CN1358188A

CN1358188A - 4″－取代的－9－脱氧－9a－氮杂－9a－高红霉素衍生物二磷酸盐和其药物组合物

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Publication number: CN1358188A
Application number: CN00809635A
Authority: CN
Inventors: R·J·拉夫卡; C·B·拉甘; D·J·M·艾伦
Original assignee: Pfizer Products Inc
Current assignee: Pfizer Products Inc
Priority date: 1999-06-30
Filing date: 2000-06-13
Publication date: 2002-07-10
Also published as: GT200000105A; HRP20010919A2; ATE286906T1; HUP0201693A2; CN101220067A; SK286243B6; BG65587B1; NO20016221D0; HRP20010919B1; HUP0201693A3; UY26221A1; JP2003503506A; KR20020016875A; CZ20014571A3; US20040209826A1; US20030092642A1; US7297682B2; HN2000000090A; EA004235B1; NO20016221L

Abstract

本发明涉及在哺乳动物中用作抗菌和抗原生动物剂的一种新型的(2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)－13－[[2,6－双脱氧－3－C－甲基－3－O－甲基－4－C－[(丙基氨基)甲基]－α－L－核－吡喃己糖基]氧]－2－乙基－3,4,10－三羟基－3,5,8,10,12,14－六甲基－11－[[3,4,6－三脱氧－3－二甲氨基)－β－D－木－吡喃己糖基]氧]－1－氧杂－6－氮杂环十五烷－15－酮的二磷酸盐结晶。本发明也涉及含有这种二磷酸盐游离碱的药物组合物和通过给予需要治疗的哺乳动物二磷酸盐游离碱治疗哺乳动物细菌和原生动物感染的方法。当肠胃外给予哺乳动物时,本发明的二磷酸盐游离碱具有抗各种细菌和原生动物感染的有效活性。

Description

4″-取代的-9-脱氧-9A-氮杂-9A-高红霉素衍生物二磷酸盐和其药物组合物

本发明涉及在哺乳动物中用作抗菌和抗原生动物剂的一种新型的(2R，3S，4R，5R，8R，10R，11R，12S，13S，14R)-13-[[2，6-双脱氧-3-C-甲基-3-O-甲基-4-C-[(丙基氨基)甲基]-α-L-核-吡喃已糖基(hexopryanosyl)]氧]-2-乙基-3，4，10-三羟基-3，5，8，10，12，14-六甲基-11-[[3，4，6-三脱氧-3-二甲氨基)-β-D-木-吡喃已糖基]氧]-1-氧杂-6-氮杂环十五烷-15-酮的二磷酸盐结晶(下文称为二磷酸盐)。本发明也涉及含有这种二磷酸盐游离碱的药物组合物和通过给予需要治疗的哺乳动物这种二磷酸盐游离碱治疗哺乳动物细菌和原生动物感染的方法。当肠胃外给予哺乳动物时，本发明的二磷酸盐游离碱具有抗各种细菌和原生动物感染的有效活性。

已知大环内酯抗生素用于治疗哺乳动物、鱼和鸟中广谱的细菌和原生动物感染。这样的抗生素包括红霉素A的各种衍生物，例如阿齐霉素，该物质是商业可得的并且在美国专利4,474,768和4,517,359中有描述，这两篇文献本文全部引做参考。

发明概述

本发明涉及(2R，3S，4R，5R，8R，10R，11R，12S，13S，14R)-13-[[2，6-双脱氧-3-C-甲基-3-O-甲基-4-C-[(丙基氨基)甲基]-α-L-核-吡喃已糖基]氧]-2-乙基-3，4，10-三羟基-3，5，8，10，12，14-六甲基-11-[[3，4，6-三脱氧-3-二甲氨基)-β-D-木-吡喃已糖基]氧]-1-氧杂-6-氮杂环十五烷-15-酮的二磷酸盐结晶(下文称为二磷酸盐)的两种多晶型物，显示如下：

其中n是0至8

在本发明的一项实施方案中，这种二磷酸盐是具有条板状结晶形态并显示纵向解理但是并无侧向解理的液晶。X-射线衍射显示很少或无序。

在另一项实施方案中，二磷酸盐是结晶。这种二磷酸盐的显微镜检查显示板状或棱晶结晶形态，它们都是高度双折射的。这种二磷酸盐是晶序良好的晶体，特征在于以下的X-射线衍射图案：

峰序号	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10
峰序号	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	d间隔	16.2	12.4	10.8	9.0	6.9	6.5	6.2	5.4	5.1	4.9

这种结晶二磷酸盐在87％的相对湿度时逐渐地吸收水至大约13％，在大约90％的相对湿度时发生迅速吸收至大约48％的水分。对这种二磷酸盐的热解重量分析揭示在约75℃失去三份水，第四份水在约120℃失去，第五份水在约170℃失去，最后的三份水在约200℃失去。稳定晶格必需的最大数目的水分子显示是大约八个。在空气中于约70℃干燥二磷酸盐，或者真空于45℃干燥，除去水剩下假同晶。这种结晶二磷酸盐的水溶解度是大约280mg/mL。

一种制备这种二磷酸盐的方法，包括室温下在无水乙醇中磁性搅拌溶解这种无水游离碱，在大约2至5分钟之内添加磷酸无水乙醇溶液，以产生沉淀，接着在少量水中部分溶解所得的固体。室温下搅拌几小时产生晶状产物，它通过过滤收集，然后以一些少量的大约10/1(v/v)的乙醇-水洗涤。在这种二磷酸盐合成之后，通过包括在水中溶解、添加二氯甲烷、增加pH至约8.5至10、收集和浓缩有机相以及从烃类溶剂结晶非晶形游离碱的方法，它再转变成可药用游离碱。

在哺乳动物中具有抗菌和抗原生动物活性的药物组合物包括细菌和原生动物疾病的治疗中有效量的这种二磷酸盐游离碱和可药用载体。一种治疗细菌和原生动物感染的方法包括给予需要这种治疗的哺乳动物抗菌量的这种二磷酸盐游离碱。抗菌量的游离碱对哺乳动物肠胃外给药。

发明详细描述

本发明涉及(2R，3S，4R，5R，8R，10R，11R，12S，13S，14R)-13-[[2，6-双脱氧-3-C-甲基-3-O-甲基-4-C-[(丙基氨基)甲基]-α-L-核-吡喃已糖基]氧]-2-乙基-3，4，10-三羟基-3，5，8，10，12，14-六甲基-11-[[3，4，6-三脱氧-3-二甲氨基)-β-D-木-吡喃已糖基]氧]-1-氧杂-6-氮杂环十五烷-15-酮的二磷酸盐结晶的两种多晶型物，显示如下：

其中n是0至8

在另一项实施方案中，二磷酸盐是吸湿性盐结晶。这种二磷酸盐的显微镜检查显示板状或棱晶结晶形态，它们都是高度双折射的。这种二磷酸盐是晶序良好的晶体，特征在于以下的X-射线衍射图案：

本发明也涉及制备这种液晶和结晶二磷酸盐以及结晶二磷酸盐游离碱的药物组合物的方法，如以下方案1所示：

方案1

其中n是0-8

这种结晶二磷酸盐的差示扫描量热法在大约119℃显示单一的现象(single event)，这与失水以及在释放的水中盐的溶解一致。该现象之后无结晶。

在VTI于20-25℃干燥显示重量丢失10％；干燥过的盐在85％RH(相对湿度)下逐渐地吸收水分至15％，接着在90％RH下迅速吸收水分至大约48％。在90％RH下，该化合物潮解。

也可以通过热解重量分析(TGA)研究这种二磷酸盐。样品在87％RH再水合时[Karl Fisher(KF)滴定法测得13％水分]，注意到四个显著的突跃。大约75℃损失3份水；大约120℃损失4份水，大约170℃损失5份水，并且大约200℃损失8份水。稳定晶格必需的最大数目的水分子显示是大约八个。水合物中水含量的减小并未引起X-射线衍射数据的变化，表明水合物的假同晶的形成。

晶格内水分的流动性直接与这种二磷酸盐接触到的环境的相对湿度有关。例如，在大约87％相对湿度下，化合物含有大约13％的水；在60％相对湿度下，化合物含有大约8％的水；并且在40％相对湿度下，这种二磷酸盐含有大约5％的水(所有通过KF计算)。

在空气中70℃或者真空下45℃干燥除去所有水分剩下假同晶。该盐在大约87％相对湿度下再水合，产生八水合物形式。

下列实施例介绍本发明的方法和化合物。可以理解，本发明并不局限于这些特定的实施例。

实施例1

这种二磷酸盐的液晶

(2R，3S，4R，5R，8R，10R，11R，12S，13S，14R)-13-[[2，6-双脱氧-3-C-甲基-3-O-甲基-4-C-[(丙基氨基)甲基]-α-L-核-吡喃已糖基]氧]-2-乙基-3，4，10-三羟基-3，5，8，10，12，14-六甲基-11-[[3，4，6-三脱氧-3-二甲氨基)-β-D-木-吡喃已糖基]氧]-1-氧杂-6-氮杂环十五烷-15-酮(7.5g，97％，9.0mmol)室温下溶解在无水乙醇(190mL)中。然后加入15mL一份的磷酸无水乙醇溶液(7.15g市售的H₃PO₄稀释至100mL，9.3mmol，1.03当量)。立即形成白色沉淀。在悬浮液于室温下搅拌1小时后加入水(10mL)。混合物接着搅拌6天，之后固体以布氏漏斗收集并用少量的无水乙醇洗涤两次。室温高真空下干燥潮湿的滤饼。所得的固体在交叉偏振光下显示双折射，但是不显示X-射线衍射图案。

对这种液晶的KF分析表明它们含水5.5％。元素分析计算和实际值如下所示：

计算％观测％

C 46.44 48.15

H 8.69 9.22

N 3.96 4.11

P 5.84 5.83

亦进行HPLC效能测定。含水5.5％的预期效能的二磷酸盐是76.4％；观测值是76.9％。

空气干燥的随后份仅仅亦显示无X-射线图案。少量的液晶放入试管并溶解(加温)在1-丙醇(含少量水)，然后放在盖子外边缓慢蒸发。此试验获得的固体用作实施例2的晶种。

实施例2

结晶磷酸八水合物盐

在无水乙醇(180mL)中，室温下磁性搅拌溶解这种游离碱(10g，98.8％，12.3mmol)。大约3分钟之内加入磷酸无水乙醇溶液[18mL，11.2mmol，0.9当量(7.15g H₃PO₄稀释至100mL)]，它引起白色、粘性沉淀的生成。加入水(10mL)，混合物室温搅拌过夜。以布氏漏斗收集晶状产物，以三小份的10/1(v/v)乙醇-水洗涤该固体。回收的、空气干燥的固体重量为2.09g。该固体的X-射线分析表明液晶形式的存在。500mg的液晶样品溶解(加温)在2mL的10∶1(v/v)乙醇-水中。所得的溶液冷却至室温，并且以小规模试验、含湿1-丙醇的固体结晶。混合物室温下搅拌过夜。布氏漏斗收集所得的固体并以少量的10∶1(v/v)乙醇-水洗涤，空气干燥重量为370mg。X-射线分析表明这种物质晶序良好并显示如下所示的轮廓分明的粉末图案：

这种二磷酸盐的液晶和结晶都是吸湿的。当在亲水性溶剂进行尝试时，向非晶形浆料加入4％至5％(v/v)的水引起该化合物结晶为八水合物。乙醇/水中的结晶表明可能形成亚稳态的乙醇溶剂合物。

实施例3

纯化结晶二磷酸盐八水合物

1.18g的非晶形二磷酸盐八水合物结合18.5mL的无水乙醇和1.05mL的水。混合物加热回流15分钟以产生混浊的溶液。停止加热并且搅拌过的混合物冷却至室温以促进结晶。2小时的粒化之后，冷却产品、过滤并且室温下空气干燥以产生纯二磷酸八水合物盐。

实施例4

(2R，33，4R，5R，8R，10R，11R，12S，13S，14R)-13-[[2，6-双脱氧-3-C-甲基-3-O-甲基-4-C-[(丙基氨基)甲基]-α-L-核-吡喃已糖基]氧]-2-乙基-3，4，10-三羟基-3，5，8，10，12，14-六甲基-11-[[3，4，6-三脱氧-3-二甲氨基)-β-D-木-吡喃已糖基]氧]-1-氧杂-6-氮杂环十五烷-15-酮

这种二磷酸盐(225g)分布在水(1200mL)和二氯甲烷(500mL)之间。水相的pH通过加入固体碳酸钾从5.9升高至8.6。收集有机相，经无水硫酸钠干燥并浓缩成干燥、非晶形泡沫(170g)。

实施例5

这种非晶形的游离碱(170g)从庚烷(700mL)结晶，以产生干净、结晶游离碱(115g)，然后它被配制成适于家畜肠胃外用途的部分水溶剂。

以上的方法和所得的二磷酸盐具有有价值的和非显著的性能。这种二磷酸盐的形成允许在所得的母液中清除大量的杂质。再转变至游离碱时，这样产生在部分含水介质制剂中形成极低水平的混浊的药物。这产生适用肠胃外用途的药学上优良的溶液。

活性化合物通过以前介绍的途径，可以单独或结合可药用载体或稀释剂给药，并且这样的给药可以一次或多剂量进行。更具体地，这种活性化合物可以以广泛种类的各种剂型给药，即它们可以结合各种可药用惰性载体以片剂、胶囊、锭剂、含片、硬糖、粉剂、喷雾剂、霜剂、药膏、栓剂、冻胶、凝胶、糊剂、洗剂、软膏、水悬浮液、注射液、酏剂、糖浆剂等等形式给药。这样的载体包括固体稀释剂或填充剂、无菌含水介质和各种无毒有机溶剂，等等。此外，口服药物组合物可以适当地增甜和/或增香。一般，这些剂型中的活性化合物的含量以重量计是大约5.0％至大约70％。

对于肠胃外给药，可以采用活性组合物的油、部分含水载体或含水载体的溶液。油可以选自可药用油；例如可以采用芝麻或花生油。部分含水载体的非水成分可选自可药用成分；例如，可以采用丙二醇或聚乙二醇。如果需要，含水溶液应当适当的缓冲(pH优选小于8)。含水和部分含水溶剂适于静脉注射目的。含水、部分含水和油溶液适合于关节内、肌肉内的和皮下注射目的。通过标准的为本领域熟练技术人员已知的制药技术可轻易地完成所有这些溶液的在无菌条件下的制备。

Claims

1.本发明涉及到(2R，3S，4R，5R，8R，10R，11R，12S，13S，14R)-1 3-[[2，6-双脱氧-3-C-甲基-3-O-甲基-4-C-[(丙基氨基)甲基]-α-L-核-吡喃已糖基]氧]-2-乙基-3，4，10-三羟基-3，5，8，10，12，14-六甲基-11-[[3，4，6-三脱氧-3-二甲氨基)-β-D-木-吡喃已糖基]氧]-1-氧杂-6-氮杂环十五烷-15-酮的二磷酸盐的两种多晶型物，它具有以下化学式：

其中n是0至8，多晶型物选自以下组成的组：

a.液晶的近晶结晶内消旋相；和

b.显示X-射线粉末衍射图案的二磷酸盐结晶峰序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 d间隔 16.2 12.4 10.8 9.0 6.9 6.5 6.2 5.4 5.1 4.9

2.按照权利要求1的二磷酸盐液晶，具有条板状结晶形态并显示纵向解理。

3.按照权利要求2的二磷酸盐液晶，在大约87％的相对湿度增重大约15％重量，结果失去双折射。

4.按照权利要求2的二磷酸盐，其中液晶具有大约5至6％的水。

5.按照权利要求1的二磷酸盐，其中该盐具有大约48％的C、大约9％的H、大约4％的N、大约6％的P和大约5.5％的H₂O。

6.按照权利要求1的二磷酸盐多晶形物，具有晶序良好的结晶板状或棱晶结晶形状。

7.按照权利要求6的二磷酸盐，其中板状或棱晶结晶形状是高度双折射的。

8.按照权利要求1的二磷酸盐结晶，其中该化合物在大约87％的相对湿度逐渐地吸收大约13％的水。

9.按照权利要求8的二磷酸盐，其中在大约90％的相对湿度迅速吸收至大约48％的水分。

10.按照权利要求9的二磷酸盐，其中在大约90％的相对湿度这种二磷酸盐变得潮解。

11.按照权利要求1的二磷酸盐，其中热解重量分析揭示在约75℃失去三份水，第四份水在约120℃失去，第五份水在约170℃失去，最后的三份水在约200℃失去。

12.按照权利要求1的二磷酸盐，其中稳定晶格必需的最大数目的水分子是八个。

13.按照权利要求1的二磷酸盐，其中在空气中于大约70℃或者真空于45℃干燥除去水分，剩下假同晶。

14.按照权利要求1的二磷酸盐，其中水溶解度是大约280mg/mL。

15.一种制备二磷酸盐的方法，包括室温下在无水乙醇中磁性搅拌溶解游离碱；在大约2至3分钟之内加入磷酸无水乙醇溶液；在水中溶解所得的固体；室温收集结晶产物；以一些少量的大约10/1(v/v)乙醇-水洗涤。

16.一种转化按照权利要求15的二磷酸盐至无杂质的游离碱的方法，包括分散该盐至二氯甲烷和水之间；升高pH至大约8至10，收集并蒸发有机相。

17.一种在哺乳动物中具有抗菌和抗原生动物活性的药物组合物，包括治疗细菌和原生动物疾病有效量的按照权利要求1的二磷酸盐的游离碱和可药用载体。

18.治疗细菌和原生动物感染的方法，包括给予需要这样治疗的牲畜和猪抗菌有效量的按照权利要求1的二磷酸盐的游离碱。

19.权利要求18的方法，其中抗菌有效量的二磷酸盐的游离碱是肠胃外给药。