřívá v olejové lázni 20 hodin. Trubka se ochladí v lázni led-aceton, otevře se a ohřeje se na teplotu místnosti pro odvětrání přebytku aminu. Většina dimethylformamidu se odpaří za sníženého tlaku a získají se kiystaly. Pevná látka se trituruje s 5 ml vody, filtruje, promyje se vodou a suší; hmotn. 0,128 g. Čištění se provede rekrystalizací z ethylacetátu-petroletheru za získání 0,081 g čistého produktu; t.t. 243 až 244 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 335 (M⁺) Elementární analýza pro C15H12CI2N4O: vypočteno 53,75 % C, 3,61 % H, 16,71 % N nalezeno 53,91 % C, 3,64 % Η, 16,80 % N.

Příklad 41

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-dimethylamino-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Tato sloučenina se připraví podobným postupem jak je popsán v příkladu 40, vychází se ze 6(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37 a dimethylaminového plynu; t.t. 256 až 258 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 349 (M⁺)

Elementární analýza pro C16H14CI2N4O:

vypočteno 55,03 % C, 4,04 % H, 16,06 %N nalezeno 55,13 % C, 4,06 % H, 16,03 % N.

Příklad 42

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-ethylamino-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Tato sloučenina se připraví podobným postupem jak je popsán v příkladu 46, vychází se ze 6(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37 a plynného ethylaminu; t.t. 180 až 182 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 349 (M⁺)

-33CZ 288160 B6

Elementární analýza pro CuHuCl^O: vypočteno 55,03 % C, 4,04 % Η, 16,04 % N nalezeno 55,17 % C, 4,08 % H, 16,07 % N.

Příklad 43

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-(2-hydroxyethylamino)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37, 1,0 g (16,4 mmol) ethanolaminu a 0,5 ml dimethylformamidu se zahřívá ve 125 °C olejové lázni za míchání 1,5 hodiny. Výsledný roztok se zahustí ve vakuu a zbylá guma se trituruje s 5 ml vody. Lepivá pevná látka se zfiltruje, dobře se promyje vodou a rekrystaluje z acetonu/petroletheru za získání 0,071 g čistého produktu; t.t. 128 až 131 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 365 (M⁺)

Elementární analýza pro CieHuCbMOj.O,? C₃H₆O: vypočteno 53,56 % C, 4,52 % Η, 13,81 % N nalezeno 53,88 % C, 4,46 % H, 14,17 % N.

Příklad 44

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-isopropylamino-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Tato sloučenina se připraví podobným postupem, jak je popsán v příkladu 40, vychází se ze 6(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37 a isopropylaminu; t.t. 194 až 196 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 363 (M⁺)

Elementární analýza pro Ci7H₁₆Cl₂N₄O: vypočteno 56,21 % C, 4,44 % Η, 15,42 % N nalezeno 56,17 % C, 4,48 % Η, 15,43 % N.

Příklad 45

2-Butylamino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu

Směs 0,177 g (0,50 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37,10 ml n-butylaminu a 1,0 ml dimethylformamidu se zahřívá za míchání pod refluxem (110 °C olejová lázeň). Po 1 hodině je roztok kompletní. Po 20 hodinách refluxu se odpaří přebytek aminu a dimethylformamidu, a zbytek se trituruje s vodou, filtruje, promyje se vodou a suší; hmotn. 0,180 g. Rekrystalizací z ethylacetátu/petroletheru se získá čistý produkt; hmotn. 0,116 g; t.t. 184 až 186 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 377 (M⁺)

Elementární analýza pro CigHigCl₂N₄O:

vypočteno 57,31 % C, 4,81 % H, 14,85 % N nalezeno 57,41 % C, 4,81 % H, 14,83 % N.

-34CZ 288160 B6

Příklad 46

2-Benzylamino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pýrimidin-7-on

Směs 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37, 0,50 g (4,70 mmol) benzylaminu a 0,5 ml dimethylformamidu se zahřívá za míchání ve 120 °C olejové lázni. Po 5 minutách je roztok kompletní. Po 5 hodinách se za sníženého tlaku odpaří přebytek aminu a dimethylformamidu a zbytek se trituruje s roztokem 1 ml acetonu a 2 ml petroletheru. Lepivá pevná látka se filtruje a rekiystaluje z ethylacetátu/petroletheru za získání 0,092 g čistého produktu; t.t. 217 až 219 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 411 (M⁺)

Elementární analýza pro C17H14CI2N4O5:

vypočteno 61,33 % C, 3,92 % Η, 13,62 % N nalezeno 61,30 % C, 4,02 % H, 13,59 % N.

Příklad 47

6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-methyl-2-(3-morfolin-4-yl-propylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37, 1,00 g (6,90 mmol) N-(3-aminopropyl)morfolinu a 0,5 ml dimethylformamidu se zahřívá za míchání ve 125 °C olejové lázni. Po 2 minutách je rozpuštění úplné. Po 1,5 hodině se odpaří přebytek aminu a dimethylformamidu za sníženého tlaku a zbytek se trituruje s 5 ml vody. Guma se rozpustí ve 25 ml ethylacetátu a roztok se promyje 2 x 5 ml vody, suší se (uhličitan draselný) a zahustí. Po rozpuštění v 5 ml etheru se oddělí krystaly čistého produktu; hmotn. 0,101 g; t.t. 140 až 142 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 448 (M⁺)

Elementární analýza pro C21H23CI2N4O2:

vypočteno 56,26 % C, 5,17 % H, 15,62 % N nalezeno 56,48 % C, 5,24 % Η, 15,53 % N.

Příklad 48

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-[2-(3,4-dimethoxyfenyl)ethylamino]-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidín-7-onu z příkladu 37, 0,80 g (4,40 mmol) 2-(3,4-dímethoxyfenyl)ethylaminu a 0,5 ml dimethylformamidu se zahřívá za míchání v olejové lázni 125 °C. Po 2 minutách je rozpuštění úplné. Po 5 hodinách se přebytek aminu a dimethylformamidu odpaří za sníženého tlaku a zbytek se trituruje s 10 ml vody. Guma se rozpustí v 75 ml etheru a roztok se promyje 2 x 10 ml vody a suší se (uhličitan draselný). Hydrochloridová sůl se připraví průchodem plynného chlorovodíku tímto etherovým roztokem za vysrážení gumy. Ether se slije, a guma se rozpustí ve 2,0 ml 2-propanolu. Vyvolá se vysrážení krystalů. Ether (10 ml) se přidá a čisté krystaly se odfiltrují a promyjí se etherem; hmotn. 0,034 g; t.t. 152 až 155 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 485 (M⁺).

-35CZ 288160 B6

Elementární analýza pro C₂₄H₂₂Cl₂N₄O₃.HC1.0,75 C₃H₈O: vypočteno 55,61 % C, 5,16 % H, 9,88 % N nalezeno 55,32 % C, 5,28 % H, 9,50 % N.

Příklad 49

6- (2_J6-Dichlorfenyl)-8-methyl-2-[(pyridin-2-ylmethyl)amino]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-

7- on

Směs 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-on z příkladu 37, 1,08 g (10,0 mmol) 2-{aminoethyl)pyridinu a 0,5 ml dimethylformamidu se zahřívá za míchání ve 130 °C olejové lázni. Po 2 minutách je rozpuštění úplné. Po 2 hodinách se přebytek aminu a dimethylformamidu opaří za sníženého tlaku. Ke zbytku se přidá ether (5 ml). Ihned se vytvoří krystaly. Přidá se voda (5 ml) a celá směs se zfiltruje. Koláč se promyje 5 ml etheru, 5 ml vody a pak se suší; hmotn. 0,164 g. Rekiystalizací z ethylacetátu se získá 0,075 g čistého produktu; t.t. 198 až 201 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 412 (M ). Elementární analýza pro C₂oH|₅C1₂N50: vypočteno 58,27 % C, 3,67 % Η, 16,99 % N.

nalezeno 58,36 % C, 3,82 % Η, 16,82 % N.

Příklad 50

6- (2,6-Dichlorfenyl)-8-methyl-2-[(pyridin-3-ylmethyl)amino]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-

7- on

Tato sloučenina se připraví postupem podobným postupu popsanému v příkladu 49, vychází se z 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37 a 1,08 g (10,0 mmol) 3-(aminomethyl)pyridinu za získání 0,053 g čistého produktu; t.t. 224 až 226 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 412 (M⁴).

Elementární analýza pro C₂oH|5C1₂N₅0:

vypočteno 58,27 % C, 3,67 % Η, 16,99 % N nalezeno 58,36 % C, 3,78 % Η, 16,79 % N.

Příklad 51

6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-methyl-2-(pyridin-2-yl-ethylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7on

Tato sloučenina se připraví postupem podobným postupu popsanému v příkladu 49, vychází se z 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37 a 1,00 g (8,20 mmol) 2-(2-aminomethyl)pyridinu za získání 0,082 g čistého produktu; t.t. 173 až 174 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 426 (M⁺).

Elementární analýza pro C₂iHi7Cl₂N₅O:

vypočteno 59,17 % C, 4,02 % Η, 16,43 % N nalezeno 59,28 % C, 4,11 % Η, 16,29 % N.

-36CZ 288160 B6

Příklad 52

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-{3-[4-(2-methoxyfenyl)piperazin-l-yl]-l-propylamino}-8-methyl8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Tato sloučenina se připraví postupem podobným postupu popsanému v příkladu 49, vychází se z 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37 a 1,00 g (4,00 mmol) l-(3-aminopropyl)-4-(2-methoxyfenyl)piperazinu za získání 0,103 g čistého produktu; t.t. 187 až 188 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 553 (M⁺).

Elementární analýza pro C28H30CI2N6O2:

vypočteno 60,76 % C, 5,46 % Η, 15,18 % N nalezeno 61,04 % C, 5,41 % Η, 15,20 % N.

Příklad 53

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-methansulfmyl-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Tato sloučenina se izoluje jako vedlejší produkt při oxidaci 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37 kyselinou m-chlorperbenzoovou v jednom postupu, který je podobný příkladu 39, ale kde reakční doba je zkrácena; t.t. 244 až 247 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 368 (MJ.

Elementární analýza pro C15H11CI2N3O2S:

vypočteno 48,93 % C, 3,01 % Η, 11,41 % N nalezeno 48,42 % C, 3,20 % Η, 11,05 % N.

Příklad 54

6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-methyl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Roztok 0,113 g (0,29 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfonyl-8-methyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 v 1,00 g (10,70 mmol) anilinu se udržuje pod refluxem (184 °C) 3 minuty. Většina přebytku anilinu se odstraní za sníženého tlaku. Zbylá guma se rozpustí v 1,0 ml ethylacetátu. Vyvinou se krystaly; hmotn. 0,088 g. Další čištění pro odstranění tmavé barvy se provede silikagelovou chromatografii, elucí chloroformem a pak 50% hexanemethylacetátem za získání čistého krystalického produktu; hmotn. 0,046 ; t.t. 247 až 249 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 397 (Mj.

Elementární analýza pro C20H14CI2N4O:

vypočteno 60,47 % C, 3,55 % H, 14,10 % N nalezeno 60,25 % C, 3,64 % H, 14,00 % N.

-37CZ 288160 B6

Příklad 55

2-(3-Bromfenylamino)-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Roztok 0,155 g (0,40 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfonyl-8-methyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 v 0,50 g (2,90 mmol) 3-bromanilinu se udržuje pod refluxem (251 °C) 5 minut. Většina přebytku 3-bromanilinu se odpaří za sníženého tlaku. Ochlazením vzniklá guma se trituruje s 1,0 ml etheru. Fialové krystaly, které se vyvinuly, se odfiltrují a promyjí 2 ml etheru; hmotn. 0,186 g. Další čištění pro odstranění tmavé barvy se provede silikagelovou chromatografií, elucí chloroformem a pak 50% hexanem/ethylacetátem za získání čistého krystalického produktu; hmotn. 0,104 g; t.t. 246 až 248 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 447 (M j.

Elementární analýza pro C₂oHi₃BrCl₂N₄0:

vypočteno 50,45 % C, 2,75 % Η, 11,77 % N nalezeno 50,53 % C, 2,76 % Η, 11,52 % N.

Příklad 56

2-(4-Chlorfenylamino)-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,113 g (0,29 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfonyl-8-methyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 v 0,50 g (3,90 mmol) 4-chloranilinu se zahřívá za míchání na teplotu varu (238 °C) 5 minut. K ochlazenému tmavě modrému reakčnímu roztoku se přidá ethylacetát (3 ml). Přidá se petrolether (3 ml) pro úplné vysrážení tmavé pevné látky. Tato se odfiltruje, promyje se 50% hexanem-ethylacetátem; hmotn. 0,078 g. Surová pevná látka se čistí pro odstranění tmavé barvy silikagelovou chromatografií, eluuje se chloroformem a pak 50% hexanem-ethylacetátem za získání čistého krystalického produktu; hmotn. 0,056 g; t.t. 255 až 256 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 431 (M⁺).

Elementární analýza pro C₂oHi3Cl₃N₄0:

vypočteno 55,64 % C, 3,04 % Η, 12,98 % N nalezeno 55,75 % C, 3,04 % H, 12,97 % N.

Příklad 57

2-(Benzo[l,3]dioxo-5-ylamino)-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-

7-on

Směs 0,113 g (0,29 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfonyl-8-methyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 0,50 g (3,70 mmol) 3,4-methylendioxyanilinu se zahřívá za míchání na 200 °C olejové lázni. Výsledný roztok se zahřívá 5 minut a ochladí se na teplotu místnosti. Přidá se ethylacetát (2 ml) a stopy pevné látky se odfiltrují. Krystaly, které se pomalu vyvíjejí ve filtrátu, se odfiltrují a promyjí se 2 ml ethylacetátu; hmotn. 0,080 g. Pevná látka se čistí pro odstranění tmavého zbarvení silikagelovou chromatografií, za eluce chloroformem a pak 50% hexanem/ethylacetátem za získání čistého krystalického produktu; hmotn. 0,054 g; t.t. 240 až 241 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 441 (M j.

-38CZ 288160 B6

Elementární analýza pro C21H14CI2N4O3:

vypočteno 57,16 % C, 3,20 % Η, 12,70 % N nalezeno 56,95 % C, 3,11 % H, 12,47 % N.

Příklad 58

6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-methyl-2-(pyridin-4-ylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,550 g (1,25 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfonyl-8-methyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 1,50 g (16,00 mmol) 4-aminopyridinu se zahřívá za míchání na 150 °C olejové lázni. Výsledný roztok se zahřívá 10 minut a ochladí se na teplotu místnosti. Ztvrdlá tavenina se trituruje se 3 ml methanolu. Po 24 hodinách stání se vyvinutá granulámí pevná látka odfiltruje a promyje se 2 ml methanolu a 2 ml etheru; hmotn. 0,471 g.

Hydrochloridová sůl se připraví následovně: Výše uvedená surová báze se suspenduje v 5 ml methanolu. Za míchání se přidá 1 ml 2N kyseliny chlorovodíkové k získání kompletního roztoku. Další kyselina chlorovodíková se přidává až je roztok slabě zakalený. Krystaly se pak vyloučí, odfiltrují a promyjí 10 ml 10% methanolu-etheru a pak etherem; hmotn. 0,485 g. Rekrystalizací z methanolu/etheru se získá čistý krystalický produkt; hmotn. 0,405 g; t.t. 338 až 340 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 398 (M⁺).

Elementární analýza pro C19H31CI2N5O.HCI.H2O: vypočteno 50,40 % C, 3,56 % Η, 15,47 % N nalezeno 50,78 % C, 3,18 % Η, 15,50 % N.

Příklad 59

6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-methyl-2-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)butylamino]-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-on

Směs 0,152 g (0,43 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37 a 0,50 g (2,90 mmol) l-(4-aminobutyl)-4-methylpiperazinu se zahřívá za míchání ve 170 °C olejové lázni. Po 2 minutách je rozpuštění kompletní. Po 2 hodinách se roztok ochladí na teplotu místnosti a tmavá guma se rozpustí ve 25 ml etheru. Roztok se promyje 4 x 5 ml vody. Většina zabarvení přejde do vody pro promývání. Etherový roztok se suší nad uhličitanem draselným, filtruje a zahustí se na asi 2 ml objemu. Krystaly, které se vyloučí, se odfiltrují a promyjí se etherem; hmotn. 0,063 g; t.t. 130 až 132 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 475 (M⁺).

Elementární analýza pro C23H28CI2N6O:

vypočteno 58,11 % C, 5,94 % H, 17,68 % N nalezeno 58,39 % C, 5,99 % Η, 17,53 % N.

Příklad 60

2-Cyklohexylamino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,100 g (0,26 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfonyl-8-methyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 0,300 g (3,00 mmol) cyklohexylaminu se zahřívá na teplotu varu (134 °C). Výsledný roztok se zahřívá pod refluxem 2 minuty. Většina přebytku aminu se odpaří za sníženého tlaku. Zbývající guma se rozpustí ve 2 ml ethylacetátu za horka. Přidá se

-39CZ 288160 B6 petrolether (2 ml) a krystaly, které se vyloučí z ochlazeného roztoku se odfiltrují a promyjí se vodou; hmotn. 0,090 g. Rekrystalizací z ethylacetátu se získá čistý krystalický produkt; 0,048 g, t.t. 242 až 244 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 403 (NT).

Elementární analýza pro C₂₀H₂₀Cl₂N₄O:

vypočteno 59,56 % C, 5,00 % H, 13,89 % N nalezeno 59,92 % C, 5,03 % Η, 13,86 % N.

Příklad 61 terc.Butylester kyseliny 6-(6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3d]pyrimidin-2-ylamino]-hexanové

Směs 0,152 g (0,40 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfonyl-8-methyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 0,750 g (4,00 mmol) terc.butylesteru kyseliny 5-aminohexanové se zahřívá za míchání na 120 °C olejové lázni do úplného rozpuštění. Po 10 minutách se roztok ochladí na teplotu místnosti a přidá se 20 ml 10% hydrogensiřičitanového roztoku s přítomnými ledovými lupínky. Oddělená guma se extrahuje do 30 ml etheru. Organická fáze se promyje 3 x 5 ml vody, suší (síran hořečnatý), filtruje a zahustí se na objem 2 ml. Krystaly, které se vyloučí, se odfiltrují a promyjí se 1 ml etheru; hmotn. 0,150 g; t.t. 70 až 75 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 491 (M*).

Elementární analýza pro C₂4H₂8Cl₂N₄O₃.0,2 H₂O:

vypočteno 58,22 % C, 5,78 % Η, 11,32 % N nalezeno 57,84 % C, 5,71 % Η, 11,04 % N.

Příklad 62

6-(6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]hexanová kyselina

Roztok 0,095 g (0,19 mmol) terc.butylesteru kyseliny 6-(6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-

7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]-hexanové z příkladu 61 v 75 ml kyseliny trifluoroctové při 25 °C se nechá stát 1 hodinu. Většina kyseliny trifluoroctové se odpaří. Zbylá guma se trituruje se 2 ml vody a slije. Pro rozpuštění většiny gumy se přidá methanol (1 ml), čímž se vyvinou dobře definované krystaly, přidá se voda (1 ml) a pevná látka se filtruje a suší; hmotn. 0,100 g; t.t. 240 až 242 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 435 (M⁺).

Elementární analýza pro C₂₀H₂oCl₂N₄0₃.CFjC0₂H.O,75 CH₃OH:

vypočteno 47,65 % C, 4,22 % H, 9,77 % N nalezeno 47,38 % C, 4,28 % H, 9,72 % N.

Příklad 63

6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-methyl-2-p-tolylamino-8H-pyrido(2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,113 g (0,29 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyI)-2-methansulfonyI-8-methyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 0,50 g (4,70 mmol) 4-methylanilinu se zahřívá za míchání ve 180 °C olejové lázni. Výsledný roztok se zahřívá 10 minut. Většina přebytku 4-methylanilinu se

-40CZ 288160 B6 odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí v 1 ml ethylacetátu. Krystaly, které se oddělí ze tmavého roztoku se filtrují a promyjí 2 ml ethylacetátu a pak etheru; hmotn. 0,111 g. Rekrystalizací z ethylacetátu se získá čistý produkt; hmotn. 0,050 g; t.t. 243 až 245 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 411 (M⁺).

Elementární analýza pro C21H16CI2N4O:

vypočteno 61,33 % C, 3,92 % Η, 13,62 % N nalezeno 61,11 % C, 4,00 % Η, 13,41 % N.

Příklad 64

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-(4-methoxyfenylamino)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,113 g (0,29 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfonyl-8-methyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 0,50 g (4,10 mmol) 4-methoxyanilinu se za míchání zahřívá ve 180 °C olejové lázni. Výsledný roztok se zahřívá 10 minut. Většina přebytku anilinu se odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí ve 2 ml ethylacetátu. Krystaly, které se vyloučí ze tmavého roztoku se odfiltrují a promyjí 2 ml ethylacetátu, hmotn. 0,102 g. Rekrystalizací z ethylacetátu se získá čistý produkt; hmotn. 0,047 g; t.t. 221 až 223 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 427 (M⁺).

Elementární analýza pro C21H16CI2N4O2:

vypočteno 59,03 % C, 3,77 % H, 13,11 % N nalezeno 59,19 % C, 3,84 % Η, 13,07 % N.

Příklad 65

6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-ethyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ylidenamin g práškovaného bezvodého uhličitanu draselného se přidá k roztoku 4,95 g (0,025 mol) 4ethylamino-2-methylsulfanylpyrimidin-5-karbaldehydu a 5,25 g (0,028 mmol) 2,6-dichlorfenylacetonitrilu v 50 ml dimethylformamidu. Směs se zahřívá za míchání ve 130 °C olejové lázni (teplota nádoby = asi 120 °C) 16 hodin. Směs se ochladí a filtruje. Koláč se promyje 30 ml dimethylformamidu. K filtrátu se přidává voda až do slabého zákalu. Krystaly, které se oddělí, se odfiltrují, promyjí se 20 ml 50% dimethylformamidu/vody a pak 20 ml vody a suší se; hmotn. 4,30 g, t.t. 217 až 219 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 365 (NT).

Příklad 66

N-[6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-ethyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yliden]acetamid

Směs 2,70 g (7,40 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-ylidenaminu z příkladu 65 a 15 ml acetanhydridu se zahřívá za míchání na teplotu varu. Výsledný roztok se zahřívá pod refluxem 5 minut a zahustí se za sníženého tlaku na objem asi 8 ml. Roztok se ochladí a přidá se ether (8 ml). Dobře definované krystaly, které se oddělí, se odfiltrují a promyjí se 5 ml etheru a 10 ml petroletheru; hmotn. 2,68 g; t.t. 175 až 177 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 407 (M⁺)·

-41CZ 288160 B6

Příklad 67

6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-ethyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

2,40 g (5,90 mmol) N-[6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yliden]-acetamidu z příkladu 66 se rozpustí ve 35 ml 6N kyseliny chlorovodíkové při 25 °C. Roztok se zahřívá za míchání na teplotu varu. Po 1 minutě se oddělí krystaly produktu. Po dalších 5 minutách při teplotě varu se směs ochladí, filtruje a koláč se postupně promyje 5 ml 6N kyseliny chlorovodíkové, 15 ml vody, 5 ml 2-propanolu a 5 ml etheru; hmotn. 2,11 g (98 %). Čistý produkt se izoluje za použití silikagelové chromatografie s eluci 50 % chloroformu/ethylacetátu; t.t. 233 až 236 °C.

Elementární analýza pro Ci₆Hi₃C12N₃OS.O,1 C₄H_gO2.0,25 H₂O:

vypočteno 51,89 % C, 3,80 % Η, 11,07 % N nalezeno 51,89 % C, 3,58 % Η, 10,99 % N.

Příklad 68

6~(2,6-Dichlorfenyl)-8-ethyl-2-methansulfonyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Roztok 0,66 g (1,80 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-2-methansulfonyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 67 v 50 ml chloroformu se zpracuje za míchání s 1,50 g (4,32 mmol) 50% až 60% kyseliny m-chlorperbenzoové (celkem 50 % perkyseliny přítomno). Roztok se nechá stát při teplotě místnosti 16 hodin. Pro snížení přebytku perkyseliny se přidá 0,50 g (6,80 mmol) dimethylsulfoxidu. Po 15 minutách se roztok promyje 2 x 30 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu a pak 30 ml vody. Chloroformový roztok se suší nad bezvodým síranem sodným, filtruje a zahustí na objem 10 ml. Přidává se petrolether až do slabého zákalu. Vyloučené krystaly se odfiltrují a promyjí se etherem; hmotn. 0,401 g; t.t. 214 až 216 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 398 (M⁺).

Elementární analýza pro Ci6Hi₃Cl₂N₃O₃S.0,25 H₂O:

vypočteno 47,70 % C, 3,38 % H, 10,43 % N nalezeno 47,41 % C, 3,17 % H, 10,23 % N.

Příklad 69

6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-ethyl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,134 g (0,33 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-2-methansulfonyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 68 a 0,500 g (5,40 mmol) anilinu se zahřívá za míchání ve 195 °C olejové lázni pod refluxem. Výsledný roztok se udržuje pod refluxem 5 minut. Většina přebytku anilinu se odpaří za sníženého tlaku. Zbylý guma se rozpustí v 15 ml ethylacetátu. Po odfiltrování relativně malého množství nerozpustného materiálu se roztok filtruje přes vrstvu silikagelu pro odstranění fialové barvy. Filtrát se zahustí na objem 2 ml. Přidává se petrolether do slabého zákalu. Krystaly, které se oddělí, se odfiltrují a promyjí 50% etherem/petroletherem; hmotn. 0,068 g; t.t. 223 až 225 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 411 (M⁺).

Elementární analýza pro C2iHi₆Cl₂N₄O.0,25 C₄H_gO₂:

vypočteno 60,98 % C, 4,19 % Η, 12,93 % N.

nalezeno 61,19 % C, 4,29 % H, 12,57 % N.

-42CZ 288160 B6

Příklad 70

6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-ethyl-2-[3-(4-methyl-piperazin-l-yl)propýlamino]-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-on

Směs 0,150 g (0,41 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 67 a 0,500 g (3,20 mmol) l-(3-aminopropyl)-4-methylpiperazinu se zahřívá ve 180 °C olejové lázni. Výsledný roztok se zahřívá 0,5 hodiny. Většina přebytku aminu se odpaří za sníženého tlaku. Zbylá guma se trituruje se 2 ml vody a slije. Guma se rozpustí v 15 ml etheru. Roztok se promyje 3 x 5 ml vody, suší (síran sodný), filtruje a zahustí na objem 2 ml. Přidává se petrolether do slabého zákalu. Vyloučené krystaly se odfiltrují a promyjí se 2 ml 75% etheru/petroletheru; hmotn. 0,90 g; t.t. 126 až 128 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 475 (M⁺).

Elementární analýza pro C₂3H₂8Cl₂N6O.0,4 H₂O:

vypočteno 57,24 % C, 6,01 % H, 17,42 % N.

nalezeno 57,33 % C, 6,04 % Η, 17,07 % N.

Příklad 71

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-(2-methoxyfenylamino)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,113 g (0,29 mmol) 6-((2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfonyl-8-methyl-lH-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 0,50 g (4,10 mmol) 2-methoxyanilinu se zahřívá, za míchání na 175 °C olejové lázni. Výsledný roztok se 5 minut zahřívá a ochladí se na teplotu místnosti. Přidá se ether (2 ml). Vyloučené krystaly se odfiltrují a promyjí se 1 ml etheru; hmotn. 0,070 g. Pevná látka se čistí pro odstranění tmavé barvy chromatografií na silikagelu za eluce chloroformem. Rekrystalizací z etheru se získá čistý produkt; hmotn. 0,029 g; t.t. 200 až 201 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 427 (M⁺).

Elementární analýza pro C₂iHi6Cl₂N4O₂:

vypočteno 59,03 % C, 3,77 % Η, 13,11 % N nalezeno 59,09 % C, 3,87 % Η, 13,02 % N.

Příklad 72

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-(3-methoxyfenylamino}-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,113 g (0,29 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfonyl-8-methyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 0,50 g (4,10 mmol) 3-methoxyanilinu se zahřívá, za míchání na 175 °C olejové lázni. Výsledný roztok se 5 minut zahřívá a ochladí se na teplotu místnosti. Přidá se ether (2 ml). Vyloučené krystaly se odfiltrují a promyjí 2 ml etheru; hmotn. 0,083 g. Pevná látka se čistí pro odstranění tmavé barvy chromatografií na silikagelu, eluce chloroformem. Rekrystalizací z etheru se získá čistý produkt; hmotn. 0,037 g; t.t. 203 až 204 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 427 (M⁺).

Elementární analýza pro C₂iHi6Cl₂N4O₂.0,5H₂O:

vypočteno 57,81 % C, 3,93 % H, 12,84 % N nalezeno 57,98 % C, 3,82 % H, 12,71 % N.

-43CZ 288160 B6

Příklad 73

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-(4-methoxy-3-methylfenylamino)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,113 g (0,29 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfonyl-8-methyl-8H-pyrido[2,3dJpyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 0,40 g (2,90 mmol) 3-methyl-4-methoxyanilinu se zahřívá, za míchání na 165 °C olejové lázni. Výsledný roztok se 5 minut zahřívá a ochladí se na teplotu místnosti. Přidá se ether (1 ml). Vyloučené krystaly se odfiltrují a promyjí 2 ml etheru; hmotn. 0,109 g. Pevná látka se čistí pro odstranění tmavé barvy chromatografií na silikagelu, eluce chloroformem pak ethylacetátem. Ethylacetátový eluent se zahustí na objem 3 ml. Po ochlazení se oddělí Čisté kiystaly produktu; hmotn. 0,060 g; t.t. 218 až 220 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 441 (M⁺).

Elementární analýza pro C22H18CI2N4O2:

vypočteno 59,88 % C, 4,11 % Η, 12,70 % N nalezeno 59,88 % C, 4,14 % H, 12,57 % N.

Příklad 74

6-(2,6-Dichlorfenyl}-8-ethyl-2-(4-methoxyfenylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Roztok 0,100 g (0,25 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-2-methansulfonyl-8H-pyrÍdo[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 68 a 0,061 g (0,50 mmol) 4-methoxyanilinu v 0,5 ml dimethylfonnamidu se zahřívá pod refluxem 10 minut. Přidají se tři kapky vody. Vyloučí se krystaly. Pro vysrážení další lepkavé pevné látky se přidají další 3 kapky vody. Po dekantaci se pevná látka trituruje s 0,5 ml ethylacetátu a 0,5 ml petroletheru. Pevné látky se odfiltrují a promyjí 50% ethylacetátem/petroletherem a suší se; hmotn. 0,080 g. Čištění se provádí filtrací ethylacetátového roztoku přes vrstvu silikagelu. Zahuštěním filtrátu na objem 1 ml se získá čistý krystalický produkt; hmotn. 0,033 g; t.t. 213 až 215 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 441 (M⁺).

Elementární analýza pro CttHuCk^Oz:

vypočteno 59,88 % C, 4,11 % H, 12,70 % N nalezeno 59,52 % C, 4,17 % Η, 12,56 % N.

Příklad 75

6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-ethyl-2-(4-hydroxyfenylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,048 g (0,11 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-2-(4-methoxyfenylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 74 a 15 ml koncentrované (48%) kyseliny bromovodíkové se zahřívá za míchání pod refluxem 3 hodiny. Výsledný roztok poskytne po ochlazení krystaly; hmotn. 0,033 g; t.t. 255 až 258 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 427 (M⁺).

Elementární analýza pro C21Hi6Cl2N4O2.HBr.H2O:

vypočteno 47,93 % C, 3,64 % Η, 10,65 % N nalezeno 47,78 % C, 3,29 % Η, 10,46 % N.

-44CZ 288160 B6

Příklad 76

6-(2,6-DichIorfenyl)-2-(4-ethoxyfenylamino)-8-ethyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,150 g (0,38 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-2-methansulfonyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimÍdin-7-onu z příkladu 68 a 0,500 g (3,60 mmol) 4-ethoxyanilinu se kondenzuje na 160 °C olejové lázni 10 minut. Tmavě fialová tavenina se ochladí a rozpustí v 1 ml teplé ledové kyseliny octové. Tento roztok se zředí na objem 10 ml vodou pro vysrážení pevné látky. Pevná látka se odfiltruje, promyje se dobře vodou a suší se; hmotn. 0,140 g. Čištění se provede filtrací ethylacetátového roztoku přes vrstvu silikagelu a promytím silikagelu ethylacetátem. Filtrát se zahustí na objem 2 ml a přidají se 2 ml petroletheru. Krystaly, které se vyloučí, se odfiltrují a promyjí etherem; hmotn. 0,094 g; t.t. 192 až 1 í4 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 455 (Nf).

Elementární analýza pro C23H20CI2N4O2:

vypočteno 60,67 % C, 4,43 % H, 12,30 % N nalezeno 60,62 % C, 4,53 % H, 12,11 % N.

Příklad 77

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-(3,4-dimethoxyfenylamino)-8-ethyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,150 g (0,38 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-2-methansulfonyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 68 a 0,500 g (3,30 mmol) 3,4-dimethoxyanilinu se zahřívá na 160 °C olejové lázni 5 minut. Tmavě modrý roztok se ochladí a rozpustí ve 2 ml teplé ledové kyseliny octové. Tento roztok se zředí na objem 10 ml vodou pro vysrážení pevné látky. Pevná látka se odfiltruje, dobře se promyje vodou a suší se; hmotn. 0,200 g. Čištění se provede filtrací ethylacetátového roztoku (25 ml) přes vrstvu silikagelu a promytím silikagelu ethylacetátem. Filtrát se zahustí na objem 3 ml. Krystaly se vyloučí a odfiltrují a promyjí se 1 ml ethylacetátu a pak 1 ml etheru; hmotn. 0,116 g; t.t. 221 až 223 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 471 (M⁺).

Elementární analýza pro C23H20CI2N4O3:

vypočteno 58,61 % C, 4,28 % Η, 11,89 % N nalezeno 58,31 % C, 4,31 % Η, 11,71 % N.

Příklad 78

6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-ethyl-2-(3,4,5-trimethoxyfenylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7on

Směs 0,150 g (0,38 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-2-methansulfonyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 68 a 0,500 g (2,70 mmol) 3,4,5-trimethoxyanilinu se zahřívá na 160 °C na olejové lázni 5 minut zahřívá. Tmavý roztok se ochladí a rozpustí se ve 2 ml teplé ledové kyseliny octové. Tento roztok se zředí na objem 15 ml vodou pro vysrážení fialové pevné látky. Pevná látka se odfiltruje, promyje se dobře vodou a suší se; hmotn. 0,140 g. Čištění se provede filtrací ethylacetátového (30 ml) roztoku přes vrstvu silikagelu a promytím silikagelu ethylacetátem. Filtrát se zahustí na objem 3 ml. Krystaly, které se vyloučí, se odfiltrují a promyjí 1 ml ethylacetátu a 1 ml etheru; hmotn. 0,054 g; t.t. 275 až 278 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 501 (Nf).

-45CZ 288160 B6

Elementární analýza pro C24H22CI2N4O4:

vypočteno 57,50 % C, 4,42 % Η, 11,17 % N nalezeno 57,41 % C, 4,51 % Η, 10,98 % N.

Příklad 79

6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-methyl-2-(pyridin-3-ylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8~methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37, 0,500 g (5,30 mmol) 3-aminopyridinové báze a 0,066 g (0,50 mmol) hydrochloridu 3-aminopyridinu se zahřívá za míchání na 210 °C na olejové lázni 1 hodinu. Přidá se voda (5 ml) k ochlazení reakční směsi pro vysrážení pevné látky. Pevná látka se odfiltruje, promyje se dobře vodou a suší se; hmotn. 0,147 g. Čištění se provede silikagelovou chromatografií za eluce chloroformem a pak ethylacetátem. Ethylacetátový eluent, obsahující čistý produkt, se zahustí na objem 2 ml. Krystaly, které se vyloučí, se odfiltrují a promyjí se 0,5 ml ethylacetátu a 1 ml etheru; hmotn. 0,810 g; t.t. 247 až 248 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 398 (M⁺).

Elementární analýza pro C^HuC^NsO:

vypočteno 57,30 % C, 3,29 % Η, 17,59 % N nalezeno 57,33 % C, 3,38 % H, 17,43 % N.

Příklad 80

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-[4-(2-diethylaminoethoxy)fenylamino]-8-methyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-on

Směs 0,155 g (0,40 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37, 0,167 g (0,80 mmol) 4-(2-diethylaminoethoxy)anilinu a 1 ml (2-methoxyethyl)etheru (t.v. 162 °C) se zahřívá za míchání na 150 °C na olejové lázni. Postupně se během 10 minut rozpustí všechna pevná látka. Roztok se zahřívá dalších 10 minut a ochladí na 100 °C. Přikapává se voda do slabého zákalu. Oddělené krystaly se odfiltrují, promyjí 0,5 ml etheru a 2 ml vody a suší; hmotn. 0,105 g. Čištění se provádí chromatografií za eluce chloroformem, pak ethylacetátem a nakonec 10% methanolem/chloroformem za získání frakce s čistým produktem. Eluent se odpaří dosucha. Zbylá amorfní pevná látka se rozpustí v 1 ml teplého ethylacetátu. Krystaly, které se vyloučí, se odfiltrují a šetrně promyjí ethylacetátem a etherem; hmotn. 0,042 g; t.t. 141 až 143 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 512 (M⁺).

Elementární analýza pro C26H27CI2N5O2:

vypočteno 60,94 % C, 5,31 % Η, 13,67 % N nalezeno 60,96 % C, 5,36 % Η, 13,52 % N.

Příklad 81

6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-methyl-2-[5-(4-methylpiperazin-l-yl)-pentylamino]-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-on

Směs 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37 a 0,50 g (2,70 mmol) l-(5-aminopentyl)-4-methylpiperazinu se zahřívá za míchání na 180 °C až 185 °C na olejové lázni. Po 2 minutách je roztok úplný.

-46CZ 288160 B6

Po 0,5 hodině se roztok ochladí na teplotu místnosti a přidá se 5 ml vody pro vysrážení gumy podobné karamele. Guma se dekantuje se a trituruje s 5 ml vody. Dekantuje se a guma se vyjme do 35 ml etheru. Etherový roztok se promyje 2 x 50 ml vody, suší (uhličitan draselný) a zahustí na objem 5 ml. Do slabého zákalu se přidává petrolether. Vyloučené krystaly se odfiltrují a promyjí se 80% etherem/petroletherem; hmotn. 0,060 g; t.t. 110 až 112 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 489 (M⁺).

Elementární analýza pro C24H30CI2N6O:

vypočteno 58,90 % C, 6,18 % H, 17,17 %N nalezeno 58,75 % C, 6,14 % H, 16,96 % N.

Příklad 82

6- (2,6-Dichlorfenyl)-2-(3-hydroxymethylfenyIamino)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-

7- on

Směs 0,155 g (0,40 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyI)-2-methansulfonyl-8-methyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 0,500 g (4,10 mmol) 3-(hydroxymethyl)anilinu se zahřívá ve 180 °C olejové lázni 10 minut. Na asi 120 °C se přidají 2 ml ledové kyseliny octové pro rozpuštění gumy. Pro vysrážení pevné látky se přidá voda (20 ml). Směs se zfíltruje. Koláč se dobře promyje vodou a suší; hmotn. 0,310 g. Čištění se provede silikagelovou chromatografii za eluce chloroformem a pak ethylacetátem za získání frakce, obsahující čistý produkt. Ethylacetátový eluent se zahustí na objem 1 ml. Krystaly, které se vyloučí, se odfiltrují a promyjí 0,5 ml ethylacetátu a pak 1 ml etheru; hmotn. 0,059 g; t.t. 215 až 217 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 427 (M⁺).

Elementární analýza pro C2iHi₆Cl₂N₄O2:

vypočteno 59,03 % C, 3,77 % H, 13,11 %N nalezeno 59,14 % C, 3,91 % H, 12,78 % N.

Příklad 83

6-{2,6-Dichlorfenyl)-2-(3,5-dimethoxyfenylamino)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7on

Směs 0,155 g (0,40 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfonyl-8-methyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 0,400 g (2,60 mmol) 3,5-dimethoxyanilinu se zahřívá ve 160 °C olejové lázni 5 minut. Při asi 100 °C se přidá 1 ml ledové kyseliny octové pro rozpuštění taveniny. Pro vysrážení gumy se přidá voda (10 ml). Dekantuje se a guma se rozpustí ve 35 ml methylenchloridu. Roztok se promyje 2 x 20 ml vody, suší se nad síranem hořečnatým, zpracuje se s aktivním uhlím, filtruje a zahustí. Vzniklá guma se čistí silikagelovou chromatografii za eluce chloroformem a pak 2:1 hexan:ethylacetátem za získání frakce, obsahující čistý produkt. Eluent se odpaří téměř dosucha, kdy se vyloučí krystaly. Krystaly se odfiltrují a promyjí 0,5 ml etheru; hmotn. 0,059 g; t.t. 228 až 230 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 457 (M⁺).

Elementární analýza pro C22HUCI2N4O3:

vypočteno 57,78 % C, 3,97 % H, 12,25 % N nalezeno 57,93 % C, 4,07 % Η, 12,16 % N.

-47CZ 288160 B6

Příklad 84

Methylester kyseliny {4-(6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]fenyl}octové

Směs 0,226 g (0,58 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfonyl-8-methyl-8H-pyrido(2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 0,40 g (2,80 mmol) báze methylesteru kyseliny 4-aminofenyloctové se zahřívá na 160 °C až 165 °C olejové lázni. Výsledný roztok se 10 minut zahřívá a ochladí se na teplotu místnosti. Roztok se zpracuje s 1 ml ledové kyseliny octové pro rozpuštění. Pro vysrážení gumy se přidá voda (10 ml). Směs se dekantuje a zbylá guma se rozpustí ve 20 ml chloroformu. Chloroformový roztok se promyje 25 ml vody, suší se (síran hořečnatý), filtruje a zahustí. Čištění se provádí silikagelovou chromatografií za eluce chloroformem a pak 50% hexanem/ethylacetátem za získání frakce, obsahující čistý produkt. Eluent se zahustí dosucha za získání pevné látky; hmotn. 0,141 g. Rekrystalizací z ethylacetátu se získají kiystaly; hmotn. 0,054 g; t.t. 224 až 226 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 469 (M⁺).

Elementární analýza pro C23H18CI2N4O3:

vypočteno 58,86 % C, 3,87 % Η, 11,94 % N nalezeno 59,10 % C, 3,94 % Η, 11,85 % N.

Příklad 85

6-(2,6~Dichlorfenyl)-2-(6-methoxypyridin-3-ylamino)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,155 g (0,40 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfonyl-8-methyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 0,50 g (4,00 mmol) 5-amino-2-methoxypyridinu se zahřívá za míchání na 160 °C olejové lázni. Výsledný roztok se zahřívá 10 minut a ochladí se na teplotu místnosti. Pro vysrážení gumy se přidá voda (10 ml). Směs se dekantuje a zbylá guma se trituruje s 5 ml vody. Vzniklá pevná hnědá látka se odfiltruje, dobře se promyje vodou a suší; hmotn. 0,135 g. Čištění se provádí silikagelovou chromatografií za eluce chloroformem a pak ethylacetátem za získání frakce, obsahující čistý produkt. Eluent se zahustí na objem 2 ml. Kiystaly, které se vyloučí se odfiltrují a promyjí 0,2 ml ethylacetátu a pak 0,5 ml etheru; hmotn. 0,045 g; t.t. 233 až 235 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 428 (M‘).

Elementární analýza pro C20H15CI2N5O2:

vypočteno 56,09 % C, 3,53 % H, 16,35 % N nalezeno 56,07 % C, 3,53 % H, 16,06 %N.

Příklad 86

Kyselina {4-(6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2ylaminojfenyljoctová

0,065 g (0,14 mmol) methylesteru kyseliny {4-(6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]fenyl} octové z příkladu 84 se rozpustí za míchání ve 25 ml horkého methanolu. Při teplotě varu se přidá 1 ml 2N hydroxidu sodného. Po 1 hodině refluxu se roztok zahustí na objem 5 ml (z roztoku se odstraní pevná látka). Přidá se voda (10 ml) pro získání kompletního roztoku. Pro vysrážení volné kyseliny jako pevného produktu se přidá ledová kyselina octová (0,25 ml). Pevná látka se odfiltruje, dobře se promyje vodou a suší;

-48CZ 288160 B6 hmotn. 0,060 g. Čištění se provádí rozpuštěním v 60 ml 50% methanolu/methylenchloridu. Stopy pevné látky se odfiltrují a filtrát se zahustí za míchání na objem 2 ml. Oddělené pevné látky se odfiltrují a promyjí vodou s 0,5 ml methanolu a etherem; hmotn. 0,050 g; t.t. 286 až 290 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 455 (NT).

Elementární analýza pro C22H16CI2N4O3:

vypočteno 58,04 % C, 3,54 % H, 12,31 % N nalezeno 58,28 % C, 3,59 % H, 12,19 %N.

Příklad 87

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-(3-hydroxyfenylamino)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,155 g (0,40 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfonyl-8-methyl-8H~pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 0,50 g (4,60 mmol) 3-aminofenolu se kondenzuje na 160 °C olejové lázni 10 minut. Tavenina se ochladí na asi 100 °C a přidá se 5 ml ledové kyseliny octové pro rozpuštění. Přidává se voda do dosažení slabého zákalu. Vyloučené krystaly se odfiltrují, dobře se promyjí vodou a suší; hmotn. 0,104 g. Rekrystalizací z ethylacetátu/petroletheru se získá čistý krystalický produkt; hmotn. 0,035 g; t.t. 290 až 292 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 413 (M').

Elementární analýza pro C2oHi4C12N₄02.0,25 H₂O: vypočteno 57,50 % C, 3,50 % Η, 13,41 % N nalezeno 57,68 % C, 3,50 % H, 13,36 % N.

Příklad 88

Kyselina 4-(6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2ylaminoj-benzoová

Směs 0,226 g (0,58 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfonyl-8-methyI-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 0,40 g (2,42 mmol) ethylesteru kyseliny 4-aminobenzoové se kondenzuje na 170 °C olejové lázni za získání čiré taveniny. Po 15 minutách se v horké tavenině začnou vylučovat krystaly. Reakční směs se ochladí a trituruje se 2 ml ethylacetátu. Přidá se petrolether (1 ml). Směs se odfiltruje a koláč se promyje 2 ml etheru; hmotn. 0,200 g. Rekrystalizací z ethylacetátu se získá čistý produkt; hmotn. 0,078 g; t.t. 278 až 280 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 469 (M⁺).

Elementární analýza pro C23H_lgC12N₄O3.0,l H₂O: vypočteno 58,63 % C, 3,89 % Η, 11,89 % N nalezeno 58,43 % C, 4,01 % Η, 11,61 % N.

Příklad 89

Ethylester kyseliny 3-(6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]benzoové

Směs 0,226 g (0,58 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfonyl-8-methyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 0,40 g (2,42 mmol) ethylesteru kyseliny 3-aminobenzoové se kondenzuje na 170 °C olejové lázni za získání čiré taveniny. Po 6 minutách se tavenina ochladí na asi 100 °C. Pro rozpuštění taveniny se přidá ledová kyselina octové (1 ml). Pro vysrážení

-49CZ 288160 B6 pevné látky se přidá voda (5 ml). Pevná látka se odfiltruje, dobře se promyje vodou a trituruje se 2 ml methanolu. Směs se zfiltruje a koláč se promyje 1 ml methanolu a pak etherem; hmotn. 0,194 g. Rekrystalizací z ethylacetátu se získá čistý produkt; hmotn. 0,075 g; t.t. 238 až 240 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 469 (M⁺).

Elementární analýza pro CžaHigClžN^:

vypočteno 58,86 % C, 3,87 % Η, 11,94 % N nalezeno 58,91 %C, 3,96% H, 11,87 %N.

Příklad 90

Kyselina 3-[6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2ylaminojbenzoové

0,065 g (0,139 mmol) ethylesteru kyseliny 3-(6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]benzoové z příkladu 89 se rozpustí v 75 ml vroucího methanolu. Přidá se hydroxid sodný 2N (2 ml) a čirý roztok se udržuje pod refluxem 2 hodiny. Roztok se zahustí za míchání na objem asi 15 ml. Kalný roztok se zfiltruje za horka pro odstranění stop pevných látek. Filtrát se zahustí na objem asi 4 ml. Přidá se voda (5 ml) za získání kalné směsi. Pro vysrážení vločkovitých pevných látek se přidá ledová kyselina octová (1 ml). Pevné látky se odfiltrují, dobře se promyjí vodou a suší; hmotn. 0,048 g. Čištění se provede rozpuštěním ve 4 ml teplého dimethylformamidu a přídavkem 20 ml etheru. Krystaly, které se pomalu vyloučí z čirého roztoku se odfiltrují a promyjí se etherem a pak vodou (pro odstranění jakýchkoliv stop octanu sodného); hmotn. 0,025 g; t.t. > 300 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 441 (M⁺).

Elementární analýza pro C21H14CI2N4O3: vypočteno 57,16 % C, 3,20 % H, 12,70 % N nalezeno 56,88 % C, 3,42 % Η, 12,52 % N.

Příklad 91

Ethylester kyseliny 4-(-(6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydro~pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]máselné

Směs 0,452 g (1,16 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfonyl-8-methyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 1,00 g (4,83 mmol) ethylesteru kyseliny 4-aminofenylmáselné, báze, se zahřívá na 160 °C olejové lázni. Po 1 minutě je roztok kompletní. Po 10 minutách se reakce ochladí na asi 100 °C a přidají se 2 ml ledové kyseliny octové pro rozpuštění viskózního materiálu. Pro vysrážení gumy se přidá voda (20 ml). Směs se slije a zbylá guma se trituruje se 3 x 10 ml vody. Guma se rozpustí ve 25 ml methylenchloridu a roztok se promyje 25 ml vody, suší (síran hořečnatý), filtruje a odpaří. Zbylý materiál se rozpustí ve 2 ml horkého ethylacetátu. Vyloučené krystaly se odfiltrují a promyjí 2 ml etheru; hmotn. 0,358 g. Další čištění silikagelovou chromatografií bylo nezbytné pro odstranění stop nečistot. Chloroformový roztok sloučeniny se umístí na kolonu a produkt se eluuje 50% hexanem/ethylacetátem. Eluent se zahustí a guma se rozpustí v 5 ml teplého etheru. Po naočkování se oddělí čisté krystaly; hmotn. 0,256 g; t.t. 169 až 170 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 511 (M*).

Elementární analýza pro C26H24CI2N4O3:

vypočteno 61,06 % C, 4,73 % Η, 10,96 % N nalezeno 61,19 % C, 4,76 % H, 10,86 % N.

-50CZ 288160 B6

Příklad 92

Kyselina 4-{4-[6-(2,6-díchlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2ylamino]feny 1} máselná

5ml2N hydroxidu sodného se přidá k horkému roztoku 0,170 g (0,33 mmol) ethylesteru kyseliny 4-{3-[6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2ylamino]-fenyl}máselné z příkladu 91. Roztok se udržuje pod refluxem 1 hodinu. Přidá se ledová kyselina octová (1 ml) a reakční roztok se odpaří na objem asi 25 ml. Pro vysrážení pevné látky se přidá voda (50 ml). Směs se filtruje a koláč se dobře promyje vodou a suší; hmotn. 0,130 g. Hydrolýza není za těchto podmínek úplná. Produkt se čistí pro odstranění výchozího esteru chromatografií na silikagelu za eluce 1:20 methanolem:chloroformem za získání 55 mg čisté kyseliny; t.t. 169 až 171 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 483 (M⁺).

Elementární analýza pro C24H20CI2N4O3:

vypočteno 59,64 % C, 4,17 % Η, 11,59 % N nalezeno 59,77 % C, 4,24 % Η, 11,44 % N.

Příklad 93 (2,6-Dichlorfenyl)-8-ethyl-2-(pyridin-4-ylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,126 g (0,31 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfbnyl-8-ethyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-onu, 0,25 mol hydrátu, z příkladu 68 a 0,300 g (3,20 mmol) 4—aminopyridinu se zahřívá za míchání, na 150 °C olejové lázni 10 minut. Po 3 minutách se oddělí krystaly. Směs se ochladí a přidá se 1 ml methanolu. Pevná látka se odfiltruje, promyje se 1 ml methanolu a pak etherem; hmotn. 0,100 g. Hydrochloridová sůl se připraví následovně: výše uvedená surová báze se suspenduje ve 2 ml methanolu. Přidá se jeden ml 2N kyseliny chlorovodíkové a směs se ohřeje do úplného rozpuštění. Přidají se další 2 ml 2N kyseliny chlorovodíkové. Krystaly, které se vyloučí, se odfiltrují a promyjí postupně 1 ml 2N kyseliny chlorovodíkové, 2 ml ethylacetátu a pak etherem; hmotn. 0,110 g. Rekrystalizací z methanolu/etheru se získá čistý krystalický produkt; hmotn. 0,063 g; t.t. 325 až 330 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 412 (M⁺).

Elementární analýza pro C20H15CI2N5O.HCI: vypočteno 53,53 % C, 3,59 % Η, 15,61 % N nalezeno 53,48 % C, 3,74 % H, 15,38 % N.

Příklad 94

4-Ethylamino-2-methylthio-5-pyrimidinkarboxylát-ethylester

K roztoku 4-chlor-2-methylthio-5-pyrimidinkarboxylátu-ethylesteru (10,00 g, 43,10 mmol) ve 150 ml tetrahydrofuranu se při teplotě místnosti přidá triethylamin (18,5 I, 133 mmol) následovaný 9 ml 70% vodného roztoku ethylaminu. Roztok se míchá 30 minut, pak se zahustí ve vakuu a rozdělí se mezi chloroform a nasycený vodný hydrogenuhličitan. Organická vrstva se suší nad síranem hořečnatým, filtruje a zahuštěním se získá 9,32 g (90 %) 4-ethylamino-2-methylthio-5pyrimidinkarboxylát-ethylester jako olej.

-51CZ 288160 B6

Elementární analýza pro C10H15N3O2S:

vypočteno 49,77 % C, 6,27 % Η, 17,41 % N nalezeno 49,77 % C, 6,24 % H, 17,30 % N.

Příklad 96

4-Ethylamino-2-methylthio-5-pyrimidinmethanol

Roztok 4-ethylamino-2-methylthio-5-pyrimidinkarboxylát-ethylesteru (8,93 g, 37,1 mmol) ve 100 ml tetrahydrofuranu se přikape při teplotě místnosti k suspenzi lithiumaluminiumhydridu (2,30 g, 60,5 mmol) ve 100 ml tetrahydrofuranu. Po 10 minutách se reakce opatrně přeruší 4,5 ml vody, 4,5 ml 15% NaOH a 16 ml vody a směs se 1,5 hodiny míchá. Bílá sraženina se odstraní filtrací za promytí ethylacetátem. Filtrát se zahustí ve vakuu a přidá se 1:1 hexan:ethylacetát. Pevné látky se oddělí za získání 6,77 g (92 %) 4-ethylamino-2-methylthio-5-pyrimidinmethanolu; t.t. 152 až 156 °C.

Elementární analýza pro C8H13N3OS:

vypočteno 48,22 % C, 6,58 % H, 21,09 % N nalezeno 48,14 % C, 6,61 % H, 20,85 % N.

Příklad 96

4-Ethylamino-2-methylthio-5-formylpyrimidin

Ke 4-ethylamino-2-methylthio-5-pyrimidinmethanolu (6,44 g, 32,4 mmol) v 600 ml chloroformu se přidá během 3 minut oxid hořečnatý (21,0 g, 241 mmol). Suspenze se míchá při teplotě místnosti 2 hodiny a přidá se dalších 5,5 g oxidu hořečnatého. V míchání se pokračuje

4,5 hodiny. Směs se pak zfiltruje přes celit za promytí chloroformem. Filtrát se zahustí ve vakuu a získá se 6,25 g (97 %) 4-ethylamino-2-methylthio-5-formylpyrimidinu; t.t. 58 až 61 °C.

Elementární analýza pro CgHnNsOS:

vypočteno nalezeno

48,71 % C, 5,62 % H, 21,30 %N 48,62 % C, 5,60 % H, 21,28 % N.

Příklad 97

Ethylester kyseliny 4-ethylamino-2-methansulfinyl-pyrimidin-5-karboxylové

Při teplotě místnosti se k roztoku ethylester-4-ethylamino-2-methylthio-5-pyrimidinkarboxylátu (2,011 g, 8,34 mmol) v 70 ml chloroformu přidá (±)-trans-2-(fenylsulfonyl)-3-fenyloxaziridin (2,70 g, 10,34 mmol). Roztok se míchá při teplotě místnosti 7 hodin, pak se zahustí ve vakuu. Zbytek se čistí rychlou chromatografii za eluce gradientem ethylacetát až 3 % methanolu v ethylacetátu za získání 2,07 g (97 %) ethylesteru kyseliny 4-ethylamino-2-methansulfinylpyrimidin-5-karboxylové; t.t. 54 až 56 °C.

Elementární analýza pro C10H15N3O3S:

vypočteno 48,68 % C, 5,88 % Η, 16,33 % N nalezeno 48,56 % C, 5,68 % Η, 16,23 % N.

-52CZ 288160 B6

Příklad 98

Ethylester kyseliny 4-ethylamino-2-fenylamino-pyrimidin-5-karboxylové

Roztok ethylesteru kyseliny 4-ethylamino-2-methansulfinyl-pyrimidin-5-karboxylové (166 mg, mmol) ve 4 ml anilinu se zahřívá na 110 °C 30 minut. Roztok se ochladí na teplotu místnosti a zahustí se ve vakuu. Rychlá chromatografíe za eluce 2:1 hexanem:ethylacetátem poskytne 158 g (87 %) bílé pevné látky, která podle NMR je převážně požadovaný produkt.

Příklad 99 (4-Ethylamino-2-fenylamino-pyrimidin-5-yl)methanol

Roztok ethylesteru kyseliny 4-ethylamino-2-fenylamino-pyrimidin-5-karboxylové (109 mg, 0,38 mmol) v 6 ml tetrahydrofuranu se přidá po kapkách při teplotě místnosti k suspenzi lithiumaluminiumhydridu (35 mg, 0,92 mmol) v 5 ml tetrahydrofuranu. Po 25 minutách se přidá další lithiumaluminiumhydrid a v míchání se pokračuje 30 minut. Reakce se opatrně přeruší 120 μΐ vody, 200 μΐ 15% NaOH a 300 μΐ vody. Po 1 hodině míchání se bílá sraženina oddělí filtrací za promytí ethylacetátem. Filtrát se zahustí ve vakuu a surový materiál se čistí rychlou chromatografií za eluce ethylacetátem za získání 36 mg (39 %) (4-ethylamino-2-fenylaminopyrimidin-5-yl)methanolu, t.t. 174 až 176 °C.

Elementární analýza pro ΟβΗ^^Ο:

vypočteno 63,92 % C, 6,60 % H, 22,93 % N nalezeno 63,97 % C, 6,58 % H, 22,79 % N.

Příklad 100

4-Ethylamino-2-fenylamino-pyrimidin-5-karbaldehyd

K roztoku (4-ethylamino-2-fenylamino-pyrimidin-5-yl)methanolu (173 mg, 0,71 mmol) v 15 ml chloroformu se přidá oxid hořečnatý (600 mg, 6,89 mmol). Po míchání přes noc při teplotě místnosti se směs filtruje přes sloupeček Celitu, promyje se chloroformem. Filtrát se zahustí ve vakuu za získání 170 mg (99%) 4-ethylamino-2-fenylamino-pyrimidin-5-karbaldehydu; t.t. 155 až 157 °C.

Elementární analýza pro C13H14N4O:

vypočteno 64,45 % C, 5,82 % H, 23,12 % N nalezeno 64,31 % C, 6,01 % H, 22,98 % N.

Příklad 101 (8-Ethyl-7-imino-6-thiofen-3-yl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-fenylamin

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 27 mg) v 5 ml 2-ethoxyethanolu se přidá 3thiofenacetonitril (168 mg, 1,36 mmol). Po 5 minutách míchání při teplotě místnosti se přidá 4ethylamino-2-fenylamino-pyrimidin-5-karbaldehyd (300 mg, 1,24 mmol) a reakce se zahřívá na 120 °C 2 hodiny, vznikne tmavě hnědý roztok. Po ochlazení se roztok nalije do vody, což vyvolá vysrážení. Výsledná sraženina se odstraní filtrací a promyje se vodou. Surový produkt se čistí rychlou chromatografií za eluce 5% methanolem/methylenchloridem následovaným 10% methanolem/methylenchloridem. Zahuštěním frakcí, obsahujících produkt se získá 340 mg

-53CZ 288160 B6 (78 %) (8-ethyl-7-imino-6-thiofen-3-yl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-fenylaminu; t.t. 220 až 222 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 348 (M⁺).

Elementární analýza pro C₎₉H₁₇N₅S:

vypočteno 65,8 % C, 4,93 % H, 20,16 % N nalezeno 64,42 % C, 4,86 % Η, 19,78 % N.

Příklad 102

8-Ethyl-2-fenylamino-6-thiofen-3-yl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Sloučenina se připraví z (8-ethyl-7-imino-6-thiofen-3-yl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-fenylaminu podle postupu z příkladu 116. Produkt se čistí rychlou chromatografií za eluce 5% methanolem/methylenchloridem, následovaným 10% methanolem/methylenchloridem; t.t. 223 až 225 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 349 (NT).

Elementární analýza pro C_I9Hi6N₄OS:

vypočteno 65,49 % C, 4,63 % H, 16,08 % N nalezeno 65,33 % C, 4,49 % Η, 15,73 % N.

Příklad 103 (8-Ethyl-7-imino-6-thiofen-2-yl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-fenylamin

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 27 mg) v 5 ml 2-ethoxyethanolu se přidá 2thiofenacetonitril (168 mg, 1,36 mmol). Po 5 minutách míchání při teplotě místnosti se přidá 4ethylamino-2-fenylamino-pyrimidin-5-karbaldehyd (300 mg, 1,24 mmol) a reakce se zahřívá na 120 °C 2 hodiny, vznikne tmavě hnědý roztok. Po ochlazení se roztok nalije do vody, což vyvolá srážení. Výsledná sraženina se odstraní filtrací a promyje se vodou. Surový produkt se čistí rychlou chromatografií za eluce 5% methanolem/methylenchloridem, následovaným 10% methanolem/methylenchloridem. Zahuštěním frakcí, obsahujících produkt se získá 370 mg (85 %) (8-ethyl-7-imino-6-thiofen-2-yl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-fenylaminu; t.t. 204 až 205 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 348 (M⁺).

Elementární analýza pro Ci₉Hi₇N₅S:

vypočteno 65,68 %C, 4,93 %H, 20,16 %N nalezeno 64,38 % C, 4,90 % H, 19,78 % N.

Příklad 104

8-Ethyl-2-fenylamino-6-thiofen-2-yl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Sloučenina se připraví z (8-ethyl-7-imino-6-thiofen-2-yl-7,8-<iihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-fenylaminu postupem podle příkladu 116. Produkt se čistí rychlou chromatografií za eluce 5% methanolem/methylenchloridem, následovaným 10% methanolem/methylenchloridem; t.t. 223 až 225 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 349 (NT).

-54CZ 288160 B6

Elementární analýza pro C19H16N4OS:

vypočteno 65,49 % C, 4,63 % Η, 16,08 % N nalezeno 65,36 % C, 4,78 % Η, 15,72 % N.

Příklad 105 (6-(2-Brom-6-chlorfenyl)-8-ethyl-7-imino-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)fenylamin

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 12 mg) v 5 ml 2-ethoxyethanolu se přidá 2-brom-6chlorfenylacetonitril (286 mg, 1,24 mmol). Po 5 minutách míchání při teplotě místnosti se přidá 4-ethylamino-2-fenylamino-pyrimidin-5-karbaldehyd (200 mg, 0,83 mmol) a reakce se zahřívá 3 hodiny na 130 °C, vznikne tmavě hnědý roztok. Po ochlazení se vytvořená sraženina trituruje se 201 vody. Sraženina se odfiltruje a promyje se etherem za získání 178 mg (6-(2-brom-6chlorfenyl)-8-ethyl-7-imino-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-fenylaminu.

Příklad 106

6-(2-Brom-6-chlorfenyl)-8-ethyl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidÍn-7-on (6-(2-Brom-6-chlorfenyl)-8-ethyl-7-imino-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)fenylamin (150 mg) se přidá k 1 ml acetanhydridu a zahřívá se pod refluxem 5 minut. Reakční směs se ochladí a zahustí za získání oleje, který se zahřívá pod refluxem s lOml 6NHC1 10 minut. Reakce se ochladí a přidá se 30 ml vody, což vyvolá srážení. Sraženina se odstraní filtrací a promyje se vodou. Výsledná pevná látka se suší za získání 130 mg 6-(2-brom-6chlorfenyl)-8-ethyl-2-fenylamino-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu; t.t. měkne při 195 °C a taje při 210 až 214 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 457 (NT)·

Elementární analýza pro C2iHi6N4OBrCl.HCl:

vypočteno 51,24 % C, 3,48 % Η, 11,38 % N nalezeno 50,58 % C, 3,51 % Η, 11,32 % N.

Příklad 107

Kyselina [2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-7-oxo-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-8-yl]-octová

K roztoku terc.butylesteru kyseliny [2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-7-oxo-7H-pyrido[2,3d]pyrimidin-8-yl]-octové (157 mg, 0,37 mmol) z příkladu 36 ve 4 ml methylenchloridu se přidají 2 ml kyseliny trifluoroctové. Roztok se míchá při teplotě místnosti 5 hodin, pak se zahustí ve vakuu. Výsledný olej se rozdělí mezi methylenchlorid a solanku. Vodná vrstva se promyje ethylacetátem a organické vrstvy se spojí, suší se nad síranem hořečnatým, filtrují a zahustí ve vakuu za získání gumovité pevné látky. Přidá se diethylether a výsledná sraženina se oddělí. K filtrátu se přidá hexan a vyloučená sraženina se oddělí. Pevné látky se spojí a suší ve vakuu při 80 °C za získání 71 mg (52 %) kyseliny [2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-7-oxo-7H-pyrido[2,3d]pyrimidin-8-yl]-octové, které je podle HPLC >97% čistoty; t.t. 297 až 300 °C rozkl.

Elementární analýza pro C^H^CL^Cfi:

vypočteno 49,34 % C, 2,76 % Η, 15,34 % N nalezeno 46,01 % C, 2,77 % Η, 13,28 % N.

-55CZ 288160 B6

Příklad 108

2-Amino-8-benzy 1-6-(2,6-dichlorfenyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 34 mg) v 6 ml dimethylformamidu se přidá 2-amino6-(2,6-dichlorfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on (200 mg, 0,65 mmol). Směs se zahřívá na 50 °C za vzniku čirého roztoku. Přidá se benzylbromid (110 μΐ, 0,92 mmol) a roztok se zahřívá na 50 °C 5 minut, míchá se při teplotě místnosti 2 hodiny, pak se nalije do 40 ml ledové vody. Výsledná sraženina se oddělí filtrací a promyje se vodou. Pevná látka se čistí rychlou chromatografií, eluuje ethylacetátem za získání 181 mg produktu. Druhou chromatografií za eluce ethylacetátem následovanou sušením ve vakuu se získá 110 mg (43 %) 2-amino-8-benzyl6-(2,6-dichlorfenyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu; t.t. 220 až 222 °C.

Elementární analýza pro C20H14CI2N4O:

vypočteno 60,47 % C, 3,55 % H, 14,10 % N nalezeno 60,55 % C, 3,69 % H, 13,93 % N.

Příklad 109

2-Amino-8-(3-brombenzyl)-6-(2,6-dichlorfenyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 38 mg) v 8 ml dimethylformamidu se přidá 2-amino6-(2,6-dichlorfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on (200 mg, 0,65 mmol). Směs se zahřívá na 50 °C 20 minut za vzniku čirého roztoku. Odstraní se topný plášť a přidá se 3-brombenzylbromid (240 μΐ, 0,96 mmol). Po 10 minutách se reakční směs nalije do 30 ml ledové vody. Výsledná sraženina se oddělí filtrací a promyje se vodou. Pevná látka se čistí rychlou chromatografií za eluce 1:1 hexanem:ethylacetátem, pak se suší ve vakuu a získá se 178 mg (58%) 2amino-8-(3-brombenzyl)-6-(2,6-dichlorfenyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on; t.t. měkne při 195 °C, taje při 215 °C.

Elementární analýza pro C₂oHi3BrCl₂N40:

vypočteno 50,45 % C, 2,75 % Η, 11,77 % N nalezeno 50,82 % C, 2,91 % Η, 11,63 % N.

Příklad 110

Methylester kyseliny 4-[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-7-oxo-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-8yl-methyl]benzoové

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 36 mg) v 7 ml dimethylformamidu se přidá 2-amino-

6- (2,6-dichlorfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on (195 mg, 0,64 mmol). Směs se zahřívá na 40 °C až 50 °C 20 minut, vznikne čirý roztok. Přidá se methyl-4-(brommethyl)benzoát (206 mg, 0,90 mmol) a reakční směs se zahřívá na 40 °C až 50 °C 15 minut, pak se nalije do 30 ml ledové vody. Výsledná sraženina se odstraní filtrací a promyje se vodou. Pevná látka se čistí rychlou chromatografií za eluce gradientem 1:1 hexamethylacetát až 1:2 hexamethylacetát, pak se sušením ve vakuu získá 204 mg methylesteru kyseliny 4-[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-

7- oxo-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-8-yl-methyl]benzoové, obsahujícího 0,16 ekvivalentu ethylacetátu; t.t. 235 až 237 °C.

-56CZ 288160 B6

Elementární analýza pro C22Hi6Cl₂N₄O3.0,16 vypočteno 57,95 % C, 3,68 % Η, 11,93 % N nalezeno 57,87 % C, 3,74 % Η, 11,67 % N.

Příkladlll

2-Amino-8-(2,6-dichlorbenzyl)-6-(2,6-dichlorfenyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 36 mg) v 8 ml dimethylformamidu se přidá 2-amino6-(2,6-dichlorfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on (208 mg, 0,68 mmol). Směs se zahřívá na 70 °C 10 minut a pak na 50 °C 30 minut, vznikne čirý roztok. Přidá se a-brom-2,6-dichlortoluen (21 mg, 0,90 mmol) a reakční směs se zahřívá na 50 °C 25 minut, pak se nalije do ledové vody. Výsledná sraženina se odstraní filtrací a promyje se vodou. Pevná látka se čistí rychlou chromatografií, eluuje 1:1 hexanem:ethylacetátem a pak suší ve vakuu za získání 112 mg (35 %) 2-amino-8-(2,6-dichlorbenzyl)-6-(2,6-dichlorfenyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu;

t.t. 274 až 276 °C.

Elementární analýza pro C20H12CI4N4O:

vypočteno 51,53 % C, 2,59 % Η, 12,02 % N nalezeno 51,92 % C, 2,68 % Η, 11,84 % N.

Příklad 112

2-Amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-(4—methoxybenzyI)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 38 mg) v 8 ml dimethylformamidu se přidá 2-amino6-(2,6-dichlorfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on (208 mg, 0,68 mmol). Směs se zahřívá na 50 °C 1 hodinu, vznikne čirý roztok. Přidá se 4-methoxybenzylchlorid (130 μΐ, 0,95 mmol) a reakční směs se zahřívá na 50 °C 30 minut, pak se nalije do ledové vody. Výsledná sraženina se oddělí filtrací a promyje se vodou. Pevná látka se čistí rychlou chromatografií za eluce 1:1 hexanem:ethylacetátem, pak se suší ve vakuu za získání 208 (72 %) mg 2-amino-6-(2,6dichlorfenyl)-8-(4-methoxybenzyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu; t.t. 208 až 209 °C.

Elementární analýza pro C21H16CI2N4O2:

vypočteno 59,03 % C, 3,77 % Η, 13,11 % N nalezeno 59,39 % C, 3,92 % H, 12,88 % N.

Příklad 113

2-Amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-pyridin-4-ylmethyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 32 mg) v 6 ml dimethylformamidu se přidá 2-amino6-(2,6-dichlorfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on (200 mg, 0,65 mmol) a směs se zahřívá na 70 °C. Do druhé baňky, obsahující triethylamin (220 μ|, 1,59 mmol) ve 4 ml dimethylformamidu se přidá hydrochlorid 4-pikolylchloridu (137 mg, 0,84 mmol). Tato tmavě červená směs se přidá k výše uvedenému roztoku sodné soli 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-onu. Směs se zahřívá na 70 °C, pak ochladí na teplotu místnosti. Směs se nalije do 20 ml ledové vody a výsledná sraženina se odstraní filtrací a promyje se vodou. Tato pevná látka se promyje 10% methanolem v ethylacetátu za získání 96 mg surového produktu. Filtrát se zahustí za získání dalších 77 mg surového produktu. Analytický vzorek se získá čištěním rychlou

-57CZ 288160 B6 chromatografií, eluce gradientem ethylacetátu až 10% methanolu v ethylacetátu za získání 2amino-6-(2,6-dichlorfenyl}-8-pyridin-4-yl-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu;

t.t. 268 až 270 °C (rozkl.).

Elementární analýza pro C19H13CI2N5O:

vypočteno 57,30 % C, 3,29 % Η, 17,59 % N nalezeno 57,62 % C, 3,57 % Η, 17,31 % N.

Příklad 114

2-Amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-(3-fenylpropyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 58 mg) v 10 ml dimethylformamidu se přidá 2-amino6-(2,6-dichlorfenyl)~pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on (320 mg, 1,04 mmol). Směs se zahřívá na 60 °C za vzniku čirého roztoku. Přidá se l-chlor-3-fenylpropan (260 μΙ, 1,81 mmol) a reakční směs se zahřívá na 60 °C 35 minut, pak se nalije do ledové vody. Výsledná gumovitá pevná látka se rozpustí v ethylacetátu, promyje se vodou a suší nad síranem hořečnatým. Filtrací následovanou zahuštěním ve vakuu se získá olej, který se čistí rychlou chromatografií, eluce 1:3 hexanem:ethylacetátem za získání 345 mg surového produktu. Rekrystalizací z ethylacetátu a hexanu s následujícím sušením ve vakuu se získá 253 mg (57 %) 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-(3-fenylpropyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu; t.t. 161 až 163 °C.

Elementární analýza pro C₂₂H_I8C1₂N₄O:

vypočteno 62,13 % C, 4,27 % H, 13,17 % N nalezeno 62,08 % C, 4,37 % H, 13,15 % N.

Příklad 115 (8-Ethyl-7-imino-6-fenyl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-2-fenylamin

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 8 mg) v 5 ml 2-ethoxyethanolu se přidá fenylacetonitril (100 μΐ, 0,87 mmol). Po 5 minutách míchání při teplotě místnosti se přidá 4-ethylamino-2fenylamino-pyrimidin-5-karbaldehyd (200 mg, 0,83 mmol) a reakce se zahřívá na 90 °C 24 hodin, vznikne tmavěhnědý roztok. Tento se ochladí na teplotu místnosti a pak se nalije do 20 ml vody. Výsledná sraženina se oddělí filtrací a promyje se vodou. Zbytek se sučí a čistí rychlou chromatografií za eluce 3% methanolem/methylenchloridem. Získá se 145 mg (51 %) (8-ethyl-7-imino-6-fenyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-2-fenylaminu; t.t. 196 až 197 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 342 (M ).

Elementární analýza pro C21H19N5: vypočteno 73,88 % C, 5,61 % H, 20,51 % N nalezeno 73,22 % C, 5,59 % H, 20,29 % N.

Příklad 116

8-Ethyl-6-fenyl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on (8-Ethyl-7-imino-6-fenyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-2-fenylamin (150 mg) se přidá ke 2 ml acetanhydridu a zahřívá se pod refluxem 2 minuty. Reakční směs se ochladí a zahustí, vznikne olej, který se zahřívá pod refluxem s 10 ml 6N HC1 po 10 minut. Reakční směs

-58CZ 288160 B6 se ochladí a přidá se 20 ml vody, což vyvolá vysrážení. Sraženina se odstraní filtrací a promyje se vodou. Výsledná pevná látka se suší ve vakuové sušárně při 45 °C 2 hodiny za získání 122 mg (81 %) 8-ethyl-6-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu; t.t. 197 až 200 °C rozkl.

Hmotové spektrum (Cl) 343 (M⁺).

Elementární analýza pro C₂iHi8N₄O.0,5 HC1 vypočteno 69,94 % C, 5,17 % Η, 15,53 % N, 4,92 % Cl nalezeno 69,30 % C, 5,07 % Η, 15,44 % N, 5,21 % Cl.

Příklad 117 (6-(3,5-Dimethylfenyl)-8-ethyl-7-imino-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-2-fenylamin

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 16 mg) v 5 ml 2-ethoxyethanolu se přidá 3,5dimethylfenylacetonitril (126 mg, 0,87 mmol). Po 5 minutách míchání při teplotě místnosti se přidá 4-ethylamino-2-fenylamino-pyrimidin-5-karboxaldehyd (200 mg, 0,83 mmol) a reakční směs se zahřívá na 115 °C 2 hodiny za získání tmavě hnědého roztoku. Po ochlazení pevná látka ztuhne a trituruje se se 30 ml vody. Výsledná sraženina se odfiltruje a promyje se diethyletherem. Zbytek se suší za získání 232 mg (76 %) (6-(3,5-dimethylfenyl)-8-ethyl-7-imino-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-2-fenylaminu; t.t. 243 až 244 °C.

Elementární analýza pro C23H23N5:

vypočteno 74,77 % C, 6,27 % Η, 18,95 % N nalezeno 73,84 % C, 6,30 % Η, 18,72 % N.

Příklad 118

6-(3,5-Dimethylfenyl)-8-ethyl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on (6-(3,5-Dimethylfenyl)-8-ethyl-7-imino-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-2-fenylamin (150 mg) se přidá k 1 ml acetanhydridu a zahřívá se pod refluxem 2 minuty. Reakční směs se ochladí a zahustí za získání oleje, který se zahřívá pod refluxem s 10 ml 6NHC1 10 minut. Reakční směs se ochladí a přidá se 20 ml vody, což vyvolá srážení. Sraženina se odfiltruje a promyje se vodou. Výsledná pevná látka se suší ve vakuové sušárně při 45 °C 2 hodiny za získání 140 mg (93 %) 6-(3,5-dimethylfenyl)-8-ethyl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu; t.t. 220 až 223 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 371 (M⁺).

Elementární analýza pro C23H22N4O.HCÍ:

vypočteno 67,89 % C, 5,70 % H, 13,77 % N nalezeno 67,58 % C, 5,68 % H, 13,59 % N.

Příklad 119 (8-Ethyl-7-imino-6-pyridin-4-yl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-2-fenylamin

Připraví se v 80% výtěžku ze 4-pyridylacetonitrilu a 4-ethylamino-2-fenylamino-pyrimidin-5karbaldehydu postupem podle příkladu 115.

-59CZ 288160 B6

Příklad 120

8-Ethyl-2-fenylamino-6-pyridin-4-yl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Připraví se v 60% výtěžku z (8-ethyl-7-imino-6-pyridin-4-yl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-2-fenylaminu postupem podle příkladu 116; t.t. měkne při 230 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 344 (M⁺).

Elementární analýza pro C20H17N5O.HCI:

vypočteno 63,24 % C, 4,78 % Η, 18,44 % N nalezeno 63,92 % C, 4,70 % Η, 18,66 % N.

Příklad 121 (8-Ethyl-7-imino-6-naftalen-2-yl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-fenylamin

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 27 mg) v 5 ml 2-ethoxyethanolu se přidá 2-naftylacetonitril (227 mg, 1,36 mmol). Po 5 minutách míchání při teplotě místnosti se přidá 4-ethylamino-2-fenylamino-pyrimidin-5-karbaldehyd (300 mg, 1,24 mmol) a reakční směs se zahřívá na 110 °C 1 hodinu, získá se tmavě hnědý roztok. Po vychladnutí se roztok nalije do 30 ml vody, což vyvolá vysrážení. Výsledná sraženina se odstraní filtrací a promyje se vodou. Surový produkt se čistí rychlou chromatografii za eluce 5% methanolem/methylenchloridem následovaným 10% methanolem/methylenchloridem. Zahuštěním frakcí, obsahujících produkt se získá 400 mg (82 %) žluté pevné látky, (8-ethyl-7-imino-6-naftalen-2-yl-7,8-dihydropyrido[2,3-dlpyrimidin-2-yl)-fenylaminu; t.t. 236 až 242 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 392 (M⁺). Elementární analýza pro C25H21N5:

vypočteno 76,70 % C, 5,41 % Η, 17,89 % N nalezeno 75,58 % C, 5,49 % Η, 17,58 % N.

Příklad 122

8-Ethyl-6-naftalen-2-yl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on (8-Ethyl-7-imino-6-naftalen-2-yl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-fenylamin (150 mg) se přidá k 1 ml acetanhydridu a zahřívá se pod refluxem 2 minuty. Reakce se ochladí a zahustí, získá se olej, který se zahřívá pod refluxem s 10 ml 6N HC110 minut. Reakční směs se ochladí a přidá se 40 ml vody, což vyvolá vysrážení. Sraženina se odstraní filtrací a promyje se vodou. Výsledná pevná látka se suší ve vakuové sušárně za získání 8-ethyl-6-naftalen-2-yl-2fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu; t.t. 254 až 256 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 393 (M⁺).

Elementární analýza pro C25H20N4O.HCI:

vypočteno 70,00 % C, 4,94 % Η, 13,06 % N nalezeno 68,61 % C, 4,97 % H, 12,83 % N.

-60CZ 288160 B6

Příklad 123 (6-Bifenyl-4-yl-8-ethyl-7-imino-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-fenylamin

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 27 mg) v 5 ml 2-ethoxyethanolu se přidá 4-bifenylacetonitril (263 mg, 1,36 mmol). Po 5 minutách míchání při teplotě místnosti se přidá 4-ethylamino-2-fenylamino-pyrimidin-5-karboxaldehyd (300 mg, 1,24 mmol) a reakční směs se zahřívá na 110 °C 1 hodinu, získá se tmavě hnědý roztok. Po ochlazení se roztok nalije do vody, což vyvolá vysrážení. Výsledná sraženina se odstraní filtrací a promyje se vodou. Surový produkt se čistí rychlou chromatografií, eluuje se 5% methanolem/methylenchloridem, pak 10% methanolem/methylenchloridem. Zahuštěním frakcí, obsahujících produkt se získá 427 mg (83 %) (6-bifenyl-4-yl-8-ethyl-7-imino-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-fenylaminu; t.t. 245 až 249 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 418 (M⁺).

Elementární analýza pro C27H23N5:

vypočteno 77,67 % C, 5,55 % Η, 16,78 % N nalezeno 76,16 % C, 5,54 % H, 16,36 % N.

Příklad 124

6-Bifenyl-4-yl-8-ethyl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Připraví se ze (6-bifenyl-4-yl-8-ethyl-7-imino-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)fenylaminu postupem podle příkladu 116; t.t. měkne při 235 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 419 (M⁺).

Elementární analýza pro C27H22N4O.HCI:

vypočteno 71,28 % C, 5,10 % Η, 12,32 % N nalezeno 69,22 % C, 5,10 % H, 11,85 % N.

Sloučeniny vzorce I jsou cennými inhibitory protein tyrosin kinázy a jsou terapeuticky cenné jako buněčná antiproliferativní činidla pro léčení proliferativních poruch. Tyto sloučeniny jsou potentními inhibitory protein kináz, PDGF, FGF, EGF, virální-src (V-src) a celulámí-src (Csrc). Sloučeniny podle vynálezu jsou tak vhodné pro léčení aterosklerózy, restenózy a rakoviny. Specifické tumory pro léčení sloučeninami zahrnují malobuněčný plicní karcinom jako je popsán v an. Rev. Respir. Dis, 142:554-556 (1990); karcinom lidského prsu jak je popsán v Cancer Research. 52:4773-4778 (1992); karcinomy lidského měchýře typu popsaného v Cancer Research. 52: 1457-1462 (1992); lidský kolorektální karcinom jak je diskutován vJ, Clin. Invest., 91:53-60 (1993) a v J. Surg. Res,. 54:293-294 (1993).

Sloučeniny podle předloženého vynálezu byly hodnoceny ve standardních zkouškách, které se používají pro stanovení inhibice tyrosin kináz. Zkoušky byly provedeny následovně:

Čištění epidermální růstový faktor receptor tyrosin kinázy

Lidská EGF receptor tyrosin kinázy byla izolována zA431 epidermoidních karcinomových buněk následujícími metodami. Buňky rostly v otočných lahvích v 50% Dulbeccově modifikovaném Eagle médiu a 50% HAM F-12 živném médiu (Gibco), obsahujícím 10 % fetálního telecího séra. Přibližně 10⁹ buněk bylo lyžováno ve dvou objemech pufru, obsahujícího 20 mM 2-(4N[2-hydroxymethyl]-piperazin-l-yl)ethansulfonové kyseliny, pH 7,4, 5 mM ethylenglykolbis(2-aminoethylether)-N,N,N',N'-tetraoctové kyseliny, 1% Tritonu X-100, 10% Glycerolu,

-61CZ 288160 B6

0,1 mM Orthovanadátu sodného, 5 mM fluoridu sodného, 4 mM pyrofosfátu, 4 mM benzamidu, 1 mM dithiothreitolu, 80 pg/ml aprotininu, 40 pg/ml leupeptinu a 1 mM fenylmethylsulfonylfluoridu. Po odstřeďování při 25000 x g po 10 minut byl supematant ekvilibrován 2 hodiny při 4 °C s 10 ml aglitinin sepharosy pšeničných klíčků, která byla předem ekvilibrována s 50 mM Herpes, 10% glycerolu, 0,1% Tritonu X-100 a 150mMNaCl, pH 7,5 (ekvilibrační pufr). Kontaminující proteiny byly vymyty z pryskyřice 1M NaCl v ekvilibračním pufru a enzym byl eluován 0,5M N-acetyl-l-D-glukosaminem v ekvilibračním pufru.

Stanovení IC₅o hodnot

Enzymové zkoušky pro stanovení IC50 byly provedeny v celkovém objemu 0,1 ml, obsahujícím 25 mM Herpes, pH 7,4, 5 mM MgCl₂, 2 mM MnCl₂, 50 μΜ vanadátu sodného, 5-10 ng EGF receptor tyrosin kinázy, 200 μΜ substrátu peptidů (Ac-Lys-His-Lys-Lys-Leu-Ala-Glu-GlySer-Ala-Tyr⁴⁷²-Glu-Glu-Val-NH₂, získaného z aminokyseliny (Tyr⁴⁷² byl zjištěn jako 1 ze 4 tyrosinů v PLC-g, které jsou fosforylovány EGF receptor tyrosin kinázou (Wahl Μ. I., a spol.,

J. Biol. Chem., 265-3944-3948 (1990)) a peptidy získaných z enzymové sekvence, obklopující toto místo, jsou vynikající substráty pro enzym), 10 μΜ ATP, obsahující 1 pCi [³²P]ATP a inkubovány 10 minut při teplotě místnosti. Reakce byla ukončena přídavkem 2 ml 75 mM kyseliny fosforečné a ponechána projít přes 2,5 cm fosfocelulózový filtrační disk pro navázání peptidů. Filtr byl promyt 5x 75 mM kyselinou fosforečnou a umístěn do lahvičky spolu s 5 ml scintilační kapaliny (Ready gel Beckman).

PDGF a FGF receptor tyrosin kinázové zkoušky

Plná délka cDNA pro myší PDGF-β a lidské FGF-1 (fig) receptor tyrosin kinázy byly získány od J. Ecobeda a připraveny jak je popsáno vJ. Biol. Chem., 262:1482-1487 (1991) a PCR pimery byly sestaveny pro amplifíkaci fragmentu DNA, který kóduje intracelulární tyrosin kináza doménu. Fragment byl vnesen do bakulovirového vektoru, kotransfektován AcMNPVDNA a rekombinantní virus byl izolován. SF9 hmyzí buňky byly infektovány virem pro nadměrnou expresi proteinu a buněčné lyzáty byly použity pro zkoušku. Zkouška byla provedena v 96jamkových plotnách (100 μΐ/inkubace/jamka) a podmínky byly optimalizovány pro měření inkorporace ³²P z gama ³²P-ATP do glutamát-tyrosin kopolymerovaného substrátu. Stručně, do každé jamky bylo přidáno 82,5 μΐ inkubačního pufru, obsahujícího 25 mM Herpes (pH 7,0), 150 mM NaCl, 0,1% Tritonu X-100, 0,2 mM PMSF, 0,2 mM Na3VO4, 10 mM MnCl2 a750pl/ml Póly (4:1) glutamáz-tyrosinu a následovalo 2,5 μΐ inhibitoru a 5 μΐ enzymového lyzátu (7,5 pg/μΙ FGF-TK nebo 6,0 μg/μl PDGF-TK) k iniciaci reakce. Po 10 minutách inkubace při 25 bylo do každé jamky přidáno 10 μΐ gama³²P-ATP (0,4 pCi plus 50 μΜ ATP) a vzorky byly inkubovány dalších 10 minut při 25 °C. Reakce byla ukončena přídavkem 100 μΐΐ 30% kyseliny trichloroctové (TCA), obsahující 20 mM pyrofosforečnanu sodného a srážením materiálu na podložkách ze skelných vláken (Wallac). Filtry byly promyty 3 krát 15% TCA, obsahující 100 mM pyrofosforečnanu sodného a radioaktivita zachycená na filtrech byla spočtena ve Wallac 1250 Betaplate čtečce. Nespecifická aktivita byla definována jako radioaktivita zachycená na filtrech po inkubací vzorků se samotným pufrem (bez enzymu). Specifická enzymatická aktivita byla definována jako celková aktivita (enzym plus pufr) mínus nespecifická aktivita. Koncentrace sloučeniny, která inhibuje specifickou aktivitu z 50 % (IC50) byla stanovena na základě inhibiční křivky.

V-src a C-src kinázové zkoušky

V-src nebo C-src kináza se čistí zbakulovirem infikovaných hmyzích buněčných lyzátů za použití antipeptidické monoklonální protilátky řízené proti N-terminálním 2-17 aminokyselinám. Protilátka, kovalentně navázaná k 0,65 pm latexovým kuličkám, se přidá k suspenzi hmyzího buněčného lyzového pufru, obsahujícího 150 mM NaCl, 50 mM Tris pH7,5, 1 mM

-62CZ 288160 B6

DTT, 1 % NP-40, 2 mM EGTA, 1 mM vanadátu sodného, 1 mM PMSF, 1 pg/ml každého z leupeptinu, pepstatinu a aprotininu. Hmyzí buněčný lyzát, obsahující buď C-src nebo V-src protein se inkubuje s těmito kuličkami 3 až 4 hodiny při 4 °C za otáčení. Na konci inkubace lyzátu se kuličky promyjí 3krát v lýzovém pufru, resuspendují se v lýzovém pufru, obsahujícím 10 % glycerolu a zmrazí. Tyto latexové kuličky se nechají roztát, promyjí se 3krát ve zkušebním pufru, který obsahuje 40 mM tris pH 7,5, 5 mM MgCl₂ a suspendují ve stejném pufru. Na Millipore 96-jamkovou plotnu s 0,65 pm polyvinyliden membránovým dnem se přidají reakční složky: 10—μΐ V-src nebo C-src kuličky, 10 μΐ 2,5 mg/ml póly GluTyr substrátu, 5 μΜ ATP, obsahujícího 0,2 pCi značeného ³²P-ATP, 5 μΐ DMSO, obsahujícího inhibitory nebo jako rozpouštědlová kontrola a pufr pro úpravu konečného objemu na 125 μΐ. Reakce se nastartuje při teplotě místnosti přídavkem ATP a přeruší se o 10 minut později přídavkem 125 μΐ 30% TCA, 0,lM pyrofosforečnanu sodného po 5 minut na ledu. Plotna se pak filtruje a jamky se promyjí dvěma 250 μΐ podíly 15% TCA, 0,lM pyrofosforečnanem. Filtry se vyklepnou, spočtou v kapalinovém scintilačním čítači a data se hodnotí na inhibiční aktivitu ve srovnání se známým inhibitorem jako je erbstatin. Metoda je podrobněji popsána v J. Med. Chem., 37:598-609 (1994).

Buněčná kultura

Buňky hladkých svalů krysí aorty (RASMC) byly izolovány z thorakální aorty krys a zpracovány podle metody Rosse, J. Cell. Biol,, 30:172-186 (1971). Buňky rostly v Dulbeccově modifikovaném Eaglově médiu (DMEM, Gibco), obsahujícím 10 % fetálního telecího séra (FBS, Hyclone, Logan, Utah), 1 % glutaminu (Gibco) a 1 % penicilinu/streptomycinu (Gibco). Buňky byly identifikovány jako buňky hladkých svalů podle jejich tvaru růstu „vrcholky a prohlubně“ a fluorescentního vybarvení s monoklonální protilátkou specifikovanou pro SMC oo-aktin (Sigma). RASMC byly použity mezi pasážemi 5 a 20 pro všechny pokusy. Zkoušené sloučeniny byly připraveny v dimethylsulfoxidu (DMSO) za účelem dosažení konzistence ve vehikulu a pro zajištění rozpustnosti sloučeniny. Vhodné DMSO kontroly byly podobně hodnoceny se zkoušenými sloučeninami.

Zkouška inkorporace [³H]-thymidinu

RASMC byly umístěny na 24-jamkovou plotnu (30 000 buněk/jamka) v DMEM s 10% FBS. Po 4 dnech buňky dosáhly konfluence a byly zklidněny inkubací v DMEM/F12 médiu (Gibco), obsahujícím 0,2 % FBS po další 2 dny. DNA syntéza byla vyvolána inkubací buněk po 22 hodin s buď PDGF-BB, bFGF nebo FBS, plus testovaná sloučenina v 0,5 ml/jamka sérum obsahujícího média (DMEM/F12 + 1 % CPSR-2 od Sigma). Po 18 hodinách bylo přidáno 0,25 pCi/jamku [³H]-thymidinu. O čtyři hodiny později byla inkubace ukončena odstraněním radioaktivního média, promytím buněk dvakrát 1 ml studeného fosfátem pufrovaného salinického roztoku a pak promytím 2krát studenou 5% kyselinou trichloroctovou. Kyselá nerozpustná frakce byla lyžována v 0,75 ml 0,25N NaOH a radioaktivita byla stanovena kapalinovým scintilačním počtem. Graficky byly stanoveny hodnoty IC₅o·

PDGF receptor autofosforylace

RASMC rostly do konfluence ve lOOmm miskách. Růstové médium bylo odstraněno a nahrazeno séra prostým médiem a buňky byly inkubovány při 37 °C po dalších 24 hodin. Testované sloučeniny byly pak přidány přímo do média a buňky inkubovány po další 2 hodiny. Po 2 hodinách byl přidáván PDGF-BB v konečné koncentraci 30 ng/ml po 5 minut při 37 °C pro stimulaci sutofosforylace PGF receptorů. Po zpracování s růstovým faktorem bylo médium odstraněno a buňky byly promyty studeným fosfátem pufrovaným salinickým roztokem a ihned lyžovány s 1 ml lýzového pufru (50 mM HEPES (pH 7,5), 150 mM NaCI, 10 % glycerolu, 1 % tritonu X100, 1 mM EDTA, 1 mM EGTA, 50 mM NaF, 1 mM orthovanadátu sodného, 30 mM p-nitro

-63CZ 288160 B6 fenylfosfátu, 10 mM pyrofosforečnanu sodného, 1 mM fenylmethylsulfonylfluoridu, 10pg/ml aprotininu a 10 pg/ml leupeptinu). Lyzáty byly odstřeďovány při 10 000 x g po 10 minut. Supernatanty byly inkubovány s 10 μΐ králičí anti-humánní PDGF typ AB receptor protilátky (1:1000) po 2 hodiny. Po inkubaci byly přidány kuličky protein-A-sepharosy po 2 hodiny za kontinuálního míchání a imunní komplexy navázané na kuličky promyty čtyřikrát s 1 ml lýzového promývacího pufru. Imunní komplexy byly solubilizovány ve 30 μΐ Laemml vzorkového pufru a elektroforezovány ve 4-20% SDS polyakrylamidových gelech. Po elektroforéze byly oddělené proteiny přeneseny na nitrocelulózu a imunoblottovány s anti-fosfotyrosinovým antisérem. Po inkubaci s [¹²⁵]I-proteinem-A byly koncentrace tyrosin fosfotylovaných proteinů detegovány fosfor zobrazovací analýzou a proteinové pásy kvantifikovány denzitometricky. IC50 hodnoty byly generovány z denzitometrických dat.

Zkouška transplantovaného tumoru

Některé ze sloučenin podle vynálezu (např. sloučeniny z příkladů 54 a 80) zvyšovaly dobu přežití u zvířat infikovaných transplantovanými tumory. Ve zkoušce byly použity F1 hybridní myši. Myš v den 0 dostala ascitickou kapalinu nebo ředění tumorových zlomů. Vzorek inokula se inkubuje ve thioglykolátovém médiu pro ověření kontaminace tumorovým materiálem. Po inokulaci všech testovaných zvířat tumory, se tato náhodně rozdělí pro test. Kontrolní zvířata dostávají vehikulum, zatímco ošetření zvířata dostávají sloučeninu podle vynálezu rozpuštěnou ve vehikulu, obecně infuzí do ocasního upevnění. Všechna zvířata se sledují denně na akutní toxicitu a jiné klinické znaky. Přežití se kontroluje denně v kontrolní i ošetřené skupině. Zkouška se obecně provádí 60 dnů a pak se přežívající zvířata usmrtí.

Následující tabulky I a II představují biologická data reprezentativních sloučenin podle vynálezu po analýze předchozích zkoušek.

Tabulka I

Inhibice protein tyrosin kináz (IC50 μΜ nebo % inhibice při 50 μΜ)

Příklad	PDGFr-TK	FGFr-TK	C-src TK	EGF-FL
7	42%	28%
8	48.0	48.0
9	35%	34%
10	21.2	3.0	0.225
12	4.87	1.32	0.262	5.6
13	2.56	6.20	0.29	88%
14	1.41	7.65	3.92	65%
15	5.18	5.79	4.22
16	5.45	6.49	3.1
17	16.5	56.7
19	16%	20%
20	27%	21.9
21	8.85	1.97	0.963	93%
22	13%	17%
23	16%	34%
24	13%	16%
26	11.3	19.8
28	0%	0%
29	32%	17.2
30	0.98	0.54	0.155	77%

-64CZ 288160 B6

Příklad	PDGFr-TK	FGFr-TK	C-src TK	EGF-FL
31	1.2	0.46	100%	100%
32	0.875	0.737	33%'	100%
33	1.84	0.426	0.89	95%
34	2.73	1.2	0.037	2.9
35	3.57	1.91	0.34	1.2
36	7.53	1.45	0.56
37	33%	29%	33%	42%
38	1.09	0.23	0.003	8.7
39	19%	5.5	26%	24%
40	3.22	1.45
41	16%	0%	12%	52%
42	4.49	0.8	0.588	82%
43	5.35	1.35	0.325	67%
44	2.09	0.88	1.57	64%
45	5.68	4.04	2.39	85%
46	17.6	18.1
47	5.98	1.26	36%	70%
48	17.9	19.6	2.54	64%
49	4.65	4.01	0.813	61%
50	7.31	4.17	3.24	59%
51	7.16	8.03	1.57	55%
52	5.36	3.61	1.05	46%
53	20%	45%	15%	0.85
54	0.231	0.84	0.024	0.078
55	1.8	2.20	0.059	0.308
56	1.68	3.01	0.070
57	0.44	0.646	0.050	0.089
58	0.071	0.159	0.023	0.119
59	0.853	0.201	0.12	0.21
60	9.38	6.52	1.64
61	26.5	8.6	64%
62	0.736	0.453	0.365	1.0
63	1.01	1.05	0.033	0.14
64	0.546	0.403	0.020	0.065
67	31%	27%
68	29%	12.5
69	0.593	0.214	0.079	0.12
70	0.475	0.109	0.070
71	1.14	3.46	6.0	0.54
72	0.259	0.365	0.052	0.033
73	1.3	0.45	0.037	0.16
74	0.76	0.277	0.079	0.13
75	0.353	0.141	0%	0.021
76	2.38	0.466	33%	0.3
77	1.11	0.124	0.019	0.094
78	1.69	0.143	46%	0.097
79	0.102	0.172	0.044	0.11
80	0.105	0.045	0.006	0.035
81	0.743	0.279	94%	4.5
82	0.14	0.122	0.004
83	1.18	0.333	0.019	0.059
84	0.39	0.25	0.023	0.63
85	0.37	0.56	0.013	1.32

-65CZ 288160 B6

Příklad PDGFr-TK FGFr-TK C-src TK EGF-FL

86	0.07	0.061	0.009	0.13
87	0.35	0.17	0.020	0.14
88	38.0	69.0	0.095
89	1.48	1.49	0.014
90	0.14	0.11	0.006	0.15
93	0.076	0.087	0.009	025
102	0.355	28%
103	0.15	1.06
104	0.373	58.0
106	1.23	0.415
107	43%	9.24	52%
108	5.05	1.19	0.158	87%
109	9.29	3.37	0.240	0.062
110	25%	20.3	17.19	64%
111	3.15	1.5	0.041	1.4
112	11.2	9.1	1.16	19%
113	1.76	0.97	87%	6.7
114	5.17	3.31	1.09	3.2
115	0.17	0.097
116	0.152	1.96	1.38	0.18
117	38.0	0.8
118	12%	29%	0%
120	1.83	2%	29%
121	44%	29.0
122	33.0	20.0
123	24%	26%
124	38%	15%	11%

Tabulka II

Buněčné zkoušky (IC₅₀ = μΜ)

Příklad inhibice PDGF-stimulované receptor autofosforylace v buňkách hladkých svalů krysí _________________aorty_______________________________________________________________________

129,4

540,016

550,06

580,013

0,026

Sloučeniny podle vynálezu byly také hodnoceny ve zkouškách, používajících buňky z různých adenokarcinomů lidského kolonu. Tři takové lidské buněčné linie byly identifikovány jako HCT8, SW-620 a HT-29. V typické zkoušce jsou buňky suspendovány v 0,3% měkkém agaru, obsahujícím sloučeninu podle vynálezu v různých koncentračních hladinách a jsou umístěny na plotnu do šestijamkových ploten, kde každá plotna obsahuje 1% agarový čep. Buněčné plotny se inkubují při 37 °C ve zvlhčeném oxidu uhličitém (5%) v inkubátoru obecně 2 týdny. Na konci inkubační periody jsou kolonie buněk detegovány vybarvením jamek s 1 mg/ml p-jodnitrotetrazoliové violeti. Buňky jsou spočteny na optickém čítači kolonií. Koncentrace testované sloučeniny vyžadovaná pro inhibici tvorby buněčných kolonií v koncentraci 50 % vzhledem ke kontrolním plotnám, neobsahujícím žádnou testovanou sloučeninu se zaznamenává jako IC₅o.

-66CZ 288160 B6

IC₅₀ pro některé sloučeniny podle vynálezu proti buňkám adenokarcinomu lidského kolonu jsou uvedeny v tabulce III.

Tabulka III

Inhibice adenokarcinomu lidského kolonu

ΙΟίο(μΜ)

Sloučenina z příkladu č.	HCT-8	SW-620	HT-29
38	3.15
54	0.52	0.14	0.49
55	0.11	0.12	0.43
56		1.1
57	0.25	0.52	0.74
58	0.17	0.13	0.38
63	1.0
69			1.11
70			3.5

Jak je uvedeno výše, jsou sloučeniny vzorce I vhodné pro léčení rakoviny a jiných proliferativních chorob jako je lupenka, restenóza a ateroskleróza.

Sloučeniny podle vynálezu jsou zvláště vhodné pro léčení restenózy po balónkové angioplastii okludovaných arterií. Restenóza se objevuje u asi 40 % jedinců, kteří bylo podrobeni angioplastii kalcifíkovaných arterií a je hlavním problémem spojeným s touto formou léčby pacientů postižených takovým srdečním stavem. Sloučeniny podle vynálezu demonstrují dobrou aktivitu, jsou-li hodnoceny ve standardních testech jak jsou popsány dále.

Balónková angioplastie krysích arterií carotida

Samci krys Sprague-Dawley (350 až 450 g) byli rozděleni na 2 ošetřované skupiny: 1 skupina krys (n= 10) je ošetřena léčivem (100 mg/kg PO, BID) a druhá skupina dostala vehikulum (2ml/kgPO, Bid (n=10)). Všechna zvířata byla předem ošetřena 2 dny před chirurgickým zákrokem a v dostávala denně po zákroku léčivo až do usmrcení.

Balónková poškození v krysích arteriích carotida byla provedena podle následujícího protokolu. Krysy byly anestetizovány Telazolem (0,1 ml 100 g IM) a arteria carotis odkryta řezem na krku. Artria carotis byla izolovány bifurkací vnitřních a vnějších arterií carotis. 2F embolektomický katetr byl vsunut do vnější arteria carotis a stlačoval běžnou carotidu na hladinu aortického oblouku. Balónek se napustí a katetr se zasune zpět do bodu vstupu a pak vypustí. Tento postup se dvakrát opakuje. Embolektomický katetr se pak odstraní a vnější artera carotis se liguje za ponechání netknutého toku vnitřní arteria carotis. Chirurgické řezy byly uzavřeny a zvíře bylo ponecháno probrat z anesteze před tím, než bylo navráceno do své klícky.

V různých časových bodech po zákroku byla zvířata usmrcena inhalací CO a arteria carotis byla perfuzně fixována a zpracována pro histologické hodnocení. Morfologické stanovení velikostí lézí bylo provedeno měřením plochy arteria carotis intima vyjádřené jako poměr média u jednotlivých zvířat. Až 16 řezů bylo připraveno z každého zvířete pro získání jednotné prezentace velikosti lézí po délce arteria carotis. Plochy průřezu krevních cév byly kvantifikovány za použití programu zobrazovací analýzy od Priceton Gamma Těch (Princeton, New Jersey).

-67CZ 288160 B6

Sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou být formulovány a podávány v mnoha různých orálních a parenterálních dávkových formách, zahrnujících transdermální a rektální podání. Odborníkům v oboru bude zřejmé, že následující dávkové formy mohou obsahovat jako účinnou složku buď sloučeninu vzorce I nebo odpovídající farmaceuticky přijatelnou sůl nebo solvát sloučeniny vzorce I.

Dalším provedením vynálezu je farmaceutický formulace, obsahující sloučeninu vzorce I spolu s jejím farmaceuticky přijatelným nosičem, ředidlem nebo přísadou. Pro přípravu farmaceutických kompozic se sloučeninami podle předloženého vynálezu mohou být farmaceuticky přijatelné nosiče buď pevné nebo kapalné. Pevná forma přípravků zahrnuje prášky, tablety, pilule, kapsle, sáčky, čípky a dispergovatelné granule. Pevným nosičem může být jedna nebo více složek, které mohou také působit jako ředidla, ochucovací činidla, pojivá, chránící látky, tabletová dezintegrační činidla nebo zapouzdřovací materiál.

V prášcích je nosič jemně rozdělená pevná látka jako talek nebo škrob, která je ve směsi s jemně rozdělenou účinnou složkou.

V tabletách je účinná složka smísena s nosičem, majícím nezbytné vazebné vlastnosti ve vhodných poměrech a zhutněna do požadovaného tvaru a velikosti.

Formulace podle předloženého vynálezu výhodně obsahují od asi 5 % do asi 70 % nebo více účinné sloučeniny. Vhodné nosiče zahrnují uhličitan hořečnatý, stearát hořečnatý, talek, cukr, laktózu, pektin, dextrin, škrob, želatinu, tragant, methylcelulózu, sodnou karboxymethylcelulózu, nízko tající vosk, kakaové máslo a podobně. Preferovaná forma pro orální použití jsou kapsle, které obsahují formulaci účinné sloučeniny se zapouzdřovacím materiálem jako je nosič, poskytující kapsli, ve které je účinná složka s nebo bez jiných nosičů, obklopena nosičem, kteiý je tak ve spojení s ní. Podobně jsou zde zahrnuty sáčky a lozengy. Tablety, prášky, kapsle, pilulky, sáčky a lozengy mohou být použity jako pevné dávkové formy vhodné pro orální podání.

Pro přípravu čípků se nízko tající vosk, jako je směs glyceridů mastných kyselin nebo kakaového másla, nejprve roztaví a účinná složka se homogenně disperguje v tavenině za míchání. Roztavená homogenní směs se pak nalije do běžně tvarovaných forem, ochladí se a tím ztuhne.

Kapalné formy přípravků zahrnují roztoky, suspenze a emulze, například vodné nebo vodnépropylenglykolové roztoky. Pro parenterální injekci mohou být kapalné přípravky formulovány do roztoku ve vodném polyethylenglykolovém roztoku, isotonickém salinickém roztoku, 5% vodné glukóze a podobně.

Vodné roztoky vhodné pro orální podání mohou být připraveny rozpuštěným účinné složky ve vodě a přídavkem vhodných barviv, příchutí, stabilizačních a zahušťovacích činidel jak je to žádoucí.

Vodné suspenze vhodné pro orální použití mohou být vyrobeny dispergováním jemně rozdělené účinné složky ve vodě s viskózním materiálem jako jsou přírodní nebo syntetické gumy, pryskyřice, methylcelulóza, sodná karboxymethylcelulóza a jiná dobře známá suspendační činidla.

Zahrnuty jsou zde rovněž pevné formy přípravků, které jsou zamýšleny pro převedení, krátce před použitím, na kapalné formy přípravků pro orální podání. Takové kapaliny zahrnují roztoky, suspenze a emulze. Tyto přípravky mohou obsahovat, navíc k účinné složce, barviva, příchutě, stabilizátoiy, pufry, umělá a přírodní sladidla, disperganty, zahušťovadla, solubilizační činidla a podobně. Vosky, polymery, mikročástice a podobně mohou být použity pro přípravu dávkových forem s udržovaným uvolňováním. Také mohou být použity osmotické pumpy pro doručování účinné sloučeniny jednotně po prodlouženou dobu.

-68CZ 288160 B6

Farmaceutické přípravky podle vynálezu jsou výhodně v jednotkové dávkové formě. V takové formě je přípravek porozdělen do jednotkových dávek, obsahujících vhodná množství účinné složky. Jednotková dávková forma může být balený přípravek, kde balení obsahuje oddělená množství přípravku jako jsou balené tablety, kapsle a prášky v lahvičkách nebo v ampulích. Také mohou být jednotkovou dávkovou formou kapsle, tableta, sáček nebo lozeng samotný, nebo jich může být odpovídající množství v balené formě.

Terapeuticky účinná dávka sloučeniny vzorce I bude obecně od asi 1 mg do asi 100 mg/kg tělesné hmotnosti na den. Typické dávky pro dospělé budou asi 50 až asi 800 mg na den. Množství účinné složky v jednotkovém dávkovém přípravku se může měnit nebo být upraveno od asi 0,1 mg do asi 500 mg, výhodně asi 0,5 mg až asi 100 mg podle konkrétního použití a potence účinné složky. Kompozice může, je-li to žádoucí, také obsahovat jiná kompatibilní terapeutická činidla. Subjektu v případě potřeby ošetření sloučeninou vzorce I bude podávána dávka asi 1 až asi 500 mg na den, buď jako jednotlivá nebo násobná dávka během 24 hodinové periody.

Příklad 125

Farmaceutická formulace ve formě tvrdých želatinových kapslí pro orální podání se připraví za použití následujících složek:

množství (mg/kapsle)

účinná sloučenina	250
škrobový prášek	200
stearát hořečnatý	10

celkem 460 mg

Výše uvedené složky se smísí a naplní se do tvrdých želatinových kapslí v množstvích 460 mg. Typickou účinnou složkou je 6-(2-methyl-l-naftyI)-7-imino-8-isopropyl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamin. Kompozice se podává 2 až 4krát denně pro léčení postchirurgické restenózy.

Příklad 126

Formulace pro orální suspenzi ___________________________Složka_____________________________________množství 2-(cyklopropylamino)-6-(2-brom-4-methoxy-5-ethylthiofenyl)- 500mg

8-n-hexylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on roztok sorbitolu (70% N.F.) 40ml benzoát sodný 150 mg sacharin 10mg třešňová příchuť 50mg destilovaná voda q.s. do 100ml

Roztok sorbitolu se přidá ke 40 ml destilované vody a v tomto se suspenduje pyridopyrimidin. Přidá se a rozpustí sacharin, benzoát sodný a příchuť. Objem se upraví na 100 ml destilovanou vodou. Každý mililitr sirupu obsahuje 5 mg účinné složky.

-69CZ 288160 B6

Příklad 127

Tablety, obsahující každá 60 mg účinné složky.

účinná složka60 mg škrob45 mg mikrokrystalická celulóza35 mg polyvinylpyrrolidon4 mg (jako 10% roztok ve vodě) sodný karboxymethylškrob 4,5mg stearát hořečnatý 0,5mg talek _________________________________________________________1,0mg celkem 150 mg

Účinné složky, škrob a celulóza se protlačí sítem č. 45 mesh U.S. a pečlivě se promísí. Roztok polyvinylpyrrolidonu se smísí se vzniklými prášky a pak se protlačí sítem č. 14 mesh U.S. Granule se suší při 50 °C až 60 °C a protlačí se sítem č. 18 mesh Ú.S. Potom se ke granulím přidá sodný karboxymethylškrob, stearát hořečnatý a talek, předem protlačené sítem č. 60 mesh U.S.. Granule se, po smísení slisují na tabletovacím zařízení na tablety o hmotnosti 150 mg každá.

Typickou účinnou složkou použitou ve výše uvedené přípravě je sloučenina z příkladu 12.

Příklad 128

Parenterální kompozice vhodná pro injekční podání se připraví rozpuštěním 100 mg 2-amino-6(2,6-díchlorfenyl)-7-thioxo-pyrido[2,3-d]pyrimidinu ve 250 ml 0,9% vodného roztoku chloridu sodného a úpravou pH roztoku na asi 7,0. Tato formulace je vhodná pro léčbu rakoviny prsu.

Příklad 129

Příprava čípků

Směs 500 mg 2-methylsulfanyl-6-(2,6-dichlorfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H}-onu a 1500 mg theobromového oleje se homogenně smísí při 60 °C. Směs se ochladí na 24 °C ve zúžených formách, každý čípek bude mít hmotnost asi 2 g a může být podáván 1 až 2krát denně pro léčbu bakteriálních infekcí.

Příklad 130

Topický přípravek

Složka množství (mg)

2-acetamido-6-(2-naftyl)-8-ethylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on	20
propylenglykol	100
bílá vazelína	500
cetearylalkohol	50
glycerylstearát	100
PEG 100 stearát	100
Ceteth-20	50
monobazický fosforečnan sodný	80
celkem	1000

-70CZ 288160 B6

Příklad 131

Přípravek s pomalým uvolňováním

Pětset miligramů 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[4-(2-diethylaminoethoxy)-fenylamino]-8-methoxy8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on-hydrochloridu se umístí do osmotické tabletové pumpy a podává se orálně pro léčbu a prevenci restenózy.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Pyrido[2,3-D]pyrimidiny obecného vzorce I (I) kde

X představuje skupinu vzorce NH, N-acyl, O nebo S, přičemž acyl představuje alkanoylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, která je popřípadě substituována skupinou NR₅R^, kde R₅a R$ mají dále uvedený význam, karboxyskupinou nebo heterocyklickou skupinou s 5 až 6 členy, z nichž 1 nebo 2 jsou heteroatomy zvolené z dusíku, substituovaného dusíku, kyslíku nebo síry, přičemž pod označením „substituovaný dusík“ se rozumí dusík nesoucí alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo skupinu (CH₂)_nPh, kde n a Ph mají dále uvedený význam, nebo acyl představuje fenylkarbonylskupinu nebo (substituovaný fenyl)karbonylskupinu, kde termín „substituovaný fenyl“ má dále uvedený význam;

Ri představuje skupinu vzorce NR3R4, SR₃, OR₃, SOR3 nebo SO2R3;

každý ze symbolů

R₂, R₃ a R4 nezávisle představuje atom vodíku, skupinu vzorce (CH₂)_nPh, kde Ph znamená fenylskupinu nebo substituovanou fenylskupinu a n je číslo 0, 1,2 nebo 3; cykloalkylskupinu se 3 až 6 atomy uhlíku, alkanoylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkenylskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku nebo alkinylskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku, přičemž tyto alkylskupiny, alkenylskupiny a alkinylskupiny jsou popřípadě substituovány skupinou NR₅R₆, fenylskupinou, substituovanou fenylskupinou, thioalkylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, alkoxyskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, hydroxyskupinou, karboxyskupinou, halogenem nebo cykloalkylskupinou se 3 až 6 atomy uhlíku, kde R_s a R$ každý nezávisle představuje vodík, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkenylskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku, alkinylskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku, skupinu (CH2)_nPh, kde Ph představuje fenylskupinu nebo substituovanou fenylskupinu a n znamená číslo 0, 1, 2 nebo 3; cykloalkylskupinu se 3 až 6 atomy uhlíku nebo R5 a brány dohromady s atomem dusíku, k němuž jsou připojeny, mohou tvořit kruh obsahující 3 až 7 atomů uhlíku a popřípadě obsahující další 1,2 nebo 3 heteroatomy zvolené z dusíku, kyslíku a síry; přičemž

-71CZ 288160 B6

Ri může kromě toho představovat též skupinu vzorce -C(=O)R3, -C(=O)OR3, -SO2R3, -SOzNRjR^, -C(=O)NR₅R₆, -€(=S)NR_sR6, -C(=NH)R₃ nebo -C(=NH)NR₅Ré; a

R3 a R4 brány dohromady s atomem dusíku, k němuž jsou připojeny, mohou navíc tvořit kruh obsahující 3 až 7 atomů uhlíku a popřípadě obsahující další 1,2 nebo 3 heteroatomy zvolené z dusíku, kyslíku a siry;

Ar představuje fenylskupinu nebo substituovanou fenylskupinu;

přičemž pod pojmem „substituovaná fenylskupina“ se rozumí fenylskupina substituovaná 1, 2 nebo 3 skupinami zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, alkylskupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, alkoxyskupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, merkaptoskupiny, alkylthioskupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, hydroxyskupiny, alkylkarbonylskupiny s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části, kyanoskupiny, nitroskupiny, trifluormethylskupiny, alkylkarbonyloxyskupiny s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části, aminoskupiny, alkylaminoskupiny s 1 až 6 atomy uhlíku a dialkylaminoskupiny s 1 až 6 atomy uhlíku v každé z alkylových částí;

a jejich farmaceuticky vhodné soli.
2. Pyrimidiny podle nároku 1 obecného vzorce Ia (Ia)» kde R₇ a Rg jsou nezávisle Ci-Ce alkyl a halogen a R_b R2 a X mají výše definovaný význam.
3. Pyrimidiny podle nároku 2, obecného vzorce Ia, kde R₂ je Ci-C₆ alkyl nebo substituovaný Ci-C₆ alkyl.
4. Pyrimidiny podle nároku 3, obecného vzorce Ia, kde Ri je NR3R4.
5. Pyrimidiny podle nároku 4, obecného vzorce Ia, kde R3 je vodík.
6. Pyrimidiny podle nároku 5, obecného vzorce Ia, kde R4 je vodík.
7. Pyrimidiny podle nároku 6, obecného vzorce Ia, kde X je NH.
8. Pyrimidin podle nároku 7, kteiým je

6-(2,6-dimethyl-fenyl)-7-imino-8-methyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamin;

6-(2-methyl-fenyl)-7-imino-8-methyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamin a

6-fenyl-7-imino-8-methyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamin.

-72CZ 288160 B6
9. Pyrimidiny podle nároku 2, obecného vzorce kde R₂ je Ci-C₆ alkyl, R₃ je vodík nebo C]-C₆ alkyl, R4 je Ci-C₆ alkyl nebo substituovaný Ci-C₆alkyl a R₇ a Rg jsou Ci-C₆ alkyl nebo halogen.
10. Pyrimidin podle nároku 9, kterým je 6-(2,6-dichIorfenyl)-8-methyl-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-on;

6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

6-(2,6-dichlorfenyl)-2-dimethylamino-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

6-(2,6-dichlorfenyl)-2-ethylamino-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(2-hydroxyethylamino)-8-methylpyrido[2,3-d]pyrÍmidin-7-on;

6-(2,6-dichlorfenyl)-2-isopropylamino-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

2-butylamino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

2-benzylamino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

6- (2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-(3-morfolin-4-ylpropylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-

7-on;

6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[2-(3,4-dimethoxyfenyl)-ethylamino]-8-methyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-on;

6- (2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-[(pyridin-2-ylmethyl)-amino]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-

7-on;

6- (2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-[(pyridin-3-ylmethyl)-amino]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-

7-on;

6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-(2-pyridin-2-yl-ethylamino)-8H-pyrido(2,3-d]pyrimidin-7on;

6-(2,6-dichlorfenyl)-2-{4-[4-(2-methoxyfenyl)-piperazin-l-yl]propylamino}-8-methyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)butylamino]-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-on;

terc.butylester kyseliny 6-(6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]-hexanové;

6-(6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]hexanová kyselina;

6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-2-[3-(4-methyl-piperazin-l-yl)propylamino]-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-on;

6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-[5-(4-methylpiperazin-l-yl)pentylamino]-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-on;

-73CZ 288160 B6 ethylester kyseliny 4-(4-(6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]-fenyl}-máselné a kyselina 4—{4—[6—(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydro-pyrido(2,3-d]pyrimidin-2ylamino]-fenyl}-máselná.
11. Pyrimidiny podle nároku 6, obecného vzorce Ia, kde X je O.
12. Pyrimidin podle nároku 11, kterým je ío 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on;

2-amino-6-fenyl-8-methyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on;

2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on;

2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl}-8-propyl-8H-pyrido(2,3-d]pyrimidin-7-on;

2-amino-8-buty 1-6-(2,6-dichlorfenyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

15 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-isobutyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-(3-dimethylaminopropyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-7-oxo-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-8-yl]-octová kyselina, methylester;

[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-7-oxo-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-8-yl]octová kyselina, terc.20 butylester;

[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-7-oxo-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-8-yl]-octová kyselina;

2-amino-8-benzy 1-6-(2,6-dichlorfenyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

2-amino-8-(3-brombenzyl)-6-(2,6-dichlorfenyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

4-[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl}-7-oxO“7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-8-ylmethyl]-benzoová

25 kyselina, methylester;

2-amino-8-(2,6-dichlorbenzyl)-6-(2,6-dichlorfenyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-(4-methoxybenzyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-pyridin-4-ylmethyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on a

2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-(3-fenylpropyl}-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on.
13. Pyrimidin podle nároku 11, kterým je

2-amino-6-(2,6-methylfenyl)-8-methyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on.

35
14. Pyrimidin podle nároku 11, kterým je

2-amino-6-(2-methylfenyl)-8-methyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on.
15. Pyrimidiny podle nároku 5, obecného vzorce Ia, kde R4 je C]-Ce alkyl substituovaný NR5R6.

40
16. Pyrimidiny podle nároku 15, obecného vzorce Ia, kde R5 a R^ jsou oba Ci-Ce alkyl.
17. Pyrimidiny podle nároku 16, obecného vzorce Ia, kde X je NH.
18. Pyrimidin podle nároku 17, kterým je

45 [6-(2,6-dichlorfenyl)-7-imino-8-methyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]-(3-diethylaminopropyl)-amin.
19. Pyrimidiny podle nároku 16, obecného vzorce Ia, kde X je O.

-74CZ 288160 B6
20. Pyrimidin podle nároku 19, kterým je [6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]-(3-diethylaminopropyl)-amin.
21. Pyrimidin podle nároku 19, kterým je N-[6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]acetamid.
22. Pyrimidiny podle nároku 6, obecného vzorce Ia, kde X je S.
23. Pyrimidin podle nároku 22, kterým je 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-thion.
24. Pyrimidiny podle nároku 4, obecného vzorce Ia, kde X je O.
25. Pyrimidin podle nároku 24, kterým je N-[6-(2,6-dichlorfenyl)-7-oxo-8-methyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]-kyselina jantarová.
26. Pyrimidin podle nároku 24, kterým je l-[6-(2,6-dichlorfenyl)-7-oxo-8-methyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]-pyrrolidin-2,5-dion.
27. Pyrimidiny podle nároku 3, obecného vzorce Ia, kde Ri je OR₃.
28. Pyrimidiny podle nároku 27, obecného vzorce Ia, kde X je NH.
29. Pyrimidin podle nároku 28, kterým je 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-hydroxy-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ylidenamin.
30. Pyrimidin podle nároku 28, kterým je 6-(2,6--dichlorfenyl)-2-(2-ethoxy-ethoxy)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ylidenamin.
31. Pyrimidiny podle nároku 27, obecného vzorce Ia, kde X je O.
32. Pyrimidin podle nároku 31, kterým je 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-hydroxy-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on.
33. Pyrimidin podle nároku 31, kterým je 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[2-(diethylamino)ethoxy]-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on.
34. Pyrimidiny podle nároku 3, obecného vzorce Ia, kde Ri je S(O)₀, i nebo 2-R3·
35. Pyrimidiny podle nároku 34, obecného vzorce Ia, kde X je NH nebo O.
36. Pyrimidin podle nároku 35, kterým je

6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ylidenamin; 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ylidenamin; 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfrnyl-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on; 6-(2,6-<lichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfonyl-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ona

6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-2-methansulfonyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on.

-75CZ 288160 B6
37. Pyrimidiny podle nároku 34, obecného vzorce la, kde Xje N-acyl.
38. Pyrimidin podle nároku 37, kterým je N-[6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yliden]acetamid a

N-[6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yliden]acetamid.
39. Pyrimidin podle nároku 3, kterým je N-[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(4-diethylaminobutylamino)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yliden]-acetamid.
40. Pyrimidiny podle nároku 1 obecného vzorce kde R₂ je Ci-C₆ alkyl nebo substituovaný C]-C₆ alkyl, Xje O nebo NH a Ar je fenyl, substituovaný fenyl, pyridyl nebo substituovaný pyridyl.
41. Pyrimidin podle nároku 40, kterým je

6- (2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

2-(3-bromfenylamino)-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

2-(4-chlorfenylamino)-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

2-(benzo[l,3]dioxol-5-ylamino)-6-(2,6-dichlorfenyl}-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-

7- on;

6-(2,6-dichlorfenyl}-8-methyl-2-(pyridin-4-ylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-p-tolylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(4-methoxyfenylamino)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on; 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(2-methoxyfenylamino)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-methoxyfenylamino)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(4-methoxy-3-methylfenylamino)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-2-(4-methoxyfenylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-2-(4-hydroxyfenylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(4-ethoxyfenylamino)-8-ethyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3,4-dimethoxyfenylamino)-8-ethyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

-76CZ 288160 B6

6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-2-(3,4,5-trimethoxyfenylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7on;

6-(2,6-dichlorfenyl}-8-methyl-2-(pyridin-3-ylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[4-(2-diethylaminoethoxy)-fenylamino]-8-methyl-8H-pyrido[2,3d]pyrimidin-7-on;

6- (2,6-dichlorfenyl)-2-(3-hydroxymethylfenylamino)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-

7- on;

6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3,5-dimethoxyfenylamino}-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7on;

{4-(6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7~oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]fenylj-octová kyselina, methylester;

6- (2,6-dichlorfenyl)-2-(6-methoxypyridin-3-ylamino)-8-methyl-8H-pyrido(2,3-d]pyrimidin-

7- on;

{4-(6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]fenyl }-octová kyselina;

6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-hydroxyfenylamino}-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

4-(6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]benzoová kyselina, ethylester;

3-(6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]benzoová kyselina, ethylester;

3-(6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]benzoová kyselina;

6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-2-(pyridin-4-ylamino)-8H-pyrido(2,3-d]pyrimidin-7-on;

(6-(2-brom-6-chlorfenyl)-8-ethyl-7-imino-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-8-yl)-fenylamin;

6-(2-brom-6-chlorfenyl)-8-ethyl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

(8-ethyl-7-imino-6-fenyl-7,8-dihydropyrido(2,3-d]pyrimidin-2-yl)-2-fenylamin;

8- ethyl-6-fenyl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

(6-(3,5-dimethylfenyl)-8-ethyl-7-imino-7,8-dihydropyrido(2,3-d]pyrimidin-2-yl)-2-fenylamin a

6-(3,5-dimethylfenyl)-8-ethyl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on.
42. Pyrimidiny podle nároku 1 obecného vzorce kde R₂ je C]-C₆ alkyl nebo substituovaný Ci-C₆ alkyl, X je NH nebo O a R4 je fenyl nebo substituovaný fenyl.

-77CZ 288160 B6
43. Pyrimidin podle nároku 42, kterým je

8-ethyl-2-fenylamino-6-thiofen-3-yl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on; (8-ethyl-7-imino-6-thiofen-2-yl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-fenylamin;

8-ethyl-2-fenylamino-6-thiofen-2-yl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on; (8-ethyl-7-imino-6-pyridin-4-yl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-2-fenylamin;

8-ethyl-2-fenylamino-6-pyridin-4-yl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on; (8-ethyl-7-imino-6-naftalen-2-yl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl>-fenylamin;

8-ethyl-6-naftalen~2-yl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on; (6-bifenyl-4-yl-8-ethyl-7-imino-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-fenylamin a 6-bifenyl-4-yl-8-ethyl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on.
44. Pyrimidiny podle nároku 1, obecného vzorce I, kde R₃ je vodík a RJe cykloalkyl.
45. Pyrimidin podle nároku 44, kterým je

2-cyklohexylamino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on.
46. Farmaceutická kompozice, vyznačující se tím, že obsahuje pyrimidin podle nároku 1 spolu s jeho farmaceuticky přijatelným nosičem.
47. Kompozice podle nároku 46, vyznačující se tím, že obsahuje pyrimidin podle nároku 1 obecného vzorce I, kde Ar je fenyl nebo substituovaný fenyl.
48. Kompozice podle nároku47, vyznačující se tím, že obsahuje pyrimidin podle nároku 1 obecného vzorce I, kde X je NH nebo N-acyl.
49. Kompozice podle nároku 47, vyznačující se tím, že obsahuje pyrimidin podle nároku 1 obecného vzorce I, kde X je O.
50. Kompozice podle nároku 47, vyznačující se tím, že obsahuje pyrimidin podle nároku 1 obecného vzorce I, kde X je S.
51. Pyrimidiny obecného vzorce I podle nároku 1 pro použití jako léčiva pro léčení chorob zprostředkovaných buněčnou proliferací.
52 Pyrimidiny obecného vzorce I podle nároku 1 pro použití jako léčiva pro léčení rakoviny.
53. Pyrimidiny obecného vzorce I podle nároku 1 pro použití jako léčiva pro léčení ateroskierózy.
54. Pyrimidiny obecného vzorce I podle nároku 1 pro použití jako léčiva pro léčení psoriasis.
55. Pyrimidiny obecného vzorce I podle nároku 1 pro použití jako léčiva pro léčení restenózy.