CZ20160U1 - Individuální imunoterapeutická protinádorová vakcína - Google Patents
Individuální imunoterapeutická protinádorová vakcína Download PDFInfo
- Publication number
- CZ20160U1 CZ20160U1 CZ200921387U CZ200921387U CZ20160U1 CZ 20160 U1 CZ20160 U1 CZ 20160U1 CZ 200921387 U CZ200921387 U CZ 200921387U CZ 200921387 U CZ200921387 U CZ 200921387U CZ 20160 U1 CZ20160 U1 CZ 20160U1
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- cells
- tumor
- vaccine
- atcc
- individual
- Prior art date
Links
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims description 17
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 title claims description 7
- 230000001024 immunotherapeutic effect Effects 0.000 title description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 20
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 claims description 14
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 10
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 claims description 9
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 claims description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 3
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 claims description 3
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 13
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 5
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 4
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 3
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 3
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 3
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 3
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 3
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 102100035703 Prostatic acid phosphatase Human genes 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 2
- 238000002619 cancer immunotherapy Methods 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 108010043671 prostatic acid phosphatase Proteins 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 102000020897 Formins Human genes 0.000 description 1
- 108091022623 Formins Proteins 0.000 description 1
- 102000004457 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 1
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 239000012997 ficoll-paque Substances 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000012595 freezing medium Substances 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000006882 induction of apoptosis Effects 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000037841 lung tumor Diseases 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 229940115272 polyinosinic:polycytidylic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 201000001514 prostate carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000009738 saturating Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Description
Individuální imunoterapeutická protinádorová vakcína
Oblast techniky
Technické řešení se týká autologní individuální protinádorové vakcíny vyráběné z krevních buněk pacienta jednotlivě pro každého pacienta. Buňky jsou in vitro modifikovány s použitím anti5 genů nádorových buněk a podány zpět pacientovi jako vakcína.
Dosavadní stav techniky
Přípravky založené na dendritických buňkách, které se upraví kultivací s nádorovými antigeny, jsou slibnými prostředky pro imunoterapii některých typů nádorů. Tak se například připravují maturované autologní antigen prezentující buňky kokultivací s rekombinantním fuzním protei10 nem obsahujícím prostatickou kyselou fosfatázu (prostatic acid phosphatase; PAP) a používají se pro imunoterapii rakoviny prostaty. Podobné přípravky byly navrženy pro terapii melanomu, nemalobuněčného plicního nádoru nebo kolorektálního karcinomu.
Oproti výše uvedeným přípravkům obsahujícím rekombinantní proteiny lze polyklonální imunitní reakci proti nádoru vyvolat použitím nádorových buněk izolovaných přímo z pacienta. Vakcí15 na pro léčbu ovariálního karcinomu na bázi dendritických buněk upravených pomocí nádorových buněk získaných z ascítické tekutiny příslušných pacientek je popsána v Zuzana Tobiášova et al., In vitro assessment of dendritic cells pulsed with apoptotic tumor cells as a vaccine for ovarian cancer patiens, Clinical Immunology (2006).
Podstata technického řešení
Protože odebírání nádorových buněk pacientovi může být obtížné a pro pacienta nepohodlné, bylo by výhodné mít k dispozici vakcínu umožňující jednodušší přípravu. Nyní se podařilo vyvinout autologní individuální protinádorovou vakcínu, která jako účinnou složku obsahuje maturované živé dendritické buňky, pocházející od jednotlivého pacienta a upravené pomocí usmrcených buněk z nádorových buněčných linií.
Podstatou technického řešení je autologní individuální protinádorová vakcína, která jako účinnou složku obsahuje živé dendritické buňky pocházející od jednotlivého pacienta, které obsahují pohlcené apoptotické buňky nádorové linie ajsou posléze maturovány saturačním činidlem stimulujícím Toll-Iike receptor 3.
V provedení pro imunoterapii ovariálního karcinomu obsahuje vakcína apoptotické buňky nádo30 rové linie OV-90 (ATCC # CRL-11732) nebo SK-OV-3 (ATCC # HTB-77). V provedení pro imunoterapii karcinomu prostaty obsahuje vakcína apoptotické buňky nádorové linie LNCaP (ATCC # CRL-1740) nebo DU 145 (ATCC # HTB-81).
Vakcína je vyrobena z živých in vitro připravených dendritických buněk, které in vitro pohlcují apoptotické nádorové buňky z buněčných linií a poté jsou pomocí maturačního agens aktivová35 ny. Takto připravené dendritické buňky mají schopnost v těle pacienta prezentovat nádorové antigeny v lymfatických uzlinách a aktivují antigen specifické T lymfocyty; výsledkem je klonální expanze nádorově specifických T lymfocytů. Nádorově specifické lymfocyty mohou přímo zabíjet nádorové buňky, a tak projevovat cytotoxickou aktivitu, nebo produkují cytokiny (např. INF gamma), které zprostředkují další protinádorové mechanismy. Rovněž jsou aktivovány B lymfocyty a dochází k produkci specifických protilátek.
Použití standardní buněčné nádorové linie, například komerčně dostupné, umožňuje jednodušší přípravu vakcíny a je výhodnější z hlediska dodržování standardního operačního postupu včetně kontroly kvality.
-1 CZ 20160 Ul
Příklady provedení
Nádorové buňky buněčné linie OV-90 a SK-OV-3 (ovariální karcinom) a LNCaP a DU 145 (karcinom prostaty) jsou rozmraženy z alikvotu buněčných bank a namnoženy do potřebného množství (minimálně 50 milionů buněk). Příprava nádorových buněk je započata 1 den před plánova5 ným zpracováním leukafretického produktu (den 0). V den 6 jsou buňky připraveny na indukci apoptózy.
Z leukaferetického produktu jsou izolovány mononukleámí buňky pomocí gradientové centrifugace na densitním médiu Ficoll Paque. Získané populace jsou pomocí sledu promývacích kroků očištěny od krevních destiček. Finální suspenze buněk obsahuje cca 30 % monocytů a 70 % lym10 focytů.
Ze směsné populace mononukleámích buněk jsou izolovány monocyty, které selektivně adherují na plastový povrch kultivační lahvičky. Tento separační krok trvá 2 hodiny. Poté je povrch lahvičky promyt proudem PBS a k adherujícím monocytům je přidáno kultivační médium s cytokiny potřebnými pro diferenciaci do dendritických buněk (IL-4, GM-CSF). Po třech dnech kultivace is jsou přidány Čerstvé cytokiny. Po dalších třech dnech kultivace se z monocytů stanou nezralé dendritické buňky, které plavou v médiu, a je proveden jejich sběr.
Den před sběrem nezralých dendritických buněk je u nádorových buněk UVB ozářením navozena apoptóza. Nezralé dendritické buňky jsou pulsovány, tj. 4 až 8 h kultivovány v přítomnosti apoptotických nádorových buněk. Ty jsou dendritickými buňkami pohlcovány. Poté jsou dendri20 tické buňky maturovány přidáním maturačního agens Poly(I:C) po dobu 12 až 2 h je proveden sběr pulsovaných maturovaných dendritických buněk. V této fázi je šarže vakcíny hotová, buňky jsou převedeny do zamražovacího média a rozděleny do alikvotu. Tyto jsou zamraženy a na několika alikvotech jsou provedeny testy kontroly kvality - testy sterility a fenotypu DC.
Průběh výroby vakcíny se monitoruje na základě kontroly kvality meziproduktů. Pro propuštění šarže je relevantní procento apoptotických a mrtvých nádorových buněk po indukci apoptózy a dále kontrola kvality konečného produktu.
Šarže je propuštěna, pokud je výtěžek vyšší než minimální požadovaný počet buněk: Minimální počet maturovaných pulsovaných buněk postačující pro aplikaci min. 5 vakcín a provedení kontroly kvality je 70 milionů.
Claims (3)
- 30 NÁROKY NA OCHRANU1. Autologní individuální protinádorová vakcína, vyznačující se tím, že jako účinnou složku obsahuje živé dendritické buňky pocházející od jednotlivého pacienta, které obsahují pohlcené apoptotické buňky nádorové linie a jsou maturovány.
- 2. Vakcína podle nároku 1 pro imunoterapii ovariálního karcinomu, vyznačující se 35 t í m, že obsahuje apoptotické buňky buněčné linie OV-90 (ATCC # CRL-11732) a/nebo SKOV-3 (ATCC # HTB-77).
- 3. Vakcína podle nároku 1 pro imunoterapii karcinomu prostaty, vyznačující se tím, že obsahuje apoptotické buňky buněčné linie LNCaP (ATCC # CRL-1740) a/nebo DU 145 (ATCC # HTB-81).
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ200921387U CZ20160U1 (cs) | 2009-06-29 | 2009-06-29 | Individuální imunoterapeutická protinádorová vakcína |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ200921387U CZ20160U1 (cs) | 2009-06-29 | 2009-06-29 | Individuální imunoterapeutická protinádorová vakcína |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ20160U1 true CZ20160U1 (cs) | 2009-10-26 |
Family
ID=41254481
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ200921387U CZ20160U1 (cs) | 2009-06-29 | 2009-06-29 | Individuální imunoterapeutická protinádorová vakcína |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CZ (1) | CZ20160U1 (cs) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2020003009A1 (en) | 2018-06-26 | 2020-01-02 | Cellpeutics Sp. Z O.O. | An autologous vaccine and a preparation method of the vaccine and monitoring of the cancer patient during and after vaccination |
-
2009
- 2009-06-29 CZ CZ200921387U patent/CZ20160U1/cs not_active IP Right Cessation
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2020003009A1 (en) | 2018-06-26 | 2020-01-02 | Cellpeutics Sp. Z O.O. | An autologous vaccine and a preparation method of the vaccine and monitoring of the cancer patient during and after vaccination |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20230000919A1 (en) | Activation of marrow infiltrating lymphocytes in hypoxic alternating with normoxic conditions | |
| KR101644984B1 (ko) | 자연살해세포의 제조방법, 이러한 방법에 의해 제조된 자연살해세포 및 이를 포함하는 종양 및 감염성 질환 치료용 조성물 | |
| CN103756964B (zh) | 一种高效扩增cd3-cd56+的自然杀伤细胞培养系统的方法 | |
| JP2021533798A (ja) | エクソソームに基づく抗腫瘍ワクチン | |
| CN108379569B (zh) | 高效荷载肿瘤抗原的dc疫苗及其诱导扩增肿瘤抗原特异性ctl的方法 | |
| US20120100180A1 (en) | Methods for proliferation of antigen-specific t cells | |
| EP2222331A2 (en) | An ex vivo, fast and efficient process to obtain activated antigen-presenting cells that are useful for therapies against cancer and immune system-related diseases | |
| CN112662625B (zh) | 一种t细胞培养基及其用于t细胞的扩增培养方法 | |
| CZ20160U1 (cs) | Individuální imunoterapeutická protinádorová vakcína | |
| US8691568B2 (en) | Method for preparing cell populations with anti-tumor immune response activity | |
| CN102596209A (zh) | 含有短暂性存活ctl的医药品组合物 | |
| Klier et al. | Generation of highly pure fusions of colorectal carcinoma and antigen-presenting cells | |
| HK40064965A (en) | Activation of marrow infiltrating lymphocytes in hypoxic alternating with normoxic conditions | |
| HK1240616A1 (en) | Activation of marrow infiltrating lymphocytes in hypoxic alternating with normoxic conditions | |
| CN105219716A (zh) | 一种用于激活头颈部癌特异性免疫反应的试剂盒 | |
| HK1240085B (en) | Activation of marrow infiltrating lymphocytes in hypoxic alternating with normoxic conditions | |
| HK1240085A1 (en) | Activation of marrow infiltrating lymphocytes in hypoxic alternating with normoxic conditions |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FG1K | Utility model registered |
Effective date: 20091026 |
|
| ND1K | First or second extension of term of utility model |
Effective date: 20130530 |
|
| ND1K | First or second extension of term of utility model |
Effective date: 20160609 |
|
| MK1K | Utility model expired |
Effective date: 20190629 |